JP2025500860A

JP2025500860A - ｄｓＲＮＡ、その調製方法及び使用

Info

Publication number: JP2025500860A
Application number: JP2024535520A
Authority: JP
Inventors: 云▲飛▼ 李; ▲ジェン▼ ▲張▼; 哲侯; 俊耿; 建羽 ▲張▼; 雅琴周; ▲龍▼▲飛▼ 黄
Original assignee: Tuojie Biotech Shanghai Co Ltd
Current assignee: Tuojie Biotech Shanghai Co Ltd
Priority date: 2021-12-16
Filing date: 2022-12-16
Publication date: 2025-01-15
Also published as: KR20240116537A; TW202334425A; CA3240651A1; CN118302526A; WO2023109938A1

Abstract

ｄｓＲＮＡ、その調製方法及び使用。当該ｄｓＲＮＡを含む医薬組成物、細胞又は試薬キットである。当該ｄｓＲＮＡは、ＨＢＶ遺伝子の発現を妨害し、関連疾患を予防及び／又は治療することができる。

Description

本開示は、出願日が２０２１年１２月１６日である中国特許出願２０２１１１５４２７９７．４の優先権を主張し、本開示には、上記中国特許出願の全文が引用されている。

本開示は、ＲＮＡ干渉の役割を果たすための、細胞内への標的化された送達を可能にするｄｓＲＮＡに関する。本開示はまた、ｄｓＲＮＡの調製方法及び使用に関する。

ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）は、遺伝子の発現をサイレンシングする効率的な方式である。統計によると、人体内の疾患関連タンパク質のうち、約８０％以上のタンパク質は、現在通常の小分子薬物及び生物大分子製剤により標的とされることができず、創薬不可能なタンパク質に属する。ＲＮＡ干渉技術によれば、これらのタンパク質をコードするｍＲＮＡによって、適当なｓｉＲＮＡを設計し、特異的に目標ｍＲＮＡを標的として目標ｍＲＮＡを分解することで、関連するタンパク質の産生の抑制を達成することができる。従って、ｓｉＲＮＡは、非常に重要な医薬品開発の可能性を持っている。しかしながら、体内での治療的なＲＮＡ干渉効果を達成するためには、体内での特定の細胞へのｓｉＲＮＡ分子の送達が必要である。

標的リガンド複合ｓｉＲＮＡを採用し、標的リガンドを利用して細胞膜表面の受容体分子を結合し、エンドサイトーシスすることが、効果的な薬物送達方式である。例えば、アシアロ糖タンパク受容体（ＡＳＧＰＲ）は、肝細胞表面において高い存在度を有し、細胞内外での転換が迅速である特徴を有する、肝細胞特異的に発現される受容体である。ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ－アセチルガラクトサミンなどの単糖や多糖分子は、ＡＳＧＰＲに対して高い親和性を有する。文献によると（１０．１６４７６／ｊ．ｐｉｂｂ．２０１５．００２８）、肝細胞にｓｉＲＮＡを効率的に送達するためにアミノガラクトース分子クラスター（ＧａｌＮＡｃ）を使用することができ、ＧａｌＮＡｃ分子が３価又は４価の分子クラスターとして設計されることは、肝細胞を標的とする１価又は２価ＧａｌＮＡｃ分子の能力を顕著に増加させることができる。

異なる分子クラスター構造、及びＲＮＡへの異なる連結方式は、体内でのｓｉＲＮＡの活性に明らかに影響を及ぼし、より高い活性は、よりよい治療効果、又はより低い投与量を意味する。同等の薬効において、投与量が少ないほど毒性応答が低いことを意味する。

ｄｓＲＮＡ
第１の態様において、本開示は、ｓｉＲＮＡ及びそれに複合する１つ又は複数のリガンドを含むｄｓＲＮＡを提供し、上記ｓｉＲＮＡはセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み、上記アンチセンス鎖は、その５’末端から２位～８位の少なくとも１つのヌクレオチド位置で式（Ｉ）に示される化学修飾、その互変異性体修飾又はその薬学的に許容される塩を含み、
そのうち、ＹはＯ、ＮＨ及びＳから選ばれ、
各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、Ｓ、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、そのうち、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５はそれぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｊ_２はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
ｎ＝０、１又は２、ｍ＝０、１又は２、ｓ＝０又は１であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ＰＲ_６から選ばれ、そのうち、Ｒ_６は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｑ_１は
、Ｑ_２はＲ_２であり、又は
Ｑ_１はＲ_２、Ｑ_２は
であり、
そのうち、
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、そのうち、Ｒ_７はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｊ_１はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、そのうち、Ｒ_８はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは塩基であり、
上記式（Ｉ）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩修飾は、
ではなく、
上記リガンドは、式（ＩＩ）に示される化合物又はその薬学的に許容される塩であり、
そのうち、Ｌ_１は、Ｃ_１－Ｃ_３０アルキル鎖であるか、或いは１つ又は複数の酸素、硫黄、窒素原子又はＣ＝Ｏにより中断されるＣ_１－Ｃ_３０アルキル鎖を含み、
Ｒ_１１及びＲ_１２は、独立的に化学結合、ＮＲ_１６、Ｃ＝Ｏ又は－ＯＣ（＝Ｏ）－であり、
Ｑ_３は、
であり、
は、単結合又は二重結合であり、且つ
が単結合である場合、Ｒ_１３は、独立的にＣＲ_１７Ｒ_１８、ＮＲ_１６、Ｏ又はＳであり、
が二重結合である場合、Ｒ_１３は、独立的にＣＲ_１９又はＮであり、
Ｒ_１４は、独立的にＣＲ_１９又はＮであり、
環Ａは、存在するか、又は存在しないシクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基又はヘテロアリール基であり、且つ環Ａが存在する場合、Ｒ_１５は、独立的にＣＲ_１９又はＮであり、環Ａが存在しない場合、Ｒ_１５は、独立的にＣＲ_１７Ｒ_１８、ＮＲ_１６又はＯであり、
Ｒ_１６及びＲ_１９は、独立的に水素、重水素、アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、ＳＲ’、Ｓ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒ’、Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＲ’（Ｒ’’）、ＮＲ’（Ｒ’’）、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’又はＣ（＝Ｏ）ＮＲ’（Ｒ’’）であり、上記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基又はヘテロアリール基は、任意選択的にハロゲン、ヒドロキシ基、オキソ、ニトロ基、シアノ基、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_１－６アルコキシ基、Ｃ_３－７シクロアルキル基、３～１２員ヘテロシクロアルキル基、６～１２員アリール基、５～１２員ヘテロアリール基、ＳＲ’、Ｓ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒ’、Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＲ’（Ｒ’’）、ＮＲ’（Ｒ’’）、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’及びＣ（＝Ｏ）ＮＲ’（Ｒ’’）から選ばれる１つ又は複数の基で置換され、
Ｒ_１７及びＲ_１８は、独立的に水素、重水素、アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、ＳＲ’、Ｓ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒ’、Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＲ’（Ｒ’’）、ＮＲ’（Ｒ’’）、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’又はＣ（＝Ｏ）ＮＲ’（Ｒ’’）であり、上記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基又はヘテロアリール基は、任意選択的にハロゲン、ヒドロキシ基、オキソ、ニトロ基、シアノ基、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_１－６アルコキシ基、Ｃ_３－７シクロアルキル基、３～１２員ヘテロシクロアルキル基、６～１２員アリール基、５～１２員ヘテロアリール基、ＳＲ’、Ｓ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒ’、Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＲ’（Ｒ’’）、ＮＲ’（Ｒ’’）、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’及びＣ（＝Ｏ）ＮＲ’（Ｒ’’）から選ばれる１つ又は複数の基で置換され、
Ｒ’及びＲ’’は、独立的に水素、重水素、ヒドロキシ基、アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基又はヘテロアリール基であり、上記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基又はヘテロアリール基は、任意選択的にハロゲン、ヒドロキシ基、オキソ、ニトロ基及びシアノ基から選ばれる１つ又は複数の置換基で置換され、
ｍ１、ｎ１、ｐ１及びｑ１は、独立的に０、１、２、３又は４であり、
Ｂ１は、
であり、
Ｒ_ｂ１、Ｒ_ｂ２、Ｒ_ｂ３、Ｒ_ｂ４、Ｒ_ｂ５、Ｒ_ｂ６及びＲ_ｂ７は、独立的に－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｚ８－Ｏ－又は－ＮＨＣ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｚ９－Ｏ－であり、
ｚ１、ｚ２、ｚ３、ｚ４、ｚ５、ｚ６、ｚ７、ｚ８及びｚ９は、独立的に０～１０の整数であり、
Ｌ_２は、Ｃ_１－Ｃ_３０アルキル鎖であるか、或いは１つ又は複数の酸素、硫黄、窒素原子又はＣ＝Ｏにより中断されるＣ_１－Ｃ_３０アルキル鎖を含み、
ｒ１は、１～１０の整数である。

幾つかの実施形態において、ＸがＮＨ－ＣＯである場合、Ｒ_１はＨではない。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾は、式（Ｉ－１）に示される化学修飾であり、
そのうち、ＹはＯ、ＮＨ及びＳから選ばれ、
各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、Ｓ、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、そのうち、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５はそれぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
ｎ＝０、１又は２、ｍ＝０、１又は２、ｓ＝０又は１であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ＰＲ_６から選ばれ、そのうち、Ｒ_６は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、そのうち、Ｒ_７はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、そのうち、Ｒ_８はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ）に定義される通りである。

式（Ｉ－１）の幾つかの実施形態において、Ｂは、プリン塩基、ピリミジン塩基、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ－１）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アデニン、グアニン、イソグアニン、ヒポキサンチン、キサンチン、Ｃ２で修飾されたプリン、Ｎ８で修飾されたプリン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、Ｎ６－アルキルアデニン、Ｏ６－アルキルグアニン、７－デアザプリン、シトシン、５－メチルシトシン、イソシトシン、プソイドシトシン、ウラシル、プソイドウラシル、２－チオウリジン、４－チオウリジン、Ｃ５で修飾されたピリミジン、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ－１）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アデニン、グアニン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、シトシン、ウラシル、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ－１）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アンチセンス鎖の当該位置におけるヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾は、式（Ｉ－２）に示される化学修飾であり、
そのうち、ＹはＯ、ＮＨ及びＳから選ばれ、
各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、Ｓ、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、そのうち、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５はそれぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
ｎ＝０、１又は２、ｍ＝０、１又は２、ｓ＝０又は１であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ＰＲ_６から選ばれ、そのうち、Ｒ_６は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、そのうち、Ｒ_７はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｒ_２はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、そのうち、Ｒ_８はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ）に定義される通りである。

式（Ｉ－２）の幾つかの実施形態において、Ｂは、プリン塩基、ピリミジン塩基、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ－２）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アデニン、グアニン、イソグアニン、ヒポキサンチン、キサンチン、Ｃ２で修飾されたプリン、Ｎ８で修飾されたプリン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、Ｎ６－アルキルアデニン、Ｏ６－アルキルグアニン、７－デアザプリン、シトシン、５－メチルシトシン、イソシトシン、プソイドシトシン、ウラシル、プソイドウラシル、２－チオウリジン、４－チオウリジン、Ｃ５で修飾されたピリミジン、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ－２）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アデニン、グアニン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、シトシン、ウラシル、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ－２）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アンチセンス鎖の当該位置におけるヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、Ｓ、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、そのうち、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５はそれぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_３アルキル基であり、
ｎ＝０、１又は２、ｍ＝０、１又は２、ｓ＝０又は１であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_３アルキル基であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_４アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれ、そのうち、Ｒ_６は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_４アルキニル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、そのうち、Ｒ_７は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_４アルキニル基から選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_４アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、そのうち、Ｒ_８は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_４アルキニル基から選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ）に定義される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｂは、プリン塩基、ピリミジン塩基、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｂは、アデニン、グアニン、イソグアニン、ヒポキサンチン、キサンチン、Ｃ２で修飾されたプリン、Ｎ８で修飾されたプリン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、Ｎ６－アルキルアデニン、Ｏ６－アルキルグアニン、７－デアザプリン、シトシン、５－メチルシトシン、イソシトシン、プソイドシトシン、ウラシル、プソイドウラシル、２－チオウリジン、４－チオウリジン、Ｃ５で修飾されたピリミジン、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｂは、アデニン、グアニン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、シトシン、ウラシル、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｂは、アンチセンス鎖の当該位置におけるヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、Ｓ、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、そのうち、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５は、それぞれ独立的にＨ、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基又はイソプロピル基であり、
ｎ＝０、１又は２、ｍ＝０、１又は２、ｓ＝０又は１であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨ又はメチル基であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＮＨ_２、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基、ビニル基、アリル基、エチニル基、プロパルギル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－メチルアミノ基、－Ｏ－エチルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれ、そのうち、Ｒ_６はＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、ビニル基、アリル基、エチニル基及びプロパルギル基から選ばれ、ｐ＝１又は２であり、
Ｒ_１はＨ、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基、ビニル基、アリル基、エチニル基、プロパルギル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、そのうち、Ｒ_７はＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、ビニル基、アリル基、エチニル基及びプロパルギル基から選ばれ、ｑ＝１又は２であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＮＨ_２、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基、ビニル基、アリル基、エチニル基、プロパルギル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－メチルアミノ基、－Ｏ－エチルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、そのうち、Ｒ_８は、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、ビニル基、アリル基、エチニル基及びプロパルギル基から選ばれ、ｒ＝１又は２であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ）に定義される通りである。

幾つかの実施形態において、ＹはＯ又はＮＨであり、各Ｘは、独立的にＮＨ－ＣＯ、ＣＨ_２及びＮＨから選ばれ、
ｎ＝０又は１、ｍ＝０又は１、ｓ＝０又は１であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨであり、
Ｒ_１はＨ、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ）に定義される通りである。

幾つかの実施形態において、ＹはＯ又はＮＨであり、各Ｘは、独立的にＮＨ－ＣＯ、ＣＨ_２及びＮＨから選ばれ、
ｎ＝０又は１、ｍ＝０又は１、ｓ＝０又は１であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨであり、
Ｒ_１はＨ、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
Ｒ_２はＨ、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ）に定義される通りである。

幾つかの実施形態において、ＹはＯ又はＮＨであり、
各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５はそれぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｊ_２はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
ｎ＝０又は１、ｍ＝０又は１、ｓ＝０又は１であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれ、Ｒ_６はＯＨ、メトキシ基及びエトキシ基から選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｑ_１は
、Ｑ_２はＲ_２であり、又はＱ_１はＲ_２、Ｑ_２は
であり、
Ｒ_１はＨ、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、Ｒ_７はＯＨ、メトキシ基及びエトキシ基から選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｊ_１はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、Ｒ_８はＯＨ、メトキシ基及びエトキシ基から選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は３～６員環になるように直接連結しており、
Ｂは塩基であり、
上記式（Ｉ）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩修飾は、
ではない。

幾つかの実施形態において、Ｘは独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）及びＮＨ－ＣＯから選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｘは独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）から選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｒ_３はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｒ_３はＨ及びＣ_１－Ｃ_６アルキル基から選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１はＨ及びＣ_１－Ｃ_６アルキル基から選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｒ_２はＨ、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｒ_２はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれる。

幾つかの実施形態において、ＹはＯであり、
各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、Ｒ_４及びＲ_４’は、それぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｊ_２はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_３はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれ、Ｒ_６はＯＨから選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｑ_１は
、Ｑ_２はＲ_２であり、又はＱ_１はＲ_２、Ｑ_２は
であり、
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、Ｒ_７はＯＨから選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｊ_１はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、Ｒ_８はＯＨから選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は５～６員環になるように直接連結しており、
Ｂは塩基である。

幾つかの実施形態において、ＹはＯであり、
各Ｘは、ＣＲ_４（Ｒ_４’）から独立的に選ばれ、Ｒ_４及びＲ_４’は、それぞれ独立的に、Ｈ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｊ_２はＨであり、
Ｒ_３はＨ及びＣ_１－Ｃ_６アルキル基から選ばれ、
Ｑ_１は
、Ｑ_２はＲ_２であり、又はＱ_１はＲ_２、Ｑ_２は
であり、
Ｒ_１はＨ及びＣ_１－Ｃ_６アルキル基から選ばれ、
Ｊ_１はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_２はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、Ｒ_８はＯＨから選ばれ、Ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は５～６員環になるように直接連結しており、
Ｂは塩基である。

幾つかの実施形態において、ＹはＯである。

幾つかの実施形態において、Ｘは独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５は、それぞれ独立的にＨ、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基又はイソプロピル基である。幾つかの実施形態において、Ｘは独立的にＮＨ－ＣＯ、ＣＨ_２及びＮＨから選ばれる。幾つかの実施形態において、Ｘは独立的にＮＨ－ＣＯ及びＣＨ_２から選ばれる。幾つかの実施形態において、ＸはＣＨ_２である。

幾つかの実施形態において、Ｊ_２はＨ又はメチル基である。幾つかの実施形態において、Ｊ_２はＨである。

幾つかの実施形態において、Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれ、Ｒ_６はＯＨ、メトキシ基及びエトキシ基から選ばれ、ｐ＝１又は２である。幾つかの実施形態において、Ｒ_３はＨ、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれ、Ｒ_６はＯＨから選ばれ、ｐ＝１又は２である。幾つかの実施形態において、Ｒ_３はＨ及びメチル基から選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１はＨ、ＯＨ、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、Ｒ_７はＯＨから選ばれ、ｑ＝１又は２である。幾つかの実施形態において、Ｒ_１はＨ、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、Ｒ_７はＯＨから選ばれ、ｑ＝１又は２である。幾つかの実施形態において、Ｒ_１はＨ及びメチル基から選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｒ_２はＨ、ＯＨ、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、Ｒ_８はＯＨから選ばれ、ｒ＝１又は２である。幾つかの実施形態において、Ｒ_２はＨ、ＯＨ、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、Ｒ_８はＯＨから選ばれ、ｒ＝１又は２である。幾つかの実施形態において、Ｒ_２はＨ、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１及びＲ_２は５～６員環になるように直接連結している。幾つかの実施形態において、Ｒ_１及びＲ_２は３～６員シクロアルキル基になるように直接連結している。幾つかの実施形態において、Ｒ_１及びＲ_２はシクロペンチル基又はシクロヘキシル基になるように直接連結している。

幾つかの実施形態において、上記式（Ｉ）に示される化学修飾は、

という何れかの構造から選ばれ、
そのうち、Ｂは、プリン塩基、ピリミジン塩基、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩を含むヌクレオチドは、式（Ｉ’）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩を含むヌクレオチドであり、
そのうち、ＹはＯ、ＮＨ及びＳから選ばれ、
各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、Ｓ、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、そのうち、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５はそれぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｊ_２はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
ｎ＝０、１又は２、ｍ＝０、１又は２、ｓ＝０又は１であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ＰＲ_６から選ばれ、そのうち、Ｒ_６は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｑ_１’は
、Ｑ_２’はＲ_２であり、又はＱ_１’はＲ_２、Ｑ_２’は
であり、
そのうち、
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、そのうち、Ｒ_７はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｊ_１はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、そのうち、Ｒ_８はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは塩基であり、
ＭはＯ又はＳであり、
上記式（Ｉ’）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩は、
ではない。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ’）に示される化学修飾は、式（Ｉ’－１）に示される化学修飾であり、
そのうち、ＹはＯ、ＮＨ及びＳから選ばれ、
各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、Ｓ、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、そのうち、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５はそれぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
ｎ＝０、１又は２、ｍ＝０、１又は２、ｓ＝０又は１であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ＰＲ_６から選ばれ、そのうち、Ｒ_６は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、そのうち、Ｒ_７はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、そのうち、Ｒ_８はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
ＭはＯ又はＳであり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ’）に定義される通りである。

式（Ｉ’－１）の幾つかの実施形態において、Ｂは、プリン塩基、ピリミジン塩基、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ’－１）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アデニン、グアニン、イソグアニン、ヒポキサンチン、キサンチン、Ｃ２で修飾されたプリン、Ｎ８で修飾されたプリン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、Ｎ６－アルキルアデニン、Ｏ６－アルキルグアニン、７－デアザプリン、シトシン、５－メチルシトシン、イソシトシン、プソイドシトシン、ウラシル、プソイドウラシル、２－チオウリジン、４－チオウリジン、Ｃ５で修飾されたピリミジン、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ’－１）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アデニン、グアニン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、シトシン、ウラシル、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ’－１）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アンチセンス鎖の当該位置におけるヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ’）に示される化学修飾は、式（Ｉ’－２）に示される化学修飾であり、
そのうち、ＹはＯ、ＮＨ及びＳから選ばれ、
各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、Ｓ、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、そのうち、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５はそれぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
ｎ＝０、１又は２、ｍ＝０、１又は２、ｓ＝０又は１であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ＰＲ_６から選ばれ、そのうち、Ｒ_６は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、そのうち、Ｒ_７はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｒ_２はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、そのうち、Ｒ_８はＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
ＭはＯ又はＳであり、
Ｂは、式（Ｉ’）に定義される通りである。

式（Ｉ’－２）の幾つかの実施形態において、Ｂは、プリン塩基、ピリミジン塩基、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ’－２）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アデニン、グアニン、イソグアニン、ヒポキサンチン、キサンチン、Ｃ２で修飾されたプリン、Ｎ８で修飾されたプリン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、Ｎ６－アルキルアデニン、Ｏ６－アルキルグアニン、７－デアザプリン、シトシン、５－メチルシトシン、イソシトシン、プソイドシトシン、ウラシル、プソイドウラシル、２－チオウリジン、４－チオウリジン、Ｃ５で修飾されたピリミジン、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ’－２）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アデニン、グアニン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、シトシン、ウラシル、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

式（Ｉ’－２）の幾つかの実施形態において、Ｂは、アンチセンス鎖の当該位置におけるヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、Ｓ、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、そのうち、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５はそれぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_３アルキル基であり、
ｎ＝０、１又は２、ｍ＝０、１又は２、ｓ＝０又は１であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_３アルキル基であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_４アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれ、そのうち、Ｒ_６は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_６アルキニル基から選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_４アルキニル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、そのうち、Ｒ_７は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_４アルキニル基から選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ基、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_４アルキニル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－アルキルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、そのうち、Ｒ_８は、ＯＨ、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基及びＣ_２－Ｃ_４アルキニル基から選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ’）に定義される通りである。

