JPH05508152A

JPH05508152A - 抗ウイルス剤としての２’，３’―ジデオキシ―４’―チオリボヌクレオシド

Info

Publication number: JPH05508152A
Application number: JP91508844A
Authority: JP
Inventors: モンゴメリー、ジョン、エイ．; シークリスト、ジョン、エイ．、ザ　サード
Original assignee: サザーン　リサーチ　インスティチュート
Priority date: 1990-04-20
Filing date: 1991-04-19
Publication date: 1993-11-18
Also published as: EP0525106A4; EP0525106A1; US5128458A; CA2080916A1; WO1991016333A1; AU7855191A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】抗ウィルス剤としての２’、３”−ジデオキシ−４゛−チオリボヌクレオシド遅出　に　る本出願は、１９９０年４月２０日付の現在係属中の出願第０７１５１３．２７０号の一部継続出願である。

主肌例背旦１、光咀Ω肢歪公！本発明は、２°、３′−ジデオキシ−４′−チオリボヌクレオシド及びこれらを抗ウィルス剤、特に抗エイズ薬剤として使用することに関するものである。

２、に産肢術Ω説朋２°、３゛−ジデオキシヌクレオシドはエイズ治療用の有効でかつ選択された薬剤であることが知られている。一連の化合物の中で、ジデオキシシチジン、ジデオキシイノシン及びＡＺＴ　（３’−アジド−３°−デオキシチミジン）は特に有効であることが見出されている。

しかしながら、これらの各化合物は好ましくない副作用を生ずる。

２’、３’−ジデオキシヌクレオシドのチオヌクレオシド類似体及びこれらを抗ウィルス剤として使用することはこれまでに報告されて種々の４′−チオヌクレオシドは文献で報告されている。例えば、ライスト（Ｒｅｉｓｔ）等のＪ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、、８６．５６５８　（１９６４）には、Ｌ型及びＤ型の４′−チオリボアデノシンについて記載されている。

４′−チオリボアデノシンの生物学的作用については　ミウラ（Ｍｉｕｒａ）等のＰｕｒｉｎｅ　ａｎｄ　Ｐ　ｒｉｍｉｄｉｎｅ　Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｉｎ　Ｍａｎ　Ｖ　パートＢ１（ブリナム（Ｐｌｅｎｕｍ）出版社、１９８６）　６６７頁に記載されている。

リチー（Ｒｉｃｈｉｅ）等のＣａｎ、　Ｊ、　Ｃｈｅｍ、、５６．７９４　（１９７７）には、９−（３−デオキシ−４−チオ−β−り一エリスローベントフラノシル）アデニン（４°−チオコルジセピン）の合成が記載されている。ライスト　（Ｒｅｉｓｔ）等のＪ、　Ｏｒ　、　Ｃｈｅｍ、、３３．１８９　（１９６８）には４−チオーＤ−キシロース及び４〜チオ−Ｄ−アラビノースのアデニンヌクレオシドの合成が記載されている。オトタニ（Ｏｔｏｔａｎｉ）等のＪ、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、、１７．５３５　（１９７４）には４°−チオ−１−β− Ｄ−アラビノフラノシルシトシン及び２．２゛−アンヒドロ−４°−チオ−１− β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン塩酸塩の製造及び抗腫瘍活性が記載されている。

ツー（Ｆｕ）等のＪ、　Ｏｒ　、　Ｃｈｅｍ、、４１．３８３１　（１９７６）には、アノマー性メチル−２−デオキシ−４−千オーＤ−エリスローベントフラノシドの製造が記載されており、これらのフラノシドが２′−デオキシ−４°− チオヌクレオシドの合成用先駆体として用いることができると示唆している。

及肌ユ概ｌ特定の２゛、３°−ジデオキシ−４゛−チオリボヌクレオシドが有用な抗ウィルス活性を有することを見出した。さらに、これらの化合物はジデオキシシチジン及びＡＺＴと比較して細胞毒性が少ない。

従って、本発明は下記の式により表される新規な化合物に関するも式中、Ｘ＝Ｈ，Ｎ３又はＦであり、Ｂはピリミジン、５−アザピリミジン、６−アザピリミジン、３−デアザピリミジン、プリン、３−デアザプリン、７−デアザプリン、８−アザプリン及び２− アザプリン塩基よりなる群から選ばれる窒素含有複素環式塩基である。

「ピリミジン塩基Ｊとはこれに限定されないが、ウラシル（２，４〜ジオキソピリミジン）、チミン（５−メチル−２，４−ジオキソピリミジン）、シトシン（４−アミノ−２−オキソピリミジン）及び５−メチルシトシン（４−アミノ−５ −メチル−２−オキソピリミジン）、及びアルキルもしくはトリフルオロメチル基又はハロゲンがＣ５複素環式炭素に付いた誘導体を含む如何なるピリミジン誘導体をも意味する。「５−アザピリミジン塩基」とは、これらに限定されないが、５−アザ−２，４−ジオキソピリミジン及び４−アミノ−５−アザ−２−オキソピリミジンを含めた、如何なる５−アザピリミジン誘導体も意味する。　［６ −アザピリミジン塩基］とは、これらに限定されないが、６−アザ−２，４−ジオキソピリミジン、４−アミノ−６−アザ−２−オキソピリミジン、及びメチル基又はハロゲンがＣ５複素環式炭素に付いている誘導体を含めた如何なる６−アザピリミジン誘導体も意味する。「３−デアザピリミジン塩基」とは、これらに限定されないが、３−デアザ−２，４−ジオキソピリミジン、４−アミノ−３− デアザ−２−オキソピリミジン、及びメチル基又はハロゲンがＣ５複素環式炭素に付いている誘導体を含めた如何なる３−デアザピリミジン誘導体も意味する。

「プリン塩基」とは、これらに限定されないが、アデニン（６−アミノプリン）、グアニン（２−アミノ−６−オキソプリン）、ヒポキサンチン、２−アミノプリン、２．６−ジアミツプリン、２−クロロ−６−アミツプン誘導体も意味する。「３−デアザプリン塩基」とは、これらに限定されないが、６−アミノ−３− デアザプリン、３−デアザ−６−オキソプリン、及びアミノ基又はハロゲンがＣ２複素環式炭素に付いている誘導体を含めた如何なる３−デアザプリン誘導体も意味する。

「７−デアザプリン塩基」とは、これらに限定されないが、６−アミツーツーデアザプリン、７−ジアザ−６−オキソブリン、及びアミノ基又はハロゲンがＣ２複素環式炭素に付いている誘導体を含めた如何なる７−デアザプリン誘導体も意味する。「８−アザプリン塩基」とは、これらに限定されないが、６−アミノ− ８−アザプリン、８−アザ−６−オキソプリン、及びハロゲンがＣ２複素環式炭素に付いている誘導体を含めた如何なる８−アザプリン誘導体も意味する。

「２−アザプリン塩基」とは、これらに限定されないが、６−アミノ−２−アザプリン及び２−アザ−６−オキソプリンを含めた如何なる２−アザプリン誘導体も意味する。

本発明の別の態様は、ヒト免疫不全ウィルスに感染した人間に、治療に有効な量の、次式（式中、Ｘ＝Ｈ，Ｎ３又はＦであり、Ｂはピリミジン、５−アザピリミジン、６−アザピリミジン、３−デアザピリミジン、プリン、３−デアザプリン、７−デアザプリン、８−アザプリン及び２− アザプリン塩基よりなる群から選ばれる窒素含有複素環式塩基である）で表される化合物を投与するものである。

本発明の更に別の態様は、２°、３゛−ジデオキシ−４°−チオリボヌクレオシドの製造に有用な新規な中間体を提供することである。

泣肌例詳創μ退朋本発明の化合物は、適当な糖を、プリン及びピリミジン塩基と、又はプリン及びピリミジン類似体、例えば、５−アザピリミジン、６−アザピリミジン、３−デアザピリミジン、３−デアザプリン、７−デアザプリン、８−アザプリン及び２ −アザプリンとカップリングさせることによって製造する。いくつかの合成変換を通常の文献に記載の方法で行った。脱保護は標準的な方法で行った。特定の化合物に対する特別な手順については、以下の実施例に示す。

１−（２−デオキシ−３−アジド−４−チオーβ−Ｄ−リボフラノシル）チミンの製造は、１−（２−デオキシ−４−チオーβ−Ｄ−リボフラノシル）チミン（式１）がら始める。

化合物１の製造については、同様にサザーンリサーチインスティチュートに譲渡された、同一発明者による１９８９年９月１５日付の米国特許出願第０７／４０８，０４０号に記載されており、この記載を参考として引用する。

