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KR101194402B1 - Ganoderma resinaceum KFRI-M101 and composition for improving and preventing diabetes mellitus using this - Google Patents

Ganoderma resinaceum KFRI-M101 and composition for improving and preventing diabetes mellitus using this Download PDF

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KR101194402B1
KR101194402B1 KR1020090114765A KR20090114765A KR101194402B1 KR 101194402 B1 KR101194402 B1 KR 101194402B1 KR 1020090114765 A KR1020090114765 A KR 1020090114765A KR 20090114765 A KR20090114765 A KR 20090114765A KR 101194402 B1 KR101194402 B1 KR 101194402B1
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kfri
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ganoderma
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김영찬
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황진택
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한국식품연구원
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Abstract

본 발명은 불로초속 버섯 균사체 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주 및 이를 이용한 당뇨의 예방 및 개선용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 상기 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 는 인삼의 진세노사이드 성분을 체내에 흡수되기 용이한 비극성 형태로 전환시키는 균주이며, 상기 당뇨의 예방 및 개선용 조성물은 상기 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주로 인삼을 발효시켜 수득한 인삼 발효물을 유효성분으로 포함한다. The present invention relates to a Bulchocho mushroom mycelia Ganoderma reginaseum KFRI-M101 strain and a composition for the prevention and improvement of diabetes mellitus using the same, specifically, the Ganoderma reginaseum KFRI-M101 is a ginsenoside component of ginseng A strain converting into a non-polar form that is easy to absorb into, the composition for preventing and improving diabetes includes ginseng fermentation product obtained by fermenting ginseng with the Ganoderma reginaseum KFRI-M101 strain as an active ingredient.

상기 당뇨의 예방 및 개선용 조성물은 AMPK의 활성을 증가시켜 혈당을 낮춰 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있다. The composition for preventing and improving diabetes is effective in preventing and improving diabetes by lowering blood sugar by increasing activity of AMPK.

가노데르마 레지나세움 KFRI-M101, 당뇨, AMPK, 발효 Ganoderma Reginaseum KFRI-M101, Diabetes, AMPK, Fermentation

Description

불로초속 버섯 균사체 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주 및 이를 이용한 당뇨의 예방 및 개선용 조성물 {Ganoderma resinaceum KFRI-M101 and composition for improving and preventing diabetes mellitus using this}Bullocho mushroom mycelium Ganoderma reginaseum K フ RI-M101 strain and composition for preventing and improving diabetes using same {Ganoderma resinaceum KFRI-M101 and composition for improving and preventing diabetes mellitus using this}

본 발명은 불로초속 버섯 균사체 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주 및 이를 이용한 당뇨의 예방 및 개선용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 인삼의 진세노사이드 성분을 대사시킬 수 있는 불로초속 버섯 균사체 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주 및 이를 이용하여 AMPK를 활성화시켜 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있는 당뇨의 예방 및 개선용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a Bulchocho mushroom mycelium Ganoderma reginaseum KFRI-M101 strain and a composition for the prevention and improvement of diabetes mellitus using the same, specifically, a Bulchocho mushroom mycelium Ganoder that can metabolize the ginsenoside component of ginseng Mar Reginaseum KFRI-M101 strain and activating AMPK using the same relates to a composition for the prevention and improvement of diabetes effective in the prevention and improvement of diabetes.

인삼의 특이성분으로 알려진 진세노사이드(ginsenosides)는 배당체의 형태로 존재하며, 이것을 사람이 섭취했을 때 장내세균이 분비하는 효소의 작용으로 글리코사이드 결합은 끊어지고 체내로 흡수되어 혈액 이동을 통해 약리 효과를 나타내게 된다. Ginsenosides, known as ginseng's specific constituents, exist in the form of glycosides, and when they are ingested by humans, they act as enzymes secreted by the intestinal bacteria to break down glycoside bonds and absorb them into the body, leading to pharmacological Effect.

그러나, 식습관, 약물섭취, 스트레스 등으로 개개인에 따른 장내 환경이 판 이하게 다르며, 그에 따라 배당체를 대사 시킬 수 있는 능력 또한 사람마다 다르다. 따라서, 실질적으로 같은 양, 같은 조성의 진세노사이드를 섭취했다 해도 사람마다 그 대사되는 정도가 다르므로 인삼을 섭취 후 나타나는 효과의 정도가 개개인에 따라 차이가 생길 수 밖에 없다. 한 연구에선 흰쥐에 진세노사이드 Rb1을 경구투여하면 혈액과 소변 중에는 Rb1의 농도가 증가하는 대신 이의 대사체 농도가 증가한다고 보고하였고, 그 외에도 진세노사이드를 경구 투여한 실험을 통해 실제 흡수되서 약효를 나타내는 ginsenosides는 비극성이 큰 비당체의 형태임을 밝힌 바 있다. 또한, 김 등의 연구에 의하면 98 명의 한국인을 대상으로 조사한 결과 장내 미생물로 Rb1을 대사 시켰을 때, 그 중 20 % 가량의 조사 대상자가 ginsenosides의 대사 능력이 없거나 현저히 떨어지는 것으로 보고한 바 있다. However, the intestinal environment varies greatly from one person to another due to eating habits, drug intake, and stress, and thus the ability to metabolize glycosides also varies from person to person. Therefore, even if the intake of ginsenosides of substantially the same amount, the same composition, the degree of metabolism is different for each person, so the degree of effect after ingesting ginseng is inevitably different for each individual. One study reported that oral administration of ginsenoside Rb1 to rats increased the concentration of Rb1 in the blood and urine, but increased its metabolite concentration. Ginsenosides have been shown to be a non-polar non-saccharide form. In addition, Kim et al. Reported that 98 Koreans reported that when they metabolized Rb1 by intestinal microorganisms, about 20% of the subjects had no or significantly reduced metabolism of ginsenosides.

이렇듯 개인에 따른 유효 약리 성분의 대사 정도가 다양하기 때문에 효능 발현의 차이도 다양해지는데, 이미 대사된, 그래서 흡수가 용이한 비극성 대사체의 형태로 진세노사이드 조성을 바꾼 인삼을 섭취한다면 약효 발현의 개인차는 줄고 발현 정도는 극대화 시킬 수 있을 것이다. As the degree of metabolism of effective pharmacological components varies according to individuals, the difference in efficacy expression is also diversified. Will be reduced and the expression level will be maximized.

상기의 문제점을 해결하고자 본 발명의 목적은 인삼의 진세노사이드 성분을 대사시킬 수 있는 불로초속 버섯 균사체 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주 및 이를 이용하여 AMPK를 활성화시켜 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있는 당뇨 예방 및 개선용 조성물을 제공하는 것이다. An object of the present invention to solve the above problems is the Bulchocho mushroom mycelium Kanoderma reginaseum KFRI-M101 strain that can metabolize the ginsenoside component of ginseng, and AMPK by using it to prevent and improve diabetes There is to provide a composition for preventing and improving diabetes.

상기의 목적을 달성하고자 본 발명은,The present invention to achieve the above object,

인삼의 진세노사이드 성분을 대사시키는 불로초속 버섯 균사체 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주를 제공한다. Provided is the Bulchocho mushroom mycelium Kanoderma reginaseum KFRI-M101 strain that metabolizes the ginsenoside component of ginseng.

