KR102513639B1

KR102513639B1 - 임신성 진성 당뇨병의 처치 또는 예방을 위한 락트산 박테리아의 용도

Info

Publication number: KR102513639B1
Application number: KR1020197021211A
Authority: KR
Inventors: 크리스틴 리 위켄스
Original assignee: 유니버시티 오브 오타고
Priority date: 2016-12-22
Filing date: 2017-06-02
Publication date: 2023-03-23
Anticipated expiration: 2037-06-02
Also published as: JP7092380B2; PH12019501439B1; RU2769312C2; EP3558330A1; JP2020502247A; EP3558330B1; WO2018115985A1; RU2019122811A3; EP3558330A4; CA3047920A1; NZ754706A; BR112019012965A2; KR20190107032A; AU2017380603B2; RU2019122811A; DK3558330T3; CN110290795A; US11395839B2; PH12019501439A1; MY197917A

Abstract

본 발명은 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus) HN001 또는 이의 유도체를 투여함으로써 임신성 당뇨병을 처치하거나 예방하는 방법과, 이뿐만 아니라 임신성 진성 당뇨병(gestational diabetes mellitus)을 처치하거나 예방하기 위한 락토바실러스 람노수스 HN001 또는 이의 유도체의 용도 및 이를 포함하는 조성물 및 약제를 제공한다.

Description

임신성 진성 당뇨병의 처치 또는 예방을 위한 락트산 박테리아의 용도

본 발명은 프로바이오틱 박테리아(probiotic bacteria)의 용도, 특히 임신성 진성 당뇨병(GDM; gestational diabetes mellitus)의 처치 또는 예방을 위한 락트산 박테리아의 균주의 용도에 관한 것이다. 이러한 박테리아의 사용 방법 및 이러한 박테리아를 포함하는 조성물도 또한 제공된다.

경제 발전에 따른 식품 소비 패턴의 변화 등과 같은 생활 양식의 요인들이 뉴질랜드(NZ)⁽¹⁾ 및 여타 선진국⁽²⁾ 양쪽 모두에서 잘 인지되고 있고 증가하고 있는 비만 문제 및 이와 관련된 임신성 진성 당뇨병(GDM)을 포함한 질병문제를 일으키고 있다.

임신 전 과체중 및 비만은, 임신 중 과도한 체중 증가, 이전에 지녔던 GDM 또는 당뇨병 가족력, 다낭성 난소 증후군(PCOS; polycystic ovary syndrome), 고령 및 많은 출산 경력도 또한 위험 인자들이라고 확인된⁽⁴⁾ GDM의 46%를 차지한다고⁽³⁾ 밝혀졌다. GDM 자체는 자간전증(preeclampsia), 유산(miscarriage), 조기 분만(preterm birth), 거구증(macrosomia), 유도 분만(induction of labour) 및 제왕 절개(caesarean section)의 위험을 증가시킨다^{(2, 3)}. GDM은 또한 차후의 모자(maternal and child) 비만 및 후속적인 2형 진성 당뇨병의 위험을 증가시킨다⁽⁵⁾.

현재로서는 GDM의 진단 기준에 관하여 어떠한 국제적 합의도 존재하지 않는다. 국제 당뇨병 및 임신 연구 그룹 협회(IADPSG; International Association of diabetes and pregnancy Study Group)에 의한 하나의 진단 기준은 5.1 mmol/L 이상(공복 혈장 글루코스)의 경구 글루코스 부하 검사(oral glucose tolerance test) 역치, 또는 1시간째에 10 mmol 이상 또는 2시간째에 8.5 mmol 이상의 포스트 75 g 글루코스 수준(post 75 g glucose level)이다. GDM에 대한 뉴질랜드 보건성 지침 정의는 더 높은 기준선 및 2시간 글루코스 검사 역치(5.5 mmol/L 이상의 공복 혈장 글루코스 또는 9 mmol/L 이상의 2시간째 포스트 75 g 글루코스 수준)를 명시한다⁽¹⁾.

현재 GDM의 처치 또는 예방은 일반적으로, 대상체에서 건강한 생활양식의 유지를 기초로 한다. GDM의 예방은 임신 동안 식이요법 제한 및 규칙적인 운동을 통해 건강한 체중 및 혈당을 유지하는 것을 포함할 수 있다. 처치(treatment)는 또한 매일의 혈중 글루코스 검사 및 인슐린 주사를 포함할 수 있다. 식이요법 상담은 GDM을 예방하기 위해 현재 사용되는 또 다른 방법이다.

비만 및 관련 질병, 특히 GDM을 처치하거나 예방하는 데 유용한 방법 및 조성물, 특히 다른 락토바실러스를 이용하거나 포함하는 방법 및 조성물에 대한 필요성이 남아 있다. 또한, 식이요법 조절 및 상담에서의 변화에 의존하지 않는, GDM의 처치 또는 예방을 위한 방법 및 조성물에 대한 필요성이 존재한다. GDM-연관 위험 또는 GDM 후유증의 예방 또는 개선을 위한 방법 및 조성물도 또한 바람직하다.

본 발명의 목적은 이들 요망 사항(desiderata) 중 하나 이상을 달성하는 쪽으로 나아가거나 적어도 대중에게 유용한 선택을 제공하는 것이다.

제1 양태에서, 본 발명은 대상체에서 GDM을 처치하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 1997년 8월 18일자의 AGAL 기탁 번호 NM97/09514 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus) HN001을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

일 실시형태에서, 엘. 람노수스(L. rhamnosus) HN001은 생리학적으로 허용 가능한 희석제, 보조제, 담체 또는 부형제와 함께 조성물의 형태로 투여된다.

일 실시형태에서, HN001은 투여되는 유일한 프로바이오틱 박테리아이다.

일 실시형태에서, HN001은 하나 이상의 프리바이오틱스(prebiotics)와 함께 투여된다.

일 실시형태에서, 상기 생리학적으로 허용 가능한 희석제, 보조제, 담체 또는 부형제는 식품이다. 일 실시형태에서, 이러한 식품은 발효유(cultured milk), 요거트, 치즈, 유음료(milk drink) 또는 분유이다.

대안적으로, 조성물은 약제학적 조성물이고, 상기 부형제 또는 희석제는 약제학적으로 허용 가능한 희석제, 보조제, 담체 또는 부형제이다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증을 대상체에서 처치하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 1997년 8월 18일자의 AGAL 기탁 번호 NM97/09514 락토바실러스 람노수스 HN001을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

대상체가 태아 대상체인 실시형태에서, 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증을 처치하거나 예방하는 방법은 엘. 람노수스 HN001 또는 상기 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 조성물을 태아 대상체의 모체(mother)에게 투여하는 단계를 포함한다. 이러한 실시형태에서, 대상체에게의 투여는 간접 투여인 것으로 여겨질 수 있음을 이해할 것이다. 일 실시형태에서, 상기 조성물은 임산부용 제제(maternal formula) 또는 임산부용 보충제(maternal supplement)이다.

대상체가 신생아, 유아 또는 어린이 대상체인 소정의 실시형태에서, 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증을 처치하거나 예방하는 방법은 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 이러한 실시형태에서, 대상체에게의 투여는 직접 투여인 것으로 여겨질 수 있음을 이해할 것이다.

다른 실시형태에서, 예컨대 대상체가 모유영양 신생아, 유아 또는 어린이 대상체인 경우, 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증을 처치하거나 예방하는 방법은 엘. 람노수스 HN001 또는 상기 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 조성물을 대상체의 모체에게 투여하는 단계를 포함한다. 이러한 실시형태에서, 대상체에게의 투여는 간접 투여인 것으로 여겨질 수 있음을 이해할 것이다.

조성물은 이러한 조성물의 저자극성 실시형태를 포함하여 제제, 예를 들어 임산부용 제제 후속(follow-on) 제제, 성장용 제제(growing-up formula) 또는 식이요법 제품일 수 있다.

대상체가 성인 대상체인 바람직한 실시형태에서, 본 방법은 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 바람직하게는, 상기 조성물은 보충제, 제제, 식이요법 제품 또는 식품이다.

소정의 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001은 생식적으로 생존 가능한(reproductuvely viable) 형태, 바람직하게는 생식적으로 생존 가능한 형태 및 양이다. 다른 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001은 사멸화, 용해(lysed), 분획화 또는 약화된다.

나아가, 본 발명은 GDM을 처치하거나 예방하기 위한 또는 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증을 처치하거나 예방하기 위한 엘. 람노수스 HN001 또는 이의 유도체, 및 GDM을 처치하거나 예방하기 위한 또는 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증을 처치하거나 예방하기 위한 조성물의 제조에서 엘. 람노수스 HN001 또는 이의 유도체를 제공한다. 상기 조성물은, 예를 들어 식품 또는 약제일 수 있는 하기에 기술된 것들과 같은 조성물일 수 있다.

본 발명은 또한, 본 발명의 조성물, 예를 들어 대상체에서 GDM을 처치하거나 예방하기 위한 조성물의 제조에 엘. 람노수스 HN001를 사용하는 것도 고려될 수 있음이 이해될 것이다.

일 실시형태에서, 조성물은 경구 투여에 적합하다. 다른 실시형태에서, 조성물은 비경구 투여에 적합하다. 태아 대상체에서 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증을 예방하는 것에 관한 실시형태에서, 조성물은 임신 동안 임신부에게 경구 투여하기에 적합하다.

다양한 실시형태에서, 본 방법은 GDM의 증가된 위험을 갖는 대상체에서 GDM을 처치하거나 예방하는 방법이다. 일례에서, 상기 방법은 이미 GDM을 앓은 대상체에서 GDM을 처치하거나 예방하는 방법이다. 일례에서, 상기 방법은 35세 이상의 대상체, 예를 들어 수태한 35세 이상의 대상체에서 GDM을 처치하거나 예방하는 방법이다. 또 다른 예에서, 상기 방법은 이미 임신한 적이 있는 대상체에서 GDM을 처치하거나 예방하는 방법이다.

다양한 실시형태에서, 대상체는 30 kg/m² 미만의 BMI를 가진다.

일 실시형태에서, 본 방법은 이미 GDM을 앓은 대상체에서 GDM의 재발을 예방하는 방법이며, 상기 방법은 유효량의 HN001 또는 이의 유도체를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

일 실시형태에서, 본 방법은 임신 제1 삼분기(trimester) 후 HN001의 투여를 시작하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, HN001의 투여는 임신 14 내지 16주째에 시작한다.

일 양태에서, 본 발명은 대상체에서 공복 평균 혈중 글루코스 수준을 낮추는 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 유효량의 HN001 또는 이의 유도체를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

일 실시형태에서, 공복 평균 혈중 글루코스 수준은 약 4.35 mmol/l 미만이다.

본 발명은 또한, 넓게는, 본 출원의 명세서에서 지칭되거나 지시된 부분, 요소 및 특징과 임의의 2 이상의 상기 부분, 요소 또는 특징의 임의의 또는 모든 조합에 개별적으로 또는 집합적으로 존재한다고 할 수 있고, 구체적인 완전체(integer)가 본원에 언급되어서 그것이 본 발명과 관련된 기술 분야에 공지된 등가물을 갖는 경우, 그러한 공지된 등가물은 본원에 개별적으로 제시된 것처럼 포함되는 것으로 여겨진다.

본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "포함하는"은 "적어도 부분적으로 ~로 구성되는"을 의미한다. 용어 "포함하는"을 포함하는 본 명세서 중의 각각의 기술문을 해석할 때, 그 용어가 달린 기술문 또는 기술문들 이외의 특징도 또한 존재할 수 있다. 관련된 용어, 예컨대 "포함하다" 및 "포함한다"는 동일한 방식으로 해석되어야 한다.

특허 명세서, 다른 외부 문헌, 또는 다른 정보 자료를 참조한 본 명세서에서, 이는 일반적으로 본 발명의 특징을 논하기 위한 맥락을 제공하기 위한 것이다. 이러한 외부 문헌에 대한 참조는, 구체적으로 다르게 언급되지 않는 한, 이러한 문헌 또는 이러한 정보 자료가 임의의 권한 내에서 선행 기술이라거나 당업계의 보편적인 일반 지식의 일부를 형성하는 것이라고 인정하는 것으로 간주되어서는 안 된다.

도 1은 시험을 통한 연구 참가자들의 상태의 다이어그램이다.
도 2는 A) 35세 이상 대 35세 미만에 의해 계층화 된, B) 30 kg/m²이상 대 30 kg/m² 미만의 BMI에 의해 계층화 된, C) GDM의 이력에 의해 계층화된, D) 등록 이래로 전신 항생제 사용 여부에 의해 계층화된 GDM과 HN001과의 연관성을 보여준다..
도 3은 하위그룹(subgroup)에 의한 GDM의 유병률의 플롯을 보여준다. 좌측 플롯은 이미 임신을 한 적이 있는 대상체 대 임신한 적이 없는 대상체에서 HN001 투여의 효과를 보여주고(출산 경력, 좌측), 우측 플롯은 35세 이상 대 35세 미만의 대상체에서 HN001 투여의 효과를 보여준다(임산부 연령(maternal age), 우측).

