JPH11228512A

JPH11228512A - Ｄ−アロイソロイシンの製造方法および製造の中間体

Info

Publication number: JPH11228512A
Application number: JP3936598A
Authority: JP
Inventors: Hirobumi Noda; 博文野田; Kenichi Sakai; 健一酒井; Naomichi Murakami; 尚道村上
Original assignee: Yamakawa Industrial Co Ltd; Yamakawa Yakuhin Kogyo KK
Current assignee: Yamakawa Yakuhin Kogyo KK; Unipres Corp
Priority date: 1998-02-20
Filing date: 1998-02-20
Publication date: 1999-08-24
Anticipated expiration: 2018-02-20
Also published as: JP4138928B2

Abstract

(57)【要約】【課題】Ｌ−イソロイシンとＤ−アロイソロイシンと
のエピマー混合物を誘導体に変換することなく直接光学
分割することが可能であり、したがって簡単な工程で、
しかも高収率かつ高純度でＤ−アロイソロイシンを取得
することのできる方法を提供すること。【解決手段】Ｌ−イソロイシンとＤ−アロイソロイシ
ンとのエピマー混合溶物に、溶媒中で、式Ｉで示される
（２Ｓ，３Ｓ）−酒石酸誘導体を作用させ、【化５】（式中、Ｒは水素原子、Ｃ₁−Ｃ₃の低級アルキ
ル基、低級アルコキシ基、塩素原子、臭素原子またはニ
トロ基を表し、ｎは０，１または２である。）析出するＤ−アロイソロイシンと式Ｉで示される化合物
との錯体を溶液から分離し、分離した固体の錯体を分解
してＤ−アロイソロイシンを単離する。この分解は、
錯体を低級アルコール、好ましくは少量の水を含む低級
アルコールの中に入れるだけで可能である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、医薬とくに循環器
系薬（たとえばＷＯ９４／２８，９０１）製造の中間体
として有用な、Ｄ−アロイソロイシンの製造方法の改良
に関する。本発明はまた、その製造の過程で中間体と
して生成する新規な錯体をも包含する。

【０００２】この明細書の記述においては、酒石酸およ
びその誘導体の立体配置に関してはＲＳ表示法を用い
た。これは、ＤＬ（またはｄｌ）表示では混乱を生じ
やすく、古い時代には同じ異性体を、ある研究者はＤ体
とし、別の研究者はＬ体とした例があるからである。
アミノ酸に関しては、このような問題がないので、便宜
的なＤＬ表示によった。

【０００３】

【従来の技術】Ｄ−アロイソロイシンすなわち式IIの
（２Ｒ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチルペンタン酸
は、

【０００４】

【化２】

【０００５】必須アミノ酸の一種であるＬ−イソロイシ
ンの立体異性体であるが、これまで工業的に実施可能な
製造方法は知られていないため、きわめて高価である上
に、大量に入手することは困難であった。

【０００６】既知の製造方法のうち有力なものは２種あ
って、一つはアロイソロイシンのラセミ体を光学分割す
ることであり、いま一つは式IIIのＬ−イソロイシン

【０００７】

【化３】

【０００８】をエピメリ化して得られるエピマー混合物
から、Ｄ−アロ体を分離することである［たとえば、金
子武夫編『アミノ酸工業−合成と利用』講談社サイエン
ティフィック（1973）p.133 を参照］。ラセミ体の分
割は、Ｎ−アセチル誘導体をキニンを分割剤として実施
できることが知られている［W. A. Huffmann, A. W. In
gersoll,Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．, 73, 3366 (19
51) ］が、この方法ではＮ−アセチル体に誘導すること
が必要である上に、ラセミ体の入手からして容易ではな
い。

【０００９】これに対し、大量に生産されているＬ−イ
ソロイシンのエピメリ化は、比較的容易に実施できる
［たとえば、田辺製薬の特公昭６３−５５５０５号］。
しかし、既知のエピマー混合物の分割方法は、いずれ
もエピマー混合物を誘導体とした上で分割するものであ
って、エピマー混合物をそのまま分割する方法は知られ
ていない。すなわち、Ｎ−フォルミル体をメチルエチ
ルケトンから再結晶する方法［Dow Chemical, Ｂｒｉ
ｔ.７０４９８３ (1954)］、エピマー混合物をＺ−化ま
たはＢｏｃ−化し、光学活性α−フェネチルアミンとの
塩として溶解度差で分離する方法［G. Flouret, S. H.
Nagasawa, Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ． 40, 2635 (197
5)］、Ｎ−アセチル体を酵素を用いて不斉加水分解する
ことによりＬ−イソロイシンを除去し、残ったＮ−アセ
チル−Ｄ−アロイソロイシンを取得する方法［P. Lloyd
-Williams et al., Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．, Perkin T
rans. I, vol. 1994, 1969］などが報告されているが、
これらの方法によるときは、いずれにしても分割生成物
が誘導体として得られるのであって、所望の光学活性体
に至るまでには、さらに置換基の除去などの工程を必要
とし、煩雑で、実用的な製造方法とはいえない。