幾つかの実施形態において、各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、Ｓ、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、そのうち、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５は、それぞれ独立的にＨ、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基又はイソプロピル基であり、
ｎ＝０、１又は２、ｍ＝０、１又は２、ｓ＝０又は１であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨ又はメチル基であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＮＨ_２、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基、ビニル基、アリル基、エチニル基、プロパルギル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－メチルアミノ基、－Ｏ－エチルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれ、そのうち、Ｒ_６はＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、ビニル基、アリル基、エチニル基及びプロパルギル基から選ばれ、ｐ＝１又は２であり、
Ｒ_１はＨ、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基、ビニル基、アリル基、エチニル基、プロパルギル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、そのうち、Ｒ_７はＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、ビニル基、アリル基、エチニル基及びプロパルギル基から選ばれ、ｑ＝１又は２であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＮＨ_２、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基、ビニル基、アリル基、エチニル基、プロパルギル基、Ｓ－ＣＨ_３、ＮＣＨ_３（ＣＨ_３）、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、－Ｏ－メチルアミノ基、－Ｏ－エチルアミノ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、そのうち、Ｒ_８は、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、メトキシ基、エトキシ基、Ｎ_３、ビニル基、アリル基、エチニル基及びプロパルギル基から選ばれ、ｒ＝１又は２であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ’）に定義される通りである。

幾つかの実施形態において、ＹはＯ又はＮＨであり、各Ｘは、独立的にＮＨ－ＣＯ、ＣＨ_２及びＮＨから選ばれ、
ｎ＝０又は１、ｍ＝０又は１、ｓ＝０又は１であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨであり、
Ｒ_１はＨ、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ’）に定義される通りである。

幾つかの実施形態において、ＹはＯ又はＮＨであり、各Ｘは、独立的にＮＨ－ＣＯ、ＣＨ_２及びＮＨから選ばれ、
ｎ＝０又は１、ｍ＝０又は１、ｓ＝０又は１であり、
各Ｊ_１、Ｊ_２は、それぞれ独立的にＨであり、
Ｒ_１はＨ、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
Ｒ_２はＨ、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、メチル基及びＣＨ_２ＯＨから選ばれ、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結しており、
Ｂは、式（Ｉ’）に定義される通りである。

幾つかの実施形態において、ＹはＯ又はＮＨであり、
各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）、ＮＲ_５及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、Ｒ_４、Ｒ_４’、Ｒ_５はそれぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｊ_２はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
ｎ＝０又は１、ｍ＝０又は１、ｓ＝０又は１であり、
Ｒ_３はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれ、Ｒ_６はＯＨ、メトキシ基及びエトキシ基から選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｑ_１’は
、Ｑ_２’はＲ_２であり、又はＱ_１’はＲ_２、Ｑ_２’は
であり、
Ｒ_１はＨ、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、Ｒ_７はＯＨ、メトキシ基及びエトキシ基から選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｊ_１はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、Ｒ_８はＯＨ、メトキシ基及びエトキシ基から選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は３～６員環になるように直接連結しており、
ＭはＯ又はＳであり、
Ｂは塩基であり、
上記式（Ｉ’）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩は、
ではない。

幾つかの実施形態において、ＹはＯであり、
各Ｘは、独立的にＣＲ_４（Ｒ_４’）及びＮＨ－ＣＯから選ばれ、Ｒ_４及びＲ_４’は、それぞれ独立的にＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｊ_２はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_３はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｐＲ_６から選ばれ、Ｒ_６はＯＨから選ばれ、ｐ＝１、２又は３であり、
Ｑ_１’は
、Ｑ_２’はＲ_２であり、又はＱ_１’はＲ_２、Ｑ_２’は
であり、
Ｒ_１はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｑＲ_７から選ばれ、Ｒ_７はＯＨから選ばれ、ｑ＝１、２又は３であり、
Ｊ_１はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_２はＨ、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、Ｒ_８はＯＨから選ばれ、ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は５～６員環になるように直接連結しており、
ＭはＯ又はＳであり、
Ｂは塩基である。

幾つかの実施形態において、ＹはＯであり、
各Ｘは、ＣＲ_４（Ｒ_４’）から独立的に選ばれ、Ｒ_４及びＲ_４’は、それぞれ独立的に、Ｈ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｊ_２はＨであり、
Ｒ_３はＨ及びＣ_１－Ｃ_６アルキル基から選ばれ、
Ｑ_１’は
、Ｑ_２’はＲ_２であり、又はＱ_１’はＲ_２、Ｑ_２’は
であり、
Ｒ_１はＨ及びＣ_１－Ｃ_６アルキル基から選ばれ、
Ｊ_１はＨ又はＣ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ_２はＨ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基及び（ＣＨ_２）_ｒＲ_８から選ばれ、Ｒ_８はＯＨから選ばれ、Ｒ＝１、２又は３であり、
任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は５～６員環になるように直接連結しており、
ＭはＯ又はＳであり、
Ｂは塩基である。

幾つかの実施形態において、ＹはＯである。

幾つかの実施形態において、上記式（Ｉ’）に示される化学修飾は、
という何れかの構造から選ばれ、
そのうち、ＭはＯ又はＳであり、
Ｂは、プリン塩基、ピリミジン塩基、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

幾つかの実施形態において、上記式（Ｉ’）に示される化学修飾は、
、及びそれらの構造におけるアデニンがグアニン、シトシン、ウラシル又はチミンで置換されたもの、という何れかの構造から選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｂは、上記アンチセンス鎖の当該位置におけるヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、上記リガンドは、式（ＩＩ）に示される化合物又はその薬学的に許容される塩であり、
そのうち、
Ｌ_１は、Ｃ_１－Ｃ_３０アルキル鎖であるか、或いは１つ又は複数の酸素、硫黄、窒素原子又はＣ＝Ｏにより中断されるＣ_１－Ｃ_３０アルキル鎖を含み、
Ｒ_１１及びＲ_１２は、独立的に化学結合、ＮＲ_１６又はＣ＝Ｏであり、
Ｑ_３は
であり、
Ｒ_１３はＣＲ_１７Ｒ_１８、ＮＲ_１６、Ｏ又はＳであり、
Ｒ_１４はＣＲ_１９であり、
Ｒ_１５は、独立的にＣＲ_１７Ｒ_１８、ＮＲ_１６又はＯであり、
Ｒ_１６～Ｒ_１９は、独立的に水素、重水素又はアルキル基であり、
ｍ１、ｐ１及びｑ１は独立的に０、１、２、３又は４であり、
Ｂ１は
であり、
Ｒ_ｂ５、Ｒ_ｂ６及びＲ_ｂ７は、独立的に－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｚ８－Ｏ－又は－ＮＨＣ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｚ９－Ｏ－であり、
ｚ５、ｚ６、ｚ７、ｚ８及びｚ９は、独立的に０～１０の整数であり、
Ｌ_２は、Ｃ_１－Ｃ_３０アルキル鎖であるか、或いは１つ又は複数の酸素、硫黄、窒素原子又はＣ＝Ｏにより中断されるＣ_１－Ｃ_３０アルキル鎖を含み、
ｒ１は、１～１０の整数である。

幾つかの実施形態において、Ｌ_１は、－（ＣＨ_２）_ｊ１１－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｊ１２－であり、
Ｒ_１１及びＲ_１２は、独立的に化学結合、ＮＲ_１６又はＣ＝Ｏであり、
Ｒ_１６は、水素又はＣ_１－６アルキル基であり、
Ｑ_３は
であり、
Ｒ_１３はＣＲ_１７Ｒ_１８又はＯであり、
Ｒ_１４はＣＲ_１９であり、
Ｒ_１５は、独立的にＣＲ_１７Ｒ_１８又はＯであり、
Ｒ_１６～Ｒ_１９は、独立的に水素又はアルキル基であり、
ｍ１、ｐ１及びｑ１は、独立的に０又は１であり、
Ｂ１は
であり、
Ｒ_ｂ５、Ｒ_ｂ６及びＲ_ｂ７は、独立的に－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｚ８－Ｏ－又は－ＮＨＣ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｚ９－Ｏ－であり、
ｚ８及びｚ９は、独立的に０～１０の整数であり、
Ｌ_２は、－（ＣＨ_２）_ｊ１５－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_１－４－（ＣＨ_２）_ｊ１６－又は
であり、
ｊ１５及びｊ１６は、独立的に０～４の整数であり、
ｒ１は、３、４、５又は６である。

幾つかの実施形態において、Ｌ_１は、Ｌ_３又はＬ_３－Ｒ_１１０－Ｒ_１１１－Ｌ_３であってもよく、そのうち、Ｌ_３は、独立的にＣ_１－Ｃ_１２アルキル鎖、－（ＣＨ_２）_ｊ１１－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｊ１２－又は－（ＣＨ_２）_ｊ１３－（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１－４－（ＣＨ_２）_ｊ１４－であり、Ｒ_１１０及びＲ_１１１は、独立的に化学結合、－ＮＲ_１１２－、－Ｃ（＝Ｏ）－又は－ＯＣ（＝Ｏ）－であり、Ｒ_１１２は、水素又はＣ_１－Ｃ_１２アルキル基であり、ｊ１１、ｊ１２、ｊ１３及びｊ１４は、独立的に０～１０の整数である。幾つかの実施形態において、ｊ１１、ｊ１２、ｊ１３及びｊ１４は、独立的に０～２又は４～１０の整数である。幾つかの実施形態において、ｊ１１、ｊ１２、ｊ１３及びｊ１４は、独立的に０、１、２、６、７、８、９又は１０である。

幾つかの実施形態において、Ｌ_１は、－（ＣＨ_２）_ｊ１１－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｊ１２－であってもよく、ｊ１１及びｊ１２の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｌ_１は、
であってもよく、ｊ１２の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りであり、そのうち、ａ１末端はＢ_１に連結し、ｂ１末端はＲ_１１に連結する。

幾つかの実施形態において、Ｌ_１は、
であってもよく、そのうち、ａ１末端はＢ_１に連結し、ｂ１末端はＲ_１１に連結する。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１１は、化学結合であってもよく、且つＲ_１２は、Ｃ＝Ｏであってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１１は、化学結合であってもよく、且つＲ_１２は、ＮＲ_１６であってもよく、Ｒ_１６の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１１は、化学結合であってもよく、且つＲ_１２は、－ＯＣ（＝Ｏ）－であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１１は、ＮＲ_１６であってもよく、且つＲ_１２は、Ｃ＝Ｏであってもよく、Ｒ_１６の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１は、ＮＲ_１６であってもよく、且つＲ_１２は、－ＯＣ（＝Ｏ）－であってもよく、Ｒ_１６の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１２は、ＮＲ_１６であってもよく、且つＲ_１１は、Ｃ＝Ｏであってもよく、Ｒ_１６の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１２は、ＮＲ_１６であってもよく、且つＲ_１１は、－ＯＣ（＝Ｏ）－であってもよく、Ｒ_１６の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１１は、ＮＨであってもよく、且つＲ_１２は、Ｃ＝Ｏであってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１２は、ＮＨであってもよく、且つＲ_１１は、Ｃ＝Ｏであってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１６は、水素又はＣ_１－６アルキル基であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１６は、水素、メチル基、エチル基、プロピル基又はイソプロピル基であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１６は、水素であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１７及びＲ_１８は、水素であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｒ_１９は、水素であってもよい。

幾つかの実施形態において、環Ａが存在する場合、環Ａは、Ｃ_６－１２アリール基であってもよい。

幾つかの実施形態において、環Ａは、フェニル基であってもよい。

幾つかの実施形態において、ｍ１は、０又は１であってもよい。

幾つかの実施形態において、ｍ１は、３であってもよい。

幾つかの実施形態において、ｎ１は、０又は１であってもよい。

幾つかの実施形態において、ｐ１及びｑ１は、独立的に０又は１である。

幾つかの実施形態において、ｐ１＝１且つｑ１＝１である。

幾つかの実施形態において、ｐ１＝１且つｑ１＝０である。

幾つかの実施形態において、ｐ１＝０且つｑ１＝１である。

幾つかの実施形態において、ｐ１＝０且つｑ１＝０である。

幾つかの実施形態において、ｚ１、ｚ２、ｚ３、ｚ４、ｚ５、ｚ６、ｚ７、ｚ８及びｚ９は、独立的に０～４の整数であってもよい。幾つかの実施形態において、ｚ１、ｚ２、ｚ３、ｚ４、ｚ５、ｚ６、ｚ７、ｚ８及びｚ９は、独立的に０、１又は２であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｂ_１は、
であってもよく、Ｒ_ｂ１、Ｒ_ｂ２、Ｒ_ｂ３及びＲ_ｂ４は、独立的に－Ｃ（＝Ｏ）－又は－ＮＨＣ（＝Ｏ）－であり、Ｎ原子はＬ_１に連結し、ｚ１、ｚ２、ｚ３及びｚ４の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｂ_１は、
であってもよく、Ｒ_ｂ１、Ｒ_ｂ２、Ｒ_ｂ３及びＲ_ｂ４は、独立的に－Ｃ（＝Ｏ）－又は－ＮＨＣ（＝Ｏ）－であり、Ｎ原子はＬ_１に連結し、Ｒ_ｂ１、Ｒ_ｂ３及びＲ_ｂ４は同じであり、ｚ１、ｚ２、ｚ３及びｚ４の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｂ_１は
であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｂ_１は、
であってもよく、Ｒ_ｂ５、Ｒ_ｂ６及びＲ_ｂ７は、独立的に－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｚ８－Ｏ－又は－ＮＨＣ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｚ９－Ｏ－であり、Ｎ原子はＬ_１に連結し、ｚ５、ｚ６、ｚ７、ｚ８及びｚ９の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｂ_１は、
であってもよく、Ｒ_ｂ５、Ｒ_ｂ６及びＲ_ｂ７は、独立的に－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｚ８－Ｏ－又は－ＮＨＣ（＝Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｚ９－Ｏ－であり、Ｎ原子はＬ_１に連結し、Ｒ_ｂ５、Ｒ_ｂ６及びＲ_ｂ７は同じであり、ｚ５、ｚ６、ｚ７、ｚ８及びｚ９の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｂ_１は
であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、Ｌ_４又はＬ_４－Ｒ_１３－Ｒ_１４－Ｌ_４であってもよく、そのうち、Ｌ_４は、独立的にＣ_１－Ｃ_１２アルキル鎖又は－（ＣＨ_２）_ｊ１５－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_１－４－（ＣＨ_２）_ｊ１６－であり、Ｒ_１３及びＲ_１４は、独立的に化学結合、－ＮＲ_１１５－、－Ｃ（＝Ｏ）－又は－ＯＣ（＝Ｏ）－であり、Ｒ_１１５は、独立的に水素又はＣ_１－Ｃ_１２アルキル基であり、ｊ１５及びｊ１６は、独立的に０～１０の整数である。幾つかの実施形態において、ｊ１５及びｊ１６は、独立的に０～６の整数である。幾つかの実施形態において、ｊ１５及びｊ１６は、独立的に０、１、２、３又は４である。

幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、－（ＣＨ_２）_ｊ１５－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_１－４－（ＣＨ_２）_ｊ１６－であってもよく、ｊ１５及びｊ１６の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、
であってもよい。幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、
であってもよく、そのうち、一側はＯ原子に連結し、他側はＢ_１に連結する。

幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、Ｃ_１－Ｃ_１２アルキル鎖であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、
であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、
であってもよい。幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、
であってもよい。幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、
であってもよい。幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、
であってもよい。そのうち、ａ３末端はＯ原子に連結し、ｂ３末端はＢ_１に連結する。

幾つかの実施形態において、Ｌ_２は、
であってもよく、そのうち、ａ３末端はＯ原子に連結し、ｂ３末端はＢ_１に連結する。

幾つかの実施形態において、ｒ１は、３、４、５又は６であってもよい。幾つかの実施形態において、ｒ１は、３であってもよい。

幾つかの実施形態において、Ｑ_３は、
であってもよい。幾つかの実施形態において、Ｑ_３は、
であってもよい。そのうち、Ｒ_１３、Ｒ_１４、Ｒ_１５及びｎ１の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、
は、
であってもよく、そのうち、Ｒ_１３、Ｒ_１４、Ｒ_１５、ｐ１及びｑ１の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、
は、
であってもよい。幾つかの実施形態において、
は、
であってもよい。幾つかの実施形態において、
は、
であってもよい。ｐ１及びｑ１の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、
は、
であってもよく、そのうち、Ｒ_１３、Ｒ_１４、ｎ１、ｐ１及びｑ１の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、
は、
であってもよく、幾つかの実施形態において、
は、
であってもよい。ｎ１、ｐ１及びｑ１の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、
は、
であってもよく、ｎ１、ｐ１及びｑ１の定義は、上記の何れか１つの形態に記載される通りである。

幾つかの実施形態において、上記リガンドは、

という何れか１つの構造又はその薬学的に許容される塩であってもよい。

幾つかの実施形態において、上記リガンドは、
という何れか１つの構造又はその薬学的に許容される塩から選ばれる。。

幾つかの実施形態において、上記式（Ｉ）に示される化学修飾は
であり、Ｂはグアニン、アデニン、シトシン及びウラシルから選ばれ、且つ上記リガンドは、

という何れか１つの構造又はその薬学的に許容される塩である。

幾つかの実施形態において、上記式（Ｉ）に示される化学修飾は、
であり、Ｂはグアニン、アデニン、シトシン及びウラシルから選ばれ、且つ、上記リガンドは、
という何れか１つの構造又はその薬学的に許容される塩である。

幾つかの実施形態において、上記式（Ｉ）に示される化学修飾は、
であり、Ｂはグアニン、アデニン、シトシン及びウラシルから選ばれ、且つ、上記リガンドは、
という何れか１つの構造又はその薬学的に許容される塩である。。

幾つかの実施形態において、Ｎ－トリフルオロアセチルガラクトサミン、Ｎ－プロピオニルガラクトサミン、Ｎ－ブチリルガラクトサミン又はＮ－イソブチリルガラクトサミンで上記リガンドにおけるＮ－アセチル－ガラクトサミン部分を置換することができる。

幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡは上記リガンドと共有又は非共有結合している。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖の３’末端及び／又は５’末端は、上記リガンドに複合される。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖の３’末端は、上記リガンドに複合される。

幾つかの実施形態において、上記リガンドは、ホスフェート基又はチオホスフェート基を介して上記ｓｉＲＮＡ末端に連結される。

幾つかの実施形態において、上記リガンドは、ホスホジエステル基又はチオホスホジエステル基を介して上記ｓｉＲＮＡ末端に連結される。

幾つかの実施形態において、上記リガンドは、ホスホジエステル基を介して上記ｓｉＲＮＡ末端に連結される。

幾つかの実施形態において、上記リガンドは、ホスフェート基又はチオホスフェート基を介して上記ｓｉＲＮＡ末端に間接的に連結される。

幾つかの実施形態において、上記リガンドは、ホスフェート基又はチオホスフェート基を介して上記ｓｉＲＮＡ末端に直接的に連結される。

幾つかの実施形態において、上記リガンドは、ホスフェート基又はチオホスフェート基を介して上記ｓｉＲＮＡのセンス鎖３’末端に直接的に連結される。

幾つかの実施形態において、上記ホスフェート基は、ホスホモノエステル基又はホスホジエステル基である。幾つかの実施形態において、上記ホスフェート基は、ホスホジエステル基である。

幾つかの実施形態において、上記ホスホロチオエート基は、チオホスホモノエステル基又はチオホスホジエステル基である。幾つかの実施形態において、上記ホスホロチオエート基は、チオホスホジエステル基である。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡは、
という何れか１つの構造又はその薬学的に許容される塩であり、そのうち、ＺはｓｉＲＮＡであり、上記ｓｉＲＮＡのセンス鎖の３’末端はチオホスホジエステル基を介してリガンドに直接的に連結し、上記ｓｉＲＮＡは本開示で定義される通りである。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡは、
という何れか１つの構造又はその薬学的に許容される塩であり、
そのうち、ＺはｓｉＲＮＡであり、上記ｓｉＲＮＡのセンス鎖の３’末端はホスホジエステル基を介してリガンドに直接的に連結し、上記ｓｉＲＮＡは本開示で定義される通りである。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡは、
、という構造又はその薬学的に許容される塩であり、
そのうち、ＺはｓｉＲＮＡであり、上記ｓｉＲＮＡのセンス鎖の３’末端はホスホジエステル基を介してリガンドに直接的に連結し、上記ｓｉＲＮＡは本開示で定義される通りである。

幾つかの実施形態において、ｓｉＲＮＡの細胞への進入を促進するために、ｓｉＲＮＡセンス鎖の末端にコレステロールなどの親油性の基を導入することができ、親油性の基は共有結合でｓｉＲＮＡと結合し、例えば、末端にコレステロール、リポタンパク質、ビタミンＥなどを導入することで、脂質二重層からなる細胞膜を介して細胞内のｍＲＮＡと作用することに寄与する。また、ｓｉＲＮＡは非共有結合で修飾してもよく、例えば、疎水結合又はイオン結合によりリン脂質分子、ポリペプチド、カチオン性ポリマーなどに結合することで安定性と生物学的活性を向上させる。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩を含むヌクレオチドは、アンチセンス鎖の５’末端から５位、６位又は７位に位置する。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾、その互変異性体又は薬学的に許容されるその塩を含むヌクレオチドは、アンチセンス鎖の５’末端の７位に位置する。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾、又はその互変異性体又は薬学的に許容されるその塩修飾が５’末端からの５位にある場合、Ｂは、アデニン、グアニン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、シトシン、ウラシル、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾、又はその互変異性体又は薬学的に許容されるその塩修飾が５’末端からの６位にある場合、Ｂは、アデニン、グアニン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、シトシン、ウラシル、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾、又はその互変異性体又は薬学的に許容されるその塩修飾が５’末端からの７位にある場合、Ｂは、アデニン、グアニン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、シトシン、ウラシル、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾、又はその互変異性体又は薬学的に許容されるその塩修飾が５’末端からの８位にある場合、Ｂは、アデニン、グアニン、２，６－ジアミノプリン、６－ジメチルアミノプリン、２－アミノプリン、シトシン、ウラシル、チミン、インドール、５－ニトロインドール及び３－ニトロピロールから選ばれる。

幾つかの実施形態において、Ｂは、上記アンチセンス鎖のその５’末端から５位のヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、Ｂは、上記アンチセンス鎖のその５’末端から６位のヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、Ｂは、上記アンチセンス鎖のその５’末端から７位のヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、Ｂは、上記アンチセンス鎖のその５’末端から８位のヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾を含む残りの位置において、上記センス鎖及び／又はアンチセンス鎖における少なくとも１つの別のヌクレオチドが修飾されたヌクレオチドである。

幾つかの実施形態において、上記修飾されたヌクレオチドは、２’－メトキシ基で修飾されたヌクレオチド、２’－置換アルコキシ基で修飾されたヌクレオチド、２’－アルキル基で修飾されたヌクレオチド、２’－置換アルキル基で修飾されたヌクレオチド、２’－アミノ基で修飾されたヌクレオチド、２’－置換アミノ基で修飾されたヌクレオチド、２’－フルオロで修飾されたヌクレオチド、２’－デオキシヌクレオチド、２’－デオキシ－２’－フルオロで修飾されたヌクレオチド、３’－デオキシ－チミンヌクレオチド、イソヌクレオチド、ＬＮＡ、ＥＮＡ、ｃＥＴ、ＵＮＡ及びＧＮＡから選ばれる。幾つかの実施形態において、修飾されたヌクレオチドは、互いに独立的に２’－メトキシ基で修飾されたヌクレオチド又は２’－フルオロで修飾されたヌクレオチドから選ばれる。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖は、同一の修飾を有する３つの連続するヌクレオチドを含む。

