KR19980703429A - 신규한 "비파열" 지효성 폴리-(락타이드/글리콜라이드) 미소구 - Google Patents

Abstract

본 발명은 수성 생리학적 환경에서 1 내지 100일의 범위의 다양한 기간 동안 활성 코어를 방출하도록 프로그래밍할 수 있는 신규한 비파열, 지효성 생혼화성 및 생분해성 마이크로캡슐에 관한 것이다. 마이크로캡슐은 100/0 내지 1/99의 비의 범위인 캡핑되지 않은 형태(유리카복실 말단 그룹) 및 말단 캡핑된 형태의 블렌드로서 폴리(락타이드/글리콜라이드) 공중합체의 매트릭스 중에 캡슐화된 폴리타이드 또는 기타 생물학적 활성제의 코어로 구성된다.

Description

신규한 비파형지효성 폴리-(락타이드/글리콜라이드) 미소구

Ⅰ. 정부의 권리

본 발명은 정부의 목적에 의해 또는 정부의 목적을 위해 본 발명자에게 어떠한 사용료도 지불하지 않고 제조, 허가 및 사용될 수 있다.

Ⅱ. 관련 출원

본원은 1995년 5월 22일에 출원된 미국 특허원 제08/446,149호의 부분연속출원이다.

Ⅲ. 발명의 분야

본 발명은 수성 생리학적 환경에서 100일까지의 기간에 걸쳐서 폴리펩타이드를 포함하여, 생물학적 활성제의 비파열 계획성 지효성(sustained realease)을 위한 생적합성 및 생분해성의 미소구의 제공에 관한 것이다.

Ⅳ. 발명의 배경

많은 문헌과 특허가 생분해성 중합체로부터의 활성제 특히 폴리(락타이드/글리콜라이드(PLGA)의 지효성을 사용한다. 폴리펩타이드의 지효성을 위한 PLGA의 선행기술은 20,000 초과 분자량에 대하여 75/25 내지 100/0 몰비의 락타이드/글리콜라이드의 사용을 포함한다. PLGA의 다른 선행기술 제조방법은 충전제 또는 첨가제를 내부 수성층에 사용하여 안정성 및 봉입 효율을 개선시키고/거나 수성층의 점성을 증가시켜 중합체 가수분해 및 생물학적 활성제 또는 폴리펩타이드 방출을 조절한다.

또한, PLGA 공중합체의 선행기술 사용은 말단 캡핑되는 것이며, 여기서 말단 카복실 그룹이 차단된다. 이러한 말단 캡핑된 공중합체에서 마이크로캡슐 제제는 수성 생리학적 환경에 방치한 지 처음 24시간 후에 약 10 내지 40%의 연행 폴리펩타이드의 저파열 내지 중간 파열 방출을 나타낸다. 부분적으로 이러한 특성은 내부 수성 상에 충전제의 사용에 기인한다. 또한, 폴리펩타이드의 1개월 방출은 분자량 20,000 미만의 PLGA의 75/25 공중합체를 사용한다고 공지되어 있다.

조절된 지효성 연구에서의 조사는 폴리(락타이드/글리콜라이드)를 사용하여 생물학적 활성제 또는 폴리펩타이드에 대한 1 내지 2개월 전달 시스템을 수득하기 위해 특히 진행되어 왔다. 그러나 이러한 시스템의 대부분은 하나 이상의 다음 문제를 갖는다: 중합체가 분해될 때까지 불량한 봉입 효율 및 큰 '파열 방출' 이후의 중간 '비방출' 또는 '처진 상'. 보통, 이러한 중합체로부터의 방출은 약 4주 내지 대략 수개월 동안 일어난다. 또한, 이렇게 방출시키기 위해서 분자량30,000의 50/50 공중합체 또는 분자량10,000의 75/25 공중합체를 사용하며, 이는 간혹 활성 코어가 방출된 후에 오래동안 투여 부위에 잔류하는 잔류 중합체를 생성시킬 수 있다.

Ⅴ. 발명의 요약

본 발명은 수성 생리학적 환경에서 100일 정도의 기간에 걸쳐 폴리펩타이드를 포함하는 생리학적 활성 제제의 신규하고, 비파열이고, 계획가능한 지효성을 위해 고안된 생화합성 및 생분해성 미소구체를 제공한다.

통상의 입수가능한, 젤라틴, 알부민, 텍스트란, 펙틴, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜, 슈가 등과 같은 충전제/첨가제의 사용에 의존하고 여전히 저캡슐화 효능 및 '파열 작용하기 쉬운 방출 시스템과는 달리, 본 발명은 어떠한 첨가제를 사용하지 않으면서 고도의 캡슐화 및 비파열 방출을 성취한다. 본 발명에서, 비파열, 계획가능한 지효성은 분자량 2,000 내지 60,000 달톤의 범위의 폴리(락타이드/글리콜라이드) 중합체의 '캡핑화되지 않은' 및 말단-캡슐화 형태의 균일한 블렌드를 통해 성취한다.

일반적으로, 본 발명에서 기술된 미소구체는 균일한 유화 기술에 의해 제조하는데, 내부 유중수(w/o) 유액을 유액 안정화제를 함유하는 용매 포화된 수성상에 분산시킴으로써 안정화시킨다. 3원 w/o/w 유액을, o/w 유화제를 함유하는 외부 예비냉각된 수성상에 상기 w/o 유액을 유화시킴으로써 형성한다. 실질적으로, 내부 w/o 유액은 포획된 활성제 2 내지 20%(w/w)를 함유하는 수성층 및 5 내지 약 50%(w/w 유성상)의 범위의 농도로 폴리(락타이드/글리콜라이드) 공중합체를 함유하는 유성층으로 이루어진다. 공중합체는 90/10 내지 40/60 락타이드/글리코라이드의 몰조성 및 이의 캡슐화되지 않고 말단 캡슐화된 형태를 1000/0 내지 1/99의 비로 함유하면서, 2,000 내지 60,000 달톤 범위의 분자량을 포함한다. 약 80 내지 100%의 고도의 캡슐화 효율성은 중합체 분자량 및 구조 형태에 따라 성취한다.

1 내지 100일의 변화가능한 기간에 걸친 활성 코어의 계획가능한 방출은 중합체 농도, 펩타이드 농도 및 수성/유성상 비와 같은 공정 파라미터의 현명한 선택에 의해 수행한다.

본 발명은 특히 분자량 1,000 내지 약 250,000 달톤의 범위의 분자량의 폴리펩타이드의 캡슐화의 고효율성 및 비파열, 연속적 계획가능한 방출, 및 이외의 생리학적 활성제의 1 내지 100일간에 걸친 방출에 적합한다. 본 발명의 특이성은 캡슐화되지 않고 캡슐화된 중합체의 100/0 블렌드를 사용할 경우, 활성 코어 방출의 최종 단계는 락트산 및 글리콜산과 같은 중합체의 완전한 용해성을 수반한다는 것이다. 이는 통상적으로 구입할 수 있는 방출 시스템에 관한 중요한 이점인데, 여기서 주요 조절 관심은 활성 코어의 방출 후 투여 부위에서의 잔사 중합체의 장기간 독성에 관한 것이다.

