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KR101363237B1 - 증강된 비율의 감마 인터페론 및 알파 인터페론을 포함하는안정화된 제형 - Google Patents

증강된 비율의 감마 인터페론 및 알파 인터페론을 포함하는안정화된 제형 Download PDF

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KR101363237B1
KR101363237B1 KR1020087013121A KR20087013121A KR101363237B1 KR 101363237 B1 KR101363237 B1 KR 101363237B1 KR 1020087013121 A KR1020087013121 A KR 1020087013121A KR 20087013121 A KR20087013121 A KR 20087013121A KR 101363237 B1 KR101363237 B1 KR 101363237B1
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페드로 로페스 사우라
야넬다 갈시아 베가
헥터 산타나 밀리안
아나 아귀렐라 발레토
롤란도 파에스 메이렐레스
로렌소 아나사가스티 안구로
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센트로 데 인제니에리아 제네티카 와이 바이오테크놀로지아
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Abstract

본 발명은 비경구적(액상 또는 동결건조 형태) 또는 국소적(겔, 연고 또는 크림)으로 적용되며 악성 또는 양성의 비-생리학적 조직 또는 기관 세포 성장을 포함하는 병리학적 증상의 치료를 위해 강화된 비율로 다른 양의 재조합 감마 인터페론 및 알파 인터페론을 포함하는 안정한 약학적 제형에 관한 것이다.
인터페론 감마, 인터페론 알파, 종양, 세포 성장

Description

증강된 비율의 감마 인터페론 및 알파 인터페론을 포함하는 안정화된 제형{STABLE FORMULATIONS CONTAINING ENHANCING PROPORTIONS OF GAMMA- AND ALPHA-INTERFERONS}
본 발명은 생물공항 및 의과학, 특히 인간의 다른 조직 또는 기관에서의 세포 성장을 저해하기 위한 상승효과 비율의 재조합 인터페론 감마 및 알파를 포함하는 안정화된 약학적 조성물에 관한 것이다.
인터페론 유형 I(영어로 "인터페론(interferons)", 약자로 IFNs)의 다양한 효과는 이의 적용의 우수한 치료학적 잠재력을 나타낸다. IFNs 적용은 여러 유형의 암의 치료에 유용하며 암은 백혈병(US 5830455), 기저세포암(US 5028422), 편평세포암(US 5256410), 유방암(US 5024833), 위장암(US 5444064; 5814640) 및 광선각화증(US 5002764)이다. 다른 세포 유형은 IFNs에 대하여 다양한 감수성을 나타내며 세포 성장을 저해하는 이의 능력에서의 차이를 나타내기 위하여(Dahl H. (1983). Human interferon and cell growth inhibition. VII. Reversibility of interferon activities. J Interferon Animal, 3:327-332; Willson J.K.V., Bittner G., et al. (1984) Antiproliferative activity of human interferons against ovarian cancer cells grown in human tumor stem cell assay. J Interferon Animal, 4:441-447; Hu R., Gan Y., et al. (1993) Evidence for multiple binding sites for several components of human lymphoblastoid interferon-alpha. J Biol Chem, 268:12591-12595), and to the activity antitumoral (Quesada JR., Talpaz M., et al. (1986) Clinical toxicity of interferons in cancer patients: to review. J Clin Oncol, 4:234-243) 세포 성장을 저해하는 농도는 광범위한 등급으로 변형시킬 수 있다 (Borden E., et al. (1981) Progress in Hematology. vol XII, Brown EB., editor, 299-339).
암 치료에서의 IFNs의 용도는 생체외 연구로부터의 가능성을 만족시키며 이의 강력한 생물학적 분자의 특성을 갖는다. 다른 치료학적 스케줄이 분명한 유용한 효과 및 충격 없이 실험되었다(Strander H., and Oberg K., (1992) Clinical use of interferons. Solid tumors INTERFERON. Principles and Medical Applications. Publishing Baron S., Coppenhaver DH., Dianzani F., Fleischmann WR., Jr. Hughes TK., Jr. Klimpel GR., Niesel DW., Staton GJ., and Tyring SK., 533-561).
치료에서 더 좋은 효과를 나타내기 위한 노력으로, IFN을 고투여량으로 사용하였으나 예상되는 유용하고 가능한 반응은 나타나지 않았으며 이는 상기 투여량으로 생성된 부작용 중 다양한 인자에 의한 것이다(Lane H. C. (1990) Interferon-alpha in patients with asymptomatic human immunodeficiency virus (HIV) infection. A randomized, placebo-controlled trial. Annals of internal Medicate, 112:805-811).
게다가, IFN 알파 및 IFN 감마는 켈로이드 섬유아세포로부터의 배양을 갖는 생체외 연구(Tredget EE., Wang R., et al. (2000) Transforming growth factor-beta mRNA and protein in hypertrophic scar tissues and fibroblasts: antagonism by IFN-alpha and IFN-gamma in vitro and in vivo. J Interferon Cytokine Animal, 20:143-151)에 기재되어 있다. 이러한 작업에서, IFNs 알파 및 감마 조합의 사용이 언급되었지만, 생체외 및 아동으로부터의 켈로이드로부터 기원하는 세포에서 결과 데이타가 나타났다. 이들 저자들은 어떠한 임상 실험도 실시하지 않았으며 인터페론에 덜 반응하는 성인 켈로이드의 세포에서의 IFNs 조합의 효과를 평가하지 않았다.
특허 EP 0107498은 흑색종 Hs294T의 세포주에서 인터페론 알파 및 감마의 조합을 나타냈으나 기저세포암 또는 신경교아세포종(GL-5) 또는 후두 암종(HEp-2)의 일차 배양과 같은 다른 유형의 세포에서의 효과는 나타나 있지 않다.
천연 IFN 알파 및 재조합 IFN 감마의 대안적인 사용은 또한 신장 및 폐 전이의 치료에 대하여 기술되었다(Fujii A., Yui-In K., et al. (1999) Preliminary results of the alternating administration of natural interferon-alpha and recombinant interferon-gamma for metastasic renal cell carcinoma BJU Int.; 84:399-404). IFN 알파 2나 알파 4 또는 혼성 델타 4 알파 2 Bgl II 알파 1과 IFN 감마와의 조합은 세포주 RT4(방광 암종) 및 A2182(폐 선암)에 대하여 기술되었으며 IFNs 유형 I 또는 IFN 감마 단독으로 사용했을 때보다 더 우수한 반증식 효과를 갖는다(Hubbell H.R., Craft J.TO., et al. (1987) Synergistic antiproliferative effect of recombinant alpha-interferons with recombinant gamma-interferon. J Biol Response Mod, 6:141-153). IFN 감마 (1000 IU/mL) 및 IFN 알파 2(1000 IU/mL)에 따른 시너지 효과는 세포주 A459(폐포 종양)(Martyre M. C., Beaupain R., et al. (1987) Potentiation of antiproliferative activity by mix of human recombinant IFN-alpha 2 and -gamma on growth of human cancer nodules maintained in continuous organotypic culture. Eur J Cancer Clin Oncol, 23:917-920) 뿐만 아니라 비소세포성 퇴행성 폐암종으로부터의 세포주(Hand A., Pelin K., et al. (1993) Interferon-alpha and interferon-gamma combined with chemotherapy: in vitro sensitivity studies in non-small cell lung-cancer cell lines. Anticancer Drugs, 4:365-368)에서 나타난다.
IFN 알파 및 IFN 감마의 조합은 세포주 HepG2로의 연구(Mizukoshi E., Kaneko S., et al. (1999) Up-regulation of type I interferon receptor by IFN-gamma. J Interferon Cytokine Animal, 19:1019-1023) 및 세포주 AVA5로의 연구(Okuse C., Rinaudo J. A., et al. (2005) Enhancement of antiviral activity against hepatitis C virus in vitro by interferon combination therapy. Antiviral Animal, 65:23-34)에서 기술되었다. 이들 저자는 항증식 효과를 측정하지 않았으며 세포주 HepG2에서 알파 및 감마 인터페론의 조합에서의 좀더 효과적인 비율도 측정하지 않았다. 게다가, 시너지 효과는 세포주 Hepa1-6, 즉 마우스 간암에서의 TNF 알파 및 IFN 감마에 대해서만 조사되었다(Sasagawa T., Hlaing M., et al. (2000) Synergistic induction of apoptosis in murine hepatoma Hepa1-6 cells by IFN-GAMMA and TNF-alpha. Biochem Biophys Common Animal, 272:674-680).
특허 US 5190751에서 IFN 알파 및 감마의 조합에 의한 유형 B 및 유형 T의 백혈병 세포주의 성장을 저해함이 기술되었다. 평가된 T 세포주 중 어느 것에서도 성장 저해 효과의 가능성이 발견되지 않았으며, 특정 실험 조건에서 조합의 효과는 길항적이었다. 특허 EP 010749 및 문헌(Czarniecki C. W., Fennie C. W., et al. (1984) Synergistic antiviral and antiproliferative activities of Escherichia coli-derived human alpha, beta, and gamma interferons. J Virol. 49:490-496)에서 IFNs 알파 및 감마의 조합이 항상 시너지 효과를 나타내는 것은 아니며 길항적일 수 있음을 또한 나타내었다. 매우 광범위한 범위에서의 조합의 효능은 언급되었으나 자세히 나타내지는 않았다.
이러한 데이터는 IFN 알파 및 감마의 조합의 사용이 어떠한 조건에서 주어진 조직 또는 기관에서 부적절한 세포 성장의 치료에 대한 최적 조합을 수립하기 위한 적절한 조건인지를 확인하기 위한 실험적 정의를 평가할 수 있음을 나타낸다. 이러한 이유로, 치료법 및 적절한 투여량을 입증하기 위해 생체외 및 제어되는 임상실험에서의 실험으로 평가하여야 한다.
신경교종의 세포주로의 연구에서, IFN 감마는 연구된 종양 세포의 증식 및 이동과 같은 악성의 특성에 영향을 미친다(Knupfer M. M., Knupfer H., et al. (2001) Interferon-gamma inhibits growth and migration of A172 human glioblastoma cells. Anticancer Animal, 21:3989-3994). 다른 방법으로, 신경교 종을 치료하기 위한 IFN 감마의 사용에 관한 음성 결과가 보고되었다(Mahaley M. S., Bertsch L., Jr. et al. (1988) Systemic gamma-interferon therapy for recurrent gliomas. J Neurosurg, 69:826-829). 게다가, 이러한 종양의 치료를 위한 알파-디플루오로메틸오르니틴(DFMO)과 IFN 감마의 조합이 기술되어 있다(US 4499072). 특허 US 5002879는 림포카인 및 IL-2에 의해 활성화된 킬러 세포에 근접하여 DFMO를 사용하는 유사 치료법을 기술하고 있다. IFN 알파에 대하여, 다른 약물과의 조합이 신경교종의 치료에 유리한 효과를 나타내지 않으며 독성을 나타낸다(Buckner J. C., Burch P. A., et al (1998) Phase II trial of recombinant interferon-alpha-2a and eflornithine in patients with recurrent glioma. J Neurooncol. 36:65-70; Chang S. M., Barker F. G., et al. (1998) High dose oral tamoxifen and subcutaneous interferon alpha-2a for recurrent glioma. J Neurooncol, 37:169-176). 게다가, 이러한 유형의 종양의 치료는 생체외 실험 및 임상실험에 기초한 조합의 비율을 적절히 선택함에 의해 IFN 알파 및 IFN 감마 조합의 사용으로 인해 영향을 받을 수 있다.