본 발명은 처음에, GDM의 발생률 및 중증도에 미치는 락트산 박테리아 엘. 람노수스 HN001의 투여의 유익한 효과를 인지하고 있다.

이에, 제1 양태에서, 본 발명은 대상체에서 GDM을 처치하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 1997년 8월 18일자의 AGAL 기탁 번호 NM97/09514 락토바실러스 람노수스 HN001 또는 이의 유도체를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

추가의 양태에서, 본 발명은 또한, 대상체에서 GDM-연관 위험 또는 GDM 후유증을 처치하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 락토바실러스 람노수스 HN001 또는 이의 유도체를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 임신 대상체에서 GDM-연관 위험은 예를 들어 고혈압, 요로 감염증, 제왕 절개 분만, 및 2형 당뇨병의 증가된 위험을 포함하지만, 이들로 한정되는 것은 아니다. 태아, 신생아, 유아, 어린이 또는 성인 대상체(특히, 대상체의 자궁 내(in utero) 기간 동안 GDM을 앓은 생모를 가진 대상체)에서 GDM-연관 위험 또는 GDM 후유증은 예를 들어 조기 분만(preterm birth), 어깨 난산(shoulder dystocia), 거구증, 선천성 결손(congenital defect) 및 신생아 합병증, 예컨대 저혈당증, 황달 및 호흡 곤란, 2형 당뇨병, 심혈관 질병, 비만 및 대사 문제이지만, 이들로 한정되는 것은 아니다.

다양한 투여 경로 및 방법이 고려되는 한편, 현재로서는 예컨대 경구 투여에 적합한 조성물 내에서 엘. 람노수스 HN001의 경구 투여가 바람직하다. 당연하게도, 소정의 상황에서 다른 투여 경로 및 방법이 이용되거나 바람직할 수 있는 것으로 이해될 것이다. 예를 들어, 비경구 경로는 사멸화된 또는 약화된 엘. 람노수스 HN001 또는 이의 유도체를 포함하는 조성물과 함께 이용될 수 있다.

용어 "경구 투여"는 경구, 협측(buccal), 장내(enteral) 및 위장내(intra-gastric) 투여를 포함한다.

용어 "비경구 투여"는 국소(임의의 피부, 상피 또는 점막 표면으로의 투여를 포함함), 피하, 정맥내, 복강내 및 근육내 투여를 포함하지만, 이들로 한정되는 것은 아니다.

"대상체"는 동물, 바람직하게는 포유류, 보다 바람직하게는 포유류 애완 동물 또는 인간이다. 바람직한 애완 동물은 고양이, 개 및 말을 포함한다. 일 실시형태에서, 인간은 성인, 어린이, 유아, 신생아 또는 태아이다. 다양한 실시형태에서, 인간 어린이, 유아 또는 신생아는 모유영양 어린이, 유아 또는 신생아이다.

용어 "처치하다" 및 이의 유도체는 이들의 가능한 한 가장 넓은 맥락에서 해석되어야 한다. 상기 용어는 대상체가 완전히 회복될 때까지 처치됨을 내포하는 것으로 간주되어서는 안 된다. 이에, "처치하다"는 넓게는, 특정 질환의 증상의 개시 또는 중증도의 개선 및/또는 예방을 포함한다.

처치는 예방적 처치, 예를 들어 대상체, 예컨대 GDM의 예측되거나 구축된 증가된 위험을 갖고 있는 대상체 및/또는 임신 시도중이거나 최근 임신한 대상체의 예방적 처치, 또는 본 발명의 조성물을 태아 대상체의 모체에게 투여함으로써 상기 태아 대상체에서 상기 조성물의 간접 투여에 의한 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증의 예방적 처치를 포함하는 것으로 이해될 것이다.

또 다른 예에서, 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증의 예방적 처치는 본 발명의 조성물을 대상체의 모유영양 모체에게 투여함으로써 상기 조성물의 간접 투여에 의한 신생아, 유아 또는 어린이 대상체의 처치이다.

나아가, 처치는 치료적 처치(therapeutic treatment), 예를 들어 본 발명의 조성물을 대상체의 모체에게 투여함으로써 상기 조성물의 간접 투여에 의한 신생아, 유아 또는 어린이 대상체의 처치를 포함하여 예를 들어 GDM 또는 GDM과 연관된 하나 이상의 증상 또는 위험의 처치를 포함하는 것으로 이해될 것이다.

이에, 본 발명은 임신 대상체에서 GDM을 처치하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 엘. 람노수스 HN001 또는 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 조성물을 임신 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

소정의 실시형태에서, 임신 대상체는 고령(older)이며, 예를 들어 35세 이상이다.

소정의 실시형태에서, 임신 대상체는 GDM의 이력을 갖고 있다.

소정의 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001 또는 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 조성물은 임신 14 내지 16주로부터 출산 시까지 투여된다.

소정의 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001 또는 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 조성물은 임신 14 내지 16주로부터 산후 6개월까지 투여된다.

이에, 본 발명은 태아 대상체에서 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증을 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 엘. 람노수스 HN001 또는 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 조성물을 대상체의 모체에게 투여하는 단계를 포함한다.

또한, 신생아, 유아 또는 어린이 대상체에서 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증을 처치하거나 예방하는 방법이 제공되며, 상기 방법은 엘. 람노수스 HN001 또는 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 조성물을 대상체의 모체에게 투여하는 단계를 포함한다.

엘. 람노수스 HN001로 구성되거나 본질적으로 구성된 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 유아 또는 어린이 대상체에서 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증을 처치하는 방법이 또한, 고려된다.

소정의 실시형태에서, 유아 또는 어린이는 1세 이상이다.

소정의 실시형태에서, 유아 또는 어린이는 식품-민감화된 유아 또는 어린이이다.

소정의 실시형태에서, 유아 또는 어린이는 유아 또는 어린이의 모체에서 GDM의 과거(prior) 발생으로 인해 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 하나 이상의 GDM 후유증의 위험에 있는 것으로 여겨진다.

1 락토바실러스 람노수스 HN001

출원인의 PCT 국제 출원 PCT/NZ98/00122(WO 99/10476으로서 공개되고, 그 전문이 본 명세서에 포함됨)에 기술된 바와 같이, 락토바실러스 람노수스 HN001의 동결-건조된 배양물을 1997년 8월 18일에 오스트레일리아 1 수아킨 스트리트, 핌블(Suakin Street, Pymble), NSW 2073 소재의 오스트레일리아 정부 분석 실험실(AGAL; Australian Government Analytical Laboratories), 뉴사우스웨일즈 지역 실험실(The New South Wales Regional Laboratory)에 기탁하였으며, 기탁 번호 NM97/09514를 부여받았다. 이러한 부다페스트 조약-인지 기탁물은 현재 더 이상 AGAL로서 지칭되지 않으며, 그보다는 오스트레일리아 국립 측정 기관(NMIA; National Measurement Institute of Australia)으로서 지칭된다. 엘. 람노수스 HN001의 게놈 서열은 Genebank에서 수탁 번호: NZ_ABWJ00000000 하에 입수 가능하다.

1.1 형태학적 특성

엘. 람노수스 HN001의 형태학적 특성이 하기에 기술된다.

MRS 브로쓰(broth)에서 성장 시, 일반적으로 0.7 x 1.1 x 2.0 내지 4.0 μm의 사슬에서 정사각형 말단을 가진 짧거나 중간 크기의 막대(rod)이다.

37±1℃의 최적 성장 온도 및 6.0 내지 6.5의 최적 pH에서 그람 양성, 비-운동성(mobile), 비-포자 형성성, 카탈라제 음성 조건 혐기성 막대이다. 이들은 조건적 이형발효(facultatively heterofermentative) 박테리아이고, 글루코스로부터 기체가 생성되지 않는다.

1.2 발효 특성

API 50 CH 당 발효 키트를 사용하여, 엘. 람노수스 HN001의 탄수화물 발효 패턴을 확인하였으며, 5757177의 점수를 얻었다(22 주요 당(prominent sugar)의 점수를 기초로 함 - PCT/NZ98/00122 참조).

1.3 추가의 특징화

엘. 람노수스 균주 HN001을, PCT/NZ98/00122에 개시된 인간 장 상피 세포에 접착하는 상기 균주의 능력을 포함하여 기능적 속성에 의해, 및 식이 섭취(diet intake)에 의해 유도되는 식세포 작용, 항체 반응, 자연 살해 세포 활성 및 림프구 증식에서 또는 시험관내 모델 시스템에서의 향상에 의해 추가로 특징화할 수 있다. 엘. 람노수스 HN001의 동일성(identity)을 확인하는 데 사용될 수 있는 당업자에게 공지되고 이용 가능한 광범위하게 다양한 방법이 존재하며, 여기서, 예시적인 방법은 DNA 핑거프린팅, 게놈 분석, 시퀀싱, 및 관련된 게놈 및 프로테옴 기법을 포함한다.

본원에 기술된 바와 같이, 본 발명의 소정의 실시형태는 살아 있는 엘. 람노수스 HN001을 이용한다. 다른 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001 유도체가 이용된다.

본원에 사용된 바와 같이, 박테리아를 참조로 하여 사용될 때 용어 "유도체" 및 이의 문법적으로 같은 뜻의 표현(박테리아의 특이적인 균주, 예컨대 엘. 람노수스 HN001을 참조로 한 용도를 포함함)은 박테리아, 사멸화된 또는 약화된 박테리아, 예컨대 비제한적으로 가열-사멸화된, 용해된, 분획화된, 압력-사멸화된, 방사선 조사된, 및 UV-처리 또는 광-처리된 박테리아의 또는 이러한 박테리아로부터 유래된 돌연변이체 및 호모로그, 및 비제한적으로 박테리아 세포벽 조성물, 박테리아 세포 용해물, 동결건조된 박테리아, 박테리아로부터의 프로바이오틱 인자 등을 포함하여 박테리아로부터 유래된 물질을 고려하며, 여기서, 상기 유도체는 프로바이오틱 활성을 보유한다. 이러한 유도체, 예컨대 비제한적으로 엘. 람노수스 HN001의 하나 이상의 돌연변이체 또는 하나 이상의 프로바이오틱 인자, 특히 대상체에게 투여하기에 적합한 (예를 들어 조성물 내의) 유도체를 생성하는 방법은 당업계에 잘 공지되어 있다.

엘. 람노수스 HN001, 예컨대 상기 기술된 것들을 식별하는 데 적합한 방법은 예를 들어 엘. 람노수스 HN001의 돌연변이체나 호모로그 또는 예를 들어 엘. 람노수스 HN001로부터의 프로바이오틱 인자를 포함하여 엘. 람노수스 HN001의 유도체를 식별하는 데 유사하게 적합한 것으로 이해될 것이다.

용어 "프로바이오틱 인자"는 박테리아 DNA 모티프, 표면 단백질, 작은 유기산, 다당류 또는 세포벽 구성성분, 예컨대 리포테이코산 및 펩티도글리칸, 또는 이들 중 임의의 2 이상의 혼합물을 비제한적으로 포함해서, 프로바이오틱 활성을 매개하는 것을 담당하는 박테리아 분자를 지칭한다. 상기 주지된 바와 같이 이들 분자가 명백하게 식별되어 있지 않은 한편 임의의 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 프로바이오틱 유기체가 존재한다면 이러한 분자가 존재할 것이다.

용어 "프로바이오틱 활성"은 면역계를 자극하는 소정의 미생물의 능력을 지칭한다. 프로바이오틱 미생물의 활성의 유형 및 수준을 측정하는 것은 당업자에게 공지되어 있으며; 예를 들어 Mercenier et al. (2004), Leyer et al. (2004), 또는 Cummings et al. (2004)을 참조한다. 예를 들어, 프로바이오틱 활성은 PBMC 사이토카인 분비 검정에 의해 평가될 수 있다.

