KR100913425B1 - 인플루엔자 바이러스 및 그를 포함하는 면역원성 조성물 - Google Patents
인플루엔자 바이러스 및 그를 포함하는 면역원성 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR100913425B1 KR100913425B1 KR1020070046573A KR20070046573A KR100913425B1 KR 100913425 B1 KR100913425 B1 KR 100913425B1 KR 1020070046573 A KR1020070046573 A KR 1020070046573A KR 20070046573 A KR20070046573 A KR 20070046573A KR 100913425 B1 KR100913425 B1 KR 100913425B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- swine
- korea
- influenza virus
- virus
- gene
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 49
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title claims abstract description 48
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 title claims abstract description 37
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims abstract description 91
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 6
- 241001500351 Influenzavirus A Species 0.000 claims description 3
- 241000197306 H1N1 subtype Species 0.000 abstract description 57
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 37
- 241000725681 Swine influenza virus Species 0.000 abstract description 30
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 14
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 14
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 14
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 32
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 30
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 28
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 28
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 28
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 28
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 26
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 24
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 24
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 22
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 22
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 20
- 101710085035 RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit Proteins 0.000 description 18
- 101710102873 Polymerase basic protein 2 Proteins 0.000 description 17
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 9
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 8
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 6
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 5
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 5
- 238000013081 phylogenetic analysis Methods 0.000 description 5
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 4
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 4
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 3
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 3
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- 241001506018 H1N1 swine influenza virus Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000007491 morphometric analysis Methods 0.000 description 2
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 2
- 101150028074 2 gene Proteins 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 1
- 201000008283 Atrophic Rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- -1 BEI Chemical compound 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 208000027534 Emotional disease Diseases 0.000 description 1
- 206010069767 H1N1 influenza Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 208000001572 Mycoplasma Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 201000008235 Mycoplasma pneumoniae pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 101150080862 NA gene Proteins 0.000 description 1
- 101150076514 NS gene Proteins 0.000 description 1
- 208000009620 Orthomyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 101150105115 PA gene Proteins 0.000 description 1
- 101150030427 PB2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010039088 Rhinitis atrophic Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 101000693006 Sus scrofa Pancreatic alpha-amylase Proteins 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940103272 aluminum potassium sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000007108 local immune response Effects 0.000 description 1
- 238000000464 low-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J potassium aluminium sulfate Chemical compound [Al+3].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 208000026425 severe pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000002435 venom Substances 0.000 description 1
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 description 1
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
본 발명은 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)(KCTC-11078BP), A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)(KCTC-11080BP) 및 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)(KCTC-11079BP)로 이루어진 군으로부터 선택되는 인플루엔자 바이러스 및 이의 사균 또는 이의 항원을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스 면역원성 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 신종의 돼지 인플루엔자 바이러스를 제공하여, 돼지를 인플루엔자 바이러스에 대한 면역을 효과적으로 형성시킬 수 있으며, 따라서 돼지 농장에서의 인플루엔자 바이러스에 의한 질환 발병을 현저히 감소시켜 경제적인 손실을 방지할 수 있다.
인플루엔자 바이러스, H1N1, H1N2, H3N2, 서브타입, 유전자 규명
Description
도 1은 A/Swine/Korea/GC0503/2005의 HA(도 1a), NA(도 1b), M(도 1c), NP(도 1d), NS(도 1e), PA(도 1f), PB1(도 1g) 및 PB2(도 1h) 유전자의 뉴클레오티드 서열의 계통발생학적 트리를 보여준다.
도 2는 각 그룹의 돼지 인플루엔자 바이러스 (Swine influenza virus: SIV)의 접종 후 시간에 따른 병원성의 변화를 폐 스코어링 값으로 나타낸 도면이다.
본 발명은 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)(KCTC-11078BP), A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)(KCTC-11080BP) 및 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)(KCTC-11079BP)로 이루어진 군으로부터 선택되는 인플루엔자 바이러스 및 이의 사균 또는 이의 항원을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스 면역원성 조성물에 관한 것이다.
인플루엔자 바이러스는 오쏘믹소바이러스 속, 오쏘믹소비리대 과의 멤버이며, 네거티브 센스 단일 가닥 RNA를 포함한다 (Lamb, R.A. and Krug, R. 1996. In Field Virology. 3rd Edn. Eds B.N. Field, D.M. Knipe, P.M. Howley. Philadelphia, Lippincott-Raven. p.1353-1395). 항원으로 및 유전적으로 구분될 수 있는 16가지 상이한 서브타입의 적혈구응집소 (HA) 및 9가지 상이한 서브타입의 뉴라미니다제 (NA)가 존재한다 (Choi et al., 2004. Vet. Rec. 154, 274-275; Fouchier et al., 2005. J. Virol. 79, 2814-2822).
현재로, 3가지 주요한 서브타입의 인플루엔자 A 바이러스가 전세계를 통해 상이한 돼지 집단에서 퍼져 있다: H1N1, H1N2, 및 H3N2 (Jung, K. Chae, C. 2004. Arch. Virol. 149, 1415-1422). 돼지로부터 분리된 첫번째 인플루엔자 A 바이러스는 H1N1 서브타입이며, 상기 서브타입의 관련된 바이러스는 많은 나라에서 돼지를 감염시키는 것으로 보고되었다. H1N2 바이러스는 1999년에 미국에서, 1987년에 프랑스에서, 1978~1980년에 일본에서, 1994년에 미국에서 이전에 분리되었다. 더욱이, 1998년 이후로, H3N2 바이러스는 호흡기 질환의 만연된 발병을 야기하였으며, 특정 경우에는 미국에서 돼지 사이에 낙태까지 야기하였다 (Webby et al., 2000. J. Virol. 74, 8243-8251). 한국에서, H3N2 및 H1N2 돼지 인플루엔자 바이러스는 1998년 및 2003년에 분리된 반면, H1N1 바이러스는 2004년에 돼지로부터 분리되었다 (Choi et al., 2004. Vet. Rec. 154, 274-275). 인플루엔자 A 바이러스 감염이 한국 돼지에서 보고되었지만, H1N1 돼지 인플루엔자 바이러스 분리주의 계통발생학적 분석은 없었다.
한국공개특허 제2006-0089390호에는 돼지 인플루엔자 바이러스 A/SWINE/KOREA/S10/2004 (H1N1) 및 이의 백신이 기재되어 있으나, 본 발명의 바이러스와는 상이하다.
본 발명에서는 한국에서 돼지로부터 인플루엔자 바이러스 서브타입 H1N1, H1N2 및 H3N2의 분리 및 상기 인플루엔자 바이러스의 계통발생학적 분석을 제공함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 인플루엔자 바이러스 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1), A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2) 또는 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 바이러스의 사균 또는 이의 항원을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스 면역원성 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)(KCTC-11078BP), A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)(KCTC-11080BP) 및 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)(KCTC-11079BP)로 이루어진 군으로부터 선택되는 인플루엔자 바이러스를 제공한다.
본 발명의 돼지 인플루엔자 바이러스는 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1), A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2) 또는 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)이다.
A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1) 인플루엔자 바이러스의 HA(Hemagglutinin) 유전자는 서열번호 1에 기재된 염기서열을 포함하며, NA(Neuraminidase) 유전자는 서열번호 2에 기재된 염기서열을 포함하며, M(matrix) 유전자는 서열번호 3에 기재된 염기서열을 포함하며, NP(nucleoprotein) 유전자는 서열번호 4에 기재된 염기서열을 포함하며, NS (nonstructural) 유전자는 서열번호 5에 기재된 염기서열을 포함하며, PA(Polymerase) 유전자는 서열번호 6에 기재된 염기서열을 포함하며, PB1(Polymerase basic protein 1) 유전자는 서열번호 7에 기재된 염기서열을 포함하며, PB2(Polymerase basic protein 2) 유전자는 서열번호 8에 기재된 염기서열을 포함한다.