후두는 경구 다음으로 상 기도-식도(upper aero-digestive tract)에서 두 번째로 암이 잘 발생하는 위치이다. 후두 암종은 머리 및 목의 가장 빈번한 종양이며 후두의 대부분의 보통 암은 편평세포 암종(모든 케이스 중 95%)이다. 후두 종양 T3 및 T4의 경우에 생존율은 후두 종양에 걸린 환자의 대략 30%가 단지 5년간 생존한다(Djordjevic V., Milovanovic J., et al. (2004) Radical surgery of the malignant laryngeal tumors. Minutes Chir Lugosl, 51:31-35). 이는 방바선 치료 및 화학치료가 이러한 암종의 치료에 효과적이지 않음을 나타낸다(Chen W., Guo X., et al. (2004) Long-term follow-up observation of clinical therapy for laryngeal carcinoma recurrence and cervical metastasis Lin Chuang Er Bi Yan Hou Ke Za Zhi. 18:536-537).
그럼에도 불구하고, IFN 알파의 사용과 함께 진행되는 다제화학요법은 후두암의 치료에 효과적임이 판명되었다(Mantz C. A., Vokes E. E., (2001) Sequential induction chemotherapy and concomitant chemoradiotherapy in the management of locoregionally advanced laryngeal cancer Ann Oncol, 12:343-347). IL-2 및 IFN 알파의 조합은 후두 암종에 대한 치료로서 2기 실험(phase II trial)에서 평가되었으나 결과는 만족스럽지가 않았다(Clayman G. L., Young G., et al. (1992) Detection of regulatory factors of lymphokine-activated killer cell activity in head and neck cancer patients treated with interleukin-2 and interferon alpha. Ann Otol Rhinol Laryngol, 101:909-915). 후두 종양의 치료에서 몇몇 진보성이 존재한다. IFN 알파 및 감마의 조합된 사용은 이러한 종양과 싸우는 존재하는 치료법을 향상시키는데 기여할 수 있다.
특허 US 5503828은 IFN 알파 2 및 IFN 알파 8 및, IFN 알파 4, 알파 7, 알파 10, 알파 16, 알파 17 및 알파 21에 의해 형성된 군의 IFNs의 하나 또는 그 이상의 추가 종의 대립 유전자의 50% 미만을 포함함에 의해 특징지어진 인터페론의 조성물을 기술하였다. 반면에, 특허 US4503035는 IFN 알파의 몇몇 종류의 제제를 나타내지만 알파, 알파 5, 알파 14 및 al IFN 오메가를 포함하지 않는다. 이러한 특허는 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2의 조합에 의해 형성된 제형을 기재하고 있지 않다.
특허 US 5762923는 산성 완충용액을 제외하고 포함하는 IFN 알파를 안정화하기 위한 충분한 양의 비이온성 계면활성제 및 벤질 알콜을 갖는 물로 희석시킨 인터페론 액상 조성물을 상술하고 있다. 반면에, 특허 US 4847079는 인터페론 및 티머로살(timerosal)의 약학적 조성물을 기술하며 특허 US 4675184는 다수산기 알콜 및 안정화제로서의 유기 완충용액 및 pH 3-6의 통상적인 담체 또는 희석제를 갖는 인터페론 제형을 나타낸다. 조성물은 추가적으로 안정화제로서 음이온성 계면활성제 및/또는 알부민을 가질 수 있다. 특허 US 5236707 및 US 5431909에서 변성으로부터 인터페론을 보호하고 이를 안정화하는 유기 판매의 리튬 및 안정화제로서 아민(방향족 일차 아민)을 기재하고 있다.
특허 US 4496537은 인간 혈청 알부민 조성물 및 알라닌이나 글리신, 6.5 및 8.0 사이의 pH를 유지하기 위한 물 및 완충용액 시스템을 포함하는 인터페론-알파의 안정한 액상 제형을 나타낸다.
특허 US 5935566은 인터페론-알파의 안정한 제형을 기술하며 이들의 조성물에서 4.5 내지 7.1의 범위로 pH를 유지할 수 있는 완충용액 시스템, 안정화제로서 폴리소르베이트 80, 킬레이트제로서 EDTA, 등장화제(isotonizing agent)로서 염화나트륨 및 항균성 방부제로서 m-크레솔을 포함한다.
특허 US 0170207은 4.5 내지 9.0의 범위로 pH를 유지시킬 수 있는 완충용액 시스템, 안정화제, 비이온성 계면활성제 및 삼투압 조절제를 포함하는 인터페론-알파의 안정한 제형을 기술하였다.
특허 WO 89/04177에서, 인터페론-감마의 액상 약학적 제형이 4.0 내지 6.0의 범위로 pH를 유지하는 완충용액, 안정화제로서 폴리히드록시 당 및 비이온성 세정제를 포함함을 기술하였다. 특허 US 4895716은 완충용액 글리신/아세테이트 용액 내의 락토바이오닉산(lactobionic acid)을 갖는 인터페론-감마의 안정화 방법을 기술하였다.
특허 US 5676942는 천연원으로부터 수득한 유형 I의 인터페론의 서브타입에 의해 형성되나 인터페론 감마와는 조합되지 않은 약학적 조성물에 대해 기술하고 있으며 이러한 조합의 비율에 대해 정의되지 않았고 오직 바이러스성 감염에 대한 조합에 대해서만 기술하고 있으며 종양의 치료에 대해서는 기술하지 않았다. 기존의 보고서 중 어느 것도 시너지 효과를 내는 조합으로서 재조합 IFN 감마 및 알파 2를 함께 포함하는 약학적 조성물을 사용하거나 특성화하거나 언급하지 않았다. 조합의 사용에서의 가능성은 확립된 치료법 및 이들의 조합에 대항하는 상이한 정도의 세포 성장의 치료를 위해 명확한 비율로 혼합되었을 때 IFN 감마 및 IFN 유형 I에 대하여 존재한다.
이러한 전제들을 유지하기 위하여, 양성 및 악성 조직 형성을 갖는 개인에게서 안전하고, 유효하고 간단하며 광범위한 사용이 가능한 비율로 이러한 IFNs를 포함하는 안정한 약학적 조성물의 개선이 필요하다. 이는 조합의 좀더 최적의 관리 및 치료에 기여하는 환자의 치료제로서의 사용을 좀더 실행가능하게 하는 것을 가능하게 할 것이다.
본 발명은 상기 언급된 문제를 해결하며 비경구(액상 또는 동결건조) 또는 국소(겔, 연고 또는 크림) 경로에 의해 적용될 안정한 약학적 제형을 제공한다. 이들은 조직의 비생리학적 양성 또는 악성 성장을 예상하고 약학적으로 용인가능한 부형제를 포함하는 병리학적 사건을 치료하기 위한 시너지 효과를 나타내는 비율로 재조합 인터페론 감마 및 알파의 상이한 양을 포함한다.
이러한 제형들은 IFN에 대한 다른 감수성 및 다른 종양 존재에서 임상실험에서의 세포주를 갖는 생체외 검정뿐만 아니라 약학적으로 용인가능한 상이한 보형약 또는 부형제의 존재시 재조합 IFN 감마 및 알파 2의 생물학적 및 물리-화학적 안정성의 측정의 결과이다.
동결-건조된 안정한 약학적 제형은 4.9 및 7.5 사이의 pH를 유지하는 것이 가능한 완충용액에서 혼합된 재조합 IFN 감마 및 알파 2로 구성되었으며 완충용액은 아세트산암모늄 또는 아세트산나트륨, 숙신산나트륨, 인산나트륨 및/또는 인산칼륨 또는 시트르산/인산나트륨일 수 있다.
이러한 제형은 또한 적어도 비감소 당 화합물, 아미노산, 계면활성제 및 안정화 중합체 중에서 선택한 성분으로 구성되었다. 비 감소 당은 사카로스(sacharose) 또는 트레할로스(threhalose)일 수 있으며; 아미노산은 글리신, 히스티딘 또는 루신일 수 있고; 계면활성제는 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80이 기재되어 있고 안정화제로서는 폴리에틸렌글리콜, 덱스트란 또는 히드록시에틸스타치이다.
본 발명의 실현은 10 및 20mM 사이의 농도 범위로 완충용액을 사용함에 의해 정의된다. 사카로스 또는 트레할로스는 5 및 100mg/mL 사이로 사용할 수 있으며; 글리신, 히스티딘 또는 루신은 1 및 20mL 사이의 농도 범위로 사용할 수 있다. 폴리소르베이트는 0, 0.1 및 1mg/mL 사이로 사용할 수 있으며 폴리에틸렌글리콜, 덱스트란 및 히드록시에틸스타치는 5 및 50mg/mL 사이의 농도 범위로 사용한다.
본 발명의 몇몇 구체화는 5.6 x 108 IU 및 1.4 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 감마 및 6.8 x 108 IU 및 1.7 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 알파 2를 포함하는 동결-건조된 안정화 약학적 제형을 기술한다. 또는 2.0 x 108 IU 및 0.5 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 감마 및 12.0 x 108 IU 및 3.0 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 알파 2를 포함하는 제형을 기술한다. 또는 4.0 x 108 IU 및 1.0 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 감마 및 80 x 108 IU 및 20 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 알파 2를 포함하는 제형을 기술한다.제형은 0.0802g의 포타슘 디하이드로겐 포스페이트, 0.249g의 이수화물화 디소듐 하이드로겐-포스페이트, 4g의 사카로스, 0.8g의 글리신, 0.03g의 트윈 20, 1g의 폴리에틸렌글리콜 6000 및 상대적으로 동등한 비율에서 100mL 및 0.5mL, 1mL, 5mL 및10mL의 적당량의 주사용 물을 추가로 포함한다.
정의된 조합의 범위로 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파를 혼합하기 위한 한정은 아이소볼로그램(isobologram) 분석 후에 수득되었다. 동결-건조된 안정화 약학적 제형에서 5.6 x 108 IU 및 1.4 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 감마 및 6.8 x 108 IU 및 1.7 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 알파 2는 켈로이드(Kel 5a, Kel 17a) 및 CBC III로부터 기원한 일차 배양의 성장을 저해하는 연구의 분석으로부터 이루어진 것이다. 아이소볼로그램 분석 후에, 각각 21%, 43% 및 47%로 생체외 세포 성장을 감소시키는 100IU/mL(0.5ng/mL)의 재조합 IFN 알파 2b와 100IU/mL(10ng/mL)의 재조합 IFN 감마의 조합이 확인되었다(실시예 1, 2 및 3, 도 1 및 표 1 참조).
제형에서 2.0 x 108 IU 및 0.5 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 감마 및 12.0 x 108 IU 및 3.0 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 알파 2의 혼합물은 임상실험 및 동정에 의해 처리된 경우의 보고를 사용하여 결정되었다. 무작위의 제어된 삼중 맹검 임상실험은 상기와 같이 정의된 안정화된 동결-건조 제형을 사용하여 기저 세포 암종을 갖는 환자의 병변내(intralesional; I.L.) 치료의 효율을 평가하였다(실시예 7, 표 9, 10, 11 및 12 참조).
