JP2967956B2

JP2967956B2 - ペプチドまたはその塩

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Publication number: JP2967956B2
Application number: JP3246613A
Authority: JP
Inventors: 立雄須田; 悦子阿部; 正夫谷原; 千絵藤原
Original assignee: KURARE KK
Current assignee: KURARE KK
Priority date: 1990-09-03
Filing date: 1991-08-30
Publication date: 1999-10-25
Anticipated expiration: 2014-10-25
Also published as: JPH059199A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はヒトインタ−ロイキン−
１結合能を有するペプチドまたはその塩に関する。本発
明により提供されるペプチドまたはその塩は、ヒトイン
タ−ロイキン−１（以下、これをヒトＩＬ−１と略称す
る）と結合することによりヒトＩＬ−１の活性発現を阻
害することからリウマチ、骨粗鬆症などのＩＬ−１が関
与する疾患の治療に有用である。

【０００２】

【従来の技術】ＩＬ−１は免疫応答の重要な因子である
とともに、各種の炎症性疾患において重要な役割を果た
している。歯周囲炎の際の歯槽骨破壊、骨粗鬆症におけ
る骨の吸収、リウマチ性関節炎における軟骨の破壊にお
いてＩＬ−１が関与することが示唆されている（インタ
−ロイキン１、蛋白質核酸酵素、３３巻第１０
号、１７２８−１７４１頁、１９８８年参照）。また、
モノサイトの培養上清中に見出だされるＩＬ−１阻害活
性物質が分子量約１７，０００の、ＩＬ−１受容体のア
ンタゴニストであり、種々のＩＬ−１の生理活性を阻害
することが報告されている〔W.P.Arend ら、ジャ−ナル
・オブ・クリニカル・インヴェスティゲ−ション(J.Cli
n.Invest.)、８５巻、１６９４−１６９７頁、（１９９
０年）参照〕。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】上記のアンタゴニスト
は、分子量が大きいこと、細胞上のＩＬ−１受容体と結
合することから、肝臓および腎臓に対する毒性、非特異
的な免疫抑制などの種々の副作用が発現する可能性があ
る。しかるに、本発明の目的は、ＩＬ−１受容体と結合
することなく、ＩＬ−１阻害活性を有するペプチドを提
供することにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明によれば、上記の
目的は、下記の一般式（Ｉ）Ｈ−Ｘ ¹−Cys−Ａ−Ｂ−Ａ−Ｂ−Ａ−Ser−Ｘ ²−Ｙ（Ｉ）（式中、ＡはVal、Leu、IleおよびNleよりなる群から選
ばれるアミノ酸残基を表し、ＢはArg、Lys、Gln、Hisお
よびSerよりなる群から選ばれるアミノ酸残基を表し、
Ｘ ¹およびＸ ²はそれぞれ単結合またはGly、Ala、Val、A
rg、Asn、Ser、Phe、Pro、Leu、Glu、Asp、Lys、Thr、H
is、Tyr、NleおよびIleよりなる群から選ばれる１〜１
０個のアミノ酸残基よりなるペプチド断片を表し、Ｙは
水酸基またはアミノ基を表す）で示され、かつヒトイン
ターロイキン−１結合能を有するペプチドまたはその
塩、より好ましくは下記の一般式（ＩＩ）Ｈ−Ｘ ³−Ｄ−Ｘ ⁴−Ｙ（ＩＩ）（式中、Ｄは式（１）：Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser
（配列番号：１）で示されるペプチド断片、式（２）：
Cys Leu Gln Ile Lys Ile Ser（配列番号：２）で示さ
れるペプチド断片または式（３）：Cys Leu Gln Ile Gl
n Ile Ser（配列番号：３）で示されるペプチド断片を
表し、Ｘ ³およびＸ ⁴はそれぞれ単結合またはGly、Ala、
Val、Arg、Asn、Ser、Phe、Pro、Leu、Glu、Asp、Lys、
Thr、His、TyrおよびIleよりなる群から選ばれる１〜１
０個のアミノ酸残基からなるペプチド断片を表し、Ｙは
水酸基またはアミノ基を表す）で示されるペプチドまた
はその塩を提供することによって達成される。