A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2) 인플루엔자 바이러스의 HA(Hemagglutinin) 유전자는 서열번호 9에 기재된 염기서열을 포함하며, NA(Neuraminidase) 유전자는 서열번호 10에 기재된 염기서열을 포함하며, NS (nonstructural) 유전자는 서열번호 11에 기재된 염기서열을 포함하며, PB1(Polymerase basic protein 1) 유전자는 서열번호 12에 기재된 염기서열을 포함하며, PB2(Polymerase basic protein 2) 유전자는 서열번호 13에 기재된 염기서열을 포함한다.
A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2) 인플루엔자 바이러스의 HA(Hemagglutinin) 유전자는 서열번호 14에 기재된 염기서열을 포함하며, NA(Neuraminidase) 유전자는 서열번호 15에 기재된 염기서열을 포함하며, M(matrix) 유전자는 서열번호 16에 기재된 염기서열을 포함하며, NS (nonstructural) 유전자는 서열번호 17에 기재된 염기서열을 포함하며, PA(Polymerase) 유전자는 서열번호 18에 기재된 염기서열을 포함하며, PB1(Polymerase basic protein 1) 유전자는 서열번호 19에 기재된 염기서 열을 포함하며, PB2(Polymerase basic protein 2) 유전자는 서열번호 20에 기재된 염기서열을 포함한다.
상기 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1) 인플루엔자 바이러스는 HA(Hemagglutinin) 유전자는 A/Swine/Iowa/17672/88(H1N1)와 유사하고, NA(Neuraminidase) 유전자는 A/Wisconsin /4754/94(H1N1)와 유사하고, M(matrix) 유전자는 A/Wisconsin/4755/94 (H1N1)와 유사하고, NP(nucleoprotein) 유전자는 A/Wisconsin/3523/1988(H1N1)와 유사하고, NS (nonstructural) 유전자는 A/Swine/Iowa/17672/88(H1N1)와 유사하고, PA(Polymerase) 유전자는 A/Swine/Wisconsin/238/97 (H1N1)와 유사하고, PB1(Polymerase basic protein 1) 유전자는 A/Wisconsin/3523/88 (H1N1)와 유사하고, PB2(Polymerase basic protein 2) 유전자는 A/Swine/Zhejiang/1/2004(H1N2)와 유사하다.
본 발명에 따른 돼지 인플루엔자 바이러스 H1N1은 한국 돼지의 비강에서 직접 분리한 것으로, 상기 바이러스는 도 1a 내지 1h에 도시한 계통발생학적 연관성을 갖는다. 도 1a 내지 도 1h 는 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1) 인플루엔자 바이러스의 계통발생학적 관련성을 각각 HA, NA, M, NP, NS, PA, PB1 및 PB2를 이용하여 분석한 것이다. 상기 계통발생학적 분석으로 상기 한국 H1N1 분리주 및 미국 유래의 H1N1 분리주가 유사하게 관련되어 있다는 것을 알 수 있다.
본 발명에서 분리한 돼지 인플루엔자 바이러스는 한국 돼지에서 유행하는 바이러스 종이므로, 본 발명의 돼지 인플루엔자 바이러스에 대한 면역원성 조성물을 제조함으로써, 대부분의 돼지에서 인플루엔자 바이러스에 대한 면역을 형성시킬 수 있거나 또는 돼지를 통한 바이러스 전파 및 신종의 인플루엔자 바이러스의 생성을 억제시킬 수 있다.
본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)(KCTC-11078BP), A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)(KCTC-11080BP) 및 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)(KCTC-11079BP)로 이루어진 군으로부터 선택되는 인플루엔자 바이러스의 사균 또는 이의 항원을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스 면역원성 조성물을 제공한다.
본 발명의 면역원성 조성물은 돼지 인플루엔자 바이러스 또는 이의 항원을 유효성분으로 포함한다. 본원에서 사용된, 용어 "면역원성 조성물"은 대상에게 투여된 후, 상기 대상의 면역 반응에 긍정적으로 영향을 주는 조성물을 의미하는 가장 광범위한 의미로 사용된다. 면역원성 조성물은 대상에게 세포성 면역 반응, 예를들어 CTL 또는 체액성 면역 반응, 예를 들어 항체의 유발의 향상된 전신적 또는 국소적 면역 반응을 제공한다.
상기 면역원성 조성물은 사균 면역원성 조성물, 생균 면역원성 조성물, 특이 항원 추출 면역원성 조성물, 합성 면역원성 조성물 또는 유전공학 면역원성 조성물일 수 있으나, 생균 면역원성 조성물의 경우 바이러스가 독성이 있는 균주로 환원되어 증식될 수 있으므로 인플루엔자 바이러스에 대한 면역원성 조성물은 사균 면역원성 조성물 특이 항원 추출 면역원성 조성물, 합성 면역원성 조성물 또는 유전공학 면역원성 조성물이 바람직하다.
사균 면역원성 조성물은 불활화 면역원성 조성물 또는 사독 면역원성 조성물이라고도 하며, 죽은 바이러스를 포함한 면역원성 조성물이다. 이의 예로는 전 바이러스 면역원성 조성물과 분할 면역원성 조성물이 있으며, 이들은 공지된 방법으로 용이하게 제조가능하다. 예컨대 전 바이러스 면역원성 조성물은 바이러스 전체에 포르말린을 처리하여 제조할 수 있으며, 분할 면역원성 조성물은 바이러스에 에테르를 처리하여 외피만을 분쇄, 수득하여 제조할 수 있다.
특이항원 추출 면역원성 조성물은 바이러스의 구성성분 중 면역기능을 일으킬 수 있는 항원 성분만을 추출하여 제조한 면역원성 조성물로, 바이러스 방어에 필요한 항원 부위에 대해서만 면역형성을 유도함으로써 부작용을 최소화할 수 있다. 예를 들면, 돼지 인플루엔자 바이러스의 HA 단백질 및/또는 NA 단백질을 추출하여 사용할 수 있다.
합성 면역원성 조성물은 바이러스의 항원 또는 항원결정기만을 화학적으로 합성하거나 또는 재조합 DNA 기술로 생산한 펩티드를 포함한 면역원성 조성물로, 예를 들면 돼지 인플루엔자 바이러스의 HA 단백질 및/또는 NA 단백질을 합성하여 사용할 수 있다.
유전공학 면역원성 조성물은 바이러스의 병원성을 일으키는 특이 유전자를 변형하거나 제거한 것일 수 있다.
본 발명의 돼지 인플루엔자 바이러스 면역원성 조성물은, 일예로 (a) 돼지 인플루엔자 바이러스를 산란계 유정란에 주입하여 증식시키고, (b) 상기 유정란으로부터 요막유강을 수득하여 여기에 포르말린, BPL(betapropiolactone) 또는 BEI(BINARYETHILIMINE)를 처리하고 및 (c) 상기 포르말린이 처리된 요막유강으로부터 사독화된 바이러스를 수득하고 이를 가금 바이러스 면역원성 조성물로 제조하는 단계를 통하여 제조될 수 있다. 각 단계의 상세 방법은 하기와 같다.
상기 (a) 단계는, 가금 인플루엔자 바이러스는 5 내지 15일령의 유정란에 주입하고, 유정란은 30 내지 40℃에서 24 내지 72시간 방치하여 바이러스의 증식을 유도한다.
상기 (b) 단계에서는 통상의 방법으로 요막유강을 수득하여 여기에 최종농도 0.005 내지 0.1 (v/w)%의 포르말린, BEI 또는 BPL을 가하고 저온에 방치하여 바이러스를 사독화시킨다.
상기 (c) 단계에서는 포르말린, BEI 또는 BPL이 처리된 요막유강을 원심분리 또는 여과를 통하여 사독화된 바이러스를 수득한다. 수득된 바이러스는 수산화알루미나 겔에 흡착시킨다.
상기한, 면역원성 조성물 제조방법은, 공지의 방법을 채택하거나 또는 일부 수정을 가하여 용이하게 실시가능하다.