동정에 의한 치료된 경우의 기록에서, 이는 또한 이러한 비율을 정의하는데 기여하며 편평세포 암종(환자 1) 및 이전에 이식편을 받은 이식다중 재발 기저 세포 암종을 갖는 환자(환자 2)를 치료하였다(예를 들어 실시예 8, 각각 도 5의 b, c, d; 환자 1, 및 도 6의 b, c; 환자 2).
4.0 x 108 IU 및 1.0 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 감마 및 80 x 108 IU 및 20 x 108 IU 사이의 농도 범위의 재조합 IFN 알파 2를 포함하는 제형은 100 IU/mL의 재조합 IFN 알파 2b와 50 IU/mL의 재조합 IFN 감마에 의한 신경교아세포종(GL-5)의 성장 허해 연구로부터의 결과의 분석으로 정의된 것이다. 이러한 방식으로, 55%의 성장 저해가 이루어졌다(실시예 3). 게다가, 세포주 HEp-2로의 연구의 분석을 고려하였다. 이러한 경우에서, IFN의 양은 재조합 IFN 감마 5 IU/mL(0.5 ng/mL) 및 재조합 IFN 알파 2b 75 IU/mL(0.375 ng/mL)이다. 이를 가지고, 최적 조합은 76%로 생체외 세포 성장을 저해한다(실시예 1, 2 및 3 참조).
본 발명은 또한 개선된 약학적으로 안정한 액상 제형을 제공한다. 이러한 제형에서 재조합 IFN 감마 및 알파의 비율은 동결-건조 제형에 관하여 기술된 바와 같으나, 이들의 약학적 성분은 IFN의 이러한 혼합물의 더 좋은 안정성을 위하여 다양화할 수 있다.
이러한 작업의 결과로서 본 발명의 구체화는 완충용액 및 비-환원 당, 아미노산, 계면활성제, 안정화 중합체 항산화/킬레이트화 성분 및 등장화제 중 적어도 하나의 성분을 포함하는 액상의 안정한 약학적 제형을 기술한다. 이러한 제형은 메틸- 및 프로필-파라벤의 혼합물과 같은 방부제를 포함하거나 포함하지 않는 물 기저 용매를 사용한다.
본 발명의 다른 구체화는 pH를 4.9 및 6.5 사이로 유지할 수 있는 완충용액을 사용하는 액상의 안정한 약학적 제형의 정의를 연구한다. 이 완충용액은 아세트산암모늄 또는 아세트산나트륨, 숙신산나트륨, 인산나트륨 및/또는 인산칼륨, 시트르산염/인산염일 수 있다. 이러한 제형은 계면활성제로서 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80; 항산화/킬레이트화 성분으로서 EDTA 또는 아세틸-시스테인을 사용할 수 있으며; 아미노산은 히스티딘, L-아르기닌, L-알라닌, 글리신 또는 리신을 포함할 수 있다. 안정화 중합체로서는 히드록시에틸 스타치 또는 덱스트란을 사용하며 등장화제로서는 염화나트륨, 염화칼륨, 프로필렌글리콜, 만니톨, 글리세롤, 사카로스 또는 트레할로스이다.
본 발명의 구체화는 10 및 100 mM 사이의 농도 범위로 완충용액을 사용하는 액상의 안정한 약학적 제형을 수집하는 것이다. 이 제형에서 폴리소르베이트는 0, 0.1 및 1 mg/mL의 범위로 사용되며; EDTA 또는 아세틸-시스테인은 0, 0.1 및 1 mg/mL의 범위로 사용된다. 아미노산 히스티딘, L-아르기닌, L-알라닌, 글리신 또는 리신은 1 및 20 mg/mL 사이의 농도이며; 히드록시에틸 및 덱스트란은 5 및 50 mg/mL 사이의 농도 범위로 사용되고 등장화제는 용액을 등장화시키기 위한 충분한 양으로 사용되었다.
다른 구체화는 상기 기술된 재조합 IFN 감마 및 알파의 혼합물의 물리-화학적 및 생물학적 안정성이 필수적인 액상의 안정한 약학적 제형의 모든 약학적 성분의 양을 설명한다. 이러한 액상 제형은 IFN 이외에도 0.708 g의 아세트산나트륨, 0.079 mL의 아세트산, 0.01 g의 트윈 20, 5 g의 만니톨 및 상대적으로 동일한 비율로 100 mL 및 0.5 mL, 1 mL, 5 mL 및 10 mL에 대한 적절한 양으로 주입하기 위한 물을 포한한다.
본 발명은 세포의 양성 또는 악성 성장의 치료에 유용할 수 있는 IFN 감마 및 알파의 혼합물의 비율을 정의한다. 이는 치료에서 더 적은 투여량 및 적은 시간을 가능하게 하며, 동일한 치료 효과를 유지하거나 오늘날까지 종양 또는 세포 성장의 그외 변종물의 치료에서 인터페론의 사용에 이르는 효과를 이루어낼 것이다. 투여량을 낮추는 것은 더 적은 부작용 또는 이들의 강도를 더 낮추는 것을 가능하게 할 것이며, 이는 환자에게 더 좋은 삶의 질을 줄 수 있을 것이고 이러한 강력한 약물의 사용의 이득을 얻을 수 있도록 할 수 있다.
본 발명은 이러한 치료학적 조합 및 이들의 상업화의 조절 및 임상학적 사용을 용이하게 하는 상기 기재되지 않은 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2의 혼합물의 제형을 정의한다.
본 발명에서 기재된 증식의 저해를 위한 시너지 효과를 내는 비율의 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2의 혼합물을 포함하는 동결-건조 및 액상의 안정한 약학적 제형은 임상학적 사용에서 광범위한 범위로 사용된다. 이는 이러한 제형의 생체내 사용이 중요한 종양학적 질환에서 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2의 조합이 동시적으로 및 종양내로 효과적으로 사용됨을 보여준다.
이러한 조합은 분리된 성분으로서 사용했을 때에 비해 더 짧은 시간 동안, 그리고 더 좋은 감각적 효과를 갖는 종양에서의 동일한 치유 효과를 가질 수 있게 한다. 이러한 조합의 사용은 암과 싸우는 더 좋은 치료학적 가능성을 포함할 수 있게 할 것이다. 이는 어디에서 동결-건조된 액상의 제형이 충실성 양성 또는 음성 종양의 치료에 사용될 수 있으며 독립적으로 또는 화학요법, 방사선요법 또는 둘 다의 조합과 함께 사용할 수 있는지를 밝히는 본 발명의 구체화를 수집한다.
다른 치료제와 조합된 이러한 제형의 사용은 시스플라틴과 함께 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2의 조합(실시예 10 및 도 9 참조)으로 거대한 기저 세포 종양을 치료하는 것에서 수득된 결과에 의해 지지된다.
인터페론 감마 및 알파 2의 조합된 사용이 어떻게 매우 나쁘게 예상되고 감각 효과를 왜곡하는 종양을 감소시키거나/감소시키고 치료하는 것을 허용한다.
세포의 비조절 성장이 두드러지는 여러 양성 및 종양학적 부분의 특성에 따라, 이들은 이러한 제형으로 치료할 수 있는 여지가 있다. 종양은 다음과 같다: 급성 또는 만성 골수성 백혈병, 급성 또는 만성 림프구성 백혈병 뿐만 아니라 T 또는 B 세포의 백혈병 및 중추 신경계의 림프종과 같은 조혈 조직으로부터의 세포의 종양. 후두 암종, 인후 유두종증, 지방종, 유포피 낭종 및 피내 낭종, 지방육종, 신경섬유종, 피지선 증식 또한 치료할 수 있다. 이러한 약학적 제형의 사용으로 성상세포종, 다형성 교아죵, 상의세포종, 신경절세포종, 모세포성 별아교세포종, 혼합 교종, 핍지교종, 시신경 교종, 원시성 신경외배엽성 종양(primitive neuroectodermal tumors), 청신경종, 코르도마(cordomas), 두개인두종, 수아세포종, 수막종, 신경섬유종증, 뇌의 의사종양, 결절성 경화증, 전이성 뇌종양와 같은 말초 및 중추 신경계로부터의 종양에 효과적일 수 있다. 그외의 치료 가능한 종양은 해면상혈관종, 간세포 선종, 초점성 결절형 과증식, 송과체종, 뇌하수체 선종, 혈관성 종양, 수막 암종, 체리 유사 혈관종(cherry like angiomas), 피지선 이상증식이다. 기저 세포 암종, 편평 세포 암종, 피부섬유종, 화농성 육아종, 피부 모반과 같은 피부 종양뿐만 아니라 지루성 및 자외선 각화증은 이러한 약학적 제형으로의 치료로부터 효과를 볼 수 있다.
본 발명의 다른 구체화는 이러한 제형을 또한 섬유증, 이형성증 및 이상증식과 같은 증식의 치료에 사용할 수 있다.
실시예 7, 8 및 10에서와 같이 실행되고 기재된 임상실험의 결과에 따라 본 발명의 구체화가 제형의 점막내, 종양내 및 병소주위로의 주입 경로를 정의할 수 있다.
다른 구체화는 반고체 그램(g) 당 0.32 x 106 IU 및 0.08 x 106 IU 사이의 농도 범위의 IFN 감마 및 2.0 x 106 IU 및 0.5 x 106 IU 사이의 농도 범위의 IFN 알파 2를 포함하는 국소 적용되는 안정한 약학적 제형을 기술한다.제형은 2.2% IFN 감마, 0.58% IFN 알파, 4% 셀틸릭 알콜(celtilic alcohol), 10% 바셀린, 2% 트윈 60 및 0.2% 메틸파라벤, 프로필파라벤으로 구성된 크림이다. 게다가, 연고의 구성은 2.2% IFN 감마, 0.58% IFN 알파, 60% 백색 고형 바셀린(petrolate), 10% 중액 바셀린(heavy liquid petrolate), 3% 스판(span) 20 및 0.2% 메틸파라벤 및 프로필파라벤으로 정의된다. 마지막으로, 겔 제형은 2.2% IFN 감마, 0.58% IFN 알파, 0.5% 카르보폴(Carbopol) 940, 0.2% 메틸파라벤 및 프로필파라벤, 0.2% 수산화나트륨, 0.01% 칼슘 디소듐-에틸렌디아미노테트라에서테이트 및 2% 에탄올으로 구성된다.
본 발명의 다른 구체화는 국소의 안정한 약학적 제형이 지방종, 유포피 낭종, 피내 낭종, 지방육종, 신경섬유종, 피지선 증식, 혈관종, 초점성 결절형 과증식, 상의세포종, 신경절세포종, 모세포성 별아교세포종, 수막종, 송과체종, 뇌하수체 선종, 원시성 신경외배엽성 종양(primitive neuroectodermal tumors), 청신경종, 혈관성 종양, 수막 암종, 신경섬유종증, 체리 유사 혈관종(cherry like angiomas), 피지선 이상증식, 기저 세포 암종, 편평 세포 암종, 피부섬유종, 화농성 육아종, 피부 모반, 지루성 각화증, 자외선 각화증 또는 콘딜로마의 치료에 사용될 수 있음을 기술한다.
본 발명의 다른 구체화는 상기 기재된 농도 및 비율로 재조합 IFN 감마의 바이알, 재조합 IFN 알파의 바이알 및 IFN의 희석 및/또는 용해를 위한 적당한 양의 주입 바이알용 물을 포함하는 키트의 구성을 기술한다. 키트는 IFN 중 하나를 포함하는 바이알 중 하나와 미리 혼합시킨 IFN의 동시 투여를 위한 주사기 및 알맞은 주사바늘을 포함한다.
