KR100491815B1

KR100491815B1 - 단백질의 서방성 수송을 위한 폴리올/오일 현탁액을 포함하는 제약학적 조성물 및 그것의 제조방법

Info

Publication number: KR100491815B1
Application number: KR10-2001-7007843A
Authority: KR
Inventors: 골든버그메릴시머; 샨다지안; 비크만앨리스씨
Original assignee: 암젠 인코포레이티드
Priority date: 1998-12-23
Filing date: 1999-12-20
Publication date: 2005-05-27
Anticipated expiration: 2019-12-20
Also published as: IL143706A0; ES2204187T3; TWI221777B; PT1140018E; CN1335765A; DE69911993T2; DE69911993D1; AU2483800A; SI1140018T1; JP2002533378A; ATE251448T1; DK1140018T3; EP1140018A1; WO2000038652A1; CA2355618A1; CN1158068C; IL143706A; AU769610B2; EP1140018B1; HUP0104756A3

Abstract

본 발명은 생물학적 활성제의 서방성 수송을 위해, 생물학적 활성제를 함유한 폴리올/높은 점성을 갖는 오일 현탁액으로 이루어진 제제에 관한 것이다. 서술한 단백질/글리세롤/오일 현탁액은 적어도 1 주일 까지 단백질(예를들어, G-CSF)의 서방성을 나타낸다.

Description

단백질의 서방성 수송을 위한 폴리올/오일 현탁액을 포함하는 제약학적 조성물 및 그것의 제조방법 {PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING POLYOL/OIL SUSPENSIONS FOR THE SUSTAINED RELEASE OF PROTEINS AND PROCESS FOR PREPARING THEREOF}

본 발명은 생물학적 활성제(biologically active agent ; BAA)의 서방성 수송을 위해, 생물학적 활성제를 함유한 폴리올/높은 점성을 갖는 오일 현탁액을 포함하는 제약학적 조성물 및 그것의 제조방법에 관한 것이다.

최근에 유전자 공학 기술 및 세포 공학 기술 분야에서의 발달로 인해, 제약학적으로 사용할 경우 생체내에서 다양한 약리학적 활동을 나타내는 것으로 알려진 단백질을 대량으로 생산할 수 있게 되었다. 그러한 제약학적 단백질로는 에리트로포이에틴(EPO), 신규한 적혈구생성 자극 단백질(NESP), 과립구 군체-자극 인자(G-CSF), 인터페론(알파, 베타, 감마, 칸센서스), 종양 괴사 인자 결합 단백질(TNFbp), 인터루킨-1 수용체 길항물질(IL-lra), 뇌-유래 신경영양성 인자(BDNF), 케라티노사이트 성장 인자(KGF), 간세포 인자(SCF), 혈소판생성세포 성장 분화 인자(MGDF), 오스테오프로테게린(OPG), 신경교세포주 유래 신경영양성 인자(GDNF), 소마토트로핀 및 비만 단백질(OB 단백질)이 포함된다. OB 단백질은 본원에서 언급한 렙틴일 수 있다.

제약학적 단백질로 치료하는 다수의 질병이나 증상에 있어서, 가장 효과적인 치료 효과를 얻기 위해서는 지속적으로 단백질 수준을 유지하는 것이 필요하다. 그러나, 대부분의 단백질 약물은 일반적으로 그것의 생물학적 반감기가 짧기 때문에 자주 투여해 주어야 한다. 이렇게 반복적으로 주사하게 되면 신체내 약물 수준이 계속 변하게 되어 차이가 생기고, 환자에게 신체적으로나 금전적으로 상당한 부담이 된다. 다수의 증상이 약물의 수준 조절에 대해 민감하게 완화되므로, 장기간 동안 일정하게 방출시킬 수 있도록 의약을 조절 방출시킬 필요가 있다. 이러한 서방성 약제는 활성 성분의 혈액내 수준을 조절하므로 환자에게 보다 높은 안전성, 환자의 편의 및 순응 뿐만 아니라 증진된 예방학적, 치료학적 또는 진단학적 효과를 제공한다. 또한 이러한 서방성 조성물은 적은 양을 투여하므로 단백질의 생산 비용이 저렴해진다. 그러나, 대부분의 단백질의 불안정성(예를 들어, 열, 유기용매 등에 노출시 생활성도의 변성 및 손실)으로 인해 서방성 제제형의 개발과 가치를 크게 제한하고 있다.

서방성 제제형을 향상시키려는 노력으로 활성제를 함유한, 생분해가능한 중합체 및 비-생분해가능한 중합체 [예를 들어, 폴리(락티드-공-글리콜리드)] 미립자의 다양한 이용이 가능해졌으며[예를 들어, Wise 등의 Contraception, 8 : 227 - 234 (1973) ; 및 Hutchinson 등의 Biochem. Soc. Trans., 13 : 520 - 523 (1985) 참조하라], 활성제(예를 들어, 단백질)를 중합체성 중심체내로 혼입할 수 있는 다양한 기술이 공지되었다(예를 들어, 미국 특허 번호 제 4,675,189 호 및 본원에서 인용한 참고문헌을 참조하라). 유감스럽게도, 미립자를 이용한 서방성 장치 중의 일부는 다음과 같은 요소들에 의해 여전히 제한을 받는다 : 저 효율의 포착성(entrapment) ; 활성제의 응집 형성 ; 최소량의 방출 후에 활성제의 높은 초기 파열 ; 및 활성제의 불완전한 방출.

그밖의 다른 약물-부하 중합체성 장치로 오랜기간 동안 다양한 질환의 치료를 연구해 왔으며, 알파 히드록시카르복시산류, 특히 그것의 라세미형과 광학적 활성형인 젖산과 글리콜산에서 유도된 중합체와 그의 혼성 중합체에 또다른 많은 관심이 집중되고 있다. 이러한 중합체는 통상적으로 이용가능하며, 전립선 암 치료시 약 30 일 동안 류프롤라이드 아세테이트를 방출하는, 주사가능한 미립자로 이루어진 FDA-입증된 시스템(예를 들어, the Lupron Depot^TM)에서 사용되었다.

상기 중합체를 사용함과 동시에 나타나는 여러가지 문제점은 다음과 같다 : 매트릭스를 통해 확산되는 특정 고분자의 무능력 ; 약물의 변질 및 분해(예를 들어, 유기용매 사용으로 인한 변성) ; 유기체에 염증유발(예를 들어, 유기용매 사용으로 인한 부작용) ; 낮은 생분해능(예를들면, 다기능성 알콜 또는 연고와 같은 다기능성 카르복시산으로 된 중합체의 중축합 반응 발생) ; 및 저 분해율.

