JP3080442B2 - マルトオリゴ糖誘導体の回収方法 - Google Patents
マルトオリゴ糖誘導体の回収方法Info
- Publication number
- JP3080442B2 JP3080442B2 JP03203370A JP20337091A JP3080442B2 JP 3080442 B2 JP3080442 B2 JP 3080442B2 JP 03203370 A JP03203370 A JP 03203370A JP 20337091 A JP20337091 A JP 20337091A JP 3080442 B2 JP3080442 B2 JP 3080442B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- maltooligosaccharide
- derivative
- recovering
- phenol
- phenol derivative
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- FYGDTMLNYKFZSV-DZOUCCHMSA-N alpha-D-Glcp-(1->4)-alpha-D-Glcp-(1->4)-D-Glcp Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]2[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-DZOUCCHMSA-N 0.000 title claims description 80
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 22
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 38
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 claims description 30
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 23
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 23
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 20
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 18
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 16
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 7
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 4
- UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 2-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000000542 sulfonic acid group Chemical group 0.000 claims description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 9
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- -1 phenol derivative glucoside Chemical class 0.000 description 6
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 5
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 5
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 5
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 5
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 5
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 5
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N UNPD55895 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(O)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- BNABBHGYYMZMOA-AHIHXIOASA-N alpha-maltoheptaose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@H](O[C@@H]3[C@H](O[C@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H](O[C@@H]5[C@H](O[C@H](O[C@@H]6[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]6O)CO)[C@H](O)[C@H]5O)CO)[C@H](O)[C@H]4O)CO)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O BNABBHGYYMZMOA-AHIHXIOASA-N 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 3
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 3
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N malto-tetraose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FJCUPROCOFFUSR-GMMZZHHDSA-N maltopentaose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O1 FJCUPROCOFFUSR-GMMZZHHDSA-N 0.000 description 3
- LUEWUZLMQUOBSB-OUBHKODOSA-N maltotetraose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-OUBHKODOSA-N 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 240000007930 Oxalis acetosella Species 0.000 description 2