또한 본 발명의 면역원성 조성물은 추가적으로 용매, 면역증강제 및 부형제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 더 포함할 수 있다. 또한 상기 용매로는 생리식염수 또는 증류수가 있으며, 면역증강제로는 프로인트 불완전체 또는 완전체 어드쥬번트가 있으며, 부형제로는 알루미늄 포스페이트, 알루미늄 히드록시드 또는 알루미늄 포타슘 설페이트(alum)가 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며 공지의 물질이 모두 포함될 수 있다.
본 발명의 면역원성 조성물은 돼지 인플루엔자 바이러스를 375 HA 내지 1000 HA 혈구응집 단위로 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 다만, 면역원성 조성물의 혈구응집 단위가 375 HA 미만인 경우, 돼지에 효과적으로 항체형성을 유도하지 못할 수 있으며, 1000 HA를 초과하는 경우, 효율 대비 비경제적일 수 있다.
본 발명의 면역원성 조성물은 경구형 또는 비경구형 제제로 제조할 수 있으며, 바람직하게는 비경구형 제제인 주사액제로 제조하며, 진피내, 근육내, 복막내, 정맥내, 피하내, 비강 또는 경막외(eidural) 경로로 투여할 수 있다.
본 발명의 면역원성 조성물은 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1), A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2) 또는 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)에 감염될 수 있으며, 상기 인플루엔자 바이러스를 다른 개체에 전파시킬 수 있는 모든 종류의 가금, 조류 및 사람에 사용가능하다. 그 예로는, 돼지, 닭, 오리 또는 칠면조가 있다.
면역원성 조성물의 투여량은 적용 대상의 종류, 성장 정도, 타 약물의 투여 여부 및 건강 상태에 따라 적절히 조절하여 결정할 수 있으며, 예컨대 체중 1 kg 당 15 HA 유닛 내지 60 HA 유닛으로 접종할 수 있으며 1차 접종 후 2 내지 1달 경과 후 2차 접종을 추가로 실시할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의 해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예
실시예 1: 본 발명의 돼지 인플루엔자 바이러스의 분리
2005년 1월에, 급성 호흡기 질환의 발병이 경기도에서 300 마리의 모유돈에 대해 상업적인 돼지 농장에서 발생하였다. 젖뗀 및 성장 돼지의 대부분은 전형적인 인플루엔자 임상 신호 (재치기, 기침, 및 복식 호흡)를 보여주었다. 상기 발병은 2주 내에 전체 시설에 걸쳐 진행되었다. 상기 돼지는 통상적으로 수의사의 추천에 따라 위축비염 및 마이코플라즈마 폐렴에 대해 예방접종하였다. 심한 호흡기 질환을 갖는 3마리의 45일령 돼지를 해부하였다. 전체적인 병터는 3마리 돼지에서 유사하였다.
3마리의 45일령 돼지를 돼지 인플루엔자 감염의 진단을 위해 녹십자 수의약품 연구소 (한국)로 옮기고, 비강용 면봉을 이용하여 인플루엔자 A 바이러스를 분리하여 11일령 병아리 알에 접종하였다. 요막강액을 저속 원심분리에 의해 제거하고, 3~4일 인큐베이션 후에 -70℃에 저장하였다. 인플루엔자 A 바이러스를 H1 및 H3 단특이성 항혈청 및 RT-PCR 분석 (Song et al, 2003. J. Vet. Diagn. Invest. 15, 30-34; Choi et al., 2002a. J. Vet. Diagn. Invest. 14, 62-65)을 이용한 적혈구응집억제 (HI) 시험에 의해 서브타입하였다. HI 시험을 기준 돼지 항혈청 (Iowa State University, Ames, IA의 수의 진단 실험에서 친절하게 제공)을 이용하여 수행하였다. 상기 항혈청은 H1N1 돼지 인플루엔자 바이러스 (A/Sw/IA/1979) 또 는 최근의 미국 H3N2 돼지 인플루엔자 바이러스 분리주 (A/Sw/IA/41305/1998)에 단특이적이었다. 상기 분리주에 대한 항혈청은 돼지 유래이었다. 시험을 alphamethod (즉, 가변적인 바이러스 농도 및 일정한 항체 역가) (Carbrey et al,, 1973. In: Serologic microtiter techniques for diagnostic virology, ed. Veterinary Service Diagnostic Laboratory, p.14-18. USDA/AHPIS, Ames, IA)를 이용하여 수행하였다. 상기 분리된 바이러스는 각각 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1), A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2) 및 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)로서 명명하였으며, 이를 각각 2007년 3월 2일자로 국제기탁기관인 한국생명공학연구소 유전자 은행에 기탁하였으며, 이의 수탁번호는 각각 KCTC-11078BP, KCTC-11080BP 및 KCTC-11079BP이다.
실시예 2: 본 발명의 인플루엔자 바이러스의 유전자 서열 분석
바이러스 RNA를 제조자의 지시에 따라 Trizol LS를 이용하여 요막강액으로부터 추출하였다. RT 및 PCR을 랜덤 헥사머 프라이머를 이용하여 표준 조건하에 수행하였다. 적혈구응집소 (HA), 뉴라미니다제 (NA), PA, PB1 및 PB2 중합효소 유전자의 증폭을 H1F (서열번호 21) 및 H1R (서열번호 22), N1F (서열번호 23) 및 N1R (서열번호 24), PAF (서열번호 25) 및 PAR (서열번호 26), PB1F (서열번호 27) 및 PB1R (서열번호 28), PB2F (서열번호 29) 및 PB2R (서열번호 30)을 이용하여 수행하였다. A/Swine/Korea/GC0503/2005의 유전자형 분석 (genotyping)을 위해, 핵단백질 (NP), 기질 (M) 및 비구조체 (NS) 유전자의 증폭 및 서열결정을 이전에 기재한 바와 같이 수행하였다 (Young Ki Choi. 2002. Virus Research 87. 173??179, Zou S. 1997. J. Clin. Microbiol. 2623-2627).
분리된 바이러스의 서열을 PAUP 규칙에 따라, 갭은 "결실된" 것으로 처리하면서 기준 바이러스의 진뱅크 서열과 비교하였다. 기준 바이러스에 대한 서열 비교를 Bioedit 소프트웨어(v.7.0; Tom Hall Ibis Therapeutics)를 이용하여 수행하였다. 개개의 인플루엔자 바이러스 서열의 정렬을 ClustalX 프로그램 (v. 1.82; Tompson)을 이용하여 생성하였다. H1N1 분리주 및 선택된 기준 바이러스 사이의 계통발생학적 관계를 tree-bisection-reconnection branch swapping 알고리즘 및 MULTITREES 옵션을 이용하는 최대 파시모니 (maximum parsimony) 방법 (PAUP 소프트웨어, v.4.0b2; David Swofford, Smithsonian Institution)을 이용함으로써 이의 뉴클레오티드 서열로부터 평가하였다.
11일령 배아 난으로부터 분리된 바이러스는 수탉 적혈구세포(RBC)를 효과적으로 응집하였다. 시료의 평균 적혈구응집 활성 역가는 1/2,048이었다. HI 시험에서, H1N1 SIV (A/Sw/IA/1979)에 단특이적인 항체는 분리주의 HA 활성을 완전히 저해한 반면, H3N2 SIV 항혈청 (A/Sw/IA/41305/1998에 대한 것)은 효과가 없었다. 이는 상기 분리주가 H1 서브타입이라는 것을 제시한다.
