KR101203752B1

KR101203752B1 - 홍게를 유효성분으로 함유하는 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 치료용 조성물

Info

Publication number: KR101203752B1
Application number: KR1020100079520A
Authority: KR
Inventors: 조순영; 최종원; 이승주; 하왕현; 최혜진
Original assignee: 강릉원주대학교산학협력단
Priority date: 2010-08-17
Filing date: 2010-08-17
Publication date: 2012-11-21
Also published as: KR20120021800A

Abstract

본 발명은 홍게를 유효성분으로 함유하는 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 본 발명의 홍게는 고지혈증을 유발시킨 동물모델에서 간조직 및 분변 중 지질 함량을 감소시키고, 혈청 중의 중성지방, 콜레스테롤, 인지질, 과산화지질 및 Hydroxyl radical 함량을 감소시키며, 혈청 중 SOD 활성을 증진시킴을 확인한 바, 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 치료에 유용한 약학조성물 및 건강기능식품에 이용될 수 있다.

Description

홍게를 유효성분으로 함유하는 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 치료용 조성물 {Composition comprising Chioneceter japonicur for preventing and treating obesity or hyperlipidemia and atherosclerotic-vascular diseases}

본 발명은 홍게를 유효성분으로 함유하는 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.

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사람들이 일상적으로 알고 있는 기존의 만성 퇴행성 질환을 설명하던 성인병의 개념을 1996년 일본 후생성 공중위생심의회에서 "생활습관병"의 개념을 도입하였으며(1), '식습관, 운동습관, 휴양, 흡연, 음주 등의 생활습관이 발병, 진행에 관여하는 질환군'이라고 "생활습관병"으로 정의하였다(2). 따라서 생활습관병은 생활습관의 개선을 통한 질병의 발생과 진행을 막을 수 있다는 1차 예방적 개념이며, 소아기부터 올바른 생활습관을 가지도록 해야 한다는 개념이 들어 있다(3, 4).

흡연, 고혈압, 비만 및 고지혈증등이 동맥경화증을 야기시키는 위험인자로 이 중 고지혈증은 혈중 중성지방 및 콜레스테롤이 비정상적으로 증가된 상태, 즉 혈청지질의 농도가 정상보다 많은 경우를 말하는 것으로(5, 6) 증가된 지질의 종류에 따라 고콜레스테롤혈증과 고중성지방혈증으로 분류된다. 고지혈증은 지질함량 식이의 과다한 섭취가 주원인인데(7, 8) 보다 정확한 원인은 과다한 육류의 섭취가 아니라, 고혈당이나 섭취한 지질의 대사이상으로 인한 혈중 지질의 증가가 중요한 요인으로 알려져 있으며, 이러한 지질과산화에 따른 조직의 손상으로 인해 발병된다(9, 10). 고지혈증은 심혈관계질환 중 특히 관상동맥질환의 가장 중요한 독립적인 위험인자로서 혈중 콜레스테롤이나 중성지방이 정상 이상으로 상승되면 동맥경화증 발생이 증가되지만, 혈중 콜레스테롤 농도 특히 LDL-콜레스테롤 농도를 감소시키거나 HDL-콜레스테롤을 증가시키면 관상동맥질환이 감소된다는 사실은 잘 알려져 있다(11). 고혈압, 당뇨병, 고콜레스테롤혈증, 흡연, 비만, 부족한 운동 등은 관상동맥질환의 위험요인으로 지적되고 있고(12, 13), 지방 섭취 등을 비롯한 식사 요인은 고콜레스테롤혈증 및 관상동맥질환에 지대한 영향을 미친다고 한다(14). 고지혈증 약물요법에 보고된 바에 의하면 고지혈증의 치료지침은 크게 생활요법(포화지방산과 콜레스테롤 섭취를 줄이는 식사요법, 체중감소, 운동요법등)과 약물요법의 두 가지 방법으로 구분한다. 이 중 약물요법으로 사용되어지는 합성의약품은 LDL-콜레스테롤치나 중성지방치를 감소시키는 반면 복통, 소화불량, 고혈당, 망막병증, 불면증, 근육병증 등의 부작용을 가져온다(15).

홍게(red crab)는 학명이 Chioneceter japanicur로 통상 우리나라에선 대게 또는 홍 대게라고 불린다. 홍게는 특유의 감칠맛과 향 때문에 많은 사람들이 별미로 즐겨 먹거나 맛살, 그라탱 등 가공식품제조에 이용하고 있다. 홍게는 식용으로 이용되는 부위가 15% 정도이고 나머지 85%는 가공부산물로 폐기되고 있다. 이에 본 연구에서는 동해안의 특산물인 홍게를 이용하여 버리는 부분 없이 각 부위를 나누고 이들을 용매로 추출하여 생리활성을 동물실험을 통해 검증하고자 하였다.

이에 본 발명자들은 홍게의 항비만과 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 치료의 조성물에 대해서 연구한 바, 비만 유도성분(beef tallow)을 첨가한 조제 시료를 사육하여 비만 및 식이성 고지혈증을 유발시킨 동물모델의 홍게 투여군에서 혈중 중성지방 및 콜레스테롤 함량을 감소시킴을 확인하였으며, 고콜레스테롤 식이 섭취로 고지혈증을 유발시킨 동물모델에서 간조직 및 분변 중 지질 함량을 감소시키고, 혈청 중의 중성지방, 콜레스테롤, 인지질, 과산화지질 및 Hydroxyl radical 함량을 감소시키며, 혈청 중 SOD 활성을 증진시킴을 확인하여, 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 치료에 유용함을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.

