JPS62224285A - アムパラリエラ属の新種の微生物を含む培養物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアムパラリエラ属の新種の微生物を含む培養物
に関する。本発明の微生物は炭素、窒素および必須鉱物
の同化性源を含む水性媒質中で好気性発酵させた場合グ
ルコースイソメラーゼを生成する能力をもつ。

グルコースおよびフラクトースは蔗糖の加水分解で遊離
する単糖類である。グルコースは葡萄糖として知られた
工業的に食品加工工業によって澱粉、特にコーンスター
チから生成されろアルドヘキソースである。フラクトー
スも果糖とよばれ澱粉から誘導されたシロップや砂糖中
に少量あろケトヘキソースである。しかしフラクトース
はグルコースよりも甘いので、さとうきび糖又はてノし
さい糖の特有の味をもつ製品とする為澱粉から誘導した
シロップ又は砂糖中のグルコースの少なくも一部をフラ
クトースに変えろことが望ましい。グルコースのフラク
トースへの異性化は種々のアルカリ性触媒の使用又は酵
素による転化法によって行うことができろ。従来アルカ
リ性触媒は広く使用されたが割合収率が低（またシロッ
プ品質に悪影響をもっ副成物ができろ。この欠点の為に
グルコースイソメラーゼを用いる酵素使用転化法が漸次
一般的となっている。

種々の微生物から多くのグルコースイソメラーゼが分離
されている。グルコースイソメラーゼは属ストレプトマ
イセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｅｅｓ）、アクチノプラネ
ス（人ｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ）、バシル７．　（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ）、フラボ／＜−ｙす’）　Ａ　（Ｆｌａ
ｖｏｂａｔｅｒｉｊ＋＋ａ）、ブレビバクテリウム（Ｂ
ｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、アルスロバクテル（Ａ
「−ｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）、ノカルジア（Ｎｏｅａｒ
ｄｉａ）、ミクロモノスポラ（旧ｅｒｏｍｏｎｏｓｐｏ
ｒａ）、ミクロバイスポラ（ｌＪｉｅ−ｒｏｂ　１ｓｐ
ｏｒａ）およびミクロバイスポラ（Ｍｉｅｒｏｅ　ｌ　
ｌｏ　−ｂｏｓｐｏｒａ）からの微生物によって生成さ
れている。

グルコースからフラクト−スへの酵素転化法使用の欠点
は酵素生成経費と環境条件に対する酵素の敏感性にある
。イソメラーゼ生成は普通高温によって不活性となるの
で異性化を行わせるには比較的低温を用いねばならない
。したがって異性化を高温で行わせるに要する時間より
も長い反応時間が必要である。また操作中イソメラーゼ
を回収するに必要な固定化法は適度の温度条件のみを用
いる方法に限定されろ。したがって熱安定性のよいグル
コースイソメラーゼは特に好ましい。

本発明者は培養基中でアムバラリエラ属に罵する微生物
を培養すると該培養基中にグルコースイソメラーゼが生
成することを発見した。この方法を用いて生成されたグ
ルコースイソメラーゼは優秀な熱安定性を示している。