製造については、次の反応式で説明され、その詳細は後記の実施例１から４に示す。

ユ　土２’、３’−ジデオキシー４′−チオリボヌクレオシドの製造は（Ｓ）−０−ｔ −ブチルジフェニルシリル−５−ヒドロキシメチル旦の製造については、Ｓ、ハネシアン（Ｈａｎｅｓｓｉａｎ）及びＰ、Ｊ。

マージ　（Ｍｕｒｒａｙ）、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、　１９８７、す、５０５５−５０７２に記載されており、それをここに参考として引用する。中間体である１−０−アセチル−５−０−ｔ−ブチルジフェニルシリル−４−チオ−２，３の製造については、次の反応式で表され、詳細は実施例５から８に示す。

！！Ｌ　２以下の反応式並びに実施例９−１２．２４及び２６に記載するように、化合物旦を種々のプリン、ピリミジン　３−デアザプリン、７−デアザプリン、８−アザプリン、２−アザプリン、５−アザピリミジン、６−アザピリミジン及び３−デアザピリミジンと反応させると、化合物置ないし１４及び化合物２６のようなアノマー性５’−０−ｔ−ブチルジフェニルシリルによって保護された４−チオ− ２’、３’−ジデオキシリボヌクレオシドを得ることができる。

ム以下の反応式並びに実施例１３−２３及び２５に記載するように、化合物上工ないしょＡ及び化合物２６を、例えば脱保護、アノマーの分離及びプリンの変換によってさらに処理すると、中間体１支及び１１並びに化合物上ユないし、λ支並びに化合物２７が得られる。

１ｇ、　二ヱし２°、３°−ジデオキシ−リボヌクレオシドから２°、３゛−ジデオキシ−３° −アジド−リボヌクレオシド及び２°、３′−ジデオキシ−３′−フルオロ−リボヌクレオシドを生成する公知の方法は、２°、３°−ジデオキシ−４′−チオ −リボヌクレオシドの２“、３°−ジデオキシ−３°−アジド−４′−チオ−リボヌクレオシド及び２°、３°−ジデオキシ−３°−フルオロ−４′−チオ−リボヌクレオシドへの変換に用いることができる。

本発明の化合物は、ＣＥＭ及びＭＴ２細胞における次の標準スクリーニング分析により、抗ＨＩＶ活性について簡単にスクリーニングすることができる。

１、化合物の希釈及びプレートへの移動。試験化合物を蒸留水、ＤＭＳＯ，メチルアルコール又は他の適当な溶媒中に溶解する。最高溶解度は適当に定める。全操作工程においてゴム手袋、実験室着及びマスクを使用して、非常に危険な薬剤にさらされることを防ぐ。

最高の溶解度で、試験化合物を製造し、モしてスクリーニング実験室で用いるまで、−２０℃で貯蔵する。各化合物の最初の希釈は溶媒の入った管で行って、最高試験濃度の２倍の濃度にする。次に、滅菌タイター管を用いて、各化合物の一連の１／２対数希釈を行う。

希釈を行った後、希釈化合物を９６穴マイクロタイタープレートの適当な穴に加える。１２種までの希釈物を、細胞対照、ウィルス対照、毒性対照、薬剤色彩対照、媒体対照及びプラスチック対照を含めた全ての適当な対照を有する単一プレート上で３組都合よく分析することができる。６種の希釈物を試験する場合には、２種の薬剤を単一のマイクロタイタープレート上で分析することができる。試験化合物はプレートに１００マイクロリツトルの最終容量で加える。

２、細胞及びウィルス。試験化合物の希釈物を製造している間に、細胞を洗浄し、カウントする。生存率をトリパンブルー染料による分離によってモニターし、生存率が９０％より低下した場合には分析は行わない。細胞は指数増殖期に保ち、分析する前日に１：２に分けて確実に適切な成長速度にする。最初のスクリーニングの場合、用いる細胞系はＯＥＭ細胞である。この細胞系はＭＴ２細胞上で検出される陽性の化合物全てを検出することができるが、ＭＴ２細胞で検出されないいくつかの化合物の活性を検出することもできることが経験から分かっている。しかしながら、両タイプの細胞系はいつでも入手しかつ用いることができ、必要であれば、、ＯＥ　Ｍ細胞に代えて又はこれに加えて用いることができる。

特に言及しない限り、媒体は１０％熱不活性化ウシつ児血清（Ｆ　Ｂ　Ｓ）、グルタミン及び抗生物質を含有するフェノールレッドを含まないＲＰＭＩ　１６４０である。細胞は５％のＣＯ２を含む空気の雰囲気中で３７℃で成長させる。この試験で用いるウィルスは、次のような急性感染法によって生成したＨ　Ｉ　Ｖ −１単離ＩＩＩＢ及び／又はＲＦである：簡単に説明すると、ウィルスが培養物中の細胞全部を殺すまで、ウィルス感染細胞を感染後３日目から始めて１日ごとにベレットにする。逆転写酵素活性及びｐ２４　ＥＬＩＳＡを用いて、最高量のウィルスを含有するプールを識別する。これらの２４時間採取したものをプールし、濾過し、そして−９０℃で冷凍した。分析に必要なウィルスの量を測定するため、ウィルスを分析に用いる前に、入手可能なすべての細胞系についてウィルスの力価測定（ｔｉｔｅｒ）を行う。

一般に、急性ウィルス法によって生成したプールは、１穴当たり１マイクロリツトルの伝染性ウィルスを加える必要があり、０．０１の感染頻度で薬剤をスクリーニングする。このように、十分なウィルスを生成し、冷凍して、１，０００を越えるマイクロタイタープレートを完成させ、単一スドックから２，０００までの化合物の試験を行うことができる。長期間、単一スドックのウィルスを試験に用いることは、分析システムの反復精度にたいへん好ましい効果を及ぼした。ＯＥＭ細胞のウィルス感染はバルク感染法で行う。分析を終えるのに必要な適当な数の細胞を、１−２ミリリツトルの全容量が小さい円錐遠心管中の伝染性ウィルスと混合する。１時間培養した後、感染細胞を新鮮な組織培養基で１ミリリツトル当たり５Ｘ１０’細胞の適切な最終濃度にし、１００マイクロリツトルを適当な実験穴及びウィルス対照穴に加える。同じ濃度の非感染細胞を毒性対照用に及び細胞対照用に平板培養する。

３、ＣＰＥ抑制の評価。細胞及び試験化合物をマイクロタイタープレートに加えた後、プレートを６日間、３７℃で培養する。培養時間を長＜　（７−８日）したり、あるいは投入細胞数を多く　（１×１０４）すると、細胞対照とウィルス対照との間の結果となることが経験から分かっている。

抗ウイルス分析の評価法では、２０マイクロリツトルのテトラゾリウム塩ＭＴＴを５ｍｇ／ｍｌでプレートの各穴へ４−８時間加える。この培養期間の後、０．０ＩＮ−ＨＣｌ中の２０％ＳＤＳを５０μｍ加えることによって細胞を破壊する。生存可能な細胞の代謝活性で着色反応生成物が生じ、これを５７０ｎｍにおいてモレキュラーディバイスＶ　ｍａｘプレートリーダーで分光光度測定する。光学密度（０，Ｄ、）値はホルマザン生成物の量によって変わり、これ１マ生存可能な細胞の数に比例する。プレートリーダーを、プレートデータの評価及び計算を行うためのスクリーニング実験室のコンピューターにつなぐ。プレートからは、そのままのＯ，Ｄ値、計算された平均０．Ｄ、及びウィルス性ＣＰＥを含めた全ての関連情報、並びにＴｅ３゜、ＩＣ５゜及び抗ウィルス及び特異性指数を含めた計算値が得られる。最後に、結果には、非感染細胞に及ぼす化合物の作用（毒性）及び感染細胞への化合物の保護及び非保護作用を視覚的に示すプロットを含めることもできる。

ヒト免疫不全ウィルスに感染した人間の治療のためのここに記載した２°、３゛ −ジデオキシ−４°−チオリボヌクレオシドの適当な薬剤担体及び希釈剤及び最適投与量及び投与法は当業者には明らかなことである。

次の実施例は、本発明の化合物の製造について説明するものである。これらの実施例における各種化合物番号は、前記反応式の化合物を指す。これらの実施例において、ＤＡＳＴは三フッ化ジエチルアミノサルファーであり、Ｄｉｂａｌ−Ｈはジイソブチルアルミニウムハイドライドであり、ＤＭＡＰは４−ジメチルアミノピリジンであり、ＨＭＤＳは１，１，１，３，３．３−へキサメチルジシラザンであり、ＴＭＳ−ＣＩはクロロトリメチルシランであり、ＥｔＯＡｃは酢酸エチルであり、ＴＨＦはテトラヒドロフランであり、ＬＡＨはリチウムアルミニウムハイドライドであり、ＭｅＯＨはメチルアルコールであり、ＥｔＯＨはエチルアルコールであり、ＤＭＦはジメチルホルムアミドであり、ＴＥＡＢは臭化テトラエチルアンモニウムである。

