JPH08502295A

JPH08502295A - 悪液質の治療およびｉｌ−６活性の阻害

Info

Publication number: JPH08502295A
Application number: JP6510102A
Authority: JP
Inventors: ギデオンストラスマン
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1992-10-13
Filing date: 1993-10-12
Publication date: 1996-03-12
Also published as: WO1994008574A1; KR950703336A; EP0664700A1; CA2146988A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、患者の悪液質の治療方法及びＩＬ−６の生物活性の阻害方法に関する。これは、有効な量のサルフェート含有化合物、例えば、スラミン、スラミン誘導体、ペントサン・ポリサルフェート又はデキストラン硫酸を、患者に投与することによって、達成される。本発明は，また、ＩＬ−６関連疾患に対抗するのにも有効である。

Description

【発明の詳細な説明】悪液質の治療およびＩＬ−６活性の阻害発明の分野本発明は、患者、特にヒトにおける悪液質の治療方法、およびＩＬ−６活性の阻害方法に関する。発明の背景悪液質は、哺乳動物を苦しめる潜在的に致死的な症候群であり、感染、炎症および癌の治療をしばしば悪化させる。それは、体脂肪（脂肪）および筋肉（タンパク質）の消耗により生じる、大幅な体重減少を特徴とする。トレーシー（Ｔｒａｃｅｙ）ら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、Ｖｏ１．１６７、１２１１−１２２７（１９８８年、３月）。ローソン（Ｌａｗｓｏｎ）ら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ．、２：２７７−３０１（１９８２）。食欲不振、貧血、および衰弱もまた、悪液質において起こり得る。トレーシー（Ｔｒａｃｅｙ）ら、上記。悪液質は、就中、グルコースレベルの低下（低血糖）およびトリグリセリドレベルの上昇（高トリグリセリド血症）により、さらに特徴付けられる。悪液質は、年齢、癌、および寄生虫による感染、並びに細菌、真菌、ウィルスおよび原生動物のような微生物による感染などの、多様な原因から生じ得る。急性および慢性の感染または病気は、しばしば悪液質を引き起こす。事実、ほとんどの慢性的で、致命的で、非腫瘍性の疾患は、悪液質に帰結する（例えば、慢性の散在性感染、または心臓、肺、肝臓、腎臓、もしくは小腸の長期間の機能不全）。ローソン（Ｌａｗｓｏｎ）ら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ．、２：２７７−３０１（１９８２）。さらに、この症候群は、適切なカロリー摂取によって緩和されない。事実、悪液質では、十分な食物を摂食している間でも、体重減少は持続し得る。シルヴァ（Ｓｉｌｖａ）ら、Ｊ．ＧｅｎｅｒａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、Ｖｏ１．１３４、１６２９−１６３３（１９８８）。研究者は、微生物感染、およびトリパノソーマ症およびリーシュマニア症のような寄生虫感染により引き起こされる悪液質を研究してきた。シェリー（Ｓｈｅｒｒｙ）ら、Ｊ．ＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ、Ｖｏ１．１０７、１２６９− １２７７（１９８８年、１０月）。微生物感染により引き起こされる悪液質の研究は、この症候群が、微生物の直接的な作用、または微生物によって産生される毒素のいずれかにより起こり得ることを示した。事実、微生物により産生される毒素は、悪液質の研究のためのモデルを創出するのに使用されてきた。