본 발명의 다른 목적을 달성하고자 본 발명은,The present invention to achieve another object of the present invention,

가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주로 인삼을 발효시켜 수득한 인삼 발효물을 유효성분으로 포함하는 당뇨의 예방 및 개선용 조성물을 제공한다. It provides a composition for the prevention and improvement of diabetes comprising ginseng fermentation product obtained by fermenting ginseng with Ganoderma reginaseum KFRI-M101 strain as an active ingredient.

상기 발효는 20 ℃ 내지 30 ℃, 습도 40 % 내지 80 % 조건에서 진행될 수 있다. The fermentation may be carried out at 20 ℃ to 30 ℃, humidity 40% to 80% conditions.

상기 발효는 2 주 내지 8 주 동안 수행할 수 있다. The fermentation may be performed for 2 to 8 weeks.

상기 당뇨의 예방 및 개선용 조성물은 상기 인산 발효물을 물, 에탄올 또는 이의 혼합물로 추출한 추출물을 유효성분으로 포함할 수 있다. The composition for preventing and improving diabetes may include an extract of the phosphoric acid fermented product extracted with water, ethanol or a mixture thereof as an active ingredient.

상기 추출물은 90 ℃ 내지 110 ℃에서 2 시간 내지 4 시간 동안 열수추출된 것일 수 있다. The extract may be hot water extracted for 2 hours to 4 hours at 90 ℃ to 110 ℃.

상기 조성물은 건강기능식품일 수 있다. The composition may be a dietary supplement.

본 발명의 불로초속 버섯 균사체 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주는 인삼의 진세노사이드 성분을 흡수가 용이한 형태로 전환시킬 수 있다. 따라서, 인삼의 진세노사이드 성분의 체내 흡수를 돕고 당뇨병의 예방 및 개선 효과를 극대화할 수 있다. Fibromycelium mycelium Ganoderma reginaseum KFRI-M101 strain of the present invention can convert the ginsenoside component of ginseng into an easily absorbed form. Therefore, the ginsenoside component of ginseng may help the body absorb and maximize the prevention and improvement effect of diabetes.

상기 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주로 대사된 인삼 발효물을 포함하는 본 발명의 조성물은 AMPK를 활성화시켜 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 크다. The composition of the present invention comprising the ginseng fermentation metabolized by the Ganoderma reginaseum KFRI-M101 strain is effective in the prevention and improvement of diabetes by activating AMPK.

또한, 천연물에서 유래된 성분을 포함하므로 인체에 안전하며 장기간 사용하여도 부작용이 작다. In addition, since it contains ingredients derived from natural products, it is safe for the human body and has a small side effect even when used for a long time.

본 발명의 당뇨의 예방 및 개선용 조성물은 건강기능식품 등으로 다양하게 제형화될 수 있어 섭취가 용이하다. The composition for the prevention and improvement of diabetes of the present invention can be formulated in a variety of health functional foods and the like is easy to ingest.

이하, 당업자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명을 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail so that those skilled in the art can easily practice.

본 발명은 불로초속 버섯 균사체 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주를 제공한다. The present invention provides a fibromycelium mycelium Kanoderma reginaseum KFRI-M101 strain.

상기 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주는 인삼의 진세노사이드(ginsenosides) 성분을 인체에서 흡수가 용이한 대사성분으로 전환시킬 수 있다. 보다 구체적으로는, ginsenoside Rb1, Rb2 와 Rc 등과 같은 극성의 진세노사이드를 체내 흡수율이 높은 ginsenoside Rh2, Rg3 compound K와 같은 비극성 형태로 전환할 수 있다. 진세노사이드 Rb1은 대사에 의해 진세노사이드 Rd로 전환되고 이후에도 계속적인 분해로 진세노사이드의 비극성 형태인 Rh2로 전환될 수 있다. The Ganoderma reginaseum KFRI-M101 strain may convert ginsenosides components of ginseng into metabolism components that are easily absorbed by the human body. More specifically, polar ginsenosides such as ginsenoside Rb1, Rb2 and Rc can be converted into nonpolar forms such as ginsenoside Rh2 and Rg3 compound K, which have high absorption in the body. Ginsenosides Rb1 can be converted metabolically to ginsenosides Rd and subsequently to Rh2, the nonpolar form of ginsenosides, with subsequent degradation.

상기 버섯 균사체는 우리나라 경기도 인근 야산 등의 토양에서 채집한 불로초속 버섯 자실체로부터 분리한 것으로, 가노데르마 레지나세움(Ganoderma resinaceum) KFRI-M101 로 명명하고, 이를 2008년 10월 1일 한국종균협회 부설 한국미생물보존센터에 기탁번호 제KFCC 11429P로 기탁하였다. The mushroom mycelium to be separated from bulrocho in mushroom fruiting bodies was collected from the soil, such as South Korea, Gyeonggi-do nearby hills, Kano der Matthew Regina erecting (Ganoderma resinaceum) named KFRI-M101, and this October 1st Korea Seed Association affiliated, 2008 The deposit was made with the deposit number KFCC 11429P at the Korea Microorganism Conservation Center.

본 발명은 또한, 인삼 발효물을 유효성분으로 포함하는 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있는 조성물을 제공한다. The present invention also provides a composition that is effective in the prevention and improvement of diabetes comprising ginseng fermented product as an active ingredient.

상기 조성물은 인삼 발효물을 포함하며 상기 인삼 발효물에는 진세노사이드가 체내에 흡수되기 용이한 형태로 포함되어 있으며, AMPK(AMP-activated protein kinase)를 활성화시켜 인슐린 감수성을 증가시키고 실질적으로 혈당을 낮추는 기능을 하여 당뇨병의 예방 및 개선에 효과가 있다. The composition includes a ginseng fermentation product, which contains ginsenosides in a form that is easily absorbed by the body, and activates AMP-activated protein kinase (AMPK) to increase insulin sensitivity and substantially reduce blood sugar. Lowering the effect is effective in preventing and improving diabetes.

AMPK는 세포의 에너지 수준을 감지하여 활성화되는 대표적인 단백질로서, 운동과 같은 외부의 스트레스에 의해 지방산 합성과 콜레스테롤 합성으로 대표되는 세포내의 ATP를 소모하는 경로를 차단하고, 포도당의 세포내 이동, 해당과정 및 베타-산화(beta-oxidation)로 대표되는 세포내 ATP를 만드는 경로를 활성화시키므로 궁극적으로 세포의 항상성 유지에 필수적인 단백질이다. 특히 ATP를 만드는 경로인 포도당의 세포내 흡수 및 해당작용에 중요한 역할을 하는 단백질로, 타입 2 당뇨환자에게 처방되는 대표적인 약물인 메트포르민(Metformin)과 트로글리타존(Troglitazone)로 궁극적으로 활성화시킨다. AMPK는 인슐린 감수성의 대표적인 신호전달경로인 PI-3 kinase/Akt와 독립적으로 활성화되어 혈당의 흡수를 촉진시키므로 실질적으로 혈당을 낮추는 역할을 한다. AMPK is a representative protein that activates by sensing the energy level of cells. It blocks the pathway of consuming ATP in the cells, which is represented by fatty acid synthesis and cholesterol synthesis by external stress such as exercise. And it activates the pathway to make intracellular ATP, represented by beta-oxidation (ultimately a protein essential for maintaining homeostasis of cells. In particular, it is a protein that plays an important role in the cellular uptake and glycolysis of glucose, a pathway that makes ATP, and is ultimately activated by metformin and troglitazone, which are representative drugs prescribed for type 2 diabetes patients. AMPK is activated independently of PI-3 kinase / Akt, which is a representative signaling pathway of insulin sensitivity, and promotes the absorption of blood glucose, thereby substantially lowering blood glucose.

