JPH09503493A - 微小管安定化剤を用いたアテローム性動脈硬化症または再狭窄症の治療方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明はアテローム性動脈硬化症または再狭窄症を予防または軽減する方法、ならびにこれに使用する医薬調製物に関する。特に、本発明は、タキソールまたは水溶性タキソール誘導体のような微小管安定化剤を低投与量用いて治療する動脈損傷後のアテローム性動脈硬化症または再狭窄症を予防または軽減する方法である。本発明で用いる低投与量は、医薬の好ましくない副作用を最小にしながら、動脈閉鎖を防止する。

Description

【発明の詳細な説明】 微小管安定化剤を用いたアテローム性動脈硬化症または再狭窄症の治療方法 発明の分野 本発明はアテローム性動脈硬化症または再狭窄症の進行の危険のある患者の治 療方法に関する。 更に詳しくは、本発明はアテローム性動脈硬化症または再狭窄症の進行を防ぎ 、または減ずるために低用量のタキソール溶液でこれらの患者を治療することに 関する。 発明の背景 血管系の疾患は、先進国において、特に老人を苦しめる主な死亡及び植物状態 の原因である。合衆国のみにおいて、近年の減少傾向は励みとなるものだが、心 臓血管系の疾患は未だに毎年ほぼ百万人もの死亡の原因となっており、これは全 ての死因の半分以上である；心臓血管系の疾患で苦しむおよそ五百万人もの人が 毎年入院している。苦しんでいる人及び物的資源の点から見ると、この疾患によ る犠牲はほとんど計り知れないほどである。 アテローム性動脈硬化症は血管系の疾患の最も一般的な形態であり、重要な身 体の器官への血液の供給が不十分となり、結果として心臓発作、卒中、及び腎不 全を招く。更に、アテローム性動脈硬化症は、喫煙者と同様、高血圧症や糖尿病 を患う人に主な合併症を引き起こす。アテローム性動脈硬化症は、通常血流を調 整する血管の緊張力を調節する動脈壁の正常な血管平滑筋細胞（“ＶＳＭＣ”） のいくつかが、その性質を変えて“癌−様”の振舞いをするようになる慢性的な 血管損傷の型である。これらのＶＳＭＣは異常に増殖するようになり、これらが 内側の血管内膜中に侵入して広がることを可能にする物質（成長因子、組織−分 解酵素及び他のタンパク質）を分泌し、血流を遮断し、そして異常に弱くなった 血管を局所的な血液の凝塊によって完全に遮断し、その動脈につながる組織を死 に到らしめる。 再狭窄症、すなわち矯正的な手術後の狭窄または動脈狭窄の再発は、アテロー ム性動脈硬化症の加速された形態である。近年の証拠によって、冠静脈の移植及 び心臓の同種移植によるアテローム性動脈硬化症に伴う冠動脈の再狭窄症は、自 発的なアテローム性動脈硬化症に到る同じ発病過程が大きく加速された型を示す と考えることができる血管損傷の統合仮説が支持された（Ip,J.H.，et al.，（1 990）J Am Coll Cardiol，15:1667-1687; Muller,D.W.M.，et al.，（1992）J A m Coll Cardiol ，19:418-432）。再狭窄症は、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ） 及び塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）を含む有力な成長−調節分子の関与 する血管損傷に対する一連の複雑な線維増殖的な応答であるため、アテローム性 動脈硬化症の病変部位における後期の段階に共通しており、血管平滑筋細胞増殖 、移動及び新生動脈内膜蓄積に到る。 再狭窄症は、冠動脈バイパス手術（ＣＡＢ）、血管内膜切除術、及び心臓移植 、そして特に心臓バルーン血管形成術、アセレクトミー（atherectomy）、レー ザー剥離または脈管内ステンチング（stenting）の後に生じ（これらのいずれも 患者の三分の一において、６月以内に動脈遮断が再発する（再狭窄））、症状の 再発（または死亡）に影響し、しばしば脈管再生手術を繰り返す必要がある。１ ０年にわたる研究、及び血管形成術、バイパス移植及び血管内膜切除術等のアテ ローム性動脈硬化症の種々の医学的及び外科的治療の最初の成功率の顕著な改善 にも関わらず、後期の再狭窄による第二の失敗が患者の３０−５０％で発生し続 けている（Ross,R．(1993)Nature，362:801-809）。 その結果、動脈遮断を減少または予防するために好結果を与える化学療法に対 する必要性が存在している。合併症または死亡という大きな危険があり、時間及 び費用を消費し、かつ患者にとって不便である脈管再生手術の繰り返しとは対照 的に、この疾患を予防する最も効果的な方法は、細胞レベルにおけるものである 。 全ての真核生物の細胞に存在する細胞内小器官である微小管は、健康で、正常 な細胞の活性のために必要である。これらは細胞分裂のために必要な有糸分裂の 紡錘体の必須成分であり、また、成長因子と細胞表面の受容体との相互作用、及 び細胞間のシグナル伝達の調節と共に、細胞の形及び固有運動性、固定化、細胞 内小器官間の輸送、細胞外への分泌の過程のような他の細胞活性を維持するため に必要である（Dustin,P.（1980）Sci.Am.，243:66-76）。更に、微小管は、有 糸分裂の開始、チューブリンへの結合及びリン酸化を調節するｃ−ｍｏｓ癌遺伝 子及びＣＤＣ−２−キナーゼの双方のように細胞の複製において重要な調節的な 役 割を果たしており（Verde,F．et al．(1990) Nature，343:233-238）、また腫瘍 サプレッサー遺伝子ｐ５３の遺伝子産物、及びＳＶ−４０のＴ−抗原の双方は三 元複合系においてチューブリンに結合する（Maxwell,S.A．et al．(1991) Cell Growth Differen. ，2:115-127）。微小管は、その水溶性タンパク質サブユニッ ト、α−及びβ−チューブリンヘテロダイマーと、静的ではなく、むしろ動的な 平衡状態にある。