JPH11262385A - エチレングリコールを分解することができる微生物及びその使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 pH５の酸性条件下でエチレングリコールを分
解することができるシュードモナス属微生物及びそれを
使用したエチレングリコール分解法の提供。 【解決手段】 シュードモナスに属し、エチレングリコ
ールを分解する能力を有する微生物を変異処理し、変異
処理した菌体をエチレングリコール含有酸性培地にて集
積培養することにより目的とする変異株を得る。本発明
によれば、使用済ＬＬＣからの約５，０００ｍｇ／Ｌの
エチレングリコールを２日間で分解することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明はエチレングリコール
含有水、特に自動車エンジン用の使用済冷却液中のエチ
レングリコールの微生物的分解方法、及びそのための微
生物に関する。

【０００２】

【従来の技術】エチレングリコールは、比較的微生物に
よる分解が容易な物質であるため、今までに数１００pp
m 〜数１，０００ppm といった低濃度のエチレングリコ
ールを分解する微生物は数多く知られている。また、特
開平１−２１８６９７においては、１０，０００〜２
０，０００ppm といった高濃度エチレングリコールにつ
いての処理方法が記載されている。その記載によると光
合成細菌による高濃度エチレングリコールの浄化では、
浄化過程でグリコール酸が蓄積し、完全な浄化すなわち
エチレングリコールの分解が困難となる。

【０００３】そこで、それを回避するために酢酸塩、グ
リコール酸酸化酵素含有物を添加している。しかし、そ
れらを添加することによりランニングコストは高くなる
といった問題点が生じている。従って、高濃度エチレン
グリコール含有排水をグリコール酸が蓄積せずにしかも
低コストで短時間に処理可能な菌株および処理方法が求
められていた。

【０００４】また、自動車用エンジン冷却水は、主成分
がエチレングリコールであるが、その他トリエタノール
アミン等の防錆剤が含まれている。使用済み自動車用エ
ンジン冷却水は、通常３０〜５０％の高濃度エチレング
リコールが含まれ、アミン等の防錆剤や、エンジン部品
から溶出した鉄、アルミニウム等の金属分が含有される
こともある。使用済み自動車用エンジン冷却水の浄化微
生物に関しての報告例はなく、適正な処理方法が求めら
れていた。

【０００５】〔関連技術〕上記の課題を解決するため、
特願平９−１３１１５６号の明細書には、シュードモナ
ス属に属し、１０，０００ppm 以上のエチレングリコー
ル、特に使用済自動車用エンジン冷却水中のエチレング
リコールを効率よく分解することができる微生物、及び
該微生物を用いたエチレングリコールの分解法、特に使
用済自動車用冷却水（ＬＬＣ）の処理方法が開示されて
いる。しかしながら、使用済自動車用冷却水（ＬＬＣ）
を含む排水のpHは一般にpH５〜pH８の範囲内にあり、上
記のシュードモナス属微生物では、低pH域、例えばpH約
５においてもエチレングリコールが十分に分解できない
という問題点があった。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明は、自動
車エンジン冷却液を含む排水など、高濃度のエチレング
リコールを低pH条件下で処理することができる方法、及
びそのための微生物を提供しようとするためのものであ
る。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく種々検討した結果、エチレングリコール
を効率よく分解することができるシュードモナス属微生
物を、突然変異処理し、この変異処理された微生物か
ら、所望により低pH条件下で集積培養した後、低pH条件
下でエチレングリコールを分解することができる変異株
を分離することにより、目的とする微生物が得られるこ
とを見出し本発明を完成させた。

【０００８】従って本発明は、シュードモナス（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ）属に属し、少なくともpH５の酸性条
件下でエチレングリコールを分解することができる微生
物を提供する。好ましい微生物は、シュードモナス・プ
チダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ）であ
る。本発明はまた、上記の微生物を好気的条件下でエチ
レングリコールと接触せしめることを特徴とする、エチ
レングリコール含有水の処理方法を提供する。

【０００９】上記の微生物は、シュードモナス属に属
し、エチレングリコール分解能を有する微生物、例えば
シュードモナス・プチダを変異処理にかけ、好ましくは
それを低pH条件下で集積培養することにより、低pH条件
下でエチレングリコールを分解することができる変異株
を濃縮した後、低pH条件下でエチレングリコールを効率
よく分解することができる変異株を単離することにより
得られる。

