JPH10245316A - 皮膚老化予防及び改善剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 皮膚の老化を予防し改善する剤の提供。 【解決手段】 リン酸化多糖類を有効成分とする皮膚老
化予防及び改善剤。リン酸化多糖類は式(I) 又は(II)の
化合物が用いられる。皮膚老化予防改善剤は、化粧水、
クリーム等化粧品の形で用いられる。 【化１】 【化２】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、リン酸化多糖類を
有効成分とする皮膚老化予防及び改善剤に関する。本発
明の皮膚老化予防及び改善剤は化粧品として用いられ
る。

【０００２】

【従来の技術】通常、皮膚には吸水能や水分保持能があ
るので、柔軟性や弾力性が保たれているが、老化によっ
てこれらの機能が低下すると皮膚の水溶性画分は失わ
れ、皮膚表面が乾燥して、いわゆる「肌荒れ状態」にな
ると考えられている。皮膚の主要な構成成分としては、
コラーゲンやエラスチン等が知られており、これらの成
分が皮膚の柔軟性や弾力性に寄与しているといわれてい
る。また、老化によってこれらの機能が低下するのは、
コラーゲンの代謝の低下や細胞間に存在する保湿能を有
するヒアルロン酸の減少に起因するものと考えられてい
る。したがって、これらの老化した皮膚を改善する目的
でコラーゲンやヒアルロン酸等を配合した化粧品が市販
されている。

【０００３】一方、種々の乳酸菌が多糖類を生産するこ
とが知られている。また，ストレプトコッカス・ラクチ
ス(Streptococcus lactis) もしくはラクトコッカス・
ラクチス(Lactococcus lactis) 、ストレプトコッカス
・クレモリス(Streptococcuscremoris) もしくはラクト
コッカス・クレモリス(Lactococcus cremoris) 等の乳
酸球菌の一部の菌種がリン酸化多糖類を生産することが
報告されている (特開平3-229702号公報；Nakajima et
al., Carbohydr. Res., vol.224, pp.245-253, 1992)。
さらに、ラクトバチルス・サケ(Lactobacillus sake)
等の乳酸桿菌の一部の菌種もリン酸化多糖類を生産する
ことが報告されている (WO94/12656号公報) 。これらの
リン酸化多糖類は、いずれも、グルコース、ガラクトー
ス、ラムノース等の単糖が一定の配列を繰り返して糖鎖
を形成し、その側鎖として単糖やグリセロール基を伴っ
たリン酸基が、直接あるいは別の単糖を介して結合した
構造を有している点で中性多糖類とは異なる。また、そ
のリン酸基が有する三つのオキシ酸のうち、単糖とのエ
ステル結合に二つが関与するが、残る一つは遊離状態で
あるため、他の物質との反応に関与することができると
いう性質を有する。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、リン酸
化多糖類の利用性について、種々、検討を重ねてきたと
ころ、このリン酸化多糖類に保湿作用及びコラーゲン産
生能があることを見出した。そして、このリン酸化多糖
類を皮膚老化予防及び改善剤の有効成分として配合する
ことにより、化粧品等に皮膚老化予防及び改善効果を賦
与することができることを見出し、本発明を完成するに
至った。したがって、本発明は、リン酸化多糖類を有効
成分とする皮膚老化予防及び改善剤を提供することを課
題とする。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明は、リン酸化多糖
類を有効成分とする皮膚老化予防及び改善剤である。そ
して、本発明の皮膚老化予防及び改善剤の有効成分であ
るリン酸化多糖類は、前記したように公知の化合物であ
り (特開平3-229702号公報；Nakajima et al.,Carbohyd
r. Res., vol.224, pp.245-253, 1992 ; WO94/12656号
公報) 、例えば、次のような構造式で示される化合物で
ある。

【０００６】

【化３】 （但し、式中、Glc はグルコース残基を、Gal はガラク
トース残基を、Rha はラムノース残基をそれぞれ示す。
また、式中の大きな字で書かれた数字はそれぞれの結合
部位を、ｍは０〜３の整数を、ｎは繰り返しの単位で、
1,000〜5,000 をそれぞれ示す。)

【０００７】

【化４】 （但し、式中、Glc はグルコース残基を、Gal はガラク
トース残基を、Rha はラムノース残基をそれぞれ示す。
また、式中の大きな字で書かれた数字はそれぞれの結合
部位を、ｎは繰り返しの単位で、 1,000〜5,000 をそれ
ぞれ示す。)

