KR102416399B1 - 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물을 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물 - Google Patents
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Abstract
숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물을 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 대하여 개시한다.
본 발명에 따른 피부 주름 개선용 화장료 조성물은 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물이 세포독성을 나타내지 않고, 피부의 진피 층에 존재하는 섬유아세포에 작용하여 세포의 증식을 촉진하고, 콜라겐의 발현을 증가시키며, 콜라겐 분해 효소 활성화를 억제 시킬 수 있다.
본 발명에 따른 피부 주름 개선용 화장료 조성물은 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물이 세포독성을 나타내지 않고, 피부의 진피 층에 존재하는 섬유아세포에 작용하여 세포의 증식을 촉진하고, 콜라겐의 발현을 증가시키며, 콜라겐 분해 효소 활성화를 억제 시킬 수 있다.
Description
본 발명은 숙지황, 맥문동, 천문동, 자초의 혼합 추출물을 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물 및 피부 주름 예방 및 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 숙지황, 맥문동, 천문동, 자초 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하여 콜라겐 생성 촉진 효과 및 MMP-1 생성 억제 효과 및 피부의 흔적을 개선할 수 있는 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물을 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 우리 인체 내에서 외부 환경과 가장 밀접하게 접하고 있으며 인체 내부를 보호하는 아주 중요한 기관이다. 피부는 표피(epidermis), 진피(dermis), 피하지방(hypodermis)으로 크게 나뉘어 있고 최근 인구구조가 고령화되면서 피부의 노화와 관련된 연구가 많이 진행되고 있다. 피부 노화는 크게 내인성 노화와 광노화로 나눌 수 있는데, 이러한 피부노화를 억제 및 예방하는 기능성 화장품의 대부분은 그 원료 개발에 큰 부분을 차지하고 있다.
최근에는 천연물을 이용한 많은 약제 및 화장료 원료들이 개발되고 있다. 천연물의 종류는 무수히 많지만, 화장료 조성료로 이용되고 연구되고 있는 복합 천연원료들은 아직 일부분으로 알려져 있다. 복합천연물들이 피부에 미치는 화장품 효능연구는 피부 질환 치료 및 화장료 원료 개발에 있어서 매우 높은 가능성을 지니고 있으며, 이를 이용한 체계적인 연구 수행이 필요하다.
예컨대, 숙지황(Rehmanniae Radix preparata)은 혈류를 좋게 하여 허혈을 해소함으로써 신체의 냉증을 해소하고 혈류가 상대적으로 어려운 하초의 기운을 보충하며 각종 면역세포와 혈액세포의 증식 및 골수세포를 활성화 및 세포성 면역을 증진 효능이 있다고 알려져있어 보혈제로 많이 쓰인다.
또한, 맥문동(Liriope platyphylla Wang et Tang)효능으로 혈당강하 작용, 항염증 작용, IgM 항체 생산억제 작용, 항부정맥효과, 부탄올 분획의 항암작용, 백혈구 감소증 길항체로의 작용 등이 알려져 있고, 또한 맥문동 종자 추출물이 피부 미백에 효능이 있다는 연구가 보고되어있다. (특허문헌 0001)
또한, 천문동(Asparagus cochinchinensis)은 백합과에 속하는 다년생 초본식물로 백혈병 및 유선암들에 특이 좋은 항암효과와 편도선염, 피부 및 상처회복에 효능이 있어 피부의 재생을 도와 피부를 윤기 있는 피부를 유지시켜주며 그 외에도 기력증진 및 항균효과가 뛰어나다.
또한, 자초(Lithospermum erythrorhizon)는 지치의 뿌리로서, 시코닌(shikonin), 아세틸시코닌(acetylshikonin) 등과 함께 다당류인 리소스퍼먼(lithosperman) 등의 성분을 함유하며, 혈액 순환 촉진, 해독작용, 항균 및 항염작용 등이 있어 현재 종기나 화상, 습진 등을 치료하는데 상용되는 한약재로 알려져 있으며 또한, 자초의 70 wt% 에탄올 추출물이 아토피피부염 동물모델인 쥐(NC/Nga mice) 실험을 통해 아토피성 피부염의 발전을 억제한다는 것이 보고되었다. (비특허문헌 0001)
이에, 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물이 세포에 독성에도 영향을 미치지 않으면서 섬유아세포에서 콜라겐의 발현을 증가시키며, 콜라겐 분해 효소 활성화 억제 효과를 나타냄을 확인함으로써, 상기 혼합 추출물을 피부 주름 개선 및 억제용 화장료 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있다는 것을 확인하였기에, 상기와 같은 혼합 추출물들을 이용한 피부 주름 개선 및 억제용 화장료 원료 개발의 필요성이 대두되고 있다.