生理的な条件下で集合するためには、補因子として、グアノシ ン−３−リン酸（ＧＴＰ）と、ある種の微小管に関与し、組織化するタンパク質 を必要とする；他方、高カルシウム濃度と低温は解重合を引き起こす。 従って、微小管とそのサブユニットとの間のこの正常な平衡状態による妨害の ために、微小管に依存する他の活性と同様、細胞分裂と固有運動性が中断させら れると予想される。この戦略はある種の悪性腫瘍の治療に顕著な成果をもって利 用されてきた。事実、コルヒチンやビンカアルカロイドのような抗微小管剤は、 最も重要な抗癌剤の部類にある。微小管の分解を促進するこれらの抗微小管剤は 、多くの他の癌の緩和的な治療においてと同様、急性リンパ球性白血病、ホジキ ン及び非−ホジキン型のリンパ腫、及び生殖細胞腫瘍を含むほとんどの治療可能 な新生物の化学療法において主要な役割を果たしている。 研究中の最も新しく、かつ最も有望な抗微小管剤はタキソールである。タキソ ールはTaxus brevifolia、西洋（太平洋）いちいの木の樹皮から単離された抗微 小管剤である。微小管の分解を促進するコルヒチンやビンカアルカロイドの様な 他の抗微小管剤と異なり、タキソールは異常に安定な微小管の形成を促進するこ とによって、有糸分裂や細胞増殖に必要な微小管ネットワークの正常な動的再構 成を阻害するように働く（Schiff,P.B.，et al．(1979) Nature 277:665; Schif f,P.B.，et al．(1981) Biochemistry 20:3247）。タキソールの存在下、重合に 必要なチューブリンの濃度は顕著に低下する；微小管の集合はＧＴＰなしで、か つ低温で起こり、しかも形成した微小管は希釈、カルシウム、冷却及び阻害剤に よる解重合に対してより安定である。タキソールは重合したチューブリンに可逆 的に結合し、他のチューブリン結合性薬剤はタキソールの存在下においてもまだ チューブリンに結合するだろう。 タキソールは最も広い抗新生物活性のスペクトルを有するものの一つであり、 微小管に対して働きかける化学療法的な戦略において新たに大きな関心が持たれ ている（Rowinsky,E.K.，et al．(1990) Jrnl.of the Nat'l．Cancer Inst.，82 :1247-1259）。近年の研究において、タキソールは、乳癌（Holmes,F.A.，et al ．(1991) JNCI，83:1797-1805）、頭部及び頚部、及び肺の癌と同様、前進性で 治療不応性の卵巣癌（Einzig,A.I.，et al．(1992) J.Clin.oncol.，10:1748） 悪性メラノーマ（Einzig,A.I．(1991) Invest.New Drugs，9:59-64）で顕著な活 性を示した。 タキソールは種々の投与スケジュールを用いた数種の臨床的な試みで、腫瘍の 成長を抑える効果が研究された。タキソールの投与に続いて重篤なアレルギー反 応が観察された。しかしながら、アレルギー反応の発生及びその度合はタキソー ル注入の用量及び速度に影響されることが示された（Weiss,R.B.，et al．(1990 ) J.Clin.Oncol. 8:1263）。 心臓の不整脈はタキソールの投与と関連し、アレルギー反応のように、その発 生はタキソール投与の用量及び速度に影響される。洞徐脈及びモビッツ（Mobitz ）II型の不整脈は、それぞれ患者のおよそ４０％及び５％で起こり、タキソール の注入開始から４−６時間後に始まり、注入完了後４−８時間持続するだろう。 ほとんどの患者において、異常なリズムは一過性、無症候性の、血液動力学的に 安定なものであり、心臓への投薬及び電気的な整調は必要ではない。更に、重篤 な心臓への影響が出る度合はタキソール単独投与の患者では低いことが観察され た。従って、タキソールによる治療においては、毒性と薬剤に対するアレルギー 反応の発生を抑えるために、注入時間を２４時間までとして用いられた。 血管形成術の際、動脈内バルーンカテーテルの膨張は、脱内皮化（deendothel ialization）、内部の弾力層の破壊、そして内側の平滑筋細胞の損傷を引き起こ す。再狭窄症は、おそらくこれに続く炎症、血栓症、及び平滑筋細胞の蓄積の相 互依存性の作用から生じる（Ferrell,M.，et al．(1992)Circ.，85:1630-1631） が、最終的な共通の経路は内側のＶＳＭＣの収縮性から分泌性の表現型への脱分 化の結果として展開する。このことは、主としてＶＳＭＣが、新生動脈内膜の線 維増殖的な病変を形成しながら、周りの基礎膜を分解する基質メタロプロテイナ ーゼを分泌し、増殖及び動脈内膜への走化性移動をし、及び大きな細胞外基質を 分泌することを意味する。動脈損傷後のＶＳＭＣ表現型の脱分化の多くは新生細 胞のそれ（すなわち、異常増殖、成長−調節分子及びプロテアーゼの分泌、移動 及び基礎膜への侵入）をまねたものである。 再狭窄症を予防するための抗微小管剤コルヒチンの利用についての他の研究が あるが、逆の結論が報告されている（Currier,et al.，“コルヒチンはアテロー ム性動脈硬化症ウサギにおける腸管の血管形成術後の再狭窄症を阻害する”(198 9) Circ.，80:II-66; O'Keefe et al.，“冠状血管形成術後の再狭窄症の予防に おけるコルヒチンの無効性”(1992) J.Am.Coll.Cardiol.，19:1597-1600参照） 。 この結果からは、この疾患を予防または軽減するためにタキソールのような微小 管安定化剤の利用を示唆することができない。従って、本発明の方法はタキソー ルまたは水溶性タキソール誘導体のような微小管安定化剤を用いたアテローム性 動脈硬化症及び再狭窄症の進行を予防または軽減するものである。アテローム性 動脈硬化症または再狭窄症の予防におけるこの微小管安定化のメカニズムはタキ ソール、及び異なる基礎的メカニズムを介して比較し得る微小管効果を示す²Ｈ₂ Ｏ（酸化デューテリウム）を用いた細胞増殖及び移動に関する実験での類似の結 果によって支持される。 