寒鳳例ユ１−２−デオキシ−４−チオ−５−０−）リチルー　−Ｄ−リボフラノシル　チミン（２）。４８６．５ｍｇ　（１，７５ｍｍｏ　＋）の塩化トリフェニルメチルを含有する２０ｍ１のピリジンに３６５ｍｇ　（１，４２ｍｍｏ　ｌ）の１を含む溶液を、１００℃で攪拌しながら０．５時間加熱した。冷却した反応混合物を細流状態で、激しく攪拌した１、５リツトルの氷水に注いだ。生成物を集め、多量のＨ２Ｏで洗浄し、乾燥した。純白の固体をアセトン／ベンゼンから結晶化させた；収量６００ｍｇ；融点１２０−１２１℃；ＭＳ　ＦＡＢ５０１　（Ｍ＋１）”；’ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ２，３００　ＭＨｚ）δ　１．４２　（ｓ、３Ｈ，Ｃ−５，ＣＨ，）、２．０　（ｍ、１．　Ｈ−２°）、２．４５　（ｍ、１．　Ｈ−２°）、２．８２　（ｂｒｓ、１．３−０Ｈ）、３　、２２　（ｍ、１．　ＣＨ２）、３．６４　（ｍ、２Ｈ，ＣＨ２，Ｈ−４’）、４．５０　（ｂｒｓ、１．Ｈ−３°）、６．４５　（ｔ、１．　Ｊ＝４　Ｈｚ。

Ｈ−１’）、７．３５　（ｍ、ＩＩＨ，芳香族及びＨ−６）、７．４５（ｍ、５Ｈ，芳香族）、９．２　（ｓ、１．　Ｈ−３）。

Ｘ樵透１２．３′−アンヒドロ−２−デオキシ−４°−チオ−１−−Ｄ−リボフラノシルチミン（冬）。１０ｍ１のＣＨ２Ｃｌ２中にλ（３００ｍｇ）を加えた溶液に、 −７８℃のＤＡＳＴを０．１ｍｌ加え、反応混合物を徐々に室温まで温めた。反応混合物を１００ｍ１のＨ２Ｏに注ぎ、２Ｘ５０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、蒸発させ乾燥し淡黄色固体２３５ｍｇを得た。ＭＳ　ＦＡＢ　４８３　（Ｍ＋１）”；１ＨＮＭＲ（ＣＤ　ＣＩ　３．　３００　ＭＨｚ）　６１．９　（ｓ、３Ｈ。

Ｃ−５，ＣＨ，）、２．４５　（ｍ、１．　Ｈ−２°）、２．９５（ｍ。

ＩＨ，Ｈ−２°）、３．４５　（ｍ、ＬＨ，ＣＨ２）、３．７０（ｍ。

２Ｈ，ＣＨ２及びＨ−４°）、５．２０　（ｂｒｔ、ＩＨ，Ｈ−１°）、５．３４　（ｂｒｔ、ＩＨ，Ｈ−３’）、６．８０　（ｓ、ＬＨ，Ｈ−６）、７．２６　（ｍ、ＩＯＨ，芳香族）、７．４４　（ｍ、５Ｈ，芳香族）０寒獲男１２゛−デオキシ−３゛−アジド−４゛−チオ−５’−０４リチルーーＤ−リボフラノシルチミン（４）。２０ｍ、ＩのＤＭＦに冬（２００ｍｇ）を加えた溶液に、アジ化ナトリウム（１００ｍｇ）を加え、反応混合物を１２０℃で２４時間加熱し、室温に冷却し、１００ｍ１のＨ２Ｏに注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。溶媒を蒸発させてシロップを得た。これについてカラムクロマトグラフィーを行なったところ、白色非晶質固体（１２５ｍｇ）が得られた：ＭＳ　ＦＡＢ　５２６（Ｍ＋１）”、ＩＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３゜３００　ＭＨｚ）　δ　１．６５　（ｓ、３Ｈ，Ｃ５，ＣＨ３）、２．０５　（ｍ、１．　Ｈ−２’）、２．４０　（ｍ、１．　Ｈ−２°）、３．２６　（ｍ、１．　Ｈ−４°）、３　、’５２　（ｍ、２．　ＣＨ２）、４，３０（ｍ、１．Ｈ−３°）、６．３５　（ｔ、１．　Ｊ＝４　Ｈｚ、Ｈ−１’）、７．５０　（ｍ、１６．ＡｒＨ，Ｈ−６）、８．７２　（ｓ、１．Ｈ−３）。

夾施」Ａ１−２−デオキシ、３−アジド−４−チオ−−Ｄ−リボフラノ２Ａａ二りえ２（５）。１０ｍ１の８０％ＣＨ３ＣＯ０Ｈに４（５０ｍｇ）を加えた溶液を６０℃ で２時間加熱し、室温に冷却し、減圧下蒸発させて乾燥して固体を得た。これを厚い調整用プレート上で精製して（ＣＨＣＩ３／ＭｅＯＨ８５：１５）、１２ｍｇの五を得た；融点１２０−１２１℃；ＭＳ　ＦＡＢ　２８４　（Ｍ＋１）÷； ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００　ＭＨｚ）　δ　１，８０（ｓ、３．　ＣＨ３）、２．３４　（ｍ、１．　Ｈ−２°）、２．４５（ｍ。

１、Ｈ−２’）、３．４０　（ｍ、１．　Ｈ−４°）、３．６５　（ｍ、２゜ＣＨ２）、４．５２　（ｍ、１．　Ｈ−３°）、５．３４　（ｔ、１．Ｊ＝２゜４　Ｈｚ、０Ｈ−５’）、６．１６　（ｔ、１．　Ｊ＝４　Ｈｚ、Ｈ−１°）、７．８４　（ｓ、１．　Ｈ−６）　１１．３６　（ｓ、１．　Ｈ−３）。

大施珂下５−ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ−４−Ｓ　−ヒドロキシペンタン　メチルエステル（２）。２５０ｍ１のエタノールに溶解したラクトン６　（５ｇ、１４．１ｍｍｏ　ｌ）に、水１４．５ｍ　ｌにＮａＯＨ（５６４ｍｇ、１４．１ｍｍｏ　ｌ）を含む溶液を加えた。反応混合物を１時間攪拌し、次いで、溶媒をトルエンとの共沸混合物にして除去した。残留物を５０ｍ１のジメチルスルホキシド及び１０ｍ１のトルエンに再溶解し、硫酸ジメチル（１，６ｍ　ｌ、１７ｍｍｏｌ）で処理した。２時間、２５℃で攪拌した後、反応混合物を２００ｍ１の氷水に注ぎ、２Ｘ７５ｍｌのエチルエーテル及びｌＸ５０ｍ１のトルエンで抽出した。有機層を４Ｘ１００ｍｌの水で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳ０４）。溶媒を真空中で除去し、残留物を３＝１のヘキサン／酢酸エチルを用いて４０−ｇシリカゲルバッドに通して濾過した。溶媒を除去したところ、５．３０ｇ　（９７％）の粘性の油を得た；ＦＡＢ　ＭＳ　３２９　（ｍ−ｔ−ブチル）＋；ＩＨＮＭＲ（ＣＣ１４）　δ　７．８−７．２　（ｍ、１０．ＡｒＨ）、３．７　（ｍ、１．　Ｈ−４）、３．６５　（ｓ、３，０ＣＨ３）、３６（ｍ、１．　ＯＨ）、３．４　（ｍ、２．　ＣＨ２）、２．４　（ｍ、２゜ＣＨ２）、１．８　（ｍ、２．　ＣＨ２）、１．１　（ｓ、９．　ｔ−ブチル）。

実施１５−ｔニプチルジフェニルシ旦オキシ−４−ユＥｌ二、ヨードペンタン　メチルエステル１（８）。２５０ｍ１のトルエンにユ（４，３３ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）を加えた溶液に、窒素雰囲気下でトリフェニルホスフィン（５，９ｇ、２２．４ｍｍｏ　Ｉ）、イミダゾール（２，３ｇ、３３．６ｍｍｏｌ）及びヨウ素（４，２６ｇ。

