JP4477285B2 - 抗炎症剤、ＰＧＥ２産生抑制剤、ＩＬ−１α産生抑制剤及びＩＬ−６産生抑制剤 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗炎症剤、ＰＧＥ2産生抑制剤、ＩＬ−１α産生抑制剤及びＩＬ−６産生抑制剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
一般に炎症は生体に何らかの害をもたらす侵襲が加わったり、損傷が生じた際に、その損傷部位を修復、再生しようとする生体の防御反応である。生体はこの防御反応によって、組織や細胞の損傷の広がりを抑え、損傷の原因を排除し、組織を修復しようとするが、一方で、過度の痛み、腫れ、かゆみ及び発熱等が起こり、組織の損傷が逆に増幅されることがある等、かえって生体にとって好ましくない症状が発生することもある。
故に、過度の炎症を抑制することは患者の苦痛を軽減し、損傷の治療を早めるために必要であり、その炎症抑制手段として、抗炎症効果のある抗炎症剤の投与が行われている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
ところが、これまで開発されてきた抗炎症剤は優れた効果を有するが、その大部分が目的とする抗炎症作用以外に強い生理作用を併有することが知られている。
【０００４】
そこで本発明は、抗炎症作用をもつと同時に安全性の高い抗炎症剤を提供することを課題とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らによって初めて、カルノシン酸、カルノソール、及びノバラ抽出物が優れた抗炎症作用を有し、特に炎症反応のケミカルメディエーターであるＰＧＥ2（プロスタグロンジンＥ2）及び炎症性サイトカインであるＩＬ−１α（インターロイキン−１α）及びＩＬ−６（インターロイキン−６）の産生を有効に抑制すると同時に生体に対しては安全であることが見出され、本発明が完成された。
【０００６】
即ち本発明の抗炎症剤は、カルノシン酸、カルノソール、及びノバラ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする。又、本発明によれば、カルノシン酸、カルノソール、及びノバラ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有するＰＧＥ2産生抑制剤、ＩＬ−１α産生抑制剤及びＩＬ−６産生抑制剤が提供される。
【０００７】
本発明の抗炎症剤に使用されるサクラダソウは、キキョウ科Ｐｒａｔｉａ属（銅錘玉帯草属）に属し、匍匐性の多年草の植物である。
サクラダソウ抽出物は、サクラダソウを乾燥し、細切し、水、エタノール等の親水性有機溶剤、又はこれらの混合物に浸漬し、得られた液をろ過して得られる。該抽出物は、茎葉部、果実部、毛状根部等に分けることができ、茎葉部及び果実部が特に好ましく用いられる。
ローズマリー抽出物、サクラ抽出物、ソテツ抽出物、ノバラ抽出物、イチゴ抽出物、ユキノシタ抽出物、クズ抽出物、レモングラス抽出物及びユキヤナギ抽出物も、サクラダソウ抽出物と同様にして得ることができる。また、カルノシン酸及びカルノソールはローズマリーから単離される。
【０００８】
抗炎症剤中のサクラダソウ抽出物、ローズマリー抽出物、カルノシン酸、サクラ抽出物、ソテツ抽出物、カルノソール、ノバラ抽出物、イチゴ抽出物、ユキノシタ抽出物、クズ抽出物、レモングラス抽出物及びユキヤナギ抽出物から選ばれる少なくとも１種の配合量は、特に限定されるものではないが、乾燥固形物重量で、総量を基準として０．０００１〜２０．０重量％が好ましく、更に好ましくは０．０００５〜５．０重量％である。
該配合量が０．０００１重量％未満であると、本発明の効果が充分に得られず、一方２０．０重量％を超えても、その増量に見合った効果の向上は認められない。
【０００９】
本発明の抗炎症剤は、皮膚外用剤として、例えば、ローション類、乳液類、クリーム類、軟膏類、パック類等の剤型とすることができる。
【００１０】
本発明の抗炎症剤には、色素、防腐剤、界面活性剤、香料、顔料等を適宜配合することができる。
【００１１】
【実施例】
以下、本発明を実施例に基づいてさらに詳しく説明する。ただし本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。なお、以下の調製例及び実施例中％とあるのは、特にことわらない限り重量％を示す。
【００１２】
調製例１
〔サクラダソウ抽出物の調製〕
サクラダソウは、茎葉培養系により大量増殖させて得た。得られたサクラダソウを自然乾燥し、茎葉部、果実部及び毛状根部に分け、それぞれ細切し、５０％エタノール水溶液あるいは水に一晩浸漬し、ろ紙でろ過して、抽出物として得た。
【００１３】
〔サクラダソウ抽出物の分画〕
得られた茎葉部の５０％エタノール抽出物を、エバポレーターにより糊状になるまで濃縮した。この濃縮エキスに水及びヘキサンを同量ずつ加え、分液ロートで分配した。
水層は遠心分離により沈殿と上清とに分け、沈殿物は濃縮乾固後５０％エタノールに溶解又は分散させ、５０％エタノールを溜去後、凍結乾燥した。ヘキサン層はヘキサンを溜去後、５０％エタノールに溶解、エタノール溜去後、凍結乾燥した。
【００１４】
実施例１
（サクラダソウ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
〔重層表皮細胞の作成（液層培養法）〕
ＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２（Ｋｕｒａｂｏ）を用いてセミコンフルエントに増殖させた凍結正常ヒト表皮細胞（初代、新生児包皮由来：ＮＨＥＫ（Ｆ）ＣＡＳＣＡＤＥ、３次培養）を９６ウェル培養プレート（ＩＷＡＫＩ）に６０，０００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）ずつ播種した。２４時間培養し、細胞が接着していることを確認した後、表皮細胞の分化を促すために１．２ｍＭＣａ2+を含むＫ１１０ｔｙｐｅＩＩ添加剤＋（Ｋ１１０ＩＩ（＋）、Ｋｙｏｋｕｔｏ）に培地交換した。１．２ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（＋）で７日間培養し、重層表皮細胞とした。途中２日毎に培地交換した。
【００１５】
サクラダソウ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果については、以下の実験によって確認した。
得られた重層表皮細胞の培地を吸引除去して、１．２ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（−）２００μｌで細胞を洗浄し、同培地２００μｌで２時間プレインキュベートした。その後、培地を吸引除去し、ＵＶＢ（紫外線Ｂ領域）を照射した。ＵＶＢランプはＴＯＳＨＩＢＡ ＦＬ２０ＳＥ、照射装置はデルマレイ照射装置（エーザイ）を使用し、ランプ点灯約１時間後より照射を開始した。照射強度は０．５ｍＷ／ｃｍ2になるよう高さを調整し、５０ｍＪ／ｃｍ2のＵＶＢを照射した。なお、照射中、マイクロプレートのフタははずした。
ＵＶＢ照射後、茎葉部及び果実部から採取したサクラダソウ抽出物（水抽出物及び５０％エタノール抽出物）をそれぞれ含む１．２ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（−）２００μｌ（サクラダソウ濃度：１μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ）を加え、培養した。２４時間培養後、上清を回収し、該上清中のＰＧＥ2をＰＧＥ2 ＥＩＡ ｓｙｓｔｅｍ（ＢＩＯＴＲＡＫ）を用いて定量した。吸光度測定にはマイクロプリートリーダＥＬ３１２ｅ(ＢＩＯ−ＴＥＫ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴＳ ＩＮＣ)を用いた。
結果を図１に示す。
なお、図１中、Ａは茎葉部の５０％エタノール抽出物、Ｂは茎葉部の水抽出物、Ｃは果実部の５０％エタノール抽出物及びＤは果実部の水抽出物に関する結果を示す。
【００１６】
図１のＡ及びＢから明らかなように、サクラダソウ茎葉部の５０％エタノール抽出物は、該サクラダソウ抽出物を加えない場合はＰＥＧ2の産生量が約２０ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのが、サクラダソウ抽出物濃度が１０μｇ／ｍｌで約１７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１００μｇ／ｍｌ濃度で約１０ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少した。サクラダソウ茎葉部の水抽出物は、該サクラダソウ抽出物を加えない場合はＰＥＧ2の産生量が約２０ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのが、サクラダソウ抽出物濃度が１０μｇ／ｍｌ濃度で約１５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１００μｇ／ｍｌ濃度で約１０ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少した。即ちサクラダソウ茎葉部は、５０％エタノール抽出物及び水抽出物どちらもＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
又同様に、Ｃ及びＤから明らかなように、果実部の５０％エタノール抽出物は、該サクラダソウ抽出物を加えない場合はＰＥＧ2の産生量が約２１ｎｇ／ｍｌｍｅｄｉｕｍであったのが、１００μｇ／ｍｌ濃度で約１６ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少し、水抽出物は、該サクラダソウ抽出物を加えない場合、ＰＥＧ2の産生量が約２１ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのが、１００μｇ／ｍｌ濃度で約１８ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少し、これもＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
特に茎葉部の抽出物の活性は、１００μｇ／ｍｌ濃度で約５０％の抑制率が得られ、サクラダソウ抽出物を含有しない場合に比べてＰＧＥ2産生抑制効果が非常に優れていた。
尚、「ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍ」とは、培地１ｍｌ中に産生されるＰＧＥ2の産生量である。
【００１７】
実施例２
（サクラダソウ茎葉部の５０％エタノール抽出物の水画分及びヘキサン画分のＰＧＥ2産生抑制効果）
サクラダソウの茎葉部の５０％エタノール抽出物（ＳＡＬ７００）、サクラダソウの茎葉部の５０％エタノール抽出物−水層画分（ＳＡＬ７０１）、サクラダソウの茎葉部の５０％エタノール抽出物−水層沈殿（ＳＡＬ７０２）及びサクラダソウの茎葉部の５０％エタノール抽出物−ヘキサン層画分（ＳＡＬ７０３）について、サクラダソウ濃度２５μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ、２００μｇ／ｍｌで、実施例１と同様にしてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。
結果を図２に示す。
なお、図２中、ＡはＳＡＬ７００、ＢはＳＡＬ７０１、ＣはＳＡＬ７０２及びＤはＳＡＬ７０３に関する結果を示す。
【００１８】
図２から明らかなように、サクラダソウ茎葉部の５０％エタノール抽出物は、水層画分で、該サクラダソウ抽出物を含まない場合はＰＥＧ2の産生量が約６μｇ／ｍｌであったのが、サクラダソウ濃度が１００μｇ／ｍｌで約３．５μｇ／ｍｌに、２００μｇ／ｍｌで約２μｇ／ｍｌに減少した。又、水層沈殿では、該サクラダソウ抽出物を含まない場合、ＰＥＧ2の産生量が約５μｇ／ｍｌであったのが、サクラダソウ濃度が２００μｇ／ｍｌで約３μｇ／ｍｌに減少した。又、ヘキサン画分では、サクラダソウ抽出物を含まない場合、ＰＥＧ2の産生量が約７．５μｇ／ｍｌであったのが、サクラダソウ濃度が２００μｇ／ｍｌで約４μｇ／ｍｌに減少した。即ち水画分であってもヘキサン画分であってもＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。特に水画分は高い効果を示した。
【００１９】
実施例３
（サクラダソウ抽出物中の３種類のフラボノイドのＰＧＥ2産生抑制効果）
サクラダソウ抽出物から単離された３種類のフラボノイド〔リナリン（ｌｉｎａｒｉｎ）、ジオスミン（ｄｉｏｓｍｉｎ）及びルテオリン ７−Ｏ−グルコシド（ｌｕｔｅｏｌｉｎ ７−Ｏ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）〕について、実施例１と同様にして、フラボノイド濃度０．１μｇ／ｍｌ、１μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌで、ＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。
結果を図３に示す。
なお、図３中、Ａはリナリン、Ｂはジオスミン、Ｃはルテオリン ７−Ｏ−グルコシドに関する結果を示す。
【００２０】
図３から明らかなように、リナリンについては、無添加の場合、ＰＥＧ2の産生量が約６μｇ／ｍｌであったのが、リナリン濃度が０．１μｇ／ｍｌで約５μｇ／ｍｌに、１μｇ／ｍｌで約４μｇ／ｍｌに、１０μｇ／ｍｌで約３μｇ／ｍｌに、１００μｇ／ｍｌで約１．５μｇ／ｍｌに減少し、ジオスミンについては、無添加の場合、ＰＥＧ2の産生量が約４μｇ／ｍｌであったのが、ジオスミン濃度が１０μｇ／ｍｌで約２μｇ／ｍｌに、１００μｇ／ｍｌで約１μｇ／ｍｌに減少し、ルテオリン ７−Ｏ−グルコシドについては、無添加の場合、ＰＥＧ2の産生量が約７μｇ／ｍｌであったのが、ルテオリン ７−Ｏ−グルコシド濃度が１μｇ／ｍｌで約５μｇ／ｍｌに、１０μｇ／ｍｌで約３μｇ／ｍｌに、１００μｇ／ｍｌで約０．５μｇ／ｍｌに減少した。即ち、試験に使用した３種のフラボノイドはどれも、茎葉部５０％エタノール抽出物のＳＡＬ７０１に比べて、１／１０から１／２０の低い濃度でも、ＰＧＥ2産生抑制効果を示すことが確かめられた。
【００２１】
実施例４
（サクラダソウ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２（Ｋｕｒａｂｏ）を用いてセミコンフルエントに増殖させた凍結正常ヒト表皮細胞（ＮＨＥＫ（Ｆ）ＣＡＳＣＡＤＥ、３次培養）を９６ウェル培養プレート（ＩＷＡＫＩ）に６０，０００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）ずつ播種した。２４時間培養し、細胞が接着していることを確認した後、サクラダソウ抽出物を含む０．６ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（＋）で培地交換を行い７２時間培養した。途中４８時間で同培地で培地交換を行った。７２時間培養後、サクラダソウ抽出物及び５０μｇ／ｍｌＬＰＳを含む同培地にて培地交換し、そのまま１時間培養することにより、表皮細胞をＬＰＳ刺激した。刺激後の培養上清を回収し、該上清中のＩＬ−１α量を（ｈ）ＩＬ−１α ＥＬＩＳＡ ｓｙｓｔｅｍ（ＢＩＯＴＲＡＫ）を用いて定量した。