ある種類からつくられたイソメラーゼ試料は７５℃で２
４時間加熱後に本質的にその初めの活性を全部保持する
ことがわかった。

属のメンバー分離が困難な為アムパラリエラの４［のみ
が従来文献に記載されている。Ｊｏｕｒ、　ｏｆｔｈｅ
　Ｍｉｔｅｈｅｌｌ　Ｓｏｃ、、１９６３年５月、５３
ページを参照されたい。この既知の浦はアムパラリエラ
　ロパタ（人ｍｐｕｌｌａｒｉｅｌｌａ　１ｏｂａｔａ
）、アムバラリエラ　デイギクク（人ｍｐｕｌｌａｒｉ
ｅｌｌａ　ｄｉｇｉｔａｔａ）、アムバラリエラ　キャ
ンパヌラタ（人ｍｐｕｌｌａｒｉｅｌｌａ　ｅａｎｐａ
ｎｕｌａｔａ）およびアムパラリエラ　レギュラリス（
Ａａ＋ｐｕｌｌａｒｉ　−ｅｌｌａ　ｒｅｇｕｌａｒｉ
ｓ）である。本発明者は上記の４種全部がグルコースイ
ソメラーゼを生成することを見出した。更に本発明者は
この属に属する新規の微生物４菌株を発見し、これらの
新菌株のすべてがグルコースイソメラーゼを生成するこ
とを発見した。本発明はこの発見にもとづくものである
。これらの単離された菌株はアムパラリエラ属に属する
がこの属の知られたどの種にも該当しないのでアムパラ
リエラ属の未知孤である。この新規の単離物を本明細書
においてはツム２９９１９３８フ６種（ＡＴＣＣ３１３
５１）、アムパラリエラ３８７７種（人ＴＣＣ３１３５
２）、７ムバラリ工ラ３９ｔｉＳｇ　（入ＴＣＣ３１３
５３）およびアムパラリエラ３９６６種（人ＴＣＣ３１
３５４）と呼ぶ。グルコースイソメラーゼ生成に特に好
ましいものは新種アムパラリエラ３８７Ｂ種で、その酵
素は優秀な熱安定性を示す。ここに発表された種からつ
（られグルコースイソメラーゼを生成しうる突然変異微
生物は本発明の範囲内と考えられろ。従来未知の単離物
の亜培養菌は米国メリーランド州１−１ツクビル、パル
クロー〉　ドライブ１２３０１のアメリカンクイブカル
チャー　コレクションの永久収集品とされている。培養
菌は１９７７年１２月７日に寄託された。

また、上記４種の新種の微生物は昭和４５年６月１日に
工業技術院微生物工業技術研究所に委託された。（申請
書受理番号第５０２８号、第５０２９号。

第５０３０号および第５０３１号）。

アムパラリエラ属は単−中心鞭毛又は１又は２の側止鞭
毛をもった径０．３−０．７、長さｏ、ｓ−ｉ、ｓμ諷
の捧型遊走子をもっているのが特徴である。寒天上の細
菌集落は一般に黄褐色、黄灰色、黄色又は明るいレモン
黄色である。この属の最も明瞭な特徴は主に円筒形胞子
嚢および一般に胞子嚢内端から端迄線に並んだ遊走子で
ある。通常この有機体は腐生菌の様に種々の！＠！＋植
物、特に毛および他のケラチン買上に成長する。これら
は土壌内で発見されろ。

アムパラリエラ属の微生物は好気性で同化性窒素源、同
化性炭素源および本質的鉱物質を含む種々の栄養媒質上
でよく成長する。グルコースイソメラーゼ生成には培養
基がキシロースを含むと好ましいが、イソメラーゼはキ
シロースがなくとも多少生成されろ。工業的に回収する
に充分な量の酵ｌ：生成の為媒質中に必要なキノロース
の址は一般に約０１乃至１０垂址％である。この属の各
種は一般に約１５乃至４５℃の温度で最もよく成長する
。グルコースイソメラーゼは細！ｌＡ内で生成され一般
（こ周囲の培養基中（こｂｉ泄されない。しｔ二がって
イソメラーゼを分離するには酵素を出す為細胞膜を破る
必要がある。細胞膜を破るには例えば超音波破壊の様な
この分野で知られた方法によって行うことが出来ろ。

この分野の知識ある者に認められるとおり上記の生成さ
れｔニゲルコースイソメラーゼを用いろＤ−グルコース
のＤ−フラクトースへの転化は一般に水性媒質中で行わ
れろ。グルコースの異性化に有用な水溶液は例えばコー
ンシロップの様なもので約５乃至８０垂址％、好ましく
は約３０乃至６０重Ｊ比％のグルコースを含むものであ
る。異性化された液の最終フラクト一ス′ａｆＩＬはこ
の分野でよく知られた要素、例えばグルコースイソメラ
ーセ使用址、処理時間、使用温度、液のｐ　Ｈ等によろ
。

更にアルドとケトヘキソースの間の平衡に達した際、異
性化速度は減少する。故にフラクトースがグルコースと
フラクトースの乾燥合計重最の約４０乃至５０垂址％に
達すれば一般に操作を終わらせる。

