JP2025505131A

JP2025505131A - ＩｇＡプロテアーゼトランケート、ＩｇＡプロテアーゼトランケートを含む融合タンパク質及びその用途

Info

Publication number: JP2025505131A
Application number: JP2024545112A
Authority: JP
Inventors: リョ，ジチェン; ツァン，ホン; シュ，チュティアン
Original assignee: ペキンユニバーシティファーストホスピタル; シャンハイアレザイムファーマシューティカルズリミテッド
Priority date: 2022-01-29
Filing date: 2023-01-29
Publication date: 2025-02-21
Also published as: WO2023143563A1; CN118302522A; IL314384A; MX2024009171A; EP4471138A1; AU2023210789A1; KR20240137091A

Abstract

本願はＩｇＡプロテアーゼトランケート、ＩｇＡプロテアーゼトランケートを含む融合タンパク質（例えばＩｇＡプロテアーゼトランケートとＦｃとを含む融合タンパク質）及びＩｇＡ沈着疾患（例えばＩｇＡ腎症）の治療におけるその用途に関する。
【選択図】図６

Description

本願はバイオ医薬分野に関し、具体的には、本願はＩｇＡプロテアーゼトランケート、ＩｇＡプロテアーゼトランケートを含む融合タンパク質、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケート又は前記融合タンパク質を含む医薬組成物、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケート又は前記融合タンパク質をコードする核酸、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケート又は前記融合タンパク質の調製方法、及びＩｇＡ沈着関連疾患を治療するための医薬の調製におけるＩｇＡプロテアーゼトランケート又は前記融合タンパク質の用途に関する。

ＩｇＡ腎症は、現在世界で最もよく見られる原発性糸球体疾患の１つであり、患者や社会に大きな負担を与えている。目下、ＩｇＡ腎症に対する特異的な治療法はいまだない。臨床ではＲＡＳ阻害剤をベースとした支持療法が多く用いられ、これにより腎機能低下を遅延させている。支持療法で効果を得られない患者には、ステロイドと免疫抑制薬の併用療法を行う。

しかしながら、ステロイドと免疫抑制薬の使用は長期的効果が低く、また患者に重篤な副作用をもたらす。

このため有効で副作用の少ない治療薬の開発が急がれている。

一態様において、本願は、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼの非天然トランケートフラグメントを含むか、又は前記非天然トランケートフラグメントと少なくとも７０％の配列同一性を有する、単離されたＩｇＡプロテアーゼトランケートを提供する。いくつかの実施形態において、前記非天然トランケートフラグメントは、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼをベースにアミノ酸の置換、欠失、挿入又は修飾が行われ、それにより前記ＩｇＡプロテアーゼトランケートの自己酵素切断機能が喪失又は低下される。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸の置換、欠失、挿入、又は修飾は、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼの天然自己酵素切断部位、前記天然自己酵素切断部位の５部位以内上流、及び／又は５部位以内下流で発生する。いくつかの実施形態において、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）は、ＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍＡＫ１８３株である。いくつかの実施形態において、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は配列番号１に示すとおりである。いくつかの実施形態において、前記天然自己酵素切断部位は、配列番号１に示すアミノ酸配列の７３０位～８４０位の間（例えば、７９２位～７９７位の間）である。いくつかの実施形態において、前記天然自己酵素切断部位は、配列番号１に示すアミノ酸配列の７９０位、７９１位、７９２位、７９３位、７９４位、７９５位、７９６位、７９７位、７９８位、７９９位、又は８００位である。

いくつかの実施形態において、前記非天然トランケートフラグメントは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端トランケートフラグメント又はＣ末端トランケートフラグメントである。いくつかの実施形態において、前記Ｎ末端トランケートフラグメントは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端側３１位から少なくとも７６０個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含むか、又は前記ポリペプチドフラグメントと少なくとも７０％の配列同一性を有する。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から少なくとも７６０個（例えば、少なくとも７６１個、少なくとも７６２個、少なくとも７６３個、少なくとも７６４個、少なくとも７６５個、少なくとも７６６個、少なくとも７６７個、少なくとも７６８個、少なくとも７６９個、少なくとも７７０個、少なくとも７７１個、少なくとも７７２個、少なくとも７７３個、少なくとも７７４個、少なくとも７７５個、少なくとも７７６個、少なくとも７７７個、少なくとも７７８個、少なくとも７７９個、少なくとも７８０個、少なくとも７８１個、少なくとも７８２個、少なくとも７８３個、少なくとも７８４個、少なくとも７８５個、少なくとも７８６個、少なくとも７８７個、少なくとも７８８個、少なくとも７８９個、少なくとも７９０個、少なくとも７９１個、少なくとも７９２個、少なくとも７９３個、少なくとも７９４個、少なくとも７９５個、少なくとも７９６個、少なくとも７９７個、少なくとも７９８個、少なくとも７９９個、少なくとも８００個、少なくとも８０１個、少なくとも８０２個、少なくとも８０３個、少なくとも８０４個、少なくとも８０５個、少なくとも８０６個、少なくとも８０７個、少なくとも８０８個、少なくとも８０９個、少なくとも８１０個、少なくとも９００個、少なくとも９５０個、少なくとも１０００個、少なくとも１１００個、少なくとも１１５０個又は少なくとも１２００個）の連続するアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～７９８位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～８０７位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～８１６位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～８３３位アミノ酸、及びそれらと少なくとも７０％の配列同一性を有するポリペプチドフラグメント、からなる群より選択されるポリペプチドフラグメントを含む。

いくつかの実施形態において、前記非天然トランケートフラグメントは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端側３３５位から少なくとも４５６個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含むか、又は前記ポリペプチドフラグメントと少なくとも９０％若しくは少なくとも９５％の配列同一性を有する。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位から少なくとも４５６個（例えば、少なくとも４５７個、少なくとも４５８個、少なくとも４５９個、少なくとも４６０個、少なくとも４６１個、少なくとも４６２個、少なくとも４６３個、少なくとも４６４個、少なくとも４６５個、少なくとも４６６個、少なくとも４６７個、少なくとも４６８個、少なくとも４６９個、少なくとも４７０個、少なくとも４７１個、少なくとも４７２個、少なくとも４７３個、少なくとも４７４個、少なくとも４７５個、少なくとも４７６個、少なくとも４７７個、少なくとも４７８個、少なくとも４７９個、少なくとも４８０個、少なくとも４８１個、少なくとも４８２個、少なくとも４８３個、少なくとも４８４個、少なくとも４８５個、少なくとも４８６個、少なくとも４８７個、少なくとも４８８個、少なくとも４８９個、少なくとも４９０個、少なくとも４９１個、少なくとも４９２個、少なくとも４９３個、少なくとも４９４個、少なくとも４９５個、少なくとも４９６個、少なくとも４９７個、少なくとも４９８個、少なくとも４９９個、少なくとも５００個、少なくとも５５０個、少なくとも６００個、少なくとも６５０個、少なくとも７００個、少なくとも７５０個、少なくとも８００個、少なくとも８５０個又は少なくとも９００個）の連続するアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位～７９１位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～７９１位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３０位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３０位～７９１位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３０位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～８１６位アミノ酸、及びそれらと少なくとも９０％又は少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチドフラグメント、からなる群より選択されるポリペプチドフラグメントを含む。

いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、前記ポリペプチドフラグメントのアミノ酸配列をベースに、１つ又は複数の部位にアミノ酸の保存的置換を有する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位、８６２位、９３１位、９３３位、９７８位、１００２位、１００４位のうち１つ又は複数に対応する位置にアミノ酸変異を有する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位、８６２位、９３１位、９３３位、９７８位、１００２位、１００４位のうち１つ又は複数に対応する位置がグリシンに変異する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位に対応する位置にアミノ酸変異、８６２位に対応する位置にアミノ酸変異、９３１位及び９３３位に対応する位置にアミノ酸変異、９７８位に対応する位置にアミノ酸変異、又は１００２位及び１００４位に対応する位置にアミノ酸変異を有する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントのアミノ酸配列は、配列番号５３（「ＰＡ－ＧＡＭｕｔ」ともいう）、配列番号５４（「ＰＩ－ＧＩＭｕｔ」ともいう）、配列番号５５（「ＰＡＰ－ＧＡＧＭｕｔ」ともいう）、配列番号５６（「ＰＡＴ－ＧＡＴＭｕｔ」ともいう）又は配列番号５７（「ＰＩＰ－ＧＩＧＭｕｔ」ともいう）で示される。

いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、ヒトＩｇＡを特異的に切断する酵素活性を有する。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、ヒトＩｇＡ重鎖を特異的に切断する酵素活性を有する。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、ヒトＩｇＡ重鎖ＣＨ１とヒンジ領域との交わる箇所を特異的に切断する酵素活性を有する。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、ヒトＩｇＡ１を特異的に切断する酵素活性を有する。

別の態様において、本願は、第１のポリペプチドと第２のポリペプチドとを含む融合タンパク質を提供し、前記第１のポリペプチドは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、若しくはそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼの全長、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、若しくはそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのシグナルペプチドを除去してなるポリペプチド、又は本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートを含み、前記第２のポリペプチドは、対象の体内における前記第１のポリペプチドの半減期を延長するためのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記第１のポリペプチドは、配列番号１又は配列番号４２に示す配列を含む。いくつかの実施形態において、前記第２のポリペプチドは、前記第１のポリペプチドのＮ末端又はＣ末端に位置する。

いくつかの実施形態において、前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドとの間はリンカーによって連結される。いくつかの実施形態において、前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドとの間は直接連結される。いくつかの実施形態において、前記リンカーは、切断可能型リンカー、非切断可能型リンカー、ペプチドリンカー、フレキシブルリンカー、剛直リンカー、らせん状リンカー、及び非らせん状リンカーからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、前記リンカーはペプチドリンカーを含む。いくつかの実施形態において、前記ペプチドリンカーは、グリシン及びセリンを含有するリンカーを含む。いくつかの実施形態において、前記グリシン及びセリンを含有するリンカーは、配列番号２１（ＧＧＧＳ）、配列番号２２（ＧＧＧＧＳ）、配列番号８６（ＧＧＧＧＧＳ）又は配列番号８７（ＧＧＧＧＧＧＧＳ）に示す１つ、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上の反復を含む。いくつかの実施形態において、前記リンカーは、配列番号２３（ＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＧＡＴＣＣ）に示すか、配列番号５８（ＥＥＫＫＫＥＫＥＫＥＥＱＥＥＲＥＴＫ）に示すか、又は配列番号５９（ＨＨＨＨＨＨＨＨＨＨ）に示すアミノ酸配列を含む。

いくつかの実施形態において、前記第２のポリペプチドは、Ｆｃドメイン及びアルブミンより選択される。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインはヒンジ領域を含む。いくつかの実施形態において、前記ＦｃドメインはヒトＩｇＧＦｃドメインに由来する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、ヒトＩｇＧ１Ｆｃドメイン、ヒトＩｇＧ２Ｆｃドメイン、ヒトＩｇＧ３Ｆｃドメイン、又はヒトＩｇＧ４Ｆｃドメインに由来する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、配列番号２４、配列番号２５、配列番号３２、又は配列番号７７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、配列番号２４、配列番号２５、配列番号３２、又は配列番号７７に示すアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、配列番号２５の７位に対応する位置にアミノ酸変異を有する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、配列番号２５の７位に対応する位置のアミノ酸（例えばアラニン）がバリン、グリシン、セリン、又はロイシンに変異する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、前記融合タンパク質の半減期を延長する１つ又は複数の変異を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、前記第１のポリペプチドのＣ末端又はＮ末端に連結される。いくつかの実施形態において、前記アルブミンは、ヒト血清アルブミンの１つ又は複数のドメインを含む。いくつかの実施形態において、前記アルブミンは、ヒト血清アルブミンのＤ３ドメインを含む。

いくつかの実施形態において、本願記載の融合タンパク質は、さらにタグを含む。いくつかの実施形態において、前記タグは、蛍光タグ、発光タグ、精製タグ、及び発色タグからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、前記タグは、ｃ－Ｍｙｃタグ、ＨＡタグ、ＶＳＶ－Ｇタグ、ＦＬＡＧタグ、Ｖ５タグ、及びＨＩＳタグからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、前記タグは、６個、７個、８個、９個、又は１０個のヒスチジンを含むＨＩＳタグである。いくつかの実施形態において、前記第２のポリペプチドは、前記第１のポリペプチドのＣ末端に位置し、前記タグは前記第２のポリペプチドのＣ末端に位置する。

いくつかの実施形態において、対象の体内の血液循環中における本願記載の融合タンパク質の半減期は、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、少なくとも６日、少なくとも７日、少なくとも８日、少なくとも９日、少なくとも１０日、少なくとも１１日、少なくとも１２日、少なくとも１３日、少なくとも１４日である。

別の態様において、本願は、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートをコードするヌクレオチド配列を含む、又は本願記載の融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸を提供する。いくつかの実施形態において、本願記載の核酸は、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、及びそれらと少なくとも７０％の配列同一性を有するヌクレオチド配列からなる群より選択されるヌクレオチド配列を含む。

別の態様において、本願は、本願記載の核酸を含むベクターを提供する。

別の態様において、本願は、本願記載の核酸又は本願記載のベクターを含む細胞を提供する。いくつかの実施形態において、前記細胞は、原核生物の細胞又は真核生物の細胞である。いくつかの実施形態において、前記原核生物の細胞は、大腸菌の細胞である。いくつかの実施形態において、前記真核生物の細胞は、哺乳類の細胞である。いくつかの実施形態において、前記哺乳類の細胞は、ヒト細胞又はチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である。いくつかの実施形態において、前記哺乳類の細胞は、ヒト胎児腎細胞２９３（ＨＥＫ２９３細胞）である。

別の態様において、本願は、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートを含む、本願記載の融合タンパク質を含む、本願記載の核酸を含む、本願記載のベクターを含む、又は本願記載の細胞、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。

別の態様において、本願は、本願記載の細胞を培養するステップを含む、融合タンパク質の産生方法を提供する。

別の態様において、本願は、治療又は予防を必要とする対象に対し本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート、本願記載の融合タンパク質、又は本願記載の医薬組成物を投与することを含む、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防する方法を提供する。

別の態様において、本願は、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート、本願記載の融合タンパク質、又は本願記載の医薬組成物の、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防するための医薬の調製における用途を提供する。

別の態様において、本願は、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防するための、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート、本願記載の融合タンパク質、又は本願記載の医薬組成物を提供する。

別の態様において、本願は、治療又は予防を必要とする対象に対しＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート、前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケートを含む融合タンパク質、又は前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート若しくは前記融合タンパク質を含む医薬組成物を投与することを含む、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防する方法を提供し、前記ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６又はそれらの組合せからなる群より選択される。

別の態様において、本願は、ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート、前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケートを含む融合タンパク質、又は前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート若しくは前記融合タンパク質を含む医薬組成物の、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防するための医薬の調製における用途を提供し、前記ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６又はそれらの組合せからなる群より選択される。

別の態様において、本願は、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防するためのＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート、前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケートを含む融合タンパク質、又は前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート若しくは前記融合タンパク質を含む医薬組成物を提供し、前記ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６又はそれらの組合せからなる群より選択される。

いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡ沈着関連疾患には、ＩｇＡ腎症、疱疹状皮膚炎、ヘノッホ・シェーライン紫斑病（ＩｇＡ血管炎ともいう）、川崎病、紫斑病性腎炎、ＩｇＡ血管炎による腎損傷、ＩｇＡリウマトイド因子陽性の関節リウマチ、ＩｇＡ型抗ＧＢＭ病、又はＩｇＡ型ＡＮＣＡ関連血管炎が含まれる。いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡ沈着関連疾患は、ＩｇＡ腎症、ＩｇＡ血管炎、又は川崎病である。

図１は、ＡＫ１８３（３１－７３７）、ＡＫ１８３（３１－７６８）、ＡＫ１８３（３１－７９８）及びＡＫ１８３（３１－８３３）の４種類のＩｇＡプロテアーゼトランケートのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図２は、ＡＫ１８３（３１－７７３）、ＡＫ１８３（３１－７７８）、ＡＫ１８３（３１－７８２）、ＡＫ１８３（３１－７８７）及びＡＫ１８３（３１－７９２）の５種類のＩｇＡプロテアーゼトランケートのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図３ａ～ｃは、ＡＫ１８３（３１－７８８）、ＡＫ１８３（３１－７８９）、ＡＫ１８３（３１－７９０）及びＡＫ１８３（３１－７９１）の４種類のＩｇＡプロテアーゼトランケートのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図４は、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－７９０）－Ｆｃプラスミドの構築フロー図を示す。図５は、ＡＫ１８３（３１－７９０）－Ｆｃ融合タンパク質の発現結果図を示す。図６ａは、ＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃ融合タンパク質の発現結果図を示す。図６ｂは、ＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃ融合タンパク質のＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図７は、ＡＫ１８３（３１－７９８）－Ｆｃ、ＡＫ１８３（３１－８０７）－Ｆｃ、ＡＫ１８３（３１－８１６）－Ｆｃ及びＡＫ１８３（３１－８３３）－Ｆｃの４種類の融合タンパク質のＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図８は、ＡＫ１８３（３１－８０７）－Ｆｃ融合タンパク質のＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｖｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図９は、ＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃ融合タンパク質のＨＥＫ２９３細胞における発現結果図を示す。図１０は、ＡＫ１８３（２８５－７９２）、ＡＫ１８３（３３０－７９２）、ＡＫ１８３（３８０－７９２）、ＡＫ１８３（４３０－７９２）、ＡＫ１８３（４８０－７９２）、ＡＫ１８３（５３０－７９２）及びＡＫ１８３（５８０－７９２）の７種類のＩｇＡプロテアーゼトランケートのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図１１は、ＡＫ１８３（３３５－７９２）、ＡＫ１８３（３４０－７９２）、ＡＫ１８３（３４５－７９２）、ＡＫ１８３（３５０－７９２）、ＡＫ１８３（３５５－７９２）、ＡＫ１８３（３６０－７９２）、ＡＫ１８３（３６５－７９２）、ＡＫ１８３（３７０－７９２）及びＡＫ１８３（３７５－７９２）の９種類のＩｇＡプロテアーゼトランケートのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図１２は、ＡＫ１８３（３３６－７９２）、ＡＫ１８３（３３７－７９２）、ＡＫ１８３（３３８－７９２）及びＡＫ１８３（３３９－７９２）の４種類のＩｇＡプロテアーゼトランケートのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図１３は、ＡＫ１８３（２８５－７９２）、ＡＫ１８３（３３０－７９２）、ＡＫ１８３（３３５－７９２）、ＡＫ１８３（３３６－７９２）、ＡＫ１８３（３３７－７９２）、ＡＫ１８３（３３８－７９２）、ＡＫ１８３（３３９－７９２）、ＡＫ１８３（３４０－７９２）、ＡＫ１８３（３４５－７９２）及びＡＫ１８３（３５０－７９２）の１０種類のＩｇＡプロテアーゼトランケートのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性の再検証実験の結果を示す。図１４は、ＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ及びＦｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）の２種類の融合タンパク質の発現結果図を示す。図１５は、ＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ及びＦｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）の２種類の融合タンパク質のＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図１６は、Ｆｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）融合タンパク質、ＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質及びＡＫ１８３（２８５－８１６）ＩｇＡプロテアーゼトランケートのＩｇＡ１に対する酵素切断活性実験の結果を示す。図１７は、Ｆｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）融合タンパク質のＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｖｏ酵素切断活性実験の結果を示す。図１８は、ＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質及びＦｃ－ＡＫ１８３（３１－１２０３）融合タンパク質のＩｇＡ１に対する酵素切断活性実験の結果を示す。図１９は、ＡＫ１８３（３１－８１６）－ＩｇＧ１Ｆｃ融合タンパク質、ＡＫ１８３（３１－８１６）－ＩｇＧ４Ｆｃ融合タンパク質及びＡＫ１８３（３１－８１６）－アルブミン融合タンパク質のＩｇＡ１に対する酵素切断活性実験の結果を示す。図２０は、異なるリンカー（配列番号５９、配列番号５８、配列番号２２、配列番号７８、配列番号７９又は配列番号８０）を有するＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質のＩｇＡ１に対する酵素切断活性実験の結果を示す。図２１は、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、又は配列番号５７に示す５種類のＩｇＡプロテアーゼトランケートの変異体のＩｇＡ１に対する酵素切断活性実験の結果を示す。図２２は、ＡＫ１８３（３１－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質のＦｃ領域に４種類の異なる変異をそれぞれ行ってなる４種類の変異体のＩｇＡ１に対する酵素切断活性実験の結果を示す。図２３ａは、１６種類のＡＫ１８３相同酵素のＩｇＡ１に対する酵素切断活性実験の結果を示す。図２３ｂは、１６種類のＡＫ１８３相同酵素のＩｇＡ１に対する酵素切断活性実験の結果を示す。