다양한 오일 기저 제제형에 관해 기술하고 있다. 미국 특허 번호 제 2,491,537 호에서 Welch 는 페니실린을 24 시간 동안 방출하기 위한 오일 현탁액(겔화된 식물성 오일) 사용에 관해 서술하고 있다. 미국 특허 번호 제 2,507,193 호에서 Buckwalter 는 5 % 모노스테아르산 알루미늄(AIMS)으로 겔화된 땅콩 오일에서 현탁시킨 프로카인 페니실린을 사용하여 11 일 동안 토끼에게서 방출시키는 것에 관해 서술하고 있다. 미국 특허 번호 제 2,964,448 호에서 Anschel 은 AIMS 로 겔화된 식물성 오일에서 용해된 레락신(relaxin) 현탁액에 관해 서술하고 있다. Anschel 은 약물의 지속기간이 5 - 7 일이라고 보고하였으며, AIMS 를 함유한 현탁액을 열처리함으로써 얻은 장기간 효과(23 일까지)에 관해 서술하고 있다. 미국 특허 번호 제 4,855,134 호에서 Yamahira 등은 겔라틴과 같은 제약학적으로 용인가능하며 생분해가능한 담체와 혼합한 인도메타신 또는 인터페론의 서방성 제제에 관해 서술하고 있다. 미국 특허 번호 제 5,411,951 호에서 Mitchell 은 생체적합한 오일에 존재하는 금속-관련 소마토트로핀 조성물에 관해 서술하고 있으며 그 조성물은 동물에서 소마토트로핀을 지속적으로 방출할 수 있도록 비경구적으로 투여할 수 있다고 기재되어 있다. 미국 특허 번호 제 4,977,140 호에서 Ferguson 등은 우형의 소마토트로핀, 왁스 및 오일을 함유한 서방성 제제형에 관해 서술하고 있다. 제 WO 96/18417 호에서 Reichert 등은 결정성 G-CSF 와 식물성 오일의 혼합물을 포함한 제약학적 조성물에 관해 서술하고 있다.

응집되는 단백질을 사용한 약물의 서방성 체계를 향상시키려는 것에 관한 많은 문헌이 존재한다. 예를 들어, Grodsky 등의 미국 특허 번호 제 4,371,523 호는 인슐린 제제형을 개발하기 위해, 글루탐산 및/또는 아스파르트산과 같은 항-응집제의 사용에 관해 서술하고 있다. Blackshear 등의 미국 특허 번호 제 4,439,181 호에는 수성의 단백질 호르몬 수용액을 약물 수송 체계에 도입하기 전에 글리세롤 또는 다른 폴리올과 상기 수용액의 혼합에 관해 서술하고 있다. Wigness 등의 PCT 공개 제 WO 85/02118 호에는 약물 수송 체계내에서 단백질의 침전을 예방하기 위해 글리세롤 사용에 관해 서술하고 있으며 ; Azain 등의 EP 공개 제 0 374 120 A2 호에는 무엇보다도 안정한 폴리올을 사용한 안정한 소마토트로핀 조성물에 관해 기술하고 있다.

상기 기술된 과정에서도 진보된 점이 있지만, 임상 적용시 좀 더 다양하며 효과적인 서방성을 제공하는 제약학적 제제형을 개발해야 할 필요가 있다. 수 많은 재조합 단백질이나 천연 단백질은 오랜 기간 동안 일정하게 방출되는 장점이 있으므로 보다 효과적인 임상 결과를 제공한다.

인체 재조합 G-CSF 는 호중구, 감염 방어에 사용되는 백혈구 세포형을 선택적으로 자극한다. 일반적으로, Filgrastim^?, 재조합 G-CSF 는 치료학적 용도로 이용 가능하다. 다양한 조건하에서 G-CSF 의 구조는 광범위하게 연구되었다 ; Lu 등의 J. Biol. Chem. Vol. 267, 8770 - 8777 (1992) 참조.

G-CSF 는 불안정하며 온도, 습도, 산소 및 자외선과 같은 환경 인자에 쉽게 영향을 받는다. 그리고 그것의 소수성 특징, 장기간 저장시 이량체 형성 및 고도로 응집체가 형성되기 때문에 G-CSF 는 제형화하기 어렵다. G-CSF 는 특히, 중성의 pH, 높은 염 농도 (elevated salt) 및 증가된 온도(즉, 생리학적 혈청 상태)에서 아주 쉽게 응집되는 것으로 밝혀졌다. 이러한 불안정성은 여러 문제가 있는 통상적인 수송계에 의해 서방성(일주일 또는 그 보다 긴 기간)을 야기하지만, 사실상, 상기 수송계는 일반적으로 기껏해야 몇 일 동안의 방출만을 제공한다.

G-CSF 를 함유한 제제를 생산하는 본 발명의 목적은 G-CSF 의 서방성을 제공하는 것이다. G-CSF 를 함유한 글리세롤/오일 현탁액을 이용하여 상기 제제를 제조하였으며, 중요하게도, 이러한 G-CSF/글리세롤/오일 현탁액을 이용한 제약학적 조성물은 증가된 단백질 안정성 및 효능과 함께 증가된 생체내이용효율, 단백질 보호, 감소된 분해 및 서방성을 제공할 수 있다. 중요하게도, 본 발명의 제약학적 조성물은 예방학적, 치료학적 또는 진단학적으로 유효한 결과에 적합한 재조합 단백질의 조절 방출에 관한 단순하고 신속하며 저렴한 방법을 제공한다.

발명의 요약

본 발명은 생물학적 활성제를 함유한, 안정하며 지속적으로 약물을 방출하는 주사가능한 현탁액으로 이루어진 제제에 관한 것이다. 본 발명은 G-CSF 분말을 글리세롤에서 현탁한 경우에 안정화되며 그 현탁액을 저 비율의 모노스테아르산 알루미늄 또는 왁스를 포함하는 참기름과 같은 높은 점성을 갖는 오일에서 더 현탁한 경우에 안정화를 유지하며, 그로 인해 안정하며 지속적으로 약물을 방출하는 주사가능한 제제를 제공하는 것으로 밝혀졌다. 중요하게도, 본원에서 서술한 방법은 G-CSF 뿐만 아니라 다른 단백질(또는 그의 유사체)에도 광범위하게 적용할 수 있다.

