JPH08505846A - 血小板凝集阻害用化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は血小板凝集の阻害に効果的な式（Ｉ）：Ｗ−（ＣＲ’₂）q-Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r-Ｕ−（ＣＲ’₂）s−Ｖ−（Ｇly）n−（Ａsp）m−Ａで示される化合物、そのような活性をもたらす医薬組成物、および血小板凝集の阻害法に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 血小板凝集阻害用化合物 発明の分野 本発明は血小板凝集を阻害する新規化合物、該化合物を含む医薬組成物および 該化合物の使用法に関する。 発明の背景 血小板の凝集は、主に、インテグリンと称される付着レセプターの一種である フィブリノゲンレセブター、またはＧＰIIｂ−IIIａ血小板レセプター複合体に より媒介されると考えられている。インテグリンレセプターの天然のリガンドは 、Ａrg−Ｇly−Ａsp配列（一文字アミノ酸コードではＲＧＤ）を含有する蛋白質 であることが多いことが判明している。ＧＰII−IIIａレセプターについての天 然のリガンドと考えられる、フォン・ウィルブランド（von Willebrand）因子お よびフィブリノゲンは、その一次構造においてＲＧＤ配列を有する。機能的には 、これらの蛋白質は隣接する血小板上のＧＰIIｂ−IIIａレセプターと結合およ び交差結合能を有し、それにより、血小板の凝集が生じる。 フィブロネクチン、ビトロネクチンおよびトロンボスポンジンも、ＧＰIIｂ− IIIａと結合することが知られているＲＧＤ含有蛋白質である。フィブロネクチ ンは、血漿中に見られ、細胞内マトリックスにおける構造蛋白質として機能する 。構造蛋白質およびＧＰIIｂ−IIIａ間の結合は、血小板を損傷した血管壁に付 着させるように機能する。 ビトロネクチンに結合し、ＲＧＤ配列を有する直鎖状および環状ペプチドが、 ＷＯ８９／０５１５０（ＰＣＴＵＳ８８／０４４０３）に開示されている。ＥＰ ０２７５７４８は、ＧＰIIｂ−IIIａレセプターと結合し、血小板凝集を阻害す る直鎖状のテトラないしヘキサペプチドおよび環状ヘキサないしオクタペプチド を開示している。その開示が出展明示により本明細書の一部とされる、他の直鎖 状および環状ペプチドは、ＥＰ−Ａ０３４１９１５にて報告されている。しかし 、このような阻害剤のペプチド状構造は、薬剤デリバリー、代謝安定性および選 択性などにおいてしばしば問題を有する。天然のアミノ酸配列で構成されないフ ィブリノケンレセプターの阻害剤がＥＰ−Ａ０ ３７２ ４８６、ＥＰ−Ａ０ ３８１ ０３３およびＥＰ−Ａ０４７８ ３６３に開示されている。ＷＯ９２／ ０７５６８（ＰＣＴ／ＵＳ９１／０８１６６）は、単環式７員環構造を形成する ことによりＲＧＤ配列におけるγ−ターン構造を模倣したフィブリノゲンレセプ ターアンタゴニストを開示している。しかし、in vivoおよびin vitroにて有効 な効果を有し、アミノ酸配列のペプチド骨格構造を有しない新規フィブリノゲン レセプターアンタゴニスト（例、ＧＰIIｂ−IIIａ蛋白質の阻害物質）について 、なお要求がある。 本発明は新規化合物を開示する。これらの化合物はＧＰIIｂ−IIIａレセプタ ーへの結合を阻害し、血小板凝集を阻害する。 発明の要約 一態様において、本発明は以下の式（Ｉ）に記載するような、新規化合物を提 供する。 本発明はまた、式（Ｉ）の化合物と、医薬上許容される担体とからなる、血小 板凝集または血餅形成を阻害する医薬組成物を提供する。 本発明はさらには、有効量の式（Ｉ）の化合物を内部投与することからなる、 血小板凝集の阻害を必要とする哺乳動物における血小板凝集阻害法に関する。 別の態様において、本発明は、フィブリン溶解治療後の哺乳動物における動脈 または静脈の再閉塞の阻害法であって、有効量のフィブリン溶解剤および式（Ｉ ）の化合物を内部投与することからなる阻害法を提供する。本発明はまた、卒中 、一過性虚血性発作、心筋梗塞またはアテローム性動脈硬化症の治療法を提供す る。 発明の詳細な記載 本発明は、血小板凝集を阻害する新規化合物を開示する。該新規化合物はＧＰ IIｂ−IIIａレセプターと有利に相互作用し、５および６員環上の側鎖置換基が またレセプターと有利に相互作用するように配向すると考えられる。 特定の作用機構と結び付けるものではないが、これらの化合物は、フィブリノ ゲンの血小板結合フィブリノゲンレセプタ−ＧＰIIｂ−IIIａとの結合を阻害し 、推定ＲＧＤ結合部位の拮抗作用を介して他の付着蛋白質と相互作用すると考え られる。 本発明の化合物は、式（Ｉ）： Ｗ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r−Ｕ−（ＣＲ’₂）s−Ｖ− （Ｇly）n−（Ａsp）m−Ａ （Ｉ） ［式中、 ＷはＲ’Ｒ”Ｎ−、Ｒ’Ｒ”ＮＲ’Ｎ−、Ｒ’Ｒ”ＮＲ’ＮＣＯ−、Ｒ’₂Ｎ Ｒ’ＮＣ（＝ＮＲ’）−、Ｒ’ＯＮＲ’Ｃ（＝ＮＲ’）−、 Ｚは（ＣＨ₂）t、Ｈet、Ａr、Ｃ_3-7シクロアルキルまたはＮＲ’であり、 ＵおよびＶは、独立して、存在しないか、またはＣＯ、ＣＲ’₂、Ｃ（＝ＣＲ_' 2）、Ｓ（Ｏ）r、Ｏ、ＮＲ’、ＣＲ’ＯＲ’、ＣＲ’（ＯＲ”）ＣＲ’₂、ＣＲ ’₂ＣＲ’（ＯＲ”）、Ｃ（Ｏ）ＣＲ’₂、ＣＲ’₂Ｃ（Ｏ）、ＣＯＮＲ’、ＮＲ ’ＣＯ、ＯＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｓ）Ｏ、ＯＣ（Ｓ）、Ｃ（Ｓ）ＮＲ’、 ＮＲ’Ｃ（Ｓ）、Ｓ（Ｏ）r、Ｒ’、ＮＲ’Ｓ（Ｏ）r、Ｎ＝Ｎ、ＮＲ’ＮＲ’、 ＮＲ’ＣＲ’₂、ＣＲ’₂Ｏ、ＯＣＲ’₂、Ｃ≡Ｃ、ＣＲ’＝ＣＲ’またはＣＲ’ （ＮＲ’Ｒ”）Ｃ（Ｏ）として存在し、 ＸはＮ＝ＣＲ’、Ｃ（Ｏ）またはＯであり、 ＹはＳまたはＯであり、 ｍは０または１であり、 ｎは０または１であり、 ｑは０ないし３であり、 ｒは、各々、独立して０ないし３であり、 ｓは０ないし２であり、 ｔは、各々、独立して０ないし２であり、 Ｒ’は、各々、独立してＨ、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_3-7シクロアルキル−Ｃ_0-4ア ルキルまたはＡr−Ｃ_0-4アルキルであり、 Ｒ”は、各々、独立してＲ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ¹⁵であり 、 Ｒ¹⁰は存在しないか、またはＨ、Ｃ_1-4アルキルまたはＮＲ’Ｒ’として存在 し、 Ｒ¹³は、各々、独立してＲ’、ＣＦ₃、Ｓ’またはＯＲ’であり、 Ｒ¹⁴は、各々、独立してＣ_1-4アルキル、Ｃ_3-7シクロアルキル−Ｃ_0-4アルキ ル、Ａr−Ｃ_0-4アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒ’、ＣＮ、ＮＯ₂、ＳＯ₂Ｒ’またはＣ（Ｏ ）ＯＲ¹⁵であり、 Ｒ¹⁵は、各々、独立してＣ_1-4アルキル、Ｃ_3-7シクロアルキル−Ｃ_0-4アルキ ルまたはＡr−Ｃ_0-4アルキルであり、 Ａは Ｒ²は存在しないかまたはＣ_1-4アルキル、Ｊ−ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮＲ’、ＳＲ ’、ＮＲ’Ｒ”、Ｃ_1-4アルコキシ、ヒドロキシ、ＣＮ、ＣＦ₃、ハロ、または Ｊは単結合、−ＯＣＲ’₂−、−ＮＲ’ＣＲ’₂−、ＣＲ’₂ＣＲ’₂−、−ＣＲ ’₂−、−ＣＲ’＝ＣＲ’または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’ＣＲ’₂−であり、 Ｑは単結合、ＣＲ’₂、Ｓ、ＯまたはＮＲ’であり、 ＤはＣ_1-4アルキル、Ｃ_3-7シクロアルキル、ＡrまたはＨetを意味する；ただ し、 （１）Ａが Ｗ−（ＣＲ’₂）ｑ−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）ｒ−は、Ｈ₂Ｎ−（ＣＨ₂）_3-5−ＣＨ− 以外の基であり、 （２）Ａが Ｗ−（ＣＲ’₂）ｑ−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）ｒ−はＮＨＲ’以外の基であり、およ び（３）Ａが Ｗ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r−は、 で示される化合物またはその医薬上許容される塩である。 本発明はまた、本発明の化合物の複合体またはプロドラッグを包含する。プロ ドラッグは、in vivoにて式（Ｉ）の活性な親薬剤を放出する共有結合したキャ リアーと考えられる。 本発明の化合物が１またはそれ以上のキラル中心を有する場合、特に記載しな い限り、本発明は通常の技術により合成され、分割される各独自の非ラセミ化合 物を包含する。化合物が不飽和炭素−炭素二重結合を有する場合、シス（Ｚ）お よびトランス（Ｅ）異性体は共に本発明の範囲内にある。化合物が互変異性体形 、 性体で存在する場合、互変異性体は、各々、平衡状態であっても、適当なＲ’で の置換により１つの形態にロックされていても、本発明に含まれると考えられる 。特に記載しない限り、いずれかある場合に置換基の意味するものは、いずれか 他の場合にその意味するものまたは他の置換基の意味するものとは別個独立して いる。 式（Ｉ）に関して、適当には、 ＺはＨetであり、 ｍ、ｎおよびｑは、各々、０であり、 ＷはＲ’Ｒ”Ｎ−であり、 フェニルとして定義されたＡ基上の少なくとも１個のＲ²はＪ−ＣＯ₂Ｒである 。 前記した下位群の式（Ｉ）に包含される本発明の個々の化合物は、限定される ものではないが、以下のもの： ４−［２−［３−［６−アミノ−２−ピリジニル］−１−オキソプロピル− （メチル）アミノ］−１−オキソエチル］フェノキシ酢酸； ４−［２−［４−［６−アミノ−２−ピリジニル］−１−オキソブチル−（ メチル）アミノ］−１−オキソエチル］フェノキシ酢酸；および ４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−［５−（２−アミノベンズイミダゾリル）］アミ ノ］アセチル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸； またはその医薬上許容される塩を包含する。 さらに、式（Ｉ）に関して、適当には、 Ｚは（ＣＨ₂）_1-2であり、 ｍ、ｎおよびｑは、各々、０であり、 フェニルとして定義されたＡ基上の少なくとも１個のＲ²はＪ−ＣＯ₂Ｒである 。 前記した下位群の式（Ｉ）に包含される本発明の個々の化合物は、限定される ものではないが、以下のもの： ４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−［３−（４−ピリジニル）プロピオニル］アミノ ］アセチル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸；ま たはその医薬上許容される塩を包含する。 さらに、式（Ｉ）に関して、適当には、 Ｚは（ＣＨ₂）_1-2またはフェニルであり、 ｒおよびｓは、各々、０であり、 Ｖは存在せず、 である。 前記した下位群の式（Ｉ）に包含される本発明の個々の化合物は、限定される ものではないが、以下のもの： Ｎ^α−アセチル−カラバニニル−グリシニル−アスパルチル−アニリド； Ｎ^α−ベンゾイル−Ｎ（クアニジノ）−シアノ−Ｎ^α−メチル−Ｌ−アルギ ニルグリシル−Ｌ−アスパルチック−１−アニリド；および Ｎ^α−ベンゾイル−ＮΔ−［（シアノイミノ）（フェノキシ）メチル］−Ｎ^α −メチル−Ｌ−オルニチルグリシル−Ｌ−アスパルチック−１−アニリドを包含 する。 また、式（１）に関して、適当には、 ＺはＨetであり、 ｍおよびｎは、各々、１であり、 Ｖは存在せず、 Ａは ＷはＲ’Ｒ”Ｎ−である。 前記した下位群の式（Ｉ）に包含される本発明の個々の化合物は、限定される ものではないが、以下のもの： ３−［６−アミノ−２−ピリジニル］プロピオニル−グリシル−Ｌ−アスパ ルチル−Ｌ−フェニルアラニン；および ４−［６−アミノ−２−ピリジニル］ブチリル−グリシル−Ｌ−アスパルチ ル−Ｌ−フェニルアラニン またはその医薬上許容される塩を包含する。 さらに、式（Ｉ）に関して、適当には、 Ｚは（ＣＨ₂）_1-2またはＮＲ’であり、 Ａは である。 前記した下位群の式（Ｉ）に包含される本発明の個々の化合物は、限定される ものではないが、以下のもの： Ｎ^α−ベンゾイル−ＮΔ−［１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−Ｌ−オルニ チルグリシル−β−（２−ベンゾチアゾリル）−β−アラニン；および ±−Ｎ−［（４−クアニジノアミノ）ブタノイルサルコシニル］−β−（２ −ベンゾチアゾリル）−β−アラニン； またはその医薬上許容される塩を包含する。 また、式（Ｉ）に関して、適当には、 ＺはＡrまたはＨetであり、 ｍおよびｎは、各々、１であり、 ｓは０であり、 Ｖは存在せず、 ＷはＲ’Ｒ”Ｎ−である。 前記した下位群の式（Ｉ）に包含される本発明の個々の化合物は、限定される ものではないが、以下のもの： シクロ−（Ｓ，Ｓ）−（２−メルカプト）ベンゾイル−Ｎ^α−メチル−４− アミノメチルフェニルアラニル−グリシル−アスパルチル−（２−メルカプト） フェニルアミドを包含する。 ペプチドおよび化学の分野で通常用いられる略語および記号を本明細書におい て用い、本発明の化合物を記載する。一般に、アミノ酸略号は、ＩＵＰＡＣ−Ｉ ＵＢ Joint Commission on Bichemical Nomennclature（ヨーロピアン・ジャー ナル・オブ・バイオケミストリー（Eru.J.Biochem.），１５８，９（１９８４） に記載）に従う。 Ａrgはアルギニンを表し、ＭeＡrgはＮ^α−メチル−アルギニン、ＨＡrgはホ モアルギニン、ＮＡrgはノルアルギニン、（Ｍe₂）ＡrgはＮ’，Ｎ”−ジメチル アルギニン、（Ｅt₂）ＡrgはＮ’，Ｎ”−ジエチルアルギニン、Ｏrnはオルニチ ンを表す。これらの基は、Ｒ⁶置換基の適当な成分である。これらのアミノ酸の Ｎ^α−置 換誘導体も本発明において有用である。α−置換誘導体の代表的製法は、米国特 許第４，６８７，７５８号；チェン（Cheung）ら、カナディアン・ジャーナル・ オブ・ケミストリー（Can.J.Chem.），５５，９０６（１９７７）；フライディ ンガー（Freidinger）ら、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（J. Org.Chem.），４８，７７，（１９８２）；およびシュマン（Shuman）ら、ペプ タイズ（PEPTIDES）：PROCEEDINGS OF THE ７TH AMERICAN PEPTIDE SYMPOSIUM， リッチ・デイ（Rich.D.），グロス・イー（Gross,E.），ピアース・ケミカル社 （Pierce Chemical Co.）編，ロックホード（Rockford），イリノイ州．６１７ （１９８１）に記載されており、その内容を出典明示により本明細書の一部とす る。 本明細書において用いるＣ_1-4アルキルは分枝または非分枝状の炭素鎖を意味 し、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルお よびｔ−ブチルを包含する。Ｃ_1-6アルキルはさらに、ペンチル、ｎ−ペンチル 、イソペンチル、ネオペンチルおよびヘキシルおよびその単純な脂肪族異性体を 包含する。Ｃ_0-4アルキルおよびＣ_0-6アルキルはさらにアルキルが存在する必要 がない（例えば共有結合が存在する）ことも意味する。 本明細書において用いるＡr、またはアリールは、フェニルまたはナフチル、 または１〜３個のＲ²基で置換されたフェニルまたはナフチルを意味する。特に 、Ｒ²はＣ_1-4アルキル、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｃ_1-4アルキルチオ、トリフルオロア ルキル、ＯＨ、Ｃl、Ｂr、Ｉ、ＦまたはＪ−ＣＯ₂Ｈであり、ここにＪは式（Ｉ ）の記載と同意義である。 Ｈet、またはヘテロサイクリルは、窒素、酸素および硫黄の群から選択される １〜３個のヘテロ原子を含有する、所望により置換されていてもよい５または６ 員の単環式環、または９または１０員の二環式環を意味し、それは安定で、通常 の化学合成により利用可能である。