本願では、以下、様々な態様及び実施形態を開示するが、当業者にとって、本願の主題の趣旨及び範囲から逸脱することなく様々な均等な変更及び修正を実施可能であることは明らかである。本願により開示される様々な態様及び実施形態は説明のための例示にすぎず、本願を限定するものではない。本願の実際の保護範囲は特許請求の範囲を基準とする。別途示されない限り、本明細書で使用するすべての技術用語及び科学用語は、本願が属する技術分野において当業者が通常理解するのと同じ意味を有する。本願で引用するすべての参考文献、特許、特許出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

定義
本願で使用する用語「クロストリジウム・ラモーサム」又は「クロストリジウム」はいずれも、ＩｇＡプロテアーゼを産生可能なヒト腸内共生細菌であるＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ菌（Ｒａｍｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｒａｍｏｓｕｍともいう）を指す。

本願で使用する用語「プロテアーゼ」は、タンパク質及びペプチドを分解する能力を有する酵素を指す。プロテアーゼは、タンパク質を形成するペプチド又はポリペプチド鎖においてアミノ酸をつなぐペプチド結合を加水分解することにより、タンパク質を分解することができる。従来技術において、特定種のプロテアーゼのタンパク質加水分解活性を測定する方法は数多く知られている。例えば、適切な基質に対する各種プロテアーゼの加水分解能を比較測定し分析することによって、プロテアーゼのタンパク質加水分解活性を決定することができる。タンパク質加水分解活性分析のための基質の例には、例えば、ジメチルカゼイン、牛コラーゲン、牛エラスチンなどが含まれる。これらの基質を用いた比色定量法も従来技術において知られている（ＷＯ９９／３４０１１及びＵＳ６，３７６，４５０などを参照されたい）。

本願で使用する用語「ＩｇＡプロテアーゼ」とは、対象（例えばヒト）のＩｇＡ免疫グロブリン分子（例えばＩｇＡ１又はＩｇＡ２）を特異的に切断又は分解することができる酵素を指す。例えば、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導されるＩｇＡプロテアーゼは、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２の２２１位のプロリン（Ｐｒｏ）と２２２位のバリン（Ｖａｌ）との間のペプチド結合を特異的に切断してＩｇＡ１及びＩｇＡ２を分解することができる。

ポリペプチド又はタンパク質について言う場合、本願で使用する用語「野生型」とは、１つ又は複数のアミノ酸の位置において人為的な置換、挿入、欠失又は修飾を含まない、天然に存在するポリペプチド又はタンパク質を指す。核酸、ヌクレオチド、又はポリヌクレオチドについて言う場合、本願で使用する用語「野生型」とは、１つ又は複数のヌクレオチドの位置において人為的な置換、挿入、欠失、又は修飾を含まない、天然に存在する核酸、ヌクレオチド、又はポリヌクレオチドを指す。ただし、野生型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、天然に存在するポリヌクレオチドに限定されず、野生型ポリペプチドをコードする任意のポリヌクレオチドも含まれる。

本願で使用する用語「ＡＫ１８３」とは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）のＡＫ１８３株を指す。ＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍＡＫ１８３株が産生する野生型ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は配列番号１に示すとおりである（このうち１～３０位アミノ酸がシグナルペプチドである）。

本願で使用する用語「シグナルペプチド」とは、タンパク質の成熟体若しくは前駆体形態での分泌又は指向性輸送に関与し得るアミノ酸残基の配列を指す。シグナルペプチドは通常、前駆体又は成熟タンパク質の配列のＮ末端に位置する。シグナルペプチドは内在性であっても外在性であってもよい。成熟タンパク質には一般にシグナルペプチドは存在しない。通常、タンパク質輸送後に、シグナルペプチドはシグナルペプチダーゼによって前記タンパク質から切断される。例えば配列番号１に示すアミノ酸配列からＮ末端のシグナルペプチドを除いてなるアミノ酸配列は、配列番号４２に示すとおりである。

ＡＳＫＰＤＩＫＶＧＤＹＶＫＭＧＶＹＮＮＡＳＩＬＷＲＣＶＳＩＤＮＮＧＰＬＭＬＡＤＫＩＶＤＴＬＡＹＤＡＫＴＮＤＮＳＮＳＫＳＨＳＲＳＹＫＲＤＤＹＧＳＮＹＷＫＤＳＮＭＲＳＷＬＮＳＴＡＡＥＧＫＶＤＷＬＣＧＮＰＰＫＤＧＹＶＳＧＶＧＡＹＮＥＫＡＧＦＬＮＡＦＳＫＳＥＩＡＡＭＫＴＶＴＱＲＳＬＶＳＨＰＥＹＮＫＧＩＶＤＧＤＡＮＳＤＬＬＹＹＴＤＩＳＥＡＶＡＮＹＤＳＳＹＦＥＴＴＴＥＫＶＦＬＬＤＶＫＱＡＮＡＶＷＫＮＬＫＧＹＹＶＡＹＮＮＤＧＭＡＷＰＹＷＬＲＴＰＶＴＤＣＮＨＤＭＲＹＩＳＳＳＧＱＶＧＲＹＡＰＷＹＳＤＬＧＶＲＰＡＦＹＬＤＳＥＹＦＶＴＴＳＧＳＧＳＱＳＳＰＹＩＧＳＡＰＮＫＱＥＤＤＹＴＩＳＥＰＡＥＤＡＮＰＤＷＮＶＳＴＥＱＳＩＱＬＴＬＧＰＷＹＳＮＤＧＫＹＳＮＰＴＩＰＶＹＴＩＱＫＴＲＳＤＴＥＮＭＶＶＶＶＣＧＥＧＹＴＫＳＱＱＧＫＦＩＮＤＶＫＲＬＷＱＤＡＭＫＹＥＰＹＲＳＹＡＤＲＦＮＶＹＡＬＣＴＡＳＥＳＴＦＤＮＧＧＳＴＦＦＤＶＩＶＤＫＹＮＳＰＶＩＳＮＮＬＨＧＳＱＷＫＮＨＩＦＥＲＣＩＧＰＥＦＩＥＫＩＨＤＡＨＩＫＫＫＣＤＰＮＴＩＰＳＧＳＥＹＥＰＹＹＹＶＨＤＹＩＡＱＦＡＭＶＶＮＴＫＳＤＦＧＧＡＹＮＮＲＥＹＧＦＨＹＦＩＳＰＳＤＳＹＲＡＳＫＴＦＡＨＥＦＧＨＧＬＬＧＬＧＤＥＹＳＮＧＹＬＬＤＤＫＥＬＫＳＬＮＬＳＳＶＥＤＰＥＫＩＫＷＲＱＬＬＧＦＲＮＴＹＴＣＲＮＡＹＧＳＫＭＬＶＳＳＹＥＣＩＭＲＤＴＮＹＱＦＣＥＶＣＲＬＱＧＦＫＲＭＳＱＬＶＫＤＶＤＬＹＶＡＴＰＥＶＫＥＹＴＧＡＹＳＫＰＳＤＦＴＤＬＥＴＳＳＹＹＮＹＴＹＮＲＮＤＲＬＬＳＧＮＳＫＳＲＦＮＴＮＭＮＧＫＫＩＥＬＲＴＶＩＱＮＩＳＤＫＮＡＲＱＬＫＦＫＭＷＩＫＨＳＤＧＳＶＡＴＤＳＳＧＮＰＬＱＴＶＱＴＦＤＩＰＶＷＮＤＫＡＮＦＷＰＬＧＡＬＤＨＩＫＳＤＦＮＳＧＬＫＳＣＳＬＩＹＱＩＰＳＤＡＱＬＫＳＧＤＴＶＡＦＱＶＬＤＥＮＧＮＶＬＡＤＤＮＴＥＴＱＲＹＴＴＶＳＩＱＹＫＦＥＤＧＳＥＩＰＮＴＡＧＧＴＦＴＶＰＹＧＴＫＬＤＬＴＰＡＫＴＬＹＤＹＥＦＩＫＶＤＧＬＮＫＰＩＶＳＤＧＴＶＶＴＹＹＹＫＮＫＮＥＥＨＴＨＮＬＴＬＶＡＡＫＡＡＴＣＴＴＡＧＮＳＡＹＹＴＣＤＧＣＤＫＷＦＡＤＡＴＧＳＶＥＩＴＤＫＴＳＶＫＩＰＡＰＧＨＴＡＧＴＥＷＫＳＤＤＴＮＨＷＨＥＣＴＶＡＧＣＧＶＩＩＥＳＴＫＳＡＨＴＡＧＥＷＩＶＤＴＰＡＴＡＴＴＡＧＴＫＨＫＥＣＴＶＣＨＲＶＬＥＴＱＰＩＰＳＴＧＴＥＬＫＩＩＡＧＤＮＱＩＹＮＫＡＳＧＳＤＶＴＩＴＣＮＧＤＦＡＫＦＴＧＩＫＶＤＧＳＶＶＤＳＳＮＹＴＡＶＳＧＳＴＶＬＴＬＫＡＳＹＬＧＴＬＴＤＧＳＨＴＩＴＦＶＹＴＤＧＥＡＮＡＮＬＴＶＲＴＡＧＳＧＨＩＨＤＹＧＴＥＷＫＳＮＡＤＮＨＷＨＥＣＮＣＧＤＫＫＤＥＡＡＨＳＦＫＷＶＶＤＫＥＡＴＡＴＫＫＧＳＫＨＥＥＣＫＩＣＧＹＫＲＳＡＶＥＩＰＡＴＧＴＳＴＡＰＴＤＴＴＫＰＮＤＴＴＫＰＧＮＴＮＧＳＥＫＳＰＱＴＧＤＮＳＮＩＦＬＷＦＡＬＬＦＶＳＡＡＧＶＴＧＩＴＡＹＮＫＫＫＫＥＨＡＥ（配列番号４２）

本願で使用する用語「対象」には、ヒト及び非ヒト動物が含まれる。非ヒト動物には、すべての脊椎動物（例えば哺乳類及び非哺乳類）が含まれる。「対象」は、家畜動物（例えばウシ、ブタ、ヒツジ、家禽及びウマ）、又はげっ歯類（例えばラット、マウス）、又は霊長類（例えば類人猿（ａｐｅ）、サル、チンパンジー（ｃｈｉｍｐａｎｚｅｅ）、ゴリラ（ｇｏｒｉｌｌａ）、オランウータン（ｏｒａｎｇｕｔａｎ）、ヒヒ（ｂａｂｏｏｎ））、又は家庭動物（例えば犬や猫）であってもよい。「対象」は、オスであってもメスであってもよく、高齢、成年、青年、小児、又は乳児であってもよい。ヒトの「対象」は、コーカソイド、アフリカ人、アジア人、セム人若しくは他の人種、又は前記人種的背景の混合であってもよい。

本願で使用する用語「タンパク質」、「ポリペプチド」、及び「ペプチド」は互換使用可能な語であり、アミノ酸のポリマーを指す。本願記載のタンパク質、ポリペプチド、又はペプチドは、天然アミノ酸を含有してもよいし、非天然アミノ酸、又はアミノ酸の類似体若しくは模倣体を含有してもよい。本願記載のタンパク質、ポリペプチド、又はペプチドは、当技術分野で公知のあらゆる方法によって得ることができる。例えば天然単離、組換発現、化学合成などであるがこれらに限定されない。

本願で使用する用語「アミノ酸」とは、アミノ基（－ＮＨ_２）及びカルボキシル基（－ＣＯＯＨ）の官能基と、各アミノ酸に特有の側鎖を含有する有機化合物を指す。本願において、アミノ酸の名称は、以下にまとめた標準的な１文字又は３文字の略号で表すこともある。

本願において、アミノ酸配列について用いられるときの「保存的置換」とは、１つのアミノ酸残基を、類似した物理化学的特性の側鎖を有する別のアミノ酸残基によって置換することを指す。例えば、疎水性側鎖を有するアミノ酸残基間（例えばＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、及びＩｌｅ）、中性・親水性側鎖を有するアミノ酸残基間（例えばＣｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、及びＧｌｎ）、酸性側鎖を有するアミノ酸残基間（例えばＡｓｐ、Ｇｌｕ）、塩基性側鎖を有するアミノ酸残基間（例えばＨｉｓ、Ｌｙｓ、及びＡｒｇ）、又は芳香族側鎖を有するアミノ酸残基間（例えばＴｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ）で保存的置換を行うことができる。当技術分野において知られているように、保存的置換では通常、タンパク質の立体構造の有意な変化は起きないため、タンパク質の生物活性が保持される。

本願記載の用語「相同」は、最適にアラインメントされたときに、核酸配列（又はその相補鎖）又はアミノ酸配列が別の配列と少なくとも６０％（例えば、少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、８８％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％）の配列同一性を有することを指す。

アミノ酸配列（又は核酸配列）について用いられるときの「百分率（％）配列同一性」とは、配列アラインメントを行い、かつ同じアミノ酸（又は核酸）の数が最大になるよう必要に応じて間隔を導入した後の候補配列において、前記候補配列のアミノ酸（又は核酸）残基中に占めるリファレンス配列と同じアミノ酸（又は核酸）残基の割合を指す。換言すれば、アミノ酸配列（又は核酸配列）の百分率（％）配列同一性は、比較対象であるリファレンス配列と同じアミノ酸残基（又は塩基）の数を、候補配列又はリファレンス配列（短い方を基準とする）中のアミノ酸残基（又は塩基）の総数で割ることによって計算することができる。前記アミノ酸残基の保存的置換は、同じ残基と考えてもよく、又はそのように考えなくてもよい。当技術分野において開示されているツール、例えばＢＬＡＳＴＮ、ＢＬＡＳＴｐ（米国国立生物工学情報センターのウェブサイト（ＮＣＢＩ）。ＡｌｔｓｃｈｕｌＳ．Ｆ．ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２１５：４０３－４１０（１９９０）；ＳｔｅｐｈｅｎＦ．ｅｔａｌ．，ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．，２５：３３８９－３４０２（１９９７）も参照されたい）、ＣｌｕｓｔａｌＷ２（欧州バイオインフォマティクス研究所のウェブサイト。ＨｉｇｇｉｎｓＤ．Ｇ．ｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：３８３－４０２（１９９６）；ＬａｒｋｉｎＭ．Ａ．ｅｔａｌ．，Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ（Ｏｘｆｏｒｄ，Ｅｎｇｌａｎｄ），２３（２１）：２９４７－８（２００７）も参照されたい）、及び、ＡＬＩＧＮ又はＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを用いて配列のアラインメントを行い、アミノ酸（又は核酸）配列の百分率配列同一性を確定することができる。当業者は、前記ツールのデフォルトパラメータを使用するか、又は、アラインメントの必要に応じ、例えば適切なアルゴリズムを選択するなどしてパラメータを適切に調整することができる。

「単離された」物質は人工的に自然状態から改変されている。仮に、ある「単離された」組成物又は物質が自然界において出現した場合、それは、すでに改変されているか、原始状態から逸脱しているか、又はその両方である。例えば、ある動物の生体内に天然に存在するポリヌクレオチド又はポリペプチドは、「単離された」ものではないが、仮にそのようなポリヌクレオチド又はポリペプチドが、天然の状態で共存する物質から十分に分離され、実質的に純粋な状態で存在するなら、「単離された」と考えられる。「単離された核酸配列」とは、単離された核酸分子の配列を指す。いくつかの実施形態において、「単離されたＩｇＡプロテアーゼトランケート」とは、純度が少なくとも６０％、７０％、７５％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％であるＩｇＡプロテアーゼトランケートを指す。純度は電気泳動（例えばＳＤＳ－ＰＡＧＥ，等電点電気泳動、キャピラリー電気泳動）又はクロマトグラフィー（例えばイオン交換クロマトグラフィー又は逆相ＨＰＬＣ）によって確定される。

本願中の用語「ベクター」とは、遺伝因子がその中に操作可能に挿入され、当該遺伝因子を発現させる（例えば当該遺伝因子によってコードされるタンパク質、ＲＮＡ、若しくはＤＮＡの産生、又は、前記遺伝因子の複製など）運搬ツールを指す。ベクターは宿主細胞の形質転換、形質導入又はトランスフェクションに用いられ、その携帯する遺伝因子を宿主細胞内で発現させる。例えば、ベクターには、プラスミド、ファージミド、コスミド（ｃｏｓｍｉｄ）、人工染色体（例えば酵母人工染色体（ＹＡＣ）、細菌人工染色体（ＢＡＣ）又はＰ１由来人工染色体（ＰＡＣ））、バクテリオファージ（例えばλファージ又はＭ１３ファージ）、及び動物ウイルスなどが含まれる。ベクターは、発現を制御する様々な因子を含有し得る。ここにはプロモーター配列、転写開始配列、エンハンサー配列、選択因子及びレポーター遺伝子が含まれる。また、ベクターはさらに複製開始点を含有し得る。ベクターはさらに、細胞への侵入を補助する成分を含み得る。ここにはウイルス粒子、リポソーム又はタンパク質外殻を含むが、これらに限定されない。ベクターは発現ベクター又はクローニングベクターであってもよい。本願が提供するベクター（例えば発現ベクター）は、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質をコードする核酸配列、前記核酸配列に操作可能に連結された少なくとも１つのプロモーター（例えばＳＶ４０、ＣＭＶ、ＥＦ－１α）、及び少なくとも１つの選択標識を含有する。

特定の疾患、症状、若しくは状態の「治療」若しくは「療法」とは、本願で使用される場合、特定の疾患、症状、若しくは状態を予防若しくは軽減すること、特定の疾患、症状、若しくは状態が発生若しくは進行する速度を下げること、特定の疾患、症状、若しくは状態が発生するリスクを低下させること、特定の疾患、症状、若しくは状態に関連する症状の進行を予防若しくは遅延させること、特定の疾患、症状、若しくは状態に関連する症状を減少若しくは停止させること、特定の疾患、症状、若しくは状態の完全若しくは部分的な改善をもたらすこと、特定の疾患、症状、若しくは状態を治癒させること、又はその組合せを含む。

用語「薬学的に許容される」は、指定のベクター、ビヒクル、希釈剤、賦形剤、及び／又は塩が当該製剤を構成する他成分と、通常は化学的及び／又は物理的に、適合し、かつその受容体と生理学的に適合することを表す。

用語「ＩｇＡ沈着関連疾患」とは、ＩｇＡ免疫グロブリンが凝集性又は非凝集性の形態で対象の組織又は器官に蓄積することに関連する疾患を指す。例えば、ＩｇＡ腎症、疱疹状皮膚炎、ヘノッホ・シェーライン紫斑病（ＩｇＡ血管炎ともいう）、川崎病、紫斑病性腎炎、ＩｇＡ血管炎による腎損傷、ＩｇＡリウマトイド因子陽性の関節リウマチ、ＩｇＡ型抗ＧＢＭ病、又はＩｇＡ型ＡＮＣＡ関連血管炎を含むがこれらに限定されない。