従って、本発明の目的は、非常に安定化したチューブリン形成を促進する薬剤 での治療によってアテローム性動脈硬化症または再狭窄症の進行を軽減または予 防する方法を提供することである。 本発明の更に他の目的は、低用量のタキソールまたは水溶性タキソール誘導体 を含有する製薬学的調製物を用いてアテローム性動脈硬化症または再狭窄症を予 防または軽減する方法を提供することである。 引用文献は全て参考としてここに挿入する。 発明の概要 本発明のこれら及び他の目的に従って、タキソールまたは水溶性タキソール誘 導体のような微小管安定化剤の治療的に有効な量で治療することからなる、アテ ローム性動脈硬化症または再狭窄症を予防または軽減する方法を提供する。薬剤 の治療的に有効な量とは、アテローム性動脈硬化症または再狭窄症の進行を予防 または軽減するために十分な量である。 この方法によって、アテローム性動脈硬化症または再狭窄症にり患している患 者においてこれらの疾患の進行を予防または軽減する効果的な方法が提供される 。更に、用いる化学療法剤が低用量であるために、患者に副作用が現れる可能性 は減少する。 図面の簡単な説明 図１はＶＳＭＣの基礎膜タンパク質で被覆したフィルターへの侵入性のタキソ ール誘導性損傷、及びタキソールによる培養ＶＳＭＣ［³Ｈ］−チミジンの取り 込みの阻害を示す。 図２Ａ−２Ｃはラット頚動脈のバルーンカテーテル損傷後の平滑筋細胞新生動 脈内膜蓄積のタキソールによる阻害を示す。タキソールはラット頚動脈のバルー ンカテーテル損傷から１１日後の動脈内膜平滑筋細胞の蓄積を阻害する。図２Ａ −２Ｃは、施術１１日経過後のバルーンカテーテルを入れたラットの通常の冠動 脈のヘマトキシリン−及び−エオシン染色横断面である。（２Ａ）非損傷；（２ Ｂ）損傷及び担体、及び（２Ｃ）損傷及びタキソール。 図３は、酸化デューテリウム用量依存的なＶＳＭＣの化学的侵入の阻害、及び 培養ＶＳＭＣのブロモデオキシウリジン（ＢｒＤＵ）の取り込みの酸化デューテ リウムによる阻害を示す。 図４Ａ−４Ｃはプラスチック上で培養したＶＳＭＣにおいて用量依存的な微小 管の束化を引き起こすタキソール濃度を示す。 図５Ａ−５Ｂは培養ＶＳＭＣにおける酸化デューテリウム誘導性の微小管の束 化を示す。（５Ａ）対照、ＶＳＭＣ 非−血清 飢餓条件 抗チューブリン抗体 （α−チューブリン）。（５Ｂ）７５％酸化デューテリウム ＶＳＭＣ 非−血 清 飢餓条件 抗チューブリン抗体（α−チューブリン）。 発明の詳細な説明 本発明の具体例の実施は、腹腔内または皮下注射、持続的な静脈内注入、経口 的な摂取または局所的な（直接）投与、あるいはこれら２種以上の組み合せのよ うな、数種の選択的な薬剤輸送経路を介して達成することができる。注射または 持続注入のための溶液を処方する場合、最初にタキソール溶液を調製しなければ ならない。タキソールは、ポリオキシエチレンヒマシ油（Cremophor EL）５０％ 及び脱水アルコール、ＵＳＰ（５０％）の担体中６mg/mlの濃縮溶液として、５ ｍｌのバイアル（３０mg/バイアル）で、ＣＴＥＰ、ＤＣＴ、ＮＣＩ（ＩＮＤ＃２２ ８５０）を通じて供給されている。そのままのバイアルで冷凍保存し、使用に先 立って希釈すべきである。５％のブドウ糖注射液あるいは０．９％の塩化ナトリ ウムで希釈する場合、０．３−１．２mg/mlのタキソール濃度のものが、室温で 少なくとも１２時間物理的及び化学的に安定である。（ＮＣＩ研究薬；製薬学的 データ（NCI Investigation Drugs;Pharmaceutical Data）(1990)）。ポリオレ フィン容器で調製した、Ｄ５ＷまたはＮＳ希釈のタキソール濃度０．６mg/mlの もの、及びＮＳ希釈の１．２mg/mlのものは、環境温度（２０−２３℃）で少な くとも２５時間安定であることも報告された。（Waugh,et al．(1990) Am.J.Hos p.Pharm. 48,1520）。これらの濃度で上記の時間の安定性が示されたが、これは タキソールのいずれの濃度を用いても良い本発明の実施を制限することを意味す るものではない。 タキソールの溶液全てにおいて、薬剤濃度及び調製後の時間の経過に直接比例 して、わずかなもやが生じる。タキソール注入用溶液の調製後、（ＬＶＰのため のＵＳＰ粒子状物質試験(USP Particulate Matter Test)によって確立された許 容限界内で）溶液中に小数の繊維の形成が観察された。粒子の形成は薬剤の効力 の損失を示すものではないが、過剰な粒子状物質の生成を示す溶液は用いるべき ではない。従って、持続注入によって投与する場合、ライン内濾過が必要かも知 れず、これは親水性で、孔のサイズが０．２２ミクロン以下の微孔性フィルター （IVEX-HP In Line Filter Set-SL,15",Abbott model # 4525またはこれと同等 なもの）を、注入ポンプに到る末端の流体の経路内に導入することによって達成 することができる。 タキソールは塩化ポリビニル（ＰＶＣ）バッグ及び静脈内チューブからのジエ チルヘキシルフタレート（ＤＥＨＰ）可塑剤の浸出のため、非−可塑化溶液用容 器（例えばガラス、ポリオレフィン、またはポリプロピレン）で調製しなければ ならない。タキソールはＰＶＣ静脈内投与用または注射用セットで投与してはな らない。従って、ＩＶニトログリセリンセット（またはこれと同等なもの）のよ うなポリオレフィン−、またはポリエチレン−系列のセットを、（持続注入のた めのタキソール溶液を含有する）瓶またはバッグをＩＶポンプにつないで用いる べきであり、次に０．２２ミクロンのフィルターをＩＶセットに付け、次いでこ れを患者の中央接触装置に直接つなげても良い。必要であれば、ポリオレフィン −系列の延長セット（Polyfin^TM Extension Set,MiniMed Technologies，Model# 126）をＩＶポンプと患者の中央接触装置の間の距離を埋めるために用いること ができる。 タキソール利用の１つのカテゴリーは、冠動脈または末梢動脈の治療的な血管 形成術またはatherectomyの後、冠動脈のバイパス移植またはステント手術の後 、あるいは末梢血管の手術の後（例えば頚動脈または他の末梢血管の血管内膜切 除術、血管のバイパス、ステントまたは補充的移植術）の狭窄の再発（再狭窄症 ）の予防を包含するものであろう。