본 발명에서 기술된 미세캡슐제는 비경구(근육내, 피하내), 경구, 국소, 비공, 직장 및 질과 같은 여러 경로를 통한 투여에 적합하다.

Ⅵ. 도면의 간단한 설명

도 1은 통상적인 시스템 대 조절된 방출 시스템으로부터의 약물 방출의 비교를 도시한다. 통상적인 투여에서의 피크 및 골 수준은 조절된 방출 투여에서의 안정된 치료학적 수준과 대조적인 것으로 나타난다.

도 2는 본 발명의 방법에 따라서 Mw 8 내지 12k 달톤의 50/50 캡핑되지 않은 중합체를 사용하여 제조된 PLGA 미소구체의 전자 주사 조직 사진을 도시한 것으로서 우수한 구 형태, 구 보존성 및 혐소한 크기 분포를 도시한다.

도 2a는 Mw 8 내지 12k 달톤의 50/50 12k 캡핑되지 않은 중합체를 사용하여 통상의 용매 증발법에 따라서 제조된 PLGA 미소구체의 전자 주사 조직 사진을 도시한다.

도 3은 PLGA 미소구체로부터의 누적 히스타틴 방출을 도시하는 것으로서, 몇몇 배치로부터의 방출 프로파일은 50/50 캡핑되지 않은 중합체(Mw 8 내지 12k 달톤)를 사용하여 제조되고, 공정 변수는 방출을 변조하기 위해 1 내지 35일로 변한다.

도 4는 본 발명의 방법에 따라서 50/50 말단-캡핑된 중합체(Mw 30 내지 40k 달톤)를 사용하여 제조된 PLGA 미소구체의 고체의 평활한 구 표면의 전자 주사 조직 사진을 도시한다.

도 5는 PLGA 미소구체로부터의 누적 히스타틴 방출을 도시하는 것으로서, 몇몇 배치로부터의 방출 프로파일은 Mw 30 내지 40k 달톤인 50/50 비캡핑되고 말단 캡핑된 중합체를 사용하여 제조되고, 공정 변수는 방출을 변조하기 위해 28 내지 60일로 변한다.

도 6은 PLGA 미소구체로부터의 누적 히스타틴 방출을 도시하는 것으로서, 몇몇 배치로부터 합해진 배출 프로파일은 Mw 8 내지 40k 달톤의 50/50 비캡핑되고 말단 캡핑된 중합체(Mw 8 내지 12k 달톤)를 사용하여 제조되고, 공정 변수는 방출을 변조하기 위해 1 내지 60일로 변한다.

도 7은 Mw 8 내지 12k 달톤의 캡핑되지 않은 중합체를 사용하여 제조된 PLGA 미소구체로부터의 LHRH의 누적 방출융을 도시한다.

본 발명은 수성 생리학적 환경에서 100일 이하 정도의 기간에 걸쳐 폴리펩타이드를 포함하는 생리학적 활성제의 신규하고, 비파열이고, 계획가능한 지속적 방출을 위해 고안된 생화합성 및 생분해성 미소구체를 제공한다.

통상의 입수가능한, 젤라틴, 알부민, 텍스트란, 펙틴, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜, 슈가 등과 같은 충전제/첨가제의 사용에 의존하고 여전히 저 캡슐화 효능 및 파열 작용하기 쉬운 방출 시스템과는 달리, 본 발명은 어떠한 첨가제를 사용하지 않으면서 고도의 캡슐화 효능 및 비파열 방출을 성취한다. 본 발명에서, 비파열, 계획가능한 지속된 방출은 폴리(락타이드/글리코라이드) 중합체의 '캡슐화되지 않은' 및 말단-캡슐화 형태의 균일한 블렌드를 통해 성취한다.

캡핑되지 않은 형태는 일반적으로 말단 캡핑된 형태를 사용하는 것에 비하여 중합체를 보다 더 친수성이도록 하는 유리 카복실 말단 그룹을 갖는 폴리(라타이드/글리콜라이드)를 의미한다. 현재 말단 캡핑된 중합체 수화물을 분자량에 따라서 4 내지 12주 동안 사용하여 전혀 방출하지 않음 또는 지제상의 중간체를 수득한다. 따라서, 캡핑되지 않은 중랑체 수화물을 통상적으로 분자량에 따라서 5 내지 60 동안 지체상없이 연속적으로 이의 세공을 방출시킨다. 두가지 형태의 조심스러운 블렌드 및 적합한 분자량 및 L/G 비율은 1 내지 100일 동안 연속 방출을 유도한다. 또한, 상기 기간 동안의 방출은 중합체 농도, 펩타이드 농도 및 수성/유성 상 비율과 같은 공정 변수를 현명하게 선택하여 계획할 수 있다.

본 발명의 공중합체는 분자량 2,000 내지 60,000 달톤, 락타이드/글리콜라이드 비율 90/10 내지 40/60 및 100/0 내지 1/99 비율의 캡핑되지 않은/캡핑된 형태의 블렌드를 포함한다. 폴리펩타이드의 분자량은 1000 내지 250,000달톤이고, 다른 생물학적 활성제의 분자량은 100 내지 100,000달톤일 수 있다.

본 발명에 기술된 마이크로캡슐은 우수한 구형 형태, 구형 보존성 및 협소한 크기 분포를 제공하기 위해 캡핑되지 않은 중합체로 사용하기 위해 개발된 독특한 수성 유화 기술에 의해 제조한다. 이는 우선 내부 유중수(w/o)를 제공한 다음, 유기 용매(예:메틸렌 클로라이드) 중의 중합체의 용액 및 물 중의 생물학적 활성제제를 혼합하여 달성된다. 폴리비닐 알콜과 같은 o/w 유화제를 함유하는 용매-포화 수용액 중에서 w/o 유액을 안정화시킨다. 3원 유액을 0.25 내지 1%w/v의 농도로 상기와 동일한 유화제를 함유하는 외부 수성 상 중에서 w/o 유액을 유화시켜 형성시킨다. 마이크로캡슐은 증발에 의해 용매를 제거함에 따라 경화되고, 세정하여 잔류 유화제를 제거한 다음, 동결 건조시킨다. 저온을 제1유화(w/o 유액 형성) 및 최종 w/o/w 유액의 형성 동안 사용하여 안정한 유액 및 우수한 구형 특성을 수득한다.

본 발명에서, 생물학적 활성 제제는 수용성 호르몬 약물, 항생제, 항종양제, 소염제, 해열제, 진통제, 진해제, 거담제, 진정제, 근육 이완제, 항간질제, 항궤양제, 항우울제, 항알러지제, 강심제, 항부정맥제, 혈관확장제, 항고혈압제, 이뇨제, 항응고제, 항마취제 등이다.

보다 정확하게, 본 발명자들은 다음의 양태를 갖는 약제학적 조성물 및 방법을 발견하였다.

1. 활성 제제 및 캡핑되지 않고 말단-캡핑된 생분해성 폴리(락타이드/글리콜리드)의 블렌드를 포함하는 1 내지 100일간의 지속기간에 걸쳐 생물학적 활성 제제의 파열되지 않고 지속되고 프로그램 가능한 방출용의 방출 조절된 마이크로캡슐 약제학적 제형.