用語「ＩｇＡ腎症」とは、腎臓内のＩｇＡ沈着を特徴とする腎疾患を指す。

ＩｇＡプロテアーゼトランケート
一態様において、本願は、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼの非天然トランケートフラグメントを含むか、又は前記非天然トランケートフラグメントと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）、単離されたＩｇＡプロテアーゼトランケートを提供する。いくつかの実施形態において、前記非天然トランケートフラグメントと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）ＩｇＡプロテアーゼトランケートは、ＩｇＡプロテアーゼの機能又は活性（例えばタンパク質加水分解活性、ＩｇＡを特異的に切断する酵素活性など）を保持している。

本願で使用する用語「トランケート」又は「トランケートフラグメント」とは、野生型ポリペプチドの一方又は両方の末端から１つ又は複数のアミノ酸を除去してなるペプチドを指す。したがって、本願における「トランケート」又は「トランケートフラグメント」に、その対応する野生型ポリペプチドの全長は含まれないが、野生型ポリペプチドのトランケート型に比して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失、挿入、又は修飾などを含んでもよい。例えば、「ＩｇＡプロテアーゼトランケート」又は「ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメント」は、野生型ＩｇＡプロテアーゼの一方又は両方の末端から１つ又は複数のアミノ酸を除去してなるペプチドを含んでもよいし、野生型ＩｇＡプロテアーゼのトランケート型に比して１つ又は複数のアミノ酸が置換、欠失、挿入、又は修飾されたペプチドを含んでもよい。

いくつかの実施形態において、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートは、その対応する野生型ＩｇＡプロテアーゼに比して１つ又は複数のアミノ酸置換、欠失、挿入、又は修飾を有する。例えば、いくつかの実施形態において、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼの非天然トランケートフラグメントを含み、前記非天然トランケートフラグメントは、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼをベースにアミノ酸の置換、欠失、挿入又は修飾が行われ、それにより前記ＩｇＡプロテアーゼトランケートの自己酵素切断機能が喪失又は低下される。

本願で使用する用語「から得られる」及び「から誘導される」は、言及された生物体によって産生される、又は産生され得るタンパク質だけでなく、そのような生物体から単離されたＤＮＡ配列によってコードされ、かつそのようなＤＮＡ配列を有する宿主生物体内で産生されるタンパク質も包含するし、合成された及び／又はｃＤＮＡ由来のＤＮＡ配列によってコードされ、かつ言及されたタンパク質に特有の特徴を有するタンパク質も包含する。例えば、クロストリジウム・ラモーサムから得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼには、クロストリジウム・ラモーサムによって天然に産生されるＩｇＡプロテアーゼも含まれるし、遺伝子工学技術を活用してＩｇＡプロテアーゼをコードする核酸で形質転換された他の宿主細胞（例えば大腸菌）から産生されるＩｇＡプロテアーゼも含まれる。

本願で使用する用語「非天然トランケートフラグメント」とは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼが自然環境下で自己酵素切断されてなるトランケートフラグメントとは異なるアミノ酸配列（例えばアミノ酸の長さが異なったり、アミノ酸の種類が異なるなど）を有するフラグメントを指す。

いくつかの実施形態において、前記アミノ酸の置換、欠失、挿入、又は修飾は、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼの天然自己酵素切断部位で発生する。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸の置換、欠失、挿入、又は修飾は、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼの天然自己酵素切断部位の５部位以内上流（例えば、前記天然自己酵素切断部位の１部位、２部位、３部位、４部位又は５部位上流）で発生する。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸の置換、欠失、挿入、又は修飾は、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼの天然自己酵素切断部位の５部位以内下流（例えば、前記天然自己酵素切断部位の１部位、２部位、３部位、４部位又は５部位下流）で発生する。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸の置換、欠失、挿入、又は修飾は、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼの天然自己酵素切断部位の５部位上流（例えば、前記天然自己酵素切断部位の１部位、２部位、３部位、４部位又は５部位上流）及び５部位以内下流（例えば、前記天然自己酵素切断部位の１部位、２部位、３部位、４部位又は５部位下流）で発生する。

いくつかの実施形態において、前記非天然トランケートフラグメントは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端トランケートフラグメント又はＣ末端トランケートフラグメントである。

本願で使用する用語「Ｎ末端トランケートフラグメント」とは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼのアミノ末端を含むアミノ酸配列のトランケートフラグメントを指す。「アミノ末端」の開始位置は、クロストリジウム・ラモーサムの野生型ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列のアミノ末端近傍の任意の位置であってよい。例えば、アミノ末端から数えて１位であってもよく、アミノ末端から数えて他の位置であってもよい。また例えば、仮に野生型ＩｇＡプロテアーゼの全長のアミノ酸配列が１０００個のアミノ酸からなる場合、そのＮ末端トランケートフラグメントのアミノ末端開始位置は、そのアミノ酸配列のアミノ末端から１位～５００位の間の任意の位置であってよい。

本願で使用する用語「Ｃ末端トランケートフラグメント」とは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼのカルボキシル末端を含むアミノ酸配列のトランケートフラグメントを指す。「カルボキシル末端」の終了位置は、クロストリジウム・ラモーサムの野生型ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列のカルボキシル末端近傍の任意の位置であってよい。例えば、カルボキシル末端から数えて１位であってもよく、カルボキシル末端から数えて他の位置であってもよい。また例えば、仮に野生型ＩｇＡプロテアーゼの全長のアミノ酸配列が１０００個のアミノ酸からなる場合、そのＣ末端トランケートフラグメントのカルボキシル末端終了位置は、そのアミノ酸配列のアミノ末端から５０１位～１０００位の間の任意の位置であってよい。

クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ属の多くの菌種（ｓｐｅｃｉｅｓ）の１つであり、例えばＡＫ１８３、ＶＰＩ－０４９６Ａ、ＮＣＴＣ１０４７４株など多種の菌株（ｓｔｒａｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）は、ＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍＡＫ１８３株である。

いくつかの実施形態において、前記Ｎ末端トランケートフラグメントは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端側３１位から少なくとも７６０個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含むか、又は前記ポリペプチドフラグメントと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）Ｎ末端トランケートフラグメントは、ＩｇＡプロテアーゼの機能又は活性（例えばタンパク質加水分解活性、ＩｇＡを特異的に切断する酵素活性など）を保持している。

いくつかの実施形態において、本願記載のＩｇＡプロテアーゼの非天然トランケートフラグメントは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端側３３５位から少なくとも４５６個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含むか、又は前記ポリペプチドフラグメントと少なくとも９０％若しくは少なくとも９５％の配列同一性（例えば、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性）を有する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントと少なくとも９０％若しくは少なくとも９５％の配列同一性（例えば、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性）を有する非天然トランケートフラグメントは、ＩｇＡプロテアーゼの機能又は活性（例えばタンパク質加水分解活性、ＩｇＡを特異的に切断する酵素活性など）を保持している。

いくつかの実施形態において、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は配列番号１に示すとおりである。

特に説明しない限り、本願で言及されるＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸部位は野生型ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼ（そのアミノ酸配列は配列番号１のとおり）のアミノ酸部位と対応する。例えば、本願で言及されるＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼの７９０位は、配列番号１の７９０番目の部位と対応する。特に説明しない限り、本願で言及されるＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼトランケートの命名規則は、「ＡＫ１８３（配列番号１に対応した開始点－配列番号１に対応した終了点）」である。例えば、ＡＫ１８３（３１－７９０）とは、配列番号１の３１位～７９０位アミノ酸によって形成されるＩｇＡプロテアーゼトランケートである。

いくつかの実施形態において、出願記載のＩｇＡプロテアーゼの天然自己酵素切断部位は、配列番号１に示すアミノ酸配列の７３０位～８４０位の間である。いくつかの実施形態において、本願記載のＩｇＡプロテアーゼの天然自己酵素切断部位は、配列番号１に示すアミノ酸配列の７１０位～８３０位の間、７２０位～８２０位の間、７３０位～８１０位の間、７４０位～８００位の間、７５０位～７９０位の間、７９１位～７８０位の間又は７９２位～７９７位の間である。いくつかの実施形態において、前記天然自己酵素切断部位は、配列番号１に示すアミノ酸配列の７９０位、７９１位、７９２位、７９３位、７９４位、７９５位、７９６位、７９７位、７９８位、７９９位、又は８００位である。

いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から少なくとも７６０個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。例えば、いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から少なくとも７６１個、少なくとも７６２個、少なくとも７６３個、少なくとも７６４個、少なくとも７６５個、少なくとも７６６個、少なくとも７６７個、少なくとも７６８個、少なくとも７６９個、少なくとも７７０個、少なくとも７７１個、少なくとも７７２個、少なくとも７７３個、少なくとも７７４個、少なくとも７７５個、少なくとも７７６個、少なくとも７７７個、少なくとも７７８個、少なくとも７７９個、少なくとも７８０個、少なくとも７８１個、少なくとも７８２個、少なくとも７８３個、少なくとも７８４個、少なくとも７８５個、少なくとも７８６個、少なくとも７８７個、少なくとも７８８個、少なくとも７８９個、少なくとも７９０個、少なくとも７９１個、少なくとも７９２個、少なくとも７９３個、少なくとも７９４個、少なくとも７９５個、少なくとも７９６個、少なくとも７９７個、少なくとも７９８個、少なくとも７９９個、少なくとも８００個、少なくとも８０１個、少なくとも８０２個、少なくとも８０３個、少なくとも８０４個、少なくとも８０５個、少なくとも８０６個、少なくとも８０７個、少なくとも８０８個、少なくとも８０９個、少なくとも８１０個、少なくとも８５０個、少なくとも８６０個、少なくとも８７０個、少なくとも８８０個、少なくとも８９０個、少なくとも９００個、少なくとも９１０個、少なくとも９２０個、少なくとも９３０個、少なくとも９４０個、少なくとも９５０個、少なくとも９６０個、少なくとも９７０個、少なくとも９８０個、少なくとも９９０個、少なくとも１０００個、少なくとも１０５０個、少なくとも１１００個、少なくとも１１５０個、少なくとも１２００個の連続するアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。

いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から７６０個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から７６１個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から７６２個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から７６８個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から７７７個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から７８６個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から８０３個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。

いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～７９８位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～８０７位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～８１６位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～８３３位アミノ酸、及びそれらと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）ポリペプチドフラグメント、からなる群より選択されるポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）ＩｇＡプロテアーゼトランケートは、ＩｇＡプロテアーゼの機能又は活性（例えばタンパク質加水分解活性、ＩｇＡを特異的に切断する酵素活性など）を保持している。

いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位から少なくとも４５６個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。例えば、いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位から少なくとも４５７個、少なくとも４５８個、少なくとも４５９個、少なくとも４６０個、少なくとも４６１個、少なくとも４６２個、少なくとも４６３個、少なくとも４６４個、少なくとも４６５個、少なくとも４６６個、少なくとも４６７個、少なくとも４６８個、少なくとも４６９個、少なくとも４７０個、少なくとも４７１個、少なくとも４７２個、少なくとも４７３個、少なくとも４７４個、少なくとも４７５個、少なくとも４７６個、少なくとも４７７個、少なくとも４７８個、少なくとも４７９個、少なくとも４８０個、少なくとも４８１個、少なくとも４８２個、少なくとも４８３個、少なくとも４８４個、少なくとも４８５個、少なくとも４８６個、少なくとも４８７個、少なくとも４８８個、少なくとも４８９個、少なくとも４９０個、少なくとも４９１個、少なくとも４９２個、少なくとも４９３個、少なくとも４９４個、少なくとも４９５個、少なくとも４９６個、少なくとも４９７個、少なくとも４９８個、少なくとも４９９個、少なくとも５００個、少なくとも５５０個、少なくとも６００個、少なくとも６５０個、少なくとも７００個、少なくとも７５０個、少なくとも８００個、少なくとも８５０個又は少なくとも９００個の連続するアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む。

いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位～７９１位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～７９１位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３０位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３０位～７９１位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３０位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～８１６位アミノ酸、及びそれらと少なくとも９０％又は少なくとも９５％の配列同一性（例えば、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性）を有するポリペプチドフラグメント、からなる群より選択されるポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントと少なくとも９０％若しくは少なくとも９５％の配列同一性（例えば、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性）を有するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、ＩｇＡプロテアーゼの機能又は活性（例えばタンパク質加水分解活性、ＩｇＡを特異的に切断する酵素活性など）を保持している。

いくつかの実施形態において、本願は、配列番号１４で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３１－７９０）トランケートを提供する。
ＡＳＫＰＤＩＫＶＧＤＹＶＫＭＧＶＹＮＮＡＳＩＬＷＲＣＶＳＩＤＮＮＧＰＬＭＬＡＤＫＩＶＤＴＬＡＹＤＡＫＴＮＤＮＳＮＳＫＳＨＳＲＳＹＫＲＤＤＹＧＳＮＹＷＫＤＳＮＭＲＳＷＬＮＳＴＡＡＥＧＫＶＤＷＬＣＧＮＰＰＫＤＧＹＶＳＧＶＧＡＹＮＥＫＡＧＦＬＮＡＦＳＫＳＥＩＡＡＭＫＴＶＴＱＲＳＬＶＳＨＰＥＹＮＫＧＩＶＤＧＤＡＮＳＤＬＬＹＹＴＤＩＳＥＡＶＡＮＹＤＳＳＹＦＥＴＴＴＥＫＶＦＬＬＤＶＫＱＡＮＡＶＷＫＮＬＫＧＹＹＶＡＹＮＮＤＧＭＡＷＰＹＷＬＲＴＰＶＴＤＣＮＨＤＭＲＹＩＳＳＳＧＱＶＧＲＹＡＰＷＹＳＤＬＧＶＲＰＡＦＹＬＤＳＥＹＦＶＴＴＳＧＳＧＳＱＳＳＰＹＩＧＳＡＰＮＫＱＥＤＤＹＴＩＳＥＰＡＥＤＡＮＰＤＷＮＶＳＴＥＱＳＩＱＬＴＬＧＰＷＹＳＮＤＧＫＹＳＮＰＴＩＰＶＹＴＩＱＫＴＲＳＤＴＥＮＭＶＶＶＶＣＧＥＧＹＴＫＳＱＱＧＫＦＩＮＤＶＫＲＬＷＱＤＡＭＫＹＥＰＹＲＳＹＡＤＲＦＮＶＹＡＬＣＴＡＳＥＳＴＦＤＮＧＧＳＴＦＦＤＶＩＶＤＫＹＮＳＰＶＩＳＮＮＬＨＧＳＱＷＫＮＨＩＦＥＲＣＩＧＰＥＦＩＥＫＩＨＤＡＨＩＫＫＫＣＤＰＮＴＩＰＳＧＳＥＹＥＰＹＹＹＶＨＤＹＩＡＱＦＡＭＶＶＮＴＫＳＤＦＧＧＡＹＮＮＲＥＹＧＦＨＹＦＩＳＰＳＤＳＹＲＡＳＫＴＦＡＨＥＦＧＨＧＬＬＧＬＧＤＥＹＳＮＧＹＬＬＤＤＫＥＬＫＳＬＮＬＳＳＶＥＤＰＥＫＩＫＷＲＱＬＬＧＦＲＮＴＹＴＣＲＮＡＹＧＳＫＭＬＶＳＳＹＥＣＩＭＲＤＴＮＹＱＦＣＥＶＣＲＬＱＧＦＫＲＭＳＱＬＶＫＤＶＤＬＹＶＡＴＰＥＶＫＥＹＴＧＡＹＳＫＰＳＤＦＴＤＬＥＴＳＳＹＹＮＹＴＹＮＲＮＤＲＬＬＳＧＮＳＫＳＲＦＮＴＮＭＮＧＫＫＩＥＬＲＴＶＩＱＮＩＳＤＫＮＡＲＱＬＫＦＫＭＷＩＫＨＳＤＧＳＶＡＴＤＳＳＧＮＰＬＱＴＶＱＴＦＤＩＰＶＷＮＤＫＡＮＦＷＰＬＧＡＬＤＨＩＫＳＤＦＮＳＧＬＫＳＣＳＬＩＹＱＩＰＳＤＡＱＬＫＳＧＤＴＶＡＦＱ（配列番号１４）

いくつかの実施形態において、本願は、配列番号１５で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３１－７９１）トランケートを提供する。
ＡＳＫＰＤＩＫＶＧＤＹＶＫＭＧＶＹＮＮＡＳＩＬＷＲＣＶＳＩＤＮＮＧＰＬＭＬＡＤＫＩＶＤＴＬＡＹＤＡＫＴＮＤＮＳＮＳＫＳＨＳＲＳＹＫＲＤＤＹＧＳＮＹＷＫＤＳＮＭＲＳＷＬＮＳＴＡＡＥＧＫＶＤＷＬＣＧＮＰＰＫＤＧＹＶＳＧＶＧＡＹＮＥＫＡＧＦＬＮＡＦＳＫＳＥＩＡＡＭＫＴＶＴＱＲＳＬＶＳＨＰＥＹＮＫＧＩＶＤＧＤＡＮＳＤＬＬＹＹＴＤＩＳＥＡＶＡＮＹＤＳＳＹＦＥＴＴＴＥＫＶＦＬＬＤＶＫＱＡＮＡＶＷＫＮＬＫＧＹＹＶＡＹＮＮＤＧＭＡＷＰＹＷＬＲＴＰＶＴＤＣＮＨＤＭＲＹＩＳＳＳＧＱＶＧＲＹＡＰＷＹＳＤＬＧＶＲＰＡＦＹＬＤＳＥＹＦＶＴＴＳＧＳＧＳＱＳＳＰＹＩＧＳＡＰＮＫＱＥＤＤＹＴＩＳＥＰＡＥＤＡＮＰＤＷＮＶＳＴＥＱＳＩＱＬＴＬＧＰＷＹＳＮＤＧＫＹＳＮＰＴＩＰＶＹＴＩＱＫＴＲＳＤＴＥＮＭＶＶＶＶＣＧＥＧＹＴＫＳＱＱＧＫＦＩＮＤＶＫＲＬＷＱＤＡＭＫＹＥＰＹＲＳＹＡＤＲＦＮＶＹＡＬＣＴＡＳＥＳＴＦＤＮＧＧＳＴＦＦＤＶＩＶＤＫＹＮＳＰＶＩＳＮＮＬＨＧＳＱＷＫＮＨＩＦＥＲＣＩＧＰＥＦＩＥＫＩＨＤＡＨＩＫＫＫＣＤＰＮＴＩＰＳＧＳＥＹＥＰＹＹＹＶＨＤＹＩＡＱＦＡＭＶＶＮＴＫＳＤＦＧＧＡＹＮＮＲＥＹＧＦＨＹＦＩＳＰＳＤＳＹＲＡＳＫＴＦＡＨＥＦＧＨＧＬＬＧＬＧＤＥＹＳＮＧＹＬＬＤＤＫＥＬＫＳＬＮＬＳＳＶＥＤＰＥＫＩＫＷＲＱＬＬＧＦＲＮＴＹＴＣＲＮＡＹＧＳＫＭＬＶＳＳＹＥＣＩＭＲＤＴＮＹＱＦＣＥＶＣＲＬＱＧＦＫＲＭＳＱＬＶＫＤＶＤＬＹＶＡＴＰＥＶＫＥＹＴＧＡＹＳＫＰＳＤＦＴＤＬＥＴＳＳＹＹＮＹＴＹＮＲＮＤＲＬＬＳＧＮＳＫＳＲＦＮＴＮＭＮＧＫＫＩＥＬＲＴＶＩＱＮＩＳＤＫＮＡＲＱＬＫＦＫＭＷＩＫＨＳＤＧＳＶＡＴＤＳＳＧＮＰＬＱＴＶＱＴＦＤＩＰＶＷＮＤＫＡＮＦＷＰＬＧＡＬＤＨＩＫＳＤＦＮＳＧＬＫＳＣＳＬＩＹＱＩＰＳＤＡＱＬＫＳＧＤＴＶＡＦＱＶ（配列番号１５）

