JPS61249389A - 安定化サルコシンオキシダ−ゼ組成物 - Google Patents
安定化サルコシンオキシダ−ゼ組成物Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は安定化サルコシンオキシダーゼ組成物に関する
。
。
従来技術
サルコシンオキシダーゼＥ、Ｃ，１，５，３，１。
（５ａｒｃ−ＯＤ ）はホルムアルデヒド及びＨ２Ｏ２
の形成下にサルコシンと０２及びＨ２Ｏとの反応を触媒
する。Ｈ２Ｏ２を容易に平衡から取り去ることができる
該反応に基づき、サルコシンオキシダーゼはサルコシン
の測定に使用することができる。一方サルコシンは酵素
クレアチンアミジノヒドロラーゼＥ、Ｃ，３，５，３，
３の作用下にクレアチンの加水分解において生じ、この
原水の取り込み下にす、ルコシンと尿素が生じる。更に
クレアチンはクレアチニンから酵素により形成されるの
で、前記の方法でのサルコシン測定はクレアチン及びク
レアチニンの測定も可能にする。
の形成下にサルコシンと０２及びＨ２Ｏとの反応を触媒
する。Ｈ２Ｏ２を容易に平衡から取り去ることができる
該反応に基づき、サルコシンオキシダーゼはサルコシン
の測定に使用することができる。一方サルコシンは酵素
クレアチンアミジノヒドロラーゼＥ、Ｃ，３，５，３，
３の作用下にクレアチンの加水分解において生じ、この
原水の取り込み下にす、ルコシンと尿素が生じる。更に
クレアチンはクレアチニンから酵素により形成されるの
で、前記の方法でのサルコシン測定はクレアチン及びク
レアチニンの測定も可能にする。
特に血清中でのクレアチニンの測定は臨床的に非常に重
要である。
要である。
試薬中のサルコシンオキシダーゼをサルコシン、クレア
チン又はクレアチニンの測定のために使用するためには
、該酵素が乾燥（凍結乾燥）した形、特に復元して溶解
した形で十分な安定性を示すということが実地において
は非常に重要なことである。この特性を有していないた
めに、サルコシン測定のための前記方法でサルコシンオ
キシダーゼを実地に使用することは従来阻止されていた
。こうして、緩衝水溶液中のサルコシンオキシダーゼは
すでに１時間後に明らかな混濁を示し、この混濁を視覚
的測定法において考慮しなければならない。商業的に使
用可能な試薬にとって必要な数日間の最低安定性が与え
られなかった。
チン又はクレアチニンの測定のために使用するためには
、該酵素が乾燥（凍結乾燥）した形、特に復元して溶解
した形で十分な安定性を示すということが実地において
は非常に重要なことである。この特性を有していないた
めに、サルコシン測定のための前記方法でサルコシンオ
キシダーゼを実地に使用することは従来阻止されていた
。こうして、緩衝水溶液中のサルコシンオキシダーゼは
すでに１時間後に明らかな混濁を示し、この混濁を視覚
的測定法において考慮しなければならない。商業的に使
用可能な試薬にとって必要な数日間の最低安定性が与え
られなかった。
発明が解決しようとする問題点
従って、本発明の課題は前記欠点を有さす、商業的なサ
ルコシン測定に使用することができる安定化サルコシン
オキシダーゼ組成物を製造することである。
ルコシン測定に使用することができる安定化サルコシン
オキシダーゼ組成物を製造することである。
問題点を解決するための手段
この課題は水溶性多糖類に共有結合したクレアチンアミ
ジノヒドロラーゼを含有することを特徴とする安定化サ
ルコシンオキシダーゼ組成物により解決する。
ジノヒドロラーゼを含有することを特徴とする安定化サ
ルコシンオキシダーゼ組成物により解決する。
多糖類結合クレアチンアミジノヒドロラーゼがサルコシ
ンオキシダーゼによる混濁形成を阻止するということは
意外なことである。この作用が何に基づくのかは知られ
ていない。しかしながら、１方の酵素はサルコシンを生
成物として引き渡し、他方の酵素は該生成物を基質とし
て取り込むので、両方の酵素は複合体様に組み合わさっ
ており、この際１方の酵素の炭水化物部分は他方の酵素
を不安定化の影響に対して遮蔽すると考えることもでき
る。
ンオキシダーゼによる混濁形成を阻止するということは
意外なことである。この作用が何に基づくのかは知られ
ていない。しかしながら、１方の酵素はサルコシンを生
成物として引き渡し、他方の酵素は該生成物を基質とし
て取り込むので、両方の酵素は複合体様に組み合わさっ