結果を図４に示す。
なお図４中、Ａは茎葉部の５０％エタノール抽出物、Ｂは果実部の５０％エタノール抽出物及びＣは毛状根部のエタノール抽出物に関する結果を示す。
【００２２】
図４から明らかなように、茎葉部５０％エタノール抽出物を使用する場合、０．５μｇ／ｍｌ濃度で約２５ｐｇ／ｍｌと５０％の抑制率、５μｇ／ｍｌ濃度で約２０ｐｇ／ｍｌと６０％の抑制率であった。又果実部５０％エタノール抽出物は０．５μｇ／ｍｌ濃度及び５μｇ／ｍｌ濃度で約３０ｐｇ／ｍｌと５０％の抑制率であった。毛状根部エタノール抽出物は、０．５μｇ／ｍｌ濃度及び５μｇ／ｍｌ濃度で約２５ｐｇ／ｍｌと６０％の抑制率であった。
【００２３】
実施例５
（サクラダソウ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
マウスマクロファージＲＡＷ２６４．７を２４ウェル培養プレート（ＩＷＡＫＩ）に１．０×１０5ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌずつ播種した。培地には１０容量％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ（１０容量％ＦＢＳ／ＤＭＥＭ）を使用し、２４時間培養した。細胞の状態を確認した後、培地を吸引除去し、サクラダソウ抽出物を含む１０容量％ＦＢＳ／ＤＭＥＭ４５０μｌを加え、続いてＬＰＳ（リポサッカライド、シグマ社製）５０μｌで刺激した。細胞刺激２４時間後、培養上清を回収し、該上清中のＩＬ−６量を（ｍ）ＩＬ−６ ＥＬＩＳＡ ｓｙｓｔｅｍ（ＢＩＯＴＲＡＫ）を用いて測定した。
結果を図５に示す。
なお図５中、Ａは茎葉部の５０％エタノール抽出物、Ｂは果実部の５０％エタノール抽出物、Ｃは果実部の水抽出物、Ｄは毛状根部のエタノール抽出物に関する結果を示す。
【００２４】
図５から明らかなように、茎葉部５０％エタノール抽出物の場合、濃度依存的に効果が認められ、１μｇ／ｍｌの濃度で約１０ｎｇ／ｍｌと抑制率は５７％であった。果実部５０％エタノール抽出物及び水抽出物は、０．０５〜１μｇ／ｍｌにおいて約２５％の程度の抑制率が得られた。毛状根部エタノール抽出物は、０．０５〜１μｇ／ｍｌにおいて濃度依存的に効果が認められた。
【００２５】
実施例６
（細胞毒性試験）
サクラダソウ抽出物の細胞生育への影響を検討するため、ａｌａｍａｒＢｌｕｅ Ａｓｓａｙを行った。すなわち培養上清を除去後、１０％ａｌａｍａｒＢｌｕｅを含む１．２ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（＋）２００μｌを加え、２時間インキュベーションした。上清の５５０ｎｍ及び６３０ｎｍにおける吸光度を測定した。数値は、サクラダソウ抽出物無添加群の吸光度を１００％として示した。
結果を図６に示す。
なお図６中、Ａは茎葉部の５０％エタノール抽出物、Ｂは茎葉部の水抽出物、Ｃは果実部の５０％エタノール抽出物、Ｄは果実部の水抽出物、Ｅは毛状根部のエタノール抽出物及びＦは毛状根部の水抽出物に関する結果を示す。
【００２６】
図６から明らかなように、サクラダソウの茎葉部、果実部及び毛状根部の各抽出物も、１〜１００μｇ／ｍｌにおいて細胞毒性及び細胞増殖作用は確認されなかった。
【００２７】
調製例２
〔ローズマリー抽出物の調製〕
ローズマリーの茎葉部を自然乾燥し、細切し、５０％エタノール水溶液に一晩浸漬し、ろ紙でろ過して抽出物を得た。
【００２８】
実施例７
（ローズマリー抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
ローズマリー５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図７に示す。
【００２９】
図７から明らかなように、ローズマリー５０％エタノール抽出物は、該ローズマリー抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、ローズマリー抽出物濃度０．５％溶液で約６ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１．０％溶液で約５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってローズマリー５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００３０】
実施例８
（ローズマリー抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ローズマリー５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図８に示す。
【００３１】
図８から明らかなように、ローズマリー５０％エタノール抽出物は、該ローズマリー抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、ローズマリー抽出物濃度０．１％溶液で約２５ｐｇ／ｍｌに、１．０％溶液で約２０ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってローズマリー５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００３２】
実施例９
（ローズマリー抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ローズマリー５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図９に示す。
【００３３】
図９から明らかなように、ローズマリー５０％エタノール抽出物は、該ローズマリー抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、ローズマリー抽出物濃度０．５％溶液で約１９ｎｇ／ｍｌに、１．０％溶液で約１７ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約６ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってローズマリー５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００３４】
調製例３
〔カルノシン酸の調製〕
ローズマリーを酢酸エチルで抽出し、その抽出液をエーテルと１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で振盪分配後、水酸化ナトリウム層を分取し、２Ｎ塩酸で中和後、エーテルで抽出した。エーテル抽出エキスはシリカゲルクロマトグラフィー（ベンゼン−アセトン（１０：１））に通し、ベンゼンで再結晶を行うと、無色粉末が析出した。
析出した無色粉末を除いた残りのベンゼン溶液をポリアミド処理後、微量のベンゼンに溶解し、ヘキサンを加えて再結晶を行い、無色針状晶のカルノシン酸を得た。
【００３５】
実施例１０
（カルノシン酸のＰＧＥ2産生抑制効果）
カルノシン酸を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図１０に示す。
【００３６】
図１０から明らかなように、カルノシン酸は、該カルノシン酸を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、カルノシン酸濃度１０μＭ（μｍｏｌ／ｌ、以下同）溶液で約３．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１０μＭ溶液で約２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってカルノシン酸は優れたＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００３７】
実施例１１
（カルノシン酸のＩＬ−１α産生抑制効果）
カルノシン酸を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図１１に示す。
【００３８】
図１１から明らかなように、カルノシン酸は、該カルノシン酸を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、カルノシン酸濃度１０μＭ溶液で約２０ｐｇ／ｍｌに、２０μＭ溶液で約１２ｐｇ／ｍｌに、４０μＭ溶液で約１０ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってカルノシン酸は優れたＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００３９】
実施例１２
（カルノシン酸のＩＬ−６産生抑制効果）
カルノシン酸を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図１２に示す。
【００４０】
図１２から明らかなように、カルノシン酸は、該カルノシン酸を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、カルノシン酸濃度１０μＭ溶液で約２０ｎｇ／ｍｌに、２０μＭ溶液で約１５ｎｇ／ｍｌに、４０μＭ溶液で約５ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってカルノシン酸は優れたＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００４１】
調製例４
〔サクラ抽出物の調製〕
サクラの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、サクラ５０％エタノール抽出物を得た。
【００４２】
実施例１３
（サクラ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
サクラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図１３に示す。
【００４３】
図１３から明らかなように、サクラ５０％エタノール抽出物は、該サクラ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、サクラ抽出物濃度０．５％溶液で約７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１．０％溶液で約５．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってサクラ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００４４】
実施例１４
（サクラ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
サクラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図１４に示す。
【００４５】
図１４から明らかなように、サクラ５０％エタノール抽出物は、該サクラ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、サクラ抽出物濃度０．５％溶液で約４０ｐｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約３０ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってサクラ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００４６】
実施例１５
（サクラ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
サクラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図１５に示す。
【００４７】
図１５から明らかなように、サクラ５０％エタノール抽出物は、該サクラ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２２ｎｇ／ｍｌであったのを、サクラ抽出物濃度１．０％溶液で約１７ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約１１ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってサクラ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００４８】
調製例５
〔ソテツ抽出物の調製〕
ソテツの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、ソテツ５０％エタノール抽出物を得た。
【００４９】
実施例１６
（ソテツ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
ソテツ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図１６に示す。
【００５０】
図１６から明らかなように、ソテツ５０％エタノール抽出物は、該ソテツ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、ソテツ抽出物濃度１．０％溶液で約１ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、２．０％溶液で約０．８ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってソテツ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００５１】
実施例１７
（ソテツ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ソテツ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図１７に示す。
【００５２】
図１７から明らかなように、ソテツ５０％エタノール抽出物は、該ソテツ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約４９ｐｇ／ｍｌであったのを、ソテツ抽出物濃度２．０％溶液で約４０ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってソテツ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００５３】
実施例１８
（ソテツ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ソテツ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図１８に示す。
【００５４】