代表的な複素環は、イミダゾール、ベンズイ ミダゾール、ピロール、インドール、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、キノリ ン、ベンゾフラン、フラン、ベンゾピラン、ベンゾチオフェン、チオフェン、チ アゾール、ベンゾチアゾール、インドリン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジ ン、ピロリジン、イソキノリン、ならびにテトラーおよびパーヒドロ−キノリン およびイソキノリンである。Ｈet環上、Ｒ²から選択されるような３個までの置 換基の可能な組み合わせであり、化学合成により得ることができ、安定な組み合 わせは本発明の範囲に含まれる。 Ｃ_3-7シクロアルキルは３〜７個の炭素原子を有する所望により置換されてい てもよい炭素環系をいい、２個までの不飽和炭素−炭素結合を含有していてもよ い。典型的なＣ_3-7シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロ ペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニルおよびシクロ ヘプチルである。通常の化学合成により得ることができ、安定な、シクロアルキ ル環上のＲ²から選択されるような３個までの置換基のいずれの組み合わせも本 発明の範囲に含まれる。 原子ならびに酸素および硫黄から選択される１個のヘテロ原子を含有し、安定な 構造が得られるようにいずれかの元素上で置換されていてもよい、飽和または不 飽和の、安定な５、６または７員単環式環、または７ないし１０員の二環式環で ある窒素ヘテロ環をいい、その窒素ヘテロ原子は所望により第四級化されていて もよい。窒素ヘテロ環は、いずれか安定な位置がＣ_1-4アルコキシ、Ｃ_1-4アルキ ルチオ、Ｆ、Ｃl、Ｂr、Ｉ、ＮＯ₂、ＮＲ’₂、ＯＨ、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮＨＲ’ またはＣ_1-4アルキルで置換されていてもよい。 ピロリジン、イミダゾール、イミダゾリン、イミダゾリジン、ピラゾール、ピラ ゾリン、ピラゾリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、ピリジン、テト ラヒドロピリジン、テトラヒドロ−およびヘキサヒドロ−アゼピン、キヌクリジ ン、キヌクリジニウム、キノリン、イソキノリンおよびテトラ−およびパーヒド イミダゾリル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニルまたはテトラヒドロ ピリジニルである。 t−Ｂuは第３ブチル基をいい、Ｂocはt−ブチルオキシカルボニル基、Ｆmocは フルオレニルメトキシカルボニル基、Ｐhはフェニル基、Ｃbzはベンジルオキシ カルボニル基、ＢrＺはｏ−ブロモベンジルオキシカルボニル基、ＣlＺはｏ−ク ロロベンジルオキシカルボニル基、Ｂzlはベンジル基、４−ＭＢzlは４−メチル ベンジル基、Ｍeはメチル、Ｅtはエチル、Ａcはアセチル、ＡlkはＣ_1-4アルキル 、Ｎphは１−または２−ナフチル、およびｃＨexはシクロヘキシルをいう。Ｍe ＡrgはＮ^α−メチルアルギニンである。 ＤＣＣはジシクロヘキシルカルボジイミド、ＤＭＡＰはジメチルアミノピリジ ン、ＤＩＥＡはジイソプロピルエチルアミン、ＥＤＣはＮ−エチル−Ｎ’（ジメ チルアミノプロピル）カルボジイミドをいう。ＨＯＢtは１−ヒドロキシベンゾ トリアゾール、ＴＨＦはテトラヒドロフラン、ＤＩＥＡはジイソプロピルエチル アミン、ＤＭＦはジメチルホルムアミド、ＮＢＳはＮ−ブロモースクシンイミド 、Ｐd／Ｃは炭素上パラジウム触媒、ＰＰＡは１−プロパンホスホン酸環状無水 物、ＤＰＰＡはジフェニルホスホリルアジド、ＢＯＰはベンゾトリアゾール−１ −イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェ ート、ＨＦはフッ化水素酸、ＴＥＡはトリエチルアミン、ＴＦＡはトリフルオロ 酢酸、ＰＣＣはクロロクロム酸ピリジニウムをいう。 式（Ｉ）の化合物は、一般に、式（II）および式（III）： Ａ−（Ｇly）n（Ａsp）m−Ｌ¹ Ｒ^6"−Ｌ₂ （II） （III） ［式中、Ａ、ｍおよびｎは式（Ｉ）の記載と同意義であり、いずれの反応性官能 基も保護されており、 Ｌ¹およびＬ²は反応して−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）ｒ−Ｕ−（ＣＨ’₂）s−Ｖ−結合の 形 成能を有する官能基であり、 Ｒ⁶”はＷ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−およびＬ²に連結している（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r− Ｕ−（ＣＨ’₂）s−Ｖ−であり、いずれの反応性官能基も保護されている］で示 される化合物を反応させことにより製造され、その後、いずれの保護基も除去し 、所望により医薬上許容される塩を形成してもよい。 Ｌ¹およびＬ²の完全な一致は、形成される結合の部位に依存することは明らか であろう。例えば、ＥＰ−Ａ−０３７２４８６およびＥＰ−Ａ−０３８１０３３ およびＥＰ−Ａ−０４７８３６３において（ＣＲ’Ｒ¹⁰）ｒ−Ｕ−（ＣＨ’₂）s −Ｖ−結合の一般的製法が記載されており、その内容を出典明示により本明細書 の位置部とする。 例えば、ＶがＣＯＮＨである場合、Ｌ¹は−ＮＨ₂であり、Ｌ²はＯＨ（例、酸 ）またはＣl（例、酸塩化物）であり、Ｒ⁶”はＷ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−（ＣＲ’ Ｒ¹⁰）r−Ｕ−（ＣＨ’₂）s−Ｃ（Ｏ）（ここに、いずれの官能基も所望により 保護されていてもよい）であってもよい。例えば、Ｒ⁶”は（ベンジルオキシカ ルボニル−アミジノ）ベンゾイル−または（Ｎ^α−Ｂoc，Ｎ^guan−Ｔos）アルギ ニル−であってもよい。Ｌ²がＯＨである場合、カップリング剤を用いる。 同様に、ＶがＮＨＣＯである場合、Ｌ¹は−ＣＯ₂ＨまたはＣＯＣlであり、Ｌ² は−ＮＨ₂であり、Ｒ⁶”はＷ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r−Ｕ−（Ｃ Ｈ’２）s−であってもよい。例えば、Ｒ⁶”は（ベンジルオキシカルボニル−ア ミジノ）フェニル、べンジルオキシカルボニルアミノ）メチルベンジル−または ６−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ヘキシル−であってもよい。 ＶがＮＨＳＯ₂である場合、Ｌ¹はＳＯ₂Ｃlであり、Ｌ²は−ＮＨ₂であり、Ｒ⁶ ”は前記と同じであってよい。ＶがＳＯ₂ＮＨである場合、Ｌ¹は−ＮＨ₂であり 、Ｌ²はＳＯ₂Ｃlである。このような塩化スルホニルの製法は、例えばジャーナ ル・オブ・オーガニック・ケミストリー（J.Org.Chem.），２３，１２５７（１ ９５８）に開示されている。 ＶがＣＨ＝ＣＨである場合、Ｌ¹は−ＣＨＯであり、Ｌ²はＣＨ＝Ｐ−Ｐh₃であ り、Ｒ₆”はＷ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r−Ｕ−（ＣＨ’₂）s−であ って もよい。 ＶがＣＨ₂ＣＨ₂であるものは、ＶがＣＨ＝ＣＨである適宜保護された化合物を 還元することにより得ることができる。 ＶがＣＨ₂ＯまたはＣＨ₂Ｎである場合、Ｌ¹は、各々、−ＯＨまたは−ＮＨで あり、Ｌ²は−Ｂrであり、Ｒ⁶”はＷ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r−Ｕ −（ＣＨ’₂）s−であってもよい。例えば、Ｒ⁶”は（ベンジルオキシカルボニ ルアミノ）メチルベンジル−または２−（Ｎ−ベンジル−４−ピペリジニル）エ チルであってもよい。同様に、ＵまたはＶがＯＣＨ₂またはＮＲ’ＣＨ₂である場 合、Ｌ¹は−ＣＨ₂Ｂrであり、Ｌ²は、各々、−ＯＨまたは−ＮＨであってもよい 。 ＶがＣＨＯＨＣＨ₂である化合物は、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミ ストリー，５４，１３５４（１９８９）に開示されている操作により、ＶがＣＨ ＝ＣＨである適宜保護された化合物より製造してもよい。 ＶがＣＨ₂ＣＨＯＨである化合物は、テトラヘドロン・レターズ（Tet.Lett.） ，３１，２３１（１９９０）に開示されているホウ水素化および塩基性酸化によ り、ＶがＣＨ＝ＣＨである適宜保護された化合物より得ることができる。 本発明において用いるカップリング剤はペプチド結合を形成するのに用いるこ とができる試薬を意味する。典型的なカップリング法は、カルボジイミド、活性 無水物およびエステルおよびアシルハライドを用いる。典型的には、ＥＤＣ、Ｄ ＣＣ、ＤＰＰＡ、ＰＰＡ、ＢＯＰ試薬、ＨＯＢｔ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ ドおよび塩化オキサリルなどの試薬である。 ペプチド結合を形成するカップリング法は、一般に、当該分野において周知で ある。ボダンスキー（Bodansky）ら、ザ・プラクティス・オブ・ペプチド・シン セシス（THE PRACTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS），Springer-Verlag，ベルリン， １９８４、アリ（Ali）ら、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（J .Med.Chem.），２９，９８４（１９８６）およびジャーナル・オブ・メディシナ ル・ケミストリー，３０，２２９１（１９８７）に示されるペプチド合成法が該 技術の一般例であり、その開示を出典明示により本明細書の一部とする。 アミドまたはペプチド結合を形成するための溶液合成は、アミド結合を形成す るのに用いられる方法を利用して行われる。典型的には、アミンまたはアニリン をその遊離アミノ基を介して適当なカルボン酸基質に、適当なカルボジイミドカ ップリング剤、例えば Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ） を用いて、所望により触媒、例えば１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢ ｔ）およびジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下に結合させる。他の方 法、例えば適宜保護した酸基質の遊離カルボキシルの活性化エステル、無水物ま たは酸ハロゲン化物を形成させ、その後、適宜保護したアミンの遊離アミンを、 所望により塩基の存在下で反応させる方法もまた適当である。例えば、保護した Ｂoc−アミノ酸またはＣbz−アミジノ安息香酸を、塩化メチレンまたはテトラヒ ドロフラン（ＴＨＦ）などの無水溶媒中、Ｎ−メチルモルホリン、ＤＭＡＰまた はトリアルキルアミンなどの塩基の存在下、クロロギ酸イソブチルで処理して「 活性化無水物」を形成させ、これを続いて別の保護したアミノ酸またはアニリン の遊離アミンと反応させる。 式（III）の化合物は、市販の物質から常套手段により調製される。Ｗは、一 般に、所望によりアルキル鎖を介して、Ｚに結合した塩基性官能基であり、合成 の間、保護されるか、または−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r−Ｕ−（ＣＨ’₂）s−Ｖ−結合 が形成された後に分子中に導入される。例えば、式（III）または式（Ｉ）の化 合物（式中、Ｗは適宜置換されたＲ’Ｒ”Ｎ−、Ｒ’₂Ｎ（Ｒ¹³）Ｃ＝Ｎ−、Ｒ ”Ｎ＝（Ｒ¹³）Ｃ−ＮＲ’−、Ｒ’₂Ｎ（Ｒ’₂Ｎ）Ｃ＝Ｎ−またはＲ”Ｒ’Ｎ（ Ｒ’Ｎ＝）Ｃ−ＮＲ’を意味する）は、ＥＰ−Ａ０ ３７２ ４８６、ＥＰ−Ａ ０ ３８１ ０３３またはＥＰ−Ａ０ ４７８ ３６３（その開示を出典明示に より本明細書の一部とする）に開示されている方法を含む常套手段により調製さ れる。 ８ ３６３に開示されている方法により調製される。 ＷがＲ’₂Ｎ（Ｒ’₂Ｎ）Ｃ＝Ｎ−Ｘ−またはＲ”Ｒ’Ｎ（Ｒ’Ｎ＝）Ｃ−ＮＲ ’−Ｘ−であり、ＸがＯである化合物は、とりわけ、ジャーナル・オブ・オーガ ニック・ケミストリー（J.Org.Chem.），５１，５０４７（１９８６）に開示さ れている 方法により調製される。 ＷがＲ’₂Ｎ（Ｒ’₂Ｎ）Ｃ＝Ｎ−Ｘ−またはＲ”Ｒ’Ｎ（Ｒ’Ｎ＝）Ｃ−ＮＲ ’−Ｘ−であり、ＸがＮ＝ＣＲ’である化合物は、とりわけ、米国特許第３，７ １４，２５３号およびヨーロピアン・ジャーナル・オブ・メディカル・ケミスト リー−シミー・セラピューテックス（Eur.J.Med.Chem.−Chim.Ther.），２０， ２５（１９８５）に開示されている方法により調製される。 ＷがＲ’₂Ｎ（Ｒ’₂Ｎ）Ｃ＝Ｎ−Ｘ−またはＲ”Ｒ’Ｎ（Ｒ’Ｎ＝）Ｃ−ＮＲ ’−Ｘ−であり、ＸがＣ（Ｏ）である化合物は、とりわけ、米国特許第３，７１ ４，２５３号およびカナディアン・ジャーナル・オブ・ケミストリー（Can.J.Ch em.），４３，３１０３（１９６５）に開示されている方法により調製される。 ＷがＲ’ＯＮＲ’Ｃ（＝ＮＲ’）−である化合物は、とりわけ、ジャーナル・ オブ・ヘテロサイクリック・ケミストリー（J.Het.Chem.），１６，１０６３（ １９７９）またはジャーナル・オブ・ヘテロサイクリック・ケミストリー，２６ ，１２５（１９８９）に開示されている方法により調製される。 ＷがＲ’₂ＮＲ’ＮＣ（＝ＮＲ’）−である化合物は、シンセシス（Syn.）， ５８３（１９７４）に開示されているものを含む常套手段により調製される。 ＷがＲ’Ｒ”ＮＲ’Ｎ−である化合物は、とりわけ、ジャーナル・オブ・プラ クティカル・ケミストリー（J.Prakt.Chem.），３６，２９（１９６７）に開示 されている方法により調製される。 ＷがＲ’Ｒ”ＮＲ’ＮＣＯ−である化合物は、とりわけ、ビュレティン・オブ ・ケミカル・ソサイエティ・ジャパン（Bull.Chem.Soc.Jpn.），４３，２２５７ （１９７０）に開示されている方法により調製される。 ＷがＲ”Ｒ’ＮＣ（＝ＮＲ’）Ｙであり、ＹがＳである化合物は、とりわけ、 ケミカル・レターズ（Chem.Lett.），１３７９（１９８６）に開示されている方 法により調製される。 式（III）または式（Ｉ）の化合物（式中、ＷはＲ”Ｒ’ＮＣ（＝ＮＲ’）Ｙ であり、ＹはＯを意味する）は日本国特許第２０２２７５１号に開示されている ものを含む常套手段により調製される。 各合成フラグメントの側鎖の反応性官能基は当該分野において公知のように適 宜保護される。適当な保護基は、グリーン（Greene）、「有機化学における保護 基」（PR0TECTIVE GR0UPS IN ORGANIC CHEMISTRY），John Wiley and Sons，ニ ューヨーク，１９８１）に開示されている。例えば、Ｂoc、Ｃbz、フタロイルま たはＦmoc基はアミノまたはアミジノ基の保護に用いられる。α−アミノ基を保 護する場合、一般に、Ｂoc基が好ましい。ｔ−Ｂu、ｃＨexまたはベンジルエス テルはカルボキシル側鎖の保護に用いられる。ベンジル基または適宜置換された ベンジル基（例、４−メトキシベンジルまたは２，４−ジメトキシ−ベンジル） を用い、メルカプト基またはヒドロキシル基を保護する。イミダゾリル基の保護 にはトシル基が、グアニジノ基の保護にはトシルまたはニトロ基が用いられる。 適宜置換されたカルボベンジルオキシ基またはベンジル基もまた、ヒドロキシル 基またはアミノ基について用いられる。カルボベンジルオキシまたはベンジル保 護基の適当な置換は、クロロ、ブロモ、ニトロまたはメチルでのオルトおよび／ またはパラ置換であり、保護基の反応性を修飾するために用いられる。Ｂoc基を 除いて、アミノ基についての保護基は、最も好都合には、穏やかな酸処理によっ て除去されないものである。これらの保護基は、当該分野において知られている ように、接触水素添加、ナトリウム／液体アンモニアまたはＨＦ処理などの方法 により除去される。 Ａが である式（II）の化合物は、ＥＰ−Ａ０３８１０３３（出典明示により本明細書 の一部とする）に開示されている方法により調製される。 Ａが である式（II）の化合物は、ＥＰ−Ａ０４８３６６７（出典明示により本明細書 の一部とする）に開示されている方法により調製される。 Ａが である式（II）の化合物は、ＥＰ−Ａ０３１９５０６（出典明示により本明細書 の一部とする）に開示されている方法により調製される。 