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JPH05168485A - 新規物質ksb−8200w及びその製造法 - Google Patents

新規物質ksb−8200w及びその製造法

Info

Publication number
JPH05168485A
JPH05168485A JP3344243A JP34424391A JPH05168485A JP H05168485 A JPH05168485 A JP H05168485A JP 3344243 A JP3344243 A JP 3344243A JP 34424391 A JP34424391 A JP 34424391A JP H05168485 A JPH05168485 A JP H05168485A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
ksb
substance
culture
water
magnetic resonance
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP3344243A
Other languages
English (en)
Inventor
Kenji Yamashita
賢次 山下
Kozo Nagayama
孝三 永山
Hiroshi Abe
洋 阿部
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kumiai Chemical Industry Co Ltd
Original Assignee
Kumiai Chemical Industry Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kumiai Chemical Industry Co Ltd filed Critical Kumiai Chemical Industry Co Ltd
Priority to JP3344243A priority Critical patent/JPH05168485A/ja
Publication of JPH05168485A publication Critical patent/JPH05168485A/ja
Pending legal-status Critical Current

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  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

(57)【要約】 【構成】 ストレプトミセス属に属する微生物を培養し
て得られる、分子式C131956で表わされる新規物
質KSB−8200W及びその製造法。 【効果】 植物調節剤、除草剤などとして有用である。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、植物調節活性を有する
新規な生理活性物質及びその製造法に関する。
【0002】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】従来、
数多くの生理活性物質が発見され、医薬品、動物用薬
品、農薬などの分野で実用化されている。
【0003】しかしながら、多くの医療又は産業分野に
おいては、いまだ有効な生理活性物質が見出されないた
めに、解決されていない課題が残されている。例えば、
植物調節剤や除草剤の分野においても、新しい作用を有
する新規な生理活性物質は常に要望されていた。
【0004】
【課題を解決するための手段】斯かる実情において、本
発明者らは、生理活性を有する物質の探索を続けた結
果、ストレプトミセス属に属するある菌株の培養液中
に、植物調節活性を有する物質が生産されていることを
見出し、新規物質KSB−8200Wを単離し、その理
化学的性状及び生物学的性状を確定することにより、本
発明を完成した。
【0005】すなわち、本発明は、新規な生理活性物質
KSB−8200W(以下、「KSB−8200W物
質」という)及びストレプトミセス属に属するKSB−
8200W生産菌を培養し、該培養物から採取すること
を特徴とするKSB−8200W物質の製造法を提供す
るものである。
【0006】本発明で用いられるKSB−8200W物
質生産菌は、ストレプトミセス(Streptomyc
es)属に属する微生物であって、その培養物中に採取
するに充分な量のKSB−8200W物質を生産する能
力を有するものであればいかなるものであってもよい。
このような菌株としては、例えば本発明者らにより土壌
より新たに分離されたKSB−8200株(以下、「本
菌株」という)がある。本菌株の微生物学的性状は以下
に示す通りである。なお、本菌株の特徴付けは、国際ス
トレプトミセス計画(International S
treptomyces Project;ISP)の
方法とワックスマン氏の方法に、その記載はISPの例
に準じた。
【0007】(イ)形態的性質 基菌糸は分岐しながら伸張し、菌糸の分断は観察されな
い。気中菌糸はスターチ寒天培地、イースト・麦芽寒天
培地等で旺盛に着生し、胞子形成も良好である。気中菌
糸は分岐しながら伸張し、コンパクトな閉鎖型の螺旋糸
又は短い解放型の螺旋糸となる。長時間培養すると胞子
鎖先端が黒粘質塊化し、更に進んだ部分は気中菌糸全体
が黒粘質塊化する。胞子鎖の幅は0.7ないし0.9ミ
クロン、胞子表面はしわ状(Rugose)を呈し、胞
子の区切りが不鮮明なため、詳しい個々の胞子の形状及
び連結数は不明であるが、10個以上の連結が認められ
る。また、胞子は運動性を示さず、胞子嚢、菌核等は観
察されない。
【0008】(ロ)ジアミノピメリン酸分析 全菌体加水分解物の分析からL,L−ジアミノピメリン
酸が認められ、細胞壁タイプI型である。
【0009】(ハ)各種培地における生育状態 培養3週間目の生育状態は表1に示す通りである。な
お、色調の判別は日本規格協会のJIS色名帳に準じ
た。
【0010】
【表1】
【0011】(ニ)生理的性質
【0012】(ホ)各炭素の利用性(ブリドハム・ゴド
リーブ寒天培地上) D−キシロース、D−グルコース、D−フルクトース、
L−ラムノースをよく利用する。また、L−アラビノー
ス、イノシトールを利用しない。
【0013】上記の菌学的性質をバージーズ・マニュア
ル・オブ・システマテック・バクテリオロジー、4巻、
2451−2492頁(1989年)を参照して同定を
行った結果、KSB−8200株はストレプトミセス・
ハイグロスコピカスとよく一致することから、ストレプ
トミセス・ハイグロスコピカス KSB−8200(S
treptomyces hygroscopicus
KSB−8200)と命名し、工業技術院微生物工業
技術研究所に寄託した(微工研菌寄第12538号)。
【0014】本菌株は他の微生物の場合にみられるよう
にその性状が変化しやすい。例えば本菌株の、又はこの
