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KR101864561B1 - Jak 억제제 - Google Patents

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KR101864561B1
KR101864561B1 KR1020177023156A KR20177023156A KR101864561B1 KR 101864561 B1 KR101864561 B1 KR 101864561B1 KR 1020177023156 A KR1020177023156 A KR 1020177023156A KR 20177023156 A KR20177023156 A KR 20177023156A KR 101864561 B1 KR101864561 B1 KR 101864561B1
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Abstract

본 발명은 여러 JAK억제제를 공개하였으며, 구체적으로 식(I)화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염 및 그의 JAK관련 질병을 치료하는 약물제작에 사용되는 것을 공개하였다.
Figure 112018017062155-pct00436

(I)

Description

JAK 억제제{JAK inhibitors}
본 발명은 여러JAK억제제에 관한 것이며, 구체적으로 식(I)의 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염에 관한 것이다.
JAK는 염증, 자체 면역력 질병, 증식성 질병, 이식배척, 연골갱신(turnover) 회손에 관련 질병, 선천적 연골기형 및/또는 IL6과도분미와 관련 질병에 참여하는 티로신 키나제계열에 속한다. 본 발명은 상기 화합물, 상기 화합물을 포함하는 약물 조성물의 생산방법 및 본 발명 화합물을 이용하여 염증, 자체 면역력 질병, 증식성 질병, 이식배척, 연골갱신(turnover) 회손에 관련 질병, 선천적 연골기형 및/또는 IL6과도분미와 관련 질병을 예방 및/또는 치료하는 방법도 제공한다.
Janus 카나아제(JAK)는 세포 인자신호를 막 수용체에서 STAT전사인자로 형질도입하는 세포질 타이로신 키나아제이다. 종래 기술은 이미 4종류의 JAK 가족 구성원인 JAK1, JAK2, JAK3 및TYK2을 설명하였다. 세포인자는 기타 수용체와 결합할 경우, JAK각족 구성원은 자기 인산화 및/또는 서로 인산 전이하며, 그 다음 STATs인산화하고, 그 다음 세포핵 내부로 이전하여 전사를 조절한다. JAK-STAT세포내 신호 형질도입은 인터페론, 대다수 인터류킨 및 다양한 세포인자 및 내분비 인자에 적용된다. 예를 들어, EPO, TPO, GH, OSM, LIF, CNTF, GM-CSF 및 PRL(VainchenkerW. 등(2008)).
유전학 모델과 소분자JAK억제제의 조합연구는 JAKs의 몇 가지 치료 잠재적 기능을 밝혔다. 생쥐 및 사람의 유전학을 통해 JAK3는 면역 억제의 목표임을 확증하였다(O'Shea J. 등(2004)). JAK3억제제는 임상개발에 성공적으로 사용되었으며, 초기에는 장기 이식 배척에 사용되었으나, 후에는 기타 면역 염증성 적응 증후군에도 사용되었다. 예를 들어, 류머티스성 관절염(RA), 건선 및 클론 질환(http: //clinicaltrials.gov/). TYK2는 면역 염증성 질병의 잠재적 핵심인 사실이 이미 사람의 유전학 및 생쥐의 제거의 연구를 통해 확증되었다(Levy D. 및 Loomis C. (2007)). JAK1는 면역 염증성 질병 분야의 새로운 목표이다. JAK1을 기타 JAKs와 이종 이합하여 세포인자가 유도하는 염증 촉발시키는 신호전송을 형질 도입한다. 따라서, JAK1및/또는 기타JAK에 대하여 사전 억제하여 일련의 염증성 질병 및 기타 JAK를 매개로 신호형질도입에 의해 유도된 질병에 대하여 치료효과가 있다.
토파시티닙 (Tofacitinib)은 파이저 회사 (Pfizer)에서 연구개발 되었으며, 그에 대한 특허는 WO02/096909, US7301023, WO2015087201가 있으며, 2012년11월7일 미국사장에서 출시되었으며 류머티스성 관절염의 치료에 사용되며, 상품명칭은 Xeljanz? 이다.
피고티니(Filgotinib)의 특허는 US8808764, WO2009047514A1 있으며, 피고티니(Filgotinib)는 Galapagos회사에서 개발된 선택성 Jk1억제제이다. 이는 류머티스성 관절염과 크론병 (Crohn’s disease)에 사용되며, 임상 II기에 처한 상태이다. 문헌에서 기재된 활성ak1는 IC50 = 10nM, Jak2 는 IC50= 28nM이다.
Figure 112017080031701-pct00001
본 발명은 식(I)에서 도시된 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염에 있어서,
Figure 112017080031701-pct00002
(I)
여기서,
고리A는 치환된 5～12원(membered)헤테로시클릭기 또는 5~6원(membered)헤테로아릴기에서 임의로 선택되고;
R1는H를 선택하거나 치환된 C1- 6알킬기, C1- 6헤테로알킬기, C3- 6시클로알킬기, 3~6원(membered)헤테로시클릭기, 5~6원(membered)아릴, 또는 5~6원(membered)헤테로아릴기로부터 임의로 선택하고;
L는 단일결합, -C(=O)O-, 아실기루부터 선택하거나 치환된 아미노, 아미노아실기, 아실아미노메틸렌기, 아미노아실메틸렌기로부터 임의로 선택하고;
선택적으로, R1과 L 중의 N은 임의로 선택되어 치환된 3～6원(membered) 고리를 형성하고;
R2는 H로부터 선택되거나 치환된 C1- 3알킬기, 3~6원(membered)시클로알킬기로부터 임의로 선택되고;
선택적으로, 구조 유닛
Figure 112017080031701-pct00003
을
Figure 112017080031701-pct00004
으로 치환하고;
"헤테로"는 O, S 또는 N를 대표하고, 그 수량은 1, 2 또는 3에서 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, 상기5～10원(membered)헤테로시클릭기, 5~6원(membered)헤테로아릴기, C1- 6알킬기, C1- 6헤테로알킬기, C3- 6시클로알킬기, 3~6원(membered)헤테로시클릭기, 5~6원(membered)아릴, 5~6원(membered)헤테로아릴기, 아미노, 아미노아실기, 아실아미노메틸렌기, 아미노아실메틸렌기, C1- 3알킬기, 3～6원(membered)고리의 치환기는 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노 치환으로 된 C1- 3알킬기, C1- 3헤테로알킬기로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, 치환기의 수량은 0, 1, 2, 3, 4 또는 5로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, 치환기는 F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, Me, 에틸, N-프로필, 이소프로필기, 시클로프로필기, 트리플루오메틸기로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, 고리A는 선택적으로 치환된 피페리딜, 피페라진, 모르폴리닐, 피롤리딜, 옥사졸기, 1～2개의 헤테로원자를 포함한7~12원(membered)헤테로사이클릭기로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, 고리A는 선택적으로 치환된
Figure 112017080031701-pct00005
,
Figure 112017080031701-pct00006
,
Figure 112017080031701-pct00007
,
Figure 112017080031701-pct00008
,
Figure 112017080031701-pct00009
,
Figure 112017080031701-pct00010
,
Figure 112017080031701-pct00011
,
Figure 112017080031701-pct00012
,
Figure 112017080031701-pct00013
,
Figure 112017080031701-pct00014
,
Figure 112017080031701-pct00015
,
Figure 112017080031701-pct00016
,
Figure 112017080031701-pct00017
,
Figure 112017080031701-pct00018
,
Figure 112017080031701-pct00019
,
Figure 112017080031701-pct00020
,
Figure 112017080031701-pct00021
,
Figure 112017080031701-pct00022
로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, 고리A는
Figure 112017080031701-pct00023
,
Figure 112017080031701-pct00024
,
Figure 112017080031701-pct00025
,
Figure 112017080031701-pct00026
,
Figure 112017080031701-pct00027
,
Figure 112017080031701-pct00028
,
Figure 112017080031701-pct00029
,
Figure 112017080031701-pct00030
,
Figure 112017080031701-pct00031
,
Figure 112017080031701-pct00032
,
Figure 112017080031701-pct00033
,
Figure 112017080031701-pct00034
,
Figure 112017080031701-pct00035
,
Figure 112017080031701-pct00036
,
Figure 112017080031701-pct00037
,
Figure 112017080031701-pct00038
,
Figure 112017080031701-pct00039
,
Figure 112017080031701-pct00040
로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, R1는 H에서 선택되거나 치환된 C1- 4알킬기, C1- 2알킬기-O-C1- 2알킬기-, C1- 2알킬기-S-C1- 2알킬기-, C4- 5시클로알킬기, 6원(membered)아릴, 또는 5원(membered)헤테로아릴기로부터 임의로 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, R1는 H를 선택하거나 선택적으로 치환된 Me,
Figure 112017080031701-pct00041
,
Figure 112017080031701-pct00042
,
Figure 112017080031701-pct00043
,
Figure 112017080031701-pct00044
,
Figure 112017080031701-pct00045
, C1- 2알킬기-O-C1- 2알킬기-, C1- 2알킬기-S-C1- 2알킬기-, 이미다졸릴, 페닐기로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, R1는 H,
Figure 112017080031701-pct00046
,
Figure 112017080031701-pct00047
,
Figure 112017080031701-pct00048
,
Figure 112017080031701-pct00049
,
Figure 112017080031701-pct00050
,
Figure 112017080031701-pct00051
,
Figure 112017080031701-pct00052
,
Figure 112017080031701-pct00053
,
Figure 112017080031701-pct00054
,
Figure 112017080031701-pct00055
,
Figure 112017080031701-pct00056
,
Figure 112017080031701-pct00057
,
Figure 112017080031701-pct00058
,
Figure 112017080031701-pct00059
,
Figure 112017080031701-pct00060
,
Figure 112017080031701-pct00061
로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, R1와 L 중의 N는 선택적으로 치환된 4～5원(membered)고리를 형성된다.
본 발명의 일 방안에서, R1와 L 중의 N이 형성된 고리는 선택적으로 치환된
Figure 112017080031701-pct00062
,
Figure 112017080031701-pct00063
으로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, R1-L-는 선택적으로 치환된Me,
Figure 112017080031701-pct00064
,
Figure 112017080031701-pct00065
,
Figure 112017080031701-pct00066
,
Figure 112017080031701-pct00067
,
Figure 112017080031701-pct00068
,
Figure 112017080031701-pct00069
,
Figure 112017080031701-pct00070
,
Figure 112017080031701-pct00071
,
Figure 112017080031701-pct00072
,
Figure 112017080031701-pct00073
,
Figure 112017080031701-pct00074
,
Figure 112017080031701-pct00075
,
Figure 112017080031701-pct00076
,
Figure 112017080031701-pct00077
,
Figure 112017080031701-pct00078
,
Figure 112017080031701-pct00079
,
Figure 112017080031701-pct00080
,
Figure 112017080031701-pct00081
로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, R1-L-는
Figure 112017080031701-pct00082
,
Figure 112017080031701-pct00083
,
Figure 112017080031701-pct00084
,
Figure 112017080031701-pct00085
,
Figure 112017080031701-pct00086
,
Figure 112017080031701-pct00087
,
Figure 112017080031701-pct00088
,
Figure 112017080031701-pct00089
,
Figure 112017080031701-pct00090
,
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로부터 선택된다.
본 발명의 일 방안에서, R2는H, 메틸, 에틸 또는 시클로프로필기로부터 선택된다.
구체적으로, 본 발명의 화합물은
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로부터 선택된다.
본 발명은 식(I) 화합물이 JAK에 관련된 질병을 치료하는 약물의 제조에 사용되는 것도 제공한다.
관련 정의
별도의 설명이 없은 한, 본문에서 사용되는 기술용어 및 단어는 다음의 의미를 갖고자 목적을 둔다. 한 특정한 용어 또는 단어는 특별한 정이가 없는 경우, 불 확정 또는 불 명확한 것으로 판정해서는 안되며, 일반적인 의미로 의해 해야 한다. 본문에서 제품명이 나타날 경우, 그 대응된 제품 또는 그의 활성성분을 지칭하는 것에 목적으로 한다.
C1-12는 C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, C10, C11 및 C12로부터선택되고, C3-12는 C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, C10, C11 및 C12로부터 선택된다.
C1- 12알킬기 또는 헤테로알킬기, C3-12 환성기 또는 헤테로사이클릭 탄화수소기, C3- 12사이클릭 탄화수소 또는 헤테로사이클릭 탄화수소기로 치환된 C1- 12알킬기 또는 헤테로알킬기는 다음을 포함하나 다음에 한정되지 않는다.
C1- 12알킬기, C1- 12알킬아미노, N, N-디(C1-12알킬기) 아미노, C1-12알콕시, C1-12알카노일, C1- 12알콕시 카르보닐, C1- 12알킬술포닐, C1- 12알킬술피닐, C3- 12시클로알킬기, C3- 12시클로알킬아미노, C3- 12헤테로사이클릭알킬아미노, C3- 12사이클로알킬옥시, C3- 12시클로알킬아실기, C3- 12시클로알킬옥시카보닐, C3- 12시클로알킬슬포니, C3- 12시클로알킬술피닐, 5～12원(membered)아릴 또는 헤테로아릴기, 5～12원(membered)아르알킬 또는 헤테로아르알킬;
메틸, 에틸, N-프로필, 이소프로필기, -CH2C(CH3)(CH3)(OH), 시클로프로필기, 시클로부틸, 프로필 메칠렌, 시클로프피오닐, 벤질옥시, 트리플루오메틸기, 아미노메틸, 하이드록시메틸, 메톡실, 포밀, 메톡시카보닐, 메틸설포닐, 메틸설피닐, 에톡시, 아세틸, 에틸설피닐, 에톡시카보닐, 디메틸아미노, 디에틸아미노, 디메틸아미노카르보닐, 디에틸아미노카르보닐;
N(CH3)2, NH(CH3), -CH2CF3, -CH2CH2CF3, -CH2CH2F, -CH2CH2S(=O)2CH3, -CH2CH2CN,
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, -CH2CH(OH)(CH3)2, -CH2CH(F)(CH3)2, -CH2CH2F, -CH2CF3, -CH2CH2CF3, -CH2CH2NH2, -CH2CH2OH, -CH2CH2OCH3, -CH2CH2CH2OCH3, -CH2CH2N(CH3)2, -S(=O)2CH3, -CH2CH2S(=O)2CH3; 및
페닐, 티아졸린, 바이페닐, 나프틸페닐, 시클로펜틸, 푸릴, 3-피롤리닐, 피롤리딜, 1,3-디옥솔란, 피라졸, 2-피라졸린, 알킬 피라졸, 이미다졸릴, 옥사졸기, 티아졸린, 1,2,3-이미디졸릴, 1,2,3-트리아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 4H-피라닐, 피리딜, 피페리딜, 1,4-다이옥산기, 모르폴리닐, 피리다진, 피리미딘기, 파라진기, 피페라진, 1,3,5-트리티온, 1,3,5-트라이아진일, 벤조퓨란기, 벤조티에닐, 인도릴, 벤지미디졸, 벤조사이아졸, 퓨린기, 퀴놀릴기, 이소퀴놀릴기, 신놀린기 또는 퀴녹살리닐이기기;
여기서, 사용되는 용어 "약학적 허용 가능한"은 화합물, 자새, 조성물 및/또는 제형에 대하여, 이는 신뢰할 수 있는 의학적 판단범위 내에서, 인류 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하는데 적절하고, 과도한 독성, 자극성, 과민성 반응 또는 기타문제 또는 합병증이 없고, 합리적인 이익/리스크 비률에 어울린다.
용어 "약학적 허용 가능한 염"은 본 발명의 화합물의 염을 가르기며, 본 발명에서 발견된 특정 치환기를 구비한 화합물과 상대적으로 독성 없는 산 또는 알칼리로 제작된다. 본 발명의 화합물에 상대적으로 산성 작용기가 포함될 경우, 순용액 또는 적절한 불활성 용매 중에 춘분한 알칼리로 이러한 화합물과 중성 접축 하는 방식으로 알칼리 추가된 염을 취득한다. 약학적 허용 가능한 알칼리 추가된 염은 나트륨, 칼륨, 칼슘, 암모늄, 유기 암모니아 또는 마그네슘염 또는 유사한 염을 포함한다. 본 발명의 화합물에 상대적으로 아칼리성 적용기를 포함할 경우, 순용액 또는 적절한 불활성 용매 중에 춘분한 산로 이러한 화합물과 중성 접축 하는 방식으로 산 추가된 염을 취득한다. 약학적 허용 가능한 산 추가된 염의 실제적인 예는 무기산염 및 유기산염을 포함하고, 상기 무기산은 예을 들어 염산, 브롬화 수소산, 질산, 카본산, 비카보네이트, 인산, 인산수소, 인산이수소염, 황산, 황화 수소, 아이오딘화 수소, 아인산 등을 포함하고, 상기 유기산은 예를 들어 초산, 프로피온산, 이소부티르산, 말레산, 말론산, 벤조산, 숙신산, 수베르산, 푸마르산, 젖산, 만델산, 프탈산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술포산, 구연산, 주석산 및 메탄 설폰산 등 유사한 산을 포함하고; 아미노산(예를 들어, 아르기닌 등)의 염 및 글루쿠론산 등과 같은 유기산의 염(Berge et al. "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977)참조)을 더 포함한다. 본 발명의 일부 특정한 화합물은 알칼리성 및 산성의 작용기를 포함하여, 임의의 하나의 알칼리 또는 산 추가된 염으로 전환될 수 있다.
일반적인 방식으로 염과 알칼리 또는 산과 접촉시키고, 다시 모체 화합물을 분리하여, 화합물의 중성방식으로 재생하는 것이 바람직하다. 화합물의 모체 형식은 기타 다른 염의 형식과 다른 점은 일부 물리적인 특성에 있으며, 예를 들어, 극성용액에서의 영해도가 다르다.
본문에서 사용되는"약학적 허용 가능한 염"은 본 발명의 화합물의 파생물 이며, 여기서, 산을 통해 산화 또는 알칼리를 통해 산화하는 방식은 상기 모체화합물을 수식한다. 약학적 허용 가능한 염의 실제적인 예는 알칼리기, 산기, 또는 유기염 등을 포함하지만 제한은 받지 않는다. 알칼리기는 예를 들어, 무기산 또는 유기산 아민염을 포함하고, 산기는 예를 들어, 카복실산의 알칼리금속을 포함한. 약학적 허용 가능한 염은 일반적인 무 독성 염 또는 모체 화합물의 사차 암모늄염 예를 들어, 무 독성 무기산 또는 유기산으로 형성된 염을 포함한다. 일반적인 무 독성 염은 무기산과 유기산으로부터 파생된 염을 포함하나 제한은 받지 않는다. 상기 무기산 또는 유기산은 2-아세톡실기 벤조산, 2-하이드록시 에탄술포산, 초산, 아스코르브산, 벤젠술폰산, 벤조산, 비카보네이트, 카본산, 구연산, 에데트산, 에탄다이설포닉산, 에탄설포산, 푸마르산, 글루코헵토오스, 글루콘산, 글루탐산, 글리콜산, 브롬화 수소산, 염산, 아이오딘산 수소염, 수산기, 히드록시나프탈렌, 하이드록시에탄술폰산, 젖산, 유당, 도데실술폰산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄 설폰산, 질산, 옥살산, 디히드록시나프탈렌산, 판토텐산, 페닐아세트산, 인산, 롤리갈락투론산, 프로피온산, 살리실산, 스테아르산, 아초산, 숙신산, 설팜산, p-아미노벤젠술폰산, 황산, 탄닌, 주석산 및 p-톨루엔술포산.
본 발명의 약학적 허용 가능한 염은 산기 또는 알칼리기를 포함하는 모체화합물로 일반적인 화학방법으로 합성한다. 일반적인 경우에, 이러한 염의 제작 방법은 물 또는 유기용액 또는 양자의 혼합물에서, 유리산 또는 알칼리 형식의 상기 화합물과 화학량론의 적정한 알칼리 또는 산으로 반응하여 제작된다. 일반적으로, 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴 등 비 수정 매질을 선택하는 것이 바람직하다.
염의 형식 의외에, 본 발명에서 제공하는 화합물은 전구약물 형태로도 존재한다. 본문에서 기재한 화합물의 전구체는 생리조건에서 화학적 변화가 쉽게 발생되어 본 발명의 화합물로 전환된다. 또한, 전국약물은 체내 환경에서 화학 또는 생화방법으로 본 발명의 화합물로 전환될 수 있다.
본 발명의 일부 화합물은 무용제화 형식으로 또는 용제화 형식으로 존재할 수 있으며, 하이드레이트 형태를 포함한다. 일반적으로, 용제화 형식과 무용제화 형식은 상당하며, 모두 본 발명의 범위 내에 포함된다. 본 발명의 일부 화합물은 비 대칭된 카본원자(광학중심) 또는 이중결합을 구비될 수 있다. 라세믹체, 부분 입체 이성질체, 기하 이성체 및 단일 이성체는 모두 본 발명의 범위 내에 포함된다.
본문에서 라세미체, 각별 가능한 입체 이성체; 및 라세미 혼합물과 비등량 대응된 이성체의 혼합물 또는 대응체의 순화합물의 도시번은 Maehr, J. Chem. Ed. 1985, 62: 114-120을 참고하였다. 별도의 설명이 없는 한, 쐬기 모양의 결합과 점선 모양의 결합으로 하나의 입체 중심의 절대 구조를 표시한다. 본문의 상기 화합물이 에틸렌계 이중 결합 또는 기타 기하 비 대응 중심을 갖고 있을 경우, 별도의 규정이 없는 한, 이들은 E, Z기하 이성체를 포함하게 된다. 마참가지로, 모든 이성체의 구성은 모두 본 발명의 범위 내에 속한다.
본 발명의 화합물은 특정한 기하 또는 입체 이성체 형식으로 존재 할 수 있다. 본 발명은 모든 이러한 화합물을 가정한다. 이는 시스 및 트랜스 이성체, (-)- 와 (+)-, (R)- 및 (S)- 거울성체, 부분입체 이성질체, (D)-이성체, (L)-이성체, 및 그의 라세미 혼합물 및 기타 혼합물을 포함하며, 예를 들어, 거울 이성체 또는 부분입체 이성절체적으로 풍부한 혼합물, 이러한 혼합물은 전부다 본 발명의 범위에 속한다. 알킬기 등 치환기 중에 다른 비대층된 탄소원자가 존재할 수 있다. 이러한 이성체 및 그들의 혼합물은 전부다 본 발명의 범위에 속한다.
키랄합성 또는 키랄시료 또는 기타 일반적인 기술을 통해 광활성인 (R)-및(S)-이성체 그리고 D및L이성체를 제작할 수 있다. 본 발명의 한 화합물의 거울성 이성체를 취득하려면, 비 대응 합성 또는 키랄보조제를 구비한 유도작용을 통해 제작될 수 있다. 여기서, 모든 부분입체이성절체 혼합물을 분리되고, 보조기는 분리되어 순수 필요한 거울성 이성체를 제공한다. 또는, 분자에 알칼리성 작용기(예컨대, 아미노) 또는 산성 작용기(예컨대, 카르복실)을 포함할 경우, 적정한 광활성 산 또는 알칼리와 부분 입체 이성질체 염을 형성한다. 그 다음, 분기 기술분야의 공지된 분리 방법을 통해 부분입체 이성질체에 대하여 분리 시킨다. 그 다음, 회수하여 정제된 거울성 이성체를 얻는다. 또한, 거울성 이성체 및 부분입체 이성질체의 분리는 일반적으로, 크로마토그래피를 이용하여 구형되며, 상기 크로마토그래피는 비대칭 고정상을 사용하며, 선택적으로 화학유도법과 결합한다(예를 들어, 아민을 이용하여 카바메이트를 생성한다).
본 발명의 화합물은 하나 또는 복수의 상기 화합물을 구성한 원자에 비 천연비율의 원자 동위 원소를 포함한다. 예를 들어, 방사성 동위원소를 이용하여 화합물을 표기할 수 있으며, 예를 들어, 삼중수소(3H), 유오드-125(125 I) 또는 C-14(14C). 본 발명의 화합물의 모든 동위원소로 구성된 변형은, 방사성여부과 상관 없이, 본 발명의 범위에 속한다.
용어 "약학적 허용 가능한 캐리어"는 본 발명의 유효량의 활설물질을 제공할 수 있고, 활성화 물질의 생물적 활성을 방해하지 않며, 또한 호스트 또는 환자에 대하여 독성 부작용이 없는 어떠한 제제 또는 물, 기름, 야채 및 광물직, 크림베이스, 세척제 기질, 연고기질 등을 포함한 캐리어 매체가 대표한 캐리어를 지칭한다. 이러한 기질은 현탁제, 증점제, 경피촉진제 등을 포함한다. 이들의 제제는 화장품 분야 또는 일부 약학 분야의 기술자에게 있어서, 주지된 것이다. 캐리어의 기타 정보에대하여 Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed. , Lippincott, Williams & Wilkins (2005)을 참조할 수 있다. 이 문헌의 내용은 이용방식으로 본문에 병합된다.
용어 "부형제"는 일반적으로, 유효한 약물조성물을 조제하는데 필요한 캐리어, 희석제 및/또는 매체를 지칭한다.
약물 또는 약학적 화성제에 대하여, 용어 "유효량" 또는 "치료 유효량"는 독성이 없고 또한 예상된 효과를 달성하는 약물 또는 약제의 충분한 양을 지칭한다. 본 발명의 구복제형(口服型)에 대하여, 조성물 중의 한 활성물징의 "유효량"은 이 조성물 주의 다른 한 활성물질과 같이 사용 시 예상효과를 달성하기 위하여 필요한 사용량을 지칭한다. 유효량의 확정은 사람에 따라 다를 수 있으며, 수용체의 나이와 일반 상황에 따르게 되며, 또한, 구체적인 활성물질에 따르게 된다. 케이스에 따라 적절한 유효랑은 본 기술분야의 기술자의 통상적 실험을 통해 확증될 수 있다.
용어 "활성성분", "치료제", "활성물질" 또는 "활성제"은 일종의 화학실체를 의미하며, 이는 목표문란, 질병 또는 병증을 효율적으로 치료할 수 있다.
용어 "치환된 것"은 특정한 원자 상의 어느 하나 또는 복수의 수소원자가 치환기로 치환되는 것을 의미하며, 특정한 원자가상태가 정상이고, 치환 후의 화합물은 안정적인 경우, 중수소 및 수소 변형체를 포함한다. 치환기가 케톤기(즉=O)일 경우, 두 개의 수소원자가 치환됨을 의미한다. 케톤기 치환은 방향족기 위에 발생되지 않는다. 용어 "선택적 치환된"은 치환될 수 있거나, 치환되지 않을 수도 있음을 의미하고, 별도의 규정이 존재하지 않는한, 치환기의 종류와 수량은 화학적으로 실형 가능한 기초상에서 임의로 될 수 있다.
임의의 변수(예컨대 R)가 화합물의 조성 또는 구조 중에 1회 이상 나타날 경우, 경우 별 임의의 변수에 대한 정의는 서로 독립적이다. 따라서, 예를 들어, 한 적용기가 0 내지 2개의 R로 치환될 경우, 상기 적용기는 선택적으로 최대 2개의 R로 치환되고, 각 경우 별, R는 모두 독립적 선택이 있다. 또한, 치환기 및/또는 치환기의 변형체의 조합은 이러한 조합이 안정적인 화합물을 생성할 경우에만 허용될 수 있다.
하나의 치환기의 결합이 하나의 고리의 두 개의 원자에 교차 연결된 경우, 이러한 치환기는 이 고리 상의 어떠한 원자 와도 결합할 수 있다. 예시된 치환기 중에서 어떤 원자를 통해 일반 화학 구조 중에 포함하나 구체적기지 않는 화합물과 연결하는지 명시하지 않는 경우, 이러한 치환기는 그의 어떤 원자를 통해 결할 할 수 있으며. 치환기 및/또는 그의 변형체의 조합은 이러한 조합이 안정적인 화합물 생성할 수 있는 경우에만 허용된다. 예를 들어, 구조 유닛
Figure 112018017062155-pct00168
또는
Figure 112018017062155-pct00169
는 시클로헥실 또는 시클로헥사디엔 상의 임의의 위치에서 치환됨을 표시한다.