- 235000008098 Oxalis acetosella Nutrition 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FTNIPWXXIGNQQF-UHFFFAOYSA-N UNPD130147 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(OC4C(OC(O)C(O)C4O)CO)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FTNIPWXXIGNQQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N alpha-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N 0.000 description 2
- OCIBBXPLUVYKCH-QXVNYKTNSA-N alpha-maltohexaose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@H](O[C@@H]3[C@H](O[C@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H](O[C@@H]5[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]5O)CO)[C@H](O)[C@H]4O)CO)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O OCIBBXPLUVYKCH-QXVNYKTNSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 2
- FJCUPROCOFFUSR-UHFFFAOYSA-N malto-pentaose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 FJCUPROCOFFUSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 2
- JVKRKMWZYMKVTQ-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]pyrazol-1-yl]-N-(2-oxo-3H-1,3-benzoxazol-6-yl)acetamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C=1C=NN(C=1)CC(=O)NC1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 JVKRKMWZYMKVTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001450 Alpha-Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 108010025880 Cyclomaltodextrin glucanotransferase Proteins 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 102000002464 Galactosidases Human genes 0.000 description 1
- 108010093031 Galactosidases Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 229940043377 alpha-cyclodextrin Drugs 0.000 description 1
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000005660 chlorination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- DJMVHSOAUQHPSN-UHFFFAOYSA-N malto-hexaose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 DJMVHSOAUQHPSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RJQKKZNUWRIHCS-VBNQBVOGSA-N maltodecaose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H](O[C@@H](O[C@H]3[C@@H](O[C@@H](O[C@H]4[C@@H](O[C@@H](O[C@H]5[C@@H](O[C@@H](O[C@@H]6[C@H](O[C@H](O[C@@H]7[C@H](O[C@H](O[C@@H]8[C@H](O[C@H](O[C@@H]9[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]9O)CO)[C@H](O)[C@H]8O)CO)[C@H](O)[C@H]7O)CO)[C@H](O)[C@H]6O)CO)[C@@H](O)[C@@H]5O)CO)[C@@H](O)[C@@H]4O)CO)[C@@H](O)[C@@H]3O)CO)[C@@H](O)[C@@H]2O)CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RJQKKZNUWRIHCS-VBNQBVOGSA-N 0.000 description 1
- 238000006198 methoxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、α−アミラーゼ活性測
定用基質として有用なマルトオリゴ糖誘導体の回収方法
に関し、詳しくは、マルトオリゴ糖誘導体とマルトオリ
ゴ糖との混合水溶液から、マルトオリゴ糖誘導体を効率
的に回収する方法に関する。
定用基質として有用なマルトオリゴ糖誘導体の回収方法
に関し、詳しくは、マルトオリゴ糖誘導体とマルトオリ
ゴ糖との混合水溶液から、マルトオリゴ糖誘導体を効率
的に回収する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、臨床検査分野及び学術研究分野に
おけるα−アミラーゼ活性測定用基質として、還元性末
端にフェノール誘導体を有するマルトオリゴ糖誘導体が
用いられている。
おけるα−アミラーゼ活性測定用基質として、還元性末
端にフェノール誘導体を有するマルトオリゴ糖誘導体が
用いられている。
【０００３】これらのマルトオリゴ糖誘導体は、糖部分
の重合度が４〜７であるマルトオリゴ糖の還元性末端
に、α−結合及び／又はβ−結合により、ニトロフェノ
ール、ジニトロフェノール、又はこれらの芳香族水素が