株に由来する突然変異株(自然発生又は誘発性)、形質
接合体又は遺伝子組換体であっても、KSB−8200
W物質の生産能を有するストレプトミセス属(Stre
ptomyces)の菌はすべて本発明の方法に使用す
ることができる。
【0015】本発明においては、前記の菌が通常の微生
物が利用しうる栄養物を含有する培地で培養する。栄養
源としてはグルコース、水アメ、デキストリン、シュク
ロース、デンプン、糖蜜、動・植物油等を使用できる。
また、窒素源として大豆粉、小麦胚芽、コーンスティー
プ・リカー、綿実粕、肉エキス、ペプトン、酵母エキ
ス、硫酸アンモニウム、硝酸ソーダ、尿素等を使用でき
る。その他必要に応じて、ナトリウム、カリウム、カル
シウム、マグネシウム、コバルト、塩素、リン酸、硫
酸、その他のイオンを生成することのできる無機塩類を
添加することも有効である。また、菌の生育を助け、K
SB−8200W物質の生産を促進するような有機又は
無機物を適当に添加することができる。
【0016】培養法としては、好気的条件下での培養
法、特に深部培養法が最も適している。培養に適当な温
度は10〜30℃であるが、特に20〜27℃付近で培
養するのが好ましい。KSB−8200W物質の生産は
培地や培養条件により異なるが、振盪培養、タンク培養
とも通常3〜10日の間でその蓄積が最高に達する。培
養物中のKSB−8200W物質の蓄積量が最高になっ
た時に培養を停止し、培養液から目的物質を単離精製す
る。
【0017】KSB−8200W物質を培養物から採取
するにあたっては、活性炭、アルミナ、シリカゲルなど
の吸着剤、ダイヤイオンHP−20(三菱化成(株)
製)などの合成吸着剤、イオン交換樹脂、イオン交換ゲ
ル濾過剤などのカラムクロマトグラフィーや酢酸エチ
ル、ブタノールなどによる溶剤抽出法が使用される。
【0018】以上のような方法により、あるいはこれら
を適宜組み合わせることにより、高純度のKSB−82
00W物質が得られる。得られたKSB−8200W物
質の理化学的性状は次の通りである。
【0019】(1)外観:淡黄色粉末 (2)融点:明確な融点を示さない(吸湿性) (3)紫外部吸収スペクトル:図1 (4)赤外部吸収スペクトル:図2 (5)1H−核磁気共鳴スペクトル:図3 (6)13C−核磁気共鳴スペクトル:図4 (7)分子式:C131956 (8)分子量:341(FAB−MS) (9)溶解性:水、メタノールに可溶、エタノール、ア
セトン、酢酸エチル、クロロホルム、エチルエーテルに
難溶 (10)呈色反応:ヨード、テトラゾリウムブルー、2,
4−ジニトロフェニルヒドラジン試薬に陽性、硫酸、塩
化第二鉄試薬に陰性 (11)薄膜クロマトグラフィーのRf値:0.25〔薄
膜シリカゲル・プレート(メルク社製Art.571
4)上で、ブタノール:酢酸:水=3:1:2で展開〕
【0020】
【実施例】次に、実施例及び実験例を挙げ、本発明を更
に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではな
い。 実施例1 可溶性デンプン3.0%、ペプトン0.5%、乾燥酵母
1.0%、脱脂大豆1.0%、リン酸2水素カリウム
0.2%、食塩0.2%、炭酸カルシウム0.3%を含
有する培地を100mlずつ500ml三角コルベン2本に
分注し、120℃において20分間高圧滅菌した。これ
にストレプトミセス・ハイグロスコピカス(Strep
tomyces hygroscopicus)KSB
−8200株を1白金耳ずつ植菌し、28℃にて5日
間、200r.p.m にて振盪培養し種菌を得た。2基の3
0l容ジャーファーメンターに上記種菌培養と同一培地
を20l仕込み、120℃で20分間蒸気滅菌した。そ
れぞれに上記の種菌1本を移植し、攪拌速度400r.p.
m 、通気量20l/min の条件下で、27℃で120時
間通気攪拌培養した。培養終了後、培養液に4%のケイ
藻土を加え、濾過にて菌体と50lの培養濾液を得た。
【0021】実施例2 実施例1で得られた培養濾液50lは10lのダイヤイ
オンHP−20樹脂(三菱化成(株)製)を通過させ、
通過液を10lの強陰イオン交換樹脂であるダイヤイオ
ンPA308樹脂(三菱化成(株)製)に吸着させた
後、0.5N HClで溶出した。12lの溶出液はN
aOHで中和後、360gの粉末活性炭に吸着させ、濾
過後、60%アセトン水を加えて攪拌し、有効成分を溶
出した。溶出液は減圧下でアセトンを除去し、濃縮液2
00mlとした。濃縮液は500mlのC18逆相オープンカ
ラム(ナカライテスク(株)製)を通過させ、活性画分
を濃縮し、23.9gの粗精製物質を得た。この粗精製
物質を水に溶解し、エタノールを終濃度80%になるよ
うに加え、生じた不溶物を遠心分離により集め、0.0
2%のトリフルオロ酢酸を含む水(pH3.0)に溶解し
た。これを高速液体クロマトグラフィー用分取逆相カラ
ム(ナカライテスク(株)製:コスモシール5C18−
AR、20×250mm)にチャージし、同移動相により
流速10ml/min で展開し活性画分を集め、減圧下濃縮
乾固し、純度95%の淡黄色粉末290mgを得た。この
粉末をメタノールに溶解し、順相分取TLC(メルク社
製:Art.5717)にチャージし、ブタノール:酢
酸:水=3:1:2の溶媒で展開した。活性画分をメタ
ノールで抽出し、濃縮後、前述と同様の高速液体クロマ
トグラフィー用分取逆相カラムにチャージし、展開し活
性画分を集め、減圧下濃縮乾固し、KSB−8200W
物質を210mg得た。得られた物質は、前述の理化学的
性状を有していた。また、元素分析値は以下のとおりで
あった。なお、KSB−8200W物質は吸湿性を有す
るため、モノアセチル体に交換して測定した。 (C152157として) 計算値:C 46.99、H 5.52、N 18.2
7 分析値:C 47.02、H 5.34、N 18.3
【0022】実験例1 実施例により調製したKSB−8200W物質を含む寒
天上にイネ及びダイコンの発芽種子を置き、一定時間生
育させた後、地上部及び根部の生育を測定し、各薬剤の
生育抑制効果を検討した。結果を表2に示す。無処理区
と比較しKSB−8200W物質は5×10-4Mでイネ
の地上部及び根部に対し約95%の生育抑制効果を示し
た。一方ダイコンについても同濃度でイネよりやや弱い
ものの地上部及び根部に対し明らかな生育抑制が認めら
れた。
【0023】
【表2】
【0024】
【発明の効果】本発明によれば、KSB−8200W物
質を効率よく製造することができ、また得られたKSB
−8200W物質は植物調節活性を有するため、植物調
節剤、除草剤などとして有用である。
【図面の簡単な説明】
【図1】KSB−8200W物質の水溶液中で測定した
紫外部吸収スペクトルを示す図面である。
【図2】KSB−8200W物質のKBr錠で測定した
赤外部吸収スペクトルを示す図面である。
【図3】KSB−8200W物質の重水中で測定した1
H−核磁気共鳴スペクトルを示す図面である。
【図4】KSB−8200W物質の重水中で測定した13
C−核磁気共鳴スペクトルを示す図面である。