【０００８】そして、ストレプトコッカス・ラクチス(S
treptococcus lactis) もしくはラクトコッカス・ラク
チス(Lactococcus lactis) 、ストレプトコッカス・ク
レモリス(Streptococcus cremoris) もしくはラクトコ
ッカス・クレモリス(Lactoco ccus cremoris) 等の乳酸
球菌やラクトバチルス・サケ(Lactobacillus sake)等
の乳酸桿菌を培養し、その培養物からリン酸化多糖類を
得ることができる。本発明の皮膚老化予防及び改善剤
は、化粧水、クリーム等の化粧品の形態で用いられる。

【０００９】

【発明の実施の形態】本発明においては、皮膚老化予防
及び改善剤の有効成分として、前記したリン酸化多糖類
を使用する。本発明の皮膚老化予防及び改善剤は、化粧
品として一般的な形態である乳化系、可溶化系、スプレ
ー、エアゾール等として、使用することが好ましい。そ
して、本発明の皮膚老化予防及び改善剤は、顔や手等の
皮膚のように乾燥により肌荒れを起こす部位に、直接、
適当量を一日一回以上塗布すれば良い。

【００１０】本発明の皮膚老化予防及び改善剤の有効成
分として使用するリン酸化多糖類については、精製した
リン酸化多糖類のみではなく、リン酸化多糖類を産生す
る乳酸菌の培養物をそのまま使用しても構わないし、ま
た、リン酸化多糖類を産生する乳酸菌の培養物にエタノ
ール等の溶媒を添加することにより生成する沈澱を回収
して使用しても構わない。なお、これらのリン酸化多糖
類については、液状もしくは粉末状で、皮膚老化予防及
び改善剤として容易に化粧品に配合することができる。

【００１１】そして、化粧品等に本発明の皮膚老化予防
及び改善剤を配合して皮膚老化予防及び改善効果を発揮
させるためには、少なくとも 0.001重量％以上、好まし
くは0.01〜20重量％のリン酸化多糖類を化粧品等に配合
する必要がある。また、本発明のリン酸化多糖類を有効
成分とする皮膚老化予防及び改善剤については、従来よ
りコラーゲン産生促進作用やメラニン産生抑制作用を有
することが知られているアスコルビン酸やその誘導体等
の物質と併用して、化粧品等に配合しても構わない。な
お、本発明の皮膚老化予防及び改善剤の有効成分として
用いるリン酸化多糖類については、皮膚に対する毒性や
刺激も無く、また、副作用も無いことを確認している。

【００１２】次に、参考例、実施例及び試験例を示し、
本発明を詳しく説明する。

【参考例１】特開平3-229702号公報に記載されている方
法に従ってリン酸化多糖類を得た。すなわち、アクチナ
ーゼＥ (科研製薬製) で完全に加水分解した脱脂乳を限
外濾過膜処理し、そのリテンテート液を培地とした。こ
の培地を滅菌し、10Ｌ容のジャーファーメンターに無菌
的に培地 9.8Ｌを分注した。そして、ストレプトコッカ
ス・クレモリス(Streptococcus cremoris) SBT-0495
(FERM P-10053) の前培養液を５％接種した後、中和剤
としてアンモニア水を使用し、pHを 5.5に保持して20
℃、24時間培養した。培養終了後、培養液を遠心分離し
て上清を回収し、等量のエタノールを添加して沈澱を生
成させた後、この沈澱を回収した。さらに、回収した沈
澱を0.2N食塩水で溶解した後、エタノール沈澱を行うと
いう操作を繰り返した。このＳＤＳ処理した沈澱物をＳ
ＤＳゲル電気泳動に供して、ゲル内に浸透しない部分を
回収した。そして、回収した画分を透析した後、ＤＥＡ
Ｅ−トヨパール (東ソー製) 650Mを使用したイオン交換
クロマトグラフィーにより吸着画分として精製多糖類を
得、凍結乾燥してｍが０〜３、ｎが 1,000〜5,000 の式
（Ｉ）のリン酸化多糖類粉末約 700mgを得た。

【００１３】

【実施例１】下記の表１に示した配合で各物質を混合し
て溶解した。

【００１４】

【表１】 ──────────────────────── 70％ソルビトール 3.0(g) グリセリン 5.0 参考例１で得られたリン酸化多糖類 1.0 水 70.0 ────────────────────────

