JPH05199892A - キトサンの製造方法 - Google Patents
キトサンの製造方法Info
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- JPH05199892A JPH05199892A JP4209203A JP20920392A JPH05199892A JP H05199892 A JPH05199892 A JP H05199892A JP 4209203 A JP4209203 A JP 4209203A JP 20920392 A JP20920392 A JP 20920392A JP H05199892 A JPH05199892 A JP H05199892A
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- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 品質の安定したキトサンを効率良く生産で
き、しかも周囲の環境に影響を及ぼすことのない微生物
培養によるキトサンの製造方法を提供する。 【構成】 酵母エキス、麦芽エキス、ペプトン、グルコ
ースおよび硫酸マグネシウムを含む前培養培地にムコラ
セアエ（Mucoraceae）科の糸状菌を接種して前培養した
前培養体を、前培養培地と本質的に同一組成の本培養培
地に接種し本培養してキトサンを製造できる。ムコラセ
アエの糸状菌は、特にアブシディア・コエルレア（Absi
dia coerulea）が好ましい。
き、しかも周囲の環境に影響を及ぼすことのない微生物
培養によるキトサンの製造方法を提供する。 【構成】 酵母エキス、麦芽エキス、ペプトン、グルコ
ースおよび硫酸マグネシウムを含む前培養培地にムコラ
セアエ（Mucoraceae）科の糸状菌を接種して前培養した
前培養体を、前培養培地と本質的に同一組成の本培養培
地に接種し本培養してキトサンを製造できる。ムコラセ
アエの糸状菌は、特にアブシディア・コエルレア（Absi
dia coerulea）が好ましい。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、微生物培養によるキト
サンの製造方法に関するものである。
サンの製造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】近年、セルロースに次ぐバイオマスとし
てキトサンが注目されている。キトサンの用途は、高分
子凝集剤、固定化担体、多孔性ビーズ等多方面への利用
が期待されている。キトサンは自然界に大量に存在して
おり、これを精製して製造することができる。工業的に
は、カニやエビ等の甲殻類動物の外骨格を酸およびアル
カリで脱灰および除タンパクして、単離したキチンを熱
濃アルカリで脱アセチル化してキトサンが製造されてい
る。
てキトサンが注目されている。キトサンの用途は、高分
子凝集剤、固定化担体、多孔性ビーズ等多方面への利用
が期待されている。キトサンは自然界に大量に存在して
おり、これを精製して製造することができる。工業的に
は、カニやエビ等の甲殻類動物の外骨格を酸およびアル
カリで脱灰および除タンパクして、単離したキチンを熱
濃アルカリで脱アセチル化してキトサンが製造されてい
る。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかしこの方法では、
原料となるカニ等の漁獲量が年度や季節により左右され
易いし、資源枯渇の恐れもある。また漁獲の時期等によ
って品質が変わる。そのため一定品質の原料を安定して
調達しにくい。そのような不便を解消するため原料を長
期間保存しようとすると、保存中に腐敗によって悪臭が
発生し、かつ製品の低分子量化を引き起こすという問題
がある。さらにキチンを脱アセチル化する工程等で多量
に生じる廃水は、高い生物学的酸素要求量 (Biochemica
l OxygenDemand: BOD)を示すアルカリ性の廃水であるた
め、環境を汚染することになり好ましくないものであ
る。
原料となるカニ等の漁獲量が年度や季節により左右され
易いし、資源枯渇の恐れもある。また漁獲の時期等によ
って品質が変わる。そのため一定品質の原料を安定して