ハロゲン基、スルフォン酸基、カルボン酸基から選ばれ
た一種又は二種以上の置換基で置換されたフェノール誘
導体が結合したものである。
の重合度が４〜７であるマルトオリゴ糖の還元性末端
に、α−結合及び／又はβ−結合により、ニトロフェノ
ール、ジニトロフェノール、又はこれらの芳香族水素が
ハロゲン基、スルフォン酸基、カルボン酸基から選ばれ
た一種又は二種以上の置換基で置換されたフェノール誘
導体が結合したものである。
【０００４】このマルトオリゴ糖誘導体は、マルトオ
リゴ糖と、フェノール誘導体とから化学的に合成する方
法、あるいは、フェノール誘導体グルコシドやフェノ
ール誘導体マルトシドと、マルトオリゴ糖やシクロデキ
ストリン類との混合溶液を用いて酵素合成する方法など
により製造されている。これらの方法によりマルトオリ
ゴ糖誘導体を製造する場合、いずれも反応液中に未反応
または副反応によりマルトオリゴ糖やシクロデキストリ
ンが多量残存するので、活性炭、シリカゲル、又はその
他の特殊なゲル濾過剤やイオン交換樹脂を用いて大規模
なクロマトグラフィーを行なって分画精製して、マルト
オリゴ糖誘導体を回収している。
リゴ糖と、フェノール誘導体とから化学的に合成する方
法、あるいは、フェノール誘導体グルコシドやフェノ
ール誘導体マルトシドと、マルトオリゴ糖やシクロデキ
ストリン類との混合溶液を用いて酵素合成する方法など
により製造されている。これらの方法によりマルトオリ
ゴ糖誘導体を製造する場合、いずれも反応液中に未反応
または副反応によりマルトオリゴ糖やシクロデキストリ
ンが多量残存するので、活性炭、シリカゲル、又はその
他の特殊なゲル濾過剤やイオン交換樹脂を用いて大規模
なクロマトグラフィーを行なって分画精製して、マルト
オリゴ糖誘導体を回収している。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記製
造法においては、反応液中に含まれるマルトオリゴ糖誘
導体は極少量であり、分画精製が煩雑であり、用いる活
性炭、シリカゲル、又は各種のゲル濾過剤等も大量に必
要なうえ、得られるマルトオリゴ糖の純度も低く、生産
性が極端に低いため、工業的及び経済的に大きな問題を
残していた。
造法においては、反応液中に含まれるマルトオリゴ糖誘
導体は極少量であり、分画精製が煩雑であり、用いる活
性炭、シリカゲル、又は各種のゲル濾過剤等も大量に必
要なうえ、得られるマルトオリゴ糖の純度も低く、生産
性が極端に低いため、工業的及び経済的に大きな問題を
残していた。
【０００６】本発明は上記問題点に鑑みてなされてもの
で、その目的は、還元性末端にフェノール誘導体を有す
るマルトオリゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖との混合水
溶液から、高純度のマルトオリゴ糖誘導体を、生産性を
向上させて、容易に、経済的に回収する方法を提供する
ことにある。
で、その目的は、還元性末端にフェノール誘導体を有す
るマルトオリゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖との混合水
溶液から、高純度のマルトオリゴ糖誘導体を、生産性を
向上させて、容易に、経済的に回収する方法を提供する
ことにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成するため鋭意研究した結果、マルトオリゴ糖誘導
体と、マルトオリゴ糖との混合水溶液中のマルトオリゴ
糖誘導体を、特定の吸着樹脂に選択的に吸着させてマル
トオリゴ糖を除去した後、マルトオリゴ糖誘導体を溶出
することにより、高純度のマルトオリゴ糖誘導体が得ら
れることを見出し、本発明を完成させるに至った。
を達成するため鋭意研究した結果、マルトオリゴ糖誘導
体と、マルトオリゴ糖との混合水溶液中のマルトオリゴ
糖誘導体を、特定の吸着樹脂に選択的に吸着させてマル
トオリゴ糖を除去した後、マルトオリゴ糖誘導体を溶出
することにより、高純度のマルトオリゴ糖誘導体が得ら
れることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００８】すなわち、本発明のマルトオリゴ糖誘導体
の回収方法は、還元性末端にフェノール誘導体を有する
マルトオリゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖との混合水溶
液を、スチレンジビニルベンゼン共重合体を基本骨格と
する非極性のハイポーラス型吸着樹脂に通液して前記マ
ルトオリゴ糖誘導体を吸着させた後、アルコール類で溶
出し、回収することを特徴とする。
の回収方法は、還元性末端にフェノール誘導体を有する
マルトオリゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖との混合水溶
液を、スチレンジビニルベンゼン共重合体を基本骨格と
する非極性のハイポーラス型吸着樹脂に通液して前記マ
ルトオリゴ糖誘導体を吸着させた後、アルコール類で溶
出し、回収することを特徴とする。
【０００９】以下、本発明について好ましい態様を挙げ
て更に詳細に説明する。
て更に詳細に説明する。
【００１０】本発明において、還元性末端にフェノール
誘導体を有するマルトオリゴ糖誘導体と、マルトオリゴ
糖との混合水溶液とは、マルトオリゴ糖誘導体と、マル
トオリゴ糖とを含有する水溶液を意味し、例えば、前記
した、の方法によりマルトオリゴ糖誘導体を製造す
る際の、分画精製する前の反応液であって、シクロデキ
ストリン等を有しているものであってもよい。
誘導体を有するマルトオリゴ糖誘導体と、マルトオリゴ
糖との混合水溶液とは、マルトオリゴ糖誘導体と、マル
トオリゴ糖とを含有する水溶液を意味し、例えば、前記
した、の方法によりマルトオリゴ糖誘導体を製造す
る際の、分画精製する前の反応液であって、シクロデキ
ストリン等を有しているものであってもよい。
【００１１】本発明において還元性末端にフェノール誘
導体を有するマルトオリゴ糖誘導体とは、マルトテトラ
オースからマルトデカオースまでの、グルコース重合度
４〜10の、直鎖のマルトオリゴ糖の還元性末端に、フェ
ノール誘導体が、α−結合及び／又はβ−結合により結
合した糖質を意味する。フェノール誘導体としては、ニ
トロフェノール、ジニトロフェノール、又はこれらの芳
香族水素が、ハロゲン基、スルフォン酸基、カルボン酸
基から選ばれた一種又は二種以上の置換基で置換された
ものが好ましい。また、これらのマルトオリゴ糖誘導体
の非還元性末端のグルコース残基を、カルボキシメチル
化、アミノピリジル化、ベンジル化、ベンジリデン化、
エチリデン化、イソプロピリデン化、クロル化、メトキ
シ化、トルエンスルフォン酸化、ガラクトシル化、又は
その他により修飾した、修飾マルトオリゴ糖誘導体も用
いることができる。
導体を有するマルトオリゴ糖誘導体とは、マルトテトラ
オースからマルトデカオースまでの、グルコース重合度
４〜10の、直鎖のマルトオリゴ糖の還元性末端に、フェ
ノール誘導体が、α−結合及び／又はβ−結合により結