これに関連して、ノカルジアアステロイデス（Ｎｏｃａｒｄｉａａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）から単離されたトレハローズジミコレート（ＴＤＭ）のマウスへの腹腔内注射により、悪液質が誘発された。シルヴァ（Ｓｉｌｖａ）ら、Ｊ．ＧｅｎｅｒａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、Ｖｏ１．１３４、１６２９−１６３３（１９８８）。研究者は、コードファクター（ＣＦ）としても知られている、マイコバクテリア由来の毒性糖脂質であるＴＤＭが、悪液質を引き起こす、メカニズムを研究してきた。シルヴァ（Ｓｉｌｖａ）ら、ＩｎｆｅｃｔｉｏｎａｎｄＩｍｍｕｎｉｔｙ、Ｖｏ１．５６、Ｎｏ．１２、３０６７− ３０７１、（１９８８年１２月）。その研究室は、ＣＦの投与が、体重を顕著に減少させることを観察した：動物は、ひどく消耗した状態になり、高トリグリセリド血症、低血糖、および血漿中に高レベルの腫瘍壊死因子を示した。デキサメタゾンは、ＣＦの悪液質誘発作用を部分的に阻害することが見い出された。最近の研究は、悪液質に関連する生理学に焦点を当ててきた。例えば、観察される循環トリグリセリドの上昇は、リポプロテインリパーゼ（ＬＰＬ）の全身性の抑制に起因するものであった。トレーシー（Ｔｒａｃｅｙ）ら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、Ｖｏ１．１６７、１２１１−１２２７（１９８８年、３月）。しかしながら、結腸の移植可能な腺癌（ＭＡＣ１６）は、高トリグリセリド血症を随伴することなしに、悪液質症候群を生じさせることが報告された。マホニー（Ｍａｈｏｎｙ）ら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、５７、３８５−３８９（１９８８）。「カシェクチン（“ｃａｃｈｅｃｔｉｎ”）」としても知らている［ボイトラー（Ｂｅｕｔｌｅｒ）ら、ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ．４２、２１３−２３１（１９８８）］腫瘍壊死因子（以後“ＴＮＦ”と記す）が、悪液質において、中心的な役割を担い得ることも示唆されてきた。トレーシー（Ｔｒａｃｅｙ）ら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、Ｖｏｌ．１６７、１２１１−１２２７（１９８８年、３月）。ミチエ（Ｍｉｃｈｉｅ）ら、Ｓｕｒｇｅｒｙ、Ｖｏｌ．１０４、Ｎｏ．２、２８０−２８６（１９８８年、８月）は、ＴＮＦが、敗血症および内毒素血症に関連する多くの代謝性反応を開始する、一次刺激を示し得ることを報告している。しかしながら、ＴＮＦの役割は明らかでない。癌患者における悪液質は、ＴＮＦの存在に関連しているけれども、この因子は、癌を有する悪液質患者の血清中に、一様に検出可能ではなかった。シェリー（Ｓｈｅｒｒｙ）ら、ＴｈｅＦＡＳＥＢＪ．、Ｖｏｌ．３、１９５６ −１９６２（１９８９年、６月）。悪液質誘発性腺癌（ＭＡＣ１６）および悪液質非誘発性腺癌（ＭＡＣ１３）の両方を使用するある研究で、研究者は、ＴＮＦにより生じる体重減少は、癌の悪液質に関連づけられる複雑な代謝的変化とは異なる、食欲抑制作用から生じるものであると結論した。マホニー（Ｍａｈｏｎｙ）ら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、５７、３８５−３８９（１９８８）。同様に、その研究室は、リンパ球脈絡髄膜炎ウィルス（ＬＣＭＶ）を持続的に感染させたマウスを用いた、ウィルスに関連する悪液質のある研究で、観察された２０％を越える悪液質様の体重減少は、ＴＮＦの測定可能な上昇と明らかに関連がないと結論した。ラゼイ（Ｌａｔｈｅｙ）ら、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．、１３２（３）：５８６−９２（１９８８年、９月）。悪液質の、痩せ細った体の甚だしい体重減少および衰弱性の消耗は、悪性腫瘍または慢性感染を患っている患者の治療を、しばしば面倒にさせる。