ており、この際１方の酵素の炭水化物部分は他方の酵素
を不安定化の影響に対して遮蔽すると考えることもでき
る。
多糖類とクレアチンアミジノヒドロラーゼとの共有結合
がない場合、該組成物の３成分は一緒にならないので、
混濁形成は阻止できない。
がない場合、該組成物の３成分は一緒にならないので、
混濁形成は阻止できない。
好適な多糖類としては可溶性のデンプン、グリコ−ｒン
、デキストラン、イヌリン、ペクチン、マンナン及びが
ラフタンを挙げることができる。デキストランが有利で
ある。
、デキストラン、イヌリン、ペクチン、マンナン及びが
ラフタンを挙げることができる。デキストランが有利で
ある。
本発明により安定化した酵素組成物の特別な利点は、安
定化していないサルコシンオキシダーゼを一般に迅速に
混濁する界面活性剤の存在においても改良された安定性
を示すということである。体液、特に血清中のサルコシ
ンのような物質代謝生成物を測定すべき場合、界面活性
剤は他の血清成分による混濁形成を阻止するために一般
に必要であるので、このことは本発明による組成物の著
しい利点を示す。従って、該組成物は有利に少なくとも
１種の界面活性剤を含有する。界面活性剤としては血清
のためのいわゆる６澄明化システム”の成分として公知
の物質を第１に挙げることができる。このための典型的
な例は非イオン系界面活性物質及びカチオン系界面活性
物質、特にコール酸鮮からのものである。
定化していないサルコシンオキシダーゼを一般に迅速に
混濁する界面活性剤の存在においても改良された安定性
を示すということである。体液、特に血清中のサルコシ
ンのような物質代謝生成物を測定すべき場合、界面活性
剤は他の血清成分による混濁形成を阻止するために一般
に必要であるので、このことは本発明による組成物の著
しい利点を示す。従って、該組成物は有利に少なくとも
１種の界面活性剤を含有する。界面活性剤としては血清
のためのいわゆる６澄明化システム”の成分として公知
の物質を第１に挙げることができる。このための典型的
な例は非イオン系界面活性物質及びカチオン系界面活性
物質、特にコール酸鮮からのものである。
本発明により使用した安定化剤（多糖類−酵素複合体）
の製造のための多糖類へのクレアチンアミジノヒドロラ
ーゼの共有結合は酵素の担体固定のための公知法により
行なうことができる。多糖類としてデキストランを使用
する場合ブロムシアン又はトリクロルトリアジン（ＴＣ
Ｔ）を介する結合が特に好適であると示されているが、
この際、該カップリング剤をデキストランと、相応して
注性化したデキストランの形成下に先ず反応させ、次い
で該活性化デキストランは水溶液中でクレアチンアミジ
ノヒドロラーゼを共有結合する。多糖類及び酵素を有利
に１＝１〜２０、特に１：４〜１５の重量比で使用する
。
の製造のための多糖類へのクレアチンアミジノヒドロラ
ーゼの共有結合は酵素の担体固定のための公知法により
行なうことができる。多糖類としてデキストランを使用
する場合ブロムシアン又はトリクロルトリアジン（ＴＣ
Ｔ）を介する結合が特に好適であると示されているが、
この際、該カップリング剤をデキストランと、相応して
注性化したデキストランの形成下に先ず反応させ、次い
で該活性化デキストランは水溶液中でクレアチンアミジ
ノヒドロラーゼを共有結合する。多糖類及び酵素を有利
に１＝１〜２０、特に１：４〜１５の重量比で使用する
。
その優れた安定性により、本発明によるサルコシンオキ
シダーゼ組成物は、サルコシンオキシダーゼにより生じ
たＨ２Ｏ２の測定用システムと共に一緒に予め混合する
ことも、同様に緩衝液、及びクレアチニン測定の範囲に
該組成物を使用する場合にはクレアチンアミドヒドロラ
−ゼを添加することもでき、これにより安定性が低下す
ることもない。
シダーゼ組成物は、サルコシンオキシダーゼにより生じ
たＨ２Ｏ２の測定用システムと共に一緒に予め混合する
ことも、同様に緩衝液、及びクレアチニン測定の範囲に
該組成物を使用する場合にはクレアチンアミドヒドロラ
−ゼを添加することもでき、これにより安定性が低下す
ることもない。
本発明範囲における緩衝液としては５ａｒｃ−ＯＤ及び
クレアチンアミジノヒドロラーゼの公知安定範囲を緩衝
するすべての緩衝物質を使用することができる。燐酸塩
緩衝液及びトリス緩衝液が特に有利である。有利な両値