【００１５】この溶解液に、アラントイン0.1g、ポリオ
キシエチレン硬化ヒマシ油誘導体0.5g、エタノール 20.
0g及び香料少々を撹拌しながら添加して均一な溶液と
し、皮膚老化予防及び改善効果を賦与した油性化粧水を
製造した。

【００１６】

【実施例２】下記の表２に示した配合で各物質を混合し
て溶解した。

【００１７】

【表２】 ──────────────────────── エチレングリコール 2.5(g) プロピレングリコール 5.0 シリコーン 0.0001 参考例１で得られたリン酸化多糖類 1.0 水 70.0 ────────────────────────

【００１８】この溶解液に、尿素1.0g、ポリオキシエチ
レンソルビタンモノラウレート1.2g、エタノール 20.0
g、ε−アミノカプロン酸0.1g及び香料少々を撹拌しな
がら添加して均一な溶液とし、皮膚老化予防及び改善効
果を賦与した乾性化粧水を製造した。

【００１９】

【実施例３】下記の表３に示した配合で各物質を混合し
て75℃で加熱溶解した。

【００２０】

【表３】 ───────────────────────── グリセリン 2.0(g) ステアリン酸 20.0 ミリスチン酸 10.0 ラウリン酸 5.0 ポリオキシエチレンラウリルエーテル 1.0 参考例１で得られたリン酸化多糖類 1.0 香料 少々 防腐剤 少々 ─────────────────────────

【００２１】この溶解液に、水酸化カリウム5.5g及び水
56.0gを撹拌しながら添加した後、冷却し、皮膚老化予
防及び改善効果を賦与した洗顔クリームを製造した。

【００２２】

【実施例４】下記の表４に示した配合で各物質を混合し
て75℃で加熱溶解した。

【００２３】

【表４】 ────────────────────────────── ミツロウ 10.0(g) パラフィンワックス 6.0 ラノリン 3.0 イソプロピルミリステート 6.0 スクワラン 8.0 流動パラフィン 25.0 参考例１で得られたリン酸化多糖類 1.0 ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート 1.8 ソルビタンモノステアレート 4.2 防腐剤 少々 ──────────────────────────────

【００２４】この溶解液に、プロピレングリコール2.0
g、ホウ砂0.7g、尿素5.0g及び水 28.0gを撹拌しながら
添加した後、冷却し、香料少々を添加して、皮膚老化予
防及び改善効果を賦与した油性クリームを製造した。

【００２５】

【比較例１】比較例として、リン酸化多糖類に代えてヒ
アルロン酸ナトリウムを配合した以外は実施例４と同様
の配合の油性クリームを製造した。

【００２６】

【試験例１】20〜50歳の女性パネル各20名を対象とし
て、実施例４の油性クリーム又は比較例１の油性クリー
ムを一日に朝晩２回の頻度で１ヵ月間使用してもらい、
皮膚の保湿性、柔軟性及び弾力性の変化を調べた。その
結果について、皮膚の保湿性の変化を表５に、皮膚の柔
軟性の変化を表６に、皮膚の弾力性の変化を表７にそれ
ぞれ示す。

【００２７】なお、皮膚の保湿性については、各油性ク
リームを使用した後、皮膚から不感知的に失われて行く
水分量を示す経皮水分損失(Transepidermal Water Los
s: ＴＷＬ) 値をエバポリメーターで測定し、以下の判
定基準により評価した。 非常に効果あり：比較例１の値と比べＴＷＬ値が30％以
上減少 やや効果あり：比較例１の値と比べＴＷＬ値が10％以上
30％未満減少 効果なし：比較例１の値と比べＴＷＬ値が10％未満減少
又は10％未満増大 悪化：比較例１の値と比べＴＷＬ値が10％以上増大 また、皮膚の柔軟性の変化及び皮膚の弾力性の変化につ
いては、パネルの官能評価により表した。

【００２８】

【表５】 ─────────────────────────────── （非常に効果あり） （やや効果あり） （効果なし） （悪化） ─────────────────────────────── 4／20 12／20 4／20 0／20 ───────────────────────────────

【００２９】

【表６】 ─────────────────────────────────── （非常に改善） （やや改善） （変化なし） （悪化した） ─────────────────────────────────── 実施例 11／20 9／20 0／20 0／20 比較例 9／20 11／20 0／20 0／20 ───────────────────────────────────