事実、悪液質は、癌死亡率に寄与している。幾つかのデータは、癌患者の３０％までもが、腫瘍の負荷（burden）よりも、悪液質によって死亡することを示している。トレーシー（Ｔｒａｃｅｙ）ら、上記。１冊の医学書は以下のように記述している：「悪性腫瘍が死をもたらす最も普遍的な道筋は、悪液質：進行性の衰弱、体重減少、および消耗の進展である。通常、既存の悪性疾患の総体と悪液質の重篤度との間には、密接な相関関係がある。・・・この衰弱した状態にあって、癌患者は、肺炎のような末期的な感染に特に罹患しやすく、これはしばしば死を早める。」ファンアイス（ｖａｎＥｙｓ）、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ．、５：４３５−６１（１９８５）［ロビンス（Ｒｏｂｂｉｎｓ）のＴｅｘｔｂｏｏｋｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙの第２版に基づく］。悪液質の重篤度は、腫瘍のサイズまたは寄生虫の負荷（load）とは無関係であり得、また甚だしい消耗は、体重の０．０１から５％しか腫瘍負荷（burden）を有しない患者で観察されていた。状況を逆転しなければ、悪液質に関連する生理的な変化は、免疫不全、臓器不全、および多発性代謝異常を導く。トレーシー（Ｔｒａｃｅｙ）ら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、１６７、１２１１−１２２７（１９８８年、３月）。Ｔｈｅｏｌｏｇｉｄｅｓ、Ｃａｎｃｅｒ、ＭａｙＳｕｐｐｌｅｍｅｎｔ、４３、２００４−２０１２（１９７９）。悪液質による生理的変化は、術後合併症の頻度の増加に加えて、化学療法および放射線治療に対する患者の耐性を低下させる。化学療法剤および放射線傷害により引き起こされる悪心、嘔吐、および食欲不振は、非常に重篤であり得る。さらに、化学療法は、栄養失調の主たる要因である。治療はしばしば、癌それ自身と同じくらい衰弱させるものであることが、よく認識されている。栄養失調に陥った患者は、ほとんどの腫瘍学的治療に対し、治療上の安全な境界領域がひどく狭い。ファンアイス（ｖａｎＥｙｓ）、上記。さらに、検査された、ほとんどの型の腫瘍で体重を減少させた患者では、メジアン生存（ｍｅｄｉａｎｓｕｒｖｉｖａｌ）は、有意に短いことが見い出された。ローソン（Ｌａｗｓｏｎ）ら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ．、２：２７７− ３０１（１９８２）。悪液質症候群が、ある患者に死をもたらし、恐らく、他の患者にもそのように寄与する、その正確なメカニズムは、完全には理解されていない。ローソン（Ｌａｗｓｏｎ）ら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ．、２：２７７−３０１（１９８２）。従って、当分野は、癌または感染症のような病因学から、悪液質を治療する有効な方法の探求を続けてきた。発明の概要本発明は、悪液質の治療方法であって、スラミンまたはその誘導体のような、サルフェートを含む化合物の、該治療に有効な量を、患者に投与する工程を包含する方法を提供する。本発明は、感染、癌、年齢またはその他により引き起こされる全ての形態の悪液質を治療することを意図する。本発明はまた、インターロイキン６（“ＩＬ−６”）活性を阻害する方法であって、スラミンまたはその誘導体のような、サルフェートを含む化合物の、該阻害に有効な量を、患者に投与する工程を包含する方法も提供する。本発明のさらなる目的および利点は、以下に記載の中で部分的に説明される。上述の一般的な記載および以下の詳細な説明は、例示および説明のみであり、クレームされている本発明を制限するものではないと理解すべきである。図面の簡単な説明図１は、スラミンを使用することによる、Ｃ−２６悪液質の、時間依存性阻害を示す。図２は、インビボでの、腫瘍（Ｃ−２６）増殖に対する、スラミンの効果の欠如を示す。図３は、スラミンを使用することによる、Ｃ−２６悪液質の、用量依存性阻害を示す。