は７．０〜８．５であり、特に７．６〜８．２である。
クレアチンアミジノヒドロラーゼの公知安定範囲を緩衝
するすべての緩衝物質を使用することができる。燐酸塩
緩衝液及びトリス緩衝液が特に有利である。有利な両値
は７．０〜８．５であり、特に７．６〜８．２である。
好適な濃度は例えば５０〜５００ミリモル／ｌである。
Ｈ２Ｏ２の測定用システムとしては酵素の活性を損う成
分を含有しない、Ｈ２０□測定用として専門家に公知の
システムを使用することができる。この種のシステムの
典型的な例は、Ｅ（、Ｕ。
分を含有しない、Ｈ２０□測定用として専門家に公知の
システムを使用することができる。この種のシステムの
典型的な例は、Ｅ（、Ｕ。
ベルグ々イヤー（Ｂｅｒｇｍｅｙｅｒ ）、メトーデン
・デル・エンチマーテイツシエン・アナリューゼ（Ｍｅ
ｔｈｏｄｅｎ ｄｅｒ ｅｎｚｙｍａｔｉｓｃｈｅｎ
Ａｎａｌｙｓｅ ） １第４改訂版から知ることができ
る。澄明化システムは例えば非イオン系界面活性剤、例
えばｎ−デカノールポリグリコールエーテル〔ルチンゾ
ール（Ｌｕｚｅｎｓｏｌ ） ＯＮ ５０ ］から、場
合によリコール酸ナトリウムのようなコール酸群のアニ
オン系界面活性剤及びハロゲン化フエノーノＫ例えば２
，４．６−）リブロム−３−ヒドロキシ安息香酸と共に
成形されていてよい。更に、該組成物は常用の保存剤、
例えばアルカリアジド、を混入していてよい。
・デル・エンチマーテイツシエン・アナリューゼ（Ｍｅ
ｔｈｏｄｅｎ ｄｅｒ ｅｎｚｙｍａｔｉｓｃｈｅｎ
Ａｎａｌｙｓｅ ） １第４改訂版から知ることができ
る。澄明化システムは例えば非イオン系界面活性剤、例
えばｎ−デカノールポリグリコールエーテル〔ルチンゾ
ール（Ｌｕｚｅｎｓｏｌ ） ＯＮ ５０ ］から、場
合によリコール酸ナトリウムのようなコール酸群のアニ
オン系界面活性剤及びハロゲン化フエノーノＫ例えば２
，４．６−）リブロム−３−ヒドロキシ安息香酸と共に
成形されていてよい。更に、該組成物は常用の保存剤、
例えばアルカリアジド、を混入していてよい。
本発明の更に有利な実施形によれば、サルコシンオキシ
ダーゼは予架橋状態で本発明による組成物中に存在する
。この種の予架橋、サルコシンオキシダーゼは、例えば
西ドイツ国特許公開第２１２８７４３号公報及び同第２
２６０１８５号公報に記載されているような二官能性蛋
白質試薬との反応により得られた。グルタルジアルデヒ
ドとの予架橋サルコシンオキシダーゼが特に有利である
。これにより、本発明によるサルコシンオキシダーゼ組
成物の安定性の吏なる改良が達せられる。
ダーゼは予架橋状態で本発明による組成物中に存在する
。この種の予架橋、サルコシンオキシダーゼは、例えば
西ドイツ国特許公開第２１２８７４３号公報及び同第２
２６０１８５号公報に記載されているような二官能性蛋
白質試薬との反応により得られた。グルタルジアルデヒ
ドとの予架橋サルコシンオキシダーゼが特に有利である
。これにより、本発明によるサルコシンオキシダーゼ組
成物の安定性の吏なる改良が達せられる。
界面活性剤の不存在及び存在において、本発明により達
せられた安定化効果を添付図面に示した。この図面にお
いては、５４６ｎｍにおける吸光度として測定した混濁
形成を溶解したサルコシンオキシダーゼの６７°Ｃにお
ける恒温保持時間＠）に対して記載した。すべての場合
において、自然のサルコシンオキシダーゼを６００ｍＭ
燐酸塩緩衝液、ｐＨ７，９中に添加した。曲線１は５ａ
ｒｃ−ＯＤに関し、曲線２は５ａｒｃ−ＯＤ＋デキスト
ラン−酵素複合体に関し、曲線３は０．１チルテンゾー
ル（界面活性剤）を添加した曲線１に相応し、曲線４は
デキストラン−酵素複合体を添加した曲線３に相応する
。曲ｌＮ５はルチンゾール０．４％を添加した曲線３に
相応した。曲ＩＮ！６はデキストラン−酵素複合体を添
加した曲線５に相応する。デキストラン−酵素複合体の
量はこの際すべての場合において１２Ｕ／ｍＡであり、
サルコシンオキシダーゼは６．５Ｕ／ｒｒＬでクレアチ
ンアミジノヒドロラーゼ濃度１２ ｍＵ／ｍｅであった
。複合体中の酵素；デキストランの比は１：４であった
。
せられた安定化効果を添付図面に示した。この図面にお
いては、５４６ｎｍにおける吸光度として測定した混濁
形成を溶解したサルコシンオキシダーゼの６７°Ｃにお
ける恒温保持時間＠）に対して記載した。すべての場合