合した糖質を意味する。フェノール誘導体としては、ニ
トロフェノール、ジニトロフェノール、又はこれらの芳
香族水素が、ハロゲン基、スルフォン酸基、カルボン酸
基から選ばれた一種又は二種以上の置換基で置換された
ものが好ましい。また、これらのマルトオリゴ糖誘導体
の非還元性末端のグルコース残基を、カルボキシメチル
化、アミノピリジル化、ベンジル化、ベンジリデン化、
エチリデン化、イソプロピリデン化、クロル化、メトキ
シ化、トルエンスルフォン酸化、ガラクトシル化、又は
その他により修飾した、修飾マルトオリゴ糖誘導体も用
いることができる。
【００１２】本発明の還元性末端にフェノール誘導体を
有するマルトオリゴ糖誘導体は、前記したマルトオリ
ゴ糖と、フェノール誘導体とから化学的に合成する方
法、あるいは、フェノール誘導体グルコシドやフェノ
ール誘導体マルトシドと、マルトオリゴ糖やシクロデキ
ストリン類との混合溶液を用いて酵素合成する方法によ
り製造することができる。これらの反応液は、マルトオ
リゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖と、シクロデキストリ
ン等との混合水溶液として得られる。
有するマルトオリゴ糖誘導体は、前記したマルトオリ
ゴ糖と、フェノール誘導体とから化学的に合成する方
法、あるいは、フェノール誘導体グルコシドやフェノ
ール誘導体マルトシドと、マルトオリゴ糖やシクロデキ
ストリン類との混合溶液を用いて酵素合成する方法によ
り製造することができる。これらの反応液は、マルトオ
リゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖と、シクロデキストリ
ン等との混合水溶液として得られる。
【００１３】本発明に用いる吸着樹脂は、スチレンジビ
ニルベンゼン共重合体を基本骨格とする非極性のハイポ
ーラス型の樹脂であって、一般的に市販されているもの
であるが、本発明者らは、この吸着樹脂に、マルトオリ
ゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖と、必要に応じてシクロ
デキストリン等とを含有する水溶液を通液すると、マル
トオリゴ糖やシクロデキストリンを吸着することなく、
還元性末端にフェノール誘導体を有するマルトオリゴ糖
誘導体を選択的に吸着する特性を有することを見出し
た。本発明の吸着樹脂は、表面積が400 〜1000m2/gであ
り、平均細孔径が30〜120 オングストロームであるもの
が特に好ましく用いられる。
ニルベンゼン共重合体を基本骨格とする非極性のハイポ
ーラス型の樹脂であって、一般的に市販されているもの
であるが、本発明者らは、この吸着樹脂に、マルトオリ
ゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖と、必要に応じてシクロ
デキストリン等とを含有する水溶液を通液すると、マル
トオリゴ糖やシクロデキストリンを吸着することなく、
還元性末端にフェノール誘導体を有するマルトオリゴ糖
誘導体を選択的に吸着する特性を有することを見出し
た。本発明の吸着樹脂は、表面積が400 〜1000m2/gであ
り、平均細孔径が30〜120 オングストロームであるもの
が特に好ましく用いられる。
【００１４】上記特性を有する吸着樹脂としては、例え
ば、「デュオライトS-876 」（商品名、ダイヤモンドシ
ャムロック社製）、「デュオライトS-861 」（商品名、
ダイヤモンドシャムロック社製）、「アンバーライトXA
D-4 」（商品名、ロームアンドハース社製）、「アンバ
ーライトXAD-2000」（商品名、ロームアンドハース社
製）等が市販されている。
ば、「デュオライトS-876 」（商品名、ダイヤモンドシ
ャムロック社製）、「デュオライトS-861 」（商品名、
ダイヤモンドシャムロック社製）、「アンバーライトXA
D-4 」（商品名、ロームアンドハース社製）、「アンバ
ーライトXAD-2000」（商品名、ロームアンドハース社
製）等が市販されている。
【００１５】このような吸着樹脂に、マルトオリゴ糖誘
導体と、マルトオリゴ糖と、場合によってはシクロデキ
ストリン等とを含む混合水溶液を通液すると、マルトオ
リゴ糖誘導体のみが選択的に吸着され、マルトオリゴ
糖、シクロデキストリン等を分別除去することができ
る。吸着されたマルトオリゴ糖誘導体は、例えばメタノ
ール、エタノール、プロパノール等のアルコール類を用
いて溶出して回収することができる。こうして回収され
た溶出液中には、マルトオリゴ糖誘導体が高純度、高回
収率で含まれている。
導体と、マルトオリゴ糖と、場合によってはシクロデキ
ストリン等とを含む混合水溶液を通液すると、マルトオ
リゴ糖誘導体のみが選択的に吸着され、マルトオリゴ
糖、シクロデキストリン等を分別除去することができ
る。吸着されたマルトオリゴ糖誘導体は、例えばメタノ
ール、エタノール、プロパノール等のアルコール類を用
いて溶出して回収することができる。こうして回収され
た溶出液中には、マルトオリゴ糖誘導体が高純度、高回
収率で含まれている。
【００１６】更に、上記アルコール類による溶出液か
ら、公知の結晶化法や、ゲル濾過クロマトグラフィー
法、あるいはそれらの併用により、マルトオリゴ糖誘導
体をより高度に精製することも可能である。例えば、上
記溶出液を減圧濃縮などの方法で濃縮し、４℃程度の冷
所に放置して、析出した結晶を濾別することにより、マ
ルトオリゴ糖誘導体をより高純度で含む水溶液を容易に
得ることができる。
ら、公知の結晶化法や、ゲル濾過クロマトグラフィー
法、あるいはそれらの併用により、マルトオリゴ糖誘導
体をより高度に精製することも可能である。例えば、上
記溶出液を減圧濃縮などの方法で濃縮し、４℃程度の冷
所に放置して、析出した結晶を濾別することにより、マ
ルトオリゴ糖誘導体をより高純度で含む水溶液を容易に
得ることができる。
【００１７】
【作用】本発明においては、還元性末端にフェノール誘
導体を有するマルトオリゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖
との混合水溶液を、スチレンジビニルベンゼン共重合体
を基本骨格とする非極性のハイポーラス型吸着樹脂に通
液して、マルトオリゴ糖誘導体を選択的に吸着させて、
マルトオリゴ糖を除去した後、アルコール類で溶出する
ので、混合水溶液中のマルトオリゴ糖誘導体を、高純
度、高収率で回収することができる。また、混合水溶液
中のマルトオリゴ糖誘導体の含量が少なくても、マルト
オリゴ糖誘導体が高度に濃縮回収されることから、後の
工程において更に高度に精製することも容易になる。
導体を有するマルトオリゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖
との混合水溶液を、スチレンジビニルベンゼン共重合体
を基本骨格とする非極性のハイポーラス型吸着樹脂に通
液して、マルトオリゴ糖誘導体を選択的に吸着させて、
マルトオリゴ糖を除去した後、アルコール類で溶出する
ので、混合水溶液中のマルトオリゴ糖誘導体を、高純