調達しにくい。そのような不便を解消するため原料を長
期間保存しようとすると、保存中に腐敗によって悪臭が
発生し、かつ製品の低分子量化を引き起こすという問題
がある。さらにキチンを脱アセチル化する工程等で多量
に生じる廃水は、高い生物学的酸素要求量 (Biochemica
l OxygenDemand: BOD)を示すアルカリ性の廃水であるた
め、環境を汚染することになり好ましくないものであ
る。
【０００４】本発明はこのような問題点を解消するため
なされたもので、品質の安定したキトサンを効率良く生
産でき、しかも周囲の環境に影響を及ぼすことのない微
生物培養によるキトサンの製造方法を提供するものであ
る。
なされたもので、品質の安定したキトサンを効率良く生
産でき、しかも周囲の環境に影響を及ぼすことのない微
生物培養によるキトサンの製造方法を提供するものであ
る。
【０００５】
【課題を解決するための手段】前記のような種々の問題
点を有する従来のキトサンの工業的な製造方法について
検討する中で、ムコラセアエ（Mucoraceae）科に属する
糸状菌の細胞壁にはキチンと共にかなりの量のキトサン
が含まれていることに着目した。尚、この事実は文献
（Bartnicki-Garcia,S.: Ann.Rev.Microbiol.,22,87,19
68）に開示されている。この糸状菌を多量に培養できれ
ば、キトサンの製造ができることを推定した。その推定
にもとずいて種々の実験をし下記の発明を完成するに至
った。
点を有する従来のキトサンの工業的な製造方法について
検討する中で、ムコラセアエ（Mucoraceae）科に属する
糸状菌の細胞壁にはキチンと共にかなりの量のキトサン
が含まれていることに着目した。尚、この事実は文献
（Bartnicki-Garcia,S.: Ann.Rev.Microbiol.,22,87,19
68）に開示されている。この糸状菌を多量に培養できれ
ば、キトサンの製造ができることを推定した。その推定
にもとずいて種々の実験をし下記の発明を完成するに至
った。
【０００６】すなわち本発明を適用するキトサンの製造
方法は、酵母エキス、麦芽エキス、ペプトン、グルコー
スおよび硫酸マグネシウムを含む前培養培地にムコラセ
アエ（Mucoraceae）科の糸状菌を接種して前培養した前
培養体を、前培養培地と本質的に同一組成の本培養培地
に接種して本培養することを特徴としている。
方法は、酵母エキス、麦芽エキス、ペプトン、グルコー
スおよび硫酸マグネシウムを含む前培養培地にムコラセ
アエ（Mucoraceae）科の糸状菌を接種して前培養した前
培養体を、前培養培地と本質的に同一組成の本培養培地
に接種して本培養することを特徴としている。
【０００７】前培養培地および本培養培地の各成分の濃
度は、酵母エキスを 0.1〜2.5w/v%、麦芽エキスを 0.1〜
2.5 w/v%、ペプトンを 0.5〜8w/v% 、 グルコースを 1〜
10w/v%、硫酸マグネシウム（MgSO4・7H2O) を 0.1〜１.4
w/v%、 好ましくは酵母エキスを 0.3〜2.1w/v%、麦芽エキ
スを 0.3〜2.1w/v%、ペプトンを 1.5〜5w/v%、グルコース
を３〜７w/v%、硫酸マグネシウム（MgSO4・7H2O）を 0.6
〜1.4w/v% 、更に好ましくは酵母エキスを 1.2〜1.8w/v
% 、麦芽エキスを 1.2〜1.8w/v% 、ペプトンを 2.0〜3.
0w/v% 、グルコースを４〜６w/v%、硫酸マグネシウム(M
gSO4・7H2O)を0.8〜1.2w/v% 程度にするとよい。
度は、酵母エキスを 0.1〜2.5w/v%、麦芽エキスを 0.1〜
2.5 w/v%、ペプトンを 0.5〜8w/v% 、 グルコースを 1〜
10w/v%、硫酸マグネシウム（MgSO4・7H2O) を 0.1〜１.4
w/v%、 好ましくは酵母エキスを 0.3〜2.1w/v%、麦芽エキ
スを 0.3〜2.1w/v%、ペプトンを 1.5〜5w/v%、グルコース
を３〜７w/v%、硫酸マグネシウム（MgSO4・7H2O）を 0.6
〜1.4w/v% 、更に好ましくは酵母エキスを 1.2〜1.8w/v
% 、麦芽エキスを 1.2〜1.8w/v% 、ペプトンを 2.0〜3.