프로바이오틱 활성의 보유에 관한 참조는, 프로바이오틱 미생물의 유도체, 예컨대 프로바이오틱 미생물 또는 약화된 또는 사멸화된 프로바이오틱 미생물의 돌연변이체나 호모로그가 유용한 프로바이오틱 활성을 여전히 갖고 있거나, 프로바이오틱 미생물 또는 이의 유도체를 포함하는 조성물이 유용한 프로바이오틱 활성의 유지를 뒷받침할 수 있음을 의미하고자 한다. 프로바이오틱 활성의 매개를 담당하는 박테리아 분자가 명백하게 식별되어 있지 않은 한편, 가능한 후보로서 제안된 분자는 박테리아 DNA 모티프, 표면 단백질, 작은 유기산, 다당류, 및 세포벽 구성성분, 예컨대 리포테이코산 및 펩티도글리칸을 포함한다. 이들은 숙주 면역계의 구성성분과 상호작용하여 면역-조정 효과를 제공하는 것으로 가정되었다. 바람직하게는, 보유된 활성은 비처리된(즉, 살아 있거나 약화되지 않은) 대조군의 활성의 적어도 약 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 99 또는 100%이고, 유용한 범위는 이들 값 중 임의의 값들(예를 들어 약 35 내지 약 100%, 내지 약 50 내지 약 100%, 내지 약 60 내지 약 100%, 내지 약 70 내지 약 100%, 내지 약 80 내지 약 100%, 및 약 90 내지 약 100%) 사이에서 선택될 수 있다.

당업계에 잘 공지된 종래의 고체 기재(substrate) 및 액체 발효 기법을 사용하여, 엘. 람노수스 HN001은 본원에 고려된 바와 같이 사용할 수 있기에 충분한 양으로 성장될 수 있다. 예를 들어, 엘. 람노수스 HN001은 예를 들어 WO99/10476에 기술된 바와 같은 조건 하에 영양 필름 또는 액침 배양 성장 기법을 사용하여 제제에 대해 벌크(bulk)로 생성될 수 있다. 간략하게는, 성장은 유기체의 성장에 만족할 만한 임의의 온도에서 호기성 조건 하에 실시된다. 예를 들어 엘. 람노수스 HN001에 대해, 30℃ 내지 40℃ 범위의 온도, 바람직하게는 37℃가 바람직하다. 성장 배지의 pH는 약간 산성이며, 바람직하게는 약 6.0 내지 6.5이다. 인큐베이션 시간은 단리물이 정지 성장기(stationary growth phase)에 도달하기에 충분하다.

엘. 람노수스 HN001 세포는 당업계에 잘 공지된 방법에 의해, 예를 들어 종래의 여과 또는 침강 방법(예를 들어 원심분리)에 의해 수합되거나, 사이클론 시스템을 사용하여 건식 수합될 수 있다. 엘. 람노수스 HN001 세포는 즉시 사용되거나, 표준 기법을 사용하여 필요한 대로 오랫동안 저장되거나, 바람직하게는 -20℃ 내지 6℃, 바람직하게는 -4℃에서 동결-건조되거나 냉각될 수 있다.

2 조성물

본원에 유용한 조성물은 식품, 음료, 식품 첨가제, 음료 첨가제, 식이요법 보충제, 영양 제품, 의료 식품, 장(enteral) 또는 비경구 공급 제품, 식사 대용품, 화장품, 기능 식품 또는 의약으로서 제제화될 수 있다. 적절한 제제는 본 명세서의 기술 및 교시에 관하여 당업자에 의해 제조될 수 있다.

일 실시형태에서, 본원에 유용한 조성물은 박테리아 또는 박테리아 유도체를 운반할 수 있는 임의의 식용 소비재를 포함한다. 적합한 식용 소비재의 예로는, 이러한 조성물의 저자극성 실시형태를 포함하는 분말, 액체, 초콜렛, 젤, 아이스크림, 재구성된 과일 제품, 스낵 바, 식품 바(food bar), 뮤즐리 바(muesli bar), 스프레드, 소스, 딥(dip)을 포함한 과자 제품, 요거트 및 치즈를 포함한 유제품, 유제품 및 비-유제품 기초 음료를 포함한 음료(예컨대 유음료 및 요거트 음료), 분유, 유제품 및 비-유제품 기초 스포츠 보충제를 포함한 스포츠 보충제, 식품 첨가제, 예컨대 단백질 스프링클(protein sprinkle), 일일 보충제 정제(daily supplement tablet)를 포함한 식이요법 보충제 제품, 이유식 및 요거트, 및 분말 또는 액체 형태의 제제, 예컨대 임산부용 제제가 있다. 이러한 실시형태 내에서, 본원에 유용한 바람직한 조성물은 분말 또는 액체 형태의 임산부용 제제일 수 있다. 본원에 유용한 적합한 기능 식품 조성물은 유사한 형태로 제공될 수 있다.

분말 또는 액체 형태의 제제, 예컨대 임산부용 제제의 예는 하기를 포함한다. 하기 제제는 단지 지시적인 것이고, 이러한 생성물을 제제화하기 위한 공지된 원리에 따라 변동이 이루어질 수 있음을 이해해야 한다. 예를 들어, 단백질의 비-유제품 공급원은 열거된 유제품 단백질에 보충될 수 있다. 동일하게는, 이들 생성물의 저자극성 실시형태가 제공될 수 있으며, 여기서, 단백질 공급원은 완전히 또는 부분적으로 가수분해된다. 이러한 가수분해물은 당업계에 공지되어 있다. 본원에서 유용한 임산부용 제제의 일례는

30 내지 60 %(w/w)의 락토스,

15 내지 35 %(w/w)의 식물유,

0 내지 40 %(w/w)의 탈지 분유,

0 내지 40 %(w/w)의 유청 단백질, 예컨대 WPC 또는 WPI, 바람직하게는 80% WPC(WPC80)

0.001 내지 50 %(w/w)의 엘. 람노수스 HN001

을 포함한다.

본원에 유용한 임산부용 제제의 또 다른 예는

40 내지 60 %(w/w)의 락토스,

20 내지 30 %(w/w)의 식물유,

10 내지 15 %(w/w)의 탈지 분유,

6 내지 8 %(w/w)의 유청 단백질, 바람직하게는 WPC80,

0.001 내지 10 %(w/w)의 엘. 람노수스 HN001

을 포함한다.

본원에서 임산부용 제제의 또 다른 예는

40 내지 60 %(w/w)의 락토스,

20 내지 30 %(w/w)의 식물유,

10 내지 15 %(w/w)의 탈지 분유,

6 내지 8 %(w/w)의 유청 단백질, 바람직하게는 WPC80,

0.001 내지 5 %(w/w)의 엘. 람노수스 HN001

을 포함한다.

본원에 유용한 임산부용 제제의 또 다른 예는

40 내지 60 %(w/w)의 락토스,

20 내지 30 %(w/w)의 식물유,

10 내지 15 %(w/w)의 탈지 분유,

6 내지 8 %(w/w)의 유청 단백질, 바람직하게는 WPC80,

0.001 내지 2 %(w/w)의 엘. 람노수스 HN001

을 포함한다.

이들 제제 중 임의의 제제는 또한, 비타민 예비혼합물, 미네랄 예비혼합물, 레시틴, 하나 이상의 항산화제, 하나 이상의 안정화제 또는 하나 이상의 뉴클레오타이드 또는 이들 중 임의의 2 이상의 조합 중 하나 이상을 0.1 내지 4% w/w, 바람직하게는 2 내지 4% w/w로 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 이들 유아용 제제는 2700 내지 3000 kJ/L를 제공하도록 제제화될 수 있다.

본 발명의 식용 소비재의 예, 예컨대 유제품 기초 음료(예컨대 유음료 및 요거트 음료)는 전형적으로 엘. 람노수스 HN001 또는 이의 유도체 외에도 단백질 공급원(예컨대 유제품 단백질 공급원), 지질 공급원, 탄수화물 공급원을 포함할 것이고, 이로 구성될 수 있다. 당업자에게 잘 공지된 바와 같은 풍미제, 착색제 및 다른 첨가제, 담체 또는 부형제가 또한, 포함될 수 있다.

본 발명에 사용하기에 용이한 식용 소비재의 추가의 예는 PCT 국제 출원 PCT/AU2007/000265(WO 2007/098564로서 공개됨) 및 PCT 국제 출원 PCT/AU2007/001698(WO 2008/055296으로서 공개됨)에 기술된 바와 같이 Unistraw™전달 시스템(오스트레일리아 소재의 Unistraw International Limited)이며, 상기 출원은 각각 그 전문이 본 명세서에 포함된다. 당업자는, 엘. 람노수스 HN001 및 이의 유도체가 선택적으로 하나 이상의 추가의 프로바이오틱 인자 또는 프로바이오틱 작용제와 함께 이러한 전달 시스템에 사용하기 위한 기재(예를 들어 수용성 비드) 상으로 코팅될 수 있음을 이해할 것이다.

대안적인 실시형태에서, 본원에 유용한 조성물은 비제한적으로 경구 또는 비경구(국소, 피하, 근육내 및 정맥내를 포함) 투여를 포함하여 임의의 선택된 경로에 의해 대상체에게 투여될 수 있도록 제제화될 수 있다.

예를 들어, 본 발명에 따라 사용하기 위한 기능 식품 조성물은 식이요법 보충제(예를 들어 캡슐, 미니-백 또는 정제) 또는 식료품(예를 들어 우유, 쥬스, 소프트 음료, 허브차 티백 또는 과자류)일 수 있다. 이러한 조성물은 또한, 다른 영양소, 예컨대 단백질, 탄수화물, 비타민, 미네랄 또는 아미노산을 포함할 수 있다. 상기 조성물은 경구 사용에 적합한 형태, 예컨대 정제, 경질 또는 연질 캡슐, 수성 또는 유성 현탁액, 또는 시럽; 또는 비경구 사용에 적합한 형태, 예컨대 프로필렌 글리콜 수용액, 또는 완충 수용액일 수 있다. 기능 식품 조성물 내 활성 성분의 양은 대상체의 특이적인 필요에 크게 의존한다. 상기 양은 또한, 당업자에 의해 인지되는 바와 같이, 투여 경로 및 다른 프로바이오틱 인자 또는 프로바이오틱 작용제의 가능한 병용(co-usage)에 따라 다양하다.

소정의 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 요망되는 칼로리 함량을 갖도록, 예를 들어 요망되는 양의 에너지 또는 요망되는 퍼센트의 일일 권장 에너지 섭취를 전달하도록 제제화될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 예를 들어, 식용 소비재는 1회 제공량(serve) 당 약 200 내지 약 2000 kJ, 1회 제공량 당 약 500 kJ 내지 약 2000 kJ, 또는 1회 제공량 당 약 1000 내지 약 2000 kJ을 제공하도록 제제화될 수 있다.

따라서, 본 발명에 따라 유용한 약제학적 조성물은 의도되는 투여 경로 및 표준 약제학적 관행에 관하여 선택되는 적절한 약제학적으로 허용 가능한 담체(부형제, 희석제, 보조제 및 이들의 조합을 포함)와 함께 제제화될 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따라 유용한 조성물은 분말, 액체, 정제 또는 캡슐로서 경구 투여되거나, 연고, 크림 또는 로션으로서 국소 투여될 수 있다. 적합한 제제는 필요에 따라, 유화제, 항산화제, 풍미제 또는 착색제를 포함한 추가의 작용제를 함유할 수 있고, 즉시-방출(immediate-release), 지연-방출(delayed-release), 변형-방출(modified-release), 지속-방출(sustained-release), 펄스드-방출(pulsed-release), 또는 조절-방출(controlled-release)되도록 조정될 수 있다.

용어 "약제학적으로 허용 가능한 담체"는 비제한적으로 부형제, 희석제 또는 보조제를 포함한 담체를 지칭하고자 하며, 약제학적으로 허용 가능한 담체는 용매, 분산 매질, 코팅제, 항균 및 항진균 작용제, 및 등장성 및 흡수 지연 작용제 또는 이들의 조합을 포함하고, 이들은 본원에 유용한 유효량의 화합물 또는 조성물을 전달하기에 충분한 용량으로 투여 시 본원에 기술된 조성물의 활성을 감소시키지 않고 독성이지 않은 상기 조성물의 구성성분으로서 대상체에게 투여될 수 있다. 이러한 제제는 경구, 비강내 또는 비경구(국소, 근육내, 복강내, 피하 및 정맥내 포함) 투여될 수 있다.

소정의 실시형태에서, 본 발명의 조성물(예를 들어 본 발명의 기능 식품 또는 약제학적 조성물)은 캡슐로서 제공될 수 있다. 캡슐은 임의의 표준 약제학적으로 허용 가능한 물질, 예컨대 젤라틴 또는 셀룰로스를 함유할 수 있다. 정제는 종래의 절차에 따라 활성 성분과 고체 담체 및 윤활제의 혼합물을 압축시킴으로써 제제화될 수 있다. 고체 담체의 예로는, 전분 및 당 벤토나이트가 있다. 활성 성분은 또한, 결합제, 예를 들어 락토스 또는 만니톨, 종래의 충전제 및 정제화 작용제(tabletting agent)를 함유하는 경질 쉘(shell) 정제 또는 캡슐의 형태로 투여될 수 있다. 약제학적 조성물은 또한, 비경구 경로를 통해 투여될 수 있다. 비경구 투약 형태의 예로는, 활성제의 수용액, 등장성 식염수 또는 5% 글루코스, 또는 다른 잘 공지된 약제학적으로 허용 가능한 부형제가 있다. 당업자에게 잘 공지된 사이클로덱스트린 또는 다른 가용화제는 치료제의 전달을 위해 부형제로서 이용될 수 있다.

