JPH0959206A

JPH0959206A - エイコサペンタエン酸およびエイコサペンタエン酸エステルの製造方法

Info

Publication number: JPH0959206A
Application number: JP24064595A
Authority: JP
Inventors: Masao Suzuki; 正夫鈴木; Yosuke Kidera; 洋介木寺; Tomohiro Takamoto; 智裕高本
Original assignee: Nippon Oil and Fats Co Ltd
Current assignee: NOF Corp
Priority date: 1995-08-25
Filing date: 1995-08-25
Publication date: 1997-03-04

Abstract

(57)【要約】【課題】脂肪酸またはそのエステルの混合物から、有用
性の高いエイコサペンタエン酸またはそのエステルを、
機能阻害性を有するω６系の脂肪酸成分の濃縮を伴うこ
となく、基質劣化を招くことなく、簡便な方法により、
大量かつ安価に製造する方法を提供する。【解決手段】エイコサペンタエン酸を含む脂肪酸混合物
またはエイコサペンタエン酸エステルを含む脂肪酸エス
テル混合物に、イソアルカンとアセトニトリルを加えて
混合したのち分層し、エイコサペンタエン酸またはエイ
コサペンタエン酸エステルをアセトニトリル層に濃縮す
ることを特徴とするエイコサペンタエン酸およびエイコ
サペンタエン酸エステルの製造方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、エイコサペンタエ
ン酸およびエイコサペンタエン酸エステルの製造方法に
関する。さらに詳しくは、本発明は、エイコサペンタエ
ン酸またはエイコサペンタエン酸エステルを含有する脂
肪酸または脂肪酸エステルの混合物より、エイコサペン
タエン酸に対して機能阻害性を有するω６系の脂肪酸を
濃縮することなく、選択的にエイコサペンタエン酸また
はエイコサペンタエン酸エステルを濃縮することができ
るエイコサペンタエン酸およびエイコサペンタエン酸エ
ステルの製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年の科学技術の進歩と相まって、脂肪
酸の構造と機能の相関が次第に明らかになってきてお
り、とりわけ、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコ
サヘキサエン酸（ＤＨＡ）、α−リノレン酸などのω３
系の高度不飽和脂肪酸の生理活性作用に注目が集まって
いる。脂肪酸またはそのエステルは高純度になると固有
の物性や生理作用などをシャープに発現するようにな
り、さらに安全性や安定性、色、においなどの品質水準
も向上するので、医薬品、香粧品、食品などの生体関連
分野などにおいて、高度利用が可能となる。すでに、エ
イコサペンタエン酸はエチルエステルとして動脈硬化症
や高脂血症（中性脂肪）の治療薬として大型医薬品とな
っており、さらに新規な効能が追究されている状況下に
あって、高純度、高品質の製品を大量かつ安価に製造す
る方法が求められている。ω３系の不飽和脂肪酸は、抗
血栓、抗動脈硬化、抗脂血、抗炎症、免疫調整などの優
れた生理作用を発現するが、ω６系の不飽和脂肪酸、と
りわけアラキドン酸とは競合的阻害関係にあることが明
らかになってきている。従って、ＥＰＡの生理作用や薬
効を高めるためには、ＥＰＡの純度を高めると共にアラ
キドン酸の含量を低下させることが肝要となっている。
ＥＰＡとアラキドン酸の阻害関係に関する文献等は多数
あるが、熊谷朗著「ＥＰＡの医学」（中山書店、１９９
４年）、田中汎著「機能性脂質の開発と応用」１４２頁
（シーエムシー、１９９２年）などの著書に詳しく述べ
られている。脂肪酸またはそのエステルの混合物から、
エイコサペンタエン酸またはそのエステルを濃縮するた
めの従来技術としては、蒸留法、尿素付加法、液体クロ
マトグラフィ、カラムクロマトグラフィ、超臨界ガス抽
出法、液液分配法などの方法が報告されている。蒸留法
は沸点あるいは蒸気圧の差による分離法であり、その差
の少ない物質間の分離はできない。脂肪酸では炭素数の
異なる脂肪酸の分離は可能であるが、炭素数が同じで二
重結合の数またはその位置の異なる脂肪酸の分離はでき
ない。また、蒸留は高温の熱履歴を受けるので、熱安定
性の悪い不飽和脂肪酸、特に高度不飽和脂肪酸に適用す
るには注意を要する（特開平６−３３０８８号公報、特
公平１−４０８１７号公報、特公平５−２５８７０号公
報、特開平２−２６８１３３号公報、特開平４−４１４
５７号公報、特開平４−１２８２５０号公報など）。尿
素付加法は、尿素が炭素数７個以上の飽和直鎖状炭化水
素鎖を有している脂肪酸と付加体を形成する性質のある
ことを利用して、脂肪酸の分離を行う方法である。この
方法の分離特性は、一般に、二重結合数が３個以下の脂
肪酸の分離には有効であるが、二重結合を４個以上有す
る脂肪酸はほとんどが炭素数７個以上の飽和直鎖状炭化
水素鎖を有しないので尿素付加体を形成しない。従っ