において、自然のサルコシンオキシダーゼを６００ｍＭ
燐酸塩緩衝液、ｐＨ７，９中に添加した。曲線１は５ａ
ｒｃ−ＯＤに関し、曲線２は５ａｒｃ−ＯＤ＋デキスト
ラン−酵素複合体に関し、曲線３は０．１チルテンゾー
ル（界面活性剤）を添加した曲線１に相応し、曲線４は
デキストラン−酵素複合体を添加した曲線３に相応する
。曲ｌＮ５はルチンゾール０．４％を添加した曲線３に
相応した。曲ＩＮ！６はデキストラン−酵素複合体を添
加した曲線５に相応する。デキストラン−酵素複合体の
量はこの際すべての場合において１２Ｕ／ｍＡであり、
サルコシンオキシダーゼは６．５Ｕ／ｒｒＬでクレアチ
ンアミジノヒドロラーゼ濃度１２ ｍＵ／ｍｅであった
。複合体中の酵素；デキストランの比は１：４であった
。
これらの曲線からも判明するように、記載された温度で
９０分以内に、自然サルコシンオキシダーゼは混濁を生
じ、この混濁は安定化剤としてデキストラン酵素複合体
の存在におけるよりも約２倍高い。安定化剤なしで、界
面活性剤は の存在においては、混濁に著しく強く、１５分。
９０分以内に、自然サルコシンオキシダーゼは混濁を生
じ、この混濁は安定化剤としてデキストラン酵素複合体
の存在におけるよりも約２倍高い。安定化剤なしで、界
面活性剤は の存在においては、混濁に著しく強く、１５分。
後にはすでに測定限界を越えてしまう。これに対し界面
活性剤及び安定化剤の存在においては開始時には同様に
混濁が生じるが、この混濁は測定範囲内に留まり、約４
０分後にはもはや上昇しない。こうして、サルコシン、
クレアチン又はクレアチニンの測定のために十分に長く
保持可能な試薬を製造することが本発明により可能とな
り、こうしてサルコシンオキシダーゼによるサルコシン
測定及びこの測定を介してクレアチン及びクレアチニン
の測定も実地に使用可能な形にすることを可能とした。
活性剤及び安定化剤の存在においては開始時には同様に
混濁が生じるが、この混濁は測定範囲内に留まり、約４
０分後にはもはや上昇しない。こうして、サルコシン、
クレアチン又はクレアチニンの測定のために十分に長く
保持可能な試薬を製造することが本発明により可能とな
り、こうしてサルコシンオキシダーゼによるサルコシン
測定及びこの測定を介してクレアチン及びクレアチニン
の測定も実地に使用可能な形にすることを可能とした。
実施例
次に実施例につき本発明の詳細な説明する。
例１
安定化剤の製造
平均分子量１００００．２００００、
４００００及び５０００００の可溶性デキストラン〔ロ
ート（Ｒｏｔ、ｈ）社、カールスルーエ〕をｐＨ１０，
６でブロムシアンと反応させる。
ート（Ｒｏｔ、ｈ）社、カールスルーエ〕をｐＨ１０，
６でブロムシアンと反応させる。
このためにはデキストラン１２０ｇを水１２１中に浴か
し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液でＰＨ１０，＜５に調
節する。攪拌下にブロムシアン３６〜６０ｇを１２ｇず
つ配合物中に４０分かけて添加した。この際、−値を２
Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液の添加によりＰ）′１１０
．６に保持する。水酸化ナトリウム水溶液がもはや消費
されなくなる時、活性化反応は終了する。
し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液でＰＨ１０，＜５に調
節する。攪拌下にブロムシアン３６〜６０ｇを１２ｇず
つ配合物中に４０分かけて添加した。この際、−値を２
Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液の添加によりＰ）′１１０
．６に保持する。水酸化ナトリウム水溶液がもはや消費
されなくなる時、活性化反応は終了する。
得られた透明な溶液を２モル／ｌ塩酸でＰｌ″１８に調
節する。得られた活性化デキストランを２０℃で２時間
水に対して透析する。市販の凍結乾燥した形のクレアチ
ンアミジノヒドロラーゼ（４，２０／〜；蛋白質０．５
４ｍｇ／■凍結乾燥物質＞ ４４．４ ｇ（酵素蛋白質
約２４ｇに相応）を２０ミリモル／ｌ燐酸塩緩衝液、−
８，０，２５０ａ中に溶かし、同じ緩衝Ｗ２Ｏ１に対し
て透析する。このようにして得られた酵素溶液を前記の
ようにして製造された活性化デキストランの溶液と合し
