JPS59116531A - 組織試料薄切片の移行マウント方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、組織染色およびマウント前の、テープに支持
された、特にこわれやすい組織試料の薄切片の取扱い方
法に関し、さらに詳しくは、前記工程のために顕微鏡用
スライド上に前記切片を確実、安全に移行およびマウン
トするに際しこれを迅速、簡単とするための方法に関す
る。

種々の顕微鏡的研究のために、動物および植物組織の非
常に薄い切片が各種のミクロトームで切断されて調製さ
れる。組織を生の捷ま切断することも可能であるが、生
の組織の多くはその柔軟性のため、ゆがみのない薄い切
片に切断することが非常に困難である。しばしば組織を
凍結ミクロトーム上でまたは低温恒温装置内で０℃（３
２’Ｆ）以下の温度で切断する場合があり、組織内の凍
結水の硬さのため２〜３マイクロメートルもの薄い切片
を比較的容易につくることができる。これらの凍結切片
は脆く砕は易いためそれ以後の取扱いおよび処理が困難
である。組織切片の作成を簡単にするため、すぐれた切
断性を有し、高品質で取扱いの比較的容易な組織切片を
生ずる、支持された組織のノロツクを製造する一部の方
法が開発されている。。このような方法には、典型的に
は次の操作が含まれる：山絹繊細胞を構成する天然ポリ
マーを不溶化しこれ′ｆ：硬化させる浴液中での組織の
固定、（２）一連の、水と混合し得る溶媒（例えはアル
コール）、次でパラフィンまたはプラスチックモノマー
と混合し得る溶媒（例えはトルエンま／乙はキンレン）
による組織の脱水、（３）溶融パラフィンまたはモノマ
ー６液による組織への浸透、および（４）パラフィンの
凝固またはモノマーの重合による固体ポリマーの形成に
よる包埋。「Ｓｔａｉｎｉｎｇ］Ｖｉｅｔｈｏｄｓ　（
組織染色法）　Ｊｌ　（Ｊ、Ｆ、Ａ、　ＭｃＭａｎｕｓ
　　およびＬ　ｗ、　Ｍｏｗｒｙ著、Ｐ、Ｂ、　Ｈｏｅ
ｂｅｒ社、ニューヨーク、１９６０年）およびＷ　Ｔｅ
ｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｆｏｒ　ＥｌｅｃｔｒｏｎＭｉｃｒ
ｏｓｃｏｐｙ　（電子顕微鏡技７１　）　Ｊｌ　（Ｄ、
　Ｋａｙ編、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ　Ｓｃｉ、　Ｐｕｂｌ
、社、オックスフオート、イギリス）第１６６〜２１２
頁参照。

しかし時には切片作成がやはり困難な試料がある。切片
を組織から切断する場合に切片の一部がばらばらになっ
て切片から脱落したシ、ミクロトームから取去る場合に
切片から落ちたりし易い。

このような切断の難しい切片の切断および取扱を容易に
するための方法を記載した次の文献を参考として引用す
る； １、　　Ａ、Ｐａｌｍｇｒｅｎ　　（ネイチャー（Ｎａ
ｔｕｒｅ　）、第１７４巻、第４６頁（１９５４年）〕
は非常に大形で硬い、ｌたは脆い試料切断用の補助材と
して感圧接着テープを使用することを述べている。接着
テープの一片を、ミクロトーム内に支持された、凍結ま
たはパラフィンブロック内に包埋された試料の表面に貼
る。切断された切片はこれにより貼らたテープで支持さ
れる。このようにして調製した、硬くて脆く砕は易い組
織の圧縮されていない切片の品質は、同じ組織のプＯツ
クからの常法による切片よりはるかにすぐれたものとす
ることができる。

しかしＰａｌｍｇｒｅｎ　　によれば、前記切片をテー
プ上にある４、Ｘで処１：Ｊｊ　シたり、スライドガラ
ス上に転位したり（それ以後常法によって処理し借るよ
うにするため）するには、手の込んだ、時間かか＼９１
だ不便な手法が必要で、これにより切片か損傷を受ける
恐れもある。