て、魚油などに含まれているＣ１６：４、Ｃ１８：４、
Ｃ２０：４、Ｃ２０：５（エイコサペンタエン酸）、Ｃ
２１：５、Ｃ２２：５，Ｃ２２：６（ドコサヘキサエン
酸）などの高度不飽和脂肪酸は尿素付加体を形成しない
ので、これらの脂肪酸の分離は全く不可能である。さら
に、尿素付加法では大量の尿素や溶媒を用いるので製造
コストが高く、操作もやや煩雑である（特公平１−４０
８１７号公報、特公平３−４７２５９号公報、特公平５
−２５８７０号公報など）。液体クロマトグラフィは分
析的手法であり、工業的生産手段とするには生産性が低
く、設備費やランニングコストが高いなどの問題点があ
る（特開昭６１−３７７５２号公報、特開昭６３−２９
５５２７号公報など）。カラムクロマトグラフィは吸着
剤との親和性によって分離する方法であり、大量の溶剤
を用いること、生産性が低く設備が大型化することなど
の問題点がある（特開昭６１−１９２７９７号公報、特
開昭６３−２９０８４５号公報、特開平３−１６７２９
４号公報など）。最近になって、硝酸銀カラム法が不飽
和度の異なる脂肪酸間の分離に有効であることが報告さ
れているが、高価な硝酸銀を使用することなどの点から
工業生産手段としての問題点がある（特開平４−１０３
５５８号公報、特開平４−１５４８９６号公報、特開平
５−１５９３９８号公報など）。超臨界ガス抽出法は、
近年になってエイコサペンタエン酸やドコサヘキサエン
酸の分離に活発に検討されているが、その分離効果は原
料脂肪酸組成に強く依存するので、他の方法で事前に組
成調整したものでないと分離効果が期待できない（特開
昭６０−２１４７５７号公報、特開昭６０−２１７２９
９号公報、特開平２−８２９８号公報など）。超臨界ガ
ス抽出法は設備費が高く、大がかりなものとなるなどの
難点がある。液液分配法は、非混和性の２種類の溶媒間
に成分を分配させることによる分離法である。本法の分
離効果を支配する要因は２つの溶媒の種類と量、溶媒間
比率、分配温度、原料脂肪酸組成などであるが、キーフ
ァクターは２つの溶媒の種類である。特開昭６４−８３
０４３号公報には炭化水素系溶媒と極性溶媒の組合せ、
特にｎ−ヘプタンと含水アセトニトリルの２溶媒系を用
いる液液分配法による高度不飽和脂肪酸の濃縮方法が開
示されているが、この方法では魚油などに含まれている
二重結合数が３個以上の不飽和脂肪酸がすべて濃縮され
るので、ω３系の脂肪酸であるＥＰＡの機能阻害性脂肪
酸であるω６系のアラキドン酸（Ｃ２０：４）やＣ１
６：３、Ｃ１６：４、Ｃ１８：３、Ｃ１８：４、Ｃ２
１：５、Ｃ２２：５、Ｃ２２：６なども同時に濃縮され
るという欠点がある。このように、従来のエイコサペン
タエン酸またはそのエステルの濃縮方法は、種々の問題
点を有しており、エイコサペンタエン酸またはそのエス
テルのみを簡便かつ効率的に濃縮する方法は見当たらな
い。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、脂肪酸また
はそのエステルの混合物から、有用性の高いエイコサペ
ンタエン酸またはそのエステルを、機能阻害性を有する
ω６系の脂肪酸成分の濃縮を伴うことなく、基質劣化を
招くことなく、簡便な方法により、大量かつ安価に製造
する方法を提供することを目的としてなされたものであ
る。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、エイコサペンタ
エン酸を含む脂肪酸またはエイコサペンタエン酸エステ
ルを含む脂肪酸エステルに、イソアルカンとアセトニト
リルを加えて混合したのち分層することにより、エイコ
サペンタエン酸またはエイコサペンタエン酸エステルが
選択的にアセトニトリル層に濃縮されることを見いだ
し、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。す
なわち、本発明は、（１）エイコサペンタエン酸を含む
脂肪酸混合物に、イソアルカンおよびアセトニトリルを
加えて混合したのち分層し、エイコサペンタエン酸をア
セトニトリル層に濃縮することを特徴とするエイコサペ
ンタエン酸の製造方法、（２）エイコサペンタエン酸を
含む脂肪酸混合物に、イソアルカンおよびアセトニトリ
ルを加えて混合したのち分層し、得られたアセトニトリ
ル層に新たなイソアルカンを加えて混合したのち分層す
る操作を繰り返し、エイコサペンタエン酸をアセトニト
リル層に濃縮することを特徴とするエイコサペンタエン
酸の製造方法、（３）エイコサペンタエン酸エステルを
含む脂肪酸エステル混合物に、イソアルカンおよびアセ
トニトリルを加えて混合したのち分層し、エイコサペン
タエン酸エステルをアセトニトリル層に濃縮することを
特徴とするエイコサペンタエン酸エステルの製造方法、
および、（４）エイコサペンタエン酸エステルを含む脂
肪酸エステル混合物に、イソアルカンおよびアセトニト
リルを加えて混合したのち分層し、得られたアセトニト
リル層に新たなイソアルカンを加えて混合したのち分層
する操作を繰り返し、エイコサペンタエン酸エステルを
アセトニトリル層に濃縮することを特徴とするエイコサ
ペンタエン酸エステルの製造方法、を提供するものであ
る。