図１８から明らかなように、ソテツ５０％エタノール抽出物は、該ソテツ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、ソテツ抽出物濃度０．５％溶液で約２０ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約９ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってソテツ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００５５】
調製例６
〔カルノソールの調製〕
ローズマリーを酢酸エチルで抽出し、その抽出物をエーテルと１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で振盪分配後、水酸化ナトリウム層を分取し、２Ｎ塩酸で中和後、エーテルで抽出した。エーテル抽出エキスはシリカゲルクロマトグラフィー（ベンゼン−アセトン（１０：１）に通し、ベンゼンで再結晶を行い、得られた無色粉末を更にメタノールで再結晶し、無色針状晶カルノソールを得た。
【００５６】
実施例１９
（カルノソールのＰＧＥ2産生抑制効果）
カルノソールを用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図１９に示す。
【００５７】
図１９から明らかなように、カルノソールは、該カルノソールを含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、カルノソール濃度１０μＭ溶液で約３．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってカルノソールは優れたＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００５８】
実施例２０
（カルノソールのＩＬ−１α産生抑制効果）
カルノソールを用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図２０に示す。
【００５９】
図２０から明らかなように、カルノソールは、該カルノソールを含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、カルノソール濃度１０μＭ溶液で約２１ｐｇ／ｍｌに、２０μＭ溶液で約１６ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってカルノソールは優れたＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００６０】
実施例２１
（カルノソールのＩＬ−６産生抑制効果）
カルノソールを用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図２１に示す。
【００６１】
図２１から明らかなように、カルノソールは、該カルノソールを含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、カルノソール濃度１０μＭ溶液で約１９ｎｇ／ｍｌに、２０μＭ溶液で約１７ｎｇ／ｍｌに、４０μＭ溶液で約１１ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってカルノソールは優れたＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００６２】
調製例７
〔ノバラ抽出物の調製〕
ノバラの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、ノバラ５０％エタノール抽出物を得た。
【００６３】
実施例２２
（ノバラ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
ノバラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図２２に示す。
【００６４】
図２２から明らかなように、ノバラ５０％エタノール抽出物は、該ノバラ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、ノバラ抽出物濃度０．１％溶液で約５．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、０．５％溶液で約３ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってノバラ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００６５】
実施例２３
（ノバラ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ノバラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図２３に示す。
【００６６】
図２３から明らかなように、ノバラ５０％エタノール抽出物は、該ノバラ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、ノバラ抽出物濃度０．１％溶液で約４２ｐｇ／ｍｌに、０．５％溶液で約３６ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってノバラ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００６７】
実施例２４
（ノバラ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ノバラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図２４に示す。
【００６８】
図２４から明らかなように、ノバラ５０％エタノール抽出物は、該ノバラ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、ノバラ抽出物濃度０．５％溶液で約１８ｎｇ／ｍｌに、１．０％溶液で約１４ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約４ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってノバラ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００６９】
調製例８
〔イチゴ抽出物の調製〕
イチゴの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、イチゴ５０％エタノール抽出物を得た。
【００７０】
実施例２５
（イチゴ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
イチゴ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図２５に示す。
【００７１】
図２５から明らかなように、イチゴ５０％エタノール抽出物は、該イチゴ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、イチゴ抽出物濃度１．０％溶液で約６ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、２．０％溶液で約４．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってイチゴ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００７２】
実施例２６
（イチゴ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
イチゴ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図２６に示す。
【００７３】
図２６から明らかなように、イチゴ５０％エタノール抽出物は、該イチゴ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、イチゴ抽出物濃度０．５％溶液で約３５ｐｇ／ｍｌに、１．０％溶液で約３２ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってイチゴ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００７４】
実施例２７
（イチゴ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ノチゴ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図２７に示す。
【００７５】
図２７から明らかなように、イチゴ５０％エタノール抽出物は、該イチゴ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２５ｎｇ／ｍｌであったのを、イチゴ抽出物濃度１．０％溶液で約２０ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約８ｎｇ／ｍｌに、減少させた。従ってイチゴ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００７６】
調製例９
〔ユキノシタ抽出物の調製〕
ユキノシタの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、ユキノシタ５０％エタノール抽出物を得た。
【００７７】
実施例２８
（ユキノシタ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
ユキノシタ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図２８に示す。
【００７８】
図２８から明らかなように、ユキノシタ５０％エタノール抽出物は、該ユキノシタ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、ユキノシタ抽出物濃度０．５％溶液で約０．６ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１．０％溶液で約０．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってユキノシタ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００７９】
実施例２９
（ユキノシタ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ユキノシタ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図２９に示す。
【００８０】
図２９から明らかなように、ユキノシタ５０％エタノール抽出物は、該ユキノシタ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、ユキノシタ抽出物濃度０．５％溶液で約４０ｐｇ／ｍｌに、１．０％溶液で約３５ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってユキノシタ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００８１】
実施例３０
（ユキノシタ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ユキノシタ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図３０に示す。
【００８２】
図３０から明らかなように、ユキノシタ５０％エタノール抽出物は、該ユキノシタ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、ユキノシタ抽出物濃度１．０％溶液で約１８ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約１４ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってユキノシタ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００８３】
調製例１０
〔クズ抽出物の調製〕
クズの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、クズ５０％エタノール抽出物を得た。
【００８４】
実施例３１
（クズ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
クズ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図３１に示す。
【００８５】
図３１から明らかなように、クズ５０％エタノール抽出物は、該クズ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約２．３ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、クズ抽出物濃度０．５％溶液で約１．２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１．０％溶液で約１ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、２．０％溶液で約０．７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってクズ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００８６】
実施例３２
（クズ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
クズ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図３２に示す。
【００８７】
図３２から明らかなように、クズ５０％エタノール抽出物は、該クズ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、クズ抽出物濃度１．０％で約４２ｐｇ／ｍｌに、２．０％で約４０ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってクズ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００８８】
実施例３３
（クズ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
クズ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図３３に示す。
【００８９】