１６．８ｍｍｏ　＋）を加えた。反応混合物を予熱した加熱マントルに入れ、１時間還流させた。反応混合物を、２００ｍ１の飽和Ｎ　ａ　ＨＣＯ３に注ぐことによって急冷した。ヨウ素の色が有機層に残るまで、ヨウ素を添加することによって過剰のトリフェニルホスフィンをなくした。次に、有機層を５％チオ硫酸ナトリウム溶液（２Ｘ１００ｍｌ）及び２ｘ２００ｍｌの水で洗浄した。６：１のへキサン／酢酸エチルを用いてフラッシュクロマトグラフィーにより生成物を精製した：収ｊ１４．７５ｇ（８５％）の粘性の油；［α］Ｄ２５十６５°　（Ｃ＝１．ＣＨＣｌ３）；ＦＡＢ　ＭＳ　４９７（Ｍ　＋ｉ（）◆、４３９（Ｍ−ｔ −ブチル）＋；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　６７．８９　（ｍ、４．ＡｒＨ）、７．４　（ｍ、６゜ＡｒＨ）、４．１５　（ｍ、１．　Ｈ−４）、３．８５　（ｍ、２．　ＣＨ２）、３．７　（ｓ、３．　０ＣＨ３）、２　５（ｍ、２．ＣＨ２）、２．２５（ｍ。

１、　Ｈ−２）、２．１　（ｍ、１．　Ｈ−２）、１．１　（ｓ、９．　ｔ−ブチル）。

夾施刺１４−　Ｓ　−アセチルチオ−５−ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ吉草　メチルエステル（旦）。チオ酢酸（１ｍ　ｌ、１３．２ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、２０ｍ１のトルエンに加えた。

１、ｍｌメタノール洗液を含有するメタノール（１１ｍ、ｌ、１１ｍｍｏｌ）に水酸化テトラブチルアンモニウムを含む１Ｍ溶液を、チオ酢酸溶液に加えた。メタノールをトルエンとの共沸混合物にして除き、残留塩を３０ｍ１のトルエンに再溶解した。２０ｍ１のトルエン洗液を含む塩溶液を、５０ｍ１のトルエンに８（４，７５ｇ。

９．６ｍｍｏｌ）を含む溶液に加え、窒素の下で１８時間攪拌した。

溶媒を除去し、塩を沈殿させた後、粗生成物を、６：１のヘキサン／酢酸エチルを用いてフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。収量３．４７ｇ　（８１％）の粘性の油；　［αコ。”５−１．６．０”（Ｃ＝０．７．ＣＤＣｌ、）；ＦＡＢ　ＭＳ　４４５　（Ｍ＋Ｈ１゜３８７（Ｍ−ｔ−ブチル）”；　ＩＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ３）　６７．６５（ｍ、４．ＡｒＨ）、７．４　（ｍ、６．ＡｒＨ）、３．８　（ｍ、１゜Ｈ−４）、３．７　（ｓ、３．　０ＣＨ３）、３．７　（ｍ、２．　ＣＨ２）、２．３５　（ｍ、２．　ＣＨ２）、２３（ｓ、３．アセチルＣＨ３）、２．２　（ｍ、１．　Ｈ−２）、１．９　（ｍ、１．　Ｈ−２）、１０５（ｓ、９．　ｔ−−ブチル）。

寒胤猶１１−０−アセチル−５−０−ｔ−ブチルジフェニルシリル−４二チオ−２，３− ジデオキシリボフラノ−２（１０）。１４ｍ　ｌの乾燥ヘキサン及び２ｍｌのトルエンに９　（Ｉｇ、２．２５ｍｍｏ　ｌ）を加えた溶液を窒素雰囲気下で一７８℃に冷却した。Ｄｉｂａｌ−Ｈ（３，０ｍｌ、４．５ｍｍｏ　ｌ）の１．５Ｍ　）ルエン溶液を２分間にわたって加え、さらに３０分間攪拌を続けた。反応混合物を１．２ｍｌのメタノールで急冷し、２５℃にした。次に、２．５ｍｌの飽和Ｎ　ａ　ＨＣＯ３溶液、続いて１．５ｍｌの酢酸エチルを加えた。混合物をＭｇＳＯ４で乾燥した。固体を濾過により除き、酢酸エチルで洗浄した。溶媒を真空中で除去した後、残留物を２０ｍ１のジクロロメタンに再溶解し、窒素下、− 晩中攪拌しながらＤＭＡＰ　（１０ｍｇ）、ピリジン（０，９ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）及び酢酸（０，４７ｍ１゜５ｍｍｏ　Ｉ）で処理した。反応混合物を５０ｍ１の水と、次いで５０ｍ１の１％Ｎ　ａ　ＨＣ０３と共に振盪した。乾燥（Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４）後、溶媒を真空中で除き、残留物を８＝１のへキサン／酢酸エチルを用いてフラッシュクロマトグラフィーにより精製した：収量０．７８ｇ（８３％）の粘性の油；ＦＡＢ　ＭＳ　３５７　（Ｍ−ｔ−ブチル）＋；ＩＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ３）　δ　７．６８　（ｍ、４．ＡｒＨ）、７．４　（ｍ、６．ＡｒＨ）、６．０　（ｍ、１．ＡｒＨ）、３．７５（ｍ。

１、Ｈ−５）、３．５　（ｍ、１．　Ｈ−４）、３．５　（ｍ、１．　Ｈ−５）、２．１５　（ｍ、２．　ＣＨ２）、２．０　（２ｓ、３．芳香族アセチル）、１．９　（ｍ、２．　ＣＨ２）、１．０５　（ｓ、９．　ｔ−ブチル）。

寒施胴遣９−５−〇−ｔ−ブチルジフェニルシリルー４−チオ−２，３−ジデオキシ−Ｄ −リボフラノシル　−６−クロロプリン（よユ）。

１７ｍ１のアセトニトリルに１０　（０，４３ｇ、１．０４ｍｍｏ　Ｉ）及び６ −クロｏプリン（０，２４ｇ、１．５６ｍｍｏ　Ｉ）を含む混合物を０℃に冷却し、塩化ジエチルアルミニウム（０，５９ｍ１゜１．０６ｍｍｏ　１）の１．８Ｍトルエン溶液を１分間にわたって加えた。０℃で５分間及び２５℃で１０分間攪拌し続けた。反応混合物を、２０ｍ１のジクロロメタン及び１０ｍ１の飽和ＮａＨＣＯ３の混合物に注ぐことによって急冷した。有機層を乾燥（Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４）　Ｌ、真空中で濃縮した。残留物を９＝１のへキサン／酢酸エチル、次いで４：１のへキサン／酢酸エチルでフラッシュクロマトグラフィーを行なった。

溶媒を除去して１：１　α／βアノマー混合物を得た：収量０．３１５ｇ　（５９％）；ＦＡＢ　ＭＳ　５０９　（Ｍ＋Ｈ）”；βアノマーのＩＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ３）　δ　８．７　（ｓ、１゜Ｈ−２）、８．４５　（ｓ、１．　Ｈ−８）、７．７　（ｍ、４．ＡｒＨ）、７．４　（ｍ、６．ＡｒＨ）、６．２７　（ｍ、１．７’−Ｈ）、３．９５（ｍ、１．　５’−Ｈ）、３．８５　（ｍ、２．４ ’−Ｈ，５’−Ｈ）、２．４５　（ｍ、２．　２’−Ｈ’ｓ）、２．２５　（ｍ、１．　３°−Ｈ）、１．８５　（ｍ、１．３’−Ｈ）、１．１　（ｓ、９．　ｔ−ブチル）。