2. 생분해성 폴리(락타이드/글리콜리드)가 100/0 내지 1/99의 비로 캡핑되지 않고 캡핑된 형태의 블렌드인 상기 1)의 약제학적 제형.

3. 캡핑되지 않고 말단 캡핑된 중합체에 대한 공중합체(락타이드/글리콜리드, L/G)비가 52/48 내지 48/52인 상기 1) 또는 2)의 마이크로캡슐.

4. 캡핑되지 않고 말단 캡핑된 중합체에 대한 공중합체 L/G 비가 90/10 내지 10/90인 상기 1) 또는 2)의 마이크로캡슐.

5. 공중합체의 분자량이 2000 내지 60000dalton인 상기 1) 또는 2) 또는 3) 또는 4)의 마이크로캡슐.

6. 생물학적 활성 제제가 펩타이드 또는 폴리펩타이드인 상기 1) 또는 2) 또는 3) 또는 4) 또는 5)의 마이크로캡술.

7. 폴리펩타이드가 12개의 아미노산으로 이루어진 히스타틴이고, 분자량이 1563인 상기 6)의 마이크로캡슐.

8. L/G의 비가 48/52 내지 52/48이고 분자량이 15000인 캡핑되지 않고 말단 캡핑된 폴리(락타이드/글리콜리드)의 100/0 블렌드를 갖는 1 내지 35일간의 수성 생리학적 환경에서 히스타틴의 완전 방출 용량에 의해 특징화되는 상기 1) 또는 2) 또는 3) 또는 4) 또는 5) 또는 6)의 마이크로캡슐.

9. 48/52 내지 528/48의 L/G 비율 및 28,000 내지 40,000의 분자량 범위를 갖는 캡핑되지 않은 것과 말단 캡핑된 폴리(락티드/글리콜리드)의 100/0 혼합물과 함께 18 내지 40일동안 생리적 용적중에서 히스타틴을 완전히 방출할 수 있는 용량에 의해 특징화되는 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6의 마이크로캡슐.

10. 48/52 내지 52/48의 L/G 비율 및 10,000 내지 40,000 돌턴의 분자량 범위를 갖는 캡핑되지 않은 것과 말단 캡핑된 폴리(락티드/글리콜리드)의 0/100 혼합물과 함께 28 내지 70일동안 생리적 용액중에서 히스타틴을 90% 이하까지 방출할 수 있는 용량에 의해 특징화되는 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6의 마이크로캡슐.

11. 75/25의 L/G 비율 및 15,000 돌턴 미만의 분자량 범위를 갖는 캡핑되지 않은 것과 말단 캡핑된 폴리(락티드/글리콜리드)의 0/100 혼합물과 함께 56 내지 100일동안 생리적 용액중에서 히스타틴을 완전히 방출할 수 있는 용량에 의해 특징화되는 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6의 마이크로캡슐.

12. 분자량 1,000-3,000 돌턴의 11 내지 24개의 아미노산의 쇄 길이를 가진 히스타틴의 동족체를 갖고 하기의 구조에 의해 특징화되는 품목 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11의 마이크로캡슐

*D-아미노산

13. 생물학적으로 활성제가 아세테이트 형태로 분자량 1182의 데카펩타이드인 폴리펩타이드 류틴화 호르몬 방출 호르몬(LHRH)이고 하기의 구조를 갖는 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5의 마이크로캡슐.

p-E H W S Y G L R P G

14. 분자량 1,000 내지 250,000을 갖는 품목 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13의 마이크로캡슐.

15. 다양한 방출비 및 지속시간이 다양한 양의 칵테일로서 캡핑되지 않은 것과 캡핑된 마이크로스피어를 혼합시킴으로서 성취되는 품목 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14의 마이크로 캡슐.

16. 다양한 방출비 및 지속시간이 동일한 마이크로스피어내에서 상이한 비유로 캡핑되지 않은 것과 캡핑된 마이크로스피어를 혼합시킴으로서 성취되는 품목 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14의 마이크로 캡슐.

17. 포집된 폴리펩타이드가 CFA/I, CFA/II, CS1, CS3, CS6 및 CS17 및 또 다른 ETEC-연관된 엔테로톡신과 같은 엔테로톡신성 이. 콜리(ETEC)에 대한 백신 제제중의 하나인 품목 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14 또는 15 또는 16의 마이크로 캡슐.

18. 포집된 폴리펩타이드가 엔테로톡신성 이. 콜리(ETEC)에 대한 면역화를 위해 약 800 내지 5000돌턴의 분자량의 펩타이드 항원으로 구성되는 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14 또는 15 또는 16 또는 17의 마이크로 캡슐.

19. 상기 생물학적 활성제가 수용성 호르몬 약제, 항생제, 항암제, 소염제, 해열제, 진통제, 진해제, 거담제, 진정제, 근육 이완제, 항간질제, 항궤양제, 항우울제, 항알러지제, 강심제, 항부정맥제, 혈관확장제, 항고혈압제, 이뇨제, 항응고제, 항마취제로 구성되는 그룹중에서 선택되는, 분자량이 100 내지 100,000 돌턴인 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5의 마이크로캡슐.

20. 상기 생분해되는 폴리(락티드/글리콜리드)가 오일상에 있고 약 1 내지 50%로 존재하는 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6 또는 7 또는 8의 마이크로캡슐.

21. 활성제의 농도가 0.1 내지 약 60%(W/W)인 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14 또는 15 또는 16 또는 17의 마이크로 캡슐.

22. 내부 수용액 대 오일상의 비가 약 1/4 내지 1/40(v/v)인 품목 1 또는 2 또는 3 또는 4 또는 5 또는 6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11 또는 12 또는 13 또는 14 또는 15 또는 16 또는 17의 마이크로 캡슐.

23. 비캡핑된 형태의 생분해 폴리(락티드/글리콜리드)를 메틸렌 클로라이드 중에 용해시키고 물중에 생물학적 활성제 또는 활성 코어를 용해시키며 액상층을 폴리머 용액에 첨가하고 유화시켜 내부 물-내-오일(w/o) 유제를 수득하고 오일-내-물(o/w) 유화제를 포함하는 용매 포화된 액상중에서 w/o 유제를 안정화시키며 상기 w/o 유제를 오일-내-물 유화제를 포함하는 외부 액상으로 첨가하여 3급 유제를 형성하고 수득한 물-내-오일-내-물(w/o/w)을 충분한 시간동안 교반시켜 상기 용매를 제거하며 경화된 마이크로캡슐을 물로 세척하고 상기 경직된 마이크로캡슐을 동결건조시키는 것을 포함하여 파열안되고 지연되며 프로그램화된 생물학적으로 활성제의 방출에 의해 특징화되는 통제된 방출 마이크로캡슐 제제를 제조하기 위한 방법.

24. 말단 캡핑된 형태의 생분해 폴리(락티드/글리콜리드)를 메틸렌 클로라이드중에 용해시키고 물중에 생물학적 활성제 또는 활성 코어를 용해시키며 액상층을 폴리머 용액에 첨가하고 유화시켜 내부 물-내-오일(w/o) 유제를 수득하고 오일-내-물(o/w) 유화제를 포함하는 용매 포화된 액상중에서 w/o 유제를 안정화시키며 상기 w/o 유제를 오일-내-물 유화제를 포함하는 외부 액상층으로 첨가하여 3급 유제를 형성하고 수득한 물-내-오일-내-물(w/o/w)을 충분한 시간동안 교반시켜 상기 용매를 제거하며 경화된 마이크로캡슐을 물로 세척하고 상기 경직된 마이크로캡슐을 동결건조시키는 것을 포함하여 파열안되고 지연되며 프로그램화된 생물학적으로 활성제의 방출에 의해 특징화되는 통제된 방출 마이크로캡슐 제제를 제조하기 위한 방법.