"자초 추출물 극성 성분의 피부 보습 증진 및 아토피 피부염 호전 효과", KOREAN J. FOOD SCI. TECHNOL., Vol. 41, No. 5, pp. 547~551 (2009).
본 발명의 목적은 숙지황(Rehmanniae Radix preparata), 맥문동(Liriope platyphylla Wang et Tang), 천문동(Asparagus cochinchinensis)및 자초(Lithospermum erythrorhizon)의 혼합 추출물을 함유하여 피부 주름 개선효과가 있는 화장료 조성물을 제공하는 것이다. 특히, 콜라겐 생합성을 촉진하고, MMP-1 생성을 억제함으로써 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물을 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적은, 본 발명에 따라 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초로 이루어진 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 의해 달성된다.
상기 혼합 추출물은 숙지황 : 맥문동 : 천문동 : 자초를 각각 1~5 : 1~5 : 1~5 : 1~5 중량비율로 혼합하여 추출할 수 있다.
상기 혼합 추출물은 상기 화장료 조성물 전체 중량 대비 0.01 내지 20 중량%로 포함될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도로 구성된 그룹에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제공될 수 있다.
본 발명은 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공함으로써, 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물이 세포독성을 나타내지 않고, 피부의 진피 층에 존재하는 섬유아세포에 작용하여 세포의 증식을 촉진하고, 콜라겐의 발현을 증가시키며, 콜라겐 분해 효소 활성화를 억제 시킬 수 있다.
또한, 본 발명은 이를 사람의 피부에 직접 발라보았을 때 피부의 흔적 및 주름을 완화함을 확인함으로써, 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물이 피부 주름 개선용 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 복합 천연물이 섬유아세포의 세포생존율을 도식화한 것이다.
도 2은 본 발명의 복합 천연물이 콜라겐 합성 증가효과를 그래프로 도식화한 것이다.
도 3는 본 발명의 복합 천연물이 MMP-1 생성 억제효과를 그래프로 도식화한 것이다.
도 4 은 본 발명의 복합천연물이 포함된 조성물의 눈가주름 개선 효과율을 그래프로 도식화한 것이다.
도 2은 본 발명의 복합 천연물이 콜라겐 합성 증가효과를 그래프로 도식화한 것이다.
도 3는 본 발명의 복합 천연물이 MMP-1 생성 억제효과를 그래프로 도식화한 것이다.
도 4 은 본 발명의 복합천연물이 포함된 조성물의 눈가주름 개선 효과율을 그래프로 도식화한 것이다.
본 발명과 본 발명의 동작상의 이점 및 본 발명의 실시에 의하여 달성되는 목적을 충분히 이해하기 위해서는 본 발명의 바람직한 실시예를 예시하는 첨부 도면 및 첨부 도면에 기재된 내용을 참조하여야만 한다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시예를 설명함으로써, 본 발명을 상세히 설명한다. 다만, 본 발명을 설명함에 있어서 이미 공지된 기능 혹은 구성에 대한 설명은, 본 발명의 요지를 명료하게 하기 위하여 생략하기로 한다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초 혼합 추출물은 1~5 : 1~5 : 1~5 : 1~5의 중량비, 바람직하게는 1 : 1 : 1 : 1 중량비로 이루어지는 것이다,
유효성분으로서의 상기 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초 추출물은 전 중량에 대하여 0.005~50 중량% 함유되며, 0.01~20 중량% 함유되는 것이 더욱 바람직하다. 0.005중량% 미만으로 함유되는 경우에는 활성이 약하며, 50 중량%를 초과하는 경우 제형에 있어 불안정하다.