夾施透１ユ９−５−０−ｔ−ブチルジフェニルシリル−４−チオ−２，３−ジデオキシ−Ｄ −リボフラノシル　−２，６−クロロプリン（旦）。

１０ｍ１のアセトニトリルに１０　（０，２５ｇ、０．６ｍｍｏ　ｌ）、２．６ −ジクロロプリン（０，１４２ｇ、　０．７５ｍｍｏ　ｌ）を含む混合物を０℃ に冷却し、塩化ジエチルアルミニウム（０，３４５ｍ１゜０．６２ｍｍｏ　ｌ）の１．８Ｍトルエン溶液を１分間にわたって加えた。０℃で５分間、更に２５℃ で１０分間攪拌し続けた。反応混合物を、２０ｍ１のジクロロメタン及び１０ｍ１の飽和Ｎ　ａ　ＨＣＯ３の混合物に注ぐことによって急冷した。有機層を乾燥（ＭｇＳ０４）し、真空中で濃縮した。残留物を１５＝１のトルエン／酢酸エチルでフラッシュクロマトグラフィーを行なった。溶媒を除去して９８ｍｇ（３０％）（７）１２Ｇ得た。ＦＡＢ　ＭＳ　５４３（Ｍ＋Ｈ）十；’ＨＮＭＲ（ＣＤ　ＣＩ　３）　δ　８．４７　（ｓ、１．　Ｈ−８）、７．７（ｍ、４．ＡｒＨ）、７．４　（ｍ、６．ＡｒＨ）、６．２２　（ｍ、１゜１’−Ｈ）、３．９６　（ｍ、１．５’−Ｈ）、３．８５　（ｍ、２゜４°−Ｈ２５°−Ｈ）、２．４５　（ｍ、２．２’−Ｈ’ｓ）、２２５（ｍ、１．　３°−Ｈ）、１．８２　（ｍ、１．　３°−Ｈ）、５’−０−ｔ−ブチルジフェニルシリル−４゛−チオ− ２′、３°−ジデオキシシチジン（１３）、１０　（０，２６ｇ、０．６３ｍｍｏ　ｌ）、シトシン（０，１０５ｇ５０．９５ｍｍｏ　ｌ）及びカリウムノナフルオロブタンスルホネート（０，７７ｇ、２゜３ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素下、１２ｍ１の乾燥アセトニトリル中に懸濁させた。ＨＭＤ　Ｓ（０，１３５ｍ１．０．６３ｍｍｏり及びＴＭＳ−ＣＩ　（０，３７ｍ１，２．９ｍｍｏ　ｌ）を注射器で次々に加え、反応混合物を２５°Ｃで一晩中攪拌した。反応混合物を２０ｍ１のジクロロメタン及び１５ｍ１の飽和ＮａＨＣＯ３の混合物に注ぎ振盪した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）Ｌ、真空中で濃縮した。アノマー混合物を、アンモニア雰囲気を用いた７、５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３による分取ＴＬＣによって分離した：収量はβ−アノマーが７８ｍｇ、　α−アノマーが１１７ｍｇであり、全体収量は１９５ｍｇ　（６６，５％）：ＦＡＢ　ＭＳ　４６６　（Ｍ＋Ｈ）”；α／βアノマーの’　ＨＮ　Ｍ　Ｒ（ＣＤＣ１３）　δ　８．１２　（ｄ、１．６−Ｈ）、７．７　（ｒｎ、４゜ＡｒＨ）、７．４　（ｍ、６．ＡｒＨ）、６．３２　（ｍ、１．　１°−Ｈ）、５．９−５．３　（ハンプ（ｈｕｍｐ）、１．　ＮＨ２）、５．７５　（ｄ、１゜５−Ｈ）、５．４５　（ｄ、１．５− Ｈ）、３．７５　（ｍ、３゜４°−Ｈｏ、ｅ’ｓ、３’−Ｈａ、ｓ’ｓ）。

実り月↓ユ５’−０−ｔ−ブチルジフェニルシリル−４゛−チオ−３゛−デオキシチミン≧ （よＡ）。実施例１１の手順を用いて、４゛−チオリボースよ遼（０，３５ｇ、０．８３ｍｍｏ　ｌ）、チミン（０，１３ｇ。

１．０５ｍｍｏ　ｌ）、カリウムノナフルオロブタンスルホネート（０，８７５ｇ、２．５４ｍｍｏ　Ｉ）、ＨＭＤＳ　（０，１７５ｍ３０．８３ｍｍｏ　ｌ）及びＴＭＳ−ＣＩ　（０，４ｍｌ、３．２ｍｍｏ　１）を処理し、分取ＴＬＣ（８：１　ジクロロメタン／アセトニトリル）によって精製して、４：３のα：β アノマー混合物として、３７１ｍｇ　（９２，５％）の１４を得た；ＦＡＢ　ＭＳ　４８１　（Ｍ＋Ｈ）”；ＩＨＮＭＲ（ＣＤＣ１３）　δ　９．６５　（ｓ、１．ＮＨ）、７．７　（ｍ、４．ＡｒＨ）、７．４　（ｍ、６．ＡｒＨ）、６．３（ｍ、１．　１’　Ｈａ、ｓ）、３．８８　（ｍ、１．　４°−Ｈ，）、３．８２　（ｄ、１．　５’−Ｈｌｌ）、３．６６　（ｄ＋ｍ、２，４°　ＨＢ＋５ ’−８，２）、２．４−１．８５　（ｍ、４．　２°　Ｈｏ　＋　８　”　＊３ °　Ｈ（１，Ｉｔ’ｓ）、１．９５　（ｓ、３．　５β−ＣＨ５）、１．７７（ｓ、３．　５６　ＣＨ３）、１．１１．　（ｓ、９．　β−ｔ−ブチル）、１．０７　（ｓ、９．　ａ−ｔ−ブチル）。

裏施ガユユ９−５−０−ｔ−ブチルジフェニルシリル−４−チオ−２３ニジデオキシ−Ｄ− リボフラノシル　−２−クロロ−６−アえムブｙ＞（１５）。１２　（１５０ｍｇ）及び飽和エタノール性アンモニア（５０ｎ　Ｉ）の混合物を、グラスライニングのステンレス鋼製加圧容器中で５０℃にて４８時間加熱した。反応混合物を蒸発させて乾燥しシロップを得た。これを９９＝１のＣＨＣＩ３−ＭｅＯＨで展開する２つの厚いシリカゲルプレート（ＡｎａｌｔｅｃｈＳＧＦ、　１０００　 μｍ）上で精製した。生成物をＣ’Ｈ，ＣＩで溶離し、蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ−シクロヘキサンから再結晶して、純粋な−１５（１２５ｍｇ、８６％）を得た；融点１２３−１２５℃；ＦＡＢ　ＭｇＳ２４　（Ｍ十Ｈ）”、ＩＨＮＭＲ（ＣＤＣ１３）　δ　８．１４（ｓ。

１、Ｈ−８）、７．７２　（ｍ、４．ＡｒＨ）、７．４２　（ｍ、６゜Ａ　ｒ　Ｈ）、６．０２　（ｂｒｓ、２．ＮＨ２）、６．１６　（ｍ、１’−Ｈ）、３．９３　（ｍ、１．　５°−Ｈ）、３．８４　（ｍ、１．５’−Ｈ）、３．７３　（ｍ、１．　４°−Ｈ）、２．３６（ｍ、２．２’−Ｈ）、’２．１８　（ｍ、１．３’−Ｈ）、１．９０　（ｍ、１．３’−Ｈ）、１．１　（Ｓ、９．　ｔ− ブチル）。

夾施孤１１９−５−０−ｔ−ブチルジフェニルシリル−４−チオ−２，３〜ジデオキシ−Ｄ −リボフラノシル　−２，６−ジアミツブリン（１６）。

１０ｍ１の９５％エタノールに１２　（１１７，５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びアジ化リチウム（５４ｍｇ、１．１ｍｍｏ　Ｉ）を含む溶液を、２時間還流した。溶媒を真空中で除去し、残留物をジクロロメタンと水の間で分配した。有機層を乾燥（ＭｇＳ０４）し、真空中で濃縮して残留物を得て、これを１５ｍ１のエチルエーテルに再溶解した。次にエーテル溶液をＬＡＨ（０，１ｇ、２．６ｍｍｏ　１）で０．５時間、２５℃にて処理した。２０％の水／ＴＨＦを加えて過剰のＬＡＨを分解し、次いでセライトを加えて濾過した。残留物をエチル／エーテルで洗浄し、濾液を濃縮して粗ジアミノ化合物を得た。生成物を９５：５のクロロホルム／メタノールを用いる分取ＴＬＣによって精製して９０ｍｇ　（８０％）の１６を得た。

ＦＡＢ　ＭＳ　５０５（Ｍ＋Ｈ）”；’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ３）δ　７．８３　（ｓ、１．　Ｈ−８）、７．６８　（ｍ、４．ＡｒＨ）、７．４２　（ｍ、６．ＡｒＨ）、６．０２　（ｍ、１．　１°−Ｈ）、５．４　（ｂ　ｒ　ｓ、２．　ＮＨ２）、４．６８　（ｂｒｓ、２．ＮＨ２）、３．９３　（ｍ、１．５’−Ｈ）、３．８４　（ｍ、１．５’−Ｈ）、３．７２　（ｍ、１．４’−Ｈ）、２．３５　（ｍ、２．２’−Ｈ’ｓ）、２．１７　（ｍ、１．　３°−Ｈ）、１．８８　（ｍ、１．　３°−Ｈ）、１．８　（ｂｒｓ、ＣＨ，ＯＨ）、１．４３　（ｓ、ＣＨ，ＯＨ）、１．１　（ｓ、９．　ｔ−ブチル）。

大施■１１９−４−チオ−２，３−ジデオキシ−Ｄ−リボフラノシル　−２゜６−ジアミツプリン（ヨユ）。ＴＨＦ　（０，１７ｍｍｏ　ｌ）に１６（５０ｍｇ、０．１ｍｍｏ　１）、酢酸（７μｍ、０．１２ｍｍｏｌ）及び０．１７ｍ　ｌの１Ｍフッ化テトラブチルアンモニウムを含む混合物を、ｌｏｍｌのテトラヒドロフラン中で一夜攪拌した。２ｍｌの水及び１５ｍ１のエチルエーテルを加え、その後５分間攪拌した。