上記の異性化において、シロップは回分方式又は連続方
式いずれを使ってもグルコースイソメラーゼと処理でき
る。何れの場合も一般に水不溶性支持物、普通重合体に
よって、物理的吸収共有結合又は捕集いずれかにより酵
素を固定することが好ましい。固定化の初めの２方法で
はグルコースイソメラーゼ／水不溶性重合体複合物が形
成され、それば酵素の保持および循環を可能にする。イ
ソメラーゼの水不溶性重合体への共有結合により形成さ
れた複合物に（よイソメラーゼと官能化された水不溶性
重合体との間の反応から得られろ複合物、成長する重合
体＆１ＪＩＪにイソメラーゼの混入により得られろ複合
物又は酵素の多官能性低分子量試薬との分子内交叉結合
から得られろ複合物がある。

酵素に対する共有的結合に使われており、上記の異性化
反応におけろ使用に適する合成支持物にはアクリルアミ
ド、無水マレイン酸、メタアクリル酸およびスチレンを
主体とする重合体がある。よく知られた天然支持物には
アガロース、セ／Ｌ、　＋７−ス、デキストランおよび
澱粉がある。酵素固定に普通便われている吸着媒にはア
ルミナ、イオン交換樹脂、炭ＦＩＵカルシウム、炭素、
セルロース、粘土、コラーゲン、コロジオン、調整され
た金属又；よガラス表面、けい藻土およびヒドロキシル
−燐灰石がある。この様なグルコースイソメラーゼ／水
不溶性重合体複合物を形成する種々の方法は、０　ザボ
ルキイのＩｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ　Ｅｎｚ　ｍｅｑ（Ｃ
ＲＣＰｒｅｇｓ。

オハイオ）１９７３年の壕な文献に記載されている。ま
た米閣特許第３５１９５３８号、　３７８８９４５号、
　３９３３５８７号および第３９３３５８９号を参照さ
れたい。

グルコースイソメラーゼ固定化の他の適当する方法は中
空繊維反応器の使用である。この種の方法は例又は食料
品製造におけろ様に活性化学的残基の可能性を避けろ必
要がある活性支持物上に固定化するに好ましい。Ｊｏｕ
ｒ、　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　５ｃｉｅｎｃｅ　４２゜２５８
　（＋　９７７）を参照されたい。

シロップの異性化に用いろグルコースイソメラーゼの蚤
はかなり変又でもよい。異性化反応を行うにグルコース
イソメラーゼζよ多量でも少量でも使用できるが、実際
には固定化されたグルコースイソメラーゼポンド（ｋｇ
）当たり乾最固体としてフラクトース／グルコース混合
物約５０乃至５０００ポンド（ｋｇ）の範囲の生産が好
ましい。本明細書で用いろ１グルコースイソ、ノラーゼ
弔位と；よグルコース２壬ル／１．．硫酸マグネシウム
０．０２℃ル／ｅおよび塩化コバルト０．００１モル／
ｌを含む溶液中ｐｔ（６、８５＜　０．２Ｍマレイン酸
ナトリウム）において６０℃で毎分当ｔ−リグルコース
のミクロモルを７ラクト−スに転化するグルコースイソ
、ノラーゼ址と規定する。Ｄ−フラクトースイソメラー
ゼの分析は２ミリモル塩化コバルト６水化物（ＣｏＣＩ
２・ｔ３Ｈ，，０）および５０ミリモル硫酸マグネシウ
ム７水化物（！、ＩｇＳ０４・７Ｈ，Ｏ）を含む５％Ｄ
−グルコース溶液を用いて７０℃で行う。適当に稀釈（
０−５０μにフラクトース／ｍｊ）シた後イソメラーゼ
により生成物されたフラクト−ス濃度を６０℃で１０分
間のンステインーカルバゾル反応により測定する。Ｊ、
　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｗ。

す主−５８３（１９５１１および加μＰ弘８４８　（１
９５７）を参照されたい。７％過塩素酸塩を使し）中止
させた対照ｖ、鵜を試料中のグルコースの元の濃度測定
の為行う。

異性化を行う条件は巾広く変えうろが、一般に操作温度
は約４５乃至約８５℃の範囲で、またｐｔ（ば約６乃至
約８５の範囲である。約５０乃至７５℃の温度と約６５
乃至約７．５のｐＨで操作を行うことが好ましい。