0w/v% 、グルコースを４〜６w/v%、硫酸マグネシウム(M
gSO4・7H2O)を0.8〜1.2w/v% 程度にするとよい。
【０００８】ムコラセアエの糸状菌は、特にアブシディ
ア・コエルレア（Absidia coerulea）が好ましい。この
菌株は、財団法人発酵研究所（住所：大阪市淀川区十三
本町２−１７−８５）のAbsidia coerulea ＩＦＯ ５
３０１として管理されており、同所より入手可能であ
る。前培養の培地に対する糸状菌の胞子濃度は、105 〜
108 個/100ミリリットルが適当である。
ア・コエルレア（Absidia coerulea）が好ましい。この
菌株は、財団法人発酵研究所（住所：大阪市淀川区十三
本町２−１７−８５）のAbsidia coerulea ＩＦＯ ５
３０１として管理されており、同所より入手可能であ
る。前培養の培地に対する糸状菌の胞子濃度は、105 〜
108 個/100ミリリットルが適当である。
【０００９】本培養培地の成分濃度は前培養培地の成分
濃度の１〜７倍であることが好ましい。本培養培地中の
成分濃度を前培養培地の成分濃度より上げることにより
菌体量に対するキトサン含量が上昇する。培地中の基質
である窒素成分、すなわち窒素含量の高いペプトンおよ
び酵母エキス、マグネシウムの濃度が本培養培地で前培
養培地より増加させているため、菌体量に対するキトサ
ン含量が上昇する。しかしあまり培地の濃度が高すぎて
も逆に基質阻害がかかりキトサン含量の増加は望めな
い。したがって本培養培地の成分濃度は、前培養培地の
成分濃度の７倍程度までが好ましい。
濃度の１〜７倍であることが好ましい。本培養培地中の
成分濃度を前培養培地の成分濃度より上げることにより
菌体量に対するキトサン含量が上昇する。培地中の基質
である窒素成分、すなわち窒素含量の高いペプトンおよ
び酵母エキス、マグネシウムの濃度が本培養培地で前培
養培地より増加させているため、菌体量に対するキトサ
ン含量が上昇する。しかしあまり培地の濃度が高すぎて
も逆に基質阻害がかかりキトサン含量の増加は望めな
い。したがって本培養培地の成分濃度は、前培養培地の
成分濃度の７倍程度までが好ましい。
【００１０】前培養培地における前培養は、ｐＨが 4〜
7 程度、厳密には 4.5〜6.5 で行われることが好まし
い。本培養培地における本培養も同じ範囲のｐＨが好ま
しい。前培養および本培養は、温度が20〜30℃ぐらい、
好ましくは23〜28℃程度、さらに好ましくは24〜27℃の
範囲でおよそ１〜３日程度の培養によって最大収穫が得
られる。
7 程度、厳密には 4.5〜6.5 で行われることが好まし
い。本培養培地における本培養も同じ範囲のｐＨが好ま
しい。前培養および本培養は、温度が20〜30℃ぐらい、
好ましくは23〜28℃程度、さらに好ましくは24〜27℃の
範囲でおよそ１〜３日程度の培養によって最大収穫が得
られる。
【００１１】前記本培養により得られた本培養体から
は、熱苛性ソーダ溶液で処理した後、酢酸水溶液で抽出
し、アルカリ性にすればキトサンを析出できる。すなわ
ち本培養を終了した培養液から菌体を集め、この菌体
に、２〜５w/v%の水酸化ナトリウム水溶液を加えて 100
〜125 ℃で１時間熱処理してから、残渣を集めて水洗し
２〜５w/v%の酢酸で抽出する。その溶液の不溶物質を遠
心分離および濾過により除き、上澄液を水酸化ナトリウ
ム等で弱アルカリ性にするとキトサンが析出する。培養
操作は回分操作に限られず、培養中に制限基質である炭
素源や窒素源または新たな培地を追加する半回分操作、
反復回分操作、反復半回分操作、連続操作も可能であ
る。
は、熱苛性ソーダ溶液で処理した後、酢酸水溶液で抽出
し、アルカリ性にすればキトサンを析出できる。すなわ
ち本培養を終了した培養液から菌体を集め、この菌体
に、２〜５w/v%の水酸化ナトリウム水溶液を加えて 100
〜125 ℃で１時間熱処理してから、残渣を集めて水洗し
２〜５w/v%の酢酸で抽出する。その溶液の不溶物質を遠
心分離および濾過により除き、上澄液を水酸化ナトリウ
ム等で弱アルカリ性にするとキトサンが析出する。培養
操作は回分操作に限られず、培養中に制限基質である炭
素源や窒素源または新たな培地を追加する半回分操作、
反復回分操作、反復半回分操作、連続操作も可能であ
る。
【００１２】
【実施例】以下、本発明の実施例を詳細に説明する。 実施例１ 酵母エキス３g/リットル、麦芽エキス３g/リットル、ペ
プトン５g/リットル、グルコース10g/リットル、および
硫酸マグネシウム（７水和物）２g/リットルの割合で混
合し前培養培地を調製する。その前培養培地 100ミリリ
ットルが入った500ミリリットル振盪フラスコ内にアブ
シディア・コエルレア IFO5301株の胞子を 4.5×107 個