25. 용매 포화된 외부 액상을 첨가하여 외부 액상 층의 첨가전의 내부 w/o 유제를 유화시켜 0.05 내지 500um 사이의 협소한 크기 분배 범위의 마이크로캡슐을 수득하는 것을 특징으로 하는 품목 23 또는 24의 방법.

26. 약 0℃ 내지 4℃의 낮은 온도가 내부 w/o 유제의 제조 동안에 제공되고 약 4 내지 20℃의 낮은 온도가 w/o/w 유제의 제조동안에 제공되어 안정한 유제 및 높은 캅셀화 효율이 제공되는 품목 23 또는 24의 방법.

27. 비캡핑된 것과 말단 캡핑된 폴리머의 100/0 혼합이 지연상(lag phase) 없이 연속식 및 지연식으로 활성 코어의 방출을 제공하는데 사용되는 품목의 방법.

28. 포집된 폴리펩타이드가 LHRH, 아드레노코르티코트로픽 호르몬, 상피성장 인자와 같이 낮은 pH에서 활성이고 칼시토닌 방출 폴리펩타이드가 생활성인 품목 6의 마이크로캡슐.

29. 히스타틴과 같은 포집된 펩타이드가 낮은 pH에서 불활성이고 무기염의 pH 안정화제가 내부 액상으로 첨가되어 방출되는 펩타이드의 생물학적 활성을 유지하는 품목6 또는 7 또는 8 또는 9 또는 10 또는 11의 마이크로 캡슐.

30. 제6항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 히스타틴과 같은 인트랩된 폴리펩타이드가 낮은 pH에서 불활성이고, 폴리옥시에틸렌 솔비탄 지방산 에스테르(트윈 80, 트윈 60 및 트윈 20) 및 폴리옥시에킬렌-폴리옥시프로필렌 차단 공중합체(Pluronics)가 내부 수성상에 가해져서 방출된 폴리펩타이드의 생물학적 활성을 유지시키는 미세캅셀.

31. 제29항에 있어서, 내부 수성상내의 pH-안정화제의 첨가가 산성 pH 민감성 폴리펩타이드를 완전히 봉입하는데 있어 바람직하지 않은 경우, pH-안전화제와 함께 부과된 위약 구체가 폴리펩타이드-부과된 구체와 함께 투여되어 미세캅셀 주변의 용액 pH를 유지시키고 방출된 펩타이드의 생물학적 활성을 보존시키는 미세캅셀.

32. 제30항에 있어서, 내부 수성상내의 비-이온성 계면활성제의 첨가가 산성 pH 민감성 폴리펩타이드를 완전히 봉입하는데 있어 바람직하지 않은 경우, 비-이온성 계면활성제 부과된 위약 구체가 폴리펩타이드-부과된 구체와 함께 투여되어 방출된 폴리펩타이드의 생물학적 활성을 유지시키는 미세캅셀.

33. 제1항 내지 제6항중 어느 한 항 또는 제8항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 캡핑되지 않은 중합체 및 캡핑된 중합체의 배합물(여기서, 공중합체의 완전한 가용화로 인하여 투여 부위에 중합체가 잔류하지 않으며 인트랩제의 완전한 방출이 동시에 이루어진다)을 포함하는 미세캅셀.

34. 근육내 및 피하내와 같은 비경구 경로를 통한 사람 투여용으로써, 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 다른 미세캅셀을 사용하는 방법.

35. 국소 경로를 통한 사람 투여용으로써, 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 미세캅셀을 사용하는 방법.

36. 경구를 통한 사람 투여용으로써, 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 미세캅셀을 사용하는 방법.

37. 비강, 경피, 직장 및 질내 경로를 통한 사람 투여용으로써, 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 미세캅셀을 사용하는 방법.

폴리펩타이드 생활성의 보존

폴리머가 빠르게 분해되면, 미세환경에서의 가용성 올리고머의 방출에 의해 수반되어 급격히 pH가 낮아지며, 이는 산 pH-민감성 펩타이드/단백질의 생물학적 활성에 영향을 미칠 수 있다. 이러한 예로서, 생물학적 활성은 펩타이드가 함께 용해된 불활성 수성상중에서 무기염 또는 완충제를 사용하여 유지될 수 있다.

하기의 독특한 이점이 본 발명의 특징이다:

1. 코어내에 첨가제의 사용 없이, 수성 생리학적 환경에서 폴리펩타이드 및 기타 생상용성 및 생분해성 미세캡슐의 최대 100일간의 격발성이 아닌, 장시간의 서방성 방출.

2. 상이한 분자량 및 공중합체 비를 갖는 비-캡핑 및 캡핑된 폴리머의 혼합물을 사용하고, 공정 파라미터를 조작함에 의한 1 내지 100일에 걸친 다양한 기간 동안의 활성 코어의 계획된 방출.

3. 특히 비-캡핑/캡핑된 폴리머의 100/0 혼합물을 사용하는 경우에, 락트산 및 글리콜산과 같은 무독성 성분에 담체 폴리머를 완전히 용해시키는 것과 동시에 활성 성분이 완전히 방출된다. 1 내지 30일간의 전달을 위해 현재 사용되어지는 대부분의 생분해 가능한 폴리머는 의도된 방출 기간의 말기까지도 완전히 분해되지 않으므로 이는 통제 당국이 투여 부위에서의 잔류 폴리머의 효과에 관해 깊은 관심을 보일 정도로 상당히 중요하다.

4. 여러 경로, 예를 들면 비경구(근육내 및 피하내), 경구, 국소, 경비, 질 등을 통한 다양한 투여형으로 미세캡슐이 용이하게 투여된다.

D.L-락테이드 및 글리콜라이드를 기본으로 하는 친수성 단일중합체 및 공중합체는 하기 화학식에 의해 특정된다.

폴리(D,L-락테이드-공-글리콜라이드) 50:50

(C₃H₄O₂)_n(C₂H₂O₂)_mn:m=1:1

상기 식에서, Z는 분자량/130이다; 예를 들면 분자량이 12,000인 경우 Z=92이고 분자량이 34,000인 경우 Z=262이다.

글리콜라이트에 대한 락테이드의 몰비는 다양한 반면, 락테이트 대 글리콜라이드 공중합체 비는 50:50이 가장 바람직하다.

현재, 참조물이 도 1로 작성되었으며, 도 1은 이상적 조절 방출 시스템에 비교되는, 일련의 용량을 사용하는 종래의 약제 투여를 보여주는 혈액-약제 농도 대 시간의 그래프이다. 불행하게도, 많은 약제는 치료적 범위를 갖는데, 치료적 범위 이상인 경우 독성이며, 치료적 범위 미만인 경우 비효과적이다. 전신 투여에 이어서 통상적으로 관찰되는 진동화 약물 수준은 무효 기간 및 독성의 변화를 유발한다. 실제로, 지효성형의 캡슐화된 생물학적 활성제 또는 폴리펩타이드 제제는 도 1의 치료 범위(여기서, 조절된 방출에 대한 이상적인 경우가 도시되어 있다)에 도시된 바와 같이 단일 용량에 의해 목적하는 치료 범위에서 약물을 유지할 것이다.