본 발명 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초 혼합 추출물은 피부 내에서 콜라겐의 활성을 촉진하며, MMP-1 생성을 억제하는 작용을 촉진함으로써 피부 주름을 개선하는 작용기전을 가진다.
본 발명의 숙지황 추출물, 맥문동 추출물, 천문동 추출물 및 자초 추출물은 다음과 같이 제조할 수 있다. 맥문동, 천문동, 자초의 뿌리를 물로 깨끗이 세척한 후, 그늘에서 건조한다. 숙지황은 지황을 7번 찌고 말리는 과정을 거쳐 최종적으로 그늘에서 건조한다. 건조물을 추출용기에 넣고, 적당량의 추출 용매에 적절한 온도에서 일정 시간 추출한다. 상기 추출물은 여과되고, 진공회전증발기 등을 이용하여 농축 될 수 있다.
상기 추출 용매로는 물, 탄소수 1 내지 4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 헥산 또는 이들의 혼합 용매로부터 선택된 용매를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 에탄올을 첨가하여 열수 추출하는 것을 특징으로 한다. 상기 추출 용매의 양은 생약 건조 중량의 1~15배, 바람직하게는 10배로 한다.
상기 추출 방법은 중탕 추출, 환류냉각 추출, 초음파 추출 등의 추출 방법을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 중탕 추출의 추출방법으로 1회 내지 5회 추출될 수 있다.
상기 침적 온도는 40~70℃ 정도로, 더욱 바람직하게는 55℃로 유지하는 것이 부패, 변색 및 변취의 예방에 가장 효과적이다. 상기 침척 시간은 2~7시간, 바람직하게는 4시간을 유지하는 것이 좋다.
상기 침적에 의하여 수득한 추출물을 1~3일, 바람직하게는 2일 방치한 후 여과 장치에 여과지를 이용하여 여과하고 동결건조기로 건조하여 숙지황 추출물, 맥문동 추출물, 천문동 추출물 및 자초 추출물에 해당하는 파우더를 얻는다.
본 발명의 숙지황 추출물, 맥문동 추출물, 천문동 추출물 및 자초 추출물을 혼합하는 최적의 혼합비는 숙지황 추출물, 맥문동 추출물, 천문동 추출물 및 자초 추출물이 1~5 : 1~5 : 1~5 : 1~5, 더욱 바람직하게는 1 : 1 : 1 : 1 중량비로 혼합되는 것이다. 한편, 본 발명의 혼합 추출물은 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초를 혼합 후 추출할 수도 있고, 각각의 추출물을 얻은 후 혼합할 수도 있다.
만약 상기 숙지황 추출물, 맥문동 추출물, 천문동 추출물 및 자초 추출물을 함유하는 마이크로캡슐, 나노캡슐, 나노좀 등의 제형으로 용액 또는 파우더 형태로 존재한다면 당업자는 상기 농도 범위 내에서 본 발명에 따른 조성물 내에 이 용액 또는 파우더의 양을 조절할 수 있을 것이다.
본 발명 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물로 제조되는 화장품은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연 화장수가 있다. 또한, 본 발명의 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초 추출물을 함유하는 화장품 이외에도 피부 과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부 과학 부야에서 통상적으로 사용되는 국소 전용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초 추출물에 추가로 지방 물질, 용해제, 유기 용매, 겔화제, 연화제, 항산화제, 농축제, 안정화제, 현탁화제, 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 비타민, 보존제, 차단제, 필수오일, 염료, 습윤화제, 발포제, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고 상기의 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도 등의 제형으로 적용될 수 있다.
이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다.
이들 실시예 및 실험예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예 및 실험예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예
1 : 숙지황 추출물의 제조
음지에서 건조하고 숙성시킨 숙지황 뿌리를 분쇄한 뒤, 200 g을 10배 가량의 70%(V/V) 에탄올 수용액으로 4시간 가온 열수 추출하고 냉침한 후, 100 ㎛ 투과사이즈를 갖는 여과지로 여과하였다. 이 여과된 추출액을 60℃이하에서 감압농축 한 후 동결건조기를 이용해 완전히 건조시켜 숙지황 추출물 45 g을 수득하였다.