Ａが である式（II）の化合物は、ＷＯ／０８４６４およびＷＯ９２／１３５５２（出 典明示により本明細書の一部とする）に記載されている方法により調製される。 Ａが である式（II）の化合物は、ＥＰ−Ａ０４２５２１２（出典明示により本明細書 の一部とする）に開示されている方法により調製される。 式（Ｉ）の化合物の酸付加塩は、親化合物および過剰量の酸、例えば塩酸、臭 化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、マレイン酸、コハク酸またはメタンスルホン酸 から適当な溶媒中、標準的方法で調製される。酢酸塩の形態が特に有用である。 ある種の化合物は、許容できる内部塩または双性イオンを形成する。カチオン性 塩は、親化合物を、適当なカチオンを含有する水酸化物、炭酸塩またはアルコキ シドのような過剰のアルカリ試薬；または適当な有機アミンで処理することによ り調製される。Ｌi⁺、Ｎa⁺、Ｋ⁺、Ｃa⁺⁺、Ｍg⁺⁺、ＮＨ₄+のようなカチオンは、 医薬上許容される塩において存在するカチオンの例である。 本発明は、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体からなる医薬組成物 を提供する。したがって、式（Ｉ）の化合物は医薬の製造において用いられる。 前記したように調製した式（Ｉ）の化合物の医薬組成物を非経口投与用に溶液ま たは凍結乾燥粉末として処方してもよい。粉末は使用前に適当な希釈剤または他 の医薬上許容される担体を添加することにより復元される。液体処方は緩衝等張 水溶液であってもよい。適当な希釈剤の例は、通常の等張塩溶液、標準５％水中 デキストロースまたは緩衝酢酸ナトリウムまたはアンモニウム溶液である。この ような処方は特に非経口投与に適しているが、経口投与にも用いられ、また吸入 用の用量計量吸入器またはネブライザーに入れてもよい。ポリビニルピロリドン 、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、アカシア、ポリエチレングリコール、マン ニトール、塩化ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムのような賦形剤を添加する ことが望ましい。 また、これらの化合物は経口投与用にカプセル化、打錠化またはエマルジョン またはシロップに調製される。医薬上許容される固体または液体担体を添加して 、組成物を強化または安定化させ、または組成物の調製を容易にする。固体担体 は、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、白土、ステアリン酸マグ ネシウムまたはステアリン酸、タルク、ペクチン、アカシア、寒天またはゼラチ ンを包含する。液体担体は、シロップ、ピーナツ油、オリーブ油、食塩水および 水を包含する。担体は、また、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン 酸グリセリルのような除放性物質を単独またはワックスと共に含有してもよい。 固体担体の量は変化するが、好ましくは、単位投与量当たり約２０ｍｇ〜約１ｇ の間である。医薬調製物は、錠剤形の場合、粉砕、混合、顆粒化、および必要な らば、圧縮化；またはハードゼラチンカプセル形の場合、粉砕、混合および充填 を含む通常の調剤技術に従って調製される。液体担体を用いる場合、調製物はシ ロップ、エリキシル、エマルジョンまたは水性または非水性懸濁剤の形態である 。このような液体処方は、直接的に経口投与、またはソフトゼラチンカプセルに 充填して投与される。 経直腸投与の場合、本発明の化合物はまた、カカオ脂、グリセリン、ゼラチン またはポリエチレングリコールのような賦形剤と組み合わせて、坐剤に成型して もよい。 本発明は、また、哺乳動物、特にヒトにおいて血小板凝集および血餅形成を阻 害する方法であって、式（Ｉ）のペプチドおよび医薬上許容される担体を内部投 与することからなる阻害方法を提供する。このような療法についての適応症は、 急性心筋梗塞（ＡＭＩ）、深静脈血栓症、肺塞栓症、解剖無尿症、一過性虚血発 作（ＴＩＡ）、卒中および他の梗塞関連障害、および不安定アンギナを包含する 。分散性静脈内凝固（ＤＩＣ）、敗血症、手術または感染性ショック、手術後お よび分娩後外傷、心肺バイパス手術、不適合輸血、胎盤早期剥離、血栓症性血小 板減少性紫斑症（ＴＴＰ）、ヘビ毒および免疫病のような慢性または急性の高凝 集性症状はこのような治療に反応しやすい。加えて、本発明の化合物は、転移状 態の予防、免疫刺激を誘発する真菌性または細菌性感染症の予防または治療、骨 吸収が要因である病気の予防または治療において有用である。 本発明の化合物を患者に、血漿中の薬剤濃度が血小板凝集またはこのような他 の適応症を阻害するのに十分な濃度になるように経口または非経口投与する。本 発明の化合物を含有する医薬組成物を、約０．２〜約５０ｍｇ／ｋｇの用量で、 患者の症状に合うように投与する。急性療法の場合、非経口投与が好ましい。高 凝集の持久性症状の場合、化合物の５％水中デキストロースまたは生理食塩水中 静脈内注入液が最も有効であるが、筋肉内ボーラス注射でも十分である。 慢性であるが、重篤でない血小板凝集の症状の場合、カプセルまたは錠剤の経 口投与またはボーラス筋肉内注射が適当である。本発明の化合物を一日につき１ 〜４回、約０．４〜約５０ｍｇ／ｋｇのレベルで投与して、一日用量が合計約０ ．４〜約２００ｍｇ／ｋｇ／日とする。 本発明はさらにフィブリン溶解療法後の動脈または静脈の再閉塞の阻害法であ って、式（Ｉ）の化合物およびフィブリン溶解剤を内部投与することからなる阻 害法を提供する。フィブリン溶解療法におけるある種の化合物の投与は、再閉塞 を完全に防止するかまたは再閉塞までの時間を延長することが判明している。 本発明の内容において用いる場合、フィブリン溶解剤なる語は、天然または合 成製品のいずれであっても、フィブリン血餅の溶解を直接または間接的に生じさ せる化合物を意味する。プラスミノーゲン活性化剤は周知の一群のフィブリン溶 解剤である。有用なプラスミノーゲン活性化剤は、例えば、アニストレプラーゼ 、ウロキナーゼ（ＵＫ）、プローウロキナーゼ（ｐＵＫ）、ストレプトキナーゼ （ＳＫ）、組織プラスミノーゲン活性化剤（ｔＰＡ）、および化学的に修飾され ているか、または１個またはそれ以上のアミノ酸が付加、欠失または置換されて いるか、または１個またはそれ以上の機能領域が付加、欠失もしくは１個のプラ スミノーゲン活性化剤の活性部位を別のプラスミノーゲン活性化剤またはフィブ リン結合分子のフィブリン結合領域と合するように変更されている変異体のよう な、プラスミノーゲン活性化剤活性を保持する、その突然変異体または変異株を 包含する。他の例示的変異株は、１個またはそれ以上のグリコシル化部位が変更 されているｔＰＡ分子を包含する。プラスミノーゲン活性化剤のうち好ましいの は、第一アミノ酸配列が成長因子領域でプラスミノーゲン活性化剤の血清半減期 が増加するように変更されているｔＰＡ変異株である。ｔＰＡ成長因子変異株は 、例えば、ロビンソン（Robinson）ら、ＥＰ−Ａ０ ２９７ ５８９およびブラ ウン（Browne）ら、ＥＰ−Ａ０ ２４０ ３３４に開示されている。他の変異株 は、ハイブリッドタンパク質、例えば、ＥＰ ０ ０２８ ４８９、ＥＰ ０ １５５ ３８７およびＥＰ ０ ２９７ ８８２（そのすべてを出典明示により 本明細書の一部とする）に開示されているものを包含する。アニストレプラーゼ が本発明における使用に好ましいハイブリッドタンパク質である。フィブリン溶 解剤は、天然源から単離されるが、通常は遺伝子工学の伝統的方法により産生さ れる。 ｔＰＡ、ＳＫ、ＵＫおよびｐＵＫの有用な処方は、例えばＥＰ−Ａ ０ ２１ １５９２、ＥＰ−Ａ ０ ０９２ １８２および米国特許第４，５６８，５４３ 号（そのすべてを出典明示により本明細書の一部とする）に開示されている。典 型的には、フィブリン溶解剤は、緩衝等張水溶液、例えば、酢酸またはアジピン 酸ナトリウムまたはアンモニウム緩衝液（ｐＨ３．３〜５．５）に処方される。 ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、アカシア、ポリエチ レン、グリコール、マンニトールおよび塩化ナトリウムのような別の賦形剤を添 加してもよい。このような組成物は凍結乾燥できる。 医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物およびフィブリン溶解剤の両方を同一容器中 に処方してもよいが、別の容器内に処方するのが好ましい。両方の薬剤を溶液形 態にて提供する場合、同時投与用の注入／注射系に、またはタンデム装置中に含 めることができる。 このような療法の適応症は、心筋梗塞、深静脈血栓症、肺塞栓症、卒中および 他の梗塞関連障害を包含する。本発明の化合物をｔＰＡまたは他のフィブリン溶 解剤の非経口投与の直前、同時、または直後に投与する。再灌流が、最大限、療 法後の再閉塞を阻害するように確立された後も、本発明に係る化合物での治療を 十分な期間続けるのが望ましいことが判明している。ｔＰＡ、ＳＫ、ＵＫまたは ｐＵＫの有効用量は０．５〜５ｍｇ／ｋｇであり、ペプチドの有効用量は約０． １〜２５ｍｇ／ｋｇである。 阻害剤およびフィブリン溶解剤を同時または別々に都合よく投与する場合、１ 個の容器、例えば、箱、カートンまたは他の容器、個別のビン、袋、バイアルま たは他の容器であって、各々、前記の有効量の非経口投与用阻害剤および前記の 有効量の非経口投与用ｔＰＡまたは他のフィブリン溶解剤を入れたものからなる キットが調製される。このようなキットは、例えば、別々の容器または同一の容 器に入れた両薬剤と、所望の凍結乾燥プラグと、復元用溶液の容器とからなって いてもよい。この変形は、復元用溶液および凍結乾燥プラグを１個の容器の２つ のチャンバーに含めるものであり、これを使用前に混合できる。このような装置 では、フィブリン溶解剤および本発明の化合物を別々に、２個の容器にパッケー ジしたり、または粉末として一緒に凍結乾燥して１個の容器にて提供できる。 両薬剤を溶液形態にて提供する場合、これら薬剤は同時投与用の注入／注射系 またはタンデム装置に配合できる。例えば、血小板凝集阻害剤は、静脈内注射可 能な形態、またはチューブを介して一列に別の注入バッグ内のフィブリン溶解剤 に連結した注入バッグに入れてもよい。このような系を用いた場合、患者は、最 初、ボーラス型の阻害剤の注射または注入を受け、続いてフィブリン溶解剤の注 入を受けることができる。 本発明の化合物の薬理活性を、³Ｈ−ＳＫ＆Ｆ１０７２６０（公知のＲＧＤ− フィブリノゲン拮抗剤）のＧＰIIｂIIIａレセプターとの結合を阻害する能力；i n vitroで血小板凝集を阻害する能力およびin vivoで血栓形成を阻害する能力に より評価する。 ＲＧＤ−媒介ＧＰIIｂ−IIIa結合の阻害 ＧＰIIｂ−IIIａの精製 １０ユニットの古い、洗浄したヒト血小板（赤十字より入手）を、３％オクチ ルグルコシド、２０ｍＭトリス−ＨＣl（ｐＨ７．４）、１４０ｍＭ ＮａＣl、 ２ｍＭ ＣaＣl₂中、４℃で２時間、穏やかに攪拌するで溶解させた。その溶解 物を１００，０００ｇで１時間遠心分離に付した。得られた上清液を、２０ｍＭ トリス−ＨＣl（ｐＨ７．４）、１００ｍＭ ＮａＣl、２ｍＭ ＣａＣl₂、１％ オクチルグルコシド（緩衝液Ａ）で予備平衡した、５ｍｌのレンチル・レクチン ・セファロース４Ｂカラム（E.Y.Labs）に加えた。２時間インキュベーションし た後、該カラムを冷緩衝液Ａ（５０ｍｌ）で洗浄した。レクチン保持ＧＰIIｂ− IIIａを１０％デキストロース含有の緩衝液Ａで溶出した。すべての操作は４℃ で行った。得られたＧＰIIｂ−IIIａは、ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳 動操作によれば、純度が＞９５％であった。 ＧＰIIｂ−IIIａのリポソームへの組み込み ホスファチジルセリン（７０％）およびホスファチジルコリン（３０％）の混 合物（Avanti Polar Lipids）を、窒素流下、ガラス管壁に乾燥させた。精製し たＧＰIIｂ−IIIａを最終濃度０．５ｍｇ／ｍＬに希釈し、１：３（ｗ：ｗ）の タンパク質：リン脂質の比にてリン脂質と混合した。該混合物を再び懸濁させ、 バスソニケーターにて５分間超音波処理に付した。ついで、該混合物を、１００ ０倍過剰の５０ｍＭトリス−ＨＣl（ｐＨ７．４）、１００ｍＭ ＮａＣl、２ｍ Ｍ ＣａＣl₂（２回交換）に対する１２，０００−１４，０００分子量カットオ フ透析を用いて一夜透析した。ＧＰIIｂ−IIIａ含有リポソームを少し、１２， ０００ｇで１ ５分間遠心分離に付し、約１ｍｇ／ｍＬの最終タンパク質濃度で再び透析緩衝液 に懸濁させた。該リポソームを必要になるまで−７０℃で貯蔵した。 ＧＰIIｂ−IIIａへの競合結合 フィブリノゲンレセプター（ＧＰIIｂ−IIIａ）に対する結合を、ＲＧＤ−型 リガンドとして［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０を用いる間接的競合結合法に より検定した。該結合検定は、２２μｍの親水性デュラポアー（durapore）膜を 用い、９６−ウェルの濾過プレート装置（ミリポール・コーポレイション（Mill ipore Corporation），Bedford，ＭＡ）にて行った。該ウェルを１０μｇ／ｍＬ のポリリシン（シグマ・ケミカル社（Sigma Chemical Co.），St．Louis，ＭＯ. ）０．２ｍＬで、室温で１時間、プレコートし、非特異的結合を遮断した。種々 の濃度の非標識ベンザジアザピンを、四重試験にて該ウェルに加えた。［³Ｈ］ −ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０を４．５ｎＭの最終濃度にて各ウェルに加え、つづい て精製した血小板ＧＰIIｂ−IIIａ含有リポソーム１μｇを加えた。混合物を室 温で１時間インキュベートした。ＧＰIIｂ−IIIａ結合［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０ ７２６０を、ミルポール濾過マニホールドを用いる濾過により非結合体より分離 し、つづいて氷冷緩衝液（２回、各０．２ｍＬ）で洗浄した。濾紙上に残ってい る結合放射活性を、べックマン・リキッド・シンチレーション・カウンター（Be ckman Liquid Scintillation Counter）（Model LS6800）におけるレディー・ソ ルブ（Ready Solve）（Beckman Instruction,Fullerton,CA）１．５ｍＬにて計 数した（４０％効率）。非特異的結合を２μＭの非標識ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０ の存在下で測定し、それはサンプルに加えた全放射活性の０．１４％未満であっ た。すべてのデータは４重試験の平均である。本発明の化合物は［³Ｈ］−ＳＫ ＆Ｆ−１０７２６０結合を約１０μＭないし約２００μＭの範囲のＫiで阻害す る。 血小板凝集の阻害 血液を特定の実験を受けたことがない雑種成犬より収集した（シトレート処理 に付し、凝固作用を抑制した）。血小板に富む血漿（ＰＲＰ）を、１５０×ｇで １０分間、室温で遠心分離に付すことにより調製した。洗浄した血小板をＰＲＰ を８００×ｇで１０分間遠心分離に付すことで調製した。こうして得られた細胞 ペレットを、Ｃa⁺⁺不含Ｔyrode緩衝液（ｐＨ６．５）にて２回洗浄し、３×１０⁵ 細胞／ｍＬの濃度で、１．８ｍＭ Ｃa⁺⁺含有のＴyrode緩衝液（ｐＨ７．４） に再び懸濁させた。すべての血小板凝集の検定において、化合物をアゴニスト添 加の３分前に加えた。最終アゴニスト濃度は、トロンビン（０．１単位／ｍｌ） およびＡＤＰ（２ｍＭ）（シグマ社）であった。凝集をChrono−Log Lumi−Aggr egometerにてモニター観察した。アゴニスト添加の５分後の光透過率を用い、式 ： ［式中、ＣＲはチャート読み、９０はベースライン、１０はＰＲＰブランク読み を意味する］ に従って凝集％を算定した。ＩＣ₅₀を、［凝集の阻害％］対［化合物濃度］をプ ロットすることにより測定した。化合物を２００ｍＭで検定し、逐次、２つのフ ァクターで希釈し、適当な用量応答曲線を確立した。 本発明の化合物は、ＡＤＰで剌激されたヒト血小板の凝集を約７０〜約２００ μＭのＩＣ₅₀で阻害する。 