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JPH0686674A - 血液凝固因子を活性化する方法 - Google Patents

血液凝固因子を活性化する方法

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JPH0686674A
JPH0686674A JP5079490A JP7949093A JPH0686674A JP H0686674 A JPH0686674 A JP H0686674A JP 5079490 A JP5079490 A JP 5079490A JP 7949093 A JP7949093 A JP 7949093A JP H0686674 A JPH0686674 A JP H0686674A
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Abstract

(57)【要約】 【構成】 プロトロンビン複合体を含有する画分から回
収される血液凝固因子を水不溶性担体上に固定化したト
リプシンで処理し、血液凝固因子の活性化後、該固定化
トリプシンを分離することを特徴とする、トリプシンに
よる血液凝固因子活性化方法。 【効果】 本発明方法ではトリプシンによる過剰なタン
パク質加水分解を避けることができ、所望の活性化型血
液凝固因子を高収率かつ簡便に得ることができる。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はトリプシンを利用して血
液凝固因子を活性化する方法並びに該方法をトロンビン
の製造に使用することに関する。
【０００２】
【従来の技術】血液凝固には、血液凝固因子が活性化さ
れ、次いでそれが以降の反応を触媒するという一連の連
続的な反応が必要である。最後に、活性化されたプロト
ロンビン(トロンビン)の作用によってフィブリノーゲン
からフィブリンが生成する。血液凝固因子の活性化には
ほとんどの場合、チモーゲン(酵素前駆体)のタンパク質
加水分解によってタンパク質加水分解的に活性な酵素が
生成するという過程が含まれる。この活性化反応の機序
はまだ部分的にわかっていないところがあるので、血液
凝固因子のインビトロ活性化はその制御が困難である。
例えば、プロトロンビンのトロンビンへの変換は因子Ｘ
ａとカルシウムだけでは極めてゆっくりと起こる。その
最適な進行は数種の因子の複合体(プロトロンビナーゼ
複合体)の存在下でのみ確保される。因子Ｘａに加え
て、因子Ｖ、リン脂質及びカルシウムがこの複合体に属
する。因子Ｘａがプロトロンビン分子(分子量６８００
０Ｄ)をタンパク質加水分解的に切断することによって
活性な酵素であるトロンビン(分子量３００００Ｄ)が生
成する。
【０００３】血漿プロテアーゼであるトロンビンはフィ
ブリノーゲンをフィブリンに切断する点で凝固的に活性
であるばかりでなく、凝固因子Ｖ、ＶIII及びＸIIIを活
性化し、かつ、自身のプロ酵素(プロトロンビン)を切断
するなど多機能性の酵素である。医療においては、トロ
ンビンは単独で、もしくはフィブリノーゲンと共に、出
血を止めるため、あるいは外科では組織を接着するため
に使用されている。
【０００４】プロトロンビナーゼ複合体によるプロトロ
ンビンの活性化を系外で模倣することは困難であり、そ
れゆえにヒトもしくは動物由来のプロテアーゼの作用下
でトロンビンを生成させる試みがなされてきた。
【０００５】牛因子Ｘａまたは牛トリプシンによるヒト
・プロトロンビンの活性化に関する検定によって、トリ