알킬과 헤테로알킬 원자단의 치환기는 일반적으로"알킬 치환기"로 불리며, 이들은 다음과 같은 기단 중의 하나 또는 복수를 선택하나 이에 제한 받지 않는다. 즉, -R', -OR', =O, =NR', =N-OR', -NR'R", -SR', 할로겐, -SiR'R"R"', OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', NR' C(O)NR"R"', -NR"C(O)2R', -NR""'-C(NR'R"R'")=NR"", NR"" C(NR'R")=NR'", -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", NR"SO2R', -CN, -NO2, -N3, -CH(Ph)2및 플루오르로 치환된 (C1-C4)알킬, 치환기의 수량은 0～(2m'+1)이고, 여기서, m'은 이러한 원자단 중에 탄소 원자의 총 개수이다. R', R", R"', R''''및R'''''는 H, 치환된 또는 미 치환된 헤테로알킬기, 치환된 또는 미 치환된 아릴(예를 들어, 1 내지 3개의 알로겐로 치환된 아릴), 치환된 또는 미 치환된 알킬, 알콕시, 황 치환된 알콕시기 또는 아르알킬에서 각자 독립적으로 선택하는 것이 바람직하다. 본 발명의 화합물이 하나 이상의 R기 를 포함할 경우, 예를 들어, 각 R기는 독립적으로 선택되며, 예를 들어, 하나 이상의R', R", R"', R'''' 및 R'''''기 존재할 경우의 각 이러한 기 이다. R'과 R"동시에 하나의 질소 원자에 부착될 경우, 이들은 상기 질소 원자 결합하여 5-, 6- 또는 7-원(membered) 고리를 형성한다. 예를 들어, -NR'R"는 1-피롤리딜과4-모르폴리닐을 포함하는 것을 의미하나 이에 제한 받지 않는다. 상기 치환기에 관련된 토론에서, 본 기술분야의 기술자는 용어"알킬"을 탄소 원자가 비수소기로 구성된 기와 결합, 예를 들어, 할로켄 치환된 알킬(예컨데, -CF3, -CH2CF3)과 아실기(예컨데, -C(O)CH3, -C(O)CF3, -C(O)CH2OCH3 등).
알킬 원자단의 상기 치환기와 유사하며, 아릴과 헤테로아릴 치환기는 일반적으로 "아릴 치환기"로 불리며, 예를 들어, -R', -OR', -NR'R", -SR', -할로겐, -SiR'R"R"', OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', NR' C(O)NR"R"', -NR"C(O)2R', -NR""'-C(NR'R"R'")=NR"", NR"" C(NR'R")=NR'", -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", NR"SO2R', -CN, -NO2, -N3, -CH(Ph)2, 불소(C1-C4)알콕시 및 불소(C1-C4)알킬기 등에서 선택되며, 치환기의 수량은 0에서 방향고리 상에 열린 원자가의 총수량 사이에 있다; 여기서, R', R", R"', R"" 및 R""'는 H, 치환된 또는 미 치환된 알킬, 치환된 또는 미 치환된 헤테로알킬기, 치환된 또는 미 치환된 아릴 및 치환된 또는 미 치환된 헤테로아릴기에서 독립적으로 선택하는 것이 바람직하다. 본 발명의 화합물이 하나 이상의 R기를 포함할 경우, 예를 들어, 각 R기는 독립적으로 선택되며, 예를 들어, 하나 이상의R', R", R"', R'''' 및 R'''''기 존재할 경우의 각 이러한 기 이다.
아릴 또는 헤테로아릴기 고리의 인접된 원자상의 두 개의 치환기는 선택적으로 일반식이 -T-C(O)-(CRR')q-U- 되는 치환기로부터 치환된다. 여기서, T및U는 독립적으로 -NR-, -O-, CRR'- 또는 단일결합로부터 선택되고, q는 0 내지 3의 정수이다. 대안으로서, 아릴 또는 헤테로아릴기 고리 의 인점된 원자상의 두 개의 치환기는 선택적으로 일반식이 -A (CH2)r B- 되는 치환기로부터 치환된다. 여기서, A및 B는 독립적으로-CRR'-, -O-, -NR-, -S-, -S(O)-, S(O)2-, -S(O)2NR'- 또는 단일결합로부터 선택되고, r는 1 내지 4의 정수이다. 선택적으로, 이른 통해 형성된 새로운 고리 상의 단일결합은 2중 결합으로 치환된다. 대안으로서, 알릴 또는 헤테로아릴기 고리의 인접된 원자상의 두 개의 치환기는 선택적으로 일반식이 -A (CH2)r B- 되는 치환기로부터 치환되며, 여기서, s 및 d는 각각 독립적으로 0 내지 3의 정수 이다. X는 -O-, -NR', -S-, -S(O)-, -S(O)2- 또는 -S(O)2NR'-이다. 치환기R, R', R" 및 R"'는 각각 독립적으로 수소 및 치환된 또는 미 치환된 (C1-C6)알킬기로부터 선택된다.
별도의 규정이 없는 한, 용어 "할로켄 치환 원소" 또는 "할로겐"자체 또는 다른 치환기의 일부분으로서 불소, 클로로, 브롬 또는 유오드원자로 표시된다. 또한, 용어"할로알킬"는 단일 할로알킬과와 다중 할로알킬을 포함함에 의도가 있다. 예를 들어, 용어 "알킬 (C1-C4) 할라이드"는 트리플루오메틸기, 2,2,2-트라이플루오로에틸, 4-클로로부틸 및 3-브로모프로필 등을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
할로알킬의 실제적인 예는 트리플루오메틸기, 트리클로로메틸, 펜티플로우로에틸, 및 텐티클로로에틸을 포함하나 이에 한정되지 않는다. "알콕시"는 산소 브릿지을 통해 연결된, 특정한 수량의 탄소원자를 구비한 상기 알킬기를 대표한다. C1- 6알콕시는 C1, C2, C3, C4, C5 및 C6의 알콕시를 포함한다. 알콕시의 실제적인 예는 메톡실, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, sec-부톡시, tert-부톡시, n-펜톡시 및S-펜톡시를 포함하나 이에 한정되지 않는다. "시클로알킬기"는 포화 사이클릭, 예를 들어, 시클로프로필기, 시클로부틸 또는 시클로펜틸을 포함한다. 3-7시클로알킬기는 C3, C4, C5, C6 및 C7시클로알킬기를 포함한다. "알케닐"는 직쇄 또는 측쇄 구조형태의 탄화수소쇄를 포함하며, 여기서, 이 쇄상에 임의의 안정되 위치에 하나 또는 복수의 카본-카본2중결합이 존재한다. 예를 들어, 비닐 및 프로페닐.
용어 "할로겐" 또는 "할로겐 원소"는 플루오르, 클로로, 프롬 및 요오드를 의미한다.
별도의 규정이 없는 한, 용어"헤테로"는 헤테로 원자 또는 헤테로 원자단(즉, 헤테로원자를 포함하는 원자단)를 표시하고, 탄소(C) 및 수소(H) 이외에 원자 및 이러한 헤테로 원자를 포함한 원자단, 예를 들어, 산소(O), 질소(N), 황소(S), 규소(Si), 게르마늄 (Ge), 알루미늄(Al), 봉소(B), -O-, -S-, =O, =S, -C(=O)O-, -C(=O) -, -C(=S)-, -S(=O), -S(=O)2-, 및 임의로 치환된-C(=O)N(H)-, -N(H)-, -C(=NH)-, -S(=O)2 N(H)- 또는 -S(=O) N(H)-를 포함한다.
별도의 규정이 없는 한, "고리"는 치환된 또는 미 치환된 시클로알킬기, 헤테로시클릭기, 사이클로알케닐, 헤테로시클릭 알케닐, 시클로알키닐, 헤테로사이클릭 알키닐, 아릴 또는 헤테로아릴기. 여기서, 고리는 싱글 고리, 링크고리, 시피로 고리, 병환 또는 프릿지 고리를 포함한다. 고리 상의 원자수는 일반적으로 고리의 원(membered) 수량으로 정의하며, 예를 들어, "5～7원(membered) 고리"는 고리를 둘러 5 내지 7 원자가 배열된다. 별도의 규정이 없는 한, 상기 고리는 전택적으로 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함한다. 따라서,"5～7원(membered) 고리"는 예를 들어, 페닐기피리딘과 피페리딜을 포함한다; 다른 일 면에서, 용어" 5～7원(membered)헤테로시클릭 고리"는 피리딜과 피페리딜을 포함하나, 페닐을 포함하지 않는다. 용어 "고리"는 적어도 하나의 고리를 구비하는 고리의 고리 시스템을 포함하며, 그 중의 각 "고리"별 모두 독립적으로 상기 정에에 부합된다.
별도의 규정이 없는 한, 용어 "헤테로사이클릭" 또는 "헤테로사이클릭기"는 안정적으로 헤테로원자 또는 헤테로 원자단의 싱글 고리, 이중 고리 또는 삼환을 포함하는 것을 의미하며, 이들은 포화 적인 것, 일부는 불포화된 것 또는 불포화 적인 것(아로마틱)이다. 이들은 탄소 원자와 1, 2, 3 또는 4 개의 독립적으로 N, O및S에서 선택된 헤테로사이클릭 원자를 포함하고, 여기서, 상기 임의의 헤테로시클릭은 하나의 벤젠 고리에 응결되어 이중 고리를 형성될 수 있다. 질소와 황소 헤테로원자는 선택적으로 산화(즉, NO 및S (O) p)산화된다. 질소 원자는 치환 또는 미 치환될 (즉N 또는 NR, 여기서, R는 H 또는 본문에서 이미 정의한 기타 치환기이다)수 있다. 상기 헤테로시클릭은 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자의 부속기에 부착되어 안정적인 구조를 형성한다. 생성된 화합물이 안정적으로 형성되면, 본문 상기 헤테로시클릭은 탄소 위치 또는 질소 위치에서 치환이 발생할 수 있다. 헤테로시클릭 중의 질소원자는 선택적으로 4차화된다. 바람직한 방법으로, 헤테로시클릭 중의 S 및O 원자의 총 수량이 1를 초과할 경우, 이러한 헤테로원자들은 서로 이웃 되지 않는다. 다른 일 발람직한 방법으로, 헤테로시클릭 중의 S 및 O원자의 총수량이 1를 초과하지 않을 것이다. 본문에서 사용된 것과 같이, 용어 "아로마틱 헤테로사이클릭기" 또는 "헤테로아릴기"는 안정적인 5, 6, 7원(membered) 싱글고리 또는 이중 고리 또는 7, 8, 9 또는 10원(membered) 이중 고리 헤테로사이클릭의 방향족 고리를 의미하며, 이는 탄소원자와 1, 2, 3 또는 4개의 독립적으로 N, O및S에서 선택된 헤테로사이클릭 원자를 포함한다. 질소원자는 치환된 또는 미 치환될 (즉, N 또는 NR, 여기서, R는 H 또는 본문에서 이미 정의한 기타 치환기이다)수 있다. 질소와 황소 헤테로원자는 선택적으로 산화(즉NO 및 S (O) p)산화된다. 방향 헤테로시클릭 상의 S 및 O원자의 총수량이 1을 초과하지 않는 점을 주의해야 한다. 브릿지 고리도 헤테로시클릭의 정의에 속한다. 하나 또는 복수의 원자(즉C, O, N 또는 S)가 두 개의 서로 이웃 되지 않는 탄소원자 또는 질소원자와 연결될 경우 브릿지 고리를 형성한다. 바람직한 브릿지는 하나의 탄소원자, 두 개의 탄소원자, 하나의 질소원자, 두 개의 질소원자 및 하나의 탄소-질소기를 포함하나 이에 제한받지 않는다. 하나의 프릿지는 항상 싱글고리를 3개 고리로 전호나하고, 브릿지 고리에서 고리 상의 치환기는 브릿지에 나타날 수도 있음을 주의 해야 한다.
헤테로시클릭 화합물의 실제적인 예는 다음을 포함하나 이에 제한 받지 않는다. 즉, 아크리딘, 아조신(azocine), 벤지미디졸, 벤조퓨란기, 벤조메르캅토푸릴, 벤조메르캅토페닐, 벤즈옥사졸, 벤즈옥사졸린(Benzoxazoline), 벤조사이아졸, 벤조티아졸, 벤조트리아졸, 벤조이속사졸릴, 벤즈이소옥사졸릴, 벤즈이소티아졸릴, 벤조이미다졸리닐, 카바졸릴, 4aH-카바졸릴, 카보리닐, 크로마닐, 크로먼, 시놀리닐 데카히드로퀴놀리닐, 2H, 6H-1, 5,2-디타아진, 다이하이드로[2,3-b]트라하이드로푸라닐, 푸릴, 푸라진, 이미디졸알킬기, 이미다졸리닐, 이미다졸릴, 1H-인다졸릴, 인돌알케닐, 인돌리닐, 인돌리진, 인도릴, 3H-인도릴, isatino, 이소벤조퓨란기, 파이란, 이소인도릴, 이소인돌리닐, 이소인도릴, 인도릴, 이소퀴놀릴기, 이소티아졸린, 이소옥사졸기, 메틸렌디옥시페닐, 모르폴리닐, 느타리딘닐,오타히드로이소퀴놀릴기, 옥사디아졸, 1,2,3-옥사디아졸, 1,2,4-옥사디아졸, 1,2,5-옥사디아졸, 1,3,4-옥사디아졸, 옥사졸리디닐, 옥사졸기, 이소옥사졸기, 하이드록시인돌, 피리미딘기, 페난트리딘기, 페난스롤리닐, 페나진, 페노티아진, 벤조옥사티닐, 페녹사지닐기, 프탈라지닐, 피페라진, 피페리딜, 피페리딘케톤기, 4-피페리딘케톤기, 피페로닐, 프테리딜, 퓨린기, 피라닐, 파라진기, 알킬 피라졸, 피라졸린, 피라졸, 피리다진, 피리디노옥사졸일, 피리디노이미다졸, 피리디노티아졸, 피리딜, 피리미딘기, 피롤리딜, 피롤리닐, 2H-피롤릴, 피롤릴, 피라졸, 쿠나졸리닐, 퀴놀릴, 4H-퀴놀리지닐, 퀴녹살리닐, 퀴누클리디닐, 트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로나프탈렌닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 테트라조릴,6H-1,2,5-티아디아지닐, 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1,2,5-티아디아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 티안트레닐, 티아졸린, 이소티아졸릴티에닐, 티에닐, 티에노옥사졸일, 티에노티졸릴, 티에노이미다졸일, 티에닐, 트라이아진일, 1,2,3-트리아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 1,2,5-트리아졸릴, 1,3,4-트리아졸릴 및 크산테닐. 또한, 다환 및 스피로형 화합물을 포함한다.
별도의 규정이 없는 한, 용어 "히드로카르빌" 또는 그의 하위 개념 (예컨대, 알킬기, 알켄닐기, 알키닐기, 페닐기 등) 자체 또는 다른 치환기의 일부로서 직쇄, 측쇄 또는 고리 모양의 탄화수소 원자단 또는 그 조합을 표시하며, 이는 완전 포화, 단원 또는 다원(membered) 불포화 가 될 수 있으며, 이는 모노 치환(mono-substituted), 비스치환(bis-substituted) 또는 폴리 치환(polysubstitution)가 될 수 있으며, 이는 일가(예컨대, 메틸), 이가(예컨대, 메칠렌) 또는 다가(예컨대, 메틴)가 될 수 있으며, 이가 또는 다가원자단을 포함할 수 있으며, 지정된 수량의 탄소원자를 구비한다(예컨대, C1-C10는 1 내지 10개의 탄소를 표시). "히드로카르빌"는 지방 히드로카르빌 및 방향 히드로카르빌을 포함하나 이에 제한 받지 않는다. 상기 지방 히드로카르빌은 사슬 모양과 고리 모양을 포함하며, 구제척으로 알킬기, 알켄닐기, 알키닐기를 포함하나 이에 제한 받지 않는다. 상기 방향 히드로카르빌은 6-12원(membered)의 방향 히드로카르빌, 예를 들어, 벤젤, 나프탈렌 등을 포함하나 이에 제한 받지 않는다. 일 실시예에서 용어 "알킬기"는 직쇄 또는 측쇄의 원자단 또는 그들의 조합을 표시하며, 이는 완전 포화, 단원 또는 다원(membered) 불포화가 될 수 있으며, 이는 이가 및 다가원자단을 포함할 수 있다. 포화 탄화수소 원자단의 실제적인 예는 메틸, 에틸, N-프로필, 이소프로필기, n-부틸, tert-부틸, 이소부틸, sec-부틸, 이소부틸, 시클로헥실, (시클로헥실)메틸, 시클로프로필기메틸, 및 n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸 등 원자단의 동족체 또는 이성체를 포함하난 이에 제한 받지 않는다. 불포화 알킬기는 하나 또는 복수의 2중 결합 또는 3중 결합을 포함하며, 그의 실제적인 예는 비닐, 2 -프로페닐, 부테닐, 크로틸, 2-이소펜터닐, 2-(뷰타다이엔), 2,4-펜타디엔, 3-(1,4 -펜타디엔), 아세틸렌, 1-및3-프로핀일, 3-부틴, 및 더 고급적인 동족체 및 이성체를 포함하나 이에 제한 받지 않는다.
별도의 규정이 없는 한, 용어"헤테로 히드로카르빌" 또는 그의 하위 개념 (예컨대, 헤테로알킬기, 헤테로 알켄닐기, 헤테로 알키닐기, 헤테로아릴기 등) 자체 또는 다른 용어와 결합하여 안정적인 직쇄, 측쇄 또는 고리 모양의 탄화수소 원자단 또는 그 조합을 표시하며, 일정 수량의 탄소원자와 적어도 하나의 헤테로원자로 구성된다. 일부 실시예에서, 용어"헤테로알킬기" 자체 또는 다른 용어와 결합하여 안정적인 직쇄, 측쇄 또는 고리 모양의 탄화수소 원자단 또는 그 조합을 표시하며, 일정 수량의 탄소원자와 적어도 하나의 헤테로원자로 구성된다. 일 대표 실시예에서, 헤테로원자는 B, O, N및S에서 선택되고, 여기서, 질소 및 황원자는 선택적으로 산화되고, 질소 헤테로원자는 선택적으로 4차화된다. 헤테로원자B, O, N및S는 헤테로 히드로카르빌의 임의의 내부 위치에 위치된다(상기 히드로카르빌가 분자 기타 부위에 부착하는 것을 포함한다). 실제적인 예는 -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2, -S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -CH2-CH=N-OCH3및-CH=CH-N(CH3)-CH3를 포함하나 이에 제한 받지 않는다. 최대로 두 개의 헤테로원자가 연속된다. 예를 들어, -CH2-NH-OCH3.
용어 "알콕시", "알킬아미노" 및 "알킬티오"(또는 티오알콕시(thioalkoxy))는 관용적 표현이고, 이는 각각 하나의 산소원자, 아미노 또는 황원자로 분자의 기타 부위에 결합된 알킬기 들을 지칭한다.
별도의 규정이 없는 한, 용어"사이클릭 탄화수소", "헤테로사이클릭 탄화수소" 또는 그의 하위 개념(예컨대, 아릴키, 헤테로아릴기, 시클로알킬기, 헤테로시클릭기, 사이클로알케닐, 헤테로사이클로알케닐, 시클로알키닐, 헤테로사이클릭 알키닐 등)자체 또는 기타 용어와 결합하여 환화된 "히드로카르빌", "헤테로히드로카르빌"을 각각 표시한다. 또한, 헤테로히드로카르빌 또는 헤테로사이클릭 탄화수소기(예컨대, 헤테로알킬기, 헤테로시클릭기)에 있어서, 헤테로원자는 상기 헤테로시클릭가 분자의 남은 부위에 부착되는 위치를 점유할 수 있다. 시클로알킬기의 실제적인 예는 시클로펜틸, 시클로헥실, 1-사이클로헥센, 3-사이클로헥센, 사이클로헵탄 등을 포함하나 이에 제한 받지 않는다. 헤테로사이클릭기의 비 제한적인 실제적인 예는 1-(1,2,5,6-테트라 하이드로 피리딘), 1-피페리딜, 2-피페리딜, 3-피페리딜, 4-모르폴리닐, 3-모르폴리닐, 테트라하이드로퓨란-2-기, 테트라하드로푸란 인돌-3-기, 테트라하이드로티오펜-2-기, 테트라하이드로티오펜-3 -기, 1-피페라진 및 2-피페라진을 포함한다.
별도의 규정이 없는 한, 용어 "아릴기"는 다중 불포화 방향족 탄화수소 치환기을 표시할 수 있으며, 이는 모노 치환(mono-substituted), 비스치환(bis-substituted) 또는 폴리 치환(polysubstitution)가 될 수 있으며, 이는 일가, 이가 또는 다가가 될 수 있으며, 이는 싱글 고리 또는 당중 고리(예컨대, 1 내지 3개의 고리; 여기서, 적어도 하나의 고리는 방향족이 되어야 한다)가 될 수 있으며, 이들은 응결되거나 공유 연결된다. 용어 "헤테로아릴기"는 내지 4 개의 헤테로원자의 아릴기(또는 고리)를 포함하는 것을 지칭한다. 일 시범예에서 헤테로원자는 B, N, O 및 S에서 선택되고, 여기서, 질소 및 황원자는 선택적으로 산화되고, 질소 헤테로원자는 선택적으로 4차화된다. 헤테로아릴기는 헤테로원자를 통해 분자의 기타 부분에 연결된다. 아릴기 또는 헤테로아릴기의 비 제한적 실시예는 페닐기, 1-나프틸페닐, 2-나프틸페닐, 4-바이페닐, 1-피롤, 2-피롤, 3-피롤, 3-피라졸, 2-이미다졸릴, 4-이미다졸릴, 파라진기, 2-옥사졸기, 4-옥사졸기, 2-페닐기-4- 옥사졸기, 5-옥사졸기, 3-이소옥사졸기, 4-이소옥사졸기, 5-이소옥사졸기, 2-티아졸린, 4-티아졸린, 5-티아졸린, 2-푸릴, 3-푸릴, 2-티에닐, 3-티에닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 2-피리미딘기, 4-피리미딘기, 5-벤조사이아졸, 퓨린기, 2-벤지미디졸, 5-인도릴, 1-이소퀴놀릴기, 5-이소퀴놀릴기, 2-퀴녹살리닐이기기, 5-퀴녹살리닐이기기, 3-퀴놀릴기 및6-퀴놀릴기를 포함한다. 상기 임의의 한 아릴기 및 헤테로아릴기 고리 시스템의 치환기는 후문에서 기재된 허락된 치환기에서 선택된 수 있다.
편의상으로, 아릴기는 기타 용어와 결합하여 사용할 경우(예를 들어, 아릴옥시, 아릴티오, 아르알킬), 위와 같이 정의된 아릴기 및 헤테로아릴기 고리를 포함한다. 따라서, 용어 "아르알킬"는 아릴기가 알킬기에 부착된 그런 원자단(예를 들어, 벤질, 페네틸, 피리딜메틸 등)을 포함하고, 탄소원자(예컨데, 메칠렌)가 예를 들어, 산소원자로 치환된 그런한 알킬기, 예를 들어, 페녹시메틸, 2-피리딘옥시메틸3-(1-나프톡시)프로필등을 포함하는 것에 의도가 이었다.
용어 "이탈기"는 치환반응 (예를 들어, 친화 치환반응)을 통해 다른 작용기 또는 원자로 치환될 수 있는 작용기 또는 원자를 지칭한다. 예를 들어, 대표적인 이탈기는 트리플루로메탄술포네이트; 클로로, 브롬, 요오드; 술폰산에스터, 예컨데, 메탄설포네이트, 톨루엔 숲포네이트, p-브롬벤젠술폰산염(p-bromobenzenesulfonate), p-톨루엔술폰산염 등; 아실옥시, 예켄데, 아셀톡실, 트리플루오로아셀톡실 등을 포함한다.
용어 "보호기"는 "아미노 보호기", "수산기 보호기" 또는 "술프하이드릴 보호기(sulfydryl protecting group)"를 포함하난 이에 제한 받지 않는다. 용어 "아미노 보호기"는 아미노가 질소 위치에 부작용하는 것을 방지에 적용되는 보호기를 지칭한다. 대표적인 아미노 보호기는 이하를 포함하는 이에 제한 받지 않는다. 즉, 포밀; 아실기, 예를 들어, 알칸아실(예컨데, 아세틸, 트리클로로아세틸(trichloroacetyl) 또는 트리플루오로아세틸); 알콕시 카브보닐, 예컨데, butyloxycarboryl(Boc); 아릴메톡시카보닐(arylmethoxycarbonyl), 예를 들어, 벤질옥시카보닐(Cbz) 및 9-플루오레닐메톡시카보닐(Fmoc, fluorenylmethoxycarbonyl); 아릴메틸, 예를 들어, 벤질(Bn), 트리페닐메틸(Tr), 1,1-디-(4'-메톡실페닐기)메틸; 실릴, 예를 들어, 트리메틸실릴(TMS) 및t-부틸디메틸실릴(TBS). 용어 "수산기 보호기"는 수산기의 부작용을 방지하는데 적요되는 보호기를 지칭한다. 대표적인 수산기 보호기는 이하를 포함하나 이에 제한 받지 않는다. 즉, 알킬기, 예를 들어, 메틸, 에틸 및tert-부틸; 아실기, 예를 들어, 알칸아실(예컨데, 아세틸; 아릴메틸, 예를 들어, 벤질(Bn), p-메톡시페닐(PMB), 9-플루오레닐메틸(Fm, Fluorenylmethyl) 및 디페닐메틸(디페닐메틸, DPM); 실릴, 예를 들어, 트리메틸실릴(TMS) 및 tert- 부틸디메틸실릴 (TBS) 등.
본 발명의 화합물은 본 기술분야의 기술자가 숙지한 다양한 합성 방법으로 제작되며, 다음에 설명된 구체적인 실시방식과 기타 화학 합성방법광의 결합을 통해 형성된 실시방식 및 본 기술분야의 기술자가 숙지한 동등한 치환방법을 포함한다. 바람직한 실시방식은 발명의 실시예를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명에서 사용되는 용제는 시중에서 구입할 수 있다. 본 발명은 다음 과 같은 약어를 사용한다. 즉, aq는 물을 대표한다; HATU는 O-(7-벤조트리아졸-1-기)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트를 대표한다; EDC는 N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카본디이미드 하이드로클로라이드를 대표한다; m-CPBA는 3-클로퍼펜조산을 대표한다; eq는 같음을 대표한다; CDI는 카르보닐디이미다졸을 대표한다; DCM는 디클로로메탄를 대표한다; PE는 석유 에테르를 대표한다; DIAD는 디이소프로필 아조디카르복실레이트를 대표한다; DMF는 N,N-디메틸포름아미드를 대표한다; DMSO는 디메틸술폭사이드를 대표한다; EtOAc는 에틸 아세테이트를 대표한다; EtOH는 에탄올을 대표한다; MeOH는 메탄올을 대표한다; CBz는 아민 보호기인 벤질옥시카보닐을 대표한다; BOC는 아민 보호기인 t-부톡시카보닐을 대표한다; HOAc는 초산을 대표한다; NaCNBH3는 소듐 시아노보로하이드라이드를 대표한다; r.t.는 실온을 대표한다; O/ N는 하루 밤을 대표한다; THF는 테트라하이드로퓨란을 대표한다; Boc2O는 디-tert-부틸디카르보네이트를 대표한다; TFA는 트리플루오로초산을 대표한다; DIPEA는 에틸디이소프로필아민을 대표한다; SOCl2 는 티오닐 클로라이드를 대표한다; CS2는 카본디설파이드를 대표한다; TsOH는 p-톨루엔술포산을 대표한다; NFSI는 N-불소-N-(페닐설폰닐)벤젤 설폰아마이드를 대표한다; NCS는 1-클로로피롤리딘-2,5-쿠르디온을 대표한다; n-Bu4NF는 테트라부탈암모늄을 대표한다; iPrOH는 2-프로판올을 대표한다; mp는 융점을 대표한다; LDA는 리륨다이아이소아마이드를 대표한다; TLC는 박층 크로마토그래피를 대표한다, MS ESI는 전기분무 이온화 질량분석기를 대표한다. DCM는 디클로로메탄을 대표하고, LCMS는 액체크로마토그래피 질량분석기를 대표하고, SFC는 supercritical fluid chromatography 초임계 액체 크로마토그래피를 대표한다; DMF는 N,N-디메틸포름아미드를 대표한다; HOBt는 1-하이드록시벤조트리아졸대표하고, EDCI는 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 염산염을 대표한다.