첫 번째 실시형태에서, 본 발명은 폴리올/높은 점성을 갖는 오일 현탁액내로 혼입된 생물학적 활성제(BAA)의 유효량을 포함하는 제약학적 조성물을 제공한다. 여기에서, 생물학적 활성제는 분말 또는 수용액 형태이며 상기 현탁액은 생물학적 활성제의 서방성을 제공한다.

다른 실시형태에서, 본 발명은 온혈 동물에게 BAA/글리세롤/오일 현탁액을 비경구적으로 투여하는 방법을 제공하며, 여기에서 현탁액은 피하내 또는 근육내로 투여하고 생물학적 활성제는 1 주일 또는 그 이상의 기간 동안 조절된 속도로 현탁액에서 방출된다.

본 발명은 또한 상기와 같이 BAA/폴리올/오일 현탁액으로 이루어진 주사가능한 서방성 제약학적 조성물의 제조방법에 관한 것이다. 주요한 실시형태는 다음을 포함한다 : (a) 폴리올에 BAA 를 현탁하여 BAA/폴리올 현탁액 형성 ; 및 (b) 상기 BAA/폴리올 현탁액을 높은 점성을 갖는 오일 또는 왁스를 포함하는 혼합물에 현탁하여 BAA/폴리올/오일 현탁액 형성.

본 발명은 또한 상기 제제형을 포함한 미리 충진된 주사기에 관한 것이다.

본 발명은 본원에서 서술한 안정하며 지속적으로 약물을 방출하는 주사가능한 제제를 이용하여 개체를 치료하는 방법에 관한 것이다.

본원에서 사용한 다음 용어들은 하기의 의미를 가질 것이다 :

"생분해가능한" 이란, 폴리올/오일 담체가 소형의 비-독성 성분을 형성하기 위해 부식되거나 분해되거나 흡수되거나 생체내 물질대사가 되는 것을 의미한다.

"생체적합성" 이란, 오일과 그것의 증점제(thickener) 및 그외의 부형제가 폴리펩티드 또는 치료받는 인체 상에서 과도한 역효과를 갖지 않는 것을 의미한다.

"비경구적 투여" 란, 예를 들어 피하, 근육내, 초내, 안와내, 관절내, 폐, 코, 직장 및 귀를 포함하는 소화관 이외의 투여 경로를 의미한다.

본원에서 사용한 바와 같이, 재조합 단백질이나 천연 단백질(인체 또는 동물)에 관계된 생물학적 활성제는 예방, 치료 또는 진단시 유용하다. 생물학적 활성제는 천연, 합성, 반-합성 제제 또는 유도체일 수 있다. 또한, 본 발명의 생물학적 활성제는 탄수화물과 같은 수용성 부가물(예, 덱스트란)과 복합되거나 폴리에틸렌글리콜화될 수 있다. 다양한 생물학적 활성제가 사용될 수 있는데 이러한 것들은 다음을 포함하지만 그것으로 한정되지는 않는다 : 호르몬, 시토킨, 조혈 인자, 성장 인자, 항비만 인자, 영양성 인자, 항-염증성 인자 및 효소(유용한 생물학적 활성제의 부가적인 예에 대한 미국 특허 번호 제 4,695,463 호 참조). 본 분야의 숙련자는 소형 유기 화합물 또는 유기금속 화합물을 포함하는 본 발명의 조성물을 고려하여 바람직한 생물학적 활성제를 쉽게 선택할 수 있을 것이다.

이러한 단백질은 다음을 포함하지만 그것으로 한정되지는 않는다 : 과립구-군체 자극 인자(G-CSF)(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 미국 특허 번호 제 4,810,643 호, 제 4,999,291 호, 제 5,581,476 호, 제 5,582,823 호, 및 PCT 공개 번호 제 94/17185 호 참조), 인터페론(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 미국 특허 번호 제 5,372,808 호, 제 5,541,293 호, 제 4,897,471 호 및 제 4,695,623 호 참조), 인터루킨(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 미국 특허 번호 제 5,075,222 호 참조), 에리트로포이에틴(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 미국 특허 번호 제 4,703,008 호, 제 5,441,868 호, 제 5,618,698 호, 제 5,547,933 호 및 제 5,621,080 호 참조), 간세포 인자(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 PCT 공개 번호 제 91/05795 호, 제 92/17505 호 및 제 95/17206 호 참조), 오스테오프로테게린(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 PCT 공개 번호 제 97/23614 호 참조), 신규한 적혈구생성 자극 단백질(NESP)(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 PCT 공개 번호 제 94/09257 호 참조) 및 렙틴(OB 단백질).

상기 기술한 G-CSF 를 사용하는 하기 실시예는 조혈 장애를 치료하는데 사용되는 치료 단백질을 제공한다. 일반적으로, 본 발명의 실시에 유용한 G-CSF 는 포유동물 유기체로부터 분리된 형태이거나 ; 또는 대안적으로, 화학적 합성 과정의 산물, 또는 게놈 클로닝이나 cDNA 클로닝에 의하거나 DNA 합성에 의해 수득한 외인성 DNA 서열의 원핵 숙주 발현이나 진핵 숙주 발현 산물일 것이다. 적절한 원핵 숙주는 다양한 박테리아(예, E. coli)를 포함하고 ; 적절한 진핵 숙주는 효모(예, 에스. 세레비지에 : S. cerevisiae) 및 포유동물 세포(예, 차이니즈 햄스터 난소 세포, 원숭이 세포)를 포함한다. 사용되는 숙주에 따라 G-CSF 발현 산물은 포유동물이나 다른 진핵 탄수화물과 글리코실화되거나, 글리코실화되지 않을 수 있다. 또한 G-CSF 발현 산물은 개시 메티오닌 아미노산 잔기(위치 -1)를 포함할 수 있다. 재조합 G-CSF, 특히 E. coli 유도된 G-CSF 가 다른 것들 중에서 상업적으로 가장 실용적이고 바람직하긴 하지만, G-CSF 의 특정 형태 및 모든 형태를 사용할 수 있을 것으로 본 발명은 기대한다.

특정한 G-CSF 유사체는 생물학적으로 기능적인 것으로 보고되어 왔으며, 또한 하나 또는 그 이상의 폴리에틸렌 글리콜 분자의 첨가에 의해 화학적으로 변형될 수 있다. G-CSF 유사체는 미국 특허 번호 제 4,810,643 호에 기술되어 있다. 생물학적 활성을 갖는 것으로 보고된 다른 G-CSF 유사체의 예는 제 AU-A-76380/91 호, 제 EP 0 459 630 호, 제 EP 0 272 703 호, 제 EP 0 473 268 호 및 제 EP 0 335 423 호에 기술되어 있으나, 각각의 유사체 활성에 대하여 묘사되지는 않았다. 또한 제 AU-A-10948/92 호, PCT 제 94/00913 호 및 제 EP 0 243 153 호를 참조하라. 비-인체 포유동물 치료시에, 물론 원한다면 재조합 마우스, 소, 개 등과 같은 재조합 비-인체 G-CSF 를 사용할 것이다. 예를 들어, PCT 제 WO 9105798 호 및 PCT 제 WO 8910932 호를 참조하라.