실시예
2 : 맥문동 추출물의 제조
음지에서 건조한 맥문동 뿌리를 분쇄한 뒤, 200 g을 10배 가량의 70%(V/V) 에탄올 수용액으로 4시간 가온 열수 추출하고 냉침한 후, 100 ㎛ 투과사이즈를 갖는 여과지로 여과하였다. 이 여과된 추출액을 60℃이하에서 감압농축 한 후 동결건조기를 이용해 완전히 건조시켜 맥문동 추출물 52 g을 수득하였다.
실시예
3 :
천문동
추출물의 제조
음지에서 건조시킨 천문동 뿌리를 분쇄한 뒤, 200 g을 10배 가량의 70%(V/V) 에탄올 수용액으로 4시간 가온 열수 추출하고 냉침한 후, 100 ㎛ 투과사이즈를 갖는 여과지로 여과하였다. 이 여과된 추출액을 60℃이하에서 감압농축 한 후 동결건조기를 이용해 완전히 건조시켜 천문동 추출물 82 g을 수득하였다.
실시예
4 : 자초 추출물의 제조
음지에서 건조시킨 자초 뿌리를 분쇄한 뒤, 200 g을 10배 가량의 70%(V/V) 에탄올 수용액으로 4시간 가온 열수 추출하고 냉침한 후, 100 ㎛ 투과사이즈를 갖는 여과지로 여과하였다. 이 여과된 추출액을 60℃이하에서 감압농축 한 후 동결건조기를 이용해 완전히 건조시켜 자초 추출물 71 g을 수득하였다.
상기 실시예 1내지 4에서 제조한 숙지황 추출물, 맥문동 추출물, 천문동 추출물 및 자초 추출물, 그리고 이를 각각 1~5 : 1~5 : 1~5 : 1~5비로 다양하게 혼합한 혼합물을 농도별로 에탄올에 희석하여 제조한 희석용액을 실험에 사용하였다.
실험예
1 : 세포 생존율 분석 (
in vitro
)
복합천연물에 대한 세포 생존율에 미치는 영향을 알아보기 위해 인간 피부 섬유아세포(HDF: Human dermal fibroblast, Thermo사 제조)를 3.0×103세포/㎖ 농도로 96웰 플레이트에 100 ul씩 분주하고, 37℃, 5% C02, 가습 조건하에서 1일 배양을 실시하였다. 배양액은, DMEM medium(Dulbecco's Modified Eagle's Medium, Gibco사 제조)에 FBS(Gibco사 제조)를 10%로 함유한 배지를 각 웰당 100 ul씩 사용하였다.
이어서, FBS(Gibco)가 포함되지 않은 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium, Sigma사 제조)으로 교환하고, 본 발명의 천연물을 0.5, 5, 50 ug/ml 씩 처리하여 배양하였다. 상기 화합물을 용해하지 않는 PBS 동일한양을 첨가한 것을 대조군으로서 사용하였다.
시험 시료를 넣고 24시간 배양 후, 배양된 세포에 MTT solution을 0.5 mg/ml의 농도로 첨가하여 2시간 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 배양이 끝 난 후 각 well의 배지를 제거하고 배지가 제거된 각 well에 demethyl sulfoxide (DMSO; Sigma-Aldrich) 100 μL를 놓고 microplate reader (Bio-Rad, USA)를 이용하여 595 nm 에서 흡광도를 측정하였다. 실험은 3회 반복 실시하였으며 수학식 1에 따라서 평균값을 도출하였다. 그 결과를 표 1 및 도 1에 나타내었다.
[수학식 1]
세포 생존율(%) = (실험군 540 nm 흡광도 / 대조군 540 nm 흡광도) * 100
| 구분 | 세포 생존율(%) |
| 대조군 | 100 |
| 복합천연물(0.5 ug/ml) | 101 |
| 복합천연물 (5 ug/ml) | 105 |
| 복합천연물(50 ug/ml) | 103 |
상기 표 1 및 도 1을 참고하면, 본 발명의 모든 화합물은 모두 세포 생존율이 대조군과 비교하였을 때, 90% 이상의 세포 생존율을 보이는 것을 확인하였다. 본 실험 결과를 통해, 본 발명의 복합천연물은 모두 인간 피부 섬유아세포를 포함하는 동물세포에서 독성도가 없음이 확인되어 안전한 원료임을 확인하였다.