상기 목적을 수행하기 위하여, 본 발명은 홍게를 유효성분으로 함유하는 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 홍게를 유효성분으로 함유하는 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.

본원에서 정의되는 상기 홍게는 건조분말, 극성용매 가용 추출물, 또는 극성용매 불용성 추출물 형태를 포함한다.

본원에서 정의되는 상기 홍게는 홍게살, 홍게 다리껍질 또는 홍게 몸통껍질을 포함하며, 바람직하게는 또한 (1) 홍게 건조분말은 일광건조, 자연건조, 강제 건조법 등의 통상적인 건조법으로 건조시키고 분말화시킨 홍게 건조분말(이하, “CJ-B”이라 함)을 포함하며; (2) 상기 홍게 극성용매 가용 추출물은 상기 건조분말을 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등과 같은 저급알콜 및 이의 혼합물, 바람직하게는, 물 및 에탄올 혼합용매 등과 같은 극성용매로 통상적인 추출공정으로 추출한 홍게 극성용매 가용 추출물(이하, “CJ-1”이라 함); 및 (3) 상기 극성용매에 불용성 잔사인 홍게 극성용매 불용성 추출물(이하, “CJ-P”이라 함)을 포함한다.

본원에서 정의되는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환은 구체적으로는 고지혈증, 동맥경화증, 심부전증, 고혈압성 심장질환, 부정맥, 선천성 심장질환, 심근경색증, 협심증, 뇌졸중 또는 말초혈관질환, 바람직하게는 고지혈증 또는 동맥경화증이다.

이하, 본 발명의 홍게 극성용매 가용 추출물 및 홍게 극성용매 불용성 추출물을 수득하는 방법을 상세히 설명한다.

예를 들어, 진공동결된 홍게 시료를 플라스크에 넣은 후 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등과 같은 저급알콜 및 이의 혼합물, 바람직하게는, 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 바람직하게는, 80 내지 100% 에탄올을 시료량의 1배 내지 20배(w/v), 바람직하게는 2.5배 내지 10배(w/v)를 첨가한 후에 1℃ 내지 50℃, 바람직하게는 5℃ 내지 45℃에서 10분 내지 50분, 바람직하게는 20분 내지 40분 동안 초음파 추출한 후, 감압여과 장치를 이용해서 여과를 하여 추출된 홍게 극성용매 가용 추출물 및 극성용매에 불용성인 홍게 극성용매 불용성 추출물로 나누는 제 1단계; 상기에서 얻은 각각의 추출물의 용매를 제거 후 회전 감압농축기로 5℃ 내지 45℃에서 농축, 동결 건조한 후 -5℃ 내지 -60℃, 바람직하게는 -10℃ 내지 -50℃에 보관하는 제 2단계의 제조공정을 통하여 본 발명의 홍게 극성용매 가용 추출물을 수득하고, 남은 잔사를 건조시켜 홍게 극성용매 불용성 추출물을 각각 수득할 수 있다.

상기 제 1단계에서, 상기 홍게는 홍게(Chioneceter japanicur)이다.

본 발명의 약학 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 홍게를 0.1 내지 50 중량%로 포함한다.

그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.

본 발명의 상기 홍게 자체는 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다.

본 발명의 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 분말에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 홍게는 1일 0.5 g/kg 내지 5 g/kg으로, 바람직하게는 1 g/kg 내지 3 g/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.

본 발명의 홍게를 포함하는 조성물은 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 개선을 위한 약제, 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 발명의 홍게를 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.

본 발명의 홍게는 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 개선을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 홍게의 양은 일반적으로 본 발명의 건강식품 조성물은 전체 식품 중량의 1 내지 5 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다.

본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 홍게를 함유하는 것 외에 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명의 홍게는 고지혈증을 유발시킨 동물모델에서 간조직 및 분변 중 지질 함량을 감소시키고, 혈청 중의 중성지방, 콜레스테롤, 인지질, 과산화지질 및 Hydroxyl radical 함량을 감소시키며, 혈청 중 SOD 활성을 증진시킴을 확인하여, 비만 또는 고지혈증 및 동맥경화성 혈관계 질환의 예방 및 치료에 유용한 약학조성물 및 건강기능식품에 이용될 수 있다.

이하 본 발명의 참고예, 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 참고예, 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 참고예, 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 추출물 및 추출잔사의 제조

속초시에 위치한 성진상사에서 구입한 진공 동결된 홍게(50g as dry weight)를 500mL 삼각 플라스크(Erlenmeyer flask)에 넣은 후 95% 에탄올을 시료량의 5배(w/v)인 250mL을 첨가한 후에 30℃에서 30분 동안 초음파 추출한 후 감압여과 장치를 이용해서 여과를 하여 추출된 추출물과 잔사로 나누었다. 추출된 잔사는 실온에서 에탄올을 제거 후 -20℃이하에서 보관하였고, 에탄올 추출물은 감압 농축기로 40℃에서 에탄올을 제거한 후 -40℃이하에서 보관하면서 실험분석에 사용되었다. 상기 실험에서 (1) 홍게살 에탄올 추출물(이하, “CJ-1A”이라 함) 및 홍게살 에탄올 추출물 잔사(이하, “CJ-1AR”이라 함) (2) 홍게 다리껍질 에탄올 추출물(이하, “CJ-1B”이라 함) 및 홍게 다리껍질 에탄올 추출물 잔사(이하, “CJ-1BR”이라 함), (3) 홍게 몸통껍질 에탄올 추출물(이하, “CJ-1C”이라 함) 및 홍게 몸통껍질 에탄올 추출물 잔사(이하, “CJ-1CR”이라 함)를 각각 수득하였다(표 1 참조).