실시예 3: 본 발명의 인플루엔자 바이러스의 계통발생학적 특성 규명
모든 8가지 A/Swine/Korea/GC0503/2005 분리주 유전자의 뉴클레오티드 서열에 대한 계통발생학적 트리를 작성하였다. 도 1은 A/Swine/Korea/GC0503/2005의 HA, NA, M, NP, NS, PA, PB1 및 PB2 유전자의 뉴클레오티드 서열의 계통발생학적 트리를 보여준다. 바이러스 사이의 진화적인 관계를 최대 파시모니 방법 (PAUP 소 프트웨어, v.4.0b2; David Swofford, Smithsonian Institution)을 이용하여 평가하였다. 수평선 거리는 분기점 사이의 뉴클레오티드 치환 수에 비례한다. HA 트리는 A/Wahan/359/95 (H3N2)에 뿌리가 있으며, NA 유전자 트리는 B/Beijing/184/93에 뿌리가 있으며, M 유전자 트리는 B/Lusuka/432/99에 뿌리가 있으며, NS 유전자 트리는 B/Beijing/184/93에 뿌리가 있다. NP, PA, PB1 및 PB2 유전자 트리는 B/Yamagata/16/88에 뿌리가 있다.
상기 계통발생학적 분석은 본원의 신규 한국 H1N1 분리주 및 미국 유래의 H1N1 분리주가 유사하게 관련되어 있다는 것을 강하게 제시한다. 하기 표 1은 A/Swine/Korea/GC0503/2005 및 진뱅크에서 유용한 기준 균주 사이의 유전적 유사성을 보여준다.
| 유전자 단편 | Accession NO | 영역 | 가장 높은 동일성을 갖는 바이러스 | 뉴클레오티드 서열 동일성 (%) | 인플루엔자 바이러스 혈통 |
| HA | U47304 | 345-1351 | A/Swine/Iowa/17672/88(H1N1) | 98.3 | 돼지 |
| NA | U53166 | 324-1078 | A/Wisconsin /4754/94(H1N1) | 98.0 | 돼지 |
| M | U53169 | 61-849 | A/Wisconsin/4755/94 (H1N1) | 98.9 | 돼지 |
| NP | M63755 | 1310-1530 | A/Wisconsin/3523/1988(H1N1) | 97.7 | 돼지 |
| NS | U49485 | 56-829 | A/Swine/Iowa/17672/88(H1N1) | 98.3 | 돼지 |
| PA | DQ280258 | 247-773 | A/Swine/Wisconsin/238/97 (H1N1) | 97.2 | 돼지 |
| PB1 | M25934 | 251-628 | A/Wisconsin/3523/88 (H1N1) | 96.8 | 돼지 |
| PB2 | DQ139325 | 317-1086 | A/Swine/Zhejiang/1/2004(H1N2) | 95.5 | 돼지 |
중요하게, 한국에서 분리된 상기 H1N1 바이러스는 이의 초기 유래 농장을 벗어나 전파되지는 않는 것 같다.
같은 방식으로 H1N2와 H3N2에 대해서 계통발생학적 분석을 실시한 결과, 본발명의 한국 H1N2와 H3N2 분리주 및 미국 유래의 분리주가 유사하게 관련되어 있다는 것을 강하게 제시한다. 하기 표 2는 A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2) 및 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2) 및 진뱅크에서 유용한 기준 균주 사이의 유전적 유사성을 보여준다.
| 바이러스 분리주 | 유전자 단편 | 가장 높은 동일성을 갖는 바이러스 | 뉴클레오티드 서열 동일성(%) | Accession NO |
| GCVP H1N2 | HA | A/SW/MN/16419/01(H1N2) | 98.2 | AY060050 |
| NA | A/SW/Korea/CY02/02(H1N2) | 99.8 | AY129157 | |
| PB1 | A/SW/Korea/CY02/02(H1N2) | 96.0 | AY129162 | |
| PB2 | A/SW/Korea/CY02/02(H1N2) | 99.0 | AY129163 | |
| M | A/SW/Korea/CY02/02(H1N2) | 99.5 | DQ150436 | |
| NS | A/SW/IN/14810-S/01(H1N2) | 98.9 | AY060136 | |
| GCVP H3N2 | NA | A/SW/OK/18089/99(H3N2) | 97.8 | AF268140 |
| PB1 | A/SW/IL/100085A/01 (H1N2) | 99.1 | AF455729 | |
| PB2 | A/WI/10/98 (H1N1) | 98.9 | AF342824 | |
| PA | ASW/NC/98225/01(H1N2) | 99.2 | AF455716 | |
| M | A/WI/10/98 (H1N1) | 99.4 | AF342818 | |
| NS | A/SW/MN/3128/00(H1N2) | 99.4 | AY060132 |
실시예
4: 본 발명의 인플루엔자 바이러스로 감염된
돼지에서
발병 기전 및 바이러스 분포
1. 재료 및 방법
돼지 인플루엔자 바이러스:
돼지 인플루엔자 바이러스 A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1), A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2) 및 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)를 한국에서 호흡기 질환의 심각한 발병 동안 돼지로부터 실시예 1에 나타낸 바와 같이, 분리하였다.
실험 설계:
HI 시험에 의해 돼지 인플루엔자 바이러스 (SIV)에 대한 혈청 음성으로서 확인된 3주된 60마리의 돼지를 H1N1, H1N2, H3N2 또는 대조군으로 동일 수로 무작위로 분배하였다. 감염군에서 15마리의 각각을 돼지 인플루엔자 바이러스 (2nd 계대; 106 TCID50/ml)를 포함하는 3 ml의 배지 (DMEM, Mediatech)을 이용하여 3000rpm에 10분간 원심분리하여 상층액을 비강으로 접종하였다. 대조군의 15마리는 동일한 방식으로 비감염 세포 배양 상층액에 노출하였다.
접종 후 매일 간격으로, 동물을 임상적으로 평가하고, 비강 면봉 시료를 각 동물로부터 수득하였다. 각 그룹으로부터 3마리의 돼지를 접종 후 2, 4, 7, 14 및 21일에 죽였다. 해부하여 조직을 각 돼지로부터 수집하였다. 모든 이용된 방법은 서울대학교 실험동물관리위원회에 의해 이전에 승인을 받았다.
폐 스코어링 (Lung scoring):
폐 스코어를 형태계측학적 분석에 의해 평가하였다 (심함: 3, 적당함: 2 순함: 1, 정상: 0).
혈청학:
각 그룹의 3마리의 돼지의 혈액 시료를 0, 2, 4, 7, 14 및 21 dpi(접종 후 일수)에서 수집하였다. 혈청을 병아리 적혈구 상에 흡착하여 적혈구응집의 비특이적 저해제를 제거하였다. 혈청을 A/Swine/Korea/GC0503/2005 및 A/Swine/Korea/GC0407/2005에 대한 HI 시험에서 조사하였다. HI 시험은 표준 절차에 따라 수행하였다.
2. 결과
H1N1 그룹은 형태계측학적 분석에서 가장 높은 스코어를 나타내었다. H1N2 및 H3N2 그룹도 또한 폐에서 명백한 병원성 신호가 있었다 (도 2 참고). 도 2는 각 그룹의 돼지 인플루엔자 바이러스 (Swine influenza virus: SIV)의 접종 후 시간에 따른 병원성의 변화를 폐 스코어링 값으로 나타낸 도면이다.