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 次の理化学的性質を有する物質KSB−
    8200W。 (1)外観:淡黄色粉末 (2)融点:明確な融点を示さない(吸湿性) (3)紫外部吸収スペクトル:図1 (4)赤外部吸収スペクトル:図2 (5)1H−核磁気共鳴スペクトル:図3 (6)13C−核磁気共鳴スペクトル:図4 (7)分子式:C131956 (8)分子量:341(FAB−MS) (9)溶解性:水、メタノールに可溶、エタノール、ア
    セトン、酢酸エチル、クロロホルム、エチルエーテルに
    難溶 (10)呈色反応:ヨード、テトラゾリウムブルー、2,
    4−ジニトロフェニルヒドラジン試薬に陽性、硫酸、塩
    化第二鉄試薬に陰性 (11)薄膜クロマトグラフィーのRf値:0.25〔薄
    膜シリカゲル・プレート(メルク社製Art.571
    4)上で、ブタノール:酢酸:水=3:1:2で展開〕
  2. 【請求項2】 ストレプトミセス属に属するKSB−8
    200W生産菌を培養し、該培養物から採取することを
    特徴とする請求項1記載の物質KSB−8200Wの製
    造法。
JP3344243A 1991-12-26 1991-12-26 新規物質ksb−8200w及びその製造法 Pending JPH05168485A (ja)

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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011021580A1 (ja) * 2009-08-18 2011-02-24 三井化学アグロ株式会社 A-87774化合物又はその塩、それらの製法及びそれらを有効成分として含有する農薬

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