JP3025443B2 - カバーグラス用ホルダ - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、概して、細胞培養
装置、より具体的には、カバーグラス（ｃｏｖｅｒｓｌ
ｉｐ）上で細胞を培養することに関する。
装置、より具体的には、カバーグラス（ｃｏｖｅｒｓｌ
ｉｐ）上で細胞を培養することに関する。
【０００２】
【従来の技術】生物学的研究において、顕微鏡のスライ
ドカバーグラスの表面上で小規模の細胞培養を行うこと
が多い。カバーグラスは、容易に入手可能であり、洗浄
が容易で且つ均一である。カバーグラスは、一般に、ガ
ラス及びプラスチックで出来ている。カバーグラスは、
直径１２ｍｍ及び１８ｍｍの円形、辺が１８ｍｍ、２２
ｍｍ及び２５ｍｍの正方形並びに１１ｍｍ×２２ｍｍ乃
至４８ｍｍ×６０ｍｍの矩形として入手可能である。細
胞培養に使用したとき、カバーグラスは、一般に、洗浄
し、タンパク質で被覆し、また、乾燥後に、平坦な底部
を有する培養容器内に入れる。こうした方法に使用され
る培養容器は、幾つかのカバーグラスを互いに離間させ
て同時に配置することのできるペトリ皿とするか、また
は、各カバーグラスが個々のウェル内に配置される多数
ウェルプレートとする。
ドカバーグラスの表面上で小規模の細胞培養を行うこと
が多い。カバーグラスは、容易に入手可能であり、洗浄
が容易で且つ均一である。カバーグラスは、一般に、ガ
ラス及びプラスチックで出来ている。カバーグラスは、
直径１２ｍｍ及び１８ｍｍの円形、辺が１８ｍｍ、２２
ｍｍ及び２５ｍｍの正方形並びに１１ｍｍ×２２ｍｍ乃
至４８ｍｍ×６０ｍｍの矩形として入手可能である。細
胞培養に使用したとき、カバーグラスは、一般に、洗浄
し、タンパク質で被覆し、また、乾燥後に、平坦な底部
を有する培養容器内に入れる。こうした方法に使用され
る培養容器は、幾つかのカバーグラスを互いに離間させ
て同時に配置することのできるペトリ皿とするか、また
は、各カバーグラスが個々のウェル内に配置される多数
ウェルプレートとする。
【０００３】ＭＩＴプレスによって出版されたＧ．バン
カー（Ｇ．Ｂａｎｋｅｒ）及びＫ．ゴスリン（Ｋ．Ｇｏ
ｓｌｉｎ）による神経細胞の培養（Ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ
Ｎｅｒｖｅ Ｃｅｌｌｓ）という表題の参考文献は、
細胞培養のためにカバーグラスを使用することを論じて
いる。この文献の２５５−２５９頁の「低密度の海馬組
織培養体を作製のためのプロトコル（Ｐｒｏｔｏｃｏｌ
ｆｏｒ Ｐｒｅｐａｒｉｎｇ Ｌｏｗ−Ｄｅｎｓｉｔ
ｙ Ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ Ｃｕｌｔｕｒｅｓ）の部
分において、カバーグラスを使用することが記載されて
いる。
カー（Ｇ．Ｂａｎｋｅｒ）及びＫ．ゴスリン（Ｋ．Ｇｏ
ｓｌｉｎ）による神経細胞の培養（Ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ
Ｎｅｒｖｅ Ｃｅｌｌｓ）という表題の参考文献は、
細胞培養のためにカバーグラスを使用することを論じて
いる。この文献の２５５−２５９頁の「低密度の海馬組
織培養体を作製のためのプロトコル（Ｐｒｏｔｏｃｏｌ
ｆｏｒ Ｐｒｅｐａｒｉｎｇ Ｌｏｗ−Ｄｅｎｓｉｔ
ｙ Ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ Ｃｕｌｔｕｒｅｓ）の部
分において、カバーグラスを使用することが記載されて
いる。
【０００４】この「プロトコル」では、プラスチック培
養皿内に直に細胞を成長させるために顕微鏡技術を適用
することは難しいと記述されている。この「プロトコ
ル」には、細胞の培養を促進させるためにタンパク質、
及びポリリジンで処理したガラス製のカバーグラス上に
海馬組織細胞を被覆することが示唆されている。
養皿内に直に細胞を成長させるために顕微鏡技術を適用
することは難しいと記述されている。この「プロトコ
ル」には、細胞の培養を促進させるためにタンパク質、
及びポリリジンで処理したガラス製のカバーグラス上に
海馬組織細胞を被覆することが示唆されている。
【０００５】この「プロトコル」によれば、細胞の単一
培養、即ち、一種類の細胞のみを成長させるためには、
一般に、タンパク質で被覆したカバーグラスをペトリ
皿、または、多数ウェルプレートのウェルとすることが
できる、容器の底部に平らとなるように載せ、水性培養
基内に懸濁させた細胞懸濁液を容器に加える。カバーグ
ラス及び懸濁液を備えた容器を培養して、カバーグラス
上に略融合性のある細胞の単一層を発生させる。細胞を
顕微鏡で分析するため、または、細胞を更に処理するた
めには、細胞の単一層を有するカバーグラスを一般に、
ピンセットを使用して容器から除去しなければならな
い。カバーグラス及び容器の底部は、共に、略平坦であ
るから、水性培養基はカバーグラスを容器の底部に強く
付着させることがある。この付着のため、ピンセットで
カバーグラスを取り扱うと、カバーグラスに亀裂が生
じ、細胞が破壊され、カバーグラス上の細胞が更なる研
究のために使用し得なくなることが多い。
培養、即ち、一種類の細胞のみを成長させるためには、
一般に、タンパク質で被覆したカバーグラスをペトリ
皿、または、多数ウェルプレートのウェルとすることが
できる、容器の底部に平らとなるように載せ、水性培養
基内に懸濁させた細胞懸濁液を容器に加える。カバーグ
ラス及び懸濁液を備えた容器を培養して、カバーグラス
上に略融合性のある細胞の単一層を発生させる。細胞を
顕微鏡で分析するため、または、細胞を更に処理するた
めには、細胞の単一層を有するカバーグラスを一般に、
ピンセットを使用して容器から除去しなければならな
い。カバーグラス及び容器の底部は、共に、略平坦であ
るから、水性培養基はカバーグラスを容器の底部に強く
付着させることがある。この付着のため、ピンセットで
カバーグラスを取り扱うと、カバーグラスに亀裂が生
じ、細胞が破壊され、カバーグラス上の細胞が更なる研
