JPS62132878A - 新生理活性物質モナコリンｍ及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はコレステロール低下作用を有する新生理活性物
質およびその製造法に関する。

〔従来の技術〕

血中コレステロール低下作用を有する物質としては例え
ば微生物、モナスカス・ルーペルの産生ずるジヒドロモ
ナコリンＬなどが知られている（特開昭５８−１０９４
８０）。

〔本発明が解決すべき問題点〕

血中コレステロール低下剤に関し、薬効の強い、又副作
用の弱い有効成分の出現が期待されている。

〔問題点を解決するための手段〕

そこで本発明者らは種々検討した結果、モナスカス属に
、属する微生物が血中のコレステロール低下作用？有す
る下記式（１） で表わされる新生理活性物質モナコリンＭを産生するこ
とを見い出した。

本発明は上記知見に基づいて完成されたものである。

次にモナコリンＭの理化学的性状を記す。

モナコリンＭは白色の結晶性粉宋で、メタノール、エタ
ノール、プロパツール等の低級アルコール、アセトン、
クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼン等に可溶で、ヘキ
サン、石油エーテル等には不溶である。本物質は中性物
質で、中性、酸性の水には溶けないが、通常のアルカリ
処理によりラクトン構造が開環した酸性物質に変換し水
に転溶する。この酸性物質は酸性のｐＨ領域で酢酸エチ
ル、クロロホルム等に抽出され、乾固によりモナコリン
Ｍに再転換される。

モナコリンＭの元素分析値は炭素６７．９６％、水素８
．４３％、酸素２３．６１％である。

分子量４０６．５で分子式はＣ２３Ｈ３＜　Ｏｓである
。

赤外吸収スペクトルにおいて吸収ピークを示す波長（ｃ
ｍ−’　）は次のとおりである。

３３８６．２９６２．２９２７．２８７１，２８５６゜
１７３４、　１７１６．　１７０３．　１４５８．　１
３７５゜１２６１．８６６．８００゜ 又、ＮＭＲスペクトル図を第１図に示す。

シリカゲルを用いた薄層クロマトグラフィー（メルク社
規、Ａ　５７１５、キーゼルゲル６０　Ｆ２５４で展開
溶媒としてヘキサン−アセトン（４：１）を用いたとき
Ｒｆ値０．４に単一スポラトラ与える。なお、本スポッ
トは硫酸スプレー（弱い加熱により赤褐色に発色〕およ
びヨードにより検出される。

本発明のモナコリンＭは、モナスカス属に属するモナコ
リンＭ生産菌を培養し、次いで培養物よりモナコリンＭ
を採取することによ・り得られる。モナコリンＭ生産菌
の代表的なものとしては、モナスカス・ルーベル１ｏｏ
Ｓ株（微工研菌寄ｆＩ４８２２号）があげられる。

この菌株は特開昭５５−１１１７９０号に記載された公
知の菌株である。

モナコリンＭはモナコリンＭを生産する菌株をカビの培
養法として公知の方法により好気的に培養物中に生産せ
しめられる。例えばモナコリンＭ生産菌は可溶性デンプ
ン２％、グルコース１％、ペプトン２％、寒天２％から
なる培地に継代培養され、モナコリンＭ生産のためにこ
の寒天培地の発育菌体を直接生産培地に接種して培養で
きる。また生産培地に発育させた菌体を新しい生産培地
に培養して、そこにモナコリンＭを生産させることがで
きる。

モナコリンＭ生産菌は７〜４０°Ｃで発育するがモナコ
リンＭの生産には通常２０〜３５°Ｃが好ましい。モナ
コリンＭを生産するモナスカス属の菌を培養するには、
カビその他の微生物の培養に公知の栄養源はすべて利用
でキル。例えば、グルコース、マルト−、＜、ｆキスト
リン、デンプン、ラクトース、サッカロース、グリセリ
ン等を炭素源として利用できる。これらの炭素源の中で
グルコースおよびデンプンはモナコリンＭ生産に好まし
い炭素源である。

モナコリンＭを生産するためモナスカス属その他の微生
物の発育のため公知の窒素源はすべて利用できる。例え
ば、ペプトン、肉エキス、酵母、酵母エキス、大豆粉、
落花生粉、コーンスチープリカー、米ぬか、無機窒素源
等を利用できる。モナコリンＭ生産菌の培養でモナコリ
ンＭを生産させる場合、必要とするときは無機塩、金属
塩を加える。また必要とするときは重金属の微量を加え
ることもできるＯ モナコリンＭはその生産菌を好気的に培養して得られる
が、通常用いられる好気的培養法例えば固体培養法、振
とう培養法、通気攪拌培養法が用いられる。培養あるい
は培地滅菌中消泡を必要とするときはシリコンオイル、
界面活性剤等の消泡剤が使用できる。培養温度は２０〜
３５℃が好ましい。