プシンによる活性化が因子Ｘａによる場合と同じ生理学
的中間体を経由し、同じ経路で起こることが明らかにさ
れている。しかし、トリプシンの場合にはタンパク質加
水分解が進行してトロンビンの分解と低分子量産物の生
成をもたらすので、その収率はせいぜい５０％である(K
isiel及びHanahan(1973),Biochim.Biophys.Acta 329,22
1-232)。
【０００６】血清アルブミンや高濃度のグリセロール
(５０％)などの添加物によってトロンビンの収率を改善
することができる(Landaburuら(1961),Am.J.Physiol.20
1,298-302)。しかし、生物学的に適合する調製物に加工
できるようになるまでには、活性化反応の後に煩雑な方
法でその生成物をトリプシンや様々な添加物から精製し
なければならない。
【０００７】反応媒質からのトリプシンの除去は固定化
酵素の使用によって本質的に簡略化することができよ
う。しかし、プロトロンビンの活性化に固定化トリプシ
ンを使用することは今まで不可能であると考えられてき
た。可溶性トリプシンとは対照的に固定化トリプシンが
クエン酸加血漿中のプロトロンビンのトロンビンへの活
性化に適さないことは、検定によって立証されている(Z
ubairov及びZinkevich(1976),Vosprosy meditsinskoi k
himii 2(82),187-91)。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、活性化反応
後に煩雑な精製段階を行う必要を伴うことなく高収率の
活性化された酵素を保証する簡潔な血液凝固因子活性化
法を提供することを目的としてなされた。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明では、トリプシン
で血液凝固因子を活性化する方法であって、プロトロン
ビン複合体を含有する画分から血液凝固因子を回収し、
これを水不溶性の担体上に固定化したトリプシンで処理
し、血液凝固因子の活性化後、上記固定化トリプシンを
分離することからなる方法によってこの目的を達成す
る。水不溶性担体としては、例えばセルロース、デキス
トラン、アガロース、アクリレートまたはシリケートな
どを使用する。
【００１０】この方法は血液凝固因子プロトロンビン、
因子ＩＸまたは因子Ｘの活性化に特に適している。
【００１１】本発明の有利な態様は、プロトロンビン、
因子ＩＸまたは因子Ｘの活性化をｐＨ５.８〜７.９、導
電率５〜２４ｍＳおよび温度２〜４５℃の条件下で行う
ことである。
【００１２】本発明の方法はプロトロンビンからトロン
ビンを回収するのに特に適している。精製されたプロト
ロンビンを含有する画分の固定化トリプシンによる制御
された処理は、予め決定した処理時間後の迅速かつ完全
なトリプシンの分離からなる。したがって、生成物は実
質上なんらの切断産物をも含有しない。５０％グリセロ
ールなど一般的な安定化剤の添加をやめることもでき
る。このトロンビン含有画分は従来法により医薬的調製
物に加工することができる。
【００１３】血液凝固因子から活性化された酵素を製造
するために、精製した血液凝固因子もしくは血液凝固因
子複合体のいずれかを活性化することが可能であり、後
者の場合には活性化された酵素が都合よくさらに精製さ
れる。したがって、精製したプロトロンビンの活性化も
しくはプロトロンビン複合体の活性化によってトロンビ
ンを得ることができる。
【００１４】本発明のもう１つの利点は、ウイルス汚染
貯蔵物から誘導される出発産物を使用する場合に、血液
凝固因子の活性化と同時にウイルス活性がかなり軽減さ