２、ＡＶ、Ｅ、　Ｂｅｃｌ＜ｅｌ　（ネイチャー、第１
８４巻、第１５８４頁（１９５９年）〕は前記Ｐａ１ｍ
ｇｒｅｎ記載の方法において商品名スコッチ（Ｓｃｏｔ
ｃｈ）　Ａ　８１０　　の酢酸セルロース下地の接着テ
ープの使用について述べている。テープに載せた切片は
、湿った常法でアルブミンを塗布したスライドガラス上
に切片側を下にして当てる。充分乾燥後（少くとも２〜
３時間を要する）、接着剤の下地、接着剤層およびパラ
フィンをすべてテトラヒドロフランに３０分間θ角イす
ると切片のみかスライドガラスに接ン音して残シ以後常
法によって処理することかできる。別の方法として、ク
ロロホルムで２分間、次でキシンンで３０分間の処理も
接危剤下地、接着剤層およびパラフィンの溶解に使用す
ることができる。

１３ｅｃｋｅｌ　　ばまた、アルブミンのフィルムと、
セロイジン（、ｃｅｌｌｏｉｄｉｎ　）の安息香酸メチ
ル捷たはエチルアルコール２パーセント溶液を使用して
切片とスライドガラスとを接合し、次でクロロホルムで
１分間、キ７レンで１０分間処理して処理を完了する「
より迅速な方法」を記述している。

３、　　Ｄ、Ｓ、ＧｏｗｅｒｓおよびＲ，Ｅ、　Ｍｉｌ
ｌｅｒ　（ネイチャー、第１９０巻、第４２５頁（１９
６１年）〕はＢｅｃｋｅｌ　の方法を追試したが、入手
し得るスコッチ扁８１０テープでは接着剤を溶解するこ
とができず、それに代る入手し得る最良のテープ〔商品
名　タック（Ｔｕｃｋ）　Ａ　２００：］を使用した場
合、溶媒中で切片を損傷せずにテープを安全に除去する
には１〜１０時間を要することを見いだした。

４、　　Ｒ，Ｐ、　　Ｗｅｄｅｅｎ　およびＨ，１，Ｊ
ｅｒｎｏｗ　　ＣＡｍ、　Ｊ　。

Ｐｈｙｓｉｏｌ、、紀２１４巻、第７７６頁（１９６８
年）は接着テープで支持した凍結切片をオートラジオグ
ラフ（写真）用プレートに付着させるのにシアノアクリ
レート（イーストマン９１０“スーパーグルー″）（Ｅ
ａｓｔｍａｎ　９１０　”　ｓｕｐｅｒｇｌｕｅ　”　
）を使用した。／アノアクリレートは最初液体であるが
、絞シ出して薄膜にすると重合固化する。シアノアクリ
レートポリマーはキ７レンその他の処理溶媒に可溶であ
りこのため切片は離れて浮いてし捷うので、通常の染色
操作には有用でない。

本発明は、少くとも部分的に、接着テープに支持された
組織切片を迅速で便利な方法により、永久的結合によっ
て顕微鏡用スライドにマウントする方法であって、その
結合材料はか＼る試料に対して以後加えられる処理工程
のいずれにも影響されず甘たそれらを妨害せず、捷だそ
の後の完全処理試月の顕微鏡観察を妨害しないようなも
のでらる方法に戊ｊする。

テープに載せた組織切片試料の処理の時間を知縮しこれ
を簡牟化するという従来得られなかった利点を獲得する
／ζめ、本発明により、可撓性の感圧接着テープの一片
上に支持された組織試料を、さらに重合可能な感圧接着
剤の皮膜を接触面上に被覆しグζ顕微鏡用スライドと接
触させる方法が提供される。切片作成の補助手段として
、前記試料に可撓性テープを貼る技法は、例えば前・−
記の、それぞれＰａｌｍｇｒｅｎ　、　　１３ｅｃｋｅ
ｌ、ＧｏｗｅｒｓらおよびＷｅ　ｄ　ｅ　ｅ　ｎ　　ら
の文献に記載されている。試料切片を重合性の層に接触
させた後その層を１〜３分間で重合させ、テープを支持
テープの下地および（４たけ）支持テープ接着剤層を弱
める溶媒中に浸漬すると、これらは洗い去られまたはは
がれ落ちて１分間以内に組織試料が完全に露出する。重
合性の層およびその切片への結合は硬化後は、不溶性の
テープ下地を切片に損傷を与えずにはく離し、その後試
料を顕微鏡用スライド上に強固に支持するに十分な強度
を有する。