、室温でゆっくりと１６時間攪拌する。得られたデキス
トラン−酵素複合体を０．０４モル／ｌ、クエン酸ナト
リウム緩衝液、ｐＨ５，８に対して６時間透析した。次
いでラフィノース２４ｇを添加し、該溶液を透明に濾過
し凍結乾燥する。使用した酵素活性の８０％が凍結乾燥
物質中に見られる。
節する。得られた活性化デキストランを２０℃で２時間
水に対して透析する。市販の凍結乾燥した形のクレアチ
ンアミジノヒドロラーゼ（４，２０／〜；蛋白質０．５
４ｍｇ／■凍結乾燥物質＞ ４４．４ ｇ（酵素蛋白質
約２４ｇに相応）を２０ミリモル／ｌ燐酸塩緩衝液、−
８，０，２５０ａ中に溶かし、同じ緩衝Ｗ２Ｏ１に対し
て透析する。このようにして得られた酵素溶液を前記の
ようにして製造された活性化デキストランの溶液と合し
、室温でゆっくりと１６時間攪拌する。得られたデキス
トラン−酵素複合体を０．０４モル／ｌ、クエン酸ナト
リウム緩衝液、ｐＨ５，８に対して６時間透析した。次
いでラフィノース２４ｇを添加し、該溶液を透明に濾過
し凍結乾燥する。使用した酵素活性の８０％が凍結乾燥
物質中に見られる。
例２
試薬を一緒に混合して、クレアチニンの測定用試薬とし
て好適であり、水溶液として次の組成を示す安定化サル
コシンオキシダーゼ組成物を製造する： サルコシンオキシダーゼ ６．５Ｕ／ｍＪクレア
チンアミジノヒドロラーゼ 一デキストラン複合体 １２Ｕ／ｍｌクレ
アチンイミドヒドロラーゼ ２５Ｕ／ｍＪペルオ
キシダーゼ ２Ｕ／ｍｌカンジダ・
シリンドラセア（Ｃａｎｄｉｄａｃｙｌｉｎｄｒａｃｅ
ａ）からのコレステリンエステラーゼ
２Ｕ／ｍｌ燐酸カリウム緩衝液、ｐＨ７，９１
５０ミリモル／ｌルチンゾール０Ｎ５Ｑ［Ｆ］
０．３％２．４．６−）リプロム−６− ヒドロキシ安息香酸 ８．６ミリモル／ｌコ
ール酸ナトリウム ５ミリモル／ｌティ
トリプレックス（Ｔｉｔ、ｒｉｐｌｅｘ） １０．５ミ
リモル／ｌ ナトリウムアジド ０．２％に
４Ｆｅ（ＣＮ）６ １０マ
イクロモル／ｌ前記試薬を凍結乾燥する。水で復元する
際に視覚的クレアチニン測定のために少なくとも２日間
使用可能な溶液が得られる。
て好適であり、水溶液として次の組成を示す安定化サル
コシンオキシダーゼ組成物を製造する： サルコシンオキシダーゼ ６．５Ｕ／ｍＪクレア
チンアミジノヒドロラーゼ 一デキストラン複合体 １２Ｕ／ｍｌクレ
アチンイミドヒドロラーゼ ２５Ｕ／ｍＪペルオ
キシダーゼ ２Ｕ／ｍｌカンジダ・
シリンドラセア（Ｃａｎｄｉｄａｃｙｌｉｎｄｒａｃｅ
ａ）からのコレステリンエステラーゼ
２Ｕ／ｍｌ燐酸カリウム緩衝液、ｐＨ７，９１
５０ミリモル／ｌルチンゾール０Ｎ５Ｑ［Ｆ］
０．３％２．４．６−）リプロム−６− ヒドロキシ安息香酸 ８．６ミリモル／ｌコ
ール酸ナトリウム ５ミリモル／ｌティ
トリプレックス（Ｔｉｔ、ｒｉｐｌｅｘ） １０．５ミ
リモル／ｌ ナトリウムアジド ０．２％に
４Ｆｅ（ＣＮ）６ １０マ
イクロモル／ｌ前記試薬を凍結乾燥する。水で復元する
際に視覚的クレアチニン測定のために少なくとも２日間
使用可能な溶液が得られる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、水溶性多糖類に共有結合したクレアチンアミジノヒ
ドロラーゼを含有することを特徴とする安定化サルコシ
ンオキシダーゼ組成物。 ２、多糖類がデキストランである特許請求の範囲第１項
記載のサルコシンオキシダーゼ組成物。 ３、界面活性剤を含有している特許請求の範囲第１項又
は第２項記載のサルコシンオキシダーゼ組成物。 ４、ブロムシアン又はトリクロルトリアジンで活性化し
たデキストランに結合しているクレアチンアミジノヒド
ロラーゼを含有している特許請求の範囲第１項から第３
項までのいずれか１項記載のサルコシンオキシダーゼ組
成物。 ５、クレアチニンアミドヒドロラーゼ、緩衝剤及びＨ＿
２Ｏ＿２測定システムを含有する特許請求の範囲第１項
から第４項までのいずれか１項記載のサルコシンオキシ
ダーゼ組成物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3515586.8 | 1985-04-30 | ||
