KR101464958B1

KR101464958B1 - 비타민나무 열매 추출물을 이용한 사과의 재배방법

Info

Publication number: KR101464958B1
Application number: KR1020130167415A
Authority: KR
Inventors: 박규원
Original assignee: 박규원
Priority date: 2013-12-30
Filing date: 2013-12-30
Publication date: 2014-11-25
Anticipated expiration: 2033-12-30

Abstract

본 발명은 비타민나무 열매 추출물을 이용한 사과의 재배방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 비타민나무 열매를 믹서기 또는 압착기로 으깬 후, 체로 걸러 부직포로 여과하여 비타민나무 열매 추출물을 추출하고, 추출된 비타민나무 열매 추출물을 설탕과 무게대비 1대1로 혼합하여 상온에서 6개월 이상 발효시키고, 상기 발효된 비타민나무 열매 추출물을 필요한 만큼씩 물과 식물성 계면활성제를 혼합하여 엽면비료를 제조하여 상기 엽면비료를 사과나무에 살포하여 사과를 재배하는 것을 특징으로 하며, 상기 엽면비료는 발효된 비타민나무 추출물 20cc ~ 90cc, 바람직하게는 30cc를 물 10리터에 혼합한 후, 식물성 계면활성제 코코베타인 3cc ~ 15cc, 바람직하게는 5cc와 수용성 아연 10g ~ 60g, 바람직하게는 20g을 혼합하여 이루어지고, 상기 엽면비료 살포는 엽면비료를 6월부터 10월까지 월 2회씩 총 10회에 걸쳐 살포하며, 엽면비료 살포량은 1회 살포시 사과재배 단지의 1,000㎡ 당 엽면비료 100L를 살포하는 것을 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 한다.

Description

비타민나무 열매 추출물을 이용한 사과의 재배방법{Cultivation method of apples using sea buckthorn fruit extracts}

비타민나무 열매 추출물을 이용한 사과의 재배방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 비나민나무 열매 추출물을 발효시켜 이를 물에 희석하고, 식물성 계면활성제를 혼합하여 엽면비료를 제조하여 사과나무 잎에 옆면시비를 하여 사과를 재배하는 방법에 관한 것이다.

산소는 우리가 살아가는 데 없어서는 안 되는 생명의 필수인자이다. 산소가 부족하면 우리 신체의 세포는 호흡할 수도 없고 대사가 일어나지도 않아 생명을 유지할 수 없게 된다. 이처럼 산소는 우리가 생명을 유지하는 데 없어서는 안 되는 중요한 역할을 하는데, 한편으로는 호흡으로 몸 안에 들어온 산소 중 일부가 우리 신체의 대사과정 중에 불가피하게 변형되어 활성산소가 되어 우리 몸의 세포를 손상시키는 독작용을 하게 된다. 이러한 독작용은 대사 중에 생성된 유리(활성)산소기(프리래디컬, free radical) 때문에 생기는 것으로 알려지고 있다. 프리래디컬이란 정상적인 원자 또는 분자가 전자를 하나 이상 잃어 짝이 없어져 불안정한 상태로 존재하는 것을 말한다. 이 프리래디컬화된 원자 또는 분자는 스스로 안정화되기 위해 주변의 원자나 분자로부터 전자를 하나 빼앗아 안정된 상태가 되려고 하는데 이러한 전자 빼앗기 과정은 연쇄적으로 일어나 마지막 원자나 분자가 안정화될 때까지 진행된다. 미국의 존스 홉킨스 대학 의학부는 1991년 현대인이 앓고 있는 질병의 95% 이상이 이 프리래디컬에 의한 것이라고 발표한바 있다.