건조홍게로부터 수득한 추출물 수율 ( Unit : g/100g)
시료	홍게 살(g)	홍게 다리껍질(g)	홍게 몸통껍질(g)
홍게	2.97	0.12	0.15

참고예 1. 실험준비

1-1. 동물 및 처치

본 시험에 사용한 SPF 웅성 140±10g의 Sprague-Dawley(SD)계 흰쥐는 [(주) 효창사이언스(대구)]로부터 구입한 후 1주일 간 검역과 순화, 사육을 거쳐 건강한 동물만을 실험에 이용하였다. 본시험의 사육환경은 온도 22±3℃, 상대습도 50±10%, 조명시간 12시간(07:00~19:00)로 설정된 실험동물 사육실(TECNIPLAST, Italy)에서 실시되었다. 사료는 실험동물용 고형사료(중앙실험동물, 서울)를 음수는 상수도를 자유 섭취시켰다. 실험 시간 전 24시간 동안 물만 주고 절식하였다. 이때 효소 활성의 일중 변동을 고려하여 실험동물을 일정시간(오전 10:00~12:00) 내에서 처치하였다.

1-2. 실험사료의 동물식이 투여 방법

각각의 시료를 생리식염수로 희석한 4% tween 80을 사용하여 시료를 200mg/kg 용량으로 4주간 각각의 실험군에 경구용 needle zonde을 사용하여 투여하였다.

1-3. 통계학적 분석

본 실험에서 얻어진 결과는 평균치±표준편차로 표시하였고, 통계적 유의성 검증은 Duncan's multiple range test로 그 유의성을 나타내었다.

실험예 1. 고지혈증 실험

1-1. 고지혈증의 유발

실험동물의 식이성 고지혈증의 유발은 표 2에 나타내었다. 즉 beef tallow를 첨가한 조제 시료를 6주간 사육하여 유발시켰다(표 2 참조).

기초 및 고지혈증식이의 구성
구성	기초식이 (%)	고지혈증식이 (%)
Casein	20.0	20.0
DL - Methionine	0.3	0.3
Corn Starch	15.0	15.0
Sucrose	50.0	34.5
Fiber ¹ ⁾	5.0	5.0
Corn oil	5.0	-
AIN - mineral Mixture ² ⁾	3.5	3.5
AIN - vitamin Mixture ³ ⁾	1.0	1.0
Choline Bitartate	0.2	0.2
Beef Tallow	-	20.5
¹⁾ Cellulose : Sigma Co . LTD ., USA ²⁾ Rogers and Haper (1965)의 방법에 따른 미네랄 혼합물은 하기와 같다(g/ kg diet ): 인산칼슘 2가 500.0, 염화나트륨 74.0, 칼슘 구연산염 일수염 220.0, 황산칼슘 52.0, 산화마그네슘 24.0, 탄산마그네슘 3.5, 철 구연산염 6.0, 탄산아연1 .6, cupuric 탄산염 0.3, 칼륨 요오드산염 0.01, 크롬 칼륨 황산염 0.55, 수크로오스로 미세분말화 하여 1,000으로 조정 ³⁾ 비타민 혼합물(g/ kg diet ): 티아민 HCl 0.6, 비오틴 0.02, 리보플라빈 0.6, 시아노코발라민 0.001, 피리독신 HCl 0.7, 레티닐 아세테이트 0.8, 니코틴산 3.0, DL -토코페롤 3.8, Ca - 판토테네이트 1.6, 7- 디하이드로콜레스테롤 0.0025, 엽산 0.2, 메티오닌 0.005, 수크로오스로 미세분말화 하여 1,000으로 조정

1-2. 혈청 및 효소원의 조제

시료의 투입이 끝난 실험동물을 CO₂로 가볍게 마취시켜 복부 대동맥으로부터 혈액을 채취하였고, 채취한 혈액은 30분간 방치한 후 3,000 rpm에서 10분간 원심 분리하여 혈청을 분리하여 지질, lipid peroxide, hydroxyl radical 함량 및 superoxide dismutase 활성 측정에 사용하였다.

1-3. 체중 및 지방 조직의 무게 측정

체중 변화는 실험 개시일로부터 1주일마다 측정하였으며, 지방 조직의 무게는 복강 및 고환주위의 지방을 채취하여 산출하였다.

1-4. 간조직 및 분변중 지질 함량측정

간조직은 중량을 측정한 뒤 -70℃에 냉동 보관하였으며, 분변은 마지막 4일 동안의 것을 수거하였다. 중성지방과 콜레스테롤 측정은 Folch(16)등의 방법에 따라 추출하였다. 즉 변은 동결건조 후 분쇄하여 분말화 시켰으며, 간조직은 세절한 다음 teflon homogenizer로 마쇄하였다. 시료에 10배량의 용매(chloroform:methanol=2:1)를 첨가하여 지질을 반복 추출한 후 여과액을 수기에 넣고 감압농축하여 지질을 얻었다. 이에 메탄올을 가하여 잘 용해시킨 후 효소법을 이용한 kit를 사용하여 정량하였다.

1-5.총지질( Total lipid ) 함량 측정

Sulfo-phospho-vanillin reaction의 원리를 이용한 Fringe와 Dunn의 방법(1980)에 의하여 지질을 진한 황산과 함께 가열한 후 vanillin 인산을 가하여 나타나는 핑크색을 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준 검량선에 준해 혈중 함량은 ㎎/㎗로 표시하였다.