돼지 인플루엔자 바이러스 (SIV) 배출은 DPI 2에서 DPI 5 까지 계속되었다 (표 3 참고). 표 3은 비강 면봉으로 채취된 시료를 주형으로 한 RT-PCR을 통하여, 돼지 인플루엔자 바이러스가 배출되는지를 확인한 결과를 나타낸 것이다.
| DPI | 대조군 | H1N1 | H1N2 | H3N2 |
| 1 | 0/5 | 0/5 | 0/5 | 0/5 |
| 2 | 0/5 | 0/5 | 1/5 | 1/5 |
| 3 | 0/3 | 3/5 | 4/5 | 1/5 |
| 4 | 0/5 | 2/5 | 2/5 | 2/5 |
| 5 | 0/5 | 4/5 | 4/5 | 3/5 |
| 6 | 0/5 | 0/5 | 0/5 | 0/5 |
| 7 | 0/5 | 0/5 | 0/5 | 0/5 |
본원에서 분리된 돼지 인플루엔자 바이러스에 대하여 HI 실험을 수행하였다, 그 결과 측정된 평균 HI 역가는 하기 표 4 및 표 5에 나타낸 바와 같다.
| DPI | 대조군 | H1N1 그룹 | H1N2 그룹 | H3N2 그룹 |
| 0 | 10×23 | 10×23 | 10×23 | 10×23 |
| 2 | 10×22 | 10×22.41 | 10×22 | 10×22 |
| 4 | 10×21.42 | 10×21.74 | 10×21.42 | 10×22.41 |
| 7 | 10×21.74 | 10×22.41 | 10×21.74 | 10×22 |
| 14 | 10×21.74 | 10×23 | 10×22 | 10×23.42 |
| 21 | 10×21 | 10×21 | 10×21 | 10×24 |
| DPI | 대조군 | H1N1 그룹 | H1N2 그룹 | H3N2 그룹 |
| 0 | 10×22.49 | 10×22.49 | 10×22.49 | 10×22.49 |
| 2 | 10×22 | 10×21.74 | 10×21.42 | 10×21.42 |
| 4 | 10×21.42 | 10×20.41 | 10×20.41 | 10×22 |
| 7 | 10×21.42 | 10×21 | 10×20.41 | 10×21.74 |
| 14 | 10×21 | 10×22.22 | 10×21.42 | 10×22.41 |
| 21 | 0 | 10×22.87 | 0 | 10×2-0.58 |
표 4 및 표 5에 나타낸 바와 같이, H1N1 그룹은 H1형 항원에 대한 항체를 형성하였고, H3N2 그룹은 H3형 항원에 대한 항체를 형성하였다.
상기 결과로부터 한국에서 분리된 돼지 인플루엔자 바이러스 서브타입 H1N1, H1N2 및 H3N2가 심각한 폐렴을 야기하는 독성 병원균이라는 것을 확인하였다. 따라서, 본 발명의 한국에서 3가지 서브타입 돼지 인플루엔자 바이러스는 상기 바이러스에 대한 감염의 제어 및 예방을 위한 면역원성 조성물을 제조하는데 사용될 수있다.
이상 살펴본 바와 같이, 본 발명은 신종의 돼지 인플루엔자 바이러스를 제공하여, 돼지를 인플루엔자 바이러스에 대한 면역을 효과적으로 형성시킬 수 있으며, 따라서 돼지 농장에서의 인플루엔자 바이러스에 의한 질환 발병을 현저히 감소시켜 경제적인 손실을 방지할 수 있다.
<110> Green Cross Verterinary Products Co., Ltd
<120> Influenza virus and immunogenic composition comprising the same
<130> PN073935
<160> 30
<170> KopatentIn 1.71
<210> 1
<211> 665
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)
<400> 1
gctcagtgtc atcatttgaa agatttgaga tattccccaa ggcaagttcc tggcccaatc 60
atgaaacgaa cagaggtgtg acggcagcat gtccttatgc tggagcaaac agcttctaca 120
gaaatttaat atggctggta aaaaaagaga attcataccc aaagctcagc aaatcctata 180
ttaacaataa ggagaaggaa gtcctcgtgc tatggggcat tcaccatcca cctaccagta 240
ctgaccaaca aagtctctac cagaatgcag atgcctatgt ttttgtgggg tcatcaaaat 300
acaacaagaa attcaagcca gaaatagcaa caagacccaa ggtgaggggt caagcaggga 360
gaatgaacta ttactggaca ctagtagagc ctggagacac aataacattc gaagcaactg 420
gaaatctagt ggtaccaaga tatgccttcg caatgaaaag aggttctgga tccggtatta 480
tcatttcaga tacatcagtc cacgattgta atgcgacttg tcaaacaccc aaaggtgcta 540
taaacaccag ccttccattt cagaatatac atccagtcac aattggagaa tgtccaaaat 600
atgtcaaaag cacaaaattg agaatggcta caggattaag gaatatcccg tctattcaat 660
ctaga 665
<210> 2
<211> 665
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)
<400> 2
tgctctcatt tggagtgcag gacttttttt ctgacccaag gtgctttgct gaatgacagg 60
cattctaatg gaaccgtcaa ggacaggagt ccttatagaa ccttaatgag ctgcccgatt 120
ggtgaagctc catctccgta caattcaagg ttcgaatcag ttgcttggtc agcaagtgca 180
tgccatgatg gaatgggatg gctaacaatc gggatttccg gtccagataa tggagcagtg 240
gctgttttga aatacaatgg tataataaca gatacaataa aaagttggag aaacaaaata 300
ctaagaacac aagagtcaga atgtgtttgt ataaacggtt catgttttac tataatgact 360
gatggcccaa gcaatgggca agcatcatac aaaatattca aaatggagaa agggaagatt 420
attaagtcag ttgagctgga tgcacctaat taccactatg aggaatgctc ttgttaccct 480
gatacaggca aagtggtgtg cgtatgcaga gacaattggc atgcttcgaa tcgaccatgg 540
gtctctttcg atcagaatct tgattatcag atagggtaca tatgcagtgg ggttttcggt 600
gataacccgc gttctaatga cgggaaaggc aattgtggcc cagtactttc taatggagcg 660
aatgg 665
<210> 3
<211> 789
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)
<400> 3
ctctatcgtt ccgtcaggcc ccctcaaagc cgagatagcg cagagacttg aagacgtttt 60
tgcagggaaa aacaccgatc ttgaggcact catggaatgg ctaaagacaa gaccaatcct 120
gtcacctctg actaagggga ttttaggatt tgtgttcacg ctcaccgtgc ccagtgagcg 180
aggactgcag cgtagacgct ttgtccagaa tgccctcaat gggaatggtg acccgaacaa 240
catggacaaa gcggtcaaac tgtacaggaa acttaaaagg gaaataacat tccatggggc 300
caaagaagta tcgctcagtt actctgctgg tgcacttgcc agttgcatgg gcctcatata 360
caacagaatg gggactgtca ccactgaggt ggcctttggt ctagtatgtg caacctgtga 420
acagattgct gattcccagc atcgatctca tagacaaatg gtgacaacaa ccaatccact 480
aatcaggcat gagaacagaa tggtattagc cagcacaaca gctaaagcca tggaacaaat 540
ggctggatca agcgaacaag cagcagaggc tatggaggtt gccagccagg ctagacaaat 600
ggtacaggca atgagaacaa ttgggactca ccctagttcc agcgctggtc taaaagatga 660
tcttcttgaa aatttacagg cctatcagaa acgaatggga gtgcaaatgc aacgattcaa 720
gtgatcctct aattgctgcc gcaagcatca ttgggatttt gcacctgata ttgtggattc 780
ttgatcgtc 789
<210> 4
<211> 221
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)
<400> 4
gagcatccgt tatggcagct ttcagcggga acaatgaggg acggacatcg gacatgcgat 60
cggaagttat aagaatgatg gaaagtgcaa ggccagaaga tttgtccttc caggggcggg 120
gagtcttcga gctctcggac gaaaaggcaa cgaacccgat cgtgccttcc tttgacatga 180
gtaatgaagg gtcttatttc ttcggagaca atgcagagga g 221
<210> 5
<211> 774
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)
<400> 5
ggtagactgt ttcctttggc atatccgcaa acggtttgca gacaatggct tgggtgatgc 60
cccattcctt gatcggctcc gccgagatca aaagtcccta aaaggaagag gcagcaccct 120
tggtctcgac atcgaaacag ccactcttgt tgggaaacaa attgtggagt ggattttgaa 180
agaggaatcc aacgaaacac ttaagatgac cattgcatct gtacctactt cgcgctacct 240
ggctgacatg accctcgagg aaatgtcacg agactggttc atgctcatgc ctaggcaaaa 300
gataataggc tctctttgtg tgcgaatgga ccaggcgatc atggaaaaga acatcatact 360
gaaagcgaac ttcagtgtga tttttaatcg attagagact ttgatactac taagggcttt 420
caccgaggag ggagcaatca ttggagaaat ttcaccatta ccttctcttc caggacatac 480
tgatgaggat gtcaaaaatg caattggggt cctcatcgga gggcttgaat ggaatggtaa 540
cacggttcga gtctctgaaa atctacagag attcgcttgg agaaaccgta atgaggatgg 600
gagaccttca ctacctccaa agcagaaatg aaaagtggcg agagcaattg ggacagaaat 660
ttgaggaaat aaggtggttg attgaagaag tgcggcacaa attgaaaatg acagagaata 720
gtttcgagca aataacattt atgcaagcct tacaactatt gcttgaagta gaac 774
<210> 6
<211> 527
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)