有機層を２ｍｌの水で抽出し、次に合わせた水溶液を１５ｍ１のエチルエーテルで洗浄した。水性抽出物を真空中で１ｍｌに濃縮し、４−ｍｌのダウエックスＩＸ４　１００−２００　（−３０Ｈ）カラムにかけて、水で、次いで２０％水性メタノールで溶離することによってテトラブチルアンモニウム塩を除いた。溶媒を真空中で除去し、生成物をエタノール／酢酸エチルから再結晶して、１９．５ｍｇ（５４％）の↓ユを得た；融点１８７−９０℃分解；ＦＡＢ　ＭＳ２６７　（Ｍ＋Ｈ）”；ＩＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）　６　８．０（ｓ、１．Ｈ−８）、６．６８　（ｂｒ、ｓ、２．　ＮＨ２）、５．９５　（ｍ、１．　１°−Ｈ）、５．７１　（ｂｒｓ、２．ＮＨ２）、５．２２　（ｍ、１．５’−０Ｈ）、３．７３　（ｍ、１．　５°−Ｈ）、３．５７　（ｍ、２．４’−Ｈ，５’−Ｈ）、２．４　（ｍ、１．　２°−Ｈｏ）、２．３２　（ｍ、１．　２°−Ｈ）、２．１２　（ｍ、１．　３°−Ｈ）、１．９８　（ｍ、１．　３°−Ｈ）。

大施■１１９−４−チオ−２３−ジデオキシ−Ｄ−リボフラノシル　−２−クロロ−６−アミノプリン（ヨ溢）。５ｍｌのＴＨＦによ互（１００ｍｇ、０．１９ｍｍｏりを含む溶液に、ＣＨ３ＣＯ０Ｈ（１４μｌ、０．２４ｍｍｏ　ｌ）、及びＭｅＯＨ（０，４ｍ　ｌ、０４ｍｍｏｌ）にフッ化テトラブチルアンモニウムを含む１Ｍ溶液を加え、次いで１時間攪拌した。１滴のピリジンを加え、次に溶媒を真空中で蒸発させた。溶離剤として９０：１０のＣＨＣｌ　３　Ｍ　ｅ　ＯＨを用いる分取ＴＬＣで精製して粗生成物１８を得、これをＥｔＯＨで結晶化して純粋な１８（３８ｍｇ、７０％）を得た；融点１２５−１２７℃；ＦＡＢ　ＭＳ　２８６（Ｍ＋Ｈ）＋；’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６）　６８．４５　（ｓ、１．　Ｈ−２）、７．８０　（ｂｒｓ、２．ＮＨ２）、６．１０　（ｍ、１．１’−Ｈ）、５．１２　（ｍ、１．５’−０Ｈ）、３．７５　（ｍ、１．　４°−Ｈ）、３．６１　（ｍ、２．　５°−Ｈ）、２．４０　（ｍ、２．　２°−Ｈｏ）、２．１５　（ｍ、１．　３°−Ｈ）、２．０　（ｍ、１．　３’−Ｈ）。

Ｘに遡１ユ４′−チオ−２°、３°−ジデオキシ−グアノシン（旦）。

２０ｍ１の０．７５Ｍ　ＴＥＡＢバッファーによユ（５０ｍｇ。

０．１８ｍｍｏ　ｌ）を含む溶液に、６μｌのアデノシンデアミナーゼを加えた。反応混合物を１２日間攪拌し、その後凍結乾燥した。

残留物を、４：１のＣＨＣｌ３　ＭｅＯＨによる分取ＴＬＣによって精製した。

粗生成物を熱ＥｔＯＨから再結晶化して１９（４０ｍｇ。

８０％）を得た：融点１８０−１８３℃、ＦＡＢ　ＭＳ　２６８（Ｍ＋Ｈ）”； ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）　δ　１０８（ｂｒ、１．ＮＨ）、８．０　（ｓ、１．　Ｈ−８）、６．６　（ｓ、２゜ＮＨ２）、５．９０　（ｍ、１．　’１ °−Ｈ）、５．１２　（ｂｒｓ、１゜５’−０Ｈ）、３．７２　（ｍ、１．　４ °−Ｈ）、３．５５　（ｍ、２゜５°−Ｈ）、２．３５　（ｍ、２．　２°−Ｈｏ）、２．１５　（ｍ、１゜３°−Ｈ）、１．９５　（ｍ、１．　３°−Ｈ）。

失態ｊＬＬｆ１９−４−チオ−２３−ジデオキシ−Ｄ−リボフラノシル　−６−りｏｏプリン（ λ麿）。３ｍｌのＴＨＦに１１（０，３１５ｇ。

０．６２ｍｍｏｌ）、酢酸（３０μＬ　Ｏ，６３ｍｍｏ　り及びフッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＨＦ中ＬＭ、０．６５ｍ１゜０．６５ｍｍｏ　Ｉ）を含む溶液を、窒素の下で、１０分間攪拌した。

溶媒を真空中で蒸発させ、残留物をジクロロメタン、次いで１９：１のクロロホルム／メタノールでフラッシュクロマトグラフィーを行い、０．１６４ｇ　（９８％）のアノマーを得た。アノマーを１９＝１のクロロホルム／メタノールで遠心クロマトグラフィーすることによって分離した：収量はβ−アノマー１０ｍｇ；融点１２５−１２８℃；　［α］Ｄコ５＋２．５°　（Ｃ＝０．１゜ＣＨ３０Ｈ）；ＦＡＢ　ＭＳ　２７１　（Ｍ＋Ｈ）◆；１）（ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、）　６９．０　（ｓ、１．　Ｈ−２）、８．８　（ｓ、１゜Ｈ−８）、６．３　（ｍ、１．　５°−０Ｈ）、３．８　（ｍ、１．　５’−Ｈ）、３．６５　（ｍ、２．　４°−Ｈ，５’−Ｈ）、２．６　（ｍ、１．　２’−Ｈ）、２．４５　（ｍ、１．２’−Ｈ’）、２．２　（ｍ、１．　３°−Ｈ）、２．０　（ｍ、１．　３ °−Ｈ）。

失施透１ユ４−チオ−２°　３′−ジデオキシイノシン（λ１）。２０ｍ１の０．７５Ｍ　ＴＥＡＢバッファーに２０のα／βアノマ（８２ｒｎ　ｇ　％０．３ｍｍｏ　＋）を含む溶液に、３μｍのアデノシンデアミナーゼを加えた。反応混合物を３４時間攪拌し、その後凍結乾燥した。残留物を、１％の酢酸を含有する６：１のクロロホルム／メタノールでの分取ＴＬＣによって精製した。粗生成物をメタノール／四塩化炭素から再結晶化して３０．５ｍｇ　（７９％）のλ↓を得た；融点１９５−１９７℃；　［α］　ｏ２５−１３．９°　（Ｃ＝０．１．Ｈ２Ｏ）’ ；ＦＡＢ　ＭＳ　２５３　（Ｍ＋Ｈ）＋：　ＩＨＮＭＲ（Ｄ２゜）δ　８．５　（ｓ、１．　Ｈ−２）、８．２　（ｓ、１．　Ｈ−８）、６．２　（ｍ、１．　１’−Ｈ）、３．９５　（ｍ、１．５’−Ｈ）、３．８　（ｍ、２．　４’−Ｈ，５°−Ｈ）、２．５　（ｍ、２．　２°−Ｈ’ｓ）、２．３　（ｍ、１．　３ °−Ｈ）、１．９　（ｍ、１．　３’−Ｈ）。

大施透）ＡＮ６−メチル−４゛−チオ−２’、３’−ジデオキシアデノシン（且）。

鋼製ホンへ中で、２０　（０，１３２ｇ％０．４９ｍｍｏ　ｌ）のアノマー混合物を、２０ｍ１の４０％メチルアミン水溶液と共に８０℃にて一夜攪拌した。溶媒を真空中で除去した後、残留物を、９：１のクロロホルム／メタノールでの分取ＴＬ、Ｃによって精製して１００ｍｇ（７７％）のアノマー混合物を得た。アノマーを１０％水性メタノールを用いてダウエックスＩＸ４　（−ＯＨ）カラムによって分離して、３７ｍｇの粗製βアノマーを得て、これをヘキサン−酢酸エチルから再結晶化し、２２．５ｍｇの純粋なβアノマーをＨＰＬＣによって得た；融点１３１−１３４℃、ＦＡＢ　ＭＳ　２６６（、Ｍ＋Ｈ）”；ＩＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）　δ　８．４　（ｓ、１゜Ｈ−２）、８．２　（ｓ、１．　Ｈ −８）、７．７　（ｂｒｓ、１．ＮＨ）、６．２　（ｍ、１．　１°−Ｈ）、５．１５　（ｍ、１．　５°−０Ｈ）、３．７５　（ｍ、１．　５°−Ｈ）、３．６　（ｍ、２．　４’−Ｈ，５′−Ｈ）、２．９５　（ｓ、３．　ＣＨ３）、２．４　（ｍ、２．　４°−Ｈ’ｓ）、２．１５　（ｍ、１．　３°−Ｈ）、２．０　（ｍ、１．　３°−Ｈ）。