【０００５】本明細書においては各種アミノ酸残基を次
の略号で記述する。 Ala ：Ｌ−アラニン残基 Arg ：Ｌ−アルギニン残基 Asn ：Ｌ−アスパラギン残基 Asp ：Ｌ−アスパラギン酸残基 Cys ：Ｌ−システイン残基 Gln ：Ｌ−グルタミン残基 Glu ：Ｌ−グルタミン酸残基 Gly ：グリシン残基 His ：Ｌ−ヒスチジン残基 Ile ：Ｌ−イソロイシン残基 Leu ：Ｌ−ロイシン残基 Lys ：Ｌ−リシン残基 Phe ：Ｌ−フェニルアラニン残基 Pro ：Ｌ−プロリン残基 Ser ：Ｌ−セリン残基 Thr ：Ｌ−トレオニン残基 Trp ：Ｌ−トリプトファン残基 Tyr ：Ｌ−チロシン残基 Val ：Ｌ−バリン残基 Nle ：Ｌ−ノルロイシン残基また、本明細書においては、常法に従ってペプチドのア
ミノ酸配列を、そのＮ末端のアミノ酸残基が左側に位置
し、Ｃ末端のアミノ酸残基が右側に位置するように記述
する。

【０００６】本発明により提供されるペプチドの代表例
を次に示す。（ａ）：Val Val Arg Asn Ser Ser Tyr Cys Leu Arg Il
e Lys Ile Ser Ala Lys（配列番号：４）、（ｂ）：Lys Asn Ser Ser Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Il
e Ser Ala Lys Phe ValGlu（配列番号：５）、（ｃ）：Lys Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser Ala Ly
s Phe Val Glu Asn GluPro（配列番号：６）、（ｄ）：Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser Ala Lys
（配列番号：７）、（ｅ）：Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser（配列番
号：８）、（ｆ）：Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser（配列番号：
１）、（ｇ）：Lys Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser（配列番
号：９）、（ｈ）：Cys Leu Gln Ile Lys Ile Ser（配列番号：
２）、（ｉ）：Lys Cys Leu Gln Ile Gln Ile Ser（配列番
号：１０）、（ｊ）：Lys Ile Cys Ile Arg Ile Gln Ile Ser（配列
番号：１１）、（ｋ）：Lys Xaa Cys Xaa Arg Xaa Gln Xaa Ser（配列
番号：１２）（ただし、Xaa はいずれもNleを表す）、（ｌ）：Lys Ile Cys Ile His Ile Gln Ile Ser（配列
番号：１３）、（ｍ）：Lys Ile Cys Leu Arg Ile Gln Ile Ser（配列
番号：１４）、（ｎ）：Lys Cys Val Gln Val Gln Val Ser（配列番
号：１５）および（ｏ）：Lys Ile Cys Ile Arg Ile Gln Ile Xaa（配列
番号：１６）（ただし、XaaはSerの−ＣＯＯＨ基を−Ｃ
ＯＮＨ ₂基で置換したものを表す）。

【０００７】本発明のペプチドの塩は生理学的に許容さ
れる塩であり、その塩としては、例えば、塩酸、硫酸、
燐酸、乳酸、酒石酸、マレイン酸、フマ−ル酸、シュウ
酸、リンゴ酸、クエン酸、オレイン酸、パルミチン酸な
どの酸との塩；ナトリウム、カリウム、カルシウム、ア
ルミニウムなどのアルカリ金属またはアルカリ土類金属
の水酸化物または炭酸塩との塩；トリエチルアミン、ベ
ンジルアミン、ジエタノ−ルアミン、ｔ−ブチルアミ
ン、ジシクロヘキシルアミン、アルギニンなどとの塩な
どが挙げられる。

【０００８】本発明のペプチドは、ペプチドの合成にお
いて通常用いられる方法、例えば固相合成法または液相
合成法によって調製されるが、固相合成法が操作上簡便
である〔例えば、日本生化学会編「続生化学実験講座２
タンパク質の化学（下）」（昭和６２年５月２０日
株式会社東京化学同人発行）、第６４１−６９４頁参
照〕。

