KR101789355B1

KR101789355B1 - 피부 콜라겐 생성 촉진제

Info

Publication number: KR101789355B1
Application number: KR1020137009620A
Authority: KR
Inventors: 켄 가토; 아이코 오노; 히로시 우에노; 노리코 우에다; 히로아키 마츠야마
Original assignee: 유키지루시 메그밀크 가부시키가이샤
Priority date: 2010-09-30
Filing date: 2011-09-29
Publication date: 2017-10-23
Anticipated expiration: 2031-09-29
Also published as: CA2810712A1; WO2012043714A1; MY179236A; JP2012077018A; CA2810712C; US20130225497A1; KR20130099104A; CN103140231A; CN103140231B

Abstract

본 발명은, 피부의 건조감이나 피부 거칠음, 주름이나 처짐을 방지할 수 있고, 게다가 안전성의 점에서도 문제가 없는 식품 소재로서도 사용 가능한 피부 콜라겐의 생합성을 촉진하는 새로운 피부 콜라겐 생성 촉진제를 제공하는 것을 과제로 한다. 또한, 본 발명은, 피부 콜라겐 생성 촉진제를 배합한 음식품 또는 화장료를 제공하는 것을 과제로 한다. 다음 (a) 내지 (c)의 특성을 갖는 유단백질 분획을 유효성분으로 하는 피부 콜라겐 생성 촉진제. (a) 젖 유래인 것. (b) 소듐도데실설페이트-폴리아크릴아미드겔(SDS-PAGE) 전기영동으로, 분자량 6,000∼150,000 달톤 범위의 단백질을 함유하는 분획인 것. (c) 구성 아미노산 조성 중에 염기성 아미노산을 12∼14 중량% 함유하고, 또한, 염기성 아미노산/산성 아미노산비가 0.5∼0.7의 범위인 것.

Description

피부 콜라겐 생성 촉진제{SKIN COLLAGEN PRODUCTION-PROMOTING AGENT}

본 발명은, 피부 거칠음, 주름, 탄성 저하 등을 방지하는 데 유용한 피부 콜라겐 생성 촉진제, 피부 콜라겐 생성 촉진용 음식품 및 피부 콜라겐 생성 촉진용 화장료에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 본 발명은, 유단백질 분획 및/또는, 그 유단백질 분획의 분해물을 유효성분으로 하는 피부 콜라겐 생성 촉진제에 관한 것이다.

최근, 피부의 메커니즘에 관한 연구가 진행되고, 피부의 건조감이나 피부 거칠음의 원인으로서 거시적으로는, 가령(加齡)에 따른 신진대사의 감쇠에 의한 것 이외에, 태양광(자외선), 건조, 산화 등의 작용이 복잡하게 관여하고 있는 것이 확인되었다. 이들 인자에 따른 작용에 의해, 진피의 가장 주요한 매트릭스 성분인 콜라겐 섬유가 현저히 감소하고 있는 것이 밝혀졌다. 콜라겐 섬유에 의해 유지되고 있던 피부의 팽팽함이나 탄력성과 같은 장력 유지 기구가 자외선 등의 작용에 의해 파괴되면, 피부는 주름이나 처짐을 증가시킨 상태가 된다. 또한, 콜라겐은 그 분자 중에 수분을 유지할 수 있고, 이것에 따라, 피부를 촉촉하게 한 상태로 유지하는 것에도 도움이 되고 있기 때문에, 외적 인자에 의해 콜라겐이 파괴되면 피부는, 건조하고, 거칠어진 상태가 된다. 이상으로부터, 진피층의 주요한 성분 중 하나인 콜라겐의 생합성을 촉진시킴으로써, 피부의 주름이나 처짐을 방지할 수 있고, 게다가 안전성의 점에서도 문제가 없는 피부 콜라겐 생성 촉진제가 요구되고 있었다.

피부 콜라겐 촉진 작용을 갖는 물질로서는, 젖(乳) 중에 존재하는 염기성 단백질 분획 혹은 그 염기성 단백질 분획을 단백질 분해효소로 분해하여 얻어지는 염기성 펩티드 분획(특허문헌 1)이나, 락토페린 혹은 락토페린을 단백질 분해효소로 분해하여 얻어지는 락토페린 분해물(특허문헌 2), 락토퍼옥시다아제 혹은 락토퍼옥시다아제를 단백질 분해효소로 분해하여 얻어지는 락토퍼옥시다이제 분해물(특허문헌 3), 안지오제닌 혹은 안지오제닌을 단백질 분해효소로 분해하여 얻어지는 안지오제닌 분해물(특허문헌 4)이 이미 알려져 있다.