화합물은 수공 또는 ChemDraw? 소프트웨어로 네이밍되고, 시중 판매되는 화합물은 공급장의 카탈로그 이름을 채택한다.
본 발명을 더 구체적으로 설명하기 위하여 다음과 같은 실시예을 제공하나, 이는 발명의 범위를 제한하지 않는다.
관건 중간체1, 중간체2 및 중간체3의 합성:
Figure 112017080031701-pct00170
단계1: 0℃조건에서 1-터부티록시카르보닐 피페리딘-3 -카복실산에틸 에스테르(50g, 194.30mmol)의 DCM용액(50mL)에 염산/디옥산(10 M, 200mL)을 첨가하고, 반응액을 25℃로 온도 상승시키고 2시간 교반한다. TLC에서 반응이 완전히 진행되었음을 나타낸다. 혼합물을 압력감소 하에서 농축하여 노란색 고체인(42.63g, 조생성물) 에틸피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르염산염을 얻는다. 상기 생성물은 추가 정제할 필요가 없이 다음단계에 바로 사용할 수 있다. MS ESI 계산 값은 C8H15NO2 [M+H]+ 158이고, 측정값은 158이다.
단계2: 피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르염산염(40.00g, 206.54mmol)을 핑초산(400mL) 및 물(200mL)의 혼합용제에 용해하고, 0℃에서, 점차적으로(30분) 아질산나트륨(28.50g, 413.08mmol)의 수(200mL)용액을 첨가한다. 첨가 끝나 후, 0℃에서 계속 교반하여 1시간 반응시킨다. 다음, 반응액을 25℃로 온도 상승시켜 다시1시간 교반한다. TLC(석유 에테르 : 에틸 아세테이트=5: 1)은 원료반응이 완전하게 진행하였음을 나타낸다. 반응물을 물로 담금질하고, 다음, 에틸 아세테이트(100mLx2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 중탄산 나트륨 용액(100mLx3)과 포화 포화 식염수(100mL"×2)로 각각 체척하고, 무수 환산 나트륨으로 건조하여 필터링하고, 압력감소을 통해 농축시킨다. 잠류물을 실리카겔크로마토그패픽 컬럼으로(석유 에테르 : 에틸 아세테이트= 5: 1)정제하여, 무색 유상물질인 1-나트로소피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (31.00g, 수학율은80.60％ 이다)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C8H14N2O3 [M+H]+ 187이고, 측정값은 187이다.
단계3: 1-나트로소피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(10.00g, 53.70mmol)과 아연분말(17.56g, 268.50mmol)을 메탄올(80mL)에 용해시키고, -5℃로 냉각하고, 점차적으로 핑초산(80mL)을 첨가한다. 취득한 상기 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음 25℃로 온도 상승시켜 2시간교반하여 반응을 시킨다. TLC이 반응이 완전 진행되었음을 나타나면, 고체는 유출하고, 여과액은 압력 감소를 통해 농축된다. 잠유물은 포화 중탄산 나트륨용액으로 pH=7-8로 조제하고, 수상은 디클로로메탄/메탄올(5: 1)로 추출한다(100mL×3). 병합된 유기상은 포화 식염수로 세척하고(50mL×3), 무수 환산 나트륨로 건조시켜, 필터링 및 간압농축을 통해, 연황색 유상물질인 1-아미노피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (6.50g, 조생성물)을 얻는다. 상기 생성물은 추가 정제가 필요 없이 바로 다음단계에 사용된다. MS ESI 계산 값은 C8H16N2O2 [M+H]+ 173이고, 측정값은 173이다.
단계4: 1-아미노피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(6.50g, 37.74mmol)과 4 -클로로-7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(12.78g, 41.51mmol)을 DCM(60mL)에 용해시킨다. 25℃에서 상기 용액에 트리에틸아민(11.46g, 113.22mmol)을 첨가한다. 본 혼합액을 25℃에서 10시간 동안 교반하여 반응시킨다. TLC은 반응이 완전 진행됨을 나타낸다. 본 혼합물을 압력 감소를 통해 농축시킨다. 잠류물을 물(100mL)에 붓고, 수상을 에틸 아세테이트로 추출한다(100mL×2). 병합된 유기상을 포화 식염수(50mL×2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시켜, 필터링 그리고 압력감소를 통해 농축한다. 잠류물은 실리카겔크로마토그패픽 컬럼(디클로로메탄 /에틸 아세테이트=1/0至2: 1)을 통해 정제하여, 휜색거품형 고체인 1-((7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4 -기)아미노기)피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (5.60g, 수율은 33.47％)를 얻는다. MS ESI 계산 값은 C21H25N5O4S [M+H]+ 444이고, 측정값은 444이다.
단계5: 1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노기]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(2.00g, 4.51mmol)을 테트라하이드로퓨란(30mL)에 용해시키고, 0℃에서 NaH(60％, 270.80mg, 6.77mmol)을 나누어서 첨가하고, 혼합물을 28℃로 온도 상승시켜 30분 동안 교반한다. 그 다음, 반응 시스템을 0℃로 낮추고, 점차적으로 요오드화메탄(960.22mg, 6.77mmol)을 추가하며, 추가 끝난 후, 반응 시스템의 온도를 28℃로 상승시켜 해당 온동에서 2시간 동안 교반하여 반응한다. LCMS과 TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타낸다. 반응액을 물(5mL)로 냉각하고, 수상은 에틸 아세테이트로 추출한다(20mL×3). 병합된 유기상을 포화 식염수(15mL×2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조하여, 필터링 그리고 압력 감소를 통해 농축을 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그패픽 컬럼(석유 에테르/에틸 아세테이트= 5: 1,3: 1)로 정제하여, 흰색 거픔상 고체인1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노기]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (900.00mg, 수율41.43％)를 얻는다. MS ESI 계산 값은 C22H27N5O4S [M+H]+ 458이고, 측정값은 458이다.
단계6: 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(900.00mg, 1.97mmol)를 메탄올(8mL)에 용해시키고, THF(8mL)과 물 (4mL)의 혼합용제에, 수산화나트륨(315.20mg, 7.88mmol)을 첨가한 다음 혼합물을 70℃로 가열하여 1시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타낸다. 용제를 감압을 통해 농축하여 말린다, 잠류물은 2M의 염산(4mL)으로 pH =3-4로 조성하고. 수상을 진공농축하여 휜색 고체인 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-카르복실산 (650.00mg, 조생성물)을 얻는다, 상기 조생성물은 추가 정제할 필요가 없이 다음 단계에서 바로 사용가능하다. MS ESI 계산 값은 C13H17N5O2 [M+H]+ 276이고, 측정값은 276이다.
실시예 1
Figure 112017080031701-pct00171
1-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노기)-N-(2,2,2 -트라이플루오로에틸)피페리딘-3 -포름아미드
Figure 112017080031701-pct00172
단계1: 중간체1(270.00mg, 608.77umol)을 테트라하이드로퓨란(5mL)과 물(3mL)의 혼합용제에 용해시키고, 25℃에서 수산화리튬 일수화물(51.09mg, 1.22mmol)를 나누어서 추가하고, 25℃에서 5시간 동안 교반하여 반응시킨다. LCMS과 TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 반응액을 감압을 통해 농축하여 건조시키고, 수상은 2M의 HCl(3mL)로 pH =2-3로 조성하고, 에틸 아세테이트로 추출한다(10mL×2). 병합된 유기상은 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조하고, 필터링 그리고 진공 농축을 통해, 노란색 유상물질인 1-((7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3-카르복실산 (200.00mg, 조생성물)을 얻는다 .MS ESI 계산 값은 C19H21N5O4S [M + H]+ 416 이고, 측정값은 416이다.
단계2: 1-((7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3-카르복실산(200.00mg, 481.38umol)을 DMF(10mL)에 용해시키고, 0℃에서 HOBt(130.09mg, 962.76umol), EDCI(184.56mg, 962.76umol),트리에틸아민(292.27mg, 2.89mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로에틸아민(95.36mg, 962.76umol)을 첨가한다. 혼합물을 25℃로 온도 상승시키고 10시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 반응액을 물(30mL)에 주입하고, 수상은 에틸 아세테이트로 추출한다(15mL×2). 병합된 유기상을 포화 식염수(10mL×2)로 세첵하고, 무수 환산 나트륨으로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 한다. 잠류물은 조제형TLC을 통해 정제하여(에틸 아세테이트/석유 에테르= 1/10), 노란색 유상물질인 1-((7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드 (40.00mg, 수율16.74％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C21H23F3N6O3S [M + H]+ 497이고, 측정값은 497 이다.
단계3: 1-((7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2 -트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(40.00mg, 80.56umol)을 MeOH(3mL)와 물(3mL)에 용해시키고, 25℃에서 탄산칼륨(22.27mg, 161.12umol)을 첨가하고, 반응액을 70℃로 가열하여 2시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각하고, 압력 감소를 통해 농축하여 건조시킨다. 수상은 에틸 아세테이트로 추출한다(10mL×2). 병합된 유기상을 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 한다. 잠류물은 조제형TLC(디클로로메탄/메탄올= 10: 1)을 통해 정제하여, X01: 1-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(7.00mg, 수율25.38％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 8.11 (br. s., 1H), 6.51-7.23 (m, 2H), 3.96 (br. s, 2H), 2.53-3.26 (m, 5H), 1.38-2.05 (m, 4H), 6.74 (s, 1H), 4.64-4.72 (m, 1H), 4.44-4.59 (m, 2H), 3.77-3.84 (m, 1H), 3.66 (dd, J=5.02, 13.30 Hz, 1H), 3.18-3.28 (m, 3H), 1.25 (t, J=7.40 Hz, 3H). MS ESI 계산 값은 C14H17F3N6O [M + H]+ 343이고, 측정값은 343 이다.
실시예 2
Figure 112017080031701-pct00173
N-메틸-1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00174
단계1: 1-((7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(60.00mg, 120.84umol)을 THF(5mL)에서 용해시키고, 0℃에서 NaH(60％, 5.30mg,132.50umol)를 나누어서 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반 후, 요오드화메탄(1.05g,7.40mmol)을 점차적으로 첨가한다. 반응액은 20℃로 온도를 상승시키고, 2시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 물(10mL)을 추가하여, 20분 동안 교반한다. 수상은 에틸 아세테이트로 추출한다(10mL×2). 병합된 유기상을 포화 식염수(10mL×2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 압력 감소를 통해 농축하여 건조시켜, 노란색 유상물질인 N-메틸-1-[메틸-[7-(토실기)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(50.00mg, 조생성물)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C23H27F3N6O3S [M + H]+ 525이고, 측정값은 525 이다.
단계2: N-메틸-1-[메틸-[7-(토실기)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드 (50.00mg, 95.32umol)을 메탄올(3mL)과 물(3mL)의 혼합용제에 용해시키고, 탄산칼륨(39.52mg, 285.96umol)을 첨가하고, 혼합물을 80℃로 가열하여 5시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각하고, 압력 감소를 통해 농축하여 건조시킨다. 잠류물을 prep-HPLC를 통해 정제하여(NH3.H2O), WX02: N-메틸1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(11.00mg,수율31.16％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d 4) ? = 8.11 (br. s., 1H), 7.04-7.11 (m, 2H), 3.94-4.39 (m, 2H), 3.22 (s, 6H), 2.84-3.13 (m,5H), 1.93 (br. s., 3H), 1.38-1.58 (m, 1H).MS ESI 계산 값은 C16H21F3N6O [M + H]+ 371이고, 측정값은 371 이다.
실시예 3
Figure 112017080031701-pct00175
1-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(시아노메틸)피페리딘-3 - 포름아미드
Figure 112017080031701-pct00176
단계1: 중간체1(1.32g, 2.98mmol)를 테트라하이드로퓨란(10mL)와 물(10mL)의 혼합용제에 용해시키고, 수산화나트륨(238.40mg, 5.96mmol)을 첨가한다. 반응액을 70℃로 가열하여 10시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 20℃로 냉각하고, 용제는 압력 감소를 통해 농축하여 건조시킨다. 잠류물을 2M HCl로 중화하여 pH 값이 2 내지 3 되도록 하고, 압력 감소를 통해 농축하여 회색 유성물질인 1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기아미노)피페리딘-3-카르복실산(2.00g, 조생성물)을 얻는다. 상기 생성물은 추가 정화할 필요 없이 다음 단계에서 바로 사용할 수 있다. MS ESI 계산 값은 C12H15N5O2 [M + H]+ 262이고, 측정값은 262 이다.
단계2: 1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기아미노)피페리딘-3-카르복실산(520.00mg, 1.99mmol)을 DMF(15mL)에 용해시키고, 0℃에서 HOBt(537.78mg, 3.98mmol),EDCI(762.97mg,3.98mmol),2 - 아미노아세토니트릴염산(220.98mg,2.39mmol) 및 트리에틸아민(1.01g,9.95mmol)을 첨가한다. 반응액을 25℃에서 10시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 끝남을 나타낸다. 잠류물을 물(20mL)에 주입하여 20분 동안 교반한다. 수상은 디클로로메탄과 메탄올로 추출한다(10: 1,15mL×3). 합된 유기상을 포화 식염수(20mL×2)로 세척하고 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 한다. 잠류물을 조제형HPLC(NH3.H2O)을 통해 정제하여, WX03: N-(시아노메틸)-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기아미노)피페리딘-3-포름아미드(56.27mg,수율9.45％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 8.21 (br. s., 1H), 7.16 (br. s., 1H), 6.72 (br. s., 1H), 4.15-4.28 (m, 2H), 2.66-3.26 (m, 5H), 1.84 (d, J = 6.8 Hz, 4H).MS ESI 계산 값은 C14H17N7O [M + H]+ 300이고, 측정값은 300 이다.
실시예 4
Figure 112017080031701-pct00177
1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2, -트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00178
단계1: 중간체3(650.00mg, 2.36mmol)을 DMF(15mL)에 용해시키고, HOBt(637.77mg, 4.72mmol),EDCI(904.82mg,4.72mmol),2,2,2 - 트리플루오로에틸아민(467.52mg,4.72mmol) 및 트리에틸아민(1.43mg,14.16mmol)을 첨가하고, 상기 반응액은 25℃에서 10시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 물(50mL)에 주입하고, 수상을 에틸 아세테이트로 추출한다(20mL×3). 병합된 유기상을 포화 식염수(15mL)로 체삭하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 압력 감소를 통해 농축하여 건조시켜. 잠류물을 조제형HPLC(NH3.H2O)을 통해 정제하여, WX04: 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노] -N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(270.00mg,수율32.11％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 8.11 (s, 1H), 7.00-7.10 (m, 2H), 3.75-4.00 (m, 2H), 3.21 (s, 3H), 3.01 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 2.85-2.96 (m, 3H), 1.85-2.02 (m, 3H), 1.37-1.58 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C15H19F3N6O [M + H]+ 357이고, 측정값은 357 이다.
실시예 5
Figure 112017080031701-pct00179
(R&S)1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2, -트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00180
1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2 - 트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(140.00mg, 392.87umol), 키랄 칼럼을 통해 분리되어 WX05: (R 또는 S)-1 - [메틸(7H피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(68.00mg, 수율48.57％)와 WX06: (S 또는 R)-1 - [메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노] -N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(53.00mg, 수율37.86％)을 얻는다.
SFC분리 조건:
칼럼: AS-H키랄 칼럼
유동상: A: 임계 초과 CO2, B: 20% EtOH (0.1% NH3.H2O), A: B = 50: 50
유속: 60mL/min
칼람 온도: 38°C
파장: 220nm
분사압력: 100 Bar
노즐온도: 60°C
증발온도: 20°C
마무리온도: 25°C
WX05: (R 또는 S)-1-[메틸(7H피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드, 보류시간: 3.268min. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) 8.11 (s, 1H), 7.06 (s, 2H), 3.76-3.98 (m, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.83-3.07 (m, 5H), 1.84-2.02 (m, 3H), 1.39-1.55 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C15H19F3N6O [M + H]+ 357이고, 측정값은 357 이다.
WX06: (S 또는 R)-1-[메틸(7H피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드, 보류시간: 3.991min.1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 8.11 (s, 1H), 7.06 (br. s., 2H), 3.75-3.99 (m, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.82-3.07 (m, 5H), 1.82-2.04 (m, 3H), 1.47 (d, J = 12.0 Hz, 1H).MS ESI 계산 값은 C15H19F3N6O [M + H]+ 357이고, 측정값은 357 이다.
실시예 6
Figure 112017080031701-pct00181
(N -(시아노메틸)-1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3 - 포름아미드
Figure 112017080031701-pct00182
단계1: 중간체3(550.00mg, 2.00mmol)을 DMF(15mL)에 용해시키고, HOBt(540.48mg, 4.00mmol), EDCI(766.80mg, 4.0mmol),2 - 아미노아세토니트릴염산염(370.12mg,4.0mmol) 및 트리에틸아민(1.21mg,12.0mmol)을 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 10시간 동안 교방하여 반응시킨다. LCMS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 물(50mL)에 주입하고, 수상을 에틸 아세테이트로 추출한다(15mL×4), 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL×2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 압력 감소를 통해 농축하여 건조시킨다. 잠류물을 조제형HPLC(NH3.H2O)을 통해, WX07: N-(시아노메틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드(170.00mg,수율26.74％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.43 (br. s., 1H), 8.31 (br. s., 1H), 7.18 (br. s., 1H), 6.87-7.07 (m, 1H), 6.59 (br. s., 1H), 4.11-4.40 (m, 3H), 3.32-3.47 (m, 1H), 3.39 (br. s., 3H), 3.22 (br. s., 1H), 2.74-3.14 (m, 7H), 1.95 (d, J = 15.9 Hz, 2H), 1.74 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 12.7 Hz, 1H).MS ESI 계산 값은 C15H19N7O [M + H]+ 314 ,측정값은 314 이다.
실시예 7
Figure 112017080031701-pct00183
(R&S)(N-(시아노메틸)-1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00184
N-(시아노메틸-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드(170.00mg, 542.51umol)을 키랄 분리 칼럼을 통해 WX08: (R 또는 S)-N-(시아노메틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드(68.00mg, 수율40.00％) 및 WX09: (S 또는 R)-N-(시아노메틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드(64.00mg,수율37.65％)을 얻는다.
SFC 분리조건:
분리칼럼: AS-H
유동상: A: 초임계CO2, B: 30% MeOH (0.1% NH3H2O), A: B = 50: 50
유속: 50mL/min
칼람 온도: 38°C
파장: 220nm
분사압력: 100 Bar
노즐온도: 60°C
증발온도: 20°C
마무리온도: 25°C
WX08: (R 또는 S)-N-(시아노메틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드, 보류시간: 5.659min. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d 4) δ = 8.11 (s, 1H), 6.97-7.13 (m, 2H), 4.12 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.79-3.07 (m, 5H), 1.80-2.03 (m, 3H), 1.38-1.55 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C15H19N7O [M + H]+ 314 이고, 측정값은 314 이다.
WX09: (S 또는 R)-N-(시아노메틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드, 보류시간: 6.872min. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d 4) δ = 8.11 (s, 1H), 6.96-7.12 (m, 2H), 4.03-4.20 (m, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.76-3.09 (m, 5H), 1.84-2.01 (m, 3H), 1.39-1.56 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C15H19N7O [M + H]+ 314이고, 측정값은 314 이다.
실시예 8
Figure 112017080031701-pct00185
1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르
Figure 112017080031701-pct00186
단계1: 25℃ 질소 보호에서, 중간체2 (100.00mg, 218.56umol)의 에탄올 (10.00mL)용액에, 탄산칼륨 (90.62mg, 655.68umol)을 첨가한다. 혼합물을 25℃에서 16 시간 동안 교반한다 TLC은 원재료 완전하게 반응되 었음을 나타낸다. 혼합물을 40℃에서 압력 감소를 통해 농축한다. 잠류물을 물(10mL)로 희석한다. 수상을 에틸 아세테이트 (50mL*2)로 추축한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조하고, 필터링, 그리고 용제를 감압농축한다. 잠류물을 조제형HPLC로 정제하여(알칼리성 방법), WX10: 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(30.00mg, 98.89umol, 수율은 45.25％이고, 100％순도)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, Methanol-d4) δ = 8.13 (s, 1H), 7.06 (d, J=16.8 Hz, 2H), 4.14 (q, J=6.9 Hz, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.15 (d, J=6.8 Hz, 1H), 2.94 (br. s., 4H), 2.12 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.92 (br. s., 2H), 1.41 (br. s., 1H), 1.26 (t, J=6.9 Hz, 3H), 1.00 (br. s., 1H). MS ESI 계산 값은 C15H21N5O2 [M + H]+ 304, 측정값 304.
실시예 9
Figure 112017080031701-pct00187
1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00188
단계1: 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (470.00mg, 1.09mmol) 및 트리에틸아민 (166.10mg, 1.64mmol)을 테트라하이드로퓨란 (20.00mL)에 용해시킨다. 0℃에서 상기 용액체계에 이소프로필 클로로포메이트 (134.11mg, 1.09mmol, 1.00eq)을 첨가한다. 혼합물을 신온에서 1시간 동안 교반한다. TLC(석유 에테르: 에틸 아세테이트=1: 1)은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타낸다. 혼합물은 다음 단계의 반응에 다로 사용된다. 상기 혼합물을 디시 0°C로 냉각하고, 아무니아수(383.56mg, 10.94mmol)을 첨가한다. 최종적으로 얻는 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반한다. 혼합물을 물 (10mL)로 희석한다. 수상을 에틸 아세테이트로 추출한다 (50mL*3). 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 압력 감소를 통해 농축하여 건조시켜, 노란색 고체인 1-[메틸-[7-(p-톨루엔설포닐)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-포름아미드(470.00mg, 조생성물)을 얻어, 추가 정제 없이 다음 단계 반응에서 바로 사용할 수 있다.
단계2: 1-[메틸-[7-(p-톨루엔설포닐)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-포름아미드(70.00mg, 163.36umol)을 테트라하이드로퓨란 (5.00mL) 및 메탄올 (5.00mL)의 혼합용제에 용해시키고, 수산화나트륨 (13.07mg, 326.72umol)의 수용액(2.50mL)을 첨가한다. 상기 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하여 반응시킨다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각시키고, 40℃에서 용제를 감압농축신킨다. 희석된 염산으로 잠류물을 pH =8-9로 조성한다. 잠류물을 조제형 HPLC로 정제하여(알칼리성 방법), WX11: 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드(30.00mg, 수율 66.94%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.12 (s, 1H), 7.07 (s, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.10 - 2.81 (m, 5H), 2.03 - 1.87 (m, 3H), 1.54 - 1.41 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C13H18N6O [M + H]+ 275이고, 측정값은 275 이다.
실시예 10
Figure 112017080031701-pct00189
2-시아노-N-(1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3 -아세트아미드
실시예6과 유사한 조제 방법을 통해 WX12을 조제하고, 조생성물을 조제형HPLC을 통해 정제하여, WX12: 2-시아노-N-(1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3 -아세트아미드를 얻는다.1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.13 (s, 1H), 7.09 (br. s., 1H), 7.05 (d, J=3.5 Hz, 1H), 4.24 - 4.08 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 3.15 (d, J=5.5 Hz, 1H), 3.06 - 2.83 (m, 2H), 2.68 (t, J=10.0 Hz, 1H), 2.05 (d, J=11.5 Hz, 1H), 1.99 - 1.85 (m, 2H), 1.32 - 1.18 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C15H19N7O [M + H]+ 314이고, 측정값은 314 이다.
실시예 11
Figure 112017080031701-pct00190
3,3,3트라이플루오로에틸-N-(1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3-)프로피온아미드
실시예6과 유산한 조제방법으로 WX13을 조제하고, 조생성물을 조제형HPLC을 통해 정제하여, WX13: 3,3,3트라이플루오로에틸-N-(1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3-)프로피온아미드를 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.13 (s, 1H), 7.12 - 7.04 (m, 2H), 4.21 (t, J=11.2 Hz, 1H), 3.22 (s, 3H), 3.15 (d, J=10.5 Hz, 1H), 2.97 - 2.83 (m, 2H), 2.67 (t, J=9.9 Hz, 1H), 2.04 (d, J=11.8 Hz, 1H), 1.98 - 1.84 (m, 2H), 1.32 - 1.19 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C15H19F3N6O [M + H]+ 357이고, 측정값은 357 이다.
실시예 12
Figure 112017080031701-pct00191
N-(시아노메틸)-1-(메틸(1H-피롤[2,3-b]피리딘-4-)아미노)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00192
단계 1: 4-클로로-1H-피롤[2,3-b]피리딘(20.00g, 131.08mmol)을 디클로로메탄(400mL)에 용해시키고, Et3N (39.79g, 393.24mmol)을 첨가하고, 잠시후 DMAP (1.60g, 13.11mmol)을 첨가하고, 0°C로 냉각하며, p-토실클로라이드(p-tosyl chloride)(27.49g, 144.19mmol)을 나누어서 첨가하며, 이 온도에서 4시간 동안 교반후, 25°C로 온도 상승시키고, 12시간 동안 교반한다. LC-MS는 원재료 완전히 반응되었음을 나타내고, 목표물이 검측된다. 물(100mL)을 추가하여 다듬질하고, 수상을 디클로로메탄(100mL*3)로 추출하고, 병화된 유기층은 포화 식염수(100mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 필터링, 감압농축하여, 갈색고체를 얻는다. 조생성물은 재결정(에틸 아세테이트: 석유 에테르=10mL: 200mL)하여 4-클로로-1-(토실기)피롤[2,3-b]피리딘의 조생성물(18.90g)을 얻는다. 추가 정제가 필요 없이 다음 단계의 반응에 바로 사용될 수 있다. MS ESI 계산 값은 C14H11ClN2O2S5 [M + H]+ 307.0이고, 측정값은 306.9 이다.
단계2: 4-클로로-1-(토실기)피롤[2,3-b]피리딘(5.9g, 19.2mmol), 1-아미노피페리딘-3-포름산 에틸(3.00g, 17.42mmol) (관건 중간체 라우터를 참조)을 무수 툴루엔(40mL)에 용해시키고, Cs2CO3 (11.35g, 34.84mmol)을 첨가하고, N2 치환을 3번하고, Pd2(dba)3 (1.60g, 1.74mmol) 및 Xantphos (2.02g, 3.48mmol)을 첨가하고, N2치환을 3번 한다. 120oC 에서 3시간 동안 역류반응을 진행하고, LC-MS는 생성물 생서됨을 나타낸다. 반응 시간을 연장하고, 원재료가 더 이상 소모되지 않고, 동시에 대분자량의 부산물이 생성된다. 에틸 아세테이트희석, 필터링, 여과액 농축, 칼럼분리(석유 에테르/에틸 아세테이트=5: 1)을 통해 연붉은색인1-[[1-(p-톨루엔설포닐)피롤[2,3-b]피리딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름산 에틸(800.00mg, 수율은 10.38%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C22H26N4O4S [M + H]+ 443.1이고, 측정값은 443.1 이다.