【０００５】

【発明の実施の形態】本発明方法は、エイコサペンタエ
ン酸を含む脂肪酸混合物およびエイコサペンタエン酸エ
ステルを含む脂肪酸エステル混合物に適用することがで
きる。エイコサペンタエン酸を含む脂肪酸混合物は、主
として魚油の加水分解によって得ることができ、このよ
うな脂肪酸混合物を与える魚油としては、例えば、イワ
シ油、タラ肝油、カツオ油、ニシン油、マグロ油、サン
マ油などを挙げることができる。高度不飽和脂肪酸は高
温にさらされると変質しやすいので、加水分解は常温付
近で行うことができるリパーゼ分解法などを好適に使用
することができる。本発明方法において、エイコサペン
タエン酸エステルを含む脂肪酸エステルとしては、メチ
ルエステル、エチルエステル、ｎ−プロピルエステル、
イソプロピルエステル、ｎ−ブチルエステル、イソブチ
ルエステル、sec−ブチルエステル、tert−ブチルエス
テルなどの低級アルキルエステルを好適に使用すること
ができる。このようなエイコサペンタエン酸エステルを
含む脂肪酸エステルは、エイコサペンタエン酸を含む脂
肪酸の直接エステル化により、あるいは、脂肪酸成分と
してエイコサペンタエン酸を有する油脂のアルコリシス
によって得ることができる。本発明方法においては、エ
イコサペンタエン酸を含む脂肪酸またはエイコサペンタ
エン酸エステルを含む脂肪酸エステルに、非混和性のイ
ソアルカンとアセトニトリルを加えて混合したのち分層
して、エイコサペンタエン酸またはそのエステルをアセ
トニトリル層に濃縮する。イソアルカンとは、分岐を持
つアルカンのことであり、本発明方法においては、イソ
ペンタン、イソヘキサン、イソヘプタン、イソオクタ
ン、イソノナン、イソデカン、イソウンデカン、イソド
デカンなどのイソアルカンを好適に使用することができ
る。

【０００６】本発明方法においては、イソアルカンと非
混和性の溶媒としてアセトニトリルを使用する。アセト
ニトリルは、純粋な状態で使用することができ、あるい
は、アセトニトリル／水、アセトニトリル／メタノー
ル、アセトニトリル／エタノールなどの混合溶媒の状態
で使用することができる。本発明方法において、イソア
ルカンとアセトニトリルの使用量は、原料脂肪酸または
そのエステルの組成、分離対象成分、分離温度、目標収
率などによって適宜選定することができるが、一般的に
は、原料脂肪酸またはそのエステルに対する２種の溶媒
の合計量が、重量比で１〜５０倍であることが好まし
く、２〜２０倍であることがより好ましい。また、イソ
アルカンとアセトニトリルの使用比率は、重量比で１：
５０〜５０：１であることが好ましく、１：２０〜２
０：１であることがより好ましい。本発明方法におい
て、脂肪酸または脂肪酸エステルを含むイソアルカンと
アセトニトリルを混合および分層する方法には、特に制
限はなく、バッチ式または連続式のいずれの方法も用い
ることができる。バッチ式の場合は、温度制御装置を備
えた撹拌機つきの容器に、イソアルカン、アセトニトリ
ルおよび脂肪酸または脂肪酸エステルを仕込み、撹拌す
ることにより脂肪酸または脂肪酸エステルをイソアルカ
ン層およびアセトニトリル層に分配し、静置により分層
したのち、エイコサペンタエン酸またはそのエステルが
濃縮されたアセトニトリル層を抜き出すことができる。
連続式の場合は、脂肪酸または脂肪酸エステルをイソア
ルカンもしくはアセトニトリルまたはその両方に溶解
し、充填塔、プレート塔などを用いて、比重の大きいア
セトニトリルを上から、比重の小さいイソアルカンを下
から送って向流接触させることができる。連続的に向流
接触させる方法は、少ない溶媒量で高い分離効果が得ら
れるので有利である。連続式においては、遠心抽出機、
回転円板筒、脈動抽出塔なども使用することができる。
本発明方法において、液液分配温度は、原料脂肪酸また
はそのエステルの組成や、分離対象成分、目標収率、溶
媒の種類などによって適宜定めることができるが、一般
的には−４０〜４０℃で行うことが好ましい。低温にな
るとエイコサペンタエン酸またはそのエステルの濃縮効
果は向上するが、収率は低下する傾向にある。