重合性の層はさらに、以下の性質をもつ硬化性成分のみ
を含有するという特徴を有している。すなわち、前記硬
化性成分は、それぞれの硬化ｍ１および硬化中の拡散係
数が充分に小さく、従って硬化過程中の試料内への成分
の拡散が最小となり、また粘度が充分に大きく、従って
指圧を加えた場合の試料中への流入が最小、すなわち３
０分間で１マイクロメートル以下であるという特徴を有
している。しかし硬化すると、前記の層は顕微鏡用スラ
イＩ・と試イ′」切片との間に確実な結合を形成し、支
持された切片の以後の処理の際の取扱い全容易にする。

切片内への拡散および流入が最小であるので組織切片の
内部構造は実質的に全部か、次の処理を受けやすい状態
の一４ｓである。丑だ、重合後の結合層は前記の処理に
より側管影響を受けない。

重要なこととして、重合した層は未染色の組織の屈折率
（例えば約１．５３ないし１．５７　）に合った、−ま
た処理終了後に試料ｆ：封入しその上にカバーグラスを
イ勺するのに通常使用するマウント用媒体に合った屈折
率を有する。通常、試料はその特定の成分を際立たせる
ため処理の間に染色する。完成した顕微鏡用スライドの
各種の成分それぞれの屈折率が実質的に同じであるので
、後に組織を顕微鏡で検鏡する場合に像を悪化させるよ
うな光学的干渉は生じない。

従って本発明は、感圧重合性層によって組織を顕微鏡用
スライドに確実に付着させ、この層の硬化性成分は重合
前および重合中に極めて僅かしか試料中に浸透せず、か
つ重合後（ｄ試料の屈折率に合った屈折率を有し、支持
された組織を後に化学的または物理的に処理する場合、
これら処理の影響を受けず１だこれらに影響もしないも
のである方法を提供する。

第１図に示すように、パラフィン（１０）によって囲ま
れ浸透された組織薄切片（９）を感圧接着剤層α→によ
り可撓性テープまたは基体（１つの表面上に支持しこれ
に＋１着させる。切片（９）は層αΦに付着させたスペ
ーサμ３）の窓または開口部内に位置している。

１９８２年３月４日出願の米国特許出願第０６７３５４
，８３７号明細書に記載の如く、スペーサ（１３）はミ
クロトームによる薄切片（９）の切断を容易にする。

第２図において、顕微鏡用スライド（１時が図示され、
これはその上面に感圧接着剤層０８）を支持している。

層０８）は熱硬化性の重合性材料か光重合性材料かのい
ずれかから成ることができる。好捷しくけ層Ｃｌ８）は
、例えば３２０ｎｍ　〜３９０ｎｍ範囲の波長の紫外線
に露光することによシ光重合可能である。第２図（ｄ　
捷た、試料（９）と層（１８）が並置されるようテープ
（１２を倒置した状態を示す。次に試料と層（１８）と
を接触させる。軽い圧力を、例えば手で、加えることが
好にしい。′−！、たこの圧力は、試料（９）と層０８
）との間の接触を円、（Ｈ７にするため、試料に沿って
漸次（／Ｃ加えることもできる。