1-6. 총 콜레스테롤( Total cholesterol ) 함량 측정

Richmond(18)등의 효소법에 의하여 조제된 kit(AM 202-K, Asan)를 사용하여 실험하였다. 빙냉상에서 효소시약(cholesterol esterase 20.5 U/ℓ, cholesterol oxidase 10.7 U/ℓ, sodium hydroxide 1.81 g/ℓ함유)을 효소시약 용해액(potassium phosphate monobasic 13.6g/ℓ, phenol 1.88 g/ℓ 함유)에 용해한 용액에 시료 20㎕에 조제한 효소시액 3.0㎖을 첨가한 후 37℃에서 5분간 incubation하여 시약 blank를 대조로 파장 500㎚에서 흡광도를 측정하였다. 표준 검량선에 준해 혈중 함량은 ㎎/㎗로 표시하였다.

1-7. 트리글리세리드 ( Triglyceride ) 함량 측정

McGowan 등(19)의 방법에 준하여 조제된 kit(AM 157S-K, Asan)를 사용하여 실험하였다. 빙냉상에서 효소시약(lipoprotein lipase 10800U, glycerol kinase 5.4U, peroxidase 135000U, L-α-glycero phosphooxidase 160U 함유)을 효소시약 용해액[N,N-bis(2-hydroxyethyl)-2-aminomethane sulfonic acid 0.427 g/㎗ 함유]에 용해한 용액에 시료 20㎕에 조제한 효소시액 3.0㎖을 첨가한 후 37℃에서 10분간 incubation하여 시약 blank를 대조로 파장 550㎚에서 흡광도를 측정하였다. 표준 검량선에 준해 혈중 함량은 ㎎/㎗로 표시하였다.

1-8. 인지질( Phospholipid ) 함량 측정

Chen 등(20)의 효소법에 의하여 조제된 kit(Iatron Chem. Co.)를 사용하여 실험하였다. 빙냉상에서 효소시약(phospholipase 3.9U, choline oxidase 5.6U, peroxidase 3.6U, 4-aminoantipyrine 0.3252㎎ 함유)을 효소시약 용해액[tris(hydroxymethyl)-aminomethane 6.057㎎ 함유]에 용해한 용액에 시료 20㎕에 조제한 효소시액 3.0㎖을 첨가한 후 37℃에서 20분간 incubation하여 파장 500㎚에서 흡광도를 측정하였다. 표준 검량선에 준해 그 함량을 ㎎/㎗로 표시하였다.

1-9. High density lipoprotein - cholesterol ( HDL -C) 함량 측정

Noma등(21)의 효소법에 의하여 조제된 kit(AM 203-K, Asan)를 사용하여 실험하였다. 혈청 20㎕에 침강시약(dextran sulfate 0.1%, magnesium chloride 0.1M 함유) 0.2㎖를 가하고 잘 혼합한 후 실온에서 10분간 방치하고 3000rpm에서 10분간 원심분리하였다. 그 상징액을 0.1㎖ 취하여 효소시액 3.0㎖와 잘 혼합하여 37℃에서 5분간 incubation하여 시약 blank를 대조로 파장 500㎚에서 흡광도를 측정하였다. 표준 검량선에 준해 그 함량을 ㎎/㎗로 표시하였다.

1-10. LDL - cholesterol 함량 측정

Low density lipoprotein-cholesterol(LDL-C) 함량은 Fridewald(22)등의 방법에 따라 하기 수학식 1에 의하여 산출하였다.

1-11. 혈중 Lipid peroxide 함량 측정

Yagi 등(23)의 방법에 따라 혈청 20㎕에 1/12N H₂SO₄ 4.0㎖를 가하여 혼합하고 10% phosphotungstic acid 0.5㎖를 가하여 실온에서 5분간 방치한 후 원심분리하여 침전물인 혈청단백질만 취해서 다시 1/12N H₂SO₄ 2.0㎖와 10% phosphotungstic acid 0.3㎖를 가하여 원심분리하였다. 침전물만을 취하여 증류수 4.0㎖와 0.67% thiobarbituric acid와 acetic acid를 1:1로 혼합한 용액을 1.0㎖를 가하고 95℃에서 60분간 반응시켜 실온에서 냉각 후 n-BuOH을 5.0㎖를 첨가하여 3000rpm에서 15분간 원심분리한 후 생성된 홍색의 n-BuOH을 취해 spectrofluorometer를 사용하여(Ex : 515nm, Em : 553nm) 흡광도를 측정하였다. 표준 용액으로 tetraethoxypropane 0.5 nmole을 같은 방법으로 반응시켜 흡광도를 측정하고 하기의 수학식 2에 의해 혈청 lipid peroxide 함량을 산출하였다.

1-12. 혈중 Hydroxyl radical 함량 측정

Kobatake 등(24)의 방법에 따라 혈청 34.8㎕에 0.54M NaCl, 0.1M potassium phosphate buffer(pH 7.4), 10mM NaN₃, 7mM deoxyribose, 5mM ferrous ammonium sulfate 및 증류수로서 333.3㎕가 되도록 첨가하여 vortex에서 잘 혼합하여 37℃ 에서 15분간 정치하였다. 혈청 67㎕를 취하고 여기에 8.1% sodium dodecyl sulfate 75㎕, 20% acetic acid 500㎕ 및 재증류수 25㎕를 넣어 혼합하였다. 여기에 다시 1.2% thiobarbituric acid 333㎕를 가하여 water bath(100℃)에서 30분간 가열한 후 실온에서 냉각한 다음 700×g에서 5분간 원심분리하여 얻은 상층액을 파장 532㎚에서 흡광도를 측정하여 표준 검량선에 의하여 hydroxyl radical(nmole/mg protein)의 함량을 정량하였다.