図３３から明らかなように、クズ５０％エタノール抽出物は、該クズ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、クズ抽出物濃度０．５％溶液で約１９ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約１１ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってクズ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００９０】
調製例１１
〔レモングラス抽出物の調製〕
レモングラスの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、レモングラス５０％エタノール抽出物を得た。
【００９１】
実施例３４
（レモングラス抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
レモングラス５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図３４に示す。
【００９２】
図３４から明らかなように、レモングラス５０％エタノール抽出物は、該レモングラス抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約２．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、レモングラス抽出物濃度０．５％溶液で約２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、２．０％溶液で約１．４ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってレモングラス５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００９３】
実施例３５
（レモングラス抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
レモングラス５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図３５に示す。
【００９４】
図３５から明らかなように、レモングラス５０％エタノール抽出物は、該レモングラス抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、レモングラス抽出物濃度０．５％溶液で約４３ｐｇ／ｍｌに、１．０％で約３３ｐｇ／ｍｌに、２．０％で約２４ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってレモングラス５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００９５】
実施例３６
（レモングラス抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
レモングラス５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図３６に示す。
【００９６】
図３６から明らかなように、レモングラス５０％エタノール抽出物は、該レモングラス抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、レモングラス抽出物濃度１．０％溶液で約１７ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約１４ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってレモングラス５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００９７】
調製例１２
〔ユキヤナギ抽出物の調製〕
ユキヤナギの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、ユキヤナギ５０％エタノール抽出物を得た。
【００９８】
実施例３７
（ユキヤナギ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
ユキヤナギ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図３７に示す。
【００９９】
図３７から明らかなように、ユキヤナギ５０％エタノール抽出物は、該ユキヤナギ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約２．９ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、ユキヤナギ抽出物濃度０．５％溶液で約２．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、２．０％溶液で約２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってユキヤナギ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【０】
実施例３８
（ユキヤナギ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ユキヤナギ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図３８に示す。
【０】
図３８から明らかなように、ユキヤナギ５０％エタノール抽出物は、該ユキヤナギ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、ユキヤナギ抽出物濃度０．５％溶液で約３０ｐｇ／ｍｌに、２．０％で約２７ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってユキヤナギ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【０】
実施例３９
（ユキヤナギ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ユキヤナギ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図３９に示す。
【０】
図３９から明らかなように、ユキヤナギ５０％エタノール抽出物は、該ユキヤナギ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、ユキヤナギ抽出物濃度０．５％溶液で約２０ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約１３ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってユキヤナギ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【０】
実施例４０
スクワレン、セチルイソオクタノエート及びマイクロクリスタリンワックスを加熱溶解後、粘土鉱物、ＰＯＥグリセロールトリイソステアリン酸エステル（界面活性剤）を加え、７０℃に調整し、均一に分散・溶解して油性ゲルを得た。
次に、所定濃度のサクラダソウ抽出物を精製水に溶解し、７０℃に調整し、油性ゲルの中へ十分に攪拌しながらゆっくりと添加した。
ホモミキサーで均一に混合した後、脱気、ろ過後、３０℃まで冷却し、クリームを得た。各成分の配合比は以下の通りである。
【０】
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
サクラダソウ抽出物 ０．０１
水 残量
【０】
実施例４１
サクラ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
サクラ抽出物 ０．０１
水 残量
【０】
実施例４２
ソテツ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
ソテツ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４３
ノバラ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
ノバラ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４４
イチゴ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
イチゴ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４５
ユキノシタ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
ユキノシタ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４６
クズ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
クズ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４７
レモングラス抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
レモングラス抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４８
ユキヤナギ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
ユキヤナギ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
【発明の効果】
本発明によれば、抗炎症作用をもつと同時に安全性の高い抗炎症剤、ＰＧＥ2産生抑制剤、ＩＬ−１α産生抑制剤、ＩＬ−６産生抑制剤及び抗アレルギー剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】サクラダソウ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図２】サクラダソウ抽出物画分のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図３】サクラダソウ由来フラボノイドのＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図４】サクラダソウ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図５】サクラダソウ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図６】サクラダソウ抽出物のヒト表皮細胞生育へ及ぼす影響を示すグラフ。
【図７】ローズマリー５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図８】ローズマリー５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図９】ローズマリー５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図１０】カルノシン酸のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図１１】カルノシン酸のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図１２】カルノシン酸のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図１３】サクラ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図１４】サクラ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図１５】サクラ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図１６】ソテツ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図１７】ソテツ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図１８】ソテツ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図１９】カルノソールのＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図２０】カルノソールのＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図２１】カルノソールのＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図２２】ノバラ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図２３】ノバラ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図２４】ノバラ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図２５】イチゴ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図２６】イチゴ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図２７】イチゴ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図２８】ユキノシタ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図２９】ユキノシタ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図３０】ユキノシタ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図３１】クズ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図３２】クズ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図３３】クズ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図３４】レモングラス５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図３５】レモングラス５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図３６】レモングラス５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図３７】ユキヤナギ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図３８】ユキヤナギ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図３９】ユキヤナギ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗炎症剤、ＰＧＥ2産生抑制剤、ＩＬ−１α産生抑制剤及びＩＬ−６産生抑制剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