幾つかの実施形態において、上記同じ修飾を有する３つのヌクレオチドは、２’－フルオロ修飾されたヌクレオチドである。

幾つかの実施形態において、５’末端から３’末端への方向に、アンチセンス鎖の２位、４位、６位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１８位のヌクレオチドは、それぞれ独立的に２’－フルオロで修飾されたヌクレオチドである。

幾つかの実施形態において、上記アンチセンス鎖は標的配列に少なくとも部分的に逆相補的である。幾つかの実施形態において、上記アンチセンス鎖と標的配列との間に５個以下、４個以下、３個以下、２個以下、１個以下のミスマッチが存在する。幾つかの実施形態において、上記アンチセンス鎖は、標的配列と完全に逆相補的である。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖は、二本鎖領域を形成するためにアンチセンス鎖と少なくとも部分的に逆相補的である。幾つかの実施形態において、上記センス鎖とアンチセンス鎖との間に５個以下、４個以下、３個以下、２個以下、１個以下のミスマッチが存在する。幾つかの実施形態において、上記センス鎖は、アンチセンス鎖と完全に逆相補的である。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖とアンチセンス鎖は、それぞれ独立的に１６個～３５個、１６個～３４個、１７個～３４個、１７個～３３個、１８個～３３個、１８個～３２個、１８個～３１個、１８個～３０個、１８個～２９個、１８個～２８個、１８個～２７個、１８個～２６個、１８個～２５個、１８個～２４個、１８個～２３個、１９個～２５個、１９個～２４個、又は１９個～２３個のヌクレオチド（例えば１９個、２０個、２１個、２２個、２３個のヌクレオチド）を有する。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖とアンチセンス鎖の長さは同一又は異なり、上記センス鎖の長さは１９個～２３個のヌクレオチド（例えば１９個、２０個、２１個、２２個、２３個のヌクレオチド）であり、上記アンチセンス鎖の長さは１９個～２６個のヌクレオチドである。本開示により提供されるｄｓＲＮＡのセンス鎖とアンチセンス鎖との長さ比は、１９／１９、１９／２０、１９／２１、１９／２２、１９／２３、１９／２４、１９／２５、１９／２６、２０／１９、２０／２０、２０／２１、２０／２２、２０／２３、２０／２４、２０／２５、２０／２６、２１／２０、２１／２１、２１／２２、２１／２３、２１／２４、２１／２５、２１／２６、２２／２０、２２／２１、２２／２２、２２／２３、２２／２４、２２／２５、２２／２６、２３／２０、２３／２１、２３／２２、２３／２３、２３／２４、２３／２５又は２３／２６であってもよい。幾つかの実施形態において、上記センス鎖とアンチセンス鎖との長さ比は、１９／２１、２１／２３又は２３／２５である。幾つかの実施形態において、上記センス鎖とアンチセンス鎖との長さ比は１９／２１である。

幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡは、１個又は２個の平滑末端を含む。

幾つかの具体的な実施形態において、ｓｉＲＮＡの各鎖は、それぞれ独立的に１個～２個の不対ヌクレオチドを含み、突出末端を形成する。

幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡは、上記アンチセンス鎖３’末端に位置する突出末端を含む。

幾つかの実施形態において、ｓｉＲＮＡのセンス鎖において、５’末端の７位～９位に位置する３個の連続的なヌクレオチドは、２’－フルオロで修飾されたヌクレオチドである。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖は、下記の式に示されるヌクレオチド配列（５’－３’）を含む。

Ｎ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＸＮ_ａＮ_ｂＮ_ｂＮ_ｂＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａ
そのうち、各Ｘは独立的にＮ_ａ又はＮ_ｂであり、Ｎ_ａは２’－メトキシ基で修飾されたヌクレオチドであり、Ｎ_ｂは２’－フルオロで修飾されたヌクレオチドである。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖は、下記の式に示されるヌクレオチドを含む。

５’－Ｎ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ｂＮ_ｂＮ_ｂＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａ－３’、又は、
５’－Ｎ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ｂＮ_ａＮ_ｂＮ_ｂＮ_ｂＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａ－３’、
そのうち、Ｎ_ａは２’－メトキシ基で修飾されたヌクレオチドで、Ｎ_ｂは２’－フルオロで修飾されたヌクレオチドである。

幾つかの実施形態において、上記アンチセンス鎖は、下記の式に示されるヌクレオチドを含む。

５’－Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｗ’Ｎ_ａ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ａ’Ｎ_ａ’－３’、
そのうち、Ｎ_ａ’は２’－メトキシ基で修飾されたヌクレオチドで、Ｎ_ｂ’は２’－フルオロで修飾されたヌクレオチドであり、Ｗ’は、２’－メトキシ基で修飾されたヌクレオチド或いは式（Ｉ）に示される化学修飾、又はその互変異性体又はその薬学的に許容される塩修飾を含むヌクレオチドを表す。

幾つかの具体的な実施形態において、Ｗ’は、式（Ｉ）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩を含むヌクレオチドを表す。

幾つかの具体的な実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾は、
から選ばれ、そのうち、Ｂは、グアニン、アデニン、シトシン又はウラシルから選ばれる。幾つかの具体的な実施形態において、Ｂは、上記アンチセンス鎖のその５’末端から７位のヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの具体的な実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾は、
から選ばれ、そのうち、ＭはＯ又はＳであり、そのうち、Ｂは、グアニン、アデニン、シトシン又はウラシルから選ばれる。幾つかの具体的な実施形態において、Ｂは、上記アンチセンス鎖のその５’末端から７位のヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの具体的な実施形態において、ＭはＳである。幾つかの具体的な実施形態において、ＭはＯである。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖及び／又はアンチセンス鎖における少なくとも１つのホスフェート基は、修飾基を有するホスフェート基である。上記修飾基により、上記ｓｉＲＮＡは、生体試料又は環境において向上した安定性を有する。幾つかの実施形態において、上記修飾基を有するホスフェート基は、チオホスフェート基である。幾つかの実施形態において、上記修飾基を有するホスフェート基は、チオホスホジエステル基である。

幾つかの実施形態において、上記チオホスホジエステル基は、
上記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、
上記センス鎖の５’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
上記アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、
上記アンチセンス鎖の５’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
上記アンチセンス鎖の３’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、及び
上記アンチセンス鎖の３’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
という位置から選ばれる少なくとも１つに存在する。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖及び／又はアンチセンス鎖は複数のチオホスホジエステル基を含み、上記チオホスホジエステル基は、
上記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、
上記センス鎖の５’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
上記アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、
上記アンチセンス鎖の５’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
上記アンチセンス鎖の３’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、及び
上記アンチセンス鎖の３’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
という位置から選ばれる少なくとも１つに存在する。

幾つかの実施形態において、上記センス鎖は、下記の式に示されるヌクレオチド配列を含み、
５’－ＮｍｓＮｍｓＮｍＮｍＮｆＮｍＮｆＮｆＮｆＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍ－３’、又は、
５’－ＮｍｓＮｍｓＮｍＮｍＮｍＮｍＮｆＮｆＮｆＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍＮｍ－３’、
そのうち、Ｎｍは２’－メトキシ基で修飾された任意のヌクレオチドを示し、例えば、２’－メトキシ基で修飾されたＣ、Ｇ、Ｕ、Ａであり、Ｎｆは２’－フルオロで修飾された任意のヌクレオチドを示し、例えば、２’－フルオロで修飾されたＣ、Ｇ、Ｕ、Ａであり、
小文字ｓは、当該文字ｓの左右に隣接する２つのヌクレオチド同士がチオホスフェート基で連結されていることを示し、小文字ｓが３’末端の１番目にある場合は、当該文字ｓの上流（５’方向）に隣接する１つのヌクレオチド末端がチオホスホジエステル基であることを示す。

幾つかの実施形態において、上記アンチセンス鎖は、下記の式に示されるヌクレオチド配列を含み、
５’－Ｎｍ’ｓＮｆ’ｓＮｍ’Ｎｆ’Ｎｍ’Ｎｆ’Ｗ’Ｎｍ’Ｎｍ’Ｎｆ’Ｎｍ’Ｎｆ’Ｎｍ’Ｎｆ’Ｎｍ’Ｎｆ’Ｎｍ’Ｎｆ’Ｎｍ’ｓＮｍ’ｓＮｍ’－３’、
そのうち、Ｎｍ’は２’－メトキシ基で修飾された任意のヌクレオチドを示し、例えば、２’－メトキシ基で修飾されたＣ、Ｇ、Ｕ、Ａであり、Ｎｆ’は２’－フルオロで修飾された任意のヌクレオチドを示し、例えば、２’－フルオロで修飾されたＣ、Ｇ、Ｕ、Ａであり、
小文字ｓは、当該文字ｓの左右に隣接する２つのヌクレオチド同士がチオホスホジエステル基で連結されていることを示し、小文字ｓが３’末端の１番目にある場合は、当該文字ｓの上流に隣接する１つのヌクレオチド末端がチオホスホジエステル基であることを示し、
Ｗ’は２’－メトキシ基で修飾されたヌクレオチド或いは式（Ｉ）に示される化学修飾、又はその互変異性体又はその薬学的に許容される塩修飾を含むヌクレオチドを示す。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾は、
から選ばれ、そのうち、Ｂは、グアニン、アデニン、シトシン又はウラシルから選ばれる。幾つかの実施形態において、Ｂは、上記アンチセンス鎖のその５’末端から７位のヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、式（Ｉ）に示される化学修飾は、
から選ばれ、そのうち、ＭはＯ又はＳであり、そのうち、Ｂは、グアニン、アデニン、シトシン又はウラシルから選ばれる。幾つかの具体的な実施形態において、Ｂは、上記アンチセンス鎖のその５’末端から７位のヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである。

幾つかの実施形態において、ＭはＳである。幾つかの具体的な実施形態において、ＭはＯである。

ＨＢＶを標的とするｄｓＲＮＡ
幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡは、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡである。

幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡは、ＨＢＶ－Ｓを標的とするｓｉＲＮＡである。

幾つかの具体的な実施形態において、ＨＢＶ－Ｓを標的とするｓｉＲＮＡのセンス鎖及びアンチセンス鎖は、
センス鎖のヌクレオチド配列は、配列番号２を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は、配列番号６を含む、という群の何れか１つから選ばれる。

幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡは、ＨＢＶ－Ｘを標的とするｓｉＲＮＡである。

幾つかの具体的な実施形態において、ＨＢＶ－Ｘを標的とするｓｉＲＮＡのセンス鎖及びアンチセンス鎖は、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号１を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号５を含み、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号４を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号５を含み、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号１を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号８を含む、という群の何れか１つから選ばれる。

幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡのセンス鎖は、配列番号１～配列番号４の何れかのヌクレオチド配列と３個以下のヌクレオチドの違いがある配列を含み、それは少なくとも１５個（幾つかの実施形態において、少なくとも１９個から選ばれる）の連続ヌクレオチドを含み、及び／又は、
アンチセンス鎖は、配列番号５～配列番号８の何れかのヌクレオチド配列と３個以下のヌクレオチドの違いがある配列を含み、それは少なくとも１９個（幾つかの実施形態において、少なくとも２１個）の連続ヌクレオチドを含む。

幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡのセンス鎖のヌクレオチド配列は、配列番号１～配列番号４の何れか１つを含み、及び／又は、上記アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は、配列番号５～配列番号８の何れか１つを含み、
幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡのセンス鎖及びアンチセンス鎖は、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号１を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号５を含み、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号２を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号６を含み、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号３を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号７を含み、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号４を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号５を含み、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号１を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号８を含む、という群の何れか１つから選ばれる。

幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡのセンス鎖及びアンチセンス鎖は、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号１であり、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号５であり、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号２であり、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号６であり、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号３であり、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号７であり、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号４であり、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号５であり、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号１であり、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号８である、という群の何れか１つから選ばれる。

本開示において、５’－３’方向に従って、
配列番号１はＧＵＧＵＧＣＡＣＵＵＣＧＣＵＵＣＡＣＣであり、
配列番号２はＣＵＵＵＵＧＵＣＵＵＵＧＧＧＵＡＵＡＵであり、
配列番号３はＵＵＡＣＣＡＡＵＵＵＵＣＵＵＵＵＧＵＵであり、
配列番号４はＧＵＧＵＧＣＡＣＵＵＣＧＣＵＵＣＡＣＵであり、
配列番号５はＡＧＵＧＡＡＧＣＧＡＡＧＵＧＣＡＣＡＣＧＧであり、
配列番号６はＡＵＡＵＡＣＣＣＡＡＡＧＡＣＡＡＡＡＧＡＡであり、
配列番号７はＡＡＣＡＡＡＡＧＡＡＡＡＵＵＧＧＵＡＡＣＡであり、
配列番号８はＩＧＵＧＡＡＧＣＧＡＡＧＵＧＣＡＣＡＣＧＧである。

幾つかの実施形態において、上記ｓｉＲＮＡはＴＪＲ１００３８１及びＴＪＲ１００３８２である。

幾つかの実施形態において、本開示に記載のｄｓＲＮＡのセンス鎖は、配列番号９～配列番号１５の何れか１つを含み、及び／又は、
アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は、配列番号１７～配列番号２０の何れか１つを含む。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡは、
センス鎖は配列番号９を含み、アンチセンス鎖は配列番号１７を含むｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１１を含み、アンチセンス鎖は配列番号１８を含むｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１３を含み、アンチセンス鎖は配列番号１９を含むｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１０を含み、アンチセンス鎖は配列番号１７を含むｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１２を含み、アンチセンス鎖は配列番号１８を含むｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１４を含み、アンチセンス鎖は配列番号１９を含むｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号９を含み、アンチセンス鎖は配列番号２０を含むｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１５を含み、アンチセンス鎖は配列番号１７を含むｄｓＲＮＡ、という群の何れか１つから選ばれる。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡは、
センス鎖は配列番号９であり、アンチセンス鎖は配列番号１７であるｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１１であり、アンチセンス鎖は配列番号１８であるｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１３であり、アンチセンス鎖は配列番号１９であるｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１０であり、アンチセンス鎖は配列番号１７であるｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１２であり、アンチセンス鎖は配列番号１８であるｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１４であり、アンチセンス鎖は配列番号１９であるｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号９であり、アンチセンス鎖は配列番号２０であるｄｓＲＮＡ、
センス鎖は配列番号１５であり、アンチセンス鎖は配列番号１７であるｄｓＲＮＡ、という態様の何れか１つである。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡは、
配列番号９及び配列番号１７を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１１及び配列番号１８を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１３及び配列番号１９を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１０及び配列番号１７を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１２及び配列番号１８を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１４及び配列番号１９を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号９及び配列番号２０を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１５及び配列番号１７を含むｄｓＲＮＡ、という群の何れか１つから選ばれる。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡは、
配列番号９及び配列番号１７であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１１及び配列番号１８であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１３及び配列番号１９であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１０及び配列番号１７であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１２及び配列番号１８であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１４及び配列番号１９であるｄｓＲＮＡ、
配列番号９及び配列番号２０であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１５及び配列番号１７であるｄｓＲＮＡ、という態様の何れか１つである。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡは、
配列番号９に示されるセンス鎖及び配列番号１７に示されるアンチセンス鎖を含むか又はから選ばれるｄｓＲＮＡ、
配列番号９に示されるセンス鎖及び配列番号２０に示されるアンチセンス鎖を含むか又はから選ばれるｄｓＲＮＡ、
配列番号１１に示されるセンス鎖及び配列番号１８に示されるアンチセンス鎖を含むか又はから選ばれるｄｓＲＮＡ、
配列番号１３に示されるセンス鎖及び配列番号１９に示されるアンチセンス鎖を含むか又はから選ばれるｄｓＲＮＡ、
配列番号１０に示されるセンス鎖及び配列番号１７に示されるアンチセンス鎖を含むか又はから選ばれるｄｓＲＮＡ、
配列番号１２に示されるセンス鎖及び配列番号１８に示されるアンチセンス鎖を含むか又はから選ばれるｄｓＲＮＡ、
配列番号１４に示されるセンス鎖及び配列番号１９に示されるアンチセンス鎖を含むか又はから選ばれるｄｓＲＮＡ、
配列番号１５に示されるセンス鎖及び配列番号１７に示されるアンチセンス鎖を含むか又はから選ばれるｄｓＲＮＡ、という群の何れか１つから選ばれる。

幾つかの具体的な実施形態において、ＨＢＶ－Ｘを標的とするｄｓＲＮＡは、
配列番号９及び配列番号１７であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１０及び配列番号１７であるｄｓＲＮＡ、
配列番号９及び配列番号２０であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１５及び配列番号１７であるｄｓＲＮＡ、という態様の何れか１つである。

幾つかの具体的実施形態において、ＨＢＶ－Ｓを標的とするｄｓＲＮＡは、
配列番号１１及び配列番号１８であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１３及び配列番号１９であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１２及び配列番号１８であるｄｓＲＮＡ、
配列番号１４及び配列番号１９であるｄｓＲＮＡ、という態様の何れか１つである。

本開示において、５’－３’方向に従って、
配列番号９は
ＧｍｓＵｍｓＧｍＵｍＧｍＣｍＡｆＣｆＵｆＵｍＣｍＧｍＣｍＵｍＵｍＣｍＡｍＣｍＣｍ－ＮＡＧ００５２’であり、
配列番号１０は
ＧｍｓＵｍｓＧｍＵｍＧｆＣｍＡｆＣｆＵｆＵｍＣｍＧｍＣｍＵｍＵｍＣｍＡｍＣｍＣｍ－ＮＡＧ００５２’であり、
配列番号１１は
ＣｍｓＵｍｓＵｍＵｍＵｆＧｍＵｆＣｆＵｆＵｍＵｍＧｍＧｍＧｍＵｍＡｍＵｍＡｍＵｍ－ＮＡＧ００５２’であり、
配列番号１２は
ＣｍｓＵｍｓＵｍＵｍＵｍＧｍＵｆＣｆＵｆＵｍＵｍＧｍＧｍＧｍＵｍＡｍＵｍＡｍＵｍ－ＮＡＧ００５２’であり、
配列番号１３は
ＵｍｓＵｍｓＡｍＣｍＣｆＡｍＡｆＵｆＵｆＵｍＵｍＣｍＵｍＵｍＵｍＵｍＧｍＵｍＵｍ－ＮＡＧ００５２’であり、
配列番号１４は
ＵｍｓＵｍｓＡｍＣｍＣｍＡｍＡｆＵｆＵｆＵｍＵｍＣｍＵｍＵｍＵｍＵｍＧｍＵｍＵｍ－ＮＡＧ００５２’であり、
配列番号１５は
ＧｍｓＵｍｓＧｍＵｍＧｍＣｍＡｆＣｆＵｆＵｍＣｍＧｍＣｍＵｍＵｍＣｍＡｍＣｍＵｍ－ＮＡＧ００５２’であり、
配列番号１７は
ＡｍｓＧｆｓＵｍＧｆＡｍＡｆ（－）ｈｍｐＮＡ（Ｇ）ＣｍＧｍＡｆＡｍＧｆＵｍＧｆＣｍＡｆＣｍＡｆＣｍｓＧｍｓＧｍであり、
配列番号１８は
ＡｍｓＵｆｓＡｍＵｆＡｍＣｆ（－）ｈｍｐＮＡ（Ｃ）ＣｍＡｍＡｆＡｍＧｆＡｍＣｆＡｍＡｆＡｍＡｆＧｍｓＡｍｓＡｍであり、
配列番号１９は
ＡｍｓＡｆｓＣｍＡｆＡｍＡｆ（－）ｈｍｐＮＡ（Ａ）ＧｍＡｍＡｆＡｍＡｆＵｍＵｆＧｍＧｆＵｍＡｆＡｍｓＣｍｓＡｍであり、
配列番号２０は
ＩｍｓＧｆｓＵｍＧｆＡｍＡｆ（－）ｈｍｐＮＡ（Ｇ）ＣｍＧｍＡｆＡｍＧｆＵｍＧｆＣｍＡｆＣｍＡｆＣｍｓＧｍｓＧｍであり、
そのうち、Ａｆ＝アデニン２’－Ｆリボヌクレオシド（ａｄｅｎｉｎｅ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｃｆ＝シトシン２’－Ｆリボヌクレオシド（ｃｙｔｏｓｉｎｅ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｕｆ＝ウラシル２’－Ｆリボヌクレオシド（ｕｒａｃｉｌ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｇｆ＝グアニン２’－Ｆリボヌクレオシド（ｇｕａｎｉｎｅ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ａｍ＝アデニン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ａｄｅｎｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｃｍ＝シトシン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ｃｙｔｏｓｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｇｍ＝グアニン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ｇｕａｎｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｕｍ＝ウラシル２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ｕｒａｃｉｌ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｉｍ＝ヒポキサンチン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
ｓは、当該文字ｓの左右に隣接する２つのヌクレオチド間が、チオホスホジエステル基による連結であることを表し、
ＮＡＧ００５２’は
を表し、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ｇ）は
を表し、（－）ｈｍｐＮＡ（Ｃ）は
を表し、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ａ）は
を表す。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡは、
、という構造又はその薬学的に許容される塩から選ばれ、
そのうち、
Ａｆ＝アデニン２’－Ｆリボヌクレオシド（ａｄｅｎｉｎｅ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
Ｃｆ＝シトシン２’－Ｆリボヌクレオシド（ｃｙｔｏｓｉｎｅ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
Ｇｆ＝グアニン２’－Ｆリボヌクレオシド（ｇｕａｎｉｎｅ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
Ｕｆ＝ウラシル２’－Ｆリボヌクレオシド（ｕｒａｃｉｌ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
Ａｍ＝アデニン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ａｄｅｎｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
Ｃｍ＝シトシン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ｃｙｔｏｓｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
Ｇｍ＝グアニン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ｇｕａｎｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
Ｕｍ＝ウラシル２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ｕｒａｃｉｌ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
Ｉｍ＝ヒポキサンチン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（Ｉｎｏｓｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
はチオホスホジエステル基を表し、
はホスホジエステル基を表し、
ＮＡＧ００５２’は
を表し、
ＮＡＧ１は
を表し、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ｇ）は
を表し、（－）ｈｍｐＮＡ（Ｃ）は
を表し、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ａ）は
を表す。

幾つかの実施形態において、上記薬学的に許容される塩は、ナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩、アミン塩などを含むが、これらに限定されない、本分野における従来の塩であってもよい。