본 발명에 사용된 G-CSF 의 형태는, 상기에 기술되어 있고 그 전부를 본원에서 참고문헌으로 인용한 PCT 공개 번호 제 94/17185 호에 기술된 것에서 선택하였다. 성숙한 재조합 메티오닌 인체 G-CSF 에 대한 174 개 아미노산 서열은 SEQ ID NO : 1 에 나타내었으며, 여기에서 성숙한 단백질의 첫번째 아미노산은 트레오닌(T)(위치 1)이고 메티오닌 잔기는 위치 -1 에 위치한다(아래 서열에는 포함되지 않음).

그러나, 본 발명의 어떤 G-CSF 부분에서는 위치 -1 의 메티오닌 잔기가 없을 수 있다.

삭제

또한 산성, 전하, 소수성, 극성, 크기 또는 본 분야의 숙련자에게 공지된 다른 특징에 준하여 "보존적" 인 아미노산 치환을 지니는 상기 기술한 바와 같은 단백질도 포함된다. 이러한 치환은 하기 표 1 에 기술하였다. 본원에서 참고문헌으로 인용한 Creighton, Proteins, passim (W.H. Freeman 및 Company, N.Y., 1984) ; Ford 등의, Protein Expression 및 Purification 2 : 95 - 107 (1991) 을 참조하라.

또한 생물학적 활성제는 다음을 포함하지만 그것으로 한정되지는 않는다 : 인슐린, 가스트린, 프로락틴, 부신피질자극호르몬(ACTH), 갑상선자극호르몬(TSH), 황체형성호르몬(LH), 난포자극호르몬(FSH), 태반성 성선자극호르몬(HCG), 모틸린, 인터페론(알파, 베타, 감마), 인터루킨(IL-1 내지 IL-12), 종양 괴사 인자(TNF), 종양 괴사 인자-결합 단백질(TNF-bp), 뇌 유래 신경영양성 인자(BDNF), 신경교세포 유래 신경영양성 인자(GDNF), 신경영양성 인자 3(NT3), 섬유아세포 성장 인자(FGF), 신경영양성 성장 인자(NGF), 인슐린-유사 성장 인자(IGF), 대식세포 군체 자극 인자(M-CSF), 과립구 대식세포 군체 자극 인자(GM-CSF), 거대핵세포 유래 성장 인자(MDGF), 케라티노사이트 성장 인자(KGF), 트롬보포이에틴, 혈소판-유래 성장 인자 (PDGF), 군체 자극 성장 인자(CSF), 골 형태형성 단백질(BMP), 초과산화물 디스무타제(SOD), 조직 플라스미노겐 활성제(TPA), 우로키나제, 소마토트로핀, 스트렙토키나제 및 칼리크레인. 본원에서 사용한 단백질이란 용어는 펩티드, 폴리펩티드, 칸센서스(consensus) 분자, 그것의 유사체, 유도체 또는 조합물을 포함한다.

본 발명의 서방성 조성물을 제조하기 위해 사용된 BAA 는 용액 또는 분말 형태일 수 있으며, 먼저 폴리올(예, 글리세롤)과 혼합한다. BAA 는 글리세롤내의 분말 형태일 수 있거나, 글리세롤의 수용액내에 용해되거나 현탁될 수 있다. 현탁액내 BAA 를 장기간 저장하는 동안 BAA 를 안정화시키기에(예, 응집 예방) 충분한 양으로 폴리올을 첨가한다.

사용할 수 있는 다른 생체적합성의 C-4 내지 C-19 폴리올은 다음을 포함하지만 그것으로 한정되지는 않는다 : C-4 : 에리트리톨 ; C-5 : 아라비노스, 자일로스, 리보스 ; C-6 : 이노시톨, 프럭토스, 갈락토스, 글루코스, 만노스 ; C-12 : 말토스 및 수크로스. 만일 고체 형태의 폴리올을 사용한다면, 먼저 수성 용액이나 수성 유기 용액으로 제조하거나, 또는 열이나 압력으로 유체화한 다음 BAA 와 혼합할 것이다. 사용하는 폴리올은 바람직하게 중량의 5 % - 90 %, 더 바람직하게는 중량의 10 % - 50 %, 및 가장 바람직하게는 중량의 10 % - 30 % 범위일 수 있다. G-CSF 가 생물학적 활성제이고 글리세롤이 폴리올인 바람직한 실시형태에 있어서, 20 % 수성 글리세롤이 사용된다. 또다른 바람직한 실시형태에 있어서(물이 거의 없거나 전혀 존재하지 않음), 20 % 글리세롤은 제제형의 총 부피에 관한 것이다.

본 발명에 사용하는 오일은 낮은 산성이며 필수적으로 산패되지 않는 생체적합성을 지닌다. 이러한 오일은 예를 들어, 다음 중에서 선택된다 : 참기름, 캐놀라, 사프란, 피마자유, 면실유, 올리브유, 땅콩 기름, 해바라기씨 기름, 올레산 에틸, α-토코페롤과 그것의 유도체를 포함하는 비타민 E 및 미글리올 812.

또한 글리세롤/오일 현탁액은 "증점제" 또는 "겔화제" 를 함유하는데, 이들은 현탁액의 수화를 지연시키고, 더 높은 점성도 또는 점탄성의 오일 바디를 제공함으로써, 투여 후 현탁액으로부터의 BAA 방출율을 감소시키고 또한 BAA 의 안정화를 증가시키며, 전체적인 현탁액의 물리적 안정성을 증가(즉, 상의 분리를 방지함)시키는 것을 돕는다. 이러한 제제는 유기산의 다가 금속염, 예를 들어, 라우르산, 팔미트산, 스테아르산 등의 알루미늄염, 아연염, 마그네슘염 또는 칼슘염, 및 왁스 및 고 점성도 오일과 같은 유성 물질, 및 중합체 및 염과 같은 유기 또는 무기 충전제를 포함한다. 모노스테아르산 알루미늄, 디스테아르산 알루미늄 및 백랍(white wax)이 특히 바람직한 제제이다. 상기 제제들은 보통 0.1 % - 99 % 사이의 농도(오일의 중량에 기초하여), 더 일반적으로는 0.5 % - 90 %, 및 금속염의 경우 훨씬 더 일반적으로 0.5 % - 20 % 로 존재한다. 현탁액이 주사기를 통한 주사에 더이상 유용하지 않는 경우, 제제가 현탁액의 점성도를 증가시키지 않는 것을 확실하게 하는데 있어서 이런 비율은 중요하다. 고 점성의 제제형에 있어서는 임플란트도 사용된다.