실험예
2 : 복합 천연물의 Type-1
Procollagen
합성 촉진 효과 측정 (in vitro)
인간 피부 섬유아세포(HDF: Human dermal fibroblast, Thermo사 제조)를 6.0×104세포/㎖ 농도로 12웰 플레이트에 1 ㎖씩 분주하고, 37℃, 5% C02, 가습 조건하에서 1일 배양을 실시하였다. 배양액은, DMEM medium(Dulbecco's Modified Eagle's Medium, Gibco사 제조)에 FBS(Gibco사 제조)를 10%로 함유한 배지를 각 웰당 1 ㎖씩 사용하였다.
이어서, FBS(Gibco)가 포함되지 않은 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium, Sigma사 제조)으로 교환하고, 본 발명의 천연물을 농도별로 각각 처리하여 배양하였다. 상기 화합물을 용해하지 않는 PBS를 동일한양을 첨가한 것을 대조군으로서 사용하였다.
콜라겐 생산 촉진 시험에 있어서는, 48시간 배양한 후, 배양액을 채취하여, 배양액 중에 분비된 타입 I 프로 콜라겐의 농도를, 효소 결합 면역 측정법(ELSIA, Procollagen type I c-peptide EIA Kit; R&D system 제조)으로 정량하였다.
정량 결과를 기초로, 합성된 타입 I 프로 콜라겐의 양(pg/㎖)을 측정하고, 하기 수학식 2에 따라 타입 I 프로 콜라겐 생성율을 계산하였으며, 그 결과를 표 2 및 도 2 에 나타내었다.
[수학식 2]
타입 I 프로 콜라겐 생성율(%) = (실험군 타입 I 프로 콜라겐 양 / 대조군 타입 I 프로 콜라겐 양) * 100
| 구분 | + : 50 ug/ml, ++ : 100 ug/ml | ||||
| 숙지황 | - | ++ | - | - | - |
| 맥문동 | - | - | ++ | - | - |
| 천문동 | - | - | - | ++ | - |
| 자초 | - | - | - | - | ++ |
|
피부섬유아세포
콜라겐생산량
(%) |
100.00 | 130 | 124.50 | 112.50 | 124.20 |
| 숙지황 | ++ | + | + | + | |
| 맥문동 | + | ++ | + | + | |
| 천문동 | + | + | ++ | + | |
| 자초 | + | + | + | ++ | |
|
피부섬유아세포
콜라겐생산량
(%) |
160.50 | 140.20 | 120.50 | 136.50 | |
| 숙지황 | + | + | + | - | |
| 맥문동 | + | + | - | + | |
| 천문동 | + | - | + | + | |
| 자초 | - | + | + | + | |
|
피부섬유아세포
콜라겐생산량
(%) |
134.50 | 115.20 | 112.50 | 142.50 | |
| 숙지황 | ++ | + | + | ++ | + |
| 맥문동 | + | ++ | + | - | - |
| 천문동 | - | - | - | + | ++ |
| 자초 | + | + | ++ | + | + |
|
피부섬유아세포
콜라겐생산량
(%) |
130.50 | 113.35 | 132.50 | 110.53 | 110.55 |
| 숙지황 | + | - | - | - | + |
| 맥문동 | - | ++ | + | + | + |
| 천문동 | + | + | ++ | + | + |
| 자초 | ++ | + | + | ++ | + |
|
피부섬유아세포
콜라겐생산량
(%) |
134.20 | 103.57 | 107.50 | 143.50 | 201.20 |
상기 표 2 및 도 2을 참고하면, 본 발명의 천연물들은 모두 콜라겐 생성 촉진 효과를 보이며, 특히 천연물 4가지를 50 ug/ml씩 복합으로 처리하였을 때 더욱더 콜라겐 증진을 촉진시켜 피부 주름 방지와 같은 피부 주름 완화에 대해 충분한 효과를 나타내는 것으로 확인된다.
실험예
3 : 복합 천연물의
MMP
-1 생성 억제 효과 (
in vitro
)
인간 피부 섬유아세포(HDF: Human dermal fibroblast, Thermo사 제조)를 6.0×104세포/㎖ 농도로 12웰 플레이트에 1 ㎖씩 분주하고, 37℃, 5% C02, 가습 조건하에서 1일 배양을 실시하였다. 배양액은, DMEM medium(Dulbecco's Modified Eagle's Medium, Gibco사 제조)에 FBS(Gibco사 제조)를 10%로 함유한 배지를 각 웰당 1 ㎖씩 사용하였다.