도 1은 1000 IU/mL의 재조합 IFN 감마 또는 IFN 알파 2에 의한 켈로이드를 갖는 환자의 생검으로부터 유래한 섬유아세포 일차 세포 배양의 성장 저해를 나타낸 것이다.
도 2는 켈로이드(Kel5a)로부터의 섬유아세포 일차 세포 배양에서 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 조합에 의한 세포 성장 저해에서의 아이소볼로그램을 나타낸 것이다.
도 3은 켈로이드(Kel17a)로부터의 섬유아세포 일차 세포 배양에서 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 조합에 의한 세포 성장 저해에서의 아이소볼로그램을 나타낸 것이다.
도 4는 기저 세포 암종(CBC III)로부터의 섬유아세포 일차 세포 배양에서 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 조합에 의한 세포 성장 저해에서의 아이소볼로그램을 나타낸 것이다.
도 5는 신경교아세포종 GL-5로부터의 세포주에서 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 조합에 의한 세포 성장 저해에서의 아이소볼로그램을 나타낸 것이다.
도 6은 후두 HEp-2로부터의 세포주에서 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 조합에 의한 세포 성장 저해에서의 아이소볼로그램을 나타낸 것이다.
도 7은 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 조합으로 치료한 유포피종 암종을 갖는 환자를 나타낸 것이다.
도 8은 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 조합으로 치료한 재발 기저 세포 암종을 갖는 환자를 나타낸 것이다.
도 9는 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b 및 시스플라틴의 조합으로 치료한 재발 기저 세포 암종을 갖는 환자를 나타낸 것이다. A: 치료 전, B: 치료 1년 후.
실시예 1. 일차 세포 배양에서 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파에 의한 세포 성장의 저해.
피부 생검을 수술이나 화상에 의한 손상에 기인한 기저 세포 암종 또는 켈로이드가 발생한 환자로부터 및 일반 피부로부터 수득하였다. 조직 시료를 배지 DMEM에 즉시 위치시키고 외식편 방법에 의한 일차 배양을 수득하기 위해 절편화하였다. 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파의 항증식 효과의 평가를 위해 다음의 일차 배양이 평 가되었다: 켈로이드(1, 2, 5, 7, 8, 15, 17, 19, 20, 24, 26, 31, 32)로부터의 섬유아세포 일차 배양(CPF), 기저 세포 암종(CBC III)으로부터의 CPF 및 일반 피부(FibN3 및 FibN5)로부터의 CPF. CPF는 젠타마이신(50 ㎍/ml) 및 12% 송아지 우혈청(CBS)를 포함하는 배양 배지 혼합물 RPMI-1640/DMEM에서 성장시켰다. 모든 배양을 5% 습도의 CO2 배양기에서 37℃에서 배양하였다. IFN의 항증식 효과를 결정하기 위해, 세포를 96 마이크로웰 플레이트에 5 x 104 세포/mL로 접종하였다. 접종 후 24시간 후에 신선한 배지를 교체하여 동조화시켰다. IFN의 다른 농도의 존재 하에 96시간 동안 배양한 후에 크리스탈 바이올렛 염색을 사용하고, 580nm에서의 흡광도를 측정하고 리더 플레이트를 사용하는 평가된 실험 조건을 3회 반복하여 생존도를 결정하였다. 결과는 생존 세포의 수에 기저한 성장의 %로서 나타내었다:
성장율 % = (AT72h-AC0h/AC72h-AC0h) x 100.
AT72h = 72시간 동안 처리된 세포의 흡광도.
AC72h = 72시간 동안 처리된 대조 세포의 흡광도.
AC0h = IFN으로 처리하기 전의 세포 흡광도.
도 1은 켈로이드 CPF의 성장에서 재조합 IFN 감마 및 알파의 항증식 작용을 나타낸다. IFN 감마 또는 알파 2b가 다양한 일차 배양에서의 세포 증식을 저해함이 관찰되었으며 다른 것은 성장을 촉진함이 관찰되었다. 대조군은 일차 배양 FibN3 및 FibN5 뿐만 아니라 CBCIII 및 HEp-2, U1752 및 GL-5 세포주의 생검으로부터의 일차 배양을 평가한다.
실시예 2: 수립된 세포주에서 재조합 IFN 감마 및 알파 재조합체에 의한 세포 성장의 저해.
연구된 인간 세포주는 다음과 같다: Jurkat (ATCC, TIB-152), GL-5 (Perea S. and., 등의 (1993) Minutes Cient Venez, 44:22-27), HEp-2 (ATCC, CCL23). 세포 GL-5를 DMEM, 및 젠타마이신(50 mg/ml) 및 10% CBS를 포함하는 MEM-CANE 내의 HEp-2에 배양하였다. Jurkat 세포를 젠타마이신 및 10% CBS를 갖는 RPMI 배지에 항온하였다. 모든 배양물을 5% 습도를 갖는 CO2 배양기에서 37℃에서 항온하였다. GL-5 및HEp-2 세포의 항증식 효과를 평가하기 위해 3 x104 세포/mL로 접종하였다. Jurkat 세포의 경우에서, 이들을 105 세포/mL로 접종하였다. 다른 농도의 IFN의 존재하에서 72시간 동안 항온한 후, 3회 복제에서의 생존력을 바이올렛 크리스탈 염색 방법을 사용하고 580 nm에서 흡광도를 측정하고 리더 플레이트를 사용하여 측정하였다. 결과는 실시예 1에 기재된 바와 같이 생존가능한 세포의 수를 기초로 한 성장률 %로서 결과를 정의하였다. 표 1 및 도 1에서 나타난 바와 같이, 세포주 HEp-2(후두 암종) 및 GL-5(신경교아세포종으로부터 수득함)는 IFN 감마에 매우 민감하나 IFN 알파에는 민감하지 않다.
Figure 112008038944213-pct00001
표 1에서 세포주 HepG2(간세포암)은 이러한 IFN에 민감하지 않으며 세포주 Jurkat(림프종 T)에서 IFN 알파가 가장 효과적이며 림프양 조직으로부터의 종양의 치료에서 IFN 알파 2의 성공적인 사용으로 동시에 사용하는 결과를 관찰되었다.
실시예 3: 일차 배양 및 세포주에서의 좀더 효과적인 항증식 작용을 갖는 재조합 IFN 감마 및 알파의 조합.
CBC-III 및 켈로이드(Kel-5a 및 Kel-17a) CPF 및 세포주 HEp-2 및 GL-5를 사용하여, 조합의 연구를 세포 성장 저해의 시너지 효과를 갖는 최적의 혼합물을 정의하기 위해 재조합 IFN 감마 및 알파 2b로 실행하였다. 연구에서 수득된 데이타를 빌딩 아이소볼로그램으로 분석하였다. 성인켈로이드(kel 5a 및 kel 17a)으로부터 기원한 CPF의 아이소볼로그램연구로부터 성장 저해를 위한 최적의 시너지 조합은 100 IU/mL(10 ng/mL)의 IFN 감마 및 100 IU/mL(0.5 ng/mL)의 IFN 알파 2b로 구성될 수 있음이 밝혀졌다. 이러한 조합으로 세포 성장이 21%(Kel 5a) 및 43%(kel 17a)로 생체외에서 감소되었다(도 2 및 3).
도 4의 아이소볼로그램은 100 IU/mL(10 ng/mL)의 IFN 감마 및 100 IU/mL(0.5 ng/mL)의 IFN 알파 2b의 조합이 시너지 효과를 나타내며 47%로 CBC III의 생체외 세포 성장을 감소시키는데 가장 효과적임을 보여준다.
도 5에서 보여지는 아이소볼로그램에 따라, GL-5의 세포 성장을 저해하기 위한 최적 시너지 조합은 50 IU/mL(3 ng/mL)의 IFN 감마 및 600 IU/mL(5 ng/mL)의 IFN 알파 2b이다. 이 조합으로 생체외 세포 성장이 55% 감소되었다.
도 6에서 나타난 아이소볼로그램은 HEp-2 세포에서 최상의 항증식 효과를 수득하기 위한 IFN 감마 및 알파의 최적 시너지 조합을 보여준다. IFN의 양은 5 IU/mL(0.5 ng/mL)의 IFN 감마 및 75 IU/mL(0.375 ng/mL)의 IFN 알파 2b이다. 이 최적 조합으로 76%의 생체외 세포 성장 저해를 이루었다.
실시예 4: 수용액 내의 인터페론 알파-2a 및 감마 혼합물의 안정성에서 pH , 이온종 및 완충용액의 농도의 효과.
재조합 인터페론 감마 및 알파의 시너지 조성의 액상 동결건조 제형의 안정성을 연구하기 위해, IFN을 상이한 검정 제형으로 이들의 상응하는 활성 약학적 성분(IFA)으로부터 희석하였다: 완충용액, 개별 부형제를 갖는 완충용액 혼합물 및 다양한 부형제를 갖는 완충용액. 다른 제형의 바이알의 대표적 시료는 인터페론의 안정성을 평가하기 위한 다른 치료를 가능하게 한다: 동결-해동 사이클, 동결건조, 37℃에서 교반, 빛 및 온도의 효과. 다른 과정이 끝난 후에, 물리-화학적 안정성을 다른 검정을 통하여 평가하였다: 물리학적 양상, 소듐 도데실 폴리아크릴아미드 겔 전기영동(SDS-PAGE), 역-상 액체 크로마토그래피(RP-HPLC) 및 분자 배재 크로마토그래피(ME-HPLC). 생물학적 안정성을 각 인터페론에 특이적인 면역-효소학적 검정(ELISA) 및 바이러스성 사이토패소제닉 효과의 저해의 생물학적 검정에 의해 평가하였다.
이러한 모든 제형 설계 연구를 인터페론의 중간체 농도(0.5 MIU의 IFN 감마 및 3.0 MIU의 IFN 알파 2b)의 혼합물로 실행하였다. 수득된(복제에 의해 생성된) 제형의 최종 변이체로 시너지 조성물을 생성하고 이의 안정성을 평가하였다.
기관감각수용성 특성: 이는 제형의 양상의 분석에 의해 측정되었다(무색, 투명하고 단백질 응집이 없이 유지될 경우). 동결-건조된 제형에서, 또한 동결-건조된 산물의 양상을 분석하였다.
습도: 동결-건조 산물의 잔류 습도의 함량은 습도 방사계(모델 TIM 550)의 미터를 사용하여 칼 피셔 요오드 적정의 기술에 의해 결정한다.
화학 안정성: 단백질의 순도 및 분해의 규모를 용매 유리의 시스템, 다이오드 배열 검출기, 오븐 및 데이터 프로세싱 시스템을 갖춘 HPLC 시스템 머크-히타치(Merch-Hitachi)를 사용하는 키핑-컬럼(keeping-column) C8 Vydac(Vydac, Hesperia, CA)이 장착된 컬럼 C8 Vydac에서 RP-HPLC로 결정하였다. 단백질의 순도는 또한 SDS-PAGE로도 결정하였다.
응집체 결정: 재조합 IFN 감마의 응집물 및 IFN 알파 2b의 응집물을 수퍼덱스-75 HR 10/30 컬럼(Amersham Pharmacia Biotech AB, Sweden) 및 용매 유리의 시스템, 다이오드 배열 검출기, 오븐 및 데이터 프로세싱 시스템을 갖춘 HPLC 시스템 머크-히타치를 사용하는 분자 배재 HPLC로 측정하였다. 공유 응집물의 함량을 SDS-PAGE로 검출하였다.
