JPH0534334B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

〔利用分野〕 本発明は、水難溶性薬物・リン脂質複合体の製
造方法に関する。 〔従来技術〕 水にも有機溶媒にも溶けにくい難溶性薬物はそ
の製剤化が困難であり、一般に界面活性剤による
乳化、包接化、誘導体化による可溶化、リポソー
ム化あるいはマイクロカプセル化などの手段を通
じて製剤化している。しかし、これらの手段をほ
どこしても、依然として薬効を十分発揮する如き
製剤化は困難であるのが実情である。 そこで本発明者らは、水難溶性薬物の可溶化、
製剤化について種々検討した結果、リポソーム製
剤化技術に準じて調製した水難溶性薬物含有リン
脂質薄膜を水溶液で懸濁後、超音波処理し、さら
に遠心分離を行うことにより回収される最下層沈
渣が水難溶性薬物の取り込みの豊富な画分である
こと、その画分は水難溶性薬物・リン脂質複合体
を形成しており、水可溶性であり、この複合体は
医薬品として極めて有用であることを見い出して
本発明を完成した。 〔本発明の目的〕 本発明の目的は、水難溶性薬物の可溶化方法を
提供することである。 本発明の他の目的は、水難溶性薬物の取り込み
量豊富な水難溶性薬物・リン脂質複合体の製造方
法を提供することである。 本発明の更に他の目的は、新規水溶性製剤を提
供することである。 〔発明の開示〕 本発明は、水難溶性の薬物とリン脂質を有機溶
媒に溶解後、溶媒を留去して薬物を含んだリン脂
質薄膜を形成し、この薄膜の懸濁液をさらに超音
波処理後、遠心分離して得られた最下層沈渣を回
収することを特徴とする水難溶性薬物・リン脂質
複合体の製造方法、水難溶性の薬物を上記水難溶
性薬物・リン脂質複合体とすることによる水難溶
性薬物の可溶化方法および上記水難溶性薬物・リ
ン脂質複合体を含有してなる水溶性製剤である。 本発明で用いられる水難溶性薬物は、水に対す
る溶解度が0.1mg／ml以下で薬理学的に活性を有
するものである。当該薬物は、分子量1000以下の
低分子化合物であることが好ましい。より好まし
くは、クロロホルム、酢酸エチル、アセトン、エ
ーテル、ベンゼンなどの有機溶媒に対して、0.1
〜100mg／ml程度の溶解性を有する化合物である。
かかる薬物の具体例としては、例えばスパデイコ
マイシン、アントラマイシン、フルオロウラシ
ル、ダウノマイシン、アドリアマイシン等に代表
される制癌剤、フルルビプロフエン、アセメタシ
ン等に代表される消炎鎮痛剤、あるいはプロスタ
グランジン、リポキシゲナーゼ阻害剤などが挙げ
られる。 当該複合体を形成するためのリン脂質は、生理
的に許容され、そして代謝されうる無毒のリン脂
質であればいずれも本発明に用いられる。たとえ
ば、ホスフアチジルコリン、ホスフアチジルセリ
ン、ホスフアチジル酸、ホスフアチジルグリセリ
ン、ホスフアチジルエタノールアミン、ホスフア
チジルイノシトール、スフインゴミエリン、ジセ
チルホスフエート、リゾホスフアチジルコリン
（リゾレシチン）、ステアリルアミン、あるいはこ
れらの混合物である大豆リン脂質、卵黄リン脂質
などが用いられる。好ましいリン脂質としては、
大豆あるいは卵黄のリン脂質が例示される。 これら両成分を用いて、本発明の複合体を調製
する。まず、リン脂質および水難溶性薬物を有機
溶媒、例えばクロロホルムなどに溶解させる。両
者の割合は、リン脂質の１重量部に対して水難溶
性薬物が0.01〜10重量部であることが好ましい。
当該薬物およびリン脂質を混和した溶液含有容器
を、好ましくはロータリーエバポレータを用いて
減圧して、溶媒を留去し、容器の内壁にリン脂質
を薄く付着させて水難溶性薬物を含んだリン脂質
の薄膜を形成される。この場合、好ましくはリン
脂質の安定化のために、抗酸化剤、例えばα−ト
コフエロールを、好適にはリン脂質に対する重量
％が0.0001〜0.1％（ｗ／ｗ）程度になるように
添加する。また、公知の安定化剤を添加すること
はもちろん可能である。 形成された薄膜に、生理的に受け入れられる水
溶液（例えば、PH5.5〜８、好ましくはPH６〜７
に調整したもの。具体的には、クエン酸緩衝液、
酢酸緩衝液、リン酸緩衝液、生理食塩溶液など）
を、リン脂質１ｇに対して10〜500mlになるよう
に添加して、直ちに振盪あるいは撹拌を行うこと
により薄膜を破壊し、複合体からなる粒子を形成
させる。具体的には、通常、丸底フラスコにガラ
スビーズ数個を入れ、手で激しく振りまぜる（室
温下、３〜20分間）方法が取られる。こうして濃
度0.5〜100mgリン脂質／mlの複合体懸濁液が調製
される。 当該粒子は、次いで超音波処理を施し、粒子径
を0.2〜2μ以下に調整する。この時、超音波によ
る発熱（液温の上昇）を防ぐために、氷冷下で超
音波処理を行う。また、好ましくは、窒素のよう
な不活性ガス雰囲気下で行う。 さらに遠心分離を温度５〜20℃で１万ｇ以上、
好ましくは２〜３万ｇ、30分〜２時間程度行う。 この結果、懸濁液は３層に分かれる。即ち、上
層（Frと称する）は、リン脂質の色を示す上
清であり、通常のリポソーム（Small
unilamelar vesicle）画分に値する。中層（Fr
と称する）は、薬物とリン脂質の混合色を示す沈
渣であり、超音波処理で破壊されずに残つた脂質
粒子の層である。Frはさらに超音波処理を行
うことによりFr及びFrに移行する。最下層
（Frと称する）の沈渣は、薬物に応じた色とな
る。この最下層沈渣Frを回収し、上述の生理
的に受け入れられる水溶液、リン脂質を含む水溶
液あるいは上清Frを用いて遠心洗浄する。か
くして、水難溶性薬物・リン脂質複合体がペレツ
ト状、懸濁状として調製される。得られた複合体
の物性は、実験例１に示した。 〔使用方法〕 本発明で得られる複合体の製剤化は、医薬品に
おいて広く公知の方法に準ずればよい。また、液
状製剤を凍結乾燥することにより乾燥製剤として
も提供される。この場合、各々の薬物あるいはリ
ン脂質に応じて、適宜公知の安定化剤を用いるこ
とはもちろん自由である。また、非イオン系界面
活性剤を添加しておくことは乾燥製剤の可溶性を
高めるのに有用である。かかる乾燥製剤は、生理
的に許容される水溶液、例えば生理食塩溶液ある
いは上述した上清Frによつて溶解または希釈
して用いられるのが一般的であるが、製剤上の常
套手段によつて錠剤化、カプセル化、腸溶剤化、
懸濁剤化、顆粒化、粉末化、注射剤化、坐剤化な
どを行つてもよい。 〔効果〕 本発明により得られる複合体は、水難溶性薬物
自在に比べて水への溶解度が増し、可溶化に伴い
数倍から数十倍の活性の上昇が見られる。また、
毒性も単独投与に比べて低く抑えられるため、投
与量の増加に伴う効果の上昇が期待される。 また、注射剤化が可能になり、複合体の粒子径
を0.2〜2μに調整することにより、静脈内投与が
可能となつて速効性あるいは局所親和性の向上が
期待されるうえ、経口投与時の薬物による腸管部
への副作用を抑え、同時に腸管吸収の増加による
効果の上昇が期待される。 かくして提供される本発明からなる複合体は、
水難溶性薬物の従来にない効果的な製剤化が可能
なものであり、医薬産業上また臨床上においても
新たな発展を可能にするものである。 実験例 １ 複合体の物性 (1) 薬物の取り込み 遠心分離後の各層（Fr〜）におけるリ
ン脂質中への薬物の取り込みの度合を調べた。
各層を分取し、トリトンＸ−100で処理して複
合体を破壊し、リン酸緩衝液中に懸濁され、遠
心後の上清を回収し、上清中の薬物量を高速液
体クロマトグラフイーにより測定して、取り込
み率〔ｗ／ｗ％（薬物量／リン脂質量）〕を算
出した（第１表）。