단계 3: 1-[[1-(p-톨루엔설포닐)피롤[2,3-b]피리딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름산 에틸(543.00mg, 1.23mmol)을 테트라하이드로퓨란(10mL)에 용해시키고, 0°C에서 NaH (54.00mg, 1.35mmol)을 나누어서 첨가하고, 25°C에서 옴겨서 0.5 시간 동안 교반한다. 0°C로 다시 냉각시켜, CH3I (174.17mg, 1.23mmol, 1.00 Eq)을 첨가한 후, 25°C에 옴겨서 1시간 동안 교반한다. LC-MS은 원재로가 더 이상 반응하지 않음을 나타낸다. 물(10ml)을 추가하여 다듬질을 하고, 아세테이트 (10ml*3)로 추출한다. 병합된 유기층은 포화 식염수(10mL*2)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 필터링, 농축, 실리카겔 칼럼분리(100-200목 실리카겔, 석유 에테르/에틸 아세테이트=5: 1 내지 3: 1) 을 통해 노란색 유상 물질인 1-[메틸-[1-(토실기)피롤[2,3-b]피리딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름산 에틸(204.00mg, 수율은 35.60%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C23H28N4O4S [M + H]+ 457.1이고, 측정값은 457.1 이다.
단계 4: 1-[메틸-[1-(토실기)피롤[2,3-b]피리딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름산 에틸(204.00mg, 446.82umol)을 H2O (4mL) 및 CH3OH (4mL)의 혼합용제에 용해시키고, NaOH (71.5mg, 1797.28umol)를 첨가하고, 80oC에서 13시간 동안 교반하여 반용시킨다. LC-MS은 원재료가 완전하게 반응되었음을 나타내고, 감압 증류를 통해 용제를 제거하고, HCl (2 M) 을 추가하여 pH을 중성으로 조제하며, 감압농축하여 연노란색인 1-[메틸-[1-(토실기)피롤[2,3-b]피리딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름산조생성물(122mg)을 얻으며, 추가 정제가 필요없이 다음단계의 반응에 바로 사용할 수 있다. MS ESI 계산 값은 C14H18N4O2 [M + H]+ 274.9이고, 측정값은 274.9 이다.
단계 5: 1-[메틸-[1-(토실기)피롤[2,3-b]피리딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름산(61.00mg, 222.37umol)을 DMF (4mL)에 용해시키고, HOBt (72.12mg, 533.68umol) 및 EDCI(102.2mg, 533.68umol)를 첨가하고, 25oC에서 30분 동안 교반 반응 후, 2-아미노아세토니트릴염산염 (24.69mg, 266.84umol) 및 Et3N (90.01mg, 889.47umol)을 첨가하고, 첨가끝난 후 25oC에서 계속하여 18시간 동안 교반 반응시킨다. LC-MS은 원재료 완전하게 반응되었음을 나타내고, 목표분자량이 검측된다. 조제형 HPLC(알칼리성 방법)로 분리하여 WX14: N-(시아노메틸)-1-(메틸(1H-피롤[2,3-b]피리딘-4-)아미노)피페리딘-3-포름아미드(19.2mg, 수율은 27.6%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 11.27 (br. s., 1H), 8.66 (t, J=5.3 Hz, 1H), 7.85 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.10 (br. s., 1H), 6.87 (br. s., 1H), 6.23 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.08 (d, J=5.5 Hz, 2H), 3.00 (s, 3H), 2.91 - 2.62 (m, 6H), 1.79 (br. s., 2H), 1.38 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C16H20N6O [M + H]+ 313이고, 측정값은 313 이다.
실시예 13
Figure 112017080031701-pct00193
N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1-(메틸(1H-피롤[2,3-b]피리딘-4-)아미노)피페리딘-3-포름아미드
실시예12와 유사한 조제방법을 사용하여 WX15를 조제하고, 조생성물을 조제형HPLC를 통해 정제하여, WX15: N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1-(메틸(1H-피롤[2,3-b]피리딘-4-)아미노)피페리딘-3-포름아미드(4.3mg, 수율은 5.4%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 11.27 (br. s., 1H), 8.66 (t, J=5.3 Hz, 1H), 7.85 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.10 (br. s., 1H), 6.87 (br. s., 1H), 6.23 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.08 (d, J=5.5 Hz, 2H), 3.00 (s, 3H), 2.91 - 2.62 (m, 6H), 1.79 (br. s., 2H), 1.38 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C16H20N6O [M + H]+ 313이고, 측정값은 313 이다.
실시예 14
Figure 112017080031701-pct00194
Figure 112017080031701-pct00195
N-(시아노에틸)-1-(메틸(1H-피롤[2,3-b]피리딘-4-)아미노)피페리딘-3-포름아미드
실시예12와 유사한 조제방법을 사용하여 WX16를 조제하고, 조제형HPLC(알칼리성 방법)를 하용하여 분리하여 WX16: N-(시아노에틸)-1-(메틸(1H-피롤[2,3-b]피리딘-4-)아미노)피페리딘-3-포름아미드(32.30mg, 수율은 35.0%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.12 (s, 1H), 7.12 - 7.02 (m, 2H), 3.42 (t, J=6.4 Hz, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.08 - 2.99 (m, 2H), 2.98 - 2.79 (m, 3H), 2.70 - 2.62 (m, 2H), 2.30 - 2.22 (m, 1H), 2.03 - 1.86 (m, 3H), 1.58 - 1.42 (m, 1H), 1.28 - 1.05 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C16H21N7O [M + H]+ 328.1이고, 측정값은 328.1 이다.
실시예 15
Figure 112017080031701-pct00196
N-(2,2,2-트라이플루오로에틸) -2-(1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-)아세트아미드
Figure 112017080031701-pct00197
단계 1: 중간체2 (1.65g, 3.61mmol)을 C2H5OH (40mL)에 용해시키고, N2보호, 0°C에서 NaBH4 (546.27mg, 14.44mmol)을 첨가하고, 첨가 끝나 후 25°C에 옴겨서 16시간 동안 교반 반응시킨다. LC-MS은 원재료 완전하게 반응되었음을 나타내고, 목표분자량이 검측된다. 물(5mL)을 추가하여 다듬질 반응을 하고, 에틸 아세테이트(10ml*3)로 추출하고, 병합된 유기상을 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 감압농축하여 노란색점성 액체인 (1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-기)메탄올(1.29g, 조생성물)을 얻으며, 분리하지 않고 다음단계에서 바로 사용할 수 있다. MS ESI 계산 값은 C20H25N5O3S [M + H]+ 416이고, 측정값은 416 이다.
단계 2: (1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-기)메탄올 (967.50mg, 2.33mmol) 및 Et3N (706.85mg, 6.99mmol)을 CH2Cl2 (30.00mL)에 용해시키고, N2환경, 0oC에서 DMAP(28.45mg, 232.87umol, 0.1eq) 및 p-톨루엔설포닐클로로(1.864g, 9.76mmol, 4.2eq)을 첨가하고, 系을 25oC에 옴겨서 6시간 동안 교반 반응한다. LC-MS가 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난 후, 물(20ml)을 추가하여 다듬질 반응을 하고, 수상을 AcOEt (10mL*3)로 추출하고, 병합된 유기상을 순차적 HCl(2M, 10mL)과 포화 식염수(10mL)? 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 필터링, 농축을 한다. 실리카겔 칼람분리(실리카겔100-200목, 석유 에테르/에틸 아세테이트=3/1, 1/1)을 통해 흰색인 (1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-기)메틸톨루엔술포네이트(993.00mg, 수율은 74.73%)을 얻는다.MS ESI 계산 값은 C33H46N6O5S2 [M + H]+ 470이고, 측정값은 470 이다.
단계 3: (1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-기)메틸톨루엔술포네이트(943.00mg, 1.66mmol)을 DMF (30.00mL) 및 H2O (10.00mL)의 혼합용제에 용해시키고, KCN (440.00mg, 6.76mmol)을 첨가하고, 80°C에서 6시간 동안 교반 반응한다. LC-MS은 원재료 완전하게 반응되었음을 나타내고, 목표분자량이 검측된다. AcOEt(5mL)을 첨가하여 희석하고 교반하고, 에틸 아세테이트(10mL*3)로 추출하고, 병합된 유기층은 포화 식염수(10mL*3)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 필터링, 농축한다. 실리카겔 칼람분리(100-200목 실리카겔, 석유 에테르/에틸 아세테이트=3/1, 1/1)을 통해 연노란색 점상물질인2-(1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-기)아세토니트릴(665.00mg, 수율은 94.37%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C21H24N6O2S [M + H]+ 425이고, 측정값은 425 이다.
단계 4: HCl (12.0ml, 72.18mmol, 237.53eq)을 2-(1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-기)아세토니트릴 (129.00mg, 303.87umol) 에 첨가하여100oC에서 15시간 동안 교반 역류 후, 실온으로 냉각시키고, NaOH (24mg, 600umol)를 더 첨가하고, 100°C에서 4시간 동안 계속 교반한다. LC-MS은 원재료 완전하게 반응되었음을 나타내고, 목표분자량이 검측된다. 반응액을 농축시키고, 조제형HPLC (알칼리성 방법) 로 분리하여 2-(1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-)초산(90.00mg수율은 97.04%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C14H19N5O2 [M + H]+ 290이고, 측정값은 290 이다.
단계 5: 2-(1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-기)초산(45.50mg, 157.26umol)을 DMF (4.00mL)에 용해시키고, HOBt (85.00mg, 629.04umol, 4.00eq) 및 EDCI (212.79mg, 1.11mmol, 4.00eq)을 첨가하고, 25oC에서 30분 동안 교반 반응 후, 2,2,2-트리플루오로에틸아민(46.73mg, 471.78umol, 3.00eq) 및 Et3N (63.65mg, 629.04umol, 4.00eq)을 첨가하고, 이 온도에서 12시간 동안 계속 교반 반응한다. LC-MS은 원재료 완전하게 반응되었음을 나타내고, 목표분자량이 검측된다. 필터링, 조제형HPLC (알칼리성 방법)로 분리하여 WX017: N-(2,2,2-트리플루오메틸기) -2-(1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-기)아세트아미드 (7.40mg, 수율은 14.37%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.11 (s, 1H), 7.11 - 7.03 (m, 2H), 4.65 (br. s., 1H), 4.02 - 3.76 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.01 - 2.80 (m, 3H), 2.62 (t, J=10.5 Hz, 1H), 2.41 (dd, J=3.5, 7.5 Hz, 1H), 2.26 - 2.16 (m, 2H), 1.99 - 1.77 (m, 3H), 1.12 - 0.93 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C16H21F3N6O [M + H]+ 371이고, 측정값은 371 이다.
실시예 16
Figure 112017080031701-pct00198
N-(시아노메틸)-2-(1-(메틸(7-토실기-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-)아세트아미드
실시예15와 유사한 조제방법을 사용하여 WX18을 조제하고, 조생성물을 조제형HPLC을 통해 정제하여, WX18(4.20mg, 수율은 7.82%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.11 (s, 1H), 7.15 - 7.03 (m, 2H), 4.14 (d, J=4.0 Hz, 2H), 3.21 (s, 3H), 3.01 - 2.79 (m, 3H), 2.68 - 2.53 (m, 1H), 2.48 - 2.35 (m, 2H), 2.34 - 2.28 (m, 1H), 2.22 (d, J=6.0 Hz, 2H), 1.94 - 1.82 (m, 3H). MS ESI 계산 값은 C16H21N7O [M + H]+ 328이고, 측정값은 328 이다.
실시예 17
Figure 112017080031701-pct00199
3,3,3-트리플루오로-N-((1-(메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-)메틸)프로피온아미드
Figure 112017080031701-pct00200
단계 1: 중간체3 (1.15g, 2.67mmol)과 이소프로필 클로로포메이트(327.57mg, 2.67mmol, 1.00Eq)을 THF (30mL)에 용해시키고, 10°C이하에서 Et3N (811.42mg, 8.02mmol, 3.00Eq)을 첨가하고, 첨가 끝나 후 25°C에 옴겨서 1시간 동안 교반 반응 후, 10°C로 냉각하고, NH3.H2O (3.75g, 26.76mmol, 10.01Eq)을 첨가한 다음, 25°C에 옴겨서 7시간 동안 계속 교반 반응한다. LC-MS은 원재료 완전하게 반응되었음을 나타내고, 목표분자량이 검측된다. 빙수 (10mL)을 추가하고 30분 동안 교반하고, 에틸 아세테이트(20mL*3)로 추출하고, 병합된 유기층을 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 필터링, 농축, 실리카겔 크로마토그래피로 분리 (100-200목 실리카겔, 에틸 아세테이트)하여 흰색 고체인 1-[[1-(p-톨루엔설포닐)피롤[2,3-b]피리딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름아미드(568.00mg, 수율은 49.65%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C20H24N6O3S [M + H]+ 429이고, 측정값은 429 이다.
단계 2: 1-[[1-(p-톨루엔설포닐)피롤[2,3-b]피리딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름아미드(569.9mg, 1.33mmol)을 THF(20ml)에 현탁하여, 0 °C에서 LiAlH4 (807.58mg, 21.28mmol)을 첨가하고, 첨가 끝나면 70°C에 옴겨서 24 시간 동안 가열 역류한다. LC-MS은 원재료가 완전하게 반응되었음을 나타낸다. 0°C에서 순차적으로 물(0.8ml), NaOH (0.8ml 10%)용액과 물(2.4ml)을 추가하고, 15분 동안 교반한다. 필터링, 농축하고, 조제TLC(CH2Cl2: 　CH3OH　= 10: 1)로 분리하여 흰색 고체인 N-(3-아미노메틸)피페리딘-1-)-N-메틸-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-아민 (147.00mg, 수율은 42.45%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C13H20N6 [M + H]+ 261.1이고, 측정값은 261.1 이다.
단계 3: 3,3,3-트리플루오로프로피온산 (57.74mg, 450.94umol, 2.00eq)을 DMF (4mL)에 용해시키고, HOBt(121.86mg, 901.88umol, 4.00eq) 및 EDCI (172.89mg, 901.88umol, 4.00eq)을 첨가하고, 25oC에서 30분 동안 교반 반응 후, N-(3-아미노메틸)피페리딘-1-)-N-메틸-7H-피롤[2,3-b]피리미딘-4-아민(58.70mg, 225.47umol, 1.00eq) 및 Et3N (182.52mg, 1.80mmol, 8.00eq)을 첨가한다. 25°C에서 12시간 동안 계속 교반 반응한다. LC-MS은 원재료가 완전하게 반응되었음을 나타낸다. 필터링하고, 여과액을 감압농축하고 조제형HPLC(알칼리성 방법)로 분리하여 WX19: 3,3,3-트리플루오로-N-((1-(메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노)피페리딘-3-)메틸)프로피온아미드(7.4mg, 수율은 8.8%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.09 (s, 1H), 7.02 (s, 2H), 3.23 - 3.16 (m, 4H), 3.16 - 3.06 (m, 3H), 3.01 - 2.75 (m, 3H), 2.57 (t, J=10.5 Hz, 1H), 2.21 - 2.02 (m, 1H), 1.94 - 1.72 (m, 3H), 1.47 - 1.12 (m, 1H), 1.09 - 0.84 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C16H21F3N6O [M + H]+ 371이고, 측정값은 371 이다.
실시예 18
Figure 112017080031701-pct00201
N-(시아노메틸)-1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-4-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00202
단계1: 피페리딘-4-카복실산에틸 에스테르 (9.00g, 57.25mmol)을 초산(30mL) 및 물(30mL) 의 혼합물에 용해시키고, 0℃로 냉각한 다음 질소의 보호에서 아질산나트륨(7.90g, 114.50mmol,)의 수용액(30mL)을 첨가한다. 첨가 끝나면, 반응액은 0℃에서 30분 동안 교반한 다음 25℃에 옴겨서 2시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 에틸 아세테이트(100mL*2)로 추출하고, 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축하여, 70℃에서 일부의 초산을 제거한다. 잠류물을 에틸 아세테이트(100mL) 및 물(50mL)에 용해시키고, NaOH (2M)로 pH=8-9되도록 조제한다. 혼합물을 에틸 아세테이트(100mL*2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축을 통해, 노란색 유상물질인 1-나트로소피페리딘-4-카복실산에틸 에스테르(10.60g, 조생성물)을 얻으며, 추가 정제없이 다음 단계의 반응에 바로 사용될 수 있다. MS ESI 계산 값은 C8H14N2O3 [M + H]+ 187이고, 측정값은 187 이다.
단계2: 1-나트로소피페리딘-4-카복실산에틸 에스테르(10.60g, 54.08mmol)을 메탄올(80mL)에 용해시키고 -10oC로 냉각한 다음 질소의 보호에서 아연분말(17.68g, 270.39mmol)을 첨가한다. -10℃에서 30분 동안을 걸쳐서 상기 용액에 초산(32.47g, 540.79mmol, 10.00 Eq)을 주입하고, 혼합물을 -10℃에서 30분 동안 교반한 다음 0℃에서 2시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 필터링하고, 각각 메탄올(50mL) 및 물(50mL)를 사용하여 세척한다. 여과액은 70℃에서 감압농축한다. 잠류물을 디클로로메탄: 메탄올(5: 1,100mL)에 용해시키고, NaOH (2M)를 사용하여 pH=8-9되도록 조제한다. 혼합물을 규조토를 통해 필터링하고, 디클로로메탄 및 메탄올의 혼합용액(5: 1)를 사용하여 세척한다. 여과액을 감압농축하여 연노란색 유상물질인 1-아미노피페리딘-4-카복실산에틸 에스테르(9.80g, 조생성물)을 얻으며, 추가 정제 필요없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C8H16N2O2 [M + H]+ 173이고, 측정값은 173 이다.
단계3: 1-아미노피페리딘-4-카복실산에틸 에스테르 (9.80g, 48.37mmol, 1.00 Eq) 및 4-클로로-7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘(16.37g, 53.21mmol, 1.10 Eq) 의 혼합물을 디옥산(100mL)에 용해시키고, 질소의 보호에서 트리에틸아민(14.68g, 145.11mmol, 3.00 Eq)을 첨가한 다음 110oC에서 12시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각하고, 60oC에서 감압농축하고, 잠류물을 물(50mL)에 주입하고. 수상을 에틸 아세테이트(100mL*3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL*3)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 농축, 진공 건조을 한다. 잠류물을 실리카겔 크로마토그래피(100-200목 실리카겔, 석유 에테르: 에틸 아세테이트=5: 1-1: 1)로 정제하여 연 노란색 고체인 1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-4-카복실산에틸 에스테르(9.50g,수율44.28%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C21H25N5O4S [M + H]+ 444이고, 측정값은 444 이다.
단계4: 1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-4-카복실산에틸 에스테르(8.80g, 19.84mmol)을 테트라하이드로퓨란(150mL)에 용해시킨 다음 0oC과 질소의 보호에서 수소화 소듐(1.19g, 29.76mmol)을 나누어서 첨가한다. 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반한고, 0℃로 냉각한 후 요오드화메탄(4.22g, 29.76mmol, 1.50 Eq)을 주입하고, 25℃로 옴겨서 2시간 동안 교반 반응한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 상기 혼합물을 0℃로 냉각하고 물(20mL)을 추가하여 다딤질을 한다. 수상을 에틸 아세테이트(100mL*2)로 추출하고, 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그래피를 사용하여 (100-200목 실리카겔, 석유 에테르: 에틸 아세테이트=3: 1-2: 1) 정제하여, 연노란색 고체인 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-4-카복실산에틸 에스테르(4.10g, 수율45.17%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C22H27N5O4S [M + H]+ 458이고, 측정값은 458 이다.
단계5: 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-4-카복실산에틸 에스테르(500.00mg, 1.09mmol)을 테트라하이드로퓨란(10mL) 및 메탄올(10mL)의 혼합용액에 용해시킨 후, 수산화나트륨(87.20mg, 2.18mmol)의 수용액(5mL)을 첨가한다. 혼합물을 100oC에서 30분 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각한 후 50℃에서 감압농축한다. 잠류물을 희석된 염산 수용액로 중화 또는 감압농축하여 연노란색 고체인 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-4-카르복실산(400.00mg, 조생성물)을 얻어, 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C13H17N5O2 [M + H]+ 276이고, 측정값은 276 이다.
단계6: 25℃에서, 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-4-카르복실산(150.00mg, 544.84umol)을 DMF(4mL)에 용해시키고, HOBt (88.34mg, 653.81umol) 및 EDCI (125.34mg, 653.81umol)를 첨가한다. 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반한 다음, 2-아미노아세토니트릴(60.50mg, 653.81umol, 1.20 Eq) 및 트리에틸아민(220.53mg, 2.18mmol, 4.00 Eq)을 첨가하여 이 온도에서 12시간 동안 계속 교반 반응한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 감압농축 후 얻는 잠류물을 알칼리성 HPLC을 통해 정제하여, WX20(35mg, 25%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.12 (s, 1H), 7.14 (d, J=3.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J=3.5 Hz, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.05 - 2.96 (m, 4H), 2.30 (d, J=12.0 Hz, 1H), 2.16 - 2.04 (m, 2H), 2.01 - 1.91 (m, 2H). MS ESI 계산 값은 C15H19N7O [M + H]+ 314이고, 측정값은 314 이다.
실시예 19
Figure 112017080031701-pct00203
실시예18과 유사한 조제방법을 사용하여 WX21를 조제하고, 조생성물을 조제형 HPLC을 통해 정제하여, WX21을 얻는다, 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.08 (s, 1H), 7.13 (d, J=3.3 Hz, 1H), 6.93 (br. s., 1H), 4.62 (br. s., 1H), 4.18 (s, 2H), 3.23 (d, J=9.3 Hz, 2H), 2.68 (br. s., 2H), 2.34 (br. s., 1H), 2.10 - 1.98 (m, 2H), 1.97 - 1.89 (m, 2H). MS ESI 계산 값은 C14H17N7O [M + H]+ 300이고, 측정값은 300 이다.
실시예 20
Figure 112017080031701-pct00204
실시예18과 유사한 조제방법을 사용하여 WX22을 조제하고, 조생성물을 조제형 HPLC을 통해 정제하여, WX22을 얻는다,1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.08 (s, 1H), 7.12 (d, J=3.3 Hz, 1H), 6.94 (br. s., 1H), 3.94 (q, J=9.3 Hz, 2H), 3.23 (d, J=10.0 Hz, 2H), 2.68 (t, J=10.2 Hz, 2H), 2.41 - 2.29 (m, 1H), 2.10 - 1.98 (m, 2H), 1.96 - 1.87 (m, 2H). MS ESI 계산 값은 C14H17F3N6O [M + H]+ 343이고, 측정값은 343 이다.
실시예 21
Figure 112017080031701-pct00205
실시예18과 유사한 조제방법을 사용하여 WX23을 조제하고, 조생성물을 조제형 HPLC을 통해 정제하여, WX23을 얻는다, 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.12 (s, 1H), 7.14 (d, J=3.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J=3.3 Hz, 1H), 3.95 (q, J=9.5 Hz, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.05 - 2.95 (m, 4H), 2.32 (d, J=12.5 Hz, 1H), 2.17 - 2.05 (m, 2H), 1.94 (d, J=11.8 Hz, 2H). MS ESI 계산 값은 C15H19F3N6O [M + H]+ 357이고, 측정값은 357 이다.
실시예 22
Figure 112017080031701-pct00206
실시예18과 유사한 조제방법을 사용하여 WX24을 조제하고, 조생성물을 조제형 HPLC을 통해 정제하여, WX24을 얻는다, 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.12 (s, 1H), 7.12 - 7.09 (m, 1H), 7.09 - 7.06 (m, 1H), 3.84 - 3.69 (m, 1H), 3.26 - 3.13 (m, 5H), 3.12 - 3.02 (m, 2H), 2.98 (br. s., 2H), 2.04 (d, J=11.3 Hz, 2H), 1.95 - 1.80 (m, 2H). MS ESI 계산 값은 C15H19F3N6O [M + H]+ 3557이고, 측정값은 357 이다.
실시예 23
Figure 112017080031701-pct00207
2-시아노-N-(1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-4-기)아세트아미드
Figure 112017080031701-pct00208
단계1: 25℃에서 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-4-카복실산에틸 에스테르(3.50g, 7.65mmol)을 테트라하이드로퓨란(20mL)에 용해시키고, 수산화리튬 일수화물(481.47mg, 11.47mmol)의 수용액(20mL)을 첨가하고, 상기 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 40oC에서 감압농축 한다. 희석된 염산 수용액을 사용하여 잠류물을 pH=4-5되도록 산화한다. 수상은 에틸 아세테이트(100mL*2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축 하여, 연노란색 고체인 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-4-카르복실산(3.10g, 수율94.35％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C20H23N5O4S [M + H]+ 430이고, 측정값은 430 이다.
단계2: 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-4-카르복실산(2.00g, 4.66mmol) 및 트리에틸아민(706.82mg, 6.99mmol)을 툴루엔(100mL)에 용해시키고 0.5시간 동안 교반한 다음 25oC그리고 잴소의 보호에서 [아지드기(페녹시)포스포릴]알콕시벤젠술폰산(1.28g, 4.66mmol)을 첨가하고, 25oC에서 30분 동안 교반한 다음 110℃로 가열하여 2시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각하고, 삼차부틸알콜(7.70g, 103.89mmol)을 첨가한다. 혼합물을 110℃에서 12시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각한 다음에 50℃에서 감압농축 한다. 잠류물을 물(30mL)로 희석한다. 수상은 에틸 아세테이트(100mL*2)로 추출하고, 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그래피를 사용하여 (100-200목 실리카겔, 석유 에테르: 에틸 아세테이트=4: 1-2: 1) 정제하여, 연노란색 고체인 N-[1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-4-피페리딜]아미노포름산터트부틸 에스테르(950.00mg, 수율40.46%)을 얻는다.MS ESI 계산 값은 C24H32N6O4S [M + H]+ 501이고, 측정값은 501 이다.
단계3: 25 ℃에서 N-[1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-4-피페리딜]아미노포름산터트부틸 에스테르(500.00mg, 998.78umol)을 디클로로메탄(500.00mg, 998.78umol)에 용해시킨 다음 트리플루오로초산(500.00mg, 998.78umol)을 주입하고, 혼합물을 25 ℃에서 30분 동안 교반하고, TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난 후 혼합물을 40oC에서 압력 감소를 통해 농축하여 건조시킨다. 얻는 잠류물을 물(10mL)에 용해시키고, 고체 중탄산 나트륨을 사용하여 pH= 9되도록 알칼리화하고, 수상은 에틸 아세테이트 (50mL*3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축 하여, 연노란색 고체인 1-(메틸[7-(토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]피페리딘-4-아민(400mg, 56%)을 얻어 다음 단계의 반응에 바로 사용한다. MS ESI 계산 값은 C19H24N6O2S [M + H]+ 401이고, 측정값은 401 이다.
단계4: 1-(메틸[7-(토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]피페리딘-4-아민(400.00mg, 998.75umol)을 테트라하이드로퓨란(10.00mL) 및 메탄올(10.00mL)용액에 용해시키고, 수산화나트륨(79.90mg, 2.00mmol)의 수용액(5mL)에 첨가한다. 혼합물을 100oC에서 1시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 상기 혼합물을 40oC에서 감압농축 하고, 잠류물을 물(10mL)에 용해시키고, 희석된 염산 수용액을 사용하여 pH=9되도록 조제한 후 감압농축 하여, 연노란색 고체인 1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-4-아민(300mg, 조생성물)을 얻어 다음 단계의 반응에 바로 사용한다. MS ESI 계산 값은 C12H18N6 [M + H]+ 247이고, 측정값은 247 이다.
단계5: 2-시아노초산(49.73mg, 584.63umol), HOBt (78.99mg, 584.63umol) 및 EDCI (112.07mg, 584.63umol)을 DMF (4.00mL)에 용해시킨다. 혼합물을 25에서 30 분 동안 교반한 다음 1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-4-아민(120.00mg, 487.19umol) 및 트리에틸아민(98.60mg, 974.38umol)을 첨가하고, 그 다음 혼합물을 25에서 24 시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난 후, 혼합물을 70oC 이하에서 압력 감소를 통해 농축하여 건조시키고, 얻는 잠류물을 알칼리형 HPLC을 통해 정제하여 WX25 (25mg, 35%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.12 (s, 1H), 7.11 (d, J=3.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J=3.3 Hz, 1H), 3.75 (br. s., 1H), 3.23 (s, 3H), 3.13 - 3.04 (m, 2H), 2.99 (br. s., 2H), 2.06 (d, J=10.0 Hz, 2H), 1.96 - 1.81 (m, 2H).MS ESI 계산 값은 C15H19N7O [M + H]+ 314이고, 측정값은 314 이다..