특허문헌 1 : 일본 특허 공개 2003-144095 특허문헌 2 : 일본 특허 공개 2004-331564 특허문헌 3 : 일본 특허 공개 2004-331565 특허문헌 4 : 일본 특허 공개 2004-331566

본 발명은, 피부의 건조감이나 피부 거칠음, 주름이나 처짐을 방지할 수 있고, 게다가 안전성의 점에서도 문제가 없는 식품 소재로서도 사용 가능한 피부 콜라겐의 생합성을 촉진하는 새로운 피부 콜라겐 생성 촉진제를 제공하는 것을 과제로 한다. 또한, 본 발명은, 피부 콜라겐 생성 촉진제를 배합한 음식품 또는 화장료를 제공하는 것을 과제로 한다.

본 발명의 발명자들은, 이들 과제를 해결하기 위해서, 널리 식품 소재에 포함되어 있는 피부 콜라겐 생성 촉진 작용을 나타내는 물질에 대해서 예의, 탐색을 진행한 결과, 피부 콜라겐 생성 촉진 작용을 나타내는 유단백질 분획 및/또는 그 유단백질 분획의 분해물을 발견하여 본 발명을 완성시키기에 이르렀다.

즉, 본 발명은 이하의 양태를 포함하는 것이다.

(1) 다음 (a) 내지 (c)의 특성을 갖는 유단백질 분획을 유효성분으로 하는 피부 콜라겐 생성 촉진제.

(a) 젖 유래인 것.

(b) 소듐도데실설페이트-폴리아크릴아미드겔(SDS-PAGE) 전기영동으로, 분자량 6,000∼150,000 달톤 범위의 단백질을 함유하는 분획인 것.

(c) 구성 아미노산 조성 중에 염기성 아미노산을 12∼14 중량% 함유하고, 또한, 염기성 아미노산/산성 아미노산비가 0.5∼0.7의 범위인 것.

(2) 다음 (a) 내지 (c)의 특성을 갖는 유단백질 분획의 분해물을 유효성분으로 하는 피부 콜라겐 생성 촉진제.

(a) 젖 유래인 것.

(3) (1) 또는 (2)에 기재된 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 배합한 피부 콜라겐 생성 촉진용 음식품.

(4) (1) 또는 (2)에 기재된 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 배합한 피부 콜라겐 생성 촉진용 화장료.

(5) 다음 (a) 내지 (c)의 특성을 갖는 유단백질 분획을, 성인 1인당 1일 10 ㎍ 이상 경구 섭취하거나 또는 조성물 전량을 기준으로 하여 0.001∼2 중량%가 되도록 배합한 제제를 도포함에 의한 피부 콜라겐의 생성 촉진 방법.

(a) 젖 유래인 것.

(6) 다음 (a) 내지 (c)의 특성을 갖는 유단백질 분획의 분해물을, 성인 1인당 1일 10 ㎍ 이상 경구 섭취하거나 또는 조성물 전량을 기준으로 하여 0.001∼2 중량%가 되도록 배합한 제제를 도포함에 의한 피부 콜라겐의 생성 촉진 방법.

(a) 젖 유래인 것.

본 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제는, 경구 투여 혹은 도포에 의해 피부에 있어서의 콜라겐의 생합성을 촉진함으로써, 피부의 건조감이나 피부 거칠음, 주름이나 탄성 저하 등의 방지에 유용하다.