도 2는 평균 분자량 8 내지 12k 달톤의 50/50 비캡핑된 중합체를 사용하여 제조된 PLGA 중심체의 주사 전자 현미경 사진을 도시한다. 비캡핑된 중합체는 고형의 부드러운 구형 표면을 가지고, 격발성이 아닌 방출 시스템을 제공하는데 적합하다.

표 1은 1 내지 100일에 걸쳐 조절된 방출을 가지는 펩타이드 시스템(히스타틴 펩타이드)을 제조하기 위한 중삼체 처리 기술의 요약이다.

방출 프로파일은 별도의 중심체 또는 동일한 중심체에서 비캡핑된 중합체와 캡핑된 중합체의 명백한 혼합물에 의해 변형된다. 표 1에 수록된 마이크로캡슐제형 1 내지 21로부터의 방출은 서로 독립적으로 발생하므로 이들 제형의 혼합물로부터 누적 방 출이 부가된다. 비캡핑된 중심체 및 말단-캡핑된 중심체의 몇몇 제형을 혼합함으로써, 모든 목적하는 기간의 방출 곡선은 교정될 수 있다. 또한, 비캡핑된 중합체와 말단-캡핑된 중합체의 방출 특성에 기초하여, 캡핑된 중합체에 대한 비캡핑된 중합체의 비율이 상이한 단일 제형에서의 두가지 형태의 혼합은 중합체 수화에 현저한 영향을 미친 것이므로 이에 의해 활성 코어의 방출은 모든 목적하는 패턴의 방출 곡선을 제공한다. 활성 코어의 방출을 변화시키는 중합체 수화 및 퇴화의 조작은 1% 내지 100%의 양으로 말단-캡핑된 중합체에 비캡핑된 중합체를 가함으로써 달성된다.

[표 1]

히스타틴 폴리펩타이드를 함유하는 마이크로캡슐 조성물

약어:

L/G비:락타이드/글리콜라이드의 공중합체 조성

DCM:메틸렌 클로라이드

Mw:분자량(달톤)

A:유액 안정화 중간 단계가 없는 w/o/w 유화

B:유액 안정화 중간 단계가 있는 w/o/w 유화

U:캡핑되지 않은 중합체

도 3과 함께 표 1을 참조하면, 50/50 및 75/25의 캡핑되지 않은 중합체 및 말단 캡핑된 중합체를 사용하여 제조한 수개의 배취로부터 제조된 PLGA 미소구로부터의 축적된 히스타틴 방출은 공정 파라메터를 변화시킴으로써 1 내지 100일간에 걸친 방출을 조절함을 알 수 있다. 1 내지 35일 동안에는 캡핑되지 않은 50/50에 의해, 18 내지 56일 동안에는 캡핑된 50/50에 의해, 그리고 56일 내지 100일 동안에는 캡핑된 75/25에 의해 조절된다.

도 4는 분자량 30 내지 40 킬로달톤의 말단 캡핑된 중합체에 의해 제조된, 1 내지 2개월 방출 시스템으로 고안된 PLGA 미소구의 주사 전자 현미경 사진을 도시한 것이다.

도 5는 PLGA 미소구로부터의 축적된 히스타틴 방출을 도시한 것이며 방출프로필은 50/50의 캡핑되지 않은 중합체 및 캡핑된 중합체를 사용하여 제조한 수개의 배취로부터의 공정 파라메터를 변화시킴에 의한 28 내지 60일간에 걸친 방출 조절이다.

도 6은 PLGA 미소구로부터의 축적된 히스타틴 방출을 도시한 것이며 합성한 방출 프로필들은 50/50의 캡핑되지 않은 중합체 및 캡핑된 중합체를 사용하여 제조한 수개의 배취로부터의 공정 파라메터를 변화시킴에 의한 1 내지 60일간에 걸친 방출 조절이다.

본 발명 명세서에서 생리학적 활성제는 모든 수용성 항균제, 항암제, 해열제, 진통제, 항염제, 진해제, 거담제, 진정제, 근육 이완제, 간질치료제, 궤양치료제, 우울증 치료제, 알러지 치료제, 강심제, 부정맥 치료제, 혈관확장제, 고혈압 치료제, 이뇨제, 항응고제, 호르몬제, 마지억제제 등이다.

일반적으로, 본 발명에서의 PLGA 미소구로부터의 생리학적 활성제의 비파열 지효성 전달은 90/10 내지 40/60의 몰비 및 말단 캡핑된 중합체에 대한 캡핑되지 않은 중합체의 비 100/0 내지 1/99에 의해 성취된다.

일반적으로, 빈 캡슐에 캡슐화시킨 생물학적 활성제를 고안하는 방법 및 빈 캡슐/말단-캡된 PLGA 거대구체 및 이들 캡슐제의 특징은 아래에 간단히 기술되었다.

1. 도 2 및 도 4에 도시한 바와 같은 분자량이 8,000 내지 40,000 달턴인 캡되지 않은 중합체/캡된 중합체(50/50)를 이용하여 PLGA 거대구체의 표면 형태를 제공한다.

2. 시험관내에서 분자량이 8,000 내지 40,000 달턴이고 몰비가 75/25인 캡되지 않은 중합체/캡된 중합체(50/50)를 이용하여 도 3 및 5에 도시한 바와 같은 PLGA 거대구체로부터 폴리펩타이드, 히스타틴의 방출을 제공한다.

예를 들면, 1 내지 12주 생활성 화합물의 방출 시스템의 디자인은 하기 특성을 갖는 PLGA를 이용하고, 하가 파라미터내에서 현명하게 컴빙(combing)되고 본 발명에 기재된 적절한 수성 유화 방법에 의해 성취한다:

1. 중합체 분자량:약 2,000 내지 60,000달턴

2. 공중합체 몰비(L/G):90/10 내지 40/60

3. 중합체 말단 그룹:캡되지 않고/거나 말단 캡됨

4. 중합체 농도:5 내지 50%

5. 오일 상에 대한 내부 수성상의 비:1:5 내지 1:20(v/v)

6. 펩타이드 중량:2 내지 약 40%(중합체 w/w)

발명의 특이성 및 신규성은 통상 하기와 같이 간단히 요약된다:

1. 생물학적 활성제의 붕괴되지 않고 연속적으로 유지되는 프로그래밍 방출을 성취하기 위해 1 내지 100일에 걸친 캡되지 않은 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 사용.

2. 균일한 구형 형태 및 좁은 크기 분포와 같은 보다 우수한 형태 특성을 성취하기 위해 적절한 수성 유화 시스템의 사용.

3. 내부 공극에 첨가제를 사용하지 않고서 수성 생리학적 환경에서 100일 이하 동안 생혼화성 및 생분해성 마이크로캡슐로부터 폴리펩타이드 및 다른 생물학적 활성제의 붕괴되지 않고 장기간 유지되는 방출.