글리세롤/오일 현탁액은 글리세롤/오일 현탁액을 안정화하고 분리를 방지하는 계면활성제 또는 유화제를 더 포함할 수 있다. 이러한 계면활성제 또는 유화제는 이온성 또는 비이온성일 수 있으며, 예를 들어 다음 중에서 선택할 수 있다 : 스팬 40, 스팬 80, Pluronics^?? 및 에그 레시틴, 또는 그들의 혼합물, 바람직하게는 1 - 10 의 HLB(친수성-친유성 밸런스 : hydrophile-lipophile balance), 더 바람직하게는 2 - 8, 및 훨씬 더 바람직하게는 4 - 8 의 HLB 를 지니는 것. 계면활성제는 또한 오일을 생물학적 환경으로 흩뜨리는 것을 도와줄 수 있다. 계면활성제는 보통 오일 중량의 0.1 % - 50 % 로 존재하며, 바람직하게는 0.2 % - 20 %, 및 더 바람직하게는 0.5 % - 10 % 이다. 수화된 식물성 오일과 같은 특정 물질은 글리세롤 현탁액의 점증제 및 안정화제 둘 다의 기능을 할 수 있다.

BAA/글리세롤 현탁액을 형성하기 위해 실질적으로 순수한 글리세롤 용액에 생물학적 활성제(분말화된 형태)를 현탁시킨 다음, 오일만 포함하는 용액 또는 오일에 현탁되거나 용해된 "겔화제" 를 함유하는 오일을 포함하는 용액에 상기 BAA/글리세롤 현탁액을 현탁시킴으로써 본 발명의 BAA/글리세롤/오일 현탁액을 제조할 수 있다. 오일에 겔화제가 완전히 용해되도록 하기 위해 먼저 오일(겔화제를 함유함)에 열을 가하는 것이 필요하다(혼합하면서). 또한 수성 글리세롤 용액(계면활성제를 함유하는 것이 바람직함)에 BAA 를 용해시키거나 현탁시킨 다음 오일(계면활성제를 함유하는 것이 바람직함)에 용액을 혼합함으로써 BAA 제제형을 제조할 수 있다[여기에서, 수성 글리세롤은 안정한 pH(예를 들어, G-CSF 의 경우는 산성)로 완충된 것이 바람직하다]. 수성 상(aqueous phase)은 보통 내지 높은 HLB 의 계면활성제를 함유하는 것이 바람직하고 오일 상(oil phase)은 낮은 HLB 의 계면활성제를 함유하는 것이 바람직하다. 본 발명에 있어서, 보통 내지 높은 HLB 는 약 8 이상이고, 낮은 HLB 는 약 8 이하를 말한다.

일반적으로, 본 발명의 제약학적 조성물은 생물학적 활성제 또는 유도체 산물(예, 침전물)의 유효량과 함께 제약학적으로 용인가능한 희석제, 방부제, 용해제, 유화제, 항-산화제(예, 아스코르브산 및 비타민 E), 보조제 및/또는 투여시 필요한 담체를 포함하는 것으로 이해된다(본원에서 참고문헌으로 인용한 PCT 제 97/01331 호 참조). 본 분야의 숙련자는 투여 경로, 원하는 투여량 및 방출 기간에 따라 바람직한 생물학적 활성제에 대한 최적의 제약학적 제제형을 결정할 수 있을 것이다. 전형적인 제약학적 조성물은 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Co., 18th Ed., Easton, PA, pgs. 1435 - 1712 (1990) 에 기술되어 있다. 본 발명의 제약학적 조성물은 특히 비경구적 투여에 관한 것이다(예를 들어, 근육내 주사, 피하 주사 또는 복강내 주사에 의한 비경구적 투여).

본 발명의 조성물의 치료학적 용도는 사용되는 생물학적 활성제에 따라 결정된다. 본 분야의 숙련자들은 바람직한 생물학적 활성제를 본 발명에서 의도하고자 하는 치료학적 용도에 적합하도록 수정할 수 있을 것이다. 상기 제제의 치료학적 용도는 도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 하기의 공개문헌에 상세히 설명되어 있다. 치료학적 용도는 다음을 포함하지만 다음과 같은 단백질의 용도로 제한되는 것은 아니다 : 과립구-군체 자극 인자(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 미국 특허 번호 제 4,999,291 호, 제 5,581,476 호, 제 5,582,823 호, 제 4,810,643 호 및 PCT 공개 번호 제 94/17185 호 참조), 인터페론(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 미국 특허 번호 제 5,372,808 호, 제 5,541,293 호 참조), 인터루킨(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 미국 특허 번호 제 5,075,222 호 참조), 에리트로포이에틴(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 미국 특허 번호 제 4,703,008 호, 제 5,441,868 호, 제 5,618,698 호, 제 5,547,933 호 및 제 5,621,080 호 참조), 간세포 인자(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 PCT 공개 번호 제 91/05795 호, 제 92/17505 호 및 제 95/17206 호 참조), OB 단백질(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 PCT 공개 번호 제 96/40912 호, 제 96/05309 호, 제 97/00128 호, 제 97/01010 호 및 제 97/06816 호 참조), 신규한 적혈구생성 자극 단백질(도면을 포함하여 본원에서 참고문헌으로 인용한 PCT 공개 번호 제 94/09257 호 참조) 및 소 분자 약물. 또한, 본 발명의 조성물은 생물학적 활성제로 치료하고자 하는 증상을 치료하거나 개선하기 위해 하나 또는 그 이상의 약제를 제조하는데 사용될 수 있다.

G-CSF 는 본질적으로 염증성 장 질환을 치료하는데 효과적인 것으로 알려져왔다. 예를 들어, 크론병 및 장피부루(enterocutaneous fistulas)를 앓고 있는 청년기 소년의 경우 표준 치료가 실패한 이후 G-CSF (필그라스팀 : filgrastim)의 치료에는 반응을 보이는 것으로 보고되었다 ; Vaughn 및 Drumm, New England Journal of Medicine, 340 (3) : 239 - 240 (1999). 또한 G-CSF 로 장기간 고 투여량으로 치료하면 대장염에서 항-염증성 효과를 나타내는 것으로도 보고되었다 ; Hommes 등의 Clin Exp. Immunol., 106 : 529 - 533 (1996). 따라서 본 발명의 G-CSF-함유 현탁액이 염증성 장 질환의 치료에도 효과적일 것으로 기대된다.