図４は、スラミンを使用することによる、ターペンチンにより引き起こされる消耗の防止を示す。図５は、スラミンを使用することによる、ＩＬ−６の生物学的活性の阻害を示す。図６は、スラミンを使用することによる、ＩＬ−６のヒト骨髄腫細胞に対する結合の、用量依存性の防止を示す。発明の詳細な説明本発明は、感染、癌、年齢またはその他の結果として生ずる、悪液質の治療方法を提供する。クレームされた方法もまた、悪液質症候群に関連するあらゆる症状を治療するために、使用されることができる。従って、本発明の方法は、体脂肪および筋肉を消耗することによる、体重減少、高トリグリセリド血症、低血糖、および食欲不振を緩和するか、または完全に排除するために使用され得る。さらに、クレームされた発明は、生命維持に必要な器官での、組織の損失を防止するために使用され得る。本方法は、癌または慢性感染による悪液質を治療するのに、特に有用である。本発明の方法は、例えば、単細胞もしくは多細胞の寄生虫、または細菌、真菌、原生動物もしくはウィルスなどの微生物、あるいはこれらの生物の組合わせにより生じる、慢性もしくはそれ以外の感染の結果として起こる、悪液質を治療するために使用され得る。例えば、本発明は、以下による悪液質の治療を意図する： − グラム陰性またはグラム陽性の細菌、例えば、グラム陽性球菌による感染（肺炎球菌、ブドウ球菌および連鎖球菌の感染） − グラム陰性球菌による感染（髄膜炎菌の感染） − 腸のグラム陰性桿菌による感染（大腸菌群の細菌の感染、腸チフス、サルモネラ感染、赤痢菌属の感染、コレラ） − ヘモフィルス群の細菌による感染（百日ぜき、インフルエンザ菌の感染） − 結核感染 − 真菌感染（カンジダ属） − スピロヘータおよびリケッチアの感染、ウィルス感染（インフルエンザ、肝炎、センダイ、ヘルペス）、および − 原生動物による感染（マラリア、リーシュマニア症）本発明の方法は、癌から生じる悪液質の治療にも有用である。ＴＮＦ−産生癌または非ＴＮＦ−産生癌のいずれかから生ずる悪液質の治療は、本発明の範囲内にある。従って、例えば、癌腫または白血病により生ずる全ての形態の悪液質が、本発明により治療可能である。クレームされた発明に従う治療は、消耗および他の生理的変化などの、悪液質の症状を緩和または全面的に排除する。この治療は、患者を、化学療法または放射線療法に対して、より耐性にさせ、患者の全体的な予後および生活の質を改善する。さらに本発明は、悪液質、多クローン性Ｂ細胞異常または自己免疫疾患、心臓粘液腫、慢性関節リウマチ、キャッスルマン氏病、エイズ、アルコール肝硬変、増殖性疾患、メサンギウム増殖性糸球体腎炎、乾癬、悪性腫瘍、プラスマ細胞腫、骨髄腫、リンパ腫、白血病、および腎細胞癌において、主要な原因であると現在考えられているインターロイキン６（“ＩＬ−６”）の生物学的活性を、阻害する。［ヒラノ（Ｈｉｒａｎｏ）ら、Ｊ．ｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙＴｏｄａｙ、１１：４４３−４４９（１９９０）およびヒラノ（Ｈｉｒａｎｏ）ら、Ｐｒｏ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、Ｕ．Ｓ．Ａ．８４：２２８（１９８７）を参照］。ＩＬ−６の生物学的活性の測定は、当分野で公知であり、Ｂ−９アッセイを含む種々の方法により遂行されることができる。サルフェート含有化合物の使用により、悪液質は治療され、ＩＬ−６の生物学的活性は阻害される。本発明で使用されるサルフェート含有化合物は、ＩＬ−６の生物学的活性を阻害し、および／または上述のように悪液質の治療に有効な、全てのサルフェート含有化合物であり得る。ＩＬ−６の生物学的活性の阻害に有効で、悪液質の治療にも有効であるサルフェート含有化合物の１つの例は、スラミンである。本発明で使用されるスラミンは、スラミンナトリウムまたは８−８’−［カルボニルビス［イミノ−３，１−フェニレンカルボニル−イミノ（４−メチル−３，１−フェニレン）カルボニルイミノ］］ビス−１，３，５−ナフタ−レントリスルホン酸６ナトリウム塩として公知である。