소정의 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 살아 있는 엘. 람노수스 HN001을 포함한다. 이러한 조성물의 제조 방법은 당업계에 잘 공지되어 있고, 하나의 이러한 방법은 본원 실시예에 예시되어 있다.

다른 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 하나 이상의 엘. 람노수스 HN001 유도체를 포함한다. 마찬가지로, 이러한 조성물의 제조 방법은 당업계에 잘 공지되어 있고, 표준 미생물학 및 약제학적 관행을 이용할 수 있다.

예를 들어 박테리아 생존력을 향상시키거나 보존하거나 엘. 람노수스 HN001 또는 하나 이상의 엘. 람노수스 HN001 유도체의 치료적 치료제을 증가시키기 위해, 광범위한 첨가제 또는 담체가 이러한 조성물에 첨가될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 예를 들어 첨가제, 예컨대 계면활성제, 습윤제, 보습제, 점착제(sticker), 분산제, 안정화제, 침투제, 및 박테리아 세포 활력, 성장, 복제 및 생존율을 향상시키기 위한 소위 스트레스 첨가제(stressing additive)(예컨대 염화칼륨, 글리세롤, 염화나트륨, 및 글루코스), 뿐만 아니라 동결보호제, 예컨대 말토덱스트린이 포함될 수 있다. 첨가제는 또한, 장기간 저장 시 미생물 생존력을 유지시키는 데 일조하는 조성물, 예를 들어 비정제(unrefined) 옥수수유, 또는 외부 상에 오일과 왁스의 혼합물 및 내부 상에 물, 소듐 알기네이트 및 박테리아를 함유하는 "인버트(invert)" 에멀젼을 포함할 수 있다.

소정의 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001은 재생적으로 생존 가능한 형태 및 양으로 존재한다.

상기 조성물은 예를 들어 수크로스, 프룩토스, 글루코스 또는 덱스트로스를 포함하여 이당류와 같은 탄수화물 공급원을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 탄수화물 공급원은 엘. 람노수스 HN001에 의해 호기적으로 또는 혐기적으로 이용될 수 있는 것이다.

이러한 실시형태에서, 조성물은 바람직하게는, 엘. 람노수스 HN001의 생식(reproductive) 생존력을 약 2주 초과, 바람직하게는 약 1개월, 약 2개월, 약 3개월, 약 4개월, 약 5개월 초과, 보다 바람직하게는 약 6개월 초과, 가장 바람직하게는 적어도 약 2년 내지 약 3년 이상의 기간 동안 뒷받침할 수 있다.

소정의 실시형태에서, GDM 또는 GDM-연관 위험이나 GDM 후유증을 처치하거나 예방하기 위한 조성물은 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 프로바이오틱 및 프리바이오틱, 예를 들어 프룩토올리고당류, 갈락토올리고당류, 모유 올리고당류 및 이들의 조합을 포함한다.

또 다른 실시형태에서, 대상체에서 GDM 또는 GDM-연관 위험이나 GDM 후유증을 처치하고 예방하는 방법은 유효량의 엘. 람노수스 HN001 및 프리바이오틱, 예를 들어 프룩토올리고당류, 갈락토올리고당류, 모유 올리고당류 및 이들의 조합을 포함하는 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함한다. 소정의 실시형태에서, 경구 조성물은 섭취 시, 대상체의 위장관에서 개체군(population)을 구축하기에 충분한 양의 엘. 람노수스 HN001을 투여할 수 있도록 제제화된다. 구축된 개체군은 일시적 또는 영구적 개체군일 수 있다.

이론상, 하나의 콜로니 형성 단위(cfu; colony forming unit)는 대상체에서 엘. 람노수스 HN001의 개체군을 구축하기에 충분해야 하지만, 실제적인 상황에서는 이를 위해 최소 수의 단위가 필요하다. 따라서, 생존 가능한, 살아 있는 프로바이오틱 박테리아 개체군에 의지하는 치료적 기전에 대해, 대상체에게 투여되는 단위의 수는 치료적 효능에 영향을 미칠 것이다.

본원의 실시예에 제시된 바와 같이, 출원인은, 1일 당 6 x 10⁹ cfu 투약률(dosage rate)의 엘. 람노수스 HN001이 인간 대상체의 위장관에서 개체군을 구축하기에 충분하다고(그러나 필수적이지 않을 수 있음) 결정하였다. 이에 일례에서, 투여용으로 제제화된 조성물은 1일 당 적어도 약 6 x 10⁹ cfu의 엘. 람노수스 HN001을 제공하기에 충분할 것이다.

대상체의 위장관에서 장내 세균총(gut flora), 예컨대 엘. 람노수스 HN001의 개체군의 존재를 결정하는 방법은 당업계에 잘 공지되어 있으며, 이러한 방법의 예는 본원에 제시되어 있다. 소정의 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001의 개체군의 존재는 예를 들어 대상체로부터 수득된 하나 이상의 시료를 분석하고, 상기 시료 내에서 엘. 람노수스 HN001의 존재 또는 양을 결정함으로써 직접적으로 결정될 수 있다. 다른 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001의 개체군의 존재는 예를 들어 GDM 증상의 감소 또는 대상체로부터 수득된 시료 내에서 다른 장내 세균총의 수의 저하를 관찰함으로써 간접적으로 결정될 수 있다. 이러한 방법들의 조합이 또한, 예상된다.

본 발명에 따라 유용한 조성물의 효능은 시험관내 및 생체내 둘 모두에서 평가될 수 있다. 예를 들어 하기 실시예를 참조한다. 간략하게는, 상기 조성물은 GDM을 예방하거나 처치하거나, 글루코스 부하를 조정하는 상기 조성물의 능력에 대해 검사될 수 있다. 생체내 연구를 위해, 조성물은 동물 모델(예를 들어 마우스)에게 공급되거나 주사되거나, 인간 대상체(임신부 포함)에게 투여될 수 있고, GDM의 발생률 및 중증도, 또는 글루코스 부하 및 연관된 질환에 미치는 상기 조성물의 효과가 평가된다. 그 결과를 기초로, 적절한 투약 범위 및 투여 경로가 결정될 수 있다.

적절한 용량을 계산하는 방법은 조성물 내 활성제의 성질에 의존할 수 있다. 예를 들어, 상기 조성물이 살아 있는 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 경우, 용량은 존재하는 살아 있는 박테리아의 수를 참조로 계산될 수 있다. 예를 들어, 본원의 실시예에 기술된 바와 같이, 용량은 1일 당 투여되는 콜로니 형성 단위(cfu)의 수를 참조로 구축될 수 있다. 조성물이 하나 이상의 엘. 람노수스 HN001 유도체를 포함하는 예에서, 용량은 존재하는 엘. 람노수스 HN001 유도체의 양 또는 농도를 참조로 계산될 수 있다. 예를 들어, 엘. 람노수스 HN001 세포 용해물을 포함하는 조성물의 경우, 용량은 조성물에 존재하는 엘. 람노수스 HN001 세포 용해물의 농도를 참조로 계산될 수 있다.

일반적인 예로, 1일 당 체중 1 kg 당 약 1 x 10⁶ cfu 내지 약 1 x 10¹² cfu, 바람직하게는 약 1 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 1 x 10¹¹ cfu/kg/일, 약 1 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 1 x 10¹⁰ cfu/kg/일, 약 1 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 1 x 10⁹ cfu/kg/일, 약 1 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 1 x 10⁸ cfu/kg/일, 약 1 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 5 x 10⁷ cfu/kg/일, 또는 약 1 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 1 x 10⁷ cfu/kg/일의 엘. 람노수스 HN001의 투여가 고려된다. 바람직하게는, 1일 당 체중 1 kg 당 약 5 x 10⁶ cfu 내지 약 5 x 10⁸ cfu, 바람직하게는 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 4 x 10⁸ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 3 x 10⁸ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 2 x 10⁸ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 1 x 10⁸ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 9 x 10⁷ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 8 x 10⁷ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 7 x 10⁷ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 6 x 10⁷ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 5 x 10⁷ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 4 x 10⁷ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 3 x 10⁷ cfu/kg/일, 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 2 x 10⁷ cfu/kg/일, 또는 약 5 x 10⁶ cfu/kg/일 내지 약 1 x 10⁷ cfu/kg/일의 엘. 람노수스 HN001의 투여가 고려된다.

소정의 실시형태에서, 주기적인 용량이 대상체의 체중 또는 다른 특징에 따라 달라질 필요는 없다. 이러한 예에서, 1일 당 약 1 x 10⁶ cfu 내지 약 1 x 10¹³ cfu, 바람직하게는 약 1 x 10⁶ cfu/일 내지 약 1 x 10¹² cfu/일, 약 1 x 10⁶ cfu/일 내지 약 1 x 10¹¹ cfu/일, 약 1 x 10⁶ cfu/일 내지 약 1 x 10¹⁰ cfu/일, 약 1 x 10⁶ cfu/일 내지 약 1 x 10⁹ cfu/일, 약 1 x 10⁶ cfu/일 내지 약 1 x 10⁸ cfu/일, 약 1 x 10⁶ cfu/일 내지 약 5 x 10⁷ cfu/일, 또는 약 1 x 10⁶ cfu/일 내지 약 1 x 10⁷ cfu/일의 엘. 람노수스 HN001의 투여가 고려된다. 바람직하게는, 1일 당 체중 1 kg 당 약 5 x 10⁷ cfu 내지 약 5 x 10¹⁰ cfu, 바람직하게는 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 4 x 10¹⁰ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 3 x 10¹⁰ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 2 x 10¹⁰ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 1 x 10¹⁰ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 9 x 10⁹ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 8 x 10⁹ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 7 x 10⁹ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 6 x 10⁹ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 5 x 10⁹ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 4 x 10⁹ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 3 x 10⁹ cfu/일, 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 2 x 10⁹ cfu/일, 또는 약 5 x 10⁷ cfu/일 내지 약 1 x 10⁹ cfu/일의 엘. 람노수스 HN001의 투여가 고려된다.

예를 들어 본원의 실시예에 제시된 바와 같이, 동결-건조된 엘. 람노수스 HN001의 유효 용량은 1일 당 6 x 10⁹ cfu인 것으로 결정되었다.

본 조성물은 바람직하게는, 유효 용량의 엘. 람노수스 HN001 또는 이의 하나 이상의 유도체를 투여할 수 있도록 제제화되는 것으로 이해될 것이다. 투여되는 조성물의 용량, 투여 기간 및 일반적인 투여 계획은 대상체 사이에서 상기 대상체의 증상의 중증도, 처치되는 장애의 유형, 선택된 투여 방식, 및 대상체의 연령, 성별 및/또는 일반적인 건강 상태와 같은 변수에 따라 상이할 수 있다. 더욱이, 상기 기술된 바와 같이, 적절한 용량은 조성물 내의 활성제의 성질 및 제제화의 방식에 의존할 수 있다. 예를 들어, 상기 조성물이 살아 있는 엘. 람노수스 HN001을 포함하는 경우, 용량은 존재하는 살아 있는 박테리아의 수를 참조로 계산될 수 있다. 예를 들어 본원의 실시예에 기술된 바와 같이, 용량은 1일 당 투여되는 콜로니 형성 단위(cfu)의 수를 참조로 구축될 수 있다. 조성물이 하나 이상의 엘. 람노수스 HN001 유도체를 포함하는 예에서, 용량은 1일 당 투여되는 엘. 람노수스 HN001 유도체의 양 또는 농도를 참조로 계산될 수 있다. 예를 들어 엘. 람노수스 HN001 세포 용해물을 포함하는 조성물의 경우, 용량은 조성물에 존재하는 엘. 람노수스 HN001 세포 용해물의 농도를 참조로 계산될 수 있다.

바람직한 조성물은 유효 용량을 편리한 형태 및 양으로 제공하도록 제제화되는 것으로 이해될 것이다. 소정의 실시형태에서, 예컨대 주기적인 용량이 대상체의 체중 또는 다른 특징에 따라 다양할 필요가 없는 실시형태로 제한되지 않으면서, 상기 조성물은 단위 투약용으로 제제화될 수 있다. 투여는 적절할 수 있는 한, 단일 일일 용량 또는 다수의 별개의 분할된 용량을 포함할 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어 본원의 실시예에 제시된 바와 같이, 유효 용량의 엘. 람노수스 HN001은 경구 투여용 캡슐 내로 제제화될 수 있다.