실시예24
Figure 112017080031701-pct00209
N -(시아노메틸)-6-메틸-1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00210
단계1: 6-메틸피리딘-3-카르복실산메틸 에스테르(18.00g, 119.08mmol)의 메탄올(200mL)용액에 PtO2(3.00g)을 첨가한 다음 물(10mL)과 염산(20mL)을 첨가하여, H2(50psi)인 조건에서 반응액을 50℃로 가열하여, 15시간 동안 교반한다. TLC은 반응물이 완전하게 소모되었음을 나타난 후 고체는 필터링하고, 여과액은 감압농축 시키고, 잠류물은 툴루엔(100mL)에 용해시킨 다음 용제툴루엔을 스핀건조하여, 노란색 유상물질인 6-메틸피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르(18.00g, 수율은 96.15％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C8H15NO2 [M + H]+ 157이고, 측정값은 157 이다.
단계2: 6-메틸피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르(25.00g, 159.02mmol)을 물(50mL)과 핑초산(100mL)에 용해시키고, 0℃에서 서서히 아질산나트륨(21.95g, 318.05mmol)의 수용액(50mL)을 첨가하고, 반응액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 에틸 아세테이트(100mL)과 물(50mL)로 희석한 다음 분리하고, 물층은 에틸 아세테이트(100mL×2)로 추출하고, 병합된 유기층은 포화 식염수로 세척하고, 황산로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 하여 조생성물을 얻는다. 얻는 조생성물을 실리카겔 칼럼(석유 에테르: 에틸 아세테이트=10: 1)을 통해 정제하여 노란색 유상물질인6-메틸-1-나트로소-피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르 (20.00g,수율은 67.54％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C8H14N2O3 [M + H]+ 187 이고, 측정값은 187 이다.
단계3: 6-메틸-1-나트로소-피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르(21.00g, 112.78mmol)과 아연분말(36.87g, 563.90mmol)을 무수 메탄올(100mL)용액에 용해시키고, 0℃에서 핑초산(100mL)을 서서히 주입하여 내부온도 가 5℃보다 낮도록 한 다음, 0℃에서 1 시간 동안 교반한다. 그 다음, 용제를 감압농축 한다, 그 다음 포화 중탄산 나트륨용액을 사용하여 반응액의 pH이 7이 되도록 조제한 다음, 에틸 아세테이트(200mL×3)로 추출한다. 병합된 유기층을 건조 그리고 농축하여 노란색 유상물질인1-아미노-6메틸-피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르 (18.00g, 수율은 92.67％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C8H16N2O2 [M + H]+ 173이고, 측정값은 173 이다.
단계4: 1-아미노-6메틸-피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르(15.00g, 46.16mmol)과4-클로로-7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘(20.00g,64.99mmol)을 디옥산(200mL)용액에 용해시키고, 20℃ 또는 질소의 보호에서 고체 세슘카보네이트(15.04g,46.16mmol)을 첨가하고, 상기 반응액을 110℃로 가열한 후 20시간 동안 교반한다. 혼합물을 20℃로 냉각하여 감압농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트=1: 1)를 통해 정화하여흰색 고체인6-메틸-1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르 (3.50g, 수율17.10％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C21H25N5O4S [M + H]+ 444이고, 측정값은 444 이다.
단계5: 0℃ 질소의 보호에서, 6-메틸-1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르(1.60g, 3.61mmol)의 THF(50mL)용액 중에 NaH(288.80mg, 7.22mmol)을 첨가하여, 혼합물을 0에서 20 분 동안 교반한 후, 점차적으로 MeI(1.02g,7.22mmol)을 주입한 다음 20℃에서 1 시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 반응액을 DCM(50mL)과 물 (50mL)의 혼합액 중에 주입한 다음 분층되도록 정지상태를 유지한다. 수상은 DCM(50mL×3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(100mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 한다. 잠류물을 실리카겔 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트=10/11: 1)을 사용하여 정제하여, 노란색 고체인6-메틸-1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-D]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르 (1.50g,수율90.81％)을 얻는다.MS ESI 계산 값은 C22H27N5O4S [M + H]+ 458이고, 측정값은 458 이다.
단계6: 20℃에서 6-메틸-1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-D]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르(1.50g, 3.28mmol)의 THF(20mL)과 물(10mL) 혼합용액 중에 NaOH(656.00mg, 16.40mmol)을 첨가하고, 상기 반응액을 60℃로 가열하여15시간 동안 교반한 다음 MeOH(10mL)을 첨가하여 80℃로 가열하여 3시간 동안 교반한다. LCMS는 반응이 끝남을 나타낸다. 혼합물을 20℃로 냉각하여, HCl(6M)을 사용하여 pH=7되도록 조제한 다음 감압농축 하여, 흰색 고체인6-메틸-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-카르복실산 (1.80g, 조생성물)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C14H19N5O2 [M + H]+ 290이고, 측정값은 290 이다.
단계7: 6-메틸-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-카르복실산(250.00mg, 864.07umol)의 DMF(5mL)용액 중에 EDCI(331.28mg, 1.73mmol)과 HOBt(233.51mg, 1.73mmol)을 첨가한다. 혼합물을 20에서 5 분 동안 교반한 다음2-아미노아세토니트릴(72.67mg, 1.30mmol)과 TEA(437.18mg, 4.32mmol)을 첨가한다. 상기 혼합물을 20에서 15 시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 필터링 그리고 조제형HPLC을 통해 (산성 조건: 0.1％TFA) 정제하여 WX26: N-(시아노메틸)-6-메틸-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드(61.95mg, 수율21.90％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d4) δ= 8.48 (s, 1H), 7.47 (d, J=3.6 Hz, 1H), 7.01 (d, J=3.6 Hz, 1H), 4.25-4.35 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.17-3.24 (m, 1H), 3.09-3.16 (m, 1H), 2.99-3.08 (m, 1H), 2.95 (br. s., 1H), 2.04-2.14 (m, 1H), 1.78-1.96 (m, 2H), 1.45-1.59 (m, 1H), 0.99 (d, J=6.4 Hz, 3H).MS ESI 계산 값은 C16H21N7O [M + H]+ 328 측정값은 328 이다.
실시예 25
Figure 112017080031701-pct00211
6-메틸-1-(메틸(7H-피롤[2.3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00212
단계1: 6-메틸-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-카르복실산(250.00mg, 864.07umol)의 DMF(5mL)용액 중에 EDCI(331.28mg, 1.73mmol)과 HOBt(233.51mg, 1.73mmol)을 첨가하고, 혼합물을 20에서 5 분 동안 교반한다. 그 다음, 2,2,2-트리플루오로아세토니트릴(128.38mg, 1.30mmol)과 TEA(437.18mg, 4.32mmol)을 첨가하여, 상기 혼합물을 20에서 15 시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 끝났음을 나타내면 혼합물을 필터링 그리고 조제형 HPLC을 통해 정제하여 (산성 조건: 0.1％TFA), WX27: 6-메틸-1-(메틸(7H-피롤[2.3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(81.80mg, 수율25.56％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d4) δ = 8.88 (br. s., 1H), 8.46 (s, 1H), 7.45 (d, J=3.6 Hz, 1H), 6.99 (d, J=3.6 Hz, 1H), 4.10-4.27 (m, 1H), 3.86-4.02 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.09-3.21 (m, 2H), 2.98-3.08 (m, 1H), 2.96 (br. s., 1H), 2.10 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.76-1.97 (m, 2H), 1.42-1.57 (m, 1H), 0.98 (d, J=6.0 Hz, 3H).MS ESI 계산 값은 C14H19F3N6O [M + H]+ 345이고, 측정값은 345 이다.
실시예 26
Figure 112017080031701-pct00213
2-메틸-7-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)-1,7-디아자바시클로[3.2.1]oct-6케톤
Figure 112017080031701-pct00214
단계1: 20℃에서 6-메틸-1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카르복실산메틸 에스테르(600.00mg, 1.35mmol)의 THF(20mL)과 물(10mL)의 혼합용액 중에 NaOH(270.00mg, 6.75mmol)을 첨가하고, 반응액을 60℃로 온도 상승시켜 2시간 동안 교반한다. 그 다음 MeOH(10mL)을 첨가하여 80℃로 가열하여 2시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 20℃로 냉각하고, HCl(6M)을 사용하여 pH=7되도록 조제한 다음 진공농축 하여 흰색 고체인 6-메틸-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4기 아미노)피페리딘-3-카르복실산 (600.00mg, 조생성물)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C13H17N5O2 [M + H]+ 276이고, 측정값은 276 이다.
단계2: 20℃에서 6-메틸-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기아미노)피페리딘-3-카르복실산(186.00mg, 675.60mmol)의 DMF(5mL)용액 중에 HATU(513.77mg, 1.35mmol)을 첨가하여, 반응액을 5분 동안 교반한 다음 2-아미노아세토니트릴(56.82mg, 1.01mmol)과 TEA(341.82mg, 3.38mmol)을 첨가하여, 20℃에서 1 시간 동안 교반한다. LCMS는 원재료가 완전하게 소모되었음을 나타나면, 혼합물을 DCM(50mL)과 물(10mL) 중에 주입하고, 유기상은 포화 식염수로 (50mL×3)세척하고, 그 다음 유기층을 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 하여 조생성물을 얻는다. 얻은 조생성물을 조제형 HPLC을 통해 정체하여(알칼리 성 조건: 0.1％NH3.H2O), WX28: 2-메틸-7-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)-1,7-디아자바시클로[3.2.1]oct-6-케톤(12.30mg,수율7.08％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.50 (s, 1H), 7.39-7.46 (m, 1H), 6.67-6.74 (m, 1H), 5.78 (d, J=5.6Hz, 1H), 3.81 (dd, J=4.0, 11.2 Hz, 1H), 2.20 (t, J=7.2 Hz, 1H), 1.96 (dd, J=3.2, 6.0 Hz, 2H), 1.59-1.82 (m, 2H), 1.47 (q, J=7.2 Hz, 1H), 0.96 (t, J=7.2 Hz, 1H), 0.64 (d, J=6.8 Hz, 3H).MS ESI 계산 값은 C13H15N5O [M + H]+ 257 측정값은 257 이다.
실시예 27
Figure 112017080031701-pct00215
1 -(1 - (메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4 - 기)아미노)피페리딘-3 - 기) - 피롤리딘-2-케톤
Figure 112017080031701-pct00216
단계1: N-(1-나트로소-3-피페리딜)아미노포름산터트부틸 에스테르(5.00g, 21.81mmol)과 아연분말(7.13g, 109.05mmol)을 무수 메탄올(30mL)에 용해시키고, -10℃에서 점차적으로 핑초산(30mL)을 주입하되 1시간 후에 주입이 끝나게 되며, 혼합물을 -10℃에서 30분 동안 교반한 다음 25℃로 온도 상승시켜 2시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완성되었음을 나타난다. 고체는 피터링하여 걸러내고, 잠류물은 감압농축하여, 물(5mL)을 추가하여, 수상은 포화 중탄산 나트륨용액(100mL)을 사용하여 pH =8-9되도록 조제한 다음 디클로로메탄/메탄올(5/1; 50mL×3)를 사용하여 추출하고. 병합된 유기상을 포화 식염수(50mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 하여 연노란색 유상물질인 N-(1-아미노-3-피페리딜)아미노포름산터트부틸 에스테르 (1.80g, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제없이다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C10H21N3O2 [M + H]+ 216이고, 측정값은 216 이다.
단계2: N-(1-아미노-3-피페리딜)아미노포름산터트부틸 에스테르(1.80g, 8.36mmol)과 4-클로로-7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘(2.83g, 9.20mmol)을 디클로로메탄(20mL)용액에 용해시키고, 트리에틸아민(2.54g, 25.08mmol)을 첨가한 다음 반응액을 60℃로 가열하여 10시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각하여 감압농축 한다. 잠류물을 물(20mL)에 주입하고, 수상은 에틸 아세테이트(30mL×3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(15mL×2)를 사용하여 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그패픽 컬럼(디클로로메탄/에틸 아세테이트= 5: 1/3: 1)을 통해 정제하여, 노란색 거픔형 고체인 N-[1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-3-피페리딜]아미노포름산터트부틸 에스테르(1.83g, 수율은 43.18％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C23H30N6O4S [M + H]+ 487이고, 측정값은 487 이다.
단계3: 0℃에서 N-[1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-3-피페리딜]아미노포름산터트부틸 에스테르(1.80g, 3.70mmol)가 용해되어 있는 (25mL)용액을 수소화 소듐(60％, 162.80mg, 4.07mmol)가 용해되어 있는 테트라하이드로퓨란(25mL)현탁액 중에 한 방울씩 주입한다. 질소의 보호에서, 혼합물을 0에서 30 분 동안 교반한 다음 요오드화메탄(577.70mg, 4.07mmol)을 한방울씩 주입하며. 주입끝난 후, 반응액을 실온으로 온도 상승시켜 1시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 상기 혼합물은 포화 암모니움 클로라이드용액(10mL)를 사용하여 다듬질을 하고, 에틸 아세테이트(30mL×2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(15mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그패픽 컬럼(석유 에테르/에틸 아세테이트=3: 1)을 사용하여 정제하여 연노란색 거픔형 고체인 N-[1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-3-피페리딜]아미노포름산터트부틸 에스테르(900.00mg, 수율48.59％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C24H32N6O4S [M + H]+ 501, 측정값 501.
단계4: 0℃에서 N-[1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-3-피페리딜]아미노포름산터트부틸 에스테르(900.00mg, 1.80mmol)의 DCM(5mL)용액 중에 염산/디옥산(20mL)을 첨가하고, 혼합물을 30℃로 온도상승시켜 1시간 동안 교반한다. 고체가 형성되고, 또한 TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타나면 혼합물을 감압농축하여 연노란색 고체인 N-메틸-N-[7-(토실기)-7-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-아민 염산염 (900.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제없이 다음 단계에서 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C19H24N6O2S [M + H]+ 401이고, 측정값은 401 이다.
단계5: N-메틸-N-[7-(토실기)-7-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-아민 염산염(400mg, 0.9mmol)과 메틸4 -옥소부티르산(159.43mg, 1.37mmol)을 무수 메탄올(10mL)에 용해시키고, 실온에서 초산 수소화 붕소나트륨(388.03mg,1.83mmol)을 나누어서 첨가한다. 상기 반응액은 28℃에서 10시간 동안 교반 반응한다. LC-MS은 새로운 생성물 있음을 나타난다. 팔요 없는 용제를 스핀 건조하고, 잠류물은 물(10mL)과 포화 중탄산 나트륨(10mL)용액 중에 붓어넣는다. 수상은 에틸 아세테이트(30mL×2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 하여 노란색 유상물질인 4-[[1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-3-피페리딜]아미노]부티르산메틸 에스테르(600.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C24H32N6O4S [M + H]+ 501이고, 측정값은 501 이다.
단계6: 4-[[1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-3-피페리딜]아미노]부티르산메틸 에스테르(1.00g, 2.00mmol)의 N-메틸피롤리딘케톤(20mL)용액을 140℃로 가열하여 5시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 30℃로 냉각하고, 물(50mL)에 붓어넣는다. 수상은 에틸 아세테이트(20mL×3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(10mL×2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그패픽 컬럼(석유 에테르/에틸 아세테이트=3: 1 내지 1: 1)을 사용하여 노란색 고체인 1-[1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘 정화-4-기]아미노]-3-피페리딜]피롤리딘-2-케톤 (385.00mg, 수율36.97％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C23H28N6O3S [M + H]+ 469이고, 측정값은 469 이다.
단계7: 1-[1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-3-피페리딜]피롤리딘-2-케톤(100.00mg, 213.42umol)을 MeOH(3mL)과 물(3mL)의 혼합용액에 용해시키고, 탄산칼륨(88.49mg, 640.26umol)을 첨가한다. 혼합물을 80℃로 가열하여 2시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 30℃로 냉각시키고, 감압농축 한다. 잠류물을 물(5mL)에 붓어넣고, 수상은 디클로로메탄/메탄올(5/1,10mL×3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(10mL×2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 한다. 잠류물을 조제형 HPLC(NH3.H2O)을 통해 정제하여, WX29: 1-[1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-3-피페리딜]피롤리딘2-케톤(28.00mg,수율41.73％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d 4) δ = 8.07-8.13 (m, 1H), 7.03-7.10 (m, 2H), 4.28-4.46 (m, 1H), 3.44-3.56 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.81-3.07 (m, 4H), 2.30-2.42 (m, 2H), 1.77-2.09 (m, 5H), 1.45-1.62 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C16H22N6O [M + H]+ 315이고, 측정값은 315 이다.
실시예 28
Figure 112017080031701-pct00217
N-(시아노메틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피롤리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00218
단계1: 1-t-BOC피롤-3-카르복실산(5.00g, 23.23mmol)과 트리에틸아민(2.82g, 27.88mmol)을 테트라하이드로퓨란(100mL)에 용해시키고, 0℃ 질소의 보호에서 클로로포름산 에틸(2.77g,25.55mmol)을 한방울씩 주입하고, 반응액을 0℃에서 1 시간 동안 교반한 후, DMAP(56.76mg,464.60umol)의 에탄올(25mL)용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 30℃로 온도 상승시켜 10시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 물(50mL)에 붓어넣고, 수상은 에틸 아세테이트(50mL×3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 하여 무색 유상물질인 1-t-BOC피롤-3-카복실산에틸 에스테르(5.50g, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제없이 다음 단계에서 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C12H21NO4 [M + H]+ 244이고, 측정값은 244 이다.
단계2: 1-t-BOC피롤-3-카복실산에틸 에스테르(5.50g, 22.61mmol)의 디클로로메탄(10mL)용액 중에 염산/디옥산(30mL)을 서서히 검가한다. 상기 반응액을 상온에서 3시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 감압농축하여 연노란색 유상물질인 피롤리딘-3-카복실산에틸 에스테르염산(4.00g, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제업시 다음 단계에서 바로 상용된다. MS ESI 계산 값은 C7H13NO2 [M + H]+ 144이고, 측정값은 144 이다.
단계3: 피롤리딘-3-카복실산에틸 에스테르염산(4.00g, 22.27mmol)을 핑초산(30mL)과 물(10mL)에 용해시키고, 0℃에서 아질산나트륨(3.07g, 44.54mmol)의 수용액(20mL)을 한방울씩 주입하되, 30분 동안 주입한다. 이기간 동안 0℃ 보다 낮은 온도로 유지한다. 반은 혼합물을 0에서 1 시간 동안 교반하고, 30℃로 온도 상승시켜 1시간 동안 계속하여 교반한다. TLC(PE: 에틸 아세테이트=5: 1)는 원재료가 완전하게 소모되었음을 나타난다. 반응액을 물(30mL)에 붓어넣고, 그 다음, 에틸 아세테이트(50mL×3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 중탄산 나트륨용액(20mL×3)과 포화 식염수(20mL×2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그패픽 컬럼(석유 에테르/에틸 아세테이트=3: 1)을 사용하여 정제하여, 연노란색 유상물질인 1-나트로소피롤리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (2.40g, 수율은 59.45％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C7H12N2O3 [M + H]+ 173이고, 측정값은 173 이다.
단계4: 1-나트로소피롤리딘-3-카복실산에틸 에스테르(2.40g, 13.94mmol)과 아연분말(4.56g, 69.70mmol)을 무수 메탄올(15mL)용액에 용해시키고, 반응액의 온도를 -10℃로 낮추고, 핑초산(15mL)를 서서히 주입하되, 30분 후에 주입 끝난다. 반응액을 -10℃에서 30분 교반 후 30℃로 온도 상승시켜 1시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 고체는 여출하고, 여과액은 감압농축 하여 조생성물을 얻는다. 조생성물을 물(10mL)에 용해시키고, 수상은 포화 고체 중탄산 나트륨을 사용하여 pH=7-8 되도록 중화시키고, 디클로로메탄/메탄올(5/1,200mL×2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(50mL×2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 하여 연노란색 유상물질인 1-아미노피롤리딘-3-카복실산에틸 에스테르(1.60g, 조생성물)을 얻는다. 조생성물은 추가 정제없이 다음 단계에서 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C7H14N2O2 [M + H]+ 159이고, 측정값은 159 이다.
단계5: 1-아미노피롤리딘-3-카복실산에틸 에스테르(1.60g, 10.11mmol)과 4-클로로-7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘(3.42g, 11.12mmol)을 디클로로메탄(20mL)용액에 용해시키고, 트리에틸아민(3.07g, 30.33mmol)을 첨가하고, 반응액을 60℃로 가열하여 10시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 용제를 스핀 건조하고, 잠류물을 물(20mL)에 붓어넣고, 수상은 에틸 아세테이트(20mL×3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(15mL×2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그패픽 컬럼(디클로로메탄/에틸 아세테이트= 5: 1 내지 3: 1)을 사용하여 정제하여 노란색 고체인 1-((7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피롤리딘-3-카복실산에틸 에스테르(1.00g, 수율은 22.11％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C20H23N5O4S [M + H]+ 430이고, 측정값은 430 이다.
단계6: 0℃ 질소의 보호에서, NaH(60％, 112.00mg, 2.80mmol)의 테트라하이드로퓨란(15mL)현탁액에, 1-((7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피롤리딘-3-카복실산에틸 에스테르(1.00g, 2.33mmol)의 테트라하이드로퓨란(15mL)용액을 한방울씩 주입하되, 30분 동안 주입하고, 반응액을 0℃에서 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 요오드화메탄(396.86mg, 2.80mmol)을 첨가한다. 반응액을 25℃로 온도 상승시켜 1시간 동안 교반한다. TLC는 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 상기 반응액을 포화 암모니움 클로라이드용액(10mL)을 사용하여 다듬질하고, 수상은 에틸 아세테이트(30mL×2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그패픽 컬럼(석유 에테르/에틸 아세테이트=5/1 내지 3: 1)을 사용하여 정제하여 연노란색 거픔형 고체인 1-(메틸1-(7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피롤리딘-3-카복실산에틸 에스테르(220.00mg, 수율17.67％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C21H25N5O4S [M + H]+ 444이고, 측정값은 444 이다.
단계7: 1-(메틸1-(7-토실기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피롤리딘-3-카복실산에틸 에스테르(220.00mg, 496.03umol)을 테트라하이드로퓨란(5mL)과 물(2mL)의 혼합용액에 용해시키고, 수산화나트륨(79.36mg, 1.98mmol)을 첨가하고, 반응액을 60℃로 가열하여 10시간 동안 교반하다. LCMS는 반응이 완성되었음을 나타난다. 반응액을 25℃로 냉각하여, 감압농축 한다. 수상을 2M HCl(3mL)을 사용하여 pH=5-6되도록 조제하고, 진공농축 하여, 노란색 고체인 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피롤리딘-3-카르복실산(65.00mg, 조생성물)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C12H15N5O2 [M + H]+ 262이고, 측정값은 262 이다.
단계8: 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피롤리딘-3-카르복실산(65.00mg, 248.78umol)의 DMF(10mL)용액에 HOBt(84.04mg, 621.95umol), EDCI(119.23mg,621.95umol),2-아미노아세토니트릴염산(38.51mg,298.54umol) 및 트리에틸아민(151.04mg,1.49mmol)을 첨가하고, 반응액을 상온에서 10시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 물(10mL)에 붓어넣고, 수상은 디클로로메탄/메탄올(5/1,30mL*4)로 추출한다. 병합된 유기상은 포화 식염수(15mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 유기상을 농×x한다. 잠류물을 조제형HPLC(NH3.H2O)을 통해 정제하여 WX30: N-(시아노메틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피롤리딘-3포름아미드(34.00mg,수율44.93％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d 4) 8.09 (s, 1H), 7.04 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.90 (br. s., 1H), 4.11-4.27 (m, 2H), 3.00-3.27 (m, 8H), 2.18 (br. s., 2H). MS ESI 계산 값은 C14H17N7O [M + H]+ 300이고, 측정값은 300 이다.
실시예 29
Figure 112017080031701-pct00219
1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2트라이플루오로에틸)피롤리딘-3-포름아미드
실시예28과 유사한 조제 방법을 사용하여 WX31노란색 고체인, 조생성물을 조제형 HPLC을통해 정제하여 WX31(56.00mg, 수율62.47％)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d 4) 8.09 (s, 1H), 7.03 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 6.91 (br. s., 1H), 3.81-4.04 (m, 2H), 3.03-3.27 (m, 8H), 2.01-2.32 (m, 2H). MS ESI 계산 값은 C14H17F3N6O [M + H]+ 343이고, 측정값은 343 이다.
실시예 30
Figure 112017080031701-pct00220
(R&S)1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2트라이플루오로에틸)피롤리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00221
1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2트라이플루오로에틸)피롤리딘-3-포름아미드(2.00g, 5.84mmol)을 키랄 칼럼분리을 통해 WX32: (R 또는 S)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2트라이플루오로에틸)피롤리딘-3-포름아미드(890.00mg, 수율44.52%)과 WX33: (S 또는 R)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2트라이플루오로에틸)피롤리딘-3-포름아미드(835.00mg, 수율41.78%)을 얻는다.
SFC 분리조건:
칼럼: AD(250mm*30mm, 5um) 키랄 칼럼
유동상: A: 초임계CO2, B: 20% MeOH (0.1% NH3H2O), A: B = 80: 20
유속: 60mL/min
칼람 온도: 38°C
파장: 220nm
분사압력: 100 Bar
노즐온도: 60°C
증발온도: 20°C
마무리온도: 25°C
WX32: (R 또는 S)-N-(시아노메틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드, 보류시간: 5.136min. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) = 8.09 (s, 1H), 7.03 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 6.76- 6.99 (m, 1H), 3.83-4.03 (m, 2H), 3.00-3.27 (m, 8H), 2.19 (br. s., 2H). MS ESI 계산 값은 C14H17F3N6O [M + H]+ 343이고, 측정값은 343 이다.
WX33: (S 또는 R)-N-(시아노메틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드, 보류시간: 5.634min. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 8.09 (s, 1H), 7.03 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 6.89 (br. s., 1H), 3.85-4.02 (m, 2H), 3.02-3.26 (m, 8H), 2.18 (br. s., 2H).MS ESI 계산 값은 C14H17F3N6O [M + H]+ 343이고, 측정값은 343 이다.
실시예 31
Figure 112017080031701-pct00222
3-(4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-1,4-디아자시클로헵탄-1-기)-3-카르보닐 프로피오니트릴
Figure 112017080031701-pct00223
단계1: 1,4-디아자시클로헵탄-1-카르복실산터트부틸 에스테르 (10.00g, 49.93mmol)을 초산(25mL)과 물 (15mL)에 용해시키고, 0oC로 냉각한 다음, 아질산나트륨 (6.89g, 99.86mmol)의 수용액(10mL)을 주입하되 0.5시간 내에 주입을 끝내고, 동시에 0oC 보다 낮은 온도를 유지한다. 혼합물을 외부 외부 가열 없이 실온까지 온도 상승된 후, 원재료 완전하게 소모되었음을 TLC가 표시될 때까지 (석유 에테르: 에틸 아세테이트=3: 1, Rf=0.45) 1.5시간 동안 교반한다. 에틸 아세테이트 (2*100ml)을 첨가하여 추출한다. 유기상은 고체 중탄산 나트륨을 사용하여 중화시키고, 물, 식염수로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 감압농축 하여 연노란색 유상물질인 4-나트로소-1,4-디아자시클로헵탄-1-카르복실산터트부틸 에스테르(7.00g, 조생성물)을 얻어 다음 단계에서 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C10H19N3O3 [M + H]+ 230이고, 측정값은 230 이다.