본 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제는, (a) 젖 유래인 것, (b) 소듐도데실설페이트-폴리아크릴아미드겔(SDS-PAGE) 전기영동으로, 분자량 6,000∼150,000 달톤 범위의 단백질을 함유하는 분획인 것, (c) 구성 아미노산 조성 중에 염기성 아미노산을 12∼14 중량% 함유하고, 또한, 염기성 아미노산/산성 아미노산비가 0.5∼0.7의 범위인 것의 3가지 조건을 전부 만족하는 유단백질 분획이나 혹은 이 유단백질 분획의 분해물을 유효성분으로 한다. 이러한 유단백질 분획은, 예컨대, 탈지유나 유청 등의 젖 원료를 양이온 교환수지와 접촉시켜, 탈이온수로 세정한 후, 이 수지에 흡착된 유단백질을 0.2 M의 식염 용출액으로 용출시켜 얻을 수 있다. 또한, 염류로서는, 식염 이외에 칼륨염, 암모니아염, 인산염, 아세트산염, 탄산염 등을 사용할 수 있고, 세정액의 이온 강도를 0.05 이하, 용출 용액의 이온 강도를 0.15∼0.25로 적절하게 조정하여 본 발명의 유단백질 분획을 얻을 수 있다. 또한, 이 용출 분획을 회수하여 역침투(RO)막이나 전기투석(ED)법 등에 의해 탈염 및 농축하고, 필요에 따라 건조시킴으로써 얻을 수 있다. 역침투(RO)막으로서는, Desal-3(Desalination사 제조), HR-95(Dow Danmark사 제조), NTR-729HF(니토덴코사 제조) 등을 예시할 수 있다. 또한, 전기투석(ED) 장치는, 유아사아이오닉스사나 니폰렌스이사에서 제조한 전기 투석 장치를 예시할 수 있다.

또한, 젖 유래의 단백질 분획을 얻는 방법으로는, 젖 또는 젖 유래의 원료를 양이온 교환체에 접촉시킨 후, 이 양이온 교환체에 흡착된 염기성 단백질 분획을, pH 5를 초과하고, 이온 강도 0.5를 초과하는 용출액으로 용출시켜 얻는 방법(일본 특허 공개 평성 제5-202098호 공보), 알긴산겔을 이용하여 얻는 방법(일본 특허 공개 소화 제61-246198호 공보), 무기 다공성 입자를 이용하여 유청으로부터 얻는 방법(일본 특허 공개 평성 제1-86839호 공보), 황산화에스테르 화합물을 이용하여 젖으로부터 얻는 방법(일본 특허 공개 소화 제63-255300호 공보) 등이 알려져 있고, 본 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제는, 이러한 방법으로 얻어지는 유단백질 분획을 이용할 수 있다. 또한, 이와 같이 하여 회수된 유단백질 분획은 동결 건조 등에 의해 분말화하여 사용하는 것도 가능하다.

본 발명에서 이용하는 피부 콜라겐 생성 촉진 작용을 갖는 유단백질 분획은, 그 구성 아미노산 조성 중에 염기성 아미노산을 12∼14 중량% 함유하고, 또한 염기성 아미노산/산성 아미노산비가 0.5∼0.7의 범위이다. 이 범위를 벗어나면 본원 발명의 효과를 발휘할 수 없다. 또한, 본 발명품은, 분자량 6,000∼150,000 달톤을 나타내는 다종의 단백질 혼합물로서, 등전점(等電点)도 6∼11의 광범위한 분포를 나타낸다.

유단백질 분획의 분해물은, 유단백질 분획과 동일한 아미노산 조성을 갖고 있고, 예컨대, 상기한 방법으로 얻어진 유단백질 분획에 펩신, 트립신, 키모트립신 등의 단백질 분해효소를 작용시키고, 필요에 따라 판크레아틴 등의 단백질 분해효소를 더 작용시킴으로써, 평균 분자량 4,000 이하의 분해물로서 얻을 수 있다. 또한, 유단백질 분획의 분해물은, 동결 건조 등에 의해 분말화하여 사용하는 것도 가능하다.

본 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제의 유효성분인 유단백질 분획의 공급원이 되는 젖 또는 젖 유래 원료로는 우유, 사람젖, 염소젖, 양젖 등의 젖을 이용할 수 있고, 이들 젖을 그대로, 혹은, 이들 젖의 환원유, 탈지유, 훼이(whey) 등을 이용할 수 있다.