프리래디컬 현상은 신체 내에 자연스럽게 존재하는 것으로, 프리래디컬이 과도하게 진행되면 이를 줄여주는 항산화효소도 체내에 이미 존재하고 있는데 그 대표적인 것이 SOD(Superoxide Dismutase)나 Catalase, Peroxidase, Glutathione Peroxidase 같은 효소들이다. 하지만 스트레스, 자외선, 중금속 오염, 흡연, 과음, 과도한 운동 등 여러 가지 이유로 활성산소가 체내에 허용량 이상으로 많이 발생하면, 활성산소의 반응속도가 세포 재생 속도를 앞지르게 되며, 활성산소가 제대로 제거되지 않으면 정상 세포에 대단히 큰 영향을 주게 된다. 활성산소는 세포의 지질막을 변성시켜 세포 내의 RNA, DNA 등의 핵산을 공격하여 산화를 촉진시키며, 단백질의 과산화반응을 유도하여 체내 효소 및 호르몬의 기능을 저하시키게 된다. 이러한 반응들이 고혈압, 협심증, 심근경색, 뇌경색, 대동맥류 등 혈관 관련 질환을 유발시키며, 암과 아토피, 알러지, 류머티스 관절염 등의 자가면역질환의 원인이 되기도 한다. 이러한 현상들이 총체적으로 노화의 주원인이 된다.

항산화제는 이런 프리래디컬에게 전자를 내어주어 전자 빼앗기 연쇄작용을 중단시키는 작용을 한다. 즉 체내에 항산화효소가 열세이거나 프리래디컬이 과도하게 생성될 때 외부에서 항산화제를 투입해주면 세포의 산화를 막을 수 있다.

대표적인 항산화제로는 안토시아닌, 비타민 A, C, E, 베타카로틴, 아연 등이 있으며, 특히 비타민E는 지용성 비타민의 하나로, 식품에는 네 종류의 토코페롤(tocopherol:α, β, γ, δ)과 네 종류의 토코트리에놀(tocotrienol:α, β, γ, δ) 형태로 나타나지만 이 중 가장 흔하고 생체활성이 큰 것은 α-토코페롤로서 비타민 E의 대명사처럼 사용되고 있다.

이러한 비타민 E의 인체내 중요한 기능은 항(抗)산화제로서 세포 내에서 산화되기 쉬운 물질, 특히 세포막을 구성하고 있는 불포화지방산의 산화를 억제함으로써 세포막의 손상과 나아가서 조직의 손상을 막아주므로 치매예방, 동맥경화 예방, 항암효과, 백내장 예방 및 치료의 효과가 있다고 한다.

비타민 E가 결핍되면 동물에서는 정상적인 새끼의 생산기능이 상실되고, 사람에서는 드물기는 하나 적혈구의 막이 손상되어 빈혈이 생길 수도 있다고 한다.

비타민E가 많이 함유된 식품에는 소맥배아유, 쌀겨, 콩기름, 옥수수 기름, 면실유, 채소류, 녹황색 야채, 콩류, 소, 돼지의 간 등이 있다.

2013년 12월에는 제약업계에서 만들어 판매하는 종합비타민이 효능 없다는 연구결과가 잇따르고 있다. 미국 CBS방송은 하버드대 공공보건대학원 연구진이 만 65세 노인 6,000여 명을 대상으로 종합비타민과 가짜 약을 12년간 복용하게 한 뒤 기억력 시험을 한 결과 양측이 차이를 보이지 않았다고 보도했다. 또 존스홉킨스대 연구에서도 종합비타민과 미네랄 섭취가 심장마비 혹은 심근경색을 향한 효능이 없다는 결론이 나왔다. 연구진은 종합비타민과 가짜 약을 5년간 먹은 실험군의 심장마비, 흉통, 뇌졸중 확률, 사망률 등이 다르지 않다는 것을 확인했다.

연구진들은 종합비타민 효능 없다는 연구결과와 함께 과일, 채소, 견과류를 많이 먹고 운동하는 것이 종합비타민 섭취보다 낫다고 조언했다.

한편, 지금까지 야채 및 과일에 이러한 비타민E의 함량을 높이기 위한 다양한 연구가 많이 이루어졌다.

종래기술로는 대한민국 등록특허공보 제0823036호, 대한민국 등록특허공보 제0910504호, 미국 등록특허 US 7,208,659호에 개시되어 있다.

그러나, 종래 기술은 농산물 재배기간 중 작물의 엽면에 비료를 뿌려주는 방법이 시행되고 있는데 옆면시비를 하면 잎사귀 표면의 왁스층에 의한 표면장력으로 비료의 흡수가 어렵고, 살포액이 쉽게 휘산되어 식물에 흡수 이용되는 량이 매우 적다. 이러한 단점을 극복하기 위해 인체에 해로운 유기합성물질인 침투제를 사용하는 경우가 있는데 이는 작물과 작물을 소비하는 사람에게 결코 친환경적인 방법이라고 할 수 없다는 문제점이 제기되어 왔었다.