ＪＶｒ　Ｌｌｇ）は好捷しくは次の」る徴を有するよう
に形成される： １、重４＝　ＡｉＪ＋ｄ試料（９）に接着するに光分な
粘着性を有する。

２、試料（９）とスライド００との間に永久的結合を形
成するよう、重合性である。

３、層（１８）の重合前に組織切片（９）内に３０分間
で１マイクロメーターも拡散する程拡散係数の大きな硬
化性成分を含有しない。もしこのような成分が相当量拡
散したとすれば、硬化後これによって、以後の処理にお
ける試料切片（９）全体への処理試薬の浸透が妨げられ
るであろうことは明かである。

４、試料切片（９）との接触の際、捷たなでつけ操作に
おいて圧力を加えている間に切片（９）の細孔内に流入
しないよう、十分に大きな粘度を有すること。もし切片
内に相当量が流入すれば、これも捷た硬化後、それ以降
の処理の妨げになるであろう。

５、硬化後は、試料切片（９）が以後の処理中に遭遇す
る試薬のすべてに不溶性、非膨潤性である。′６、未染
色組織の屈折率および、試料（９）を顕微鏡用スレイ１
ζ上に封入するのに通常使用されるマウント用妹体の屈
折率と合った屈折率例えば約１．５３ないし１．５７を
有する。

７、硬化後は、試料切片（９）の底面およびスライドα
・の対向面の両方に強固に結合するのに有効である。

従って、試料（９）を層０８）に接触させなでつけた後
、得られた積層体（２０）は第３Ａ図に示す通シ、光源
（２１）からの紫外線に、層（１８）を完全に重合させ
るに充分な時間、典型的には３分間、露光する。光源（
２１）は４ワツト（またはそれ以上）のプラノクライト
けい光ランプ（けい光体のピーク光出力３５０１ｍのも
の）でよい。この時点で、層（１８）およ”びテ−プ（
１多」二の接危１Ｅｌ１層（］ゆ（これは重合しない）
は間にはさｌれ／こ試イ′斗（９）に強固に接着する１
、第：３１３図に示すように、積層体１２０）を次にビ
ーカー　（２４）内に入れ／こ溶媒溶液（２２）、例え
はキルン中に浸漬する。この浸漬はテープ（１り」二の
層（１徨を迅速に軟化させる役をし、積層体服がビーカ
ー（２４）内に浸漬している間に試Ｒｔ９）−ヒからテ
ープ０２を手で静かにはがせるようにする６、露出した
層０→およびパラフィン（１０）はテープ０りがはき取
られる際に、￥ｔたｄ：その後１分間以内に、溶解する
。試料切片（９）はこれで完全に露出する。層（１ゆが
溶解してし甘うと、残りの積層体にはいっでも以後の処
理を行なうことができ、試料切片（９）はスライｌ”　
（１５１の表面に強固に結合している。また、箔様溶液
（２２）は、前述のように基体（１２をはがす必要を無
くするため基体Ｏ２と接着剤層（］４）の両方を溶解し
佑るように選択してもよいことは明かである。

好１しくは、スライドα０上の層（１８）は非常に篩分
子茶の反応性オリゴマー（典型的には、それぞれが２個
の末端アクリルまたはメタクリル基を有するもの）の混
合物から成る。高分子昂により、高粘度と低拡散係数と
が確保される。分子量か高過ぎると粘着性が不十分であ
る。アクリル基丑たはツタクリル基の存在によって、オ
リゴマーはラジカル重合により架橋して高度に不溶性の
ポリマーとなる。

典型的には、混合物は硬化後の屈折率が１．５６０より
大きい一つのオリゴマー（例えば、屈折率を犬キ＜スる
ためにビスフェノールＡまたはその他の高度に芳香族性
の残基を多くしたエポキシ−アクリレートオリコマ−）
および硬化後の屈折率が１　、５３０より小さい別のオ
リゴマー（例えばウレタンアクリレートオリゴマー）か
ら横取される。硬化した樹脂は両方ともキルン中、アル
コールおよび水に対して非常に高い耐性を有しなければ
ならない。これらを適当な比率で混合することにより、
層０８）を重合した場合その硬化後の屈折率を所望の任
意の、１．５３０ないしｊ、５６０の値とすることがで
きる。