1-13. 혈중 Superoxide dismutase ( SOD ) 활성 측정

Oyanagui(25)의 방법에 따라 정량하였다. 혈청을 potassium phosphate buffer로써 100배 희석하여 그 중의 100㎕를 시험관에 넣고 여기에 재증류수 500㎕, 시약 A(3mM hydroxylamine / 3mM hypoxanthine) 200㎕ 및 시약 B(7.5mU/ml xanthine oxidase(XO) with 0.1mM EDTA-2Na) 200㎕를 넣고 잘 혼합한 다음, 37℃ water bath에서 40분간 정치한다. 반응액에 시약 C(300 of sulfanilic acid / 5.0mg N-1-naphthyl-ethylenediamine in 500㎖ of 16.7% acetic acid) 2.0㎖를 넣어 실온에서 20분 동안 정치한 다음 550㎚에서 흡광도를 측정하여 표준 검량선에 준하여 혈청 중의 superoxide dismutase 활성을 측정하였다. 효소 활성도는 superoxide dismutase의 U/mg protein으로 표시하였다. SOD의 1 Unit는 50% 억제되는 adrenochrome의 생성율로서 산출하였다.

1-14. 단백질 정량

단백질의 함량은 Lowry(26)등의 방법에 준하여 bovine serum albumin(Sigma, Fr. V)을 표준품으로 하여 측정하였다.

2. 실험 결과

2-1. 체중변화

체중은 실험 개시일로부터 1주일마다 측정하였으며, 지방조직의 무게는 실험 마지막 날 복강 및 고환주위의 지방을 채취한 후, 측정하여 표 3에 나타내었다(표 3 참조). 실험결과 6주간의 고콜레스테롤 식이 섭취로 고지혈증이 유발된 실험동물의 6주째의 체중은 325.4±21.6g으로 일반 식이를 한 정상군(6주째, 210.6±19.7g)에 비하여 무게가 약 54% 정도 증가하였음을 확인할 수 있었다. 또한, 고지혈증 실험동물에 홍게 분획물을 투여한 결과, 고지혈증 식이군과 비교하여 홍게 분획물 투여 실험군 모두 무게 증가현상을 완화하였고 홍게살에 비해 홍게껍질 부위가 더 효과가 있었으며, 특히 홍게 몸통껍질 에탄올 추출잔사물 투여군이 280.5±14.7g으로 가장 우수한 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다. 또한 표 4에 나타난 바와 같이, 고지혈증 식이군과 비교하여 홍게 분획물 투여군 실험군 모두 복강 및 고환주위 지방조직 무게의 감소효과를 확인할 수 있었으며, 특히 홍게 몸통껍질 에탄올 추출잔사 투여가 26% 감소로 우수한 효과가 있음을 확인할 수 있었다(표 4 참조). 홍게 껍질분말 성분(키틴)이 수용성 섬유소와 같은 수분 보유력을 가지고 있어 위에 머루르는 시간이 증가되어 포만감을 제공하고 영양소의 소화흡수를 지연시키는 효과가 있는 것으로 생각되었다(27).

4주 간 정상 및 고지방식이를 섭취한 랫트 체중에 대한 홍게 개개 부분의 효과
처치	투여량 ( mg / kg )	체중 증감
처치	투여량 ( mg / kg )	1	2	3	4	5	6
정상군		72.9±7.25 b	110.8±12.3 b	139.6±19.4 b	176.4±21.4 b	203.5±22.5 c	210.6±19.7 e
대조군		83.7±8.16 a	151.4±11.7 a	211.8±20.7 a	251.6±19.8 a	310.6±25.4 a	325.4±21.6 a
홍게살	200	78.2±7.11 ab	148.6±13.5 a	212.3±19.8 a	248.7±21.8 a	298.2±19.1 ab	315.6±18.9 abc
CJ-1A	200	81.6±6.45 ab	149.2±13.9 a	209.6±21.7 a	253.9±13.7 a	295.4±20.6 ab	320.3±17.7 ab
CJ-1AR	200	75.4±6.52 ab	150.3±14.8 a	210.7±18.8 a	249.2±16.4 a	297.1±14.7 ab	315.8±15.2 abc
홍게 다리껍질	200	73.7±8.17 ab	151.7±12.6 a	213.6±22.6 a	241.6±18.6 a	286.5±21.6 ab	296.5±18.3 cd
CJ-1B	200	75.4±6.47 ab	149.8±13.4 a	217.4±21.3 a	250.3±17.3 a	294.2±13.2 ab	300.6±19.8 bcd
CJ-1BR	200	76.2±7.42 ab	153.6±12.9 a	212.6±21.5 a	237.8±19.2 a	273.3±18.6 b	280.5±14.7 d
홍게 몸통껍질	200	73.4±8.06 b	150.9±14.1 a	211.3±23.4 a	243.2±18.5 a	290.2±14.5 ab	300.9±18.6 bcd
CJ-1C	200	80.6±8.25 ab	148.7±13.7 a	210.2±21.8 a	248.5±20.1 a	298.6±16.2 ab	295.4±14.9 cd
CJ-1AR	200	81.1±7.26 ab	151.2±14.0 a	216.4±22.2 a	240.5±16.4 a	281.9±15.4 b	285.2±15.6 d
6주 간 고지방식이에 의해 비만이 된 랫트는 4주 간 매일 홍게 각각의 부위를 구강급이하였고 , 홍게 각각의 부위의 마지막 처리 24시간 후 죽였다. 상기 에세이 과정은 실험방법으로 서술되어진다 . 수치는 6번 실험 결과의 평균±S.D으로 나타냄. 동일한 문자에 따르는 수치는 유의적으로 상이하지 않음(p<0.05).