幾つかの具体的な実施形態において、上記ｄｓＲＮＡは、ＴＲＤ００７９７０、ＴＲＤ００７９９４、ＴＲＤ００７９９５、ＴＲＤ００７９７０－１、ＴＲＤ００７９９４－１、ＴＲＤ００７９９５－１、ＴＪＲ１００２５９又はＴＪＲ１００２６０から選ばれる。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡはＴＲＤ００７９７０であり、その構造は以下の通りである。

。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡはＴＲＤ００７９９４であり、その構造は以下の通りである。

。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡはＴＲＤ００７９９５であり、その構造は以下の通りである。

。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡはＴＲＤ００７９７０－１であり、その構造は以下の通りである。

。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡはＴＲＤ００７９９４－１であり、その構造は以下の通りである。

。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡはＴＲＤ００７９９５－１であり、その構造は以下の通りである。

。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡはＴＪＲ１００２５９であり、その構造は以下の通りである。

。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡはＴＪＲ１００２６０であり、その構造は以下の通りである。

。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡはＴＪＲ１００４１０であり、その構造は以下の通りである。

そのうち、Ａｆ＝アデニン２’－Ｆリボヌクレオシド（ａｄｅｎｉｎｅ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｃｆ＝シトシン２’－Ｆリボヌクレオシド（ｃｙｔｏｓｉｎｅ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｇｆ＝グアニン２’－Ｆリボヌクレオシド（ｇｕａｎｉｎｅ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｕｆ＝ウラシル２’－Ｆリボヌクレオシド（ｕｒａｃｉｌ２’－Ｆｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、
Ａｍ＝アデニン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ａｄｅｎｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｃｍ＝シトシン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ｃｙｔｏｓｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｇｍ＝グアニン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（ｇｕａｎｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｕｍ＝ウラシル２’－Ｏｍｅリボヌクレオシド（ｕｒａｃｉｌ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）、Ｉｍ＝ヒポキサンチン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド（Ｉｎｏｓｉｎｅ２’－ＯＭｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ）。

はチオホスホジエステル基を表し、
はホスホジエステル基を表し、
ＮＡＧ００５２’は
を表し、
ＮＡＧ１は
を表し、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ｇ）は
を表し、（－）ｈｍｐＮＡ（Ｃ）は
を表し、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ａ）は
を表す。

別の態様において、本開示は、二本鎖領域を形成するセンス鎖及びアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡを提供し、上記センス鎖及びアンチセンス鎖は、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号１を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号５を含み、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号２を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号６を含み、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号３を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号７を含み、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号４を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号５を含み、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号１を含み、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号８を含む、という群の何れか１つから選ばれる。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡのセンス鎖及びアンチセンス鎖は、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号１であり、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号５であり、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号２であり、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号６であり、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号３であり、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号７であり、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号４であり、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号５であり、
センス鎖のヌクレオチド配列は配列番号１であり、アンチセンス鎖のヌクレオチド配列は配列番号８である、という群の何れか１つから選ばれる。

本開示に記載のｓｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡは、合成由来又はインビトロで調製されるものから選ばれる。

医薬組成物
別の態様において、本開示は、本開示に記載のｄｓＲＮＡから選ばれる合成由来の化合物又はインビトロで調製される化合物を提供する。

別の態様において、本開示は、上記ｄｓＲＮＡを含む医薬組成物を提供する。

幾つかの実施形態において、上記医薬組成物は、１つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤を更に含む。

幾つかの実施形態において、上記医薬組成物は、１つ又は複数の他の治療剤を更に含む。

幾つかの実施形態において、上記医薬組成物は、本開示に記載のｄｓＲＮＡ及び１つ又は複数の他の治療剤を活性成分として含む。

幾つかの実施形態において、上記医薬組成物のｄｓＲＮＡは、１つ又は複数の他の治療剤と組み合わせて使用される。

幾つかの具体的な実施形態において、上記他の治療剤は、抗ウイルス剤、逆転写酵素阻害剤、免疫刺激剤、治療用ワクチン、ウイルス侵入阻害剤、ＨｂｓＡｇの分泌又は放出を阻害するオリゴヌクレオチド、キャプシド阻害剤、共有結合性閉鎖環状（ｃｃｃ）ＨＢＶＤＮＡ阻害剤から選ばれる。

種々の薬物送達システムは既知のもので、本開示に係るｄｓＲＮＡ又は医薬組成物に適用可能であり、例えば、リポソーム中へのパッケージ、微小粒子、マイクロカプセル、当該化合物を発現可能な組換え細胞、受容体媒介性の細胞エンドサイトーシス、逆転写ウィルス又は他のベクターの一部となる核酸の構築である。

幾つかの実施形態において、本開示に記載のｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は、従来通りに投与され、局所（例えば、直接注射若しくは移植）又は全身投与によって、又は経口、直腸若しくは非経口経路によって投与され、上記非経口経路は皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、経皮投与、吸入投与（例えば、エアロゾル）、粘膜投与（例えば、舌下、鼻腔内投与）、頭蓋内投与などを含むが、これらに限定されない。

幾つかの実施形態において、本開示により提供されるｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は、注射、例えば、静脈内、筋肉内、皮内、皮下、十二指腸内又は腹腔内注射により投与されてもよい。

幾つかの実施形態において、本開示によって提供されるｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は、試薬キットにパッケージされ得る。

使用及び治療方法
別の態様において、本開示は、薬剤の調製における本開示に記載のｄｓＲＮＡ又は医薬組成物の使用を提供する。

幾つかの実施形態において、上記薬剤は、対象におけるＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染の予防及び／又は治療に用いられる。

幾つかの実施形態において、上記薬剤は、Ｂ型肝炎ウイルス関連疾患の予防及び／又は治療に用いられる。幾つかの実施形態において、上記Ｂ型肝炎ウイルス関連疾患は慢性肝炎であり、上記対象はＨＢｅＡｇ陽性又はＨＢｅＡｇ陰性である。

幾つかの実施形態において、上記Ｂ型肝炎ウイルス関連疾患は、急性Ｂ型肝炎、慢性Ｂ型肝炎、Ｄ型肝炎ウイルス感染症、Ｄ型肝炎、肝線維症、進行性肝疾患及び肝細胞癌である。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物の有効量又は有効用量は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重～約２００ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重又は約０．５ｍｇ／ｋｇ体重～約５０ｍｇ／ｋｇ体重である。

別の態様において、本開示は、本開示に記載のｄｓＲＮＡ又は医薬組成物の有効量又は有効用量を対象に投与することを含む、疾患を予防及び／又は治療する方法を提供する。

幾つかの実施形態において、上記疾患は、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症から選ばれる。幾つかの実施形態において、上記疾患は、Ｂ型肝炎ウイルス関連疾患から選ばれる。幾つかの実施形態において、上記Ｂ型肝炎ウイルス関連疾患は慢性肝炎であり、上記対象はＨＢｅＡｇ陽性又はＨＢｅＡｇ陰性である。

幾つかの実施形態において、上記Ｂ型肝炎ウイルス関連疾患は、急性Ｂ型肝炎、慢性Ｂ型肝炎、Ｄ型肝炎ウイルス感染症、Ｄ型肝炎、肝線維症、進行性肝疾患及び肝細胞癌である。幾つかの実施形態において、本開示の方法は、別の治療剤を対象に投与することを更に含む。

幾つかの実施形態において、上記別の治療剤は、抗ウイルス剤、逆転写酵素阻害剤、免疫刺激剤、治療用ワクチン、ウイルス侵入阻害剤、ＨｂｓＡｇの分泌又は放出を阻害するオリゴヌクレオチド、キャプシド阻害剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、及び前述のものの何れかの組み合わせから選ばれる。

幾つかの実施形態において、上記ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物の有効量又は有効用量は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重～約２００ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重又は約０．５ｍｇ／ｋｇ体重～約５０ｍｇ／ｋｇ体重である。別の態様において、本開示は、体内又は体外で細胞における標的遺伝子又はそのｍＲＮＡをサイレンシングするための方法であって、上記ｄｓＲＮＡ又は上記医薬組成物を当該細胞に導入するステップを含む方法を提供する。

幾つかの実施形態において、上記標的遺伝子は、ＨＢＶ（例えば、ＨＢＶ－Ｓ、ＨＢＶ－Ｘ）を標的とする遺伝子を含むが、これに限定されない。

標的遺伝子の抑制方法
別の態様において、本開示は、対象に有効量又は有効用量の本開示に記載のｄｓＲＮＡ又は本開示に記載の医薬組成物を投与することを含む、標的遺伝子又はそのｍＲＮＡの発現を阻害する方法を提供する。

幾つかの実施形態において、上記標的遺伝子は、ＨＢＶ（例えば、ＨＢＶ－Ｓ、ＨＢＶ－Ｘ）を含むが、これに限定されない。

幾つかの実施形態において、上記対象は、既にこの前に、標的とされた細胞、細胞集団、組織又は対象において標的遺伝子又はそのｍＲＮＡの病理学的アップレギュレーションを有すると同定された。

本開示は、細胞を本開示のｄｓＲＮＡ及び／又は医薬組成物と接触させることによって、細胞におけるＨＢＶの複製を阻害するステップを含む、細胞におけるＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）の複製を阻害する方法を更に提供する。幾つかの実施形態において、細胞は対象の体内にある。幾つかの実施形態において、細胞はインビトロである。

本開示は、ＨＢＶに感染した対象におけるＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）抗原のレベルを低下させる方法であって、本開示のｄｓＲＮＡ及び／又は医薬組成物の治療有効量を対象に投与し、それによって対象におけるＨＢＶ抗原のレベルを低下させることを含む、方法を更に提供する。幾つかの実施形態において、ＨＢＶ抗原はＨＢｓＡｇである。幾つかの実施形態において、ＨＢＶ抗原はＨＢｅＡｇである。幾つかの実施形態において、上記対象はＨＢｅＡｇ陽性である。幾つかの実施形態において、上記対象はＨＢｅＡｇ陰性である。

送達方法
別の態様において、本開示は、肝臓にオリゴヌクレオチドを送達する方法であって、上記ｄｓＲＮＡ又は上記医薬組成物の有効量又は有効量を対象に投与することを含む方法を提供する。

別の態様において、本開示は、上記ｄｓＲＮＡ又は上記医薬組成物を含むＲＮＡｉ（ＲＮＡ干渉）剤を提供する。

別の態様において、本開示は、上記ｄｓＲＮＡ又は上記医薬組成物を含む細胞を更に提供する。

別の態様において、本開示は、上記ｄｓＲＮＡ又は上記医薬組成物を含む試薬キット又はキットを更に提供する。

本開示において、上記ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は標的遺伝子を発現した細胞に接触する場合、測定されるように（例えば、ｐｓｉＣＨＥＣＫ活性スクリーニング、ルシフェラーゼレポーター遺伝子検出法、ＰＣＲ又は分岐ＤＮＡ（ｂＤＮＡ）に基づく方法、又はタンパク質に基づく方法、例えば、免疫蛍光分析法、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ、又はフローサイトメトリーなどにより）、上記ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は、標的遺伝子の発現を少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％阻害することになる。

本開示において、上記ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は標的遺伝子を発現した細胞に接触する場合、測定されるように（例えば、ｐｓｉＣＨＥＣＫ活性スクリーニング、ルシフェラーゼレポーター遺伝子検出法、ＰＣＲ又は分岐ＤＮＡ（ｂＤＮＡ）に基づく方法、又はタンパク質に基づく方法、例えば、免疫蛍光分析法、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ、又はフローサイトメトリーなどにより）、上記ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物による標的遺伝子ｍＲＮＡの余剰発現百分率は９９％以下、９５％以下、９０％以下、８５％以下、８０％以下、７５％以下、７０％以下、６５％以下、６０％以下、５５％以下、５０％以下、４５％以下、４０％以下、３５％以下、３０％以下、２５％以下、２０％以下、１５％以下、又は１０％以下である。

本開示において、上記ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は標的遺伝子を発現した細胞に接触する場合、測定されるように（例えば、ｐｓｉＣＨＥＣＫ活性スクリーニング、ルシフェラーゼレポーター遺伝子検出法、ＰＣＲ又は分岐ＤＮＡ（ｂＤＮＡ）に基づく方法、又はタンパク質に基づく方法、例えば、免疫蛍光分析法、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ、又はフローサイトメトリーなどにより）、ｄｓＲＮＡはオンターゲット活性を維持しながら、オフターゲット活性を少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％又は少なくとも７５％低減させる。

本開示において、上記ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は標的遺伝子を発現した細胞に接触する場合、測定されるように（例えば、ｐｓｉＣＨＥＣＫ活性スクリーニング、ルシフェラーゼレポーター遺伝子検出法、ＰＣＲ又は分岐ＤＮＡ（ｂＤＮＡ）に基づく方法、又はタンパク質に基づく方法、例えば、免疫蛍光分析法、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ、又はフローサイトメトリーなどにより）、ｄｓＲＮＡはオンターゲット活性を多くとも２０％、多くとも１９％、多くとも１５％、多くとも１０％、多くとも５％又は多くとも１％低下させると共に、オフターゲット活性を少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％又は少なくとも７５％低減させる。

本開示において、上記ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は標的遺伝子を発現した細胞に接触する場合、測定されるように（例えば、ｐｓｉＣＨＥＣＫ活性スクリーニング及びルシフェラーゼレポーター遺伝子検出法、ＰＣＲ又は分岐ＤＮＡ（ｂＤＮＡ）に基づく方法、又はタンパク質に基づく方法、例えば、免疫蛍光分析法、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ、又はフローサイトメトリーなどにより）、ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は、オンターゲット活性を少なくとも１％、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％又は少なくとも８０％を向上させると共に、オフターゲット活性を少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％又は少なくとも７５％低減させる。

本開示は、本開示に記載のリガンド、ｓｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物を合成することを含む、ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物を調製する方法を更に提供する。

用語の説明
本開示が更に容易に理解されるように、以下、幾つかの技術・科学用語を具体的に定義する。本願で別途明確に定義しない限り、本願に使用される他の技術・科学用語の全ては、当業者に通常理解されている意味を持っている。

本開示に係る化合物は、特定の幾何又は立体異性体の形態があってもよい。本開示は、シス・トランス異性体、（－）－と（＋）－エナンチオマー、（Ｒ）－と（Ｓ）－エナンチオマー、ジアステレオマー、（Ｄ）－異性体、（Ｌ）－異性体、及びそのラセミ混合物と他の混合物、例えば、エナンチオマーやジアステレオマーに富む混合物のような混合物の全てを含め、このような化合物の全ては本開示の範囲に含まれることを意図する。アルキル基などの置換基には、他の不斉炭素原子があってもよい。このような異性体及びそれらの混合物の全ては、本開示の範囲に含まれる。本開示に係る不斉炭素原子を含む化合物は、光学活性純品の形態又はラセミ形態で単離されることができる。光学活性純品の形態は、ラセミ混合物から分割され、或いはキラル原料又はキラル試薬を使用することにより合成されてもよい。

キラル合成又はキラル試薬又は他の通常の技術により、光学活性の（Ｒ）－と（Ｓ）－異性体及びＤとＬ異性体を調製することができる。本開示のある化合物の１つのエナンチオマーを得るには、不斉合成又はキラル助剤を有する誘導作用により調製することができ、ここで、得られたジアステレオマー混合物を単離し、且つ基の分裂を補助することにより、必要なエナンチオマーの純品を提供する。或いは、分子に塩基性官能基（例えば、アミノ基）又は酸性官能基（例えば、カルボキシ基）が含まれる場合、適当な光学活性の酸又は塩基と共にジアステレオマーの塩を形成し、そしてこの分野でよく知られている通常の方法によりジアステレオマー分割を行い、その後、回収してエナンチオマーの純品を得る。なお、エナンチオマーとジアステレオマーの単離は、一般的にクロマトグラフィーを使用することにより完成され、上記クロマトグラフィーはキラル固定相を採用し、且つ任意選択的に化学誘導法と組み合わせる（例えば、アミンからカルバメートを生成する）。

本開示に記載される化合物の化学構造において、「
」という結合は配置が指定されていないことを示し、即ち、化学構造にキラル異性体が存在する場合、「
」という結合は「
」又は「
」であってもよく、或いは「
」及び「
」という２つの配置を同時に含んでもよい。本開示に記載される化合物の化学構造において、「
」という結合は、配置が指定されておらず、即ち、「
」という結合の配置はＥ配置又はＺ配置であってもよく、或いはＥとＺという２つの配置を同時に含んでもよい。

本開示の化学構造式において、「
」、「
」又は「
」は、本明細書に記載される発明の範囲に従って、１つ又は複数の任意の基に結合することができ、アスタリスク「＊」はキラル中心を表す。

配置が明示されていない場合、本開示の化合物と中間体は、異なる互変異性体形態で存在してもよく、且つ、このような形態の全ては本開示の範囲内に含まれる。「互変異性体」又は「互変異性体形態」という用語は、低いエネルギー障壁により相互変換可能な異なるエネルギーの構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体（プロトン移動互変異性体ともいう）は、例えば、ケト－エノール及びイミン－エナミン、ラクタム－ラクチム異性化などのプロトリシスによる相互変換を含む。ラクタム－ラクチム平衡の実例は、以下に示すようなＡとＢの間である。

本開示における化合物の全ては、Ａ型又はＢ型に描かれることができる。全ての互変異性形態は、本発明の範囲にある。化合物の命名は、何れの互変異性体も排除しない。

本開示は、本願に記載されるものと同じであるが、１つ又は複数の原子が、自然界で通常見られる原子量又は質量数と異なる原子量又は質量数を有する原子で置換された同位体標識の幾つかの本開示の化合物を更に含む。本開示の化合物に結合可能な同位体の実例は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、ヨウ素及び塩素の同位体を含み、例えば、それぞれ^２Ｈ、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１３Ｎ、^１５Ｎ、^１５Ｏ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^３１Ｐ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、^１２３Ｉ、^１２５Ｉ及び^３６Ｃｌなどである。

特に説明のない限り、１つの位置が特に重水素（Ｄ）と指定される場合、当該位置は、重水素の天然存在度（０．０１５％である）よりも少なくとも１０００倍高い存在度を有する重水素（即ち、少なくとも１０％の重水素が組み込まれた）であると理解すべきである。例における化合物の、重水素の天然存在度よりも高い存在度を有することは、少なくとも１０００倍の存在度の重水素、少なくとも２０００倍の存在度の重水素、少なくとも３０００倍の存在度の重水素、少なくとも４０００倍の存在度の重水素、少なくとも５０００倍の存在度の重水素、少なくとも６０００倍の存在度の重水素又はそれ以上の存在度の重水素であってもよい。本開示は、種々の重水素化形態の式（Ｉ）、式（Ｉ’）、式（ＩＩ）の化合物を更に含む。炭素原子に連結されるそれぞれの利用可能な水素原子は、独立的に重水素原子で置換されてもよい。当業者は、関連文献を参照して重水素化形態の式（Ｉ）、式（Ｉ’）、式（ＩＩ）の化合物を合成することができる。重水素化形態の式（Ｉ）、式（Ｉ’）、式（ＩＩ）の化合物は、調製する場合、市販の重水素化出発物質を使用してもよく、或いは、通常の技術により重水素化試薬で合成されてもよく、重水素化試薬は、重水素化ボラン、三重水素化ボランテトラヒドロフラン溶液、重水素化水素化アルミニウムリチウム、重水素化ヨードエタン及び重水素化ヨードメタンなどを含むが、これらに限定されない。

特に説明のない限り、「任意選択的に」、「任意選択的」、「選択可能的に」又は「選択可能的」は、その後に説明される事象又は状況が生じてもよいが、生じなくてもよいことを意味し、この説明は、当該事象又は状況が生じる場合と生じない場合を含む。例えば、「任意選択的に、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結している」とは、Ｒ_１とＲ_２は環になるように直接連結してもよいが、存在する必要はないことを意味し、当該説明には、Ｒ_１とＲ_２が環になるように直接連結する場合と、Ｒ_１とＲ_２が環を形成しない場合とが含まれる。

「約」又は「ほぼ」という用語は、数値が当業者により測定される具体値の許容可能な誤差範囲にあることを意味し、上記数値部分が如何に計測又は測定するか（即ち、計測システムの限度）によって決められる。例えば、「約」は、標準偏差の範囲内であることを意味してもよい。或いは、「約」又は「基本的に含む」は、多くとも２０％の範囲、例えば、１％～１５％の間、１％～１０％の間、１％～５％の間、０．５％～５％の間、０．５％～１％の間に変化することを意味してもよく、本開示では、数字又は数値範囲の前に「約」という用語がある何れの場合も、所定の数の実施形態を含む。特に説明のない限り、具体値が本願及び特許請求の範囲に現れる場合、「約」又は「基本的に含む」の意味は、当該具体値の許容可能な誤差範囲内にあると仮定すべきである。

本開示において、「含む」という用語は、「……からなる」と置き換えることができる。

特に明記しない限り、本開示の「化合物」、「化合修飾」、「リガンド」、「ｄｓＲＮＡ」、「核酸」及び「ＲＮＡｉ」は何れも、独立的に、塩、混合塩又は非塩（例えば、遊離酸又は遊離塩基）の形態で存在することができる。塩又は混合塩の形態で存在する場合、それは薬学的に許容される塩であってもよい。

「薬学的に許容される塩」は、無機塩又は有機塩から選ばれてもよく、薬学的に許容される酸付加塩及び薬学的に許容される塩基付加塩も含んでもよい。

「薬学的に許容される酸付加塩」は、他の副作用無しに遊離塩基の生物学的利用率を保持することができる、無機酸又は有機酸と形成された塩を指す。無機酸塩は塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などを含むが、これらに限定されず、有機酸塩はギ酸塩、酢酸塩、２，２－ジクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、カプロン酸塩、オクタン酸塩、デカン酸塩、ウンデシレン酸塩、グリコール酸塩、グルコン酸塩、乳酸塩、セバシン酸塩、アジピン酸塩、グルタル酸塩、マロン酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、オレイン酸塩、桂皮酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、グルタミン酸塩、ピログルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、メシル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、サリチル酸塩、４－アミノサリチル酸塩、ナフタレンジスルホン酸塩などを含むが、これらに限定されない。これらの塩は、本分野で知られている方法で調製することができる。

「薬学的に許容される塩基付加塩」は、他の副作用無しに遊離酸の生物学的利用率を保持することができる、無機塩基又は有機塩基と形成された塩を指す。無機塩基から誘導された塩は、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、マンガン塩、アルミニウム塩などを含むが、これらに限定されない。好ましい無機塩は、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩及びマグネシウム塩であり、ナトリウム塩が好ましい。有機塩基から誘導された塩は、以下の塩、即ち、第１級アミン類、第２級アミン類及び第３級アミン類、天然の置換されたアミン類を含む置換されたアミン類、環状アミン類及び塩基性イオン交換樹脂、例えば、アンモニア、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジメチルエタノールアミン、２－ジメチルアミノエタノール、２－ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、コリン、グリシンベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルコサミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ－エチルピペリジン、ポリアミド樹脂などを含むが、これらに限定されない。好ましい有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリン及びカフェインを含む。これらの塩は、本分野で知られている方法で調製することができる。