【００１０】

【発明の実施の形態】本発明の変異株を得るために使用
する親株としては、シュードモナス属に属し、エチレン
グリコールを分解することができる微生物、特に高濃
度、例えば１０，０００ppm 以上の濃度のエチレングリ
コールを分解することができるものであればよく、すで
に存在する保有株の中から選択してもよく、又は新株を
分離したものであってもよい。

【００１１】本発明においては特に、本発明者らにより
新たに分離されたシュードモナス・プチダＮ−ＧＦ０５
５株及びシュードモナス・プチダＵ−ＴＣＨ０１１を挙
げることができる。この微生物の分離方法及び菌学的性
質は後に参考例１において具体的に記載する。これらの
微生物はエチレングリコールを１０，０００ppm 以上含
有する排水中のエチレングリコールを分解することがで
き、特に、自動車エンジン用冷却液の排水のごとく、ト
リエタノールアミン等の防錆剤や、エンジン部品から溶
出した鉄やアルミニウム等の金属の存在下でよくエチレ
ングリコールを分解することができる。

【００１２】上記シュードモナス・プチダＮ−ＧＦ０５
５及びシュードモナス・プチダＵ−ＴＣＨ０１１は、そ
れぞれ、ＦＥＲＭ ＢＰ−５９４７、及びＦＥＲＭ Ｂ
Ｐ−５９４８として、生命工学工業技術研究所に寄託さ
れている。変異処理は常法に従って、例えば物理的方法
又は化学的方法に従って行うことができる。物理的方法
としては、紫外線照射、Ｘ線照射等が用いられ、化学的
方法としては、変異原性化学物、例えば亜硝酸、Ｎ−メ
チルＮ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＭＮＮ
Ｇ）、エチルメタンスルホネート（ＥＭＳ）、アクリジ
ン系色素等が使用される。

【００１３】変異の発生率が高い等のためＭＮＮＧが特
に好ましい。具体的には、例えば、微生物研究法懇談会
偏、微生物学実験法、講談社（１９８２）：Fitt, p.s.
ら、Curr. Microbiolo, 18, 87-91 (1989); Hofherr,
L.A. ら、J. Pairy Sci, 66,2482-2487 (1983)等に記載
の方法により行うことができる。ＭＮＮＧ処理は、例え
ば、ＭＮＮＧ濃度１００μｇ、処理時間１〜２時間、pH
５〜６において行われる。

【００１４】変異処理した微生物から、低pH条件下でエ
チレングリコールを分解することができる変異株を選択
するには、変異処理した菌体を、低pH、例えばpH４．５
の、エチレングリコール含有寒天培地にプレーティング
し、生ずる耐酸性コロニーをピックアップして低pHの液
体培地中でのエチレングリコール分解能を試験すればよ
い。しかし、プレート上でのコロニーの形成に先立っ
て、変異処理した菌体を低pH条件下で集積培養すること
により、低pH条件下でエチレングリコール分解能を有す
る変異株を濃縮することができる。

【００１５】集積培養は、例えば、低pH、例えばpH５の
エチレングリコール含有培地に、変異処理した菌体を接
種して培養し、微生物の増殖を確認すればよい。集積培
養は複数代、例えば２〜７代にわたって行うこともでき
る。この場合には、集積培養培地中での菌体の増殖を確
認した後、その培養物の一部を取って次代の新しい集積
培養培地に接種し、再度培養を行い、微生物の増殖を確
認する。これを複数代にわたって行うことにより、低pH
条件下でエチレングリコールを分解する能力を有する変
異株を著しく濃縮することができ、次に行う寒天培地上
でのコロニー形成による選択を効率的に行うことができ
る。