4주 간 홍게 시료를 첨가한 식이가 흰쥐의 복강 및 부고환주위 지방조직 무게에 미치는 영향
처치	투여량 ( mg / kg )	복강	부고환
처치	투여량 ( mg / kg )	mg / g of body weight
정상군		6.73±2.12 e	8.27±1.83 d
대조군		14.6±3.16 a	12.8±2.11 a
홍게살	200	13.9±2.62 ab	12.5±1.42 ab
CJ -1A	200	13.7±1.87 abc	12.1±1.36 ab
CJ -1 AR	200	14.1±1.42 ab	12.3±1.25 ab
홍게 다리껍질	200	11.3±2.61 bcd	10.9±1.47 abc
CJ -1B	200	13.5±1.38 abc	12.1±1.63 ab
CJ -1 BR	200	9.62±2.25 d	9.43±1.42 cd
홍게 몸통껍질	200	12.5±2.10 abc	11.4±1.37 ab
CJ -1C	200	13.4±2.13 abc	12.3±1.45 ab
CJ -1 CR	200	10.9±1.92 cd	10.5±1.38 bc
상기 에세이 과정은 실험방법으로 서술되어진다 . 수치는 6번 실험 결과의 평균±S.D으로 나타냄. 동일한 문자에 따르는 수치는 유의적으로 상이하지 않음(p<0.05).

2-2. 혈청에서의 지질( lipid ) 함량

표 5에 나타난 바와 같이, 고지혈증 흰쥐의 혈중 지질양은 일반식이를 한 흰쥐에 비하여 phospholipid 18%, triglyceride 172%로 특히 중성지질의 증가 비율이 높은 것을 확인할 수 있었다(표 5 참조). 홍게 분획물을 투여한 실험군에서의 인지질양은 고지혈증 식이군과 실험군을 비교하여 유의적인 차이를 보이지 않았지만 중성지질의 함량은 실험군 모두 증가현상을 완화하였다. 특히 홍게 몸통껍질 추출잔사가 고지혈증 식이군 혈중 중성지질의 함량에 비하여 약 26% 감소로 감소율이 가장 높음을 확인하였다.

홍게 시료를 4주간 경구투여 한 후 혈청지질성분의 농도변화 결과
처치	투여량 ( mg / kg )	Phospholipid	Triglyceride
처치	투여량 ( mg / kg )	mg / dl
정상군		127.7±20.3 a	71.3±7.43 f
대조군		151.3±18.7 a	194.5±10.6 a
홍게살	200	149.8±14.2 a	182.3±9.7 abc
CJ -1A	200	147.3±18.9 a	186.7±11.3 ab
CJ -1 AR	200	150.6±19.6 a	180.4±10.8 bc
홍게살 다리껍질	200	150.8±16.5 a	163.9±10.1 bc
CJ -1B	200	148.3±17.3 a	185.2±9.9 ab
CJ -1 BR	200	146.2±18.8 a	142.9±11.3 e
홍게살 몸통껍질	200	149.3±15.4 a	170.7±14.6 cd
CJ -1C	200	148.1±16.1 a	182.4±10.8 abc
CJ -1 CR	200	147.1±14.5 a	151.3±10.4 e
상기 에세이 과정은 실험방법으로 서술되어진다 . 수치는 6번 실험 결과의 평균±S.D으로 나타냄. 동일한 문자에 따르는 수치는 유의적으로 상이하지 않음(p<0.05).

2-3. 혈청 콜레스테롤( cholesterol ) 함량 변화 및 동맥경화지수

고콜레스테롤 식이 섭취로 고지혈증이 유발된 흰쥐에 홍게 분획물을 투여하여 혈청 cholesterol의 함량 및 동맥경화지수의 변화에 미치는 영향을 조사한 결과를 표 6에 나타내었다(표 6 참조). 고지혈증 유도로 혈중의 총cholesterol 함량이 88.7±5.25mg/dL로 증가하였던 것이 홍게 분획물 투여로 실험군 모두 총 cholesterol 함량이 낮아졌다. 특히 홍게 몸통껍질 에탄올 추출잔사가 65.8±4.37mg/dL(약 26%)로 가장 높은 감소량을 확인하였다. 키틴이 혈중의 지질 농도에 영향을 준다는 연구 결과가 나오고 있으므로(28, 29) 이런 선행연구와 비교해 보면 홍게 껍질분말 첨가 식이군에서도 혈장 콜레스테롤의 농도 저하 효과가 있으며, 이는 홍게 껍질분말이 섬유소처럼 콜레스테롤의 흡수를 저해하는 역할을 한 것으로 생각된다. HDL-cholesterol 수치와 LDL-cholesterol 수치는 고지혈증 식이군과 홍게살 첨가군 사이에는 큰 차이가 없었으나, 홍게 껍질 첨가군은 HDL-cholesterol 수치를 높여주었고, LDL-cholesterol 수치를 낮추므로 혈관계 질환에 간접으로 효과가 있음을 증명하였다. 한편, 동맥경화지수(A.I)는 고지혈증 유도 흰쥐가 1.72±0.11mg/dL이였고 홍게살과 홍게 껍질 에탄올추출물 첨가군 사이에는 큰 차이를 보이지 않은 반면에, 홍게 껍질과 홍게 껍질 에탄올 추출잔사물의 투여군의 동맥경화지수가 낮아졌으며 특히 홍게 몸통껍질 에탄올 추출잔사물 첨가군이 0.70±0.12mg/dL로 가장 낮았는데 이 결과로 보아 홍게 몸통껍질 에탄올 추출잔사물이 동맥경화지수 수치를 낮추데 뛰어난 효과가 있음을 알 수 있었다.