본 분야의 숙련자는 조성물을 투여하고 원하는 치료 효과를 관찰함으로써 효과적인 투여량을 확인할 수 있을 것이다. G-CSF 의 경우에, 바람직하게는 약 0.01 ㎍ - 10 ㎎ G-CSF 성분/체중 ㎏/일의 현탁액 제제형으로 바람직한 치료 효과를 수득할 것이다. 일정 시간 동안 진단적 도구를 사용하여 효과적인 투여량을 결정할 수 있다. 예를 들어, G-CSF 단백질의 내인성 수준을 측정하기 위해 혈액 (또는 혈장이나 혈청)내 G-CSF 의 양을 측정하는 진단이 가장 먼저 사용된다. 이러한 진단적 도구는 항체 샌드위치 분석과 같은 항체 분석의 형태일 수 있다. 내인성 G-CSF 단백질의 양을 먼저 정량하고, 기준선을 측정한다. 내생 및 외생의 G-CSF 단백질 성분(즉, 자가 생성되거나 투여된, 신체내에서 발견되는 단백질, 유사체 또는 유도체)의 양이 치료 과정 중에 유지되도록 치료량을 결정한다. 따라서 투여량은 치료 경과에 따라 달라진다. 예를 들어 초기에서 부터 치료 효과가 나타날 때까지는 상대적으로 많은 양을 투여하고 치료 효과를 유지하기 위해서는 적은 양을 투여한다. 택일적으로, 치료 과정 중에 호중구의 양을 측정하고 모니터한다. 투여 빈도를 가장 적게 하여 원하는 호중구 수를 유지할 수 있도록 투여량을 조절한다.

하기 실시예는 본 발명을 보다 상세히 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범주를 제한하고자 하는 것은 아니다.

실시예 1

본 실시예는 분무건조법에 의해 G-CSF 분말을 제조하는 것에 관하여 기술하고 있다.

G-CSF 용액 (∼2.75 ㎎/㎖, 0.58 mM HCl 내에 5 ％ 소르비톨 함유) 을 투석 튜브(스펙트럼 라보라토리 인코포레이티드에서 입수, 편평하고 가로 18 ± 2 ㎜, 직경 11.5 ㎜, 1.0 ㎖/㎝)에 담고 4 ℃ 에서 24 시간 동안 물 (pH 3.25) 에 대하여 투석하였다. 투석 중에, 물을 4 회 갈아준다. 투석된 G-CSF 용액(∼1100 ㎖)을 한외여과 용기에 담은 다음 용액에 대기압을 가하였다. 두 시간 후에, 약 300 ㎖ 의 농축된 G-CSF 용액을 모아 0.2 ㎜ 필터로 여과하였다. G-CSF 용액의 최종 농도는 9.134 ㎎/㎖ 이다. 분무건조법은 부치 190 미니 분무건조기 (브링크만 인스티튜트에서 입수, BUCHI 190 Mini Spray Dryer)로 실시하였고, 분무건조기의 모든 유리 기구는 우선 탈염수로 세척한 다음 멸균수로 세척하고 다시 에탄올로 세척하였다. 분무건조법은 450 노르말 리터/시의 유입 기류로 실시하였고, G-CSF 용액의 공급량은 1.0 ㎖/분이다. G-CSF 분말(2.640 g, 82.7 ％ G-CSF) 은 290 mL 의 G-CSF 출발 용액에서 수득하였다.

실시예 2

본 실시예는 G-CSF/글리세롤 현탁액의 제조 및 G-CSF/글리세롤/오일 제제형을 제조하기 위한 G-CSF/글리세롤 현탁액의 용도에 관하여 기술하고 있다.

1 단계. 우선 유발에 2.401 mL 의 글리세롤과 105.4 ㎎ 의 분무건조된 G-CSF 분말(실시예 1 에 기재되어 있는 바와 같이 제조함)을 담아 굵은 입자가 보이지 않을 때까지 혼합물을 분쇄하여 G-CSF/글리세롤 현탁액을 제조하였다.

2 단계. 125 mL 의 엘렌마이어 플라스크에 45.67 g 의 참기름 (크로다, 인코포레이티드에서 구입) 및 1.91 g 의 모노스테아르산 알루미늄 (AIMS)(플루카)을 담아 실온에서 20 분간 자석 교반기로 혼합한 다음 질소 대기하에서 교반하면서 165 ℃ - 170 ℃ 로 가열하였다. 2 시간 동안 계속적으로 교반한 다음 혼합물의 온도를 실온까지 식혀 겔과 유사하게 높은 점성을 갖는 유광(乳光)의 오일(3 ％ AIMS)을 생성시켰다.

3 단계. 1 mL 의 G-CSF/글리세롤 현탁액과 4 mL 의 높은 점성을 갖는 오일을 유발에 담고 잘 혼합될 때까지 함께 분쇄하였다. 현탁액(G-CSF/20 ％ 글리세롤/3 ％ AIMS/오일)은 사용할 때까지 4 ℃ 에서 멸균 시료 바이알에 저장하였다.

실시예 3

본 실시예는 L-아스코르브산과 계면활성제를 부가적으로 함유하는 G-CSF/글리세롤-함유 점성 오일 현탁액의 제조에 관하여 기술하고 있다.

1 mL 의 글리세롤 용액에 L-아스코르브산(50 ㎎)을 용해시키고 혼합물을 가열하면서 교반하였다. 실온까지 식힌 후, 아스코르브산/글리세롤 용액을 G-CSF 분말(45.3 ㎎) 및 스팬 80 (250 mL)과 혼합하였다.

상기한 바와 같이 제조한 3.75 mL 의 높은 점성을 갖는 오일(3％ AIMS)을 G-CSF/아스코르브산/글리세롤 혼합물에 가하여 함께 분쇄함으로써 점성 오일 현탁액(G-CSF/20 ％ 글리세롤 ＋ 아스코르브산/스팬 80/3 ％ AIMS/오일)을 수득하였다.

실시예 4

본 실시예는 7 ％ 백랍으로 점성을 높인 오일을 제조하는 것에 관하여 기술하고 있다.

백랍(4.49 g)과 참기름(59.65 g) 혼합물을 질소 대기하에서 2 시간 동안 160 ℃로 가열하여(실시예 2 의 2 단계에 기술한 방법을 이용하여) 높은 점성을 갖는 7 ％ 왁스/오일을 수득하였다.