いくつかの実施形態において、本願は、配列番号１６で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３１－７９２）トランケートを提供する。
ＡＳＫＰＤＩＫＶＧＤＹＶＫＭＧＶＹＮＮＡＳＩＬＷＲＣＶＳＩＤＮＮＧＰＬＭＬＡＤＫＩＶＤＴＬＡＹＤＡＫＴＮＤＮＳＮＳＫＳＨＳＲＳＹＫＲＤＤＹＧＳＮＹＷＫＤＳＮＭＲＳＷＬＮＳＴＡＡＥＧＫＶＤＷＬＣＧＮＰＰＫＤＧＹＶＳＧＶＧＡＹＮＥＫＡＧＦＬＮＡＦＳＫＳＥＩＡＡＭＫＴＶＴＱＲＳＬＶＳＨＰＥＹＮＫＧＩＶＤＧＤＡＮＳＤＬＬＹＹＴＤＩＳＥＡＶＡＮＹＤＳＳＹＦＥＴＴＴＥＫＶＦＬＬＤＶＫＱＡＮＡＶＷＫＮＬＫＧＹＹＶＡＹＮＮＤＧＭＡＷＰＹＷＬＲＴＰＶＴＤＣＮＨＤＭＲＹＩＳＳＳＧＱＶＧＲＹＡＰＷＹＳＤＬＧＶＲＰＡＦＹＬＤＳＥＹＦＶＴＴＳＧＳＧＳＱＳＳＰＹＩＧＳＡＰＮＫＱＥＤＤＹＴＩＳＥＰＡＥＤＡＮＰＤＷＮＶＳＴＥＱＳＩＱＬＴＬＧＰＷＹＳＮＤＧＫＹＳＮＰＴＩＰＶＹＴＩＱＫＴＲＳＤＴＥＮＭＶＶＶＶＣＧＥＧＹＴＫＳＱＱＧＫＦＩＮＤＶＫＲＬＷＱＤＡＭＫＹＥＰＹＲＳＹＡＤＲＦＮＶＹＡＬＣＴＡＳＥＳＴＦＤＮＧＧＳＴＦＦＤＶＩＶＤＫＹＮＳＰＶＩＳＮＮＬＨＧＳＱＷＫＮＨＩＦＥＲＣＩＧＰＥＦＩＥＫＩＨＤＡＨＩＫＫＫＣＤＰＮＴＩＰＳＧＳＥＹＥＰＹＹＹＶＨＤＹＩＡＱＦＡＭＶＶＮＴＫＳＤＦＧＧＡＹＮＮＲＥＹＧＦＨＹＦＩＳＰＳＤＳＹＲＡＳＫＴＦＡＨＥＦＧＨＧＬＬＧＬＧＤＥＹＳＮＧＹＬＬＤＤＫＥＬＫＳＬＮＬＳＳＶＥＤＰＥＫＩＫＷＲＱＬＬＧＦＲＮＴＹＴＣＲＮＡＹＧＳＫＭＬＶＳＳＹＥＣＩＭＲＤＴＮＹＱＦＣＥＶＣＲＬＱＧＦＫＲＭＳＱＬＶＫＤＶＤＬＹＶＡＴＰＥＶＫＥＹＴＧＡＹＳＫＰＳＤＦＴＤＬＥＴＳＳＹＹＮＹＴＹＮＲＮＤＲＬＬＳＧＮＳＫＳＲＦＮＴＮＭＮＧＫＫＩＥＬＲＴＶＩＱＮＩＳＤＫＮＡＲＱＬＫＦＫＭＷＩＫＨＳＤＧＳＶＡＴＤＳＳＧＮＰＬＱＴＶＱＴＦＤＩＰＶＷＮＤＫＡＮＦＷＰＬＧＡＬＤＨＩＫＳＤＦＮＳＧＬＫＳＣＳＬＩＹＱＩＰＳＤＡＱＬＫＳＧＤＴＶＡＦＱＶＬ（配列番号１６）

いくつかの実施形態において、本願は、配列番号１７で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３１－７９８）トランケートを提供する。
ＡＳＫＰＤＩＫＶＧＤＹＶＫＭＧＶＹＮＮＡＳＩＬＷＲＣＶＳＩＤＮＮＧＰＬＭＬＡＤＫＩＶＤＴＬＡＹＤＡＫＴＮＤＮＳＮＳＫＳＨＳＲＳＹＫＲＤＤＹＧＳＮＹＷＫＤＳＮＭＲＳＷＬＮＳＴＡＡＥＧＫＶＤＷＬＣＧＮＰＰＫＤＧＹＶＳＧＶＧＡＹＮＥＫＡＧＦＬＮＡＦＳＫＳＥＩＡＡＭＫＴＶＴＱＲＳＬＶＳＨＰＥＹＮＫＧＩＶＤＧＤＡＮＳＤＬＬＹＹＴＤＩＳＥＡＶＡＮＹＤＳＳＹＦＥＴＴＴＥＫＶＦＬＬＤＶＫＱＡＮＡＶＷＫＮＬＫＧＹＹＶＡＹＮＮＤＧＭＡＷＰＹＷＬＲＴＰＶＴＤＣＮＨＤＭＲＹＩＳＳＳＧＱＶＧＲＹＡＰＷＹＳＤＬＧＶＲＰＡＦＹＬＤＳＥＹＦＶＴＴＳＧＳＧＳＱＳＳＰＹＩＧＳＡＰＮＫＱＥＤＤＹＴＩＳＥＰＡＥＤＡＮＰＤＷＮＶＳＴＥＱＳＩＱＬＴＬＧＰＷＹＳＮＤＧＫＹＳＮＰＴＩＰＶＹＴＩＱＫＴＲＳＤＴＥＮＭＶＶＶＶＣＧＥＧＹＴＫＳＱＱＧＫＦＩＮＤＶＫＲＬＷＱＤＡＭＫＹＥＰＹＲＳＹＡＤＲＦＮＶＹＡＬＣＴＡＳＥＳＴＦＤＮＧＧＳＴＦＦＤＶＩＶＤＫＹＮＳＰＶＩＳＮＮＬＨＧＳＱＷＫＮＨＩＦＥＲＣＩＧＰＥＦＩＥＫＩＨＤＡＨＩＫＫＫＣＤＰＮＴＩＰＳＧＳＥＹＥＰＹＹＹＶＨＤＹＩＡＱＦＡＭＶＶＮＴＫＳＤＦＧＧＡＹＮＮＲＥＹＧＦＨＹＦＩＳＰＳＤＳＹＲＡＳＫＴＦＡＨＥＦＧＨＧＬＬＧＬＧＤＥＹＳＮＧＹＬＬＤＤＫＥＬＫＳＬＮＬＳＳＶＥＤＰＥＫＩＫＷＲＱＬＬＧＦＲＮＴＹＴＣＲＮＡＹＧＳＫＭＬＶＳＳＹＥＣＩＭＲＤＴＮＹＱＦＣＥＶＣＲＬＱＧＦＫＲＭＳＱＬＶＫＤＶＤＬＹＶＡＴＰＥＶＫＥＹＴＧＡＹＳＫＰＳＤＦＴＤＬＥＴＳＳＹＹＮＹＴＹＮＲＮＤＲＬＬＳＧＮＳＫＳＲＦＮＴＮＭＮＧＫＫＩＥＬＲＴＶＩＱＮＩＳＤＫＮＡＲＱＬＫＦＫＭＷＩＫＨＳＤＧＳＶＡＴＤＳＳＧＮＰＬＱＴＶＱＴＦＤＩＰＶＷＮＤＫＡＮＦＷＰＬＧＡＬＤＨＩＫＳＤＦＮＳＧＬＫＳＣＳＬＩＹＱＩＰＳＤＡＱＬＫＳＧＤＴＶＡＦＱＶＬＤＥＮＧＮＶ（配列番号１７）

いくつかの実施形態において、本願は、配列番号１８で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３１－８０７）トランケートを提供する。
ＡＳＫＰＤＩＫＶＧＤＹＶＫＭＧＶＹＮＮＡＳＩＬＷＲＣＶＳＩＤＮＮＧＰＬＭＬＡＤＫＩＶＤＴＬＡＹＤＡＫＴＮＤＮＳＮＳＫＳＨＳＲＳＹＫＲＤＤＹＧＳＮＹＷＫＤＳＮＭＲＳＷＬＮＳＴＡＡＥＧＫＶＤＷＬＣＧＮＰＰＫＤＧＹＶＳＧＶＧＡＹＮＥＫＡＧＦＬＮＡＦＳＫＳＥＩＡＡＭＫＴＶＴＱＲＳＬＶＳＨＰＥＹＮＫＧＩＶＤＧＤＡＮＳＤＬＬＹＹＴＤＩＳＥＡＶＡＮＹＤＳＳＹＦＥＴＴＴＥＫＶＦＬＬＤＶＫＱＡＮＡＶＷＫＮＬＫＧＹＹＶＡＹＮＮＤＧＭＡＷＰＹＷＬＲＴＰＶＴＤＣＮＨＤＭＲＹＩＳＳＳＧＱＶＧＲＹＡＰＷＹＳＤＬＧＶＲＰＡＦＹＬＤＳＥＹＦＶＴＴＳＧＳＧＳＱＳＳＰＹＩＧＳＡＰＮＫＱＥＤＤＹＴＩＳＥＰＡＥＤＡＮＰＤＷＮＶＳＴＥＱＳＩＱＬＴＬＧＰＷＹＳＮＤＧＫＹＳＮＰＴＩＰＶＹＴＩＱＫＴＲＳＤＴＥＮＭＶＶＶＶＣＧＥＧＹＴＫＳＱＱＧＫＦＩＮＤＶＫＲＬＷＱＤＡＭＫＹＥＰＹＲＳＹＡＤＲＦＮＶＹＡＬＣＴＡＳＥＳＴＦＤＮＧＧＳＴＦＦＤＶＩＶＤＫＹＮＳＰＶＩＳＮＮＬＨＧＳＱＷＫＮＨＩＦＥＲＣＩＧＰＥＦＩＥＫＩＨＤＡＨＩＫＫＫＣＤＰＮＴＩＰＳＧＳＥＹＥＰＹＹＹＶＨＤＹＩＡＱＦＡＭＶＶＮＴＫＳＤＦＧＧＡＹＮＮＲＥＹＧＦＨＹＦＩＳＰＳＤＳＹＲＡＳＫＴＦＡＨＥＦＧＨＧＬＬＧＬＧＤＥＹＳＮＧＹＬＬＤＤＫＥＬＫＳＬＮＬＳＳＶＥＤＰＥＫＩＫＷＲＱＬＬＧＦＲＮＴＹＴＣＲＮＡＹＧＳＫＭＬＶＳＳＹＥＣＩＭＲＤＴＮＹＱＦＣＥＶＣＲＬＱＧＦＫＲＭＳＱＬＶＫＤＶＤＬＹＶＡＴＰＥＶＫＥＹＴＧＡＹＳＫＰＳＤＦＴＤＬＥＴＳＳＹＹＮＹＴＹＮＲＮＤＲＬＬＳＧＮＳＫＳＲＦＮＴＮＭＮＧＫＫＩＥＬＲＴＶＩＱＮＩＳＤＫＮＡＲＱＬＫＦＫＭＷＩＫＨＳＤＧＳＶＡＴＤＳＳＧＮＰＬＱＴＶＱＴＦＤＩＰＶＷＮＤＫＡＮＦＷＰＬＧＡＬＤＨＩＫＳＤＦＮＳＧＬＫＳＣＳＬＩＹＱＩＰＳＤＡＱＬＫＳＧＤＴＶＡＦＱＶＬＤＥＮＧＮＶＬＡＤＤＮＴＥＴＱ（配列番号１８）

いくつかの実施形態において、本願は、配列番号１９で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３１－８１６）トランケートを提供する。
ＡＳＫＰＤＩＫＶＧＤＹＶＫＭＧＶＹＮＮＡＳＩＬＷＲＣＶＳＩＤＮＮＧＰＬＭＬＡＤＫＩＶＤＴＬＡＹＤＡＫＴＮＤＮＳＮＳＫＳＨＳＲＳＹＫＲＤＤＹＧＳＮＹＷＫＤＳＮＭＲＳＷＬＮＳＴＡＡＥＧＫＶＤＷＬＣＧＮＰＰＫＤＧＹＶＳＧＶＧＡＹＮＥＫＡＧＦＬＮＡＦＳＫＳＥＩＡＡＭＫＴＶＴＱＲＳＬＶＳＨＰＥＹＮＫＧＩＶＤＧＤＡＮＳＤＬＬＹＹＴＤＩＳＥＡＶＡＮＹＤＳＳＹＦＥＴＴＴＥＫＶＦＬＬＤＶＫＱＡＮＡＶＷＫＮＬＫＧＹＹＶＡＹＮＮＤＧＭＡＷＰＹＷＬＲＴＰＶＴＤＣＮＨＤＭＲＹＩＳＳＳＧＱＶＧＲＹＡＰＷＹＳＤＬＧＶＲＰＡＦＹＬＤＳＥＹＦＶＴＴＳＧＳＧＳＱＳＳＰＹＩＧＳＡＰＮＫＱＥＤＤＹＴＩＳＥＰＡＥＤＡＮＰＤＷＮＶＳＴＥＱＳＩＱＬＴＬＧＰＷＹＳＮＤＧＫＹＳＮＰＴＩＰＶＹＴＩＱＫＴＲＳＤＴＥＮＭＶＶＶＶＣＧＥＧＹＴＫＳＱＱＧＫＦＩＮＤＶＫＲＬＷＱＤＡＭＫＹＥＰＹＲＳＹＡＤＲＦＮＶＹＡＬＣＴＡＳＥＳＴＦＤＮＧＧＳＴＦＦＤＶＩＶＤＫＹＮＳＰＶＩＳＮＮＬＨＧＳＱＷＫＮＨＩＦＥＲＣＩＧＰＥＦＩＥＫＩＨＤＡＨＩＫＫＫＣＤＰＮＴＩＰＳＧＳＥＹＥＰＹＹＹＶＨＤＹＩＡＱＦＡＭＶＶＮＴＫＳＤＦＧＧＡＹＮＮＲＥＹＧＦＨＹＦＩＳＰＳＤＳＹＲＡＳＫＴＦＡＨＥＦＧＨＧＬＬＧＬＧＤＥＹＳＮＧＹＬＬＤＤＫＥＬＫＳＬＮＬＳＳＶＥＤＰＥＫＩＫＷＲＱＬＬＧＦＲＮＴＹＴＣＲＮＡＹＧＳＫＭＬＶＳＳＹＥＣＩＭＲＤＴＮＹＱＦＣＥＶＣＲＬＱＧＦＫＲＭＳＱＬＶＫＤＶＤＬＹＶＡＴＰＥＶＫＥＹＴＧＡＹＳＫＰＳＤＦＴＤＬＥＴＳＳＹＹＮＹＴＹＮＲＮＤＲＬＬＳＧＮＳＫＳＲＦＮＴＮＭＮＧＫＫＩＥＬＲＴＶＩＱＮＩＳＤＫＮＡＲＱＬＫＦＫＭＷＩＫＨＳＤＧＳＶＡＴＤＳＳＧＮＰＬＱＴＶＱＴＦＤＩＰＶＷＮＤＫＡＮＦＷＰＬＧＡＬＤＨＩＫＳＤＦＮＳＧＬＫＳＣＳＬＩＹＱＩＰＳＤＡＱＬＫＳＧＤＴＶＡＦＱＶＬＤＥＮＧＮＶＬＡＤＤＮＴＥＴＱＲＹＴＴＶＳＩＱＹ（配列番号１９）

いくつかの実施形態において、本願は、配列番号２０で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３１－８３３）トランケートを提供する。
ＡＳＫＰＤＩＫＶＧＤＹＶＫＭＧＶＹＮＮＡＳＩＬＷＲＣＶＳＩＤＮＮＧＰＬＭＬＡＤＫＩＶＤＴＬＡＹＤＡＫＴＮＤＮＳＮＳＫＳＨＳＲＳＹＫＲＤＤＹＧＳＮＹＷＫＤＳＮＭＲＳＷＬＮＳＴＡＡＥＧＫＶＤＷＬＣＧＮＰＰＫＤＧＹＶＳＧＶＧＡＹＮＥＫＡＧＦＬＮＡＦＳＫＳＥＩＡＡＭＫＴＶＴＱＲＳＬＶＳＨＰＥＹＮＫＧＩＶＤＧＤＡＮＳＤＬＬＹＹＴＤＩＳＥＡＶＡＮＹＤＳＳＹＦＥＴＴＴＥＫＶＦＬＬＤＶＫＱＡＮＡＶＷＫＮＬＫＧＹＹＶＡＹＮＮＤＧＭＡＷＰＹＷＬＲＴＰＶＴＤＣＮＨＤＭＲＹＩＳＳＳＧＱＶＧＲＹＡＰＷＹＳＤＬＧＶＲＰＡＦＹＬＤＳＥＹＦＶＴＴＳＧＳＧＳＱＳＳＰＹＩＧＳＡＰＮＫＱＥＤＤＹＴＩＳＥＰＡＥＤＡＮＰＤＷＮＶＳＴＥＱＳＩＱＬＴＬＧＰＷＹＳＮＤＧＫＹＳＮＰＴＩＰＶＹＴＩＱＫＴＲＳＤＴＥＮＭＶＶＶＶＣＧＥＧＹＴＫＳＱＱＧＫＦＩＮＤＶＫＲＬＷＱＤＡＭＫＹＥＰＹＲＳＹＡＤＲＦＮＶＹＡＬＣＴＡＳＥＳＴＦＤＮＧＧＳＴＦＦＤＶＩＶＤＫＹＮＳＰＶＩＳＮＮＬＨＧＳＱＷＫＮＨＩＦＥＲＣＩＧＰＥＦＩＥＫＩＨＤＡＨＩＫＫＫＣＤＰＮＴＩＰＳＧＳＥＹＥＰＹＹＹＶＨＤＹＩＡＱＦＡＭＶＶＮＴＫＳＤＦＧＧＡＹＮＮＲＥＹＧＦＨＹＦＩＳＰＳＤＳＹＲＡＳＫＴＦＡＨＥＦＧＨＧＬＬＧＬＧＤＥＹＳＮＧＹＬＬＤＤＫＥＬＫＳＬＮＬＳＳＶＥＤＰＥＫＩＫＷＲＱＬＬＧＦＲＮＴＹＴＣＲＮＡＹＧＳＫＭＬＶＳＳＹＥＣＩＭＲＤＴＮＹＱＦＣＥＶＣＲＬＱＧＦＫＲＭＳＱＬＶＫＤＶＤＬＹＶＡＴＰＥＶＫＥＹＴＧＡＹＳＫＰＳＤＦＴＤＬＥＴＳＳＹＹＮＹＴＹＮＲＮＤＲＬＬＳＧＮＳＫＳＲＦＮＴＮＭＮＧＫＫＩＥＬＲＴＶＩＱＮＩＳＤＫＮＡＲＱＬＫＦＫＭＷＩＫＨＳＤＧＳＶＡＴＤＳＳＧＮＰＬＱＴＶＱＴＦＤＩＰＶＷＮＤＫＡＮＦＷＰＬＧＡＬＤＨＩＫＳＤＦＮＳＧＬＫＳＣＳＬＩＹＱＩＰＳＤＡＱＬＫＳＧＤＴＶＡＦＱＶＬＤＥＮＧＮＶＬＡＤＤＮＴＥＴＱＲＹＴＴＶＳＩＱＹＫＦＥＤＧＳＥＩＰＮＴＡＧＧＴＦＴ（配列番号２０）