본 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제는, 경구 투여 혹은 도포함으로써, 피부 콜라겐 생성 촉진 효과를 발휘한다. 본 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제를 경구 투여함에 있어서는, 유효성분인 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 그대로의 상태로 이용할 수도 있지만, 통상적인 방법에 따라 분말제, 과립제, 정제, 캡슐제, 드링크제 등으로 제제화하여 이용할 수도 있다. 본 발명에 있어서, 분말제, 과립제, 정제, 캡슐제 등의 경구제는 예컨대 전분, 젖당, 백당, 만니톨, 카르복시메틸셀룰로오스, 콘스타치, 무기염류 등의 부형제를 이용하여 통상적인 방법에 의해 제제화된다. 이러한 종류의 제제에는, 상기 부형제 이외에 결합제, 붕괴제, 계면활성제, 활택제, 유동성 촉진제, 착색료, 향료 등을 적절하게 사용할 수 있다. 보다 구체적으로는, 결합제로는 예컨대 전분, 덱스트린, 아라비아검말, 젤라틴, 히드록시프로필스타치, 카르복시메틸셀룰로오스나트륨, 메틸셀룰로오스, 결정성 셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈을 들 수 있다. 또한, 붕괴제로는 예컨대 전분, 히드록시프로필스타치, 카르복시메틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스나트륨, 가교 카르복시메틸셀룰로오스나트륨, 결정성 셀룰로오스 등을 들 수 있다. 계면활성제로는 대두 레시틴, 자당 지방산 에스테르 등을 들 수 있고, 활택제로는 탈크, 납, 자당 지방산 에스테르, 수소 첨가 식물유 등을 들 수 있으며, 유동성 촉진제로는 무수 규산, 건조 수산화알루미늄, 규산마그네슘 등을 들 수 있다.

나아가서는, 이들의 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 그대로 혹은 제제화한 후, 이것을 영양제나 음식품 등에 배합하는 것도 가능하다. 또한, 비타민 C 등의 종래부터 콜라겐 생성에 유효한 작용을 갖는다고 생각되고 있는 성분과 함께 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 배합하면, 한층 더한 피부 콜라겐 생성 촉진 작용을 기대할 수 있다. 또한, 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물은, 비교적 열에 대하여 안정하기 때문에, 통상 행해지는 조건으로 가열 살균하는 것도 가능하다.

본 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제를 도포함에 있어서는, 그 사용 목적에 따라 통상 이용되는 공지된 성분에 배합함으로써, 액제, 고형제, 반고형제 등의 각종 제형으로 조제하는 것이 가능하고, 바람직한 조성물로서 연고, 겔, 크림, 스프레이제, 첩부제, 로션, 분말 등을 들 수 있다. 예컨대, 본 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제를 바셀린 등의 탄화수소, 스테아릴알코올, 미리스트산이소프로필 등의 고급 지방산 저급 알킬에스테르, 라놀린 등의 동물성 유지, 글리세린 등의 다가 알코올, 글리세린 지방산 에스테르, 모노스테아르산, 폴리에틸렌글리콜 등의 계면활성제, 무기염, 납, 수지, 물 및 필요하다면 파라옥시안식향산메틸, 파라옥시안식향산부틸 등의 보존료에 혼합함으로써, 피부 콜라겐 생성 촉진용 화장료나 의약품을 제조할 수 있다.

본 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제의 경구 투여에 의한 유효량은, 그 제제 형태, 투여 방법, 사용 목적 및 이것을 적용할 수 있는 환자의 연령, 체중, 병의 상태에 따라 적절하게 규정되어 일정하지 않지만, 래트를 이용한 동물실험의 결과에 따르면, 피부 콜라겐 생성 촉진 작용을 나타내기 위해서는, 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 래트 체중 1 ㎏당 10 ㎍ 이상 섭취시켜야만 하는 것을 알 수 있었다. 따라서, 외삽법(外揷法)에 따르면, 통상, 성인 1인당 1일 10 ㎍ 이상의 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 섭취하면 효과를 기대할 수 있으므로, 이 필요량을 확보할 수 있도록 음식품에 배합하거나 혹은 의약으로서 투여하면 좋다. 또한, 투여는 필요에 따라 1일 수회에 나누어 행하는 것도 가능하다.

본 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제의 도포에 의한 유효량은, 제형에 따라 다르지만, 적용하는 조성물 전량을 기준으로 하여, 바람직하게는, 0.001∼2 중량%가 되도록 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 배합하면 좋다. 단, 입욕제와 같이 사용시에 희석되는 것은, 배합량을 더 늘릴 수 있다.