化合物の血漿中プロテアーゼに対する安定性を評価するために、化合物をアゴ ニストの添加前にＰＲＰ中で３時間（３分ではなく）培養した。 血小板凝集のin vivo阻害 血栓形成のin vivo阻害を、エイケン（Aiken）ら、プロスタグランジンズ（Pr ostaglandins），１９，６２９（１９８０）に記載されている方法にしたがって 、麻酔したイヌにペプチドを注入し、全身性および血液学的効果を記録すること により測定する。 以下の実施例は、本発明の範囲を何ら制限するものではなく、本発明の化合物 の調製法および使用を説明するものである。多くの他の具体例は、当業者には自 明であり容易に利用可能であろう。 実施例 実施例１ ４−［２−［３−［６−アミノ−２−ピリジニル］−１−オキソプロピル−（メ チル）−アミノ］−１−オキソエチル］フェノキシ酢酸 （ｉ）３−（２−［６−ブロモピリジル］）−プロパルギルアルコール ２，６−ジブロモピリジン（１５ｇ、６３ミリモル）をフラスコに入れ、該フ ラスコをアルゴンでフラッシした。トリエチルアミン（２００ｍl）を加え、該 フラスコを０℃に冷却した。このフラスコに、プロパルギルアルコール（５ｍl 、８５ミリモル）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（II）クロリド （１．５ｇ、１．４ミリモル）およびヨウ化第一銅（０．５０ｇ、２．６ミリモ ル）を加えた。反応混合物を０℃でまたは２０分間攪拌し、ついで室温に加温し 、攪拌をアルゴン下で１８時間続けた。この期間の経過後、反応混合物を酢酸エ チルで希釈し、酢酸エチルリンス液と一緒に濾過した。溶媒を蒸発させ、得られ た淡褐色固体をクロマトグラフィー（シリカゲル、７０％酢酸エチル／ヘキサン ）に付し、淡橙色固体として粗生成物（８ｇ、５９％）を得た。これをヘキサン でトリチュレートし、淡黄色固体として生成物（６．５ｇ、４８％）を得た。 ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７．５２（”ｔ”，１Ｈ，Ｊ＝７．８）；７．４５（ｄ ，１Ｈ，Ｊ＝７．８）；７．３９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．４）；４．５２（ｓ，２ Ｈ）。マススペクトル：１９４（Ｍ＋Ｈ⁺−Ｈ₂Ｏ）；２１２（Ｍ＋Ｈ⁺）；２３ ４（Ｍ＋Ｎa⁺）。また、検知可能な量のビス付加物（２，６−ジ（３−ヒドロキ シ−１−ブロピニル）ピリジン）が観察された。 （ii）３−（２−［６−ブロモピリジル］）−プロパン−１−オール ３−（２−［６−ブロモピリジル］）−プロパルギルアルコールをチレイ（Ti lley）らの方法（ＪＯＣ，１９８８，３８６頁）を用いて還元した。（１）（４ ２０ｍｇ、２．０ミリモル）をエタノール（１０ｍl）に溶かし、酸化白金（IV ）水和物（２０ｍｇ、０．０８ミリモル）およびトリエチルアミン（０．２０ｍ l、１５ミリモル）で処理した。該フラスコをＨ₂でフラッシし、大気圧のＨ₂の 下、室温で１時間攪拌した。ついで反応混合物を酢酸エチルを用いるショートシ リカゲルプラグを介して濾過し、触媒のほとんどを除去した。得られた灰色油を クロマトグラフィー（シリカゲル、５０％酢酸エチル／ヘキサン）に付し、無色 油として生成物（３１０ｍｇ、７２％）を得た。ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）：７．４８ （”ｔ”，１Ｈ，Ｊ＝７．８）；７．１６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５）；４．１２ （ｂｒ，１Ｈ）；３．６９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．２）；２．８８（ｔ，２Ｈ，Ｊ ＝７．５）；１．９７（”ｑ”，２Ｈ，Ｊ＝６．６）。マススペクトル：１９８ （Ｍ＋Ｈ⁺−Ｈ₂Ｏ）；２１６（Ｍ＋Ｈ⁺；２３８（Ｍ＋Ｎa⁺）。 （iii）３−（２−［６−ブロモピリジル］）−プロピオン酸 ３−（２−［６−ブロモピリジル］）−プロパン−１−オール（１．３ｇ、６ ．０ミリモル）をアセトン（１００ｍl）に溶かし、０℃に冷却した。ジョーン ズ試薬（４．５ｍl）を３回で２０分間隔にて添加した。最後の添加から２０分 経過した後、反応物を過剰のイソプロパノールでクエンチし、１０分間攪拌した 。ついで、該反応混合物を水で希釈し、ロータリーエバポレーターに付して、有 機溶媒を除去した。残りの水溶液をさらに水で希釈し、酢酸エチルで４回抽出し た。有機層をブラインで１回リンスし、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させて白 色固体として生成物（１．１ｇ、８０％）を得た。ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）；７．４ ８（”ｔ”，１Ｈ，Ｊ＝７．８）；７．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９）；７．１ ７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５）；３．０９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２）；２．８５（ ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．２）。マススペクトル：２１２（Ｍ＋Ｈ⁺−Ｈ₂Ｏ）；２３０ （Ｍ＋Ｈ⁺）；２５４（Ｍ＋Ｎa⁺）。 （iv）３−（２−［６−アミノピリジル］）−プロピオン酸 ドライアイス／アセトン冷却器を備えた三ツ口フラスコおよびガラス攪拌板を 備えた機械攪拌機にて、アンモニア（２５０ｍl）を冷却した。このフラスコに Ｆe（ＮＯ₃）₃・９Ｈ₂Ｏ（約１００ｍｇ）およびカリウム元素（７．５ｇ、１９ ０ミリモル）を加えた。得られた暗青色溶液を還流温度で７５分間攪拌し、その 期間経過後、乾燥ＴＨＦ（１０ｍ１）中の３−（２−［６−ブロモピリジル］） −プロピオン酸（１．２ｇ、５．２ミリモル）を加えた。約１０分後、さらに１ ０ｍlのＴＨＦを加えた。反応混合物を６．５時間加熱還流し、ついで塩化アン モニウム（６０ｇ）でクエンチした。アンモニアを一夜蒸発させた。得られた黄 褐色固体を酢酸エチルで徹底的に抽出し、こうして得られた粗生成物をクロマト グラフィー（シリカゲル、１５％メタノール／１％酢酸／塩化メチレン）に付し た。酢酸塩として所望の生成物（０．４７ｇ、４０％）を得た。 ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）：７．６２（”ｔ”，１Ｈ，Ｊ＝８．０）；６．６４（ｄ ，１Ｈ，Ｊ＝８．７）；６．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３）；２．９２（ｔ，２ Ｈ，Ｊ＝６．８）；２．６０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．９）；１．９４（ｂｒ）。マ ススペクトル：１４９（Ｍ＋Ｈ⁺−Ｈ₂Ｏ）；１６７（Ｍ＋Ｈ⁺）。さらに、１３ ％収率のブロモアミドが得られた。 （ｖ）４−［２−［３−［６−アミノ−２−ピリジニル］−１−オキソプロピル −（メチル）−アミノ］−１−オキソエチル］フェノキシ酢酸 ３−（２−［６−アミノピリジル］）−プロピオン酸（９５ｍｇ、０．４２ミ リモル）、４−［２−（メチルアミノ）−１−オキソエチル］フェノキシ酢酸ベ ンジルエステル塩酸塩（１４９ｍｇ、０．４３ミリモル）および１−ヒドロキシ ベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴ）（７６ｍｇ、０．５６ミリモル）をジメ チルホルムアミド（８ｍl）中に合し、フラスコをアルゴンでフラッシした。つ いで、ジイソプロピルエチルアミン（３３５μl、１．９ミリモル）を加え、該 フラスコを０℃に冷却した。該混合物を５分間攪拌した後、１−（３−ジメチル アミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）（１０３ｍｇ、 ０．５４ミリモル）を一度に加え、該混合物を室温に加温した。該混合物をアル ゴン下で３日間攪拌した。ついで、高真空を用いて数時間、ジメチルホルムアミ ドを除去した。得られた残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、１０％メタノ ール／塩化メチレン）に付した。こうして得られた生成物（４５ｍｇ、０．０９ ７ミリモル）をメタノールに溶かし、ブタノール（１６ｍｇ）中に攪拌したパラ ジウム（炭素上１０％）で処理した。該フラスコをＨ₂でフラッシし、ついでＨ₂ 雰囲気下、室温で数時間攪拌した。溶液をイソプロパノールで希釈し、濾過し、 ロータリーエバポレーターを用いて溶媒を除去した。逆相ＨＰＬＣにより所望の 生成物をトリフルオロ酢酸塩（２工程について１７％収率）として得た。 ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）：７．９６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８）；７．７６（”ｔ” ，１Ｈ，Ｊ＝８．１）；７．０３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８）；６．８１（ｄ，１ Ｈ，Ｊ＝９．０）；６．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３）；４．８７（ｓ，２Ｈ） ；４．７２（ｓ，２Ｈ）；３．１４（ｓ，３Ｈ）；３．０５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６ ．１）；２．９９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．５）。このピークはアミド結合配座異性 体に対応する対となるセット（比率が約３：１）を有した。マススペクトル：３ ７０（Ｍ−Ｈ）^-；４８４（Ｍ＋ＣＦ₃ＣＯＯ^-）；７４１（２Ｍ−Ｈ）^-。元素分 析：Ｃ₁₉Ｈ₂₁Ｎ₃Ｏ₅・１．０Ｆ₃Ｃ₂Ｏ₂Ｈ・０．５Ｈ₂Ｏとして、計算値（％）： Ｃ，５１．０２；Ｈ，４．６９Ｎ，８．５０；測定値（％）：Ｃ，５１．１９； Ｈ，４．３８；Ｎ，８．１４。 実施例２ ４−［２−［４−［６−アミノ−２−ピリジニル］−１−オキソブチル− （メチル）アミノ］−１−オキソエチル］フェノキシ酢酸 （ｉ）４−（２−［６−ブロモピリジル］）−３−ブチン−１−オール プロパルギルアルコールの代わりに３−ブヂン−１−オールを用い、実施例１ （ｉ）と同様の反応を行った。収率：４９％。ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）７．４９（” ｔ”，１Ｈ，Ｊ＝７．７）；７．４１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８），７．３４（ｄ ，１Ｈ，Ｊ＝７．３）；３．８５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．１）；２．７２（ｔ，２ Ｈ，Ｊ＝６．２）。マススペクトル：２２６（Ｍ＋Ｈ⁺）；２５０（Ｍ＋Ｎa⁺） 。ビス−アダクツを １６％収率にて得た。 （ii）４−（２−［６−ブロモピリジル］）−ブタン−１−オール ４−（２−［６−ブロモピリジル］）−３−ブチン−１−オールを用い、実施 例１（ii）と同様の反応を行った。収率：８２％。ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）：７．４ ６（”ｔ”，１Ｈ，Ｊ＝７．６）；７．３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６）；７．１ ２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３）；３．６８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．３）；３．０（ｂ ｒ，１Ｈ）；２．７９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．７）；１．７９（ｍ，２Ｈ）；１． ６３（ｍ，２Ｈ）。マススペクトル：２１２（Ｍ＋Ｈ⁺−Ｈ₂Ｏ）；２３０（Ｍ＋ Ｈ⁺）；２５２（Ｍ＋Ｎa⁺）。元素分析：Ｃ₉Ｈ₁₂ＮＯＢｒとして、計算値（％） ：Ｃ，４６．９８；Ｈ，５．２６；Ｎ，６．０９；測定値（％）：Ｃ，４６．９ ６；Ｈ，５．１６；Ｎ，５．８９。また、オレフィンを８％収率にて得た。 （iii）４−（２−［６−ブロモピリジル］）−ブタン酸 ４−（２−［６−ブロモピリジル］）−ブタン−１−オールを用い、実施例１ （iii）と同様の反応を行った。収率：９５％。ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）：９．９（ ｂｒ，１Ｈ）；７．４８（”ｔ”，１Ｈ，Ｊ＝７．６）；７．３２（ｄ，１Ｈ， Ｊ＝７．８）；７．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３）；２．８４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝ ７．５）；２．４２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１）；２．０６（”ｑ”，２Ｈ，Ｊ＝ ７．３）。 （iv）４−（２−［６−アミノピリジル］）−ブタン酸 ４−（２−［６−ブロモピリジル］）−ブタン酸を用い、酢酸エチルからの再 結晶で最終精製を行う以外、実施例１（iv）と同様の反応を実施した。収率：７ １％。ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）：７．５８（”ｔ”，１Ｈ，Ｊ＝８．０）；６．５ ９（ｍ，２Ｈ）；２．７１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６）；２．３０（ｔ，２Ｈ，Ｊ ＝７．１）；１．９５（”ｑ”，２Ｈ，Ｊ＝７．３）。マススペクトル：１６３ （Ｍ＋Ｈ⁺−Ｈ₂Ｏ）；１８１（Ｍ＋Ｈ⁺）。 （ｖ）４−［２−［４−［６−アミノ−２−ピリジニル］−１−オキソブチル− （メチル）アミノ］−１−オキソエチル］フェノキシ酢酸 ４−（２−［６−アミノピリジル］）−ブタン酸を用い、水素添加後、触媒を 除去するための濾過をイソプロパノールの代わりに１％酢酸／水で実施する以外 、実施例１（ｖ）と同様の反応を実施した。全収率：２６％。ＮＭＲ（ＤＭＳＯ −ｄ₆）：７．９３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．７）；７．７５（”ｔ”，１Ｈ，Ｊ＝ ８．０）；７．６２（ｂｒ，１Ｈ）；７．４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８）；６．７ ３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８）；６．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２）；４．８３（ ｓ，２Ｈ）；４．８１（ｓ，２Ｈ）；３．３６（ｂｒ）；３．００（ｓ，３Ｈ） ；２．７０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６）；２．４５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３）；１ ．８６（ｍ，２Ｈ）。このピークもまた、アミド結合配坐異性体に対応する対と なるセット（比率が約２：１）を有した。マススペクトル：３８４（Ｍ−Ｈ）^- ；４９８（Ｍ＋ＣＦ₃ＣＯＯ^-）；７６９（２Ｍ−Ｈ）^-。元素分析：Ｃ₂₀Ｈ₂₃Ｎ₃ Ｏ₅・１．５Ｆ₃Ｃ₂Ｏ₂Ｈ・２．０Ｈ₂Ｏとして、計算値（％）：Ｃ，４６．６３ ；Ｈ，４．８５；Ｎ，７．０９；測定値（％）：Ｃ，４６．２５；Ｈ，５．０２ ；Ｎ，６．８８。 実施例３ ３−［６−アミノ−２−ピリジニル］−プロピオニル−グリシル− （Ｌ）−アスパルチル−（Ｌ）−フェニルアラニン ３−（２−［６−アミノピリジル］）−プロピオン酸（６３ｍｇ、０．２８ミ リモル）、ＨＯＢＴ（５０ｍｇ、０．３７ミリモル）、ＨＣl・Ｈ₂Ｎ−Ｇly−Ａ sp（ＯＢn）−Ｐhe−ＯＢn（１５５ｍｇ、０．