4. 상이한 분자량 및 공중합체 비율을 갖는 캡된 중합체와 캡되지 않은 중합체의 블랜드를 사용하고 공정 파라미터를 조작함으로써 1 내지 100일에 걸쳐 변화되는 기간 동안 프로그래밍 활성 코어의 방출.

5. 특히 캡된 중합체/캡되지 않은 중합체의 블랜드(100/0)를 이용하는 경우, 락트산 및 글리콜산과 같은 무해한 성분에 대한 케리어 중합체의 완전한 용해와 일치하는 활성 코어의 완전한 방출. 이는 투여 부위에서 잔류 중합체의 효과에 대한 조절하는 능력에 관한 문제점을 야기시키는 의도하는 방출 기간의 말기에 완전히 분해되지 않고 1 내지 30일 동안 이동시 현제 사용되는 대부분의 생분해성 중합체로서 매우 중요하다.

6. 비경구(근육내 및 피하), 경구, 국소, 비후, 질 등과 같은 여러 경로를 통해 다양한 투여 형태로 마이크로캡슐의 용이한 투여.

다음 실시에는 본 발명의 마이크로캡슐 조성물을 설명하지만, 본 발명이 이로써 한정되지는 않는다.

[실시예 1]

폴리락타이드/글리콜라이드(PLGA) 마이크로캡슐을, 캡되지 않은 증합체와 함께 사용하기 위해서 개발되어 우수한 구형 형태학, 구형 일체성 및 좁은 크기 분포를 제공하는 단일 수성 유화 기술에 의해 제조한다(도 1a와 도 1b 참조). 이는 메틸렌 클로라이드와 같은 염소화 탄화수소 용매에 중합체를 용해시키고 생물학적 활성제를 물에 용해시켜 수행된다. 그 다음, 중합체 용액을 초음파에 의한 분해 처리로 활성제와 혼합하여 w/o 유액을 제조한 후, 용매(폴리비닐 알콜을 함유하는 포화 수용액) 속에서 유액 안정화한다. 그 다음, w/o 유액을 외부에서 유화하여 4차 유액을 형성시킨 후, 폴리비닐 알콜(1.25 내지 1% w/v)을 함유하는 수성 상을 예비 냉각시킨다. 마이크로캡슐을 용매를 증발 제거하여 경화시키고, 세정하여 잔류하는 유화제를 제거한 후, 동결 건조한다.

표 1에는 이렇게 건조되고 생물학적 활성 폴리펩타이드, 히스타틴(12개의 아미노산으로 이루어지고 분자량이 1563이다) 및 100/0 내지 1/99의 캡되지 않은 중합체와 캡된 중합체와의 혼합물로 이루어지고 락타이드/글리콜라이드 비가 90/10 내지 40/60이고 분자량이 2000 내지 60,000달톤인 마이크로캡슐 조성물이 열거되어 있다.

[실시예 2]

마이크로캡슐 조성물을 실시예 1에서 언급한 바와 동일하게 제조하는데, 공중합체 L/G 비는 48/52 내지 52/48이고 캡되지 않은 중합체/캡된 중합체의 비는 100/0이다. 활성 코어는 히스타틴(Mw 1563)이고 중합체 분자량은 15,000 미만이며 중합체 농도는 7 내지 40중량%로 다양하다. 조성물 1, 2, 4, 12 내지 14 및 16 및 18을 표 1에 열거한다.

37±1℃에서 pH 7.0로 유지되는 인산 완충된 염수와 같은 수성 생리학적 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 프로파일을 누적 방출 % 대 시간으로서 플롯하고 표 2에 나타낸다.

폭발없이 1 내지 35일의 각종 방출을 오일상 속에서의 중합체 농도를 7 내지 40중량%로 다양화함으로써 달성한다.

[실시예 3]

마이크로캡슐 조성물을 실시예 2에서 언급한 바와 동일하게 제조하는데, 수성/오일 비는 1/4 내지 1/20(v/v)로 다양하다. 조성물 1, 2, 4 및 12를 표 1에 열거한다.

실시예 2에서 언급한 수성 생리학적 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 프로파일을 누적 방출 % 대 시간으로서 플롯하고 표 2에 나타낸다.

폭발 없이 개시 시간과 종결 시간이 상이한 1 내지 35일 동안의 연속 방출을 내부 코어 속의 w/o 비를 상이하게 선택함으로써 달성한다.

[실시예 4]

마이크로캡슐 조성물을 실시예 2에서 언급한 바와 동일하게 제조하는데, 중합체 분자량은 28,000 내지 40,000이고 중합체 농도는 5 내지 15중량%로 다양하다. 조성물 19 내지 21을 표 1에 열거한다.

실시예 2에서 언급한 수성 생리학적 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 프로파일을 누적 방출 %대 시간으로서 플롯하고 표 3에 나타낸다.

폭발없이 18 내지 40일의 다양한 방출을 중합체 농도를 다양화함으로써 달성한다.

[실시예 5]

캐핑되지 않거나 캐핑된 중합체의 비율이 1/99이고 중합체 농도가 5 내지 12중량/중량%로 다양하게 마이크로캡슐 조성물을 실시예 2에서 기술한 바와 같이 제조한다. 조성물 10 및 11을 표 1에 기재하였다.

수성 생리학적 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 플로파일은 실시예 2에 기술되어 있으며, 시간에 대한 방출 누적 백분율로서 플롯팅한 것을 도 2로 나타내었다.

버스트가 없는, 28 내지 70일 동안의 다양한 방출은 오일상에서 중합체 농도를 다양하게 함으로써 달성된다.

[실시예 6]

중합체 분자량이 28,000 내지 40,000이고 중합체 농도가 5 내지 12중량/중량%로 다양한 마이크로캡슐 조성물을 실시예 5에 기술한 바와 같이 제조한다. 조성 5 및 6을 표 1에 나타내었다.

수성 생리학적 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 플로파일은 실시예 2에 기술되어 있으며, 시간에 대한 방출 누적 백분율로서 플롯팅한 것을 도 3으로 나타내었다.

버스트가 없는, 28 내지 70일 동안의 다양한 방출은 중합체 농도를 다양하게 함으로써 달성된다.

[실시예 7]

수성/오일 비율이 1/5 내지 1/25로 다양한 마이크로캡슐 조성물을 실시예 6에 기술한 바와 같이 제조한다. 조성물 3 및 7을 표 1에 나타내었다.

수성 생리학적 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 플로파일은 실시예 2에 기술되어 있으며, 시간에 대한 방출 누적 백분율로서 플롯팅한 것을 도 3으로 나타내었다.

버스트가 없는, 28 내지 70일 동안의 다양한 방출은 수성/오일 비율을 다양하게 함으로써 달성된다.

[실시예 8]

공중합체 비율이 75/25이고 중합체 농도가 5 내지 25중량/중량%로 다양한 마이크로캡슐 조성물을 실시예 5에 기술한 바와 같이 제조한다. 조성물 8 및 9를 표 1에 나타내었다.

수성 생리학적 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 플로파일은 실시예 2에 기술되어 있으며, 시간에 대한 방출 누적 백분율로서 플롯팅한 것을 도 2로 나타내었다.