れることにある。
【００１５】血液凝固因子含有画分における固定化トリ
プシンのウイルス不活化効果は意外なことであった。繁
殖性濾過性病原物質を不活化するための固定化中性加水
分解酵素による処理は免疫グロブリン-Ｇ含有画分に関
して知られているに過ぎなかった(ＥＰ-Ａ-０ ２４７
９９８)。
【００１６】存在する可能性のある感染性物質を不活化
するための追加手段を本発明方法の範囲内で行い得るこ
とは言うまでもない。すなわち、例えば、湿潤化した凍
結乾燥出発物質に蒸気加熱処理を行うことができる。
【００１７】下記実施例により本発明をさらに詳細に説
明する。
【００１８】
【実施例】
１．トリプシンの固定化 トリプシン・タイプIII(シグマ，製品番号Ｔ８２５３)
１.２ｇをＣＮＢｒ-活性化セファロース４Ｂ ３５０ｍ
ｌ(１００ｇ粉末)に、製造者(ファルマシア)の指示に従
って結合させた。上記トリプシンの９０％以上が固定化
された。
【００１９】２．プロトロンビン複合体含有画分中のプ
ロトロンビンの活性化 「Ｍethods of Plasma Fractionation」(J.M.Curling
編,アカデミック・プレス,1980)に記載された公知のＢru
mmelhuisの方法に従い、低温沈殿物が少ないヒト血漿５
０リットルからアニオン交換体への吸着によってプロト
ロンビン複合体を単離した。ダイアフィルトレーション
によってプロトロンビン含有画分の塩濃度を１５０ｍＭ
ＮａＣｌまで減じ、その生成物を凍結乾燥した。
【００２０】存在する可能性のある病原物質を不活化す
るために、この画分を６０℃に１０時間加熱し、ＡＴ-
Ｂ-３８５６５７に従って、水蒸気の存在下８０℃に１
時間加熱した。
【００２１】加熱した嵩高い粉末を２５Ｕプロトロンビ
ン／ｍｌ(タンパク質濃度１２ｍｇ／ｍｌ)になるように
溶解し、ゆっくり撹拌しながら、セファロース上に固定
化したトリプシン１ｍｌを用いて２５℃で１５０分間処
理した。トロンビン活性は１ｍｌあたり１９８０Ｕであ
り、比活性は１６５Ｕ／ｍｇ-タンパク質であった。
【００２２】３．上記２で得られるトロンビンのさらな
る精製 上記２に従ってトロンビンを製造し、Ｓ-セファロール
カラム(ファルマシア)４５ｍｌを用いて下記要領でさら
に精製した。カラムを２５ｍＭ クエン酸三ナトリウム
(ｐＨ６.２)で平衡化した。トロンビン(２５ｍＭ クエ
ン酸三ナトリウム中１０５０００Ｕ)を上記Ｓ-セファロ
ースに結合させ、同緩衝液で洗浄し、４５０ｍＭ Ｎａ
Ｃｌ溶液１５０ｍｌで溶出させた。トロンビンの収率は
９４％であり、比活性は１７３５Ｕ／ｍｇ-タンパク質
であった。このトロンビンを９ｇ／ｌ ＮａＣｌおよび
５ｇ／ｌ グリシンの存在下で凍結乾燥して安定な調製
物にすることが可能であった。
【００２３】４．精製したプロトロンビンの活性化 上記２に従って、血漿から蒸気処理したプロトロンビン
複合体の回収を行った。ウイルスを不活化したこの産物
はプロトロンビンの他に因子ＩＸおよび因子Ｘを含有し
ていた。硫酸化セファデックスＧ５０(ファルマシア)で
のクロマトグラフィー的分離(Miletichら,(1980),Analy
t.Biochem.105,304-310)により、因子ＩＸ及びＸをプロ
トロンビンから分離した。上記２に従って上記精製プロ
トロンビンをトロンビンに活性化した後、比活性は７４
５Ｕ／ｍｇであった。
【００２４】５．上記４で得られるトロンビンのさらな
る精製 上記４に従ってトロンビン１１００００Ｕを製造し、Ｓ
-セファロースカラム４５ｍｌでさらに精製した。精製
後、トロンビンは３２４０Ｕ／ｍｇ-タンパク質の比活
性を有した。