当業者が反応性オリゴマーおよび（寸たは）ポリマーと
他の開始剤および溶媒のその他の組合せ全配合して、１
ｊｉＪ記の方法における各条件をθもたすことかできる
ことは明らかである。しかし、層（１８）の形成に適当
な組成物の詳細な記述については、本願と同一日イリで
出願した、出願人および発明者同一の別出願の明細砺の
記載を参照されたい。

層（１８）の屈折率と、試料切片（９）ならびにスライ
ド００上に試料を封入するのに使用されるマウント用媒
体の両者の屈折率との調和は極めて重要である。

これらの屈折率か正しく調和されていないと、層０８）
の硬化した上面の表面欠陥のすべて、例えばさきに除去
した接着剤層（匈せたはハラフィン（１０ｊ上の肌理に
よって残った表面欠陥が顕微鏡検鏡の際に、目を混乱さ
れる、位相差による強度差の細い模様として観察される
であろう。従ってこれらの屈折率を正しく調和させると
非常に高品質に仕上った顕微鏡用スライドが得られる。

試料（９）封入用のマウント用媒体は好ましくは１．５
５　　付近の屈折率を、硬化後の層（１８）は１　、５
４５ないし１．５５５の屈折率を有する。

テープ（６）をほく離した後、露出した試料切片（９）
は慣用の組織学的技法によシ、貯蔵および永久封入のた
めに処理することができる。この処理の間、試料切片（
９）はすでに重合した層０８）によシスライト００に強
固に永久的に結合し、層（Ｌ８）は前記技法による処理
に影響を与えることも影響されることもない。ｉｉＪ記
封入操作は、例えば前記ＭｃＭａｎｕｓおよびＭｏｗｒ
ｙの著者に詳細に記載されているようにして手動で行な
うことができる。別の方法として、それぞれ個別のスラ
イド（１０上に支持した多数の組織試料切片（９）を自
動式に、例えばテクニコンインスツルメンツ社（Ｔｅｃ
ｈｎｉｃｏｎ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　Ｃｏｒｐｏｒ
ａｔｉｏｎ。

Ｔａｒｒｙｔｏｗｎ　、　Ｎｅｗ　ｙｏｒｋ）販売のオ
ートテクニコン（、ＡＵＴＯＴＥＣＩ（ＮＩＣＯＮ　）
ノステムに明確に示し記載されているように、またその
技術報文（ＴｅｃｈｎｉｃａｌＰｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ
　）　Ａ　ＴＡ　１−０２２５−１０　（１９７７年６
月）、３−１０ないし３−１３ページに記載されている
ようにして処理することができる。

第４図は、直ちに顕微鏡観察できるよう完全にマウント
した試料切片を示す。第４Ａ図は常法でマウノトシた試
料切片（９）を示す１、この試料はマウント用媒体（２
６）で拶われ、カバーグラス（２８）が前記媒体および
試ｑｑ　、Ｊ二に存在している。

−力、第４１３図は米国特許第４，１２０，９９１号明
細ル）、に開示された技法による、紫外線硬化性マウン
トト用媒体（２７）内への試料（９）の封入を小す。図
に示されるＪｌｏす、カバーグラスは無く、代りにマウ
ノト用媒体（２７）の上面が光学的に・ビ坦となるよう
形成されている。

水力法の目的に対しては、切片を捕捉するのに使用する
接着テープ（ｄ少くとも溶媒例えはキ／レンに可溶性の
Ｊｄ沼剤層を有しなけれはならない。

先に引用したＷｅ　ｄ　ｅ　ｅ　ｎ　　およびＪｅｒｎ
ｏｗ　が使用したような／リコーンゴム接着剤か凍結切
片に対し適当であり、ベルマセル（Ｐｅｒｍａｃｅｌ　
）　Ａ　９２５　　のような接着テープがパラフィン切
片作成に適当である。

組織試料の薄切片を顕微鏡用スライド上に移行する方法
のいくつかの形式について記述したがこの方法には、本
発明の原理から逸脱することなくその細部に種々の変更
を加え得ることは明らかである′）。