버스트가 없는, 56 내지 90일 동안의 다양한 방출은 오일상에서 중합체 농도를 다양하게 함으로써 달성된다.

[실시예 9]

활성 코어가 황체형성 호르몬 방출 호르몬(LHRH, 분자량 1182의 데카펩타이드)이며 중합체 농도가 ~40중량/중량%인 마이크로캡슐 조성물은 실시예 2에 기술되어 있다. 수성 생리학적 환경에서 조성물로부터의 활성 코어의 방출 플로파일은 실시예 2에 기술되어 있으며, 시간에 대한 방출 누적 백분율로서 플롯팅한 것을 도 4로 나타내었다.

버스트가 없는, 연속적이며 완전한 방출은 히스타틴 아세테이트와 동일하게 35일 이내에 달성된다.

[실시예 10]

나트륨염(탄산염 또는 중탄산염)과 같은 첨가제를 1 내지 10중량/중량%의 농도로 내부 수성상에 가하여 방출된 폴리펩타이드의 생물학적 활성이 유지되는 마이크로캡슐 조성물을 실시예 2에서 기술한 바와 같이 제조한다.

버스트가 없는 1 내지 28일 동안의 다양한 방출은 실시예 2 및 3과 동일하게 달성되고 방출된 폴리펩타이드는 나트륨염이 존재하기 때문에 30일까지 생물학적으로 활성이 있다.

[실시예 11]

비이온성 계면활성제, 폴리옥시에틸렌/폴리옥시에프로필렌 블록 공중합체(Pluronics F68 및 F127)와 같은 첨가제를 내부 오일 또는 수성상에 10 내지 100%(w/w)의 농도로 가하여 방출된 폴리펩타이드의 생물학적 활성을 유지하면서 실시예 2에 기술되어 있는 바와 같이 마이크로캡슐 조성물을 제조한다.

실시예 2 및 3에서와 같이 1 내지 35일에 걸쳐 분출되지 않고 연속적으로 방출되며, 방출된 폴리펩타이드는 계면활성제의 존재로 인해 생활성적이다.

[실시예 12]

제2도 및 제3도에 플롯팅된, 실시예 1 내지 11에 기술되어 있는 마이크로캡슐 조성물로부터의 축적 히스타틴 방출도 및 방출 프로파일은 파열없이 프로그래밍된 펩타이드가 1 내지 100일에 걸친 기간 동안 방출됨을 입증한다. 실제로, 상기한 도면에 도시되어 있는 바와 같은 각종 조성물을 적절하게 혼합함으로써 임의의 축적 방출 패턴을 100일간에 걸쳐 달성할 수 있다.

Claims (37)

1. 캡핑되지 않은 폴리(락타이드/글리콜라이드)와 말단 차단된 생분해성 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 혼합물과 활성제를 포함하는, 생물학적 활성제를 1 내지 100일간에 걸쳐 분출되지 않고 지속적으로 프로그래밍가능하게 방출시키기 위한, 방출 조절된 마이크로캡슐 약제학적 제형.
2. 제1항에 있어서, 생분해성 폴리(락타이드/글리콜라이드)가, 캡핑되지 않은 형태와 차단된 형태가 100/0 내지 1/99의 비율로 혼합된 형태로 존재하는 약제학적 제형.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 비차단되고 말단 차단된 중합체의 공중합체(락타이드/글리콜라이드 L/G) 비율이 52/48 내지 48/52인 마이크로캡슐.
4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 비차단되고 말단 차단된 중합체의 공중합체 L/G 비율이 90/10 내지 40/60인 마이크로캡슐.
5. 제3항에 있어서, 공중합체의 분자량이 2,000 내지 60,000 달톤(dalton)인 마이크로캡슐.
6. 제1항에 있어서, 생물학적 활성제가 펩타이드 또는 폴리펩타이드인 마이크로캡슐.
7. 제6항에 있어서, 폴리펩타이드가 12개의 아미노산으로 이루어진 분자량 1563의 히스타틴인 마이크로캡슐.
8. 제7항에 있어서, 히스타틴이, L/G가 48/52 내지 52/48이고 분자량이 15,000 미만인, 비차단되고 말단 차단된 폴리(락타이드/글리콜라이드) 100/0 혼합물에 의해 수성 생리학적 환경내에서 1 내지 35일에 걸쳐 완전히 방출됨을 특징으로 하는 마이크로캡슐.
9. 제7항에 있어서, 히스타틴이, L/G가 48/52 내지 52/48이고 분자량이 28,000 내지 40,000 미만인, 비차단되고 말단 차단된 폴리(락타이드/글리콜라이드) 100/0 혼합물에 의해 수성 생리학적 환경내에서 18 내지 40일에 걸쳐 완전히 방출됨을 특징으로 하는 마이크로캡슐.
10. 제7항에 있어서, L/G 비가 48/52 내지 52/48이고 분자량 범위가 10,000 내지 40,000달톤인 캡핑되지 않은 폴리(락타이드/글리콜라이드)와 말단 캡핑된 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 0/100 혼합물에 의한 수성 생리학적 환경에서의 28일 내지 70일에 걸친 히스타틴의 방출 용량이 90% 이하임을 특징으로 하는 마이크로캡슐.
11. 제7항에 있어서, L/G가 75/25이고 분자량이 15,000달톤 미만인 캡핑되지 않은 폴리(락타이드/글리콜라이드)와 말단 캡핑된 폴리(락타이드/글리콜라이드)의 0/100 혼합물에 대한 수성 생리학적 환경에서의 56 내지 100일에 걸친 히스타틴의 방출 용량이 80% 이하임을 특징으로 하는 마이크로캡슐.
12. 제7항 내지 제11항 중의 어느 한 항에 있어서, 쇄 길이가 분자량이 1,500 내지 3,000달톤인 아미노산 11 내지 24개이고 구조가 다음과 같은 히스타틴 동족체를 갖는 마이크로캡슐.
13. 제6항에 있어서, 생물학적 활성제가 분자량이 1182이고 구조가 다음과 같은, 아세테이트 형태인 데카펩타이드인 폴리펩타이드 류티나이징 호르몬 방출 호르몬(LHRH)인 마이크로캡슐.