使用する高温におけるイソメラーゼの不活性化を防ぎ操
作効率を高めろ為シロップに熱安定剤を加入ることが−
Ｃきる。熱安定剤および（又は）コ・ファクターとして
普通用いられろ多価陽イオン（こ１、ｆ：ｊパルｌ−、
マグネシウムおよびマンガンイオンがある。これらのイ
オンのｉ＆適量は熱安定剤および（又は）コファクター
のちがった濃度に対する異性化最適温度を比較し一定時
間後のイソメラ′−ゼ保持パーセンｉ・を分析測定して
容易に決定てきろ。

本発明は更に次の実施例によって例証されろ。

しかし実施例は本発明の範囲を限定するものと考えろべ
きではない。

火遊Ｉ（−ユ 上述したとおりアムパラリエラ３８７６種ＡＴＣＣ３１
３５１と命名されたアムパラリエラ新種が発見された。

この９ＲｈｆＥはこの鳥肉の知られた種からの菌株と同
様にグルコースイソメラーゼを生成できろ。アムパラリ
エラ３８７６Ｍは形態学的に幅約９乃至１１ミクロン長
さ約１４乃至１８ミクロンの種々の大きさの卵形からび
ん形迄種々の形の不規則輪郭をもった胞子嚢を特長とす
る。素止菌糸（ま常にないが、ある媒質内で胞子嚢体は
素止菌糸の外観をとる。

アムパラリエラ３８７６［人ＴＣＣ３１３５１のンヤー
リングとゴツトリープのＩｎｔ、　　Ｊ、　　５ｙｓｔ
、　Ｂａｃｔｅｒｉａｌ、　　１６３１３−３４０　（
１９６Ｂ）およびワクスマンのＭυ±５ｅエリ２Ｑ（１
９６６年バルチモのウィリアムスアン！：１″フイルキ
ンス社１３２１１１−３３４ページに記載の異なる媒質
上の培養特性を表１に示している。この培養特性は３０
℃で６乃至１４日培養後に測定した。アムパラリエラ３
８７７種人１’ＣＣ３１３５２，アムパラリエラ３９６
５種人ＴＣＣ３１３５３およびアムパラリエラ３９６Ｇ
種人ＴＣＣ３１３５４について上記と同様にして測定し
た培養特性も表１に示す。

表２はプリダムらの方法（Ｉｎｔｅｒｎ、　Ｊ、　５ｙ
ｓｔ、　Ｂａｅｔ。

５６．１０７．１９４８）により炭素源に対するアムパ
ラリエラ３８７ｆ４　ＡＴＣＣ３１３５１および既知種
の利用可能性を比較している。

表３はアムパラリエラの各種の生理学的特性を比較して
いる。

形態学的時１１ｉ１ｋ（即ちおもに円筒形の胞子量、棒
形胞子および胞子嚢内に長さ方向端から端まで並んだ胞
子配列）から人ＴＣＣ３１３５１株はアムパラリエラ属
の種であると認められる。しかし培養特性、各種寒天上
の色素形成型、生理学的特性、各種寒天上の色素形成型
、生理学的特性（即ちＨ２Ｓ形成および硝酸塩減少のな
いこと、またリドマスミルクをペプトン化する性質）お
よび炭素化合物利用型（即ち複合炭水化物ラフィノース
上の成長性）はこの株を従来既知のどの種からも区別す
るのである。

未−見 イノシット　　　　　　−　　無成長　無成長　　　−
−フルクトース　　　　　＋　　　　ｌ　　　　〃　　
　　　−十ラムノース　　　　　　＋　　　　／／　　
　　　／／　　　　　　＋　　　　　＋マンニット　　
　　　　十　　　　〃〃十−キシロース　　　　　　＋
　　　　〃〃＋＋ラフィノース　　　　　＋　　　々　
　　　〃−−アラビノース　　　　　＋　　　　／／　
　　　　／／　　　　　　＋　　　　　＋セル叶ス　　
　　　　−　　　／／　　　　Ｊｉ＋　　　　　−−蔗
糖　　＋　／／／／　　−＋ グルコース　　　　　　十　　　　ｌ　　　　〃　　　
　　＋　　　　＋マンノース　　　　　　＋　　　　〃
〃＋＋ラクトース　　　　　　＋　　　　／／　　　　
　／／　　　　　　−＋サリシン　　　　　　　＋　　
　ｌ　　　〃　　　　−＋零　十は成長を表わし、−は
無成長を表わす。