「アルキル基」は、例えば、１個～３０個の炭素原子を含む直鎖及び分岐鎖基（Ｃ_１－Ｃ_３０アルキル基）、又は例えば、１個～６個の炭素原子を含むアルキル（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基）、又は例えば、１個～３個の炭素原子を含むアルキル（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル基）である、飽和脂肪族炭化水素基を意味する。非限定的な実施例は、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｎ－ペンチル基、１，１－ジメチルプロピル基、１，２－ジメチルプロピル基、２，２－ジメチルプロピル基、及びその様々な分岐鎖異性体などを含む。

「アルケニル基」という用語は、少なくとも１つの二重結合を含む炭化水素基を指す。アルケニル基の非限定的な実例は、ビニル基、１－プロペニル基、２－プロペニル基、１－ブテニル基又は２－ブテニル基及びその種々の分岐鎖異性体を含むが、これらに限定されない。

「アルキニル基」という用語は、少なくとも１つの三重結合を含む炭化水素基を指す。アルキニル基の非限定的な実例は、エチニル基、１－プロピニル基、２－プロピニル基、１－ブチニル基又は２－ブチニル基及びその種々の分岐鎖異性体を含むが、これらに限定されない。

「アルコキシ基」という用語は、－Ｏ－（アルキル基）を指し、そのうち、アルキル基の定義は上記の通りである。アルコキシ基の非限定的な実例は、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基を含む。

「シクロアルキル基」は、飽和又は部分不飽和の単環式又は多環式環状炭化水素置換基を指し、シクロアルキル環は３個～２０個の炭素原子を含み、好ましくは３個～６個の炭素原子を含み、より好ましくは５個～６個の炭素原子を含む。単環式シクロアルキル基の非限定的な実例は、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロペンテニル基、シクロヘキシル基、シクロヘキセニル基、シクロヘキサジエニル基などを含み、多環式シクロアルキル基は、スピロ環、縮合環及び架橋環のシクロアルキル基を含む。

「ヘテロシクロアルキル基」は、飽和又は部分的に不飽和の単環又は多環式の環状炭化水素置換基であり、３個～２０個の環原子を含み、そのうち、１つ又は複数の環原子は、窒素、酸素又はＳ（Ｏ）_ｍ（そのうち、ｍは０～２の整数である）から選ばれるヘテロ原子であるが、－Ｏ－Ｏ－、－Ｏ－Ｓ－又は－Ｓ－Ｓ－の環部分を含まず、残りの環原子は炭素である。好ましくは３個～１２個の環原子を含み、そのうち、１個～４個はヘテロ原子であり、より好ましくは３個～７個の環原子を含む。「ヘテロシクロアルキル基」の非限定的な実例は、
などを含む。

上記ヘテロシクロアルキル環は、アリール基又はヘテロアリール基に縮合されてもよく、そのうち、母体構造に連結された環はヘテロシクロアルキル基であり、その非限定的な実例は、
などを含む。

「アリール基」は、共役したπ電子系を有する６～１４員の全炭素単環式又は縮合多環式（即ち、隣接する炭素原子対を共有する環）の基を指し、好ましくは６～１２員であり、例えば、フェニル基とナフチル基である。上記アリール基環は、ヘテロアリール基、ヘテロシクロアルキル基又はシクロアルキル基環に縮合してもよく、そのうち、母体構造に連結された環はアリール基環であり、その非限定的な実例は、
を含む。

「ヘテロアリール基」は、１個～４個のヘテロ原子、５個～１４個の環原子を含む複素芳香族系を指し、そのうち、ヘテロ原子は酸素、硫黄及び窒素から選ばれる。ヘテロアリール基は、６～１２員が好ましく、５員又は６員がより好ましい。例えば、その非限定的な実例は、イミダゾリル基、フリル基、チエニル基、チアゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基（ｏｘａｚｏｌｙｌ）、イソオキサゾリル基（ｉｓｏｘａｚｏｌｙｌ）、ピロリル基、テトラゾリル基、ピリジル基、ピリミジニル基、チアジアゾリル基、ピラジニル基、トリアゾリル基、インダゾリル基、ベンゾイミダゾリル基、
などを含む。

上記ヘテロアリール基環は、アリール基、ヘテロシクロアルキル基又はシクロアルキル基環に縮合してもよく、そのうち、母体構造に連結された環はヘテロアリール基環であり、その非限定的な実例は、
を含む。

「ヒドロキシ基」という用語は、－ＯＨ基を指す。

「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素を指す。

「シアノ基」という用語は、－ＣＮを指す。

「アミノ基」という用語は、－ＮＨ_２を指す。

「ニトロ基」という用語は、－ＮＯ_２を指す。

「オキソ」という用語は、＝Ｏ置換基を指す。

本開示において、「ホスフェート基」は、ホスホモノエステル基、ホスホジエステル基又はホスホトリエステル基であってよく、好ましくはホスホジエステル基である。

本開示において、チオホスホジエステル基は、非架橋酸素原子の１つを硫黄原子に置換して修飾したホスホジエステル基を指し、
と互換的に使用される。

「置換される」とは、基の中の１つ又は複数の水素原子、好ましくは５個以下、より好ましくは１個～３個の水素原子が互いに独立的に対応する数の置換基で置換されることを指す。置換基がケトン又はオキソ（即ち、＝Ｏ）である場合、原子上の２つ（２個）の水素が置換される。

本開示の文脈において、
という基における
は、隣接するヌクレオチドと連結可能な任意の基で置換されることができる。

「連結」という用語は、２つの分子間の繋がりを示す場合、２つの分子が共有結合で連結し、又は２つの分子が非共有結合（例えば、水素結合又はイオン結合）で繋がることを指し、直接的連結と間接的連結を含む。

「直接的連結」という用語は、第１の化合物又は基と第２の化合物又は基が、何らの原子や原子団も介在することなく連結していることを指す。

「間接的連結」という用語は、第１の化合物又は基と第２の化合物又は基が、中間基、化合物又は分子（例えば、連結基）を介して連結していることを指す。

「医薬組成物」は、１種又は複数種の本明細書に記載の化合物又はその生理学的に薬用可能な塩又はプロドラッグと他の化学成分の混合物と、生理学的に薬用可能なベクター及び賦形剤などの他の成分とを含むことを意味する。医薬組成物は、生体への投与を促進し、活性成分の吸収に寄与して更に生物活性を発揮するためのものである。

「薬学的に許容される賦形剤」は、承認された、ヒト又は家畜動物への使用が許容される任意の助剤、ベクター、流動促進剤、甘味料、希釈剤、防腐剤、染料／着色剤、着香剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁化剤、安定剤、等張化剤、緩衝剤、溶媒又は乳化剤を含むが、これらに限定されない。

本明細書に使用されるように、「阻害」という用語は、「低減」、「サイレンシング」、「ダウンレギュレーション」、「抑制」及び他の類似の用語と交換して使用可能であり、且つ、任意のレベルの阻害も含む。阻害は、これらの変数のうちの１つ又は複数の、対照レベルと比べる場合の絶対的又は相対的なレベルの低減によって評価可能である。この対照レベルは、この分野で使用されている何れの種類の対照レベルであってもよく、例えば、投与前基線レベル、又は類似の未処理の、若しくは対照（例えば、緩衝液対照又は不活性剤対照だけ）処理された対象、細胞や試料から決定されたレベルである。例えば、ｍＲＮＡ余剰発現量によって、ｓｉＲＮＡ（又はｄｓＲＮＡ）による標的遺伝子発現への阻害程度を表すことができ、例えば、ｍＲＮＡ余剰発現量は、９９％以下、９５％以下、９０％以下、８５％以下、８０％以下、７５％以下、７０％以下、６５％以下、６０％以下、５５％以下、５０％以下、４５％以下、４０％以下、３５％以下、３０％以下、２５％以下、２０％以下、１５％以下、又は１０％以下である。標的遺伝子発現の抑制率は、Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）ＬｕｃｉｆｅｒａｓｅＡｓｓａｙＳｙｓｔｅｍにより検出し、それぞれホタル（Ｆｉｒｅｆｌｙ）化学発光値とウミシイタケ（Ｒｅｎｉｌｌａ）化学発光値を読み取り、相対値Ｒａｔｉｏ＝Ｒｅｎ／Ｆｉｒ、抑制率（％）＝１－（Ｒａｔｉｏ＋ｓｉＲＮＡ／レポーター遺伝子のみ）×１００％を算出することができ、本開示では、余剰ｍＲＮＡ発現量比率（又は余剰活性％）＝１００％－抑制率（％）である。

「有効量」又は「有効用量」という用語は、医学病状の症状又は病状の改善や予防に十分な量を含む。有効量は、更に、診断の許容又は促進に十分な量を指す。特定の患者又は獣医学対象に用いられる有効量は、例えば、治療すべき病状、患者の全体的な健康状況、投与の方法経路と用量及び副作用の重症度などの要因によって変化することができる。有効量は、顕著な副作用又は毒性作用が回避される最大用量又は投与計画であってもよい。

本明細書に使用されるように、「対象」、「患者」、「対象」又は「個体」は互い交換して使用可能であり、ヒト又は哺乳類などの非ヒト動物を含み、例えば、ヒトやサルである。

本明細書で使用する場合、センス鎖（ＳＳ、ＳＳ鎖、又はセンス鎖とも呼ばれる）は、標的ｍＲＮＡ配列と同一又は実質的に同一の配列を含む鎖を指し、アンチセンス鎖（ＡＳ又はＡＳ鎖とも呼ばれる）は、標的ｍＲＮＡ配列に相補的な配列を有する鎖を指す。

本開示において、センス鎖又はアンチセンス鎖の「５’領域」即ち「５’端」、「５’末端」は互換的に使用される。例えば、アンチセンス鎖５’領域の２位から８位のヌクレオチドに代えて、アンチセンス鎖５’端の２位から８位のヌクレオチドに置換してもよい。同様に、センス鎖又はアンチセンス鎖の「３’領域」、「３’末端」及び「３’端」も同様に互換的に使用される。

本明細書に記載のｓｉＲＮＡセンス鎖を説明する文脈において、「配列番号１～配列番号４の何れか１つのヌクレオチド配列と３個以下のヌクレオチドの違いがある配列、且つ少なくとも１５個の連続的なヌクレオチドを含む」という用語は、本明細書に記載のｓｉＲＮＡセンス鎖が、配列番号１～配列番号４の何れか１つのセンス鎖の少なくとも１５個の連続的なヌクレオチド、或いは配列番号１～配列番号４の何れか１つのセンス鎖の少なくとも１５個の連続的なヌクレオチドと３個以下のヌクレオチドの違いがある配列（任意選択的に、２個以下のヌクレオチドの違いがある配列、任意選択的に、１個以下のヌクレオチドの違いがある配列）を含むことを示すことを意図する。任意選択的に、本明細書に記載のｓｉＲＮＡセンス鎖は、配列番号１～配列番号４の何れか１つのセンス鎖の少なくとも１６個の連続的なヌクレオチド、或いは配列番号１～配列番号４の何れか１つのセンス鎖の少なくとも１６個の連続的なヌクレオチドと３個以下のヌクレオチドの違いがある配列（任意選択的に、２個以下のヌクレオチドの違いがある配列、任意選択的に、１個以下のヌクレオチドの違いがある配列）を含む。

本明細書に記載のｓｉＲＮＡアンチセンス鎖を説明する文脈において、「配列番号５～配列番号８の何れか１つのアンチセンス鎖と３個以下のヌクレオチドの違いがある配列、且つ少なくとも１５個の連続的なヌクレオチドを含む」という用語は、本明細書に記載のｓｉＲＮＡアンチセンス鎖が、配列番号５～配列番号８の何れか１つのアンチセンス鎖の少なくとも１５個の連続的なヌクレオチド、或いは配列番号５～配列番号８の何れか１つのアンチセンス鎖の少なくとも１５個の連続的なヌクレオチドと３個以下のヌクレオチドの違いがある配列（任意選択的に、２個以下のヌクレオチドの違いがある配列、任意選択的に、１個以下のヌクレオチドの違いがある配列）を含むことを示すことを意図する。

特に明記しない限り、本開示の文脈において、「Ｇ」、「Ｃ」、「Ａ」、「Ｔ」及び「Ｕ」は、それぞれグアニン、シトシン、アデニン、チミジン及びウラシルの塩基を含むヌクレオチドをそれぞれ表す。本開示の文脈において、Ｉは、核酸塩基ヒポキサンチン（ｎｕｃｌｅｏｂａｓｅｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ）を含むヌクレオチドに相当する。幾つかの実施形態において、本開示で使用されるイノシンという用語は、ヒポキサンチン及び糖又は修飾糖を含むヌクレオシド（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅａｎｄａｓｕｇａｒｏｒｍｏｄｉｆｉｅｄｓｕｇａｒ）に相当する。

特に説明のない限り、本開示の文脈において、小文字ｄは、当該文字ｄの下流に隣接する１つのヌクレオチドがデオキシリボヌクレオチドであることを示し、小文字ｍは、当該文字ｍの上流に隣接する１つのヌクレオチドが２’－メトキシ基で修飾されたヌクレオチドであることを示し、小文字ｆは、当該文字ｆの上流に隣接する１つのヌクレオチドが２’－フルオロで修飾されたヌクレオチドであることを示し、小文字ｓは、当該文字ｓの左右に隣接する２つのヌクレオチド同士がチオホスホジエステル基で連結されていることを示す。

本明細書に使用されるように、「２’－フルオロ（２’－Ｆ）で修飾されたヌクレオチド」という用語は、ヌクレオチドのリボシル基２’位のヒドロキシ基がフルオロで置換されて形成されたヌクレオチドを指し、「非フルオロで修飾されたヌクレオチド」は、ヌクレオチドのリボシル基２’位のヒドロキシ基が非フルオロ基で置換されて形成されたヌクレオチド又はヌクレオチド類似体を指す。

本開示に使用されるように、「２’－メトキシ基（２’－ＯＭｅ）で修飾されたヌクレオチド」という用語は、リボシル基の２’－ヒドロキシ基がメトキシ基で置換されて形成されたヌクレオチドを指す。

本開示の文脈において、１つのヌクレオチド配列と別のヌクレオチド配列との間に「ヌクレオチドの差異」があるとは、前者が後者と比較して、同じ位置のヌクレオチドの塩基の種類が変化していることを意味し、例えば、後者において、１つのヌクレオチド塩基がＡである場合、前者の同じ位置における対応するヌクレオチド塩基がＵ、Ｃ、Ｇ又はＴである場合、２つのヌクレオチド配列間に、その位置でヌクレオチドの差異があると考えられる。幾つかの実施形態において、元の位置のヌクレオチドを無塩基ヌクレオチド又はその等価物に置き換える場合、その位置でヌクレオチドの差異が生じると考えられる。

本明細書に使用されるように、「相補的」又は「逆相補的」という用語は、互いに置き換えて使用することができ、且つ、二本鎖核酸分子において、１つの鎖の塩基がもう１つの鎖における塩基と相補的にペアリングするという当業者に知られている意味を有する。ＤＮＡにおいて、プリン塩基アデニンは、常にピリミジン塩基チミン（又は、ＲＮＡではウラシル）とペアリングし、プリン塩基グアニンは、常にピリミジン塩基シトシンとペアリングする。各塩基ペアは、何れも１つのプリンと１つのピリミジンを含む。１つの鎖におけるアデニンが常にもう１つの鎖におけるチミン（又はウラシル）とペアリングし、且つグアニンが常にシトシンとペアリングする場合、２つの鎖は互いに相補的であるとされ、また、その相補的な鎖の配列から当該鎖の配列を推定することができる。それに応じて、「ミスマッチ」は、本分野で、二本鎖核酸において、対応する位置での塩基が相補的な形態でペアリングして存在するものではないことを意味する。

「化学修飾」又は「修飾」という用語は、ヌクレオチドの化学的手段による変化の全てを含み、例えば、化学部分の追加又は除去、或いは１つの化学部分による別の化学部分の置換である。

「ｄｓＲＮＡ」という用語は、ＲＮＡ干渉が可能なセンス鎖及びアンチセンス鎖を含む二本鎖ＲＮＡ分子を指す。

「塩基」という用語は、何れの既知のＤＮＡとＲＮＡ塩基、塩基類似体を含み、例えば、プリンやピリミジンであり、更に、天然化合物であるアデニン、チミン、グアニン、シトシン、ウラシル、イノシン及び天然類似体を含む。塩基類似体は、ユニバーサル塩基であってもよい。

「平坦末端」又は「平滑末端」という用語は、ｓｉＲＮＡの所定の末端におけるペアリングしなかったヌクレオチド又はヌクレオチド類似体がないこと、即ちヌクレオチド突出がないことを意味するために互換的に使用される。ほとんどの場合、２つの末端が平滑末端であるｓｉＲＮＡは、その全長にわたって二本鎖である。

本開示により提供されるｓｉＲＮＡは、この分野での通常の調製方法（例えば、固相合成と液相合成の方法）により得ることができる。そのうち、固相合成は、既に商用カスタマイズサービスが出た。対応する修飾を持つヌクレオシド単量体により、修飾されたヌクレオチド基を本開示に記載されるｓｉＲＮＡに導入することができ、対応する修飾を持つヌクレオシド単量体を調製する方法、及び修飾されたヌクレオチド基をｓｉＲＮＡに導入する方法も、当業者によく知られているものである。

本開示に記載の「併用」、「組み合わせて使用する」とは、一定の期間内に少なくとも１つの用量のｄｓＲＮＡ、及び少なくとも１つの用量の他の治療剤を投与する投与方法であり、そのうち、投与される薬剤は、何れも薬理学的作用を示す。ｄｓＲＮＡは、別の治療剤と同時に又は順次に投与することができる。このような期間は、同じ投与経路又は異なる投与経路でｄｓＲＮＡ及び別の治療剤を投与する治療を含む。本開示に記載の併用投与方法は、同時に投与すること、個別に調製して共投与すること、又は個別に調製して相次いで投与することから選ばれる。

ＴＲＤ００２２１８、及びＴＲＤ００７２０５の投与後の７日目のＴＴＲにおけるｍＲＮＡの余剰発現量である。ＴＲＤ００２２１８、及びＴＲＤ００７２０５の投与後の２８日目のＴＴＲにおけるｍＲＮＡの余剰発現量である。エキソヌクレアーゼ安定性のゲル電気泳動実験の結果である。５’エキソヌクレアーゼ安定性の実験的定量結果である。３’エキソヌクレアーゼ安定性の実験的定量結果である。

以下、実施例と合わせて本開示を更に説明するが、これらの実施例は本開示の範囲を限定するものではない。本開示の実施例において具体的な条件が明記されていない実験方法は、一般的に、通常の条件に従い、又は原料や商品のメーカーにより勧められた条件に従う。具体的な供給源が明記されていない試薬である場合、当該試薬は、何れかの分子生物学的試薬の供給元から、分子生物学的使用のための品質／純度で得ることができる。

実施例１：化学修飾の調製
１．１化合物１－１ａ及び化合物１－１ｂの合成
化合物１（５００ｍｇ、３．４２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（Ｅｔ_３Ｎ、６９２ｍｇ、６．８４ｍｍｏｌ、０．９５ｍＬ）をジクロロメタン（ＤＣＭ、１０ｍＬ）に溶け、氷浴下で４－トルエンスルホニルクロリド（ＴｓＣｌ、７１７ｍｇ、３．７６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液を滴下し、滴下完了後に室温下で一晩撹拌しながら反応させ、反応が完了した後、水でクエンチし、水相をジクロロメタン（１５ｍＬ）で３回抽出し、合わせた有機相をまず飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、更に飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄してから、減圧下で溶剤を蒸発乾燥させて粗製品２（８２０ｍｇ、８０％）を得て、そのまま次の反応に用いた。ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_１４Ｈ_２１Ｏ_５Ｓ、［Ｍ＋Ｈ］^＋理論：３０１．１０、実測：３０１．２。

化合物３（２３９ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ、１０ｍＬ）に溶け、氷浴下でＮａＨ（ミネラルオイルに６０％溶けた、９３ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ）溶液を加え、３０分間撹拌しながら当該反応を行い、その後化合物２（３５０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後に６０℃で５時間撹拌しながら反応させ、反応が完了した後、水を加えてクエンチし、水相を酢酸エチル（１５ｍＬ）で３回抽出し、合わせた有機相をまず水（１０ｍＬ）で３回洗浄し、そして飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄してから、減圧下で溶剤を蒸発乾燥させ、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ^１８、条件：５％～５０％（Ａ：Ｈ_２Ｏ、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：７０ｍＬ／ｍｉｎ）を経て、凍結乾燥した後に２２０ｍｇの化合物４を得た。ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_１９Ｈ_２１Ｎ_５Ｏ_３Ｎａ、［Ｍ＋Ｎａ］^＋理論：３９０．１６、実測：３９０．３。

室温下で化合物４（１．５０ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの酢酸と水（４：１）の混合溶液に溶け、６０℃で３０分間撹拌し、反応が完了した後に減圧下で溶剤を蒸発乾燥させ、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ^１８、条件：５％～２５％（Ａ：Ｈ_２Ｏ、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：７０ｍＬ／ｍｉｎ）を経て、凍結乾燥した後に１．１０ｇの化合物５を得た。ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_１６Ｈ_１８Ｎ_５Ｏ_３、［Ｍ＋Ｈ］^＋理論：３２８．１３、実測：３２８．４。

化合物５（１．００ｇ、３．０５ｍｍｏｌ）をピリジン（Ｐｙ、１０ｍＬ）に溶け、氷浴下で４，４’－ジメトキシトリチルクロリド（ＤＭＴｒＣｌ、１．５０ｇ、４．５８ｍｍｏｌ）のピリジン（５ｍＬ）溶液を滴下し、滴下完了後に室温下で一晩撹拌しながら反応させ、反応が完了した後、水でクエンチし、減圧下で溶剤を蒸発乾燥させ、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ^１８、条件：５％～８０％（Ａ：Ｈ_２Ｏ、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：７０ｍＬ／ｍｉｎ）を経て、凍結乾燥した後に１．００ｇの化合物６を得た。ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_３７Ｈ_３６Ｎ_５Ｏ_５、［Ｍ－Ｈ］^＋理論：６３０．２６、実測：６３０．５。ラセミ体化合物６をキラルカラム（ＤａｉｃｅｌＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＩＥ２５０ｍｍ＊４．６ｍｍ、５μｍ、Ａ：ｎ－ヘキサン、Ｂ：エタノール）により分割して４１０ｍｇの６Ａ（－）と４３５ｍｇの６Ｂ（＋）を得た。