ヒトにおける投与スケジュールは、血管の施 術に先立って約０．５−２mg/kg（２０−８０mg/m²）までによる２４時間の持続 性ＩＶ前処理、施術後２４時間の約０．２５−２mg/kg（１０−８０mg/m²）の持 続性ＩＶ注入、次いで２１日毎に１から６サイクルで２４時間の約０．２５−２ mg/kg（１０−８０mg/m²）の持続性ＩＶ注入からなるようにすることができる（ が、これに限定されるものではない）。このような投与量は、ヒトの癌の治療に 用いる量（およそ４−６mg/kg）より顕著に少ない。 タキソール利用のもう１つのカテゴリーは、血管系疾患（アテローム性動脈硬 化症）の進行の一次的な予防または軽減を包含するものであろう。こうした応用 のいくつか（こうしたものの例としては、心臓の同種移植（組織移植）のアテロ ーム性動脈硬化症、真性糖尿病の血管合併症から生じる多臓器系の不全または気 の毒な手術の対象者である患者で加速された、医学的−治療不応性のアテローム 性動脈硬化症の予防がある）では、５−７日間にわたる持続性の低用量（１−５ mg/m²/日）ＩＶ注入の予後治療サイクルが必要かも知れない。アレルギー反応が 生じる可能性を最小限にするために、タキソールによる治療のいずれにおいても 、タキソール投与の１４及び７時間前にデキサメタゾン２０ｍｇの経口的な前投 与、タキソール投与の３０分前にジフェンヒドラミン５０ｍｍｇのＩＶ注入、シ メチジン３００ｍｇのＩＶ注入が一般に必要である。外科手術に関連しない更に 他の応用としては、血管線維筋性異形成、結節性多発動脈炎、及びタカヤス動脈 炎の治 療がある。前述の応用のそれぞれは、全身毒性がわずかしかない高用量の局所的 な薬剤投与を可能にするタキソール（または他の微小管安定化剤）の持続性放出 製剤の選択的、局所的な応用に用いても良い。 更に、タキソールの水溶性誘導体も本発明で用いることができる。タキソール の水溶性誘導体としては、Haugwitzらの米国特許No.5,157,049号（参考のために ここに挿入した）に記載したように、２’−サクシニル−タキソール；２’−サ クシニル−タキソールトリエタノールアミン；２’−グルタリル−タキソール； ２’−グルタリル−タキソールトリエタノールアミン塩；Ｎ−（ジメチルアミノ エチル）グルタミドとの２’−Ｏ−エステル；Ｎ−（ジメチルアミノエチル）グ ルタミド塩酸塩との２’−Ｏ−エステルが挙げられるが、これらに限定されるも のではない。これらの水溶性タキソール誘導体は、これらの薬剤の薬物動態学の 解明途上で適当な修正をしながら、タキソールで先に挙げたものと類似の投与ス ケジュールで投与することができる。 活性成分としてタキソールの水溶性誘導体の有効量を含有する製薬学的組成物 は、必要であれば製薬学的に許容し得る非毒性の無菌の担体と共に、この分野で 良く知られる標準的な方法で容易に調製することができる。このような調製物は 、アテローム性動脈硬化症にり患またはこれが進行する危険のある患者に対し、 疾患の進行の予防または軽減のために経口的に、または注射可能な形態で、ある いは患部に直接投与することができる。 以下の実施例は、血管平滑筋細胞の増殖及び移動を阻害する点におけるタキソ ール（またはタキソールの水溶性誘導体を含むが、これに限定されない他の微小 管安定化剤）の有効性を説明するものであり、本発明の範囲を制限するために用 いるべきではない。 実施例１ 種々のタキソール濃度で前処理した培養ＶＳＭＣの、再構成基底膜タンパク質 で被覆されたフィルターに侵入するインビトロの能力を試験して、タキソール誘 導された微小管束状化（ｂｕｎｄｌｉｎｇ）がインビボでの新生動脈内膜形成に 必要な細胞プロセスを損傷するかを評価した。 ６カ月齢のウイスター（Ｗｉｓｔａｒ）ラットから得たラット大動脈の内層を コラゲナーゼ／エラスターゼ酵素処理することによって血管平滑筋細胞（ＶＳＭ Ｃ）を単離した。細胞を１０％ウシ胎児血清、高グルコースＤＭＥＭおよびアミ ノ酸補充した培地で維持した。細胞培養物は５％ＣＯ₂中、３７℃で維持した。 培養中、タキソール前処理の１８時間後に、細胞を３．７％ホルマリンで固定 し、１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で透過性にし、そして重合チューブリンをマ ウス抗−δ−チューブリン抗体（重合δ−チューブリンに対するＳＭＩ６２モノ クローナル抗体、Ｐａｒａｇｏｎ Ｂｉｏｔｅｃ，Ｉｎｃ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ ，ＭＤ）で標識した。二次標識は銀増強した１ｎｍ金結合ウサギ抗−マウス抗体 （Ｇｏｌｄｍａｒｋ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，Ｎ Ｊ）で行った。（４Ａ）対照、（４Ｂ）０．１ｎＭタキソール、（４Ｃ）１ｎＭ タキソール、および（４Ｄ）１０ｎＭタキソールで処理したＶＳＭＣの代表的光 学顕微鏡写真を図４Ａ−４Ｄに示す。 上部チャンバーが多孔性ＰＶＰＦフィルターで下部チャンバーから分離されて いる修飾ボイデン（Ｂｏｙｄｅｎ）チャンバー（Albini，et al.，Cancer Res． 47:3239-3245，1987）を用いて、化学侵入（ｃｈｅｍｏｉｎｖａｓｉｏｎ）（ボ イデンチャンバー）アッセイを行った。ＰＶＰＦフィルター（孔直径８μｍ、Ｎ ｕｃｌｅｏｐｏｒｅ Ｆｉｌｔｅｒｓ，Ｐｌｅａｓｏｎｔｏｎ，ＣＡ）を被覆し 、１００μｇ／ｍｌタイプＩコラーゲン、５μｇ／ｍｌフィブロネクチン、およ び５μｇ再構成基底膜（Ｅｎｇｌｅｂｒｅｔｈ−Ｈｏｌｍ−Ｓｗａｒｍ腫瘍から 調製（Kleinman，et al.，Biochemistry，25:312-318，1986）を含む溶液で順次 風乾して、マトリックス物質の連続的１０μｍ厚さの被覆を製造した。