홍게 시료를 4주간 경구 투여 후 혈청 콜레스테롤 함량변화와 동맥경화지수 변화에 미치는 영향
처치	투여량 ( mg / kg )	Cholesterol( mg / dl )
처치	투여량 ( mg / kg )	Total	HDL	LDL	AI
정상군		56.4±6.13 e	41.8±3.14 a	2.47±0.92 d	0.35±0.07 f
대조군		88.7±5.25 a	32.6±2.96 de	7.83±1.11 a	1.72±0.11 b
홍게살	200	87.3±6.18 ab	30.3±3.18 e	7.69±0.83 a	1.88±0.09 a
CJ -1A	200	86.9±4.17 ab	31.8±2.17 e	7.77±0.75 a	1.73±0.13 b
CJ -1 AR	200	85.2±5.06 ab	32.5±3.25 de	7.65±0.65 a	1.62±0.08 b
홍게 다리껍질	200	71.3±4.25 ed	36.3±2.25 bc	6.32±0.61 b	0.96±0.10 d
CJ -1B	200	84.6±5.19 ab	32.4±2.37 de	7.53±0.76 a	1.61±0.05 b
CJ -1 BR	200	65.8±4.37 d	38.6±1.98 b	5.25±0.63 c	0.70±0.12 e
홍게 몸통껍질	200	73.8±5.19 c	35.2±2.08 cd	6.53±0.58 b	1.10±0.15 c
CJ -1C	200	81.9±4.92 b	31.3±1.83 e	7.58±0.70 a	1.62±0.13 b
CJ -1 CR	200	67.7±5.06 cd	37.5±2.11 bc	5.87±0.52 bc	0.81±0.14 e
상기 에세이 과정은 실험방법으로 서술되어진다 . 수치는 6번 실험 결과의 평균±S.D으로 나타냄. 동일한 문자에 따르는 수치는 유의적으로 상이하지 않음(p<0.05). AI ( Atheroscrelosis Index ) = ( total cholesterol - HDL cholesterol ) / HDL cholesterol

2-4. 간장 조직 중의 지질( lipid ) 및 콜레스테롤( cholesterol )함량의 변화

식이성 고지혈증을 유도한 흰쥐에 홍게 분획물을 경구 투여했을 때의 간장 조직 중의 지질 및 콜레스테롤 함량의 변화에 대한 영향을 실험한 결과는 표 7과 같다(표 7 참조). 식이성 고지혈증을 유도하여 홍게 분획물을 경구 투여한 흰쥐의 경우 고지혈증 식이군과 비교하여 볼 때 간장 조직 중의 총지질과 중성지질, 콜레스테롤 함량은 홍게살과 홍게 껍질 에탄올추출물 첨가군 사이에 유의적인 차이가 없었으나, 홍게 껍질과 홍게 껍질 에탄올 추출잔사물 첨가군에서 함량이 낮게 나타났다. 이는 홍게 껍질과 홍게 껍질 에탄올 추출잔사물 투여가 간장 조직의 지질 대사에 영향을 미친다는 것을 알 수 있으며, 고지혈증 등의 질환에도 효과가 있음을 간접적으로 증명하는 결과라고 할 수 있으며, 수용성 섬유소를 섭취했을 때 간에서의 콜레스테롤 저하 효과(30, 31)와 유사했다.

홍게 시료를 4주간 경구투여 했을 때의 간 조직중의 지질 및 콜레스테롤 함량의 변화에 대한 영향
처치	투여량 ( mg / kg )	Total lipid	Triglyceride	Cholesterol
처치	투여량 ( mg / kg )	mg / g of tissue
정상군		16.4±2.16 g	10.2±0.98 g	2.97±0.38 d
대조군		32.8±3.17 a	26.8±1.43 a	6.52±0.92 a
홍게살	200	32.9±2.13 a	25.4±1.37 abc	6.37±0.83 a
CJ -1A	200	31.4±1.97 a	25.8±1.45 ab	6.25±0.72 a
CJ -1 AR	200	31.5±2.11 a	24.3±1.97 bcd	6.31±0.87 a
홍게 다리껍질	200	25.7±1.86 de	20.6±1.41 e	4.63±0.46 bc
CJ -1B	200	28.8±2.06 bc	24.8±1.36 bc	5.88±0.53 a
CJ -1 BR	200	20.9±1.43 f	17.4±1.28 f	3.92±0.48 c
홍게 몸통껍질	200	27.3±1.82 cd	22.7±1.25 d	5.1±0.39 b
CJ -1C	200	30.7±1.77 ab	23.9±1.30 cd	6.04±0.47 a
CJ -1 CR	200	23.5±1.63 e	19.2±1.31 e	4.42±0.35 bc
상기 에세이 과정은 실험방법으로 서술되어진다 . 수치는 6번 실험 결과의 평균±S.D으로 나타냄. 동일한 문자에 따르는 수치는 유의적으로 상이하지 않음(p<0.05).