그러나 일반적인 예로, 본 발명자들은 약 1 mg 내지 약 1000 mg/kg 체중/일, 바람직하게는 약 50 내지 약 500 mg/kg/일, 대안적으로 약 150 내지 약 410 mg/kg/일, 또는 약 110 내지 약 310 mg/kg/일의 본원에 유용한 조성물의 투여를 고려한다. 일 실시형태에서, 본 발명자들은 약 0.05 mg/kg 내지 약 250 mg/kg 체중의 본원에 유용한 조성물의 투여를 고려한다.

유아용 제제, 후속 제제 또는 성장용 제제의 예가 본원에 제시된다. 이들과 같은 조성물은, 상기 조성물에 존재하는 엘. 람노수스 HN001의 농도가, 쉽게 측정 가능한 양의 상기 조성물을 사용하여 유효 용량이 제조될 수 있는 정도가 되도록 제제화될 수 있다. 예를 들어 조성물이 유아용 제제인 것과 같은 소정의 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001은, 투여용 제제의 제조 시 부모 또는 간병인이 예를 들어 측정용 스쿠프(measured scoop) 또는 보편적으로 유아용 제제와 함께 제공되는 바와 같은 유사한 것을 이용하여 쉽게 측정할 수 있는 제제의 양에서 유효 용량을 공급하기에 충분한 양으로 제공된다. 이러한 조성물에 사용하기 위한 엘. 람노수스 HN001의 예시적인 비제한적 농도는 약 5 x 10⁵ cfu/그램 제제(gram of formula) 내지 약 10⁹ cfu/그램 제제, 또는 약 10⁶ cfu/그램 제제 내지 약 10⁸ cfu/그램 제제를 포함한다.

일 실시형태에서, 본원에 유용한 조성물은 적어도 약 0.1, 0.2, 0.5, 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 99, 99.5, 99.8 또는 99.9 중량%의 엘. 람노수스 HN001 또는 이의 유도체를 포함하거나, 본질적으로 구성되거나, 구성되고, 유용한 범위는 이들 상기 값들 중 임의의 값들(예를 들어 약 0.1 내지 약 50%, 내지 약 0.2 내지 약 50%, 내지 약 0.5 내지 약 50%, 내지 약 1 내지 약 50%, 내지 약 5 내지 약 50%, 내지 약 10 내지 약 50%, 내지 약 15 내지 약 50%, 내지 약 20 내지 약 50%, 약 25 내지 약 50%, 내지 약 30 내지 약 50%, 내지 약 35 내지 약 50%, 내지 약 40 내지 약 50%, 내지 약 45 내지 약 50%, 내지 약 0.1 내지 약 60%, 내지 약 0.2 내지 약 60%, 내지 약 0.5 내지 약 60%, 내지 약 1 내지 약 60%, 내지 약 5 내지 약 60%, 내지 약 10 내지 약 60%, 내지 약 15 내지 약 60%, 내지 약 20 내지 약 60%, 약 25 내지 약 60%, 내지 약 30 내지 약 60%, 내지 약 35 내지 약 60%, 내지 약 40 내지 약 60%, 내지 약 45 내지 약 60%, 내지 약 0.1 내지 약 70%, 내지 약 0.2 내지 약 70%, 내지 약 0.5 내지 약 70%, 내지 약 1 내지 약 70%, 내지 약 5 내지 약 70%, 내지 약 10 내지 약 70%, 내지 약 15 내지 약 70%, 내지 약 20 내지 약 70%, 약 25 내지 약 70%, 내지 약 30 내지 약 70%, 내지 약 35 내지 약 70%, 내지 약 40 내지 약 70%, 내지 약 45 내지 약 70%, 내지 약 0.1 내지 약 80%, 내지 약 0.2 내지 약 80%, 내지 약 0.5 내지 약 80%, 내지 약 1 내지 약 80%, 내지 약 5 내지 약 80%, 내지 약 10 내지 약 80%, 내지 약 15 내지 약 80%, 내지 약 20 내지 약 80%, 약 25 내지 약 80%, 내지 약 30 내지 약 80%, 내지 약 35 내지 약 80%, 내지 약 40 내지 약 80%, 내지 약 45 내지 약 80%, 내지 약 0.1 내지 약 90%, 내지 약 0.2 내지 약 90%, 내지 약 0.5 내지 약 90%, 내지 약 1 내지 약 90%, 내지 약 5 내지 약 90%, 내지 약 10 내지 약 90%, 내지 약 15 내지 약 90%, 내지 약 20 내지 약 90%, 약 25 내지 약 90%, 내지 약 30 내지 약 90%, 내지 약 35 내지 약 90%, 내지 약 40 내지 약 90%, 내지 약 45 내지 약 90%, 내지 약 0.1 내지 약 99%, 내지 약 0.2 내지 약 99%, 내지 약 0.5 내지 약 99%, 내지 약 1 내지 약 99%, 내지 약 5 내지 약 99%, 내지 약 10 내지 약 99%, 내지 약 15 내지 약 99%, 내지 약 20 내지 약 99%, 약 25 내지 약 99%, 내지 약 30 내지 약 99%, 내지 약 35 내지 약 99%, 내지 약 40 내지 약 99%, 및 약 45 내지 약 99%) 사이에서 선택될 수 있다.

일 실시형태에서, 본원에 유용한 조성물은 적어도 약 0.001, 0.01, 0.05, 0.1, 0.15, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 또는 19 그램의 엘. 람노수스 HN001 또는 이의 유도체를 포함하거나, 본질적으로 구성되거나, 구성되고, 유용한 범위는 이들 상기 값들 중 임의의 값들(예를 들어 약 0.01 내지 약 1 그램, 약 0.01 내지 약 10 그램, 약 0.01 내지 약 19 그램, 약 0.1 내지 약 1 그램, 약 0.1 내지 약 10 그램, 약 0.1 내지 약 19 그램, 약 1 내지 약 5 그램, 약 1 내지 약 10 그램, 약 1 내지 약 19 그램, 약 5 내지 약 10 그램, 및 약 5 내지 약 19 그램) 사이에서 선택될 수 있다.

일 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001 또는 이의 유도체를 포함하는 본원에서 유용한 조성물은 추가로 약 0.1, 0.5, 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 또는 99.9 중량%의 신선한 전지유 또는 우유 유도체를 포함하고, 유용한 범위는 이들 상기 값들 중 임의의 값들(예를 들어 약 0.1 내지 약 50%, 내지 약 0.2 내지 약 50%, 내지 약 0.5 내지 약 50%, 내지 약 1 내지 약 50%, 내지 약 5 내지 약 50%, 내지 약 10 내지 약 50%, 내지 약 15 내지 약 50%, 내지 약 20 내지 약 50% 내지 약 25 내지 약 50%, 내지 약 30 내지 약 50%, 내지 약 35 내지 약 50%, 내지 약 40 내지 약 50%, 및 약 45 내지 약 50%) 사이에서 선택될 수 있다. 우유 유도체는 바람직하게는 재조합, 분말 또는 신선한 탈지유, 재조합 또는 재구성된 전지 분유 또는 탈지 분유, 탈지유 농축물, 탈지유 보유물(retentate), 농축 우유, 한외여과(ultrafiltered) 우유 보유물, 우유 단백질 농축물(MPC), 우유 단백질 단리물(MPI), 칼슘 결핍된 우유 단백질 농축물(MPC), 저지방 우유, 저지방 우유 단백질 농축물(MPC), 카세인, 카세이네이트(caseinate), 우유 지방, 크림, 버터(butter), 버터(ghee), 무수 우유 지방(AMF), 버터밀크, 버터 세럼(butter serum), 베타 세럼, 경질 우유 지방 분획, 연질 우유 지방 분획, 스핑고리피드 분획, 우유 지방 구형(globular) 막 분획, 우유 지방 구형 막 지질 분획, 인지질 분획, 복합체 지질 분획, 초유, 초유 분획, 초유 단백질 농축물(CPC), 초유 유청, 초유로부터의 면역글로불린 분획, 유청(스위트 유청, 락트산 유청, 미네랄산 유청 또는 재구성된 유청 분말 포함), 유청 단백질 단리물(WPI), 유청 단백질 농축물(WPC), 임의의 모유 또는 초유 가공 스트림으로부터 유래된 조성물, 임의의 모유 또는 초유 가공 스트림의 한외여과 또는 정밀여과(microfiltration)에 의해 수득된 보유물 또는 투과물(permeate)로부터 유래된 조성물, 임의의 모유 또는 초유 가공 스트림의 크로마토그래피(비제한적으로 이온 및 겔 투과 크로마토그래피 포함) 분리에 의해 수득된 돌파구(breakthrough) 또는 흡착된 분획으로부터 유래된 조성물, 다단계 분획화, 분별 결정, 용매 분획화, 초임계 분획화, 근임계(near critical) 분획화, 증류, 원심분리 분획화, 또는 변형제(예를 들어 비누(soap) 또는 유화제)를 이용한 분획화에 의해 제조된 추출물을 포함하여 이들 임의의 우유 유도체의 추출물, 이들 임의의 유도체의 가수분해물, 가수분해물의 분획, 및 가수분해된 및/또는 비-가수분해된 분획의 조합을 포함하여 이들 유도체 중 임의의 2 이상의 임의의 조합으로부터 선택된다. 이들 유도체의 공급원은 우유(milk), 초유 또는 이들의 조합일 수 있는 것으로 이해되어야 한다.

투여용으로 제제화된 조성물 내에서 엘. 람노수스 HN001 또는 하나 이상의 이의 유도체의 농도는 예를 들어 유통(distribution) 또는 저장용으로 제제화된 조성물에서의 농도보다 작을 수 있고, 투여용으로 적합한 조성물로의 저장 및 후속적인 제제화를 위해 제제화된 조성물의 농도는 상기 투여용 조성물을 치료적 유효 용량으로 투여될 수 있도록 충분히 농축될 수 있게 하도록 적절해야 하는 것이 분명할 것이다.

본원에 유용한 조성물은 단독으로 또는 하나 이상의 다른 치료제와 조합되어 사용될 수 있다. 상기 치료제는 식품, 음료, 식품 첨가제, 음료 첨가제, 식품 구성성분, 음료 구성성분, 식이요법 보충제, 영양 제품, 의료 식품, 기능 식품, 약제 또는 의약일 수 있다. 상기 치료제는 프로바이오틱 작용제 또는 프로바이오틱 인자일 수 있고, 바람직하게는 GDM, 하나 이상의 GDM 증상, 또는 하나 이상의 GDM-연관 위험이나 하나 이상의 GDM 후유증을 처치하거나, 예방하거나 약화시키기에 효과적이다.

또 다른 치료제와 조합되어 사용 시, 본원에 유용한 조성물 및 다른 치료제의 투여는 동시적이거나 순차적일 수 있다. 동시적 투여는, 모든 구성성분을 포함하는 단일 투약 형태의 투여, 또는 개별 투약 형태를 실질적으로 동시에 투여하는 것을 포함한다. 순차적 투여는 상이한 스케쥴에 따른 투여를 포함하고, 바람직하게는 본원에 유용한 조성물 및 다른 치료제가 제공되는 기간에 중첩(overlap)이 존재하게 된다.

본원에 유용한 조성물이 개별적으로, 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있는 적합한 작용제로는, 하나 이상의 프로바이오틱 작용제, 하나 이상의 프리바이오틱 작용제, 하나 이상의 인지질, 하나 이상의 강글리오사이드, 당업계에 공지된 다른 적합한 작용제 및 이들의 조합이 있다. 유용한 프리바이오틱스로는, 갈락토올리고당류(GOS), 단쇄 GOS, 장쇄 GOS, 프룩토올리고당류(FOS), 모유 올리고당류(HMO), 단쇄 FOS, 장쇄 FOS, 이눌린, 갈락탄, 프룩탄, 락툴로스 및 이들 중 임의의 2 이상의 임의의 혼합물이 있다. 일부 프리바이오틱스는 Boehm G 및 Moro G(문헌[Structural and Functional Aspects of Prebiotics Used in Infant Nutrition, J. Nutr. (2008) 138(9):1818S-1828S])에 의해 검토되고, 이는 원용에 의해 본 명세서에 포함된다. 다른 유용한 작용제는 식이요법 섬유, 예컨대 완전히 또는 부분적으로 불용성 또는 비소화성(indigestible) 식이요법 섬유를 포함할 수 있다. 이에 일 실시형태에서, 엘. 람노수스 HN001 또는 이의 유도체는 하나 이상의 프로바이오틱스, 하나 이상의 프리바이오틱스, 식이요법 섬유의 하나 이상의 공급원, 하나 이상의 갈락토올리고당류, 하나 이상의 단쇄 갈락토올리고당류, 하나 이상의 장쇄 갈락토올리고당류, 하나 이상의 프룩토올리고당류, 하나 이상의 단쇄 갈락토올리고당류, 하나 이상의 장쇄 갈락토올리고당류, 하나 이상의 모유 올리고당류, 이눌린, 하나 이상의 갈락탄, 하나 이상의 프룩탄, 락툴로스 또는 이들 중 임의의 2 이상의 임의의 혼합물로부터 선택되는 하나 이상의 작용제와 개별적으로, 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다.