상기 인삼 발효물은 인삼을 본 발명의 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주로 발효시켜 수득된 산물을 의미한다. 인삼이 발효되는 과정에서 인삼의 진세노사이드 성분은 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101에 의해 체내에서 흡수가 용이한 비극성으로 대사될 수 있다.The ginseng fermented product means a product obtained by fermenting ginseng with the strain Kanoderma Reginaseum KFRI-M101 of the present invention. In ginseng fermentation process, ginsenoside component of ginseng can be metabolized into non-polar body easily absorbed by the body by Ganoderma reginaseum KFRI-M101.

구체적으로는, 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101을 멸균된 인삼, 입자 크기가 4 내지 25 mm 인 인삼 큐브 또는 입자크기가 1 내지 4 mm인 인삼 플레이크에 접종한 뒤 배양하여 인삼을 발효시킬 수 있다. 이 때, 상기 인삼, 인삼 큐브 또는 인삼 플레이크는 건조후 분쇄하여 사용할 수 있다. Specifically, inoculating Ganoderma reginaseum KFRI-M101 into sterile ginseng, ginseng cubes having a particle size of 4 to 25 mm or ginseng flakes having a particle size of 1 to 4 mm and then culturing the ginseng to ferment. . At this time, the ginseng, ginseng cubes or ginseng flakes may be used by grinding after drying.

상기 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101은 배양 기질이 되는 인삼 배지 표면적의 1 내지 100 % 에 해당하는 균사체의 양으로 접종될 수 있다. 1 % 미만으로 접종하는 경우 인삼의 대사가 진행되지 못할 수 있으며, 100 %를 초과하는 경우 과다한 양의 균주 접종으로 인해 균사체가 제대로 성장하지 못할 수 있다. The ganoderma reginaseum KFRI-M101 may be inoculated in an amount of mycelium corresponding to 1 to 100% of the surface area of ginseng medium serving as a culture substrate. If you inoculate less than 1% may not progress the metabolism of ginseng, if more than 100% due to the inoculation of excessive amounts of the mycelium may not be able to grow properly.

상기 발효는 20 ℃ 내지 30 ℃, 습도 40 % 내지 80 %에서 진행될 수 있다. 상기 온도 및 습도 범위에서 상기 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101의 생장이 활발히 일어날 수 있으며, 이로 인해 발효가 원활히 진행될 수 있고, 결과적으로 당뇨병의 예방 및 개선 효과가 증진된다. The fermentation may be carried out at 20 ℃ to 30 ℃, humidity 40% to 80%. The growth of the Ganoderma reginaseum KFRI-M101 can occur actively in the temperature and humidity range, which can facilitate the fermentation, thereby improving the prevention and improvement effect of diabetes.

또한, 상기 발효는 2 주 내지 12 주 동안 진행할 수 있다. 발효가 2 주 미만으로 진행되는 경우 균사체의 성장이 미미하여 인삼의 대사가 원활히 일어나지 못할 수 있으며, 12 주를 초과하는 경우 발효가 과다하게 진행되어 그 부산물로 당뇨의 예방 및 개선 효과의 상승이 미미할 수 있다. In addition, the fermentation may proceed for 2 to 12 weeks. If fermentation is less than 2 weeks, the growth of mycelium may be insufficient and metabolism of ginseng may not occur smoothly. If it exceeds 12 weeks, fermentation may proceed excessively and the by-product may not increase the prevention and improvement of diabetes. have.

상기 인삼 발효물은 조성물에 대하여 0.01 내지 50 중량부로 포함될 수 있다. The ginseng fermentation may be included in an amount of 0.01 to 50 parts by weight based on the composition.

인삼 발효물이 0.01 중량부 미만으로 포함되는 경우 AMPK를 활성화시켜 혈당을 낮추는 효과가 미미할 수 있으며, 50 중량부를 초과하는 경우 첨가량에 비해 혈당을 낮추는 효과의 상승이 미미하여 비효율적일 수 있다. If the ginseng fermentation is included in less than 0.01 parts by weight, the effect of lowering blood sugar by activating AMPK may be insignificant. If it exceeds 50 parts by weight, the effect of lowering blood sugar compared to the added amount may be inefficient.

본 발명은 또한, 상기 인삼 발효물의 추출물을 포함하는 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있는 조성물을 제공한다. The present invention also provides a composition that is effective in the prevention and improvement of diabetes comprising the extract of the ginseng fermentation.

당업자의 필요에 따라 인삼 발효물을 추출하여 사용할 수 있으며, 추출물도 인삼 발효물과 동등한 수준의 당뇨의 예방 및 개선 효과가 있다. Ginseng fermented products can be extracted and used according to the needs of those skilled in the art, and the extract also has an effect of preventing and improving diabetes equivalent to that of ginseng fermented products.

상기 추출의 방법은 냉침 추출, 열수 추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출, 가열 추출 등 당업계에 공지된 방법이 사용될 수 있다. 또한, 물, 에탄올 및 이의 혼합물 등의 추출용매를 이용하여 상온에서 추출할 수도 있다. 바람직하게는, 인삼을 상기 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 로 발효시켜 수득한 발효물을 90 ℃ 내지 110 ℃에서 2 시간 내지 5 시간 동안 열수 추출하여 추출물을 수득할 수 있다. 상기 인삼 발효물의 추출물은 추출용매에 의한 추출뿐만 아니라, 통상적인 정제과정을 거친 추출물도 포함한다. 구체적으로, 추출용매에 의한 추출물을 그대로 사용하거나 추출한 후 정제과정, 예를 들어 일정한 분자량으로 컷-오프값을 갖는 여과막을 이용한 막 분리, 크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위한 다양한 크로마토그래피에 의한 분리 등의 정제 과정을 추가적으로 실시하여 사용할 수 있다. The extraction method may be a method known in the art such as cold needle extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, reflux cooling extraction, heating extraction. It may also be extracted at room temperature using an extraction solvent such as water, ethanol and mixtures thereof. Preferably, the fermentation product obtained by fermenting ginseng with Ganoderm Reginaseum KFRI-M101 may be hydrothermally extracted at 90 ° C. to 110 ° C. for 2 to 5 hours to obtain an extract. The extract of the ginseng fermented product includes not only an extraction by an extracting solvent, but also an extract that has undergone a conventional purification process. Specifically, various chromatography for membrane separation, separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity using a filtration membrane having a cut-off value at a constant molecular weight after use or extraction of the extract by an extraction solvent as it is Purification process such as separation by may be carried out additionally.