化合物６Ａ（－）（２００ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、テトラゾリウム（１１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、Ｎ－メチルイミダゾール（５ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）、３Ａ分子ふるい（５００ｍｇ）を１０ｍＬのアセトニトリルに溶け、室温下で化合物７（１４４ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を加え、室温下で一晩撹拌した。反応が完了した後、分子ふるいをろ過除去し、ジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）で３回洗浄し、更に飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、ろ液を回転乾燥させ、そして逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ^１８、条件：５％～１００％（Ａ：水、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：７０ｍＬ／ｍｉｎ）を経て、凍結乾燥した後に２００ｍｇの化合物１－１ａを得た。ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_４０Ｈ_３９Ｎ_６Ｏ_７Ｐ、［Ｍ－ジイソプロピル＋ＯＨ］^＋理論：７４７．２６、実測：７４７．６。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトニトリル－ｄ_３） δ ７．５６，７．５４（２ｓ，１Ｈ），７．３６－７．２７（ｍ，２Ｈ），７．２４－７．２１（ｍ，７Ｈ），６．８３－６．８０（ｍ，４Ｈ），４．１２－４．１０（ｍ，２Ｈ），３．７５－３．６８（ｍ，１０Ｈ），３．２０－２．８０（ｍ，２Ｈ），２．６８－２．５４（ｍ，４Ｈ），１．２２－１．０４（ｍ，１８Ｈ）。

化合物６Ｂ（＋）（２００ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、テトラゾリウム（１１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、Ｎ－メチルイミダゾール（５ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）、３Ａ分子ふるい（５００ｍｇ）を１０ｍＬのアセトニトリルに溶け、室温下で化合物７（１４４ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を加え、室温下で一晩撹拌した。反応が完了した後、分子ふるいをろ過除去し、ジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）で３回洗浄し、更に飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、ろ液を回転乾燥させ、そして逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ^１８、条件：５％～１００％（Ａ：水、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：７０ｍＬ／ｍｉｎ）を経て、凍結乾燥した後に２００ｍｇの化合物１－１ｂを得た。ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_４０Ｈ_３９Ｎ６Ｏ_７Ｐ、［Ｍ－ジイソプロピル＋ＯＨ］^＋理論：７４７．２６、実測：７４７．５。

１．２化合物１－６ａの合成
化合物１（１０ｇ、６８．４０４ｍｍｏｌ）、化合物２（１５ｇ、６２．１８６ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（３２．６２ｇ、１２４．３７１ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶け、０℃でＤＩＡＤ（２４．６５６ｍＬ、１２４．３７１ｍｍｏｌ）を徐々に滴下した。当該反応液を２５℃で１２ｈ反応させ、ＬＣＭＳで反応が完了したことを示した。当該反応液を酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）で抽出し、有機相を乾燥してろ液を濃縮し、得られた残留物を順相カラムで精製（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）して目標生成物３（２０ｇ）を得た。

化合物３（２０ｇ、２８．５８５ｍｍｏｌ）を酢酸（２４ｍＬ、４２６．０１６ｍｍｏｌ）とＨ_２Ｏ（１２ｍＬ）に溶け、６０℃で１ｈ撹拌した。その後、反応液を回転乾燥させてＴＨＦ（１２ｍＬ）とＨ_２Ｏ（１２ｍＬ）を加え、８０℃で７ｈ撹拌した。ＬＣＭＳで反応が完了したことを示した。反応液に酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）を加えて抽出し、水相に大量の固体が析出するまで、水相に炭酸ナトリウム固体を加えた。固体をろ過し、水で洗浄し、ろ過ケーキを油ポンプにより吸引乾燥させ、目標化合物５（９ｇ）を得た。

窒素ガス保護で、化合物５（６．８ｇ、１８．５８１ｍｍｏｌ）をピリジン（８０ｍＬ）に溶け、０℃でＴＭＳＣｌ（１４．２５０ｍＬ、１１１．４８９ｍｍｏｌ）を徐々に加え、２ｈ撹拌した。その後、０℃でイソブチリルクロライド（２．０４４ｍＬ、１９．５１１ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で１ｈ撹拌し、ＬＣＭＳで反応が完了したことを示した。ジクロロメタン（２００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）で抽出し、有機相を回転乾燥させた後、試料を混合し、順相カラムで精製（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１）してカラムにかけ、４．８％でピークが出た）、黄色油状化合物６（１２ｇ）を得た。

窒素ガス保護下で、化合物６（５．５ｇ、１２．３９２ｍｍｏｌ）をピリジン（３０ｍＬ）に溶け、ＭＯＬＥＣＵＬＡＲＳＩＥＶＥ４Ａ１／１６（７ｇ、１２．３９２ｍｍｏｌ）を加え、その後、０℃で数回に分けてＤＭＴｒＣｌ（５．０４ｇ、１４．８７０ｍｍｏｌ）固体を加え、２５℃で２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１：１、Ｒｆ＝０．６９）で反応が既に完了したことを示した。当該反応液とＴＪＮ２００８７９－０４０－Ｐ１を合わせて処理した。反応液を酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）で抽出し、有機相を回転乾燥させた後、試料を混合し、順相カラムで精製し（ＰＥ：ＥｔＯＡｃでカラムにかけ、８４％でピークが出た）、黄色油状化合物７（１２ｇ）を得た。

化合物７（１２ｇ、１５．３８９ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１４０ｍＬ）に溶け、湿式パラジウム炭素Ｐｄ／Ｃ（７ｇ、１５．３８９ｍｍｏｌ）を加えて当該反応液を２５℃、水素ガス（１５Ｐｓｉ）で２ｈ反応させた。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝０：１、Ｒｆ＝０．０９）で反応が既に完了したことを示した。反応液をろ過し、ろ過ケーキを酢酸エチル（３０ｍＬ）で３回洗った後、ろ液を収集した。ろ液を回転乾燥させた後、５０ｍＬのジクロロメタン及び２ｍＬのトリエチルアミンを加えて試料を混合し、順相カラムで精製し（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１でカラムにかけ、０．５％でピークが出た）、９ｇ（黄色泡状固体）を得て、得られたラセミ化合物をＳＦＣにより分割し、製品である目標化合物７Ａ（－）（３．９ｇ）及び目標化合物７Ｂ（＋）（３．８ｇ）を得た。

化合物７Ａ（－）（３．３０ｇ、５．４０ｍｍｏｌ）、テトラゾリウム（１９０ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ）、１－メチルイミダゾール（９０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）、３Ａ分子ふるい（５００ｍｇ）を３０ｍＬのアセトニトリルに溶け、室温下で化合物８（２．５０ｇ、８．１０ｍｍｏｌ）を加え、室温下で２ｈ撹拌した。反応が完了した後、分子ふるいをろ過除去し、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて洗浄し（３０ｍＬ×３）、更に飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、ろ液を回転乾燥させ、そして逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、条件：５％～１００％（Ａ：水、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：７０ｍＬ／ｍｉｎ）を経て、凍結乾燥した後に１－６ａ（２．９ｇ、６６％）を得た。ＭＳｍ／ｚ：Ｃ４３Ｈ５５Ｎ７Ｏ７Ｐ［Ｍ＋Ｈ］＋、理論：８１２．３８、実測：８１２．５。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトニトリル－ｄ３） δ ７．５６，７．５４（２ｓ，１Ｈ），７．３６－７．２７（ｍ，２Ｈ），７．２４－７．２１（ｍ，７Ｈ），６．８３－６．８０（ｍ，４Ｈ），４．１２－４．１０（ｍ，２Ｈ），３．７５－３．６８（ｍ，１０Ｈ），３．２０－２．８０（ｍ，２Ｈ），２．６８－２．５４（ｍ，４Ｈ），１．２２－１．０４（ｍ，１８Ｈ）。

１．３化合物１－７ａの合成
窒素ガス保護下で、化合物１（５ｇ、２３．１２７２ｍｍｏｌ）、化合物２（６．７６ｇ、４６．２５４ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（７．２８ｇ、２７．７５３ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのジオキサンに溶け、０℃でＤＥＡＤ（５．５０２ｍＬ、２７．７５３ｍｍｏｌ）を徐々に滴下した。滴下完了後に、反応を２５℃に徐々に昇温し、そして１ｈ反応させ続けた。反応物に１００ｍＬのＨ_２Ｏ及び１００ｍＬのＥｔＯＡｃを加えて抽出し、有機相を合わせ、乾燥してろ過し、そして濃縮した後、試料を混合してカラムにかけ、順相カラムで精製し（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１：１でカラムにかけた）、目標生成物（４ｇ）を得た。

化合物３（３．３ｇ）をＨＯＡｃ（１６ｍＬ）とＨ_２Ｏ（４ｍＬ）に溶け、油浴に６０℃で０．５ｈ加熱し、反応液を回転乾燥させ、得られた残留物を順相カラムで精製し（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝０：１でカラムにかけた）、目標生成物４（３ｇ）を得た。

化合物４（３ｇ、８．８７３ｍｍｏｌ）を５ｍＬのピリジンに溶け、窒素ガス保護で０℃でＤＭＴｒＣｌ（３．９１ｇ、１１．５３５ｍｍｏｌ）のピリジン溶液１０ｍＬを徐々に滴下した。滴下完了後に反応を２５℃に昇温し、そして１ｈ反応させ続けた。反応液に５０ｍＬの水と１００ｍＬの酢酸エチルを加えて抽出した。水相を更に１００ｍＬの酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせて乾燥しろ過し濃縮して順相カラムで精製（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝２：１で）した。目標生成物５（４ｇ）を得た。

化合物５（４ｇ、５．７６９ｍｍｏｌ）をメタノール（１０ｍＬ）に溶け、飽和のＮＨ３メタノール溶液（４０ｍＬ）を加え、０℃で６ｈ反応させ、反応液を回転乾燥させて順相カラムで精製（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝０：１で）してラセミ化合物２．４ｇを得てＳＦＣにより分割し、目標生成物６Ａ（７５０ｍｇ、１００％の純度）と目標生成物６Ｂ（４００ｍｇ、９９．１６％の純度）を得た。

化合物６Ａ（－）（７００ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）、テトラゾリウム（５０ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）、１－メチルイミダゾール（２３ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、３Ａ分子ふるい（５００ｍｇ）を１０ｍＬのアセトニトリルに溶け、室温下で化合物７（６３０ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を加え、室温下で２ｈ撹拌した。反応が完了した後、分子ふるいをろ過除去し、ＤＣＭ（５０ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて洗浄し（１０ｍＬ×３）、更に飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、ろ液を回転乾燥させて逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、条件：５％～１００％（Ａ：水、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：７０ｍＬ／ｍｉｎ）を経て、凍結乾燥した後に１－７ａ（７００ｍｇ、７２％）を得た。ＭＳｍ／ｚ：Ｃ３８Ｈ４７Ｎ４Ｏ７ＰＮａ［Ｍ＋Ｎａ］＋、理論：７２５．３２、実測：７２５．５。

１．４化合物１－８ａの合成
化合物１（８．５ｇ、７６．５０８ｍｍｏｌ）、化合物２（３０．６４ｇ、９１．８０９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５０ｍＬ）に溶け、ＣＳ２ＣＯ３（２９．９１ｇ、９１．８０９ｍｍｏｌ）を加え、反応を窒素ガス保護下で、９０℃で１２ｈ反応させた。ＬＣＭＳで反応が完了したことを検出した。反応液をろ過し、油ポンプで回転乾燥させ、順相カラムで分離して精製（８０ｇ、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１～５／１）して目標生成物３（１３．５ｇ、８０％の純度）を得た。

化合物３（１０．５ｇ、３５．１０５ｍｍｏｌ）をピリジン（６５ｍＬ）とＣＨ_３ＣＮ（６５ｍＬ）に溶け、溶液にＢｚＣｌ（４．８９４ｍＬ、４２．１２６ｍｍｏｌ）を滴下し、２５℃で２ｈ反応させた。ＬＣＭＳでほとんどの原料の反応が完了したことを検出し、Ｈ_２Ｏ（１００ｍＬ）を加えてクエンチし、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出し、回転乾燥させ、カラムで分離（ＴＪＮ２００８７２－１０１と合わせ）して精製（８０ｇ、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１～０／１、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）して目標生成物４（１４ｇ、９０％の純度）を得た。

化合物４（１４ｇ、３６．６９４ｍｍｏｌ）をＨＯＡｃ（５６ｍＬ、３１４．７９６ｍｍｏｌ）とＨ_２Ｏ（１４ｍＬ）に溶け、６０℃で２ｈ反応させ、ＬＣＭＳで反応が完了したことを示した。油ポンプで濃縮させ、順相カラムで分離（４０ｇ、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１／０～５／１）して目標生成物５（８．４ｇ、９０％の純度＆２．４ｇ、８０％の純度）を得た。

化合物５（７．４ｇ、２１．９５７ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（０．５４ｇ、４．３９１ｍｍｏｌ）、ＭＯＬＥＣＵＬＡＲＳＩＥＶＥ４Ａ（１１．１ｇ、２．９６７ｍｍｏｌ）をピリジン（６０ｍＬ）に溶け、氷浴下で１０ｍｉｎ撹拌し、その後ＤＭＴｒＣｌ（８．９３ｇ、２６．３４８ｍｍｏｌ）を加え、１．８ｈ撹拌しながら反応させ、ＬＣＭＳで約１９％の原料が残り、約６０％の目標がＭＳであることが検出された。（ＴＪＮ２００８７２－１０５＆１０６）と合わせて精製した。反応液にＨ_２Ｏ（５０ｍＬ）を加え、ＤＣＭ（５０ｍＬ×３）で抽出し、乾燥し、回転乾燥させ、カラムで分離（１２０ｇ、ＰＥ／（ＥＡ：ＤＣＭ：ＴＥＡ＝１：１：０．０５）＝１／０～０／１からＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）して目標化合物６（１１ｇ、８９％の純度、ＴＪＮ２００８７２－１０５＆１０６＆１０７）を得て、原料（３．０ｇ、７０％の純度）を回収した。

化合物６（１５ｇ、２２．０４１ｍｍｏｌ）をＳＦＣ（ＤＡＩＣＥＬＣＨＩＲＡＬＰＡＫＡＤ（２５０ｍｍ×５０ｍｍ、１０μｍ）、０．１％のＮＨ_３Ｈ_２ＯＥｔＯＨ、Ｂ：４５％～４５％、２００ｍＬ／ｍｉｎ）により分離して目標生成物６Ａ（５．３３ｇ、９４．２９％の純度）、目標生成物６Ｂ（６．１４ｇ、９７．９１％の純度）を得て、化合物６を１．０ｇ回収した。

化合物６Ｂ（－）（５．４ｇ、８．９２ｍｍｏｌ）、テトラゾリウム（３１２ｍｇ、４．４６ｍｍｏｌ）、１－メチルイミダゾール（１４６ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）、３Ａ分子ふるい（５００ｍｇ）を４０ｍＬのアセトニトリルに溶け、室温下で化合物７（４ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）を加え、室温下で２ｈ撹拌した。反応が完了した後、分子ふるいをろ過除去し、ＤＣＭ（２００ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて洗浄し（３０ｍＬ×３）、更に飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、ろ液を回転乾燥させて逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、条件：５％～１００％（Ａ：水、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：７０ｍＬ／ｍｉｎ）を経て、凍結乾燥した後に１－８ａ（５．８ｇ、８０％）を得た。ＭＳｍ／ｚ：Ｃ４５Ｈ５１Ｎ５Ｏ７Ｐ、［Ｍ＋Ｈ］＋、理論：８０４．３６、実測：８０４．４。

実施例２．ｓｉＲＮＡの合成
ｄｓＲＮＡの合成は、通常のホスホロアミダイト固相合成法と変わりがなく、ＡＳ鎖５’の７位修飾されたヌクレオチドを合成する時に、上記合成されたホスホロアミダイト単量体で親配列元ヌクレオチドを置換した。以下、合成プロセスを簡単に説明する。Ｄｒ．Ｏｌｉｇｏ４８シンセサイザー（Ｂｉｏｌｙｔｉｃ）において、ＵｎｉｖｅｒｓａｌＣＰＧベクターを始めとして、合成プログラムによってヌクレオシドホスホロアミダイト単量体を１つずつ連結した。以上記載されたＡＳ鎖５’の７位のヌクレオシドホスホロアミダイト単量体を除き、他のヌクレオシド単量体原料である２’－ＦＲＮＡ、２’－Ｏ－メチルＲＮＡなどのヌクレオシドホスホロアミダイト単量体は、上海兆維又は蘇州吉瑪から購入された。５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（ＥＴＴ）を活性化剤（０．６Ｍのアセトニトリル溶液）として採用し、０．２２ＭのＰＡＤＳを１：１の体積比であるアセトニトリルとトリメチルピリジン（蘇州柯楽瑪）に溶けた溶液を加硫試薬として使用し、ヨードピリジン／水溶液（柯楽瑪）を酸化剤として使用した。

固相合成が完了した後、オリゴリボヌクレオチドは当該固体支持体から溶解され、３：１の２８％アンモニア水とエタノール溶液により５０℃の条件で１６ｈ浸漬された。その後遠心分離し、上清液を別の遠心分離管に移動し、濃縮して蒸発乾燥させた後、Ｃ１８逆相クロマトグラフィーにより精製し、移動相が０．１ＭのＴＥＡＡとアセトニトリルで、そして、３％のトリフルオロ酢酸溶液によりＤＭＴｒを除去した。目標オリゴヌクレオチドを収集してから凍結乾燥させ、そしてＬＣ－ＭＳで目標生成物であると同定し、更にＵＶ（２６０ｎｍ）で定量した。

得られた一本鎖オリゴヌクレオチドを、等モル比によって、相補的にペアリングし、アニールし、最後に得られた二本鎖ｄｓＲＮＡを１×ＰＢＳに溶け、そして実験に必要な濃度に調整して使用に備えた。

実施例３．ｐｓｉＣＨＥＣＫ活性スクリーニング実験
ｄｓＲＮＡサンプルの合成は上記の通りであり、プラスミドは、生工生物工程（上海）股フン有限公司に由来した。ｐｓｉＣＨＥＣＫ実験消耗品は表１に示される。

実験手順：細胞をプレートに播種し、細胞をトランスフェクションし、そのうち、トランスフェクション複合物の具体的な調製量は表２に示す通りである。

注記：Ｌｉｐｏ：０．２μＬ／ウェル、プラスミド：０．０５μＬ／ウェル、Ｏｐｔｉ－ＭＥＭ：１０μＬ／ウェル。

表３によれば、異なる実験の需要に応じて異なる濃度に希釈し、作動液として使用に備え、使用する直前に調製した。２４ｈトランスフェクションした後、Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）ＬｕｃｉｆｅｒａｓｅＡｓｓａｙＳｙｓｔｅｍ検出試薬キットの実験操作案によって検出した。相対値Ｒａｔｉｏ＝Ｒｅｎ／Ｆｉｒ（ウミシイタケ／ホタルの比）を算出し、阻害率１－（Ｒａｔｉｏ＋ｄｓＲＮＡ／レポーター遺伝子のみ）×１００％＝阻害率（％）を計算し、本開示において、余剰活性％（ｍＲＮＡ余剰発現量％又はｍＲＮＡ余剰発現割合ともいう）＝１００％－阻害率（％）である。

実施例４：異なる化学修飾の特性評価
そのうち、２－ヒドロキシメチル－１，３－プロパンジオールを出発原料として合成されたヌクレオチドをｈｍｐＮＡと定義し、
（＋）ｈｍｐＮＡ（Ａ）は、実施例１．１におけるヌクレオシドホスホロアミダイト単量体１－１ｂから固相合成により得られ、絶対配置が（Ｓ）－ｈｍｐＮＡ（Ａ）であり、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ａ）は、実施例１．１におけるヌクレオシドホスホロアミダイト単量体１－１ａから固相合成により得られ、絶対配置が（Ｒ）－ｈｍｐＮＡ（Ａ）であり、
同様に、ｈｍｐＮＡの塩基の種類を置換し、固相合成により以下の構造を得て、そして絶対配置を確認した：
（＋）ｈｍｐＮＡ（Ｇ）は、絶対配置が（Ｓ）－ｈｍｐＮＡ（Ｇ）であり、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ｇ）は、絶対配置が（Ｒ）－ｈｍｐＮＡ（Ｇ）であり、
（＋）ｈｍｐＮＡ（Ｃ）は、絶対配置が（Ｓ）－ｈｍｐＮＡ（Ｃ）であり、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ｃ）は、絶対配置が（Ｒ）－ｈｍｐＮＡ（Ｃ）であり、
（＋）ｈｍｐＮＡ（Ｕ）は、絶対配置が（Ｒ）－ｈｍｐＮＡ（Ｕ）であり、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ｕ）は、絶対配置が（Ｓ）－ｈｍｐＮＡ（Ｕ）であり、
（Ｓ）－ｈｍｐＮＡ（Ｇ）、（Ｒ）－ｈｍｐＮＡ（Ｇ）、（Ｓ）－ｈｍｐＮＡ（Ｃ）、（Ｒ）－ｈｍｐＮＡ（Ｃ）、（Ｓ）－ｈｍｐＮＡ（Ｕ）及び（Ｒ）－ｈｍｐＮＡ（Ｕ）の絶対配置は、その中間体又は誘導体からＸ－Ｒａｙ回折により確認された。

中間体又は誘導体の構造は、以下の通りである。

ＴＪ－ＮＡ０６７：検出結晶は無色のブロック状（０．３０ｍｍ^３×０．１０ｍｍ^３×０．０４ｍｍ^３）で、単斜晶系Ｐ２１空間群に属する。セルパラメータａ＝１６．０４９６（５）Å、ｂ＝４．８６２６０（１０）Å、ｃ＝１６．４６８６（５）Å、α＝９０°、β＝１１８．０１５（４）°、γ＝９０°、Ｖ＝１１３４．６５（７）Å３、Ｚ＝４。計算密度Ｄｃ＝１．３８９ｇ／ｃｍ^３、単位セルにおける電子数^Ｆ（０００）＝５０４．０、単位セルの線形吸収係数μ（ＣｕＫα）＝０．８４０ｍｍ-１、回折実験温度Ｔ＝１５０．００（１１）Ｋ。

６Ａ（＋）：検出結晶は無色のブロック状（０．３０ｍｍ^３×０．２０ｍｍ^３×０．１０ｍｍ^３）で、単斜晶系Ｐ２１空間群に属する。セルパラメータａ＝２２．６６８８（７）Å、ｂ＝８．５５９５（２）Å、ｃ＝２３．３５７８（５）Å、α＝９０°、β＝１１３．８７６（３）°、γ＝９０°、Ｖ＝４１４４．３（２）Å３、Ｚ＝２。計算密度Ｄｃ＝０．９９９ｇ／ｃｍ^３、単位セルにおける電子数^Ｆ（０００）＝１３１８．０、単位セルの線形吸収係数μ（ＣｕＫα）＝０．５７０ｍｍ-１、回折実験温度Ｔ＝１００．０１（１８）Ｋ。