【表】 体画分として有用であることが判明した。
(2) 粒子径 各層（Fr〜）の粒子の粒子径を遠心沈
降法（コールター・カウンター法）により調べ
た（第２表）。

【表】 (3) 可溶性 薬物単独と本発明複合体との注射用蒸溜水
（液温20℃）への溶解性を比較した（第３表）。

【表】 複合体形成により、可溶性の良好な向上が見ら
れた。 (4) 粒子径の安定性 実施例１の方法に準じて各薬物のリン脂質複
合体（Fr）を製造し、これを注射用蒸溜水
に溶解して0.5％（ｗ／ｖ）水溶液を調製し、
４℃で１ケ月間保存し、粒子径を測定して粒子
の安定性を検討した（第４表）。

【表】 (5) 複合体の安定性 本発明複合体から薬物が遊離することなく、
安定であるかどうかを調べた。 各種リン脂質・複合体を生理食塩溶液で懸濁
後、室温（13〜26℃）にて１週間保存した場合
(A)、およびヒト血漿中で37℃にて１時間インキ
ユベートした場合(B)の各種リン脂質・複合体の
安定性を調べた、即ち、上記(A)及び(B)の処理
後、それぞれ実験例１の(1)「薬物の取り込み」
に準じて、まず遠心分離により、沈渣と上清と
に分け、更に沈渣を生理食塩溶液で３〜４回遠
心洗浄後、トリエンＸ−100処理を行い、沈渣
中の薬物量を上清の形態にした上で、高速液体
クロマトグラフイーにより測定して、薬物の残
存量から複合体の安定性を求めた（第５表）。