이하에, 참고예, 실시예 및 시험예를 나타내어 본 발명을 상세하게 설명하지만, 이들은 단순히 본 발명의 실시양태를 예시하는 것으로서, 본 발명은 이들에 의해 전혀 한정되지 않는다.

[참고예 1]

하기의 방법(일본 특허 공개 2003-144095 참조)에 의해 피부 콜라겐 생성 촉진 작용이 확인되는 유단백질 분획을 조제하였다. 양이온 교환수지의 술폰화 키토펄(후지보세키 제조) 0.5 ℓ를 충전한 직경 10 ㎝의 칼럼을 탈이온수로 충분히 세정하였다. 이 칼럼에 미살균 탈지유 50 ℓ를 유속 100 ㎖/min로 통액한 후, 이 칼럼을 탈이온수로 충분히 세정하고, 0.95 M 염화나트륨을 포함하는 0.05 M 인산완충액(pH 7.0) 2.5 ℓ를 통액하여 수지에 흡착된 단백질을 용출시켰다. 그리고, 이 용출액을 역침투(RO)막 처리에 의해 탈염하고, 농축한 후, 동결 건조시켜 분말형의 유단백질 분획을 얻었다. 이 조작을 2회 반복하여 104 g의 단백질 분획을 얻었다. 이 단백질 분획의 등전점은 7.0∼8.5로서, 이 단백질 분획에 포함되는 염기성 아미노산은 17.8%였다.

실시예 1

양이온 교환수지의 술폰화 키토펄(후지보세키 제조) 0.5 ℓ를 충전한 직경 10 ㎝의 칼럼을 탈이온수로 충분히 세정하였다. 이 칼럼에 미살균 탈지유 50 ℓ를 유속 100 ㎖/min로 통액한 후, 이 칼럼을 탈이온수로 충분히 세정하고, 0.15 M 염화나트륨을 포함하는 0.05 M 인산완충액(pH 7.0) 2.5 ℓ를 통액하여 수지에 흡착된 단백질을 용출시켰다. 그리고, 이 용출액을 역침투(RO)막 처리에 의해 탈염하고, 농축한 후, 동결 건조시켜 분말형의 유단백질 분획을 얻었다. 이 조작을 10회 행하고, 유단백질 분획 24.2 g을 얻었다. 이 분획은 분자량이 6,000∼150,000 달톤, 등전점이 6.0∼11.0이고, 이 유단백질 분획에 포함되는 구성 아미노산 중, 염기성 아미노산은 12∼14%였다. 또한, 염기성 아미노산/산성 아미노산비는 0.5∼0.7이었다. 얻어진 유단백질 분획은 그대로 본원 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제로서 사용할 수 있다.

실시예 2

양이온 교환수지의 술폰화 키토펄(후지보세키 제조) 0.5 ℓ를 충전한 직경 10 ㎝의 칼럼을 탈이온수로 충분히 세정하였다. 이 칼럼에 미세균 탈지유 50 ℓ를 유속 100 ㎖/min로 통액한 후, 이 칼럼을 0.05 M 염화나트륨을 포함하는 0.05 M 인산완충액(pH 7.0)으로 충분히 세정하고, 0.25 M 염화나트륨을 포함하는 0.05 M 인산완충액(pH 7.0) 2.5 ℓ를 통액하여 수지에 흡착된 단백질을 용출시켰다. 그리고, 이 용출액을 역침투(RO)막 처리에 의해, 탈염하고, 농축한 후, 동결 건조시켜 분말형의 유단백질 분획을 얻었다. 이 조작을 5회 행하고, 유단백질 분획 12.8 g을 얻었다. 이 분획은 분자량 6,000∼150,000 달톤, 등전점은 6.0∼11.0이고, 이 유단백질 분획에 포함되는 구성 아미노산 중, 염기성 아미노산은 12∼14%였다. 또한, 염기성 아미노산/산성 아미노산비는 0.5∼0.7이었다. 얻어진 유단백질 분획은 그대로 본원 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제로서 사용할 수 있다.