또한, 미국 등록특허는 비타민 C2라 할 수 있는 식물의 플라보노이드 성분 함량을 높이는 방법에 대한 발명에서는 토마토의 유전자를 변형하여서 플라보노이드 성분 함량을 높이는 방법을 사용하였으나 유전자 변형을 통한 식물은 장기간 복용하였을 경우 발생가능한 부작용에 대한 걱정으로 사람들이 구입을 기피하기 때문에 널리 이용하기 어렵다는 문제점이 있었다.

이에, 본 발명은 상기의 제반 문제점을 해결하기 위해 창안된 것으로서, 본 발명의 과제는 쉽게 구입하여 먹을 수 있는 사과를 생산하여 이를 복용한 사람이 건강한 생활을 하는데 도움을 주고, 아울러 인체와 식물체에 안전한 천연 계면활성제를 사용하여 사과나무의 면역성을 높여 노화억제와 병해충발생을 줄여 농약사용횟수도 줄여 안전한 농산물 생산에 기여하며, 영농비를 절감할 수 있도록 하는 데 있다.

상기 목적을 달성하기 위해 본 발명의 비타민나무 열매 추출물을 이용한 사과의 재배방법은 비타민나무 열매를 믹서기 또는 압착기로 으깬 후, 체로 걸러 부직포로 여과하여 비타민나무 열매 추출물을 추출하고, 추출된 비타민나무 열매 추출물을 설탕과 무게대비 1대1로 혼합하여 상온에서 6개월 이상 발효시키고, 상기 발효된 비타민나무 열매 추출물을 필요한 만큼씩 물과 식물성 계면활성제를 혼합하여 엽면비료를 제조하여, 상기 엽면비료를 사과나무에 살포하여 사과를 재배하는 것을 특징으로 하며, 상기 엽면비료는 발효된 비타민나무 추출물 20cc ~ 90cc, 바람직하게는 30cc를 물 10리터에 혼합한 후, 식물성 계면활성제 코코베타인 3cc ~ 15cc, 바람직하게는 5cc와 수용성 아연 10g ~ 60g, 바람직하게는 20g을 혼합하여 제조되고, 상기 엽면비료 살포는 엽면비료를 6월부터 10월까지 월 2회씩 총 10회에 걸쳐 엽면시비하며, 엽면비료 살포량은 1회 살포시 사과재배 단지의 1,000㎡ 당 엽면비료 100L를 살포하는 것을 포함한다.

본 발명은 사과를 생산하여 이를 복용한 사람이 건강한 생활을 할 수 있도록 하고, 아울러, 본 발명은 사과나무의 면역성 회복으로 병충해 방제횟수를 줄임으로써 방제비용을 낮춰 사과의 생산가를 낮추고, 생산량을 증대시켜 농가 소득을 향상시키는 효과가 기대된다.

이하에서는 본 발명에 따른 비타민나무 열매 추출물을 이용한 사과의 재배방법의 일 실시 예에 대해 상세히 설명한다.

본 발명에서 사용하는 엽면비료의 주원료인 비타민나무(sea buckthorn)는 원산지가 중앙아시아 또는 고비사막에서 자생하는 수종으로, 뿌리혹박테리아가 있어 질소고정능력이 강하며 내한성이 강한 나무로 그 열매에는 비타민을 많이 함유하고 있다하여 우리나라에서는 비타민나무라는 명칭을 쓰며, 특히 비타민 E는 콩기름의 20배, 비타민 C도 키위의 3~6배, 사포닌은 한국인삼의 4배 정도를 함유하고 있으며, 기타 24종의 미네랄, 18종의 아미노산, 8종류의 비타민류 등 각종 영양소가 많으며, 그 과실은 생식, 가공식품, 의약품, 화장품 등으로 다양하게 이용되고 있다.

본 발명은 (a) 비타민나무 열매 추출물 추출단계, (b) 비타민나무 열매 추출물 발효단계, (c) 엽면비료 조제단계와, (d) 엽면비료 살포단계를 포함하여 이루어진다.