상기 본 발명의 당뇨의 예방 및 개선용 조성물은 각종 식품, 구체적으로는 건강기능식품으로 제조될 수 있다. 즉, 본 발명의 인삼 발효물 또는 인삼 발효물의 추출물은 각종 음식, 음료, 곡류, 껌, 차, 비타민 복합제 및 엑기스 등과 같은 기호성 식품이나 건강 보조 식품류 등에 첨가되어 통상적으로 알려진 방법에 따라 각종 식품을 제조할 수 있다. 또한, 각각 통상의 방법에 따라 분말, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸등의 형태로 제형화하여 사용할 수도 있다. 이외에도 일반적인 제형으로 제형화될 수 있으며, 식품에 사용되는 통상적인 첨가제 등의 성분을 당업자가 적의하게 선택하여 배합할 수 있다.The composition for preventing and improving diabetes of the present invention may be prepared in various foods, specifically, health functional foods. That is, the ginseng fermented product or the extract of ginseng fermented product of the present invention is added to various foods, beverages, grains, gums, teas, vitamin complexes and extracts, such as palates or health supplements, etc. to produce various foods according to a commonly known method. can do. In addition, each may be formulated in the form of powder, powder, granule, tablet, capsule, suspension, emulsion, syrup, aerosol and the like according to a conventional method. In addition, it may be formulated in a general formulation, and ingredients such as conventional additives used in food may be appropriately selected and combined by those skilled in the art.

이하, 실시예 및 비교예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 이는 본 발명의 설명을 위한 것일 뿐, 이로 인해 본 발명의 범위가 제한되지 않는다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Comparative Examples. This is for the purpose of illustrating the invention only, and thus the scope of the invention is not limited.

<< 실시예Example 1> 불로초속 버섯 균사체인  1> Fireweed Mushroom Mycelia GanodermaGanoderma resinaceumresinaceum KFRIKFRI M101M101 의 분리Separation of

경기도 인근 야산에서 채집한 불로초속 버섯 자실체를 채집하여 무균 상태에서 갓 또는 줄기로부터 균사를 분리하여 PDA배지에 이식하였다. 여기에서 자라난 균사의 오염여부를 확인하였으며, 균사 배양은 온도 25 ℃, 습도 50 %의 조건에서 3~10일간 이루어졌다.Bulchocho mushroom fruiting bodies collected from Yasan near Gyeonggi-do were collected and isolated from mycelia or stems under sterile conditions and transplanted into PDA medium. It was confirmed whether the hyphae grew up here, and the hyphae culture was performed for 3 to 10 days at 25 ° C. and 50% humidity.

<< 실시예Example 2>  2> GanodermaGanoderma resinaceumresinaceum KFRIKFRI M101M101 of 배양학적Culture , 형태학적 특성, Morphological characteristics

상기 분리된 Ganoderma resinaceum KFRI M101를 PDA(potato dextrose agar) 또는 PDB(potato dextrose broth)에 접종하여 25 ℃, 습도 40~80 % 조건에서 3~15 일 간 배양한 결과, 그 형태는 도 1 와 같았다. 현미경으로 관찰한 결과는 도 2 에 나타내었다. 도 1 에 의하면, 고체배지에서 균사체(mycelium)는 흰색이며, 3~15 일 후에는 평판배지 기준 반경 0.5~5.5 mm 의 크기에 달한다. 균사체의 색상은 초기에는 흰색이나 균사의 노화가 진행되면서 노란색으로 변한다. 또한, 도 2 에 의하면, 섬세한 실모양으로 얽혀 있는 균사체를 관찰할 수 있다.The separated Ganoderma Inoculation of resinaceum KFRI M101 in PDA (potato dextrose agar) or PDB (potato dextrose broth) and incubated for 3 to 15 days at 25 ℃, humidity 40 ~ 80% conditions, the form was as shown in FIG. The results observed under the microscope are shown in FIG. According to Figure 1, in the solid medium mycelium (mycelium) is white, reaches a size of 0.5 ~ 5.5 mm radius of the plate medium after 3 to 15 days. The color of mycelium initially turns white, but turns yellow as the mycelium ages. In addition, according to FIG. 2, the mycelium which is entangled in delicate thread shape can be observed.

<< 실시예Example 3>  3> rDNArDNA sequencingsequencing

상기 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101을 ITS-5.8S rDNA sequencing 결과, Ganoderma resinaceum 과 99%의 유전적 유사성을 보이는 균사로 판명되었다(도 3). ITS-5.8S rDNA sequencing of Ganoderma reginaseum KFRI -M101, Ganoderma resinaceum It turned out to be mycelia showing 99% genetic similarity with (Fig. 3).

<< 실시예Example 4>  4> 인삼발효물의Ginseng fermentation 제조 Produce

플레이크 형태로 잘게 썬 인삼을 40~70 ℃ 열풍 건조기에서 20시간 건조시키고 이를 분쇄하였다. 그 분쇄물을 물과 1:1 의 중량비로 혼합한 뒤, 유리 시험관에 10 g씩 담아 실리콘 스토퍼로 봉하거나 버섯 배양병에 100 g씩 채워 넣어 121 ℃, 30분간 멸균하여 인삼 배지를 제조하였다. The ginseng chopped in the form of flakes was dried for 20 hours in a 40 ~ 70 ℃ hot air dryer and ground it. The pulverized product was mixed with water at a weight ratio of 1: 1, and then put in a glass test tube, 10 g each, sealed with a silicone stopper or 100 g each in a mushroom culture bottle, and sterilized at 121 ° C. for 30 minutes to prepare a ginseng medium.

가노데르마 레지나세움 KFRI-M101은 PDA 또는 PDB에 접종하여 25 ℃, 습도 40~80 % 조건에서 3~15 일 배양한 후, 4 ℃에서 보존한 것을 종균으로 사용하였다.Ganoderma reginaseum KFRI-M101 was inoculated in PDA or PDB, incubated for 3 to 15 days at 25 ° C. and 40% to 80% humidity, and then stored at 4 ° C. as a seed.

상기 인삼 배지에 상기 4 ℃에서 보존된 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101을 PDA에서 자란난 균사 절편의 직경 0.1~5.5 cm 의 양으로 접종한 뒤, 25 ℃, 습도 40~80 % 조건에서 8 주 동안 배양하여 인삼 진세노사이드 대사를 유도하였다. After inoculating the ginseng medium with Ganoderma reginaseum KFRI-M101 stored at 4 ° C. in an amount of 0.1-5.5 cm in diameter of mycelial sections grown on PDA, 8 ° C. at 25 ° C. and 40-80% humidity. Incubation induced ginseng ginsenoside metabolism.

<< 실시예Example 5>  5> 인삼발효물의Ginseng fermentation 추출물 제조 Extract manufacturer

상기 실시예 4 에서 수득한 발효물에 대하여 물을 1:10 의 중량비로 첨가하여 100 ℃에서 1 시간 동안 추출한 후, 필터 또는 여과지로 여과하여 인삼 발효물의 추출물을 수득하였다. Water was added at a weight ratio of 1:10 to the fermented product obtained in Example 4, extracted at 100 ° C. for 1 hour, and then filtered with a filter or a filter paper to obtain an extract of ginseng fermented product.