下部（化 学誘引物質）チャンバーにＤＭＥＭ中の１０ｎｇ／ｍｌＰＤＧＦ ＢＢを加える ことによってボイデンチャンバーを組み立てた。次に０．１％ＢＳＡを含むＤＭ Ｅ Ｍ中に懸濁した細胞（約２００，０００）を上部チャンバーに加えた。このアッ セイに用いる細胞のいくつかは培養中にタキソール（３０ｐＭ〜１００ｎＭ濃度 ）で１８時間前処理した。タキソール処理群では、前処理に用いたのと同じ濃度 で上部および下部チャンバーにタキソールを加えた。次にチャンバーを５％ＣＯ₂ 雰囲気中、３７℃で４時間インキュベートした。インキュベーション期間の終 わりに、細胞を固定し、ヘマトキシリンとエオシンで染色した。上部表面（非侵 入者）上の細胞を機械的に除去し、フィルターの下側（侵入者）にある細胞を４ ００倍の顕微鏡で計数した（１フィルターにつき４つの視野を無差別に計数し、 すべての実験は３回行い、異なるＶＳＭＣ調製物を用いる個別の場合につきこの 各３回のアッセイを少なくとも３回繰り返した）。再構成基底膜を除く以外は上 述のボイデンチャンバーと類似の方法で走化性をアッセイした。この化学侵入ア ッセイは、インビトロでの侵入性とインビボでの細胞挙動との高い相関を示すも のとして当業者に受け入れられているものである（Iwamoto Y，et al.，Advance s In Experimental Medicine & Biology，324:141-9，1992）。 誘引物質としてＰＤＧＦ−ＢＢを用ると、タキソールは０．５ｎＭの半値幅（ ｈａｌｆ−ｍａｘｉｍａｌ）阻害濃度でＶＳＭＣ侵入を阻害した。タキソールは １００ｎＭで実質的に完全に阻害し、３０ｐＭ（使用したうちで最低投与量）で も有意な阻害が観察された（図１）。誘引物質としてＰＤＧＦ−ＢＢを用いる走 化性アッセイ（フィルター孔を閉じる基底膜タンパク質を用いずに、フィブロネ クチンとコラーゲンＩのみで被覆したフィルター）を類似の方法で行ったところ 、同様の結果が得られた。これらの結果は、少なくとも薬剤ナノモルレベルでの タキソールが、このアッセイでＶＳＭＣが基底膜タンパク質を貫通するのに必要 であることが知られているコラゲナーゼおよびメタロプロテイナーゼの細胞分泌 を阻害するというよりは、むしろ主として移動および／または形態変化の阻害に よってＶＳＭＣ侵入を阻害することを示している。 上述のボイデンアッセイの終結４時間後に除去した上清についてゼラチナーゼ ザイモグラフィーを行った。ＶＳＭＣによって培地中に分泌されたゼラチン分解 性プロテイナーゼを、０．１％（ｗ／ｖ）ゼラチンを含む１０％ポリアクリルア ミドゲル中の非還元性ドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳 動で分析した。電気泳動後、ゲルを２．５％（ｖ／ｖ）Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１０ ０中２３℃で３０分インキュベートし、次いで０．２Ｍ ＮａＣｌ、５ｍＭ Ｃ ａＣｌ₂、０．０２％ Ｂｒｉｊ３５（ｗ／ｖ）、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ （ｐＨ７．６）中、３７℃で１８時間インキュベートすることによってゼラチナ ーゼを変性した。ゲルを０．５％クマシーブリリアントブルーＧ−２５０で９０ 分染色し、１０％酢酸、４０％メタノールで脱染色した。青色染色されたゼラチ ンのバックグランドに対する透明のバンドによってゼラチン分解活性が示された 。 これらのボイデンチャンバー侵入実験からのゼラチナーゼザイモグラフィーア ッセイは、ＶＳＭＣコラゲナーゼ分泌レベルは、対照と比較して３０ｐＭから１ ００ｎＭのタキソール範囲で有意な変化がなかったことを確認する（図１、挿入 図）。 実施例２ 微小管の安定化と超重合がＶＳＭＣ侵入のタキソール阻害に関与する決定的か つ十分な要因であることを確認するために、酸化デューテリウム（重水、²Ｈ₂Ｏ ）を用いて化学侵入（ボイデンチャンバー）アッセイを行った。酸化デューテリ ウムはタキソールとは異なるメカニズムで微小管／チューブリン重合を増強する 。増強されたチューブリンの疎水性相互作用によってαβ−チューブリンヘテロ ダイマーの重合に決定的な濃度を減少すること（Itoh，T.J.，et al.，Biochim ．Biophys．Acta.，800:21-27，1984）と、非重合チューブリン集団を重合形に 変換すること（Takahashi，T.C.，et al.，Cell Struct．Funct.，9:45-52，198 4）の両方によって、酸化デューテリウムのアイソトープと溶媒効果の組み合わ せが、微小管の重合を可逆的に増加する。 ６カ月齢のウイスターラットから得たラット大動脈の内層のコラゲナーゼ／エ ラスターゼ酵素消化によってＶＳＭＣを単離した。細胞を１０％ウシ胎児血清、 高グルコースＤＭＥＭおよびアミノ酸補充した培地で維持した。細胞培養物は５ ％ＣＯ₂中、３７℃で維持した。 酸化デューテリウム処理した細胞において、濃縮ストックからＤＭＥＭを調製 するときに²Ｈ₂Ｏ（ｖ／ｖ）で水（Ｈ₂Ｏ）を置換した。培養中、酸化デューテ リウム前処理の１８時間後に、細胞を３．７％ホルマリンで固定し、１％Ｔｒｉ ｔｏｎ Ｘ−１００で透過性にし、そして重合チューブリンをマウス抗−δ−チ ューブリン抗体（重合δ−チューブリンに対するＳＭＩ６２モノクローナル抗体 、Ｐａｒａｇｏｎ Ｂｉｏｔｅｃ，Ｉｎｃ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ）で標識 した。二次標識は銀増強した１ｎｍ金結合ウサギ抗−マウス抗体（Ｇｏｌｄｍａ ｒｋ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，ＮＪ）で行った。 （５Ａ）対照、および（５Ｂ）７５％酸化デューテリウム処理したＶＳＭＣの代 表的光学顕微鏡写真を図５Ａ−５Ｂに示す。 上部チャンバーが多孔性ＰＶＰＦフィルターで下部チャンバーから分離されて いる修飾ボイデンチャンバーを用いて、化学侵入（ボイデンチャンバー）アッセ イを行った。