<400> 6
agatttgaaa taattgaagg aagggatcgg aatatggcat ggacggtggt aaacagtatt 60
tgtaacacta caggggttgg gaaaccaagg tatctcccag atctatatga ctacaaagaa 120
gatagattca ttgagattgg agtgacaaga agagaagtcc atatctacta cctggagaag 180
gccaataaga taaagtctga agatacgcac atccatattt tctcatttac aggagaagaa 240
atggcaacaa aagccgacta cacactagat gaagaaagta gagccagaat aaagaccagg 300
ctatttacca taagacaaga gatggctagc agaggtcttt gggattcctt tcgtcagtcc 360
gagagaggtg aagagacaat tgaagaaaga tttgaaatca aagggacaat gcgaaagctt 420
gctgaccaaa gtctcccacc aaacttctca agtttcgaca actttagagc ctatgtagat 480
ggattcgaac cgaatggcta cattgagggc aagctttccc aaatgtc 527
<210> 7
<211> 378
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)
<400> 7
acaatgaacc aactggttat gcccaaacag actgcgtttt agaagcaatg gcgtttctcg 60
agaaatccca tcctggcatc tttgaaaact catgtcttga aacgatggag gttgttcagc 120
aaacacgggt ggacaaacta acgcaaggac ggcaaacctt cgattggact ctgaatagga 180
atcagcctgc tgcaacagca ttggccaaca caatagaggt attcagatta aacagcctca 240
cggccagtga atctggaagg ctcatagact tcctgaaaga tgtcatggat tcaatggaca 300
aagaagaaat ggaaattgta acccatttcc aaagaaaaag gagagtgagg gacaatatga 360
ctaagaaaat ggtaacgc 378
<210> 8
<211> 378
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0503/2005(H1N1)
<400> 8
acaatgaacc aactggttat gcccaaacag actgcgtttt agaagcaatg gcgtttctcg 60
agaaatccca tcctggcatc tttgaaaact catgtcttga aacgatggag gttgttcagc 120
aaacacgggt ggacaaacta acgcaaggac ggcaaacctt cgattggact ctgaatagga 180
atcagcctgc tgcaacagca ttggccaaca caatagaggt attcagatta aacagcctca 240
cggccagtga atctggaagg ctcatagact tcctgaaaga tgtcatggat tcaatggaca 300
aagaagaaat ggaaattgta acccatttcc aaagaaaaag gagagtgagg gacaatatga 360
ctaagaaaat ggtaacgc 378
<210> 9
<211> 435
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)
<400> 9
agatttgaga tattccccaa gacaagttca tggcccaatc atgacacgaa cagaggtgtg 60
acggaggcat gttctcatgc tggaacaaaa agcttctaca gaaatttaat atggctggtc 120
aaaaaaggag actcataccc aaagatcagc aaatcctaca ttaacaataa ggagaaggaa 180
gttctcgtgc tatggggcat tcaccatcca tctaccagtg ccgatcaaca aattctctat 240
cagaatgcag atgcctatgt ttttgtgggg tcatcaagat acagcaaaaa gttcaagcca 300
gaaatagcaa caagacccaa ggtgagggac caagcaggga gaatgaacta ttactggaca 360
ctagtagagc ctggagacaa aataacattc gaagcaactg gaaatctagt ggtaccgaga 420
tatgccttcg cattg 435
<210> 10
<211> 418
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)
<400> 10
gaatgctcct gttatcctcg atatcctggt gtcagatgtg tctgtagaga caactggaaa 60
ggttccaata ggcccatcgt agacataaat gtaaaggatt ataacattgt ttccagttat 120
gtgtgctcag gacttgttgg agacacaccc agaaaaaacg acagatccag cagtagcaat 180
tgtattaatc ctaacaatga ggaagggggt catggagtga aaggctgggc ctttgatgat 240
ggaaatgacg tgtggatggg aagaacaatc aacgagaagt tacgctcagg ttacgaaacc 300
ttcaaagtca ttgagggctg gtccaaacct aactccaaat tgcagataaa taggcaagtc 360
atagttgaca gaggtgatag gtccggttat tctggcattt tctctgttga aggcaaaa 418
<210> 11
<211> 796
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)
<400> 11
gctttcaggt agactgtttc ctttggcaca tccgcaaacg gtttgcagac aatggattgg 60
gtgatgcccc attccttgat cggctccgcc gagatcaaaa gtccctaaaa ggaagaggca 120
acacccttgg cctcgacgtc gaaacagcca ctcttgttgg gaaacaaatt gtggagtgga 180
ttttgaaaga ggaatccagc gagacactta ggatgaccat tgcatctgta cctacttcgc 240
gctacatagc tgacatgacc ctcgaggaaa tgtcacgaga ctggttaatg ctcatgccta 300
ggcaaaagat aataggccct ctttgtgtgc gaatggacca ggcgatcatg gaaaagaaca 360
tcatactgaa agcgaacttc agtgtgatct ttaaccgatt agaaactttg atactactaa 420
gggctttcac tgaggaggga gcaatcgttg gagaaatttc accattacct tctcttccag 480
gacatactaa tgaggatgtc aaaaatgcaa ttggggtcct catcggagga cttgaatgga 540
atggtaacac ggttcgaggc tctgaaaatc tacagagatt cgcttggaga aaccgtaatg 600
aggatgggag accttcactc cctccagagc agaaatgaaa agtggcgaga gcaattggga 660
cagaaatttg aggaaataag gtggttaatt gaagaagtgc ggcacagatt gaaagcgaca 720
gagaatagtt tcgaacaaat aacatntatg caagccttac aactactgct tgaagtagaa 780
caagagataa ggactt 796
<210> 12
<211> 556
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)
<400> 12
gttctagagg ccatggcttt ccttgaagaa tcccccccag ggttatttga gaattcatgc 60
ctggaaacaa tggaagttgt tcaacaaaca agggtggata tactaactca aggtcgccag 120
agttatgatt gggcattgaa cagaaatcaa ccggcagcaa ctgcattggc caacaccata 180
gaagttttta gatcgaatgg tctaacagct attgaatcag gaaggttaat agatttccta 240
aaggatgtaa tggaatcaat ggataaagag gaaatagagt tcacaacgca ctttcaaagc 300
aaacggagag taagagacaa catgcccaag aagatggtca cacaaagaac aataggaaag 360
caaaaacaac gagtgaataa gagaggttat ctcatccgag cactgacatt gaatacgatg 420
accaaagatg cagagagagg caaattaaaa agaagagcta tcgcaacacc agggatgcaa 480
attagagggt tcgtgtactt tgttgaaact ttagctagga gcatttgcga aaagcttgaa 540
cagtctggac tcccag 556
<210> 13
<211> 791
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)
<400> 13
ggaacaggaa aggcccaaca acaagcacag ttcactaccc taaggtatat aaaacttatt 60
tcgaaaaagt cgaaaggtta aaacatggta cctttggccc tgtccacttc agaaatcaag 120
ttaaaataag aaggagagtt gacacaaacc ctggtcacgc agatctcagt gccaaggagg 180
cacaggatgt gatcatggaa gttgttttcc caaatgaagt gggggcaaga atactgacat 240
cagagtcaca gctgacaata acaaaggaga agaaagaaga gctccaggat tgtaaaattg 300
ctcccttgat ggtggcatac atgctagaaa gagagttggt ccgtaaaacg aggtttctcc 360
cggtggctgg tggaacaggc agtatttata ttgaggtgct gcacttaact caggggacat 420
gctgggagca aatgtacact ccaggaggag aagtgagaaa tgatgatgtt gaccaaagtt 480
tgattatcgc tgctagaaac atagtaagaa gagcagcagt gtcagcagac ccattagcat 540
ctctcttgga aatgtgccac agcacacaga ttggaggaat aaggatggta gacatcctta 600
gacagaatcc aacggaggaa caagccgtag acatatgcaa ggcagcaatg gggctgagga 660
ttagctcctc tttcagcttt ggtgggttca ctttcaaaag aacaagcgga tcatcagtta 720
agaaagaaga agaagtgctc acgggcaacc tccaaacact gaaaataaga gtacatgaag 780
gatatgaaga a 791
<210> 14
<211> 206
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)
<400> 14
gctcactaat gaggtcggat gcacccattg acaactgcaa ttctgaatgc attactccaa 60
