JPS6344532A - 豚のレオウイルス感染症ワクチン - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 この発明は豚のレオウィルス感染症ワクチンに関するも
のである。

〔従来の技術〕

欧米における豚のレオウィルスは、呼吸器または消化管
から１９７０年頃に相次いで分離され、その病原性は初
乳未摂取仔豚などを用いた感染試験などで呼吸器症状を
伴う肺を中心とした病変と下痢を伴う消化管の病変を引
き起こすことが明らかにされた。わが国では過去に豚か
らのレオウィルス分離の報告はなく、この発明の発明者
らが初めてその分離に成功したのであって、１９８４年
新潟県および山形県の二つの農場において、約３カ月齢
の肥育豚群に発核または鼻漏を呈しやや衰弱した豚の鼻
腔拭い液と扁桃とから豚腎初代培養（ＳＫ）細胞に細胞
変性効果を示す因子を分離し、この分離因子の諸性状を
調べた結果レオウィルスと同定したのである。

このような分離レオウィルスを初乳未摂取仔豚に経口ま
たは経鼻接種すると、軽い発核、クシャミ、鼻漏などの
呼吸器症状と、軟便または水様性下痢を呈し、病理組織
学的には鼻粘膜または気管上皮の変性、肺胞上皮の腫大
とマクロファージまたはリンパ球の集籏がみられ、腸管
では上皮細胞の変性とリンパ球またはマクロファージの
集籏が観察されている。

今日まで、わが国において豚からレオウィルスが分離さ
れなかったことから、野外の豚群におけるレオウィルス
感染による被害状況は明らかにされていなかったが、こ
の発明の発明者らは１９７７年以来、いくつかの大規模
養豚場における疾病調査を行なって来た。その結果によ
ると、導入肥育養豚場では肥育素豚の導入後、また−貫
経営養豚場では３〜４力月齢に発核、鼻漏などの呼吸器
病が急増し、その直後にレオウィルスの中和抗体も上昇
する傾向が確認されている。結局、豚におけるこのウィ
ルス感染は、細菌の二次感染と重なって各種症状を伴っ
た呼吸器症状を呈し、元気、食欲の減退を示し、次第に
衰弱して肥育除外または死亡等を招来し、養豚界におけ
るレオウィルス感染による損耗は決して少なくない。１
９７７年以来の保存血清による大規模養豚場におけるこ
の発明の発明者等の抗体調査の結果から、レオウィルス
の中和抗体は養豚場または豚群によって差はあるが、１
〜２力月齢では約２０％の陽性率を示すが、３〜４力月
齢には約５０％にまで上昇し、６〜９力月齢には約９０
％までさらに上昇する傾向が明らかになった。このよう
に、豚のレオウィルス感染症は養豚場の飼育形態の大型
化に伴ってその被害は大きくなる傾向にある。

〔発明ゐ（解決しようとする問題点３ 以上述べたように、豚のレオウィルス感染症によって養
豚場の経営に与える被害が大きくなる傾向にありながら
、従来の技術においてはこの感染症に有効なワクチンが
未開発であるきいう問題点があった。

〔問題点を解決するための手段〕

上記の問題点を解決するために、この発明は啄のレオウ
ィルスを培養細胞で増殖し、不活化した抗原を有効成分
としてワクチンとする手段を採用したものである。以下
その詳細を述べる。

、　まず、豚のレオウィルスはたとえば呼吸器病発症豚
より分離採取したもので、このウィルスをＳＫ細胞（前
記の豚腎初代培養細胞）に接種し、３７℃で５〜８日間
培養し、ウィルス液を採集する。

これに不活化剤たとえばホルマリンを０．１５容量％添
加し２２℃前後で約４８時量感作した後りん酸アルミニ
ウムゲルを２０容量％または親水性油性アジュバントを
５０〜７０容量％添加すればこの発明の豚のレオウィル
ス感染症ワクチンが得られる。

〔実施例〕

レオウィルスＮＮＦＯγ４３株を培養５日目のＳＫ細胞
に接種し、３７℃で７日間培養した後採取した液に、ホ
ルマリンを０．１５容量％添加し、２２・Ｃで４８時間
感作してウィルスを不活化した。これにりん酸アルミニ
ウムゲルを２０容量％添加した不活化ワクチンと、親水
性油性アジュバントを７０容量％添加した不活化ワクチ
ンとを調製した。

得られた２種類の不活化ワクチンを豚の皮下または筋肉
内に２ｍｌ　ずつ２週間隔で２回注射すると、２回注射
後２週目には８〜１２８倍の中和抗体を産生じ、その免
疫は６力月間持続し、ワクチンを２〜５　’ｃの冷暗所
に１２力月間保存しても効力の低下は見られなかった。

なお、これらワクチンの安全性および有効性については
つぎのような結果を得た。すなわち、安全性： 中和抗体陰性の約２．５力月齢の豚１４頭を用いて第１
表に示すように、りん酸アルミニウムゲル添加ワクチン
と親水性油性アジュバント添加ワクチンとをそれぞれ４
頭宛皮下と筋肉内とに、２週第１表 備考二ワクチン注射量は２ｍｌ、２週間隔２回間隔で２
回注射し、２頭は無処置対照として同居させた。接種時
の反応や臨床症状を観察したが、注射豚も対照豚も異常
は全く認められず、また２回注射後２週目と１力月目か
ら６力月目まで一部採血して中和抗体価を測定したとこ
ろ少なくとも６力月間は免疫が持続されることがわかっ
た。

有効性： 約２．５力月齢の抗体陰性豚１０頭に、アルミニウムゲ
ル添加ワクチンと親水性油性アジュバント添加ワクチン
とを第２表に示すように皮下と筋肉内とに２ｍｌ　ずつ
２週間隔で２回注射後、１力月目に、レオウィルスＮＮ
ＦＯγ４３株の１０’°６ＴＣＩ　Ｄ５゜７ｍｌ液を３
ｍｌ　　鼻腔内攻撃した後、１４日間毎日鼻腔拭い液か
らウィルス回収を行なったところ、ワクチン注射群のウ
ィルス回収は無処置攻撃対照群に比べて著しく少なく、
このワクチンの有効性が確認された。

さらに、４週齢マウスの腹腔内にこのワクチン０、５　
ｍｌ　　を接種して７日間の観察を行なったが、全く異
常を認めず、体重も減少せず、また４週齢マウスの腹腔
内に０．２５　ｍｌ　　宛１週間隔で２回接種後、１４
日口の採血血清は４倍以上の中和抗体が産生されていた
。中和抗体陰性の２〜３力月齢の豚に２ｍｌ　ずつ２〜
３週間隔で２回皮下もしくは筋肉内注射しても豚は異常
を示さず２回注射後２〜３週目には８〜１２８倍の中和
抗体が産生され、ワクチン接種により免疫された豚は生
ウィルスの攻撃たとえば鼻腔内接種等の攻撃によっても
鼻腔からのウィルス回収は対照豚と比較して著しく少な
く、感染を防御することなどが確認された。

〔効果〕

以上述べたように、この発明の豚のレオウィルス感染症
ワクチンはこのウィルス感染に起因する豚の呼吸器病に
対して、従来具られなかった優れた有効性と安全性とを
有し、養豚場経営に与える甚大な被害を未然に防ぐうえ
できわめて貢献するものであるから、この発明の意義は
非常に大きいと言うことができる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 豚のレオウイルスを培養細胞で増殖し、不活化したこと
   を特徴とする豚のレオウイルス感染症ワクチン。