상기 (a) 비타민나무 열매 추출물 추출단계는 보통 가을철에 비타민나무 열매를 구입하여 비타민나무 열매를 믹서기에 넣어 믹서하거나, 압착기에 넣고 으깬 후, 체로 걸러 부직포를 이용하여 추출물을 여과한다.

상기 (b) 비타민나무 열매 추출물 발효단계에서는 여과된 비타민나무 열매 추출물은 변질되기 쉬우므로 설탕과 무게대비 1대1의 비율로 혼합한 후 밀봉하여 상온에서 6개월 이상 숙성시킨다. 농산물 재배기간 중 추출물을 바로 엽면에 시비하면 살포액이 쉽게 휘산되어 식물에 흡수 이용되는 양이 매우 적다. 최근에 식물에 흡수되는 양을 높이기 위해 인체에 해로운 유기합성물질인 침투제를 사용하는 경우가 있는데 이는 작물과 과실을 복용하는 사람에게 부작용을 초래할 수 있으므로 작물과 인체에 안전하며 침투량을 높일 수 있는 친환경적인 설탕을 혼합하고 흡수율을 높이기 위해 발효시켜 이용한다.

비타민나무 열매는 9월~10월에 성숙하는데 10월 ~ 11월에 발효를 시작하여 5월 ~ 6월 경까지 발효시키는 것이 바람직하며 발효된 비타민나무 추출물은 저온창고에 보관하면서 필요한 만큼 사용하면 된다.

상기 (c) 엽면비료 조제단계에서는 엽면비료는 필요할 때마다 발효된 비타민나무 추출물을 저온창고에서 꺼내 발효된 비타민나무 추출물 20 ~ 90cc, 바람직하게는 30cc를 물 10리터에 혼합한 후, 식물성 계면활성제 코코베타인 3 ~ 15cc, 바람직하게는 5cc와, 수용성 아연 10g ~ 60g, 바람직하게는 20g을 넣어 잘 섞으면 옆면비료가 완성된다.

발효된 비타민나무 추출물은 20cc이하에서는 희석량이 적어 효과가 급격히 저하되고, 150cc이상인 경우에는 적정량인 30cc를 투입한 것과 비교시 유의미한 추가효과가 없으므로 30cc정도를 물 10리터에 투입하는 것이 바람직하다.

식물성 계면활성제인 코코베타인(Cocoamidopropyl Betaine)은 코코넛 오일에서 얻어지는 인체에 안전한 양성이온성 천연 계면활성제이다. 특히 코코베타인은 표면장력이 강할 때 엽면시비의 효과가 낮고, 엽면시비시 물방울이 잘 형성되는 합성 계면활성제의 결점을 보완할 수 있는 것으로, 식물 표면에 고르게 부착되어 영양소가 고르게 흡수되게 한다. 또한, 양쪽성 계면활성제이므로 친수성, 지용성, 소수성, 산성, 중성, 알카리성 등의 물질을 희석할 때에도 용이하고, 표면장력을 제거하여 농약, 영양제, 기능성제제 살포 등에도 효과가 뚜렷하게 나타난다.

코코베타인은 3cc이하에서는 희석량이 적어 효과가 거의 없게 되고, 15cc이상인 경우에는 적정량인 5cc정도를 투입한 것과 비교시 효과의 차이가 크지 않으므로 적정량인 5cc정도를 투입하는 것이 바람직하다.

한편, 엽면비료는 수용성 아연 특히 묽은 황산 아연을 더 포함하는 것이 바람직하며, 아연은 식물생장에 필수 미량원소로 식물생장에 중요한 역할을 한다. 이러한 수용성 아연은 식물의 면역성 회복으로 병충해 방제횟수를 줄이고, 방제가를 낮춰 농산물의 생산가를 낮추는 반면 생산량을 증대시키는 장점이 있다.

또한, 아연은 인체에 흡수되면 독성물질의 흡수를 막고, DNA 손상을 방어하는 기능도 하여 기능성 농산물 생산방법에 이용되기도 한다.

화학비료사용량이 많은 우리나라 토양에서는 아연의 흡수가 곤란한 경우가 많으므로 엽면비료에 포함하여 살포하는 것이 바람직하다.