<< 실시예Example 6>  6> 건강기능음료의Health functional drink 제조 Produce

상기 실시예 4 에서 수득한 발효물 2 g, 사과 농축액 2 g, 석류 농축액 0.5 g, 고과당 6 g, 올리고당 2 g, 꿀 1 g, 구연산 0.13 g, 비타민 C 0.03 g, 타우린 1 g 및 정제수 85.34 g를 배합하여 인삼의 발효물을 함유하는 음료를 제조하였다.2 g of the fermented product obtained in Example 4, 2 g of apple concentrate, 0.5 g of pomegranate concentrate, 6 g of high fructose, 2 g of oligosaccharides, 1 g of honey, 0.13 g of citric acid, 0.03 g of vitamin C, 1 g of taurine and purified water 85.34 g was combined to prepare a beverage containing the fermented product of ginseng.

<< 실험예Experimental Example 1> 인삼 배지 중에서  1> out of ginseng medium KFRIKFRI M101M101 균사의 생장속도 관찰 Observation of the growth rate of mycelia

상기 실시예 4 에서 KFRI-M101 균주를 접종 후, 배양 발효되는 시간에 따라 균사의 길이를 측정하여 균사의 생장속도를 살펴보았다. 균사의 길이를 측정한 결과는 하기 표 1 에 나타내었으며, 이 때의 생장 사진은 도 4 에 나타내었다. After inoculating the KFRI-M101 strain in Example 4, the growth rate of the mycelia was examined by measuring the length of the mycelia according to the culture fermentation time. The results of measuring the length of the hyphae are shown in Table 1 below, and the growth pictures at this time are shown in FIG. 4.

균사길이 (cm)Mycelial length (cm) 1주1 week 2주. 2 weeks. 3주3 weeks 4주4 weeks 5주5 Weeks 6주6 weeks 7주7 weeks 8주8 weeks KFRI M101KFRI M101 -- 0.1 0.1 0.8 0.8 1.5 1.5 2.2 2.2 2.4 2.4 5.0 5.0 5.3 5.3

상기 표 1 및 도 4 에 의하면, 발효가 시작된지 약 2 주가 경과하여야 이식된 균사 절편이 발아를 시작함을 알 수 있다. 또한, 균주 접종후 8 주후에는 유리시험관에 채워놓은 인삼 배지의 80% 까지 균사생장을 보였다. According to Table 1 and FIG. 4, it can be seen that the transplanted mycelia fragments start germination only after about two weeks have elapsed. In addition, 8 weeks after strain inoculation, up to 80% of the ginseng medium filled in the glass test tube showed mycelial growth.

<< 실험예Experimental Example 2> 인삼  2> Ginseng 발효물Fermentation product 중의 글루코사민 함량의 변화 Of Glucosamine Content in Water

글루코사민은 진균류의 균사 격막을 이루고 있는 주요 골격 성분의 하나로 세균류와는 달리 개체수를 계수함으로 균수의 증감을 확인할 수 없는 진균류 균사의 증식 정도를 판단할 수 있는 간접적인 기준이 된다. Glucosamine is one of the major skeletal components of the fungal mycelial diaphragm. Unlike bacteria, glucosamine is an indirect standard for judging the proliferation of fungal hyphae that cannot increase or decrease by counting populations.

상기 실시예 4 에서 수득한 인삼 발효물 시료 2 g을 취해 9 ㎖아세톤과 함께 15 ㎖ 원심분리 튜브에 넣어 1,500×g로 2 분간 원심분리 하였다. 원심분리후, 수득된 침전물을 9 ㎖ 아세톤에 녹이고 이를 재원심분리시켜 재침전물을 얻었다. 상기 재침전물을 건조시킨 후, 4 ㎖ 농축 수산화칼륨(120 g/100 ㎖)에 현탁하여 121 ℃에서 15 분간 멸균 후 방냉시켰다. 여기에 냉각시킨 75% 에탄올 8 ㎖를 혼합하고 15 분간 냉수욕조에 방치하였다. 1 g‘545 celite’에 20 ㎖, 75% 에탄올을 혼합하여 2분간 정치시켜 얻은 상등액 0.9 ㎖를 상기 에탄올 용액에 첨가하였다. 이를 1,500×g, 10 분, 2 ℃ 조건으로 원심분리하여 침전물을 얻었고, 이를 차갑게 한 40 % 에탄올 8 ㎖에 재현탁시켰다. 이를 다시 1,500×g, 10 분, 2 ℃로 원심분리하여 침전물을 얻었고, 상기 침전물을 찬 증류수에 2 회 세척한 후, 남은 잔사를 물에 녹여 1.5 ㎖ 부피를 만들었다. 이를 1.5 ㎖의 5 % KHSO4, 1.5 ㎖의 5 % NaNO2와 15 분간 교반하고, 원심분리(1,500×g, 2 min, 2 ℃)하였다. 원심분리 후 얻어진 상등액 1.5 ㎖에 0.5 ㎖ 12 % NH4SO4NH2를 넣어 5분간 교반하고, 0.5 ㎖ 0.5 % 3-methyl-2-benzothiozolone hydrazone(MBTH)를 넣어 끓는 물에서 3분간 중탕 후 방냉하였다. 여기에 0.5 ㎖ 0.5% FeCl3를 넣어 상온에서 30분 방치한 후, 650 nm에서 흡광도를 측정하여 글루코사민의 함량을 측정하였고 그 결과는 도 5 와 같다. 이 때, 검량선은 글루코사민-HCl (0, 20, 30, 40, 50 ㎍)과 증류수 혼합액 1.5 ㎖에 대한 흡광도를 측정한 것을 시료로 하여, 1.5 ㎖ 5 % KHSO4와 1.5 ㎖ 5 % NaNO2을 넣어 반응시키는 위의 과정부터 반복하여 얻었다. 2 g of the ginseng fermented product sample obtained in Example 4 was taken and placed in a 15 ml centrifuge tube with 9 ml acetone and centrifuged at 1500 x g for 2 minutes. After centrifugation, the obtained precipitate was dissolved in 9 ml acetone and recentrifuged to obtain a reprecipitate. The reprecipitate was dried, suspended in 4 ml concentrated potassium hydroxide (120 g / 100 ml), sterilized at 121 ° C. for 15 minutes, and allowed to cool. 8 ml of cooled 75% ethanol was mixed and left for 15 minutes in a cold water bath. 20 ml of 1 g'545 celite 'was mixed with 75% ethanol, and 0.9 ml of the supernatant obtained by standing for 2 minutes was added to the ethanol solution. The precipitate was obtained by centrifugation at 1,500 × g, 10 minutes at 2 ° C. and resuspended in 8 ml of cold 40% ethanol. This was again centrifuged at 1,500 × g, 10 min, 2 ° C. to obtain a precipitate, which was washed twice with cold distilled water, and the remaining residue was dissolved in water to make 1.5 mL volume. It was stirred with 1.5 ml of 5% KHSO 4 , 1.5 ml of 5% NaNO 2 for 15 minutes, and centrifuged (1,500 × g, 2 min, 2 ° C.). 0.5 ml 12% NH 4 SO 4 NH 2 was added to 1.5 ml of the supernatant obtained after centrifugation, followed by stirring for 5 minutes, and 0.5 ml 0.5% 3-methyl-2-benzothiozolone hydrazone (MBTH) was added thereto. It was. 0.5 ml 0.5% FeCl 3 was added thereto and allowed to stand at room temperature for 30 minutes, and then the absorbance at 650 nm was measured to determine the content of glucosamine. The results are shown in FIG. At this time, the calibration curve was measured by measuring the absorbance of glucosamine-HCl (0, 20, 30, 40, 50 µg) and 1.5 ml of distilled water mixture, using 1.5 ml 5% KHSO 4 and 1.5 ml 5% NaNO 2 . Repeatedly obtained from the above process to put the reaction.