【０００９】本発明のペプチドの固相合成法による調製
は、例えば、スチレン−ジビニルベンゼン共重合体など
の反応溶媒に不溶性である重合体に目的とするペプチド
のＣ末端に対応するアミノ酸をそれが有するα−ＣＯＯ
Ｈ基を介して結合させ、次いで該アミノ酸に目的とする
ペプチドのＮ末端の方向に向かって、対応するアミノ酸
またはペプチド断片を該アミノ酸またはペプチド断片が
有するα−ＣＯＯＨ基以外のα−アミノ基などの官能基
を保護したうえで縮合させて結合させる操作と、該結合
したアミノ酸またはペプチド断片におけるα−アミノ基
などのペプチド結合を形成するアミノ基が有する保護基
を除去する操作とを順次繰り返すことによってペプチド
鎖を伸長させ、目的とするペプチドに対応するペプチド
鎖を形成し、次いで該ペプチド鎖を重合体から脱離さ
せ、かつ保護されている官能基から保護基を除去するこ
とにより目的とするペプチドを得、次いでこれを精製す
ることによって実施される。ここで、ペプチド鎖の重合
体からの脱離および保護基の除去は、フッ化水素を用い
て同時に行うのが副反応を抑制する観点から好ましい。
また、得られたペプチドの精製は逆相液体クロマトグラ
フィ−で行うのが効果的である。

【００１０】また、本発明のペプチドの塩は、通常の塩
生成反応を利用することにより調製される。

【００１１】本発明のペプチドおよびその塩（以下、こ
れらをペプチド類と略称する）は、ヒトＩＬ−１と結合
する能力を有しているので、ＩＬ−１受容体と結合する
ことなくＩＬ−１の活性を阻害することができる。ま
た、本発明のペプチド類は、毒性試験において低毒性で
あることが確認されている。

【００１２】したがって、本発明のペプチド類はＩＬ−
１の過剰産生が原因となるリウマチ、骨粗鬆症などの疾
患の治療に有効である。

【００１３】本発明のペプチド類は、リウマチ、骨粗鬆
症などの疾患の罹患者に投与することにより血清中およ
び関節液中のＩＬ−１と結合し、これを中和することが
できるので、上記罹患者の症状を軽減することができ
る。

【００１４】ペプチド類の有効な活性発現のための投与
量は、通常０．０１μｇ／kg〜２ｇ／kg（成人）であ
り、好ましくは０．０１μｇ／kg〜２００mg／kg（成
人）である。

【００１５】投与形態としてはペプチド類を５％ブドウ
糖液や生理食塩水などの生理学的に許容し得る溶液に溶
解させて得られる溶液が好ましく、また該溶液は薬理学
的に許容される種々の添加剤を含んでいてもよい。投与
方法としては静脈投与、皮下投与、腹腔投与、関節投与
などが挙げられ、さらにペプチド類をカプセル化または
リポソ−ム化することにより経口投与も可能である。

【００１６】

【実施例】以下、実施例により本発明を具体的に説明す
る。なお、本発明はこれらの実施例により限定されるも
のではない。

【００１７】実施例１式（４）：Val Val Arg Asn Ser Ser Tyr Cys Leu Arg
Ile Lys Ile Ser Ala Lys（配列番号：４）で示される
ペプチドをペプチド自動合成装置を用いて固相合成法に
より合成した。すなわち、４−〔Ｎ ^α−（ｔ−ブトキシ
カルボニル）−Ｎ ^ε−（ｐ−クロロベンジルオキシカル
ボニル）−Ｌ−リジルオキシメチル〕−フェニルアセト
アミドメチル基を０．６５ミリモル／ｇ（樹脂）の割合
で有するスチレン−ジビニルベンゼン共重合体〔スチレ
ンとジビニルベンゼンの構成モル比：９９対１〕からな
る粒状樹脂〔米国アプライド・バイオシステムズ社製、
ＰＡＭリジン、t-Boc-L-Lys(Cl-Z)〕０．１ミリモルを
用い、ペプチドのＮ端に向かって順次アミノ酸を結合さ
せた。結合反応において、アミノ酸として、米国アプラ
イド・バイオシステムズ社製のＮ ^α−（ｔ−ブトキシカ
ルボニル）−Ｎ ^ε−（ｐ−クロロベンジルオキシカルボ
ニル）−Ｌ−リジン〔t-Boc リジン〕、Ｎ−（ｔ−ブト
キシカルボニル）−Ｌ−ロイシン〔t-Boc ロイシン〕、
Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｏ−（２−ブロモベ
ンジルオキシカルボニル）−Ｌ−チロシン〔t-Boc チロ
シン〕、Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−イソロ
イシン〔t-Boc イソロイシン〕、Ｎ−（ｔ−ブトキシカ
ルボニル）−Ｌ−アスパラギン〔t-Boc アスパラギ
ン〕、Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｏ−ベンジル
−Ｌ−セリン〔t-Boc セリン〕、Ｎ−（ｔ−ブトキシカ
ルボニル）−Ｓ−（ｐ−メトキシベンジル）−Ｌ−シス
テイン〔t-Boc システイン〕、Ｎ−（ｔ−ブトキシカル
ボニル）−Ｌ−バリン〔t-Boc バリン〕、Ｎ ^α−（ｔ−
ブトキシカルボニル）−Ｎ ^G−（メシチレン−２−スル
フォニル）−Ｌ−アルギニン〔t-Boc アルギニン〕、Ｎ
−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニン〔t-Boc
アラニン〕をそれぞれ１ミリモル用いた。