度、高収率で回収することができる。また、混合水溶液
中のマルトオリゴ糖誘導体の含量が少なくても、マルト
オリゴ糖誘導体が高度に濃縮回収されることから、後の
工程において更に高度に精製することも容易になる。
【００１８】したがって、本発明によれば、α−アミラ
ーゼ活性測定用基質として有用なマルトオリゴ糖誘導体
を、高純度で、容易に、高収率で製造することができ、
工業的及び経済的に有利になる。
ーゼ活性測定用基質として有用なマルトオリゴ糖誘導体
を、高純度で、容易に、高収率で製造することができ、
工業的及び経済的に有利になる。
【００１９】
製造例 澱粉加水分解物である「サンオリゴ」（商品名、参松工
業株式会社製）8.0kgと、ｐ−ニトロフェノール−α−
Ｄ−グルコピラノシド（以下、ｐＮＰ−α−Ｇ１と記
す）4.0kg とを、20％のメタノールと、20％のプロパノ
ールとを含むアルコール水溶液に溶解させた混合溶液
（ｐＨ7.0 ）80Ｌ（リットル）に、マルトテトラオース
生成型α−アミラーゼである「オリゴアミラーゼ」［商
品名、日本食品化工株式会社製、2500U/mL（ミリリット
ル）］30,000単位を添加し、35℃で、一夜反応させた。
業株式会社製）8.0kgと、ｐ−ニトロフェノール−α−
Ｄ−グルコピラノシド（以下、ｐＮＰ−α−Ｇ１と記
す）4.0kg とを、20％のメタノールと、20％のプロパノ
ールとを含むアルコール水溶液に溶解させた混合溶液
（ｐＨ7.0 ）80Ｌ（リットル）に、マルトテトラオース
生成型α−アミラーゼである「オリゴアミラーゼ」［商
品名、日本食品化工株式会社製、2500U/mL（ミリリット
ル）］30,000単位を添加し、35℃で、一夜反応させた。
【００２０】次いで、常法により、活性炭脱色濾過を行
なった後、ブリックス度40まで濃縮し、４℃の冷室に一
夜放置して、ｐＮＰ−α−Ｇ１の結晶を析出させた。析
出したｐＮＰ−α−Ｇ１結晶を濾別し、ｐ−ニトロフェ
ノール−α−Ｄ−マルトペンタオシド（以下、ｐＮＰ−
α−Ｇ５と記す）7.6 重量％と、ｐＮＰ−α−Ｇ１3.9
重量％と、その他のｐ−ニトロフェノール−α−マルト
オリゴ糖（以下、ｐＮＰ−α−Ｇｎと記す）2.5 重量％
と、マルトオリゴ糖86.0重量％とからなる固形物を含有
する溶液を得た。
なった後、ブリックス度40まで濃縮し、４℃の冷室に一
夜放置して、ｐＮＰ−α−Ｇ１の結晶を析出させた。析
出したｐＮＰ−α−Ｇ１結晶を濾別し、ｐ−ニトロフェ
ノール−α−Ｄ−マルトペンタオシド（以下、ｐＮＰ−
α−Ｇ５と記す）7.6 重量％と、ｐＮＰ−α−Ｇ１3.9
重量％と、その他のｐ−ニトロフェノール−α−マルト
オリゴ糖（以下、ｐＮＰ−α−Ｇｎと記す）2.5 重量％
と、マルトオリゴ糖86.0重量％とからなる固形物を含有
する溶液を得た。
【００２１】実施例１〜４、及び比較例１〜５ 製造例で得られた、固形物450gを含有する溶液1.5 Ｌ
に、表１に示す各種の吸着樹脂（湿潤状態）１Ｌを添加
し、室温で15分間攪拌した後、樹脂を濾別して濾液を得
た。これらを実施例１〜４とする。
に、表１に示す各種の吸着樹脂（湿潤状態）１Ｌを添加
し、室温で15分間攪拌した後、樹脂を濾別して濾液を得
た。これらを実施例１〜４とする。
【００２２】なお、比較のため、吸着樹脂を、基本骨格
がスチレンジビニルベンゼン共重合体ではないもの、非
極性ではないもの、表面積、平均細孔径が、本発明のも
のとは異なるものに代え、あとは実施例１〜４と同様に
して濾液を得た。これらを比較例１〜５とする。
がスチレンジビニルベンゼン共重合体ではないもの、非
極性ではないもの、表面積、平均細孔径が、本発明のも
のとは異なるものに代え、あとは実施例１〜４と同様に
して濾液を得た。これらを比較例１〜５とする。
【００２３】得られたそれぞれの濾液（実施例１〜４、
比較例１〜５）について、残存するｐＮＰ−α−Ｇｎ誘
導体の相対的な量を求めるため、310nm の吸光度を測定
し、その結果を表１に記した。
比較例１〜５）について、残存するｐＮＰ−α−Ｇｎ誘
導体の相対的な量を求めるため、310nm の吸光度を測定
し、その結果を表１に記した。
【００２４】
【表１】
【００２５】表１の結果から、スチレンジビニルベンゼ
ン共重合体を基本骨格とし、非極性であって、表面積が
400 〜1000m2/g、平均細孔径が30〜120 オングストロー
ムである条件を満足する吸着樹脂を用いた実施例１〜４
の濾液は、吸光度が0.441 〜0.935と低く、濾液中にｐ
ＮＰ−α−Ｇｎ誘導体が少ないこと、すなわち吸着樹脂
に良く吸着していることがわかる。また、前記条件のう
ち一つ又は二つ以上を満足しない比較例１〜５の濾液
は、吸光度が2.093 〜5.250 と高く、濾液中にｐＮＰ−
α−Ｇｎ誘導体が多いこと、すなわち吸着樹脂にあまり
吸着していないことがわかる。
ン共重合体を基本骨格とし、非極性であって、表面積が
400 〜1000m2/g、平均細孔径が30〜120 オングストロー
ムである条件を満足する吸着樹脂を用いた実施例１〜４
の濾液は、吸光度が0.441 〜0.935と低く、濾液中にｐ
ＮＰ−α−Ｇｎ誘導体が少ないこと、すなわち吸着樹脂
に良く吸着していることがわかる。また、前記条件のう
ち一つ又は二つ以上を満足しない比較例１〜５の濾液
は、吸光度が2.093 〜5.250 と高く、濾液中にｐＮＰ−
α−Ｇｎ誘導体が多いこと、すなわち吸着樹脂にあまり
吸着していないことがわかる。
【００２６】実施例５ 製造例で調製したｐＮＰ−α−Ｇｎ誘導体を含む溶液50
mL（固形物15g)を、予め「デュオライトS-876 」（商品
名、ダイヤモンドシャムロック社製）（湿潤状態）50mL
を充填したカラムに、室温で、ＳＶ＝１で通液してｐＮ
Ｐ−α−Ｇｎ誘導体を吸着させた。次いで、純水150mL
をＳＶ＝２で通液してカラム内を洗浄した後、60％メタ
ノール溶液100mL をＳＶ＝１で通液してｐＮＰ−α−Ｇ
ｎ誘導体を溶出させた。
mL（固形物15g)を、予め「デュオライトS-876 」（商品
名、ダイヤモンドシャムロック社製）（湿潤状態）50mL
を充填したカラムに、室温で、ＳＶ＝１で通液してｐＮ
Ｐ−α−Ｇｎ誘導体を吸着させた。次いで、純水150mL
をＳＶ＝２で通液してカラム内を洗浄した後、60％メタ
ノール溶液100mL をＳＶ＝１で通液してｐＮＰ−α−Ｇ
ｎ誘導体を溶出させた。
【００２７】更に、この溶出液を、直ちに、ブリックス
度35まで減圧濃縮した後、４℃の冷室中に一夜放置し
て、ｐＮＰ−α−Ｇ１の結晶を析出させた。析出した結
晶を濾別して、濾液を回収した。
度35まで減圧濃縮した後、４℃の冷室中に一夜放置し
て、ｐＮＰ−α−Ｇ１の結晶を析出させた。析出した結
晶を濾別して、濾液を回収した。
【００２８】上記における吸着処理前の溶液、吸着処理
後の溶出液、及び結晶除去処理後の濾液について、それ
ぞれに含まれるｐＮＰ−α−Ｇ５等の糖組成を、「トヨ
パールＨＷ−40Ｓ」（商品名、東ソー株式会社製）を担
体とする高速液体クロマトグラフィーにより測定した。
その結果を表２に示す。
後の溶出液、及び結晶除去処理後の濾液について、それ