도 5 에 의하면, 인삼에 KFRI-M101 균주를 접종한 후, 발효 시간이 지날수록 글루코사민의 함량이 증가함을 알 수 있고, 8 주 후에는 인삼 배지 1 g 에 대하여 글루코사민의 함량이 0.084 g에 이름을 알 수 있다. 이를 통해 인삼 배지 내에서 균사가 성공적으로 생장하고 있음을 알 수 있다. 5, after inoculating the KFRI-M101 strain in ginseng, it can be seen that the content of glucosamine increases as the fermentation time passes, and after 8 weeks, the content of glucosamine is 0.084 g for 1 g of ginseng medium. It can be seen. This suggests that the mycelia grow successfully in ginseng medium.

<< 실험예Experimental Example 3> 베타- 3> Beta- 글루코시다아제Glucosidase (β-(β- glucosidaseglucosidase ) 활성의 평가) Evaluation of activity

베타-글루코시다아제는 진세노사이드를 장내 흡수가 용이한 비극성 형태로 전환시킬 수 있다. 따라서, 베타-글루코시다아제의 활성이 높을수록 인삼 내 중요 성분인 진세노사이드의 비극성 형태로의 전환 가능성이 높다는 의미가 된다. 베타-글루코시다아제의 활성은 다음과 같은 방법으로 평가하였다. 0.1 M Sodium phosphate buffer(pH 7.0) 0.3 ㎖, 2 mM p nitrophenylβ-D -glucopyranoside 0.2 ㎖, 효소액 0.1 ㎖에 상기 실시예 5 에서 제조한 인삼 발효물의 추출물 0.1 ㎖를 가하여 37 ℃ shaking water bath에서 30 분간 반응시킨 후, 0.5 N NaOH 0.3 ㎖를 가해 반응을 종료시켰다. 원심분리(13,000 rpm, 5 min)후, 상등액을 취해 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 2 에 나타내었다. 하기 표 2 에서 1 unit 은 1 분당 1μM p-nitropenol(139.11)을 생산 한다는 의미이다.Beta-glucosidase can convert ginsenosides into non-polar forms that are easily intestinal absorbed. Therefore, the higher the activity of beta-glucosidase, the more likely the conversion of ginsenoside, an important component in ginseng, into the nonpolar form. Beta-glucosidase activity was evaluated in the following manner. 0.3 ml of 0.1 M sodium phosphate buffer (pH 7.0), 0.2 ml of 2 mM pnitrophenylβ-D-glucopyranoside, and 0.1 ml of enzyme solution were added 0.1 ml of the extract of the ginseng fermentation product prepared in Example 5 for 30 minutes in a shaking water bath at 37 ° C. After the reaction, 0.3 ml of 0.5 N NaOH was added to terminate the reaction. After centrifugation (13,000 rpm, 5 min), the supernatant was taken and the absorbance was measured at 405 nm. The results are shown in Table 2 below. 1 unit in Table 2 means that 1 μM p-nitropenol (139.11) is produced per minute.

베타-글루코시다아제 활성 (unit)Beta-glucosidase activity (unit) 1주1 week 2주2 weeks 3주3 weeks 4주4 weeks 5주5 Weeks 6주6 weeks 7주7 weeks 8주8 weeks KFRI M101KFRI M101 2.22.2 4.04.0 13.713.7 86.786.7 61.761.7 170.2170.2 255.2255.2 301.4301.4

상기 표 2 에 의하면, 균사의 생장이 진행될수록 베타-글루코시다아제의 활성도 증가함을 알 수 있고, 이로써 발효가 진행될수록 인삼 내 진세노사이드 성분은 체내 흡수가 용이한 형태로 대사됨을 알 수 있다. According to Table 2, it can be seen that the activity of beta-glucosidase increases as the mycelium grows, and as a result, the ginsenoside component in ginseng is metabolized into an easily absorbed form in the body as the fermentation proceeds. .

<< 실험예Experimental Example 4> 인삼  4> Ginseng 발효물Fermentation product 중의  Of 조사포닌Crude saponin 함량의 측정 Measurement of content

식품공전에 의한 홍삼 성분분석법에 따른 물포화 부탄올법을 사용하여 조사포닌의 함량을 분석하고, 인삼 발효물 중의 조사포닌 함량과 인삼 배지 10 g 에 대해 KFRI-M101 균주를 접종하여 생성된 발효물의 건조 중량을 측정하여 하기 표 3 에 나타내었다. The content of irradiated butanol was analyzed using the water-saturated butanol method according to the red ginseng component analysis method by food processing, and the fermentation product produced by inoculating KFRI-M101 strain against 10 g of ginseng medium and ginseng medium in ginseng fermented product. The weight is measured and shown in Table 3 below.


조사포닌함량 (%)Irradiated Phonine Content (%)
1주1 week 2주2 weeks 3주3 weeks 4주4 weeks 5주5 Weeks 6주6 weeks 7주7 weeks 8주8 weeks 발효전
인삼배지
Before fermentation
Ginseng badge
조사포닌(%)Irregular Phononin (%) 6.196.19
건조중량(g)Dry weight (g) 3.23.2 발효후
인삼배지
After fermentation
Ginseng badge
조사포닌(%)Irregular Phononin (%) 6.976.97 6.596.59 7.217.21 6.986.98 6.986.98 6.776.77 6.726.72 7.487.48
건조중량(g)Dry weight (g) 3.23.2 3.23.2 3.13.1 3.13.1 2.92.9 3.03.0 2.82.8 2.72.7

상기 표 3 에 의하면, 발효 전의 인삼배지의 건조 중량은 3.2 g 이었으나, 균사가 자라나 발효가 진행됨에 따라 균사 생장 후에는 건조 중량이 2.7 g까지 유의적인 감소를 보였다. 이는 KFRI M101 이 인삼의 표면을 감싸며 자라는 형태의 형식적 균사 생장이 아닌, 인삼 조직을 직접적으로 소모하며 증식하는 균사 생장을 하고 있음을 의미한다. 즉, 실제적 영양원으로 인삼 성분을 이용하고 있는 것이다. 발효가 진행됨에 따라 발효물의 건조 중량은 감소하는 반면, 조사포닌 함량은 감소되지 않았으며, 발효 8 주까지 조사포닌의 함량 손실이 거의 없었다. According to Table 3, the dry weight of the ginseng medium before fermentation was 3.2 g, but as the mycelium grew or the fermentation progressed, the dry weight decreased significantly to 2.7 g after the mycelial growth. This means that KFRI M101 does not form formal hyphae that grows around the surface of ginseng, but rather hyphae that directly consume and grow ginseng tissue. In other words, ginseng is used as a practical nutrient. As the fermentation progressed, the dry weight of the fermentation decreased, while the irradiated saponin content did not decrease, and there was little loss of irradiated saponin content until 8 weeks of fermentation.