실시예 3

실시예 1에서 얻어진 유단백질 분획 24.2 g을 증류수 10 ℓ에 용해한 후, 펩신(간토카가쿠 제조)을 2% 농도가 되도록 첨가하여 37℃에서 1시간 동안 교반하면서 가수분해하였다. 계속해서, 수산화나트륨 용액으로 pH 6.8로 중화시킨 후, 1% 판크레아틴(시그마사 제조)을 첨가하여 37℃에서 2시간 동안 반응시켰다. 반응 후, 80℃에서 10분간 가열 처리하여 효소를 실활시킨 후, 유단백질 분획의 분해물 23.1 g을 얻었다. 얻어진 유단백질 분획의 분해물은 그대로 본원 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제로서 사용할 수 있다.

실시예 4

실시예 2에서 얻어진 유단백질 분획 12.8 g을 증류수 8 ℓ에 용해한 후, 트립신(간토카가쿠 제조)을 2% 농도가 되도록 첨가하여 37℃에서 1시간 동안 교반하면서 가수분해하였다. 계속해서, 수산화나트륨 용액으로 pH 6.6으로 중화시킨 후, 1% 판크레아틴(시그마사 제조)을 첨가하여 37℃에서 2시간 동안 반응시켰다. 반응 후, 80℃에서 10분간 가열 처리하여 효소를 실활시킨 후, 유단백질 분획의 분해물 11.7 g을 얻었다. 얻어진 유단백질 분획의 분해물은 그대로 본원 발명의 피부 콜라겐 생성 촉진제로서 사용할 수 있다.

[시험예 1]

참고예 1에서 얻어진 유단백질 분획 및 실시예 1에서 얻어진 유단백질 분획, 실시예 3에서 얻어진 유단백질 분획의 분해물에 대해서, 래트를 이용한 동물실험에 의해 콜라겐 생성 촉진 작용을 조사하였다. 7주령의 Wistar계 수컷 래트를, 생리 식염수 투여군(A 군), 참고예 1에서 얻어진 유단백질 분획을 래트 체중 1 ㎏당 10 ㎍ 투여하는 군(B군), 참고예 1에서 얻어진 유단백질 분획을 래트 체중 1 ㎏당 100 ㎍ 투여하는 군(C군), 실시예 1에서 얻어진 유단백질 분획을 래트 체중 1 ㎏당 10 ㎍ 투여하는 군(D군), 실시예 1에서 얻어진 유단백질 분획을 래트 체중 1 ㎏당 100 ㎍ 투여하는 군(E군), 실시예 3에서 얻어진 유단백질 분획의 분해물을 래트 체중 1 ㎏당 10 ㎍ 투여하는 군(F군), 실시예 3에서 얻어진 유단백질 분획의 분해물을 래트 체중 1 ㎏당 100 ㎍ 투여하는 군(G군)의 7시험군(n=6)으로 나누어 각각을 매일 1회 존데로 투여하여 10주간 사육하였다. 피부의 콜라겐량에 대해서는, 래트의 진피를 Nimni 연구진의 방법(Arch. Biochem. Biophys., 292페이지, 1967년 참조)에 따라 처리한 후, 가용성 분획에 포함되는 히드록시프롤린량을 측정하였다. 히드록시프롤린은 콜라겐에만 포함되는 특수한 아미노산으로, 콜라겐을 구성하는 전체 아미노산의 약 10%를 차지하기 때문에 콜라겐량의 추정이 가능하다(아사노 류지 연구진, Bio Industory, 12페이지, 2001년 참조). 그 결과를 표 1에 나타낸다.

수치는, 평균치±표준편차(n=6)를 나타낸다. 또한, ※는 대조군인 A군과 비교하여 유의차가 있는 것을 나타낸다(p<0.05).

이것에 따르면, 10주간 후의 가용성 분획 중 히드록시프롤린량은, A군에 비하여 B군, C군, D군, E군, F군 및 G군으로 유의하게 높은 값을 나타내었다. 또한, 실시예 1에서 얻어진 유단백질 분획 및 실시예 3에서 얻어진 유단백질 분획의 분해물은, 참고예 1에서 얻어진 유단백질 분획에 비하여 약 2배의 효과가 있는 것을 알 수 있었다. 이것으로부터, 본 발명의 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물에는 피부 콜라겐 생성 촉진 작용이 있는 것이 밝혀져 피부 콜라겐 생성 촉진제로서 유용하다는 것이 제시되었다. 또한, 이 피부 콜라겐 생성 촉진 작용은 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 래트 체중 1 ㎏당 최저 10 ㎍ 투여한 경우에 확인되는 것이 밝혀졌다.