알파 인터페론 ELISA: 이 검정은 본 실험실에서 개발된 것이다(H. Santana., Espino Y., et al. (1999) A sandwich-type enzyme-linked immunosorbent assay for the analysis of recombinant human interferon α-2b. Biotechnology Techniques, 13, 341-346). 검정은 모노클로날 항체를 사용하며 보고된 방법론에 따라 실행된다. 측정은 100%로서 초기 시료에서의 ELISA 활성을 획득하는, 각 제형 변이체로부터 다른 시료들에서 인터페론 알파-2b의 잔류 ELISA 활성의 퍼센트로서 본원에 기재되었다.
인터페론 감마 ELISA: 이 검정은 본 실험실에서 개발된 것이다(Bouyon R., Santana H., et al. (2003) Development and validation of an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for recombinant human gamma interferon. Journal of Immunoassay and Immunochemistry, 24:1-10). 검정은 모노클로날 항체를 사용하며 보고된 방법론에 따라 실행된다. 측정은 100%로서 초기 시료에서의 ELISA 활성을 획득하는, 각 제형 변이체로부터 다른 시료들에서 인터페론 감마의 잔류 ELISA 활성의 퍼센트로서 본원에 기재되었다.
항바이러스성 생물학적 활성 정량: 생물학적 활성의 측정을 Ferrero J., Ochagavia ME.등의 문헌(1994, Titulacion de la actividad antiviral del interferon utilizando el sistema de equipos SUMA. Biotecnologia Aplicada , 11:34-42)에 기재된 바와 같이 실행하였다. 생물학적 활성의 계산을 Ferrero J., Duany L.등의 문헌(1997, Nuevo programa de calculo, cuantificacion de la actividad antiviral de interferones mediante la inhibicion del efecto citopatogenico utilizando el sistema de equipos SUMA. Biotecnologia Aplicada , 14: 267-269)에 기재된 바와 같이 실행하였다. 측정은 100%로서 초기 시료에서의 ELISA 활성을 획득하는, 잔류 ELISA 활성의 퍼센트로서 본원에 기재되었다. 유효 성분의 안정성에서의 pH의 효과를 알기 위해, 다른 완충용액 내에서 0.5 MIU의 IFN 감마 및 3.0 MIU의 IFN 알파 2b를 포함하는 다른 제형을 제조하였다; 이는 완충용액 시트레이트/포스포네이트, 완충용액 포스포레이트, 완충용액 시트레이트 및 완충용액 에서테이트이다. 완충용액과 함께 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 혼합물을 포함하는 제형은 동결-해동 사이클을 거치거나 45℃에서 저장되며 다른 시간 간격에서 ELISA로 분석하였다. 제형을 4 및 8 사이의 pH 및 0.1M 농도에서의 모든 완충용액을 갖도록 제조하였다. 표 2, 3 및 4는 동결-해동의 세 사이클 후에 및 45℃에서 3 내지 12일의 다른 시간 간격에서 실행된 검정의 결과를 나타낸 것이다.
Figure 112008038944213-pct00002
Figure 112008038944213-pct00003
이러한 표(2, 3, 4)로부터의 데이터는 5 및8 사이의 pH 수치를 갖는 제형이 동결-해동 사이클 동안에, 바람직하게는 완충용액 아세테이트, 포스페이트 및 시트레이트-포스페이트에서 5 및 7에 근접한 pH에서 적절한 안정성을 가짐을 나타낸다. 수용액에서의 열 안정성은 5 및 5.8 사이의 pH 수치, 바람직하게는 완충용액 아세테이트 및 포스페이트에서 더 우수하다.
표 5로부터의 데이터는 특히 다른 평가된 완충용액에서, 더 높은 완충용액 농도의 제형이 IFN 감마에 대하여 pH 5.5에서의 낮은 농도의 제형에서보다 동결-해동 사이클 동안에 더 우수한 안정성을 보임을 나타낸다. 그럼에도 불구하고, 열 안정성의 결과는 완충용액 아세테이트 및 그 다음으로 포스페이트 내의 pH 5.5에서 더 우수하다. 완충용액 시트레이트-포스페이트 내에서의 열 안정성은 낮은 농도의 완충용액에서 더 우수하다.
Figure 112008038944213-pct00004
Figure 112008038944213-pct00005
실시예 5. 동결-건조 제형( 바이알 당 1.4 x 10 6 IU 의 IFN 감마 및 1.7 x 10 6 IU의 IFN 알파 2b).
조성물: IFN 감마 2.8 x 108 IU, IFN 알파 2b 3.4 x 108 IU, 디-히드로겐 포타슘 포스페이트 0.0802 g, 디-소듐 디-하이드레이트화 히드로겐 포스페이트 0.249 g, 사카로스 4 g, 글리신 0.8 g, 트윈 20 0.03 g, 폴리에틸렌글리콜 6000 1 g, 100 mL에 대한 주입 적량의 물.
인터페론을 제외한 모든 성분을 측정하고 주입을 위해 물에 희석시켰다. 용액의 pH를 측정하고, 필요하다면 희석된 (1:2) 아세트산 또는 1 M의 NaOH로 7.2±0.2의 수치로 조절하였다. IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 활성 약학적 성분을 첨가하고 적절한 농도로 희석시켰다. 용액을 무균형태에서 여과시키고 바이알을 충진시키고 과정이 실행되는 클래스 100 영역에서 동결건조를 위한 플러그로 뚜껑을 덮었다. 최종적으로, 바이알을 뚜껑을 씌우고 밀봉하였으며; 산물을 2 및 8℃ 사이에서 보관하였다. 표 6은 사용된 동결건조 주기의 주요 파라미터를 보여준다.
Figure 112008038944213-pct00006
시간의 수립된 간격에서 시료를 취하고 이의 재구성뿐만 아니라 산물의 잔여 습도의 함량, IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 함량(ELISA에 의함), 생물학적 활성, RP-HPLC에 의한 순도 및 동결-건조된 산물의 외양을 분석하였다. 결과는 표 7에 나타내었다.
Figure 112008038944213-pct00007
실시예 6. 동결-건조 제형( 바이알 당 0.5 x 10 6 IU 의 IFN 감마 및 3.0 x 10 6 IU의 IFN 알파 2b).
조성물: IFN 감마 1.0 x 108 UI, IFN 알파 2b 6.0 x 108 UI, 디-히드로겐 ㅍ포타슘 포스페이트 0.0802 g, 디-소듐 디-하이드레이트화 히드로겐 포스페이트 0.249 g, 사카로스 4 g, 글리신 0.8 g, 트윈 20 0.03 g, 폴리에틸렌글리콜 6000 1 g, 100 mL에 대한 주입 적량의 물. 제조 방법은 실시예 5의 동결-건조 제형에서 기재된 바와 동일하다.
시간의 수립된 간격에서 시료를 취하고 이의 재구성뿐만 아니라 산물의 잔여 습도의 함량, IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 함량(ELISA에 의함), 생물학적 활성, RP-HPLC에 의한 순도 및 동결-건조된 산물의 외양을 분석하였다. 결과는 표 8에 나타내었다.
Figure 112008038944213-pct00008
실시예 7. 안정화된 동결-건조 약학적 제형( 바이알 당 0.5 x 10 6 IU 의 IFN 감마 및 3.0 x 10 6 IU 의 IFN 알파 2b)으로의 임상 실험. CBC 에서의 병변내 적용.
실시예 6에 기재된 안정화 동결-건조 약학적 제형은 어떤 부분에서든지 CBC의 임상적 및 조직학적 진단 및 4cm 미만의 직경의 병변을 갖는 피부 유형을 갖는 59명의 한자를 포함하는, 삼중 맹검의 조절되고 무작위인 임상 실험의 실행에 사용되었다. 환자들을 무작위로 3개의 치료군으로 나누었다. 병변을 치료군 I, II 및 III 각각에서, 재조합 IFN 알파 2b (1, 5 x106 IU/mL); 또는 재조합 IFN 감마 (0, 25 x106 IU/mL) 또는 안정화 동결-건조 제형 (바이알 당 0.5 x 106 IU 의 IFN 감마 및 3.0 x 106 IU 의 IFN 알파 2b)의 투여량 절반으로 병변내 처리하였다. IFN을 3주간 계속 주 3회, 9주간 지속적으로 주 1회 또는 병변이 완전히 사라질 때까지, 즉 치료의 임상적 효능이 평가되는 순간까지 적용시켰다. IFN 알파 2b, IFN 감마 및 제형 (바이알 당 0.5 x 106 IU 의 IFN 감마 및 3.0 x 106 IU 의 IFN 알파 2b)로 처리한 치료군 각각의 9.5%, 35.3.9% 및 5.3%에서 병변 크기의 50% 미만이 감소되었다. 나머지 병변에서 90.5%, 57.9% 및 94.7%(치료군 I, II 및 III 각각)의 목표로 하는 반응이 관찰되었다. 병변 중에서 진행된 것은 없었다(표 9 참조). "치료를 마치지 않은 환자"의 집단에서, 항증식성 시너지 효과를 갖는 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b를 포함하는 제형의 치료의 우수성이 관찰되었다(IFN 알파 2b의 치료에 대하여 17%의 차이 및 IFN 감마의 치료에 대하여 27%의 차이). "11주 미만 동안 치료받은 환자"의 집단에서, 제형의 우수성이 관찰되었다. IFN 감마에 대하여 대략 30%의 차이가 존재하며 IFN 알파 2b에 대하여 27%의 차이가 존재한다. 완전한 반응의 비율이 더 높다((IFN 알파 2b 치료에 대하여 40% 이상의 우수성 및 IFN 감마 치료에 대하여 30% 이상의 우수성). 12회 이하로 주입된 환자들 중, 제형으로 치료된 군에서 100%의 유리한 반응이 이루어졌다(이들 중 RC의 50%). 다른 두 치료군에서 유리한 반응은 67%(이들 중 RC의 33.3%)이며 이는 조합된 치료에 대하여 대략 33%의 차이를 이루었음을 의미한다. 표 9를 참조하라.
Figure 112008038944213-pct00009
표 10에서 관찰되는 바와 같이, 재조합 IFN 감마 및 알파 2b를 포함하는 안정화 동결-건조 제형으로, 분리된 인터페론에서보다 짧은 기간에 임상적인 완전한 반응을 수득하는 것이 가능하며, IFN 알파에 대해 4주 전의 차이를 갖는다.
Figure 112008038944213-pct00010
치료되지 않은 경우에서, 켈로이드의 형성이 관찰되었으며, 이와는 반대로 치료된 모든 경우에서 일반 감수성, 일반 탄력도 또는 건성, 취약성 및 악독성의 약간의 감소 또는 부재를 갖는 병변의 우수한 반흔 형성을 나타낸다. 색에 관하여, 제형으로 처리된 환자의 대부분에서, 치료된 부분의 일반적 발색을 발견하였으며(47.4%) 이는 IFN 알파로 치료한 군에서 관찰된 것(28.6%)의 두배이다. 실험의 마지막에서, 제형으로 처리한 군에서 도 11에 나타낸 바와 같이 IFN 알파 2b 단독으로 치료한 군(52.4%에 대하여 평편한 상처의 우수한 백분율을(63.2%)이 관찰되었다.