失施週ｌユ１止ゴブ≧λＬＪ」≦巧シコシ１ｆフク２（且）。

α／βアノマー２０　（８０ｍｇＳ０．３ｍｍｏｌ）及び５０ｍ１の飽和アンモニア／メタノール混合物を、８０℃で３日間加熱した。

溶媒を真空中で除去し、残留物を９：１のクロロホルム／メタノールでの分取ＴＬＣにより精製して、５５ｍｇ　（７３％）のアデノシンアノマーを得た。アノマー混合物をイオン交換クロマトグラフィー（水で溶離）で分離して、エタノール／酢酸エチルから再結晶すると、過半量がβ−アノマーである７、５ｍｇを得た；融点１７９−１８２℃；　’ＨＮＭＲ（ＤＭＳ　Ｏｄ６）　δ　８．４　（ｓ、１゜Ｈ−２）、８．１５　（ｓ、１．　Ｈ−８）、７．２５　（ｓ、２．　ＮＨ２）、６．１５　（ｍ、ａ、１°−Ｈ）、５．１５　（ｂｒｓ、１，５°− ０Ｈ）、３．７５　（ｍ、１．５’−Ｈ）、３．６　（ｍ、２．　４’−Ｈ，５ ’−Ｈ）、２．４　（ｍ、２．２”−Ｈ’ｓ）、２．１５　（ｍ、１．　３°− Ｈ）、２．０　（ｍ、１．　３°−Ｈ）。

大嵐例）ユ４゛−チオ−２゛、３°−ジデオキシシチジン（６１Ａ）。化合物１Ｊ（７８ｍｇ、０．１７ｍｍｏ　Ｉ）を４ｍｌのテトラヒドロフランに溶解し、モしてＴＨＦ　（０，２ｍｌ、０．２ｍｍｏ　＋）中の１Ｍフッ化テトラブチルアンモニウム及び酢酸（１１５μｍ、０．２ｍｍｏｌ）を加え、その後２５℃で一晩中攪拌した。反応混合物を１０ｍ１の水及び１０ｍ１のエチルエーテルで希釈し、その後５分間攪拌した。

水性相を２０ｍ１のエチルエーテルで洗浄し、真空中で１ｍｌに濃縮した。水性残留物を、水を用いる５−ｍ１ダウエツクス１×４（−ＯＨ）カラムで溶離して、テトラブチルアンモニウム塩を除いた。粗生成物（３３ｍｇ、８７％）は再結晶が難しく、酢酸エチル及びエチルエーテルで非晶質固体として沈殿させて、２６．５ｍｇ（６９％）のλＡを得た；融点８３−８５℃、ＦＡＢ　ＭＳ　２２８　（Ｍ＋Ｈ）＋；Ｉ）（ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）　δ　８．０　（ｄ。

１、Ｈ−６）、７．１　（ｂ　ｒ　ｄ、Ｚ、ＮＨ２）、６．１５　（ｍ、１゜１ °−Ｈ）、５．７４　（ｄ、１．Ｈ−５）、５．１　（ｂｒｓ、１，５゜−ＯＨ）、４．２　（ｑ、ＥｔＯＡｃ）、３．６４　（ｍ、１．５’−Ｈ）、３．５　（ｍ、２．　４°−Ｈ，５’−Ｈ）、２．１８　（ｍ、１．２’−Ｈ）、２．０　（ｍ、２．　２°−Ｈ，３’−Ｈ）、１．９９　（ｓ、ＥｔＯＡｃ）、１．８２　（ｍ、１．　３’−Ｈ）、１．１８　（ｔ、ＥｔＯＡｃ）。

大施透１１４゛−チオ−３°−デオキシチミジン（λ五）。３ｍｌのテトラヒドロフランに１４　（０，１３６ｇ、０．２８ｍｍｏ　ｌ）を含む溶液に、酢酸（１７μｍ、０．３ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ中の１Ｍフッ化テトラブチルアンモニウム０．３ｍｌ　（０，３ｍｍｏ　１）を加え、その後１時間攪拌した。１滴のトリエチルアミンを加え、次に溶媒を真空中で除いた。残留物を、ジクロロメタンを用い、次いで９５：５のクロロホルム／メタノールを用いてフラッシュクロマトグラフィーを行い、定量的収量のアノマー混合物を得た。アノマーをイオン交換クロマトグラフィー（水で溶離）によって分離して、フラクション１（１：３　α／β）、フラクション２（１：１　α／β）及びフラクション３（４：１　α／β）を得た。フラクション１を酢酸エチル／ヘキサンから結晶化すると、３．９ｍｇの２５（２：３　α／β）を得た。同様にフラクション２から１８．６ｍｇの２５（７：３α／β）を得た。フラクション２の母液の再結晶で更に８．８ｍｇのλ 支（１：１　α／β）を得た；融点１３８−１４０℃；ＦＡＢ　ＭＳ　２４３　（Ｍ＋Ｈ）＋；ｉＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ　１１．３　（ｂｒｓ、１．ＮＨ）、７．８８．７．７３　（２ｓ、１゜Ｈａ−６＋　Ｈａ−ａ）、６．１５　（ｍ、１．　１°　Ｈａ　、　ｓ　）、５．１５゜５．０　（２ｍ、１．　５’ −ＯＨ，２，６）、３．７３　（ｍ、０．５゜４°−Ｈａ）、３．６８　（ｍ、０．５．　５−Ｈａ）、３．６２−３．４２　（ｍ、１．５，４゛−Ｈ，，５° −Ｈ，，５°−Ｈａ）、３．５６（ｍ、０．５．５’−Ｈ，）、２．３　（ｍ、０．５．　２−ＨＩＤ）、２．２４−２．０４　（ｍ、２．５．　２°　Ｈａ、Ｂ、３　’　Ｈａ、β）、２．０４−１．８　（ｍ、１．　３°　Ｈｏ　、　ｓ　）、１．８　（２ｓ、３゜５ａ、ｓ　ＣＨ３）。

夾旅貢２４５’−０−ｔ−ブチルジフェニルシリル−４゛−チオ−２’、３’−ジデオキシ −５−フルオロシチジン（λ６）。１０　（０，３５ｇ。

０．８４ｍｍｏ　ｌ）、５−フルオロシトシン（０，１７ｇ。

１．３２ｍｍｏｌ）及びカリウムノナフルオロブタンスルホネート（１０５ｇ、３．１１ｍｍｏ　］）の混合物をアルゴン下で１９ｍ１の乾燥アセトニトリル中に懸濁させた。ＨＭＤＳ　（０，２０ｍ１．０．９５ｍｍｏｌ）及びＴＭＳ−ＣＩ　（０，５１ｍ　ｌ、　４．０２ｍｍｏりを注射器で次々に加え、反応混合物を２５℃で２４時間攪拌した。反応混合物を５０ｍ１のジクロロメタン及び３０ｍ１の飽和ＮａＨＣＯ３の混合物に注ぎ２時間攪拌した。層を分離し、水性層を５０ｍ１のジクロロメタンで２回抽出し、合わせた抽出物を乾燥（Ｎ　ａ　２Ｓ　０４）　シ、溶媒を減圧下で除去して、０．３８５ｇの残留物を得た。粗生成物を１０％Ｍ　ｅ　ＯＨ／　ＣＨＣ１３による分取ＴＬＣによって精製して、０．２２７ｇ　（５５，６％）のα−及びβ−アノマーの２＝３混合物を得た：ＦＡＢ　ＭＳ　４８４（Ｍ＋Ｈ）”；ＩＨＮＭＲ（ＣＤＣ１３）　δ　８．０９　（ｄ、０．４．　６−Ｈ。