【図面の簡単な説明】

第１図は可撓性テープ寸たは基体の表面上に支持された
状態の組織薄切片を示す斜視図である。 第２図は顕微鏡用スライドとこれに並置した第１図の基
体とを示す斜視図である。 第３Ａ図は、基体と顕微鏡用スライドとの間に組織薄切
片が積層されるように両者を重ね合せたところを示す斜
視図である。 第３Ｂ図は組織切片を顕微鏡用スライド上にそれ以後の
処理のために露出させるため、スライド上から基体を取
り除くところを示す断面図である。 第４Ａ図は顕微鏡用スライド上に組織薄切片をカバーグ
ラスと共にマウントした最終的な状態を示す断面図であ
る。 第４Ｂ図は顕微鏡用スライド上にカバーグラスなしで組
織薄切片をマウントした最終的な状態を示す断面図であ
る。 ＦＩＧ、３Ｂ ＦＩＧ、４Ａ ＦＩＧ、４Ｂ 手　　続　　補　　正　　、」： 昭和５８年１２月１３日 特許庁　　長　　　官　　　殿 ｌ事件の表示　　　　昭和５８年特許願第１６７６９５
号３　補正をする者　事件との関係　　　特許出願ノ（
ザ、マウント、サイナイ、スクール、アヴ、メダスン４
　代　理　人　　東京都港区赤坂１丁目１番１４号・溜
池束急ビル５　補正命令の日付　　　　　　自　　　　
発６　補正により増加する発明の数 ７補正の対象　　　　明細書の特許請求の範囲８、補正
の内容　　　　　別紙のと　おりネｊｌ正の内容（鯖顧
昭５８−１６７６９５）ＩＪｊ細店に以下のとおり補正
を加えます。 １゜４カ許託求の範囲を以下のとおりに訂正し祉ず。 「２、特許請求の範囲 ｉｌｌ　　オーの感圧接着剤層によって基体上に支持さ
れた組織試料のイｔｉ７．切片を、オニの感圧接着剤層
によって一つの而の少くとも一部を接値された顕微鋭用
スライド上へ、前記基体から移行しマウントする力？去
でりっで、 前らビオ二の層としてのみ、重合性の感圧接着剤の層を
使い、たたしこの乗合性感圧接渚剤は重合前の拡散係数
が前記組織試料への拡散を実質的に防ぐのに充分に低く
一部た重合前の粘度が前記組織試オ→への流入を実質的
に防ぐのに充分に高いものとし、 前記支持された組織切片と前記ｌ・二の層とを接触さゼ
て、前記基体、前記オーの層、前記組織切片、前記オニ
の層および前記顕微鏡片スライドから成る積層体を形成
し、 前記オニのへン：を中合し、 前記オ一層を溶片１′するか重合した前記シ・二層は灼
解しない溶液中に前記積層体全浸漬して、前記基体とＡ
ｉＪ記オ一層とのＭｉＪ記絹織切片」二からの除去を容
易なものとし、次で 前記基体と前記オ一層とを除去して、前記萌微鏡用ヌラ
イｌ”　ｌ二に支持された前記組織切片をｊｔＡ出させ
ることから成る、ｎｓＪ記組織試伺助切片の移行マウン
１一方法。 （２）　　前記顕微鏡用スライト−ヒに支持芒れた前記
組織切片に、該組織試１を直ちに顕微鏡検鏡しＶ４）る
状態となるよう染色しマウントする処理を１〕なう、前
項（１］に記載の方法。 （３）　　前記除去工程が、前記基体と前記オ一層とを
前記溶媒中に実質的に完全に溶解する工程から成る、前
項（１）に記載の方法。 （４）　　前記基体が可撓性であり、そしてＭｉｌ記除
去工程が？１記組織切片」二から前記基体をはく離しｒ
Ｆｉ前記オ一層を浴解し去る工程から成る、１１Ｊ墳（
１）に記１１戊の方法。 ｉ５）　　ｔｌｊｌ記重合工程が前記オニ層を熱硬化す
る工程から成る、前項山に記載の方法。 （６）　　前記重合工程が前記オニ層を光重合する工程
から成る、ｉ′ｌＪ項山に記載の、方法。 （７）　　前記２・二層の重合の前に前記積層体に圧力
を加えて前記組織切片の前記オニ層への接着を確実なも
のとする、前項山に記載の方法。 （８）　　前記組織切片を前記オ一層上になでつけて両