Figure 112008038944213-pct00011
치료군 사이에 통계적인 차이가 검출되지 않았으므로, 인터페론의 조합은 이들의 생산 또는 강도에 대하여 부작용을 촉진하지 않는다. 일반적으로, 이들은 약하거나(71.2%) 온건하거나 완전히 저항성이다(표 12).
Figure 112008038944213-pct00012
이 표에서 관찰되는 바와 같이, 각 치료군에서 가장 빈번한 부작용은 다음과 같다: IFN 알파, IFN 감마 및 조합 각각에서 발열(38.5%; 60.8% 및 26.2%), 근육통(38.5%; 3.9% 및 31%), 오한(12.8%; 19.6% and 21.4%). 존재하는 총 부작용은 IFN 감마로 치료한 환자군에서보다 약간 더 많다.
일반적으로, 조합된 치료는 IFN 알파 군에 대하여 대략 4주 전 및 25% 이하의 주입으로 완전한 반응의 32%의 우수성을 이루었다. 조합은 부작용을 촉진시키지 않으며 완전한 임상 반응을 갖는 환자에 대한 치료를 마친 후의 1년 동안 어떤 재발이 관찰되었다. 미용적인 면 때문에 결과는 편평하고 정색소성의 상처에서 대부분 매우 좋은 결과이다.
실시예 8: 표준 치료에 민감하지 않은, 피부 종양을 갖는 환자에서 재조합 IFN 감마 및 알파 2b의 혼합물의 동정적 사용의 결과. 케이스 리포트.
환자 1
환자 EPR: HC: 302396 연령: 82세, 성별: 남성, 개인적 병리학적 선례 (APP): n/r. 흉강의 내부 영역에서 피부의 종양을 갖는 네셔널 인스티튜트 오브 온콜로지 앤드 라디올로지(INOR)로 완화된 것으로 수술적 절단 03/07/01을 갖는, 궤양성 형태로 자란 후에 전기방전요법(electrofulguration)을 받았다. 결과: 유극세포 암종이 불완전하게 제거되었다. 환자는 높은 유리함을 갖는 원조 종양의 위치에서 3cm의 지속성 종양 병변이 도래한다. 물리학적 발견은 국부 전이성 신경종이 존재하지 않는다. 종양에서의 방사선 치료가 지시되었으며 29/01/02에 종료하였다: 60co 50 Gy + X-선 12 Gy. 종양 당 총 투여량은 62Gy이다.
한 달 후에, 환자는 쇄골 및 아래로부터 3번째 흉쇄유돌기 근육에서의 고정된 종양을 보였다. 단시간에, 종양은 빠른 성장을 지속하였으며 이는 모두 흉곽의 일부인 내부 3번째 우측 쇄골, 목의 기저부분 및 흉골의 일부에서의 10 x 8 cmdml 04/03/02 심한 궤양화 상처를 나타낸다. 수술적 개입이 환자에게 제안되었다. 환자의 연령이 82세이고 높은 수술 위험 때문에 수술적 개입은 거절되었다. 그런 후에 병변내로의 IFN 처리가 권고되었다.
상당한 크기(12.5 x 9 cm 및 1-1.5 cm의 두께)의 종양이 뼈 및 근육에 고정되어 있었다. IFN 적용은 주변의 세 부문으로 계획되었다. 각 부문은 3주간 주 3회로 6 mL의 주입용 물 내의 0.5 x 106 IU의 IFN 감마 + 6 x 106 IU의 IFN 알파 2b의 투여량으로 대략 5 cm3 의 조직(1.5 x 1.5 x 1.5)에 1.5 mL 용액으로 침투시켰다(도 7a). 산물의 다섯 번째 적용 후(2주) 더 높은 투여량의 IFN 감마(두 배, 1 x 106 IU)를 적용시키는 것을 결정하였다. 투여량의 단계적 확대는 이전 투여량의 부작용이 없기 때문에 두 인터페론의 시너지 효과가 보여지는 임상 연구의 이전 정보에 따라 매우 큰 종양에서 더 좋은 결과를 얻기 위한 노력을 위해 제안된 것이다.
결국, 환자는 두 달의 치료에서 25 x 106 IU의 IFN 감마 + 162 x 106 IU의 IFN 알파 2b의 총 투여량으로 27번 투여받았다. 다섯 번째 투여에서, 상처의 가장자리가 정상 피부의 수준으로 변하였다(도 7b). 치료 시작 한 달 후에 환자는 쇄골의 상완 신경총의 침윤, 노출, 괴사 및 골절에서 발견되는 우측 상위 막의 강한 통증을 겪었다. 20번째의 투여에서 주입된 위치에서 종양 성장이 중단된 것이 발견되었으나, 소엽-유사 형태로 성장하는 종양의 중앙부에서는 성장 중단이 발견되지 않았다(도 7c). 이 현상은 24번째 투여에서도 마찬가지로 발견되었다. 게다가 종양성 궤양에서 패혈증 및 괴사가 나타났다. 치료를 시작한지 정확히 2주 후에(27회 투여) 환자는 쇄골하의 동맥의 침습에 의해 강한 동맥 출혈을 겪었다; 환자의 헤모글로빈이 80 g/L로 낮아져 치료는 15일간 중단되었으며 마지막에는 지속되는 출혈에 기인하여 복귀되었으며 진행성 무력증을 갖는다. 환자는 동맥 파열에 의해 두 달 후에 사망하였다. 주사된 위치는 종양 성장 없이 유지되었다. 처음 8회의 투여에서, 발열(39℃), 오한, 병소주위 홍반 및 무력증과 같은 몇몇 부작용이 나타났으나 모두 약한 강도였으며 단기간 나타났다. 결론: 주사한 부분에서의 임상 반응은 적어도 두 달간 지속적으로 이루어졌으며 심하지 않은 부작용만 나타났다.
환자 2
환자 LGR: HC: 158390 연령: 65세 성별: 여성, APP: n/r. 다형성 암종에 걸린 환자에서 얼굴 전체를 기초로 하였다. 환자는 이식편이 있는 좌측 눈의 아래 눈꺼풀에서 수술적으로 개입되었으며 여러 번 방출되었다. 현재에는 눈꺼풀 가장자리에 5mm 직경의 종양이 재발되었으며 눈꺼풀 아래에서 광대뼈쪽으로 흉터와 유사한 편평한 다른 상처가 나타났다(도 8a). 치료의 대안은 이미 다중-치료된 경우가 될 결함을 갖는 새로운 수술이다. 동일한 눈의 위 눈꺼풀에서 이전에 치료되지 않은 7mm의 다른 기저 암종이 나타났다.
08/05/02는 3주간 주 3회 4mL의 IFN(0.5 x 106 IU의 IFN 감마 + 3 x 106 IU의 IFN 알파 2b)의 병변내 처리가 제안되었다. 결국, 환자는 35 x 106 IU의 인터페론(5 x 106 IU의 IFN 감마 + 30 x 106 IU의 IFN 알파 2b)의 총 투여량으로 10회 투여받았다. 1/4 침습에서, 흉터와 유사한 상처가 사라졌으며 눈꺼풀에서 종양의 위치에서 궤양이 괴사하였다(도 8b). 치료 후 2달 동안에 눈꺼풀에는 종양이 없었으며 광대뼈의 흉터와 유사한 상처가 사라졌음이 관찰되었다(도 8c). 국소-국부 효과가 얻어졌다. IFN으로 직접적으로 치료되지 않은 죄측 눈의 위 눈꺼풀의 기저 암종의 50% 감소가 발견되었으며 나중에 수술적으로 절개되었다. 3년 후에 환자는 IFN으로 병변에 침습시켜 제어하는 것을 여전히 계속하였다. 광도의 몇몇 부작용 및 단기간의 부작용은 발열(39℃), 오한 및 냉습포로 경감되는 치료된 눈의 결막부종이 있다.
결론: 2005년 8월(마지막 제어)까지 환자는 최소한의 부작용을 가지며 완전한 임상 반응을 갖는다.
실시예 9. 동결-건조 제형( 바이알 당 0.5 x 10 6 IU 의 IFN 감마 및 10 x 10 6 IU 의 IFN 알파 2b).
조성: 1.0 x 108 IU의 IFN 감마, 20 x 108 IU의 IFN 알파 2b, 0.0802 g의 디-히드로겐 포스페이트, 0.249 g의 디-소듐 디-히드레이트 히드로겐 포스페이트, 4 g의 사카로스, 0.8 g의 글리신, 0.03 g의 트윈 20, 1 g의 폴리에틸렌글리콜 6000, 100 mL에 대해 적량의 주입용 물.
제조 방법은 실시예 5의 동결-건조 제형에서 기재된 바와 같다.
시간의 설정된 간격에서 시료를 취득하여 산물의 잔여 습도 함량, IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 함량(ELISA에 의해), 생물학적 활성, RP-HPLC에 의한 순도 및 재구성된 바와 같은 동결-건조 산물의 존재를 분석하였다. 결과는 표 13에 나타내었다.
Figure 112008038944213-pct00013
실시예 10. 시스플라틴과 조합된 바이알 당 0.5 MIU IFN 감마 및 10.0 MIU IFN 알파 2b에 의해 구성된 안정한 동결-건조 제형의 사용.
환자 3
환자 JGA: HC: 연령: 33세, 성별: 남성, APP: 여러 수술적 개입 및 방출을 갖는, 좌측 눈의 내각에 침투하는 기저 세포의 암종을 갖는 INOR에서 기록된 환자 n/r. 현재, 환자는 두개골의 기저의 뼈에 도달하는 궤양화된 종양을 갖는다(도 9a). 컴퓨터 단층 촬영장치(CAT)에 의해 증명되어 코 뼈 및 안와의 내벽의 공동, 왼쪽 콧구멍에 남아있는 참기 힘든 악취 및 같은 위치에서의 화농성의 황색 분비물이 발견되었다.
상처의 연장에 의해 21일의 간격의 6 사이클의 투여로 시스플라틴의 전신 화학치료 및 동시에 3주간 주 3회 국소적으로 침습시키는 제형(바이알 당 0.5 MIU IFN 감마 및 10.0 MIU IFN 알파 2b)의 조합 치료를 실시하기로 결정하였다.
3차 적용의 마지막에, 이미 눈꺼풀 개방 및 악취의 감소를 허용하는 중요한 부분적인 임상 반응이 관찰되었다. 완화된 강도의 결막부종이 동시에 나타났다. 완전한 임상 반응은 한 달 후에 나타났다. 이러한 반응은 화학요법이 끝날 때까지 유지되었다. 부작용은 적었으며 다소의 발열, 오한 및 상처의 융터 위치에 대한 통증이 있었다. 1년 후에 환자는 완전한 임상 반응을 유지하고 있다(도 9b).
실시예 11: 액상의 안전한 약학적 제형( 바이알 당 1.4 x 10 6 IU 의 IFN 감마 및 1.7 x 10 6 IU 의 IFN 알파 2b).
조성: IFN 감마 2.8 x 108 IU, IFN 알파 2b 3.4 x 108 IU, 소듐 아세테이트 0.708 g, 아세트산 0.079 mL, 트윈 20 0.01 g, 만니톨 5 g, 100 mL에 대해 적량의 주입용 물.