수용성 아연 10g이하를 투입하면, 표면장력을 거의 제어하지 못하고, 80g이 넘으면 길항작용으로 다른 원소의 흡수를 방해하는 역효과가 발생하므로 80g이 넘지 않도록 하며, 바람직하게는 20g정도를 투입하는 것이 좋다.

상기 (d) 엽면비료 살포단계는 상기의 과정을 통해 제조된 엽면비료를 사과나무 잎에 살포하는 단계이다.

엽면비료 살포는 6월부터 10월까지 월 2회씩 총 10회에 걸쳐 사과나무의 엽면에 살포하게 된다.

엽면비료 살포량은 1회 살포시 사과재배 단지의 1,000㎡ 당 엽면비료 100L를 살포하는 것이 바람직하다.

이와 같이 비타민나무 열매 추출물 용해액이 포함된 엽면비료는 식물의 면역성을 높여 노화를 억제하므로 병해충발생을 줄여 농약의 살포횟수도 줄여 영농비가 절감되어 경제적인 효과가 있다.

본 발명에 따른 재배방법에 의해 생산된 사과와 일반적인 재배방법에 의해 생산된 사과의 항산화 활성 시험분석을 한국생명공학연구원에 의뢰하여 다음과 같은 결과를 얻었다.

1. 재료 및 방법

가. 재료

각 시료 당 3개씩의 사과를 사용함.

시료1: 일반적인 재배방법에 의해 생산된 사과

시료2: 본 발명에 따른 재배방법에 의해 생산된 사과

나. 방법(시료의 추출 및 준비)

각 사과 시료 3개씩을 취하여 사과 1개당 100g을 골고루 취하여 시료당 300g 씩을 분쇄기로 곱개 마쇄한 다음 이 시료를 50 ml 원심분리 튜브에 넣고 4에서 10,000 g로 20분간 저온 원심분리하여 상등액을 취하여 시료 추출액을 얻었다. 이 추출액을 각기 1.3ml씩을 취하여 다시 14000 rpm에서 5분간 원심분리한 후 상징액 1ml 씩을 취하하여 즉시 항산화 활성측정시료로 사용하였다.

다. 항산화활성 측정

항산화활성을 DPPH 라디칼 소거활성, 및 ABTS 라디칼 소거활성 및 superoxide 라디칼 소거활성 등을 측정하여 조사하였다. 활성 측정시험은 각각의 시료들의 시료처리량을 달리하여 (20, 30, 40) 항산화 활성을 측정을 하여 시료 처리량에 따른 항산화활성의 변화를 조사하고 각 시료 당 최적의 비교조건을 찾아내어 각 시료의 항산화 활성을 비교하였다. 이때 각각의 실험은 3회 반복실험을 실시하였다. 최종 항산화 활성값은 각 시험에서 얻어진 항산화 활성을 평균하여 활성을 나타내었다.

1) DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 라디칼 소거활성

96-well 플래이트의 well당 에탄올에 녹인 0.6 mM DPPH 용액 90 ul에 각 시료 10 ul를 첨가한 후 30분간 반응을 시킨 다음 마이크로플래이트 측정기로 517 nm의 흡광도를 측정하였다. 이때 control은 시료 대신 증류수를 넣은 것으로 하였으며 blank는 DPPH용액 대신 에탄올을 넣은 것으로 하였다.

DPPH라디칼소거활성(%)=활성(%)=[(A_contol-A_sample)/(A_contol - A_blank)]x100

2) ABTS'+ scavenging activity

본 활성 측정법은 시료의 총 항산화 활성을 조사하는 방법으로 알려져 있는 방법으로서 시료의 ABTS 라디칼 2,2-azinobis(3-ethylbenzothiazoline- 6-sulfonate) (ABTS ^. +)] 소거능을 측정하는 것이다. ABTS 라디칼은 7 mM ABTS와 2,45 mM potassium persulfate를 암소에서 12시간 동안 반응시켜서 발생시켰으며, 이것을 PBS (pH 7.0)용액으로 734 nm에서의 흡광도가 1.0이 되도록 희석하였다. 96-well 플래이트 well에 시료 (시료처리량을 달리하여 5, 10, 15, 20, 30 에 대하여 실험 하였음)를 넣고 ABTS 용액 150ul를 가하여 5분간 반응시킨 다음 734 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료에 의하여 라디칼이 소거되는 만큼의 흡광도가 감소되는 정도를 측정하였으며 다음 식에 의하여 활성을 산출하였다.