接種した。このフラスコを回転振盪器で27℃、200rpmの
条件で24時間培養して前培養体を得た。
プトン５g/リットル、グルコース10g/リットル、および
硫酸マグネシウム（７水和物）２g/リットルの割合で混
合し前培養培地を調製する。その前培養培地 100ミリリ
ットルが入った500ミリリットル振盪フラスコ内にアブ
シディア・コエルレア IFO5301株の胞子を 4.5×107 個
接種した。このフラスコを回転振盪器で27℃、200rpmの
条件で24時間培養して前培養体を得た。
【００１３】一方、酵母エキス３g/リットル、麦芽エキ
ス３g/リットル、ペプトン５g/リットル、グルコース10
g/リットル、硫酸マグネシウム（７水和物）２g/リット
ルの割合（前培養培地と同一の割合）で混合し本培養培
地を調製する。前記した前培養で得られた前培養体 100
ミリリットルを、通気撹拌型発酵槽内の本培養培地２リ
ットルに接種し、27℃、通気量３リットル/min、撹拌回
転数300rpmで70時間培養した。
ス３g/リットル、ペプトン５g/リットル、グルコース10
g/リットル、硫酸マグネシウム（７水和物）２g/リット
ルの割合（前培養培地と同一の割合）で混合し本培養培
地を調製する。前記した前培養で得られた前培養体 100
ミリリットルを、通気撹拌型発酵槽内の本培養培地２リ
ットルに接種し、27℃、通気量３リットル/min、撹拌回
転数300rpmで70時間培養した。
【００１４】このようにして本培養が終了した本培養体
（菌体）を、２w/v%の水酸化ナトリウム水溶液により 1
21℃で１時間熱処理する。それを２w/v%の酢酸で抽出す
る。不溶物質を遠心分離および濾過により除き、上澄液
を水酸化ナトリウムで弱アルカリ性にすると1.6gのキト
サンが析出した。析出物がキトサンであることは、赤外
線吸収スペクトルおよび核磁気共鳴スペクトル（ＮＭ
Ｒ）により確認された。乾燥菌体量に対するキトサンの
収量は８％であった。
（菌体）を、２w/v%の水酸化ナトリウム水溶液により 1
21℃で１時間熱処理する。それを２w/v%の酢酸で抽出す
る。不溶物質を遠心分離および濾過により除き、上澄液
を水酸化ナトリウムで弱アルカリ性にすると1.6gのキト
サンが析出した。析出物がキトサンであることは、赤外
線吸収スペクトルおよび核磁気共鳴スペクトル（ＮＭ
Ｒ）により確認された。乾燥菌体量に対するキトサンの
収量は８％であった。
【００１５】実施例２ 実施例１と同一の条件で前培養体を得た。一方、本培養
培地は、酵母エキス15g/リットル、麦芽エキス15g/リッ
トル、ペプトン25g/リットル、グルコース50g/リット
ル、硫酸マグネシウム（７水和物）10g/リットルの割合
（各成分の混合比率が前培養培地と同一であるが、各成
分の濃度は前培養培地の５倍）で混合し本培養培地を調
製する。前記の前培養体 100ミリリットルを、通気撹拌
型発酵槽内の本培養培地２リットルに接種し、27℃、通
気量３リットル/min、撹拌回転数300rpmで70時間培養し
た。
培地は、酵母エキス15g/リットル、麦芽エキス15g/リッ
トル、ペプトン25g/リットル、グルコース50g/リット
ル、硫酸マグネシウム（７水和物）10g/リットルの割合
（各成分の混合比率が前培養培地と同一であるが、各成
分の濃度は前培養培地の５倍）で混合し本培養培地を調
製する。前記の前培養体 100ミリリットルを、通気撹拌
型発酵槽内の本培養培地２リットルに接種し、27℃、通
気量３リットル/min、撹拌回転数300rpmで70時間培養し
た。
【００１６】これにより得られた本培養体を、実施例１
と同一の条件による熱苛性処理、抽出、析出の工程を経
て 15.2gのキトサンが得られた。乾燥菌体量に対するキ
トサンの収量は23％であった。
と同一の条件による熱苛性処理、抽出、析出の工程を経
て 15.2gのキトサンが得られた。乾燥菌体量に対するキ
トサンの収量は23％であった。
【００１７】実施例３ 実施例１と同一の条件で前培養体を得た。一方、本培養
培地は、酵母エキス21g/リットル、麦芽エキス21g/リッ
トル、ペプトン35g/リットル、グルコース70g/リット
ル、硫酸マグネシウム（７水和物）14g/リットルの割合
（各成分の混合比率が前培養培地と同一であるが、各成
分の濃度は前培養培地の７倍）で混合し本培養培地を調
製する。この本培養培地に前記の前培養体 100ミリリッ
トルを接種し、その他は実施例１と同一の条件で本培養
を行って本培養体を得た。
培地は、酵母エキス21g/リットル、麦芽エキス21g/リッ
トル、ペプトン35g/リットル、グルコース70g/リット
ル、硫酸マグネシウム（７水和物）14g/リットルの割合
（各成分の混合比率が前培養培地と同一であるが、各成