이어서, Serum이 들어가 있지 않은 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium, Sigma사 제조)으로 교환하고, 본 발명의 천연물을 농도별로 각각 처리하여 배양하였다. 상기 화합물을 용해하지 않는 멸균된 증류수 동일한 양을 첨가한 것을 대조군으로서 사용하였다.
MMP-1 생성 억제율 시험에 있어서는, 2일 배양한 후, 배양액을 채취하여, 배양액 중에 분비된 MMP-1의 농도를, 효소 결합 면역 측정법(ELSIA, MMP-1 EIA Kit; R&D system 제조)으로 정량하였다.
정량 결과를 기초로, 합성된 MMP-1의 양(pg/㎖)을 측정하고, 하기 수학식 3에 따라 MMP-1 생성 억제율을 계산하였으며, 그 결과를 표 3 및 도 3에 나타내었다.
[수학식 3]
MMP-1 생성 억제율(%) = (1-실험군 MMP-1 양 / 대조군 MMP-1 양) * 100
| 구분 | + : 50 ug/ml, ++ : 100 ug/ml | ||||
| 숙지황 | - | ++ | - | - | - |
| 맥문동 | - | - | ++ | - | - |
| 천문동 | - | - | - | ++ | - |
| 자초 | - | - | - | - | ++ |
|
피부섬유아세포
MMP -1 생성억제율 (%) |
100.00 | 80.20 | 75.60 | 91.50 | 77.04 |
| 숙지황 | ++ | + | + | + | |
| 맥문동 | + | ++ | + | + | |
| 천문동 | + | + | ++ | + | |
| 자초 | + | + | + | ++ | |
|
피부섬유아세포
MMP -1 생성억제율 (%) |
62.10 | 59.80 | 67.50 | 56.90 | |
| 숙지황 | + | + | + | - | |
| 맥문동 | + | + | - | + | |
| 천문동 | + | - | + | + | |
| 자초 | - | + | + | + | |
|
피부섬유아세포
MMP -1 생성억제율 (%) |
87.30 | 65.10 | 77.70 | 77.60 | |
| 숙지황 | ++ | + | + | ++ | + |
| 맥문동 | + | ++ | + | - | - |
| 천문동 | - | - | - | + | ++ |
| 자초 | + | + | ++ | + | + |
|
피부섬유아세포
MMP -1 생성억제율 (%) |
82.35 | 68.21 | 61.20 | 66.92 | 87.10 |
| 숙지황 | + | - | - | - | + |
| 맥문동 | - | ++ | + | + | + |
| 천문동 | + | + | ++ | + | + |
| 자초 | ++ | + | + | ++ | + |
|
피부섬유아세포
MMP -1 생성억제율 (%) |
72.10 | 62.90 | 81.20 | 62.60 | 40.83 |
상기 표 3 및 도 3을 참고하면, 본 발명의 천연물들 모두 MMP-1 생성 억제 효과가 우수함을 확인할 수 있었고, 천연물 4가지를 50 ug/ml씩 복합 처리하였을 때 더욱 억제하는 것을 확인하여 이를 기반으로 피부 주름과 같은 피부 주름 완화에 대해 충분한 효과를 나타내는 것으로 확인하였다.
실험예
4: 눈가 주름 개선 효과 인체 적용 시험 (
PRIMOS
High Resolution)
본 발명에 따른 화장료 조성물의 피부 주름, 예컨대 피부 주름 개선 효과를 확인하기 위해, 만 35 내지 50세의 대한민국 여성 22명을 대상으로 각 4주간 일상적인 크림 사용과 같은 방법으로 평가하였다. 평가 방법은 PRIMOS High Resolution(Phaseshift Rapid In vivo Measurement Of Skin high resolution, GFMesstechinik GmbH, Germany 제조)을 이용하여 눈가 주름 부위의 Roughness 분석을 통한 변수 별 측정을 진행 하였다. Roughness 분석을 통한 눈가주름 변수 값은 다음과 같다.