ェ廣使持作−３８７６種　　　　　Ａ、デイギタタ生理
学的特性本 澱粉の加水分解　　　　　＋　　　　　　　　　　＋Ｈ
３形成　　　　　　　　　　　　　　　　　　　十メラ
ニン生成　　　　　　＋　　　　　　　　　　＋チロシ
ン反応　　　　　　−− カゼイン加水分解　　　　−− マレイレ酸カルシウムの溶角召ヒ　　　　　　−　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　−硝酸塩減少　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　十ゼラチン液化　
　　　　　士　　　　　　　　　　士零十は強陽性、　
−は強陰性、　士は弱陽性。

Ａ、。、＜タ　　　　Ａキャンパヌラタ　　　　Ａレギ
ュラリス＋＋＋ ＋＋＋ 十−一 ＋十＋ アムバラリエラ３８７６種の他にこの属の新種をあられ
す３新分離種もグルコースイソメラーゼを生成すること
が発見された。この分ｍ種はアムパラリエラ３８７７種
（人ＴＣＣ３１３５２）、アムバラリエラ３９６５種（
ＡＴＣＣ３１３５３）およびアムパラリエラ３９６６種
（人ＴＣＣ３１３５４）という。

これら上記の各種の炭素源利用度は表４に示している。

新種の生理学的特性は表５に示している。

イノジット　　　　　−−− フラクトース　　　　＋　　　　　＋　　　　　＋ラム
ノース　　　　　＋　　　　　＋　　　　　＋マンニッ
ト　　　　　＋　　　　　＋　　　　　＋キシロース　
　　　　＋　　　　　＋　　　　　＋ラフィノース　　
　　−　　　　　−＋アラビノース　　　　＋　　　　
　＋　　　　　＋セルロース　　　　　−−− 蔗　　糖　　　　　　　＋　　　　　　＋　　　　　　
＋グルコース　　　　　＋　　　　　＋　　　　　＋マ
ンノース　　　　　＋　　　　　＋　　　　　＋ラクト
ース　　　　　−　　　　　＋　　　　　＋サリシン　
　　　　　＋　　　　　＋　　　　　＋零　十は成長を
表わし、−は無成長を表わす。

表５ 澱粉の加水分解　　　　　千　　　　　十　　　　　＋
Ｈ３形成　　　　　　　＋　　　　　＋　　　　　＋メ
ラニン生成　　　　　　＋　　　　　＋　　　　　＋チ
ロシン反応　　　　　　−−− カゼイン加水分解　　　　−−− マレイン酸カルシウムの溶方１化　　　　　−−−−硝
酸塩減少　　　　　　　−−− ゼラチンの液化　　　　　士　　　　　士　　　　　士
リドマスミルク凝固　　　−−− リドマス之ルクベブトン化＋−一 セルロース分解　　　　　−−− 零　十は強陽性、〜は強陰性、士は９陽性をそれぞれ表
わす。

実施例　２ −ａにアムバラリエラ培養物の保持に適した栄養スープ
は次のとおりであろ： 牛肉抽出液　　　５ｇ ペプトン　　　　５ｇ 蒸留水　　　　　１１ グルコースイソメラーゼの生成にはエマーソンキシロー
ス成長媒質が適当であると発見した。成分は次のとおり
である： 牛肉抽出液　　　　　４．０ｇ ペプトン　　　　　　４．０ｇ 塩化ナトリウム　　　２８５ｇ 酵母抽出液　　　　　１．０ｇ キシロース　　　　　１０．０ｇ 蒸留水　　　　　　　ＩＩ 及庭叢−ユ アムパラリエラ３９８６Ｉｌの栄養スープ培養液２ｍｌ
をエマーソンキシロース成ｍ！質１００鳳１　ヲ［ｔｒ
５００＋＋＋Ｚバッフル付きフラスコに接種物として用
いた。振どう器上３０℃で３日間培養液を培養した。１
Ｂ、　３００Ｘ　ｇで３分間遠心分離して細胞を回収し
０．０１３Ｍ燐酸塩緩衝液（ｐＨ７，０）１００ｙｒｌ
で洗った。細胞を再び２７．　ｏｏｏｘ　ｇで３０分間
遠心分歴した。湿細胞の少ｌを００５Ｍトリス−１１０
１緩衝液（ｐＨ７４）中に湿細胞ダラム当たりＮ衝液１
０ｍ１の濃度に懸濁させた。プランソンソニファイヤー
　細胞破壊器を用いて３分間おいて２−３分間衛げきを
与えて４℃の温度で細胞を破壊した。細胞破片を２７、
０ＯＯＸ　ｇで３０分間遠心分離して除去した。５％グ
ルコース溶液を抽出液と処理し上記の方法を用いてフル
クトースの存在を検べ粗抽出液試料のグルコースイソメ
ラーゼ活性を試験した。抽出液はそのミリリットル当た
り０６９グルコ一スイソメラーゼ単位を含むことを発見
した。