2-5. 혈중 MDA 의 함량 변화, hydroxyl radical 생성 및 superoxide dismutase ( SOD ) 활성

실험결과, 표 8에 나타낸 바와 같이, 4주간의 고콜레스테롤 식이 섭취로 고지혈증이 유발된 실험동물의 혈청 중 지질과산화 산물인 MDA의 함량은 고지혈증 식이군에 비해 홍게 분획물 첨가군 모두 낮았으면 특히 홍게 몸통껍질 에탄올 추출잔사물의 MDA 함량이 낮았다(표 8 참조). 고지혈증 식이군의 Hydroxyl radical은 5.73±0.52nmole/mg으로, 일반 식이를 한 정상군(2.87±0.49nmole/mg)에 비하여 약 2배 증가하였으며, 고지혈증 실험동물에 홍게 분획물을 투여한 결과, 고지혈증식이군과 비교하여 대체로 적게나마 혈청 중 Hydroxyl radical 감소 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다. 또한, 활성산소를 제거하는 Superoxide dismutase(SOD) 활성은 투여군 모두에서 현저하게 증진되었음을 확인할 수 있었으며 특히 홍게 몸통껍질 에탄올 추출잔사물 투여군의 활성산소 제거능이 가장 크게 증진하였다.

4주 간 홍게 시료를 섭취한 쥐의 혈청 중 지질과산화 산물인 MDA 의 함량
처치	투여량 ( mg / kg )	TBARS	Hydroxy radical	SOD
처치	투여량 ( mg / kg )	MDA nmol / mg protein	nmol / mg protein	Unit / mg protein
정상군		28.1±2.92 f	2.87±0.49 c	3.56±0.36 a
대조군		52.9±2.48 a	5.73±0.52 a	1.77±0.27 d
홍게살	200	48.3±3.11 b	5.39±0.39 ab	1.87±0.29 d
CJ -1A	200	48.7±2.73 b	5.47±0.31 ab	1.88±0.30 d
CJ -1 AR	200	47.8±2.62 b	5.51±0.25 ab	1.92±0.43 d
홍게 다리껍질	200	43.2±2.53 d	5.07±0.26 ab	2.25±0.35 bcd
CJ -1B	200	47.5±2.48 d	5.45±0.39 ab	1.98±0.34 cd
CJ -1 BR	200	39.9±2.51 e	4.69±0.42 ab	2.58±0.22 b
홍게 몸통껍질	200	43.9±2.37 cd	5.19±0.35 ab	2.11±0.36 bcd
CJ -1C	200	46.8±2.46 bc	5.41±0.28 ab	1.92±0.25 d
CJ -1 CR	200	41.6±2.33 de	4.87±0.33 ab	2.43±0.28 bc
상기 에세이 과정은 실험방법으로 서술되어진다 . 수치는 6번 실험 결과의 평균±S.D으로 나타냄. 동일한 문자에 따르는 수치는 유의적으로 상이하지 않음(p<0.05). Unit : SOD 의 단위는 혈중 50%에 대해 알칼라인 DMSO - 중개 adrechrome 의 감소 억제로써 정의된다.

하기에 본 발명의 홍게를 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

제제예 1. 산제의 제조

CJ-1 20 mg

유당 100 mg

탈크 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.

제제예 2. 정제의 제조

CJ-1A 10 mg

옥수수전분 100 mg

유당 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mg

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.

제제예 3. 캅셀제의 제조

CJ-1C 10 mg

결정성 셀룰로오스 3 mg

락토오스 14.8 mg

마그네슘 스테아레이트 0.2 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.

제제예 4. 주사제의 제조

CJ-1B 10 mL

만니톨 180 mg

주사용 멸균 증류수 2974 mg

Na₂HPO₄,12H₂O 26 mg

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.

제제예 5. 액제의 제조

CJ-1 20 mL

이성화당 10 g

만니톨 5 g

정제수 적량

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.

제제예 6. 건강 식품의 제조

CJ-P 1000 mL

비타민 혼합물 적량

비타민 A 아세테이트 70 ㎍

비타민 E 1.0 ㎎

비타민 B1 0.13 ㎎

비타민 B2 0.15 ㎎

비타민 B6 0.5 ㎎

비타민 B12 0.2 ㎍

비타민 C 10 ㎎

비오틴 10 ㎍

니코틴산아미드 1.7 ㎎

엽산 50 ㎍

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎

무기질 혼합물 적량

황산제1철 1.75 ㎎

산화아연 0.82 ㎎

탄산마그네슘 25.3 ㎎

제1인산칼륨 15 ㎎

제2인산칼슘 55 ㎎

구연산칼륨 90 ㎎

탄산칼슘 100 ㎎

염화마그네슘 24.8 ㎎

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

제제예 7. 건강 음료의 제조

CJ-1 1000 mL

구연산 1000 ㎎

올리고당 100 g

매실농축액 2 g

타우린 1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims

홍게(Chioneceter japonicur) 다리껍질 또는 홍게(Chioneceter japonicur) 몸통껍질의 극성용매 불용성 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만, 고지혈증, 또는 동맥경화증의 예방 및 치료용 약학조성물.
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홍게(Chioneceter japonicur) 다리껍질 또는 홍게(Chioneceter japonicur) 몸통껍질의 극성용매 불용성 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만, 고지혈증, 또는 동맥경화증의 예방 및 개선용 건강기능식품.
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