실시예 5

표 2에 나타낸 배합으로, 피부 콜라겐 생성 촉진제를 배합한 음료를 통상적인 방법에 의해 제조하였다. 제조한 음료의 풍미는 양호하고, 상온 1년간 보존에 의해서도 풍미가 열화하는 일이 없으며, 침전 등의 문제도 없었다.

실시예 6

표 3에 나타낸 배합의 도우를 통상적인 방법에 의해 제작하고, 성형한 후, 배소(焙燒)하여 피부 콜라겐 생성 촉진제를 배합한 비스킷을 제조하였다.

실시예 7

표 4에 나타낸 배합으로, 피부 콜라겐 생성 촉진제를 통상적인 방법에 의해 제조하였다.

표 5에 나타낸 조성으로 각 성분을 혼합하고, 유화 온도 85℃에서 유화하여 피부 콜라겐 생성 촉진제를 배합한 가공 치즈를 조제하였다.

[시험예 2]

실시예 2에서 얻어진 유단백질 분획(실시예품 2) 및 실시예 4에서 얻어진 유단백질 분획의 분해물(실시예품 4)에 대해서, 정상 인간 섬유아세포주[백인 여성의 피부로부터 채취된 CCD45SK(ATCCRL 1506)]를 이용한 실험에 의해 피부 콜라겐 생성 촉진 작용을 조사하였다. 10 용량% 소 태아 혈청(이하 FBS라 약기함) 함유 변법 이글 배지(MEM, 10-101, 다이니폰세이야쿠사 제조)를 이용하여 정상 인간 섬유아세포주를 4×10⁴개/웰/0.4 ㎖가 되도록 24웰 플레이트에 파종하고, 5% 탄산가스, 포화 수증기 하, 37℃에서 24시간 동안 배양한 후, 0.6 용량% FBS 함유 MEM 배지로 치환하였다. 그리고, 실시예 2에서 얻어진 유단백질 분획(실시예품 2) 및 실시예 4에서 얻어진 유단백질 분획의 분해물(실시예품 4)을 각 웰에 0.1 용량%가 되도록 첨가(n=6)하여 24시간 동안 배양한 후, β-아미노프로피오니트릴을 50 ㎍/㎖, 트리튬-L-프롤린을 1 μCi/㎖가 되도록 첨가하고, 24시간 더 배양하여 배양액을 얻었다. 이와 같이 하여 얻어진 배양액으로부터, Webster 연구진의 방법(Analytical Biochemistry, 220 페이지, 1979년 참조)에 따라 콜라겐 분획을 분획하고, 콜라겐 분획에 포함된 방사능을 측정하였다. 또한, 대조로서, 유단백질 분획 및 유단백질 분획의 분해물을 첨가하지 않고 동일한 시험을 행하였다. 그 결과를 표 6에 나타낸다.

수치는, 평균치±표준편차(n=6)를 나타낸다. 또한, ※는 대조군과 비교하여 유의차가 있는 것을 나타낸다(p<0.05).

이것에 따르면, 유단백질 분획 및 유단백질 분획의 분해물을 첨가한 군은, 유단백질 분획 및 유단백질 분획의 분해물을 첨가하지 않은 군(대조)에 비하여 모두 2배 이상의 콜라겐 생성 촉진능을 나타내었다. 이것으로부터, 본 발명의 유단백질 분획 및 유단백질 분획의 분해물에는 피부 섬유아세포에 작용하여 콜라겐 생성을 촉진하는 작용이 있는 것이 밝혀져 피부 콜라겐 생성 촉진제로서 유용하다는 것이 제시되었다.

실시예 8

표 7에 나타낸 배합의 화장수를 통상적인 방법에 의해 제조하였다.

실시예 9

표 8에 나타낸 배합의 크림을 통상적인 방법에 의해 제조하였다.