【０００７】本発明方法において、分離されたアセトニ
トリル層からの濃縮されたエイコサペンタエン酸または
そのエステルを含有する脂肪酸または脂肪酸エステルの
回収は、アセトニトリルを減圧留去することにより行う
ことができる。本発明方法においては、イソアルカンと
アセトニトリルの間の液液分配により濃縮されたエイコ
サペンタエン酸を含有する脂肪酸またはそのエイコサペ
ンタエン酸エステルを含有する脂肪酸エステルについ
て、イソアルカンとアセトニトリルによる液液分配を繰
り返すことにより、エイコサペンタエン酸またはそのエ
ステルの濃度を高めることができる。また、濃縮された
エイコサペンタエン酸またはそのエステルを含有するア
セトニトリル層に、新たなイソアルカンを加えて液液分
配を繰り返すことにより、アセトニトリル層中のエイコ
サペンタエン酸またはそのエステルの全脂肪酸または脂
肪酸エステルに占める割合を高めることができる。ある
いは、イソアルカンとアセトニトリルにより液液分配を
行ったのち、イソアルカン層に新たなアセトニトリルを
加えて液液分配を行うことを繰り返し、イソアルカン層
に溶解しているエイコサペンタエン酸またはそのエステ
ルを抽出し、エイコサペンタエン酸またはそのエステル
の収量を高めることができる。本発明方法のイソアルカンおよびアセトニトリルを用い
る液液分配によれば、エイコサペンタエン酸、ドコサヘ
キサエン酸などのω３系の脂肪酸またはそのエステルの
みがアセトニトリル層に濃縮され、アラキドン酸、リノ
ール酸などのω６系の脂肪酸、パルミトレイン酸、オレ
イン酸などの不飽和脂肪酸、パルミチン酸、ステアリン
酸などの飽和脂肪酸またはこれらのエステルはすべてイ
ソアルカン層に濃縮される。従来の液液分配による分離
方法では、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸
などのω３系の脂肪酸とともに、アラキドン酸などのω
６系の脂肪酸も極性溶媒側に濃縮され、ω３系の脂肪酸
とω６系の脂肪酸を分離することができなかった。ω６
系の脂肪酸は、ω３系の脂肪酸に対して機能阻害性を有
するので、エイコサペンタエン酸を医薬品、香粧品、食
品などの生体関連分野において高度利用する上で大きな
障害となっていた。本発明方法によれば、ω６系の脂肪
酸を含まない高純度のエイコサペンタエン酸またはエイ
コサペンタエン酸エステルを容易に製造することができ
る。本発明方法のイソアルカンおよびアセトニトリルを
用いる液液分配においては、ω３系の脂肪酸または脂肪
酸エステルとω６系を含むその他の脂肪酸または脂肪酸
エステルが共存する場合は、ω３系の脂肪酸または脂肪
酸エステルがアセトニトリル層に濃縮され、ω６系を含
むその他の脂肪酸または脂肪酸エステルはイソアルカン
層に濃縮される。しかし、ω３系の脂肪酸または脂肪酸
エステルの含有量が多く、その他の脂肪酸または脂肪酸
エステルの含有量が少ない混合物の場合は、アセトニト
リル層にはエイコサペンタエン酸またはエイコサペンタ
エン酸エステルが選択的に濃縮され、エイコサペンタエ
ン酸またはエイコサペンタエン酸エステル以外のω３系
の脂肪酸または脂肪酸エステルは、その他の脂肪酸また
は脂肪酸エステルとともにイソアルカン層に濃縮される
ので、最終的にエイコサペンタエン酸またはエイコサペ
ンタエン酸エステルを純粋に単離し、エイコサペンタエ
ン酸またはエイコサペンタエン酸以外のすべての脂肪酸
または脂肪酸エステルを分離することが可能である。