一般に炎症は生体に何らかの害をもたらす侵襲が加わったり、損傷が生じた際に、その損傷部位を修復、再生しようとする生体の防御反応である。生体はこの防御反応によって、組織や細胞の損傷の広がりを抑え、損傷の原因を排除し、組織を修復しようとするが、一方で、過度の痛み、腫れ、かゆみ及び発熱等が起こり、組織の損傷が逆に増幅されることがある等、かえって生体にとって好ましくない症状が発生することもある。
故に、過度の炎症を抑制することは患者の苦痛を軽減し、損傷の治療を早めるために必要であり、その炎症抑制手段として、抗炎症効果のある抗炎症剤の投与が行われている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
ところが、これまで開発されてきた抗炎症剤は優れた効果を有するが、その大部分が目的とする抗炎症作用以外に強い生理作用を併有することが知られている。
【０００４】
そこで本発明は、抗炎症作用をもつと同時に安全性の高い抗炎症剤を提供することを課題とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らによって初めて、カルノシン酸、カルノソール、及びノバラ抽出物が優れた抗炎症作用を有し、特に炎症反応のケミカルメディエーターであるＰＧＥ2（プロスタグロンジンＥ2）及び炎症性サイトカインであるＩＬ−１α（インターロイキン−１α）及びＩＬ−６（インターロイキン−６）の産生を有効に抑制すると同時に生体に対しては安全であることが見出され、本発明が完成された。
【０００６】
即ち本発明の抗炎症剤は、カルノシン酸、カルノソール、及びノバラ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする。又、本発明によれば、カルノシン酸、カルノソール、及びノバラ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有するＰＧＥ2産生抑制剤、ＩＬ−１α産生抑制剤及びＩＬ−６産生抑制剤が提供される。
【０００７】
本発明の抗炎症剤に使用されるサクラダソウは、キキョウ科Ｐｒａｔｉａ属（銅錘玉帯草属）に属し、匍匐性の多年草の植物である。
サクラダソウ抽出物は、サクラダソウを乾燥し、細切し、水、エタノール等の親水性有機溶剤、又はこれらの混合物に浸漬し、得られた液をろ過して得られる。該抽出物は、茎葉部、果実部、毛状根部等に分けることができ、茎葉部及び果実部が特に好ましく用いられる。
ローズマリー抽出物、サクラ抽出物、ソテツ抽出物、ノバラ抽出物、イチゴ抽出物、ユキノシタ抽出物、クズ抽出物、レモングラス抽出物及びユキヤナギ抽出物も、サクラダソウ抽出物と同様にして得ることができる。また、カルノシン酸及びカルノソールはローズマリーから単離される。
【０００８】
抗炎症剤中のサクラダソウ抽出物、ローズマリー抽出物、カルノシン酸、サクラ抽出物、ソテツ抽出物、カルノソール、ノバラ抽出物、イチゴ抽出物、ユキノシタ抽出物、クズ抽出物、レモングラス抽出物及びユキヤナギ抽出物から選ばれる少なくとも１種の配合量は、特に限定されるものではないが、乾燥固形物重量で、総量を基準として０．０００１〜２０．０重量％が好ましく、更に好ましくは０．０００５〜５．０重量％である。
該配合量が０．０００１重量％未満であると、本発明の効果が充分に得られず、一方２０．０重量％を超えても、その増量に見合った効果の向上は認められない。
【０００９】
本発明の抗炎症剤は、皮膚外用剤として、例えば、ローション類、乳液類、クリーム類、軟膏類、パック類等の剤型とすることができる。
【００１０】
本発明の抗炎症剤には、色素、防腐剤、界面活性剤、香料、顔料等を適宜配合することができる。
【００１１】
【実施例】
以下、本発明を実施例に基づいてさらに詳しく説明する。ただし本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。なお、以下の調製例及び実施例中％とあるのは、特にことわらない限り重量％を示す。
【００１２】
調製例１
〔サクラダソウ抽出物の調製〕
サクラダソウは、茎葉培養系により大量増殖させて得た。得られたサクラダソウを自然乾燥し、茎葉部、果実部及び毛状根部に分け、それぞれ細切し、５０％エタノール水溶液あるいは水に一晩浸漬し、ろ紙でろ過して、抽出物として得た。
【００１３】
〔サクラダソウ抽出物の分画〕
得られた茎葉部の５０％エタノール抽出物を、エバポレーターにより糊状になるまで濃縮した。この濃縮エキスに水及びヘキサンを同量ずつ加え、分液ロートで分配した。
水層は遠心分離により沈殿と上清とに分け、沈殿物は濃縮乾固後５０％エタノールに溶解又は分散させ、５０％エタノールを溜去後、凍結乾燥した。ヘキサン層はヘキサンを溜去後、５０％エタノールに溶解、エタノール溜去後、凍結乾燥した。
【００１４】
実施例１
（サクラダソウ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
〔重層表皮細胞の作成（液層培養法）〕
ＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２（Ｋｕｒａｂｏ）を用いてセミコンフルエントに増殖させた凍結正常ヒト表皮細胞（初代、新生児包皮由来：ＮＨＥＫ（Ｆ）ＣＡＳＣＡＤＥ、３次培養）を９６ウェル培養プレート（ＩＷＡＫＩ）に６０，０００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）ずつ播種した。２４時間培養し、細胞が接着していることを確認した後、表皮細胞の分化を促すために１．２ｍＭＣａ2+を含むＫ１１０ｔｙｐｅＩＩ添加剤＋（Ｋ１１０ＩＩ（＋）、Ｋｙｏｋｕｔｏ）に培地交換した。１．２ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（＋）で７日間培養し、重層表皮細胞とした。途中２日毎に培地交換した。
【００１５】
サクラダソウ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果については、以下の実験によって確認した。
得られた重層表皮細胞の培地を吸引除去して、１．２ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（−）２００μｌで細胞を洗浄し、同培地２００μｌで２時間プレインキュベートした。その後、培地を吸引除去し、ＵＶＢ（紫外線Ｂ領域）を照射した。ＵＶＢランプはＴＯＳＨＩＢＡ ＦＬ２０ＳＥ、照射装置はデルマレイ照射装置（エーザイ）を使用し、ランプ点灯約１時間後より照射を開始した。照射強度は０．５ｍＷ／ｃｍ2になるよう高さを調整し、５０ｍＪ／ｃｍ2のＵＶＢを照射した。なお、照射中、マイクロプレートのフタははずした。
ＵＶＢ照射後、茎葉部及び果実部から採取したサクラダソウ抽出物（水抽出物及び５０％エタノール抽出物）をそれぞれ含む１．２ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（−）２００μｌ（サクラダソウ濃度：１μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ）を加え、培養した。２４時間培養後、上清を回収し、該上清中のＰＧＥ2をＰＧＥ2 ＥＩＡ ｓｙｓｔｅｍ（ＢＩＯＴＲＡＫ）を用いて定量した。吸光度測定にはマイクロプリートリーダＥＬ３１２ｅ(ＢＩＯ−ＴＥＫ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴＳ ＩＮＣ)を用いた。
結果を図１に示す。
なお、図１中、Ａは茎葉部の５０％エタノール抽出物、Ｂは茎葉部の水抽出物、Ｃは果実部の５０％エタノール抽出物及びＤは果実部の水抽出物に関する結果を示す。
【００１６】
図１のＡ及びＢから明らかなように、サクラダソウ茎葉部の５０％エタノール抽出物は、該サクラダソウ抽出物を加えない場合はＰＥＧ2の産生量が約２０ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのが、サクラダソウ抽出物濃度が１０μｇ／ｍｌで約１７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１００μｇ／ｍｌ濃度で約１０ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少した。サクラダソウ茎葉部の水抽出物は、該サクラダソウ抽出物を加えない場合はＰＥＧ2の産生量が約２０ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのが、サクラダソウ抽出物濃度が１０μｇ／ｍｌ濃度で約１５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１００μｇ／ｍｌ濃度で約１０ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少した。即ちサクラダソウ茎葉部は、５０％エタノール抽出物及び水抽出物どちらもＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
又同様に、Ｃ及びＤから明らかなように、果実部の５０％エタノール抽出物は、該サクラダソウ抽出物を加えない場合はＰＥＧ2の産生量が約２１ｎｇ／ｍｌｍｅｄｉｕｍであったのが、１００μｇ／ｍｌ濃度で約１６ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少し、水抽出物は、該サクラダソウ抽出物を加えない場合、ＰＥＧ2の産生量が約２１ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのが、１００μｇ／ｍｌ濃度で約１８ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少し、これもＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
特に茎葉部の抽出物の活性は、１００μｇ／ｍｌ濃度で約５０％の抑制率が得られ、サクラダソウ抽出物を含有しない場合に比べてＰＧＥ2産生抑制効果が非常に優れていた。
尚、「ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍ」とは、培地１ｍｌ中に産生されるＰＧＥ2の産生量である。
【００１７】
実施例２
（サクラダソウ茎葉部の５０％エタノール抽出物の水画分及びヘキサン画分のＰＧＥ2産生抑制効果）
サクラダソウの茎葉部の５０％エタノール抽出物（ＳＡＬ７００）、サクラダソウの茎葉部の５０％エタノール抽出物−水層画分（ＳＡＬ７０１）、サクラダソウの茎葉部の５０％エタノール抽出物−水層沈殿（ＳＡＬ７０２）及びサクラダソウの茎葉部の５０％エタノール抽出物−ヘキサン層画分（ＳＡＬ７０３）について、サクラダソウ濃度２５μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ、２００μｇ／ｍｌで、実施例１と同様にしてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。
結果を図２に示す。
なお、図２中、ＡはＳＡＬ７００、ＢはＳＡＬ７０１、ＣはＳＡＬ７０２及びＤはＳＡＬ７０３に関する結果を示す。
【００１８】
図２から明らかなように、サクラダソウ茎葉部の５０％エタノール抽出物は、水層画分で、該サクラダソウ抽出物を含まない場合はＰＥＧ2の産生量が約６μｇ／ｍｌであったのが、サクラダソウ濃度が１００μｇ／ｍｌで約３．５μｇ／ｍｌに、２００μｇ／ｍｌで約２μｇ／ｍｌに減少した。又、水層沈殿では、該サクラダソウ抽出物を含まない場合、ＰＥＧ2の産生量が約５μｇ／ｍｌであったのが、サクラダソウ濃度が２００μｇ／ｍｌで約３μｇ／ｍｌに減少した。又、ヘキサン画分では、サクラダソウ抽出物を含まない場合、ＰＥＧ2の産生量が約７．５μｇ／ｍｌであったのが、サクラダソウ濃度が２００μｇ／ｍｌで約４μｇ／ｍｌに減少した。即ち水画分であってもヘキサン画分であってもＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。特に水画分は高い効果を示した。
【００１９】
実施例３
（サクラダソウ抽出物中の３種類のフラボノイドのＰＧＥ2産生抑制効果）
サクラダソウ抽出物から単離された３種類のフラボノイド〔リナリン（ｌｉｎａｒｉｎ）、ジオスミン（ｄｉｏｓｍｉｎ）及びルテオリン ７−Ｏ−グルコシド（ｌｕｔｅｏｌｉｎ ７−Ｏ−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）〕について、実施例１と同様にして、フラボノイド濃度０．１μｇ／ｍｌ、１μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌで、ＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。
結果を図３に示す。
なお、図３中、Ａはリナリン、Ｂはジオスミン、Ｃはルテオリン ７−Ｏ−グルコシドに関する結果を示す。
【００２０】
図３から明らかなように、リナリンについては、無添加の場合、ＰＥＧ2の産生量が約６μｇ／ｍｌであったのが、リナリン濃度が０．１μｇ／ｍｌで約５μｇ／ｍｌに、１μｇ／ｍｌで約４μｇ／ｍｌに、１０μｇ／ｍｌで約３μｇ／ｍｌに、１００μｇ／ｍｌで約１．５μｇ／ｍｌに減少し、ジオスミンについては、無添加の場合、ＰＥＧ2の産生量が約４μｇ／ｍｌであったのが、ジオスミン濃度が１０μｇ／ｍｌで約２μｇ／ｍｌに、１００μｇ／ｍｌで約１μｇ／ｍｌに減少し、ルテオリン ７−Ｏ−グルコシドについては、無添加の場合、ＰＥＧ2の産生量が約７μｇ／ｍｌであったのが、ルテオリン ７−Ｏ−グルコシド濃度が１μｇ／ｍｌで約５μｇ／ｍｌに、１０μｇ／ｍｌで約３μｇ／ｍｌに、１００μｇ／ｍｌで約０．５μｇ／ｍｌに減少した。即ち、試験に使用した３種のフラボノイドはどれも、茎葉部５０％エタノール抽出物のＳＡＬ７０１に比べて、１／１０から１／２０の低い濃度でも、ＰＧＥ2産生抑制効果を示すことが確かめられた。
【００２１】
実施例４
（サクラダソウ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２（Ｋｕｒａｂｏ）を用いてセミコンフルエントに増殖させた凍結正常ヒト表皮細胞（ＮＨＥＫ（Ｆ）ＣＡＳＣＡＤＥ、３次培養）を９６ウェル培養プレート（ＩＷＡＫＩ）に６０，０００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）ずつ播種した。２４時間培養し、細胞が接着していることを確認した後、サクラダソウ抽出物を含む０．６ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（＋）で培地交換を行い７２時間培養した。途中４８時間で同培地で培地交換を行った。７２時間培養後、サクラダソウ抽出物及び５０μｇ／ｍｌＬＰＳを含む同培地にて培地交換し、そのまま１時間培養することにより、表皮細胞をＬＰＳ刺激した。刺激後の培養上清を回収し、該上清中のＩＬ−１α量を（ｈ）ＩＬ−１α ＥＬＩＳＡ ｓｙｓｔｅｍ（ＢＩＯＴＲＡＫ）を用いて定量した。