gtggaagcat tcccaatgac aaaccttttc aaaatgtaaa caggatcaca tatggggcct 120
gtcccagata tgttaagcaa aacactctga aattggcaac agggatgcgg aatgtaccag 180
agaaacaaac tagaggccat attcgg 206
<210> 15
<211> 457
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)
<400> 15
aggaagtgct cagcatgtcg aggagtgctc ttgttatcct agatatcccg gtgtcagatg 60
tgtctgcaga gacaactgga aaggctccaa taggcccatt gtagatataa atgtaaagga 120
ttatagcatt gtttccagtt atgtgtgctc aggacttgtt ggagacacac ccagaaaaaa 180
agacagatcc agcagtagca attgcctgaa tcctaacaat gaggaagggg gtcatggagt 240
gaaaggctgg gcctttgatg atggaaatga cgtgtggatg gggagaacga tcaacgagaa 300
gttacgctca ggttatgaaa ccttcagagt cattgatggc tggtccaaac ctaactccaa 360
attgcagata aataggcaag tcatagttga cagagatgat aggtccggtt attctggtat 420
tttctctgtt gaaggtaaaa gctgcatcaa tcggtgc 457
<210> 16
<211> 830
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)
<400> 16
ttgaggctct catggaatgg ctaaagacaa gaccaatcct gtcacctctg actaagggga 60
ttttagggtt tgtgtttacg ctcaccgtgc ccagtgagcg aggactgcag cgtagacgtt 120
ttgtccagaa tgccctcaat gggaatggtg acccgaacaa catggacaag gcggtcaaac 180
tgtacaggaa actcaaaagg gaaataacat tccatggggc caaagaagta gcgctcagtt 240
actctgctgg tgcacttgcc agttgcatgg gcctcatata caacagaatg gggactgtca 300
ccactgaggt ggcctttggt ctagtatgcg caacctgtga acagattgct gattcccagc 360
atcgatctca tagacaaatg gtgacaacaa ccaatccact aatcaggcac gagaacagaa 420
tggtaatagc cagcacaaca gctaaagcca tggaacaaat ggctggatca agcgaacaag 480
cagcagaggc tatggaggtt gccagccagg ctagacaaat ggtacaggca atgagaacaa 540
ttgggactca ccctagttcc agcgctggtc taaaagatga tcttcttgaa aatttacagg 600
cctatcagaa acggatggga gtgcaaatgc aacgattcaa gtgatcctct cattgctgcc 660
gcaagcatca ttgggatttt gcacctgata ttgtggattc ttgatcgtct ttttttcaaa 720
tgcatttacc gtcgctttaa atacggtctg caaagaggac cttctacgga aggagtgccg 780
gagtccatga gggaagaata tcgacagaaa cagcagagtg ctgtggatgt 830
<210> 17
<211> 181
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)
<400> 17
agctttcagg tagactgttt cctttggcat atccgcaaac ggtttgcaaa caatggattg 60
ggtgatgccc cattccttga tcggctccgc cgagatcaaa agtccctaaa aggaagaggc 120
aacacccttg gcctcgacat cgaaacagcc actcttgttg ggaaacaaat tgtggagtgg 180
a 181
<210> 18
<211> 827
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)
<400> 18
agaatcaaaa ccaggctttt caccataagg caagaaatgg ccagtagggg tctatgggat 60
tcctttcgtc aatccgagag aggcgaagag acaattgaag aaagatttga aattacagga 120
accatgcgca ggcttgccga ccaaagtctc ccaccgaatt tctccagcct tgaaaacttt 180
agagcctatg tagatggatt cgaaccgaac ggctgcattg agggcaagct ttctcaaatg 240
tcaaaagaag tgagcgccaa aattgaacca ttcttgaaga caacaccacg ccccctcaga 300
ttgcctgatg ggcctccttg ctctcagcgg tcaaagttct tgctgatgga tgctctgaaa 360
ctaagtattg aagacccgag tcatgagggg gaagggatac cactatatga tgcaatcaaa 420
tgcataaaga cattttttgg ctggaaagag cctaacataa tcaaaccaca tgagaaaggc 480
ataaacccca attacctcct ggcttggaag caggtgctag cagagctcca agacattgaa 540
aatggagaga agatcccaaa aacaaagaac atgaagagaa caagccaatt gaagtgggca 600
ctcggtgaga atatggcacc agagaaagta gactttgatg actgcaaaga tgttggtgat 660
cttaaacagt atgacagcga tgagccagag cccagatctc tagcaagctg ggtccaaaat 720
gaattcaata aggcatgtga attgaccgat tcaagctgga tagaacttga tgagatagga 780
gaagatgttg ccccgattga accacatcgc aagcatgagg aggaatt 827
<210> 19
<211> 597
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)
<400> 19
acagtgggtt gccaacagac tgtgttctgg aggccatggc tttccttgaa gaatcccacc 60
cagggatatt tgagaattca tgccttgaaa caatggaagt tgttcaacaa acaagggtgg 120
ataaactaac tcaaggtcgc cagacttatg attggacatt aaacagaaat caaccggcag 180
caactgcatt ggccaacacc atagaagttt ttagatcaaa tggtctaaca gctaatgagt 240
caggaaggct aatagatttc ctaaaggatg taatggaatc aatggataaa gaggaaatag 300
agataacaac acactttcaa agaaaaagga gagtaagaga caacatgacc aagaagatgg 360
tcacacaaag aacaataggg aagaaaaaac aaagagtgac taagagaggt tatctaataa 420
gagcactgac attgaatacg atgaccaaag atgcagagag aggcaaatta aaaagaaggg 480
ctatcgcaac acctgggatg caaattagag ggttcgtgta ctttgttgaa actttagcta 540
ggagcatttg cgaaaagctt gagcagtctg gactcccagt agggggcaat gaaagaa 597
<210> 20
<211> 350
<212> DNA
<213> A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)
<400> 20
ggatgttatc atggaagttg ttttcccaaa tgaagtgggg gcaagaatac tgacatcaga 60
gtcacagctg acaataacaa gagagaagaa agaagagctc caggattgta aaattgctcc 120
tttgatggtg gcatacatgc tagaaagaga gttggtccgt aaaacgaggt ttctcccggt 180
ggctggtgga acaggcagtg tttatattga ggtgctgcac ttaacccagg ggacatgctg 240
ggagcagatg tacactccag gaggagaagt gagaaatgat gatcttgacc aaagtttgat 300
tatcgctgct agaaacatag taagaagagc agcagtgtca gcagacccat 350
<210> 21
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer for HA
<400> 21
gggacatgtt acccaggaga t 21
<210> 22
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer for HA
<400> 22
gcattgtatg tccaaatatc ca 22
<210> 23
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer for NA
<400> 23
cttggtcagc aagtgcat 18
<210> 24
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer for NA
<400> 24
cattaggatc ccaaatcatc 20
<210> 25
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer for PA
<400> 25
agcggactac acccttgatg 20
<210> 26
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer for PA
<400> 26
attcagtagc cctgcaatgg 20
<210> 27
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer for PB1
<400> 27
ccgattgatg gaccactacc 20
<210> 28
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer for PB1
<400> 28
tttggccttc ttttcattgc 20
<210> 29
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> forward primer for PB2
<400> 29
aaacgatgct ggatcagacc 20
<210> 30
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> reverse primer for PB2
<400> 30
cccgaccatt gtgaattctt 20
Claims (3)
- 인플루엔자 바이러스 A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)(KCTC-11080BP) 및 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)(KCTC-11079BP)로 이루어진 군으로부터 선택되는 인플루엔자 바이러스.