培養はモナコリンＭが実質的に蓄積されるまで続け、本
物質の培養物からの抽出は、後記実施例に示すとと（、
本発明者によって明らかにされた本物質の性状にもとす
いて、種々の方法を適当に組み合せることによって行い
得る。すなわち、たとえばエーテル、酢酸エチル、クロ
ロホルム、ベンゼン等による抽出、アセトン、アルコー
ル等極性の大きい溶剤への溶解、石油エーテル、ヘキサ
ン等極性の小さい溶剤による不純物の除去、セファデッ
クスカラムによるゲル濾過、活性炭、シリカゲル等を用
いる吸着クロマトグラフィー等である。これらの手段を
適当に組み合せて使用することにより本物質は培養物か
ら均一物質として単離される。

〔作　用〕

モナコリンＭの生理活性はラットに対する血中コレステ
ロール低下作用をみる以下の方法により検定できる。す
なわち、１群５匹のラットにトライトンＷＲ−１３３９
（商品名）（本物質は血中コレステロール値を上昇させ
る作用がある）４００ｍｇ／ｋｇを靜注し、同時にモナ
コリンＭ１００■／ｋｇを経口投与し、１４時間後に放
血致死させ常法により血中コレステロールを測定する（
投与群）。−万トライドンＷＲ−１３３９のみを静注し
たラットを同様に処理して血中コレステロールを測定す
る（対照群）。両群のコレステロール値を比較すること
によりモナコリンＭの効果を定量的に判定できる。

その結果、トライトンＷＲ−１３３９のみを静注した場
合に比べてモナコリンＭを投与した場合には血中のコレ
ステロール値７３（３４，２％低下した。

なお、モナコリンＭのマウス経口による急性毒性（ＬＤ
ｓｏ）はＩｇ／ｋｇ以上と低毒性である。

〔効　果〕

以上のごとく、モナコリンＭは血中のコレステロール値
を低下させる作用を有し、例えば抗脂血剤、抗動脈硬化
薬として医薬に使用することができる。

これらの化合物は経口的または非経口的に例えばカプセ
ル剤、錠剤、注射剤等の形で投与することができる。通
常は経口剤が好適である。投与量は年令、症状、体重等
によって異るが、通常は成人に対し１日約５０〜５００
■を１〜３回に分けて投与さ′れる。しかし必要に応じ
てそれ以上の量を使用することができる。

〔実施例〕

グルコース３％、ベフトン０．８％、肉エキス３％、グ
リセリン７％、ＮａＮＯ３０，２％、Ｍｇ　Ｓ　０４・
７Ｈ２００，１％を含む液体培地にモナスカス・ルーベ
ルム１００５株を接種して温度２５℃で１０日間好気的
に培養した。培養液から菌体な炉別したろ液１０Ａを６
Ｎ−ＨＣＩでｐＨ６に調整後５！のジクロロメタンで洗
浄し水層を６ＮＨＣ１と微量のトリフルオロ酢酸でｐＨ
２として６！の酢酸エチルで抽出した。

酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで脱水後減圧濃縮し
等量の５％ＮａＨＣＯａで洗浄して更に濃縮乾固した。

乾固物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン−ア
セトン＝９５：５→７０　：　３０のグラジェント溶出
）に付し有効画分を採取した。有効１両分を濃縮した乾
固物を分取用高速液体クロマトグラフィー（カラム：　
ＯＤＳ、溶出液ニアセトニトリル−水＝４５　：　５５
）により更に精製し有効画分を得、酸性下で酢酸エチル
で抽出し無水硫酸す）　ＩＪウムで脱水後減圧乾固し粗
モナコリンＭ８■を得た。これを更に分析用高速液・体
クロマトグラフィー（カラム：シリカゲル、溶媒ニジク
ロロメタン−イソプロパノール＝９７：３）で精製しモ
ナコリンＭの精製品２ｗｇを得た。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明化合物の’Ｈ−ＮＭＲスペクトル図（２
００ＭＨｚ、　ＣＤＣ１ｇ）である。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表わされる新生理活性物質モナコリンＭ。
2. （２）モナスカス属に属するモナコリンＭ生産菌を培養
   し、培養物よりモナコリンＭを採取することを特徴とす
   るモナコリンＭの製造法。