いくつかの実施形態において、本願は、配列番号４３で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（２８５－７９０）トランケートを提供する。いくつかの実施形態において、本願は、配列番号４４で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（２８５－７９１）トランケートを提供する。いくつかの実施形態において、本願は、配列番号４５で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（２８５－７９２）トランケートを提供する。いくつかの実施形態において、本願は、配列番号４６で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（２８５－８１６）トランケートを提供する。いくつかの実施形態において、本願は、配列番号４７で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３３０－７９０）トランケートを提供する。いくつかの実施形態において、本願は、配列番号４８で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３３０－７９１）トランケートを提供する。いくつかの実施形態において、本願は、配列番号４９で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３３０－７９２）トランケートを提供する。いくつかの実施形態において、本願は、配列番号５０で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３３５－７９０）トランケートを提供する。いくつかの実施形態において、本願は、配列番号５１で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３３５－７９１）トランケートを提供する。いくつかの実施形態において、本願は、配列番号５２で示されるアミノ酸配列を有するＡＫ１８３（３３５－７９２）トランケートを提供する。

配列番号４３～５２の配列は次に示すとおりである。

いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、前述のポリペプチドフラグメントのアミノ酸配列をベースに、１つ又は複数の部位（例えば１つ、２つ、３つ、４つ、５つ又はそれ以上の部位）にアミノ酸の保存的置換を有する。アミノ酸残基の保存的置換とは、性質が類似するアミノ酸間の置換を指し、例えば極性アミノ酸間の置換（グルタミンとアスパラギンの間の置換など）、疎水性アミノ酸間の置換（ロイシン、イソロイシン、メチオニン、及びバリンの間の置換など）、並びに同じ電荷を帯びたアミノ酸間の置換（アルギニン、リシン、及びヒスチジンの間の置換、又はグルタミン酸とアスパラギン酸の間の置換など）などを指す。いくつかの実施形態において、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１又は配列番号５２に示すアミノ酸配列に比して、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１５個、２０個又はそれ以上の部位にアミノ酸の保存的置換を有する。

いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位、８６２位、９３１位、９３３位、９７８位、１００２位、１００４位のうち１つ又は複数に対応する位置にアミノ酸変異を有する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位に対応する位置にアミノ酸変異を有する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８６２位に対応する位置にアミノ酸変異を有する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の９３１位及び９３３位に対応する位置にアミノ酸変異を有する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の９７８位に対応する位置にアミノ酸変異を有する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の１００２位及び１００４位に対応する位置にアミノ酸変異を有する。

いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位、８６２位、９３１位、９３３位、９７８位、１００２位、１００４位のうち１つ又は複数に対応する位置がグリシンに変異する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位、８６２位、９３１位、９３３位、９７８位、１００２位、１００４位のうち１つ又は複数に対応する位置のプロリン（Ｐ）がグリシン（Ｇ）に変異する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位に対応する位置のプロリンがグリシンに変異する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８６２位に対応する位置のプロリンがグリシンに変異する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の９３１位及び９３３位に対応する位置のプロリンがグリシンに変異する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の９７８位に対応する位置のプロリンがグリシンに変異する。いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の１００２位及び１００４位に対応する位置のプロリンがグリシンに変異する。

いくつかの実施形態において、前記ポリペプチドフラグメントのアミノ酸配列は、配列番号５３（「ＰＡ－ＧＡＭｕｔ」ともいう）、配列番号５４（「ＰＩ－ＧＩＭｕｔ」ともいう）、配列番号５５（「ＰＡＰ－ＧＡＧＭｕｔ」ともいう）、配列番号５６（「ＰＡＴ－ＧＡＴＭｕｔ」ともいう）又は配列番号５７（「ＰＩＰ－ＧＩＧＭｕｔ」ともいう）で示される。

配列番号５３～５７の配列は次に示すとおりである。

活性に影響しない前提で、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートはさらに非天然アミノ酸を含んでもよい。非天然アミノ酸には、例えば、β－フルオロアラニン、１－メチルヒスチジン、γ－メチレングルタミン酸、α－メチルロイシン、４，５－デヒドロリシン、ヒドロキシプロリン、３－フルオロフェニルアラニン、３－アミノチロシン、４－メチルトリプトファンなどが含まれる。

本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、当技術分野で公知の方法を用いて修飾してもよい。例えば、ＰＥＧ化、グリコシル化、アミノ末端修飾、脂肪アシル化、カルボキシル末端修飾、リン酸化、メチル化などが挙げられるがこれらに限定されない。当業者であれば理解できるとおり、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、当技術分野で公知の方法により修飾した後も、ＩｇＡプロテアーゼ又はＩｇＡプロテアーゼトランケートと実質的に類似の機能を保持している。

いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、前述のポリペプチドフラグメントのアミノ酸配列をベースに、１つ又は複数の部位にアミノ酸の保存的置換を有するが、ヒトＩｇＡ（例えばＩｇＡ１）を切断する酵素活性は有している。いくつかの実施形態において、本願が提供するＩｇＡプロテアーゼトランケートは、前述のポリペプチドフラグメントと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）とともに、ヒトＩｇＡ（例えばＩｇＡ１）を切断する酵素活性は保持している。

融合タンパク質
別の態様において、本願は、第１のポリペプチドと第２のポリペプチドとを含む融合タンパク質を提供し、前記第１のポリペプチドは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、若しくはそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼの全長、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、若しくはそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのシグナルペプチドを除去してなるポリペプチド、又は本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートを含み、前記第２のポリペプチドは、対象の体内における前記第１のポリペプチドの半減期を延長するためのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記第１のポリペプチドは、配列番号１又は配列番号４２に示す配列を含む。いくつかの実施形態において、前記第２のポリペプチドは、前記第１のポリペプチドのＮ末端に位置する。いくつかの実施形態において、前記第２のポリペプチドは、前記第１のポリペプチドのＣ末端に位置する。

いくつかの実施形態において、前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドとの間はリンカーによって連結される。いくつかの実施形態において、前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドとの間は直接連結される（つまりリンカーを介さずに連結される）。本願で使用する用語「リンカー」とは、１個、２個、３個、４個、若しくは５個のアミノ酸残基を有するか、又は長さがアミノ酸残基５個から１５個、２０個、３０個、５０個若しくはそれ以上までの間であり、ペプチド結合により連結され、１つ又は複数のポリペプチドを連結するのに使用される人工アミノ酸配列を指す。リンカーには２次構造がある場合もあり、ない場合もある。リンカー配列は、当技術分野において公知である。例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：６４４４－６４４８（１９９３）、Ｐｏｌｊａｋｅｔａｌ．，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ２：１１２１－１１２３（１９９４）を参照されたい。

いくつかの実施形態において、前記リンカーは、切断可能型リンカー、非切断型リンカー、ペプチドリンカー、フレキシブルリンカー、剛直リンカー、らせん状リンカー、及び非らせん状リンカーからなる群より選択される。当技術分野において既知の任意の適切なリンカーを使用することができる。いくつかの実施形態において、前記リンカーはペプチドリンカーを含む。例えば、本願における有用なリンカーは、グリシン及びセリン残基が豊富であり得る。その例には、トレオニン／セリン及びグリシンを含む単一又は反復配列を有するリンカーが含まれる。例えばＧＧＧＳ（配列番号２１）若しくはＧＧＧＧＳ（配列番号２２）、ＧＧＧＧＧＳ（配列番号８６）若しくはＧＧＧＧＧＧＧＳ（配列番号８７）、又はそれらの直列反復（例えば２、３、４、５、６、７、８、９、１０又はそれ以上の反復）である。いくつかの実施形態において、本願で使用するリンカーにはＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＧＡＴＣＣ（配列番号２３）が含まれる。選択可能として、前記リンカーはＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＧＡＴＣＣ（配列番号２３）に示すアミノ酸配列の１つ又は複数の配列順序又は直列反復を含む長いペプチド鎖であり得る。いくつかの実施形態において、前記リンカーは、配列番号２３の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０又はそれ以上の配列順序又は直列反復を含む。いくつかの実施形態において、前記リンカーは、配列番号２１、２２、２３のいずれかと少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むか、又は当該群より選択されるアミノ酸配列からなる。

いくつかの実施形態において、本願で使用するリンカーは配列番号５８（ＥＥＫＫＫＥＫＥＫＥＥＱＥＥＲＥＴＫ）に示すアミノ酸配列を含む。選択可能として、前記リンカーは配列番号５８に示すアミノ酸配列の１つ又は複数の配列順序又は直列反復を含む長いペプチド鎖であり得る。いくつかの実施形態において、前記リンカーは、配列番号５８の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０又はそれ以上の配列順序又は直列反復を含む。いくつかの実施形態において、前記リンカーは、配列番号５８と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

いくつかの実施形態において、本願で使用するリンカーは配列番号５９（ＨＨＨＨＨＨＨＨＨＨ）に示すアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記リンカーは、配列番号５９と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

いくつかの実施形態において、前記第２のポリペプチドはＦｃドメイン及びアルブミンより選択される。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインはヒンジ領域を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは下流ヒンジ領域（ｌｏｗｅｒｈｉｎｇｅ）を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、コアヒンジ領域（ｃｏｒｅｈｉｎｇｅｒｅｇｉｏｎ）及び下流ヒンジ領域（ｌｏｗｅｒｈｉｎｇｅ）を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、上流ヒンジ領域（ｕｐｐｅｒｈｉｎｇｅｒｅｇｉｏｎ）、コアヒンジ領域（ｃｏｒｅｈｉｎｇｅｒｅｇｉｏｎ）、及び下流ヒンジ領域（ｌｏｗｅｒｈｉｎｇｅ）を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインはヒンジ領域を含まない。いくつかの実施形態において、前記ＦｃドメインはヒトＩｇＧＦｃドメインに由来する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、ヒトＩｇＧ１Ｆｃドメイン、ヒトＩｇＧ２Ｆｃドメイン、ヒトＩｇＧ３Ｆｃドメイン、又はヒトＩｇＧ４Ｆｃドメインに由来する。

いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは配列番号２４に示すアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは配列番号２４に示すアミノ酸配列からなる。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインのアミノ酸配列は、配列番号２４に示すアミノ酸と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の配列同一性を有する。
ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号２４）

いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインのコーディング核酸配列は配列番号３９に示すヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインのコーディング核酸配列は配列番号３９に示すヌクレオチド配列からなる。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインのコーディング核酸配列は、配列番号３９に示すヌクレオチド配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の配列同一性を有する。
ＧＡＧＣＣＣＡＡＡＴＣＴＴＧＴＧＡＣＡＡＡＡＣＴＣＡＣＡＣＡＴＧＣＣＣＡＣＣＧＴＧＣＣＣＡＧＣＡＣＣＴＧＡＡＣＴＣＣＴＧＧＧＧＧＧＡＣＣＧＴＣＡＧＴＣＴＴＣＣＴＣＴＴＣＣＣＣＣＣＡＡＡＡＣＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＣＡＴＧＡＴＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＣＡＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＣＧＴＧＡＧＣＣＡＣＧＡＡＧＡＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＡＧＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＴＡＡＴＧＣＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＣＣＧＣＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＡＣＡＡＣＡＧＣＡＣＧＴＡＣＣＧＧＧＴＧＧＴＣＡＧＣＧＴＣＣＴＣＡＣＣＧＴＣＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＣＴＣＣＡＡＣＡＡＡＧＣＣＣＴＣＣＣＡＧＣＣＣＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＡＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＡＧＣＣＡＡＡＧＧＧＣＡＧＣＣＣＣＧＡＧＡＡＣＣＡＣＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＡＴＣＣＣＧＧＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＧＧＴＣＡＧＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＣＡＡＡＧＧＣＴＴＣＴＡＴＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＴＧＧＧＣＡＧＣＣＧＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＧＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＣＴＣＣＧＡＣＧＧＣＴＣＣＴＴＣＴＴＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＡＡＧＣＴＣＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＣＡＧＧＴＧＧＣＡＧＣＡＧＧＧＧＡＡＣＧＴＣＴＴＣＴＣＡＴＧＣＴＣＣＧＴＧＡＴＧＣＡＴＧＡＧＧＣＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＣＡＣＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＴＣＴＣＣＣＴＧＴＣＴＣＣＧＧＧＴＡＡＡ（配列番号３９）

いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは配列番号２５に示すアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは配列番号２５に示すアミノ酸配列からなる。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインのアミノ酸配列は、配列番号２５に示すアミノ酸と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の配列同一性を有する。
ＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号２５）

いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインのコーディング核酸配列は配列番号４０に示すヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインのコーディング核酸配列は配列番号４０に示すヌクレオチド配列からなる。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインのコーディング核酸配列は、配列番号４０に示すヌクレオチド配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の配列同一性を有する。
ＡＣＡＴＧＣＣＣＡＣＣＧＴＧＣＣＣＡＧＣＡＣＣＴＧＡＡＣＴＣＣＴＧＧＧＧＧＧＡＣＣＧＴＣＡＧＴＣＴＴＣＣＴＣＴＴＣＣＣＣＣＣＡＡＡＡＣＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＣＡＴＧＡＴＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＣＡＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＣＧＴＧＡＧＣＣＡＣＧＡＡＧＡＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＡＡＧＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＴＡＡＴＧＣＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＣＣＧＣＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＡＣＡＡＣＡＧＣＡＣＧＴＡＣＣＧＧＧＴＧＧＴＣＡＧＣＧＴＣＣＴＣＡＣＣＧＴＣＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＣＴＣＣＡＡＣＡＡＡＧＣＣＣＴＣＣＣＡＧＣＣＣＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＡＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＡＧＣＣＡＡＡＧＧＧＣＡＧＣＣＣＣＧＡＧＡＡＣＣＡＣＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＡＴＣＣＣＧＧＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＧＧＴＣＡＧＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＣＡＡＡＧＧＣＴＴＣＴＡＴＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＴＧＧＧＣＡＧＣＣＧＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＧＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＣＴＣＣＧＡＣＧＧＣＴＣＣＴＴＣＴＴＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＡＡＧＣＴＣＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＣＡＧＧＴＧＧＣＡＧＣＡＧＧＧＧＡＡＣＧＴＣＴＴＣＴＣＡＴＧＣＴＣＣＧＴＧＡＴＧＣＡＴＧＡＧＧＣＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＣＡＣＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＴＣＴＣＣＣＴＧＴＣＴＣＣＧＧＧＴＡＡＡ（配列番号４０）。

いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは配列番号３２に示すアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは配列番号３２に示すアミノ酸配列からなる。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインのアミノ酸配列は、配列番号３２に示すアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の配列同一性を有する。
ＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号３２）。

いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは配列番号７７に示すアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは配列番号７７に示すアミノ酸配列からなる。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインのアミノ酸配列は、配列番号７７に示すアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の配列同一性を有する。
ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号７７）

いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、１つ又は複数のアミノ酸変異を有する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、配列番号２５の７位に対応する位置にアミノ酸変異を有する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、配列番号２５の７位に対応する位置のアミノ酸（例えばアラニン）がバリンに変異する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、配列番号２５の７位に対応する位置のアミノ酸（例えばアラニン）がグリシンに変異する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、配列番号２５の７位に対応する位置のアミノ酸（例えばアラニン）がセリンに変異する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、配列番号２５の７位に対応する位置のアミノ酸（例えばアラニン）がロイシンに変異する。

いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、前記融合タンパク質の半減期を延長する１つ又は複数の変異を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、前記第１のポリペプチドのＣ末端に連結される。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃドメインは、前記第１のポリペプチドのＮ末端に連結される。

いくつかの実施形態において、前記第２のポリペプチドはアルブミンである。いくつかの実施形態において、前記アルブミンのアミノ酸配列は配列番号６０に示すとおりである。いくつかの実施形態において、前記アルブミンは、ヒト血清アルブミンの１つ又は複数のドメインを含む。いくつかの実施形態において、前記アルブミンは、ヒト血清アルブミンのＤ３ドメインを含む。
ＤＡＨＫＳＥＶＡＨＲＦＫＤＬＧＥＥＮＦＫＡＬＶＬＩＡＦＡＱＹＬＱＱＣＰＦＥＤＨＶＫＬＶＮＥＶＴＥＦＡＫＴＣＶＡＤＥＳＡＥＮＣＤＫＳＬＨＴＬＦＧＤＫＬＣＴＶＡＴＬＲＥＴＹＧＥＭＡＤＣＣＡＫＱＥＰＥＲＮＥＣＦＬＱＨＫＤＤＮＰＮＬＰＲＬＶＲＰＥＶＤＶＭＣＴＡＦＨＤＮＥＥＴＦＬＫＫＹＬＹＥＩＡＲＲＨＰＹＦＹＡＰＥＬＬＦＦＡＫＲＹＫＡＡＦＴＥＣＣＱＡＡＤＫＡＡＣＬＬＰＫＬＤＥＬＲＤＥＧＫＡＳＳＡＫＱＲＬＫＣＡＳＬＱＫＦＧＥＲＡＦＫＡＷＡＶＡＲＬＳＱＲＦＰＫＡＥＦＡＥＶＳＫＬＶＴＤＬＴＫＶＨＴＥＣＣＨＧＤＬＬＥＣＡＤＤＲＡＤＬＡＫＹＩＣＥＮＱＤＳＩＳＳＫＬＫＥＣＣＥＫＰＬＬＥＫＳＨＣＩＡＥＶＥＮＤＥＭＰＡＤＬＰＳＬＡＡＤＦＶＥＳＫＤＶＣＫＮＹＡＥＡＫＤＶＦＬＧＭＦＬＹＥＹＡＲＲＨＰＤＹＳＶＶＬＬＬＲＬＡＫＴＹＥＴＴＬＥＫＣＣＡＡＡＤＰＨＥＣＹＡＫＶＦＤＥＦＫＰＬＶＥＥＰＱＮＬＩＫＱＮＣＥＬＦＥＱＬＧＥＹＫＦＱＮＡＬＬＶＲＹＴＫＫＶＰＱＶＳＴＰＴＬＶＥＶＳＲＮＬＧＫＶＧＳＫＣＣＫＨＰＥＡＫＲＭＰＣＡＥＤＹＬＳＶＶＬＮＱＬＣＶＬＨＥＫＴＰＶＳＤＲＶＴＫＣＣＴＥＳＬＶＮＲＲＰＣＦＳＡＬＥＶＤＥＴＹＶＰＫＥＦＮＡＥＴＦＴＦＨＡＤＩＣＴＬＳＥＫＥＲＱＩＫＫＱＴＡＬＶＥＬＶＫＨＫＰＫＡＴＫＥＱＬＫＡＶＭＤＤＦＡＡＦＶＥＫＣＣＫＡＤＤＫＥＴＣＦＡＥＥＧＫＫＬＶＡＡＳＱＡＡＬＧＬ（配列番号６０）

いくつかの実施形態において、本願が提供する融合タンパク質は、さらにタグを含む。いくつかの実施形態において、前記タグは、蛍光タグ、発光タグ、精製タグ、及び発色タグからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、前記タグは、ｃ－Ｍｙｃタグ、ＨＡタグ、ＶＳＶ－Ｇタグ、ＦＬＡＧタグ、Ｖ５タグ、及びＨＩＳタグからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、前記タグはＨＩＳタグである。いくつかの実施形態において、前記タグは、６個、７個、８個、９個、又は１０個のヒスチジンを含むＨＩＳタグである。いくつかの実施形態において、前記第２のポリペプチドは、前記第１のポリペプチドのＣ末端に位置し、前記タグは前記第２のポリペプチドのＣ末端に位置する。

いくつかの実施形態において、本願が提供する融合タンパク質は、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、配列番号８４、又は配列番号８５に示すアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、本願が提供する融合タンパク質は、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、配列番号８４、若しくは配列番号８５からなる群より選択されるアミノ酸配列からなるか、又はそれらと少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％の配列同一性を有する。いくつかの実施形態において、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、配列番号８４又は配列番号８５と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％の配列同一性を有する融合タンパク質は、ＩｇＡプロテアーゼの機能又は活性（例えばタンパク質加水分解活性、ＩｇＡを特異的に切断する酵素活性など）を保持している。