【０００８】

【実施例】以下に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細
に説明するが、本発明はこれらの実施例によりなんら限
定されるものではない。なお、実施例において、脂肪酸
組成は、脂肪酸についてはメチルエステル化した後、エ
チルエステルはそのままガスクロマトグラフィによって
分析し、エイコサペンタエン酸エステル及びエイコサペ
ンタエン酸エステルと保持時間が近い成分について含有
量を示した。ガスクロマトグラフィの条件は、次の通り
である。ガスクロマトグラフ：島津ＧＣ−１７Ａカラム：ＤＢ−ＷＡＸ（Ｊ＆Ｗ）、３０ｍ×０.２５mm
×０.２５μｍＦｉｌｍキャリアガス（Ｈｅ）流量：１ml／分サンプル濃度：１００mg／mlイソオクタン注入量：０.２μｌインジェクション温度：２４０℃ カラム温度：２１０℃ 検出器温度：２４０℃ 検出器：ＦＩＤスプリット比：５０：１実施例１液液分配分離槽に、エイコサペンタエン酸エチル６７.
９重量％、ドコサヘキサエン酸エチル２.８重量％、ア
ラキドン酸エチル３.７重量％、オレイン酸エチル１.２
重量％、アラキン酸エチル０.７重量％、ω１１〜７の
二重結合１個、炭素数２０の脂肪酸のエチルエステル
４.８重量％を含む脂肪酸エチルエステルの混合物１.０
kg、イソオクタン４.０kgおよびアセトニトリル４.０kg
を加えて激しく撹拌混合しながら液液分配温度を２０℃
として２０分間撹拌混合を続けた。次いで１０分間静置
して分層したのちアセトニトリル層を分取し、ロータリ
ーエバポレーターによりアセトニトリルを留去して脂肪
酸エチルエステル０.３０kgを得た。この脂肪酸エチル
エステルをガスクロマトグラフィで分析を行った結果、
その組成は、エイコサペンタエン酸エチル７８.８重量
％、ドコサヘキサエン酸エチル３.４重量％、アラキド
ン酸エチル２.１重量％、オレイン酸エチル０.６重量
％、アラキン酸エチル０.０重量％、ω１１〜７の二重
結合１個、炭素数２０の脂肪酸のエチルエステル１.３
重量％であった。実施例２実施例１における液液分配温度を−１０℃に変える以外
は、実施例１と全く同じ操作を繰り返し、アセトニトリ
ル層から脂肪酸エチルエステル０.２０kgを得た。この
脂肪酸エチルエステルの組成は、エイコサペンタエン酸
エチル８２.１重量％、ドコサヘキサエン酸エチル３.５
重量％、アラキドン酸エチル２.２重量％、オレイン酸
エチル０.２重量％、アラキン酸エチル０.０重量％、ω
１１〜７の二重結合１個、炭素数２０の脂肪酸のエチル
エステル０.６重量％であった。実施例３実施例２における使用溶媒量を、イソオクタン２.５kg
およびアセトニトリル５.５kgに変える以外は、実施例
１と全く同じ操作を繰り返し、アセトニトリル層から脂
肪酸エチルエステル０.３９kgを得た。この脂肪酸エチ
ルエステルの組成は、エイコサペンタエン酸エチル８
１.６重量％、ドコサヘキサエン酸エチル３.３重量％、
アラキドン酸エチル１.９重量％、オレイン酸エチル０.
３重量％、アラキン酸エチル０.０重量％、ω１１〜７
の二重結合１個、炭素数２０の脂肪酸のエチルエステル
０.８重量％であった。比較例１実施例１におけるイソオクタン４.０kgの代わりにｎ−
ヘプタン４.０kgを用いる以外は、実施例１と全く同じ
操作を繰り返し、アセトニトリル層から脂肪酸エチルエ
ステル０.２６kgを得た。この脂肪酸エチルエステルの
組成は、エイコサペンタエン酸エチル８０.１重量％、
ドコサヘキサエン酸エチル３.４重量％、アラキドン酸
エチル４.４重量％、オレイン酸エチル０.８重量％、ア
ラキン酸エチル０.０重量％、ω１１〜７の二重結合１
個、炭素数２０の脂肪酸のエチルエステル２.７重量％
であった。実施例１〜３および比較例１の結果を、まとめて第１表
に示す。