- Ra (Average roughness): 단면의 거칠기 높이에 중심선을 그렸을 때 중심선에서 표면의 단면 곡선까지 길이의 절대 값들의 평균.
- Rq (Root mean square roughness): 단면의 거칠기 높이에 중심선을 그렸을 때 중심선에서 표면의 단면 곡선까지 길이의 제곱평균제곱근.
- Rmax (Maximum roughness depth): 단일 측정 범위 내에 가장 높은 산과 가장 낮은 골의 차이 값.
Roughness 측정에 의해 분석된 변수 값이 작아지면 눈가주름이 개선됨을 의미하며 PRIMOS High Resolution에 의한 Roughness 변수 값의 감소율은 수학식 4에 따라 계산하였다. 각 변수에 대한 계산 값은 표 4 및 도 4에 나타내었다.
[수학식 4]
감소율 (%) = (시료 적용 전 측정값 - 시료 적용 후 측정값 / 시료적용 전 측정값) * 100
| Roughness 변수 | 적용 2주 후 | 적용 4주 후 |
| Ra | 3.223 | 8.631 |
| Rq | 2.111 | 5.785 |
| Rmax | 1.221 | 1.881 |
PRIMOS High Resolution을 이용한 눈가 주름 부위의 Roughness 변수별 측정값을 분석한 결과, Ra값은 시료 적용 전에 비하여 통계적으로 유의한 수준 (p<0.05)으로 적용 2주 후, 적용 4주 후 각각 3.223%, 8.631% 감소하였으며, Rq값은 시료 적용 전에 비하여 통계적으로 유의한 수준 (p<0.05)으로 적용 2주 후, 적용 4주 후 각각 2.111%, 7.785% 감소하였다. 또한, Rmax 값은 시료 적용 전에 비하여 통계적으로 유의한 수준 (p<0.05)으로 적용 4주 후에 감소하였다. 따라서 실험예 1의 크림은 적용 2주 후, 적용 4주 후 눈가주름 개선에 도움을 주는 것으로 확인되었다.
Claims (4)
- 숙지황 추출물, 맥문동 추출물, 천문동 추출물 및 자초 추출물로 이루어진 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물로,
상기 혼합 추출물은 상기 숙지황 추출물 : 상기 맥문동 추출물 : 상기 천문동 추출물 : 상기 자초 추출물을 각각 1 : 1 : 1 : 1 중량비율로 혼합하되,
상기 혼합 추출물은 상기 숙지황 추출물, 상기 맥문동 추출물, 상기 천문동 추출물 및 상기 자초 추출물을 각각 50 ug/ml 씩 포함하고,
상기 혼합 추출물은 상기 화장료 조성물 전체 중량 대비 0.01 내지 20 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 제 1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도로 구성된 그룹에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제공되는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020170067411A KR102416399B1 (ko) | 2017-05-31 | 2017-05-31 | 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물을 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020170067411A KR102416399B1 (ko) | 2017-05-31 | 2017-05-31 | 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물을 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물 |
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|---|---|
| KR20180131688A KR20180131688A (ko) | 2018-12-11 |
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ID=64671923
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020170067411A Active KR102416399B1 (ko) | 2017-05-31 | 2017-05-31 | 숙지황, 맥문동, 천문동 및 자초의 혼합 추출물을 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물 |
Country Status (1)
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| KR20250027041A (ko) | 2023-08-18 | 2025-02-25 | 이성진 | 자초 및 갈근의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용, 항염증용 및 피부 보습용 조성물 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20090070455A (ko) * | 2007-12-27 | 2009-07-01 | 주식회사 코리아나화장품 | 초임계 추출법을 이용한 자초 추출물을 유효성분으로함유하는 피부노화방지용 및 피부주름개선용 화장료 조성물 |
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-
2017
- 2017-05-31 KR KR1020170067411A patent/KR102416399B1/ko active Active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 원광대학교 대학원. 數種 한약재의 콜라겐 생합성 효과에 대한 실험적 연구. 2010년 8월 31일 공개* |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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| KR20180131688A (ko) | 2018-12-11 |
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Comment text: Notification of reason for refusal Patent event date: 20210906 Patent event code: PE09021S01D |
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