[시험예 3]

실시예 8에서 얻어진 화장수 및 실시예 9에서 얻어진 크림을 이용하여 실사용 테스트를 행하였다. 비교품으로는 유단백질 분획 및 유단백질 분획의 분해물을 제외한 것 이외에는 실시예 8 및 실시예 9와 동일한 배합의 것을 이용하였다. 안면의 처짐이나 잔주름이 확인되는 건조 피부를 가진 성인 여자 20명을, 각각 10명씩 무작위로 2군(A, B군)으로, 또한, 손에 피부 거칠음이 확인되는 여자 20명을, 각각 10명씩 무작위로 2군(C, D군)으로 나누어 A군의 안면에는 본 발명품의 화장수 2 g을, B군의 안면에는 비교품의 화장수 2 g을, C군의 손가락에는 본 발명품의 크림 2 g을, D군의 손가락에는 비교품의 크림 2 g을, 각각 1일 2회 통상의 사용 상태와 마찬가지로 10일간 도포하게 했다. 결과를 표 9에 나타낸다.

표 9로부터, 본 발명품의 화장수는, 비교품의 화장수에 비하여 건조감의 개선, 피부 거칠음 등의 개선이 현저하고, 피부 콜라겐 생성 촉진 효과가 우수한 것이 밝혀졌다. 또한, 본 발명품의 크림에 대해서도 비교품의 크림에 비하여 건조감의 개선, 피부 거칠음에 현저한 개선을 볼 수 있고, 피부 거칠음 등의 자연 증악 억제 효과를 갖는 것이 밝혀졌다.

Claims

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하기 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 배합한, 피부의 건조 방지, 피부의 거칠음 방지, 피부의 장력 유지 중 하나 이상에 유용한 피부 콜라겐 생성 촉진용 음식품:
<유단백질 분획>
하기 (a) 내지 (c)의 특성을 갖는 유단백질 분획:
(a) 젖 유래인 것.
(b) 소듐도데실설페이트-폴리아크릴아미드겔(SDS-PAGE) 전기영동으로 측정했을 때, 분자량 6,000∼150,000 달톤 범위의 단백질을 함유하는 분획인 것.
(c) 구성 아미노산 조성 중에 염기성 아미노산을 12∼14 중량% 함유하고, 또한, 염기성 아미노산/산성 아미노산 비가 0.5∼0.7의 범위인 것.
<유단백질 분획의 분해물>
하기 (a) 내지 (c)의 특성을 갖는 유단백질 분획의 분해물로서, 하기 유단백질 분획을 단백질 분해효소로 분해하여 평균 분자량을 4,000 달톤 이하로 한 분해물:
(a) 젖 유래인 것.
(b) 소듐도데실설페이트-폴리아크릴아미드겔(SDS-PAGE) 전기영동으로 측정했을 때, 분자량 6,000∼150,000 달톤 범위의 단백질을 함유하는 분획인 것.
(c) 구성 아미노산 조성 중에 염기성 아미노산을 12∼14 중량% 함유하고, 또한, 염기성 아미노산/산성 아미노산 비가 0.5∼0.7의 범위인 것.
하기 유단백질 분획 또는 유단백질 분획의 분해물을 배합한, 피부의 건조 방지, 피부의 거칠음 방지, 피부의 장력 유지 중 하나 이상에 유용한 피부 콜라겐 생성 촉진용 화장료:
<유단백질 분획>
하기 (a) 내지 (c)의 특성을 갖는 유단백질 분획:
(a) 젖 유래인 것.
(b) 소듐도데실설페이트-폴리아크릴아미드겔(SDS-PAGE) 전기영동으로 측정했을 때, 분자량 6,000∼150,000 달톤 범위의 단백질을 함유하는 분획인 것.
(c) 구성 아미노산 조성 중에 염기성 아미노산을 12∼14 중량% 함유하고, 또한, 염기성 아미노산/산성 아미노산 비가 0.5∼0.7의 범위인 것.
<유단백질 분획의 분해물>
하기 (a) 내지 (c)의 특성을 갖는 유단백질 분획의 분해물로서, 하기 유단백질 분획을 단백질 분해효소로 분해하여 평균 분자량을 4,000 달톤 이하로 한 분해물:
(a) 젖 유래인 것.
(b) 소듐도데실설페이트-폴리아크릴아미드겔(SDS-PAGE) 전기영동으로 측정했을 때, 분자량 6,000∼150,000 달톤 범위의 단백질을 함유하는 분획인 것.
(c) 구성 아미노산 조성 중에 염기성 아미노산을 12∼14 중량% 함유하고, 또한, 염기성 아미노산/산성 아미노산 비가 0.5∼0.7의 범위인 것.
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