<< 실험예Experimental Example 5>  5> 진세노사이드의Ginsenoside 성분 분석 Ingredient analysis

상기 실시예 4 에서 수득한 인삼 발효물을 대상으로 인삼의 진세노사이드 성분을 분석하였다. The ginsenoside component of ginseng was analyzed for the ginseng fermented product obtained in Example 4.

TLC 분석 결과를 얻기 위해 실시예 4 에서 수득한 인삼 발효물을 Silica gel 60 F254에 점적하여 클로로포름:메탄올:물을 65:35:10(v/v)의 비율로 아래층으로 전개시켰고, 5% 황산 (methanol 용해) 용액을 분무하여 hot plate에서 발색시켰다. 그 결과는 도 6 과 같다. The ginseng fermentation product obtained in Example 4 was added dropwise to Silica gel 60 F 254 to obtain TLC analysis results, and chloroform: methanol: water was developed to the lower layer at a ratio of 65:35:10 (v / v), and 5%. A solution of sulfuric acid (methanol dissolved) was sprayed and developed on a hot plate. The result is shown in FIG.

HPLC를 이용한 인삼 발효물 중의 진세노사이드 성분 분석은 다음의 조건으로 시행하였다. 컬럼은 μ-Bondapak C18(300×39 mm)을 이용하였고, 검출기는 UV 검출기를 사용하였으며, 실시예 4 에서 수득한 인삼 발효물의 여과물을 20 ㎕ 주입하여 유속 1 ㎖/min 으로 HPLC를 수행하였다. 그 결과는 도 7 과 같다. Analysis of ginsenoside component in ginseng fermentation product using HPLC was performed under the following conditions. As a column, μ-Bondapak C18 (300 × 39 mm) was used, a detector was used as a UV detector, and 20 μl of a filtrate of the ginseng fermentation product obtained in Example 4 was injected, and HPLC was performed at a flow rate of 1 ml / min. . The result is shown in FIG.

도 6 에서 S 는 표준물질(진세노사이드 Rb1, Rc, Re, Rg1. Rh2)를 나타내고, B 는 인삼 건조물을 나타내며, A 는 멸균처리한 인삼배지를 나타낸다. 1 내지 8 은 발효시간에 따른 인삼 발효물에 대한 TLC 결과를 나타내는 것이다. In Figure 6, S represents the standard material (ginsenosides Rb1, Rc, Re, Rg1. Rh2), B represents the ginseng dry matter, A represents a sterilized ginseng medium. 1 to 8 shows the TLC results for the ginseng fermentation product according to the fermentation time.

도 6 및 도 7 에 의하면, 발효가 진행됨에 따라 Rb1의 함량은 감소하는 반면, 진세노사이드 Rd의 함량은 증가하여 KFRI-M101 균주 접종 후 8주 후엔 접종하기 전의 인삼 배지에 비해 3.2배 농도 증가를 보였고, 진세노사이드 Rh2 함량은 균주 접종 전 인삼배지에서는 찾아볼 수 없었으나 인삼 배지에 KFRI-M101 균주 접종 후 8주가 됐을 때, 0.02 mg% 농도로 나타났다. 따라서, 본 발명의 KFRI-M101 균주는 인삼의 진세노사이드 Rb1을 Rd로 전환하고 있음을 알 수 있다. 6 and 7, as the fermentation proceeds, the content of Rb1 decreases, while the content of ginsenoside Rd increases, which is 3.2 times higher than the ginseng medium before inoculation 8 weeks after inoculation with KFRI-M101 strain. Ginsenoside Rh2 content was not found in ginseng medium before strain inoculation, but was 0.02 mg% at 8 weeks after inoculation of KFRI-M101 strain in ginseng medium. Therefore, it can be seen that the KFRI-M101 strain of the present invention converts ginsenoside Rb1 of ginseng to Rd.

<< 실험예Experimental Example 6> 인삼  6> Ginseng 발효물의Fermented 항당뇨Anti-diabetic 효능의 평가 Evaluation of efficacy

3T3-L1-preadipocyte cell 을 12-well plate에 분주하고, 이틀 후에 hormone cocktail containing 1M dexamethasone, 5g/㎖ insulin, 및 0.5 mM IBMX과 함께 adipocyte 분화를 유도하였다. 다시 이틀 후에, 세포배양을 위한 배지를 normal medium containing insulin (5 g/㎖)으로 교체하였고, 약 6일 후 80 %이상이 지방 세포로 전환됨을 관찰하였다. 이렇게 배양된 세포를 이용하여 웨스턴 블롯팅을 실시하였다. 12 well plate에 분주된 3T3-L1 지방세포를 상기 실시예 5 에서 수득된 인삼 발효물의 추출물 시료 100 ㎍/㎖로 3시간 처리 하였다. 3시간 후에 배양 배지를 버린 후 차가운 인산완충식염수(PBS)로 2회 세척하였다, 그 후 lysis buffer(50Tris-HCl(pH 7.4), 1% NP-40, 0.25% sodium deoxycholate, 150 NaCl, 1 EDTA, 1 PMSF, 1 sodium orthovanadate, 1 NaF, 1 g/㎖ aprotinin, 1 g/㎖ leupeptin 및 1 g/㎖ pepstatin)를 이용하여 세포를 모은 후 SDS-PAGE로 단백질을 분리, 겔을 nitrocellulose paper에 옮기고 AMPK 및 β-actin 단백질 발현을 western blot으로 확인하였다. 그 결과는 도 8 과 같다. 도 8 에서 none 은 시료로 처리하지 않은 것을 의미하며, positive control(양성대조군)은 AMPK activator인 AICAR(1mM)로 처리한 것을 의미한다. 3T3-L1-preadipocyte cells were dispensed into 12-well plates and two days later adipocyte differentiation was induced with hormone cocktail containing 1M dexamethasone, 5 g / ml insulin, and 0.5 mM IBMX. After two more days, the medium for cell culture was replaced with normal medium containing insulin (5 g / ml), and after about 6 days it was observed that more than 80% was converted to fat cells. Western blotting was performed using the cultured cells. 3T3-L1 adipocytes dispensed into a 12 well plate were treated with 100 μg / ml extract sample of the ginseng fermentation product obtained in Example 5 for 3 hours. After 3 hours, the culture medium was discarded and washed twice with cold phosphate buffered saline (PBS), and then lysis buffer (50Tris-HCl, pH 7.4), 1% NP-40, 0.25% sodium deoxycholate, 150 NaCl, 1 EDTA. , 1 PMSF, 1 sodium orthovanadate, 1 NaF, 1 g / ml aprotinin, 1 g / ml leupeptin and 1 g / ml pepstatin), and collected the proteins by SDS-PAGE, transferring the gel to nitrocellulose paper AMPK and β-actin protein expression was confirmed by western blot. The result is shown in FIG. 8. In FIG. 8, none means no treatment with the sample, and positive control (positive control) means treatment with AICAR (1 mM), an AMPK activator.

도 8 에 의하면, AMPK의 활성화는 KFRI M101균사를 이용한 인삼 발효물이 인삼 단독 처리군에 비해 약 1.7배 뛰어났다. 또한, AMPK activator인 AICAR(양성 대조군)에 가까운 활성을 나타내었다. According to Figure 8, the activation of AMPK was about 1.7 times better than the ginseng fermented ginseng using the KFRI M101 mycelia. It also showed activity close to AICAR (positive control), an AMPK activator.