단계2: 4-나트로소-1,4-디아자시클로헵탄-1-포름산터트부틸 에스테르 (5.68g, 24.77mmol)을 테트라하이드로퓨란 (100mL)에 용해시키고, 0℃ 또는 질소의 보호에서, 리튬 알루미늄 하이드라이드 (1.88g, 49.55mmol)을 나누어서 첨가하고, 0℃에서 30 분 동안 교반한다. 그 다음, 70℃로 가열하여 2시간 동안 교반한다. TLC는 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 0oC로 냉각하고, 순차적으로 물 (0.88mL), 15%의 수산화나트륨용액 (1.88mL), 물 (1.88 *3mL)을 주입한다. 혼합물을 20분 동안 교반하고, 필터링 그리고 진공농축 하여 노란색 유상물질인 4-아미노-1,4-디아자시클로헵탄-1-카르복실산터트부틸 에스테르 (4.00g, crude)을 얻어, 다음 단게에서 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C10H21N3O2 [M + H]+ 216이고, 측정값은 216 이다.
단계3: 25oC에서 4-아미노-1,4-디아자시클로헵탄-1-카르복실산터트부틸 에스테르(4.00g, 18.58mmol)과 4-클로로-7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘(6.86g, 22.30mmol)의 디옥산 (100mL)용액 중에 트리에틸아민 (3.76g, 37.16mmol)을 첨가한다. 혼합물을 110oC에서 5시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각하여, 감압농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그래피(석유 에테르: 에틸 아세테이트=3: 1-1: 1)을 사용하여 노란색 고체인 4-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘4-기]아미노]-1,4-디아자시클로헵탄-1-카르복실산터트부틸 에스테르 (1.70g, 수율18.80%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C23H30N6O4S [M + H]+ 487이고, 측정값은 487 이다.
단계4: 4-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘4-기]아미노]-1,4-디아자시클로헵탄-1-카르복실산터트부틸 에스테르 (800.00mg, 1.64mmol, 1.00 Eq)을 테트라하이드로퓨란 (50mL)에 용해시고, 0oC로 냉각하며, 질소의 보호에서 수소화 소듐 (118.37mg, 4.93mmol, 3.00 Eq)을 나누어서 첨가한다. 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반한다. 그 다음, 0oC에서 요오드화메탄 (8.40g, 59.18mmol, 36.09 Eq)을 항방울씩 주입한다. 25℃에서 혼합물을 2시간 동안 교반하다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 0oC로 냉각하고, 물을 추가형 다듬질 반응을 한다. 수상은 디클로로메탄: 메탄올 (10: 1,100mL*3)로 추출하고, 병합된 유기상을 포화 식염수(200mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 하여 노란색 고체인 4-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-1,4-디아자시클로헵탄-1-카르복실산터트부틸 에스테르(800.00mg, 1.60mmol,수율97.44%)을 얻는다. 상기 생성물은 추가 정제없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C24H32N6O4S [M + H]+ 501이고, 측정값은 501 이다.
단계5: 4-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-1,4-디아자시클로헵탄-1-카르복실산터트부틸 에스테르 (400.00mg, 799.03umol)을 테트라하이드로퓨란 (10mL)과 메탄올 (10mL)에 용해시키고, 25℃에서 수산화나트륨 (191.77mg, 4.79mmol)의 수용액(5mL)을 주입한다. 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25 ℃로 냉각하고, 감압농축 한다. 잠류물을 디클로로메탄: 메탄올 (10: 1,100mL*3)로 추출하고, 병합된 유기상은 포화 식염수 (20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축 하여 노란색 고체인 4-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-1,4-디아자시클로헵탄-1-카르복실산터트부틸 에스테르 (270.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 생성물은 추가 정제없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C17H26N6O2 [M + H]+ 347이고, 측정값은 347 이다.
단계6: 0oC에서, 4-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-1,4-디아자시클로헵탄-1-카르복실산터트부틸 에스테르 (270.00mg, 779.38umol)의 디클로로메탄 (10mL)용액 중에 트리플루오로초산 (10mL)을 나누어서 첨가한다. 혼합물을 25 ℃에서 30분 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 감압농축 하여 노란색 고체인 N-(1,4-아자사이클로헵테인-1-기)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (180.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 생성물은 추가 정제없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C12H18N6 [M + H]+ 247이고, 측정값은 247 이다.
단계 7: 2-시아노초산 (43.94mg, 516.62umol), HOBt (93.07mg, 688.82umol)과 EDCI (132.05mg, 688.82umol)의 DMF(3mL)의 혼합용액을 25℃에서 30분 동안 교반한 다음 N-(1,4-아자사이클로헵테인-1-기)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (80.00mg, 344.41umol)의 DMF(3mL)용액 및 트리에틸아민(174.25mg, 1.72mmol)을 첨가한다. 혼합물을 25에서 12 시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 감압농축 하고, 잠류물을 알칼리 조제형 HPLC을 사용하여 정제하여 WX34 (10.00mg, 수율9.70%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.14 (br. s., 1H), 7.18 (br. s., 1H), 6.83 (br. s., 1H), 3.78 - 3.70 (m, 2H), 3.69 - 3.61 (m, 2H), 3.28 - 3.04 (m, 4H), 2.18 (s, 1H), 2.07 (br. s., 1H), 1.34 - 1.29 (m, 2H). MS ESI 계산 값은 C15H19N7O [M + H]+ 314이고, 측정값은 314 이다.
실시예 32
Figure 112017080031701-pct00224
1-(4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)- 디아자시클로헵탄-1-기)-3,3,3-트리플루오로프로필-1-케톤
실시예31과 유사한 조제방법을 사용하여 WX35 노란색 고체인, 조생성물을 조제형 HPLC을 통해 정제하여, WX35을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.39 - 8.35 (m, 1H), 7.29 - 7.25 (m, 1H), 6.70 - 6.65 (m, 1H), 5.13 (dd, J=6.7, 13.4 Hz, 1H), 4.78 - 4.71 (m, 1H), 4.34 (dd, J=4.8, 15.3 Hz, 1H), 4.06 - 4.01 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.88 (s, 1H), 3.84 (d, J=3.8 Hz, 1H), 3.81 - 3.75 (m, 1H), 3.72 - 3.66 (m, 1H), 3.60 - 3.49 (m, 2H), 2.60 - 2.44 (m, 1H), 2.26 - 2.15 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C14H17F3N6O [M + H]+ 343이고, 측정값은 343 이다.
실시예 33
Figure 112017080031701-pct00225
3,3,3-트리플루오로-1-(4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)- 디아자시클로헵탄-1-기) prop-1-케톤
실시예31과 유사한 조제방법을 사용하여 WX36 노란색 고체인, 조생성물을 조제형 HPLC을 통해 정제하여, WX36을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.33 - 8.29 (m, 1H), 7.44 - 7.40 (m, 1H), 6.85 - 6.82 (m, 1H), 4.32 - 4.14 (m, 1H), 3.85 - 3.70 (m, 3H), 3.58 (d, J=7.0 Hz, 3H), 3.31 - 3.25 (m, 1H), 3.16 - 2.97 (m, 2H), 2.34 - 2.08 (m, 2H). MS ESI 계산 값은C15H19F3N6O [M + H]+ 357이고, 측정값은 357 이다.
실시예 34
Figure 112017080031701-pct00226
N-(시아노메틸)-3-메틸-1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00227
단계1: 아르곤 분위기에서 불로 건조된 둥근 바닥 플라스크에 테트라하이드로퓨란(150mL)을 첨가한 다음, -78℃로 냉각하고, 디이소프로필아민(6.13g, 60.62mmol, 1.20 Eq)을 첨가한 다음, 0.5시간 내에 n-부틸리륨(2.5 M, 24.25mL, 1.20 Eq)을 주입한다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반한다. -78℃에서 상기 용액에 t-BOC-3-피페리딘카복실산에틸 에스테르 (13.00g, 50.52mmol, 1.00 Eq)의 테트라하이드로퓨란 (150mL)용액을 주입하고, 0.5시간 내에 주입완료하고, 반응물을 -78℃에서 1.5시간 동안 교반한 다음, 요오드화메탄(31.94g, 224.81mmol, 4.45 Eq)을 첨가한다. 상기 반응 혼합물을 같은 온도에서 1시간 동안 교반한 다음 온도를 실온으로 서서히 올려 12시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타나면, 반응 혼합물을 포화 암모니움 클로라이드(50mL)용액을 사용하여 다듬질하고, 에틸 아세테이트(200mL*2)로 추출하고, 병합된 유기 추출액을 포화 암모니움 클로라이드용액(50mL), 식염수(50mL)을 사용하여 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고 농축하여 조화합물인 1-t-BOC-3-메틸-3-피페리딘카복실산에틸 에스테르(15g, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제 없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C14H25NO4 [M + H]+ 272이고, 측정값은 272 이다.
단계2: 0oC에서 1-t-BOC-3-메틸-3-피페리딘카복실산에틸 에스테르((13.70g, 50.49mmol, 1.00 Eq)디클로로메탄용액에 트리플루오로초산(25mL)을 나누어서 첨가한다. 혼합물을 25에서 30 분 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 감압농축하여, 노란색 유상물질인 에틸3-메틸피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(9g, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제 없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C9H17NO2 [M + H]+ 172이고, 측정값은 172 이다.
단계3: 3-메틸피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (8.60g, 50.22mmol, 1.00 Eq)을 초산(30mL)과 물(30mL)에 용해시키고, 0oC에서 아질산나트륨(6.93g, 100.44mmol, 2.00 Eq)의 수용액(30mL)을 첨가하되 10분 내에 첨가완료한다. 이 기간, 0oC보다 낮은 온도를 유지한다. 반응 혼합물을 실온 25℃에 온도를 상승시키고 25℃에서 3 시간 동안 교반한다. TLC(석유 에테르: 에틸 아세테이트=1: 1)는 원재료가 완전하게 소모되었음을 나타난다. 반응액에 어름을 서서히 첨가하여 다듬질한 다음, 에틸 아세테이트 (100mL*3)로 추출하고, 병합된 유기상을 물(100mL)로 희석하고, 탄산나트륨을 사용하여 중화하고, 물(100mL*2), 포화 식염수(20mL*2)을 사용하여 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 한다. 잠류물을 실리카겔 캄럼 크로마토그래피을 이용하여 (100-200목 실리카겔, 석유 에테르: 에틸 아세테이트=5: 1-3: 1) 정제하여 노란색 유상물질인 3-메틸-1-나트로소-피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (3.10g, 15.48mmol,수율30.83%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C9H16N2O3 [M + H]+ 201이고, 측정값은 201 이다.
단계4: 0oC에서 3-메틸-1-나트로소-피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(3.10g, 15.48mmol, 1.00 Eq)의 메탄올 (50mL)용액에 아연(5.06g, 77.41mmol, 5.00 Eq)을 첨가한다. 상기 혼합물을 0oC에서 5 분 동안 교반한다. 그 다음, 초산 (15mL)을 한방울씩 주입하는 동시에 0oC 보다 낮은 온도를 유지한다. 주입완료 후, 혼합물을 25 ℃에서 3시간 동안 교반한다. TLC반은 응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 필터링하고, 여과액은 물(100mL)과 디클로로메탄(100mL)로 희석하고, 그 다음, 0oC로 냉각하고, 고체 탄산나트륨을 사용하여 pH=8-9 되도록 알칼리화하여 유기상을 분리한다. 수상은 디클로로메탄/메탄올 (10: 1,100mL*3)로 추출하고, 병합된 유기상을 포화 식염수(100mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 하여, 연노란색 유상물질인 1-아미노3-메틸-피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (2.80g, 97.12％수율)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C9H18N2O2 [M + H]+ 187이고, 측정값은 187 이다.
단계5: 25 ℃에서 1-아미노-3-메틸피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (2.80g, 15.03mmol, 1.00 Eq)과 4-클로로-7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘(4.86g, 15.79mmol, 1.05 Eq)을 디옥산 (30mL)에 용해시키고, 트리에틸아민 (2.28g, 22.55mmol, 1.50 Eq)을 첨가한다. 혼합물을 110 ℃에서 5 시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각한다. 혼합물을 물(20mL)로 희석하고, 수상은 에틸 아세테이트 (100mL*2)로 추출한고, 변합된 유기상은 물(30ml* 2), 포화 식염수(20mL)을 각각 사용하여 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 진공농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그래피(100-200목 실리카겔, 석유 에테르: 에틸 아세테이트=5: 1-1: 1)을 통해 정제하여 노란색 고체인 3-메틸-1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (1.10g, 2.40mmol, 15.96％수율)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C22H27N5O4S [M + H]+ 458이고, 측정값은 458 이다.
단계6: 0oC 또는 질소의 보호에서, 3-메틸-1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(1.10g, 2.40mmol, 1.00 Eq)의 테트라하이드로퓨란 (30mL)에 수소화 소듐 (124.80mg, 3.12mmol, 1.30 Eq)을 나누어서 첨가한다. 혼합물을 25 ℃에서 30분 동안 교반한 다음 0 ℃ 로 다시 냉각하고, 요오드화메탄(511.87mg, 3.61mmol, 1.50 Eq)을 첨가한다. 혼합물을 25 ℃에서 2.5시간 동안 교반한다. TLC는 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 반응액을 물(10mL)에 놓어 다듬질한다. 수상은 에틸 아세테이트(50mL*2)로 추출하고, 병합된 유기상은 포화 식염수 (20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축 한다. 잠류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피을 이용하여 (100-200목 실리카겔, 석유 에테르: 에틸 아세테이트=3: 1-1: 1) 정제하여 노란색 고체인 3-메틸-1[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (1.00g, 2.12mmol,수율88.36％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C23H29N5O4S [M + H]+ 472이고, 측정값은 472 이다.
단계7: 25℃에서 3-메틸-1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (1.00g, 2.12mmol, 1.00 Eq)을 테트라하이드로퓨란 (10mL )과 메탄올 (10mL )에 용해시키고, 수산화나트륨(848.00mg, 21.20mmol, 10.00 Eq)의 수용액(5mL) 첨ㄱ가한다. 그 다음, 혼합물을 100 ℃로 가열하여 5시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 25 ℃로 냉각하고 감압농축한다. 잠류물은 희석된 HCl(수용액)를 이용하여 pH=5-6되도록 산화하고, 감압농축 하여, 노란색 고체인 3-메틸-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-카르복실산(600.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제 없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C14H19N5O2 [M + H]+ 290이고, 측정값은 290 이다.
단계8: 3-메틸-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-카르복실산(300.00mg, 1.04mmol, 1.00 Eq), HOBt (281.05mg, 2.08mmol, 2.00 Eq) 및 EDCI (398.74mg, 2.08mmol, 2.00 Eq)을 DMF(4mL)에 용해시키고, 25℃에서 30 분 동안 교반한다. 그 다음, 순차적으로 2-아미노아세토니트릴 (192.46mg, 2.08mmol, 2.00 Eq)과 트리에틸아민 (420.95mg, 4.16mmol, 4.00 Eq)을 첨가한다. 혼합물을 25 ℃에서 12시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 물(5mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(100mL*3)로 추출한다. 병합된 유기상은 포화 식염수 (20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축 한다. 잠류물을 알칼리 조제형 HPLC을 이요하여 정제하여, WX37: N-(시아노메틸)-3-메틸-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘- -기)아미노]피페리딘-3-포름아미드(130.00mg, 397.09umol, 수율38.18％)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C16H21N7O [M + H]+ 328이고, 측정값은 328 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.18 (br. s., 1H), 7.11 (d, J=3.3 Hz, 1H), 6.71 (d, J=2.8 Hz, 1H), 4.25 (d, J=17.3 Hz, 1H), 3.93 (br. s., 1H), 3.29 (br. s., 3H), 2.99 - 2.80 (m, 4H), 2.24 (d, J=11.5 Hz, 1H), 2.03 (s, 1H), 1.75 (d, J=12.3 Hz, 1H), 1.19 (s, 4H). MS ESI 계산 값은 C16H21N7O [M + H]+ 328이고, 측정값은 328 이다.
실시예 35
Figure 112017080031701-pct00228
3-메틸-1-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드
실시예34와 유사한 조제방법을 이용하여 WX38을 조제하고, 조생성물은 조제형 HPLC을 통해 정제되어 WX38을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.15 (s, 1H), 7.08 (d, J=3.3 Hz, 1H), 6.73 (br. s., 1H), 4.25 - 4.12 (m, 1H), 3.50 (br. s., 1H), 3.30 (s, 3H), 2.97 - 2.80 (m, 4H), 2.23 (d, J=12.5 Hz, 1H), 2.12 - 1.98 (m, 1H), 1.74 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.19 (br. s., 4H). MS ESI 계산 값은 C16H21F3N6O [M + H]+ 371이고, 측정값은 371 이다.
실시예 36
Figure 112017080031701-pct00229
N-(시아노에틸)-4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)모포린-2-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00230
단계1: 4-(t-BOC)모포린-2-카르복실산(7.30g, 31.57mmol)을 디클로로메탄(150.00mL)과 메탄올(10.00mL)의 혼합용제에 용해시킨 다음 0℃ 또는 질소의 보호에서 TMSCHN2(2 M, 23.68mL)의 헥산용액을 첨가한다. 반응 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반한다. TLC(석유 에테르: 에틸 아세테이트=1: 1)원재료가 완전하게 반응되었음을 나타낸다. 포화 암모니움 클로라이드 용액(20mL)을 첨가하여 다듬질 반응을 한 다음, 디클로로메탄(100mL*2)로 추출하고, 병합된 유기상은 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 하여, 연노란색 고체인 4-(t-BOC)모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(8.00g,조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제 업시 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C11H19NO5 [M + H]+ 246이고, 측정값은 246 이다.
단계2: 0oC에서 4-(t-BOC)모포린-2-카르복실산메틸 에스테르의 용액(8.00g, 32.62mmol)의 디클로로메탄(100.00mL)용액 중에 염산의 디옥산용액(4 M, 32.62mL)을 첨가한다. 반응 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반한다. TLC(석유 에테르: 에틸 아세테이트=3: 1)은 원재료가 완전하게 소모되었음을 나타난다. 반응 용제를 감압농축하여 흰색 고체인 모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(6.00, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제 없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C6H11NO3 [M + H]+ 146이고, 측정값은 146 이다.
단계3: 모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(5.70g, 31.38mmol)을 초산(50.00mL)과 물(50.00mL)에 용해시고, 0oC에서 상기 용액에 아질산나트륨(4.33g, 62.77mmol)의 수용액(50.00mL)을 첨가한다. 본 혼합물을 0oC에서 30분 동안 교반한 다음, 25에서 2 시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 물(30mL)에 넣어 다듬질하고. 수상은 에틸 아세테이트(100mL*2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링하고, 70℃에서 진공농축 하여 일부 초산을 제거한다. 잠류물을 에틸 아세테이트(100mL)과 물(50mL)의 혼합용액에 용해시키고, 고체 중탄산 나트륨을 이용하여 pH=8-9되로고 알칼리화 한다. 혼합물을 에틸 아세테이트(100mL*2)로로 추출하고, 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 하여, 연노란색 고체인 4-나트로소모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(5.40g, 97.83％수율)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C6H10N2O4 [M + H]+ 175이고, 측정값은 175 이다.
단계4: 4-나트로소모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(4.40g, 25.27mmol)을 메탄올(50.00mL)에 용해시키고, -10oC로 냉각하고, 질소의 보호에서 용액에 아연(8.26g, 126.33mmol)을 첨가하고, -10 내지 0℃에서 초산(15.17g, 252.66mmol)을 첨가한다. 상기 혼합물을 0oC에서 60분 동안 교반한 다음, 25에서 4 시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 필터링하고, 메탄올(1000mL)로 세척한다. 여과액을 70℃에서 감압농축 한다. 잠류물을 디클로로메탄메탄올(10: 1, 400mL)에 용해시키고, pH=8-9 되도록 알칼리화 한다. 혼합물을 규조토 필터링하고, 디클로로메탄메탄올(10: 1)로 세척하고. 여과액을 감압농축 한 후, 노란색 유상물질인 4-아미노모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(5.30g, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제업시 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C6H12N2O3 [M + H]+ 161이고, 측정값은 161 이다.
단계5: 4-아미노모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(4.30g, 26.85mmol)과 4-클로로-7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘(8.26g, 26.85mmol)을 디옥산(100.00mL)에 용해시키고, 질소의 보호에서 트리에틸아민(8.15g, 80.55mmol)을 첨가한다. 상기 혼합물을 110에서 24 시간 동안 교반한다. 반응이 더 이상 진행하지 않은 것을 TLC로부터 관측되면, 혼합물을 25℃로 냉각시키고, 50℃에서 감압농축 한다. 잠류물을 물(50mL)러 희석하고, 수상은 에틸 아세테이트(100mL*3)로 추출하고, 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축 한다. 잠류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(100-200목 실리카겔, 석유 에테르: 에틸 아세테이트: 디클로로메탄=5: 1: 0.5-1: 1: 1)를 이용하여 정화하여 노란색 고체인 4-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(3.80g, 7.93mmol, 수율29.52%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C19H21N5O5S [M + H]+ 432이고, 측정값은 432 이다.
단계6: 4-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(3.80g, 8.81mmol)을 테트라하이드로퓨란(100.00mL)에 용해시키고, 0oC 또는 질소의 보호에서 수소화 소듐(422.80mg, 10.57mmol, 1.20eq)을 나누어서 첨가한다. 반응액을 0oC에서 60분 동안 교반한 다음, 0oC에서 요오드화메탄(7.17g, 50.48mmol)을 첨가하고 25℃에서 4시간 동안 계속 교반한다. TLC은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 0oC로 냉각하고 물(20mL)에 넣어 다듬질한다. 수상은 에틸 아세테이트(100mL*2)로 추출하고, 병합된 유기상은 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 한다. 잠류물을 실리카겔크로마토그패픽 컬럼(100-200목 실리카겔,석유 에테르: 에틸 아세테이트=3: 1-1: 1)을 통해 정제하여 노란색 고체인 4-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(140.00mg, 수율3.39%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C20H23N5O5S [M + H]+ 446이고, 측정값은 446 이다.
단계7: 4-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]모포린-2-카르복실산메틸 에스테르(140.00mg, 314.26umol)의 테트라하이드로퓨란(5.00mL)과 메탄올(5.00mL)의 혼합용액 중에 수산화나트륨(50.28mg, 1.26mmol)의 수용액(2.50mL)을 첨가한다. 혼합물을 100에서 2 시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각시키고, 다시 50℃에서 감압농축 한다. 잠류물을 희석된 염산용액로 중화하여 감압농축 하여, 노란색 고체인 4-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]모포린-2-포름산(120mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C12H15N5O3 [M + H]+ 278이고, 측정값은 278 이다.
단계8: 4-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]모포린-2-포름산(45.00mg, 162.29umol), HOBt (43.86mg, 324.58umol) 및 EDCI(62.22mg, 324.58umol)을 DMF(4.00mL)에 용해시킨다. 혼합물을 25에서 30 분 동안 교반한 다음, 2-아미노아세토니트릴(30.03mg, 324.58umol)과 트리에틸아민(65.69mg, 649.16umol)을 첨가한 다음, 혼합물을 25에서 12 시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 물 (5mL)로 희석한다. 수상은 디클로로메탄/메탄올(5: 1, 20mL*3)로 추출하고, 병합된 유기상은 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 한다. 잠류물을 알칼리성 HPLC를 통해 정제하고, WX39 (20.00mg, 수율39.08%)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.16 (s, 1H), 7.15 - 7.06 (m, 2H), 4.63 (br. s., 1H), 4.47 (dd, J=2.8, 10.0 Hz, 1H), 4.24 - 4.13 (m, 3H), 4.05 (t, J=10.5 Hz, 1H), 3.29 - 3.18 (m, 5H), 3.00 - 2.84 (m, 2H). MS ESI 계산 값은 C14H17N7O2 [M + H]+ 316이고, 측정값은 316 이다.
실시예 37
Figure 112017080031701-pct00231
4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)모포린-2-포름아미드
실시예36과 유산한 조제방법을 이용하여 WX40를 조제하고, 조생성물을 조제형 HPLC을 통해 정제하여 WX40을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.13 (s, 1H), 7.14 (d, J=3.3 Hz, 1H), 6.86 (br. s., 1H), 4.63 (s, 1H), 4.39 (dd, J=2.4, 10.4 Hz, 1H), 4.12 (d, J=11.5 Hz, 1H), 4.02 - 3.88 (m, 3H), 3.41 (d, J=7.8 Hz, 1H), 3.07 (d, J=10.8 Hz, 1H), 2.92 - 2.82 (m, 1H), 2.66 (d, J=16.1 Hz, 1H). MS ESI 계산 값은 C13H15F3N6O2 [M + H]+ 345이고, 측정값은 345 이다.
실시예 38
Figure 112017080031701-pct00232
4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)모포린-2-포름아미드
실시예36과 유산한 조제방법을 이용하여 WX41를 조제하고, 조생성물을 조제형 HPLC을 통해 정제하여 WX41을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.16 (s, 1H), 7.11 (br. s., 2H), 4.63 (br. s., 1H), 4.47 (dd, J=2.8, 10.0 Hz, 1H), 4.21 - 4.14 (m, 1H), 4.05 (t, J=10.4 Hz, 1H), 3.94 (d, J=9.3 Hz, 2H), 3.26 - 3.15 (m, 5H), 2.99 - 2.84 (m, 2H). MS ESI 계산 값은 C14H17F3N6O2 [M + H]+ 359이고, 측정값은 359 이다.
실시예39
Figure 112017080031701-pct00233
N-(메톡실메틸)-1-[메틸-(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00234
단계 1: 1-[메틸-[7-(토실기)피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름산(672.75mg, 1.57mmol)을 테트라하이드로퓨란(30.00mL)에 용해시키고, 질소의 보호에서 트리에틸아민(474.98mg, 4.69mmol)과 이소프로필 클로로포메이트(191.75mg, 1.56mmol)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반 반응하여 원재료가 완전하게 반응되었음을 TLC가 나타나고 또한 중간체을 얻는다. NH3.H2O (548.41mg, 15.65mmol)을 첨가하여 12시간 동안 계속 교반 반응하여, 원재료가 완전하게 반응되었음을 TLC가 나타낸다. 물(10ml)을 첨가하고, 에틸 아세테이트(10ml*3)로 추출한다. 병합된 유기층을 포화 식염수(10mL*1)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압증류로 용제르 제거하여 회색고체를 얻고, TLC(DCM/MeOH=20/1)조제하여 진일보로 정제하여 1-[메틸-[7-(토실기)피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름아미드(590.00mg, 76.92%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C20H24N6O3S [M + H]+ 429.16이고, 측정값은 429 이다.
단계 4: N-(메톡실메틸)1-[메틸-[7-(토실기)피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름아미드(80.00mg, 169.29umol)을 메탄올(2.00mL)에 용해시키고, NaOH (1 M, 508uL)을 첨가하여, 25℃에서 24시간 동안 교반 반응한다. 원재료가 완전하게 반응되었음을 TLC가 나타내고, 새로운 생성물이 생성됨을 LC-MS가 나타낸다. 물(10ml)을 첨가하고, 필터링하고, 혼합용제(DCM: MeOH=5: 1)로 세척하고, 농축하여 흰색 고체를 얻으며, HPLC(알칼리성 방법)을 조제하여 WX42: N-(메톡실메틸) 1-[메틸-(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]피페리딘-3-포름아미드(13.40mg, 24.86%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C15H22N6O2 [M+H]+ 319.18이고, 측정값은 319 이다. 1H NMR (400 MHz, METHANOL-d4)δ = 8.13 (s, 1H), 7.08 (s, 2H), 4.53-4.61 (m, 2H), 3.28 (s, 3H), 3.23 (s, 3H), 2.99-3.09 (m, 2H), 2.74-2.98 (m, 3H), 1.83-2.06 (m, 3H), 1.40-1.61 (m, 1H).