市販されているスラミンが好ましく、バイエル２０５（Ｂａｙｅｒ２０５）、３０９Ｆ）アントリポール（Ａｎｔｒｙｐｏｌ）、ゲルマニン（Ｇｅｒｍａｎｉｎ）、モラニル（Ｍｏｒａｎｙｌ）、ナガノール（Ｎａｇａｎｏｌ）、ナガニン（Ｎａｇａｎｉｎ）、およびナフリドソディウム（ＮａｐｈｕｒｉｄｅＳｏｄｉｕｍ）という商品名で知られている。スラミンの誘導体も、本発明で使用され得る。そのような誘導体の例としては、本明細書に参考として援用されている、バグディギィアン（Ｂａｇｈｄｉｇｕｉａｎ）ら、ＣａｎｃｅｒＬｅｔｔｅｒｓ、６０（１９９１）ｐｐ．２１３−２１９に記載されている誘導体を含むが、それに限定されない。有効なサルフェート含有化合物のその他の例は、ペントザン・ポリサルフェート（Ｐｅｎｔｏｓａｎｐｏｌｙｓｕｌｆａｔｅ）およびデキストラン硫酸またはサルフェート含有化合物の組合せを含むが、それに限定されない。悪液質の所望される緩和もしくは全面的な排除またはＩＬ−６活性の阻害を提供する、例えば、スラミンまたはその誘導体、デキストラン硫酸またはペントザン・ポリサルフェートなどの、あらゆる形態のサルフェート含有化合物が、本発明の範囲内に意図される。本発明の方法によれば、スラミンまたはその誘導体、デキストラン硫酸またはペントザン・ポリサルフェートなどのサルフェート含有化合物は、市販されている形態で患者に投与され得、または最初に、有効量のサルフェート含有化合物および１種以上の薬理学的に許容される非毒性の担体、希釈剤またはアジュバントを含む薬学的組成物に製剤化され得る。そのような組成物は、例えば、液剤、懸濁剤、および乳濁剤製剤を含む液体製剤の形態である。そのような組成物は固体製剤として与えられ、または適切な担体の添加により、液剤に再構成される。薬学的担体は、滅菌された液体、例えば水などであり得る。薬学的組成物が、経静脈的に投与されるとき、水は好ましい担体である。食塩液およびデキストロース並びにグリセロール水溶液も、液体担体として、特に注入可能な液剤のために使用され得る。他の適切な薬学的賦形剤が使用され得る。それらの組成物は、液剤、懸濁剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、粉剤、徐放製剤などの形態を取ることができる。適切な薬学的担体は、イー．ダブリュー．マーチン（Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ）著の“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ”に記載されている。本発明のサルフェート含有化合物は、当業者に公知の方法により適切な形態、例えば、経口的、経静脈的、皮下、皮内または筋肉内に投与され得る。経静脈的が、好ましい投与方法である。スラミンまたはその誘導体のような、本発明のサルフェート含有化合物は、本発明の方法に従って、悪液質の発症または悪液質を起こす因子に曝される前、並びに後に、投与されることが特に好ましい。当業者は、サルフェート含有化合物の、本発明の目的を達成するために有効な用量を決定することができる。選択される用量は、悪液質（例えば、体重減少）に関連づけられる、当業者によく知られている症状を緩和するかまたは完全に排除する用量、あるいはＩＬ−６活性を阻害する用量である。治療のための適切な用量の決定は、当業者によって慣例的になされ、過度の実験作業なしに当業者により慣例的に遂行される一連の作業範囲内にある。スラミンまたはその誘導体のような、あらゆる形態で与えられる、サルフェート含有化合物の量は、特に限定されず、患者の年齢および性別、疾病の程度などにより適切に決定されることができるが、例えば、スラミンまたはその誘導体のようなサルフェート含有化合物は、例えば、週に約０．０１ｇから約１０ｇの用量（ここで、週とは５〜７日と理解される）で投与され得る。この用量は、週に１回の割合で与えられるか、またはその用量が、分割されて毎日与えられ得る、あるいはその用量は、週に関してずらして、例えば、週２回、週３回、与えられ得る。