ABTS 라디칼 소거활성(%) =

[1-(반응후 측정한 시료의 흡광도 변화 / 대조구의 흡광도변화)]100

ABTS 용액 대신 물을 첨가한 시료의 흡광도를 Blank로 하였으며, 시료 대신 물을 넣은 것을 control로 하였다.

3) Superoxide 라디칼 소거활성

Superoxide 라디칼 소거활성은 riboflavin/EDTA/Nitroblue tetrazolium (NBT) 방법을 이용하여 측정하였다. 96-well 플래이트 well당 50 mM potassium phosphate buffer (pH 7.8)에 녹인 0.03 mM riboflavin, 1 mM EDTA, 0.6 mM methionine 및 0.03mM NBT 혼합용액 150 ul와 각 시료용액(시료처리량을 달리하여 5, 10, 15, 20, 30 에 대하여 실험 하였음)을 첨가한 후 광화학반응에 의하여 발생된 수퍼옥사이드를 시료가 소거하는 활성을 측정하였다. 수퍼옥사이드 발생 광화학반응은 알루미늄 포일 광조사 상자에 설치된 2개의 형광램프를 이용하였으며 램프와 반응용기 간의 거리는 1000 lux가 되도록 조절하였으며 25도에서 5분간 반응시킨 다음 530 nm에서의 광흡수도를 마이크로플래이트 reader를 이용하여 측정하였다. 이때 control은 시료 대신 증류수를 첨가하였으며 5분간 광조사 후 530nm에서의 광흡수도 변화가 0.40이 되도록 하였다. 광화학반응에 의하여 발생된 수퍼옥사이드 라디칼은 NBT와 반응하여 청색의 formazan을 형성하여 광흡수도가 증가되는데 시료에 의하여 수퍼옥사이드 라디칼이 소거되면 formazan의 형성이 감소되어 광흡수도가 줄어든다. 따라서 시료의 수퍼옥사이드 소거활성은 반응전의 흡광도와 반응후의 흡광도를 측정하여 다음 식에 의하여 산출하였다.

Superoxide 라디칼 소거 항산화 활성(%) =

[1-(반응후 측정한 시료의 흡광도 변화 / 대조구의 흡광도변화)]×100

2. 결과

가. DPPH 라디칼 소거 항산화활성

1) 시료 처리량에 따른 DPPH 라디칼 소거 항산화 활성비교

그림 1. 시료처리량에 따른 시료의 DPPH 라디칼 소거활성.

시료의 처리량을 달리하여 각 시료의 DPPH 라디칼 소거활성을 측정한 결과 그림 1과 같은 결과를 얻었다. 이 결과로부터 각 시료간의 DPPH 라디칼 활성을 비교하기 위한 최적 시험조건은 40ul의 시료를 처리하였을 때임을 알 수 있었다.

2) 각 시료들 간의 DPPH 라디칼 소거 항산화 활성비교

각 시료들 간의 DPPH 라디칼 소거 항산화 활성을 비교하기 위한 최적 시험조건(시료 처리량 40ul)에서 각 시료들의 DPPH 라디칼 소거활성을 조사하였으며, 그 결과 그림 2와 같았다.

그림. 2. 각 시료들의 DPPH 라디칼 소거 항산화 활성.

나. ABTS 라디칼 소거 항산화활성

1) 시료 처리량에 따른 ABTS 라디칼 소거 항산화 활성비교

그림 3. 시료처리량에 따른 시료의 ABTS 라디칼 소거활성.

시료의 처리량을 달리하여 각 시료들의 ABTS 라디칼 소거활성을 측정하여 그림 3과 같은 결과를 얻었다. 이로부터 각 시료들 간의 ABTS 라디칼 활성을 비교하기 위한 최적 시험조건은 30ul의 시료를 처리하였을 때임을 알 수 있었다.