실시예 5

본 실시예는 증점제로서 7 ％ 왁스를 사용하여 상이한 농도의 글리세롤을 갖는 다양한 G-CSF-함유 오일 제제형을 제조하는 것에 관하여 기술하고 있다.

제 조 1 : G-CSF 분말(27.6㎎)과 글리세롤(600 ㎕)를 유발에 혼합하여 굵은 입자가 보이지 않을 때까지 분쇄한다. 그런 다음 실시예 4 에 기재되어 있는 바와 같이 제조한 높은 점성을 갖는 7 ％ 왁스/오일 2.4 mL 를 GCSF/글리세롤 현탁액에 가하였다. 혼합물을 유발과 막자로 분쇄하여 점성 오일 제제형(G-CSF/20 ％ 글리세롤/7 ％ 왁스)을 수득하였다.

제 조 2 : GCSF 분말(45.3 ㎎)을 1.00 ㎖ 의 아스코르브산/글리세롤 용액 (실시예 3 에 기재된 바와 같이 제조) 과 혼합한 다음 4.0 mL 의 점성이 높은 7 ％ 왁스/오일을 가하였다. 결과적으로 생성된 혼합물을 분쇄하여 점성 오일 제제형(G-CSF/20 ％ 글리세롤 ＋ 아스코르브산/7 ％ 왁스)을 수득하였다.

제 조 3 : G-CSF 분말(27.3 ㎎)과 글리세롤(450 ㎕)을 유발에서 혼합하고 굵은 입자가 보이지 않을 때까지 분쇄하였다. 그런 다음 실시예 4 에 기술되어 있는 바와 같이 제조한 점성이 높은 7 ％ 왁스/오일 2.55 mL 를 GCSF/글리세롤 현탁액에 가하였다. 혼합물을 유발과 막자로 분쇄하여 점성 오일 제제형(G-CSF/15 ％ 글리세롤/7 ％ 왁스)을 수득하였다.

제 조 4 : G-CSF 분말(27.5 ㎎)과 글리세롤(750 ㎕)을 유발에 혼합한 다음 굵은 입자가 보이지 않을 때까지 분쇄하였다. 그런 다음 실시예 4 에 기술한 바와 같이 제조한 점성이 높은 7 ％ 왁스/오일 2.25 mL 를 GCSF/글리세롤 현탁액에 가하였다. 혼합물을 유발과 막자로 분쇄하여 점성 오일 제제형(G-CSF/25 ％ 글리세롤/7 ％ 왁스)을 수득하였다.

실시예 6

본 실시예는 10 ％ 백랍으로 점성을 높인 G-CSF/글리세롤 오일의 제조에 관하여 기술하고 있다.

백랍(6.5 g)과 참기름(58.5 g) 혼합물을 질소 대기하에서 160 ℃ 로 2 시간 동안 가열함으로써 높은 점성을 갖는 10 ％ 왁스/오일을 제조하였다(실시예 2 의 2 단계에 기술되어 있는 방법으로 제조).

GCSF 분말(27.4 ㎎)과 글리세롤(600 ㎕)을 함께 혼합한 다음, 2.40 mL 의 높은 점성을 갖는 오일(10 ％ 왁스)을 GCSF/글리세롤 현탁액에 가하였다. 혼합물을 분쇄하여 점성 오일 제제형(G-CSF/20 ％ 글리세롤/10 ％ 왁스)을 수득하였다.

실시예 7

본 실시예는 실시예 2 - 6 에서 제조한 현탁액의 생체내 실험에 관하여 기술하고 있다.

비장절제된 마우스(BDF1)들에게 30 ㎎/㎏ 의 다양한 G-CSF 함유 현탁액을 1 회 투여하거나 여러 대조들을 1회 투여하였다. 마우스들의 혈액은 여러 날에 걸쳐 분석된 것이다. 3 ％ AIMS 오일과 혼합한 G-CSF 분말 (- 글리세롤)(30 ㎎/㎏) ; 글리세롤과 혼합한 G-CSF 분말 (30 ㎎/㎏) ; 물에 용해한 G-CSF 분말 (30 ㎎/㎏) ; 및 1 × PBS 를 대조로 런닝시켰다. 데이타는 하기 표 2 에 요약하였다.

표 2 에 나타나 있는 데이타로 알 수 있는 바와 같이, 폴리올/높은 점성을 갖는 오일 현탁액은 적어도 1 주간의 서방성을 갖는 G-CSF 를 제공할 수 있다. 중요한 것은 G-CSF 는 폴리올이 부가되지 않은 오일에서는 수송될 수 없다는 점에 주목해야 한다는 것이다.

실시예 8

본 실시예는 스테아르산 글리세린으로 점성을 높인 오일의 제조에 관하여 기술하고 있다.

제 조 1 : 트리스테아르산 글리세롤(1.00 g), 모노스테아르산 글리세롤 (4.00 g) 및 참기름(45.00 g)을 병에 담아 질소 대기하에서 160 ℃ 로 2 시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 진탕하면서 실온까지 냉각시켰다. 높은 점성을 갖는 백색 오일을 수득하였다.

제 조 2 : 모노스테아르산 글리세롤(0.80 g)과 참기름(9.20 g)을 병에 담아 질소 대기하에서 160 ℃ 로 2 시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 진탕하면서 실온까지 냉각하였다. 점성이 높은 백색 오일을 수득하였다.

실시예 9

본 실시예는 참기름과 보다 점성이 높은 수소첨가 식물유 혼합물을 사용하여 높은 점성을 갖는 오일의 제조에 관하여 기술하고 있다.

참기름(6.00 mL)과 수소첨가 식물유(34.00 mL)를 병에 담아 혼합물을 질소 대기하에서 2 시간 동안 160 ℃ 로 가열하였다. 혼합물을 실온까지 식힌 후, 높은 점성을 갖는 오일을 수득하였다.

실시예 10

본 실시예는 오일이 참기름과 수소첨가 식물유 혼합물을 함유하고 수소첨가 식물유가 혼합물의 점도를 높이는, 오일 현탁액과 혼합한 G-CSF/글리세롤의 제조에 관하여 기술하고 있다.

제 조 1 : GCSF 분말(10.0 ㎎)과 글리세롤(0.20 mL)을 혼합한 다음 오일 혼합물(수소첨가 오일/참기름 ＝ 5/3, 0.80 mL)을 가하였다. 유발과 막자로 혼합물을 분쇄하여 점성 현탁액 제제형을 수득하였다. 이 제제형을 주사기에 충진하여 주사할 수 있다.