本明細書中で、用語「患者」は、ヒト並びに、例えばウマ、ウシ、イヌ、ネコ、モルモット、マウス、およびラットなどの飼育動物および実験動物のような、他の哺乳動物を包含する哺乳動物を意味する、その最も広い意味で使用される。本発明は、以下の実施例により、さらに説明され、それら実施例は、本発明を単に例示することのみ意図しており、制限するものではない。実施例１：有効量のスラミン（suramin）を用いた、悪液質に対する効果は以下の実施例に示される。チャールズ・リバース・ラボラトリーズより得た11匹の雄のマウス（CD）2F1 は計量され、そして結腸腺癌由来の（参考文献によってここに編入されたストラスマンら（Strassmann et al）J．Clin．Invest.，89，pp168-84（1992年５月）に記載された手法による） 0.5X10⁶個のC-26.IVX 細胞を接種された。接種日を０日目（d0）とした。７日目と13日目に、これらのマウスの５匹は、それぞれ腹腔内に0.5mlのPBS（リン酸緩衝生理食塩水）を受け、他の６匹は腹腔内に0.5m lのPBSに希釈された、体重１kgにつき200 mgのスラミンを受けた。19日目にすべてのマウスが犠牲になり、最終的な全体重、宿主重量、腫瘍重量、精巣上体の脂肪、及び乾燥重量が測定された。表１にその結果を示す。結果からわかるように、スラミンを受けたマウスの平均パーセント体重減少は12.0+/-6.0%であり、一方PBSのみのマウスの平均パーセント体重減少は30.5+/-4.8%であった。従ってスラミンは対照動物と比べて明らかに重量減少を防止した。実施例２次の実験において、上記と同じ供給源から得られた８匹のマウスは、0.5mlのP BSを腹腔内に注入され、上記と同じ供給源から得られた８匹の他のマウスは、体重1kgにつき100mgのスラミンを腹腔内に注入された。注入は、７日目と12日目に与えられた。二つのグループの重量は、１週間に数回測定された。表１にみられるように、スラミンはC-26で介在された重量減少をかなりの時間依存性挙動をもって阻害した。同じ実験において、腫瘍体積もまた測定され、その結果を図２に示す。図２にみられるようにスラミンは、19日目を除いてインビボで腫瘍（C-26 ）の成長に何の重要な効果も与えていない。これは本発明の処置は、宿主に直接に影響を与えることを示す。実施例３マウスは実施例１に示したようにして得られ、C-26細胞を注入され、それからそれぞれ５匹のマウスの４つのグループにわけられた。対照マウス以外のマウスは図３に示すように腹腔内にスラミンを、量を増加させながら注入された。17日目にそれぞれのグループの全重量が、0.5mlのPBSを腹腔内に注入されていた５匹のマウスの対照グループと比較された。図３にみられるように、スラミンの濃度が増加すると、重量減少のパーセントが低下するという結果になる。従って、スラミンは、用量依存性挙動をもって消耗を阻害した。実施例４図４は、ターペンチンに誘起された消耗の防止、急性型の炎症の防止におけるスラミン処置の結果を表す。（ゲルシェンバルトら（Gershenwald et al），“ インターロイキン１受容体遮断は宿主の炎症性応答を弱化させる”（“Interleu kin 1 receptor blockade attenuates thehost inflammatory response”Proc. Natl. Acad. Sci. ，87 4966-70，（1990年７月）のターペンチンで誘起された消耗方法の記載を参照せよ）。本実験において、０日目より３日前（-３日目）に、チャールズ・リバース・ラボラトリーズから得られた５匹の雄の（CD）2F1マウスは、それぞれ腹腔内に0.5mlのPBSを受けた。同じ供給源から得られた５匹の他のマウスは、0.5mlのPBSに希釈された、体重１kgにつき100mgのスラミンを腹腔内に受けた。０日目にすべての10匹のマウスが筋肉内に0.1mlのターペンチンを受けた。図４にみられるように、PBSのみを受けたマウスは、３日目に急速な、または急性の体重減少を引き起こすターペンチンへの急性の反応を被った。スラミンで処置されたマウスはそのような体重減少を示さなかった。