ＰＶＰＦフィルター（孔直径８μｍ、Ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ Ｆｉ ｌｔｅｒｓ，Ｐｌｅａｓｏｎｔｏｎ，ＣＡ）を被覆し、１００μｇ／ｍｌタイプ Ｉコラーゲン、５μｇ／ｍｌフィブロネクチン、および５μｇ再構成基底膜（Ｅ ｎｇｌｅｂｒｅｔｈ−Ｈｏｌｍ−Ｓｗａｒｍ腫瘍から調製）を含む溶液で順次風 乾して、マトリックス物質の連続的１０μｍ厚さの被覆を製造した。下部（化学 誘引物質）チャンバーにＤＭＥＭ中の１０ｎｇ／ｍｌＰＤＧＦ−ＢＢを加えるこ とによってボイデンチャンバーを組み立てた。次に０．１％ＢＳＡを含むＤＭＥ Ｍ中に懸濁した細胞（約２００，０００）を上部チャンバーに加えた。このアッ セイに用いる細胞のいくつかは培養中に酸化デューテリウム（Ｈ₂Ｏに代えて２ ５％、５０％、または７５％ｖ／ｖ）で１８時間前処理した。酸化デューテリウ ム処理群では、前処理に用いたのと同じ濃度で上部および下部チャンバーに²Ｈ₂ Ｏ置換ＤＭＥＭ（ｖ／ｖ）を加えた。次にチャンバーを湿潤５％ＣＯ₂雰囲気中 、３７℃で４時間インキュベートした。実験の終わりに、フィルターを除去し、 細胞を固定し、ヘマトキシリンとエオシンで染色した。上部表面（非侵入者）上 の細胞を機械的に除去し、フィルターの下側（侵入者）にある細胞を４００倍の 顕微鏡で計数した（１フィルターにつき４つの視野を無差別に計数し、すべての 実験は３回行った）。 ２５％、５０％または７５％酸化デューテリウムで１８時間前処理したＶＳＭ Ｃは、タキソールで観察されたのと同様の用量依存性の微小管超重合を引き起こ した。この処理は用量依存的にＰＤＧＦ媒介性のＶＳＭＣボイデンチャンバー侵 入を同様に阻害し、２５％²Ｈ₂Ｏで半値幅阻害を、そして７５％²Ｈ₂Ｏでほぼ完 全な阻害を達成した（図３）。 実施例３ 細胞補充（ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ）と移動に加えて、ＰＤＧＦやｂＦＧＦな どの動脈損傷後に精巧に産生される各種の成長制御分子も分裂促進と細胞増殖に 関係している。ＶＳＭＣ ＤＮＡ合成に対するタキソールの効果を測定するため に、［³Ｈ］チミジン取り込みを測定した。ＶＳＭＣを２４ウエルプレートに４ ．５ｘ１０⁴でプレートした。１０％ＦＣＳ＋ＤＭＥＭ中で５時間インキュベー とした後に、０．５ｍＣｉ「³Ｈ］チミジンを添加し、さらに１６時間インキュ ベーションを続けた。細胞をリン酸緩衝塩液で２回洗浄し、氷上で２時間１０％ ＴＣＡを用いて抽出し、次に２，０００ｇで１０分遠心した。上清を捨てて、ペ レットを１Ｎ ＮａＯＨ０．５ｍｌ中に溶解した。１Ｎ ＨＣｌ０．５ｍｌで中 和した後、［³Ｈ］チミジンの取り込みをベックマン液体シンチレーションカウ ンターで測定した。チミジン添加１８時間前とチミジン取り込み時の両方で、Ｖ ＳＭＣを種々の濃度のタキソールで処理した。これらの実験の各条件を３回実施 した。 タキソールは細胞分裂のインデックスである培養、ＶＳＭＣ［³Ｈ］チミジン 取り込みを用量依存的に阻害し、半値幅阻害濃度は５ｎＭであった。タキソール は１００ｎＭで実質的に完全な阻害を引き起こし、有意な阻害が１ｎＭで観察さ れた（図１）。この阻害プロフィルが侵入および走化性のプロフィルとは幾分異 なるということ、すなわち１ｌｏｇ濃度単位感が低いが、より急勾配の濃度依存 性を示すということは、これらのプロセスの間の微小管の果たす役割がかなり異 なるために起こったと思われる。タキソールはまた、この培養ＶＳＭＣモデルに おいてＰＤＧＦ−ＢＢ刺激したｃ−ｆｏｓ ｍＲＮＡの発現を用量依存的に阻害 し、半値幅は１ｎＭであり、２０ｎＭで実質的に完全に阻害した。したがって、 即時初期遺伝子誘導の阻害が、タキソールがＶＳＭＣにおける成長因子刺激をブ ロックするための別の重要なメカニズムであり、チミジン取り込み結果の少なく とも一部の原因である。 したがって、タキソールは、微小管機能を妨害し、移動および形態変更能を破 壊し、また成長因子で剌激される初期遺伝子の発現と細胞増殖によって、ヒト腫 瘍の治療に用いられているよりも１００〜１０００倍低い濃度で、培養ＶＳＭＣ のインビトロでの侵入と増殖を有意に阻害する。 実施例４ ＶＳＭＣ ＤＮＡ合成に及ぼす酸化デューテリウムの効果を決定するために、 チミジン類似体であるブロモデオキシウリジン（ＢｒＤＵ）の取り込みを測定し た。ＶＳＭＣを２４ウエルプレートに４．５ｘ１０⁴でプレートした。種々の²Ｈ₂ Ｏ濃度で１０％ＦＣＳ＋ＤＭＥＭ中、２０時間インキュベートした後、１０μ Ｍ ＢｒＤＵを加えてさらに４時間インキュベーションを続けた。細胞をリン酸 緩衝塩液（ＰＢＳ）で２回洗浄し、１００％メタノール（−２０℃）で１０分固 定した。細胞を１Ｎ ＨＣｌで２時間インキュベートしてＤＮＡを変性し、次い でＰＢＳで４回洗浄した。２％ＢＳＡ−ＰＢＳ中のマウスモノクローナルＢｒＤ Ｕ抗体（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ）を細胞と一緒に１時間イン キュベートした。ＰＢＳで洗浄後、アルカリホスファターゼと結合させたヤギ抗 −マウス抗体を加えた。チミジンに代えたＢｒＤＵを含む細胞核はアルカリホス ファターゼ基質で赤色に染色され、その他のすべての核は青色に染色される。Ｂ ｒＤＵ−ポジティブな核の割合を、対照（１００％として定義）と酸化デューテ リウム処理群との間で比較した。 その結果は、酸化デューテリウムがタキソールと同様に用量依存的に培養ＶＳ ＭＣ増殖とＤＮＡ合成を阻害することを示唆しており、これはＶＳＭＣ増殖にお ける微小管の動力学の決定的バランスと一致する。 タキソールと酸化デューテリウムは多くの細胞内効果をもつと考えられるが、 微小管（作用メカニズムは異なるが）および多くのレベルでのＶＳＭＣ機能に及 ぼす効果に共通点が存在することは、共通の微小管安定化メカニズム作用が観察 される機能変化の原因であることを示唆する。