ＴＪ－ＮＡ０４８：検出結晶は無色の針状（０．３０ｍｍ^３×０．０４ｍｍ^３×０．０４ｍｍ^３）で、単斜晶系Ｐ１空間群に属する。セルパラメータａ＝７．６１６５（４）Å、ｂ＝１１．３４２３（５）Å、ｃ＝１７．３９９１（８）Å、α＝８５．００７（４）°、β＝８８．０５２（４）°、γ＝７０．５３２（４）°、Ｖ＝１４１１．７５（１２）Å３、Ｚ＝２。計算密度Ｄｃ＝１．３６６ｇ／ｃｍ^３、単位セルにおける電子数Ｆ（０００）＝６２０．０、単位セルの線形吸収係数μ（ＣｕＫα）＝０．８５６ｍｍー１、回折実験温度Ｔ＝１５０．００（１３）Ｋ。

ＴＪ－ＮＡ０９２：検出結晶は無色の角柱状（０．３０ｍｍ^３×０．１０ｍｍ^３×０．１０ｍｍ^３）で、単斜晶系Ｐ１空間群に属する。セルパラメータａ＝５．１７９６０（１０）Å、ｂ＝８．０６６７（２）Å、ｃ＝１２．４０７７（２）Å、α＝９３．１４６（２）°、β＝１０１．２６６（２）°、γ＝９６．１３４（２）°、Ｖ＝５０３．９９３（１８）Å３、Ｚ＝２。計算密度Ｄｃ＝１．４１２ｇ／ｃｍ^３、単位セルにおける電子数Ｆ（０００）＝２２８．０、単位セルの線形吸収係数μ（ＣｕＫα）＝０．９４５ｍｍー１、回折実験温度Ｔ＝１００．００（１０）Ｋ。

実施例５：異なる化学修飾を含むｓｉＲＮＡの配列依存性実験
Ａｂａｓｉｃ修飾はｄｓＲＮＡ配列依存性を有することが知られており、従って、本発明者らは、複数の異なる配列における本開示の化学修飾を試験した。異なる３つの遺伝子（ＡＮＧＰＴＬ３、ＨＢＶ－Ｓ、ＨＢＶ－Ｘ）ｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡ（配列は表４に示す通りである）を使用し、実施例１の化合物（＋）ｈｍｐＮＡ（Ａ）、（－）ｈｍｐＮＡ（Ａ）及び対照としてのＧＮＡ（Ａ）、化合物によりＡＳ鎖５’末端７位（配列は表５に示す通りである）を修飾し、更に親配列とオンターゲット活性及びオフターゲット活性を比較した。

上記表において、大文字Ｇ、Ａ、Ｃ、Ｕは、それぞれ、グアニン、アデニン、シトシン及びウラシルを含むヌクレオチドを表し、小文字ｍは、２’－メトキシ修飾を表し、小文字ｆは、２’－フルオロ修飾を表し、小文字ｓは、当該文字ｓの左右に隣接する２つのヌクレオチド同士がチオホスホジエステル基で連結されていることを示し、以下同様である。

オンターゲット活性実験の結果は表６に示されており、ＧＮＡ（Ａ）は顕著な配列依存性を示し、異なる配列のオンターゲット活性は明らかに相違している。本開示に係る実験化合物は、明らかな配列依存性を示しておらず、一般的な適用性がより強い。

オフターゲット活性の実験結果は表７を参照することができ、本開示の実験化合物は、親配列に比べてｓｉＲＮＡのオフターゲット活性を明らかに低下させることが分かる。

実施例６：リガンドの調製（ＮＡＧ００５２、Ｌ９６）
化合物ＮＡＧ００２４、ＮＡＧ００２６は、天津薬明康徳新薬開発有限公司から購入した。特に説明のない限り、以下の実施例で使用される試薬は何れも市販品である。

化合物ＮＡＧ００５２の合成
出発原料である化合物１は、江蘇倍達医薬科技有限公司から購入した。

化合物２
０℃及び窒素ガス保護で、化合物１（１２．３ｍＬ、１０１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３００ｍＬ）溶液にＮａＨ（１２．２ｇ、３０４ｍｍｏｌ、６０％の純度）を数回に分けて加えた。当該混合物を２０℃で１ｈ撹拌した後、０℃に再度冷却し、次に系に臭化ベンジル（３６．３ｍＬ、３０４ｍｍｏｌ）を１滴ずつ滴下し、そして２０℃で１２ｈ撹拌した。当該反応液をＨ_２Ｏ（１００ｍＬ）でクエンチした後、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、濃縮させて得た残留物はシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離した後、目標化合物２（２０．０ｇ、５１．８ｍｍｏｌ、収率５１％）を得た。
ＬＣＭＳ：ｔ_Ｒ＝２．６１５ａｎｄ２．８２０ｍｉｎｉｎ３０－９０ＡＢ＿７ｍｉｎ＿２２０＆２５４＿Ｓｈｉｍａｄｚｕ．ｌｃｍ（ＸｔｉｍａｔｅＣ１８，３ｕｍ，２．１＊３０ｍｍ），ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝３５１．２［Ｍ＋Ｎａ］^＋。
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ｐｐｍ７．３５－７．１２（ｍ，１０Ｈ），５．０６－４．９５（ｍ，１Ｈ），４．５１－４．３９（ｍ，４Ｈ），４．２４－３．８７（ｍ，２Ｈ），３．５０－３．４０（ｍ，２Ｈ），３．３８－３．２０（ｍ，３Ｈ），２．２０－１．９１（ｍ，２Ｈ）。

化合物３及び化合物４
２０℃及び窒素ガス保護で、化合物２（１３．０ｇ、３３．６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３００ｍＬ）溶液にＴＭＳＣＮ（１３．５ｍＬ、１０１ｍｍｏｌ）を一度に加え、次にＴＭＳＯＴｆ（９．１４ｍＬ、５０．５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）溶液を１滴ずつ加えた。当該反応液を２０℃で１５ｈ撹拌した。反応終了後に飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（８０ｍＬ）で当該系をクエンチし、そしてＤＣＭ（１５０ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機相を飽和食塩水（８０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過及び濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離した後、目標化合物３（３．３０ｇ、９．１８ｍｍｏｌ、収率２７％）及び淡黄色油状液体化合物４（８．５０ｇ、９．１８ｍｍｏｌ、収率７０％）を得た。

化合物３
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ｐｐｍ７．４２－７．２９（ｍ，１０Ｈ），４．８１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６５－４．４９（ｍ，４Ｈ），４．３０－４．２１（ｍ，２Ｈ），３．６５－３．５７（ｍ，１Ｈ），３．５７－３．４９（ｍ，１Ｈ），２．４９－２．４０（ｍ，２Ｈ）。

化合物４
１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ｐｐｍ７．４２－７．２６（ｍ，１０Ｈ），４．９３－４．８７（ｍ，１Ｈ），４．６５－４．４８（ｍ，４Ｈ），４．４３－４．３８（ｍ，１Ｈ），４．２１－４．１７（ｍ，１Ｈ），３．７９－３．７０（ｍ，１Ｈ），３．５４（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），２．４５－２．３７（ｍ，２Ｈ）。

化合物５
０℃及び窒素ガス保護で、化合物４（３．００ｇ、９．２８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を、ＬｉＡｌＨ_４（０．７９ｇ、２０．９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液に滴下し、滴下完了後に系を０℃で１ｈ反応させた。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝３：１）で原料が完全に消失したことをモニタリングした。発泡がなくなるまで、反応液に硫酸ナトリウム十水和物を徐々に加えた。その後、反応液をろ過し、ろ過ケーキをジクロロメタン（６０ｍＬ）で３回洗浄した後、ろ液を収集して回転乾燥させ、目標化合物５（３．００ｇ、収率９０％）を得た。
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ｐｐｍ７．４０－７．１４（ｍ，１０Ｈ），４．５４－４．３８（ｍ，４Ｈ），４．０６－３．９９（ｍ，２Ｈ），３．９１（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４８－３．３７（ｍ，２Ｈ），２．６７－２．５２（ｍ，２Ｈ），２．２１－２．１８（ｍ，１Ｈ），１．７７－１．７３（ｍ，１Ｈ）。

化合物６
窒素ガス保護で、化合物５（３．００ｇ、８．２５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶け、ＴＥＡ（３．４４ｍＬ、２４．７ｍｍｏｌ）及びＣｂｚＣｌ（１．７６ｍＬ、１２．４ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で２ｈ反応させた。ＬＣＭＳで反応が完了したことを示した。反応液にジクロロメタン（３０ｍＬ）及び水（６０ｍＬ）を加えて抽出した。有機相を水（６０ｍＬ×３）で３回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮させて順相カラムで精製し（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１：１）、目標化合物６（２．５ｇ、収率９０％）を得た。
ＬＣＭＳ：ｔ_Ｒ＝０．８１０ｍｉｎｉｎ５－９５ＡＢ＿１ｍｉｎ，ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝４６２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ｐｐｍ７．３９－７．２９（ｍ，１５Ｈ），５．３５（ｓ，１Ｈ），５．１５－５．０１（ｍ，２Ｈ），４．７２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５４－４．４０（ｍ，３Ｈ），４．２６（ｓ，１Ｈ），４．２３－４．１８（ｍ，１Ｈ），４．１１－４．０４（ｍ，１Ｈ），３．５４－３．４１（ｍ，３Ｈ），３．３７－３．２５（ｍ，１Ｈ），２．３４－２．２３（ｍ，１Ｈ），１．８５－１．７９（ｍ，１Ｈ）。

化合物７
窒素ガス保護で、化合物６（２．００ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶け、－７８℃でＢＣｌ_３のＴＨＦ溶液（１Ｍ、２７．３ｍＬ）を加え、１ｈ反応させた。ＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１）で原料が完全に消失したことをモニタリングした。－７８℃でメタノール（２０ｍＬ）を加えて反応液をクエンチし、濃縮させ、順向カラムで精製し（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１）、目標化合物７（２．００ｇ、収率６０％）を得た。
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） δ ｐｐｍ７．４１－７．２３（ｍ，５Ｈ），５．０８（ｓ，２Ｈ），４．２５－４．０７（ｍ，２Ｈ），３．８５－３．７５（ｍ，１Ｈ），３．６３－３．５６（ｍ，１Ｈ），３．５４－３．４８（ｍ，１Ｈ），３．３０－３．２７（ｍ，２Ｈ），２．３４－２．２１（ｍ，１Ｈ），１．７１－１．６４（ｍ，１Ｈ）。

化合物８
窒素ガス保護で、化合物７（０．５０ｇ、１．７８ｍｍｏｌ）をピリジン（５ｍＬ）に溶け、０℃で４Ａ分子ふるい（５００ｍｇ）及びＤＭＴｒＣｌ（０．６６ｍＬ、２．１３ｍｍｏｌ）を加え、その後、２０℃に昇温して１．５ｈ反応させた。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝２：１）で原料が完全に消失したことをモニタリングした。反応液を酢酸エチル（６０ｍＬ）及び水（６０ｍＬ）に加えて抽出し、有機相を水（６０ｍＬ×３）で３回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮させ、順向カラムで精製し（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１：１）、目標化合物８（８００ｍｇ、収率９０％）を得た。
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ｐｐｍ７．４４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．３７－７．２３（ｍ，１１Ｈ），７．２２－７．１５（ｍ，１Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，４Ｈ），５．０９（ｓ，２Ｈ），４．３１－４．１７（ｍ，２Ｈ），４．０２－３．９１（ｍ，１Ｈ），３．８４－３．７３（ｍ，６Ｈ），３．３３（ｓ，１Ｈ），３．２８（ｓ，１Ｈ），３．１９－３．０１（ｍ，２Ｈ），２．３４－２．２５（ｍ，１Ｈ），１．７０－１．６２（ｍ，１Ｈ）。

化合物９
化合物８（８００ｍｇ、１．２３４ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）に溶け、Ｐｄ／Ｃ１０％（８００ｍｇ、７．５１７ｍｍｏｌ）を加え、反応をＨ_２条件（１５Ｐｓｉ）、２０℃で１ｈ反応させた。ＬＣＭＳで反応が既に完了したことを示した。反応液をろ過し、ろ過ケーキをジクロロメタン（１００ｍＬ）及びメタノール（１００ｍＬ）で３回洗浄し、濃縮させ、逆相カラムを経て分離して化合物９（３００ｍｇ、５４％）を得た。
ＬＣＭＳ：ｔ_Ｒ＝２．５８６ｍｉｎｉｎ１０－８０ＣＤ＿３ｍｉｎＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝４５０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

化合物１１
化合物１０（４３５ｍｇ、１．７８０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶け、ＤＩＥＡ（０．４４１ｍＬ、２．６７ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（６７７ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）を加えた後、化合物９（４００ｍｇ、０．８９０ｍｍｏｌ）を更に加え、２０℃で１ｈ反応させた。ＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１）で反応が完成したことをモニタリングした。反応液にジクロロメタン（６０ｍＬ）及び水（６０ｍＬ）を加えて抽出し、有機相を水（６０ｍＬ×３）で３回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮させ、順相カラムで精製し（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝０：１でカラムにかけ、１００％で製品ピークが出た）、目標化合物１１（６００ｍｇ、収率９０％）を得た。
ＬＣＭＳ：ｔ_Ｒ＝２．７４５ｍｉｎｉｎ３０－９０ＣＤ＿３ｍｉｎ，ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝６９８．４［Ｍ＋Ｎａ］^＋。
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） δ ｐｐｍ７．４６－７．３８（ｍ，２Ｈ），７．３５－７．２４（ｍ，６Ｈ），７．２２－７．１６（ｍ，１Ｈ），６．９０－６．７８（ｍ，４Ｈ），４．２９－４．２１（ｍ，２Ｈ），４．０２－３．９５（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．６６－３．６２（ｍ，３Ｈ），３．４１（ｓ，１Ｈ），３．１８－３．０４（ｍ，２Ｈ），２．３６－２．１７（ｍ，５Ｈ），１．７１－１．５０（ｍ，５Ｈ），１．３９－１．２５（ｍ，１４Ｈ）。

化合物１２
化合物１１（６００ｍｇ、０．７９９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３ｍＬ）及びＨ_２Ｏ（１ｍＬ）に溶け、ＬｉＯＨ．Ｈ_２Ｏ（１３４ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で１２ｈ反応させた。ＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１）で反応が完了したことを示した。反応液を回転乾燥させ、水（５ｍＬ）及びメタノール（５ｍＬ）で溶解し、逆相カラムで精製し（Ｈ_２Ｏ：ＣＨ_３ＣＮ＝１：１、約３５％でピークが出た）、目標化合物１２（４６０ｍｇ、収率１００％、リチウム塩）を得た。
ＬＣＭＳ：ｔ_Ｒ＝１．３４６ｍｉｎｉｎ１０－８０ＣＤ＿３ｍｉｎ，ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝６８４．３［Ｍ＋Ｎａ］^＋。
ＨＰＬＣ：ｔ_Ｒ＝１．８７９ｍｉｎｉｎ１０－８０ＣＤ＿６ｍｉｎ。
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） δ ｐｐｍ７．４７－７．３９（ｍ，２Ｈ），７．３５－７．２４（ｍ，６Ｈ），７．２２－７．１５（ｍ，１Ｈ），６．９１－６．７９（ｍ，４Ｈ），４．３１－４．１８（ｍ，２Ｈ），４．０２－３．９５（ｍ，１Ｈ），３．７８（ｓ，６Ｈ），３．４４－３．３３（ｍ，２Ｈ），３．１８－３．０４（ｍ，２Ｈ），２．３５－２．２７（ｍ，１Ｈ），２．２４－２．１０（ｍ，４Ｈ），１．７０－１．５１（ｍ，５Ｈ），１．３１－１．２３（ｍ，１２Ｈ）。

化合物１３
室温環境、及び窒素ガス保護で、化合物ＮＡＧ００２４（２７１ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（２ｍＬ）及び無水ＤＭＦ（４ｍＬ）に溶け、３Ａ分子ふるいを加え、更に化合物１２（１００ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２５ｍｇ、０．１８１ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（３８ｍｇ、０．１８１ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（３９ｍｇ、０．３０２ｍｍｏｌ）を順に加えた。反応液を４５℃で１６ｈ反応させ、ＬＣ－ＭＳで反応が完了したことを示した後、水を加えてクエンチし、ろ過した。ろ液を濃縮させた後、Ｃ１８逆相カラムを経て精製し（Ｈ_２Ｏ／ＭｅＣＮ）、化合物１３（２１０ｍｇ、収率５７％）を得た。

化合物ＮＡＧ００５２
室温環境で、化合物１３（２３０ｍｇ、０．０９４ｍｍｏｌ）をピリジン（５ｍＬ）に溶け、分子ふるいを加え、ＤＭＡＰ（１２ｍｇ、０．２８３ｍｍｏｌ）、コハク酸無水物（２８ｍｇ、０．２８３ｍｍｏｌ）を加えた。窒素ガス保護で、５０℃で１６ｈ撹拌した。ＬＣＭＳで反応完了を検出し、ろ過して回転乾燥させた。Ｃ１８逆相カラムにかけて精製した後、分取ＨＰＬＣで二次精製し、目標化合物ＮＡＧ００５２（１２３ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ、収率５１％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝２５３５．３［Ｍ－１］^－．理論：２５３６．２。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトニトリル－ｄ_３）δ ７．４８－７．４３（ｍ，２Ｈ）、７．３７－７．１２（ｍ，１１Ｈ）、７．００－６．８５（ｍ，１０Ｈ）、６．６６（ｓ，１Ｈ）、５．３１（ｄｄ，Ｊ＝３．４，１．１Ｈｚ，３Ｈ）、５．２０－５．１３（ｍ，１Ｈ）、５．０５（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，３．４Ｈｚ，３Ｈ）、４．５６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，３Ｈ）、４．３０（ｄｄ，Ｊ＝７．７，５．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．１８－３．９３（ｍ，１４Ｈ）、３．７９（ｓ，１０Ｈ）、３．６５（ｑ，Ｊ＝４．７，３．６Ｈｚ，１３Ｈ）、３．５６－３．０７（ｍ，２４Ｈ）、２．５６（ｓ，６Ｈ）、２．３７（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１０Ｈ）、２．１７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，９Ｈ）、２．０２－１．９６（ｍ，２０Ｈ）、１．８８（ｓ，８Ｈ）、１．８２－１．７３（ｍ，２Ｈ）、１．６０（ｄｔ，Ｊ＝１５．０，７．３Ｈｚ，１６Ｈ）、１．２７（ｓ，１３Ｈ）ｓ。
化合物ＮＡＧ００５２は、固相合成により配列に連結され、更にアミン分解された後、ＮＡＧ００５２の構造から一部の官能基が除去されてＮＡＧ００５２’となった。

Ｌ９６の合成
特許出願ＷＯ２０１４０２５８０５Ａ１に記載の方法に従って調製し得た。

実施例７：ｄｓＲＮＡの合成
１．ベクター付き樹脂の自製
カルボン酸基を含有する化合物ＮＡＧ００５２（１５７ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（３ｍＬ）に溶け、基質が完全に溶解した後、無水アセトニトリル（４ｍＬ）、ＤＩＥＡ（０．０３ｍＬ、０．１５４ｍｍｏｌ、２．５ｅｑ）及びＨＢＴＵ（３５ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ、１．５ｅｑ）を順に加えた。反応液を均一に混合した後、大孔質アミノメチル樹脂（４７６ｍｇ、空白担持量０．４１ｍｍｏｌ／ｇ、目標担持量０．１ｍｍｏｌ／ｇ）を更に加えた。反応液をシェーカー（温度：２５℃、回転速度：２００ｒｐｍ）に入れて一晩振とうした。反応液をろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭ、無水アセトニトリルでそれぞれ順に洗浄し、固体を収集し、真空で一晩乾燥した。

前のステップの固体を無水アセトニトリル（５ｍＬ）に分散し、ピリジン（０．１８ｍＬ）、ＤＭＡＰ（３ｍｇ）、ＮＭＩ（０．１２ｍＬ）及びＣａｐＢ１（２．６８ｍＬ）を順に加えた。反応液をシェーカー（温度：２５℃、回転速度：２００ｒｐｍ）に入れて２ｈ振とうした。反応液をろ過し、ろ過ケーキを無水アセトニトリルで洗浄し、固体を収集し、真空で一晩乾燥し、ベクター付き樹脂を得た。測定によって担持量が０．１ｍｍｏｌ／ｇであった。

２．既に樹脂に連結されたＮＡＧ００５２は、当該樹脂を開始として、ヌクレオチド配列順番に従って３’－５’の方向からヌクレオシド単量体に１個ずつ連結された。１つのヌクレオシド単量体との連結には、脱保護、カップリング、キャッピング、酸化又は硫化という４ステップ反応が含まれている。操作は、当該技術分野において一般的であった。
調製されたｄｓＲＮＡは、表８及び表９－１に示されるセンス鎖及びアンチセンス鎖を有した。

上記ｄｓＲＮＡの構造は、以下の通りである：

そのうち、ＴＲＤ００２２１８は参照陽性化合物とした。

実施例８：ｄｓＲＮＡの、体内での標的遺伝子ｍＲＮＡの発現量への阻害
本実験は、異なる構造と複合した本開示のｄｓＲＮＡの、体内での標的遺伝子ｍＲＮＡ発現量への阻害効率を調べた。

雄６週齢～８週齢Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、各群に合計６匹ずつ、各時点で３匹ずつ無作為に群分けし、各群のマウスにＴＲＤ００７２０５、参照陽性ＴＲＤ００２２１８及びＰＢＳをそれぞれ投与した。

全ての動物は、体重によって投与量が算出され、皮下注射で単回投与され、ｄｓＲＮＡの投与用量（リガンドを含まないｓｉＲＮＡの量で）は１ｍｇ／ｋｇ、投与体積は５ｍＬ／ｋｇであった。投与の７日、２８日後に、マウスを屠殺し、肝臓を収集し、ＲＮＡｌａｔｅｒ（ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ社）で保存し、その後、組織ホモジナイザーにより肝組織をホモジネートし、更に組織ＲＮＡ抽出試薬キット（凡知医療科技、ＦＧ０４１２）により取扱説明書に記載された操作ステップに従って肝組織全ＲＮＡを抽出して得た。全ＲＮＡをｃＤＮＡに逆転写し、そしてリアルタイム蛍光定量ＰＣＲ方法により肝組織中のＴＴＲｍＲＮＡの発現量を検出した。当該蛍光定量ＰＣＲ法において、グリセルアルデヒド３－リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）遺伝子を内部基準遺伝子として、ＴＴＲとＧＡＰＤＨに対するＴａｑｍａｎプローブプライマーによりＴＴＲとＧＡＰＤＨのｍＲＮＡ発現量をそれぞれ検出した。

検出プライマーの配列を表１１に示される：

ＴＴＲｍＲＮＡ発現量は、下記の等式によって算出した。
ＴＴＲｍＲＮＡ発現量＝［（試験群ＴＴＲｍＲＮＡ発現量／試験群ＧＡＰＤＨｍＲＮＡ発現量）／（対照群ＴＴＲｍＲＮＡ発現量／対照群ＧＡＰＤＨｍＲＮＡ発現量）］×１００％。