究のために使用し得なくなることが多い。
【０００６】細胞の共培養（ｃｏ−ｃｕｌｔｕｒｅ）を
行うとき、即ち、第一の種類の細胞を第二の種類の細胞
に近接する位置にて成長させ、それらの細胞同士が直接
接触せずに化学的に相互作用するようにするときもカバ
ーグラス及び容器の技術が有用である。神経細胞の培養
という文献に記載された「プロトコル」において、その
筆者は、カバーグラスにタンパク質を被覆する前に、カ
バーグラスの縁部に少量のワックスを塗布することを示
唆している。この「プロトコル」に従って共培養体を作
製するためには、融合性のある単一層を得るための単一
培養操作の後に、少量のワックスのドット（ｄｏｔｓ）
で被覆した側にて第一の種類の細胞をカバーグラス上で
培養させる。少量のワックスのドットが被覆されたカバ
ーグラス側にて第一の種類の細胞を培養しなければなら
ないため、次のステップに必要な取り扱い中に幾つかの
カバーグラスに亀裂が生ずる可能性が依然としてある。
次に、第一の種類の細胞を有するカバーグラスをその元
の容器から取り外し、融合性のある第二の複数の細胞の
単一層がその底面に培養された第二の容器内に配置し
て、カバーグラスの第一の種類の細胞を有する側が第二
の容器内の第二の種類の細胞に対面するようにする。第
二の容器内にカバーグラスを配置するとき、ワックスの
ドットは、その表面上の第一の種類の細胞が付着したカ
バーグラスを、第二の種類の細胞に近接した状態にて支
持する。カバーグラスを使用するこの共培養の適用例に
おいて、ワックスのドットは、カバーグラスと容器の底
部とを分離させる。ワックスのドットは、カバーグラス
が容器の底部に付着するのを実質的に略防止することに
より、細胞同士を直接接触さずに共培養を進行させるこ
とを可能にすることに加えて、カバーグラスをピンセッ
トで容易に取り上げて且つ操作することを可能にする。
行うとき、即ち、第一の種類の細胞を第二の種類の細胞
に近接する位置にて成長させ、それらの細胞同士が直接
接触せずに化学的に相互作用するようにするときもカバ
ーグラス及び容器の技術が有用である。神経細胞の培養
という文献に記載された「プロトコル」において、その
筆者は、カバーグラスにタンパク質を被覆する前に、カ
バーグラスの縁部に少量のワックスを塗布することを示
唆している。この「プロトコル」に従って共培養体を作
製するためには、融合性のある単一層を得るための単一
培養操作の後に、少量のワックスのドット（ｄｏｔｓ）
で被覆した側にて第一の種類の細胞をカバーグラス上で
培養させる。少量のワックスのドットが被覆されたカバ
ーグラス側にて第一の種類の細胞を培養しなければなら
ないため、次のステップに必要な取り扱い中に幾つかの
カバーグラスに亀裂が生ずる可能性が依然としてある。
次に、第一の種類の細胞を有するカバーグラスをその元
の容器から取り外し、融合性のある第二の複数の細胞の
単一層がその底面に培養された第二の容器内に配置し
て、カバーグラスの第一の種類の細胞を有する側が第二
の容器内の第二の種類の細胞に対面するようにする。第
二の容器内にカバーグラスを配置するとき、ワックスの
ドットは、その表面上の第一の種類の細胞が付着したカ
バーグラスを、第二の種類の細胞に近接した状態にて支
持する。カバーグラスを使用するこの共培養の適用例に
おいて、ワックスのドットは、カバーグラスと容器の底
部とを分離させる。ワックスのドットは、カバーグラス
が容器の底部に付着するのを実質的に略防止することに
より、細胞同士を直接接触さずに共培養を進行させるこ
とを可能にすることに加えて、カバーグラスをピンセッ
トで容易に取り上げて且つ操作することを可能にする。
【０００７】カバーグラスにワックスのドットを付与す
ることは、カバーグラスと容器底面との間の分離を提供
するけれども、時間がかかり且つ微妙な技術である。更
に、ワックスのドットは、汚染源となる可能性があり、
また、取り扱い中に剥げ落ちる可能性もある。カバーグ
ラスを容器の底部よりも上方に保持するカバーグラス用
ホルダが利用可能であるならば、細胞の単一培養及び共
培養における実験室の作業効率及び効果が向上する。
ることは、カバーグラスと容器底面との間の分離を提供
するけれども、時間がかかり且つ微妙な技術である。更
に、ワックスのドットは、汚染源となる可能性があり、
また、取り扱い中に剥げ落ちる可能性もある。カバーグ
ラスを容器の底部よりも上方に保持するカバーグラス用
ホルダが利用可能であるならば、細胞の単一培養及び共
培養における実験室の作業効率及び効果が向上する。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、かかるホル
ダを提供するものであり、このホルダに関して以下に説
明する。
ダを提供するものであり、このホルダに関して以下に説
明する。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明によるホルダは、
容器の表面の上にカバーグラスを支持するためのホルダ
であって、少なくとも１つの突起を有すると共に前記ホ
ルダを操作すべく上方に突出する少なくとも１つのタブ
を有する上方部分と、前記カバーグラスを支持する面を
有し、少なくとも１つの凹所が形成された外周を有する
略平坦な環状体であり、前記ホルダに収納された前記カ
バーグラスの少なくとも一部分が支持されずに前記環状
体を越えて突出し、これにより操作のための前記カバー
グラスへのアクセスが可能となる下方部分と、この下方
部分と前記突起との間に形成されて前記カバーグラスを
受け入れる開口部とを具え、前記下方部分は、前記カバ
ーグラスが前記開口部に取り付けられて前記ホルダが容
器内に配された場合、当該下方部分の外側にて該下方部
分に収容された領域への流体連通を可能にする少なくと
も１つの通路をさらに有することを特徴とするものであ
る。
容器の表面の上にカバーグラスを支持するためのホルダ
であって、少なくとも１つの突起を有すると共に前記ホ
ルダを操作すべく上方に突出する少なくとも１つのタブ
を有する上方部分と、前記カバーグラスを支持する面を
有し、少なくとも１つの凹所が形成された外周を有する
略平坦な環状体であり、前記ホルダに収納された前記カ
バーグラスの少なくとも一部分が支持されずに前記環状
体を越えて突出し、これにより操作のための前記カバー
グラスへのアクセスが可能となる下方部分と、この下方
部分と前記突起との間に形成されて前記カバーグラスを
受け入れる開口部とを具え、前記下方部分は、前記カバ
ーグラスが前記開口部に取り付けられて前記ホルダが容
器内に配された場合、当該下方部分の外側にて該下方部
分に収容された領域への流体連通を可能にする少なくと
も１つの通路をさらに有することを特徴とするものであ
る。
【００１０】本発明のカバーグラス用ホルダは、容器の
面の上方にカバーグラスを支持し且つ容器の底部に対す
るカバーグラスの付着程度を実質的に小さくすることに
より、細胞培養の面としてカバーグラスを使用する実験
室の研究者等が、その労力の効率を高めることを可能に
する。また、該ホルダは、研究者等がカバーグラスを操
作することを容易にし、このカバーグラスの取り扱い
中、または、そのカバーグラスを一方の容器から別の容
器に移す間におけるカバーグラスの破損及び成長する細
胞の破壊を実質的に軽減することを可能にするものであ
る。更に、該ホルダは、脆いカバーグラスに対し、取り
扱いを容易にする支持体を付与する一方で、研究者等が
現行の方法及び装置の利用を変更せずに継続して使用す
ることを可能にするものである。本発明のカバーグラス
用ホルダは、標準的な顕微鏡による研究技術を実質的に
妨げられることなく使用することを可能にするものであ
り、また、該カバーグラス用ホルダは、その方法におけ
る任意のその後の段階を行うため、カバーグラスから容
易に取り外し可能である。
面の上方にカバーグラスを支持し且つ容器の底部に対す
るカバーグラスの付着程度を実質的に小さくすることに
より、細胞培養の面としてカバーグラスを使用する実験
室の研究者等が、その労力の効率を高めることを可能に
する。また、該ホルダは、研究者等がカバーグラスを操
作することを容易にし、このカバーグラスの取り扱い
中、または、そのカバーグラスを一方の容器から別の容
器に移す間におけるカバーグラスの破損及び成長する細
胞の破壊を実質的に軽減することを可能にするものであ
る。更に、該ホルダは、脆いカバーグラスに対し、取り
扱いを容易にする支持体を付与する一方で、研究者等が
現行の方法及び装置の利用を変更せずに継続して使用す
ることを可能にするものである。本発明のカバーグラス
用ホルダは、標準的な顕微鏡による研究技術を実質的に
妨げられることなく使用することを可能にするものであ
り、また、該カバーグラス用ホルダは、その方法におけ
る任意のその後の段階を行うため、カバーグラスから容
易に取り外し可能である。
【００１１】
【発明の実施の形態】本発明は、多数の異なる形態にて
具体化されるが、この開示は、本発明の原理を説明する
ものにしか過ぎず、本発明の範囲を図示した実施の形態
にのみ限定することを意図するものではないとの理解の
下、本発明の幾つかの実施の形態について以下に説明す
る。本発明の範囲は、特許請求の範囲、及びその均等物
により判断されるべきである。
具体化されるが、この開示は、本発明の原理を説明する
ものにしか過ぎず、本発明の範囲を図示した実施の形態
にのみ限定することを意図するものではないとの理解の
下、本発明の幾つかの実施の形態について以下に説明す
る。本発明の範囲は、特許請求の範囲、及びその均等物
により判断されるべきである。
【００１２】図１乃至図６を参照すると、本発明のカバ
ーグラス用ホルダ１０は、カバーグラス２０を支持する
面１４を有する下方部分１２を備えている。該ホルダ１
０は、少なくとも一つの突起２４を有する上方部分２２
を備えている。該ホルダ１０は、上方部分２２における
突起２４と、下方部分２２と、の中間に形成されてカバ
ーグラス２０を受け入れる開口部２８を備えている。
ーグラス用ホルダ１０は、カバーグラス２０を支持する
面１４を有する下方部分１２を備えている。該ホルダ１
０は、少なくとも一つの突起２４を有する上方部分２２
を備えている。該ホルダ１０は、上方部分２２における
突起２４と、下方部分２２と、の中間に形成されてカバ
ーグラス２０を受け入れる開口部２８を備えている。
【００１３】上方部分２２は、一対のピンセット３２、
または同様の実験室用取り扱い器具によるホルダの取り
扱いを容易にし得るように、上方に伸長する少なくとも
一つのタブ３０を備えることが好ましい。図２には、円
形のカバーグラス２０が開口部２８内に一部分が嵌まっ
たときのホルダ１０が図示されている。
または同様の実験室用取り扱い器具によるホルダの取り
扱いを容易にし得るように、上方に伸長する少なくとも
一つのタブ３０を備えることが好ましい。図２には、円
形のカバーグラス２０が開口部２８内に一部分が嵌まっ
たときのホルダ１０が図示されている。
【００１４】図３には、円形のカバーグラス２０が完全
に取り付けられて組立体３６を形成するホルダ１０が図
示されている。該ホルダの下方部分１２は、外周４０を
有する全体として環状体３８の形状をしていることが好
ましい。特別の適用例の場合、その他の下方部分１２の
形状も本発明の範囲に含まれると考えられる。ホルダ内
に取り付けるか、または、ホルダから取り外すとき、ピ
ンセットによるカバーグラス２０の取り扱いを容易にす
るため、該面１４は外周４０から開放した少なくとも一
つの凹所４２を有することが好ましい。好適な凹所４２
は、該面１４により支持されていないカバーグラス２０
の部分４４を提供する。このように、当該部分４４は、
下方部分を超えて突出し、ピンセット３２、またはその
他の実験室用の操作器具で操作すべく、カバーグラス２
０への直接的なアクセスを可能にする。図５に図示する
ような特別な用途において、少なくとも一つの凹所４２
は、通路、即ち開口部分４３を備えて、カバーグラス２
０をホルダ内に取り付け、また、組立体が容器内にある
とき、下方部分内に収容された領域４５への流体連通を
可能にすることができる。
に取り付けられて組立体３６を形成するホルダ１０が図
示されている。該ホルダの下方部分１２は、外周４０を
有する全体として環状体３８の形状をしていることが好
ましい。特別の適用例の場合、その他の下方部分１２の
形状も本発明の範囲に含まれると考えられる。ホルダ内
に取り付けるか、または、ホルダから取り外すとき、ピ
ンセットによるカバーグラス２０の取り扱いを容易にす
るため、該面１４は外周４０から開放した少なくとも一
つの凹所４２を有することが好ましい。好適な凹所４２
は、該面１４により支持されていないカバーグラス２０
の部分４４を提供する。このように、当該部分４４は、
下方部分を超えて突出し、ピンセット３２、またはその
他の実験室用の操作器具で操作すべく、カバーグラス２
０への直接的なアクセスを可能にする。図５に図示する
ような特別な用途において、少なくとも一つの凹所４２
は、通路、即ち開口部分４３を備えて、カバーグラス２
０をホルダ内に取り付け、また、組立体が容器内にある
とき、下方部分内に収容された領域４５への流体連通を
可能にすることができる。
【００１５】以下の説明を簡略化するため、カバーグラ
ス２０は、全体として円形の形状で示してある。当業者
は、このカバーグラスが正方形、矩形又はその他の形状
にても一般に利用可能であることが理解されよう。図４
には、正方形のカバーグラス４６がホルダ内に取り付け
られた状態で示してある。図４を参照すると、本発明の
ホルダは、略円形の形状のみならず、正方形及び矩形の
カバーグラスを保持するのにも適していることが明らか
である。このように、本発明の範囲は、図示した略円形
のカバーグラスのみならず、正方形、矩形、又はその他
の形状のカバーグラスをも含むものである。
ス２０は、全体として円形の形状で示してある。当業者
は、このカバーグラスが正方形、矩形又はその他の形状
にても一般に利用可能であることが理解されよう。図４
には、正方形のカバーグラス４６がホルダ内に取り付け
られた状態で示してある。図４を参照すると、本発明の
ホルダは、略円形の形状のみならず、正方形及び矩形の
カバーグラスを保持するのにも適していることが明らか
である。このように、本発明の範囲は、図示した略円形
のカバーグラスのみならず、正方形、矩形、又はその他
の形状のカバーグラスをも含むものである。
【００１６】カバーグラスは、一般に、ガラス製であ
り、約０．０９ｍｍ乃至０．３２ｍｍの厚さのものが市
販されている。カバーグラスは、一般に、直径約１２ｍ
ｍ、１８ｍｍ、２２ｍｍ、２５ｍｍの円形、辺が１８ｍ
ｍ、２２ｍｍ、２８ｍｍの正方形、及び辺寸法が１１ｍ
ｍ×２２ｍｍ乃至４８ｍｍ×６０ｍｍの矩形として製造
されている。その他の寸法も本発明の範囲に属する。図
６に図示した好適な組立体３６の断面図には、開口部２
８及びタブ３０が図示されている。該開口部２８は、締
まり嵌め状態にてカバーグラスの厚さを受け入れ得る寸
法「ａ」とし、カバーグラスがホルダ内に解放可能に保
持されるようにすることが好ましい。開口部２８の幅方
向の寸法「ｂ」は、カバーグラスをホルダに容易に取り
付け且つ取り外し得るように隙間を伴ってカバーグラス
の幅寸法を受け入れ得るような寸法にすることが好まし
い。カバーグラス２０がホルダ内で解放可能に保持され
るようにカバーグラス２０は、ホルダ１０と適合した寸
法とすることが好ましい。
り、約０．０９ｍｍ乃至０．３２ｍｍの厚さのものが市
販されている。カバーグラスは、一般に、直径約１２ｍ
ｍ、１８ｍｍ、２２ｍｍ、２５ｍｍの円形、辺が１８ｍ
ｍ、２２ｍｍ、２８ｍｍの正方形、及び辺寸法が１１ｍ
ｍ×２２ｍｍ乃至４８ｍｍ×６０ｍｍの矩形として製造
されている。その他の寸法も本発明の範囲に属する。図
６に図示した好適な組立体３６の断面図には、開口部２
８及びタブ３０が図示されている。該開口部２８は、締
まり嵌め状態にてカバーグラスの厚さを受け入れ得る寸
法「ａ」とし、カバーグラスがホルダ内に解放可能に保
持されるようにすることが好ましい。開口部２８の幅方
向の寸法「ｂ」は、カバーグラスをホルダに容易に取り
付け且つ取り外し得るように隙間を伴ってカバーグラス
の幅寸法を受け入れ得るような寸法にすることが好まし
い。カバーグラス２０がホルダ内で解放可能に保持され
るようにカバーグラス２０は、ホルダ１０と適合した寸
法とすることが好ましい。
【００１７】更に、市販の寸法のカバーグラスの幾つか
のものは、例えば、１８ｍｍの直径のものと２２ｍｍの
直径のものとを識別することが容易でないから、特定寸
法のカバーグラスを受け入れるのに適したホルダを識別
するためにカラーコード法を採用することが好ましい。
このカラーコード法の一例として、赤が１２ｍｍのカバ
ーグラス用のホルダを表示し、青が１８ｍｍのカバーグ
ラス用のホルダ、黄色が２２ｍｍのカバーグラス用のホ
ルダ、緑が２５ｍｍのカバーグラス用ホルダを表示する
ようにすることが考えられる。該ホルダについて多数の
色、または識別法が採用可能であり、これらは全て本発
明の範囲に属するものとみなす。
のものは、例えば、１８ｍｍの直径のものと２２ｍｍの
直径のものとを識別することが容易でないから、特定寸
法のカバーグラスを受け入れるのに適したホルダを識別
するためにカラーコード法を採用することが好ましい。
このカラーコード法の一例として、赤が１２ｍｍのカバ
ーグラス用のホルダを表示し、青が１８ｍｍのカバーグ
ラス用のホルダ、黄色が２２ｍｍのカバーグラス用のホ
ルダ、緑が２５ｍｍのカバーグラス用ホルダを表示する
ようにすることが考えられる。該ホルダについて多数の
色、または識別法が採用可能であり、これらは全て本発
明の範囲に属するものとみなす。
【００１８】本発明のホルダは、そのホルダ及びカバー
グラス組立体を収容する容器に水性培養基及び細胞懸濁
液を加えたときにそのホルダ及びカバーグラス組立体の
浮力を実質的に少なくするために、１より大きい密度を
有する熱可塑性材料で製造されたものであることが好ま
しい。適当な熱可塑性材料としては、材料の密度を増す
べく充填材を配合したポリカーボネート、ポリエチレ
ン、ポリプロピレン、ポリスチレン等があるが、これら
にのみ限定されるものではない。これらの充填材は、材
料にカラーコードを付与するために使用することができ