結果を図４に示す。
なお図４中、Ａは茎葉部の５０％エタノール抽出物、Ｂは果実部の５０％エタノール抽出物及びＣは毛状根部のエタノール抽出物に関する結果を示す。
【００２２】
図４から明らかなように、茎葉部５０％エタノール抽出物を使用する場合、０．５μｇ／ｍｌ濃度で約２５ｐｇ／ｍｌと５０％の抑制率、５μｇ／ｍｌ濃度で約２０ｐｇ／ｍｌと６０％の抑制率であった。又果実部５０％エタノール抽出物は０．５μｇ／ｍｌ濃度及び５μｇ／ｍｌ濃度で約３０ｐｇ／ｍｌと５０％の抑制率であった。毛状根部エタノール抽出物は、０．５μｇ／ｍｌ濃度及び５μｇ／ｍｌ濃度で約２５ｐｇ／ｍｌと６０％の抑制率であった。
【００２３】
実施例５
（サクラダソウ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
マウスマクロファージＲＡＷ２６４．７を２４ウェル培養プレート（ＩＷＡＫＩ）に１．０×１０5ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌずつ播種した。培地には１０容量％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ（１０容量％ＦＢＳ／ＤＭＥＭ）を使用し、２４時間培養した。細胞の状態を確認した後、培地を吸引除去し、サクラダソウ抽出物を含む１０容量％ＦＢＳ／ＤＭＥＭ４５０μｌを加え、続いてＬＰＳ（リポサッカライド、シグマ社製）５０μｌで刺激した。細胞刺激２４時間後、培養上清を回収し、該上清中のＩＬ−６量を（ｍ）ＩＬ−６ ＥＬＩＳＡ ｓｙｓｔｅｍ（ＢＩＯＴＲＡＫ）を用いて測定した。
結果を図５に示す。
なお図５中、Ａは茎葉部の５０％エタノール抽出物、Ｂは果実部の５０％エタノール抽出物、Ｃは果実部の水抽出物、Ｄは毛状根部のエタノール抽出物に関する結果を示す。
【００２４】
図５から明らかなように、茎葉部５０％エタノール抽出物の場合、濃度依存的に効果が認められ、１μｇ／ｍｌの濃度で約１０ｎｇ／ｍｌと抑制率は５７％であった。果実部５０％エタノール抽出物及び水抽出物は、０．０５〜１μｇ／ｍｌにおいて約２５％の程度の抑制率が得られた。毛状根部エタノール抽出物は、０．０５〜１μｇ／ｍｌにおいて濃度依存的に効果が認められた。
【００２５】
実施例６
（細胞毒性試験）
サクラダソウ抽出物の細胞生育への影響を検討するため、ａｌａｍａｒＢｌｕｅ Ａｓｓａｙを行った。すなわち培養上清を除去後、１０％ａｌａｍａｒＢｌｕｅを含む１．２ｍＭＣａ2+／Ｋ１１０ＩＩ（＋）２００μｌを加え、２時間インキュベーションした。上清の５５０ｎｍ及び６３０ｎｍにおける吸光度を測定した。数値は、サクラダソウ抽出物無添加群の吸光度を１００％として示した。
結果を図６に示す。
なお図６中、Ａは茎葉部の５０％エタノール抽出物、Ｂは茎葉部の水抽出物、Ｃは果実部の５０％エタノール抽出物、Ｄは果実部の水抽出物、Ｅは毛状根部のエタノール抽出物及びＦは毛状根部の水抽出物に関する結果を示す。
【００２６】
図６から明らかなように、サクラダソウの茎葉部、果実部及び毛状根部の各抽出物も、１〜１００μｇ／ｍｌにおいて細胞毒性及び細胞増殖作用は確認されなかった。
【００２７】
調製例２
〔ローズマリー抽出物の調製〕
ローズマリーの茎葉部を自然乾燥し、細切し、５０％エタノール水溶液に一晩浸漬し、ろ紙でろ過して抽出物を得た。
【００２８】
実施例７
（ローズマリー抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
ローズマリー５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図７に示す。
【００２９】
図７から明らかなように、ローズマリー５０％エタノール抽出物は、該ローズマリー抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、ローズマリー抽出物濃度０．５％溶液で約６ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１．０％溶液で約５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってローズマリー５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００３０】
実施例８
（ローズマリー抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ローズマリー５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図８に示す。
【００３１】
図８から明らかなように、ローズマリー５０％エタノール抽出物は、該ローズマリー抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、ローズマリー抽出物濃度０．１％溶液で約２５ｐｇ／ｍｌに、１．０％溶液で約２０ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってローズマリー５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００３２】
実施例９
（ローズマリー抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ローズマリー５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図９に示す。
【００３３】
図９から明らかなように、ローズマリー５０％エタノール抽出物は、該ローズマリー抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、ローズマリー抽出物濃度０．５％溶液で約１９ｎｇ／ｍｌに、１．０％溶液で約１７ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約６ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってローズマリー５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００３４】
調製例３
〔カルノシン酸の調製〕
ローズマリーを酢酸エチルで抽出し、その抽出液をエーテルと１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で振盪分配後、水酸化ナトリウム層を分取し、２Ｎ塩酸で中和後、エーテルで抽出した。エーテル抽出エキスはシリカゲルクロマトグラフィー（ベンゼン−アセトン（１０：１））に通し、ベンゼンで再結晶を行うと、無色粉末が析出した。
析出した無色粉末を除いた残りのベンゼン溶液をポリアミド処理後、微量のベンゼンに溶解し、ヘキサンを加えて再結晶を行い、無色針状晶のカルノシン酸を得た。
【００３５】
実施例１０
（カルノシン酸のＰＧＥ2産生抑制効果）
カルノシン酸を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図１０に示す。
【００３６】
図１０から明らかなように、カルノシン酸は、該カルノシン酸を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、カルノシン酸濃度１０μＭ（μｍｏｌ／ｌ、以下同）溶液で約３．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１０μＭ溶液で約２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってカルノシン酸は優れたＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００３７】
実施例１１
（カルノシン酸のＩＬ−１α産生抑制効果）
カルノシン酸を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図１１に示す。
【００３８】
図１１から明らかなように、カルノシン酸は、該カルノシン酸を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、カルノシン酸濃度１０μＭ溶液で約２０ｐｇ／ｍｌに、２０μＭ溶液で約１２ｐｇ／ｍｌに、４０μＭ溶液で約１０ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってカルノシン酸は優れたＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００３９】
実施例１２
（カルノシン酸のＩＬ−６産生抑制効果）
カルノシン酸を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図１２に示す。
【００４０】
図１２から明らかなように、カルノシン酸は、該カルノシン酸を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、カルノシン酸濃度１０μＭ溶液で約２０ｎｇ／ｍｌに、２０μＭ溶液で約１５ｎｇ／ｍｌに、４０μＭ溶液で約５ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってカルノシン酸は優れたＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００４１】
調製例４
〔サクラ抽出物の調製〕
サクラの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、サクラ５０％エタノール抽出物を得た。
【００４２】
実施例１３
（サクラ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
サクラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図１３に示す。
【００４３】
図１３から明らかなように、サクラ５０％エタノール抽出物は、該サクラ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、サクラ抽出物濃度０．５％溶液で約７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１．０％溶液で約５．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってサクラ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００４４】
実施例１４
（サクラ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
サクラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図１４に示す。
【００４５】
図１４から明らかなように、サクラ５０％エタノール抽出物は、該サクラ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、サクラ抽出物濃度０．５％溶液で約４０ｐｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約３０ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってサクラ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００４６】
実施例１５
（サクラ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
サクラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図１５に示す。
【００４７】
図１５から明らかなように、サクラ５０％エタノール抽出物は、該サクラ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２２ｎｇ／ｍｌであったのを、サクラ抽出物濃度１．０％溶液で約１７ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約１１ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってサクラ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００４８】
調製例５
〔ソテツ抽出物の調製〕
ソテツの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、ソテツ５０％エタノール抽出物を得た。
【００４９】
実施例１６
（ソテツ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
ソテツ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図１６に示す。
【００５０】
図１６から明らかなように、ソテツ５０％エタノール抽出物は、該ソテツ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、ソテツ抽出物濃度１．０％溶液で約１ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、２．０％溶液で約０．８ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってソテツ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００５１】
実施例１７
（ソテツ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ソテツ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図１７に示す。
【００５２】
図１７から明らかなように、ソテツ５０％エタノール抽出物は、該ソテツ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約４９ｐｇ／ｍｌであったのを、ソテツ抽出物濃度２．０％溶液で約４０ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってソテツ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００５３】
実施例１８
（ソテツ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ソテツ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図１８に示す。
【００５４】
図１８から明らかなように、ソテツ５０％エタノール抽出物は、該ソテツ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、ソテツ抽出物濃度０．５％溶液で約２０ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約９ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってソテツ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００５５】