인터페론을 제외한 모든 성분들을 측정하고 주입용 물에 현탁시켰다. 용액의 pH를 측정하고 필요하다면 희석된 아세트산(1:2) 또는 1M의 NaOH로 5.5±0.2의 수치로 조정하였다. IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 약학적 유효 성분을 첨가하고 적절한 농도로 희석하였다.
용액을 멸균 조건에서 여과하였다. 바이알에 제형을 충진하고 뚜껑을 덮은 후 클래스 100 영역으로 밀봉하였다. 최종적으로, 산물을 2 및 8℃ 사이로 보관하였다. 여러 시료를 제조된 제형으로부터 수득하여 6달의 기간 동안 8℃ 및 2℃에서 보관하였다.
설정된 시간 간격에서, 시료를 수득하여 산물의 잔여 습도 함량, IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 함량(ELISA에 의해), 생물학적 활성, RP-HPLC에 의한 순도 및 재구성된 바와 같은 동결-건조 산물의 존재를 분석하였다. 결과는 표 14에 나타내었다.
Figure 112008038944213-pct00014
실시예 12. 액상의 안정화 약학적 제형( 바이알 당 0.5 x 10 6 IU 의 IFN 감마 및 3.0 x 10 6 IU 의 IFN 알파 2b).
조성: IFN 감마 2.0 x 108 IU, IFN 알파 2b 12.0 x 108 IU, 소듐 아세테이트 0.708 g, 아세트산 0.079 mL, 트윈 20 0.01 g, 만니톨 5 g, 100 mL에 대해 적량의 주입용 물.
제조 방법은 실시예 11의 동결-건조 제형에 대해 기술된 바와 같다.
설정된 시간 간격에서, 시료를 수득하여 산물의 잔여 습도 함량, IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 함량(ELISA에 의해), 생물학적 활성, RP-HPLC에 의한 순도 및 재구성된 바와 같은 동결-건조 산물의 존재를 분석하였다. 결과는 표 15에 나타내었다.
Figure 112008038944213-pct00015
실시예 13. 액상의 안정화 약학적 제형( 바이알 당 0.5 x 10 6 IU 의 IFN 감마 및 10 x 10 6 IU 의 IFN 알파 2b).
조성: IFN 감마 2.0 x 108 IU, IFN 알파 2b 40 x 108 IU, 소듐 아세테이트 0.708 g, 아세트산 0.079 mL, 트윈 20 0.01 g, 만니톨 5 g, 100 mL에 대해 적량의 주입용 물.
제조 방법은 실시예 11의 동결-건조 제형에 대해 기술된 바와 같다.
설정된 시간 간격에서, 시료를 수득하여 산물의 잔여 습도 함량, IFN 감마 및 IFN 알파 2b의 함량(ELISA에 의해), 생물학적 활성, RP-HPLC에 의한 순도 및 재구성된 바와 같은 동결-건조 산물의 존재를 분석하였다. 결과는 표 16에 나타내었다.
Figure 112008038944213-pct00016
실시예 14. 반고체의 약학적 제형( 바이알 당 0.5 x 10 6 IU 의 IFN 감마 및 10 x 10 6 IU 의 IFN 알파 2b).
바람직하게는 크림, 연고 또는 겔로서 국소 적용되는 약학적 제형. 약학적 제형은 유효 성분으로서 재조합 인터페론 감마 및 인터페론 알파 2를 포함한다. 조성은 반고체 100g에 대해 적량인 1.6 x 107 IU의 IFN 감마 및 1 x 108 IU의 IFN 알파 2b이다.
크림의 제조: 크림을 제조하기 위해 고체 바셀린 및 세틸 알콜을 75℃에서 녹이고 공정의 마지막까지 끊임없이 교반하면서 혼합하였다. 한번 균질화한 트윈 60을 혼합물에 첨가하였다. 이에 반해서, 메틸-파라벤 및 프로필-파라벤을 90℃에서 물에 용해시키고 온도가 75℃까지 감소했을 때 이전의 혼합물에 첨가하였다. 그 후에, 에멀젼을 37℃까지 천천히 냉각하고 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b를 포함하는 수용액에 첨가시켰다. 결과적으로 생성된 크림은 4℃에서 15g 튜브에 저장하였다(표 17 참조).
Figure 112008038944213-pct00017
연고의 제조: 용기에서, 파라벤을 90℃에서 물에 용해시킨 후 37℃까지 냉각되도록 두었다. 다른 용기에서, 액상의 바셀린 및 스판 20을 일정하게 교반시키면서 혼합하였다. 그 후에, 두 용기의 내용물을 혼합하고 온도가 37℃ 이하로 감소되었을 때 재조합 IFN 감마 및 IFN 알파 2b를 일정한 교반을 계속하면서 첨가하였다. 그런 다음, 균질화될 때까지 백색 바셀린을 첨가하였다. 결과적으로 생성된 연고를 4℃에서 15g 튜브에 저장하였다(표 18 참조).
Figure 112008038944213-pct00018
겔의 제조: EDTA, 파라벤 및 알콜을 개별 용기에 용해시킨 후 프로필렌글리콜을 첨가하였다. 그런 다음 일정하게 교반하면서 이 용액들을 혼합하고 덩어리가 없는 탁한 분산 형태를 수득할 때까지 강하게 교반하면서 카르보폴 940을 천천히 첨가하였다. 적절한 용기에서 1N 소듐 히드록시드 용액을 개별적으로 제조하고 제형의 나머지 성분들을 포함하는 분산 형태에 교반하면서 천천히 첨가하였다. 그 후에 IFN 감마 및 IFN 알파 2b를 천천히 교반하면서 첨가하였다. 겔이 형성되면 4℃에서 15g의 튜브에 담았다(표 19 참조)
Figure 112008038944213-pct00019

Claims (32)

  1. 5.6 x 108 IU 및 1.4 x 108 IU 사이의 농도범위의 재조합 인터페론 감마; 6.8 x 108 IU 및 1.7 x 108 IU 사이의 농도범위의 인터페론 알파 2b; 포타슘 디-히드로겐 포스페이트와 디히드레이트 디-소듐 히드로겐 포스페이트를 포함하는 pH 4.9 내지 7.5의 완충용액; 및 사카로스, 글리신, 트윈 20 및 폴리에틸렌글리콜 6000 중에서 선택되는 적어도 하나의 성분을 포함하고, 약학적으로 용인가능한 부형제 또는 담체를 추가로 포함하는 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제1항에 있어서, 0.0802 g의 포타슘 디-히드로겐 포스페이트, 0.249 g의 디히드레이트 디-소듐 히드로겐 포스페이트, 4 g의 사카로스, 0.8 g의 글리신, 0.03 g의 트윈 20, 1 g의 폴리에틸렌글리콜 6000 및 각각의 동일한 비율로 100 mL 및 0.5 mL, 1 mL, 5 mL 및 10 mL에 대한 적량인 주입용 물로 구성된 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  6. 2.0 x 108 IU 및 0.5 x 108 IU 사이의 농도범위의 재조합 인터페론 감마; 12.0 x 108 IU 및 3.0 x 108 IU 사이의 농도범위의 인터페론 알파 2b; 포타슘 디-히드로겐 포스페이트와 디히드레이트 디-소듐 히드로겐 포스페이트를 포함하는 pH 4.9 내지 7.5의 완충용액; 및 사카로스, 글리신, 트윈 20 및 폴리에틸렌글리콜 6000 중에서 선택되는 적어도 하나의 성분을 포함하고, 약학적으로 용인가능한 부형제 또는 담체를 추가로 포함하는 비경구 동결-건조된 안정화 약학적 제형.
  7. 4.0 x 108 IU 및 1.0 x 108 IU 사이의 농도범위의 재조합 인터페론 감마; 80 x 108 IU 및 20 x 108 IU 사이의 농도범위의 인터페론 알파 2b; 포타슘 디-히드로겐 포스페이트와 디히드레이트 디-소듐 히드로겐 포스페이트를 포함하는 pH 4.9 내지 7.5의 완충용액; 및 사카로스, 글리신, 트윈 20 및 폴리에틸렌글리콜 6000 중에서 선택되는 적어도 하나의 성분을 포함하고, 약학적으로 용인가능한 부형제 또는 담체를 추가로 포함하는 비경구 동결-건조된 안정화 약학적 제형.
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 삭제
  11. 삭제
  12. 삭제
  13. 삭제
  14. 제1항 및 제5항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 독립적으로 또는 화학요법, 방사선 요법 또는 두 요법의 조합과 병용하여 사용되는 악성 또는 양성 충실성 종양의 치료를 위한 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  15. 제14항에 있어서, 후두 암종, 인후 유두종증, 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 급성 림프성 백혈병, 만성 림프성 백혈병, T 세포 백혈병, B 세포 백혈병, 중추 신경계 림프종, 지방종, 유포피 낭종, 피내 낭종, 지방육종, 신경섬유종, 피지선 증식, 해면상혈관종, 간세포 선종, 초점성 결절형 과증식, 성상세포종, 다형성 교아종, 상의세포종, 신경절세포종, 미성년의 모세포성 별아교세포종, 혼합 교종, 핍지교종, 시신경 교종, 코르도마(cordomas), 두개인두종, 수아세포종, 수막종, 송과체종, 뇌하수체 선종, 원시성 신경외배엽성 종양(primitive neuroectodermal tumors), 청신경종, 혈관성 종양, 수막 암종, 신경섬유종증, 뇌의 의사종양, 결절성 경화증, 전이성 뇌종양, 체리 유사 혈관종(cherry like angiomas), 피지선 이상증식, 기저 세포 암종, 편평 세포 암종, 피부섬유종, 화농성 육아종, 피부 모반, 지루성 각화증 또는 자외선 각화증의 치료를 위한 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  16. 제1항 및 제5항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 섬유증, 이형성증 및 이상증식으로 구성된 군에서 선택되는 증식성 증상의 치료를 위한 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  17. 제1항 및 제5항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 근육내, 종양내 또는 병소주위에 적용되는 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
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  20. 삭제
  21. 삭제
  22. 삭제
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  24. 제1항 및 제5항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IFN 감마 및 상기 IFN 알파 2b의 농도를 유지시키는 방식으로 IFN 바이알의 함유물을 혼합하기 위해 재조합 IFN 감마의 하나 또는 그 이상의 바이알 및 재조합 IFN 알파 2b의 상응하는 바이알을 포함하며, IFN의 혼합물을 구성하고 환자에게 혼합물 적용시키기 위한 주입용 물을 포함하는 바이알, 주사기 및 적절한 주사바늘을 추가로 포함하는 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  25. 삭제
  26. 삭제
  27. 제6항 또는 제7항에 있어서, 0.0802 g의 포타슘 디-히드로겐 포스페이트, 0.249 g의 디히드레이트 디-소듐 히드로겐 포스페이트, 4 g의 사카로스, 0.8 g의 글리신, 0.03 g의 트윈 20, 1 g의 폴리에틸렌글리콜 6000 및 각각의 동일한 비율로 100 mL 및 0.5 mL, 1 mL, 5 mL 및 10 mL에 대한 적량인 주입용 물로 구성된 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  28. 제27항에 있어서, 독립적으로 또는 화학요법, 방사선 요법 또는 두 요법의 조합과 병용하여 사용되는 악성 또는 양성 충실성 종양의 치료를 위한 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  29. 제28항에 있어서, 후두 암종, 인후 유두종증, 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 급성 림프성 백혈병, 만성 림프성 백혈병, T 세포 백혈병, B 세포 백혈병, 중추 신경계 림프종, 지방종, 유포피 낭종, 피내 낭종, 지방육종, 신경섬유종, 피지선 증식, 해면상혈관종, 간세포 선종, 초점성 결절형 과증식, 성상세포종, 다형성 교아종, 상의세포종, 신경절세포종, 미성년의 모세포성 별아교세포종, 혼합 교종, 핍지교종, 시신경 교종, 코르도마(cordomas), 두개인두종, 수아세포종, 수막종, 송과체종, 뇌하수체 선종, 원시성 신경외배엽성 종양(primitive neuroectodermal tumors), 청신경종, 혈관성 종양, 수막 암종, 신경섬유종증, 뇌의 의사종양, 결절성 경화증, 전이성 뇌종양, 체리 유사 혈관종(cherry like angiomas), 피지선 이상증식, 기저 세포 암종, 편평 세포 암종, 피부섬유종, 화농성 육아종, 피부 모반, 지루성 각화증 또는 자외선 각화증의 치료를 위한 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  30. 제27항에 있어서, 섬유증, 이형성증 및 이상증식으로 구성된 군에서 선택되는 증식성 증상의 치료를 위한 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  31. 제27항에 있어서, 근육내, 종양내 또는 병소주위에 적용되는 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
  32. 제27항에 있어서, 상기 IFN 감마 및 상기 IFN 알파 2b의 농도를 유지시키는 방식으로 IFN 바이알의 함유물을 혼합하기 위해 재조합 IFN 감마의 하나 또는 그 이상의 바이알 및 재조합 IFN 알파 2b의 상응하는 바이알을 포함하며, IFN의 혼합물을 구성하고 환자에게 혼합물 적용시키기 위한 주입용 물을 포함하는 바이알, 주사기 및 적절한 주사바늘을 추가로 포함하는 비경구 동결 건조된 안정화 약학적 제형.