일 실시형태에서, 본원에 유용한 조성물은 우유 구성성분, 예컨대 유청 단백질, 유청 단백질 분획(산성 또는 염기성 유청 단백질 분획 또는 이들의 조합을 포함), 글리코마크로펩타이드(glycomacropeptide), 락토페린, 철-락토페린, 기능성 락토페린 변이체, 기능성 락토페린 단편, 비타민 D 또는 칼슘 또는 이들의 조합을 포함하거나 이것과 함께 동시에 또는 순차적으로 투여된다. 유용한 우유 구성성분-함유 조성물은 조성물, 예컨대 식품, 음료, 식품 첨가제, 음료 첨가제, 식이요법 보충제, 영양 제품, 의료 식품 또는 기능 식품을 포함한다. 이들 구성성분이 농화된(enriched) 우유 분획이 또한, 이용될 수 있다. 유용한 락토페린, 단편 및 조성물은 국제 특허 출원 WO 03/082921 및 WO 2007/043900에 기술되어 있고, 이들은 둘 다 그 전문이 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.

상기 열거된 제(식품 기초 작용제 및 의약 둘 모두)는 또한, 본 발명에 따른 방법에 이용될 수 있으며, 이러한 방법에서 이들 치료제는 본원에 유용한 조성물과 개별적으로, 동시에 또는 순차적으로 투여되는 것으로 이해되어야 한다.

일 실시형태에서, 본원에 유용한 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함한다. 또 다른 실시형태에서, 상기 조성물은 식품, 음료, 식품 첨가제, 음료 첨가제, 식이요법 보충제, 영양 제품, 의료 식품, 장 공급 제품(enteral feeding product), 비경구 공급 제품, 식사 대용품, 화장품, 기능 식품, 약제 또는 의약이거나 또는 이들로서 제제화된다. 일 실시형태에서, 이러한 조성물은 정제, 당의정(caplet), 알약, 경질 또는 연질 캡슐, 또는 함당정제(lozenge) 형태로 존재한다. 일 실시형태에서, 상기 조성물은 카세제(cachet), 분말, 분배형(dispensable) 분말, 과립, 현탁액, 엘릭셔(elixir), 액체의 형태, 또는 식품 또는 예를 들어 물, 우유 또는 과일 쥬스를 포함하여 음료에 첨가될 수 있는 임의의 다른 형태로 존재한다. 일 실시형태에서, 이러한 조성물은 저장 동안 또는 투여 후 상기 조성물의 분해를 방지하거나 감소시키는 하나 이상의 구성분(예컨대 항산화제)을 추가로 포함한다. 이들 조성물은 가열-사멸화된, 압력-사멸화된, 용해된, UV-처리 또는 광-처리된, 방사선 조사된, 분획화된 또는 그렇지 않다면 사멸화된 또는 약화된 박테리아를 포함하여 박테리아 또는 박테리아 유도체를 운반할 수 있는 임의의 식용 소비재를 포함할 수 있다. 적합한 식용 소비재의 예로는, 수성 제품, 제과류(baked goods), 초콜렛, 젤, 아이스크림, 재구성된 과일 제품, 스낵 바, 식품 바, 뮤즐리 바, 스프레드, 소스, 딥을 포함한 과자 제품, 요거트 및 치즈를 포함한 유제품, 유제품 및 비-유제품 기초 음료를 포함한 음료, 우유, 분유, 유제품 및 비-유제품 기초 스포츠 보충제를 포함한 스포츠 보충제, 과일 쥬스, 식품 첨가제, 예컨대 단백질 스프링클, 일일 보충제 정제를 포함한 식이요법 보충제 제품, 이유식 및 요거트, 및 분말 또는 액체 형태의 제제, 예컨대 유아용 제제, 후속 제제 또는 성장용 제제가 있다. 본원에 유용한 적합한 기능 식품 조성물은 유사한 형태로 제공될 수 있다.

본 발명의 상이한 조성물은 특정 대상체 그룹에게 투여되는 관점에서 제제화될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 예를 들어, 임산부에게 투여하기에(예를 들어 태아 대상체, 또는 모유영양 신생아, 유아 또는 어린이 대상체에게 간접 투여하기에) 적합한 조성물의 제제는 대상체에게 직접적으로 투여되는 조성물의 제제와 상이할 수 있다. 또한, 예방적으로 투여되는 조성물의 제제는, 일단 GDM 또는 하나 이상의 GDM 증상이 존재할 때 투여되도록 제제화되는 조성물의 제제와 상이할 수 있는 것으로 이해되어야 한다.

일 실시형태에서, 예방적 용도를 위한 조성물은 프로바이오틱 작용제, 예컨대 락토바실러스 람노수스 GG, 락토바실러스 악시도필루스(Lactobacillus acidophilus)(예를 들어, 락토바실러스 악시도필루스(LAVRI-A1), 락토바실러스 류테리(Lactobacillus reuteri)(예를 들어 락토바실러스 류테리 ATCC 55730) 또는 비피도박테리아 락티스(Bifidobacteria lactis)(예를 들어, 비피도박테리아 락티스 균주 HN019 또는 비피도박테리움 락티스 Bb12) 또는 이들 중 임의의 2 이상의 조합을 추가로 포함할 수 있거나 엘. 람노수스 HN001은 이들과 조합하여 사용될 수 있다.

일 실시형태에서, 예방적 투여, 특히 예방적 간접 투여를 위한 조성물은 프로바이오틱 작용제, 예컨대 락토바실러스 람노수스 GG, 락토바실러스 악시도필루스(예를 들어, 락토바실러스 악시도필루스(LAVRI-A1), 락토바실러스 류테리(예를 들어 락토바실러스 류테리 ATCC 55730) 또는 비피도박테리아 락티스(예를 들어, 비피도박테리아 락티스 균주 HN019) 또는 이들 중 임의의 2 이상의 조합을 추가로 포함할 수 있거나 엘. 람노수스 HN001은 이들과 조합하여 사용될 수 있다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "예방적" 및 문법적으로 같은 뜻의 표현은 GDM 또는 GDM 증상이 분명해지기 전의 처치, 사용, 투여 등을 고려하는 것으로 이해될 것이다.

GDM 또는 하나 이상의 GDM 증상을 갖는 대상체의 처치에 사용하기 위한 실시형태에서, 본 조성물은 프로바이오틱 작용제, 예컨대 락토바실러스 람노수스 GG, 락토바실러스 악시도필루스(예를 들어, 락토바실러스 악시도필루스(LAVRI-A1), 락토바실러스 류테리(예를 들어 락토바실러스 류테리 ATCC 55730) 또는 비피도박테리아 락티스(예를 들어, 비피도박테리아 락티스 균주 HN019) 또는 이들 중 임의의 2 이상의 조합을 추가로 포함할 수 있거나 엘. 람노수스 HN001은 이들과 조합하여 사용될 수 있다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "치료적" 및 문법적으로 같은 뜻의 표현은 GDM 또는 GDM 증상이 존재할 때의 처치, 사용 또는 투여를 고려한다.

본원에 개시된 수의 범위(예를 들어 1 내지 10)에 대한 참조는 또한, 해당 범위 내의 모든 유리수(rational number)(예를 들어, 1, 1.1, 2, 3, 3.9, 4, 5, 6, 6.5, 7, 8, 9 및 10) 및 또한 해당 범위 내의 유리수의 임의의 범위(예를 들어, 2 내지 8, 1.5 내지 5.5, 및 3.1 내지 4.7)에 대한 참조를 통합하고자 하고, 따라서, 본원에 명백하게 개시된 모든 범위의 모든 하위-범위는 본원에서 명백하게 개시된다. 이들은 구체적으로 의도되는 것의 예일 뿐이고, 나열된 최저값과 최고값 사이의 수치의 모든 가능한 조합은 유사한 방식으로 본 출원에서 명백하게 언급되는 것으로 여겨져야 한다.

3 임신성 진성 당뇨병

세계적으로 비만의 경향과 더불어, 임신성 진성 당뇨병(GDM)의 비율 또한, 선진국 및 개발도상국 둘 모두에서 증가하고 있다⁽¹⁰⁾. GDM은 일반적으로, 국가 및 인종 그룹에 따라 모든 임신부들 중 9% 내지 26%에 영향을 미친다. 소정의 경우, GDM의 유병률은 36%일 정도로 높다. IADPSG⁽¹¹⁾ 진단 기준을 사용하여, 미국 내 임신부 중 18%에서 임신 동안 GDM이 발병한다⁽¹⁰⁾. 지난 20년에 걸쳐 유병률이 증가하는 경향이 강하게 존재한다.

GDM은 여성 및 유아 둘 모두에 대해, 임산부 임신성 고혈압(maternal gestational hypertension), 양수과다증(polyhydramnios), 자간전증, 부당중량아(large-for-gestation infant)의 분만, 기구 또는 제왕 절개 분만, 및 모성 사망을 포함하여 단기적 및 장기적 악영향과 연관이 있다^{(10, 12)}.

유아 악영향은 조기 분만(preterm birth), 어깨 난산(shoulder dystocia), 거구증, 선천성 결손(congenital defect) 및 신생아 합병증, 예컨대 저혈당증, 황달 및 호흡 곤란을 포함한다⁽¹⁰⁾. 또한, 장기적으로, GDM 임신부는 대사 증후군⁽¹³⁾, 2형 당뇨병 및 심혈관 질병의 증가된 위험에 있다. GDM 임신부의 자식은 당뇨병, 비만 및 대사 문제의 증가된 위험을 가지며, 이때 변경된 인슐린 분비 및 지질 프로파일의 증거가 유아의 체중과 상관 없이 존재한다⁽¹⁴⁾.

식이요법, 체중 감량 및 운동과 관련하여 GDM을 예방하기 위한 생활양식 개입은 종종 성공적이지 못하며^{(10, 15)}; 따라서, GDM의 일차적인 예방은 실질적인 다세대 건강(multigenerational health) 및 경제적 이득을 제공할 수 있을 것이다.

이제, 본 발명의 다양한 양태는 하기 실시예를 참조로 하여 비제한적인 방식으로 예시될 것이다.

실시예

임신 초기에 임산부가 섭취한 프로바이오틱 락토바실러스 람노수스 HN001(HN001)이 임신 26 내지 28주째까지 GDM의 유병률을 감소시킬 수 있을 것인지 결정하기 위해, 이중 맹검, 무작위화, 플라시보-대조 병행 시험을 수행하였다.

재료 및 방법

뉴질랜드 오클랜드 및 웰링턴의 임신부들을 의료 전문가 및 임신 팩에 부착된 연구 정보를 통해 연구에 모집하였다. 여성은 임신 16주 미만이며, 영어를 구사하고, 모유 수유할 의향이 있으며 임신부 또는 태아의 생물학적 아버지가 약물을 필요로 하는 천식, 건초열 또는 습진의 이력을 갖고 있다면 이들 임신부는 적격인 것으로 여겨졌다. 여성은 16세 미만이거나, 연구 기간 동안 연구 센터 밖으로 이사할 계획이 있거나, 면역학적 장애 또는 약물, 심장 판막 질병의 이력을 갖고 있거나, 체외 수정(in-vitro fertilization)을 필요로 하거나, 주요 태아 이상(major fetal abnormality)을 갖고 있거나, 프로바이오틱 음료 또는 보충제를 사용하여 또 다른 무작위화 대조 시험(RCT; randomized controlled trial)에 참가하거나, 이들의 임상 간병인의 신고(notification)를 거부하거나, 우유 알레르기에 대해 아드레날린을 운반하거나, 이식 또는 HIV의 이력을 갖고 있거나, 적어도 3개월 동안 연속 항생제 요법을 사용하였거나, 스크리닝과 등록 사이에 유산하였거나, 그렇지 않다면, 부적합한 것으로 여겨졌다. 적격인 여성은 임신 14 내지 16주째에 연구에 등록되었으며, 여기서, 임신은 최초 제1 삼분기 스캔을 기초로 하였고, 이것이 이용 가능하지 않은 경우, 마지막 월경 기간의 일자를 기초로 하였다.