調製例６
〔カルノソールの調製〕
ローズマリーを酢酸エチルで抽出し、その抽出物をエーテルと１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で振盪分配後、水酸化ナトリウム層を分取し、２Ｎ塩酸で中和後、エーテルで抽出した。エーテル抽出エキスはシリカゲルクロマトグラフィー（ベンゼン−アセトン（１０：１）に通し、ベンゼンで再結晶を行い、得られた無色粉末を更にメタノールで再結晶し、無色針状晶カルノソールを得た。
【００５６】
実施例１９
（カルノソールのＰＧＥ2産生抑制効果）
カルノソールを用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図１９に示す。
【００５７】
図１９から明らかなように、カルノソールは、該カルノソールを含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、カルノソール濃度１０μＭ溶液で約３．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってカルノソールは優れたＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００５８】
実施例２０
（カルノソールのＩＬ−１α産生抑制効果）
カルノソールを用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図２０に示す。
【００５９】
図２０から明らかなように、カルノソールは、該カルノソールを含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、カルノソール濃度１０μＭ溶液で約２１ｐｇ／ｍｌに、２０μＭ溶液で約１６ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってカルノソールは優れたＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００６０】
実施例２１
（カルノソールのＩＬ−６産生抑制効果）
カルノソールを用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図２１に示す。
【００６１】
図２１から明らかなように、カルノソールは、該カルノソールを含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、カルノソール濃度１０μＭ溶液で約１９ｎｇ／ｍｌに、２０μＭ溶液で約１７ｎｇ／ｍｌに、４０μＭ溶液で約１１ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってカルノソールは優れたＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００６２】
調製例７
〔ノバラ抽出物の調製〕
ノバラの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、ノバラ５０％エタノール抽出物を得た。
【００６３】
実施例２２
（ノバラ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
ノバラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図２２に示す。
【００６４】
図２２から明らかなように、ノバラ５０％エタノール抽出物は、該ノバラ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、ノバラ抽出物濃度０．１％溶液で約５．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、０．５％溶液で約３ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってノバラ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００６５】
実施例２３
（ノバラ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ノバラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図２３に示す。
【００６６】
図２３から明らかなように、ノバラ５０％エタノール抽出物は、該ノバラ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、ノバラ抽出物濃度０．１％溶液で約４２ｐｇ／ｍｌに、０．５％溶液で約３６ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってノバラ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００６７】
実施例２４
（ノバラ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ノバラ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図２４に示す。
【００６８】
図２４から明らかなように、ノバラ５０％エタノール抽出物は、該ノバラ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、ノバラ抽出物濃度０．５％溶液で約１８ｎｇ／ｍｌに、１．０％溶液で約１４ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約４ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってノバラ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００６９】
調製例８
〔イチゴ抽出物の調製〕
イチゴの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、イチゴ５０％エタノール抽出物を得た。
【００７０】
実施例２５
（イチゴ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
イチゴ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図２５に示す。
【００７１】
図２５から明らかなように、イチゴ５０％エタノール抽出物は、該イチゴ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約７．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、イチゴ抽出物濃度１．０％溶液で約６ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、２．０％溶液で約４．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってイチゴ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００７２】
実施例２６
（イチゴ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
イチゴ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図２６に示す。
【００７３】
図２６から明らかなように、イチゴ５０％エタノール抽出物は、該イチゴ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、イチゴ抽出物濃度０．５％溶液で約３５ｐｇ／ｍｌに、１．０％溶液で約３２ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってイチゴ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００７４】
実施例２７
（イチゴ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ノチゴ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図２７に示す。
【００７５】
図２７から明らかなように、イチゴ５０％エタノール抽出物は、該イチゴ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２５ｎｇ／ｍｌであったのを、イチゴ抽出物濃度１．０％溶液で約２０ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約８ｎｇ／ｍｌに、減少させた。従ってイチゴ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００７６】
調製例９
〔ユキノシタ抽出物の調製〕
ユキノシタの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、ユキノシタ５０％エタノール抽出物を得た。
【００７７】
実施例２８
（ユキノシタ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
ユキノシタ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図２８に示す。
【００７８】
図２８から明らかなように、ユキノシタ５０％エタノール抽出物は、該ユキノシタ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、ユキノシタ抽出物濃度０．５％溶液で約０．６ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１．０％溶液で約０．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってユキノシタ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００７９】
実施例２９
（ユキノシタ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ユキノシタ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図２９に示す。
【００８０】
図２９から明らかなように、ユキノシタ５０％エタノール抽出物は、該ユキノシタ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、ユキノシタ抽出物濃度０．５％溶液で約４０ｐｇ／ｍｌに、１．０％溶液で約３５ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってユキノシタ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００８１】
実施例３０
（ユキノシタ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ユキノシタ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図３０に示す。
【００８２】
図３０から明らかなように、ユキノシタ５０％エタノール抽出物は、該ユキノシタ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、ユキノシタ抽出物濃度１．０％溶液で約１８ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約１４ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってユキノシタ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００８３】
調製例１０
〔クズ抽出物の調製〕
クズの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、クズ５０％エタノール抽出物を得た。
【００８４】
実施例３１
（クズ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
クズ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図３１に示す。
【００８５】
図３１から明らかなように、クズ５０％エタノール抽出物は、該クズ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約２．３ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、クズ抽出物濃度０．５％溶液で約１．２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、１．０％溶液で約１ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、２．０％溶液で約０．７ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってクズ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００８６】
実施例３２
（クズ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
クズ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図３２に示す。
【００８７】
図３２から明らかなように、クズ５０％エタノール抽出物は、該クズ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、クズ抽出物濃度１．０％で約４２ｐｇ／ｍｌに、２．０％で約４０ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってクズ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００８８】
実施例３３
（クズ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
クズ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図３３に示す。
【００８９】
図３３から明らかなように、クズ５０％エタノール抽出物は、該クズ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、クズ抽出物濃度０．５％溶液で約１９ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約１１ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってクズ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００９０】