Ｊ６．５イ＝６．５Ｈｚ）、　７．９９　（ｄ、０．６．　６　Ｈ，Ｊ６．５− Ｆ＝６．５Ｈｚ）、７．７１−７．６４　（ｍ、４．ＡｒＨ）、７．４５−７．３６　（ｍ、６．ＡｒＨ）、６．２４　（Ｍ、１．　１°−Ｈ）、６．００−５．００　（ｂ　ｒ、ｈｕｍｐ、ＮＨ２）、３．９０−３．６２（ｍ、３．　４° −Ｈ及び５°−Ｈ）、２．３９−２．２３　（ｍ、１゜２°−Ｈ）、２．１３− １．６５　（ｍ、３．２’及び３°−Ｈ）、１．０９　（ｓ、３．６．ＣＨ３）、１．０７　（ｓ、５．４．ＣＨ３）。

寒族搭２５４′−チオ−２゛、３°−ジデオキシ−５−フルオロシチジン（２７）。

実施例２２の手順を用いて、化合物λｌをＴＨＦに溶解し、酢酸及びＴＨＦ中の１Ｍテトラブチルアンモニウムで処理して、化合物スユを得る。

大施ガ２６実施例１１の手順を用いて、化合物旦を次のピリミジン塩基の１つと反応させて、相当する５°−〇−ｔ−ブチルジフェニルシリルによって保護された４゛−チオ−２°、３′−ジデオキシリボヌクレオシドを得る＝５−エチルシトシン：５ −フルオロシトシン；５−ブロモシトシン；５−ヨードシトシン；５−クロロシトシン；５−トリフルオロメチルシトシン；５−メチルシトシン；ウラシル；５ −フルオロウラシル；５−ブロモウラシル；５−ヨードウラシル；５−クロロウラシル；５−トリフルオロメチルウラシル；及び５−エチルウラシル。

失塞例１ユ実施例２２の手順を用いて、実施例２６で製造した化合物を脱保護して、相当する４゛−チオ−２゛、３°−ジデオキシリボヌクレオシドを得る。

犬上■１劃溢２゛　３′−ジデオキシ−４゛−チオリボヌクレオシドの　ＨＩＶ性　本発明の代表的な化合物を、ＨＩＶウィルスに感染したＭＴ−２及びＣＥＭ細胞における抗ＨＩＶ活性について試験した。その結果を２種の公知の抗ＨＩＶ薬剤であるＡＺＴ及びＤＤＣの活性と比較した。結果は以下の表■にまとめる。

表工ＡＺＴ　ｌ１ｆｆ−２０，１４９，３＞１６０　＞８２ＣＥＭ　＜Ｏ，Ｑ３　＞１０　＞３１３　＞９３ＤＤＣＭｒ−２０，４４＞９．８　＞２５　＞５２ＣＥＭ　Ｏ，０５５，３１２０＞６３何れのデータもいくっがの実験の平均値である。ＩＣ６゜は片対数曲線を当て嵌めるための回帰分析プログラムを用いて計算したＣＰＥ　（細胞変性作用）が５０％まで抑制される最少薬剤濃度（μｇ／ｍＬ）である。Ｔｃ２５は、細胞生活能力が２５％まで減少する最少薬剤側濃度である。ＳＩ（選択指数）はＴｃ２．をＩＤ５ｏで割ることによって計算する。ＴＡＩ（全体抗ウイルス指数）は細胞毒性曲線及び抗ウイルス曲線の間の領域である。

本発明を特定の有効な具体例を参照してかなり詳しく説明したが、明細書に記載し、かつ請求範囲で限定した本発明の範囲を逸脱することなく変更することは可能である。

要　約　書の化合物を提供する。式中、ＸはＨ，Ｎ、又はＦであり、Ｂはピリミジン、５− アザピリミジン、６−アザピリミジン、３−デアザピリミジン、プリン、３−デアザプリン、７−デアザプリン、８−アザプリン及び２−アザプリン塩基からなる群から選ばれる基である。

また、１−０−アセチル−５−０−ｔ−ブチルジフェニルシリル−４−チオ−２，３−ジデオキシリボフラノースは２°、３°−ジデオキシ−４′−チオリボヌクレオシドの製造に有用な中間体である。

国際調査報失 −一−−−句睦−ａ＋“０８　ｐｃ〒／　１−１（Ｑ　ｌ　ｔ　１１　Ｍ−１，。

Ｃｏｎｔｉｎｕａｔｉｏｎ　Ｐａｇｅ、　ＰＣＴ１０５９１１０２７：１２　＋５ｅｃｏｎｄ　５ｈｅｅセ、ｐａｇ＠　１１１、Ｃ１ａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　、、ｆｃｏｎセ１ｎｕｅｄ　１ＬＩＳ　ｃｌ、：　５４４／　ｉｃ２．１８３．２１１．２２０．２４４．２５４．２６５．２７６、２７７、３０９．３１１７５４６／　１１８゜Ｉｌ、Ｆｉｅｌｄｓ　５ｅａｒｃｈｅｄ　、、、１ｃｏｎセ１ｎｕｅｄｌしＳ　Ｃ１，：　５４６／１１Ｂ

Claims

【特許請求の範囲】

１．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｘ＝Ｈ、Ｎ３又はＦであり、Ｂはピリミジン、５−アザピリミジン、６−アザピリミジン、３−デアザピリミジン、プリン、３−デアザブリン、７−デアザプリン、８−アザプリン及び２− アザプリン塩基よりなる群から選ばれる基であるで表される抗ＨＩＶ活性を有する化合物。
２．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｘ＝Ｈ、Ｎ３又はＦであり、Ｂは次のビリミジン及びプリン塩基よりなる群から選ばれる基である：ウラシル；チミン；シトシン；５−エチルシトシン；５−メチルシトシン；５−フルオロシトシン；５−ブロモシトシン；５−ヨードシトシン；５−クロロシトシン；５ −トリフルオロメチルシトシン；５−フルオロウラシル；５−ブロモウラシル：５−ヨードウラシル：５−クロロウラシル；５−トリフルオロメチルウラシル；５−エチルウラシル；アデニン；グアニン；ヒボキサンチン；２−アミノプリン；２，６−ジアミノプリン；２−クロロ−６−アミノプリン；６−クロロプリン；及びＮ６−メチルアデニンで表される抗ＨＩＶ活性を有する化合物。
３．１−（２−デオキシ−３−アジド−４−チオ−β−Ｄ−リボフラノシル）チミンからなる請求項１に記載の化合物。
４．９−（４−チオ−２，３−ジデオキシ−Ｄ−リボフラノシル）−２，６−ジアミノプリンからなる請求項１に記載の化合物。
５．４′−チオ−２′，３′−ジデオキシ−グアノシンからなる請求項１に記載の化合物。
６．４′−チオ−２′，３′−ジデオキシアデノシンからなる請求項１に記載の化合物。
７．４′−チオ−２′，３′−ジデオキシシチジンからなる請求項１に記載の化合物。
８．４′−チオ−２′，３′−ジデオキシ−５−フルオロシチジンからなる請求項１に記載の化合物。
９．１−Ｏ−アセチル−５−Ｏ−ｔ−ブチルジフェニルシリル−４−チオ−２．３−ジデオキシリボフラノースからなる、２′，３′−ジデオキシ−４′−チオリボヌクレオシドの製造に有用な中間体。
１０．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｘ＝Ｈ、Ｎ３又はＦであり、Ｂはビリミジン、５−アザピリミジン、６−アザピリミジン、３−デアザビリミジン、プリン、３−デアザプリン、７−デアザプリン、８−アザプリン及び２− アザプリン塩基よりなる群から選ばれる基であるで表される化合物の有効量を人間に投与することからなる、ヒト免疫不全ウイルスに感染した人間の治療法。
１１．前記化合物が１−（２−デオキシ−３−アジド−４−チオ−β−Ｄ−リボフラノシル）チミンである請求項１０に記載の方法。
１２．前記化合物が４′−チオ−２′，３′−ジデオキシシチジンである請求項１０に記載の方法。
１３．前記化合物が４′−チオ−２′，３′−ジデオキシシチジンである請求項１０に記載の方法。
１４．前記化合物が９−（４−チオ−２，３−ジデオキシ−Ｄ−リボフラノシル）−２，６−ジアミノプリンである請求項１０に記載の方法。
１５．前記化合物が４′−チオ−２′，３′−ジデオキシ−５−フルオロシチジンである請求項１０に記載の方法。
１６．１−（２−デオキシ−３−アジド−４−チオ−β−Ｄ−リボフラノシル）チミン、４′−チオ−２′，３′−ジデオキシシチジン、４′−チオ−２′，３′−ジデオキシアデノシン、９−（４−チオ−２，３−ジデオキシ−Ｄ−リボフラノシル）−２，６−ジアミノプリン、及び４′−チオ−２′，３′−ジデオキシ−５−フルオロシチジン、からなる群から選ばれた化合物の抗ウイルス有効量をＨＩＶウイルスに接触させることによって、ＨＩＶウイルスがもたらす細胞変性効果を抑制する方法。