したがって、タキソールと酸化デ ューテリウムを用いる実験の結果に基づいて、動脈損傷後のアテローム性動脈硬 化症および再狭窄症の進展に関与する多くの形質転換をＶＳＭＣが受けるのに必 要な最も重要且つ感受性な細胞内メカニズムに微小管が関与していることは明ら かであり、微小管がこれらの結果に影響する戦略上の標的となりうる。 実施例５ 加齢動物保護および使用委員会に関する国立研究所（National Institute on Aging Animal Care and Use Committee）で認められたプロトコルに従い、ＧＲ Ｃコロニーから得た６カ月齢のウイスターラットを２０ｍｇ／ｋｇ体重ペンタバ ルビタール、２ｍｇ／ｋｇ体重ケタミン、および４ｍｇ／ｋｇ体重キシラジンで 腹腔内麻酔した。左外側頸動脈に２−フレンチフォガーティ（２−Ｆｒｅｎｃｈ Ｆｏｇａｒｔｙ）塞栓切除術カテーテルでカニューレ挿入し、食塩水で膨張さ せ、頸動脈を３回上下して通過させて膨張させた脱内皮化（ｄｅｅｎｄｏｔｈｅ ｌｉａｌｉｚｉｎｇ）損傷を作出した。動物を２ｍｇ／ｋｇ体重のタキソール溶 液で処理し、対照動物は賦形剤のみ（１日当たり１３．４ｍｌ／ｋｇ体重の１： ２：２：１６５のＤＭＳＯ：クレモフォールＥＬ：脱水エタノール：リン酸緩衝 塩液）を損傷２時間後から始めて腹腔内注射した。タキソール溶液または賦形剤 のみは次の４日間腹腔内注射として投与した。１１日後に動物（タキソール処理 ８匹と賦形剤処理１０匹）を上述のように麻酔し、頸動脈を単離して１０％緩衝 化ホルマリンで固定し、パラフィン中に保持した。頸動脈の断面切片を顕微鏡ス ライドに乗せてヘマトキシリンとエオシンで染色した。頸動脈の画像をディジタ イジングボードに投影して動脈内膜（ｉｎｔｉｍａ）と中膜（ｍｅｄｉａ）の断 面席を測定した。結果を図２Ａ〜２Ｃに示す。先行技術（Ferns，G.A.A．et al. ，Science，253:1129-1132，1991）に示すように、再狭窄症のラット頸動脈損傷 モデルはヒト再狭窄症研究に有用であり、ヒトの治療効果の可能性を示唆する。 損傷頸動脈断面の定量分析によるとタキソール処理は賦形剤処理動物と比較し て新生動脈内膜面積を７０％減少した（表Ｉ）（*Ｐ＜０．００１；†Ｐ＝ＮＳ ；‡Ｐ＜０．００１）。タキソール処理動物の幾つかには実際上新生動脈内膜が 全く認められなかった（損傷をもたらす裸化内皮は存在するが）が、一方賦形剤 処理動物はすべて少なくとも中程度の新生動物内膜の厚みが観察された。 これらの実験に用いられたタキソールのインビボ全身投与量（２ｍｇ／ｋｇ） は、ヒトの癌治療に元々用いられた投与量（３−６ｍｇ／ｋｇ）よりも有意に低 く、前処理療法と最適の治療期間とを組み合わせて劇的に低い全身投与量で同等 またはそれ以上の効果が得られる。さらに、治療の最終目的は「活性化」ＶＳＭ Ｃを抑制すること、あるいは好ましくは成長と移動のための刺激が分散するまで の間、（細胞死をもたらす細胞毒性を引き起こすことなく）まず活性化を防止す ることにあるのであるから、毒性の少ない短期間治療という最終目的がヒトにつ いてもありうる。最終的には、局所的徐放性送達システムが血管形成術後の再狭 窄症を防ぐ最良の解決策を与えるものであり、これによって送達医薬の局所的な 高濃度が得られ全身的毒性の問題を本質的に排除できるであろう。医薬を含浸し たポリマーで被覆した金属ステント、生分解性の医薬溶出性ポリマーステント、 および金属ステントを被覆するための遺伝的にプライムされた内皮細胞などを含 む医薬送達システムが有用であり、あるいは局所的に内皮細胞を被覆するものと して送達される（Muller，D.W.M．et al.，JACC 17:126b-131b，1991）。これら のシステムは全身性の副作用なしに化学治療剤を安全に使用することを可能にす る。あるいは、治療には治療前（すなわち血管手術前）に一定期間持続静脈注入 し、次いで別の治療時期（局所的、直接送達）または手術後（経口、注射）に行 うことも含むことができる。 上記の実施例は、タキソール（またはタキソールの水溶性誘導体を含む、ただ しそれに限定されないその他の微小管安定化剤）が、動脈閉鎖を防止し、それに よって心臓発作、発作（ｓｔｒｏｋｅ）、腎不全や腎臓透析、失明、四肢切断、 神経失調、治療用血管手術／血管形成術または臓器移植の必要性、および慢性的 入院を要する未熟と恒久的障害の可能性を減少し、あるいはこれを防止するのに 使用できることを教示する。本発明を詳細に記載したが、本発明は別の態様も可 能であることを理解できるであろう。本発明の思想と範囲内で変更や修飾がなし うることが当業者には自明である。したがって、前述の開示は例示の目的のみの ためになされたものであり、いかなる意味でも本発明を限定するものでなく、本 発明は請求の範囲によってのみ定義される。

【手続補正書】特許法第１８４条の８ 【提出日】１９９５年８月１７日 【補正内容】 請求の範囲を以下のものに差し替える。 １．治療的に有効な量の微小管安定化剤を含む医薬調製物で患者を治療すること からなる、患者の線維増殖性血管疾患を予防または軽減する方法。 ２．微小管安定化剤がタキソール、タキソール誘導体または酸化デューテリウム である請求項１記載の方法。 ３．タキソール誘導体が２’−サクシニルータキソール；２’−サクシニルータ キソールトリエタノールアミン；２’−グルタリル−タキソール；２’−グルタ リル−タキソールトリエタノールアミン塩；Ｎ−（ジメチルアミノエチル）グル タミドとの２’−Ｏ−エステル；およびＮ−（ジメチルアミノエチル）グルタミ ド塩酸塩との２’−Ｏ−エステルからなる群から選択される請求項２記載の方法 。 ４．線維増殖性血管疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項１記載の方法。 ５．線維増殖性血管疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項２記載の方法。 ６．線維増殖性血管疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項３記載の方法。 ７．線維増殖性血管疾患が再狭窄症である請求項１記載の方法。 ８．線維増殖性血管疾患が再狭窄症である請求項２記載の方法。 ９．線維増殖性血管疾患が再狭窄症である請求項３記載の方法。 １０．治療処置が医薬調製物の全身的送達を含む請求項１記載の方法。 １１．治療処置が医薬調製物の局所的送達を含む請求項１記載の方法。 １２．新生動脈内膜線維増殖性損傷の進展を軽減または予防するための治療的に 有効な量の微小管安定化剤を局所的に送達するための手段を含む医薬送達システ ム。 １３．微小管安定化剤がタキソール、タキソール誘導体または酸化デューテリウ ムである請求項１２記載の医薬送達システム。 １４．患者の線維増殖性血管疾患を予防または軽減するための医薬組成物の製造 への微小管安定化剤の使用。 １５．微小管安定化剤がタキソール、タキソール誘導体または酸化デューテリウ ムである請求項１４記載の使用。 １６．水溶性タキソール誘導体が２’−サクシニルータキソール；２’−サクシ ニルータキソールトリエタノールアミン；２’−グルタリル−タキソール；２’ −グルタリル−タキソールトリエタノールアミン塩；Ｎ−（ジメチルアミノエチ ル）グルタミドとの２’−Ｏ−エステル；およびＮ−（ジメチルアミノエチル） グルタミド塩酸塩との２’−Ｏ−エステルからなる群から選択される請求項１５ 記載の使用。 １７．線維増殖性血管疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項１４記載の使 用。 １８．線維増殖性血管疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項１５記載の使 用。 １９．線維増殖性血管疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項１６記載の使 用。 ２０．線維増殖性血管疾患が再狭窄症である請求項１４記載の使用。 ２１．線維増殖性血管疾患が再狭窄症である請求項１５記載の使用。 ２２．線維増殖性血管疾患が再狭窄症である請求項１６記載の使用。 ２３．治療処置が医薬調製物の全身的送達を含む請求項１４記載の使用。 ２４．治療処置が医薬調製物の局所的送達を含む請求項１４記載の使用。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ)，ＡＭ，ＡＴ， ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｚ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＴ，ＬＵ， ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，Ｐ Ｌ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．治療的に有効な量の微小管安定化化学治療剤を含む医薬調製物で患者を治療 することからなる、患者の動脈疾患を予防または軽減する方法。 ２．微小管安定化化学治療剤がタキソールまたは水溶性タキソール誘導体である 請求項１記載の方法。 ３．水溶性タキソール誘導体が２’−サクシニル−タキソール；２’−サクシニ ル−タキソールトリエタノールアミン；２’−グルタリル−タキソール；２’− グルタリル−タキソールトリエタノールアミン塩；Ｎ−（ジメチルアミノエチル ）グルタミドとの２’−Ｏ−エステル；およびＮ−（ジメチルアミノエチル）グ ルタミド塩酸塩との２’−Ｏ−エステルからなる群から選択される請求項２記載 の方法。 ４．動脈疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項１記載の方法。 ５．動脈疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項２記載の方法。 ６．動脈疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項３記載の方法。 ７．動脈疾患が再狭窄症である請求項１記載の方法。 ８．動脈疾患が再狭窄症である請求項２記載の方法。 ９．動脈疾患が再狭窄症である請求項３記載の方法。 １０．治療処置が医薬調製物の全身的送達を含む請求項１記載の方法。 １１．治療処置が医薬調製物の局所的送達を含む請求項１記載の方法。 １２．新生動脈内膜線維増殖性損傷の進展を軽減または予防するための治療的に 有効な量の微小管安定化化学治療剤を局所的に送達するための手段を含む医薬送 達システム。 １３．微小管安定化化学治療剤がタキソールまたは水溶性タキソール誘導体であ る請求項１２記載の医薬送達システム。 １４．患者の動脈疾患を予防または軽減するための医薬組成物への微小管安定化 化学治療剤の使用。 １５．微小管安定化化学治療剤がタキソールまたは水溶性タキソール誘導体であ る請求項１４記載の使用。 １６．水溶性タキソール誘導体が２’−サクシニルータキソール；２’−サクシ ニルータキソールトリエタノールアミン；２’−グルタリル−タキソール；２’ −グルタリル−タキソールトリエタノールアミン塩；Ｎ−（ジメチルアミノエチ ル）グルタミドとの２’−Ｏ−エステル；およびＮ−（ジメチルアミノエチル） グルタミド塩酸塩との２’−Ｏ−エステルからなる群から選択される請求項１５ 記載の使用。 １７．動脈疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項１４記載の使用。 １８．動脈疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項１５記載の使用。 １９．動脈疾患がアテローム性動脈硬化症である請求項１６記載の使用。 ２０．動脈疾患が再狭窄症である請求項１４記載の使用。 ２１．動脈疾患が再狭窄症である請求項１５記載の使用。 ２２．動脈疾患が再狭窄症である請求項１６記載の使用。 ２３．治療処置が医薬調製物の全身的送達を含む請求項１４記載の使用。 ２４．治療処置が医薬調製物の局所的送達を含む請求項１４記載の使用。