| DE19853515586 DE3515586A1 (de) | 1985-04-30 | 1985-04-30 | Stabilisiertes sarcosinoxidase-praeparat |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61249389A true JPS61249389A (ja) | 1986-11-06 |
| JPH0236228B2 JPH0236228B2 (ja) | 1990-08-16 |
Family
ID=6269503
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61097026A Granted JPS61249389A (ja) | 1985-04-30 | 1986-04-28 | 安定化サルコシンオキシダ−ゼ組成物 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4950609A (ja) |
| EP (1) | EP0201805B1 (ja) |
| JP (1) | JPS61249389A (ja) |
| KR (1) | KR890004090B1 (ja) |
| AT (1) | ATE45979T1 (ja) |
| DD (1) | DD244763A5 (ja) |
| DE (2) | DE3515586A1 (ja) |
| ES (1) | ES8802443A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6460380A (en) * | 1987-08-31 | 1989-03-07 | Wako Pure Chem Ind Ltd | Stabilization of enzyme |
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| JP3125428B2 (ja) * | 1991-03-28 | 2001-01-15 | 和光純薬工業株式会社 | 修飾酵素 |
| US6274369B1 (en) * | 1996-02-02 | 2001-08-14 | Invitrogen Corporation | Method capable of increasing competency of bacterial cell transformation |
| AU2590997A (en) | 1996-03-29 | 1997-10-22 | Life Technologies, Inc. | Method for increasing viability and transformation efficiency of bacteria during storage at low temperatures |
| DK1005529T3 (da) | 1997-02-12 | 2005-06-13 | Invitrogen Corp | Fremgangsmåder til lyofilisering af kompetente celler |
| US6451572B1 (en) | 1998-06-25 | 2002-09-17 | Cornell Research Foundation, Inc. | Overexpression of phytase genes in yeast systems |
| BR0009516B1 (pt) * | 1999-03-31 | 2013-09-10 | vetor recombinante e célula hospedeira microbiana. | |
| US6841370B1 (en) | 1999-11-18 | 2005-01-11 | Cornell Research Foundation, Inc. | Site-directed mutagenesis of Escherichia coli phytase |
| US20030091971A1 (en) * | 2001-09-14 | 2003-05-15 | Invitrogen Corporation | Composition for stabilizing biological materials |
| EP1450627B1 (en) * | 2001-10-31 | 2012-09-05 | Phytex, Llc | Use of phytase containing animal food |