【００１０】一方、アミノ酸の光学分割はよく研究され
ているが、Ｎ−アシル体またはエステルなどの誘導体に
して分割することが多く、そのままで光学分割剤とのジ
アステレオマー塩として分割する例は少ない。光学分
割剤としては、酸性の強いスルフォン酸類、酒石酸ある
いはマンデル酸を使用する例がいくつか知られている
が、ロイシン、イソロイシンなどの中性脂肪族アミノ酸
での成功例はない。

【００１１】中性アミノ酸すなわちアミノ基とカルボキ
シル基以外の官能基をもたないアミノ酸をそのエステル
に誘導して、ジベンゾイル酒石酸またはその置換誘導体
を分割剤として光学分割した例は、いくつか知られてい
る。たとえば、アラニンのベンジルエステルは（２
Ｒ，３Ｒ）−ジベンゾイル酒石酸によって分割され、Ｄ
−アラニンとの塩が難溶性塩として析出する［W. Lange
nbeck, O. Herbst, Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．, 86, 1524(195
3)］。ロイシンのエチルエステルでは、これと同様
に、Ｌ−エステルと（２Ｒ，３Ｒ）−ジベンゾイル酒石
酸との塩が析出する［W. Langenbeck, G. Zimmermann,
Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．, 84,524(1951); G. Losse, H.Jesc
hkeit, Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．, 90,1275(1957)］。保護
基を与えてないアミノ酸類を、光学分割剤としてジベン
ゾイル酒石酸を用いて分割した例としては、リジンの分
割［F. J. Kearley, A. W. Ingersoll, Ｊ．Ａｍ．Ｃｈ
ｅｍ．Ｓｏｃ．, 73, 5783(1951)］とアスパラギンの分
割［E. Fogassy, M. Acs, J. Gressay, Ｐｅｒｉｏｄｉ
ｃａＰｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃａ, 20,179 (1976)］が報
告されている。しかし、アラニン、バリン、ロイシ
ン、イソロイシンなどの中性脂肪族アミノ酸をエステル
に誘導せず直接、ジベンゾイル酒石酸またはその置換誘
導体によって光学分割することは試みられていなかっ
た。

【００１２】発明者らは、Ｌ−イソロイシンをエピメリ
化して得られるエピマー混合物の光学分割によってＤ−
アロイソロシンを製造する方法の改良を意図して研究
し、エピマー混合物を誘導体に変えることなくそのまま
光学分割する方法を探索した結果、驚くべきことに、式
Ｉで表される（２Ｓ，３Ｓ）−酒石酸のＯ，Ｏ’−ジア
ロイルエステル類が、水、またはメタノール、エタノー
ルなどの低級アルコール類、またはそれらの混合溶液中
で、Ｄ−アロイソロイシンと難溶性の錯体をつくって析
出し、Ｌ−イソロイシンと容易に分離できることを見出
した。

【００１３】

【化４】

【００１４】式Ｉで表される化合物のＬ−イソロイシン
との錯体は、Ｄ−アロイソロイシンとの錯体に比べて溶
解度が著しく高く、したがって光学純度の高いＤ−アロ
イソロイシンとの錯体を固液分離によって取得し、ほぼ
定量的といってもよいくらいの収率で単離することがで
きる。

【００１５】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、上記
した発明者らの新しい知見を活用し、Ｌ−イソロイシン
とＤ−アロイソロイシンとのエピマー混合物を誘導体に
変換することなく直接光学分割することが可能であり、
したがって簡単な工程で、しかも高収率かつ高純度でＤ
−アロイソロイシンを取得することのできる方法を提供
することにある。

【００１６】

【課題を解決するための手段】本発明のＤ−アロイソロ
イシンの製造方法は、Ｌ−イソロイシンとＤ−アロイソ
ロイシンとのエピマー混合物に、溶媒中で、式Ｉで示さ
れる（２Ｓ，３Ｓ）−酒石酸誘導体を作用させ、

【００１７】

【化５】

【００１８】（式中、Ｒは水素原子、Ｃ₁−Ｃ₃の低級ア
ルキル基、低級アルコキシ基、塩素原子、臭素原子また
はニトロ基を表し、ｎは０，１または２である。）析出するＤ−アロイソロイシンと式Ｉで示される化合物
との錯体を溶液から分離し、分離した固体の錯体を分解
してＤ−アロイソロイシンを単離することからなる。

【００１９】上記した、本発明のＤ−アロイソロイシン
の製造に際して生成する中間体である、式Ｉの化合物と
Ｄ−アロイソロイシンとの錯体もまた、本発明の一部を
構成する。