者間の均一で完全な接触を確保する、前項（７）に記載
の方法。 （９）　　前記オニ層の屈折率を前記組織切片の皿上１
率と合わせる、前項山に記載の方法。 （１０）　　前記オニ層を重合後約１．５３ないし１．
５７の屈折率を有するように形成する、前項（９）に記
載の方法。 ＋１１１　　前記オニ層を、前記処理工程によって影響
を受けないように形成する、前項（２）に記載の方法。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　　第一の感圧接着剤層によって基体上に支持さ
   れた組織試料の薄切片を、該基体から、その一つの面の
   少くとも一部を第二の重合性感圧接着剤層によって被覆
   された顕微鏡用スライド上へと、移行しマウントする方
   法であって、 前記支持された組織切片と前記第二の層とを接触させて
   、前記基体、前記第一の層、前記組懺切片、前記第二の
   層および前記顕微鏡用スライドから成る積層体を形成し
   、 前記第二の層を重合し、 前記第一層を溶解する溶液中に前記積層体を浸漬して、
   前記基体と前記第一層との前記組織切片上からの除去を
   容易なものとし、次で 前記基体と前記第一層とを除去して、前記顕微鏡用スラ
   イド上に支持された前記組織切片を露出させる ことから成る、前記組織試料薄切片の移行マウント　方
   ｔクミ。 （２）　　前記顕微鏡用スライド上に支持された前記組
   織切片に、該組織試料を直ちに顕微鏡検鏡し得る状態と
   なるよう染色し載物することを含む処理を行なう工程を
   さらに含む、前項（１）に記載の方法。 （３）　　前記除去工程が、前記基体と前記第一層とを
   前記溶媒中に実質的に完全に溶解する工程から成る、前
   項（１）に記載の方法。 （４）前記基体が可撓性であシ、そして前記除去工程が
   ｉＩＪ記組織組織切片上前記基体をはく離し前記第一層
   を溶解し去る工程から成る、前項（１）に記載の方法。 （５）　　前記重合工程が前記第二層を熱硬化する工程
   から成る、前項（１）に記載の方法。 （６）　　前記重合工程が前記第二層を光重合する工程
   から成る、前項（１）に記載の方法。 （７）　　前記第二層の重合の前に前記積層体に圧力を
   加えて前記組織切片の前記第二層への接着を確実なもの
   とする工程をさらに含む、前項（１）に記載の方法。 ｊ８１　　前記加圧工程が、前記組織切片を前記第一層
   一ヒになでつけて両者間の均一で完全な接触を確保する
   工程から成る、ＡｉＪ項（７）に記載の方法。 （９）　　前記第二層の屈折率を前記組織切片の屈折率
   と合せる工程をさらに含む、Ａｉ１項は）に記載の方法
   。 （１０）　　前記屈折率を合せる工程が、前記第二層を
   重合後約１．５３ないし１．５７の屈折率を有するよう
   に形成する工程から成る前項（９）に記載の方法。 旧］　前記第二層を、重合前−！、たは重合中に前記組
   織切片内への著しい拡散を生ずるほど大きな拡散係数を
   有する硬化性成分を含有しないように形成する工程をさ
   らに含む、前項（１）に記載の方法。 αつ　前記第二層を、重合工程の繭重たはその間に前記
   組織切片への著しい流入を防止するに十分な高い粘度を
   有するように形成する工程をさらに含む、？Ｑ項山に記
   載の方法。 １３）　　前記第二層を、前記処理工程によって影響を
   受けないように形成する工程をさらに含む、前項（２）
   に記載の方法。 αゆ　前記第二層を、前記処理工程中に不活性であるよ
   うに形成する工程をさらに含む、前項（２）に記載の方
   法。