分の濃度は前培養培地の７倍）で混合し本培養培地を調
製する。この本培養培地に前記の前培養体 100ミリリッ
トルを接種し、その他は実施例１と同一の条件で本培養
を行って本培養体を得た。
【００１８】得られた本培養体を、実施例１と同一の条
件による熱苛性処理、抽出、析出の工程を経て9.4gのキ
トサンが得られた。乾燥菌体量に対するキトサンの収量
は14％であった。
件による熱苛性処理、抽出、析出の工程を経て9.4gのキ
トサンが得られた。乾燥菌体量に対するキトサンの収量
は14％であった。
【００１９】実施例４ 実施例１と同一の条件で前培養体を得た。一方、本培養
培地は、酵母エキスのみ15g/リットル、麦芽エキスのみ
15g/リットル、ペプトンのみ25g/リットル、グルコース
のみ50g/リットル、硫酸マグネシウム（７水和物）のみ
10g/リットルで他の成分は実施例１と同一の条件で混合
し本培養培地を調製する。前記前培養体５ミリリットル
を、フラスコ内の本培養培地 100ミリリットルに摂取
し、27℃、200rpmの条件で72時間培養した。これにより
得られた本培養体を実施例１と同一の条件による熱可性
処理、抽出、析出の工程を経てキトサンを得た。前培養
培地と同一の割合で混合した培地を基準としたときの各
成分の増加に伴うキトサン含量の相対値は酵母エキスの
み増加したものが1.52倍、ペプトンのみ増加したものが
1.40倍、硫酸マグネシウム(7水和物）のみ増加したもの
が1.66倍であり、他の成分についてはほとんど変化がな
かった。
培地は、酵母エキスのみ15g/リットル、麦芽エキスのみ
15g/リットル、ペプトンのみ25g/リットル、グルコース
のみ50g/リットル、硫酸マグネシウム（７水和物）のみ
10g/リットルで他の成分は実施例１と同一の条件で混合
し本培養培地を調製する。前記前培養体５ミリリットル
を、フラスコ内の本培養培地 100ミリリットルに摂取
し、27℃、200rpmの条件で72時間培養した。これにより
得られた本培養体を実施例１と同一の条件による熱可性
処理、抽出、析出の工程を経てキトサンを得た。前培養
培地と同一の割合で混合した培地を基準としたときの各
成分の増加に伴うキトサン含量の相対値は酵母エキスの
み増加したものが1.52倍、ペプトンのみ増加したものが
1.40倍、硫酸マグネシウム(7水和物）のみ増加したもの
が1.66倍であり、他の成分についてはほとんど変化がな
かった。
【００２０】実施例５ 実施例１と同一の条件で前培養体を得た。一方、本培養
培地は、酵母エキスのみ21g/リットル、麦芽エキスのみ
21g/リットル、ペプトンのみ35g/リットル、グルコース
のみ70g/リットル、硫酸マグネシウム（７水和物）のみ
10g/リットルで他の成分は実施例１と同一の条件で混合
し本培養培地を調製する。前記前培養体５ミリリットル
を、フラスコ内の本培養培地 100ミリリットルに摂取
し、27℃、200rpmの条件で72時間培養した。これにより
得られた本培養体を実施例１と同一の条件による熱可性
処理、抽出、析出の工程を経てキトサンを得た。前培養
培地と同一の割合で混合した培地を基準としたときの各
成分の増加に伴うキトサン含量の相対値は酵母エキスの
みを増加した場合が1.29倍、ペプトンのみを増加したも
のが0.76倍、硫酸マグネシウム（７水和物）のみを増加
した場合1.75倍、他の成分については若干増加した。
培地は、酵母エキスのみ21g/リットル、麦芽エキスのみ
21g/リットル、ペプトンのみ35g/リットル、グルコース
のみ70g/リットル、硫酸マグネシウム（７水和物）のみ
10g/リットルで他の成分は実施例１と同一の条件で混合
し本培養培地を調製する。前記前培養体５ミリリットル
を、フラスコ内の本培養培地 100ミリリットルに摂取
し、27℃、200rpmの条件で72時間培養した。これにより
得られた本培養体を実施例１と同一の条件による熱可性
処理、抽出、析出の工程を経てキトサンを得た。前培養
培地と同一の割合で混合した培地を基準としたときの各
成分の増加に伴うキトサン含量の相対値は酵母エキスの
みを増加した場合が1.29倍、ペプトンのみを増加したも
のが0.76倍、硫酸マグネシウム（７水和物）のみを増加
した場合1.75倍、他の成分については若干増加した。
【００２１】
【発明の効果】以上、詳細に説明したように、本発明を
適用するキトサンの製造方法によれば、工業的生産によ
り得られるものを原料として、そこに微生物の増殖作用
を利用し、品質の安定したキトサンを短い工程で効率良
く生産できる。従来の天然漁獲物を原料とする製造法に
比べ、原料の調達が不安定になったりすることがなく、
原料の品質が変わって製品の品質にも影響を及ぼすとい
うようなことが防げる。しかも従来のキトサンの製造方