２８ミリモル）およびジイソプロ ピルエチルアミンを乾燥ジメチルホルムアミド（７ｍl）中に合した。反応混合 物を０℃に冷却した。ＥＤＣ（６８ｍｇ、０^-．３５ミリモル）を一度に加え、 反応混合物を室温に加温し、アルゴン下に置いた。１８時間経過後、ジメチルホ ルムアミドをロータリーエバポレーター上４０℃で除去した。残渣を酢酸エチル と水の間に分配し、有機層を水で１回、５％クエン酸で２回、再度水で１回、５ ％炭酸水素ナトリウム溶液で２回、再び水で、最後にブラインでリンスした。有 機溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、酢酸エチルを除去した。この溶液から、 出発ペプチド８５ｍｇ（５５％）を回収した。合した水性リンス液を希ＮaＯＨ でｐＨ９に調整し、ジクロロメタンで抽出した。こうして得られた油をクロマト グラフィー（シリカゲル、５％メタノール／塩化メチレン）に付した。こうして 得られた生成物（３０ｍｇ、０．５ミリモル）をエタノール（５ｍl）に溶かし 、１０％Ｐd／Ｃ（ブタノールで湿らせた）（１０ｍｇ）で処理した。フラスコ をＨ₂でフラッシし、Ｈ₂雰囲気下で１８時間攪拌した。この時間経過後、ＴＬＣ はいくらかの量の出発物質を示し、そこでさらに１０％Ｐd／Ｃ（７ｍｇ）を加 え、該反応混合物をＨ₂下に置いた。さらに２４時間後、ロータリーエバポレー ターを用いて溶媒を除去し、残渣を１％酢酸／水で処理した。溶液を濾過し、Ｈ ＰＬＣを用いて精製した。これにより白色粉末として所望の生成物（１９ｍｇ） を得た。全収率：１０％。ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）：７．７９（”ｔ”，１Ｈ，Ｊ ＝８．１）；７．２２（ｍ，５Ｈ）；６．８１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０）；６． ７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２）；４．７４（”ｔ”，１Ｈ，Ｊ＝５．１）；４． ６１（ｍ，１Ｈ）；３．８５（ｓ，２Ｈ）；３．１８（”ａ−ｂ”，１Ｈ，Ｊ＝ ４．５）；３．０２（ｍ，３Ｈ）；２．７９（”ａ−ｂ”，１Ｈ，Ｊ＝５．０） ；２．６６（ｍ，３Ｈ）。マススペクトル：４８４（Ｍ−Ｈ）；５９８（Ｍ＋Ｃ Ｆ₃ＣＯＯ^-）。元素分析:Ｃ₂₃Ｈ₂₇Ｎ₅Ｏ₇・２．５Ｆ₃Ｃ₂Ｏ₂Ｈ・２．５Ｈ₂Ｏと して、計算値（％）：Ｃ，４１．２４；Ｈ，４．２２；Ｎ，８．５９；測定値（ ％）：Ｃ，４１．３０；Ｈ，４．２６；Ｎ，８．８１。 実施例４ ４−［６−アミノ−２−ピリジニル］−ブチリル−グリシル− （Ｌ）−アスパルチル−（Ｌ）−フェニルアラニン ４−（２−［６−アミノピリジル］）−ブタン酸を実施例３と同様の方法にて 処理した。全収率；１１％。ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：８．２１（ｄ，１Ｈ， Ｊ＝８．１）；８．１６（ｂｒ，１Ｈ）；８．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７）； ７．８０（”ｔ”，２Ｈ，Ｊ＝７．９）；７．２０（ｍ，５Ｈ）；６．７９（ｄ ，１Ｈ，Ｊ＝８．８）；６．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３）；４．５９（”ｑ” ，１Ｈ，Ｊ＝５．１）；４．３６ （”ｑ”，１Ｈ，Ｊ＝５．２）；３．６９（ｓ，２Ｈ）；３．４１（ｂｒ）；２ ．９７（”ａ−ｂ”ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．２，Ｊ＝８．５）；２．６７（ｍ，３Ｈ ）；２．４２（”ａ−ｂ”，１Ｈ，Ｊ＝８．３）；２．１９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７ ．１）；１．８５（ｍ，２Ｈ）。マススペクトル：４９８（Ｍ−Ｈ）^-；６１２ （Ｍ＋ＣＦ₃ＣＯＯ^-）。元素分析：Ｃ₂₄Ｈ₂₉Ｎ₅Ｏ₇・２．０Ｆ₃Ｃ₂Ｏ₂Ｈ・１． ５Ｈ₂Ｏとして、計算値（％）：Ｃ，４４．５７；Ｈ，４．５４；Ｎ，９．２８ ；測定値（％）：Ｃ，４４．８４；Ｈ，４．８０；Ｎ，８．６８。 実施例５ Ｎ^α−アセチル−カナバニニル−グリシニル−アスパルチル−アニリド （ｉ）Ｎ^α−t−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^ω−t−ブチルオキシカルボニル −カナバニン カナバニン硫酸塩（５．０ｇ、１８．２ミリモル、シグマ（Sigma））を１０ ％ＮaＯＨ（水溶液、５０ｍl）およびｔ−ブチルアルコール（５０ｍl）の混合 物に溶かし、室温で１３日間、ジ炭酸ジ−t−ブチル（１２．０ｇ）５５ミリモ ル）で処理した（反応は２日で完了）。反応混合物を真空下で蒸発させ、ついで 減圧でメタノールより蒸発させた。粗生成物を真空下でそのナトリウム塩として 貯蔵し、さらに精製することなく用いた：ＭＳ（ＦＡＢ）ナトリウム塩：ｍ／ｅ ３９８［（Ｍ−Ｈ）＋Ｎa］⁺。 （ii）メチルＮ^α−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^ω−ｔ−ブチルオキシカル ボニル−カナバニニル−グリシナート ＤＭＦ（２５０ｍl）中の前記の保護カナバニン塩を、ジイソプロピルエチル アミン（１９ｍl、１０９．３ミリモル）、メチルグリシナート塩酸塩（４．５ ８ｇ、３６．５ミリモル、シュバイツァーホール（Schweizerhall）、１−ヒド ロキシベンゾトリアゾール（４．９３ｇ、３６．５ミリモル）およびベンゾトリ アゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフル オロホスファート（１６．１ｇ、３６．５ミリモル）と反応させ、室温で２４時 間攪拌し た。真空下での蒸発後、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、８ ×２０ｃｍ、２％メタノール／クロロホルム；シリカゲル、８×２０ｃｍ、６０ ％酢酸エチル／ヘキサン）を繰り返すことにより精製し、生成物（３．８６ｇ） （カナバニン硫酸塩より４７％）を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣl₃ ）δ１．４４（ｓ，９Ｈ）、１．４９（ｓ，９Ｈ）、１．９８−２．１３（ｍ， ２Ｈ）、３．７７（ｓ，３Ｈ）、３．９３−４．２４（ｍ，６Ｈ）、４．３７− ４．５３（ｍ，１Ｈ）、５．５５−５．６８（ｍ，１Ｈ）、６．３１−６．４８ （ｍ，１Ｈ）、７．７４−７．８４（ｍ，１Ｈ）。 （iii）Ｎ^α−ｔ−ブチルオキシカルボニルーγ−ベンジル−アスパルチル−ア ニリド Ｎ^α−ｔ−ブチルオキシカルボニル−γ−ベンジル−アスパラギン酸（５．０ ｇ、１５．５ミリモル、ＰＲＦ）をＤＭＦ（１００ｍl）に溶かし、アニリン（ ２．１ｍl、２３．３ミリモル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．３ ｇ、１７．１ミリモル）およびＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（３． ２ｇ）１５．５ミリモル）と室温で２４時間反応させた。反応物を濾過し、濾液 を真空下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、６ ×２０ｃｍ、１５％酢酸エチル／ヘキサン）に付して精製し、生成物（５．７０ ｇ、９２％）を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）δ１．４５（ｓ，９Ｈ）、２．６ ０−３．２３（ｍ，２Ｈ）、４．５３−４．８７（ｍ，１Ｈ）、５．２０（ｓ， ２Ｈ）、５．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）、７．００−７．６７（ｍ，５Ｈ） 、７．４０（ｓ，５Ｈ）、８．６３（ｂｒｓ，１Ｈ）。 （iv）γ−ベンジル−アスパルチル−アニリド塩酸塩 Ｎ^α−ｔ−ブチルオキシカルボニル−γ−ベンジル−アスパルチル−アニリド （２．７５ｇ、６．９ミリモル）を４ＮＨＣl／ジオキサンと室温で４時間反応 させた。反応混合物を減圧下で蒸発させた。次に、まず残渣をトルエンより蒸発 させ、ついでトルエン／メタノールから蒸発させ、真空下で乾燥させて粗生成物 を 得、それをさらに精製することなく用いた。 （ｖ）Ｎ^α−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^ω−ｔ−ブチルオキシカルボニル −カナバニニル−グリシン ジオキサン（１０ｍl）中のメチルＮ^α−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^ω −ｔ−ブチルオキシカルボニル−カナバニニル−グリシナ−ト（１．５４ｇ、３ ．４５ミリモル）を１Ｎ ＮaＯＨ（水性）と室温で４．５時間反応させた。反 応混合物のｐＨを５．５−６．０に調整し（１Ｎ水性ＨＣl）、ついで真空下で 蒸発させた。残渣をトルエンより蒸発させ、減圧下で乾燥させて生成物を得、そ れをさらに精製することなく用いた。 （vi）Ｎ^α−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^ω−ｔ−ブチルオキシカルボニル −カナバニニル−グリシニル−γ−ベンジル−アスパルチル−アニリド 化合物γ−ベンジル−アスパルチル−アニリド塩酸塩およびＮ^α−ｔ−ブチル オキシカルボニル−Ｎ^ω−ｔ−ブチルオキシカルボニル−カナバニニル−グリシ ンをＤＭＦ（２００ｍl）に溶かし、ジイソプロピルエチルアミン（３．６１ｍl 、２０．７ミリモル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９３２ｍｇ、６． ９ミリモル）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルア ミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファート（３．０５ｇ、６．９ミリモル ）で処理し、室温で５日間攪拌した。反応混合物を真空下で蒸発させ、残渣をフ ラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、６×２１ｃｍ、３〜１０％メタノー ル／クロロホルム；シリカゲル、６×２１ｃｍ、６０−１００％酢酸エチル／ヘ キサン）を繰り返すことにより精製し、少量のＨＭＰＡ（ＢＯＰ試薬由来）の混 ざった生成物（２．２０ｇ、８９％）を得た。-¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，９０Ｍ Ｈz）δ １．４３（ｓ，９Ｈ）、１．４７（ｓ，９Ｈ）、１．９７−２．２７ （ｍ，２Ｈ）、３．０３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＋７．５Ｈｚ）、３．７７−４．１０（ ｍ，４Ｈ）、４．２０−４．５５（ｍ，１Ｈ）、４９０−５．２３（ｍ，１Ｈ） 、５．１７（ｓ，２Ｈ）、５．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、６．１７（ ｂｒｓ，２Ｈ）、６．８３−８．１ ７（ｍ，１３Ｈ）、８．８７（ｂｒｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ７１４（Ｍ ＋Ｈ）⁺。 （vii）カナバニニル−グリシニル−γ−ベンジル−アスパルチル−アニリド塩 酸塩 保護ペプチド生成物（４８６ｍｇ、０．６７７ミリモル）をＴＦＡと室温で２ 時間反応させた。反応混合物を減圧下で蒸発させた。残渣をトルエンより、４Ｎ ＨＣl／ジオキサンより２回、ついでトルエンより蒸発させ、塩酸塩として粗生 成物を得、それをさらに精製することなく用いた。 （viii）Ｎ^α−アセチル−カナバニニル−グリシニル−γ−ベンジル−アスパル チル−アニリド 前記の粗塩をＤＭＦに溶かし、ジイソプロピルエチルアミンで中和した。無水 酢酸（６４μｌ、０．６７７ミリモル）を加え、得られた溶液を室温で２４時間 攪拌した。反応混合物を真空下で蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィ ー（シリカゲル、４×２０ｃｍ、２０％メタノール／クロロホルム）に付して精 製し、生成物を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ，９０ＭＨｚ）δ２．０２（ｓ， ３Ｈ）、２．１５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）、２．９３−３．１７（ｍ，２ Ｈ）、３．８３−４．１０（ｍ，４Ｈ）、４．２７−５．１３（ｍ，２Ｈ＋ＨＯ Ｄ）、５．２０（ｓ，２Ｈ）、６．８３−７．９３（ｍ，１０Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ ）ｍ／ｅ４６６（Ｍ＋Ｈ）⁺。 （ix）Ｎ^α−アセチル−カナバニニル−グリシニル−アスパルチル−アニリド 前記の保護ペプチドを５％Ｐd／Ｃを含むメタノール中に溶かし、水素（パー ル（Parr）反応器、５０ｐｓｉ、室温）と４時間反応させた。反応混合物をセラ イトパッドを介して濾過し、減圧下で蒸発させた。ついで、残渣をトルエンおよ びメタノールの混合物より蒸発させ、粗生成物（１９０ｍｇ）を得た。この物質 の一部（９６ｍｇ）をｎ−ブタノール：酢酸：水（４：１：５）の上相で溶出す る分配クロマトグラフィー（Ｇ−２５、２．５ｃｍ×１ｃｍ）に付して精製し、 純粋な生成物（４７．６ｍｇ）を得た。ＥＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｅ４６６［Ｍ＋Ｈ］⁺ ，ｍ／ｅ４６４［Ｍ−Ｈ］^-；ＨＰＬＣ ｋ’２．２９［５μＰＲＰ−１：ハミ リトン（Hamiliton）、４．６×２５０ｍｍ、流速＝１．５ｍl／分、ＵＶ検出（ ２２０ｎｍ）、８８：１２（０．１％トリフルオロ酢酸（水性）：０．１％トリ フルオロ酢酸／アセトニトリル）］；ＨＰＬＣ ｋ’２．７９［５μＰＲＰ−１ ：ハミリトン、４．６×２５０ｍｍ、流速＝１．５ｍl/分、ＵＶ検出（２２０ｎ ｍ）、勾配溶出（０．１％トリフルオロ酢酸（水性）：０．１％トリフルオロ酢 酸／アセトニトリル）を９５：５（２０分間）で開始し、５０：５０（５分間） に保持し、９５：５（５分）に戻す］；ＴＬＣ Ｒｆ ０．２３（シリカゲル、 ４：１：１ブタノール：酢酸：水）；ＴＬＣ Ｒｆ ０．４２（シリカゲル、１ ：１：１：１ブタノール：酢酸：水：酢酸エチル）。 実施例６ ４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−［３−（４−ピリジニル）プロパノイル］アミノ］ アセチル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸 （ｉ）Ｎ−（カルボベンジルオキシ）アドレノロン アドルノロン塩酸塩（２８．６ｇ、０．１２１モル）の５℃で攪拌した２Ｎ水 酸化ナトリウム（２００ｍl）中溶液に、クロロギ酸ベンジル（２０．６ｇ、０ ．１２１モル）のトルエン（１８ｍl）中溶液および２Ｎ水酸化ナトリウム溶液 （６０ｍl）を同時に滴下した。得られた溶液を５℃で７５分間攪拌し、水（２ ３０ｍl）で希釈し、１Ｎ塩酸（５３６ｍl）で酸性化した。得られた懸濁液を３ ０分間攪拌した後、形成した淡緑色固体を濾過し、水（１８０ｍl）中にて攪拌 し、再び濾過した。濾過ケーキをエタノール（１３５ｍl）中にて手短に攪拌し 、濾過し、風乾した。固体をエタノール（１３５ｍl）でトリチュレートし、濾 過し、真空乾燥して標記化合物（２８．６ｇ、７５％）を得た。融点１８３−６ ℃。¹ Ｈ ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＭeＯＤ₄）δ７．３５（ｍ，７Ｈ）、６．８３（ｄ ，１Ｈ）、５．１（ｓ，２Ｈ）、４５５（ｓ，２Ｈ）。 （ii）４−［［Ｎ−（カルボベンジルオキシ）−Ｎ−メチルアミノ］アセチル− ２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸ジメチルエステル 実施例６（ｉ）の化合物（２３．６ｇ、０．０７４８モル）、アセトン（３４ ０ｍl）および無水炭酸カリウム（２１．０ｇ）の混合物を、アルゴン下、７０ 分間加熱還流した。