いくつかの実施形態において、本願が提供する融合タンパク質は、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２に示すアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、本願が提供する融合タンパク質は、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２からなる群より選択されるアミノ酸配列からなるか、又はそれらと少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％の配列同一性を有する。

いくつかの実施形態において、対象の体内の血液循環中における本願が提供する融合タンパク質の半減期は、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、少なくとも６日、少なくとも７日、少なくとも８日、少なくとも９日、少なくとも１０日、少なくとも１１日、少なくとも１２日、少なくとも１３日、少なくとも１４日である。

核酸
別の態様において、本願は、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートをコードするヌクレオチド配列を含む、又は本願記載の融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸を提供する。

本願で使用する用語「核酸」又は「ヌクレオチド」とは、一本鎖又は二本鎖の形態のデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）又はリボ核酸（ＲＮＡ）、及びそのポリマーを指す。別途説明がない限り、特定のヌクレオチド配列は、それらの保存的に修飾された変異体（例えば縮重するコドンの置換）、対立遺伝子、オルソログ、ＳＮＰ及び相補配列、並びに明示的に示された配列も暗黙的に包含する。具体的には、縮重するコドンの置換は、１つ又は複数の選択された（又はすべての）コドンの第３の位置が混合塩基及び／又はデオキシイノシン残基で置換された配列を生成することによって達成され得る（Ｂａｔｚｅｒｅｔａｌ．，ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＲｅｓ．１９：５０８１（１９９１）、Ｏｈｔｓｕｋａｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：２６０５－２６０８（１９８５）、及びＲｏｓｓｏｌｉｎｉｅｔａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ８：９１－９８（１９９４）を参照）。

本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートをコードするＤＮＡ、又は本願記載の融合タンパク質をコードするＤＮＡは、従来の方法を用いて容易に単離及びシーケンシングすることができる（例えば、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質をコードする遺伝子に特異的に結合できるオリゴヌクレオチドプローブの使用によって）。コードするＤＮＡは合成の方法によっても入手できる。

いくつかの実施形態において、本願が提供する核酸は、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８に示す核酸配列を含む。いくつかの実施形態において、本願が提供する核酸は、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８からなる群より選択されるヌクレオチド配列からなるか、又はそれらと少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する。

いくつかの実施形態において、本願が提供する核酸は、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３に示す核酸配列を含む。いくつかの実施形態において、本願が提供する核酸は、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３からなる群より選択されるヌクレオチド配列からなるか、又はそれらと少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する。

ベクターと細胞
別の態様において、本願は、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートをコードする核酸又は本願記載の融合タンパク質をコードする核酸を含む、ベクターを提供する。

当技術分野で公知の組換え技術を用いて、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質をコードする単離されたポリヌクレオチドを、さらなるクローニング（ＤＮＡ増幅）のため又は発現のためにベクターに挿入してもよい。ベクターは、様々な種類から選択することができる。ベクター成分は通常、シグナル配列、複製開始点、１種類又は複数種のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター（例えばＳＶ４０、ＣＭＶ、ＥＦ－１α）、及び転写終結配列のうちの１種類又は複数種を含むが、これらに限定されない。

いくつかの実施形態において、本願が提供する核酸は、ＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質、核酸配列に操作可能に連結された少なくとも１種類のプロモーター（例えばＳＶ４０、ＣＭＶ、ＥＦ－１α）、及び少なくとも１種類の選択タグをコードする。ベクターの実例としては、レトロウイルス（レンチウイルスを含む）、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス（例えば単純ヘルペスウイルス）、ポックスウイルス、バキュロウイルス、パピローマウイルス、パポバウイルス（例えばＳＶ４０）、λファージ及びＭ１３ファージ、プラスミドｐｃＤＮＡ３．３、ｐＭＤ１８－Ｔ、ｐＯｐｔｉｖｅｃ、ｐＣＭＶ、ｐＥＧＦＰ、ｐＩＲＥＳ、ｐＱＤ－Ｈｙｇ－ＧＳｅｕ、ｐＡＬＴＥＲ、ｐＢＡＤ、ｐｃＤＮＡ、ｐＣａｌ、ｐＬ、ｐＥＴ、ｐＧＥＭＥＸ、ｐＧＥＸ、ｐＣＩ、ｐＥＧＦＴ、ｐＳＶ２、ｐＦＵＳＥ、ｐＶＩＴＲＯ、ｐＶＩＶＯ、ｐＭＡＬ、ｐＭＯＮＯ、ｐＳＥＬＥＣＴ、ｐＵＮＯ、ｐＤＵＯ、Ｐｓｇ５Ｌ、ｐＢＡＢＥ、ｐＷＰＸＬ、ｐＢＩ、ｐ１５ＴＶ－Ｌ、ｐＰｒｏ１８、ｐＴＤ、ｐＲＳ１０、ｐＬｅｘＡ、ｐＡＣＴ２．２、ｐＣＭＶ－ＳＣＲＩＰＴ．ＲＴＭ．、ｐＣＤＭ８、ｐＣＤＮＡ１．１／ａｍｐ、ｐｃＤＮＡ３．１、ｐＲｃ／ＲＳＶ、ＰＣＲ２．１、ｐＥＦ－１、ｐＦＢ、ｐＳＧ５、ｐＸＴ１、ｐＣＤＥＦ３、ｐＳＶＳＰＯＲＴ、ｐＥＦ－Ｂｏｓなどが含まれるがこれらに限定されない。

前記ＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質をコードする核酸配列を含むベクターを、クローニング又は遺伝子発現のために宿主細胞に導入してもよい。本願記載のベクター中のＤＮＡのクローニング又は発現に適した宿主細胞は、前述の原核、酵母、又は高等真核細胞である。本願の用途に適した原核細胞には、グラム陰性又はグラム陽性細菌などの真正細菌が含まれる。例えば、エシェリヒア属（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）（例えば大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ））、エンテロバクター属（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）、エルビニア属（Ｅｒｗｉｎｉａ）、クレブシエラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、プロテウス属（Ｐｒｏｔｅｕｓ）、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）（例えばサルモネラ・ティフィリウム（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ））、セラチア属（Ｓｅｒｒａｔｉａ）（例えばセラチア・マルセッセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃａｎｓ））、赤痢菌属（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）のような腸内細菌科（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）、バシラス属（Ｂａｃｉｌｌｉ）（例えば枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）及びバシラス・リケニフォルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ））、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）（例えば緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、並びにストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）などである。いくつかの実施形態において、前記細胞は、大腸菌の細胞である。

原核細胞に加えて、真核生物細胞、例えば糸状菌又は酵母のような真核微生物も、ＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質をコードするベクターのための適切なクローニング又は発現宿主として使用することができる。出芽酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）又はパン酵母が、最も一般的に使用される下等真核宿主微生物である。しかし、その他の多くの属、種及び株も比較的一般的に使用されており本願での使用にも適している。例えば、分裂酵母（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｐｏｍｂｅ）、クルイベロマイシス属（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）の宿主（例えばクルイベロマイシス・ラクティス（Ｋ．ｌａｃｔｉｓ）、クルイベロマイシス・フラジリス（Ｋ．ｆｒａｇｉｌｉｓ）（ＡＴＣＣ１２，４２４）、クルイベロマイシス・ブルガリカス（Ｋ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）（ＡＴＣＣ１６，０４５）、クルイベロマイシス・ウィッケルハミイ（Ｋ．ｗｉｃｋｅｒａｍｉｉ）（ＡＴＣＣ２４，１７８）、クルイベロマイシス・ワルティ（Ｋ．ｗａｌｔｉｉ）（ＡＴＣＣ５６，５００）、クルイベロマイシス・ドロソフィラム（Ｋ．ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｒｕｍ）（ＡＴＣＣ３６，９０６）、クルイベロマイセス・サーモトレランス（Ｋ．ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ）、クルイベロマイセス・マルシアヌス（Ｋ．ｍａｒｘｉａｎｕｓ））、ヤロウイア属（ｙａｒｒｏｗｉａ）（ＥＰ４０２，２２６）、ピキア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ）（ＥＰ１８３，０７０）、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｉａ）（ＥＰ２４４，２３４）、アカパンカビ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａｃｒａｓｓａ）、シュワンニオマイセス属（Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ）（例えばシュワンニオマイセス・オクシデンタリス（Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ））、及び糸状菌（ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓｆｕｎｇｉ）（例えばアカパンカビ屬（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ）、アオカビ属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ））、トリポクラジウム属（Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ）及びアスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）（例えばアスペルギルス・ニデュランス（Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓ）及びアスペルギルス・ニガー（Ａ．ｎｉｇｅｒ））などである。いくつかの実施形態において、前記真核生物の細胞は、哺乳類の細胞である。いくつかの実施形態において、前記哺乳類の細胞は、ヒト細胞又はチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である。いくつかの実施形態において、前記哺乳類の細胞は、ヒト胎児腎細胞２９３（ＨＥＫ２９３細胞）である。

医薬組成物
別の態様において、本願は、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートを含む、本願記載の融合タンパク質を含む、本願記載の核酸を含む、本願記載のベクターを含む、又は本願記載の細胞、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。

本願で開示される医薬組成物のための薬学的に許容される担体には、例えば、薬学的に許容される液体、ゲル若しくは固形担体、水系溶媒、非水系溶媒、抗微生物物質、等張性物質、緩衝液、抗酸化剤、麻酔剤、懸濁剤／分散剤、キレート剤、希釈剤、補助剤、賦形剤若しくは非毒性補助物質、その他の当技術分野で公知の成分、又はこれらの様々な組合せが含まれ得る。

好適な成分には、例えば、抗酸化剤、充填剤、結合剤、崩壊剤、緩衝液、保存剤、潤滑剤、攪味剤、増粘剤、着色剤、乳化剤、又は安定剤（例えば糖及びシクロデキストリン）が含まれ得る。好適な抗酸化剤には、例えば、メチオニン、アスコルビン酸、ＥＤＴＡ、チオ硫酸ナトリウム、白金、カタラーゼ、クエン酸、システイン、チオグリセロール、チオグリコール酸、チオソルビトール、ブチルメチルアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、及び／又は没食子酸プロピルが含まれ得る。本願が開示するように、本願の開示するＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質を含む組成物中にメチオニンなどの１種類又は複数種の抗酸化剤を含めることにより、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質の酸化を低減することができる。本願はさらに、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質の酸化防止、使用期限延長、及び／又は活性向上のための複数の方法を提供する。例えば、本願において提供されるＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質を１種類又は複数種の抗酸化剤（例えばメチオニン）と混合することによって実現される。

さらに、薬学的に許容される担体には、例えば、水系媒体（例えば塩化ナトリウム注射液、リンゲル液注射液、等張ブドウ糖注射液、滅菌水注射液、又はブドウ糖加乳酸リンゲル注射液）、非水媒体（例えば植物由来の不揮発性油、綿実油、コーン油、ゴマ油、又は落花生油、細菌阻害又は真菌阻害濃度の抗菌物質）、等張剤（例えば塩化ナトリウム又はブドウ糖）、緩衝液（例えばリン酸塩又はクエン酸酸塩緩衝液）、抗酸化剤（例えば硫酸水素ナトリウム）、局所麻酔剤（例えば塩酸プロカイン）、懸濁助剤及び分散剤（例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒプロメロース又はポリビニルピロリドン）、乳化剤（例えばポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０））、キレート剤（例えばＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）又はＥＧＴＡ（エチレングリコールビス（２－アミノエチルエーテル）四酢酸）、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸又は乳酸）が含まれ得る。担体としての抗菌剤は多回投与容器中の医薬組成物に添加することができ、ここにはフェノール又はクレゾール、水銀剤、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチル及びプロピルパラベン、チメロサール、塩化ベンズアルコニウム、及び塩化ベンゼトニウムが含まれる。好適な賦形剤には、例えば、水、塩、グルコース、グリセリン又はエタノールが含まれ得る。好適な非毒性補助物質には、例えば、湿潤剤、乳化剤、ｐＨ緩衝剤、安定剤、可溶化剤、又は、酢酸ナトリウム、ラウリン酸ソルビタン、トリエタノールアミンオレエート、若しくはシクロデキストリンのような物質が含まれ得る。

前記医薬組成物は、液体の溶液、懸濁液、乳剤、丸剤、カプセル剤、錠剤、徐放性製剤又は粉末であってよい。経口製剤には、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどの標準担体を含んでよい。

いくつかの実施形態において、前記医薬組成物は注射可能な組成物として製剤される。注射可能な医薬組成物は、任意の通常の形態、例えば、液体溶媒、懸濁剤、乳化剤、又は、液体溶媒、懸濁剤若しくは乳化剤を生成するのに適した固体形態で調製してよい。注射製剤には、そのまま使用可能な無菌及び／又は発熱物質非含有の溶液、用時に溶媒と合わせる無菌乾燥可溶化物（凍結乾燥粉末など）が含まれ得る。ここには皮下注入用錠剤、そのまま注射に使用可能な無菌懸濁剤、用時に媒体と合わせる無菌乾燥不溶性製品、並びに無菌及び／又は発熱物質非含有の乳剤が含まれる。溶媒は水系又は非水系であってよい。

いくつかの実施形態において、単位用量の注射製剤が１つのアンプル、１本のバイアル、又は１本の針付きシリンジに包装される。当技術分野で知られているとおり、注射にて投与されるすべての製剤は無菌・発熱物質非含有でなければならない。

いくつかの実施形態において、本願で開示されるＩｇＡプロテアーゼトランケート又は融合タンパク質を適切な溶媒に溶解することによって、無菌凍結乾燥の粉末を調製し得る。前記溶媒は、粉末若しくは粉末から調製された再溶解溶液の安定性を向上可能な、又は粉末若しくは再溶解溶液を改良可能な別の薬理学的成分を含有し得る。好適な賦形剤には、水、グルコース、ソルビトール、フルクトース、コーンシロップ、キシリトール、グリセリン、グルコース、スクロース、又は他の好適な物質が含まれるがこれらに限定されない。溶媒は、例えばクエン酸緩衝液、リン酸ナトリウム若しくはリン酸カリウム緩衝液、又は当業者に公知の他の緩衝液などの緩衝液を含有でき、一実施形態では、緩衝液のｐＨは中性である。当技術分野で公知の標準条件のもと、前記溶解実施後の濾過除菌を行い、その後凍結乾燥して理想的な製剤を得る。一実施形態では、得られた溶媒をミニバイアルに小分けし凍結乾燥する。ミニバイアル１本あたりに、１回用量又は多回用量の前記ＩｇＡプロテアーゼトランケート若しくは融合タンパク質又はその組成物を収容することができる。各ミニバイアル１本あたりの装入量を１回の投与又は複数回の投与に必要な量よりわずかに多く（例えば１０％多めに）することで、検体採取の精度及び投薬の精度を保証することができる。凍結乾燥粉末は、約４℃～室温の範囲など、適切な条件下で保存し得る。

注射用水で凍結乾燥粉末を再溶解して注射給薬に用いる製剤を得る。一実施形態では、凍結乾燥粉末を無菌・発熱物質非含有水又は他の好適な液体担体に加えて再溶解してよい。精確な量は選択した治療法に応じて決まるが、経験的に決定してよい。

疾患を治療又は予防する方法
別の態様において、本願は、治療又は予防を必要とする対象に対し本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート、本願記載の融合タンパク質、又は本願記載の医薬組成物を投与することを含む、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防する方法を提供する。

別の態様において、本願は、治療又は予防を必要とする対象に対しＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート、前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケートを含む融合タンパク質、又は前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート若しくは前記融合タンパク質を含む医薬組成物を投与することを含む、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防する方法を提供し、前記ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６又はそれらの組合せからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５又は配列番号７６に示すアミノ酸配列からシグナルペプチドを除去してなるアミノ酸配列である。いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５又は配列番号７６に示すポリペプチドと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）。いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５又は配列番号７６に示すポリペプチドと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）とともに、ＩｇＡプロテアーゼの機能又は活性（例えばタンパク質加水分解活性、ＩｇＡを特異的に切断する酵素活性など）を保持している。

別の態様において、本願は、ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート、前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケートを含む融合タンパク質、又は前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート若しくは前記融合タンパク質を含む医薬組成物の、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防するための医薬の調製における用途を提供し、前記ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６又はそれらの組合せからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５又は配列番号７６に示すアミノ酸配列からシグナルペプチドを除去してなるアミノ酸配列である。いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５又は配列番号７６に示すポリペプチドと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）。いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５又は配列番号７６に示すポリペプチドと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）とともに、ＩｇＡプロテアーゼの機能又は活性（例えばタンパク質加水分解活性、ＩｇＡを特異的に切断する酵素活性など）を保持している。

別の態様において、本願は、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防するための、本願記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート、融合タンパク質、又は医薬組成物を提供する。

別の態様において、本願は、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防するためのＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート、前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケートを含む融合タンパク質、又は前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート若しくは前記融合タンパク質を含む医薬組成物を提供し、前記ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６又はそれらの組合せからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５又は配列番号７６に示すアミノ酸配列からシグナルペプチドを除去してなるアミノ酸配列である。いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５又は配列番号７６に示すポリペプチドと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）。いくつかの実施形態において、前記ＩｇＡプロテアーゼトランケートは、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５又は配列番号７６に示すポリペプチドと少なくとも７０％の配列同一性を有する（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する）とともに、ＩｇＡプロテアーゼの機能又は活性（例えばタンパク質加水分解活性、ＩｇＡを特異的に切断する酵素活性など）を保持している。

いくつかの実施形態において、本願記載のＩｇＡ沈着関連疾患には、ＩｇＡ腎症、疱疹状皮膚炎、ヘノッホ・シェーライン紫斑病（ＩｇＡ血管炎ともいう）、川崎病、紫斑病性腎炎、ＩｇＡ血管炎による腎損傷、ＩｇＡリウマトイド因子陽性の関節リウマチ、ＩｇＡ型抗ＧＢＭ病、又はＩｇＡ型ＡＮＣＡ関連血管炎を含む。いくつかの実施形態において、本願記載のＩｇＡ沈着関連疾患は、ＩｇＡ腎症である。いくつかの実施形態において、本願記載のＩｇＡ沈着関連疾患は、ＩｇＡ１腎症である。いくつかの実施形態において、本願記載のＩｇＡ沈着関連疾患は、ＩｇＡ血管炎である。いくつかの実施形態において、本願記載のＩｇＡ沈着関連疾患は、川崎病である。

すべての実施例において、言及される生物学的材料（例えば大腸菌菌株、各種クローニング及び発現プラスミド、培地、操作ツールとしての酵素、緩衝液）、並びに各種培養方法、タンパク質の抽出及び精製方法、その他の分子生物学的操作方法は、いずれも当業者にはよく知られたものである。Ｓａｍｂｒｏｏｋ他編著の『モレキュラー・クローニング』（ラボラトリーマニュアル、コールド・スプリング・ハーバー，１９８９）及び『精選分子生物学実験プロトコール』（米・Ｆオースベル他著，顔子穎他訳，北京，科学出版社，１９９８）を参照するとよい。

［実施例１］ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼの最短活性部位の研究
発明者らは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）ＡＫ１８３株由来の野生型ＩｇＡプロテアーゼ（そのアミノ酸配列は配列番号１のとおり）のＮ末端のシグナルペプチド（すなわち配列番号１の１位～３０位アミノ酸）及びＣ末端の膜貫通領域＋細胞内領域（すなわち配列番号１の１２０５位～１２３４位アミノ酸）を除去し、その後、シグナルペプチド、膜貫通領域及び細胞内領域を除去したＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列（すなわち配列番号１の３１位～１２０４位アミノ酸からなるＩｇＡプロテアーゼトランケート）のＮ末端に、ヒトＩｇＧ１のＦｃ配列（ＨＲ－ＣＨ２－ＣＨ３、そのアミノ酸配列は配列番号２４のとおり）を付加し、ＰＥＴ３０ａ－Ｆｃ－ＡＫ１８３プラスミドを構築した。