Claims (4)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 プロトロンビン複合体から得られる血液
    凝固因子をトリプシンを用いて活性化する方法であっ
    て、プロトロンビン複合体含有画分を調製し、該プロト
    ロンビン複合体含有画分から該血液凝固因子を回収し、
    固定化トリプシンを得るべく水不溶性担体上にトリプシ
    ンを固定化し、該血液凝固因子を該固定化トリプシンで
    処理し、該血液凝固因子の活性化後に該固定化トリプシ
    ンを分離することからなる方法。
  2. 【請求項２】 該血液凝固因子が、プロトロンビン、因
    子ＩＸおよび因子Ｘからなる群から選択されることを特
    徴とする請求項１に記載の方法。
  3. 【請求項３】 該血液凝固因子の該活性化をｐＨ５.８
    〜７.９、導電率５〜２５ｍＳおよび温度２〜４５℃の
    条件下で行うことを特徴とする請求項２に記載の方法。
  4. 【請求項４】 該血液凝固因子がプロトロンビンである
    ことを特徴とする請求項３に記載の方法。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009521226A (ja) * 2005-12-22 2009-06-04 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド プレトロンビン−１の活性化方法

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK83092D0 (da) * 1992-06-24 1992-06-24 Unes As Fremgangsmaade til udvinding af thrombin
US5795780A (en) * 1993-06-23 1998-08-18 Bristol-Myers Squibb Company Method of use of autologous thrombin blood fraction in a cell culture with keratinocytes
US5677162A (en) * 1995-05-01 1997-10-14 New York Blood Center, Inc. Method for activating prothrombin to thrombin
AT404597B (de) 1995-11-24 1998-12-28 Immuno Ag Verfahren zur herstellung von proteinen
WO2000062828A1 (en) * 1996-04-30 2000-10-26 Medtronic, Inc. Autologous fibrin sealant and method for making the same
US5844087A (en) * 1996-11-05 1998-12-01 Bayer Corporation Method and device for delivering fibrin glue
US6274090B1 (en) 1998-08-05 2001-08-14 Thermogenesis Corp. Apparatus and method of preparation of stable, long term thrombin from plasma and thrombin formed thereby
US6461834B1 (en) 1998-11-06 2002-10-08 Bionebraska, Inc. Clostripain catalyzed amidation of peptides
US6472162B1 (en) 1999-06-04 2002-10-29 Thermogenesis Corp. Method for preparing thrombin for use in a biological glue

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2757992A1 (de) * 1977-12-24 1979-06-28 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur prothrombin-bestimmung
AT383739B (de) * 1983-03-16 1987-08-10 Immuno Ag Verfahren zur inaktivierung von unvertraeglichkeitsreaktionen verursachenden substanzen in immunglobulinhaeltigen blutfraktionen
JPS59225064A (ja) * 1983-06-03 1984-12-18 ユニチカ株式会社 生理活性物質固定化用担体
AT385657B (de) * 1984-03-09 1988-05-10 Immuno Ag Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten
AT390560B (de) * 1986-05-30 1990-05-25 Immuno Ag Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern
EP0294851A3 (de) * 1987-06-12 1990-05-09 Berlin-Chemie Ag Verfahren zur Herstellung von Humaninsulin und seinen Derivaten

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DATABASE MEDLINE ON DIALOG,MD,US.ABSTRACT *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009521226A (ja) * 2005-12-22 2009-06-04 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド プレトロンビン−１の活性化方法

Also Published As

Publication number Publication date
HUT68586A (en) 1995-06-28
AT396937B (de) 1993-12-27
SK281266B6 (sk) 2001-01-18
HU216316B (hu) 1999-06-28
ATA71392A (de) 1993-05-15
DK0565512T3 (da) 1999-08-23
DE59309217D1 (de) 1999-01-28
US5393666A (en) 1995-02-28
ATE174624T1 (de) 1999-01-15
AU663573B2 (en) 1995-10-12
FI106562B (fi) 2001-02-28
HU9300753D0 (en) 1993-06-28
NO306351B1 (no) 1999-10-25
NO931221L (no) 1993-10-07
ES2125971T3 (es) 1999-03-16
CZ279602B6 (cs) 1995-05-17
CZ53193A3 (en) 1994-01-19
JP2723445B2 (ja) 1998-03-09
CA2092158A1 (en) 1993-10-07
NO931221D0 (no) 1993-03-31
SK30893A3 (en) 1993-11-10
FI931554A0 (fi) 1993-04-06
EP0565512B1 (de) 1998-12-16
FI931554L (fi) 1993-10-07
AU3562293A (en) 1993-10-07
PL298391A1 (en) 1993-10-18
EP0565512A1 (de) 1993-10-13

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