る。使用される充填材、または着色剤は、水性培養基が
浸出せず、また、細胞に対して有毒でないものであるこ
とが好ましい。
グラス組立体を収容する容器に水性培養基及び細胞懸濁
液を加えたときにそのホルダ及びカバーグラス組立体の
浮力を実質的に少なくするために、１より大きい密度を
有する熱可塑性材料で製造されたものであることが好ま
しい。適当な熱可塑性材料としては、材料の密度を増す
べく充填材を配合したポリカーボネート、ポリエチレ
ン、ポリプロピレン、ポリスチレン等があるが、これら
にのみ限定されるものではない。これらの充填材は、材
料にカラーコードを付与するために使用することができ
る。使用される充填材、または着色剤は、水性培養基が
浸出せず、また、細胞に対して有毒でないものであるこ
とが好ましい。
【００１９】ホルダ１０、及び適合可能な寸法のカバー
グラス２０を含む本発明の組立体３６は、パッケージ型
ユニット５０として供給されることが好ましい。一つの
ユニットとして供給されるとき、該組立体３６は、微生
物の透過に実質的に耐性があり且つパッケージ内に存在
する全ての微生物を死滅させる状態に露呈される材料で
形成された、図３に図示するパッケージ５２内に密封す
ることが好ましい。適当なパッケージ材料は、紙、不織
布、ポリマーシート、ポリマーフィルム、及びその組み
合わせを含むが、これらにのみ限定されるものではな
い。全ての微生物を死滅させる適当な状態は、酸化エチ
レン等のような気体状の滅菌材、ガンマ線及び電子線の
ような電離放射線に露呈させることを含むが、これらに
のみ限定されるものではない。好適なパッケージ型組立
体は、この露呈後、パッケージを開ける迄、滅菌状態で
あるとみなされる。
グラス２０を含む本発明の組立体３６は、パッケージ型
ユニット５０として供給されることが好ましい。一つの
ユニットとして供給されるとき、該組立体３６は、微生
物の透過に実質的に耐性があり且つパッケージ内に存在
する全ての微生物を死滅させる状態に露呈される材料で
形成された、図３に図示するパッケージ５２内に密封す
ることが好ましい。適当なパッケージ材料は、紙、不織
布、ポリマーシート、ポリマーフィルム、及びその組み
合わせを含むが、これらにのみ限定されるものではな
い。全ての微生物を死滅させる適当な状態は、酸化エチ
レン等のような気体状の滅菌材、ガンマ線及び電子線の
ような電離放射線に露呈させることを含むが、これらに
のみ限定されるものではない。好適なパッケージ型組立
体は、この露呈後、パッケージを開ける迄、滅菌状態で
あるとみなされる。
【００２０】多くの細胞は、タンパク質で被覆した清浄
なガラス表面上に融合性のある単一層を形成する。従来
技術のところで記載した細胞の単一培養を形成するため
には、清浄にしたガラス製カバーグラスは、多くの場
合、ポリリジンとされるタンパク質で被覆され、乾燥さ
せて、実験室用培養容器内に配置される。この培養容器
は、平坦な底部と、直線状の側壁とを有する平坦で且つ
円形の開放した、一般にペトリ皿と呼ばれる皿とされる
ことが多い。次に、適当な略水性の培養基に懸濁させた
細胞の懸濁液を皿に入れる。次に、カバーグラス上に融
合性のある細胞層が形成される迄、この懸濁液を有する
皿を培養する。次に、一般に、ピンセットを使用して、
カバーグラスを容器から取り出し、多くの場合、顕微鏡
による分析である、所望の分析を行う。カバーグラス及
び容器の底面は、共に、略平坦であるため、カバーグラ
スと底面との間の水性培養基の表面張力の作用の結果、
融合性のある細胞層を有するカバーグラスを表面から持
ち上げることが極めて難しいことが多い。融合性のある
細胞層は破壊され、または、ピンセットで操作中に破れ
たカバーグラスは、その後の研究のためにその培養体を
使用することを略不可能にする。
なガラス表面上に融合性のある単一層を形成する。従来
技術のところで記載した細胞の単一培養を形成するため
には、清浄にしたガラス製カバーグラスは、多くの場
合、ポリリジンとされるタンパク質で被覆され、乾燥さ
せて、実験室用培養容器内に配置される。この培養容器
は、平坦な底部と、直線状の側壁とを有する平坦で且つ
円形の開放した、一般にペトリ皿と呼ばれる皿とされる
ことが多い。次に、適当な略水性の培養基に懸濁させた
細胞の懸濁液を皿に入れる。次に、カバーグラス上に融
合性のある細胞層が形成される迄、この懸濁液を有する
皿を培養する。次に、一般に、ピンセットを使用して、
カバーグラスを容器から取り出し、多くの場合、顕微鏡
による分析である、所望の分析を行う。カバーグラス及
び容器の底面は、共に、略平坦であるため、カバーグラ
スと底面との間の水性培養基の表面張力の作用の結果、
融合性のある細胞層を有するカバーグラスを表面から持
ち上げることが極めて難しいことが多い。融合性のある
細胞層は破壊され、または、ピンセットで操作中に破れ
たカバーグラスは、その後の研究のためにその培養体を
使用することを略不可能にする。
【００２１】本発明の好適な組立体３６を使用して、同
様の細胞の単一培養を行うためには、好適なホルダ１０
は、実験用容器の底部の上方で且つ該底部に対して略平
行にカバーグラス２０を支持する。図７を参照すると、
上述の方法と同様の方法にて、組立体３６を多数ウェル
プレート６４のウェル６２の底面６０に載せ、培養基に
懸濁させた細胞を加える。実験室の研究者等がピンセッ
トでカバーグラスを操作する必要があれば、ピンセット
を好適なタブ３０に当てがい、カバーグラスを有するホ
ルダを容器から持ち上げる。ホルダ１０は、カバーグラ
ス２０を底面６０の上方の位置（図６において、距離
「ｃ」の位置）に支持し、カバーグラス２０と容器の底
面との間の付着の程度を小さくする。これは、ホルダ１
０がカバーグラス２０を底面よりも上方で且つ該底面と
略平行に支持するからである。このように、ホルダ１０
は、分析のため、ホルダ内のカバーグラスを容易に取り
外すことを可能にする。図８には、ペトリ皿７０におけ
る組立体３６の二つの例が示してある。
様の細胞の単一培養を行うためには、好適なホルダ１０
は、実験用容器の底部の上方で且つ該底部に対して略平
行にカバーグラス２０を支持する。図７を参照すると、
上述の方法と同様の方法にて、組立体３６を多数ウェル
プレート６４のウェル６２の底面６０に載せ、培養基に
懸濁させた細胞を加える。実験室の研究者等がピンセッ
トでカバーグラスを操作する必要があれば、ピンセット
を好適なタブ３０に当てがい、カバーグラスを有するホ
ルダを容器から持ち上げる。ホルダ１０は、カバーグラ
ス２０を底面６０の上方の位置（図６において、距離
「ｃ」の位置）に支持し、カバーグラス２０と容器の底
面との間の付着の程度を小さくする。これは、ホルダ１
０がカバーグラス２０を底面よりも上方で且つ該底面と
略平行に支持するからである。このように、ホルダ１０
は、分析のため、ホルダ内のカバーグラスを容易に取り
外すことを可能にする。図８には、ペトリ皿７０におけ
る組立体３６の二つの例が示してある。
【００２２】図９及び図１０には、本発明の一つの代替
的な実施の形態が示してある。この実施の形態におい
て、ホルダの構造体は、図１乃至図６のホルダと略同様
である。従って、略同様の機能を果たす略同様の構成要
素は、図９及び図１０の構成要素を示す符号の「１００
番」の台の数字である点を除いて、図１乃至図６の実施
の形態と同様の参照符号で示してある。該ホルダ１１０
は、カバーグラスを支持する面１１４を有する下方部分
１１２を備えている。ホルダ１１０は、少なくとも三つ
の突起１２４を有する上方部分１２２を備えている。ホ
ルダ１１０は、上方部分１２２の突起１２４と下方部分
１１２との中間に形成され、カバーグラスを受け入れる
少なくとも三つの開口部１２８を備えている。この実施
の形態において、下方部分１２２は、開放部分１４３が
外周１４０の約１／２乃至１／３の範囲を占める状態に
て、外周部分１４０を有する略環状体の形状をしてい
る。この開放部分１４３は、ホルダの面１１４の上のカ
バーグラスの接触面の殆どを擦らずに、カバーグラスを
取り付け且つホルダ１１０から取り外すことを可能にす
る。更に、図１０に図示するように、ホルダ１１０は、
図１乃至図６の実施の形態に示した、取り扱うための上
方に突起するタブを備えていない。更に、ホルダ１１０
は、突起１２４に着座することにより、第一の側部及び
第二の側部を有するカバーグラスを、該第一の側部が容
器の底部を向いた第一の位置にあり、また、該第二の側
部が容器の底部を向いた第二の位置にあるように支持す
る。このため、該ホルダは、同時培養の用途に使用する
のに適したものになる。また、ホルダ１１０にカバーグ
ラスを取り付けて、容器の底部に配置すれば、該ホルダ
１１０は、開放部分１４３を貫通する下方部分１２２に
より包み込まれた領域の内外にて流体の自由な交換を可
能にする。
的な実施の形態が示してある。この実施の形態におい
て、ホルダの構造体は、図１乃至図６のホルダと略同様
である。従って、略同様の機能を果たす略同様の構成要
素は、図９及び図１０の構成要素を示す符号の「１００
番」の台の数字である点を除いて、図１乃至図６の実施
の形態と同様の参照符号で示してある。該ホルダ１１０
は、カバーグラスを支持する面１１４を有する下方部分
１１２を備えている。ホルダ１１０は、少なくとも三つ
の突起１２４を有する上方部分１２２を備えている。ホ
ルダ１１０は、上方部分１２２の突起１２４と下方部分
１１２との中間に形成され、カバーグラスを受け入れる
少なくとも三つの開口部１２８を備えている。この実施
の形態において、下方部分１２２は、開放部分１４３が
外周１４０の約１／２乃至１／３の範囲を占める状態に
て、外周部分１４０を有する略環状体の形状をしてい
る。この開放部分１４３は、ホルダの面１１４の上のカ
バーグラスの接触面の殆どを擦らずに、カバーグラスを
取り付け且つホルダ１１０から取り外すことを可能にす
る。更に、図１０に図示するように、ホルダ１１０は、
図１乃至図６の実施の形態に示した、取り扱うための上
方に突起するタブを備えていない。更に、ホルダ１１０
は、突起１２４に着座することにより、第一の側部及び
第二の側部を有するカバーグラスを、該第一の側部が容
器の底部を向いた第一の位置にあり、また、該第二の側
部が容器の底部を向いた第二の位置にあるように支持す
る。このため、該ホルダは、同時培養の用途に使用する
のに適したものになる。また、ホルダ１１０にカバーグ
ラスを取り付けて、容器の底部に配置すれば、該ホルダ
１１０は、開放部分１４３を貫通する下方部分１２２に
より包み込まれた領域の内外にて流体の自由な交換を可
能にする。
【００２３】従来技術の欄に記載した、ＭＩＴプレス
（１９９１年）によって出版されたバンカー及びゴスリ
ンによる神経細胞の培養に記述された共培養の方法の例
にて引用されたプロトコルによれば、カバーグラス及び
培養容器を使用して、神経膠細胞の存在下、海馬神経培
養体を作製する方法が得られる。この引用されたプロト
コルでは、カバーグラスを容器の面の上方に支持すべ
く、ワックスのビーズをカバーグラスに付与する方法が
記載されている。本発明のホルダ１１０内でカバーグラ
スを使用して同様の共培養を行うためには、上記のプロ
トコルにおけると同様に、カバーグラスをホルダ内に取
り付け、ポリリジンで被覆する。ホルダ１１０を使用す
ることにより、操作者がカバーグラスにワックスのビー
ズを付与することが不要となる。神経膠細胞の存在下に
て、神経を共培養するとき、実験室の研究者等は、培養
容器の底面に融合性のある神経膠細胞の層を作製する。
これらの神経は、単一培養について上述した方法と同様
の方法にて、ホルダ１１０内に取り付けられたカバーグ
ラスの第一の面（上向き面）上で別の容器内で同時に培
養される。単一培養について上述したように、カバーグ
ラスの第一の表面上で神経細胞を成長させる間に、ホル
ダ１１０はカバーグラスが神経細胞の入った容器に付着
するのを略防止する。次に、第一の面に神経細胞を有す
るカバーグラスをその底面に神経膠細胞がある容器に運
んで、神経で被覆された第一の面が、突起により支持さ
れた容器の底面にある、融合性のある神経膠細胞の層の
方を向くように配置する。次に、適当な培養基を加え
て、その方法の共培養期間に亙って保温する。ホルダ１
１０は、突起上に着座することにより、カバーグラス上
の神経と容器の底部にある神経膠細胞とが直接、接触す
るのを略防止して、神経で被覆したカバーグラスを神経
膠細胞に近接するが、容器の底面の上方で且つ該底面に
対して略平行に位置に支持する。このようにして、本発
明のホルダ１１０を使用すれば、実験室の研究者等は、
細胞培養の操作及び細胞の分析技術に集中することがで
きる。実験室の研究者等は、ワックスの液滴をカバーグ
ラスに付与するために時間を費やす必要がなく、実際の
共培養細胞を得るのに必要な時間を著しく短くし、ま
た、実験効率を高めることが可能となる。ホルダ１１０
によれば、更に分析するため、カバーグラスの第一の面
及び第二の面の何れかにおける細胞を略破壊させること
なく、このホルダからカバーグラスを取り外すことが可
能となる。
（１９９１年）によって出版されたバンカー及びゴスリ
ンによる神経細胞の培養に記述された共培養の方法の例
にて引用されたプロトコルによれば、カバーグラス及び
培養容器を使用して、神経膠細胞の存在下、海馬神経培
養体を作製する方法が得られる。この引用されたプロト
コルでは、カバーグラスを容器の面の上方に支持すべ
く、ワックスのビーズをカバーグラスに付与する方法が
記載されている。本発明のホルダ１１０内でカバーグラ
スを使用して同様の共培養を行うためには、上記のプロ
トコルにおけると同様に、カバーグラスをホルダ内に取
り付け、ポリリジンで被覆する。ホルダ１１０を使用す
ることにより、操作者がカバーグラスにワックスのビー
ズを付与することが不要となる。神経膠細胞の存在下に
て、神経を共培養するとき、実験室の研究者等は、培養
容器の底面に融合性のある神経膠細胞の層を作製する。
これらの神経は、単一培養について上述した方法と同様
の方法にて、ホルダ１１０内に取り付けられたカバーグ
ラスの第一の面（上向き面）上で別の容器内で同時に培
養される。単一培養について上述したように、カバーグ
ラスの第一の表面上で神経細胞を成長させる間に、ホル
ダ１１０はカバーグラスが神経細胞の入った容器に付着
するのを略防止する。次に、第一の面に神経細胞を有す
るカバーグラスをその底面に神経膠細胞がある容器に運
んで、神経で被覆された第一の面が、突起により支持さ
れた容器の底面にある、融合性のある神経膠細胞の層の
方を向くように配置する。次に、適当な培養基を加え
て、その方法の共培養期間に亙って保温する。ホルダ１
１０は、突起上に着座することにより、カバーグラス上
の神経と容器の底部にある神経膠細胞とが直接、接触す
るのを略防止して、神経で被覆したカバーグラスを神経
膠細胞に近接するが、容器の底面の上方で且つ該底面に
対して略平行に位置に支持する。このようにして、本発
明のホルダ１１０を使用すれば、実験室の研究者等は、
細胞培養の操作及び細胞の分析技術に集中することがで
きる。実験室の研究者等は、ワックスの液滴をカバーグ
ラスに付与するために時間を費やす必要がなく、実際の
共培養細胞を得るのに必要な時間を著しく短くし、ま
た、実験効率を高めることが可能となる。ホルダ１１０
によれば、更に分析するため、カバーグラスの第一の面
及び第二の面の何れかにおける細胞を略破壊させること
なく、このホルダからカバーグラスを取り外すことが可
能となる。
【００２４】本発明のカバーグラス用ホルダは、細胞を
培養する面としてカバーグラスを使用する実験室の研究
者等がカバーグラスを容器の面よりも上方に支持し、カ
バーグラスが容器の底部に接着する程度を略軽減するこ
とにより、その作業効率を高めることを可能にするもの
である。このホルダは、単一培養及び共培養の用途の双
方に有用である。本発明は、脆いカバーグラスに対して
その取り扱いを容易にすべく支持体を提供する一方で、
研究者等が現行の方法及び装置を略変更せずに利用し続
けることを可能にするものである。本発明のカバーグラ
ス用ホルダは、顕微鏡による観察のような標準的な顕微
鏡技術及びミクロ注入のような操作を略妨害されずに実
施することを可能にするものである。このホルダは、カ
バーグラスの面における細胞の成長を著しく妨害せず
に、ある方法におけるその後の任意のステップのためカ
バーグラスから容易に取り外し可能である。
培養する面としてカバーグラスを使用する実験室の研究
者等がカバーグラスを容器の面よりも上方に支持し、カ
バーグラスが容器の底部に接着する程度を略軽減するこ
とにより、その作業効率を高めることを可能にするもの
である。このホルダは、単一培養及び共培養の用途の双
方に有用である。本発明は、脆いカバーグラスに対して
その取り扱いを容易にすべく支持体を提供する一方で、
研究者等が現行の方法及び装置を略変更せずに利用し続
けることを可能にするものである。本発明のカバーグラ
ス用ホルダは、顕微鏡による観察のような標準的な顕微
鏡技術及びミクロ注入のような操作を略妨害されずに実
施することを可能にするものである。このホルダは、カ
バーグラスの面における細胞の成長を著しく妨害せず
に、ある方法におけるその後の任意のステップのためカ
バーグラスから容易に取り外し可能である。
【図１】本発明のカバーグラス用ホルダの斜視図であ
る。
る。
【図２】その内部の一部に円形のカバーグラスが取り付
けられた、図１のホルダの斜視図である。
けられた、図１のホルダの斜視図である。
【図３】その内部にカバーグラスが取り付けられた、図
１及び図２のホルダの斜視図である。
１及び図２のホルダの斜視図である。
【図４】その内部に正方形のカバーグラスが取り付けら
れた、図３と同様の図１の本発明のホルダの斜視図であ
る。
れた、図３と同様の図１の本発明のホルダの斜視図であ
る。
【図５】図１の本発明のホルダを示す平面図である。
【図６】図３の略線６−６に沿った本発明のホルダの断
面図である。
面図である。
【図７】図３に示した本発明のホルダ内にカバーグラス
が配置された状態を示す、多数ウェルプレートのウェル
の斜視図である。
が配置された状態を示す、多数ウェルプレートのウェル
の斜視図である。
【図８】図３に示した本発明のホルダ内に二つのカバー
グラスが配置された状態を示す、ペトリ皿の斜視図であ
る。
グラスが配置された状態を示す、ペトリ皿の斜視図であ
る。
【図９】図１の本発明の代替的な実施の形態の図５と同
様の平面図である。
様の平面図である。
【図１０】図９の実施の形態によるホルダの開放側部か
ら見たときの側面図である。
ら見たときの側面図である。
１０ カバーグラス用ホルダ １２ カバーグラス
ホルダの下方部分 １４ カバーグラスの支持面 ２０ カバーグラス ２２ カバーグラスホルダの上方部分 ２４ 突起 ２８ 開口部 ３０ タブ ３２ ピンセット ３６ カバーグラスホルダ組立体 ３８ 環状体 ４０ 環状体の外周 ４２ 環状体の凹所 ４３ 開口部分 ４４ カバーグラス
の部分 ４５ 領域 ４６ 正方形のカバ
ーグラス ５０ パッケージ型ユニット ５２ パッケージ ６０ ウェルの底面 ６２ ウェル ６４ ウェルプレート ７０ ペトリ皿
ホルダの下方部分 １４ カバーグラスの支持面 ２０ カバーグラス ２２ カバーグラスホルダの上方部分 ２４ 突起 ２８ 開口部 ３０ タブ ３２ ピンセット ３６ カバーグラスホルダ組立体 ３８ 環状体 ４０ 環状体の外周 ４２ 環状体の凹所 ４３ 開口部分 ４４ カバーグラス
の部分 ４５ 領域 ４６ 正方形のカバ
ーグラス ５０ パッケージ型ユニット ５２ パッケージ ６０ ウェルの底面 ６２ ウェル ６４ ウェルプレート ７０ ペトリ皿
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (73)特許権者 595117091 １ ＢＥＣＴＯＮ ＤＲＩＶＥ， ＦＲ ＡＮＫＬＩＮ ＬＡＫＥＳ， ＮＥＷ ＪＥＲＳＥＹ 07417−1880， ＵＮＩ ＴＥＤ ＳＴＡＴＥＳ ＯＦ ＡＭＥＲ ＩＣＡ (56)参考文献 特開 昭63−267266（ＪＰ，Ａ) 特開 平６−189741（ＪＰ，Ａ) 特開 平６−343453（ＪＰ，Ａ) 実開 平７−36119（ＪＰ，Ｕ) 実開 昭62−43318（ＪＰ，Ｕ) 米国特許5190878（ＵＳ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) G02B 21/00 - 21/36 C12M 1/00 - 3/04
Claims (6)
- 【請求項１】 容器の面の上にカバーグラスを支持する
ためのホルダであって、 少なくとも１つの突起を有すると共に前記ホルダを操作
すべく上方に突出する少なくとも１つのタブを有する上
方部分と、 前記カバーグラスを支持する面を有し、少なくとも１つ
の凹所が形成された外周を有する略平坦な環状体であ
り、前記ホルダに収納された前記カバーグラスの少なく
とも一部分が支持されずに前記環状体を越えて突出し、
これにより操作のための前記カバーグラスへのアクセス
が可能となる下方部分と、 この下方部分と前記突起との間に形成されて前記カバー
グラスを受け入れる開口部とを具え、前記下方部分は、
前記カバーグラスが前記開口部に取り付けられて前記ホ
ルダが容器内に配された場合、当該下方部分の外側にて
該下方部分に収容された領域への流体連通を可能にする
少なくとも１つの通路をさらに有することを特徴とする
ホルダ。 - 【請求項２】 前記通路は、前記下方部分に形成された
開放部分を具えたことを特徴とする請求項１に記載のホ
ルダ。 - 【請求項３】 前記開放部分は、前記下方部分の略１／
２以下の部分を占めると共に前記上方部分は、少なくと
も３つの突起をさらに有し、前記ホルダは、第一の側部
と第二の側部とを有する前記カバーグラスを、前記第一
の側部が前記容器の底部を向く第一の位置と前記第二の
側部が前記容器の前記底部を向く第二の位置とに支持す
るようにしたことを特徴とする請求項２に記載のホル
ダ。 - 【請求項４】 前記開口部は、予め選択した厚みの前記
カバーグラスを締まり嵌めにて受け入れるような寸法と
され、これによって前記カバーグラスを前記ホルダ内に
解放可能に保持し得ることを特徴とする請求項1に記載
のホルダ。 - 【請求項５】 前記開口部に嵌まるべき予め選択した大
きさの前記カバーグラスを識別する手段をさらに具えた
ことを特徴とする請求項４に記載のホルダ。 - 【請求項６】 識別のための前記手段は、それぞれ予め
選択したカバーグラスの大きさに対する指定色を有する
カラーコード法を具えたことを特徴とする請 求項５に記
載のホルダ。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US521485 | 1983-08-08 | ||
| US08/521,485 US5635396A (en) | 1995-08-30 | 1995-08-30 | Coverslip holder |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09127428A JPH09127428A (ja) | 1997-05-16 |
| JP3025443B2 true JP3025443B2 (ja) | 2000-03-27 |
Family
ID=24076914
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8230530A Expired - Fee Related JP3025443B2 (ja) | 1995-08-30 | 1996-08-30 | カバーグラス用ホルダ |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5635396A (ja) |
| EP (1) | EP0773286B1 (ja) |
| JP (1) | JP3025443B2 (ja) |
| CA (1) | CA2184340C (ja) |
| DE (1) | DE69625159T2 (ja) |
| ES (1) | ES2188727T3 (ja) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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