【０００９】

【表１】

【００１０】第１表に見られるように、脂肪酸エチルエ
ステルをイソオクタンおよびアセトニトリルを溶媒とし
て分層することにより、ω３系の脂肪酸のエチルエステ
ルであるエイコサペンタエン酸エチルおよびドコサヘキ
サエン酸エチルは濃縮されて濃度が上昇しているが、ω
６系の脂肪酸のエチルエステルであるアラキドン酸エチ
ルは濃度が低下し、さらにω９脂肪酸、ω１１〜７の二
重結合１個の脂肪酸および二重結合を有しない脂肪酸の
エチルエステルの濃度も低下している。この結果から、
イソオクタンおよびアセトニトリルを溶媒として分層す
ることにより、ω３系の脂肪酸のエチルエステルを選択
的に濃縮することができることが分かった。これに対し
て脂肪酸エチルエステルをｎ−ヘプタンおよびアセトニ
トリルを溶媒として分層した比較例１では、ω３系の脂
肪酸のエチルエステルであるエイコサペンタエン酸エチ
ルおよびドコサヘキサエン酸エチルが濃縮され濃度が上
昇しているが、ω３系の脂肪酸の機能阻害性を有するω
６系の脂肪酸のエチルエステルであるアラキドン酸エチ
ルも濃縮されて濃度が上昇している。さらに、比較例１
では、エイコサペンタエン酸の濃縮効果と収率が本発明
の実施例１よりも低い結果となっている。実施例４実施例２の操作を繰り返し、得られたアセトニトリル層
を重量が１.０kgになるまで濃縮し、イソオクタン０.８
kgを加えて０℃において液液分配を行った。アセトニト
リル層を少量サンプリングしてアセトニトリルを蒸発さ
せたところ、アセトニトリル層には脂肪酸エチルエステ
ル０.０６kgが含まれていることが分かった。この脂肪
酸エチルエステルを分析したところ、その組成は、エイ
コサペンタエン酸エチル８７.８重量％、ドコサヘキサ
エン酸エチル３.６重量％、アラキドン酸エチル１.２重
量％、オレイン酸エチル０.０重量％、アラキン酸エチ
ル０.０重量％、ω１１〜７の炭素数２０の脂肪酸のエ
チルエステル０.０重量％であった。実施例５実施例４で得られたアセトニトリル層を重量が０.３０k
gになるまで濃縮し、イソオクタン０.２４kgを加えて１
０℃において液液分配を行い、アセトニトリル層から脂
肪酸エチルエステル０.０３kgを得た。この脂肪酸エチ
ルエステルの組成は、エイコサペンタエン酸エチル９
０.４重量％、ドコサヘキサエン酸エチル３.８重量％、
アラキドン酸エチル０.８重量％、オレイン酸エチル０.
０重量％、アラキン酸エチル０.０重量％、ω１１〜７
の炭素数２０の脂肪酸のエチルエステル０.０重量％で
あった。実施例４〜５の結果を、実施例２の結果と併せて第２表
に示す。

【００１１】

【表２】

【００１２】第２表に見られるように、脂肪酸エチルエ
ステルをイソオクタンおよびアセトニトリルを溶媒とし
て分層し、得られたアセトニトリル層にさらに新たなイ
ソオクタンを加えて分層することにより、ω３系の脂肪
酸のエチルエステルであるエイコサペンタエン酸エチル
およびドコサヘキサエン酸エチルは濃縮されて濃度が上
昇しているが、ω６系の脂肪酸のエチルエステルである
アラキドン酸エチルは濃度が低下し、さらにω９脂肪
酸、ω１１〜７脂肪酸および二重結合を有しない脂肪酸
のエチルエステルは含有されなくなることから、イソオ
クタンおよびアセトニトリルを溶媒として分層を繰り返
すことによりω３系の脂肪酸のエチルエステルを選択的
に濃縮することができることが分かった。実施例６実施例３において得られたイソオクタン層に、アセトニ
トリル５.５kgを加えて−１０℃において液液分配によ
り２回目のアセトニトリル抽出を行い、アセトニトリル
層から脂肪酸エチルエステル０.２８kgを得た。この脂
肪酸エチルエステルの組成は、エイコサペンタエン酸エ
チル８０.０重量％、ドコサヘキサエン酸エチル３.３重
量％、アラキドン酸エチル２.１重量％、オレイン酸エ
チル０.３重量％、アラキン酸エチル０.０重量％、ω１
１〜７の二重結合１個、炭素数２０の脂肪酸のエチルエ
ステル０.８重量％であった。実施例３および実施例６の結果を、併せて第３表に示
す。