제 조 2 : GCSF 분말(10.3 ㎎)과 글리세롤(0.20 mL)을 혼합한 다음 오일 혼합물(수소첨가 오일/참기름 ＝ 3/17, 0.8 mL)을 가하였다. 혼합물을 유발과 막자로 분쇄하여 점성 현탁액 제제형을 수득하였다. 이 제제형을 주사기에 충진시켜 주사할 수 있다.

실시예 11

본 실시예는 증점제로서 스테아르산, 스테아릴 알콜 및 이들의 배합물±G-CSF/글리세롤을 사용하여 높은 점성을 갖는 오일을 제조하는 것에 관하여 기술하고 있다.

제 조 1 : 스테아르산(1.00 g)과 참기름(9.00 g)을 병에 담아 이 혼합물을 질소 대기하에서 2 시간 동안 160 ℃ 로 가열하였다. 이 혼합물을 진탕하면서 실온까지 식히면 점성이 높은 오일이 수득된다.

제 조 2 : 스테아릴 알콜(1.00 g)과 참기름(9.00 g)을 병에 담아 이 혼합물을 질소 대기하에서 2 시간 동안 160 ℃ 로 가열하였다. 이 혼합물을 진탕하면서 실온까지 식히면 점성이 높은 오일이 수득된다.

제 조 3 : 스테아릴 알콜(0.50 g), 스테아르산(0.50 g) 및 참기름(9.00 g)을 병에 담아 이 혼합물을 질소 대기하에서 160 ℃ 로 2 시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 진탕하면서 실온까지 식히면 점성이 높은 오일이 수득된다.

제 조 4 : G-CSF 분말(9.8 ㎎)과 글리세롤(0.20 mL)을 혼합한 다음 0.80 mL 의 높은 점성을 갖는 오일(10 ％ 스테아릴 알콜)을 가하였다. 혼합물을 10 분간 분쇄하여 1 mL 주사기에 충진하여 주사할 수 있는 오일 제제형을 수득하였다.

제 조 5 : G-CSF 분말(10.3 ㎎)과 글리세롤(0.20 mL)을 혼합한 다음 0.80 mL 의 높은 점성을 갖는 오일(10 ％ 증점제, 스테아릴 알콜/스테아르산 〓 3/1)을 가하였다. 혼합물을 10 분간 분쇄하여 오일 제제형을 수득하였으며, 이 제제형은 1 mL 주사기 내로 충진하여 주사할 수 있다.

실시예 12

본 실시예는 오일 에멀젼 제제형내에 수성 글리세롤을 함유하는 G-CSF 의 제조에 관한 것으로, 이때 G-CSF 는 수성상의 글리세롤과 혼합된다.

수성상은 12.7 ㎎/mL 의 G-CSF, 50 ％ 글리세롤, 1 ％ (w/v) 플루로닉 F68, 10 mM 아세트산염 (pH 4.0) 및 0.44 mM HCl 로 이루어져 있다. 옥수수유와 1 ％ 플루로닉 L101 혼합물은 오일상을 이룬다. 두 상의 혼합물은 50 : 50 및 70 : 30 으로 비어티스 핸디셰어 균질기로 45 초간 균질화하여 각각의 에멀젼 제제형을 수득하였다.

실시예 13

본 실시예는 G-CSF 투여량이 대략 10 ㎎/㎏ 인 것을 제외하고는 실시예 2 와 유사한 방법으로 제조된다. 1 회 투여한 후에 적어도 1 주간 호중구가 상승하였다.

Claims

생체적합성 폴리올/오일 현탁액과 혼합한 생물학적 활성제(BAA)의 유효량을 포함하는 조성물이되, 상기 현탁액은 증점제를 함유하고 이 조성물은 생물학적 활성제의 서방성을 제공하며 상기 BAA 는 단백질인 제약학적 조성물.
제 1 항에 있어서, 생체적합성 폴리올은 글리세롤, 에리트리톨, 아라비노스, 자일로스, 리보스, 이노시톨, 프럭토스, 갈락토스, 말토스 및 수크로스 중에서 선택함을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항에 있어서, 증점제는 유기산의 다가 금속염 ; 왁스 및 고 점성도 오일과 같은 유성 물질 ; 및 중합체 및 염과 같은 유기 또는 무기 충전제 중에서 선택함을 특징으로 하는 조성물.
제 3 항에 있어서, 증점제는 모노스테아르산 알루미늄임을 특징으로 하는 조성물.
제 3 항에 있어서, 증점제는 백랍(white wax)임을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항에 있어서, 오일은 참기름, 피마자유, 면실유, 캐놀라유, 사프란, 올리브유, 땅콩 기름, 해바라기씨 기름, α-토코페롤 및 올레산 에틸 중에서 선택함을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항에 있어서, 생물학적 활성제는 다음 중에서 선택한 것임을 특징으로 하는 조성물 : 인터페론 칸센서스, 에리트로포이에틴, 과립구-군체 자극 인자(GCSF), 간세포 인자(SCF), 렙틴(OB 단백질), 종양 괴사 인자-결합 단백질(TNF-bp), 인터루킨-1 수용체 길항물질(IL-1ra), 뇌 유래 신경 영양성 인자(BDNF), 신경교세포 유래 신경영양성 인자(GDNF), 신경영양성 인자 3 (NT3), 오스테오프로테게린(OPG), 과립구 대식세포 군체 자극 인자(GM-CSF), 거대핵세포 유래 성장 인자(MDGF), 케라티노사이트 성장 인자(KGF), 트롬보포이에틴 및 신규한 적혈구생성 자극 단백질(NESP).
삭제
다음 단계를 포함하는, 제 1 항의 BAA/폴리올/오일 서방성 현탁액의 제약학적 조성물을 제조하는 방법 :

(a) 폴리올에 BAA 를 현탁하여 BAA/폴리올 혼합물을 형성하는 단계 ;

(b) 높은 점성을 갖는 오일을 포함하는 혼합물에 BAA/폴리올 혼합물을 현탁하여 BAA/폴리올/오일 현탁액을 형성하는 단계.
삭제
제 1 항의 제약학적 조성물을 함유하는 미리 충진된 주사기.
제 1 항의 BAA/폴리올/오일 현탁액의 제약학적 조성물을 인체를 제외한 포유동물에게 비경구적으로 투여하는 방법이되, 상기 조성물을 피하내 또는 근육내로 투여하고 생물학적 활성제는 현탁액으로부터 적어도 일주일 동안 조절된 속도로 방출되는 비경구적 투여 방법.