投与の７日、２８日後に、異なる構造と複合したｄｓＲＮＡの、体内での標的遺伝子ｍＲＮＡ発現量への阻害効率はそれぞれ、図１及び図２に示された。図１の結果から分かるように、ＴＲＤ００７２０５は、投与７日後のＴＴＲｍＲＮＡ発現への阻害は、何れも良好な効果を有することを示した。図２から分かるように、投与の２８日後、ＴＲＤ００７２０５による標的遺伝子ｍＲＮＡ発現量への阻害作用は、ＴＲＤ００２２１８より優れた。

実施例９：ｄｓＲＮＡの合成
１．ベクター付き樹脂の自製
具体的な操作は実施例７と同様であった。

２．ＮＡＧ００５２付き樹脂を開始として、ヌクレオチド配列順番に従って３’－５’の方向からヌクレオシド単量体に１個ずつ連結された。１つのヌクレオシド単量体との連結には、脱保護、カップリング、キャッピング、酸化又は硫化という４ステップ反応が含まれている。具体的には、実施例２の合成方法を参照した。

調製されたｄｓＲＮＡは、表１２及び表１４に示されるセンス鎖及びアンチセンス鎖を有した。

注：ＴＲＤ００７９７０、ＴＲＤ００７９７０－１、ＴＪＲ１００２５９、ＴＪＲ１００２６０はＨＢＶ－Ｘを標的とし、
ＴＲＤ００７９９４、ＴＲＤ００７９９５、ＴＲＤ００７９９４－１、ＴＲＤ００７９９５－１は、ＨＢＶ－Ｓを標的とする。

そのうち、（－）ｈｍｐＮＡ（Ａ）、（－）ｈｍｐＮＡ（Ｇ）、（－）ｈｍｐＮＡ（Ｃ）、（－）ｈｍｐＮＡ（Ｕ）の構造は、実施例４を参照した。

ＮＡＧ００５２’の構造は、
である。

実施例１０：ＨＢＶに対するｄｓＲＮＡのオンターゲット活性
陽性対照化合物を表１５に示される。

そのうち、ＡＤ８１８９０はＣＮ２０１９８００５３７８９．８を参照して調製され、Ｌ９６構造は
である。

ＨＥＫ２９３Ａ細胞では、１１個の濃度勾配を使用し、表１４及び１５のｄｓＲＮＡ配列に対して体外分子レベルのシミュレーションとオンターゲット活性スクリーニングを行った。

ＨＢＶ遺伝子でｄｓＲＮＡに対応するオンターゲット配列を構築し、ｐｓｉＣＨＥＣＫ－２プラスミドに挿入した。当該プラスミドには、ウミシイタケルシフェラーゼ遺伝子及びホタルルシフェラーゼ遺伝子が含まれていた。二重レポーター遺伝子システムとして、ｄｓＲＮＡの標的配列はウミシイタケルシフェラーゼ遺伝子の３’ＵＴＲ領域に挿入され、ｄｓＲＮＡの標的配列に対する活性は、ホタルルシフェラーゼでキャリブレーションされたウミシイタケルシフェラーゼの発現状況の検出によって反映可能であり、検出にはＤｕａｌ－ＬｕｃｉｆｅｒａｓｅＲｅｐｏｒｔｅｒＡｓｓａｙＳｙｓｔｅｍ（ｐｒｏｍｅｇａ、Ｅ２９４０）が使用された。

ＨＥＫ２９３Ａ細胞を１０％のウシ胎児血清を含むＤＭＥＭ高グルコース培地に培養し、３７℃、５％のＣＯ_２の条件で培養した。トランスフェクション２４ｈ前、ＨＥＫ２９３Ａ細胞を９６ウェルプレートに接種し、各ウェルに８×１０^３個の細胞、各ウェルに１００μＬ培地の密度で接種した。

取扱説明書に従って、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、１１６６８０１９）により細胞にｄｓＲＮＡ及び対応するプラスミドを共トランスフェクションし、各ウェルに０．２μＬのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００を使用した。プラスミドのトランスフェクション量は、各ウェルに２０ｎｇであった。オンターゲット配列プラスミドについて、ｄｓＲＮＡは、最高濃度点の最終濃度を２０ｎＭとし、３倍勾配希釈で、２０ｎＭ、６．６６６７ｎＭ、２．２２２２ｎＭ、０．７４０７ｎＭ、０．２４６９ｎＭ、０．０８２３ｎＭ、０．０２７４ｎＭ、０．００９１ｎＭ、０．００３０ｎＭ、０．００１０ｎＭ及び０．０００３ｎＭ、合計１１個の濃度点を設定した。トランスフェクションの２４ｈ後に、Ｄｕａｌ－ＬｕｃｉｆｅｒａｓｅＲｅｐｏｒｔｅｒＡｓｓａｙＳｙｓｔｅｍ（ｐｒｏｍｅｇａ、Ｅ２９４０）によりオンターゲットレベルを検出した。

ｐｓｉＣＨＥＣＫ活性スクリーニング実験手順は、具体的には以下の通りである：
ＨＥＫ２９３Ａ細胞系において、ｐｓｉ－ＣＨＥＣＫを行うことにより、ｄｓＲＮＡ配列のオンターゲット活性をスクリーニングした。実験材料及び機器は、表１６及び１７に詳細に示された。

Ｐｓｉ－ＣＨＥＣＫプラスミドは、生工生物工程（上海）股フン有限公司から購入した。

ｐｓｉＣＨＥＣＫ実験手順：
（一）細胞の播種
１．実験の準備：
１．１ＨＥＫ２９３Ａ細胞の準備：
南京科佰から購入し、足場依存性細胞消化が完了した後に計数する必要があり、細胞活性率が９５％以上であれば使用可能である。

１．２ＤＭＥＭ完全培地（ＤＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ）を４℃で保存し、実験前に平衡を室温に取り出した。

１．３９６ウェル細胞プレート。

２．細胞の播種
トランスフェクション１８ｈ前、ＨＥＫ２９３Ａ細胞を９６ウェルプレートに接種し、各ウェルに８×１０^３個の細胞、各ウェルに１００μＬ培地の密度で接種し、
２．１培地を３７℃の水浴ポットに入れて２０ｍｉｎインキュベートして使用に備え、
２．２均一な細胞懸濁液１００μＬを吸引し、細胞計数染料５μＬと混合し、１ｍｉｎ静止染色し、懸濁液１５μＬを吸引して細胞計数プレートに注入し、生細胞量（緑色）を計算し、細胞生存率は９８．７％であり、
２．３細胞計数結果に応じて、適当な体積の培地を加え、細胞量が８×１０^３細胞／ウェルとなるように、１００μＬを９６ウェルプレートに分取し、３７℃、５％のＣＯ_２インキュベーターに入れて培養した。

（二）細胞トランスフェクション実験
１．実験の準備：
１．１ｄｓＲＮＡ試料及びプラスミドの調製：ｄｓＲＮＡ試料を２０μＭに定量し、ｐｓｉ－ＣＨＥＣＫプラスミドをその濃度を測定し、－２０℃で保存して使用に備え、使用前に短時間の遠心分離を必要とし、
１．２トランスフェクション試薬Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００を４℃で保存し、
１．３ＰＣＲ９６ウェルプレートチューブ及び８連ＰＣＲチューブ、
１．４Ｏｐｔｉ－ＭＥＭ培地。

２．細胞トランスフェクション実験
２．１トランスフェクション前に、Ｏｐｔｉ－ＭＥＭ培地を予熱し、Ｏｐｔｉ－ＭＥＭ培地と細胞プレートで交換し、８０μＬの培地／ウェルとした。

２．２トランスフェクション複合体を調製する：各濃度につき２つの平行ウェルを設け、トランスフェクション複合体の具体的な調製量は表１８に示され、
トランスフェクション複合体成分：

調製したプラスミドを対応する８連チューブに２２μＬ／チューブを分注し、ＴｕｂｅＡと命名し、
２．３液置換：ウェル中の１０％ＦＢＳ含有のＨ－ＤＭＥＭ完全培地を吸引除去し、８０μＬのＯｐｔｉ－ＭＥＭに交換し、飢餓処理を１．５ｈ行った。

２．４希釈ｄｓＲＮＡ：ｄｓＲＮＡを－２０℃から出して解凍し、均一に混合し、表１９に従って異なる実験の必要に応じて異なる濃度に希釈し、作動液として使用に備え、使用する直前に調製した。

２．５希釈されたｄｓＲＮＡを、対応するＴｕｂｅＡの８連チューブに２．２μＬ／チューブで添加し、使用する直前に調製し、
２．６Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００Ｍｉｘの製剤：Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００をＯｐｔｉ－ＭＥＭで希釈し、５ｍｉｎ静置し、ＬｉｐｏＭｉｘの具体的な調製量は表１９に示され、
２．７続いて調製されたＬｉｐｏＭｉｘをＴｕｂｅＡに対応する８連チューブに分注し、２２μＬ／チューブでピペッティングして均一に混合した後（気泡を発生させず）、室温で２０ｍｉｎインキュベートした。

２．８上記ＴｕｂｅＡ混合物を、２０μＬ／ウェルで、各ウェルの細胞に入れ、元の８０μＬのＯｐｔｉ－ＭＥＭを加えて最終容積が１００μＬであった。４ｈインキュベーターで培養した後、各ウェルに２０％ＦＢＳ含有のＨ－ＤＭＥＭ培地１００μＬを追加した。

２．９３７℃、ＣＯ_２インキュベーターで２４ｈ培養した。

（三）Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）ＬｕｃｉｆｅｒａｓｅＡｓｓａｙＳｙｓｔｅｍ検出
１．実験の準備：
１．１Ｄｕａｌｌｕｃｉｆｅｒａｓｅｒｅｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅａｓｓａｙｋｉｔ（ｐｒｏｍｅｇａ、ｃａｔ．Ｅ２９４０）成分及び調製方法：Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）ＬｕｃｉｆｅｒａｓｅＢｕｆｆｅｒ及びｖｉａｌＤｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）ＬｕｃｉｆｅｒａｓｅＳｕｂｓｔｒａｔｅ（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）を予備混合し、次いで、１５ｍＬの遠心分離管に、各管に７．５ｍＬで分取した。Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）Ｓｔｏｐ＆Ｇｌｏ（登録商標）Ｂｕｆｆｅｒは、各管に１２ｍＬに事前に分注を行った。試験前に事前に混合したＤｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅを再溶解し、室温に平衡化した後、ＤＭＥＭ７．５ｍＬを各管に添加して調製し、使用する直前に調製した。Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）Ｓｔｏｐ＆Ｇｌｏ（登録商標）Ｂｕｆｆｅｒを再溶解し、室温に平衡化した後、Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）Ｓｔｏｐ＆Ｇｌｏ（登録商標）Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ１００：１で配合し、使用する直前に調製した。

２．シグナル採取
２．１吸引：９６ウェル培養プレートから元の培地を吸引し、
２．２基質添加（Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）：各ウェルに１５０μＬのＬＡＲＩＩ基質を添加し、シェーカーで１０ｍｉｎ振とうし、
２．３ピペッティング：基質（Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）ＬｕｃｉｆｅｒａｓｅＭｉｘ）１２０μＬを取り、９６ウェルプレートに移し、Ｆｉｒｅｆｌｙ化学発光値を読み取り、
２．４基質添加（Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）Ｓｔｏｐ＆Ｇｌｏ）：各ウェルに６０μＬのＤｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）Ｓｔｏｐ＆Ｇｌｏ基質を更に添加し、シェーカーで１０ｍｉｎ振とうして、Ｒｅｎｉｌｌａ化学発光値を読み取り、
２．５相対値Ｒａｔｉｏ＝Ｒｅｎ／Ｆｉｒ（ウミシイタケ／ホタルの比）を計算し、
２．６阻害率１－（Ｒａｔｉｏ＋ｄｓＲＮＡ／レポーター遺伝子のみ）×１００％＝阻害率（％）を計算し、
本開示において、余剰活性％（ｍＲＮＡ余剰発現量％又はｍＲＮＡ余剰発現割合ともいう）＝１００％－阻害率（％）である。

２．７Ｇｒａｐｈｐａｄｐｒｉｓｍ５を用いてをプロットした。

結果は表２０に示される通りであった。

以上の結果は、対照化合物ＡＤ８１８９０を参照して、ＴＲＤ００７９７０、ＴＲＤ００７９９４、ＴＲＤ００７９９５がｐｓｉＣＨＥＣＫシステムにおいてＨＢＶ遺伝子に対して高レベルのオンターゲット阻害活性を有することを示した。

別のバッチの結果は表２１に示される。

以上の結果は、対照ＡＤ８１８９０を参照して、本開示のＴＲＤ００７９７０、ＴＪＲ１００２５９、ＴＪＲ１００２６０がｐｓｉＣＨＥＣＫ系においてＨＢＶ遺伝子に対してより高レベルのオンターゲット阻害活性を有することを示した。

実施例１１：ＨｅｐＧ２．２．１５細胞を用いたｄｓＲＮＡの体外抗ＨＢＶ活性を評価する
ＨｅｐＧ２．２．１５細胞では、８個の濃度勾配を使用し、ｄｓＲＮＡに対して体外抗ＨＢＶ活性評価を行った。

１日目にＨｅｐＧ２．２．１５細胞を９６ウェルプレートに接種し、各ウェルに２万個の細胞であった。細胞を接種すると共に、ＲＮＡｉＭａｘにより異なる濃度のｄｓＲＮＡをＨｅｐＧ２．２．１５細胞に移転し、４日目に細胞培養上清を収集し、ＥＬＩＳＡによりＨＢｓＡｇを検出した（残りの上清は凍結保存して使用に備えた）。最後に細胞を収集し、細胞内ＲＮＡを抽出し、ＲＴ－ＰＣＲにより全ＨＢＶＲＮＡ（３．５ｋｂ＋２．４ｋｂ＋２．１ｋｂ＋０．７ｋｂのＲＮＡを含む）及び３．５ｋｂのＨＢＶＲＮＡ（ｐｇＲＮＡ＋ｐｒｅＣｏｒｅＲＮＡを含む）をそれぞれ検出すると共に、ＧＡＰＤＨ遺伝子ＲＮＡを内部基準として検出した。測定待ちの化合物は８個の濃度点であり、平行して２つの平行ウェルを測定した。培養液においてＤＭＳＯの最終濃度は０．５％であった。

抑制百分率の計算式は以下の通りである。

％ＨＢｓＡｇ抑制率＝（１ー試料中のＨＢｓＡｇ含有量／ＤＭＳＯ対照群中のＨＢｓＡｇ含有量）×１００
％ＨＢＶＲＮＡ抑制率＝（１ー試料中のＨＢＶのＲＮＡ含有量／ＤＭＳＯ対照群中のＨＢＶのＲＮＡ含有量）×１００
％細胞生存性＝（試料吸光値－培養液対照の吸光値）／（ＤＭＳＯ対照の吸光値－培養液対照の吸光値）×１００。

ＧｒａｐｈｐａｄＰｒｉｓｍソフトフェア（ｆｏｕｒｐａｒａｍｅｔｅｒｌｏｇｉｓｔｉｃｅｑｕａｔｉｏｎｓ）を使用してＥＣ_５０値を計算した。

結果は表２２に示され、対照ＡＤ８１８９０を参照し、総合抗ウイルス活性検出指標、試験ＴＲＤ００７９７０、ＴＲＤ００７９９４及びＴＲＤ００７９９５はＨｅｐＧ２．２．１５細胞において優れた抗ウイルス活性を示した。

実施例１２：ＡＳ鎖９位と１０位の異なる修飾の評価
１．固相ベクターに連結されたアミノガラクトース化合物１－ｔの合成：
。

合成経路は下記の通りである。

１）化合物１－ｇの合成経路
２）化合物１－ｈの合成経路
３）化合物１－ｌの合成経路
４）化合物１－ｑの合成
５）固相ベクターに連結されたアミノガラクトース化合物１－ｔの合成
。

ステップ１
原料１－ａ（２９７ｇ、７６３ｍｍｏｌ）と原料１－ｂ（１６０ｇ、６３６ｍｍｏｌ）を９６０ｍＬのＤＣＥに溶け、１５℃の条件下で、Ｓｃ（ＯＴｆ）_３（１５．６ｇ、３１．８ｍｍｏｌ）を加え、その後反応温度を８５℃に昇温し、２ｈ撹拌しながら反応させ、反応終了後に１．５Ｌの飽和ＮａＨＣＯ_３を加えて反応を中止し、有機相を分離し、更に１．５Ｌの飽和食塩水で洗浄し、有機相を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過した溶液を減圧下で蒸留した後にシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し（石油エーテル：酢酸エチル５：１～０：１）、標的生成物１－ｃ（３２８ｇ、５４４ｍｍｏｌ、収率が８５．５％、純度が９６．４％）を得た。
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．４４－７．２９（ｍ，５Ｈ），５．８３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．４０－５．２３（ｍ，２Ｈ），５．１８－５．０６（ｍ，２Ｈ），４．８６（ｓ，１Ｈ），４．６６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２１－４．０７（ｍ，２Ｈ），４．０４－３．７７（ｍ，３Ｈ），３．５１－３．４５（ｍ，１Ｈ），３．３１－３．１１（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．０３－１．９９（ｍ，３Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），１．６４－１．４６（ｍ，４Ｈ），１．４３－１．２９（ｍ，４Ｈ）。
ＭＳ、Ｃ_２８Ｈ_４０Ｎ_２Ｏ^１１、実測Ｍ^＋５８１．３。

ステップ２
ステップ１で得られた化合物を平行して２部に分けて行った：それぞれの反応には、化合物１－ｃ（７２．０ｇ、１２４ｍｍｏｌ）を４３２ｍＬのＴＨＦに加え、アルゴンガス保護下でＰｄ／Ｃ（２０．０ｇ、１０％の純度）を加え、更にＴＦＡ（１４．１ｇ、１２４ｍｍｏｌ、９．１８ｍＬ）を加え、反応溶液に水素ガスを通し、ガス圧を３０Ｐｓｉのままにして、３０℃に加熱して１６ｈ撹拌しながら反応させることが含まれた。反応が完了した後、平行して行った２つの反応を合わせ、ろ過し、減圧下でろ液を濃縮した。残留物をジクロロメタンで希釈して繰り返して減圧下で濃縮し、３回繰り返した。減圧下で吸引乾燥させた後、目標化合物１－ｄ（１３９ｇ）を得た。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ ７．８５（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｓ，３Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｄｄ，Ｊ＝２．８，１０．８Ｈｚ，１Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．０６－３．９８（ｍ，３Ｈ），３．９３－３．８２（ｍ，１Ｈ），３．７３－３．６８（ｍ，１Ｈ），３．６３－３．５６（ｍ，１Ｈ），３．４３－３．３８（ｍ，１Ｈ），２．８２－２．７１（ｍ，２Ｈ），２．１３－２．０９（ｍ，３Ｈ），２．０１－１．９７（ｍ，３Ｈ），１．９１－１．８７（ｍ，３Ｈ），１．７７（ｓ，３Ｈ），１．７６－１．７３（ｍ，１Ｈ），１．５２－１．４４（ｍ，４Ｈ），１．２８（ｓ，４Ｈ）。

ステップ３
化合物１－ｄ（１３９ｇ、２４７ｍｍｏｌ）と化合物１－ｅ（７５．３ｇ、２２３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ溶液（８３４ｍＬ）に加え、０℃で更にＤＩＰＥＡ（４１．６ｇ、３２２ｍｍｏｌ、５６．１ｍＬ）、ＨＯＢｔ（３６．８ｇ、２７２ｍｍｏｌ）とＥＤＣＩ（５２．２ｇ、２７２ｍｍｏｌ）を加え、１５℃のままにして１６ｈ撹拌しながら反応させ、反応が完了した後、反応液をジクロロメタン（４００ｍＬ）で希釈し、その後飽和塩化アンモニウム溶液（１Ｌ）、飽和ＮａＨＣＯ_３（１．００Ｌ）、飽和食塩水で順に洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した後に減圧下で溶剤を蒸留して除去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１～０：１）、目標化合物１－ｆ（１０８ｇ、収率が５６．８％）を得た。
^１ＨＮＭＲ（４０（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．８９－７．７８（ｍ，２Ｈ），７．４１－７．２７（ｍ，６Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．０８－４．９２（ｍ，３Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０７－３．９９（ｍ，３Ｈ），３．９７－３．８１（ｍ，２Ｈ），３．７５－３．６４（ｍ，１Ｈ），３．４２－３．３７（ｍ，１Ｈ），３．１３－２．９３（ｍ，２Ｈ），２．２０（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），１．９９（ｓ，３Ｈ），１．８９（ｓ，３Ｈ），１．８７－１．７９（ｍ，１Ｈ），１．７６（ｓ，３Ｈ），１．７４－１．６４（ｍ，１Ｈ），１．４８－１．４１（ｍ，２Ｈ），１．３８（ｓ，１２Ｈ），１．２９－１．２０（ｍ，４Ｈ），１．１９－１．１４（ｍ，１Ｈ）。
ＭＳ、Ｃ_３７Ｈ_５５Ｎ_３Ｏ_１４、実測値Ｍ^＋７６６．４。

ステップ４
上記得られた化合物１－ｆを平行して２部に分けて行った：それぞれの反応には、化合物６（４７．０ｇ、６１．３ｍｍｏｌ）を２８０ｍＬのＴＨＦに加え、アルゴンガス保護下でＰｄ／Ｃ（１５．０ｇ、１０％の純度）を加え、更にＴＦＡ（７．００ｇ、６１．３ｍｍｏｌ、４．５４ｍＬ）を加え、反応溶液に水素ガスを通し、ガス圧を３０Ｐｓｉのままにして、３０℃に加熱して１６ｈ撹拌しながら反応させることが含まれた。反応が完了した後、平行して行った２つの反応を合わせ、ろ過し、減圧下でろ液を濃縮した。残留物をジクロロメタンで希釈して繰り返して減圧下で濃縮し、３回繰り返した。減圧下で吸引乾燥させた後、目標化合物１－ｇ（９４．０ｇ、粗製品）を得た。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ８．３８（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，３Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），４．９６（ｄｄ，Ｊ＝３．６，１１．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０６－３．９８（ｍ，３Ｈ），３．９２－３．８２（ｍ，１Ｈ），３．７５－３．６７（ｍ，２Ｈ），３．６０（ｓ，１Ｈ），３．４３－３．３７（ｍ，１Ｈ），３．１８－３．０４（ｍ，２Ｈ），２．３０－２．２４（ｍ，２Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），２．００（ｓ，３Ｈ），１．９５－１．９０（ｍ，２Ｈ），１．８９（ｓ，３Ｈ），１．７８－１．７５（ｍ，３Ｈ），１．４９－１．４１（ｍ，３Ｈ），１．４０（ｓ，９Ｈ），１．２６（ｓ，４Ｈ）。

ステップ５
上記得られた化合物１－ｆを平行して２部に分けて行った：それぞれの反応には、化合物１－ｆ（４６．０ｇ、６０ｍｍｏｌ）をