JP3069824B2

JP3069824B2 - ２−クロロ−４−ニトロフェニル−α−Ｄ−マルトトリオシドの製造方法

Info

Publication number: JP3069824B2
Application number: JP6123154A
Authority: JP
Inventors: 昭夫林; 信行浜中; 浩清水
Original assignee: Ono Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Ono Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1993-05-13
Filing date: 1994-05-12
Publication date: 2000-07-24
Anticipated expiration: 2015-07-24
Also published as: JPH0725892A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、２−クロロ−４−ニト
ロフェニル−α−Ｄ−マルトトリオシドの合成中間体で
ある、下記式（Ｉ）

【０００２】

【化３】

【０００３】で示される２−クロロ−４−ニトロフェニ
ル−パーアセチル−α−Ｄ−マルトトリオシドの製造方
法、および前記中間体の加水分解による２−クロロ−４
−ニトロフェニル−α−Ｄ−マルトトリオシドの製造方
法に関する。

【０００４】

【発明の背景】２−クロロ−４−ニトロフェニル−α−
Ｄ−マルトトリオシド（以下、Ｇ３ＣＮＰと略す。）
は、α−アミラーゼを用いた体液中カルシウム定量系に
おいて、α−アミラーゼの基質として有用であることが
知られている（特開平 2-276597号参照）。またカルシ
ウムの定量だけでなく、α−アミラーゼの測定系でも利
用できる応用範囲の広い基質である。

【０００５】カルシウムは生体内での細胞機能や血液の
凝固機能に重要な役割を果たしているが、ヒト血漿中の
量は非常に厳密に調節されており、異常低値および高値
を知ることでの診断価値は高い。例えば低カルシウム血
症としては、低タンパク血症、低リン血症、腎炎、ネフ
ローゼ等の疾患、高カルシウム血症としては骨腫瘍、ア
ジソン病、肺気腫、腎不全等の疾患の可能性があり、こ
れらの診断に用いることができる。

【０００６】血清中のα−アミラーゼは唾液由来のも
の、および膵臓由来のもの（pancreatic amylase）であ
る。膵炎等で膵臓に障害が起こると、血清の pancreati
c amylase 活性の上昇がおこる。よってα−アミラーゼ
の測定は膵炎等の膵臓疾患の診断時に有用である。２−
クロロ−４−ニトロフェニル−パーアセチル−α−Ｄ−
マルトトリオシドは、上記の目的に利用されるＧ３ＣＮ
Ｐの合成中間体である。

【０００７】

【従来技術】オリゴ糖の１位のアノメリック炭素にフェ
ノール類を結合させる場合、β体を収率よく合成する方
法は知られているが、α体を収率よく短い工程で合成す
ることは困難であった。特に２−クロロ−４−ニトロフ
ェノールの場合には、そのフェノールイオンの求核性が
弱く立体選択的な導入が技術的に難しいために多段階の
工程を必要としていた。そこで、その改良法が提案され
ている。例えば、アセチルグルコースおよび／またはア
セチル化マルトオリゴ糖と核置換フェノールとをルイス
酸の存在下に反応させることを特徴とする、下記式
（Ｘ）

【０００８】

【化４】

【０００９】（式中、Ｒ^1XおよびＲ^2Xは、それぞれ独立
して水素原子、ヒドロキシ基、低級アルキル基、アミノ
基、ニトロ基、またはハロゲン原子を表わし、ｎＸは０
または１から７の整数を意味する。）で示されるα、β
−核置換フェニルグリコシドおよびα、β−核置換フェ
ニルマルトオリゴシドの製造方法がある（特開昭 62-28
9595号明細書参照）。また、２−クロロ−４−ニトロフ
ェニル−パーアセチル−α−Ｄ−マルトトリオシドを製
造する方法として、四塩化スズ存在下に２−クロロ−４
−ニトロフェノールを反応させる下記の反応工程式に示
される方法がある（特開平 4-368395号明細書参照）。

【００１０】

【化５】

【００１１】さらに、２−クロロ−４−ニトロフェニル
−パーアセチル−α−Ｄ−マルトトリオシドからＧ３Ｃ
ＮＰを製造する方法も提案されている（特開平 4-36839
5 号明細書参照）。

【００１２】

【従来の技術の問題点】特開昭 62-289595号明細書に
は、アセチルグルコースおよび／またはアセチル化マル
トオリゴ糖と核置換フェノールとをルイス酸の存在下で
反応させることが開示されているが、実施例に具体的に
記載されているマルトオリゴ糖はＤ−グルコシド、Ｄ−
マルトペンタオシドおよびＤ−マルトヘプタオシドであ
り、Ｄ−マルトトリオシドについては開示されていな
い。そこで、本発明者らが特開昭 62-289595号明細書の
方法に従ってＤ−マルトトリオシドについて追試してみ
たところ、α体の収率は10.2％という低いものであり、
満足のいくものではなかった（後記の比較例１参照）。
特開平 4-368395 号明細書には、ルイス酸（四塩化ス
ズ、四塩化チタン等）の存在下で化合物（II）と２−ク
ロロ−４−ニトロフェノールとを反応させて化合物
（Ｉ）を得る方法が開示されており、さらにその実施例
においてルイス酸として四塩化スズを用いた結果を示し
ているが、α体の収率は21.8％と低く、その立体選択性
も悪く（およそα／β＝1.28／1 ）、必ずしも満足のい
くものではない。

【００１３】

【問題解決のための手段】本発明者らは、２−クロロ−
４−ニトロフェニル−パーアセチル−α−Ｄ−マルトト
リオシド収率の向上およびα体の立体選択性の向上を目
的としてその製造方法について鋭意検討した。その結
果、モレキュラシーブス（商品名）等として知られてい
る合成ゼオライトを用いることによって従来技術の方法
に比べ、α体の収率および立体選択性が格段に向上する
ことを見い出し、本発明を完成した。合成ゼオライトを
用いることにより、α体の収率およびα体の立体選択性
が著しく向上することは従来技術からはまったく予測で
きないことである。

【００１４】

【発明の開示】すなわち、本発明は、以下の製造方法を
提供する。１）下記式（II）

【００１５】

【化６】

【００１６】で示されるパーアセチル−β−Ｄ−マルト
トリオシドを三フッ化ホウ素・ジエチルエーテレートお
よび合成ゼオライトの存在下、２−クロロ−４−ニトロ
フェノールと反応させることを特徴とする下記式（Ｉ）

【００１７】

【化７】

【００１８】で示される２−クロロ−４−ニトロフェニ
ル−パーアセチル−α−Ｄ−マルトトリオシドの製造方
法。２）下記式（II）

【化１２】で示されるパーアセチル−β−Ｄ−マルトトリオシドを
三フッ化ホウ素・ジエチルエーテレートおよび合成ゼオ
ライトの存在下、２−クロロ−４−ニトロフェノールと
反応させ、得られた下記式（Ｉ）

【化１３】で示される２−クロロ−４−ニトロフェニル−パーアセ
チル−α−Ｄ−マルトトリオシドを、酸性条件下で加水
分解することを特徴とする２−クロロ−４−ニトロフェ
ニル−α−Ｄ−マルトトリオシドの製造方法。３）反応をハロゲン化炭化水素系溶媒中で行なうことを
特徴とする前記１または２記載の製造方法。４）合成ゼオライトがＡ型合成ゼオライトである前記１
または２記載の製造方法。５）合成ゼオライトがモレキュラシーブス４Ａまたは３
Ａである前記４記載の製造方法。

【００１９】以下、本発明による２−クロロ−４−ニト
ロフェニル−パーアセチル−α−Ｄ−マルトトリオシド
の製造方法について説明する。式（II）のパーアセチル
−β−Ｄ−マルトトリオシドと２−クロロ−４−ニトロ
フェノールとの反応は、両原料化合物を適当な溶媒中
で、三フッ化ホウ素ジエチルエーテレート（ルイス酸触
媒）および合成ゼオライトの存在下にて、不活性気体
（アルゴン、窒素等）の雰囲中で加熱撹拌することによ
り行なわれる。

【００２０】使用する溶媒は、反応に不活性なものであ
ればよく、例えばアルコールの混在しない無水ハロゲン
化炭化水素系溶媒、具体例としては、クロロホルム、塩
化メチレン等が挙げられる。パーアセチル−β−Ｄ−マ
ルトトリオシドと２−クロロ−４−ニトロフェノールと
の割合は、前者１モルに対して後者１〜１５モル、好ま
しくは１０モル使用する。触媒の三フッ化ホウ素・ジエ
チルエーテレートはパーアセチル−β−Ｄ−マルトトリ
オシド１モルに対して１〜８モル、好ましくは３〜６モ
ル使用する。

【００２１】合成ゼオライトは、例えばモレキュラーシ
ーブスや、商品名ゼオラムあるいはモレキュライト等と
して市販されている粉末状のものが使用できる。中で
も、Ｎａ₂Ｏ・Ａｌ₂Ｏ・２ＳｉＯ₂・ｎＨ₂Ｏを基本とす
るいわゆるＡ型構造のもの、具体的にはモレキュラーシ
ーブス３Ａ、モレキュラーシーブス４Ａ、ゼオラムＡ−
３、ゼオラムＡ−４、モレキュライトＡ−３３０、モレ
キュライトＡ−３１５、モレキュライトＡ−４３０、モ
レキュライトＡ−４１５等が挙げられ、特にモレキュラ
ーシーブス３Ａおよびモレキュラーシーブス４Ａが好ま
しい。合成ゼオライトの使用量はパーアセチル−β−Ｄ
−マルトトリオシド１モルに対して１００〜5000ｇ、好
ましくは1500〜2500ｇである。

【００２２】反応温度は３０〜１００℃、好ましくは４
５〜６５℃である。反応時間は、反応温度にもよるが、
８〜４０時間である。反応終了後は反応混合物の温度を
室温まで下げた後、不活性溶媒（クロロホルム等）で希
釈し、水酸化ナトリウム水溶液を加えて触媒を分解した
後、合成ゼオライトをろ過し、常法により洗浄濃縮し、
乾燥した後減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィー等により精製して目的物を得ることがで
きる。

【００２３】本発明の方法において出発物質であるパー
アセチル−β−Ｄ−マルトトリオシドは、特開平 4-368
395 号明細書に記載の方法により製造することができ
る。また本発明方法で得られる２−クロロ−４−ニトロ
フェニル−パーアセチル−α−Ｄ−マルトトリオシドを
脱アセチル化反応に付すことによって、２−クロロ−４
−ニトロフェニル−α−Ｄ−マルトトリオシドを製造す
ることができる。この脱アセチル化反応は公知であり、
例えば水と混合する溶媒（クロロホルム−メタノール混
液またはジオキサン−メタノール混液等）中、無機酸
（塩酸、硫酸等）の存在下、４〜３０℃の温度で、５〜
９２時間反応させることによって行われる。反応後は反
応液を中和し、濃縮した後カラムクロマトグラフィー等
の常法により精製して目的物を得ることができる。

【００２４】

【発明の効果】本発明は、三フッ化ホウ素・ジエチルエ
ーテレートと合成ゼオライトの存在下で、パーアセチル
−β−Ｄ−マルトトリオシドと２−クロロ−４−ニトロ
フェノールとをハロゲン化炭化水素系溶媒中で反応させ
る２−クロロ−４−ニトロフェニル−パーアセチル−α
−Ｄ−マルトトリオシドの製造方法であり、従来法に比
べて収率が著しく向上し、またα体の立体選択性も格段
に向上するという画期的な製造方法である。本発明の方
法で得られる２−クロロ−４−ニトロフェニル−パーア
セチル−α−Ｄ−マルトトリオシドを加水分解すること
によって、体液中カルシウム定量系あるいはアミラーゼ
の測定系で有用な基質である２−クロロ−４−ニトロフ
ェニル−パーアセチル−α−Ｄ−マルトトリオシドを容
易に得ることができる。

【００２５】

【実施例および比較例】以下、比較例、参考例および実
施例により本発明を詳述するが、本発明はこれらに限定
されるものではない。なお、クロマトグラフィーによる
分離の箇所に示されているカッコ内の溶媒は、使用した
溶出溶媒または展開溶媒を表わし、割合は体積比を表わ
す。ＮＭＲは重クロロホルムおよび重メタノールで測定
した。

【００２６】実施例１２−クロロ−４−ニトロフェニル−パーアセチル−α−
Ｄ−マルトトリオシド

【００２７】

【化８】

【００２８】パーアセチル−β−Ｄ−マルトトリオシド
（３００ｍｇ）、モレキュラシーブス３Ａのパウダー
（６００ｍｇ）および２−クロロ−４−ニトロフェノー
ル（５４０ｍｇ）をアルゴン雰囲気下、アルコールの混
在しない無水クロロホルム（1.5 ｍｌ）中、６０℃で撹
拌した。撹拌しはじめたところで、三フッ化ホウ素・ジ
エチルエーテレート（２００μｌ）を加えた。反応混合
物を６０℃で１４時間撹拌した。反応混合物の温度を室
温まで下げた後、クロロホルム（２０ｍｌ）を加え、２
Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（2.4 ｍｌ）を加え、さらに
硫酸マグネシウム（4.2 ｍｇ）を加えた。１０分間激し
く撹拌した後、ろ過し、残渣をクロロホルムで十分洗浄
し、ろ液を２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液、飽和塩化アン
モニウム水溶液および飽和塩化ナトリウム水溶液で順次
洗浄し、無水硫酸マグネシウム乾燥し、減圧濃縮した。
残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサ
ン：酢酸エチル＝３：２→１：１）で精製し、次の物性
値を有する本発明化合物（１５５ｍｇ）を得た（収率約
４６％）。

【００２９】ＴＬＣ：Ｒｆ 0.40 （ヘキサン：酢酸エチ
ル＝２：３）；ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ8.29 (d, 1H), 8.20 (dd, 1
H), 7.37 (d, 1H), 5.79(t, 1H), 5.75 (d, 1H), 5.43
〜5.36 (m, 2H), 5.35 (t, 1H), 5.33 (d, 1H),5.07
(t, 1H), 4.93 (dd, 1H), 4.85 (dd, 1H), 4.77 (dd, 1
H), 4.52 〜4.47 (m, 2H), 4.33〜4.14 (m, 4H), 4.09
〜4.04 (m, 2H), 3.98〜3.90 (m, 3H), 2.20〜1.98 (m,
30H) 。

【００３０】実施例１（ａ）および１（ｂ）２−クロロ−４−ニトロフェニル−パーアセチル−α−
Ｄ−マルトトリオシド以下、次表に示す反応条件を用い
て、実施例１と同様の操作を行ない本発明化合物を得
た。結果を表１に示す。

【００３１】比較例１２−クロロ−４−ニトロフェニル−パーアセチル−α−
Ｄ−マルトトリオシドパーアセチル−β−Ｄ−マルトト
リオシド（５００ｍｇ）と２−クロロ−４−ニトロフェ
ノール（５４０ｍｇ）のトルエン（2.25ｍｌ）と塩化メ
チレン（0.45ｍｌ）の混合溶液に三フッ化ホウ素・ジエ
チルエーテレート（９１μｌ）を加えた。反応混合物を
５０℃で３０時間撹拌した。反応混合物の温度を室温ま
で下げた後、クロロホルムを加え、２Ｎ水酸化ナトリウ
ム水溶液を加え、さらに硫酸マグネシウムを加えた。１
０分間激しく撹拌した後、ろ過し、残渣をクロロホルム
で十分洗浄し、ろ液を２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液、飽
和塩化アンモニウム水溶液および飽和塩化ナトリウム水
溶液で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウム乾燥し、減圧
濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：２→１：１）で精製し
標題化合物を得た。結果を表１に示す。

【００３２】

【表１】

【００３３】表１から、本発明の方法は三フッ化ホウ素
・ジエチルエーテレートのみを用いた比較例１（特開昭
62-289595号記載の方法によって実施）に比べて、α体
の収率が 4.0〜5.0 倍、α体の立体選択性が 1.3〜2.7
倍向上した優れた方法であることがわかる。さらに、本
発明方法は四塩化スズを用いた従来法（特開平 4-36839
5 号記載）に比べ、α体の収率で 1.9〜2.3 倍、α体の
立体選択性で 2.5〜4.9 倍向上した優れた方法であるこ
とがわかる。

【００３４】実施例２２−クロロ−４−ニトロフェニル−α−Ｄ−マルトトリ
オシド

【００３５】

【化９】

【００３６】実施例１、実施例１（ａ）、または実施例
１（ｂ）で製造した化合物（1.23ｇ）を濃塩酸−メタノ
ール−クロロホルム（１：１０：４）混液に溶解させ
た。その混合物を２日間室温で撹拌した。反応混合物を
２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（２２ｍｌ）で中和した
後、減圧濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマト
グラフィー（酢酸エチル：メタノール：水＝２１：３：
１）で精製し、次の物性値を有する標題化合物（６０１
ｍｇ）を得た（収率８０％）。

【００３７】ＴＬＣ：Ｒｆ 0.47 ；（酢酸エチル：メタ
ノール：水＝７：２：１）；ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）：δ8.33 (d, 1H), 8.20 (dd, 1
H), 7.51 (d, 1H), 5.83(d, 1H), 5.20 (d, 1H), 5.17
(d, 1H), 4.20 (t, 1H), 3.96 〜3.20 (m,17H)。

フロントページの続き (56)参考文献特開平４−368395（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07H 15/203 ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式（II）【化１】で示されるパーアセチル−β−Ｄ−マルトトリオシドを
三フッ化ホウ素・ジエチルエーテレートおよび合成ゼオ
ライトの存在下、２−クロロ−４−ニトロフェノールと
反応させることを特徴とする下記式（Ｉ）【化２】で示される２−クロロ−４−ニトロフェニル−パーアセ
チル−α−Ｄ−マルトトリオシドの製造方法。
【請求項２】下記式（II）【化１０】で示されるパーアセチル−β−Ｄ−マルトトリオシドを
三フッ化ホウ素・ジエチルエーテレートおよび合成ゼオ
ライトの存在下、２−クロロ−４−ニトロフェノールと
反応させ、得られた下記式（Ｉ）【化１１】で示される２−クロロ−４−ニトロフェニル−パーアセ
チル−α−Ｄ−マルトトリオシドを、酸性条件下で加水
分解することを特徴とする２−クロロ−４−ニトロフェ
ニル−α−Ｄ−マルトトリオシドの製造方法。
【請求項３】反応をハロゲン化炭化水素系溶媒中で行
なうことを特徴とする請求項１または２記載の製造方
法。
【請求項４】合成ゼオライトがＡ型合成ゼオライトで
ある請求項１または２記載の製造方法。
【請求項５】Ａ型合成ゼオライトがモレキュラシーブ
ス４Ａまたは３Ａである請求項４記載の製造方法。