得られた懸濁液を室温まで冷却し、ブロモ酢酸メチル（２９ ．０ｇ、０．１８９モル）で滴下処理した。該懸濁液を、室温で１６時間、５０ ℃で６時間攪拌し、冷却し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をジクロロメタン（ ８００ｍl）に溶かした。溶液を水（１６０ｍl）、５％水性炭酸カリウム（２× １００ｍl）で洗浄し、乾燥（硫酸ナトリウム）した。濃縮して標記化合物（２ ６．３５ｇ、８２．３％）を得た：融点５６−９℃。ＭＳ（ＤＣＩ、ＮＨ₃）ｍ ／ｅ４４６［Ｍ＋Ｈ］⁺；¹Ｈ ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣl₃）δ７．５５（ ｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ）、７．５（ｓ，１Ｈ）、７．４（ｍ，５Ｈ）、６．８５ （ｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ）、５．１５（ｓ，２Ｈ）、４．８０（ｓ，２Ｈ）、４ ．７７（ｓ，２Ｈ）、４．７（ｄ，２Ｈ）、３．８０（ｓ，６Ｈ）。元素分析： Ｃ₂₂Ｈ₂₃ＮＯ₉・３／８Ｈ₂Ｏとして、計算値（％）：Ｃ，５８．４４；Ｈ，５． ２９；Ｎ，３．１０；測定値（％）：Ｃ，５８．４４；Ｈ，５．１３；Ｎ，２． ９４。 （iii）４−［（Ｎ−メチルアミノ）アセチル］−２，２’−［１，２−フェニ レンビス（オキシ）］ビス酢酸ジメチルエステル塩酸塩 実施例６（ii）の化合物（５．０ｇ、１１．７ミリモル）の無水メタノール（ １５０ｍl）中溶液を１Ｍ塩化水素／ジエチルエーテル（１２ｍl）で処理し、１ ０％パラジウム／炭素を加え、該懸濁液を室温で水素添加（１０ｐｓｉ）した。 ５分後、混合物を濾過し、濾液を濃縮して標記化合物（３．６g、９４％）を得 た：融点＞１９７℃（分解）；¹Ｈ ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＭeＯＤ₄₎δ７．６ ５（ｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ）、７．５６（ｓ，１Ｈ）、７．０５（ｄ，Ｊ＝８． ５，１Ｈ）、４．８８（ｓ，２Ｈ）、４．８５（ｓ，２Ｈ）、４．５（ｓ，２Ｈ ）、３．７５（ｓ，６Ｈ）。 （iv）４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−［３−（４−ピリジニル）プロパノイル］アミ ノ］アセチル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸ジ メチルエステル ３−（４−ピリジル）プロパン酸（０．７５ｇ、５ミリモル）を塩化チオニル （６ｍl）中で１２分間還流した。混合物を濃縮し、トルエンより２回濃縮した 。得られた黄色固体をジクロロメタン（１０ｍl）に懸濁させ、アルゴン下、実 施例６（iii）の化合物（１．６ｇ、５ミリモル）のジイソプロピルエチルアミ ン（１．９ｇ、１５ミリモル）含有のジクロロメタン（５０ｍl）中冷却溶液に 滴下した。明アンバー色溶液を、アルゴン下、室温で２０時間攪拌した。混合物 を水およびブラインで洗浄し、有機相を乾燥（硫酸マグネシウム）し、濃縮した 。残りの油をクロマトグラフィー（シリカゲル、２％メタノール／ジクロロメタ ン）に付して精製した。生成物含有のフラクションを合し、濃縮し、白色固体と して標記化合物（０．６６ｇ、３０％）を得た：ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４５９（Ｍ ＋Ｈ）⁺；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣl₃）δ２．７５（ｔ，Ｊ＝６．７ Ｈｚ，２Ｈ）、３．０（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）、３．０５（ｓ，３Ｈ）、 ３．７５（ｓ，６Ｈ）、４．７（ｍ，２Ｈ）、４．７５（ｓ，２Ｈ）、６．８５ （ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、７１５（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．５ （ｓ，１Ｈ）、７．６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、８．４５（ｄ，Ｊ＝６． ５Ｈｚ，２Ｈ）。 （ｖ）４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−［３−（４−ピリジル）プロパノイル］アミノ ］アセチル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸 実施例６（iv）の化合物（０．２ｇ、０．４３ミリモル）の１０％水性酢酸中 溶液を３５時間還流した。混合物を濃縮し、残渣をＨＰＬＣ（ＹＭＣ ＯＤＳ ＡＱ，５０×２５０ｍｍ；９０ｍl／分、１５％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ／０．１％Ｔ ＦＡ、ＵＶ検出（２２０ｎｍ））に付して精製した。生成物のフラクションを合 し、少容量にまで濃縮し、凍結乾燥し、綿毛状白色吸湿性固体として標記化合物 （９２ｍｇ、５０％）を得た：ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４３１（Ｍ＋Ｈ）⁺；¹Ｈ Ｎ ＭＲ（４ ００ＭＨｚ，ＭeＯＤ₄）δ３．０５（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）、３．１５（ ｓ，３Ｈ）、３．２５（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）、４．７５（ｓ，２Ｈ）、 ４．８５（ｓ，２Ｈ）、４．８（ｓ，２Ｈ）、７．０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１ Ｈ）、７．５５（ｓ，１Ｈ）、７．６５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．９ ５（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）、８．６５（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）。元 素分析：Ｃ₂₁Ｈ₂₂Ｎ₂Ｏ₈・１．５ＴＦＡ・２Ｈ₂Ｏとして、計算値（％）：Ｃ， ４６．５３；Ｈ，４．１５；Ｎ，４．５２；測定値（％）：Ｃ，４６．３３；Ｈ ，４．２７；Ｎ，４．６６。 実施例７ Ｎ^α−ベンゾイル−ＮΔ−［（シアノイミノ）（フェノキシ）メチル］− Ｎ^α−ＭeＯrn−Ｇly-Ａsp−フェニルアミド （ｉ）Ｎ^α−カルボベンジルオキシ−Ｎ^α−メチル−Ｏrn（Ｐhth） ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（J.Org.Chem.）１９８３， ４８，７７に記載の方法に類似する方法に従って、Ｎ^αＣbz−Ｏrn（Ｐhth）を 変換し、標記化合物を得た。 （ii）Ｎ^αカルボベンジルオキシ−Ｎ^αＭeＯrn（Ｐhth）−Ｇlyメチルエステル 実施例７（ｉ）の化合物（９ｇ、２２ミリモル）、グリシンメチルエステル塩 酸塩（３．５ｇ、２７．８ミリモル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３ ．６６ｇ、２７ミリモル）、ジイソプロピルエチルアミン（８ｍl、１８ミリモ ル）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩 酸塩（５．１３ｇ、２６．８ミリモル）のジメチルホルムアミド（５０ｍl）中 溶液を一夜攪拌した。混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、有機相を希塩 酸および希炭酸ナトリウムで洗浄し、乾燥（硫酸マグネシウム）し、濃縮して標 記化合物（８．３ｇ）を得た。 （iii）Ｎ^αＭeＯrn（Ｐhth）−Ｇlyメチルエステル 実施例７（ii）の化合物（２５．０ｇ、５１ミリモル）のメタノール（１５０ ｍl）中溶液を濃塩酸（１５滴）および１０％パラジウム／炭素（５．０ｇ）で 処理した。混合物を水素雰囲気下で５時間振盪した。混合物を濾過し、濾液を濃 縮し、標記化合物（２１．０ｇ）定量）を得た。 （iv）Ｎ^αベンゾイル−Ｎ^αＭeＯrn（Ｐhth）−Ｇlyメチルエステル 実施例７（iii）の化合物（２０．０ｇ、５８ミリモル）のジクロロメタン（ １５０ｍl）中溶液をジイソプロピルエチルアミン（２２．３ｇ、０．１７モル ）で処理し、氷浴中で攪拌した。混合物を塩化ベンゾイル（８．４６ｇ、６０ミ リモル）のジクロロメタン（２０ｍl）中溶液で処理し、１時間攪拌し、３Ｎ塩 酸で洗浄した。有機相を乾燥（硫酸マグネシウム）し、濃縮して標記化合物（２ ３．６ｇ、８３％）を得た。 （ｖ）Ｎ^αベンゾイル−Ｎ^αＭeＯrn（Ｐhth）−Ｇly 実施例７（iv）の化合物（２３ｇ、４７ミリモル）のアセトン（２５０ｍl） 、水（２００ｍl）および濃塩酸（４０ｍl）中溶液を２４時間加熱還流し、冷却 し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（硫酸マグネシウム）し 、濃縮し、標記化合物（２０ｇ、９０％）を得た。 （vi）Ｎ^αベンゾイル−Ｎ^αＭeＯrn（Ｐhth）−Ｇly−Ａsp（Ｏ−Ｂzl）−フェ ニルアミド 実施例７（ｖ）の化合物（１５．０ｇ、３２ミリモル）、Ａsp（Ｏ−Ｂzl）− フェニルアミド（１２．７ｇ、３２ミリモル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾ ール（６．０７ｇ、４５ミリモル）、ジイソプロピルエチルアミン（８．３２ｇ 、６４ミリモル）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカル ボジイミド・塩酸塩（６．６８ｇ、３５ミリモル）のジメチルホルムアミド（７ ０ｍl）中混合物を一夜攪拌した。混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、 有機相を冷３Ｎ塩酸で洗浄し、乾燥（硫酸マグネシウム）し、濃縮した。残渣を クロマトグラフィー（シリカゲル、３％メタノール／ジクロロメタン）に付し、 標 記化合物（１２ｇ、４４％）を得た：ＭＳ ｍ／ｅ７１８．２［Ｍ＋Ｈ］⁺。 （vii）Ｎ^αベンゾイル−Ｎ^αＭeＯrn（Ｐhth）−Ｇly−Ａsp−フェニルアミド 実施例７（vi）の化合物（５．０ｇ、５．８ミリモル）を攪拌しながらエタノ ール（１００ｍl）に溶かした。水性酢酸で洗浄し、濾過した１０％パラジウム ／炭素（２．０ｇ）で処理した。混合物を水素雰囲気下で１５時間振盪し、濾過 し、濾液を濃縮して標記化合物（４．４ｇ、８８％）を得た。 （viii）Ｎ^αベンゾイル−Ｎ^αＭeＯrn−Ｇly−Ａsp−フェニルアミド 実施例７（vii）の化合物（４．４ｇ、６．７ミリモル）のエタノール（６０ ｍl）中溶液をヒドラジン（１．０ｇ、２０ミリモル）と反応させ、１時間加熱 還流し、冷却し、濃縮して粗標記化合物を得た。ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｅ４９８［ Ｍ＋Ｈ］⁺ （ix）Ｎ^αベンゾイル−ＮΔ［（シアノイミノ）（フェノキシ）メチル］−Ｎ^α ＭeＯrn−Ｇly−Ａsp−フェニルアミド 実施例７（viii）の化合物（２．０ｇ、４．５ミリモル）およびジフェニルシ アノカーボンイミダート（１．２５ｇ、５．３ミリモル）のイソプロパノール（ ４０ｍl）中混合物を一夜攪拌し、濾過し、濾液を濃縮した。残渣をクロマトグ ラフィー（シリカゲル、４％-８％-１５％メタノール／ジクロロメタン＋０．２ ％酢酸）に付し、標記化合物（０．７ｇ、２５％）を得た：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ ｅ６４２．２［Ｍ＋Ｈ］⁺。 実施例８ Ｎ^α−ベンゾイル−Ｎ^G−シアノ−Ｎ^α−ＭeＡrg−Ｇly−Ａsp−フェニルアミド 実施例７（ix）の化合物（０．３ｇ、０．４６ミリモル）の溶液をメタノール （２０ｍl）に溶かし、冷却し、アンモニア流で５分間処理した。該混合物を室 温で一夜攪拌し、濃縮し、残渣をメタノール（２ｍl）に溶かし、ｐＨが約５に なるまで酢酸で処理した。溶液を水で希釈し、白色固体として標記化合物（０． ２４ ｇ、９２％）を得た：ＭＳｍ／ｅ５６５．２［Ｍ＋Ｈ］⁺。 実施例９ Ｎ−［Ｎ^α−ベンゾイル−ＮΔ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）− Ｎ^α−メチル−Ｏrn−Ｇly］−３−（２−ベンゾチアゾリル）−β−アラニン （ｉ）３−（２−ベンゾチアゾリル）−β−アラニンシクロヘキシルエステル ａ）２−［［３−（シクロヘキシルオキシカルボニル）−２−［［（１，１ −ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニルジ スルフィド Ｎ−Ｂoc−Ａspβ−シクロヘキシルエステル（３．２ｇ）１０ミリモル）、２ −アミノフェニルジスルフィド（３．０ｇ、１２ミリモル）、クロロギ酸イソブ チル（１．４４ｇ、１４．２ミリモル）および４−メチルモルホリン（１．３２ ６ｇ、１０ミリモル）のテトラヒドロフラン中混合物を一夜攪拌した。残渣をジ クロロメタンに溶かし、水で洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をクロマ トグラフィー（シリカゲル、３０％エーテル／石油エーテル）に付した。標記化 合物含有のフラクションを合し、１Ｎ塩酸で洗浄し、水で洗浄し、乾燥し、濃縮 して標記化合物（３．８ｇ、９０％）を得た：ＴＬＣ Ｒｆ ０．２６（シリカ 、石油エーテル：エーテル（７：３））。 ｂ）３−（２−ベンゾチアゾリル）−３−（１，１−ジメチルエトキシカル ボニル）アミノプロパン酸シクロヘキシルエステル 実施例９（ｉ）（ａ）の化合物（３．１ｇ、３．７ミリモル）および酢酸を５ ０℃に加熱し、亜鉛粉（５．６ｇ）を１５分間隔にて加えた。熱混合物を濾過し 、濾液を濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、３０％エーテル／石 油）に付し、標記化合物（２．２ｇ、７４％）を得た：ＴＬＣ Ｒｆ ０．４２ （シリカ、石油エーテル：エーテル（７：３））。 ｃ）３−アミノ−３−（２−ベンゾチアゾリル）プロパン酸シクロヘキシル エステル シオキサン（１１０ｍl）中の実施例９（i）（ｂ）の化合物（６．９ｇ、１７ ミリモル）および塩化水素を一夜攪拌し、濃縮し、残渣をトルエンで処理し、濃 縮し、標記化合物（５．７ｇ、９８％）を得た：ＴＬＣ Ｒｆ ０．４（シリカ 、ジクロロメタン：メタノール（９７：３））；ＭＳ（ＤＣＩ／ＮＨ₃）３０５ ［Ｍ＋Ｈ］⁺。 （ii）Ｎ−［Ｎ^α−ベンゾイル−Ｎ^α−メチル−Ｏrn（Ｐhth）−Ｇly］−３− （２−ベンゾチアゾリル）−β−アラニンシクロヘキシルエステル 実施例７（ｖ）の化合物（５．０ｇ、１１ミリモル）、実施例９（ｉ）（ｃ） の化合物（３．０ｇ）１１ミリモル）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）− ３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２．９５ｇ、１５．４ミリモル）、ジイソプ ロピルエチルアミン（３．９ｍl、２２ミリモル）および１−ヒドロキシベンゾ トリアゾール（２．１ｇ、１５．５ミリモル）のジメチルホルムアミド中混合物 を一夜攪拌した。該混合物を濃縮し、水で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。 有機相を水で洗浄し、乾燥し、濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（シリカゲ ル、５％メタノール／ジクロロメタン）に付し、標記化合物（３．２ｇ、４０％ ）を得た。 （iii）Ｎ−［Ｎ^α−ベンゾイル−Ｎ^α−メチル-Ｏrn−Ｇly］−３−（２−ベン ゾチアゾリル）−β−アラニン シクロヘキシルエステル 実施例９（ii）の化合物（３．２ｇ、４．４ミリモル）およびヒドラジン水和 物（０．