ぞれに含まれるｐＮＰ−α−Ｇ５等の糖組成を、「トヨ
パールＨＷ−40Ｓ」（商品名、東ソー株式会社製）を担
体とする高速液体クロマトグラフィーにより測定した。
その結果を表２に示す。
【００２９】
【表２】
【００３０】表２の結果から、吸着樹脂を用いて吸着処
理し、メタノール溶液で溶出させることにより、ｐＮＰ
−α−Ｇ５の含有率は、吸着処理前に比べて7.1 倍に増
加すること、更に、溶出液を結晶化させて析出した結晶
を除去することにより、ｐＮＰ−α−Ｇ５の含有率は、
吸着処理前の12.3倍に増加することがわかる。
理し、メタノール溶液で溶出させることにより、ｐＮＰ
−α−Ｇ５の含有率は、吸着処理前に比べて7.1 倍に増
加すること、更に、溶出液を結晶化させて析出した結晶
を除去することにより、ｐＮＰ−α−Ｇ５の含有率は、
吸着処理前の12.3倍に増加することがわかる。
【００３１】実施例６ 実施例５で得られたｐＮＰ−α−Ｇ５を93.5重量％含有
するｐＮＰ−α−Ｇｎ誘導体混合物2.0gと、乳糖2.0gと
を溶解させた5.0mLの混合水溶液（ｐＨ7.0 ）に、β−
ガラクトシダーゼである「ビオラクタ」（商品名、大和
化成株式会社製、4.5U/mg ）15単位を添加し、40℃で４
時間反応させた後、４％ＨＣｌ溶液を添加してｐＨ3.0
に調整して反応を停止させた。
するｐＮＰ−α−Ｇｎ誘導体混合物2.0gと、乳糖2.0gと
を溶解させた5.0mLの混合水溶液（ｐＨ7.0 ）に、β−
ガラクトシダーゼである「ビオラクタ」（商品名、大和
化成株式会社製、4.5U/mg ）15単位を添加し、40℃で４
時間反応させた後、４％ＨＣｌ溶液を添加してｐＨ3.0
に調整して反応を停止させた。
【００３２】次いで、得られた反応液を、「アンバーラ
イトＸＡＤ−４」（商品名、ロームアンドハース社製）
（湿潤状態）50mLを充填したカラムに、室温で、ＳＶ＝
１で通液してｐＮＰ−α−Ｇｎ誘導体を吸着させた。
イトＸＡＤ−４」（商品名、ロームアンドハース社製）
（湿潤状態）50mLを充填したカラムに、室温で、ＳＶ＝
１で通液してｐＮＰ−α−Ｇｎ誘導体を吸着させた。
【００３３】続いて、純水150mL をＳＶ＝２で通液して
カラム内を洗浄した後、60％エタノール溶液100mL をＳ
Ｖ＝１で通液してｐＮＰ−α−Ｇｎ誘導体を溶出させ
た。得られた溶出液を、直ちに、ブリックス度35まで減
圧濃縮してエタノールを除去した。溶液中のガラクトシ
ル化ｐＮＰ−α−Ｇ５等の糖組成を、実施例５と同様の
高速液体クロマトグラフィーを用いて測定した。その結
果を表３に示す。
カラム内を洗浄した後、60％エタノール溶液100mL をＳ
Ｖ＝１で通液してｐＮＰ−α−Ｇｎ誘導体を溶出させ
た。得られた溶出液を、直ちに、ブリックス度35まで減
圧濃縮してエタノールを除去した。溶液中のガラクトシ
ル化ｐＮＰ−α−Ｇ５等の糖組成を、実施例５と同様の
高速液体クロマトグラフィーを用いて測定した。その結
果を表３に示す。
【００３４】
【表３】
【００３５】表３の結果から、本発明の方法により、吸
着樹脂を用いて吸着処理すると、ガラクトシル化ｐＮＰ
−α−Ｇ５の含有率が約1.8 倍に増加することがわか
る。
着樹脂を用いて吸着処理すると、ガラクトシル化ｐＮＰ
−α−Ｇ５の含有率が約1.8 倍に増加することがわか
る。
【００３６】実施例７ マルトヘキサオース（Ｇ６）500gと、表４に示す各種の
糖フェノール誘導体250gとを、20％メタノールと、20％
プロパノールとを含む水溶液に溶解した混合溶液（ｐＨ
7.0 ）４Ｌに、前記マルトテトラオース生成型α−アミ
ラーゼ2,000 単位を添加し、40℃で、一夜反応させた。
糖フェノール誘導体250gとを、20％メタノールと、20％
プロパノールとを含む水溶液に溶解した混合溶液（ｐＨ
7.0 ）４Ｌに、前記マルトテトラオース生成型α−アミ
ラーゼ2,000 単位を添加し、40℃で、一夜反応させた。
【００３７】次いで、常法により、活性炭脱色濾過を行
なった後、ブリックス度40まで濃縮し、４℃の冷室中に
一夜放置して、原料の糖フェノール誘導体の結晶を析出
させ、析出した結晶を濾別し、濾液（Ａ）を得た。
なった後、ブリックス度40まで濃縮し、４℃の冷室中に
一夜放置して、原料の糖フェノール誘導体の結晶を析出
させ、析出した結晶を濾別し、濾液（Ａ）を得た。
【００３８】次に、これらの濾液50mL（固形物約16g ）
を、「デュオライトS-861 」（商品名、ダイヤモンドシ
ャムロック社製）（湿潤状態）50mLを予め充填したカラ
ムに、室温で、ＳＶ＝１で通液して、生成されたマルト
オリゴ糖フェノール誘導体を吸着させた。続いて、純水
150mL をＳＶ＝２で通液してカラム内を洗浄した後、60
％エタノール溶液100mL をＳＶ＝１で通液して、マルト
オリゴ糖フェノール誘導体を溶出させ、溶出液（Ｂ）を
得た。
を、「デュオライトS-861 」（商品名、ダイヤモンドシ
ャムロック社製）（湿潤状態）50mLを予め充填したカラ
ムに、室温で、ＳＶ＝１で通液して、生成されたマルト
オリゴ糖フェノール誘導体を吸着させた。続いて、純水
150mL をＳＶ＝２で通液してカラム内を洗浄した後、60
％エタノール溶液100mL をＳＶ＝１で通液して、マルト
オリゴ糖フェノール誘導体を溶出させ、溶出液（Ｂ）を
得た。
【００３９】更に、得られた溶出液を、直ちに、ブリッ
クス度35まで減圧濃縮した後、４℃の冷室に一夜放置し
て、原料の糖フェノール誘導体の結晶を析出させ、析出
した結晶を濾別し、濾液（Ｃ）を得た。
クス度35まで減圧濃縮した後、４℃の冷室に一夜放置し
て、原料の糖フェノール誘導体の結晶を析出させ、析出
した結晶を濾別し、濾液（Ｃ）を得た。
【００４０】上記における吸着処理前の濾液（Ａ）、吸
着処理後の溶出液（Ｂ）、及び結晶除去処理後の濾液
（Ｃ）について、マルトペンタオース（Ｇ５）フェノー
ル誘導体含有率（％）を、実施例５と同様の高速液体ク
ロマトグラフィーにより測定した。その結果を表４に示
す。
着処理後の溶出液（Ｂ）、及び結晶除去処理後の濾液
（Ｃ）について、マルトペンタオース（Ｇ５）フェノー
ル誘導体含有率（％）を、実施例５と同様の高速液体ク
ロマトグラフィーにより測定した。その結果を表４に示
す。
【００４１】
【表４】
【００４２】表４の結果から、本発明の方法により、吸
着樹脂を用いて吸着処理することにより、マルトペンタ
オース・フェノール誘導体の含有率は、吸着処理前の７
〜９倍に増加し、更に吸着処理後に溶出液を結晶化して
結晶を除去することにより、マルトペンタオース・フェ
ノール誘導体の含有率は、吸着処理前の12〜16倍に増加
することがわかる。
着樹脂を用いて吸着処理することにより、マルトペンタ
オース・フェノール誘導体の含有率は、吸着処理前の７
〜９倍に増加し、更に吸着処理後に溶出液を結晶化して
結晶を除去することにより、マルトペンタオース・フェ
ノール誘導体の含有率は、吸着処理前の12〜16倍に増加
することがわかる。
【００４３】実施例８ α−シクロデキストリン（シクロヘキサアミロース、以
下α−ＣＤと記す）500gと、表５に示す各種の糖フェノ