【００１３】

【表３】

【００１４】第３表の結果から、イソオクタンおよびア
セトニトリルを溶媒として分層したのち、さらにイソオ
クタン層にアセトニトリルを加えて分層すると、アセト
ニトリル層からは１回目の分層のときよりはエイコサペ
ンタエン酸エチルの濃度がわずかに低いが、１回目とほ
ぼ同様にω３系の脂肪酸のエチルエステルが濃縮され、
それ以外の脂肪酸のエチルエステルの濃度が低下した混
合物が得られることが分かった。実施例７エイコサペンタエン酸エチル８８.３重量％、ドコサヘ
キサエン酸エチル２.５重量％、アラキドン酸エチル２.
５重量％、二重結合４個、炭素数１８のω３脂肪酸のエ
チルエステル４.６重量％、二重結合５個、炭素数２１
のω３脂肪酸のエチルエステル０.９重量％および二重
結合５個、炭素数２２のω３脂肪酸のエチルエステル
０.３重量％を含む脂肪酸エチルエステル１.０kgに、イ
ソオクタン４.０kgとアセトニトリル４.０kgを加え、液
液分配温度−２０℃で実施例１と同様に操作してアセト
ニトリル層を分取し、このアセトニトリル層から脂肪酸
エチルエステル０.３８kgを得た。この脂肪酸エチルエ
ステルの組成は、エイコサペンタエン酸エチル９３.２
重量％、ドコサヘキサエン酸エチル２.０重量％、アラ
キドン酸エチル１.０重量％、二重結合４個、炭素数１
８のω３脂肪酸のエチルエステル３.５重量％、二重結
合５個、炭素数２１のω３脂肪酸のエチルエステル０.
３重量％および二重結合５個、炭素数２２のω３脂肪酸
のエチルエステル０.０重量％であった。結果を第４表
に示す。

【００１５】

【表４】

【００１６】第４表の結果から、エイコサペンタエン酸
エチルを含むω３系の脂肪酸のエチルエステルの含有量
が多い脂肪酸のエチルエステルを、イソオクタンとアセ
トニトリルにより分層すると、アセトニトリル層におい
て、ω６系の脂肪酸であるアラキドン酸の濃度は低下す
るが、エイコサペンタエン酸エチル以外のω３系の脂肪
酸のエチルエステルの濃度も低下し、ω３系の脂肪酸の
エチルエステルの中でもエイコサペンタエン酸エチルが
アセトニトリルに対して特に強い親和性を有し、選択的
に濃縮されることが分かる。実施例８エイコサペンタエン酸エチル１８.１重量％、ドコサヘ
キサエン酸エチル６.９重量％、アラキドン酸エチル１.
２重量％、パルミチン酸エチル１７.９重量％、パルミ
トレイン酸エチル８.１重量％およびオレイン酸エチル
１２.９重量％を含む魚油脂肪酸のエチルエステル１.０
kgに、イソオクタン４.０kgおよびアセトニトリル４.０
kgを加え、液液分配温度−１０℃で実施例１と同様に操
作してアセトニトリル層を分取し、アセトニトリル層か
ら脂肪酸エチルエステル０.１２kgを得た。この脂肪酸
エチルエステルの組成は、エイコサペンタエン酸エチル
３９.４重量％、ドコサヘキサエン酸エチル１４.９重量
％、アラキドン酸エチル１.１重量％、パルミチン酸エ
チル５.０重量％、パルミトレイン酸エチル４.２重量％
およびオレイン酸エチル４.３重量％であった。結果を
第５表に示す。

【００１７】

【表５】

【００１８】第５表の結果から、魚油脂肪酸のエチルエ
ステルをイソオクタンとアセトニトリルで分層すること
により、ω３系の脂肪酸のエチルエステルであるエイコ
サペンタエン酸エチルおよびドコサヘキサエン酸エチル
が濃縮されて濃度が上昇し、ω３系の脂肪酸以外の脂肪
酸のエチルエステルの濃度が低下していることが分か
る。実施例９エイコサペンタエン酸９７.９重量％、ドコサヘキサエ
ン酸０.８重量％、アラキドン酸０.８重量％、二重結合
５個、炭素数２１のω３脂肪酸０.３重量％および二重
結合５個、炭素数２２のω３脂肪酸０.２重量％を含む
脂肪酸１.０kgに、イソオクタン４.０kgおよびアセトニ
トリル４.０kgを加え、液液分配温度−２０℃で実施例
１と同様に操作してアセトニトリル層を分取し、このア
セトニトリル層から脂肪酸０.４７kgを得た。この脂肪
酸の組成は、エイコサペンタエン酸９９.５重量％、ド
コサヘキサエン酸０.３重量％、アラキドン酸０.２重量
％、二重結合５個、炭素数２１のω３脂肪酸０.０重量
％および二重結合５個、炭素数２２のω３脂肪酸０.０
重量％であった。結果を第６表に示す。