実施例５スラミンの増加量が、図５に示されるように、IL-6の様々な用量とでプレインキュベートされた。ストラスマンら，J.Immunol.，147:1279-1285（1991）の標準増殖アッセイは、96ウェルプレートを使って行われた。使用された培地は、10 %のウシ胎児血清を加えたRPMIであった。B-9細胞が加えられ、３日間培養された。B-9細胞の増殖の程度は、ストラスマンら，J.Clin.Invest.,89,pp.1681-84（1 992年５月）に記載されているように、放射性のチミジンの取り込みによって測定された。図５に表されるように、C-26腫瘍モデル中において、悪液質の重要な媒介物質になると示されたIL-6のインビトロでの生物活性をスラミンは抑制する。（参考文献によって編入されたストラスマンら，J.Clin. Invest.,89,pp.1681 -84（1992年５月）を参照）実施例６この実験は、スラミンがIL-6レセプターへの結合を妨げることによってIL-6の生物活性を抑制するかどうかを分析した。18本の試験管中に（ATCCから得られた）U266インジケーター細胞、RPMI培地、0.1mgBSA及び25μMのヘペス（Hepes）からなる結合緩衝液、及び100,000cpm（0.8ng）の¹²⁵I-IL-6を加えた。試験管はそれぞれ３本の管の６つのグループに分けられ、以下のようにスラミンを受けた：グループ１は、300μMのスラミンを受けた；グループ２は100μMのスラミンを受けた；グループ３は30μMのスラミンを受けた；グループ４は10μMのスラミンを受けた；そしてグループ５はスラミンを受けずに、培地（最大限の結合のための対照）のみを受けた。さらにグループ６はこのアッセイにおいて結合のバックグラウンドを決定するのに使うために、スラミンなしで標識していない過剰のIL -6を受けた。４℃で90分間インキュベート及びオイル上で細胞の遠心分離の後、（標準電磁波受容体アッセイ）ストラスマン，J.Immunol.，147:1279-1289 （19 91），細胞に結合する放射能の量が測定された。図６に見られるように、スラミンは、IL-6のU266細胞への結合を、用量依存性挙動をもって防止する。また、スラミンの増加量の添加は図６に表す結果において反映されるように、インビトロで放射性IL-6のU266ヒト骨髄腫インジケーター細胞への結合を防止した。ならびにこれらの結果は、スラミンはIL-6の細胞表面受容体への結合を防ぎ、従ってIL -6の生物活性を抑制するということを示す。実施例７インビボでIL-6の結合を防ぐ能力は以下のように分析された。８匹のマウスは、静脈内にスラミンを１匹につき5.0mg受け、他の８匹のマウスは静脈内にPBSを１匹につき0.2ml、0.5時間受けた。その後、16匹すべてのマウスが¹²⁵I-IL-6の300,000cp m（2.4ng）の注入を受けた。それぞれのグループの４匹のマウスが¹²⁵I-IL-6を受けた後、30分で犠牲になり、それぞれのグループの残りの４匹のマウスが¹²⁵I -IL-6を受けた後60分で犠牲になった。肝臓、腎臓、及び脾臓が除去され、放射能（cpm）を測定された。表２にみられるように、スラミンを注入されたマウスは肝臓中での測定で、約50%少ない放射能を持ち、スラミンは放射性IL-6の肝臓への結合を防ぐだろうということを示している。さらに、スラミンは、腎臓中の放射性IL-6の存在の増加から示されるように、身体からのIL-6のクリアランスを促進するであろう。これらの結果は、スラミンがIL-6の肝臓への結合を防ぎ、従ってインビボでIL-6の病理（たとえば悪液質）を抑制するであろうことを示す。結果は、ポイント当たり、２匹のマウスの平均 cpm±0.5の範囲で表す。肝臓の放射能は、cpm/gmとして表す。ＰＢＳ（0.2ml）又はスラミン（5mg/マウス）を、300,000cpm（2.4ng）の¹²⁵I - IL - 6の注射前０．５時間に注射した。実施例８異なるサルフェート含有化合物、ペントサン・ポリサルフェート（Pentosan p olysulfate）を使用した以外は、実施例５に記載の方法を行った。