ール誘導体250gとを含む混合溶液（ｐＨ5.5 ）２Ｌに、
シクロマルトデキストリングルカノトランスフェラーゼ
である「コンチザイム」（商品名、天野製薬株式会社
製、10,000U/mL）50,000単位を添加し、45℃で、２時間
反応させた後、90℃に昇温して酵素を失活させた。次い
で、室温に冷却し、シクロヘキサン１Ｌを添加し、３時
間攪拌して、析出するα−ＣＤ−シクロヘキサン包接物
を濾別した。更に、この濾液に再びシクロヘキサン500m
L を添加し、前記と同様にして、析出する包接物を濾別
して濾液を得た。
下α−ＣＤと記す）500gと、表５に示す各種の糖フェノ
ール誘導体250gとを含む混合溶液（ｐＨ5.5 ）２Ｌに、
シクロマルトデキストリングルカノトランスフェラーゼ
である「コンチザイム」（商品名、天野製薬株式会社
製、10,000U/mL）50,000単位を添加し、45℃で、２時間
反応させた後、90℃に昇温して酵素を失活させた。次い
で、室温に冷却し、シクロヘキサン１Ｌを添加し、３時
間攪拌して、析出するα−ＣＤ−シクロヘキサン包接物
を濾別した。更に、この濾液に再びシクロヘキサン500m
L を添加し、前記と同様にして、析出する包接物を濾別
して濾液を得た。
【００４４】次いで、常法により、活性炭脱色濾過を行
なった後、ブリックス度30まで濃縮し、４℃の冷室中に
一夜放置して、原料の糖フェノール誘導体の結晶を析出
させ、析出した結晶を濾別し、濾液（Ｄ）を得た。
なった後、ブリックス度30まで濃縮し、４℃の冷室中に
一夜放置して、原料の糖フェノール誘導体の結晶を析出
させ、析出した結晶を濾別し、濾液（Ｄ）を得た。
【００４５】次に、これらの濾液50mL（固形物約16g ）
を、「デュオライトS-861 」（商品名、ダイヤモンドシ
ャムロック社製）（湿潤状態）50mLを予め充填したカラ
ムに、室温で、ＳＶ＝１で通液してマルトオリゴ糖フェ
ノール誘導体を吸着させた。続いて、純水150mL をＳＶ
＝２で通液してカラム内を洗浄した後、60％プロパノー
ル溶液100mL をＳＶ＝１で通液して、マルトオリゴ糖フ
ェノール誘導体を溶出させ、溶出液（Ｅ）を得た。
を、「デュオライトS-861 」（商品名、ダイヤモンドシ
ャムロック社製）（湿潤状態）50mLを予め充填したカラ
ムに、室温で、ＳＶ＝１で通液してマルトオリゴ糖フェ
ノール誘導体を吸着させた。続いて、純水150mL をＳＶ
＝２で通液してカラム内を洗浄した後、60％プロパノー
ル溶液100mL をＳＶ＝１で通液して、マルトオリゴ糖フ
ェノール誘導体を溶出させ、溶出液（Ｅ）を得た。
【００４６】更に、得られた溶出液を、直ちに、ブリッ
クス度35まで減圧濃縮した後、４℃の冷室中に一夜放置
して、原料の糖フェノール誘導体の結晶を析出させ、析
出した結晶を濾別し、濾液（Ｆ）を得た。
クス度35まで減圧濃縮した後、４℃の冷室中に一夜放置
して、原料の糖フェノール誘導体の結晶を析出させ、析
出した結晶を濾別し、濾液（Ｆ）を得た。
【００４７】こうして得られた吸着処理前の濾液
（Ｄ）、吸着処理後の溶出液（Ｅ）、及び結晶除去処理
後の濾液（Ｆ）について、マルトヘプタオース（Ｇ７）
フェノール誘導体含有率（％）を、実施例５と同様の高
速液体クロマトグラフィーにより測定した。その結果を
表５に示す。
（Ｄ）、吸着処理後の溶出液（Ｅ）、及び結晶除去処理
後の濾液（Ｆ）について、マルトヘプタオース（Ｇ７）
フェノール誘導体含有率（％）を、実施例５と同様の高
速液体クロマトグラフィーにより測定した。その結果を
表５に示す。
【００４８】
【表５】
【００４９】表５の結果から、本発明の方法により、吸
着樹脂を用いて吸着処理することにより、マルトヘプタ
オース・フェノール誘導体の含有率は、吸着処理前の約
3.1倍に増加し、更に吸着処理後に溶出液を結晶化して
結晶を除去することにより、マルトヘプタオース・フェ
ノール誘導体の含有率は、吸着処理前の約3.5 倍に増加
することがわかる。
着樹脂を用いて吸着処理することにより、マルトヘプタ
オース・フェノール誘導体の含有率は、吸着処理前の約
3.1倍に増加し、更に吸着処理後に溶出液を結晶化して
結晶を除去することにより、マルトヘプタオース・フェ
ノール誘導体の含有率は、吸着処理前の約3.5 倍に増加
することがわかる。
【００５０】
【発明の効果】以上説明したように、本発明によれば、
還元性末端にフェノール誘導体を有するマルトオリゴ糖
誘導体と、マルトオリゴ糖との混合水溶液を、スチレン
ジビニルベンゼン共重合体を基本骨格とする非極性のハ
イポーラス型吸着樹脂に通液して、マルトオリゴ糖誘導
体を選択的に吸着させた後、溶出、回収するので、容易
に、経済的に、高収率で、高純度のマルトオリゴ糖誘導
体を得ることができる。すなわち、還元性末端にフェノ
ール誘導体を有するマルトオリゴ糖誘導体を、工業的に
有利な方法で回収することが可能になった。したがっ
て、臨床検査分野及び学術研究分野におけるα−アミラ
ーゼ活性測定用基質を、工業的に安価に提供することが
できる。
還元性末端にフェノール誘導体を有するマルトオリゴ糖
誘導体と、マルトオリゴ糖との混合水溶液を、スチレン
ジビニルベンゼン共重合体を基本骨格とする非極性のハ
イポーラス型吸着樹脂に通液して、マルトオリゴ糖誘導
体を選択的に吸着させた後、溶出、回収するので、容易
に、経済的に、高収率で、高純度のマルトオリゴ糖誘導
体を得ることができる。すなわち、還元性末端にフェノ
ール誘導体を有するマルトオリゴ糖誘導体を、工業的に
有利な方法で回収することが可能になった。したがっ
て、臨床検査分野及び学術研究分野におけるα−アミラ
ーゼ活性測定用基質を、工業的に安価に提供することが
できる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C07H 15/203 C08B 37/00 ＣＡ（ＳＴＮ) ＣＡＯＬＤ（ＳＴＮ) ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (5)
- 【請求項１】 還元性末端にフェノール誘導体を有する
マルトオリゴ糖誘導体と、マルトオリゴ糖との混合水溶
液を、スチレンジビニルベンゼン共重合体を基本骨格と
する非極性のハイポーラス型吸着樹脂に通液して前記マ
ルトオリゴ糖誘導体を吸着させた後、アルコール類で溶
出し、回収することを特徴とするマルトオリゴ糖誘導体
の回収方法。 - 【請求項２】 前記吸着樹脂の表面積が400 〜1000m2/g
であり、平均細孔径が30〜120 オングストロームである
請求項１記載のマルトオリゴ糖誘導体の回収方法。 - 【請求項３】 前記マルトオリゴ糖誘導体が、マルトオ
リゴ糖の還元性末端に、フェノール誘導体が、α−結合
及び／又はβ−結合により結合している請求項１又は２
記載のマルトオリゴ糖の回収方法。 - 【請求項４】 前記フェノール誘導体が、ニトロフェノ
ール、ジニトロフェノール、又はこれらの芳香族水素が
ハロゲン基、スルフォン酸基、カルボン酸基から選ばれ
た一種又は二種以上の置換基で置換されたものである請
求項１〜３のいずれか一つに記載のマルトオリゴ糖誘導