상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명에서 분리한 신규 균주 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101은 인삼의 진세노사이드 성분을 체내에서 흡수되기 용이한 비극성 형태로 전환시키는 능력이 우수하며, 인삼을 상기 KFRI-M101로 대사시켜 얻은 발효물 또는 발효물의 추출물을 포함하는 조성물은 AMPK 활성을 증가시켜 혈당을 낮추므로 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있음을 알 수 있다.As described above, the novel strain Ganoderma reginaseum KFRI-M101 isolated in the present invention is excellent in the ability to convert ginsenoside components of ginseng into a nonpolar form that is easily absorbed by the body, and the ginseng is KFRI- It can be seen that the composition comprising the fermentation product or the extract of the fermentation product obtained by metabolizing with M101 lowers blood sugar by increasing AMPK activity and thus is effective in preventing and improving diabetes.

도 1 은 분리된 Ganoderma resinaceum KFRI M101을 PDA에서 3~15일간 배양한 후의 모습이다. 1 is isolated Ganoderma Resinaceum KFRI M101 after incubation for 3 to 15 days in PDA.

도 2 는 배양된 Ganoderma resinaceum KFRI M101를 현미경으로 관찰한 모습이다. 2 is cultured Ganoderma The resinaceum KFRI M101 was observed under a microscope.

도 3 은 Ganoderma resinaceum KFRI M101의 rDNA sequencing 결과이다. 3 is Ganoderma This is the result of rDNA sequencing of resinaceum KFRI M101.

도 4 는 인삼 배지중에서 Ganoderma resinaceum KFRI M101 균사의 생장 속도를 관찰한 모습이다. 4 is Ganoderma in ginseng medium The growth rate of resinaceum KFRI M101 was observed.

도 5 는 발효기간에 따른 인산 발효물내의 글루코사민 함량의 변화를 나타낸 것이다. Figure 5 shows the change in the glucosamine content in the phosphoric acid fermentation with the fermentation period.

도 6 은 인삼 발효물내의 진세노사이드의 성분 변화를 알아보기 위해 TLC를 수행한 결과이다. Figure 6 is the result of performing TLC to determine the component changes of ginsenosides in ginseng fermentation.

도 7 은 인삼 발효물내의 진세노사이드의 성분을 HPLC 로 분석한 결과이다.7 is a result of analyzing the components of ginsenoside in ginseng fermentation by HPLC.

도 8 은 인삼 발효물의 AMPK 및 β-actin 단백질 발현을 western blot으로 확인한 결과이다. Figure 8 is the result confirmed by Western blot AMPK and β-actin protein expression of ginseng fermentation.

<110> KOREA FOOD RESEARCH INSTITUTE <120> Ganoderma resinaceum KFRI-M101 and composition for improving and preventing diabetes mellitus using this <130> 17553 <140> 10-2009-0114765 <141> 2009-11-25 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 398 <212> DNA <213> Ganoderma resinaceum KFRI-M101 <400> 1 gactgggttg tagctggcct tccgaggcat gtgcacgccc tgctcatcca ctctacacct 60 gtgcacttac tgtgggttcc agacgttgtg gaagcgggct ccttatggag cttgtggatc 120 ggcgtgcctg tgcctgcgtt tatcacaaac tctataaagt attagaatgt gtattgcgat 180 gtaacgcatc tatatacaac tttcagcaac ggatctcttg gctctcgcat cgatgaagaa 240 cgcagcgaaa tgcgataagt aatgtgaatt gcagaattca gtgaatcatc gaatctttga 300 acgcaccttg cgctccttgg tattccgagg agcatgcctg tttgagtgtc atgaaatctt 360 caacttacag atctttgcgg gtttgtaggc ttggactt 398 <110> KOREA FOOD RESEARCH INSTITUTE <120> Ganoderma resinaceum KFRI-M101 and composition for improving and          preventing diabetes mellitus using this <130> 17553 <140> 10-2009-0114765 <141> 2009-11-25 <160> 1 <170> Kopatentin 2.0 <210> 1 <211> 398 <212> DNA <213> Ganoderma resinaceum KFRI-M101 <400> 1 gactgggttg tagctggcct tccgaggcat gtgcacgccc tgctcatcca ctctacacct 60 gtgcacttac tgtgggttcc agacgttgtg gaagcgggct ccttatggag cttgtggatc 120 ggcgtgcctg tgcctgcgtt tatcacaaac tctataaagt attagaatgt gtattgcgat 180 gtaacgcatc tatatacaac tttcagcaac ggatctcttg gctctcgcat cgatgaagaa 240 cgcagcgaaa tgcgataagt aatgtgaatt gcagaattca gtgaatcatc gaatctttga 300 acgcaccttg cgctccttgg tattccgagg agcatgcctg tttgagtgtc atgaaatctt 360 caacttacag atctttgcgg gtttgtaggc ttggactt 398  

Claims (7)

인삼의 진세노사이드 성분을 대사시키는 불로초속 버섯 균사체 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주(KFCC 11429P). Fibromycobacterial mycelium Kanoderma reginaseum KFRI-M101 strain (KFCC 11429P) which metabolizes ginsenoside components of ginseng. 제1항의 가노데르마 레지나세움 KFRI-M101 균주로 인삼을 발효시켜 수득한 인삼 발효물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨의 예방 및 개선용 건강기능식품 조성물. The health functional food composition for preventing and improving diabetes, comprising ginseng fermented product obtained by fermenting ginseng with the Kanoderma reginaseum KFRI-M101 strain of claim 1 as an active ingredient. 제2항에 있어서,3. The method of claim 2, 상기 발효가 20 ℃ 내지 30 ℃, 습도 40 % 내지 80 % 조건에서 진행되는 것을 특징으로 하는 당뇨의 예방 및 개선용 건강기능식품 조성물.The fermentation is 20 ℃ to 30 ℃, humidity 40% to 80% conditions for preventing and improving diabetes functional health food composition, characterized in that the progress. 제2항에 있어서,3. The method of claim 2, 상기 발효가 2 주 내지 8 주 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 당뇨의 예방 및 개선용 건강기능식품 조성물.Health functional food composition for the prevention and improvement of diabetes, characterized in that the fermentation is performed for 2 to 8 weeks. 제2항에 있어서,3. The method of claim 2, 상기 조성물이 상기 인삼 발효물을 물, 에탄올 또는 이의 혼합물로 추출하여 얻은 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨의 예방 및 개선용 건강기능식품 조성물.The composition is a health functional food composition for preventing and improving diabetes, characterized in that the extract containing the extract obtained by extracting the ginseng fermented water, ethanol or a mixture thereof as an active ingredient. 제5항에 있어서,The method of claim 5, 상기 추출물이 상기 발효물을 90 ℃ 내지 110 ℃에서 2 시간 내지 4 시간 동안 열수 추출하여 얻은 것임을 특징으로 하는 당뇨의 예방 및 개선용 건강기능식품 조성물.The extract is a health functional food composition for preventing and improving diabetes, characterized in that the fermented product obtained by hot water extraction for 2 to 4 hours at 90 ℃ to 110 ℃. 삭제delete
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6746675B2 (en) 2000-01-31 2004-06-08 Tadashi Goino Physiologically active compositions based upon active ingredients of Basidiomycotina and Araliaceae
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