次に、発明者らは、ＰＥＴ３０ａ－Ｆｃ－ＡＫ１８３プラスミドをテンプレートとしてナンセンス変異を導入し、一連のＦｃ－ＡＫ１８３トランケートを構築して、ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼのＣ末端最短活性部位を調べた。予備研究の結果に基づき、発明者らはＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼの７３０位～８４０位アミノ酸の間に自己切断部位が存在すると考えた。そこで発明者らは、第１ラウンドのナンセンス変異を導入し、ナンセンス変異部位をＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼの７３８位、７６９位、７９９位、８３４位の４つのアミノ酸部位とした。結果は図１に示すとおりである。結果は、７３８位、７６９位アミノ酸のナンセンス変異後に得られたＡＫ１８３（３１－７３７）、ＡＫ１８３（３１－７６８）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントはｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性がなく、７９９位又は８３４位アミノ酸のナンセンス変異後に得られたＡＫ１８３（３１－７９８）、ＡＫ１８３（３１－８３３）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントには活性があることを示している。したがって、第１ラウンドのナンセンス変異の結論としては、ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼのＣ末端最短活性部位は７６８位～７９８位アミノ酸の間にあるということになる。続いて、第２ラウンドのナンセンス変異を導入し、変異部位をＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼの７７４位、７７９位、７８３位、７８８位又は７９３位の５つのアミノ酸部位とした。結果は図２に示すとおりであり、７７４位、７７９位、７８３位又は７８８位アミノ酸のナンセンス変異後に得られたＡＫ１８３（３１－７７３）、ＡＫ１８３（３１－７７８）、ＡＫ１８３（３１－７８２）、ＡＫ１８３（３１－７８７）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントはｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性がなく、７９３位アミノ酸のナンセンス変異後に得られたＡＫ１８３（３１－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントは活性を保っていた。したがって、第２ラウンドのナンセンス変異の結論としては、ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼのＣ末端最短活性部位は７８７位～７９２位アミノ酸の間にあるということになる。次に、発明者らは第３ラウンドのナンセンス変異を導入し、変異部位をＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼの７８９位、７９０位、７９１位又は７９２位の４つのアミノ酸部位とした。結果は図３に示すとおりであり、７８９位及び７９０位アミノ酸のナンセンス変異後に得られたＡＫ１８３（３１－７８８）、ＡＫ１８３（３１－７８９）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントはｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性がなく、７９１位又は７９２位アミノ酸のナンセンス変異後に得られたＡＫ１８３（３１－７９０）、ＡＫ１８３（３１－７９１）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントは活性を保っていた（このうち７９１位は、プロテアーゼの立体配座が原因で活性が不完全で軽微な酵素切断作用しか現れなかった可能性がある）。したがって、第３ラウンドのナンセンス変異の結論としては、ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼのＣ末端の最短活性フラグメントはＡＫ１８３（３１－７９０）であるということになる。

本発明者らは、同様に３ラウンドのトランケーション変異を行ってＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端最短活性部位を調べた。まず、発明者らは第１ラウンドのトランケーション変異を導入し、ＡＫ１８３（３１－７９２）をベースにＡＫ１８３のＮ末端の機能未知ドメイン（ｄｏｍａｉｎｏｆｕｎｋｎｏｗｎ、ＤＵＦ）を除去し、Ｃ末端のアミノ酸部位を第７９２位に固定した。例えば、ＡＫ１８３（３１－７９２）をベースに、Ｎ末端の配列番号１の３１位～２８４位に対応するアミノ酸からなるＤＵＦを除去するとＡＫ１８３（２８５－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントが得られる。同様の方法を用い、ＡＫ１８３（３３０－７９２）、ＡＫ１８３（３８０－７９２）、ＡＫ１８３（４３０－７９２）、ＡＫ１８３（４８０－７９２）、ＡＫ１８３（５３０－７９２）、ＡＫ１８３（５８０－７９２）のＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントをそれぞれ得た。得られたＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果は、図１０に示すとおりである。図１０に示すとおり、ＡＫ１８３（２８５－７９２）、ＡＫ１８３（３３０－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントはｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性を保ち、ＡＫ１８３（３８０－７９２）、ＡＫ１８３（４３０－７９２）、ＡＫ１８３（４８０－７９２）、ＡＫ１８３（５３０－７９２）、ＡＫ１８３（５８０－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントはｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性がない。したがって、第１ラウンドのトランケーション変異の結論としては、ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端最短活性部位は３３０位～３８０位アミノ酸の間にあるということになる。続いて第２ラウンドのトランケーション変異を導入し、３３０位～３８０位アミノ酸の間でアミノ酸５つおきに１つのトランケート構築を行い、ＡＫ１８３（３３５－７９２）、ＡＫ１８３（３４０－７９２）、ＡＫ１８３（３４５－７９２）、ＡＫ１８３（３５０－７９２）、ＡＫ１８３（３５５－７９２）、ＡＫ１８３（３６０－７９２）、ＡＫ１８３（３６５－７９２）、ＡＫ１８３（３７０－７９２）、ＡＫ１８３（３７５－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントをそれぞれ得た。得られたＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果は、図１１に示すとおりである。図１１に示すとおり、ＡＫ１８３（３３５－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートはｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性を保ち、ＡＫ１８３（３４０－７９２）、ＡＫ１８３（３４５－７９２）、ＡＫ１８３（３５０－７９２）、ＡＫ１８３（３５５－７９２）、ＡＫ１８３（３６０－７９２）、ＡＫ１８３（３６５－７９２）、ＡＫ１８３（３７０－７９２）、ＡＫ１８３（３７５－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートはｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性がない。したがって、第２ラウンドのトランケーション変異の結論としては、ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端最短活性部位は３３５位～３４０位アミノ酸の間にあるということになる。次に、発明者らは第３ラウンドのトランケーション変異を導入し、３３５位～３４０位アミノ酸の間で各アミノ酸にトランケート構築を行い、ＡＫ１８３（３３６－７９２）、ＡＫ１８３（３３７－７９２）、ＡＫ１８３（３３８－７９２）、ＡＫ１８３（３３９－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントをそれぞれ得た。得られたＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果は、図１２に示すとおりである。図１２に示すとおり、ＡＫ１８３（３３６－７９２）、ＡＫ１８３（３３７－７９２）、ＡＫ１８３（３３８－７９２）、ＡＫ１８３（３３９－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントはいずれもｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性がない。したがって、第３ラウンドのトランケーション変異の結論としては、ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端最短活性部位は３３５位アミノ酸にあるということになる。最後に、発明者らはこれら３ラウンドの結果に対して再検証を行い、改めてＡＫ１８３（２８５－７９２）、ＡＫ１８３（３３０－７９２）、ＡＫ１８３（３３５－７９２）、ＡＫ１８３（３３６－７９２）、ＡＫ１８３（３３７－７９２）、ＡＫ１８３（３３８－７９２）、ＡＫ１８３（３３９－７９２）、ＡＫ１８３（３４０－７９２）、ＡＫ１８３（３４５－７９２）、ＡＫ１８３（３５０－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントを同時に発現させた。得られたＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントのＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性実験の結果は、図１３に示すとおりである。図１３に示すとおり、ＡＫ１８３（２８５－７９２）、ＡＫ１８３（３３０－７９２）、ＡＫ１８３（３３５－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントはｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性を保ち、ＡＫ１８３（３３６－７９２）、ＡＫ１８３（３３７－７９２）、ＡＫ１８３（３３８－７９２）、ＡＫ１８３（３３９－７９２）、ＡＫ１８３（３４０－７９２）、ＡＫ１８３（３４５－７９２）、ＡＫ１８３（３５０－７９２）ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントはｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性がない。これは前述の３ラウンドのトランケーション変異の結論、すなわち、ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端最短活性部位が３３５位アミノ酸にあるという結論と一致する。

以上を総合すると、ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼの最短活性フラグメントはＡＫ１８３（３３５－７９０）である。

［実施例２］ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼトランケート又はＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼ全長を含む融合タンパク質の調製
２．１プラスミド構築
ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼのＣ末端最短活性フラグメントＡＫ１８３（３１－７９０）を同定した後、発明者らはＦｃドメインをＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼの７９０位アミノ酸のＣ端に置き、間にＧＧＧＧＳを付加して連結し、ＦｃのＣ端に６ＸＨｉｓタグを付加してタンパク質精製に用い、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－７９０）－Ｆｃプラスミドを構築した。構築フローは図４に示すとおりである。次に発明者らは、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－７９０）－Ｆｃプラスミドをテンプレートとして、ＰＣＲによりＡＫ１８３（３１－７９０）トランケートの後ろに７９１番目及び７９２番目のアミノ酸を付加してＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃプラスミドを構築した。

出願人は同時に、北京六合華大基因科技有限公司に委託してＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－７９８）－Ｆｃ、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８０７）－Ｆｃ、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８１６）－Ｆｃ、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８３３）－Ｆｃの４つの候補サブクローンを構築した。候補サブクローンのＦｃ（ＣＨ２－ＣＨ３）はヒンジ領域が除去されており、そのアミノ酸配列は配列番号６に示すとおりであり（配列番号６は配列番号２に比して、配列番号２の最初の９個のアミノ酸ＥＰＫＳＣＤＫＴＨが欠けている）、かつＩｇＡプロテアーゼトランケートとＦｃとの間に１０個のＨｉｓ（リンカーＧＧＧＧＳの後ろ、Ｆｃの前）が付加されている。４つの候補サブクローンは、のちのプロテアーゼ収率及び純度スクリーニングの候補案に用いた。

ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメントとＦｃ領域との連結方式がそのＩｇＡに対する酵素切断活性に影響を及ぼすか否かを考察するため、発明者らはさらにＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ、ＰＥＴ３０ａ－Ｆｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）の２つの候補サブクローンを構築した。このうちＦｃのアミノ酸配列は配列番号２５に示すとおりである。

ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼトランケートフラグメント及びＦｃで形成された融合タンパク質と、ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼ全長及びＦｃで形成された融合タンパク質とのＩｇＡに対する酵素切断活性を比較するため、発明者らはさらに候補サブクローンＰＥＴ３０ａ－Ｆｃ－ＡＫ１８３（３１－１２０３）を構築した。このうちＦｃのアミノ酸配列は配列番号２４に示すとおりである。

ＩｇＧ１Ｆｃ、ＩｇＧ４Ｆｃ及びアルブミンがＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼトランケートを含む融合タンパク質のＩｇＡ酵素切断活性に及ぼす影響を考察するため、発明者らはさらにＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８１６）－ＩｇＧ４Ｆｃ、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８１６）－アルブミンの２つの候補サブクローンを構築した。このうちＩｇＧ４Ｆｃのアミノ酸配列は配列番号７７に示すとおりであり、アルブミンのアミノ酸配列は配列番号６０に示すとおりである。

異なるリンカーがＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼトランケートを含む融合タンパク質のＩｇＡ酵素切断活性に及ぼす影響を考察するため、発明者らはさらに６つの候補サブクローンＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）－ｌｉｎｋｅｒ－Ｆｃを構築した。この６つの候補サブクローンが発現した融合タンパク質配列において、リンカーが異なること以外、ＡＫ１８３（２８５－８１６）及びＦｃのアミノ酸配列はすべて同一であり、ＡＫ１８３（２８５－８１６）のアミノ酸配列は配列番号４６で示され、Ｆｃのアミノ酸配列は配列番号２５で示される。リンカーのアミノ酸配列はそれぞれＨＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号５９、「１０ｘＨｉｓ」ともいう）、ＥＥＫＫＫＥＫＥＫＥＥＱＥＥＲＥＴＫ（配列番号５８、「ＩｇＤｌｉｎｋｅｒ」ともいう）、ＧＧＧＧＳ（配列番号２２、「１ｘｌｉｎｋｅｒ」ともいう）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７８、「２ｘｌｉｎｋｅｒ」ともいう）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７９、「３ｘｌｉｎｋｅｒ」ともいう）、及びＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号８０、「４ｘｌｉｎｋｅｒ」ともいう）である。

２．２融合タンパク質の調製方法
発現ベクターを大腸菌（ＢＬ２１－ＤＥ３）コンピテントセルにトランスフェクションし、５０ｕｇ／ｍｌのカナマイシンを含むＬＢ寒天培地シャーレでの耐性選択を経たうえで、モノクローナルコロニーを選び取り、相応の抗生物質を含むＬＢ培地中で指数増殖期（ＯＤ６００：０．６～０．８）になるまで振とう培養し、指数生長期に達した後、０．１～０．５ｍＭのイソプロピル－β－Ｄ－チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）を加えて誘導し、１６℃で低温誘導発現を２４ｈ行った。発現が完了したら、通常の方法で大腸菌細胞体を処理し超音波破砕後に高速遠心するとともに上清を保留し、その後アフィニティークロマトグラフィー及び分子篩で純化して前記組換え融合タンパク質を得た。

ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃプラスミドの発現するＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号２に示すとおりであり、そのコーディング核酸配列は配列番号３に示すとおりである。

ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－７９８）－Ｆｃプラスミドの発現するＡＫ１８３（３１－７９８）－Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号６に示すとおりであり、そのコーディング核酸配列は配列番号７に示すとおりである。

ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８０７）－Ｆｃプラスミドの発現するＡＫ１８３（３１－８０７）－Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号８に示すとおりであり、そのコーディング核酸配列は配列番号９に示すとおりである。

ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８１６）－Ｆｃプラスミドの発現するＡＫ１８３（３１－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号１０に示すとおりであり、そのコーディング核酸配列は配列番号１１に示すとおりである。

ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８３３）－Ｆｃプラスミドの発現するＡＫ１８３（３１－８３３）－Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号１２に示すとおりであり、そのコーディング核酸配列は配列番号１３に示すとおりである。

ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃプラスミドの発現するＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号８１に示すとおりである。

ＰＥＴ３０ａ－Ｆｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）プラスミドの発現するＦｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号８２に示すとおりである。

ＰＥＴ３０ａ－Ｆｃ－ＡＫ１８３（３１－１２０３）プラスミドの発現するＦｃ－ＡＫ１８３（３１－１２０３）融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号８３に示すとおりである。

ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８１６）－ＩｇＧ４Ｆｃプラスミドの発現するＡＫ１８３（３１－８１６）－ＩｇＧ４Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号８４に示すとおりである。

ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８１６）－アルブミンプラスミドの発現するＡＫ１８３（３１－８１６）－アルブミン融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号８５に示すとおりである。

２．３ｉｎｖｉｔｒｏ活性測定方法
得られたＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼトランケートを含む融合タンパク質を、ＩｇＡ腎症患者の血漿から精製した基質ＩｇＡ１とｉｎｖｉｔｒｏで混合し、３７℃で２～１２時間反応させた後、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔを行い、基質ＩｇＡ１に対する酵素切断活性を検証した。

２．４ｉｎｖｉｖｏ活性測定方法
得られたＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼトランケートを含む融合タンパク質を、ヒト化ＩｇＡ１ａｌｐｈａ鎖ノックイン（α１ＫＩ－Ｔｇ）Ｃ５７ＢＬ／６マウスの体内に尾静脈注射し、注射前、注射後５ｍｉｎ、２ｈ、４ｈ、２４ｈの血液試料をそれぞれ採取して、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔで検証を行った。

２．５結果
実験は、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－７９０）－ＦｃプラスミドがＡＫ１８３（３１－７９０）－Ｆｃ融合タンパク質をうまく発現することを示している（図５のとおり）。またＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃ融合タンパク質は、予期された全長タンパク質発現を有し（図６ａのとおり）、ＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性も有している（図６ｂのとおり）。

候補である４つのサブクローンＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－７９８）－Ｆｃ、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８０７）－Ｆｃ、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８１６）－Ｆｃ、ＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８３３）－Ｆｃは、いずれも融合タンパク質を発現し、しかもいずれもＩｇＡ１に対するｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性を有する（図７のとおり）。

また、サブクローンＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ、ＰＥＴ３０ａ－Ｆｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）はいずれも融合タンパク質を発現し（図１４のとおり）、しかもいずれもｉｎｖｉｔｒｏ酵素切断活性を有する（図１５のとおり）。

発明者らはさらに、サブクローンＰＥＴ３０ａ－ＡＫ１８３（３１－８０７）－Ｆｃによって発現されるＡＫ１８３（３１－８０７）－Ｆｃ融合タンパク質、サブクローンＰＥＴ３０ａ－Ｆｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）によって発現されるＦｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）融合タンパク質のｉｎｖｉｖｏ活性を検証した。その結果は図８（ＡＫ１８３（３１－８０７）－Ｆｃ、還元的条件下）及び図１７（Ｆｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）、非還元的条件下）に示すとおりである。図８に示すとおり、ヒト化ＩｇＡ１マウス（α１ＫＩ－Ｔｇ）Ｃ５７ＢＬ／６にＡＫ１８３（３１－８０７）－Ｆｃ融合タンパク質を１本針で尾静脈注射した後、血液中の完全なＩｇＡ１重鎖（Ｈ）はすべて消失し、少なくとも２４時間持続した。図１７に示すとおり、ヒト化ＩｇＡ１マウス（α１ＫＩ－Ｔｇ）Ｃ５７ＢＬ／６にＦｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）融合タンパク質を１本針で尾静脈注射した後、血液中の完全なＩｇＡ１重鎖（Ｈ）はすべて消失し、少なくとも２週間持続した。

発明者らはさらに、Ｆｃ－ＡＫ１８３（２８５－８１６）融合タンパク質、ＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質、ＡＫ１８３（２８５－８１６）ＩｇＡプロテアーゼトランケートの三者のＩｇＡ１に対する酵素切断活性を比較した。その結果は図１６に示すとおりである。図１６に示すとおり、これら３種類のタンパク質はいずれもＩｇＡ１に対して酵素切断活性を有する。

発明者らはさらに、ＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質、Ｆｃ－ＡＫ１８３（３１－１２０３）融合タンパク質のＩｇＡ１に対する酵素切断活性を比較した。その結果は図１８に示すとおりである。図１８に示すとおり、ＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質、Ｆｃ－ＡＫ１８３（３１－１２０３）融合タンパク質はいずれもＩｇＡ１に対して酵素切断活性を有する。

発明者らはさらに、ＡＫ１８３（３１－８１６）－ＩｇＧ１Ｆｃ融合タンパク質、ＡＫ１８３（３１－８１６）－ＩｇＧ４Ｆｃ融合タンパク質及びＡＫ１８３（３１－８１６）－アルブミン融合タンパク質のＩｇＡ１に対する酵素切断活性を比較した。その結果は図１９に示すとおりである。図１９に示すとおり、これら３種類の融合タンパク質はいずれもＩｇＡ１に対して酵素切断活性を有する。

発明者らはさらに、異なるリンカー（１０×Ｈｉｓ、ＩｇＤｌｉｎｋｅｒ、１×ｌｉｎｋｅｒ、２×ｌｉｎｋｅｒ、３×ｌｉｎｋｅｒ又は４×ｌｉｎｋｅｒ）を有するＡＫ１８３（２８５－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質のＩｇＡ１に対する酵素切断活性を比較した。その結果は図２０に示すとおりである。図２０に示すとおり、これら６種類の融合タンパク質はいずれもＩｇＡ１に対して酵素切断活性を有する。

２．６真核生物発現系
以上の実験はすべて大腸菌（ＢＬ２１－ＤＥ３）コンピテントセル（すなわち、原核生物発現系）で行った。次に、発明者らはＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃ融合ｃＤＮＡ配列をｐｃＤＮＡ３．１／ｈｙｇｒｏ（＋）発現ベクターにクローニングし、融合タンパク質のＮ末端にＡＴＧＴＡＣＡＧＧＡＴＧＣＡＡＣＴＣＣＴＧＴＣＴＴＧＣＡＴＴＧＣＡＣＴＡＡＧＴＣＴＴＧＣＡＣＴＴＧＴＣＡＣＧＡＡＴＴＣＧ（配列番号４１）を加えてヒトＩＬ－２を発現するシグナルペプチド配列をコードし、ｐｃＤＮＡ３．１／ｈｙｇｒｏ（＋）－ＩＬ２－ＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃプラスミドを構築し、真核生物発現系ＨＥＫ２９３細胞のトランスフェクションに用いた。その中でＦｃ配列に真核生物発現系に対するコドン最適化を行った。ｐｃＤＮＡ３．１／ｈｙｇｒｏ（＋）－ＩＬ２－ＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃの発現するＩＬ２－ＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列は配列番号４に示すとおりであり、そのコーディング核酸配列は配列番号５に示すとおりである。

ＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃ融合タンパク質のＨＥＫ２９３細胞における発現結果は図９に示すとおりである。結果は、ＡＫ１８３（３１－７９２）－Ｆｃ融合タンパク質は予期された全長発現を有し、しかも真核系で発現した融合タンパク質には二量体（ｄｉｍｅｒ）形式が存在することを示している。

［実施例３］ＡＫ１８３ＩｇＡプロテアーゼ変異体の調製及び活性測定
発明者らはＡＫ１８３（３１－１２０３）ＩｇＡプロテアーゼトランケートをベースに、８４４位、８６２位、９３１位及び９３３位、９７８位、１００２位及び１００４位（上記の部位はいずれも配列番号１に対応した部位である）のプロリン（Ｐ）にそれぞれ部位特異的変異導入を行ってグリシン（Ｇ）に変異させ、ＡＫ１８３（３１－１１７３）ＩｇＡプロテアーゼトランケートの５種類の変異体を得た。そのアミノ酸配列はそれぞれ配列番号５３（「ＰＡ－ＧＡＭｕｔ」ともいう）、配列番号５４（「ＰＩ－ＧＩＭｕｔ」ともいう）、配列番号５５（「ＰＡＰ－ＧＡＧＭｕｔ」ともいう）、配列番号５６（「ＰＡＴ－ＧＡＴＭｕｔ」ともいう）及び配列番号５７（「ＰＩＰ－ＧＩＧＭｕｔ」ともいう）で示される。

発明者らは、これら５種類の変異体のＩｇＡ１に対する酵素切断活性をそれぞれ測定した。その結果は図２１に示すとおりである。図２１に示すとおり、これら５種類の変異体はいずれもＩｇＡ１に対して酵素切断活性を有する。

また、発明者らはさらに実施例２で調製したＡＫ１８３（３１－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列（すなわち配列番号１０）をベースに、そのＦｃ領域の７位（当該部位は配列番号２５に対して）のアラニン（Ａ）に部位特異的変異導入を行い、それぞれバリン（Ｖ）、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、ロイシン（Ｌ）に変異させ、ＡＫ１８３（３１－８１６）－Ｆｃ融合タンパク質の４種類の変異体を得、それぞれＡ－ＶＭｕｔ、Ａ－ＧＭｕｔ、Ａ－ＳＭｕｔとＡ－ＬＭｕｔと称した。

発明者らは、これら４種類の変異体のＩｇＡ１に対する酵素切断活性をそれぞれ測定した。その結果は図２２に示すとおりである。図２２に示すとおり、これら４種類の変異体はいずれもＩｇＡ１に対して酵素切断活性を有する。

［実施例４］他のＩｇＡプロテアーゼの探索
発明者らはメタゲノムデータベースからＡＫ１８３の野生型ＩｇＡ酵素と一定の相同性を有するアミノ酸配列を数種類スクリーニングし、１６種類のＡＫ１８３相同酵素を合成した。それらのアミノ酸配列はそれぞれ配列番号６１～配列番号７６に示すとおりである。発明者らは、実施例２．３に記載のｉｎｖｉｔｒｏ活性測定方法に従って、これらＡＫ１８３相同酵素のＩｇＡ１に対する酵素切断活性をそれぞれ測定した。その結果は図２３ａと図２３ｂに示すとおりである。図２３ａ中の「１＋ＩｇＡ１」は配列番号６１に示すポリペプチドと基質ＩｇＡ１とのｉｎｖｉｔｒｏ混合を表し、「２＋ＩｇＡ１」は配列番号６２に示すポリペプチドと基質ＩｇＡ１とのｉｎｖｉｔｒｏ混合を表し、以下もこれと同様である。図２３ｂ中の「１６＋ＩｇＡ１」は配列番号７６のポリペプチドと基質ＩｇＡ１とのｉｎｖｉｔｒｏ混合を表す。

図２３ａ及び図２３ｂからわかるように、配列番号６１～７６に示すポリペプチドはいずれもＩｇＡ１に対して酵素切断活性を有する。

本願は、特定の実施例を引用しつつ発明につき特定の表現や説明を行っているが、当業者であれば理解できるとおり、上記内容は、本願に開示された趣旨及び保護範囲から逸脱することなしに、形態及び詳細において様々な変更が可能である。

Claims

クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼの非天然トランケートフラグメントを含むか、又は前記非天然トランケートフラグメントと少なくとも７０％の配列同一性を有する、単離されたＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記非天然トランケートフラグメントは、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼをベースにアミノ酸の置換、欠失、挿入又は修飾が行われ、それにより前記ＩｇＡプロテアーゼトランケートの自己酵素切断機能が喪失又は低下される、請求項１に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記アミノ酸の置換、欠失、挿入、又は修飾は、前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼの天然自己酵素切断部位、前記天然自己酵素切断部位の５部位以内上流、及び／又は５部位以内下流で発生する、請求項２に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記非天然トランケートフラグメントは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端トランケートフラグメント又はＣ末端トランケートフラグメントである、請求項１～３のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）は、ＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍＡＫ１８３株である、先行する請求項のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記Ｎ末端トランケートフラグメントは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端側３１位から少なくとも７６０個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含むか、又は前記ポリペプチドフラグメントと少なくとも７０％の配列同一性を有する、請求項４又は５に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記非天然トランケートフラグメントは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、又はそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのＮ末端側３３５位から少なくとも４５６個の連続したアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含むか、又は前記ポリペプチドフラグメントと少なくとも９０％若しくは少なくとも９５％の配列同一性を有する、先行する請求項のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）の野生型ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は配列番号１に示すとおりである、先行する請求項のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記天然自己酵素切断部位は、配列番号１に示すアミノ酸配列の７３０位～８４０位の間（例えば、７９２位～７９７位の間）である、請求項３から８のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記天然自己酵素切断部位は、配列番号１に示すアミノ酸配列の７９０位、７９１位、７９２位、７９３位、７９４位、７９５位、７９６位、７９７位、７９８位、７９９位、又は８００位である、請求項９に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位から少なくとも７６０個（例えば、少なくとも７６１個、少なくとも７６２個、少なくとも７６３個、少なくとも７６４個、少なくとも７６５個、少なくとも７６６個、少なくとも７６７個、少なくとも７６８個、少なくとも７６９個、少なくとも７７０個、少なくとも７７１個、少なくとも７７２個、少なくとも７７３個、少なくとも７７４個、少なくとも７７５個、少なくとも７７６個、少なくとも７７７個、少なくとも７７８個、少なくとも７７９個、少なくとも７８０個、少なくとも７８１個、少なくとも７８２個、少なくとも７８３個、少なくとも７８４個、少なくとも７８５個、少なくとも７８６個、少なくとも７８７個、少なくとも７８８個、少なくとも７８９個、少なくとも７９０個、少なくとも７９１個、少なくとも７９２個、少なくとも７９３個、少なくとも７９４個、少なくとも７９５個、少なくとも７９６個、少なくとも７９７個、少なくとも７９８個、少なくとも７９９個、少なくとも８００個、少なくとも８０１個、少なくとも８０２個、少なくとも８０３個、少なくとも８０４個、少なくとも８０５個、少なくとも８０６個、少なくとも８０７個、少なくとも８０８個、少なくとも８０９個、少なくとも８１０個、少なくとも９００個、少なくとも９５０個、少なくとも１０００個、少なくとも１１００個、少なくとも１１５０個又は少なくとも１２００個）の連続するアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む、先行する請求項のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～７９８位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～８０７位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～８１６位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３１位～８３３位アミノ酸、及びそれらと少なくとも７０％の配列同一性を有するポリペプチドフラグメント、からなる群より選択されるポリペプチドフラグメントを含む、先行する請求項のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位から少なくとも４５６個（例えば、少なくとも４５７個、少なくとも４５８個、少なくとも４５９個、少なくとも４６０個、少なくとも４６１個、少なくとも４６２個、少なくとも４６３個、少なくとも４６４個、少なくとも４６５個、少なくとも４６６個、少なくとも４６７個、少なくとも４６８個、少なくとも４６９個、少なくとも４７０個、少なくとも４７１個、少なくとも４７２個、少なくとも４７３個、少なくとも４７４個、少なくとも４７５個、少なくとも４７６個、少なくとも４７７個、少なくとも４７８個、少なくとも４７９個、少なくとも４８０個、少なくとも４８１個、少なくとも４８２個、少なくとも４８３個、少なくとも４８４個、少なくとも４８５個、少なくとも４８６個、少なくとも４８７個、少なくとも４８８個、少なくとも４８９個、少なくとも４９０個、少なくとも４９１個、少なくとも４９２個、少なくとも４９３個、少なくとも４９４個、少なくとも４９５個、少なくとも４９６個、少なくとも４９７個、少なくとも４９８個、少なくとも４９９個、少なくとも５００個、少なくとも５５０個、少なくとも６００個、少なくとも６５０個、少なくとも７００個、少なくとも７５０個、少なくとも８００個、少なくとも８５０個又は少なくとも９００個）の連続するアミノ酸のポリペプチドフラグメントを含む、先行する請求項のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位～７９１位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３５位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～７９１位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３０位～７９０位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３０位～７９１位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の３３０位～７９２位アミノ酸、配列番号１に示すアミノ酸配列の２８５位～８１６位アミノ酸、及びそれらと少なくとも９０％又は少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチドフラグメント、からなる群より選択されるポリペプチドフラグメントを含む、請求項１３に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記ポリペプチドフラグメントのアミノ酸配列をベースに、１つ又は複数の部位にアミノ酸の保存的置換を有する、先行する請求項のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位、８６２位、９３１位、９３３位、９７８位、１００２位、１００４位のうち１つ又は複数に対応する位置にアミノ酸変異を有する、先行する請求項のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位、８６２位、９３１位、９３３位、９７８位、１００２位、１００４位のうち１つ又は複数に対応する位置がグリシンに変異する、請求項１６に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記ポリペプチドフラグメントは、配列番号１の８４４位に対応する位置にアミノ酸変異、８６２位に対応する位置にアミノ酸変異、９３１位及び９３３位に対応する位置にアミノ酸変異、９７８位に対応する位置にアミノ酸変異、又は１００２位及び１００４位に対応する位置にアミノ酸変異を有する、請求項１６又は１７に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
前記ポリペプチドフラグメントのアミノ酸配列は、配列番号５３（「ＰＡ－ＧＡＭｕｔ」ともいう）、配列番号５４（「ＰＩ－ＧＩＭｕｔ」ともいう）、配列番号５５（「ＰＡＰ－ＧＡＧＭｕｔ」ともいう）、配列番号５６（「ＰＡＴ－ＧＡＴＭｕｔ」ともいう）又は配列番号５７（「ＰＩＰ－ＧＩＧＭｕｔ」ともいう）で示される、請求項１６から１８のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
ヒトＩｇＡを特異的に切断する酵素活性を有する、先行する請求項のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
ヒトＩｇＡ重鎖を特異的に切断する酵素活性を有する、請求項２０に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
ヒトＩｇＡ重鎖ＣＨ１とヒンジ領域との交わる箇所を特異的に切断する酵素活性を有する、請求項２１に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
ヒトＩｇＡ１を特異的に切断する酵素活性を有する、請求項２０から２２のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート。
第１のポリペプチドと第２のポリペプチドとを含む融合タンパク質であって、前記第１のポリペプチドは、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、若しくはそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼの全長、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｒａｍｏｓｕｍ）から得られる、若しくはそれから誘導される野生型ＩｇＡプロテアーゼのシグナルペプチドを除去してなるポリペプチド、又は請求項１～２３のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートを含み、前記第２のポリペプチドは、対象の体内における前記第１のポリペプチドの半減期を延長するためのアミノ酸配列を含む、融合タンパク質。
前記第１のポリペプチドは、配列番号１又は配列番号４２に示す配列を含む、請求項２４に記載の融合タンパク質。
前記第２のポリペプチドは、前記第１のポリペプチドのＮ末端又はＣ末端に位置する、請求項２４に記載の融合タンパク質。
前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドとの間はリンカーによって連結される、請求項２４から２６のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドとの間は直接連結される、請求項２４から２６のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
前記リンカーは、切断可能型リンカー、非切断可能型リンカー、ペプチドリンカー、フレキシブルリンカー、剛直リンカー、らせん状リンカー、及び非らせん状リンカーからなる群より選択される、請求項２７に記載の融合タンパク質。
前記リンカーはペプチドリンカーを含む、請求項２９に記載の融合タンパク質。
前記ペプチドリンカーは、グリシン及びセリンを含有するリンカーを含む、請求項３０に記載の融合タンパク質。
前記グリシン及びセリンを含有するリンカーは、配列番号２１（ＧＧＧＳ）、配列番号２２（ＧＧＧＧＳ）、配列番号８６（ＧＧＧＧＧＳ）又は配列番号８７（ＧＧＧＧＧＧＧＳ）に示す１つ、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上の反復を含む、請求項３１に記載の融合タンパク質。
前記リンカーは、配列番号２３（ＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＧＡＴＣＣ）に示すか、配列番号５８（ＥＥＫＫＫＥＫＥＫＥＥＱＥＥＲＥＴＫ）に示すか、又は配列番号５９（ＨＨＨＨＨＨＨＨＨＨ）に示すアミノ酸配列を含む、請求項３０に記載の融合タンパク質。
前記第２のポリペプチドは、Ｆｃドメイン及びアルブミンより選択される、請求項２４から３３のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
前記Ｆｃドメインはヒンジ領域を含む、請求項３４に記載の融合タンパク質。
前記ＦｃドメインはヒトＩｇＧＦｃドメインに由来する、請求項３５に記載の融合タンパク質。
前記Ｆｃドメインは、ヒトＩｇＧ１Ｆｃドメイン、ヒトＩｇＧ２Ｆｃドメイン、ヒトＩｇＧ３Ｆｃドメイン、又はヒトＩｇＧ４Ｆｃドメインに由来する、請求項３６に記載の融合タンパク質。
前記Ｆｃドメインは、配列番号２４、配列番号２５、配列番号３２、又は配列番号７７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項３４から３７のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
前記Ｆｃドメインは、配列番号２４、配列番号２５、配列番号３２、又は配列番号７７に示すアミノ酸配列を含む、請求項３８に記載の融合タンパク質。
前記Ｆｃドメインは、配列番号２５の７位に対応する位置にアミノ酸変異を有する、請求項３９に記載の融合タンパク質。
前記Ｆｃドメインは、配列番号２５の７位に対応する位置のアミノ酸（例えばアラニン）がバリン、グリシン、セリン、又はロイシンに変異する、請求項４０に記載の融合タンパク質。
前記Ｆｃドメインは、前記融合タンパク質の半減期を延長する１つ又は複数の変異を含む、請求項３４から４１のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
前記Ｆｃドメインは、前記第１のポリペプチドのＣ末端又はＮ末端に連結される、請求項３４から４２のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
前記アルブミンは、ヒト血清アルブミンの１つ又は複数のドメインを含む、請求項３４に記載の融合タンパク質。
前記アルブミンは、ヒト血清アルブミンのＤ３ドメインを含む、請求項４４に記載の融合タンパク質。
さらにタグを含む、請求項２４から４５のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
前記タグは、蛍光タグ、発光タグ、精製タグ、及び発色タグからなる群より選択される、請求項４６に記載の融合タンパク質。
前記タグは、ｃ－Ｍｙｃタグ、ＨＡタグ、ＶＳＶ－Ｇタグ、ＦＬＡＧタグ、Ｖ５タグ、及びＨＩＳタグからなる群より選択される、請求項４６又は４７に記載の融合タンパク質。
前記タグは、６個、７個、８個、９個、又は１０個のヒスチジンを含むＨＩＳタグである、請求項４８に記載の融合タンパク質。
前記第２のポリペプチドは、前記第１のポリペプチドのＣ末端に位置し、前記タグは前記第２のポリペプチドのＣ末端に位置する、請求項４６から４９のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
対象の体内の血液循環中における前記融合タンパク質の半減期は、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、少なくとも６日、少なくとも７日、少なくとも８日、少なくとも９日、少なくとも１０日、少なくとも１１日、少なくとも１２日、少なくとも１３日、少なくとも１４日である、請求項４６から５０のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
請求項１から２３のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートをコードするヌクレオチド配列を含む、又は請求項２４から５１のいずれか１項に記載の融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、及びそれらと少なくとも７０％の配列同一性を有するヌクレオチド配列からなる群より選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項５２に記載の核酸。
請求項５２又は５３に記載の核酸を含む、ベクター。
請求項５２若しくは５３に記載の核酸、又は請求項５４に記載のベクターを含む、細胞。
前記細胞は、原核生物の細胞又は真核生物の細胞である、請求項５５に記載の細胞。
前記原核生物の細胞は、大腸菌の細胞である、請求項５６に記載の細胞。
前記真核生物の細胞は、哺乳類の細胞である、請求項５６に記載の細胞。
前記哺乳類の細胞は、ヒト細胞又はチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、請求項５８に記載の細胞。
前記哺乳類の細胞は、ヒト胎児腎細胞２９３（ＨＥＫ２９３細胞）である、請求項５８に記載の細胞。
請求項１から２３のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケートを含む、請求項２４から５１のいずれか１項に記載の融合タンパク質を含む、請求項５２若しくは５３に記載の核酸を含む、請求項５４に記載のベクターを含む、又は請求項５５から６０のいずれか１項に記載の細胞、及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
請求項５５から６０のいずれか１項に記載の細胞を培養するステップを含む、融合タンパク質の産生方法。
治療又は予防を必要とする対象に対し請求項１から２３のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート、請求項２４から５１のいずれか１項に記載の融合タンパク質、又は請求項６１に記載の医薬組成物を投与することを含む、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防する方法。
治療又は予防を必要とする対象に対しＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート、前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケートを含む融合タンパク質、又は前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート若しくは前記融合タンパク質を含む医薬組成物を投与することを含むＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防する方法であって、前記ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６又はそれらの組合せからなる群より選択される、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防する方法。
請求項１から２３のいずれか１項に記載のＩｇＡプロテアーゼトランケート、請求項２４から５１のいずれか１項に記載の融合タンパク質、又は請求項６１に記載の医薬組成物の、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防するための医薬の調製における用途。
ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート、前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケートを含む融合タンパク質、又は前記ＩｇＡプロテアーゼ若しくはそのトランケート若しくは前記融合タンパク質を含む医薬組成物の、ＩｇＡ沈着関連疾患を治療又は予防するための医薬の調製における用途であって、ＩｇＡプロテアーゼのアミノ酸配列は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６又はそれらの組合せからなる群より選択される、用途。
前記ＩｇＡ沈着関連疾患には、ＩｇＡ腎症、疱疹状皮膚炎、ヘノッホ・シェーライン紫斑病（ＩｇＡ血管炎ともいう）、川崎病、紫斑病性腎炎、ＩｇＡ血管炎による腎損傷、ＩｇＡリウマトイド因子陽性の関節リウマチ、ＩｇＡ型抗ＧＢＭ病、又はＩｇＡ型ＡＮＣＡ関連血管炎が含まれる、請求項６３若しくは６４に記載の方法、又は請求項６５若しくは６６に記載の用途。
前記ＩｇＡ沈着関連疾患は、ＩｇＡ腎症、ＩｇＡ血管炎、又は川崎病である、請求項６３若しくは６４に記載の方法、又は請求項６５若しくは６６に記載の用途。