【００１８】得られたペプチドについて株式会社ペプチ
ド研究所製のＨＦ反応装置Ｉ型を用いて脱保護と固相か
らの脱離を行った。粗生成物をミリポア・ウォ−タ−ズ
社製分取用高速液体クロマトグラフ〔カラム：デルタパ
ックＣ１８４７×３００mmプレップパック１０００加
圧モジュ−ル付〕で精製した。得られた精製ペプチドを
島津製作所株式会社製ＬＣ６Ａ分析用高速液体クロマト
グラフ〔カラム：東ソ−株式会社製ＴＳＫｇｅｌＯＤ
Ｓ−８０ＴＭＣＴＲ、移動相：トリフルオロ酢酸を
０．０５容量％含有するアセトニトリルと水の混合溶媒
（アセトニトリル濃度を３０分間で５容量％から５０容
量％に変化させた）〕に付したところ、１７．１minに
単一のピ−クが示された。ＦＡＢ法マススペクトルによ
り求めた精製ペプチドの分子量は１８３８であった（理
論値：１８３７．２）。

【００１９】実施例２〜１５および比較例式（５）：Lys Asn Ser Ser Tyr Cys Leu Arg Ile Lys
Ile Ser Ala Lys PheVal Glu（配列番号：５）で示され
るペプチド（実施例２）、式（６）：Lys TyrCys Leu A
rg Ile Lys Ile Ser Ala Lys Phe Val Glu Asn Glu Pro
（配列番号：６）で示されるペプチド（実施例３）、式
（７）：Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser Ala Lys
（配列番号：７）で示されるペプチド（実施例４）、式
（８）：Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser（配列番
号：８）で示されるペプチド（実施例５）、式（９）：
Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser（配列番号：１）で示さ
れるペプチド（実施例６）、式（１０）：Lys Cys Leu
Arg Ile Lys Ile Ser（配列番号：９）で示されるペプ
チド（実施例７）、式（１１）：Cys Leu Gln Ile LysI
le Ser（配列番号：２）で示されるペプチド（実施例
８）、式（１２）：Lys Cys Leu Gln Ile Gln Ile Ser
（配列番号：１０）で示されるペプチド（実施例９）、
式（１３）：Lys Ile Cys Ile Arg Ile Gln Ile Ser
（配列番号：１１）で示されるペプチド（実施例１
０）、式（１４）：Lys Xaa Cys Xaa Arg Xaa GlnXaa S
er（配列番号：１２）（ただし、XaaはいずれもNleを表
す）で示されるペプチド（実施例１１）、式（１５）：
Lys Ile Cys Ile His Ile Gln Ile Ser（配列番号：１
３）で示されるペプチド（実施例１２）、式（１６）：
Lys Ile Cys Leu Arg Ile Gln Ile Ser（配列番号：１
４）で示されるペプチド（実施例１３）、式（１７）：
Lys Cys Val Gln Val Gln Val Ser（配列番号：１５）
で示されるペプチド（実施例１４）、式（１８）：Lys
Ile Cys Ile Arg Ile Gln Ile Xaa（配列番号：１６）
（ただし、XaaはSerの−ＣＯＯＨ基を−ＣＯＮＨ ₂基で
置換したものを表す）で示されるペプチド（実施例１
５）および式（１９）：Tyr Ser Leu Glu Ile Lys Ile
Ser（配列番号：１７）で示されるペプチド（比較例）
を実施例１と同様の方法で合成した。

【００２０】実施例２では４−〔Ｎ−（ｔ−ブトキシカ
ルボニル）−γ−ベンジル−Ｌ−グルタミルオキシメチ
ル〕−フェニルアセトアミドメチル基を０．７０ミリモ
ル／ｇ（樹脂）の割合で有するスチレン−ジビニルベン
ゼン共重合体〔スチレンとジビニルベンゼンの構成モル
比：９９対１〕からなる粒状樹脂〔米国アプライド・バ
イオシステムズ社製、ＰＡＭグルタミン酸、t-Boc-L-Gl
u(OBzl)〕０．１ミリモルを用い、実施例３では４−
〔Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリルオキ
シメチル〕−フェニルアセトアミドメチル基を０．７８
ミリモル／ｇ（樹脂）の割合で有するスチレン−ジビニ
ルベンゼン共重合体〔スチレンとジビニルベンゼンの構
成モル比：９９対１〕からなる粒状樹脂〔米国アプライ
ド・バイオシステムズ社製、ＰＡＭプロリン、t-Boc-L-
Pro〕０．１ミリモルを用い、実施例４では４−〔Ｎ ^α
−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ ^ε−（ｐ−クロロベ
ンジルオキシカルボニル）−Ｌ−リジルオキシメチル〕
−フェニルアセトアミドメチル基を０．６５ミリモル／
ｇ（樹脂）の割合で有するスチレン−ジビニルベンゼン
共重合体〔スチレンとジビニルベンゼンの構成モル比：
９９対１〕からなる粒状樹脂〔米国アプライド・バイオ
システムズ社製、ＰＡＭリジン、t-Boc-L-Lys(Cl-Z)〕
０．１ミリモルを用い、実施例５〜実施例１４および比
較例では４−〔Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｏ−
ベンジル−Ｌ−セリルオキシメチル〕−フェニルアセト
アミドメチル基を０．７２ミリモル／ｇ（樹脂）の割合
で有するスチレン−ジビニルベンゼン共重合体〔スチレ
ンとジビニルベンゼンの構成モル比：９９対１〕からな
る粒状樹脂〔米国アプライド・バイオシステムズ社製、
ＰＡＭセリン、t-Boc-L-Ser(Bzl)〕０．１ミリモルを用
い、実施例１５ではα−アミノ−ｐ−メチルベンジル基
を０．７８ミリモル／ｇ（樹脂）の割合で有するスチレ
ン−ジビニルベンゼン共重合体〔スチレンとジビニルベ
ンゼンの構成モル比：９９対１〕からなる粒状樹脂〔米
国アプライド・バイオシステムズ社製、ｐ−メチルＢＨ
Ａレジン〕０．１ミリモルを用いた。

【００２１】また、アミノ酸としては、実施例１で用い
たものに加えて米国アプライド・バイオシステムズ社製
のＮ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラ
ニン〔t-Boc フェニルアラニン〕、Ｎ−（ｔ−ブトキシ
カルボニル）−γ−ベンジル−Ｌ−グルタミン酸〔t-Bo
c グルタミン酸〕、Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−
Ｌ−グルタミン〔t-Boc グルタミン〕、Ｎ−（ｔ−ブト
キシカルボニル）−Ｌ−ノルロイシン〔t-Boc ノルロイ
シン〕、Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ ^Im−
（２，４−ジニトロフェニル）−Ｌ−ヒスチジン〔t-Bo
c ヒスチジン〕を用いた。

【００２２】得られたそれぞれのペプチドについて実施
例１におけると同様にして脱保護と固相からの脱離を行
い、粗生成物を精製した。それぞれの精製ペプチドにつ
いて、分析用高速液体クロマトグラフにおける溶出時間
およびＦＡＢ法マススペクトルによる分子量測定結果を
第１表にまとめて示す。