法のようにキチンを脱灰および脱アセチル化するという
ような工程を含まないので廃水による環境汚染の恐れも
軽減できる。
適用するキトサンの製造方法によれば、工業的生産によ
り得られるものを原料として、そこに微生物の増殖作用
を利用し、品質の安定したキトサンを短い工程で効率良
く生産できる。従来の天然漁獲物を原料とする製造法に
比べ、原料の調達が不安定になったりすることがなく、
原料の品質が変わって製品の品質にも影響を及ぼすとい
うようなことが防げる。しかも従来のキトサンの製造方
法のようにキチンを脱灰および脱アセチル化するという
ような工程を含まないので廃水による環境汚染の恐れも
軽減できる。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成４年８月２６日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２０】実施例５ 実施例１と同一の条件で前培養体を得た。一方、本培養
培地は、酵母エキスのみ21g/リットル、麦芽エキスのみ
21g/リットル、ペプトンのみ35g/リットル、グルコース
のみ70g/リットル、硫酸マグネシウム（７水和物）のみ
14g/リットルで他の成分は実施例１と同一の条件で混合
し本培養培地を調製する。前記前培養体５ミリリットル
を、フラスコ内の本培養培地 100ミリリットルに摂取
し、27℃、200rpmの条件で72時間培養した。これにより
得られた本培養体を実施例１と同一の条件による熱可性
処理、抽出、析出の工程を経てキトサンを得た。前培養
培地と同一の割合で混合した培地を基準としたときの各
成分の増加に伴うキトサン含量の相対値は酵母エキスの
みを増加した場合が1.29倍、ペプトンのみを増加したも
のが0.76倍、硫酸マグネシウム（７水和物）のみを増加
した場合1.75倍、他の成分については若干増加した。
培地は、酵母エキスのみ21g/リットル、麦芽エキスのみ
21g/リットル、ペプトンのみ35g/リットル、グルコース
のみ70g/リットル、硫酸マグネシウム（７水和物）のみ
14g/リットルで他の成分は実施例１と同一の条件で混合
し本培養培地を調製する。前記前培養体５ミリリットル
を、フラスコ内の本培養培地 100ミリリットルに摂取
し、27℃、200rpmの条件で72時間培養した。これにより
得られた本培養体を実施例１と同一の条件による熱可性
処理、抽出、析出の工程を経てキトサンを得た。前培養
培地と同一の割合で混合した培地を基準としたときの各
成分の増加に伴うキトサン含量の相対値は酵母エキスの
みを増加した場合が1.29倍、ペプトンのみを増加したも
のが0.76倍、硫酸マグネシウム（７水和物）のみを増加
した場合1.75倍、他の成分については若干増加した。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 三好 洋 神奈川県川崎市高津区坂戸３丁目２番１号 信越化学工業株式会社コーポレートリサ ーチセンター内 (72)発明者 渡辺 淳 神奈川県川崎市高津区坂戸３丁目２番１号 信越化学工業株式会社コーポレートリサ ーチセンター内 (72)発明者 千葉 徹 神奈川県川崎市高津区坂戸３丁目２番１号 信越化学工業株式会社コーポレートリサ ーチセンター内 (72)発明者 遠藤 勲 埼玉県和光市広沢２番１号 理化学研究所 内
Claims (6)
- 【請求項１】 酵母エキス、麦芽エキス、ペプトン、グ
ルコースおよび硫酸マグネシウムを含む前培養培地にム
コラセアエ（Mucoraceae）科の糸状菌を接種して前培養
した前培養体を、該前培養培地と本質的に同一組成の本
培養培地に接種して本培養することを特徴とするキトサ
ンの製造方法。 - 【請求項２】 前記本培養により得た本培養体を、熱苛
性ソーダ溶液で処理した後、酢酸水溶液で抽出し、アル
カリ性にしてキトサンを析出沈殿させることを特徴とす
る請求項１に記載のキトサンの製造方法。 - 【請求項３】 該ムコラセアエの糸状菌がアブシディア
・コエルレア(Absidia coerulea) であることを特徴と
する請求項１または２に記載のキトサンの製造方法。 - 【請求項４】 該本培養培地の成分濃度が該前培養培地
の成分濃度の１〜７倍であることを特徴とする請求項
１、２または３に記載のキトサンの製造方法。 - 【請求項５】 該前培養培地および該本培養培地のｐＨ
が４〜７であることを特徴とする請求項１、２、３また
は４に記載のキトサンの製造方法。 - 【請求項６】 該前培養培地における前培養および該本
培養培地における本培養の温度が20〜30℃であることを
特徴とする請求項１、２、３、４または５に記載のキト
サンの製造方法。