【００１９】

【表６】

【００２０】第６表に見られるように、エイコサペンタ
エン酸の濃度は上昇し、アラキドン酸の濃度は低下して
いるが、ω３系の脂肪酸であるドコサヘキサエン酸の濃
度も低下し、炭素数２１および炭素数２２のω３脂肪酸
は含まれていない。この結果から、エイコサペンタエン
酸の濃度が高い場合には、イソオクタンとアセトニトリ
ルによる分層において、ω３系の脂肪酸の中でエイコサ
ペンタエン酸がアセトニトリルに対する親和性が特に強
く濃縮され、エイコサペンタエン酸以外のω３系の脂肪
酸はアセトニトリル層から排除される傾向にあることが
分かる。実施例１０エイコサペンタエン酸２５.４重量％、ドコサヘキサエ
ン酸７.５重量％、アラキドン酸２.３重量％、二重結合
５個、炭素数２２のω３脂肪酸２.４重量％、ステアリ
ン酸４.３重量％およびオレイン酸１５.１重量％を含む
脂肪酸１.０kgに、イソオクタン４.０kgおよびアセトニ
トリル４.０kgを加え、液液分配温度２０℃で実施例１
と同様に操作してアセトニトリル層を分取し、このアセ
トニトリル層から脂肪酸０.２７kgを得た。この脂肪酸
の組成は、エイコサペンタエン酸４０.８重量％、ドコ
サヘキサエン酸１４.２重量％、アラキドン酸１.９重量
％、二重結合５個、炭素数２２のω３脂肪酸２.７重量
％、ステアリン酸１.４重量％およびオレイン酸８.０重
量％であった。結果を第７表に示す。

【００２１】

【表７】

【００２２】第７表の結果から、イソオクタンとアセト
ニトリルを用いた分層により、ω３系の脂肪酸であるエ
イコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸および二重結
合５個、炭素数２２のω３脂肪酸の濃度はすべて上昇
し、それ以外の脂肪酸は、ω６系の脂肪酸であるアラキ
ドン酸を含めてすべて濃度が低下していることから、イ
ソオクタンとアセトニトリルを用いる分層により、ω３
系の脂肪酸が選択的に濃縮されることが分かる。実施例１１エイコサペンタエン酸１３.９重量％、ドコサヘキサエ
ン酸８.８重量％、アラキドン酸１.１重量％、パルミチ
ン酸１７.１重量％、パルミトレイン酸９.７重量％およ
びオレイン酸１３.７重量％を含む魚油脂肪酸１.０kg
に、イソヘキサン３.０kgおよびアセトニトリル４.０kg
を加え、液液分配温度−１０℃で実施例１と同様に操作
してアセトニトリル層を分取し、このアセトニトリル層
から脂肪酸０.１５kgを得た。この脂肪酸の組成は、エ
イコサペンタエン酸３３.２重量％、ドコサヘキサエン
酸１５.８重量％、アラキドン酸１.０重量％、パルミチ
ン酸８.１重量％、パルミトレイン酸６.９重量％および
オレイン酸７.３重量％であった。結果を第８表に示
す。

【００２３】

【表８】

【００２４】第８表にの結果から、イソヘキサンとアセ
トニトリルを用いた分層においても、ω３系の脂肪酸で
あるエイコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸は
濃縮されて濃度が上昇し、ω６系の脂肪酸であるアラキ
ドン酸を含む他のすべての脂肪酸の濃度は低下している
ことが分かる。

【００２５】

【発明の効果】本発明方法によれば、エイコサペンタエ
ン酸を含有する脂肪酸またはエイコサペンタエン酸エス
テルを含有する脂肪酸エステルより、機能阻害性を有す
るω６系の脂肪酸を含まないエイコサペンタエン酸また
はそのエステルを濃縮し、高純度のエイコサペンタエン
酸またはそのエステルを製造することができる。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】エイコサペンタエン酸を含む脂肪酸混合物
に、イソアルカンおよびアセトニトリルを加えて混合し
たのち分層し、エイコサペンタエン酸をアセトニトリル
層に濃縮することを特徴とするエイコサペンタエン酸の
製造方法。
【請求項２】エイコサペンタエン酸を含む脂肪酸混合物
に、イソアルカンおよびアセトニトリルを加えて混合し
たのち分層し、得られたアセトニトリル層に新たなイソ
アルカンを加えて混合したのち分層する操作を繰り返
し、エイコサペンタエン酸をアセトニトリル層に濃縮す
ることを特徴とするエイコサペンタエン酸の製造方法。
【請求項３】エイコサペンタエン酸エステルを含む脂肪
酸エステル混合物に、イソアルカンおよびアセトニトリ
ルを加えて混合したのち分層し、エイコサペンタエン酸
エステルをアセトニトリル層に濃縮することを特徴とす
るエイコサペンタエン酸エステルの製造方法。
【請求項４】エイコサペンタエン酸エステルを含む脂肪
酸エステル混合物に、イソアルカンおよびアセトニトリ
ルを加えて混合したのち分層し、得られたアセトニトリ
ル層に新たなイソアルカンを加えて混合したのち分層す
る操作を繰り返し、エイコサペンタエン酸エステルをア
セトニトリル層に濃縮することを特徴とするエイコサペ
ンタエン酸エステルの製造方法。