【００２３】

【表１】

【００２４】試験例ヒトＩＬ−１との結合性試験金属ナトリウムの存在下で蒸留することによって得られ
たジオキサン５ml中にセルロ−ス粒子（生化学工業株式
会社販売、ＣＭ−セルロファインＣＨ）１ｇを懸濁さ
せ、得られた懸濁液にＮ−ヒドロキシコハク酸イミド
０．０５ｇおよびジシクロヘキシルカルボジイミド０．
１ｇを加え、混合物を室温下で１晩振盪攪拌した。得ら
れた混合物を０．０２モル／lのリン酸塩緩衝液（ｐＨ:
７．４）で洗浄し、吸引瀘過した。得られた粒子を、実
施例１〜１５で得られたペプチドの１mgを含有する、
０．０２モル／lのリン酸塩緩衝液（ｐＨ:７．４）また
は精製水１mlと混合し、この混合物を４℃の温度で１晩
攪拌した。得られた混合物を吸引瀘過した。瀘液を分析
用逆相高速液体クロマトグラフに付したが、残存する未
反応のペプチドはいずれも認められなかった（担体上の
ペプチドの固定化率：約１００％）。このようにして、
実施例１〜１５で得られたペプチドの各１mgが固定化さ
れた吸着剤各１ｇを得た。

【００２５】吸着剤１００mgを秤取り、これに５％の牛
血清アルブミンを含むＰＢＳ（０．１５ＭのＮａＣｌを
含む１０ｍＭリン酸塩緩衝液、ｐＨ：７．４）１００μ
lを加えて４℃で１晩インキュベ−トし、次いで¹²⁵ Ｉ標
識ヒトＩＬ−１β（アマシャム・ジャパン社より購入）
約３００Ｂｑを加えて室温で３時間インキュベ−トし
た。得られた反応混合物を０．２％のトリトンＸ−１０
０を含むトリス緩衝液（ｐＨ：７．４）で５回洗浄した
のち、吸着剤上に残存する放射活性をγカウンタ−で測
定した。その結果を第２表に示す。

【００２６】

【表２】

【００２７】第２表に示すように、実施例１〜１５で得
られたペプチドを固定化した吸着剤は、比較例を固定化
した吸着剤およびグリシン（H-Gly-OH）（対照例）を固
定化した吸着剤と比較して有意に高い放射活性が観測さ
れ、実施例１〜１５で得られたペプチドがヒトＩＬ−１
結合能を有することが確認された。

【００２８】

【発明の効果】本発明によれば、リウマチ、骨粗鬆症な
どのＩＬ−１が関与する疾患の治療に有効なペプチド類
が提供される。本発明により提供されるペプチド類は、
上記の試験例から明らかなように、ヒトＩＬ−１と特異
的に結合する能力を有しており、ヒトＩＬ−１とヒトＩ
Ｌ−１受容体との結合を阻害することから、上記罹患者
に投与されることにより体液中のヒトＩＬ−１を中和し
て該罹患者の症状を軽減することができる。

【００２９】

【配列表】

配列番号：１配列の長さ：７配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser 1 5

【００３０】配列番号：２配列の長さ：７配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Cys Leu Gln Ile Lys Ile Ser 1 5

【００３１】配列番号：３配列の長さ：７配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Cys Leu Gln Ile Gln Ile Ser 1 5

【００３２】配列番号：４配列の長さ：１６配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Val Val Arg Asn Ser Ser Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser Ala Lys 1 5 10 15

【００３３】配列番号：５配列の長さ：１７配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Lys Asn Ser Ser Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser Ala Lys Phe Val 1 5 10 15 Glu

【００３４】配列番号：６配列の長さ：１７配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Lys Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser Ala Lys Phe Val Glu Asn Glu 1 5 10 15 Pro

【００３５】配列番号：７配列の長さ：１０配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser AlaLys 1 5 10

【００３６】配列番号：８配列の長さ：８配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser 1 5

【００３７】配列番号：９配列の長さ：８配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Lys Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser 1 5

【００３８】配列番号：１０配列の長さ：８配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Lys Cys Leu Gln Ile Gln Ile Ser 1 5

【００３９】配列番号：１１配列の長さ：９配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Lys Ile Cys Ile Arg Ile Gln Ile Ser 1 5

【００４０】配列番号：１２配列の長さ：９配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列の特徴特徴を表す記号：modified site 存在位置：２、４、６、８特徴を決定した方法：Ｅその他の情報：Xaa はいずれもNle を表す。配列 Lys Xaa Cys Xaa Arg Xaa Gln Xaa Ser 1 5

【００４１】配列番号：１３配列の長さ：９配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Lys Ile Cys Ile His Ile Gln Ile Ser 1 5

【００４２】配列番号：１４配列の長さ：９配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Lys Ile Cys Leu Arg Ile Gln Ile Ser 1 5

【００４３】配列番号：１５配列の長さ：８配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Lys Cys Val Gln Val Gln Val Ser 1 5