실시예40
Figure 112017080031701-pct00235
1-[메틸-[7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]-N-(메틸티오메틸)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00236
단계1: 1-[메틸-[7-(토실기)피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]-N-[(메틸티오)메틸]피페리딘-3-포름아미드를 MeOH(5.00mL)과 H2O(2.00mL)의 혼합용제에 용해시키고, NaOH(16.95mg, 423.63umol)을 첨가하여, 25℃에서 12시간 동안 교반 반응한다. 원재료가 완전하게 반응되었음을 TLC가 나타내고, 새로운 생성물이 생성됨을 LC-MS가 나타낸다. HCl (1M*10ml)를 첨가하여 pH가 7 내지 8 되도록 조제하여, 5mL되도록 농축하여, HPLC(알칼리성 방법) 분리를 제작하여, WX43: 1-[메틸-[7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]-N-(메틸티오메틸)피페리딘-3-포름아미드(9.30mg, 9.85%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C15H22N6OS [M+H]+ 334.16이고, 측정값은 335 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4)δ = 8.12 (s, 1H), 7.08 (s, 2H), 4.33 - 4.17 (m, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.08 - 2.79 (m, 5H), 2.12 (s, 3H), 2.01 - 1.86 (m, 3H), 1.50 (d, J=10.0 Hz, 1H).
실시예41
Figure 112017080031701-pct00237
2-[1-[메틸[7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]-3-피페리딘]아세토니트릴
Figure 112017080031701-pct00238
단계 1: 2-[1-[메틸[7-(토실기)피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]-3-피페리딘]아세토니트릴을 THF(90.00uL)/ H2O(180.00uL)/MeOH(180.00uL) 혼합용제 중에 용해시키고, NaOH(26.91mg, 672.75umol)을 첨가하여, 25℃에서 12시간 동안 교반 반응한다. LC-MS은 원재료가 완전하게 반응되었음을 나타낸다. 교반을 멈추고, 감압농축 하여 유기용재를 제거하고, HCl(1M*5mL)로 pH을 7-8로 조제하고, HPLC(알칼리성 방법)분리을 제작하여, WX44: 2-[1-[메틸[7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]-3-피페리딘]아세토니트릴(30.00mg, 48.55%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C14H18N6 [M + H]+ 271.16이고, 측정값은 271 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4)δ = 8.16 - 8.10 (m, 1H), 7.08 (d, J=3.3 Hz, 1H), 7.03 (d, J=3.3 Hz, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.03 (d, J=7.3 Hz, 1H), 2.97 - 2.79 (m, 2H), 2.67 (t, J=10.5 Hz, 1H), 2.53 - 2.41 (m, 2H), 2.33 - 2.19 (m, 1H), 2.04 - 1.81 (m, 3H), 1.21 - 1.00 (m, 1H).
실시예42
Figure 112017080031701-pct00239
2-시아노-N-((메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-기)아민)피페리딘-3-기)메틸)아세트아미드
Figure 112017080031701-pct00240
단계 1: 2-시아노초산(158.14mg, 1.86mmol)을 DMF(4mL)에 용해시키고, HOBt (502.41mg, 3.72mmol)과 EDCI (712.78mg, 3.72mmol)을 첨가하여, 25℃에서 30분 덩인 교반 반응한다. N-[3-(아미노메틸)피페리딘-1-기]-N-메틸-7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-아민(134.68mg, 903.53umol)을 첨가 후 Et3N (752.49mg, 7.44mmol)을 첨가하여, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반 반응한다. 원재료가 완전하게 반응되었음을 HPLC가 나타내고, 새로운 생성물이 생성됨을 LC-MS가 나타낸다. 교반을 멈추어, 감압농축 하여 DMF을 제거하며, HPLC(알칼리성 방법)정제 분리를 제작하여 WX45: 2-시아노-N-((메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-기)아민)피페리딘-3-기)메틸)아세트아미드(7.70mg, 6.27%)를 얻는다. MS ESI 계산 값은 C16H21N7O [M+H]+ 328.18이고, 측정값은 328 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4)δ = 8.11 (s, 1H), 7.05 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 3.20 - 3.09 (m, 2H), 3.03 - 2.82 (m, 3H), 2.65 - 2.48 (m, 2H), 2.22 - 2.04 (m, 1H), 1.97 - 1.79 (m, 3H), 1.31 - 1.18 (m, 1H), 1.08 - 0.88 (m, 1H).
실시예43
Figure 112017080031701-pct00241
1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2,3,3,3-pentafluoropropionamide)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00242
단계 1: 중간체3(99.50mg, 361.41umol)은 DMF(5.00mL)에 용해시키고, HOBt (146.50mg, 1.08mmol)과 EDCI (207.85mg, 1.08mmol)을 첨가하고, 25℃에서 30분 동안 교반한다. 2,2,3,3,3-pentafluoropropionamide (134.68mg, 903.53umol)과 트리에틸아민(219.43mg, 2.17mmol)을 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반 반응한다. LC-MS가 원재료가 완전하게 반응되었음과 세러은 생성물이 생성됨을 나타낸다. 교반을 멈추고, 필터링하고, 여과액을 5mL되도록 농축하고, HPLC(알칼리성 방법)분리를 제작하여, WX46: 1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2,3,3,3-pentafluoropropionamide)피페리딘-3-포름아미드(49.70mg, 33.84%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C16H19F5N6O [M+H]+ 407.15이고, 측정값은 407 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4)δ = 8.13 (s, 1H), 7.08 (t, J=3.4 Hz, 2H), 4.09 - 3.80 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.08 - 2.83 (m, 5H), 2.01 - 1.85 (m, 3H), 1.58 - 1.40 (m, 1H).
실시예44
Figure 112017080031701-pct00243
1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2-二불소에틸)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00244
단계 1: 중간체3(76.00mg, 276.05umol)을 DMF(4.00mL)에 용해시키고, HOBt (111.90mg, 828.15umol)과EDCI(158.76mg, 828.15umol)을 첨가하고, 25℃에서 30분 동안 교반한다. 2,2-디플루오로에틸 (55.94mg, 690.13umol)과 트리에틸아민(223.47mg, 2.21mmol)을 첨가하여, 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반 반응한다. LC-MS가 원재료가 완전하게 반응되었음과 세러은 생성물이 생성됨을 나타낸다. 교반을 멈추고, 필터링하고, 여과액을 농축하고, HPLC(알칼리성 방법)분리를 제작하고, WX47: 1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2-二불소에틸)피페리딘-3-포름아미드(42.82mg, 45.85%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C15H20F2N6O [M+H]+ 339.17이고, 측정값은 339 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.12 (s, 1H), 7.11 - 7.02 (m, 2H), 6.06 - 5.67 (m, 1H), 3.66 - 3.45 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.09 - 2.98 (m, 2H), 2.96 - 2.84 (m, 3H), 2.05 - 1.83 (m, 3H), 1.58 - 1.39 (m, 1H).
실시예45
Figure 112017080031701-pct00245
5-[[7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]-헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-포름산터트부틸 에스테르
Figure 112017080031701-pct00246
단계 1: 헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-포름산터트부틸 에스테르(1.50g, 7.07mmol)을 초산(10.00mL)과 물(10.00mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각하고, 질소의 보호, 0℃에서, 30분 내에 NaNO2(1.22g, 17.68mmol)의 수용액H2O(10.00mL)을 주입하여 끝마춘고, 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 계속 교반한다. TLC(DCM: MeOH=10: 1)은 원재료가 완전하게 반응되었음을 나타낸다. 교반멈추고, 고체 탄산나트륨을를 사용하여 pH가 8-9되도록 저제하고, 혼합용제(DCM: MeOH=10: 1, 15ml*3)로 추출하고, 병합된 유기층을 포화 식염수(25mL*1)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 농축하여 회색 고체인 5-나트로소헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-포름산터트부틸 에스테르(1.27g, 조생성물)을 얻는다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4)δ= 4.57 - 4.43 (m, 1H), 4.25 (dd, J=4.9, 12.7 Hz, 1H), 3.85 (dd, J=7.8, 15.3 Hz, 1H), 3.65 (dd, J=5.3, 11.8 Hz, 2H), 3.49 (dd, J=4.9, 15.4 Hz, 1H), 3.31 - 3.21 (m, 2H), 3.18 - 2.99 (m, 2H), 1.48 (s, 9H).
단계 2: 5-나트로소헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-포름산터트부틸 에스테르(150.00mg, 621.66umol)을 메탄올(5.00mL)에 용해시키고, 아연분말(609.76mg, 9.32mmol)을 첨가한다. 질소으 보호에서 온도을 -10°C 내지 5°C 내로 유지하고, AcOH(3.99g, 66.44mmol)을 첨가한 후 혼합물을 1시간 동안 계속 교반 반응한다. TLC(DCM: MeOH=10: 1)은 원재료가 완전하게 반응되었음을 나타낸다. 교반멈추고, 필터링하고, 여과액 총축하여 얻는 고체를 다시 혼합용제(DCM: MeOH= 10: 1, 10ml)에 용해시키고, 필터링하여 고형물제를 제거하고, 여과액을 농축하여 5-아미노헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-포름산터트부틸 에스테르(150.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C18H27N3O4S [M+23]+ 404.17이고, 측정값은 404 이다.
단계 3: 4-클로로-7-(토실(Tosyl))피롤[2,3-d]피리미딘(169.00mg, 549.13umol)과5-아미노헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-포름산터트부틸 에스테르(149.78mg, 658.96umol)을 DCM (6.40mL)에 요해시키고, 트리에틸아민(278.13mg, 2.75mmol)을 첨가하고, 25℃에서 16시간 동안 교반 반응한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 교반을 멈추고, 물(10ml)을 첨가하고, DCM (5mL*3)추출하고, 병합딘 유기층은 포화 식염수(25mL*1)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링, 감압농축 한다, 조제형TLC(SiO2, PE: 　EA=1: 1)분리? 사용하여, 연노란색 고체인 5-[[7-(토실기)피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]-헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-포름산터트부틸 에스테르(161.80mg, 59.10%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C24H30N6O4S [M + H]+ 499.20이고, 측정값은 499 이다.
단계 4: 5-[[7-(토실기)피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]-헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-포름산터트부틸 에스테르(161.80mg, 324.51umol)을 H2O\MeOH (10mL, 1: 1)에 용해시키고, NaOH (38.94mg, 973.53umol)에 첨가하고, 15℃에서 12시간 동안 교반 반응한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 교반 반응하고, 감압농축 한다. 메탄올을 제거하고, 염산(1 M)을 pH가 8-9되도독 조제한다. HPLC(HCOOH)분리을 제작하여, WX48: 5-[[7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-]아미노]-헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-포름산터트부틸 에스테르(2.20mg, 1.97%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C17H24N6O2 [M+H]+ 345.20이고, 측정값은 345 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4)δ= 8.16 (br. s., 1H), 7.26 (br. s., 1H), 6.80 (br. s., 1H), 3.62 (br. s., 2H), 3.46 (d, J=11.3 Hz, 2H), 3.02 (br. s., 4H), 2.17 (s, 2H), 1.52 (s, 9H).
실시예46
Figure 112017080031701-pct00247
Figure 112017080031701-pct00248
(3S 또는 3R)- 1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2-二불소에틸)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00249
단계 1: 중간체3(600.00mg, 2.18mmol)을 DMF(30.00mL)에 용해시키고, HOBt(441.71mg, 3.27mmol)과 EDCI (626.68mg, 3.27mmol)을 첨가하고, 25℃에서 30분 동안 교반한다. 2,2-디플루오로에틸 (176.66mg, 2.18mmol)과 트리에틸아민(661.59mg, 6.54mmol)을 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반 반응한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 교반을 멈추고, 감압농축 하여 DMF을 제거하며, HPLC(알칼리성 방법)분리를 제작하여, 1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2-二불소에틸)피페리딘-3-포름아미드(210.00mg, 28.13%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은C15H20F2N6O [M + H]+ 339.17이고, 측정값은 339 이다.
단계 2: 초임계 크로마토그래피로 1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2-二불소에틸)피페리딘-3-포름아미드(화합물2)(210.00mg)을 분리한다.
SFC 분리조건:
칼람: AD(250mm*30mm,5um) 키랄 칼럼
유동상: A: 초임계CO2, B: 30% MeOH (0.1% NH3H2O), A: B = 70: 30
유속: 80mL/min
칼람 온도: 38°C
파장: 220nm
분사압력: 100 Bar
노즐온도: 60°C
증발온도: 20°C
마무리온도: 25°C
WX49(3R 또는 3S)-1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2-二불소에틸)피페리딘-3-포름아미드(156.80mg, 69.64%), 보류시간: 5.77min,MS ESI 계산 값은C15H20F2N6O [M+H]+ 339.17이고, 측정값은 339 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4)δ= 8.17 - 8.06 (m, 1H), 7.14 - 7.01 (m, 2H), 6.06 - 5.67 (m, 1H), 3.60 - 3.47 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.10 - 2.98 (m, 2H), 2.97 - 2.85 (m, 3H), 2.02 - 1.84 (m, 3H), 1.57 - 1.40 (m, 1H).
WX50(3S 또는 3R)-1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2-二불소에틸)피페리딘-3-포름아미드(71.30mg, 31.75%), 보류시간: 6.55min.MS ESI 계산 값은 C15H20F2N6O [M+H]+ 339.17이고, 측정값은 339 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4)δ= 8.13 (s, 1H), 7.15 - 6.97 (m, 2H), 6.12 - 5.64 (m, 1H), 3.61 - 3.47 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.07 - 2.97 (m, 2H), 2.97 - 2.81 (m, 3H), 2.02 - 1.84 (m, 3H), 1.57 - 1.39 (m, 1H).
실시예47
Figure 112017080031701-pct00250
Figure 112017080031701-pct00251
(3S 또는 3R )-1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2,3,3,3-pentafluoropropionamide)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00252
단계 1: 중간체3(1.20g, 4.36mmol)을 DMF(20.00mL)에 용해시키고, HOBt(1.77g, 13.08mmol)과 EDCI(2.51g, 13.08mmol)을 첨가하고, 25℃에서 30분 동안 교반한다. 2,2,3,3,3-pentafluoropropionamide(1.62g, 10.90mmol)과 Et3N(2.65g, 26.15mmol)을 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반 반응한다. LC-MS은 원재료가 완전하게 반응되었음과 새로운 생성물이 생성되었음을 나타낸다. 교반을 멈추고, 필터링하고, 여과액을 5ml로 농축하고, HPLC(알칼리성)분리를 제작하여, 1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2,3,3,3-pentafluoropropionamide)피페리딘-3-포름아미드(800.00mg, 43.77%)으 얻는다. MS ESI 계산 값은 C16H19F5N6O [M + H]+ 407.15이고, 측정값은 407 이다.
단계 2: 초임계 크로마토그래피로 (1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2,3,3,3-pentafluoropropionamide)피페리딘-3-포름아미드(800.00mg)을 분리한다.SFC 분리조건:
칼람: AD(250mm*30mm,10um) 키랄 칼럼
유동상: A: 초임계CO2, B: 40% MeOH (0.1% NH3H2O), A: B = 60: 40
유속: 70mL/min
칼람 온도: 38°C
파장: 220nm
분사압력: 100 Bar
노즐온도: 60°C
증발온도: 20°C
마무리온도: 25°C
WX51(3R 또는 3S)-1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2,3,3,3-pentafluoropropionamide)피페리딘-3-포름아미드(401.50mg, 46.90%), 보류시간: 5.77min.MS ESI 계산 값은 C16H19F5N6O [M+H]+ 407.15이고, 측정값은 407 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.13 (s, 1H), 7.13 - 7.02 (m, 2H), 4.11 - 3.80 (m, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.08 - 2.84 (m, 5H), 2.06 - 1.83 (m, 3H), 1.49 (d, J=11.5 Hz, 1H)
WX52(3S 또는 3R)-1-[메틸(7H-피롤[2,3-d]피리미딘-4-)아미노]-N-(2,2,3,3,3-pentafluoropropionamide)피페리딘-3-포름아미드(395.60mg, 46.06%), 보류시간: 6.89min.MS ESI 계산 값은 C16H19F5N6O [M+H]+ 407.15이고, 측정값은 407 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.13 (s, 1H), 7.08 (s, 2H), 4.14 - 3.81 (m, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.11 - 2.76 (m, 5H), 2.07 - 1.84 (m, 3H), 1.63 - 1.41 (m, 1H).
실시예48
Figure 112017080031701-pct00253
1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-[3-(트리플루오메틸기)페닐기]피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00254
단계1: 0℃에서 중간체3(100.00mg, 363.23umol)의 피리딘(5.00mL)용액 중에 EDCI(174.08mg, 908.08umol)을 첨가한 다음, 3-(트리플루오메틸기)아닐린(64.38mg, 399.55umol)을 첨가한다. 혼합물을 25℃로 온도 상승시카고, 25℃에서 10시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 감압 상황에서 용제를 제거한다. 잠류물은 물(10mL)로 희헉하고 디클로로메탄 / 메탄올(15mL×2,5/1)로 추출한다. 병합된 유기층을 감압농축하여 잠류물을 얻는다. 잠류물은 조제형HPLC(알칼리성 조건)을 통해 정제하여 WX53: 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-[3-(트리플루오메틸기)페닐기]피페리딘-3-포름아미드(50.00mg, 32.90％수율)을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 8.11 (s, 1H), 8.02 (br. s., 1H), 7.73 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.46 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.88-3.16 (m, 5H), 1.88-2.09 (m, 3H), 1.40-1.66 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C20H21F3N6O [M + H]+ 419이고, 측정값은 419 이다.
실시예49
Figure 112017080031701-pct00255
(3-히드록시아제티딘-1-기)-[1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노〕-3-피페리딜〕케톤
Figure 112017080031701-pct00256
단계1: 0℃ 질소의 보호에서 벤즈하드릴아민(10.00g, 54.58mmol)의 메탄올(55mL)용액 중에 2-(클로로메틸)에틸렌옥사이드(5.05g, 54.58mmol)을 한방을씩 첨가한 후, 반응액을 28℃로 온도 상승시키고 10시간 동안 교반한다. LCMS은 방응히 완성되었음을 나타낸다. 본 혼합물을 감압농축 하여, 노란색 액체인 1-(디페닐메틸아미노)-3-클로로-2-알콜(15.00g, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 다음 단계에서 바로 사용된다. 그 다음, 0℃에서 1-(디페닐메틸아미노)-3-클로로-2-프로판올(15.00g, 54.39mmol)의 에탄올(100mL)용액 중에 DIEA(7.03g, 54.39mmol)을 첨가하고, 반응액을 90℃로 가열하고, 10시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 25℃로 냉각시키고, 감압농축시킨다. 농축물을 프로파논과 석유 에테르로 재결정하여 흰색 고체인 1-디페닐메틸 아제티딘(diphenylmethylazetidine)-3-알콜 (7.10g, 51.82％수율)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C16H17NO [M + H]+ 240이고, 측정값은 240 이다.
단계2: 질소의 보호에서 1- 디페닐메틸 아제티딘(diphenylmethylazetidine)-3- 알콜 (1.00g, 4.18mmol)의 메탄올(15mL)용액 중에 Pd-C(10％, 500mg)을 첨가한다. 반응액을 수소로 여러변 치환한 다음, 30℃ 수소(15psi)보호에서 10시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 반응 혼합물을 필터링하고, 농축하여 무색 유상물질인 아제티딘-3-알콜(600.00mg, 조생성물)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C3H7NO [M + H]+ 74이고, 측정값은 74 이다.
단계3: 중간체3(100.00mg, 363.23umol)과 아제티딘-3-알콜(26.5mg, 365umol) 의 DMF(10mL)용액 중에 HOBt(122.70mg,908.08umol), EDCI (174.08mg,908.08umol) 및 TEA(220.53mg,2.18umol)을 첨가한다. 혼합물을 상온에서 10시간 동안 교반한다. LCMS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 물(20mL)에 붓어넣는다. 수상은 에틸 아세테이트(15mL×3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 농축하낟. 잠류물은 조제형 HPLC(알칼리성 조건)을 통해 정제하여 WX54: (3-히드록시아제티딘-1-기)-[1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노〕-3-피페리딜〕케톤(5.00mg, 3.75％수율 )을 얻는다. 1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 8.14 (s, 1H), 7.00-7.22 (m, 2H), 4.35-4.61 (m, 2H), 3.91-4.21 (m, 2H), 3.51-3.78 (m, 2H), 3.21-3.27 (m, 2H), 2.84-3.01(m, 5H), 1.84-2.03 (m, 3H), 1.36-1.51(m, 1H). MS ESI 계산 값은 C16H22N6O2 [M + H]+ 331이고, 측정값은 331 이다.
실시예50
Figure 112017080031701-pct00257
3- [5-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기아미노)- 헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-2-기] 3-옥소프로판니트릴
Figure 112017080031701-pct00258
단계1: 0℃에서 tert-부틸헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-2(3H)-카르복실에스터(800.00mg,3.04umol)의 초산(10.00mL)과 물(10.00mL)의 혼합용액 중에 아질산나트륨(420.00mg,6.09umol)의 수용액(10.00mL)을 한방울씩 첨가한다. 첨가 후 혼합물을 25℃로 온동 상승시키고 2시간 동안 교반한다. TLC은 원재료 소모되었음을 나타낸다. 반응액을 물(20mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(30mL×2)로 추출한다. 병합된 유기층을 포화 중탄산 나트륨로 pH=8-9 되도록 조제하고, 식염수(10mL×2)를 사용하여 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축하여 노란색 유상물질인 tert-부틸-5-나트로소헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-2(3H)-카르복실에스터(650.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C12H21N3O3 [M + H]+ 256이고, 측정값은 256 이다.
단계2: -5℃ 내지 -10℃에서 tert-부틸-5-나트로소헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-2(3H)-카르복실에스터(650.00mg, 2.55umol)과 아연분말(833.72mg, 12.75umol)의 메탄올(10.00mL)용액 중에 초산(5.00mL)을 한방울씩 첨가한다. 첨가 후, 혼합물을 25℃로 서서히 온도 상승시키고 2시간 동안 교반한다. TLC은 원재료가 완전히 소모되었음을 표시한다. 고체는 여출하고, 필터링하고, 감압농축 하여, 흰색 고체인 tert-부틸-5-아미노헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-2(3H)-카르복실에스터(620.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제 없이 다음 단계에서 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C12H23N3O2 [M + H]+ 242이고, 측정값은 242 이다.
단계3: tert-부틸-5-아미노헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-2(3H)-카르복실에스터(620.00mg, 2.06umol),4-클로로-7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘(633.12mg,2.06umol) 및 트리에틸아민(1.25g,12.36mmol)의 디클로로메탄(15.00mL)용액을 50℃로 가열하고 50℃에서 10시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 반응 혼합물을 감압농축하여 잠류물을 얻는다. 잠류물은 칼럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트=5/1 내지 2: 1)을 통해 흰색 고체인 tert-부틸5-〔7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-2(3H)-카르복실에스터(270.00mg, 20.97％수율)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C25H32N6O4S [M + H]+ 513이고, 측정값은 513 이다.
단계4: tert-부틸5-〔7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-2(3H)-카르복실에스터 (270.00mg, 526.71umol)의 DCM(3.00mL)용액 중에 염산디옥산(4M, 5.00mL)을 첨가하고, 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반한다. LC-MS은 원재료가 소모되었음을 나타낸다. 반응 혼합물을 감압농축하여 연노란색 고체인 N-헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-5(6H) -기-7-(토실기)7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(340.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 생성물은 추가 정제없이 다음 단계에서 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C20H24N6O2S [M + H]+ 413이고, 측정값은 413 이다.
단계5: N-헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-5(6H) -기-7-(토실기)7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (170.00mg, 412.11umol)의 메탄올(5.00mL)과 수용액(1.00mL) 중에 탄산칼륨(284.79mg, 2.06umol)을 첨가한다. 본 혼합물을 70℃로 가열하고 2시간 동안 교반한다. TLC은 원재료가 소모되었음을 나타낸다. 반응 혼합물을 감압농축하여 연노란색 고체인 N-헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-5(6H) -기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(50.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 생성물은 추가 정제없이 다음 단계에서 사용된다. MS ESI 계산 값은 C13H18N6 [M + H]+ 259이고, 측정값은 259 이다.
단계6: 0℃에서 N-헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-5(6H) -기-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-(50.00mg, 193.56umol)의 DMF(5.00mL)용액 중에 HOBt(65.38mg, 483.90umol)과 EDCI(92.76mg, 483.90umol)을 첨가한다. 첨가 후, 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반한 다음, 2-시아노초산(18.11mg, 212.92umol)과 트리에틸아민(117.52mg, 1.16mmol)을 첨가한고, 혼합물을 25에서 10 시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 반응 혼합물을 빙수(5mL)에 붓어넣는다. 그 다음, 디클로로메탄/메탄올(20mL×3)로 추출한다. 병합된 유기층을 감압농축하여 잠류물을 얻는다. 잠류물은 조제형HPLC(알칼리성 방법)을 통해 정제되어 WX55: 3- [5-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기아미노)-헥사하이드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-2-기] 3-옥소프로판니트릴(5.00mg, 수율 7.52％)을 얻는다, 1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 8.07 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.10 (t, J = 3.0 Hz, 1H), 6.82 (br. s., 1H), 3.40-4.13 (m, 5H), 1.67-3.24 (m, 9H). MS ESI 계산 값은 C16H19N7O [M + H]+ 326이고, 측정값은 326 이다.
실시예 51
Figure 112017080031701-pct00259
N-(3,3-二불소시클로부틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00260
단계1: 에틸 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카르복실에스터 (130.00mg, 284.13umol)을 테트라하이드로퓨란 (5mL )과 메탄올 (5mL )에 용해시키고, 수산화나트륨의 (22.73mg, 568.26umol)의 수용액(2.5mL)을 첨가한다. 그 다음, 혼합물을 100 ℃로 가열하여 2시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 25 ℃로 냉각하여 50 ℃에서 감압농축 한다. 잠류물을 희석된 HCl(수용액)를 사용하여 주화하고, 감압농축 하여 노란색 고체인 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노基]피페리딘-3-카르복실산(조생성물)을 얻어, 다음 단계에 바로 사용한다. MS ESI 계산 값은C13H17N5O2 [M + H]+ 276이고, 측정값은 276 이다.
단계2: 1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노基]피페리딘-3-카르복실산(78.00mg, 283.32umol), HOBt (76.56mg, 566.64umol) 및 EDCI (108.62mg, 566.64umol)을 DMF (3.5mL)에 용해시키고, 25℃에서 30 분 동안 교반한 다음, 순차적으로 (3,3-二불소丁(81.35mg, 566.63umol)과 트리에틸아민(114.68mg, 1.13mmol)을 첨가한다. 혼합물을 25 ℃에서 12시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 물(5mL)로 희석하고, 디클로로메탄: 메탄올(5: 1, 50mL*3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링하고, 감압농축 한다. 잠류물은 제작된 HPLC(알칼리성 방법)을 사용하여 정제하여 WX56: N-(3,3-二불소시클로부틸)-1-[메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]피페리딘-3-포름아미드(50.00mg, 48.43% 수율)을 얻는다. MS ESI 계산 값은C17H22F2N6O [M + H]+ 365이고, 측정값은 365 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.12 (s, 1H), 7.07 (s, 2H), 4.16 - 4.06 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 3.05 - 2.82 (m, 6H), 2.61 - 2.44 (m, 2H), 1.92 (br. s., 2H), 1.56 - 1.41 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C17H22F2N6O [M + H]+ 365이고, 측정값은 365 이다.
실시예 52
Figure 112017080031701-pct00261
N-메틸-N-[3-[5-트리플루오메틸기-1H-이미디졸-2-기]-1-피페리딜]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure 112017080031701-pct00262
단계1: 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(800.00mg, 1.75mmol)을 건조한 디클로로메탄(20.00mL)에 용해시키고, -78°C에서 DIBAL-H (1 M, 1.93mL)의 툴루엔용액을 한방울씩 첨가하여, -78°C에서 0.5시간 동안 교반한다. TLC에서 원재료 소모되었음을 나타나면, 포화 암모니움 클로라이드용액(2.0mL)을 첨가하여 다듬질 반응을 한다. 그 다음, 규조토로 필터링하여 물질을 제거하고, 디클로로메탄로 세척한다. 유기상을 분리 후, 수상은 디클로로메탄(50mL)로 추출한다. 병합된 유기상은 포화 식염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고, 고체생성되도록 농축하고, 잠류물을 실리카겔 크로마토그래피(100-200목 실리카겔, 석유 에테르: 에틸 아세테이트=4: 1-2: 1)을 이용하여 정제하여 연노란색 고체인 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-포름알데히드(530.00mg, 수율은 69.58%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C20H23N5O3S [M + H]+ 414이고, 측정값은 414 이다.