【００１６】酸性寒天培地上にコロニーを形成した変異
株から酸性条件下でのエチレングリコール分解能が高い
変異株を選択するには、コロニーをピックアップし、そ
れを酸性、例えばpH５のエチレングリコール含有培地、
好ましくはエチレングリコールを唯一の炭素源とする液
体培地中で培養すればよい。この場合、微生物株のエチ
レングリコール分解能は、エチレングリコールを唯一の
炭素源とする液体培地での増殖能と相関することが知ら
れた。従って、液体培地中での菌体濃度を測定すること
により、エチレングリコール分解能を推定することがで
き、菌体濃度は、濁度（吸光度）の測定により行うこと
ができる。

【００１７】本発明によれば、例えば、エチレングリコ
ール分解能を有するシュードモナス属微生物を、１００
μｇ／mlの濃度のＭＮＭＧにより１２０分間変異処理
し、pH５のエチレングリコール含有培地にて５回集積培
養し、寒天培地上でコロニー形成を行い、単離されたコ
ロニーについてpH５の液体培地でのエチレングリコール
分解能を試験したところ、pH５の酸性条件下でエチレン
グリコールを分解することができる変異株が、１回の試
行で４８株得られた。従って、本発明の変異株は、特定
の変異株に限定されるのではなく、本発明の開示に従え
ば、酸性条件下でエチレングリコールを分解する能力を
有する変異株を複数作出することができる。

【００１８】本発明の微生物は、常用の炭素源及び窒素
源の存在下、必要によりさらに無機塩やビタミン類等の
微量要素を含有する培地中で培養することができる。炭
素源としては、本発明の微生物が好んで資化する炭化水
素であればいずれでも使用できる。培地中の炭素源の濃
度は、炭素源の種類により異なるが、好ましくはたとえ
ば１〜３０ｇ／Ｌである。窒素源としては、無機窒素
源、たとえばアンモニウム塩、硝酸塩等を使用すること
ができ、有機窒素源としては、酵母エキス、ペプトン、
肉エキス等を使用することができる。

【００１９】窒素源の濃度はその種類により異なるが、
好ましくは０．１〜１．０ｇ／Ｌである。無機塩として
はカリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイ
オン、鉄イオン、マンガンイオン、コバルトイオン、ニ
ッケルイオン等の金属イオンと、硝酸イオン、硫酸イオ
ン、リン酸イオン等の陰イオンとから成る塩類が好まし
い。培養は好ましくは好気的に行われ、振とう培養ある
いは大規模の培養においては、通気・撹拌培養が好まし
い。培養温度は１０〜３７℃、特に３０℃付近が好まし
い。本発明の微生物は、少なくともpH５の酸性条件下で
エチレングリコールを分解することができる。特に、pH
５〜９の条件下で効率よくエチレングリコールを分解す
ることができる。

【００２０】本発明の排液処理方法の実施に当っては、
エチレングリコール含有排水、たとえば自動車エンジン
用冷却液の排液を含有する排水に、前記の微生物の培養
菌体を加えて、好気的条件下で培養すればよい。微生物
の培養菌体としては、上記のようにして培養した、菌体
を含む培養液であってもよく、又は培養液から分離した
培養菌体であってもよい。培養液から菌体を分離するに
は、常法により、例えば遠心分離、濾過凝集沈殿などに
よって行うことができる。処理すべき排水中のエチレン
グリコール濃度が１０，０００ppm より高い場合には、
水を添加して１０，０００ppm 程度まで希釈するのが好
ましい。

【００２１】処理すべき排液は、添加物を添加しないで
そのまま処理してもよいが、排水中に栄養分、例えば無
機物等が含まれていない場合には、それらを添加するの
が好ましい。例えば、自動車エンジン冷却液の排水の場
合、無機栄養源としてマグネシウムイオン、例えばＭｇ
ＳＯ₄ ・７Ｈ₂ Ｏ、リン酸イオン、例えばＫＨ₂ Ｐ
Ｏ ₄ 、鉄イオン、例えばＦｅＣｌ₃ ・６Ｈ₂ Ｏ、さらに
無機窒素源としてＮＨ₄ ＮＯ₃ 等を単独で、又は組合わ
せて添加するのが好ましい。少なくともリン酸塩ＫＨ₂
ＰＯ₄ 及び無機窒素源であるＮＨ₄ ＮＯ₃ を添加するの
が好ましい。