【表】 トを表わす。
実験例 ２ 薬物単独と本発明複合体とのddY系マウス
（雄）に対する静脈内投与時および経口投与時の
急性毒性（LD₅₀）を比較した（第６表）。

【表】 実験例 ３ 薬物単独と本発明複合体との静脈内投与におけ
る薬量効果を比較した（第７表）。 では、薬物としてスパデイゴマイシンを用
い、Ｌ−1210腹水型接種BDF₁マウス（雄）に対
する制癌効果（延命率）を、では、薬物として
プロスタグランジンE₁を用い、正常雑犬（雄）
に対する血圧降下効果（降下率）を調べた。

【表】 実験例 ４ 薬物単独と本発明複合体との臓器親和性を比較
した（第８表）。 動物として、Walker carcino sarcoma固形型
接種ウイスター系ラツト（雄）を用い、ラジオア
イソトープでラベルした薬剤を1.8×10⁷dpm／Kg
静脈内投与し、投与24時間後の各臓器への薬物の
貯留度を放射線を測定することにより求めた。

【表】 実験例 ５ 薬物単独と本発明複合体との経口投与時の吸収
性について比較した（第９表）。 動物として、ウイスター系ラツト（雄）を用
い、ラジオアイソトープでラベルした薬剤を1.8
×10⁷dpm／Kg経口投与し、投与24時間後の全吸
収量を放射線を測定することにより求め、吸収率
を算出した。

【表】 実施例 １ スパデイコマイシン0.25ｇ、精製卵黄リン脂質
10ｇおよびα−トコフエロール10mgをクロロホル
ム100mlに溶解した後、ロータリーエバポレータ
を用いて減圧で加温してクロロホルムを留去し、
スパデイコマイシンを含んだリン脂質の薄膜を形
成させた。この薄膜に50ｍＭ塩化ナトリウム含有
50ｍＭリン酸緩衝液（PH7.0）100mlを添加し、ガ
ラスビーズを入れ、直ちに室温で20分間激しく振
盪させた後、ソニケータ（Branson Sonic
Power社製、Cell Disrutor ＃350、出力60W）
を用いて、氷冷しながら１時間超音波処理を行つ
た。さらに室温で遠心分離（25000ｇ、１時間）
を行つて得られた最下層沈渣を回収し、上述の緩
衝液を用いて数回遠心洗浄して、除菌濾過を行
い、ペレツト状のスパデイコマイシン・リン脂質
複合体を得た。 実施例 ２ 実施例１で得られたペレツト状製剤を凍結乾燥
することにより、スパデイコマイシン・リン脂質
複合体の乾燥製剤を得た。 実施例 ３ スパデイコマイシン0.25ｇの代わりに、ダウノ
マイシン0.5ｇを用いた以外は実施例１に準じて
調製し、ダウノマイシン・リン脂質複合体（ペレ
ツト状）を得た。 実施例 ４ スパデイコマイシン0.25ｇの代わりに、５−フ
ルオロウラシル0.4ｇを用いた以外は実施例１に
準じて調製し、５−フルオロウラシル・リン脂質
複合体（ペレツト状）を得た。 実施例 ５ スパデイコマイシン0.25ｇの代わりに、デキサ
メサゾン0.25ｇを用いた以外は実施例１に準じて
調製し、デキサメサゾン・リン脂質複合体を得
た。 実施例 ６ スパデイコマイシン0.25ｇの代わりに、フルル
ビプロフエン0.5ｇを用いた以外は実施例１及び
２に準じて調製し、フルルビプロフエン・リン脂
質複合体（ペレツト状）及びその乾燥製剤を得
た。 実施例 ７ スパデイコマイシン0.25ｇ、精製卵黄リン脂質
10ｇの代わりに、プロスタグランジンE₁0.25ｇ、
精製大豆リン脂質５ｇを用いた以外は実施例１及
び２に準じて調製し、プロスタグランジンE₁・
リン脂質複合体（ペレツト状）及びその乾燥製剤
を得た。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 水難溶性の薬物とリン脂質を有機溶媒に溶解
   後、溶媒を留去して薬物を含んだリン脂質薄膜を
   形成し、この薄膜の懸濁液をさらに超音波処理
   後、遠心分離して得られた最下層沈渣を回収する
   ことを特徴とする水難溶性薬物・リン脂質複合体
   の製造方法。 ２ 薬物が水不溶性で、クロロホルム、アセト
   ン、酢酸エチル、エーテル、ベンゼンなどの有機
   溶媒に対して0.1〜100mg／ml程度の溶解度を有す
   る特許請求の範囲第１項記載の水難溶性薬物・リ
   ン脂質複合体の製造方法。