体の回収方法。 - 【請求項５】 前記アルコール類による溶出液を濃縮し
た後、濃縮液を冷所に放置し、析出した結晶を濾別して
濾液を回収する請求項１〜４のいずれか一つに記載のマ
ルトオリゴ糖誘導体の回収方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03203370A JP3080442B2 (ja) | 1991-07-19 | 1991-07-19 | マルトオリゴ糖誘導体の回収方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03203370A JP3080442B2 (ja) | 1991-07-19 | 1991-07-19 | マルトオリゴ糖誘導体の回収方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0525194A JPH0525194A (ja) | 1993-02-02 |
| JP3080442B2 true JP3080442B2 (ja) | 2000-08-28 |
Family
ID=16472911
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03203370A Expired - Lifetime JP3080442B2 (ja) | 1991-07-19 | 1991-07-19 | マルトオリゴ糖誘導体の回収方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3080442B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3507528B2 (ja) * | 1993-03-31 | 2004-03-15 | 日本食品化工株式会社 | シクロデキストリンの回収方法 |
-
1991
- 1991-07-19 JP JP03203370A patent/JP3080442B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0525194A (ja) | 1993-02-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0262239B2 (ja) | ||
| JP3134236B2 (ja) | α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法とその製造のための分離システム | |
| JP2749272B2 (ja) | アントラサイクリノングリコシドの精製法 | |
| JPS6026482B2 (ja) | サイクロデキストリンの製造方法 | |
| CN111394411A (zh) | 一种酶转化法制备α-熊果苷的工艺方法 | |
| US5007967A (en) | Separation and purification of branched beta cyclodextrins | |
| JP3080442B2 (ja) | マルトオリゴ糖誘導体の回収方法 | |
| JPH0217158B2 (ja) | ||
| EP0640095A1 (en) | Process for making vancomycin | |
| US5574135A (en) | Process for making vancomycin | |
| JP3024864B2 (ja) | エラグ酸配糖体及びその製造法 | |
| JP4697697B2 (ja) | ２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法 | |
| JPH0450319B2 (ja) | ||
| JP3141029B2 (ja) | ペントスタチンの精製方法 | |
| JPH0430276B2 (ja) | ||
| JPS62242692A (ja) | モラノリン誘導体の製造法 | |
| JP2000351791A (ja) | ドキソルビシンの精製方法 | |
| JPS61115093A (ja) | モラノリン誘導体の製法 | |
| JPH1146787A (ja) | マンノースの製造方法 | |
| WO1998026085A1 (fr) | Procedes de fabrication de vancomycine | |
| JPS60105498A (ja) | 光学活性トリプトフアンの回収方法 | |
| JPH10225299A (ja) | バンコマイシンの製造方法 | |
| JP3053510B2 (ja) | Ｄ−キロ−イノシトールの製造法 | |
| JP3826426B2 (ja) | ２−クロロ−４−ニトロフェニル ４−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−α−マルトシドの製造方法 | |
| JP2778975B2 (ja) | マルトシル―サイクロデキストリンの製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20000606 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080623 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090623 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090623 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090623 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100623 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100623 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100623 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100623 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110623 Year of fee payment: 11 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110623 Year of fee payment: 11 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120623 Year of fee payment: 12 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120623 Year of fee payment: 12 |