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Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9101537B2 (en) 2008-07-25 2015-08-11 Reven Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the prevention and treatment of cardiovascular diseases
EP2236520A1 (en) * 2009-03-31 2010-10-06 Leukocare Ag Stabilizing composition for immobilized biomolecules
EP2266588A1 (en) * 2009-06-04 2010-12-29 Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung des öffentlichen Rechts Method for cancer therapy based on co-administration of a parovirus and a cytokine
JP2011001273A (ja) * 2009-06-16 2011-01-06 Eci Inc ｅＭＩＰを有効成分とする水溶性製剤
PT2377516E (pt) * 2010-04-14 2012-07-02 Braun Melsungen Ag Composição acetaminofeno
RU2482871C2 (ru) * 2010-06-07 2013-05-27 Общество с ограниченной ответственностью "Центр Инновационных Технологий "БиоФарм" (ООО "ЦИТ "БиоФарм") Композиция для лечения вирусных заболеваний животных
CA2989896C (en) 2010-07-22 2021-02-09 Reven Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating or ameliorating diseases and enhancing performance comprising the use of a magnetic dipole stabilized solution
WO2012149302A1 (en) * 2011-04-27 2012-11-01 Northshore University Healthsystem Compositions and methods
RU2524651C1 (ru) * 2013-06-20 2014-07-27 Общество С Ограниченной Ответственностью "Валента-Интеллект" Фармацевтическая композиция в форме раствора для инъекций и способ ее получения
CN104043110B (zh) * 2014-03-28 2016-05-04 上海交通大学 干扰素温敏水凝胶及其制备方法和应用
CN109819650A (zh) * 2017-09-25 2019-05-28 春布里泽·格奥尔基·格奥尔基耶维奇 具有抗病毒和抗细菌活性的热稳定组合物及其用途
JOP20200134A1 (ar) * 2017-12-07 2022-10-30 Reven Llc تركيبات وطرق لمعالجة حالات أيضية
BR112021025105A2 (pt) * 2019-06-12 2022-03-15 Reven Ip Holdco Llc Métodos e composições para melhorar os resultados de pacientes com câncer
CU20200029A7 (es) * 2020-05-20 2022-01-13 Ct Ingenieria Genetica Biotecnologia Composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades respiratorias de origen viral
CN114015758B (zh) * 2021-10-15 2022-06-24 无锡百泰克生物技术有限公司 一种冻干保护剂、荧光pcr检测试剂盒及冻干工艺
EP4423251A1 (en) * 2021-10-26 2024-09-04 Georgia State University Research Foundation, Inc. Sirp alpha deficient macrophages for treating cancer
CN115068592A (zh) * 2022-06-27 2022-09-20 长春生物制品研究所有限责任公司 开封后常温稳定的重组人干扰素α1b滴眼液及制备方法
CN115105584B (zh) * 2022-06-28 2023-03-31 长春生物制品研究所有限责任公司 一种卡式瓶多剂量笔式注射组合包装的干扰素注射液

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004078207A1 (en) * 2003-02-28 2004-09-16 Intermune, Inc. Interferon drug therapy for the treatment of viral diseases and liver fibrosis

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4503035B1 (en) 1978-11-24 1996-03-19 Hoffmann La Roche Protein purification process and product
EP0080879B1 (en) 1981-11-28 1986-10-01 Sunstar Kabushiki Kaisha Pharmaceutical composition containing interferon in stable state
EP0082481B2 (en) 1981-12-23 1990-09-12 Schering Corporation Stabilised alpha-interferon formulations and their preparation
ZA828580B (en) * 1981-12-23 1983-10-26 Schering Corp Interferon formulations
EP0107498B1 (en) 1982-10-25 1990-05-16 Genentech, Inc. Synergistic human interferon activity
US4499072A (en) 1982-11-29 1985-02-12 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Process for treating diseases with ODC inhibitors
US4680175A (en) * 1984-02-07 1987-07-14 Interferon Sciences, Inc. Interferon administration vehicles
AU592552B2 (en) * 1985-03-25 1990-01-18 Schering Corporation Stable gamma interferon formulation
US4847079A (en) * 1985-07-29 1989-07-11 Schering Corporation Biologically stable interferon compositions comprising thimerosal
US5002879A (en) 1986-05-06 1991-03-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Treatment of tumors with autologous LAK cells, interleukin-2 and an ornithine decarboxylase inhibitor
US5028422A (en) 1986-05-27 1991-07-02 Schering Corporation Treatment of basal cell carcinoma intralesionally with recombinant human alpha interferon
US5002764A (en) 1986-08-12 1991-03-26 Schering Corporation Treatment of actinic keratoses with alpha2 interferon
US5024833A (en) 1988-03-10 1991-06-18 Industrial Farmaceutica Serono Spa Combined interferon/antiestrogen therapy for treatment of breast cancer
ATE74517T1 (de) * 1987-01-20 1992-04-15 Schering Corp Behandlung von einigen leukaemien mit einer zusammensetzung von interferon-gamma und interferon-alpha.
US5190751A (en) 1987-01-20 1993-03-02 Schering Corporation Treatment of certain leukemias with a combination of gamma interferon and alpha interferon
US4895716A (en) 1987-06-09 1990-01-23 Biogen, Inc. Stabilized formulations of gamma interferons
DE3731255A1 (de) * 1987-09-17 1989-04-06 Boehringer Ingelheim Int Stabilisierung von therapeutisch wirksamen proteinen in pharmazeutischen zubereitungen
IL88233A (en) 1987-11-03 1993-08-18 Genentech Inc Gamma interferon formulation
US5256410A (en) 1988-12-01 1993-10-26 Schering Corporation Treatment of squamous cell carcinoma intralesionally with recombinant human alpha interferon
US5444064A (en) 1989-02-28 1995-08-22 Montefiore Medical Center Method of treating gastrointestinal malignancies
CA2024046A1 (en) * 1989-09-28 1991-03-29 Alberto Ferro Stabilized leukocyte-interferons
US5372808A (en) * 1990-10-17 1994-12-13 Amgen Inc. Methods and compositions for the treatment of diseases with consensus interferon while reducing side effect
US5236707A (en) 1991-11-08 1993-08-17 Dallas Biotherapeutics, Inc. Stabilization of human interferon
AU674306B2 (en) 1992-02-10 1996-12-19 Interferon Sciences Inc. Improved alpha interferon composition and method for its production from human peripheral blood leukocytes
US5676942A (en) 1992-02-10 1997-10-14 Interferon Sciences, Inc. Composition containing human alpha interferon species proteins and method for use thereof
SI9300468A (en) * 1992-10-14 1994-06-30 Hoffmann La Roche Injectable composition for the sustained release of biologically active compounds
GB9226729D0 (en) 1992-12-22 1993-02-17 Wellcome Found Therapeutic combination
AU695125B2 (en) * 1993-02-02 1998-08-06 Xoma Corporation Pharmaceutical compositions containing bactericidal permeability increasing protein and a surfactant
US5814640A (en) 1994-10-04 1998-09-29 Montefiore Medical Center Method of treating gastrointestinal malignancies
US5766582A (en) * 1994-10-11 1998-06-16 Schering Corporation Stable, aqueous alfa interferon solution formulations
TW426523B (en) 1995-04-06 2001-03-21 Hoffmann La Roche Interferon solution
CN1175901C (zh) 1999-12-06 2004-11-17 天津华立达生物工程有限公司 一种稳定的干扰素水溶液
US20030129162A1 (en) * 2000-09-12 2003-07-10 Lau Allan S. Compositions comprising mixtures of therapeutic proteins and methods of producing the same
US6887462B2 (en) * 2001-04-09 2005-05-03 Chiron Corporation HSA-free formulations of interferon-beta
WO2003014112A1 (fr) * 2001-08-03 2003-02-20 Takeda Chemical Industries, Ltd. Cristal et procede de fabrication correspondant
US6818613B2 (en) * 2001-11-07 2004-11-16 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Aqueous sustained-release formulations of proteins
AU2003268664A1 (en) * 2002-09-26 2004-04-19 Shionogi And Co., Ltd. Stabilized protein compositions
EP1569681A1 (en) * 2002-12-13 2005-09-07 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Freeze-dried interferon-gammad; composition for transpulmonary administration and inhalation system therefor
JP2005162663A (ja) * 2003-12-02 2005-06-23 Asahi Denka Kogyo Kk 皮膚用基剤
US20050123576A1 (en) * 2003-12-03 2005-06-09 Ilana Lavon Mupirocin compositions for topical use, an improved process of making same and methods of using same
EP2102748B1 (en) * 2006-12-22 2012-02-01 International Business Machines Corporation System and method for recovery of memory transactions

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004078207A1 (en) * 2003-02-28 2004-09-16 Intermune, Inc. Interferon drug therapy for the treatment of viral diseases and liver fibrosis

Also Published As

Publication number Publication date
RU2403057C2 (ru) 2010-11-10
BRPI0618197A2 (pt) 2013-01-08
US8535657B2 (en) 2013-09-17
US20090304628A1 (en) 2009-12-10
RU2008121874A (ru) 2009-12-10
WO2007051431A2 (es) 2007-05-10
ES2619632T3 (es) 2017-06-26
EP1958643A2 (en) 2008-08-20
CU23432B6 (es) 2009-10-16
CN101351219A (zh) 2009-01-21
AR056586A1 (es) 2007-10-10
JP5366551B2 (ja) 2013-12-11
CN104826094A (zh) 2015-08-12
KR20080065684A (ko) 2008-07-14
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