연구 설계

참가 여성을, 등록 시부터 임신 전 기간에 걸쳐 여전히 모유영양한다면 산후 6개월까지 매일 섭취하게 되는 HN001(6X10⁹개 콜로니 형성 단위(cfu)) 또는 플라시보(외양 및 냄새가 프로바이오틱과 동일한, 옥수수 유래 말토덱스트린)를 함유하는 캡슐을 받도록 무작위로 나누었다. HN001 분말은 이전에 기술된 바와 같이, Fonterra Co-operative Group Ltd사가 무균 발효, 농축 및 냉동-건조를 사용하여 제조하였다⁽⁸⁾. 옥수수 유래 말토덱스트린인 플라시보 분말은 미국 오레건주 소재의 Grain Processing Corp.사가 제조하였다. 여성에게, 캡슐을 냉장고에 보관하고 뜨거운 식품 또는 유체를 섭취한 지 10분 이내에 상기 캡슐을 섭취하는 것을 피하도록 지시하였다.

Fonterra사는 캡슐 시료를 4℃에 보유하였으며, 시간 경과에 따라 내용물의 생존력을 보장하기 위해 이들 시료를 매달 검사하였다. 필드(field)로부터 반납된 미사용 캡슐 모음의 내용물의 생존력을 매달 3회 검사하였다. 생존력의 손실은 0.1 log 미만이었고, 계수 방법(counting method)의 불확실성 한계(limit of uncertainty) 내에 있었다.

캡슐의 무작위화는, 연구 조사자 또는 참가자와 접촉하지 않은 Fonterra사의 통계학자에 의해 수행되었다. 무작위화는 연구 센터에 의해 계층화되었고, 컴퓨터-생성 무작위화 스케쥴 및 1:1의 할당비(allocation ratio)에 따라 20의 블록(block) 내에서 수행되었다. 연구 스태프는 참가자를 스크리닝하고 등록시켰으며, 적격인 참가자에게 다음의 이용 가능한 순차적으로-넘버링된 캡슐 용기를 제공하였다. 모든 연구자들, 실험실 스태프 및 참가자는 연구 할당에 맹검이었다.

수합된 기준선 정보는 연령, 인종, 출산 경력, 과거 다낭성 난소 증후군(PCOS), 체질량 지수(BMI)(체중(kg)/키(m)²), 허리 둘레, 임신 동안이지만 등록 전에 항생제 사용 및 참가자 또는 1차 친척(first degree relative)에서의 2형 진성 당뇨병을 포함하였다. 20주 초과의 과거 임신을 가진 여성 중에서, 본 발명자들은 과거 GDM의 이력 및 과거 아기의 출생 시 체중을 또한 수합하였다.

결과 측정

GDM 결과는 IADPSG 권고사항⁽⁶⁾: 5.1 mmol/L 이상의 공복 혈장 글루코스, 또는 1시간째에 10 mmol/l 이상 또는 2시간째에 8.5 mmol/l 이상의 포스트 75 g 글루코스 부하에 따라 GDM의 진단으로서 주로 선험적으로 정의되었다. 5.5 mmol/l 이상의 공복 또는 2시간째에 9 mmol/l 이상의 NZ 역치를 사용하여 2차 분석을 수행하여, GDM을 정의하였다⁽¹⁾.

지역 사회 실험실에서 수행된 글루코스 부하 검사(GTT)를 사용하여, 임신 24 내지 30주째에 12시간 하룻밤 공복 후, GDM에 대한 평가를 수행하였다. 임신-전 당뇨병이 없는 여성만 초대하여, 연구 GTT를 수행하였다. 연구 GTT 이전에 GTT를 기초로 하여 GDM을 진단받은 여성은, 이들의 당뇨병이 임신성임을 확인시켜 주는 초기의 음성 검사의 증거가 있는 경우에만 연구 결과에 포함시켰다. 임신 후기에 반복 GTT를 수행한 경우(임상 목적으로), 임신 24 내지 30주째에 완료된 검사가 이들의 연구 GDM 상태를 결정하였다.

GDM을 가진 여성에게, 산후 적어도 3개월째에 산후 HbA1_c를 갖고 있는지 질문하였다. 공존 2형 당뇨병의 존재를 가리키기 위해, 6.5%(48 mmol/mol) 이상의 산후 HbA1_c 수준, 또는 7 mmol/l 이상의 산후 공복 글루코스 또는 11.1 mmol/l 이상의 2시간째 글루코스를 사용하였다. 여성이 이들 기준을 충족한다면, 이들 여성을 GDM 분석으로부터 배제하였다.

산후 4 내지 7일째에, 임산부 체중(kg) 및 허리 둘레(cm), 임신(주(week)) 및 조산(37주 미만)을 포함하여 기타 결과를 수합하였다. 5분째에 유아 아프가 점수(Apgar score) 및 출생 시 체중을 의료 기록으로부터 수합하였다. 연구자는 산후 4 내지 7일째에, 유아 키(cm), 폰더랄 지수(PI; Ponderal index)(출생 시 체중(kg)/키(m)³), 머리 둘레(cm), 출산 유형(질 분만 또는 제왕 절개 분만) 및 신생아 집중 처치실(NICU)로의 입원을 평가하였다.

충실도(adherence)

3개월 초과의 공급량의 캡슐(n=105)을 각각의 병에 넣었다. 병을 임신 26 내지 28주째 및 출산 시 교체하였으며, 이때, 2개의 병을 산모에게 제공하여 출산 후 6개월까지의 기간을 커버하였다. 충실도의 측정으로서 연구 평가에 관여하지 않은 돌려받은 병을 스태프가 계수하였다.

검정력(power)

GDM의 15% 유병률, 핀란드 연구⁽⁸⁾에서 확인된 바와 같이 프로바이오틱으로 인한 63% 감소, 및 각각의 그룹에서 195의 시료 크기를 가정하여, 본 연구는 5% 유의 수준에서 87%의 검정력을 가질 것이다.

통계적 분석

SAS 9.3 및 9.4(미국 노스캐롤라이나주 캐리 소재의 SAS Institute)를 사용하여 분석을 수행하였다. 모든 분석은 처치 의향(intention-to-treat)이었다. 상대 비율(RR; relative rate) 및 95% CI를 사용하여, GDM의 유병률 및 이분법적 출생 결과(dichotomous birth outcome)에서 처치 그룹들 사이의 차이를 추정하였다. 미리 명시되지 않더라도, 본 발명자들은, 로그 연결(log link) 및 이항 분포(binomial distribution)와 함께 일반화 선형 모델(generalized linear model)을 사용하여, GDM과 유의미하게 연관이 있는 인자(임산부 연령, BMI, GDM 이력)에 의해 및 GTT 이전에 연구 동안 항생제 사용에 의해 계층화된 GDM의 분석을 수행하였다. 연속 변수의 경우, 처치 그룹 사이의 차이를, t-검사를 사용하여 비교된 평균(95% CI)의 차이, 또는 로그된(logged) 기준선 측정에 대해 조정된 로그된 값의 공분산 분석을 사용하여 비교된 기하 평균(95% CI)의 비율로서 보고하며; 다른 차이는 윌콕슨 순위합(Wilcoxon rank-sum) 검사와 비교하였다. 순서형 로지스틱 회귀를 사용하여 그룹들 사이에서 아프가 점수를 비교하였다. 검사는 양면이었고, 0.05 미만의 P는 통계적으로 유의미하다고 여겨졌다.

결측(missing) GTT 측정은 처치, 공복, 1시간 및 2시간 측정, 인종, 연령, 등록 시 BMI, 1차 친척의 당뇨병 가족력, 과거 다낭성 난소 증후군, 및 과거 GDM과 20주 초과의 과거 임신 횟수의 조합을 사용하여 1,000의 다중 대체(multiple imputation)를 이용하여 추정하였다(과거 임신이 없었거나, GDM이 있는 1회의 과거 임산, 또는 GDM이 없는 1회의 과거 임신, GDM이 있는 2회 이상의 과거 임신, 또는 GDM이 없는 2회 이상의 과거 임신으로서 그룹으로 나뉨). GTT를 갖지 않은 1명의 참가자는 GDM을 진단받았고 임신 초기부터 인슐린을 처방받았기 때문에, 모든 대체에서 GDM을 가진 것으로 가정하였다.

이 연구는 헬싱키 선언에 규정된 지침에 따라 수행되었으며, 인간 대상체를 수반하는 모든 절차는 다중 지역 건강 및 장애 윤리위원회에 의해 승인을 받았다. 모든 대상체로부터 고지에 입각한 서면 동의를 얻었다. 시험은 오스트레일리아 NZ 임상 시험 등록 번호: ACTRN12612000196842, https://www.anzctr.org.au/Trial/Registration/TrialReview.aspx?id=362049&isReview=true에 등록되었다.

결과

1주에 4.2의 평균 비율에서 2012년 12월과 2014년 11월 사이에 참가자(n=423)를 HN001(n=212) 또는 플라시보 그룹(n=211)으로 무작위로 나누었다. 임신성 당뇨병 평가는 2015년 2월까지 완료하였고, 마지막 유아는 2015년 5월에 출생하였다. 추적 조사 중단 비율(Loss-to-follow-up rate)은 연구 그룹 사이에 유사하였으나, HN001 그룹에서 더 많은 참가자가 GTT 이전에 개입을 중단했다(도 1). 대조적으로, GTT와 출생 방문 사이에 추적 조사를 중단한 대부분의 참가자는 플라시보 그룹에 있었고, 이때 소수의 대상체은 2 연구 그룹 모두에서 개입을 중단하였다. 지주막하 출혈로 인해 플라시보 그룹에서 1명의 모성 사망이 있었다.

무작위 참가자 중에서, 24 내지 30주째 GTT 결과는, 각각 평균 27.7주째(SD 4.6) 및 28.0주째(SD=8.6)에 HN001 그룹에서 184명(87%)의 참가자 및 플라시보 그룹에서 189명(90%)에 의해 모든 3개의 시점(IADPSG 지침 정의에 의해 필요에 따라, 공복, 1시간째 및 2시간째 값)을 포함하였다. 추가의 10명의 HN001 참가자와 11명의 플라시보 참가자는 이용 가능한 공복 및 2시간 시점 GTT 결과만 가졌으며, 이는 표준 NZ 지침에 의해 GDM을 진단하기에 충분하였다. HN001 그룹에서 194명(92%) 및 플라시보 그룹에서 200명(95%)은 어느 쪽이든 GTT 평가에 참가하였고, 이들은 모두 NZ 지침을 기초로 한 분석에 데이터를 기여할 수 있었다.

연령, 인종, 출산 경력, 체중, 허리, BMI, 등록 전 임신 동안 항생제 사용, 당뇨병의 가족력, 가계 소득, 및 과거 출생, 가장 최근의 유아의 체중 및 GDM의 이력을 가진 것들을 포함하여 등록 시 임의의 모성 특징에서 연구 그룹 사이에 실질적인 차이가 없었다(표 1).

HN001 그룹에서 GDM(IADPSG 기준을 사용하여 정의됨)의 유병률은 플라시보 그룹에서보다 낮았으나, 이러한 차이는 통계적으로 유의미하지 않았다(표 2). 그러나, 보다 구체적인 NZ 정의를 사용하면, GDM의 유병률이 HN001 그룹에서보다 뚜렷하게 낮았다. 결측값에 대한 대체(imputed) 결과를 이용하여 이들 분석을 반복하였으나, RR 추정치에서 변화는 거의 없었다. IADPSG 지침을 사용하면 대체된 RR=0.64(95% CI 0.36, 1.12)이었고, NZ 지침을 사용하면 대체된 RR=0.39(95% CI 0.14, 1.07)이었다.

기준선, 및 1시간째와 2시간째에 평균 혈중 글루코스 수준은 플라시보와 비교하여 HN001 그룹에서 약간 더 낮았으나, 기준선에서만 유의미하였다(표 2).

NZ 또는 IADPSG 지침에 따라 GDM을 진단 받은 44명의 참가자 중에서, 40명의 참가자는 산후 1개월과 15개월 사이에 측정된 HbA1_c를 갖고 있었고, 이때의 값은 5.0%(31 mmol/mol)와 6.4%(46 mmol/mol) 사이였다. 1명의 참가자는 산후 GTT를 갖고 있었고, 이때 값은 정상 범위 내에 있었다. 3명의 참가자는 산후 HbA1_c를 갖지 않았는데, 왜냐하면 1명은 건강이 악화되었고, 1명은 연구에서 물러났으며, 1명은 사망하였다.