- 인플루엔자 바이러스 A/Swine/Korea/GC0502/2005(H1N2)(KCTC-11080BP) 및 A/Swine/Korea/GC0407/2005(H3N2)(KCTC-11079BP)로 이루어진 군으로부터 선택되는 인플루엔자 바이러스의 사균 또는 이의 항원을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스 면역원성 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 면역원성 조성물은 돼지 또는 사람에 적용되는 것인 면역원성 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020070046573A KR100913425B1 (ko) | 2007-05-14 | 2007-05-14 | 인플루엔자 바이러스 및 그를 포함하는 면역원성 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020070046573A KR100913425B1 (ko) | 2007-05-14 | 2007-05-14 | 인플루엔자 바이러스 및 그를 포함하는 면역원성 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20080100632A KR20080100632A (ko) | 2008-11-19 |
| KR100913425B1 true KR100913425B1 (ko) | 2009-08-21 |
Family
ID=40287077
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020070046573A Active KR100913425B1 (ko) | 2007-05-14 | 2007-05-14 | 인플루엔자 바이러스 및 그를 포함하는 면역원성 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR100913425B1 (ko) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101624580B (zh) * | 2009-07-21 | 2011-11-23 | 华中农业大学 | 一种表达人工修饰合成的甲型h1n1流感病毒ha-na-m1基因的重组杆状病毒 |
| KR101339162B1 (ko) * | 2011-10-10 | 2013-12-09 | 녹십자수의약품(주) | 돼지 인플루엔자 바이러스 감염의 예방 또는 치료방법 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002000884A2 (en) | 2000-06-23 | 2002-01-03 | American Cyanamid Company | Nucleotide sequence of influenza a/udorn/72 (h3n2) genome |
| KR20060089390A (ko) * | 2005-02-04 | 2006-08-09 | 주식회사 중앙백신연구소 | 돼지 인플루엔자 바이러스ａ／ｓｗｉｎｅ／ｋｏｒｅａ／ｓ10/2004(ｈ1ｎ1) 및 이의백신 |
-
2007
- 2007-05-14 KR KR1020070046573A patent/KR100913425B1/ko active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002000884A2 (en) | 2000-06-23 | 2002-01-03 | American Cyanamid Company | Nucleotide sequence of influenza a/udorn/72 (h3n2) genome |
| KR20060089390A (ko) * | 2005-02-04 | 2006-08-09 | 주식회사 중앙백신연구소 | 돼지 인플루엔자 바이러스ａ／ｓｗｉｎｅ／ｋｏｒｅａ／ｓ10/2004(ｈ1ｎ1) 및 이의백신 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20080100632A (ko) | 2008-11-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5508252B2 (ja) | 鳥インフルエンザ遺伝子を含有する組み換え七面鳥ヘルペスウイルス | |
| Lee et al. | Characterization of a novel live attenuated infectious bronchitis virus vaccine candidate derived from a Korean nephropathogenic strain | |
| CN110117576B (zh) | 一种鸭腺病毒3型病毒株及其卵黄抗体制备和应用 | |
| Wang et al. | Evaluation of immune effects of fowlpox vaccine strains and field isolates | |
| JP7350864B2 (ja) | 異種スパイクタンパク質を有するｈ５２ ｉｂｖワクチン | |
| CN113943714A (zh) | 一种猫杯状病毒毒株及其应用 | |
| Huang et al. | Genetic, pathogenic and antigenic diversity of Newcastle disease viruses in Shandong Province, China | |
| CN103773739B (zh) | 一种猫泛白细胞减少症病毒减毒疫苗株及其应用 | |
| CN106929480B (zh) | 猪繁殖与呼吸综合征病毒株及其应用 | |
| KR101511712B1 (ko) | 신규 전염성 ｆ낭병 바이러스 ｉｂｄ ｋ7주 및 이를 이용한 전염성 ｆ낭병 백신 | |
| CN105802920A (zh) | 传染性法氏囊病病毒a11株及其应用 | |
| KR100913425B1 (ko) | 인플루엔자 바이러스 및 그를 포함하는 면역원성 조성물 | |
| CN106232808A (zh) | 禽类呼肠孤病毒疫苗 | |
| CN104130981A (zh) | 鸡传染性支气管炎病毒疫苗株及其在制备灭活疫苗中的应用 | |
| CN102586196B (zh) | 一株h1n1亚型猪流感病毒及其应用 | |
| KR101390554B1 (ko) | 신규한 개 인플루엔자 바이러스(ｈ３ｎ２), 이를 포함하는 백신 조성물 및 ｈ３ｎ２ 바이러스 검정 키트 | |
| CN113736749B (zh) | 一株禽流感病毒毒株及其应用 | |
| Kim et al. | Development of a highly immunogenic Newcastle disease virus chicken vaccine strain of duck origin | |
| CN102899294B (zh) | 一种h1n1型猪流感病毒疫苗株及其应用 | |
| KR101073991B1 (ko) | 국내사육 닭에서 유행하는 신규한 ｂ형 조류메타뉴모바이러스 ｓｃ1509주 및 이의 용도 | |
| Ghanem et al. | Phylogenetic Analysis of Infectious Bronchitis Viruses Currently Circulating in the Egyptian Field | |
| Osman et al. | Genetic characterization of velogenic and lentogenic Newcastle disease viruses circulating among broiler chickens in Al-wadi Al-gadid Governorate, Egypt (2021) | |
| KR20200061508A (ko) | 약독화된 조류메타뉴모바이러스 주 및 이를 포함하는 백신 조성물 | |
| KR101360112B1 (ko) | 공기전파가 가능한 신규한 ｈ９ｎ２형 저병원성 조류인플루엔자 바이러스 균주 및 그로부터 유래된 백신 | |
| KR101560337B1 (ko) | 신규한 조류메타뉴모바이러스 및 그 백신 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| PA0109 | Patent application |
Patent event code: PA01091R01D Comment text: Patent Application Patent event date: 20070514 |
|
| PA0201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| PE0902 | Notice of grounds for rejection |
Comment text: Notification of reason for refusal Patent event date: 20081031 Patent event code: PE09021S01D |
|
| PG1501 | Laying open of application | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| PE0701 | Decision of registration |
Patent event code: PE07011S01D Comment text: Decision to Grant Registration Patent event date: 20090525 |
|
| GRNT | Written decision to grant | ||
| PR0701 | Registration of establishment |
Comment text: Registration of Establishment Patent event date: 20090814 Patent event code: PR07011E01D |
|
| PR1002 | Payment of registration fee |
Payment date: 20090817 End annual number: 3 Start annual number: 1 |
|
| PG1601 | Publication of registration | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20120814 Year of fee payment: 4 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20120814 Start annual number: 4 End annual number: 4 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20130814 Year of fee payment: 5 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20130814 Start annual number: 5 End annual number: 5 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20140912 Year of fee payment: 6 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20140912 Start annual number: 6 End annual number: 6 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20150813 Year of fee payment: 7 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20150813 Start annual number: 7 End annual number: 7 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20160816 Year of fee payment: 8 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20160816 Start annual number: 8 End annual number: 8 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20170811 Year of fee payment: 9 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20170811 Start annual number: 9 End annual number: 9 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20180814 Year of fee payment: 10 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20180814 Start annual number: 10 End annual number: 10 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20190812 Year of fee payment: 11 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20190812 Start annual number: 11 End annual number: 11 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20220816 Start annual number: 14 End annual number: 14 |