2) 각 시료들 간의 ABTS 라디칼 소거 항산화 활성비교

각 시료들 간의 ABTS 라디칼 소거 항산화 활성을 비교하기 위한 최적 시험조건(시료 처리량 30ul)에서 각 시료들의 ABTS 라디칼 소거활성을 조사하였으며, 그 결과는 그림 4와 같았다.

그림. 4. 각 시료들의 ABTS 라디칼 소거 항산화 활성.

다. Superoxide 라디칼 소거활성

1) 시료 처리량에 따른 superoxide 라디칼 소거 항산화 활성비교

그림 5. 시료처리량에 따른 시료의 superoxide 라디칼 소거활성.

시료의 처리량을 달리하여 각 시료의 superoxide 라디칼 소거활성을 측정한 결과 그림 5와 같았다. 이 결과로부터 각 시료간의 superoxide 라디칼 소거활성을 비교하기 위한 최적 시험조건은 10ul의 시료를 처리하였을 때임을 알 수 있었다.

2) 각 시료들 간의 superoxide 라디칼 소거 항산화 활성비교

각 시료들 간의 superoxide 라디칼 소거 항산화 활성을 비교하기 위한 최적 시험조건(시료 처리량 10ul)에서 각 시료들의 superoxide 라디칼 소거활성을 조사하였으며, 그 결과는 그림 6과 같았다.

그림. 6. 각 시료들의 superoxide 라디칼 소거 항산화 활성.

각 시료들의 항산화 활성을 측정하여 얻은 종합결과를 표 1에 나타내었다.

	시료1	시료2
DPPH 라디칼 소거능	1.00	1.27
ABTS 라디칼 소거능	1.00	1.25
Superoxide 라디칼 소거능	1.00	0.99

대조구 대비 시료들의 항산화 활성 비교값

3. 종합 고찰

각각의 사과 시료들에 대한 항산화 활성을 DPPH 라디칼 소거능, ABTS cation 라디칼 소거능 및 superoxide 라디칼 소거능을 측정하여 비교하였다. 그 결과 DPPH 라디칼 소거 항산활성은 일반적인 재배방법에 의해 생산된 사과(시료 1)에 비하여 본 발명에 따른 재배방법에 의해 생산된 사과(시료 2)는 1.27배 높았다. ABTS cation 라디칼 소거 항산화활성은 시료 1에 비하여 시료 2가 1.25배 높았다. 한편, superoxide 라디칼 소거 항산화 활성은 시료 1에 비햐여 시료 2는 0.99배로 비슷한 활성을 보였다.(표 1).

따라서 시험분석을 통해 종합적으로 항산화 활성결과를 살펴볼 때 일반적인 재배방법에 의해 생산된 사과에 비하여 본 발명에 따른 재배방법에 의해 생산된 사과가 우수한 항산화 활성을 나타냄을 알 수가 있다.

Claims

비타민나무 열매를 믹서기 또는 압착기로 으깬 후, 체로 걸러 부직포로 여과하는 비타민나무 열매 추출물 추출단계;
추출된 비타민나무 열매 추출물을 설탕과 무게대비 1대1로 혼합하여 상온에서 6개월 이상 숙성시키는 비타민나무 열매 추출물 발효단계;
상기 발효된 비타민나무 열매 추출물을 물과 식물성 계면활성제를 혼합하여 엽면비료를 제조하는 엽면비료 제조단계; 및 상기 엽면비료를 사과나무에 엽면살포하는 엽면비료 살포단계를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 비타민나무 열매 추출물을 이용한 사과의 재배방법.
제1항에 있어서,
상기 엽면비료 제조단계에서 엽면비료는 발효된 비타민나무 추출물 20cc ~ 90cc를 물 10리터에 혼합한 후, 식물성 계면활성제 코코베타인 3cc ~ 15cc와 수용성 아연 10g ~ 60g을 혼합하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 비타민나무 열매 추출물을 이용한 사과의 재배방법.
제1항 또는 제2항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 엽면비료 살포단계는 엽면비료를 6월부터 10월까지 월 2회씩 총 10회에 걸쳐 사과나무 엽면에 살포하며, 엽면비료 살포량은 1회 살포시 사과재배 단지의 1,000㎡ 당 엽면비료 100L를 살포하는 것을 특징으로 하는 비타민나무 열매 추출물을 이용한 사과의 재배방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 재배방법으로 생산한 사과.