【００２０】得られた式Ｉの化合物とＤ−アロイソロイ
シンとの錯体は、メタノール、エタノールなどの低級ア
ルコールに加えるだけで、分割剤である酒石酸−Ｏ，
Ｏ’−ジアロイルエステルを分離することが可能であっ
て、この操作により高純度のＤ−アロイソロイシンが結
晶として析出するから、簡単な精製操作によって純品と
することができる。

【００２１】

【発明の実施の形態】本発明の方法において出発原料と
して使用するＬ−イソロイシンとＤ−アロイソロイシン
とからなるエピマー混合物は、工業的に入手可能なＬ−
イソロイシンを常法により異性化することによって得ら
れる。イソロイシンにはアミノ基が結合している２−
位とメチル基が結合している３−位と、２個の不斉炭素
原子が存在するが、３−位の不斉炭素原子は通常の条件
ではまったく異性化せず、２−位の不斉炭素原子だけが
異性化して、Ｄ−アロイソロイシンとのエピマー混合物
が生成する。この異性化すなわちエピメリ化には、光
学活性アミノ酸類をラセミ化するときに常用される、す
べての方法が採用できる。具体的には、酸または塩基
触媒と混合して加熱すること、中性で必要に応じて加圧
を行い加熱すること、などである。イソロイシンの異
性化は比較的遅いので、サリチルアルデヒドなどのアル
デヒドの存在下に加熱して、シッフ塩基を経由して異性
化する方法が実用的である。

【００２２】このような異性化すなわちエピメリ化はす
でに報告されており（前掲特公昭６３−５５５０５
号）、イソロイシンを氷酢酸中で触媒量のサリチルアル
デヒドと１００℃に１時間加熱すると、９３％のエピメ
リ化が起こるという（同じ反応条件下でもアルデヒドが
存在しないと、エピメリ化率は４％に過ぎない）。こ
の方法の難点は、エピメリ化により得られる反応液から
エピマー混合物を分離するのが困難なことにある。こ
の問題の解決策として、発明者らは、エピメリ化反応を
行なう溶媒として、芳香族炭化水素または水に対する溶
解度が比較的低い不活性溶剤を用いるとよいことを見出
した。このような溶媒を使用し、反応後に冷却して晶
出するアミノ酸混合物を濾別すれば、溶剤で洗浄するだ
けで高純度のエピマー混合物を良好な収率で取得するこ
とができる。

【００２３】分割剤として使用する、式Ｉで表した（２
Ｓ，３Ｓ）−酒石酸のＯ，Ｏ’−ジアロイルエステルの
具体例は、ジベンゾイル酒石酸、ジ（ｐ−トルオイル）
ベンゾイル酒石酸、ジ（３，４−ジメチルベンゾイル）
酒石酸、ジ（２−クロロベンゾイル）酒石酸などであ
る。これらの化合物は、常法にしたがって（２Ｓ，３
Ｓ）−酒石酸を対応する安息香酸または置換安息香酸の
塩化物または無水物とともに加熱し、生成するジアロイ
ル酒石酸無水物を加水分解することによって、容易に合
成することができる［C. L. Butler, L. H. Cretcher,
Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．, 55, 2605(1933)；東
レ，特開平７−１３８２０６号］。これらの酒石酸誘
導体のうち、とくに有用なものは、工業的に入手が容易
なジベンゾイル体（Ｒ＝Ｈ，以下「ＤＢＴＡ」と略称す
る）および（ｐ−トルオイル）体（Ｒ＝ｐ−Ｍｅ，ｎ＝
１，以下「ＤＴＴＡ」と略称する）である。

【００２４】エピマー混合物に対する分割剤である酒石
酸誘導体の使用量は、モル比にして０．１ないし０．７
の範囲から選ぶ。これは、後に述べるように、Ｄ−ア
ロイソロイシンは（２Ｓ，３Ｓ）−酒石酸のＯ，Ｏ’−
ジアロイルエステル類と１：１の錯体を形成するからで
ある。酒石酸誘導体のモル比が低ければ、晶出する錯
体の量が減少して収率が低下する。一方、モル比が
０．６を超えると、酒石酸誘導体とＬ−イソロイシンと
の錯体が晶出しやすくなり、その結果、得られるＤ−ア
ロイソロイシンの光学純度が低下する。このようなわ
けで、分割剤の使用量の好ましい範囲は、エピマー混合
物に対するモル比にして０．３〜０．５、さらに好まし
くは０．４〜０．５である。この条件で晶出する錯体
中のＤ−アロイソロイシンの光学純度は９０％ｄｅ以上
であって、９７〜９８％ｄｅに達することもある。

【００２５】錯体の晶出に当たっては、分割剤である酒
石酸誘導体に加えて、アキラルな酸を系に添加すると、
さらに好ましい結果が得られる。エピマー混合物に対
してモル比０．０５〜０．７、好ましくは０．４〜０．
６のアキラル酸を添加することによって、晶出するＤ−
アロイソロイシンと酒石酸誘導体との錯体の光学純度が
向上し、かつ、必要な溶媒の量を大幅に減らすことがで
きる。アキラルな酸としては、塩酸、硫酸、リン酸な
どの無機酸およびギ酸、酢酸、プロピオン酸などの有機
酸が使用できる。無機酸とくに塩酸が好ましい。