【００４４】配列番号：１６配列の長さ：９配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列の特徴特徴を表す記号：modified site 存在位置：９特徴を決定した方法：Ｅその他の情報：XaaはSerの−ＣＯＯＨ基を−ＣＯＮＨ ₂
基で置換したものを表す。配列 Lys Ile Cys Ile Arg Ile Gln Ile Xaa 1 5

【００４５】配列番号：１７配列の長さ：８配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Tyr Ser Leu Glu Ile Lys Ile Ser 1 5

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 38/00 Ａ６１Ｋ 37/02 (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) C07K 7/08 ZNA C07K 7/06 C07K 14/715 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式Ｈ−Ｘ ¹−Cys−Ａ−Ｂ−Ａ−Ｂ−Ａ−Ser−Ｘ ²−Ｙ（式中、ＡはVal、Leu、IleおよびNleよりなる群から選
ばれるアミノ酸残基を表し、ＢはArg、Lys、Gln、Hisお
よびSerよりなる群から選ばれるアミノ酸残基を表し、
Ｘ ¹およびＸ ²はそれぞれ単結合またはGly、Ala、Val、A
rg、Asn、Ser、Phe、Pro、Leu、Glu、Asp、Lys、Thr、H
is、Tyr、NleおよびIleよりなる群から選ばれる１〜１
０個のアミノ酸残基よりなるペプチド断片を表し、Ｙは
水酸基またはアミノ基を表す）で示され、かつヒトイン
ターロイキン−１結合能を有するペプチドまたはその
塩。
【請求項２】該ペプチドが一般式Ｈ−Ｘ ³−Ｄ−Ｘ ⁴−Ｙ（式中、Ｄは式（１）：Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser
（配列番号：１）で示されるペプチド断片、式（２）：
Cys Leu Gln Ile Lys Ile Ser（配列番号：２）で示さ
れるペプチド断片または式（３）：Cys Leu Gln Ile Gl
n Ile Ser（配列番号：３）で示されるペプチド断片を
表し、Ｘ ³およびＸ ⁴はそれぞれ単結合またはGly、Ala、
Val、Arg、Asn、Ser、Phe、Pro、Leu、Glu、Asp、Lys、
Thr、His、TyrおよびIleよりなる群から選ばれる１〜１
０個のアミノ酸残基からなるペプチド断片を表し、Ｙは
水酸基またはアミノ基を表す）で示される、請求項１記
載のペプチドまたはその塩。
【請求項３】該ペプチドが下記の式（４）：Val Val Arg Asn Ser Ser Tyr Cys Leu Arg
Ile Lys Ile Ser Ala Lys（配列番号：４）、式（５）：Lys Asn Ser Ser Tyr Cys Leu Arg Ile Lys
Ile Ser Ala Lys Phe Val Glu（配列番号：５）、式（６）：Lys Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser Ala
Lys Phe Val Glu Asn Glu Pro（配列番号：６）、式（７）：Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser Ala Lys
（配列番号：７）、式（８）：Tyr Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser（配列番
号：８）、式（９）：Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser（配列番号：
１）、式（１０）：Lys Cys Leu Arg Ile Lys Ile Ser（配列
番号：９）、式（１１）：Cys Leu Gln Ile Lys Ile Ser（配列番
号：２）、式（１２）：Lys Cys Leu Gln Ile Gln Ile Ser（配列
番号：１０）、式（１３）：Lys Ile Cys Ile Arg Ile Gln Ile Ser
（配列番号：１１）、式（１４）：Lys Xaa Cys Xaa Arg Xaa Gln Xaa Ser
（配列番号：１２）（ただし、XaaはいずれもNleを表
す）、式（ｌ５）：Lys Ile Cys Ile His Ile Gln Ile Ser
（配列番号：１３）、式（１６）：Lys Ile Cys Leu Arg Ile Gln Ile Ser
（配列番号：１４）、式（１７）：Lys Cys Val Gln Val Gln Val Ser（配列
番号：１５）または式（１８）：Lys Ile Cys Ile Arg Ile Gln Ile Xaa
（配列番号：１６）（ただし、XaaはSerの−ＣＯＯＨ基
を−ＣＯＮＨ ₂基で置換したものを表す）で示されるペ
プチドである、請求項１または請求項２記載のペプチド
またはその塩。