단계2: 1-[메틸-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-포름알데히드(300.00mg, 725.53umol)의 메탄올용액 중에 3,3-二브롬-1,1,1-트리플루오로-2-알콜 (215.36mg, 798.08umol)를 첨가하고, 25°C에서 24시간 동안 교반하고, 물(20mL)을 첨가하여 희석하고, 에틸 아세테이트(50mL*3)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수 (20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링하고, 감압농축 한다. 잠류물을 제작된 TLC(석유 에테르: 에틸 아세테이트=1: 1)을 이용하여 정제하여, N-메틸-7-(토실기)-N-[3-[5-트리플루오메틸기-1H-이미디졸-2-기]-1-피페리딜]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(230.00mg, 수율은 58.58%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C23H24F3N7O2S [M + H]+ 520이고, 측정값은 520 이다.
단계3: N-메틸-7-(토실기)-N-[3-[5-트리플루오메틸기-1H-이미디졸-2-기]-1-피페리디닐]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(115.00mg, 221.35umol)을 테트라하이드로퓨란 (5mL )과 메탄올 (5mL )에 용해시키고, 수산화나트륨(88.54mg, 2.21mmol)의 수용액(2.5mL)을 첨가한다. 그 다음, 혼합물을 40℃로 가열하여 2시간 동안 교반한다. TLC은 원재료가 완전하게 반응되었음을 나타낸다. 혼합물을 30 ℃로 냉각하고 감압농축 하여 테트라하이드로퓨란을 제거한다. 잠류물을 물(10mL)로 희석하고, 디클로로메탄/메탄올(10: 1,　50mL * 2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수 (20mL*2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링하고, 감압농축 한다. 잠류물을 알칼리성 제작된 HPLC르 이용하여 정제하여 WX57: N-메틸-N-[3-[5-트리플루오메틸기-1H-이미디졸-2-기]-1-피페리딜]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(40.00mg, 수율49.46%)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C16H18F3N7 [M + H]+ 366이고, 측정값은 366 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.13 (s, 1H), 7.48 (br. s., 1H), 7.12 (d, J=15.6 Hz, 2H), 3.40 (d, J=11.5 Hz, 2H), 3.26 (br. s., 3H), 3.19 (br. s., 1H), 3.14 - 3.07 (m, 1H), 3.02 (br. s., 2H), 2.13 (d, J=12.5 Hz, 1H), 2.07 - 1.94 (m, 2H), 1.68 - 1.56 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C16H18F3N7 [M + H]+ 366이고, 측정값은 366 이다.
실시예53
Figure 112017080031701-pct00263
1-[시클로프로필기(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00264
단계1: 1-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(501.18mg, 1.13mmol)과 시클로프로필기브롬 (1.00g, 8.26mmol)을 DMF(10.00mL)에 용해시키고, 탄산칼륨(780.89mg, 5.65mmol)과 유오드화칼륨 (18.76mg, 113.00umol)을 첨가한다. 혼합물을 50에서 48 시간 동안 교반한다. LC-MS에서 9%의 원재료가 남아 있고, 6%의 목표물이 검출될 경우, 시클로프로필기브롬 (5.00g, 41.33mmol)를 추가로 첨가하고, 혼합물을 100℃로 가열하여 2시간 동안 교반한다. LC-MS에서 9%의 원재료가 남아 있고, 6%의 목표물이 검출될 경우, 25℃에서 반응액을 물(10mL)에 넣어 다듬질하고, 에틸 아세테이트(100mL*2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL * 2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링하고, 감압농축 한다. 잠유물은 TLC제작을 통해 (이산화 규소, 석유 에테르: 에틸 아세테이트=3: 1)정제되어 연노란색 유성물질인 1-[시클로헥실-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르(50.00mg, 6.86% 수율)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C24H29N5O4S [M + H]+ 484이고, 측정값은 484 이다.
단계2: 1-[시클로프로필기-[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카복실산에틸 에스테르 (50.00mg, 103.40umol)을 테트라하이드로퓨란 (5mL )과 메탄올 (5mL )에 용해시키고, 수산화나트륨의 (8.27mg, 206.80umol)으 ㅣ수용액(2.5mL)을 첨가한다. 그 다음, 혼합물을 100℃로 가열하여 1시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 감압농축 한다. 잠류물을 희석된 HCl(2M, 20방울)로 중화하고, 감압농축 하여 1-[시클로프로필기-[7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카르복실산(80.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 조생성물은 추가 정제없이 다음 단계에서 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은 C15H19N5O2 [M + H]+ 302이고, 측정값은 302 이다.
단계3: 1-[시클로프로필기-[7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]피페리딘-3-카르복실산(50.00mg, 165.93umol), HOBt (44.84mg, 331.86umol) 및 EDCI (63.62mg, 331.86umol)을 DMF (4mL)에 용해시키고, 25℃에서 30 분 동안 교반한다. 그 다음, 순차적으로 2,2,2-트리플루오로에틸아민 (24.65mg, 248.89umol)과 트리에틸아민(50.37mg, 497.79umol)을 첨가한다. 혼합물을 25 ℃에서 16시간 동안 교반한다. LC-MS은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 물(10mL)에 넣어 다듬질하고, 에틸 아세테이트(50mL*2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수 (20mL * 2)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링하고, 농축하고, 감압건조한다. 잠류물을 알칼리성으로 제작된 HPLC로 정제하여 WX58: 1-[시클로프로필기(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노]-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)피페리딘-3-포름아미드(20.00mg, 31.52% 수율)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C17H21F3N6O [M + H]+ 383이고, 측정값은 383 이다.
1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.14 (s, 1H), 7.10 (dd, J=2.9, 12.2 Hz, 2H), 6.16 - 6.03 (m, 1H), 5.26 (d, J=17.3 Hz, 1H), 5.15 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.44 (d, J=4.3 Hz, 2H), 3.97 - 3.80 (m, 2H), 3.37 (s, 1H), 3.11 - 2.85 (m, 5H), 2.00 - 1.86 (m, 3H), 1.56 - 1.44 (m, 1H). MS ESI 계산 값은 C17H21F3N6O [M + H]+ 383이고, 측정값은 383 이다.
실시예54
Figure 112017080031701-pct00265
3-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-포름아미드
Figure 112017080031701-pct00266
단계1: 3-t-BOC-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-카복실산에틸 에스테르 (300.00mg, 921.83umol)의 디클로로메탄용액(10mL) 중에 염산/디옥산용액(4 M, 2.30mL)을 첨가한다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반한다. TLC은 원재료가 완전하게 반응되었음을 나타낸다. 반응액을 감압농축 하여 연노란색 고체인 3-아자스피로[5.5]운데칸-9-카복실산에틸 에스테르(300.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 생성물은 추가 정제 없시 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은C13H23NO2 [M + H]+ 226이고, 측정값은 226 이다.
단계2: 3-아자스피로[5.5]운데칸-9-카복실산에틸 에스테르(300.00mg, 1.15mmol)을 초산(10.00mL)과 물(5.00mL)에 용해시키고, 0 에서 상기 용액 중에 아질산나트륨(158.14mg, 2.29mmol)의 수용액(5.00mL)을 첨가한다. 본 혼합물을 25에서 2 시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 물(5mL)에 넣어 다듬질한다. 수상은 에틸 아세테이트(50mL*2)로 추출한다. 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링하고, 감압농축 한다. 잠류물을 물(10mL)에 용해시키고, 고체 중탄산 나트륨을 이용하여 pH=9되도록 알칼리화한다. 그 다음, 에틸 아세테이트(50mL*2)로 추출하고, 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL)세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 하여 연노란색 유성물질인 3-나트로소-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-포름산 에틸(200.00mg, 조생성물)을 얻는다. MS ESI 계산 값은C13H22N2O3 [M + H]+ 255이고, 측정값은 255 이다.
단계3: 3-나트로소-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-포름산 에틸(200.00mg, 786.41umol)을 메탄올(5.00mL)에 용해시키고, -10oC로 냉각하고, 질소의 보호에서 상기 용액에 아연(257.12mg, 3.93mmol)을 첨가하고, -10 내지 0℃에서 초산(472.24mg, 7.86mmol)을 첨가한다. 본 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 25℃에서 1.5시간 동안 교반한다. TLC은 반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 필터링하고, 메탄올(30mL)로 세척한다. 여과액을 70℃에서 감압농축 한다. 잠류물을 디클로로메탄: 메탄올(10: 1, 20mL)에 용해시키고, 고에 중탄산 나트륨로 pH=8-9되도록 알칼리화한다. 혼합물을 규조토로 필터링하고, 디클로로메탄: 메탄올(10: 1, 50mL)로 세척한다. 여과액을 감압농축 하여, 노란색 유상물질인 3-아미노-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-포름산 에틸(200mg, 조생성물)을 얻어 다음 단계에서 바로 사용한다. MS ESI 계산 값은 C13H24N2O2 [M + H]+ 241이고, 측정값은 241 이다.
단계4: 3-아미노-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-포름산 에틸(200.00mg, 832.15umol)을 디옥산(10.00mL)에 용해시키고, 트리에틸아민(421.03mg, 4.16mmol)과 4-클로로-7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘(256.10mg, 832.15umol)을 첨가한다. 상기 혼합물을 질소의 보호에서 110℃에서 16시간 동안 교반한다. LC-MS에서 60%의 4-클로로-7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘가 남아있고, 더 이상 전환되지 않을 경우, 혼합물을 25℃에서 물(10mL)에 넣어 다듬질하고, 에틸 아세테이트(50mL*2)로 추출하고, 병합된 유기상을 포화 식염수(20mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링하고, 감압농축 한다. 잠류물을 제작된 TLC(실리카겔, 석유 에테르: 에틸 아세테이트=1: 1)을 이용하여 정제하여 연노란색 고체인 3-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-포름산 에틸(35.00mg, 6.58% 수율)을 얻는다. MS ESI 계산 값은 C26H33N5O4S [M + H]+ 512이고, 측정값은 512 이다.
단계5: 3-[[7-(토실기)피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기]아미노]-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-포름산 에틸(35.00mg, 68.41umol)의 테트라하이드로퓨란(2.00mL)과 메탄올(2.00mL) 혼합용액 중에 수산화나트륨(5.47mg, 136.82umol)의 수용액(1mL)을 첨가한다. 혼합물을 100에서 1 시간 동안 교반한다. LC-MS반응이 완성되었음을 나타난다. 혼합물을 감압농축 한다. 잠류물을 희석된 염산용액(2M, 20방울)로 중화하고, 감압농축 하여, 연노란색 고체인 3-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-포름산 (30.00mg, 조생성물)을 얻는다. 상기 생성물은 추가 정제 없이 다음 단계의 반응에 바로 사용된다. MS ESI 계산 값은C17H23N5O2 [M + H]+ 330이고, 측정값은 330 이다.
단계6: 3-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-포름산(30.00mg, 91.07umol), HOBt (36.92mg, 273.22umol) 및 EDCI (52.38mg, 273.22umol)을 DMF(2.00mL)에 용해시키고, 본 혼합물을 20에서 30분 동안 교반한 후, 2,2,2-트리플루오로에틸아민 (18.04mg, 182.15umol)과 트리에틸아민(36.86mg, 364.30umol)을 첨가하고, 취득한 혼합물을 20℃에서 16시간 동안 계속 교반한다. LC-MS은 반응이 완전하게 진행되었음을 나타난다. 혼합물을 물(5mL)로 희헉하고, 디클로로메탄과 메탄올의 혼합용액(10: 1, 30mL*2)로 추출하고, 병합된 유기상은 포화 식염수(10mL)로 세척하고, 무수 환산 나트륨로 건조시키고, 필터링 그리고 감압농축 한. 잠류물을 알칼리형 HPLC로 정제하여 WX59: 3-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-기)아미노)-N-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-3-아자스피로[5.5]운데칸-9-포름아미드(10.00mg, 26.75%수율)을 얻는다. MS ESI 계산 값은C19H25F3N6O [M + H]+ 411이고, 측정값은 411 이다. 1H NMR (400MHz, METHANOL-d4) δ = 8.06 (s, 1H), 7.09 (d, J=3.5 Hz, 1H), 6.90 (br. s., 1H), 3.90 (q, J=9.5 Hz, 2H), 2.90 (br. s., 4H), 2.33 - 2.18 (m, 2H), 1.85 - 1.04 (m, 12H).
Jak1 , 2,Jak3 키나아제의 생체외 활성태스트
실험재료
재결합된 인간 유래 JAK1, JAK2, JAK3 프로테아제는 모두 Life technology에서 구입하였다. LANCE Ultra ULight™-JAK-1 (Tyr1023) peptide 및 LANCE Eu-W1024 Anti-phosphotyrosine (PT66)은 모두 퍼킨엘머(PerkinElmer)에서 구입하였다. 멀티링크 ELIASA인 Envision (PerkinElmer)로 판독한다.
실험방법
시험 대상 화합물에 대하여 3배 농도기울기 희석을 진행하고, 최종농도는 10uM 내지 0.17nM 사이의 11개 농도 이고, 각 농도는 두 개의 복공을 둔다; 검측 반응에서 DMSO의 함랑은 1%이다.
JAK1 효소 반응:
2nM JAK1 단백질 키나아제, 50nM LANCE Ultra ULight™-JAK-1 (Tyr1023) peptide, 38uM ATP, 50mM HEPES (pH 7.5), 10mM MgCl2, 1mM EGTA, 2mM DTT, 0.01% BRIJ-35. 검출보드는 White Proxiplate 384-Plus plate (PerkinElmer)이고, 실온에서 90분 반응하고, 반응 시스템은 10ul이다.
JAK2 효소 반응:
0.02nM JAK2 단백질 키나아제, 50nM LANCE Ultra ULight™-JAK-1 (Tyr1023) peptide, 12uM ATP, 50mM HEPES (pH 7.5), 10mM MgCl2, 1mM EGTA, 2mM DTT, 0.01% BRIJ-35. 검출보드는 White Proxiplate 384-Plus plate (PerkinElmer)이고, 실온에서 60분 반응하고, 반응 시스템은 10ul이다
JAK3효소 반응:
0.05nM JAK2 단백질 키나아제, 50nM LANCE Ultra ULight™-JAK-1 (Tyr1023) peptide, 4uM ATP, 50mM HEPES (pH 7.5), 10mM MgCl2, 1mM EGTA, 2mM DTT, 0.01% BRIJ-35. 검출보드는 White Proxiplate 384-Plus plate (PerkinElmer)이고, 실온에서 90분 반응하고, 반응 시스템은 10ul이다.
반응 검측:
10ul 시약을 반응판에 넣고, 여기서 LANCE Eu-W1024 Anti-phosphotyrosine (PT66)의 최종 농도는 2nM이고, EDTA의 최종 농도는 10mM이며, 실온에서 60분 동안 배양하고, Envision기기로 판독한다.
데이터 분석
다음 공식에 의하면, 읽어 들인 데이터를 억제률로 변환 시킨다. 즉, 억제를(%)= (Min-Ratio)/(Max-Min)*100%. 4개의 파라메터 곡선을 오버피팅하여(Model 205in XLFIT5, iDBS), IC50 데이트를 검출한다. 자세한 내용은 표 1을 참조바란다.
Figure 112017080031701-pct00267
A≤10nM; 10＜B≤100nM;100＜C≤1000nM; D>1000nM
약동학(PK) 실험
실험 화합물을 용해시켜 취득한 깨끗한 용액을 꼬리 정맥주사 및 위내 투약 각각을 통해 숫행쥐(야간절식, 7~8주령) DBA/1 의 체내에 제공한다. 실험 대상 화합물을 제공한 후, 정맥주소한 팀은 0.083, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8 및 24 시간, 위내 투약한 팀은 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8 및24 시간에서 각각 하악정맥으로부터 혈액을 채취하여 원심분리 후 혈장을 취득한다. LC-MS/MS법을 이용하여 혈중 약농도를 측정하고, WinNonlin™ Version 6.3 약동학 소프트웨어를 사용하고, 비방실 모델 선형 대수 트래피조이드법을 통해 관련된 약동학 파라미터를 계산한다.
설험 대상 화합물을 PEG400/water[20%/80%]에 용해시켜 취득한 깨끗한 용액을 각각 꼬리 정매주사 및 위내 투약을 통해 맘컷 쥐 Lewis(야간절식, 7~8주령)의 체내로 제공한다. 실험 대상 화합물을 제공한 후, 정맥 주사한 팀은 0.083, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8 및24 시간에서, 위내 투약한 팀은 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8 및 24 시간에서, 각각 하악정맥으로부터 혈액을 채취하여 원심분리 후 혈장을 취득한다. LC-MS/MS법을 이용하여 혈중 약농도를 측정하고, WinNonlin™ Version 6.3 약동학 소프트웨어를 사용하고, 비방실 모델 선형 대수 트래피조이드법을 통해 관련된 약동학 파라미터를 계산한다.
Figure 112017080031701-pct00268
Figure 112017080031701-pct00269
Figure 112017080031701-pct00270
Figure 112017080031701-pct00271
Figure 112017080031701-pct00272
Figure 112017080031701-pct00273
본 발명의 화합물WX07, WX05, WX08 모두는 생쥐와 쥐 체네에서 경구적 생체 이용률이 양호하고, 노출량이 상대적으로 높아, 생채네에서 약효 생성하는데 아주 유리하다.
쥐 보조제 유도 관절염 모델에서의 약효실험:
[0001028] 쥐 보조제 유도 관절염 모델을 이용하여 본 발명의 화합물이 관절염 치료에 있어서의 효과를 검증한다.
체중이160-180g인 Lewis 맘컷 쥐를 이소푸루란으로 마취한 후, 좌측 발 뒤축에 0.1ml의 결핵균 현탁액을 주사한다. 모델 생성13일 후, 팀을 나누어 대응되는 실험 대상 화합물을 제공하며, 예를 들어, 쥐에게 1mpk, 3mpk, 10mp의 실험 대상 화합물WX07과 참고 화합물 토파시티닙(Tofacitinib)을 각각 제공하고, 토파시티닙과 본 발명의 화합물WX07을 DMSO/PEG400/H2O혼합용매에 용해시켜 맘컷 쥐Lewis(조제량별 팀의 실험 대상 동물의 수량은 10 마리)에게 경구투여한다. 또는 쥐에게 1mpk, 3mpk, 10mp의 실험 대상 화합물WX08과 참고 화합물 피고티니(Filgotinib)을 각각 제공하고, 芬戈替과 본 발명의 화합물WX08을 DMSO/PEG400/H2O혼합용매에 용해시켜 맘컷 쥐Lewis(조제량별 팀의 실험 대상 동물의 수량은 10 마리)에게 경구투여하고, 쥐의 체중은 160-170g이다. 2주 동안 연속하여 투약하며, 그 동안 쥐의 상태을 관측하고, 발의 부기 상황을 기록하고 평가를 한다. 실험결과 본 발명의 화합물WX07은 양호한 복용량 효과 관계을 나타내고, 또한 토파시티닙과 같은 관절염 억제 활성을 나타냈다. WX08은 양호한 복용량 효과 관계을 나타내고, 또한 피고티니보다 덩구 효율적인 관절염 억제 활성을 나타냈다.
Figure 112017080031701-pct00274
생쥐 교원질 유도 관절염 모델에서의 약효실험:
생쥐 교원질 유도 관절염 모델을 이용하여 본 발명의 화합물이 관절염 치료에 있어서의 효과를 검증한다.
DBA/l숫생쥐를 선택하여, 제0일과 제21일에 꼬리의 뿌리 부위에 교원질과 프로인트 완전 보조제의 유제를 주사하고, 제29에 즘부터 팀을 나눈다. 토파시티닙(15mpk), 피고티니(15mpk) 및 본 발명의 화합물WX04 (15mpk, 30mpk), WX05(15mpk), WX07(15mpk), WX08(15mpk)을 DMSO/PEG400/H2O[5/20/75 (v/v/v)]에 용해시키고, 경구투여를 통해 CIA생쥐(상하이 스라이크 실험 동물 유한 회사, 각 조제량별 팀의 시험대상 동물의 수량은 10 마리)에게 제고하되 2주 동안 지속적으로 제공하며, 그 동안 생쥐의 체중을 기록하고, 생쥐의 관절염 증상에 대하여 임상 평점한다. 실험결과의 의하면, 본 발명의 화합물WX04, WX05, WX07, WX08은 생쥐의 류머티스성 관절염에 대하여 현저한 치료 효과가 있다.
Figure 112017080031701-pct00275

Claims (10)

  1. 식(I)에서 도시된 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염에 있어서,
    Figure 112018017062155-pct00276

    (I)
    여기서,
    고리A는 0, 1, 2, 3, 4 또는 5의 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노치환으로된 C1-3알킬기, C1-3헤테로알킬기로부터 선택되는 치환기로 치환된 5～12원(membered)헤테로시클릭기 또는 5~6원(membered)헤테로아릴기에서 임의로 선택되고;
    R1는 H를 선택하거나 0, 1, 2, 3, 4 또는 5의 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노치환으로된 C1-3알킬기, C1-3헤테로알킬기로부터 선택되는 치환기로 치환된 C1-6알킬기, C1-6헤테로알킬기, C3-6시클로알킬기, 3~6원(membered)헤테로시클릭기, 5~6원(membered)아릴, 또는 5~6원(membered)헤테로아릴기로부터 임의로 선택하고;
    L는 단일결합, -C(=O)O-, 아실기로부터 선택하거나 0, 1, 2, 3, 4 또는 5의 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노치환으로된 C1-3알킬기, C1-3헤테로알킬기로부터 선택되는 치환기로 치환된 아미노, 아미노아실기, 아실아미노메틸렌기, 아미노아실메틸렌기로부터 임의로 선택하고;
    선택적으로, R1과 L 중의 N은 임의로 선택되어 0, 1, 2, 3, 4 또는 5의 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노치환으로된 C1-3알킬기, C1-3헤테로알킬기로부터 선택되는 치환기로 치환된 3～6원(membered) 고리를 형성하고;
    R2는 H로부터 선택되거나 0, 1, 2, 3, 4 또는 5의 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노치환으로된 C1-3알킬기, C1-3헤테로알킬기로부터 선택되는 치환기로 치환된 C1-3알킬기, 3~6원(membered)시클로알킬기로부터 임의로 선택되고;
    선택적으로, 구조 유닛
    Figure 112018017062155-pct00277
    을
    Figure 112018017062155-pct00278
    으로 치환하고;
    "헤테로"는 O, S 또는 N를 대표하고, 그 수량은 1, 2 또는 3에서 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염.
  2. 삭제
  3. 청구항 1에 있어서,
    고리A는 선택적으로 0, 1, 2, 3, 4 또는 5의 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노치환으로된 C1-3알킬기, C1-3헤테로알킬기로부터 선택되는 치환기로 치환된 피페리딜, 피페라진, 모르폴리닐, 피롤리딜, 옥사졸기, 1～2개의 헤테로원자를 포함한7~12원(membered)헤테로사이클릭기로부터 선택되는 것을 특징으르 하는 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염.
  4. 청구항 3에 있어서,
    고리A는 선택적으로 0, 1, 2, 3, 4 또는 5의 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노치환으로된 C1-3알킬기, C1-3헤테로알킬기로부터 선택되는 치환기로 치환된
    Figure 112018017062155-pct00279
    ,
    Figure 112018017062155-pct00280
    ,
    Figure 112018017062155-pct00281
    ,
    Figure 112018017062155-pct00282
    ,
    Figure 112018017062155-pct00283
    ,
    Figure 112018017062155-pct00284
    ,
    Figure 112018017062155-pct00285
    ,
    Figure 112018017062155-pct00286
    ,
    Figure 112018017062155-pct00287
    ,
    Figure 112018017062155-pct00288
    ,
    Figure 112018017062155-pct00289
    ,
    Figure 112018017062155-pct00290
    ,
    Figure 112018017062155-pct00291
    ,
    Figure 112018017062155-pct00292
    ,
    Figure 112018017062155-pct00293
    ,
    Figure 112018017062155-pct00294
    ,
    Figure 112018017062155-pct00295
    ,
    Figure 112018017062155-pct00296
    로부터 선택되는 것을 특징으르 하는 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염.
  5. 청구항 1에 있어서,
    R1는 H에서 선택되거나 0, 1, 2, 3, 4 또는 5의 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노치환으로된 C1-3알킬기, C1-3헤테로알킬기로부터 선택되는 치환기로 치환된 C1-4알킬기, C1-2알킬기-O-C1-2알킬기-, C1-2알킬기-S-C1-2알킬기-, C4-5시클로알킬기, 6원(membered)아릴, 또는 5원(membered)헤테로아릴기로부터 임의로 선택되는 것을 특징으르 하는 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염.
  6. 청구항 5에서 있어서,
    R1와 L 중의 N는 선택적으로 0, 1, 2, 3, 4 또는 5의 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노치환으로된 C1-3알킬기, C1-3헤테로알킬기로부터 선택되는 치환기로 치환된 4～5원(membered)고리를 형성하는 것을 특징으르 하는 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염.
  7. 청구항 1에 있어서,
    R1-L-는 선택적으로 0, 1, 2, 3, 4 또는 5의 할로겐, 시아노, 수산기, 아미노로부터 선택되거나, 임의로 할로겐치환, 수산치환 및/또는 아미노치환으로된 C1-3알킬기, C1-3헤테로알킬기로부터 선택되는 치환기로 치환된Me,
    Figure 112018017062155-pct00338
    ,
    Figure 112018017062155-pct00339
    ,
    Figure 112018017062155-pct00340
    ,
    Figure 112018017062155-pct00341
    ,
    Figure 112018017062155-pct00342
    ,
    Figure 112018017062155-pct00343
    ,
    Figure 112018017062155-pct00344
    ,
    Figure 112018017062155-pct00345
    ,
    Figure 112018017062155-pct00346
    ,
    Figure 112018017062155-pct00347
    ,
    Figure 112018017062155-pct00348
    ,
    Figure 112018017062155-pct00349
    ,
    Figure 112018017062155-pct00350
    ,
    Figure 112018017062155-pct00351
    ,
    Figure 112018017062155-pct00352
    ,
    Figure 112018017062155-pct00353
    ,
    Figure 112018017062155-pct00354
    ,
    Figure 112018017062155-pct00355
    로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염.
  8. 청구항 1에 있어서,
    R2는 H, 메틸, 에틸 또는 시클로프로필기로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염.
  9. 청구항 1에 있어서,
    상기 화합물은 구체적으로
    Figure 112018017062155-pct00382
    Figure 112018017062155-pct00383
    Figure 112018017062155-pct00384
    Figure 112018017062155-pct00385
    Figure 112018017062155-pct00386
    Figure 112018017062155-pct00387
    Figure 112018017062155-pct00388
    Figure 112018017062155-pct00389
    Figure 112018017062155-pct00390
    Figure 112018017062155-pct00391
    Figure 112018017062155-pct00392
    Figure 112018017062155-pct00393
    Figure 112018017062155-pct00394
    Figure 112018017062155-pct00395
    Figure 112018017062155-pct00396
    Figure 112018017062155-pct00397
    Figure 112018017062155-pct00398
    Figure 112018017062155-pct00399
    Figure 112018017062155-pct00400
    Figure 112018017062155-pct00401
    Figure 112018017062155-pct00402
    Figure 112018017062155-pct00403
    Figure 112018017062155-pct00404
    Figure 112018017062155-pct00405
    Figure 112018017062155-pct00406
    Figure 112018017062155-pct00407
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    로부터 선택되는 것을 특지으로 하는 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염.
  10. 청구항 1 및 청구항 3 내지 9 중 어느 한 항에 있어서,
    JAK관련 질병을 치료하는 약물제작에 사용되는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적 허용 가능한 염.
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