表３に示したように、ペントサン・ポリサルフェートは、ＩＬ−６に応答したＢ−９細胞の増殖を阻害した。結果は、³Ｈ−チミジンのcpmで表す。実施例９スラミンの代わりにペントサン・ポリサルフェートを使用した以外は、実施例６に記載の方法を行った。表４に示したように、ペントサン・ポリサルフェートの量が増加するに従って、放射性のＩＬ−６のＵ２６６ヒトミエローマ細胞への結合を阻害した。実施例１０この実施例において、スラミンの代わりにデキストラン硫酸及びデキストランを使用した以外は、実施例５に記載の方法を行った。表５に示したように、デキストラン硫酸は、ＩＬ−６に応答したＢ−９細胞の増殖を阻害した。また、表５に示したように、デキストランは、ＩＬ−６に応答したＢ−９細胞の増殖を阻害しなかった。これらあわせての結果は、デキストラン硫酸中のサルフェートが、ＩＬ−６に応答したＢ−９細胞の増殖を阻害する活性成分であることを示唆している。結果は、 ³Ｈ−チミジン取り込みのｃｐｍで表す。本発明の他の態様は、明細書の考察及びここに記載の本発明の実施から、当業者に明らかであろう。明細書及び実施例は、単に例示として考えられるべきであって、本発明の本来の範囲及び精神は、以下の請求の範囲によって明確にされる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/70 ＡＤＵＡＤＶ 31/725 ＡＥＤ 9454−4Ｃ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＣＡ，ＪＰ，ＫＲ

Claims

【特許請求の範囲】１．悪液質の治療方法であって、そのような治療が必要な患者に、前記治療に有効な量のペントサン・ポリサルフェート又はデキストラン硫酸を投与する段階を含む治療方法。２．該悪液質が、１種又は複数の微生物による感染の結果である請求項１に記載の方法。３．該悪液質が、バクテリアによる感染の結果である請求項２に記載の方法。４．該悪液質が、グラム−陰性バクテリアによる感染の結果である請求項３に記載の方法。５．該悪液質が、グラム−陽性バクテリアによる感染の結果である請求項３に記載の方法。６．該悪液質が、ウイルスによる感染の結果である請求項２に記載の方法。７．該悪液質が、原生動物による感染の結果である請求項２に記載の方法。８．該悪液質が、真菌による感染の結果である請求項２に記載の方法。９．該悪液質が、寄生虫による感染の結果である請求項１に記載の方法。 10．該悪液質が、１種又は複数の形態の癌の結果である請求項１に記載の方法。 11．該量が、１週間当たり、約０．０１〜約１０ｇの投与量である請求項１に記載の方法。 12．該量を、分割した投薬で投与する請求項１１に記載の方法。 13．ＩＬ−６の生物活性の阻害方法であって、該ＩＬ−６の生物活性を阻害するのに有効な量のサルフェート含有化合物を、患者に投与する段階を含む方法。 14．該サルフェート含有化合物が、スラミン、スラミンの誘導体、ペントサン・ポリサルフェート及びデキストラン硫酸からなる群から選ばれる請求項１３に記載の方法。 15．該量が、１週間当たり、約０．０１〜約１０ｇである請求項１３に記載の方法。 16．該量を、分割した投薬で投与する請求項１５に記載の方法。 17．体の脂肪及び筋肉の消耗による体重減少を緩和又は除去する方法であって、該体重減少を緩和又は除去するのに有効な量のサルフェート含有化合物を、患者に投与する段階を含む方法。 18．該サルフェート含有化合物が、スラミン、スラミン誘導体、ペントサン・ポリサルフェート及びデキストラン硫酸からなる群から選ばれる請求項１７に記載の方法。 19．ＩＬ−６関連疾患を治療する方法であって、該ＩＬ−６関連疾患を治療するのに有効な量のサルフェート含有化合物を、患者に投与する段階を含む方法。 20．該ＩＬ−６関連疾患が、悪液質、ポリクローナルＢ細胞異常、自己免疫疾患、心臓性粘液腫、慢性関節リウマチ、キャッスルマン氏病、ＡＩＤＳ）アルコール性肝硬変、増殖性疾患、メザンギウム増殖性糸球体腎炎、乾癖、悪性腫瘍、プラスマ細胞腫、骨髄腫、リンパ腫、白血病及び腎細胞癌である請求項１９の方法。