抽出液の第２試料を７５℃で２４時間加熱した。

加熱試料の分析でミリリットル当たり０５４グルコ一ス
イソメラーゼ単位を含んでおり抽出液が非加熱対照試料
の初めのグルコースイソメラーゼ活性の約７８％を保持
していることを示した。

友廐五−１ エマーソンキシロースＷ質１ｔｌいて１４１ニユ一プラ
ンズウイツク発酵器中で成長したアムバラリエラ３８７
Ｂ覆（湿潤１３０ｇ）を遠心分離して回収した。細胞を
脱イオン蒸留水で洗い２７．　ｏｏＯＸ　ｇで４℃、３
０分間遠心分離した。湿細胞ペレットを０５ミリモル塩
化コバルトを含む０．０２５Ｍ　）リスーＩＣＩ緩ｆｔ
ｆ液（ｐＨ７，４）中に湿細胞ダラム当たり緩衝液５ｍ
ｌの濃度で懸濁させた。プランソンソニファイヤーＬ″
１細胞破壊器を泪い５０ワツトで衝げき間隔３分をおい
て３分衝げきを５回与えて細胞を破壊した。細胞破片を
２７．０ＯＯＸ　ｇで３０分間遠心分離して除去した。

粗抽出液試料のグルコースイソメラーゼ活性および蛋白
質濃度を分析した。試料が抽出液ミリリットル当たり１
．５９グルコ一スイソメラーゼ単位と５．　ｅｗｇの蛋
白質（蛋白質ミリグラム当たり０．２８３グルコ一スイ
ソメラーゼ単位）を含むことがわかった。

粗グルコースイソメラーゼを回転蒸発器で４８℃で２倍
に濃縮しまた１５０ｒｐ■で７０℃で１時間加熱し４℃
、３０分間７８．４８０Ｘ　ｇで遠心分離してイソメラ
ーゼ含有上澄液から沈澱蛋白質を除去して２倍に精製（
蛋白ＩＲｉ：リグラム当たり０．５８０グルコ一スイソ
メラーゼ単位）した。０．０５Ｍ）リス−ＨＣＩ（ｐＨ
７，４］に対するイソメラーゼの徹底的透析を行って酵
素からコバルトを除去した。

上の実施例３に記載の方法により行った最終酵素生成物
の分析よ２．６７グルコースイソメラーゼ単位、／ｍｌ
を示した。７５℃で６および２４時間加熱された酵素試
料はグルコースイソメラーゼ非加熱対照試料と比べてそ
の初めの活性のそれぞれ１１２％および１０４％を留保
していた。

実施例　５ アムパラリエラ３９６５種および３８７７［をそれぞれ
使用して実施例３と同じ操作をくりかえした。えられた
結果は次のとおりであった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、炭素、窒素および必須鉱物の同化性源を含む水性栄
   養媒質中で発酵させた場合回収可能量のグルコースイソ
   メラーゼを生成しうろことを特徴とするＡＴＣＣ３１３
   ５１、３１３５２、３１３５３又は３１３５４の確認特
   性をそれぞれもつアムパラリエラ３８７６種、３８７７
   種、３９６３種又は３９６６種から選ばれた微生物の生
   物学的純粋培養物。 ２、好気性発酵をさせた場合回収可能量のグルコースイ
   ソメラーゼを生成しうろことを特徴とするアムパラリエ
   ラ３８７６種、３８７７種、３９６５種又は３９６６種
   又はそれらの突然変異体から選ばれた微生物および炭素
   、窒素および必須鉱物の同化性源を含む水性栄養培養基
   より成ろ培養物。 ３、更に約０．１乃至１０重量％のキシロースを含む特
   許請求の範囲第２項記載の培養物。