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| EP1405907A3 (en) * | 2002-07-22 | 2004-10-13 | Roche Diagnostics GmbH | Conjugate of a tissue non-specific alkaline phosphatase and dextran, process for its production and use thereof |
| CA2925807C (en) * | 2002-09-13 | 2020-09-15 | Cornell Research Foundation, Inc. | Using mutations to improve aspergillus phytases |
| US7919297B2 (en) | 2006-02-21 | 2011-04-05 | Cornell Research Foundation, Inc. | Mutants of Aspergillus niger PhyA phytase and Aspergillus fumigatus phytase |
| US8540984B2 (en) * | 2006-08-03 | 2013-09-24 | Cornell Research Foundation, Inc. | Phytases with improved thermal stability |
| US8192734B2 (en) | 2007-07-09 | 2012-06-05 | Cornell University | Compositions and methods for bone strengthening |
| GB201712592D0 (en) * | 2017-08-04 | 2017-09-20 | Imp Innovations Ltd | Novel compositions and uses thereof |
| KR102765277B1 (ko) * | 2019-10-31 | 2025-02-11 | (주)아모레퍼시픽 | 성상 변화 화장료 조성물 |
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| US4229537A (en) * | 1978-02-09 | 1980-10-21 | New York University | Preparation of trichloro-s-triazine activated supports for coupling ligands |
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| DE3126759A1 (de) * | 1981-07-07 | 1983-01-27 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Loesliche leber-uricase, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung |
| DE3326888A1 (de) * | 1983-07-26 | 1985-02-14 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Sarcosin-oxidase |
| DE3411997A1 (de) * | 1984-03-31 | 1985-10-17 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Neue redox-indikatoren |
-
1985
- 1985-04-30 DE DE19853515586 patent/DE3515586A1/de not_active Withdrawn
-
1986
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Cited By (1)
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