【００２２】好気的条件は、例えば小規模の処理におい
ては、振とうにより達成することができるが、工業的実
施においては、通気及び／又は撹拌により達成するのが
好ましい。排水の処理に当っては、あらかじめ前記の方
法により培養して得た培養物を培養液量に換算して、処
理すべき排水に０．５〜１０容量％、好ましくは１〜５
容量％で添加するのが好ましい。

【００２３】本発明の他の態様によれば、エチレングリ
コールを含有する排水を含む土壌の処理を行うことがで
きる。この方法においては、エチレングリコール排水を
含む土壌をほり起こし、これは前記のごとく培養して得
た培養液又は培養菌体を添加すればよい。添加量は、土
壌中に含まれるエチレングリコール量等により異るが、
土壌１kg当りおよそ培養液２００mlの比率である。

【００２４】

【実施例】次に、参考例及び実施例により本発明をさら
に具体的に説明する。参考例１．微生物の単離及び同定 本発明に関わる微生物は、自動車解体工場、排水処理
場、化学工場敷地内の土壌より以下の方法でスクリーニ
ングし、単離した。採取した土壌０．１ｇを２４ml容積
の試験管に入れた５mlの使用済み自動車用エンジン冷却
水（ＬＬＣ：LongLife Coolant)培地に接種し、３０℃
にて２〜３日間振とう培養した。

【００２５】この培地中には、エチレングリコールが約
３０，０００ppm 含まれている。その後、同培地に植え
継ぎ培養を継続した。５回目の培養終了後、培養液を適
宜希釈して、同培地に１．５％の寒天を加えた平板培地
に塗沫し、出現した微生物コロニーを単離し、この操作
を繰り返すことにより微生物を単離した。

【００２６】

【表１】

【００２７】単離した菌株を同液体培地で２日間培養
後、培養液を同液体培地に１／１００量接種し、３０℃
で振とう培養した。７日後、培養液１００μｌをエッペ
ンドルフチューブに移し、１５，０００rpm で５分間遠
心した。ガスクロマトグラフを用い、上清中のエチレン
グリコール量を測定した。こうして選抜された７日で約
３０，０００ppm のエチレングリコールを分解可能な２
種の菌株について形態学的及び生理学的な性質を調べ
た。その結果を表２に示す。

【００２８】

【表２】

【００２９】以上の結果から、文献（N.R. Krieg and
J.G. Holt, "Bergey's Manual of Systematic Bacterio
logy" Vol.1 (1984) Williams & Wilkins, J.G. Holt,
N.R.Krieg, P.H.A. Sneath, J.T. Staley and S.T. Wil
liams, "Bergey's Manual ofDetermination Bacteriolo
gy" Ninth Edition (1994) Williams & Wilkins, N.Zha
o, C. Qu, E. Wang and W. Chen Int. J. Syst. Bacter
iol., 45, 600 (1995), E. Yabuuti, Y. Kosako, H. Oy
aizu, I. Yano, H. Hotta, Y. Hashimoto, T. Ezaki an
d M. Arakawa "Microbiol. Immunol., 36, 1251 (199
2)) を参考に同定を行った結果２株ともシュードモナス
・プチダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ．ｐｕｔｉｄａ）と
同定し、各々Ｎ−ＧＦ０５５及びＵ−ＴＣＨ０１１株と
命名した。

【００３０】参考例２．エチレングリコール分解能と菌
体濃度との関係 耐酸性変異株のスクリーニングを行うに先立って、菌体
の増殖の指標である菌体濁度（ＡＤＳ）とエチレングリ
コール分解率との関係を調べた。自動車用エンジン冷却
水（ＬＬＣ）中に含まれる炭素源はほとんどエチレング
リコールであり、菌体は一定の収率でエチレングリコー
ルを分解・同化して増殖することから、エチレングリコ
ール分解率と菌体濁度（ＡＤＳ）とは比例関係にあると
推定される。

【００３１】そこで、親株シュードモナス・プチダ Ｕ
ＴＣＨ０１１（ＦＥＲＭ ＢＰ−５９４８）をpH７のＬ
ＬＣ培地で培養し、経時的に菌体濁度とエチレングリコ
ール分解率を測定し、両者をプロットしたところ、図１
に示す通り、良好な比例関係を示した。従って、スクリ
ーニングの過程でエチレングリコール分解能を測定する
には、エチレングリコールの分解に代えて簡便な菌体濁
度の測定が有効であることが判明した。

【００３２】なお、本発明の参考例及び実施例におい
て、エチレングリコール含有培地として、０．１ｇ／Ｌ
のＭｇＳＯ₄ 、１．０ｇ／ＬのＫＨ₂ ＰＯ₄ 、０．０１
ｇ／ＬのＦｅＣｌ₃ 及び０．５ｇ／ＬのＮＨ₄ ＮＯ₃ を
含有する無機培地に、使用済ＬＬＣを１／１００量（ｖ
／ｖ）添加して、任意のpHに調製したものを使用し、こ
れをＬＬＣ培地と称する。使用済ＬＬＣは約３０％のエ
チレングリコールを含有している。

【００３３】実施例１．耐酸性変異株の作出 シュードモナス・プチダ Ｕ−ＴＣＨ０１１（ＦＥＲＭ
ＢＰ−５９４８）をpH５．０のＬＬＣ培地で３０℃に
て３日間培養し、培養菌体を得、１００μｇ／mlのＭＮ
ＮＧ濃度にて１２０分間、pH５の無機塩培地（表１に記
載した組成において、使用済ＬＬＣを添加しないもの）
中でＭＮＮＧ処理を行った。変異処理した菌体をpH５の
ＬＬＣ培地に接種し、３０℃にて振とう培養することに
より集積培養を行った。培養の経過の１例を図２に示
す。菌の増殖が確認された後、その一部分を取って、次
代の集積培養培地（pH５のＬＬＣ培地）に１％の量で接
種し、２代目の集積培養を行った。これを５日行った場
合の菌体の増殖経過を図３に示す。

【００３４】次に、５回の集積培養質の培養物を、pH７
のＬＬＣ培地に１．５％の寒天を添加した固体培地にプ
レートし、３０℃にて３日間培養してコロニーの形成を
行わせたところ、４８株（処理菌数に対して約１０^-7；
１千万個に１個）の目的とする変異株が得られた。これ
ら４８本の変異株と親株とをpH５のＬＬＣ培地で３０℃
にて７日間振とう培養したところ、親株の菌体濁度（Ａ
ＤＳ）が約２００にとどまったのに対して、４８本の変
異株はすべて約７００の菌体濁度に達した。なお、代表
的な変異株ＴＣＭ０１は平成１０年３月１２日にＦＥＲ
Ｍ Ｐ−６２９２として工業技術院生物工学工業技術研
究所に寄託された。

【００３５】実施例２．ＬＬＣ培地中のエチレングリコ
ールの分解 実施例１において得た４８株の変異株の内の１株（ＴＣ
Ｍ０１と称する）（ＦＥＲＭ Ｐ−６２９２）と親株と
をpH５のＬＬＣ培地で３０℃にて振とう培養した。菌体
の増殖、エチレングリコール残有率及び培地のpHの経時
変化を図３に示す。培地のpHは培養の開始後約１日の間
に上昇した。これは培地中の炭酸イオンがガスとして放
出されたためと考えられる。

【００３６】およそ１日後から菌の増殖が始まり、親株
では、菌の増殖に従って培地のpHが低下し、pHが４まで
低下した時点でＡＤＳ約２０で増殖が停止し、それとと
もにエチレングリコールの分解も停止し、エチレングリ
コールの残存率は８０％以上（分解率２０％未満）であ
った。これに対して、変異株では１〜３日までpHは低下
したがそれ以後は上昇に転じ、菌体の増殖も良好であり
ＡＤＳ約７００に達し、エチレングリコールは７日間で
１００％分解された。

【００３７】実施例３．３Ｌ規模でのエチレングリコー
ルの分解 ＬＬＣ培地３Ｌをフラスコに入れ、これにＬＬＣ培地に
培養した変異株ＴＣＭ０１（ＦＥＲＭ Ｐ−６２９２）
又は親株の培養物１％を接種し、３０℃にて、通気培養
した。菌体濁度（ＡＤＳ）及びエチレングリコール濃度
を経時的に測定した結果を図４に示す。変異株の菌体濁
度は２日間の培養で約ＡＤＳ約８００に達し、１００％
のエチレングリコールが分解された。他方、親株では、
培養途中で増殖が停止し、半分以上のエチレングリコー
ルが分解されずに残存した。

【００３８】実施例４．固定化菌体によるエチレングリ
コールの分解 耐酸性変異株ＴＣＭ０１（ＦＥＲＭ Ｐ−６２９２）を
pH５のＬＬＣ培地で培養し、培養液１０Ｌから集めた菌
体をポリビニルアルコール（ＰＶＡ）包括固定化法によ
り固定し、３７０mlの固定化菌体を得た。この固定化菌
体を３ＬのＬＬＣ培地に入れて３０℃にて通気・撹拌を
行ったところ、１日で３６００ppm のエチレングリコー
ルが分解した。ＰＶＡ包括固定化菌を用いることによ
り、浮遊菌体量（ＡＤＳで代表）は約１／１０に減少し
た。

【００３９】実施例５．エチレングリコール含有排水の
浄化 図７に示した装置を用いて自動車整備工場より採取した
使用済みＬＬＣを含んだ排水の１００Ｌスケールでの浄
化検討を行った。油水分離槽を通した排水を生物処理槽
へ１００Ｌ移し、耐酸性変異株ＴＣＭ０１（ＦＥＲＭ
Ｐ−６２９２）をポリビニールアルコール（ＰＶＡ）包
括固定化法により固定した固定化菌体１０Ｌ、ＫＨ₂ Ｐ
Ｏ₄ ：２２ppm 、ＮＨ₄ ＮＯ₃ ：１６５ppm を加え、１
００Ｌ／min のａｉｒで曝気した。

【００４０】１日後生物処理液を沈殿槽に移し、凝集剤
（四国化成工業製：Ｍ−１２７）を加え浮遊汚泥を沈降
させた。この沈殿槽の上澄みを消毒槽に移し、殺菌剤
（四国化成工業製：ボンシロール）を通した後、処理水
を分析した。この操作を計１２回継続して繰り返した。
処理水の分析結果を表３に示す。上記方法に従えば、自
動車整備工場より排出される使用済みＬＬＣを含んだ排
水を、pH調整を行うことなく環境基準値以下にまで浄化
可能であることが明らかとなった。

【００４１】

【表３】

【００４２】

【発明の効果】本発明によれば、pH５という低pHのエチ
レングリコール含有した、例えば使用済ＬＬＣ中のエチ
レングリコールを非常に効率的に分解除去することがで
きる。

【図面の簡単な説明】

【図１】菌体濃度とエチレングリコール分解率が比例す
ることを示すグラフである。

【図２】図２は、親株と変異処理した菌体について、pH
５のＬＬＣ培地での集積培養の経過を示すグラフであ
る。

【図３】図３は、変異処理した菌体をpH５のＬＬＣ培養
で５代にわたり集積培養した場合の経過を示すグラフで
ある。

【図４】図４は、本発明の耐酸性変異株と親株の低pH培
地での増殖、エチレングリコール（ＥＧ）分解率及びpH
の経過を示すグラフである。

【図５】図５は、本発明の耐酸性変異株と親株とを、３
Ｌ規模の培養における菌体の増殖とエチレングリコール
の分解について比較したグラフである。

【図６】図６は、本発明の耐酸性変異株をＰＶＡ包括法
により固定化して使用した場合のエチレングリコールの
分解を示すグラフである。

【図７】図７は、実施例におけるエチレングリコール含
有排水の浄化装置を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ｃ０２Ｆ 3/34 Ｃ０２Ｆ 3/34 Ｚ //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:40）

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
   ｓ）に属し、少なくともpH５の酸性条件下でエチレング
   リコールを分解することができる微生物。
2. 【請求項２】 シュードモナス・プチダ（Ｐｓｅｕｄｏ
   ｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ）である請求項１に記載の微
   生物。
3. 【請求項３】 請求項１又は２に記載の微生物を、好気
   的条件下でエチレングリコールと接触せしめることを特
   徴とする、エチレングリコール含有水の処理方法。