３３ｇ）をメタノール（２７ｍl）中７２時間攪拌した。混合物を濃縮 し、残渣をＨＰＬＣ（Ultrasphere ODS，４１ｍｍ×２５０ｍｍ、６０ｍｌ／分 、３５％アセトニトリル／水／０．１％トリフルオロ酢酸、２５４ｎｍでｎｏＵ Ｖ検出）によるクロマトグラフィーに付し、標記化合物（１．７ｇ、６５％）を 得た。 （iv）Ｎ−（２，２−ジメトキシエチル）−２−メチル−２−シュードチオウレ ア ａ）Ｎ−（２，２−ジメトキシエチル）チオウレア メタノール（２００ｍl）をアンモニアで飽和し、イソチオシアナトアセトア ルデヒドジメチルアセタール（５．０ｇ）と一緒に２時間攪拌した。該混合物を 濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、５％メタノール／ジクロロメ タン）に付し、標記化合物を得た。 ｂ）Ｎ−（２，２−ジメトキシエチル）−２−メチル−２−チオシュードウ レア アセトニトリル中、実施例９（iv）（ａ）の化合物（５．９ｇ）およびヨード メタンを一夜攪拌し、濃縮し、ジクロロメタンに溶かし、乾燥し、濃縮して標記 化合物を得た。 （ｖ）Ｎ−［Ｎ^α−ベンゾイル−Ｎ^α−メチル−ＮΔ−［［（２，２−ジメトキ シエチル）アミノ］チオカルボニル）］−Ｏrn−Ｇly］−３−（２−ベンゾチア ゾリル）−β−アラニンシクロヘキシルエステル 実施例９（iii）の化合物（１．６ｇ、２７ミリモル）および実施例９（iv） の化合物（１．１ｇ、３．９ミリモル）を、ジメチルホルムアミド中、ジイソプ ロピルエチルアミン（１．３ｍl、７．３ミリモル）と一緒に攪拌した。該混合 物を濃縮し、残渣を水に溶かした。沈殿固体をジクロロメタンで抽出し、有機相 を水で洗浄し、乾燥して濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、５ ％メタノール／ジクロロメタン）に付し、標記化合物（１．２ｇ、６３％）を得 た。 （vi）Ｎ−［Ｎ^α−ベンゾイル−ＮΔ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−Ｎ^α −メチル−Ｏrn−Ｇly］−３−（２−ベンゾチアゾリル）−β−アラニン シ クロヘキシルエステル 実施例８（ｖ）の化合物（１．２ｇ）を５０％トリフルオロ酢酸水溶液（５０ ｍl）中に２８時間攪拌し、濃縮した。残渣をＨＰＬＣ（Ultrasphere ODS， ４１ｍｍ×２５０ｍｍ、６０ｍl／分、勾配、Ａ：アセトニトリル Ｂ：水／０ ．１％トリフルオロ酢酸、１０％〜８０％アセトニトリル、ＵＶ検出（２５４ｎ ｍ））に付し、標記化合物（０．２ｇ）を得た。 （vii）Ｎ−［Ｎ^α−ベンゾイル−ＮΔ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）− Ｎ^α−メチル−Ｏrn−Ｇly］−３−（２−ベンゾチアゾリル）−β−アラニン 実施例９（vi）の化合物をフッ化水素およびアニソールと反応させ標記化合物 を得た。 実施例１０ ４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−［５−（２−アミノベンズイミダゾリル）］−アミノ ］アセチル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸 （ｉ）４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−（３，４−ジニトロベンゾイル）アミノ］アセ チル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸ジメチルエ ステル ３，４−ジニトロ安息香酸（１．１ｇ、４．５ミリモル）の塩化チオニル（１ ０ｍl）中溶液を３時間還流した。反応物を冷却し、濃縮し、ジクロロメタンよ り２ないし３回濃縮し、減圧下で０．５時間乾燥させた。残渣をジクロロメタン （５ｍl）に溶かし、実施例６（iii）の化合物（１．４５ｇ、４．０ミリモル） のジイソプロピルエチルアミン（４．０ｍl、１３．５ミリモル）含有のジクロ ロメタン（２５ｍl）中溶液に滴下した。混合物を室温で１．５時間攪拌した。 混合物を希塩酸、５％炭酸水素ナトリウム、ブラインで洗浄し、乾燥（硫酸マグ ネシウム）し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、 ジクロロメタン：メタノール，９９：１）により精製し、標記化合物（６５０ｍ ｇ、３３％）を得た：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｅ５２０［Ｍ＋Ｈ］⁺。¹IＨ ＮＭＲ（ ２５０ＭＨｚ，ＣＤＣ1₃）δ８．０８（ｓ，１Ｈ）、８．０（ｄ，１Ｈ）、７． ９（ｓ，１Ｈ）、７．６０（ｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ）、７．５４（ｓ，１Ｈ）、 ６．９（ｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ）、４．９（ｓ，２Ｈ）、４．８２（ｓ，２Ｈ） 、４．７９（ｓ，２Ｈ）、３．８（ｓ，６Ｈ）、 ３．０（ｓ，３Ｈ）。 （ii）４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−（３，４−ジアミノベンゾイル）アミノ］アセ チル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸ジメチルエ ステル・二塩酸塩 実施例１０（ｉ）の化合物（４４０ｍｇ、０．８ミリモル）の１Ｍエーテル性 塩化水素（１．０ｍl）含有のメタノール（２０ｍl）およびジクロロメタン（５ ｍl）中溶液を１０％パラジウム／炭素（１００ｍｇ）で処理し、７時間水素添 加した。混合物を濾過し、濾液を濃縮して標記化合物（０．４ｇ、９４％）を得 た：ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４６０［Ｍ＋Ｈ］⁺。 （iii）４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−［５−（２−アミノベンズイミダゾリル）］ アミノ］アセチル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢 酸ジメチルエステル 実施例１０（ii）の化合物（４００ｍｇ、０．７ミリモル）の水（１０ｍl） およびメタノール（５ｍl）中溶液を５％水性炭酸ナトリウムでｐＨ７．０に中 和し、つづいて臭化シアン（７５ｍｇ、０．７ミリモル）を添加した。混合物を 室温で一夜攪拌した。メタノールを蒸発させ、水相を１０％水酸化ナトリウム水 溶液でｐＨ１０に塩基性化し、生成物を酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（ 硫酸マグネシウム）し、濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、ジク ロロメタン：メタノール ９３：７）に付し、標記化合物（１００ｍｇ、３１％ ）を得た：ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４８５［Ｍ＋Ｈ］⁺、４８３［Ｍ−Ｈ］^-。 （iv）４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−［５−（２−アミノベンズイミダゾリル）］ア ミノ］アセチル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸 ・ジトリフルオロ酢酸 実施例１０（ii1）の化合物を１０％水性酢酸（１０ｍl）中にて２４時間加熱 還流した。混合物を濃縮し、残渣をトリフルオロ酢酸で処理し、分取用ＭＰＬＣ （ＯＤＳカラム、３０％メタノール／水）により精製し、標記化合物（３９ｍｇ 、２８％）を得た：ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４５７［Ｍ＋Ｈ］⁺、４５５［Ｍ−Ｈ］^- ；¹Ｈ ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＭeＯＤ₄）δ７．７５（ｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ） 、７．６（ｓ，１Ｈ）、７．４８（ｓ，１Ｈ）、７．４（ｍ，２Ｈ）、７．２８ （ｓ，１Ｈ）、７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ）、５．０（ｓ，２Ｈ）、４． ８（ｓ，２Ｈ）、４．７６（ｓ，２Ｈ）、３．０５（ｓ，３Ｈ）。 元素分析：Ｃ₂₁Ｈ₂₀Ｎ₄Ｏ₈・２ＴＦＡ・２／３Ｈ₂Ｏとして、計算値（％）：Ｃ ，４３．１１；Ｈ，３．８８；Ｎ，８．０４；測定値（％）：Ｃ，４３．１１； Ｈ，３．６６；Ｎ，８．０９。 実施例１１ Ｎ−［Ｎ−［４−［（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ］ブタノイル］− Ｎ−メチル−グリシル］−３−（２−ベンゾチアゾリル）−β−アラニン （ｉ）Ｎ−（３−カルボキシプロパノイル）−Ｎ−メチル−グリシン ベンジル エステル サルコシンベンジルエステル（３．０ｇ、３０．７ミリモル）および無水コハ ク酸（５．５ｇ、３０．７ミリモル）のトルエン（７５ｍl）中混合物を３時間 加熱還流し、冷却し、濾過し、濾液を濃縮した。残渣を５％水性炭酸ナトリウム に溶かし、酢酸エチルで抽出した。水相をコンゴ・レッド紙（Congo Red paper ）を用いて濃塩酸でｐＨ３に調整し、酢酸エチルで抽出した。有機相を水で洗浄 し、乾燥（硫酸マグネシウム）し、濃縮して標記化合物（７．４ｇ、６７．５％ ）を得た：ＴＬＣ Ｒｆ ０．４８（シリカ、ジクロロメタン：メタノール：ギ 酸 ９：１：１）。 （ii）Ｎ−［（３−エチルチオカルボニル）プロパノイル］−Ｎ−メチル−グリ シンベンジルエステル 実施例１１（ｉ）の化合物（７．４ｇ、２８ミリモル）、エタンチオール（１ ．７６ｇ、２８．３ミリモル）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エ チ ルカルボジイミド塩酸塩（５．４ｇ、２８ミリモル）、ジイソプロピルエチルア ミン（６ｍl、３４ミリモル）、４−ジメチルアミノピリジン（３．４２ｇ、２ ７ミリモル）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３．４２ｇ、２８ミリ モル）のジメチルホルムアミド中混合物を一夜攪拌した。混合物を濃縮し、ジク ロロメタンに溶かし、水洗した。有機相を乾燥（硫酸マグネシウム）し、濃縮し 、残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン）に付し、標記化合 物（４．８ｇ、５５％）を得た：ＴＬＣ Ｒｆ ０．１３（シリカ、ジクロロメ タン：メタノール ９５：５）。 （iii）Ｎ−［（３−ホルミル）プロパノイル］−Ｎ−メチル−グリシンベンジ ルエステル 実施例１１（ii）の化合物（１．２ｇ）およびトリエチルシラン（１．３７ｇ 、１１．８ミリモル）のアセトン（３０ｍl）中溶液に、１０％Ｐd／Ｃを少しず つ加えた。混合物を濾過し、濾液を濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（シリカ ゲル、５％メタノール／ジクロロメタン）に付し、標記化合物（０．７２ｇ）７ ５％）を得た：ＴＬＣ Ｒｆ ０．２４（シリカ、ジクロロメタン）：ＭＳ（Ｄ ＣＩ／ＮＨ₃）２６４［Ｍ＋Ｈ］⁺。 （iv）Ｎ−［４−［（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ］ブタノイル］−Ｎ−メ チル−グリシンベンジルエステル 実施例１１（iii）の化合物（０．６ｇ、２．４ミリモル）のエタノール中溶 液をアミノグアニジン硝酸塩（０．５ｇ、３．７ミリモル）と反応させ、該混合 物を蒸気浴上で加温した。混合物を冷却し、沈殿した固体を濾過し、アセトン、 エーテルおよび水で洗浄した。固体をジクロロメタンで処理し、濃縮し、標記化 合物（０．６５ｇ、６５％）を得た：ＭＳ（ＤＣＩ／ＮＨ₃）３２０［Ｍ＋Ｈ］⁺ 。 （ｖ）Ｎ−［４−［（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ］ブタノイル］−Ｎ−メ チル−グリシン 実施例１１（iv）の化合物（０．５ｇ、２．６ミリモル）、炭酸カリウム（０ ．３６ｇ、２．６ミリモル）、水（２ｍl）およびテトラヒドロフラン（５ｍl） を一夜攪拌した。混合物を濃縮し、水に溶かし、そのｐＨを１Ｎ塩酸で６に調整 した。混合物を濃縮し、残渣をトルエンで処理し、濃縮し、標記化合物（０．３ ｇ、５０％）を得た：ＴＬＣ Ｒｆ ０．１３（シリカ、ジクロロメタン：メタ ノール：ギ酸 ９；１：１）；ＭＳ（ＤＣＩ／ＮＨ₃）２３０［Ｍ＋Ｈ］⁺。 （vi）Ｎ−［Ｎ−［４−［（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ］ブタノイル］− Ｎ−メチル−グリシル］−３−（２−ベンゾチアゾリル）−β−アラニン シク ロヘキシルエステル 実施例１１（ｖ）の化合物（０．４ｇ、１．７ミリモル）、実施例９（ｉ）の 化合物（０．５３ｇ、１．７ミリモル）、１−（３−ジメチルアミノプロピル） −３−エチルカルボジイミド塩酸塩（０．３３ｇ、１．７ミリモル）、ジイソプ ロピルエチルアミン（０．７ｍl、７．３ミリモル）および１−ヒドロキシベン ゾトリアゾール（０．２３ｇ、１．７ミリモル）のジメチルホルムアミド（３０ ｍl）中混合物を室温で一夜攪拌した。ジオキサン中の塩化水素をpＨ５まで加え 、つづいてジシクロヘキシルカルボジイミド（０．３５ｇ）を加えた。該混合物 を一夜攪拌し、濃縮し、水で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。有機相を乾燥 し、濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、１０％メタノール／ジク ロロメタン）および薄層クロマトグラフィー（シリカゲル）に付し、標記化合物 （５０ｍｇ、１５％）を得た：ＭＳ（ＥＳＩ）５１６［Ｍ＋Ｈ］⁺。 （vii）Ｎ−［Ｎ−［４−［（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ］ブタノイル］ −Ｎ−メチル−グリシル］−３−（２−ベンゾヂアゾリル）−β−アラニン テトラヒドロフラン（５ｍl）およびメタノール（５ｍl）に溶かした実施例１ １（vi）の化合物（３０ｍｇ、０．０６ミリモル）を水中にて炭酸カリウム（１ ２ｍｇ）で処理し、一夜攪拌した。混合物を濃縮し、残渣をＨＰＬＣ（Dynamax ，勾配 Ａ：アセトニトリル Ｂ：水／０．１％トリフルオロ酢酸、１３〜５０ ％ アセトニトリル）により精製し、凍結乾燥して標記化合物（１．４ｍｇ）を得た ：ＭＳ（ＥＳＩ）４３４［Ｍ＋Ｈ］⁺。 実施例１２ シクロ−（Ｓ，Ｓ）−（２−メルカプト）ベンゾイルー（Ｎ^α−メチル）−４− アミノメチル−フェニルアラニル−グリシル−アスパラチル−（２−メルカプト ）−フェニルアミド［シクロ−（Ｓ，Ｓ−Ｍba−ＭeＡmf−Ｇly−Ａsp−Ｍan］ （ｉ）Ｎ^α−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^α−メチル−ｐ−ヨードフェニ ルアラニン カナディアン・ジャーナル・オブ・ケミストリー（Can.J.Chem.）５５，９０ ６（１９７７）に記載の方法と同様により、Ｎ^α−tert−ブチルオキシカルボニ ル−ｐ−ヨードフェニルアラニンをＮ^α−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^α −メチル−ｐ−ヨードフェニルアラニンに変えた。 （ii）Ｎ^α−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^α−メチル−４−アミノメチル −フェニルアラニン シンセティック・コミュニケーションズ（Syn.Commun.）２１，２１０３（１ ９９１）に記載の方法と同様に、Ｎ^α−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^α− メチル−ｐ−ヨードフェニルアラニンをＮ^α−tert−ブチルオキシカルボニル− Ｎ^α−メチル−４−アミノメチル−フェニルアラニンに変えた。 （iii）Ｎ^α−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^α−メチル−４−ＣＢＺ−ア ミノメチル−フェニルアラニン ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティー（J.Am.Chem.Soc. ）７６，５５５２（１９５４）に記載の方法と同様に、Ｎ^α−tert−ブチルオキ シカルボニル−Ｎ^α−メチル−４−アミノメチル−フェニルアラニンをＮ^α−te rt−ブチルオキシカルボニル−Ｎ^α−メチル-４−ＣＢＺ−アミノメチル−フェ ニルアラニンに変え、標記化合物を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣl₃，３６０ＭＨｚ ）δ １．１−１．４（ｄ，９Ｈ）、２．６−２．７（ｄ，３Ｈ）、２．８−３．３（ ｂｒ，３Ｈ）、４．２−４．４（ｄ，２Ｈ）、４．４−４．６、４．７−４．９ （ｂｒ，１Ｈ）、５．０−５．２（ｓ，２Ｈ）、６．９−７．４（ｂｒ，９Ｈ） 、９．４−９．７（ｂｒ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４４３．２［Ｍ＋Ｈ］⁺ ； ＨＰＬＣ ｋ’１２．７（５μ Ａltex Ｕltrasphere ＯＤＳ，４．５ｍｍ×２ ５ｃｍ、勾配、Ａ：アセトニトリル Ｂ：水−０．１％トリフルオロ酢酸，５％ 〜５０％アセトニトリル（２０分）、ＵＶ検出（２２０ｎｍ））；［α］_D ^-67（ ｃ ３０，ＣＨＣl₃）。 （iv）Ｂoc−Ａsp（Ｏ−cＨex）−Ｍan（４−ＭＢｚl） Ｂoc−Ａsp（Ｏ−cＨex）（３１．５ｇ、１００、ミリモル）のＴＨＦ（５０ ０ｍl）およびＮ−メチルモルホリン（１３．１ｇ、１２０ミリモル）中冷却溶 液に、イソブチルクロロホルマート（１５．６ｍl、１．２ミリモル）を滴下し た。反応混合物を２ないし３分間攪拌し、Ｍan（４−ＭＢａl）（２２．０ｇ） ９６ミリモル）のＴＨＦ（５００ｍl）中溶液を加えた。反応混合物を室温に加 温し、１８時間攪拌した。反応終了後、反応混合物を濾過し、濾液を蒸発乾固し た。残渣を酢酸エチル（５００ｍl）に溶かし、５％水性クエン酸（３×１５０ ｍl）、水（１×４００ｍl）、１０％水性ＮａＨＣＯ₃（１×４００ｍl）、水（ １×４００ｍl）および飽和塩溶液（１×３００ｍl）で連続的に洗浄した。該溶 液を乾燥（無水Ｋ₂ＣＯ₃）し、濾過し、濃縮して標記化合物（５３ｇ）を得た。 （ｖ）Ａsp（Ｏ−cＨex）−Ｍan（４−ＭＢｚl） Ｂoc−Ａsp（Ｏ−cＨex）−Ｍan（４−ＭＢｚl）（５２g）を５０％ＴＦＡ／ 塩化メチレンで室温で４５分間処理した。溶媒を蒸発させ、塩化メチレンで数回 追跡し、微量のＴＦＡを排除した。エーテルを添加すると、生成物はそのＴＦＡ 塩として沈殿した。固体を収集し、風乾して白色固体（４６．７ｇ、８８％）を 得た。 （vi）Ｂoc−Ｇly−Ａsp（Ｏ−cＨex）−Ｍan（４−ＭＢｚl） Ａsp（Ｏ−cＨex）−Ｍan（４−ＭＢｚl）（４６．７ｇ）８６．４ミリモル） のＤＭＦ（１００ｍl）中冷却溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（１５ｍl、 ８６．１ミリモル）を加えた。Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１４．０ｇ 、１０４ミリモル）を加え、つづいてＢoc−Ｇly（１６．６ｇ）９４．８ミリモ ル）を加えた。反応混合物を２ないし３分間冷却下にて攪拌し、Ｎ−エチル−Ｎ ’（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（１８．２ｇ、９４．９ミリモル ）を加えた。反応混合物を室温に加温し、１８時間攪拌した。反応混合物を少容 量にまで濃縮し、１０％Ｋ₂ＣＯ₃水溶液（１．５Ｌ）中に注いだ。沈殿生成物を 濾過により収集し、中性ｐＨまで水洗し、標記化合物（５０．６ｇ）を得た。 （vii）Ｇly−Ａsp（Ｏ−cＨex）−Ｍan（４−ＭＢｚl） 実施例１２（Vi）の化合物（１１．７ｇ、２０ミリモル）を実施例４（ｂ）に 記載されているように５０％ＴＦＡ／ＣＨ₂Ｃl₂（８０ｍl）で処理し、標記化合 物１２．４ｇを得た。 （viii）Ｂoc−Ｍe−Ａmf（cＢＺ）−Ｇly−Ａsp（Ｏ−cＨex）−Ｍan（４−Ｍ Ｂｚl） 実施例１２（vii）の化合物を実施例１２（iii）の化合物とカップリングさせ て標記化合物を得た。 （ix）ＭeＡmf（cＢＺ）−Ｇly−Ａsp（Ｏ−cＨex）−Ｍan（４−ＭＢｚl） 実施例１２（viii）の化合物を、実施例１２（ｖ）の記載に従って、５０％Ｔ ＦＡ／ＣＨ₂Ｃl₂で処理し、標記化合物のＴＦＡ塩を得た。 （ｘ）Ｍba（ＳＥt）ＭeＡmf（cＢＺ）−Ｇly−Ａsp（Ｏ−cＨex）−Ｍan（４− ＭＢｚl） 化合物１２（ix）を実施例１２（vi）ど同様にしてＭba（ＳＥt）にカップリ ングさせ、標記化合物を得た。 （xi）シクロ−（Ｓ，Ｓ）−Ｍba ＭeＡmf-Ｇly−Ａsp−Ｍan 実施例１２（ｘ）の保護線状ペプチド（０．２５ｇ、０．２５ミリモル）を無 水ＨＦ（１０ｍl）およびアニソール（１ｍl）で０℃で１時間処理した。ＨＦを 真空下０℃で除去し、残渣をエーテルで洗浄し、黄褐色固体（０．１１６ｇ）を 得た。フラッシュクロマトグラフィー（中圧ＯＤＳ逆相カラム，２５％アセトニ トリル／Ｈ₂Ｏ−０．１％ＴＦＡ）により精製し、精製物質（０．０６９）を得 た：ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ６２２［Ｍ＆Ｎ］⁺ ＨＰＬＣＲ¹ ９．１（Ａltex Ｕlt rasphereＯＤＳ，４．５ｍｍ×２５ｃｍ，勾配Ａ：アセトニトリル Ｂ：水−０ ．１％トリフルオロ酢酸，１０−５０％アセトニトリル（２０分以上）、２２０ ｎｍ）。 実施例１３ 非経口用投与単位組成物 滅菌乾燥粉末として実施例４の化合物（２０ｍｇ）含有の調製物を以下のよう に調製する：化合物（２０ｍｇ）を蒸留水（１５ｍl）に溶かす。該溶液を滅菌 条件下で２５ｍlの複数回投与用アンプルに濾過し、凍結乾燥した。該粉末を静 脈内または筋肉内注射用の５％デキストロース／水（Ｄ５Ｗ）（２０ｍl）を加 えることで復元する。投与量は注射容量により決定される。その後、計量したこ の投与単位を別の注射用Ｄ５Ｗに加えることにより希釈を行ってもよく、または 計量した投与量を静脈内滴剤注入用のボトルまたはバックもしくは他の注射−注 入系のような薬剤を分散するための別の装置に充填してもよい。 実施例１４ 経口用投与単位組成物 経口投与用カプセル剤を、実施例４の化合物（５０ｍｇ）をラクトース（７５ ｍｇ）およびステアリン酸マグネシウム（５ｍｇ）と混合し、粉砕することによ り調製する。得られた粉末をスクリーンに付し、硬ゼラチンカプセルに充填する 。 実施例１５ 経口用投与単位組成物 経口投与用錠剤を、シュークロース（２０ｍｇ）、硫酸カルシウム・２水和物 （１５０ｍｇ）および実施例４の化合物（５０ｍｇ）を、１０％ゼラチン溶液と 混合し、造粒することにより調製する。その湿式顆粒をスクリーンに付し、乾燥 し、澱粉（１０ｍｇ）、タルク（５ｍｇ）およびステアリン酸（３ｍｇ）と混合 し、打錠する。 前記の製造法および使用法は本発明を説明する。しかしながら、本発明は、本 明細書に記載されているその具体例に限定されるものではなく、以下の請求の範 囲内にある修飾をすべて包含するものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/44 ＡＣＢ 9454−4Ｃ 38/00 Ｃ０７Ｄ 213/75 9164−4Ｃ 235/30 Ｚ 7019−4Ｃ 277/64 9283−4Ｃ 417/12 ２３３ 7602−4Ｃ Ｃ０７Ｋ 5/087 5/11 8318−4Ｈ (72)発明者 コーラーン，ジェームズ・フランシス アメリカ合衆国ペンシルベニア州19111、 フィラデルフィア、ジーネス・ストリート 8214番 (72)発明者 ハフマン，ウィリアム・フランシス アメリカ合衆国ペンシルベニア州19355、 マルバーン、クレスト・アベニュー40番 (72)発明者 キーナン，リチャード・マックローチ アメリカ合衆国ペンシルベニア州19355、 マルバーン、バス・コーブ796番 (72)発明者 メトカルフ，ブライアン・ウォルター アメリカ合衆国ペンシルベニア州19087、 ラドナー、ウッドランド・ドライブ520番 (72)発明者 サマネン，ジェームズ アメリカ合衆国ペンシルベニア州19460、 フェニックスビル、ジャグ・ハーロウ・ロ ード（番地の表示なし) (72)発明者 イェリン，トビアス・オレゴン アメリカ合衆国ペンシルベニア州19085、 ヴィラノバ、オーリオル・レーン517番

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．式（Ｉ）： Ｗ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r−Ｕ−（ＣＲ’₂）s−Ｖ− （Ｇｌｙ）n−（Ａsp）m−Ａ （Ｉ） ［式中、 ＷはＲ’Ｒ”Ｎ−、Ｒ’Ｒ”ＮＲ’Ｎ−、Ｒ’Ｒ”ＮＲ’ＮＣＯ−、Ｒ’₂Ｎ Ｒ’ＮＣ（＝ＮＲ’）−、Ｒ’ＯＮＲ’Ｃ（＝ＮＲ’）−、 Ｚは（ＣＨ₂）t、Ｈet、Ａr、Ｃ_3-7シクロアルキルまたはＮＲ’であり、 ＵおよびＶは、独立して、存在しないか、またはＣＯ、ＣＲ’₂、Ｃ（＝ＣＲ ’₂）、Ｓ（Ｏ）ｒ、Ｏ、ＮＲ’、ＣＲ’ＯＲ’、ＣＲ’（ＯＲ”）ＣＲ’₂、Ｃ Ｒ’₂ＣＲ’（ＯＲ”）、Ｃ（Ｏ）ＣＲ’₂、ＣＲ’₂Ｃ（Ｏ）、ＣＯＮＲ’、Ｎ Ｒ’ＣＯ、ＯＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｓ）Ｏ、ＯＣ（Ｓ）、Ｃ（Ｓ）ＮＲ’ 、ＮＲ’Ｃ（Ｓ）、Ｓ（Ｏ）rＮＲ’、ＮＲ’Ｓ（Ｏ）r、Ｎ＝Ｎ、ＮＲ’ＮＲ’ 、ＮＲ’ＣＲ’₂、ＣＲ’₂Ｏ、ＯＣＲ’₂、Ｃ≡Ｃ、ＣＲ’＝ＣＲ’またはＣＲ ’（ＮＲ’Ｒ”）Ｃ（Ｏ）として存在し、 ＸはＮ＝ＣＲ’、Ｃ（Ｏ）またはＯであり、 ＹはＳまたはＯであり、 ｍは０または１であり、 ｎは０または１であり、 ｑは０ないし３であり、 ｒは、各々、独立して０ないし３であり、 Ｓは０ないし２であり、 ｔは、各々、独立して０ないし２であり、 Ｒ’は、各々、独立してＨ、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_3-7シクロアルキル−Ｃ_0-4ア ルキルまたはＡr−Ｃ_0-4アルキルであり、 Ｒ”は、各々、独立してＲ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ¹⁵であり 、 Ｒ¹⁰は存在しないか、またはＨ、Ｃ_1-4アルキルまたはＮＲ’Ｒ’として存在 し、 Ｒ¹³は、各々、独立してＲ’、ＣＦ₃、Ｓ’またはＯＲ’であり、 Ｒ¹⁴は、各々、独立してＣ_1-4アルキル、Ｃ_3-7シクロアルキル−Ｃ_0-4アルキ ル、Ａr−Ｃ_0-4アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒ’、ＣＮ、ＮＯ₂、ＳＯ₂Ｒ’またはＣ（Ｏ ）ＯＲ¹⁵、 Ｒ¹⁵は、各々、独立してＣ_1-4アルキル、Ｃ_3-7シクロアルキル−Ｃ_0-4アルキ ルまたはＡr−Ｃ_0-4アルキルであり、 Ａは Ｒ₂は存在しないかまたはＣ_1-4アルキル、Ｊ−ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮＲ’、ＳＲ ’、ＮＲ’Ｒ”、Ｃ_1-4アルコキシ、ヒドロキシ、ＣＮ、ＣＦ₃、ハロ、または− ＣＨ₂−ＣＨ−ＣＯ₂Ｒ’ Ｒ’−Ｎ−Ｒ¹⁴であり、 Ｊは単結合、−ＯＣＲ’₂−、−ＮＲ’ＣＲ’₂−、ＣＲ’₂ＣＲ’₂−、−ＣＲ ’₂−、−ＣＲ’＝ＣＲ’−または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’ＣＲ’₂−であり、 Ｑは単結合、ＣＲ’₂、Ｓ、ＯまたはＮＲ’であり、 ＤはＣ_1-4アルキル、Ｃ_3-7シクロアルキル、ＡrまたはＨetを意味する； ただし、 （１）Ａが Ｗ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r−は、Ｈ₂Ｎ−（ＣＨ₂）_3-5−ＣＨ−以 外の基であり、 （２）Ａが Ｗ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r−はＮＨＲ’以外の基であり、および （３）Ａが Ｗ−（ＣＲ’₂）q−Ｚ−（ＣＲ’Ｒ¹⁰）r−は、 で示される化合物またはその医薬上許容される塩。 ２．ＺがＨetまたは（ＣＨ₂）_1-2であり、 ｍ、ｎおよびｑが、各々、０であり、 である請求項１記載の化合物。 ３．ＺがＨetであり、ＷがＲ’Ｒ”Ｎ−であり、フェニルとして定義されたＡ 基上の少なくとも１個のＲ²がＪ−ＣＯ₂Ｒである請求項２記載の化合物。 ４． ４−［２−［３−［６−アミノ−２−ピリジニル］−１−オキソプロピル− （メチル）アミノ］−１−オキソエチル］フェノキシ酢酸； ４−［２−［４−［６−アミノ−２−ピリジニル］−１−オキソブチル−（ メチル）アミノ］−１−オキソエチル］フェノキシ酢酸；または ４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−［５−（２−アミノベンズイミダゾリル）］アミ ノ］アセチル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸； またはその医薬上許容される塩である請求項３記載の化合物。 ５． Ａ基上の少なくとも１個のＲ²がＪ−ＣＯ₂Ｒである請求項２記載の化合物。 ６． ４−［［Ｎ−メチル−Ｎ−［３−（４−ピリジニル）プロピオニル］ア ミノ］アセチル］−２，２’−［１，２−フェニレンビス（オキシ）］ビス酢酸 ；またはその医薬上許容される塩である請求項５記載の化合物。 ７．Ｚが（ＣＨ₂）_1-2またはフェニルであり、 ｒおよびｓが、各々、０であり、 ｍおよびｎが、各々、１であり、 Ｖが存在せず、 である請求項１記載の化合物。 ８．Ｗが である請求項７記載の化合物。 ９． Ｎ^α−アセチル−カラバニニル−グリシニル−アスパルチル−アニリド； Ｎ^α−ベンゾイル−Ｎ（クアニジノ）−シアノ−Ｎ^α−メチル−Ｌ−アルギ ニルグリシル−Ｌ−アスパルチック−１−アニリド；または Ｎ^α−ベンゾイル−ＮΔ−［（シアノイミノ）（フェノキシ）メチル］−Ｎ^α −メチル−Ｌ−オルニチルグリシル−Ｌ−アスパルチック−１−アニリド； またはその医薬上許容される塩である請求項８記載の化合物。 １０．ＺがＨetであり、 ｍおよびｎが、各々、１であり、 Ｖが存在せず、 Ａが である請求項１記載の化合物。 １１．ＷがＲ’Ｒ”Ｎ−である請求項１０記載の化合物。 １２． ３−［６−アミノ−２−ピリジニル］プロピオニル−グリシル−Ｌ−アスパ ルチル−Ｌ−フェニルアラニン；または ４−［６−アミノ−２−ピリジニル］ブチリル−グリシル−Ｌ−アスパルチ ル−Ｌ−フェニルアラニン； またはその医薬上許容される塩である請求項１１記載の化合物。 １３．Ｚが（ＣＨ₂）_1-2またはＮＲ’であり、 Ａが である請求項１記載の化合物。 １４．ＤがＨetである請求項１３記載の化合物。 １５． Ｎ^α−ベンゾイル−ＮΔ−［１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−Ｌ−オルニ チルグリシル−β−（２−ベンゾチアゾリル）−β−アラニン；または （±）−Ｎ−［（４−クアニジノアミノ）ブタノイルサルコシニル］−β− （２−ベンゾチアゾリル）−β−アラニン； またはその医薬上許容される塩である請求項１４記載の化合物。 １６．ＺがＡrまたはＨetであり、 ｍおよびｎが、各々、１であり、 Ｓが０であり、および Ｖが存在しない請求項１記載の化合物。 １７．ＷがＲ’Ｒ”Ｎ−である請求項１６記載の化合物。 １８． シクロ−（Ｓ，Ｓ）−（２−メルカプト）ベンゾイル−Ｎ^α−メチル −４−アミノメチルフェニルアラニル−グリシル−アスパルチル−（２−メルカ プト）フェニルアミドまたはその医薬上許容される塩である請求項１７記載の化 合物。 １９．請求項１に記載の化合物と、医薬上許容される担体とからなる医薬組成 物。 ２０．請求項１に記載の化合物を血小板凝集の阻害を必要とする対象に投与す ることを特徴とする血小板凝集の阻害法。 ２１．卒中を治療するための請求項２０記載の方法。 ２２．一過性虚血発作を治療するための請求項２０記載の方法。 ２３．心筋梗塞を治療するための請求項２０記載の方法。