    p-E H W S Y G L R P G
14. 제6항에 있어서, 분자량이 1,000 내지 250,000달톤인 마이크로캡슐.
15. 제6항 내지 제11항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 있어서, 다양한 속도 및 기간의 방출 프로파일이 캡핑되지 않은 미소구체와 캡핑된 미소구체를 다양한 양으로 칵테일로서 혼합함으로써 성취되는 마이크로캡슐.
16. 제6항 내지 제11항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 있어서, 다양한 속도 및 기간의 방출 프로파일이 캡핑되지 않은 중합체와 캡핑된 중합체를 동일한 미소구체 속에서 다양한 비율로 혼합함으로써 성취되는 마이크로캡슐.
17. 제6항 내지 제11항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 있어서, 포획된 폴리펩타이드가 CFA/I, CFA/II, CS1, CS3, CS6 및 CS17과 같은 엔테로독소성 이. 콜라이(ETEC) 및 기타 ETEC 관련 엔테로독소에 대한 임의의 백신인 마이크로캡슐.
18. 제6항 내지 제11항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 있어서, 포획된 폴리펩티드가 장독소 생성 이. 콜라이(ETEC)에 대한 면역을 위한, 분자량 범위가 약 800 내지 5000달톤인 펩타이드 항원으로 이루어진 마이크로캡슐.
19. 제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, 생물학적으로 활성인 제제가, 분자량이 100 내지 100,000달톤인 수용성 호르몬 약물, 항생제, 항종양제, 항소염제, 해열제, 진통제, 항해소제, 거담제, 진정제, 근육 완화제, 항간질발작제, 항궤양제, 항우울증제, 항알레르기약, 강심제, 항부정맥약, 혈관확장약, 항고혈압제, 이뇨제, 항응고제 및 마취방지제로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 마이크로캡슐.
20. 제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 있어서, 생분해성 폴리(락타이드/글리콜라이드)가 오일상 중에서 약 1 내지 50%(w/w)로 존재하는 마이크로캡슐.
21. 제1항 내지 제11항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 있어서, 활성제의 농도 범위가 0.1 내지 약 60%(w/w)인 마이크로캡슐.
22. 제1항 내지 제11항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 있어서, 수성상 대 오일상의 비가 약 1/4 내지 1/40(v/v)인 마이크로캡슐.
23. 생분해 가능한 폴리(락타이드/글리콜라이드)를 캡핑되지 않은 형태로 메틸렌 글로라이드 속에 용해시키고, 생물학적으로 활성인 제제 또는 활성 코어를 물 속에 용해시키는 단계,

    수성층을 중합체 용액에 가하고 유화시켜 내부에 유중수(w/o) 유화제를 제공하는 단계,

    수중유(o/w) 유화제를 함유하는 용매 포화 수성상 속에서 w/o 유화액을 안정화시키는 단계,

    w/o 유화액을 수중유 유화제를 함유하는 외부 수성층에 가하여 3성분 유화액을 형성하는 단계 및

    수중유중수(w/o/w) 유화액을 충분한 시간동안 교반하여 용매를 제공하는 단계와, 경화된 마이크로캡슐을 물로 세정하고 이를 동결건조시키는 단계를 포함하여, 생물학적으로 활성인 제제의 파열 유리되어 유지되며 프로그래밍 가능한 방출성이 특징인 조절된 방출성 마이크로캡슐 제형을 제조하는 방법.
24. 생분해성 폴리(락타이드/글리콜라이드)를 메틸렌 클로라이드에 말단 캡핑된 형태로 용해시키고, 생분해적 활성제 또는 활성 코어를 물에 용해시키고; 수성층을 중합체 용액에 가하고 유화시켜 내부 유중수 에멀젼을 제공하고; 수중유(o/w) 유화제를 포함하는 용매-포화 수용액에서 w/o 에멀젼을 안정화시키고; w/o 에멀젼을 수중유 유화제를 포함하는 외부 수성 층에 가하여 4원 에멀젼을 형성시키고; 생성된 수유중수(w/o/w)를 중분한 시간 동안 교반하여 용매를 제거하고; 경화된 마이크로캡슐을 물로 세정한 다음; 경화된 마이크로캡슐을 동결건조시킴을 포함하는, 파열되지 않고 유지되고 프로그래밍 가능한 방출성이 특징인 조절된 방출성 마이크로캡슐 제형의 제조방법.
25. 제23항 또는 제24항에 있어서, 용매 포화된 외부 수성 상이 내부 w/o 에멀젼을 유화시킨 다음, 외부 수성 층을 가하여 0.05 내지 500㎛의 협소한 크기 분포 범위의 마이크로캡슐을 제공하는 방법.
26. 제23항 또는 제24항에 있어서, 약 0 내지 4℃의 저온이 내부 w/o 에멀젼의 제조 동안에 제공되고, 약 4 내지 20℃의 저온이 w/o/w 에멀젼의 제조 동안에 제공되어 안정한 에멀젼 및 고캡슐화 효율을 제공하는 방법.
27. 제23항에 있어서, 캡핑되지 않고 말단 캡핑된 중합체를 사용하여 래그 상을 사용하지 않고 연속 및 지속된 방법으로 활성 코어의 방출을 제공하는 방법.
28. 제6항에 있어서, 엔트랩핑된 폴리펩타이드가 낮은 pH에서 활성이고, LHRH, 아드레노크로티코프로픽 호르몬, 외피 성장 인자, 칼시토닌 방출된 폴리펩타이드가 생활성인 마이크로캡슐.
29. 제6항 내지 제11항 중의 어느 한 항에 있어서, 히스타틴과 같은 엔트랩핑된 펩타이드가 낮은 pH에서 비활성이고, 무기 염의 pH 안정화제를 내부 수성 상에 가함으로써 방출된 펩타이드의 생활성이 유지되는 마이크로캡슐.
30. 제6항 내지 제11항 중의 어느 한 항에 있어서, 히스타민과 같은 포획된 폴리펩타이드가 낮은 pH에서 불활성인 경우, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르[예:트윈(Tween) 80, 트윈 60 및 트윈 20] 및 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 블록 공중합체[플루로닉스(Pluronics)]와 같은 비이온성 계면활성제를 내부 수성 상에 가하여 방출된 폴리펩타이드의 생물학적 활성을 유지시키는 마이크로캡슐.
31. 제29항에 있어서, 내부 수성 상에 pH 안정화제를 첨가하는 것이 산성 pH 민감성 폴리펩타이드를 성공적으로 캡슐화하는데 있어서 바람직하지 않은 경우, pH 안정화제를 함유하는 위약 소구체를 폴리펩타이드 함유 소구체와 함께 투여하여 용액을 마이크로캡슐 주변의 pH로 유지시키고 방출된 펩타이드의 생물학적 활성을 보존시킨 마이크로캡슐.
32. 제30항에 있어서, 내부 수성 상에 비이온성 계면활성제를 첨가하는 것이 산성 pH 민감성 폴리펩타이드를 성공적으로 캡슐화하는데 있어서 바람직하지 않은 경우, 비이온성 계면활성제를 함유하는 위약 소구체를 폴리펩타이드 함유 소구체와 함께 투여하여 방출된 펩타이드의 생물학적 활성을 보존시킨 마이크로캡슐.
33. 제1항 내지 제6항, 제8항 내지 제11항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 있어서, 공중합체가 완전히 가용화되어 투여 부위에 잔여 중합체가 전혀 잔류하지 않는 동시에 포획제가 완전히 방출되는, 캡핑 또는 비캡핑 중합체를 포함하는 마이크로캡슐.
34. 제1항 내지 제10항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 따른 마이크로캡슐을 근육내 투여 및 경피 투여와 같은 비경구적 경로를 통해 사람에게 투여하는데 사용하는 방법.
35. 제1항 내지 제11항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 따른 마이크로캡슐을 국부적 경로를 통해 사람에게 투여하는데 사용하는 방법.
36. 제1항 내지 제11항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 따른 마이크로캡슐을 경구적 경로를 통해 사람에게 투여하는데 사용하는 방법.
37. 제1항 내지 제11항, 제13항 및 제14항 중의 어느 한 항에 따른 마이크로캡슐을 경비, 경피, 직장 및 질내 투여 경로를 통해 사람에게 투여하는데 사용하는 방법.