표 3은 이 연구에서 임산부 연령, BMI 및 GDM 이력 있음이 GDM과 뚜렷하게 연관되어 있음을 보여준다. 그 후에, 이들 인자를 사용하여, GDM의 IADPSG 정의만 사용하여 분석(도 2)을 계층화하였다. 연령(연속 변수로서) 상호작용(p=0.005) 및 35세 이상 대 35세 미만으로서 이분화된 연령과의 유의미하지 않은 상호작용(p=0.06)에 의해 유의미한 처치가 존재하였다.

고령 그룹에서, HN001은 플라시보 그룹의 여성들 중에서의 유병률(RR=0.31(95% CI 0.12, 0.81), p=0.009)과 비교할 때 GDM의 유병률에서 3배의 감소와 연관이 있었다. 35세 미만의 여성에서, 각각의 연구 그룹에서 유병률은 유사하였다(RR=1.04(95% CI 0.45, 2.39)). BMI가 30 kg/m² 이상(RR=0.86(95% CI 0.37-1.96))이거나 30 kg/m² 미만(RR=0.51(95% CI 0.22-1.17))인지에 따른 효과의 유의미한 차이도 없었다. 상호작용 효과는 검사할 수 없었는데, 왜냐하면 GDM의 이력을 가진 HN001 참가자 중 누구에게도 GDM이 재발하지 않았기 때문이다.

GDM의 이력이 있는 대상체 중에서, HN001은 GDM의 재발로부터 보호하였으며, RR=0.00(95% CI 0.00-0.66), 과거 GDM이 없는 대상체에 대해서는 RR=0.50(95% CI 0.20-1.27)이었다. GDM의 이력을 가진 3명의 여성(20%)은 IADSPG 지침에 따라 완료된 GTT를 갖지 않았다. 모든 대체에서, 이들은 GDA 양성이었고, 대체 RR = 0.38((95 % CI 0.05-1.00) p = 0.043, 바나드의 정확 검사(Barnard's exact test))을 제공하였다. GDM에 대한 HN001의 효과는, 연구 등록과 GTT 검사 사이에 항생제를 사용하지 않은 참가자들 사이에서는 유의미하게 보호적이었으나, 이 기간 동안 항생제를 사용한 참가자에 대해서는 HN001의 유의미한 효과가 없었다.

도 3에 도시된 유병률 플롯은, 35세 이상의 임산부가 그보다 젊은 임산부에 비해 HN001로부터 더 많은 이득을 얻은 경우인, HN001 투여와 임산부 연령에 대한 유의미한 상호작용(도 3, 우측 플롯)과, 또한 여성이 과거에 20주 초과해서 임신을 지속했었는지 여부에 따라 임신성 당뇨병에 대한 HN001의 효과가 뚜렷하게 상이한 경우인, HN001 투여와 과거 임신 사이의 상호작용(도 3, 출산 경력, 좌측 플롯)을 보여준다. 과거 임신을 했던 여성에서, HN001에 대한 것은 플라시보에 대한 것과 비교하여 GD의 비율의 약 1/3을 가졌다.

유사하게는, 항생제를 사용하지 않은 참가자 중에서, 공복 평균 혈중 글루코스 수준은 플라시보 그룹(4.42, 95% CI 4.35-4.48)과 비교하여 HN001 그룹(4.28, 95% CI 4.23-4.33)에서 뚜렷하게(p=0.001) 더 낮았다. 글루코스 부하 1시간 및 2시간째에 평균 글루코스 수준의 차이 또한 더 낮았으나, 유의미하지 않았다. 1시간째에, 혈중 글루코스 수준은 HN001 그룹에서 6.63(95% CI 6.37-6.89)이었고 플라시보 그룹에서 6.88(95% CI 6.60-7.16)이었으며, p=0.20, 2시간째에, 상기 수준은 HN001 그룹에서 5.56(95% CI 5.38-5.73)이었고 플라시보 그룹에서 5.77(95% CI 5.53-6.01)이었다, p=0.15.

HN001은 임의의 모성 인체계측(anthropometric) 측정(기준선 측정에 대한 조정 후), 또는 유아 출생 시 체중, 임신, 제왕 절개 분만 또는 NICU 입원, 또는 산후 4 내지 7일째에 유아 키, PI 또는 머리 둘레와 뚜렷하게 연관되지 않았다. 임산부가 HN001 그룹에 있었던 유아는 플라시보 그룹에서의 유아보다 뚜렷하게 더 높은 5분 아프가 점수를 가졌다(표 4).

IADPSG 권고사항에 따라 정의된 임산부의 GDM은 산후 더 높은 임산부 체중(p=0.0002), 허리 둘레(p<0.0001) 및 BMI(p<0.0001)와 연관이 있었으나, 임의의 유아 인체계측 측정, 임신, 제왕 절개 분만, NICU 입원 또는 5분째의 아프가 점수(데이터는 제시되지 않음)와 연관이 있지 않았다.

고찰

출원인이 알고 있는 한, 이는 GDM에 대한 위험을 기초로 선택되지 않은 여성 중에서 GDM 예방에 대한 프로바이오틱스의 역할을 보고한 최초의 연구이다. 본 출원인의 데이터는, 6X10⁹ cfu/일 용량의 프로바이오틱 HN001은 GDM의 비율을, IADPSG 지침⁽⁶⁾을 사용하는 경우에는 13.8%로부터 8.2%까지 낮춰서 40% 감소시킬 수 있거나, 또는 NZ 지침을 사용하는 경우에는 6.5%로부터 2.1%까지 낮춰서 68% 감소시킬 수 있음을 시사하고 있다.

이 연구는, GDM을 정의하기 위한 IADPSG 역치보다 더 높은 NZ 글루코스 역치를 사용하는 경우에는 HN001 효과가 더 강력하였음을 보여주었는데, 이는 더 중증의 GDM 예방에서 효과가 더 크다는 것을 시사하고 있다.

장내 세균총(gut microbiota)은 GDM⁽⁹⁾을 가진 여성에서 확인되는 가장 고갈된 미생물 풍부와 함께 덜 다양한 상태로 임신의 세 차례 삼분기 동안 크게 변경된다. 비만과 관련된 장내 세균총과는 대조적으로, 마지막 삼분기 장내 세균총은 제1 삼분기와 비교하여 대변에서 더 많은 양의 에너지가 손실된 것과 연관이 있었으며, 이는 숙주 지방 과다증 및 숙주 글루코스 대사에 미치는 임신 동안의 장내 세균총 변경의 영향이 필수적으로 동일하지 않음을 가리킨다⁽⁹⁾. 임의의 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 출원인은, HN001 보충이, 숙주에 대한 향상된 인슐린 감수성 및 염증에 유리하게 조성물 및 장내 세균총의 기능을 변경시켜 GDM에 대한 경향을 감소시켰다고 믿는다.

출산 결과에 대한 임의의 유해한 효과의 결여는, 초기 임신(임신 14 내지 16주)으로부터 취해지는 안전한 개입으로서 HN001을 뒷받침하고, 이는 아프가 점수에 의해 반영된 바와 같이 유아에게 유익할 수 있다. 이들 확인은, 초기 임신 프로바이오틱 개입의 효과에서 이용 가능한 소량의 데이터를 고려할 때 중요하다.

체중 조절 프로그램 또는 식이 요법을 통해 임신 동안 양호한 건강을 촉진하는 것은 부분적으로는 개입에 대한 불량한 충성도로 인해 대체로 효과가 없었다. 이러한 연구는, 엘. 람노수스 HN001이 특히 고령 임산부 및 GDM의 이력을 가진 대상체에서 GDM의 유병률을 감소시키는 데 효과적인 개입이라는 증거를 제공한다.

본 발명은 특히 GDM의 처치 또는 예방에서 프로바이오틱 박테리아, 특히 락토바실러스 람노수스 HN001 또는 이의 유도체의 용도에 관한 것이다. 상기 박테리아의 사용 방법 및 상기 박테리아를 포함하는 조성물이 또한, 제공된다.

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Claims

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성인 대상체에서 임신성 진성 당뇨병(GDM; gestational diabetes mellitus) 또는 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 GDM의 하나 이상의 후유증을 처치 또는 예방하는 데 사용하거나,
태아, 신생아, 유아 또는 어린이 대상체에서 하나 이상의 GDM-연관 위험 또는 GDM의 하나 이상의 후유증을 예방하는 데 사용되고,
a. 상기 처치 또는 예방하는데 사용되는 것은 1997년 8월 18일자의 AGAL 기탁 번호 NM97/09514 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus) HN001를 상기 성인 대상체 또는 상기 태아, 신생아, 유아 또는 어린이 대상체의 모체에 투여되는 것이고; 및
b. 상기 성인 대상체, 또는 상기 태아, 신생아, 유아 또는 어린이 대상체의 모체에서 공복 평균 혈중 글루코스 수준이 4.35 mmol/l 미만까지 낮춰지는,
1997년 8월 18일자의 AGAL 기탁 번호 NM97/09514 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus) HN001를 포함하는, 조성물.
제 2 항에 있어서,
상기 조성물은 생리학적으로 허용 가능한 희석제, 보조제, 담체 또는 부형제를 포함하는, 조성물.
제 2 항에 있어서,
상기 조성물은 식품이거나 식품을 포함하는, 조성물.
제 4 항에 있어서,
상기 식품은 발효유(cultured milk), 요거트, 치즈, 유음료(milk drink) 및 분유로부터 선택되는, 조성물.
제 2 항에 있어서,
상기 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 희석제, 보조제, 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물인, 조성물.
제 2 항에 있어서,
상기 조성물은 임산부용 제제(maternal formula), 임산부용 보충제(maternal supplement), 또는 식이요법 제품인, 조성물.
제 2 항에 있어서,
상기 엘. 람노수스 HN001은 생식적으로 생존 가능한(viable) 형태인, 조성물.
제 2 항에 있어서,
상기 엘. 람노수스 HN001은 사멸화, 용해, 분획화, 또는 약화된 것인, 조성물.
제 2 항에 있어서,
상기 성인 대상체, 또는 상기 모체는:
(a) GDM의 증가된 위험을 가지거나,
(b) 과거에 GDM을 앓은 적이 있거나,
(c) 35세 이상이거나, 또는
(d) 과거에 임신한 적이 있거나,
중에서 하나 이상인, 조성물.
제 2 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은
a. 임신 제1 삼분기 후에 투여되거나,
b. 임신 14주 내지 16주 사이에 투여가 시작되거나,
c. 임신 14 내지 16주로부터 출산 시까지 투여되거나, 또는
d. 임신 14 내지 16주로부터 산후 6개월까지 투여되는,
조성물.
제 2 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
a. 상기 처치 또는 예방하는 데 사용되는 것은 예방적 처치이거나,
b. 상기 처치 또는 예방하는 데 사용되는 것은 임신 시도 중이거나 또는 최근에 임신한 성인 대상체의 예방적 처치이거나,
c. 상기 처치 또는 예방하는 데 사용되는 것은 태아 대상체의 예방적 처치로서 상기 태아 대상체의 모체에 상기 엘. 람노수스 HN001투여하는 예방적 처치이거나, 또는
d. 상기 처치 또는 예방하는 데 사용되는 것은 신생아, 유아 또는 어린이 대상체의 예방적 처치로서 상기 대상체들의 모체에 상기 엘. 람노수스 HN001 투여하는 예방적 처치인,
조성물.
제 2 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
a. 상기 성인 대상체는 임신하였거나,
b. 상기 성인 대상체, 또는 상기 모체는 임신하였고, 35세 이상이거나,
c. 상기 성인 대상체, 또는 상기 모체는 임신하였고 GDM의 이력을 가지고 있거나, 또는
d. 상기 성인 대상체, 또는 상기 모체는 임신하였고, 35세 이상이고, GDM의 이력을 가지고 있는,
조성물.
제 2 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
a. 대상체가 태아 대상체이고, 상기 엘. 람노수스 HN001이 상기 태아 대상체의 모체에 투여되거나, 또는
b. 상기 대상체가 신생아, 유아 또는 어린이 대상체이고, 상기 엘. 람노수스 HN001이 상기 신생아, 유아 또는 어린이 대상체의 모체에 투여되는,
조성물.
제 2 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 처치 또는 예방하는 데 사용되는 것은 프리바이오틱과 상기 엘. 람노수스 HN001를 동시에 또는 순차적으로 투여하는 것을 포함하는, 조성물.
제 15 항에 있어서,
상기 프리바이오틱은 프룩토올리고당류, 갈락토올리고당류, 및 모유 올리고당류 중 하나 이상을 포함하거나 이들의 결합물을 포함하는, 조성물.
제 2 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 성인 대상체 또는 상기 태아, 신생아, 유아, 또는 어린이 대상체의 모체는 30 kg/m² 미만인 BMI를 갖는, 조성물.
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