【００３０】

【表７】 ─────────────────────────────────── （非常に改善） （やや改善） （変化なし） （悪化した） ─────────────────────────────────── 実施例 9／20 10／20 1／20 0／20 比較例 7／20 12／20 1／20 0／20 ───────────────────────────────────

【００３１】本試験の結果によると、リン酸化多糖類
は、優れた保湿性を有し、皮膚の柔軟性及び弾力性を改
善する効果を有することが判る。

【００３２】

【試験例２】本試験では、参考例１で得られたリン酸化
多糖類のコラーゲン産生促進活性を調べた。なお、コラ
ーゲン産生促進活性については、コラーゲンが細胞内で
プロコラーゲンとして生合成され、このプロコラーゲン
が細胞外に分泌されてコラーゲン繊維として重合する時
にエンドペプチダーゼの作用により遊離するプロコラー
ゲンのＣ末端プロペプチド（ＰＩＰ）をＥＬＩＳＡ法で
測定することにより求めた。また、本試験では、細胞と
して、コラーゲン産生能が認められているヒト正常線維
芽細胞(IMR-90)を使用した。

【００３３】すなわち、IMR-90(ATCC CCL-186)細胞を６
ウエルプレートでコンフルエントに到るまで培養した
後、ＰＢＳで洗浄した。次いで、終濃度１％となるよう
に10％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を添加したダルベッコ変
法イーグル培地（ＤＭＥＭ）で調製したリン酸化多糖類
溶液及びこのリン酸化多糖類溶液を原液としＤＭＥＭで
二倍段階希釈したリン酸化多糖類溶液を各ウエルに加え
て、さらに３日間培養した後、上清中に含まれるＰＩＰ
量をＥＬＩＳＡキット（宝酒造製）で測定した。その結
果を図１に示す。

【００３４】本試験の結果によると、リン酸化多糖類
は、コラーゲンの産生を濃度依存的に促進することが判
る。すなわち、リン酸化多糖類を 0.1％、 0.5％、ある
いは、１％添加することにより、コラーゲン産生促進活
性は、リン酸化多糖類無添加の場合の 1.1倍、 1.4倍、
あるいは 1.7倍というように、それぞれ高まることが判
る。

【００３５】

【発明の効果】乳酸菌が生産する安全性が極めて高いリ
ン酸化多糖類を有効成分とする皮膚老化予防及び改善剤
を化粧品等に配合することにより、皮膚機能を亢進させ
る効果を賦与することができ、皮膚の硬化、張り、皺等
を予防及び改善することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】試験例２におけるリン酸化多糖類のコラーゲン
産生促進効果を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 大田 賛行 北海道札幌市厚別区厚別中央５条８丁目９ −10−306 (72)発明者 クラース ドゥースブルグ オランダ国，9602 ダブリューズィー，ホ ーゲザンド，ファン ホーヘンドルプスト ラート ２ (72)発明者 ヤン シッケマ オランダ国，9483 ピーエー ゼイグス, ホーフドベッヘ １ビー (72)発明者 岩崎 泰介 オランダ国，9602 ジーケー ホーゲザン ド，プリンセスラーン ４

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 リン酸化多糖類を有効成分とする皮膚老
   化予防及び改善剤。
2. 【請求項２】 式(I) で示されるリン酸化多糖類を用い
   る請求項１に記載の皮膚老化予防及び改善剤。 【化１】 （但し、式中、Glc はグルコース残基を、Gal はガラク
   トース残基を、Rha はラムノース残基をそれぞれ示す。
   また、式中の大きな字で書かれた数字はそれぞれの結合
   部位を、ｍは０〜３の整数を、ｎは繰り返しの単位で、
   1,000〜5,000 をそれぞれ示す。)
3. 【請求項３】 式(II)で示されるリン酸化多糖類を用い
   る請求項１に記載の皮膚老化予防及び改善剤。 【化２】 （但し、式中、Glc はグルコース残基を、Gal はガラク
   トース残基を、Rha はラムノース残基をそれぞれ示す。
   また、式中の大きな字で書かれた数字はそれぞれの結合
   部位を、ｎは繰り返しの単位で、 1,000〜5,000 をそれ
   ぞれ示す。)
4. 【請求項４】 皮膚老化予防及び改善剤が化粧品である
   請求項１〜３のいずれかに記載の皮膚老化予防及び改善
   剤。