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| CA002077962A CA2077962C (en) | 1991-09-11 | 1992-09-10 | Method for preparing chitosan |
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| JP23189391 | 1991-09-11 | ||
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|---|---|---|---|
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|---|---|---|---|---|
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| JP2010162046A (ja) * | 2010-03-30 | 2010-07-29 | Food Industry Res & Dev Inst | キトサン及びキチンの生産 |
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| US7923437B2 (en) * | 2001-02-16 | 2011-04-12 | Cargill, Incorporated | Water soluble β-glucan, glucosamine, and N-acetylglucosamine compositions and methods for making the same |
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| US20060003965A1 (en) * | 2002-11-01 | 2006-01-05 | Fosdick Lawrence D | N-acetyl-d-glucosamine (nag) supplemented food products and beverages |
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Family Cites Families (8)
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| DE3643467A1 (de) * | 1986-12-19 | 1988-06-30 | Wintershall Ag | Verfahren zur extrazellulaeren herstellung nichtionischer biopolymerer und deren verwendung |
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| WO1990014071A2 (de) * | 1989-05-17 | 1990-11-29 | Rhone-Poulenc Chemicals Limited | Kosmetische präparate |
-
1992
- 1992-08-05 JP JP4209203A patent/JPH05199892A/ja active Pending
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- 1992-09-10 EP EP92115491A patent/EP0531991B1/en not_active Expired - Lifetime
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- 1992-09-10 CA CA002077962A patent/CA2077962C/en not_active Expired - Fee Related
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001211893A (ja) * | 2000-01-31 | 2001-08-07 | Food Industry Res & Dev Inst | キトサン及びキチンの生産 |
| KR100470609B1 (ko) * | 2002-06-19 | 2005-02-21 | 경상대학교산학협력단 | 균류로부터 생산된 키토산을 이용한 늦죽순 병조림의 백탁방지방법 |
| JP2010162046A (ja) * | 2010-03-30 | 2010-07-29 | Food Industry Res & Dev Inst | キトサン及びキチンの生産 |
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