【００２６】光学活性な酸またはアミン類を分割剤とし
て使用しジアステレオマー塩を形成させる光学分割にお
いて、ラセミ体と当量の分割剤を使用せず、当量より少
ない量の分割剤と、不足分を埋め合わせて全体を中和す
る量のアキラルな酸または塩基を使用することは広く行
なわれており、Pope and Peachey 法と呼ばれている
［Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．, 75,1066 (1899)］。本発
明のこの態様も、外見上はその一例と理解されそうであ
るが、アミノ酸エピマー１モルと二塩基酸である酒石酸
誘導体１モルとが結合して難溶性の錯体を形成し、この
錯体自体が酸性であって中和されていないところへ、さ
らに余分な酸を加えるのであるから、単純に既知の方法
と同一視することはできない。

【００２７】錯体形成の媒体としては、水、低級アルコ
ールまたはそれらの混合物が、好適に使用できる。低
級アルコールの例としては、メタノール、エタノール、
１−および２−プロパノールが挙げられる。水だけを
溶媒として用いても、錯体の収率およびＤ−アロイソロ
イシンの光学純度に関する限り良好な結果が得られる
が、比較的大量の溶媒を必要とする。この点で、水に
若干のメタノールを加えた混合溶媒を用いると、溶媒量
を２／３から１／２まで減らすことができて、効率の点
で有利である。水−メタノール系溶媒を使用して生成
した錯体は、結晶の濾過が容易であるという点でも好都
合である。メタノールは、混合溶媒中１０〜３０重量
％を占める量が適当である。１０％に満たない少量で
は、溶媒使用量が少なくて済むという効果が乏しいし、
３０％を超える大量になると、錯体の収率が低下する。

【００２８】エピマー混合物、酒石酸誘導体および溶媒
の混合、さらにアキラル酸を添加する場合はその混合も
含めて、錯体を形成する系の準備は、任意の順序で行な
うことができるが、分割剤である酒石酸誘導体は水に対
する溶解度が低く、かつ強酸性では加水分解されやす
い。そこで、まずエピマー混合物を溶媒に入れ、添加
する場合はアキラル酸の一部をここで加えて溶解して置
き、これに分割剤を、直接、または好ましくは低級アル
コールの溶液とした上で加え、全体を混合してから、残
りのアキラル酸を加えて所定の組成とすることが好まし
い。このとき、均一な溶液を形成する必要はなく、固
体が一部懸濁した状態であっても差し支えない。

【００２９】このようにして用意した組成物（溶液また
は懸濁液）を、よく撹拌する。このとき加熱すること
が、高品質のものを安定して得る上で好ましい。加熱
したのちは徐冷して、室温またはそれ以下の温度とし、
錯体を十分に晶出させる。濾過・遠心分離などの方法に
よって結晶を分離取得する。

【００３０】この錯体は、後記する実施データに示すよ
うに、元素分析および ¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルから、ア
ミノ酸と分割剤とが１：１の比で含まれている。水分
の分析値（Karl-Fischer法による）から、分割剤の種類
によってはアミノ酸に対し１〜２個の水分子が結合して
いることもわかった。すなわち、分割剤として非置換
のＤＢＴＡを使用すると無水の錯体が得られ、ｐ−メチ
ル基で置換されたＤＴＴＡを使用すると、１〜２分子の
水が結合している。

【００３１】錯体中のＤ−アロイソロイシンと酒石酸誘
導体との結合の様式は、アルコール中で容易に分解する
ことからみて、通常のジアステレオマー塩のそれよりも
弱いと解される。 Fogassy らは、脂環式アミン類とＤ
ＢＴＡとのジアステレオマー塩について研究し、その結
合が典型的なイオン結合か、それとも水素結合などの緩
やかな結合であるのかを、赤外吸収スペクトルにより判
定することを提唱している［Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ,
52(5), 1637-42(1996)］。それによれば、イオン結合
が存在する場合はイオン化したアミノ基の吸収が3400〜
2500cm^-1に、またカルボキシル基の吸収が1610〜30cm^-1
および1320〜80cm^-1に現れるのに対し、イオン結合がな
い場合は3400cm^-1付近にアミノ基の吸収が、また1720cm
^-1付近にカルボキシル基の強い吸収が現れる。

【００３２】本発明の錯体は、Fogassy らが研究した脂
環式アミン類との錯体ではなくアミノ酸との錯体であ
り、アミノ酸自身がカルボキシル基をもち、分子内塩を
形成している可能性があり、錯体の結合様式を赤外吸収
スペクトルに基づいて判定することは困難である。本
発明の錯体においては、アミノ基１個に対しカルボキシ
ル基が３個もあり、イオン的にはまったく中和されない
組成である。このことと、錯体をアルコールに入れる
と簡単に分解することから、イオン結合で強く結ばれた
塩ではなく、水素結合などで弱く結ばれた錯体である可
能性が高い。

【００３３】錯体分離後の母液にはＬ−イソロイシンが
溶解しているので、これを回収して前述の方法でエピメ
リ化し、再使用する。具体的には、溶媒にアルコール
を加えた場合は加熱してアルコール分を蒸発除去したの
ち、酸性にして適宜の有機溶剤で抽出し、水に対し難溶
性の分割剤すなわち酒石酸誘導体を分離する。残った
水溶液を等電点まで中和することにより、イソロイシン
が晶出する。

【００３４】前述のようにして分離した錯体の結晶から
目的とする光学活性Ｄ−アロイソロイシンを取得するに
は、常法に従うとすれば、錯体を酸性水溶液に入れてア
ミノ酸を溶解し、水に対し難溶性の酒石酸誘導体を水と
混和しない有機溶剤で抽出分離したのち、アミノ酸の酸
性水溶液を中和してｐＨが等電点になるようにし、晶出
するＤ−アロイソロイシンを固液分離することになる。
分割剤の溶媒抽出に次ぐアミノ酸の分離には、イオン
交換を利用することもできる。

【００３５】ところが、本発明の錯体は、上述したよう
に分解しやすい物質であって、メタノール、エタノー
ル、イソプロパノールのような極性の強い溶剤に加える
という簡単な操作で、分割剤の酒石酸誘導体が溶解し、
Ｄ−アロイソロイシンが晶出しておのずから分離すると
いう好都合な性質を示す。この分離を確実に行なうた
めには、アルコールによく溶けるトリエチルアミンなど
の塩基を、アミノ酸に対し１〜２当量添加するとよい。
より効果的な方法は、アルコールに水を２〜２０％含
有させた溶剤を使用することである。約１０％の水を
含むイソプロパノールを使用したとき、分割剤である酒
石酸誘導体をほとんど含まない、光学純度の高いＤ−ア
ロイソロイシンを、錯体に対し９０％以上の回収率で単
離できることがわかった。このようにして得られるア
ミノ酸の光学純度は錯体中のアミノ酸のそれより高く、
分解−晶出の操作それ自体に精製効果が認められる。

【００３６】錯体を分解するための溶剤としては、上記
の低級アルコール以外にも、酢酸メチル、酢酸エチルの
ようなエステル類、アセトン、メチルエチルケトンのよ
うなケトン類など、極性の大きい溶剤を使用することが
できる。いずれも、水を５〜１０％添加して使用する
ことが好ましい。

【００３７】錯体を分解して晶出するアミノ酸を分離し
た後の母液には、分割剤である酒石酸誘導体が、少量の
アミノ酸とともに溶解している。この母液を濃縮して
溶剤を蒸発除去すれば、分割剤が固体として残る。こ
れはそのまま、または必要により精製した後、次の錯体
生成サイクルに使用することができる。

【００３８】

【実施例】以下の実施例におけるエピマー混合物および
Ｄ−アロイソロイシンの光学純度の測定は、ＨＰＬＣに
より、下記の条件で行なった：カラム：ダイセル Chiralpak ＭＡ(＋) ０．４６φｘ５cm 移動相：２mmol ＣｕＳＯ₄＋ＭｅＯＨ (８５：１５) 流量：０．５mL/min. カラム温度：３０℃ 検出器：日本分光ＵＶ−９７５波長２５４nm。

【００３９】［原料製造例］反応容器にＬ−イソロイシ
ン６０．０ｇ（０．４５mol）、トルエン３００mL、氷
酢酸１１０．０ｇ（１．８mol）、サリチルアルデヒド
１１．２ｇ（０．０９mol）を装入し、撹拌しながら、
還流下（１０４℃）に３時間加熱した。室温まで冷却
し、析出した固体を濾過分離して、トルエン３０mLずつ
で３回洗浄したのち乾燥して、５４．０ｇのエピマー混
合物を得た。

【００４０】出発原料のＬ−イソロイシンに対する収率
９０％、ＨＰＬＣによるエピマー組成（Ｌ−イソロイシ
ン：Ｄ−アロイソロイシン）は４９：５１ないし５１：
４９であって、完全にエピメリ化していた。

【００４１】［実施例１］原料製造例で製造したエピマ
ー混合物５ｇ（３８．１mmol）を、反応容器中の水９０
mLに懸濁させた。これに（２Ｓ，３Ｓ）−ＤＢＴＡ
６．８３ｇ（１９．１mmol）を加え、７０℃まで加熱し
て、撹拌しながら１時間保持した。反応の結果生じた
スラリーを放置して冷却するにまかせ、２５℃において
固液分離して、固体を水１０mLずつで２回洗浄した。
Ｄ−アロイソロイシンと（２Ｓ，３Ｓ）−ＤＢＴＡとの
１：１錯体７．７７ｇを、白色結晶として得た。収率
（エピマー混合物基準）は４１．７％、光学純度は９
５．６％ｄｅであった。

【００４２】この錯体の分析結果を下に示す：融点：１７５．５〜１７６．５℃ ＩＲＫＢｒペレット（cm^-1）： 3156, 2972, 2942,
2882, 1733(S),1692(S), 1601(m), 1528(m), 1320, 126
6(S), 1118(S), 719(S)¹ Ｈ−ＮＭＲ（270MHz,MeOH-d₄） δ：０．９７（ｔ,
３Ｈ，Ｊ＝４．０Hz）；１．００（ｔ,３Ｈ,Ｊ＝４．０
Hz）；１．２４−１．４０（ｍ,１Ｈ）；１．４３−
１．５９（ｍ,１Ｈ）；２．０１−２．１４（ｍ,１
Ｈ）；３．７１（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝３．５Hz）；４．９０
（ｓ，７．５Ｈ）；５．９４（ｓ，２Ｈ）；７．５０
（ｔ，４Ｈ）；７．６４（ｍ，２Ｈ）；８．１（ｍ，
４Ｈ）．元素分析値：測定値Ｃ５９．０％Ｈ５．６％Ｎ３．１％計算値（Ｃ₂₄Ｈ₂₇ＮＯ₁₀）Ｃ５８．９％Ｈ５．６％Ｎ２．９％水分（Karl-Fischer法）：０．５３％（１水和物計算
値３．５５％）。

【００４３】２−プロパノール２７mLと水３mLとの混合
液を用意し、これに上記の錯体３ｇを加えた。加熱し
て１時間還流させたのち冷却し、２５℃において固液分
離して、得られた固体を２−プロパノール４mLで３回洗
浄した。Ｄ−アロイソロイシン０．７１ｇを白色結晶
として得た。収率は８８．３％（錯体基準）、光学純
度（ＨＰＬＣ）は１００％ｄｅであった。

【００４４】［実施例２］原料製造例で製造したエピマ
ー混合物５ｇ（３８．１mmol）を、反応容器中の水４９
mLに懸濁させ、３５％塩酸１．９８ｇ（１９．１mmol）
加えた。次に、実施例１と同様に、（２Ｓ，３Ｓ）−
ＤＢＴＡ６．８３ｇ（１９．１mmol）を加えて７０℃ま
で加熱し、撹拌しながら１時間保持した。以下、実施
例１と同様に処理して、Ｄ−アロイソロイシンと（２
Ｓ，３Ｓ）−ＤＢＴＡとの１：１錯体８．２１ｇを、白
色結晶として得た。収率（エピマー混合物基準）は４
４．０％、光学純度は９６．２％ｄｅであった。

【００４５】２−プロパノール７２mLと水８mLとの混合
液に上記の錯体８．０ｇを加えて、実施例１と同様に、
錯体の分解を行なった。得られたＤ−アロイソロイシ
ンは１．９０ｇ、その収率は８８．４％（錯体基準）、
光学純度（ＨＰＬＣ）は１００％ｄｅであった。

【００４６】［実施例３］原料製造例で製造したエピマ
ー混合物５ｇ（３８．１mmol）を、反応容器中の水７５
mLに懸濁させ、これに、メタノール１０mLに（２Ｓ，３
Ｓ）−ＤＢＴＡ６．８３ｇ（１９．１mmol）を溶解した
溶液を滴下して加えたのち７０℃まで加熱し、撹拌しな
がら１時間保持した。以下、実施例１と同様に処理し
て、錯体７．３９ｇを得た。収率（エピマー混合物基
準）は３９．６％、光学純度は９５．６％ｄｅであっ
た。

【００４７】［実施例４］原料製造例で製造したエピマ
ー混合物５ｇ（３８．１mmol）を反応容器中の水４０mL
に懸濁させ、実施例２と同様に、３５％塩酸１．９８ｇ
（１９．１mmol）加えた。これに、（２Ｓ，３Ｓ）−
ＤＢＴＡ６．８３ｇ（１９．１mmol）をメタノール１０
mLに溶解した液を滴下して加え、７０℃まで加熱し、撹
拌しながら１時間保持した。放冷後、２５℃において
さらに１時間撹拌したのち固液分離し、水１０mLで洗浄
した。得られた錯体は８．４７ｇであり、その収率
（エピマー混合物基準）は４５．４％、光学純度は９
５．４％ｄｅであった。

【００４８】［実施例５］原料製造例に示した方法によ
り製造したエピマー混合物５０ｇ（３８０mmol）を、反
応容器中の水３６０mLに懸濁させ、３５％塩酸８．０ｇ
（７７mmol）を加えて撹拌し、スラリーとした。次
に、（２Ｓ，３Ｓ）−ＤＢＴＡ６１．３ｇ（１７１mmo
l）をメタノール１００mLと水８０mLとの混合物に溶解
した液を滴下した。さらに、３５％塩酸１１．９ｇ
（１１４mmol）を水５０mLで希釈して加えたのち、７０
℃まで加熱し、この温度に１時間保持した。反応液を
放冷し、２５℃で１時間撹拌したのち、固液分離した。
固体を水１００mLで２回洗浄し、乾燥して得られた錯
体は、８４．７ｇであった。収率（エピマー混合物基
準）は４５．５％、光学純度は９４．８％ｄｅであっ
た。

【００４９】錯体を濾過分離した母液および洗浄液をあ
わせ、メタノールを留去して濃縮したのち、濃縮液をメ
チル−ｔ−ブチルエーテル２００mLで抽出して、分割剤
を除去した。残った水溶液をさらに濃縮し、等電点
（ｐＨ５．９４）に中和して、晶出するイソロイシンを
回収した。

【００５０】上述のようにして得た錯体８０．０ｇ（１
６３mmol）を、２−プロパノール７２０mLと水８０mLと
の混合液に入れ、還流下に１時間加熱したのち、冷却し
て２５℃で固液分離した。２−プロパノール８０mLで
３回洗浄し、乾燥して、Ｄ−アロイソロイシンを白色結
晶として得た。収量１９．０ｇ、収率（錯体基準）８
９．０％、光学純度９９．９％ｄｅであった。

【００５１】Ｄ−アロイソロイシンを分離した濾液と洗
浄液とを合せ、２−プロパノールを留去して濃縮し、残
った液に、メタノール１００mLを加えて溶液とした。
この溶液には、（２Ｓ，３Ｓ）−ＤＢＴＡが約５８ｇと
イソロイシン少量とが含まれていて、次の光学分割サイ
クルに使用することができた。

【００５２】［実施例６］原料製造例で製造したエピマ
ー混合物５ｇ（３８．１mmol）を、実施例１と同様に、
反応容器中の水９０mLに懸濁させた。これに、（２
Ｓ，３Ｓ）−ＤＴＴＡ７．３６ｇ（１９．０mmol）を加
え、７０℃まで加熱して、撹拌しながら１時間保持し
た。反応の結果生じたスラリーを放置して冷却するにま
かせ、２５℃において固液分離して、固体を水１０mLず
つで２回洗浄した。得られた白色結晶は９．２ｇであ
り、下記の分析データから、Ｄ−アロイソロイシン：
（２Ｓ，３Ｓ）−ＤＴＴＡ：水の１：１：１〜２の錯体
と考えられる。収率（エピマー混合物基準）は４４．
３％、光学純度は９４．８％ｄｅであった。

【００５３】この錯体の分析データを下に示す。この
結果から、アミノ酸とＤＴＴＡとの比は１：１であるこ
とがわかる。水分分析値と元素分析との結果が一致し
ないが、１分子または２分子の水が結合していると推定
される。

【００５４】融点：１５７〜１６１℃ ＩＲＫＢｒペレット（cm^-1）： 3526, 2966, 2924,
1717(S), 1609(S),1546(m), 1259(S), 1176, 1123, 110
8(S), 755(S).¹ Ｈ−ＮＭＲ（270MHz,MeOH-d₄） δ：０．９７（ｔ,
３Ｈ，Ｊ＝４．０Hz）；１．００（ｔ,３Ｈ,Ｊ＝４．０
Hz）；１．２６−１．４０（ｍ,１Ｈ）；１．４３−
１．５８（ｍ,１Ｈ）；２．０３−２．１３（ｍ,１
Ｈ）；２．４２（ｓ，６Ｈ）；３．７０（ｄ,１Ｈ,Ｊ
＝３．５MHz）；４．８９（ｓ，１１Ｈ）；５．９１
（ｓ，２Ｈ）；７．３１（ｄ，４Ｈ）；８．０３
（ｄ，４Ｈ）．元素分析値：測定値Ｃ５８．９％Ｈ６．１％Ｎ２．８％計算値（Ｃ₂₆Ｈ₃₁ＮＯ₁₀・Ｈ₂Ｏ）Ｃ５８．３％Ｈ６．２％Ｎ２．６％（Ｃ₂₆Ｈ₃₁ＮＯ₁₀・２Ｈ₂Ｏ）Ｃ５６．４％Ｈ６．４％Ｎ２．５％水分（Karl-Fischer法）：６．４７％（２水和物計
算値６．５１％）。

【００５５】上記の錯体８．０ｇをメタノール８０mLに
加え、トリエチルアミン１．６ｇを添加して、還流下に
１時間加熱した。冷却し、２５℃において固液分離し
て、得られた固体をメタノール２mLで洗浄した。得ら
れた白色結晶（Ｄ−アロイソロイシン）は１．４８ｇで
あり、収率は７６．８％（錯体基準）、光学純度（ＨＰ
ＬＣ）は９９．４％ｄｅであった。

【００５６】

【発明の効果】前述のように、既知のＤ−アロイソロイ
シンの製造方法は、ラセミ体またはＬ−イソロイシンと
Ｄ−アロイソロイシンとのエピマー混合物をＮ−アシル
誘導体に導き、分割剤を用いた光学分割−加水分解を行
なうか、または酵素による不斉加水分解という、煩雑な
工程を経なければならなかった。

【００５７】これに対し、本発明の方法によれば、Ｌ−
イソロイシンを出発原料とし、そのエピメリ化と酒石酸
誘導体との錯体の形成および形成された錯体の分解とい
う、比較的簡単な操作によって、高い光学純度をもった
Ｄ−アロイソロイシンを、高い収率で工業的に製造する
ことができる。アミノ酸類の光学分割において、この
ようにアミノ基またはカルボキシル基を保護することな
く、そのまま分割剤で光学分割することのできる例は、
きわめて限られている。とくに、ＤＢＴＡやＤＴＴＡ
のような酒石酸誘導体を分割剤として直接分割を行なっ
た例は、アスパラギン、リジンの２例しか報告されてい
ない。アラニン、バリン、ロイシンなどの中性脂肪族
アミノ酸の直接分割は、酒石酸誘導体に限らず、他の分
割剤を用いた例も知られていない。このような状況の
もとで、Ｌ−イソロイシンとＤ−アロイソロイシンとの
エピマー混合物の直接分割を可能にした本発明は、画期
的なものといえる。

【００５８】Ｌ−イソロイシンは大量に製造されている
から、容易に、かつ安価に入手することができる。分
割剤とするジアロイル−（２Ｓ，３Ｓ）−酒石酸もまた
入手容易であり、その使用量はエピマー混合物に対しモ
ル比０．５前後の少量で足りる上、錯体から高い回収率
で回収でき、再使用可能である。

【００５９】好ましい態様にあっては、錯体の製造に当
たって、分割剤とともに少量の無機酸または有機酸とく
に無機酸を添加することにより、溶媒の使用量を大幅に
減らすことができ、生産性を著しく向上させることがで
きる。

【００６０】錯体の分解は、低級アルコール、好ましく
は適量の水を加えた低級アルコールに錯体を加えるだけ
で、きわめて容易に実現し、目的とするＤ−アロイソロ
イシンを高収率で分離することができる。

【００６１】エピマー混合物からＤ−アロイソロイシン
を分離した後に残るＬ−イソロイシンは、再びエピメリ
化して、原料として再度使用することができ、原料の有
効な利用ができる。

【００６２】このように、本発明は初めてＤ−アロイソ
ロイシンの工業的な生産を実現したものであって、これ
により、種々の医薬品、農薬などの生理活性物質をはじ
めとする、光学活性な機能性材料の利用の途が開かれ
た。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】Ｌ−イソロイシンとＤ−アロイソロイシ
ンとのエピマー混合物に、溶媒中で、式Ｉで示される
（２Ｓ，３Ｓ）−酒石酸誘導体を光学分割剤として作用
させ、【化１】（式中、Ｒは水素原子、Ｃ₁−Ｃ₃の低級アルキル基、低
級アルコキシ基、塩素原子、臭素原子またはニトロ基を
表し、ｎは０，１または２である。）生成したＤ−アロイソロイシンと式Ｉで示される化合物
との錯体を析出させ、溶液から分離し、分離した固体の
錯体を分解してＤ−アロイソロイシンを単離することか
らなるＤ−アロイソロイシンの製造方法。
【請求項２】式ＩのＲが、水素原子であるか、または
ｐ−位に置換したメチル基（ｎ＝１）である酒石酸誘導
体を使用して実施する請求項１のＤ−アロイソロイシン
の製造方法。
【請求項３】溶媒として、水、または、メタノール、
エタノール等の低級アルコール類またはこれらの混合物
を使用して錯体を生成させる請求項１のＤ−アロイソロ
イシンの製造方法。
【請求項４】エピマー混合物１モルに対し、式Ｉで示
される化合物０．１〜０．７モルを作用させて錯体を生
成させる請求項１のＤ−アロイソロイシンの製造方法。
【請求項５】エピマー混合物１モルに対し、式Ｉで示
されるの化合物０．１〜０．７モルを作用させ、かつ無
機酸０．０５〜０．７当量を添加して実施する請求項１
のＤ−アロイソロイシンの製造方法。
【請求項６】錯体の分解によるＤ−アロイソロイシン
の単離を、錯体を低級アルコール中に入れて、光学分割
剤である酒石酸誘導体だけを溶解させ、Ｄ−アロイソロ
イシンは固体のまま残すことにより実施する請求項１の
Ｄ−アロイソロイシンの製造方法。
【請求項７】低級アルコールとしてイソプロパノール
をえらび、これに２〜２０重量％の水を添加して使用す
る請求項６のＤ−アロイソロイシンの製造方法。
【請求項８】Ｄ−アロイソロイシンと式Ｉで示される
化合物との錯体。