調製例１１
〔レモングラス抽出物の調製〕
レモングラスの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、レモングラス５０％エタノール抽出物を得た。
【００９１】
実施例３４
（レモングラス抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
レモングラス５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図３４に示す。
【００９２】
図３４から明らかなように、レモングラス５０％エタノール抽出物は、該レモングラス抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約２．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、レモングラス抽出物濃度０．５％溶液で約２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、２．０％溶液で約１．４ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってレモングラス５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【００９３】
実施例３５
（レモングラス抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
レモングラス５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図３５に示す。
【００９４】
図３５から明らかなように、レモングラス５０％エタノール抽出物は、該レモングラス抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、レモングラス抽出物濃度０．５％溶液で約４３ｐｇ／ｍｌに、１．０％で約３３ｐｇ／ｍｌに、２．０％で約２４ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってレモングラス５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【００９５】
実施例３６
（レモングラス抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
レモングラス５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図３６に示す。
【００９６】
図３６から明らかなように、レモングラス５０％エタノール抽出物は、該レモングラス抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、レモングラス抽出物濃度１．０％溶液で約１７ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約１４ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってレモングラス５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【００９７】
調製例１２
〔ユキヤナギ抽出物の調製〕
ユキヤナギの茎葉部を使用して、調製例２と同様にして、ユキヤナギ５０％エタノール抽出物を得た。
【００９８】
実施例３７
（ユキヤナギ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果）
ユキヤナギ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例１に準じてＰＧＥ2産生抑制効果の試験を行った。結果を図３７に示す。
【００９９】
図３７から明らかなように、ユキヤナギ５０％エタノール抽出物は、該ユキヤナギ抽出物を含まない場合はＰＧＥ2産生量が約２．９ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍであったのを、ユキヤナギ抽出物濃度０．５％溶液で約２．５ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに、２．０％溶液で約２ｎｇ／ｍｌ ｍｅｄｉｕｍに減少させた。従ってユキヤナギ５０％エタノール抽出物はＰＧＥ2産生抑制効果を有していた。
【０】
実施例３８
（ユキヤナギ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果）
ユキヤナギ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例４に準じてＩＬ−１α産生抑制効果の試験を行った。結果を図３８に示す。
【０】
図３８から明らかなように、ユキヤナギ５０％エタノール抽出物は、該ユキヤナギ抽出物を含まない場合はＩＬ−１α産生量が約５０ｐｇ／ｍｌであったのを、ユキヤナギ抽出物濃度０．５％溶液で約３０ｐｇ／ｍｌに、２．０％で約２７ｐｇ／ｍｌに減少させた。従ってユキヤナギ５０％エタノール抽出物はＩＬ−１α産生抑制効果を有していた。
【０】
実施例３９
（ユキヤナギ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果）
ユキヤナギ５０％エタノール抽出物を用いて、実施例５に準じてＩＬ−６産生抑制効果の試験を行った。結果を図３９に示す。
【０】
図３９から明らかなように、ユキヤナギ５０％エタノール抽出物は、該ユキヤナギ抽出物を含まない場合はＩＬ−６産生量が約２３ｎｇ／ｍｌであったのを、ユキヤナギ抽出物濃度０．５％溶液で約２０ｎｇ／ｍｌに、２．０％溶液で約１３ｎｇ／ｍｌに減少させた。従ってユキヤナギ５０％エタノール抽出物はＩＬ−６産生抑制効果を有していた。
【０】
実施例４０
スクワレン、セチルイソオクタノエート及びマイクロクリスタリンワックスを加熱溶解後、粘土鉱物、ＰＯＥグリセロールトリイソステアリン酸エステル（界面活性剤）を加え、７０℃に調整し、均一に分散・溶解して油性ゲルを得た。
次に、所定濃度のサクラダソウ抽出物を精製水に溶解し、７０℃に調整し、油性ゲルの中へ十分に攪拌しながらゆっくりと添加した。
ホモミキサーで均一に混合した後、脱気、ろ過後、３０℃まで冷却し、クリームを得た。各成分の配合比は以下の通りである。
【０】
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
サクラダソウ抽出物 ０．０１
水 残量
【０】
実施例４１
サクラ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
サクラ抽出物 ０．０１
水 残量
【０】
実施例４２
ソテツ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
ソテツ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４３
ノバラ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
ノバラ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４４
イチゴ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
イチゴ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４５
ユキノシタ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
ユキノシタ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４６
クズ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
クズ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４７
レモングラス抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
レモングラス抽出物 ０．１
水 残量
【０】
実施例４８
ユキヤナギ抽出物を用いて、下記の組成を有するクリームを得た。
組成 配合比（重量％）
スクワレン ２０
セチルイソオクタノエート ８．５
マイクロクリスタリンワックス １
粘土鉱物 １．３
ＰＯＥグリセロール
トリイソステアリン酸エステル ０．２
ユキヤナギ抽出物 ０．１
水 残量
【０】
【発明の効果】
本発明によれば、抗炎症作用をもつと同時に安全性の高い抗炎症剤、ＰＧＥ2産生抑制剤、ＩＬ−１α産生抑制剤、ＩＬ−６産生抑制剤及び抗アレルギー剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】サクラダソウ抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図２】サクラダソウ抽出物画分のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図３】サクラダソウ由来フラボノイドのＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図４】サクラダソウ抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図５】サクラダソウ抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図６】サクラダソウ抽出物のヒト表皮細胞生育へ及ぼす影響を示すグラフ。
【図７】ローズマリー５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図８】ローズマリー５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図９】ローズマリー５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図１０】カルノシン酸のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図１１】カルノシン酸のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図１２】カルノシン酸のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図１３】サクラ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図１４】サクラ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図１５】サクラ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図１６】ソテツ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図１７】ソテツ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図１８】ソテツ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図１９】カルノソールのＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図２０】カルノソールのＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図２１】カルノソールのＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図２２】ノバラ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図２３】ノバラ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図２４】ノバラ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図２５】イチゴ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図２６】イチゴ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図２７】イチゴ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図２８】ユキノシタ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図２９】ユキノシタ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図３０】ユキノシタ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図３１】クズ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図３２】クズ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図３３】クズ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図３４】レモングラス５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図３５】レモングラス５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図３６】レモングラス５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
【図３７】ユキヤナギ５０％エタノール抽出物のＰＧＥ2産生抑制効果を示すグラフ。
【図３８】ユキヤナギ５０％エタノール抽出物のＩＬ−１α産生抑制効果を示すグラフ。
【図３９】ユキヤナギ５０％エタノール抽出物のＩＬ−６産生抑制効果を示すグラフ。
Claims (4)
- カルノシン酸、カルノソール、及びノバラ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする抗炎症剤。
- カルノシン酸、カルノソール、及びノバラ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とするＰＧＥ2産生抑制剤。
- カルノシン酸、カルノソール、及びノバラ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とするＩＬ−１α産生抑制剤。
- カルノシン酸、カルノソール、及びノバラ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とするＩＬ−６産生抑制剤。
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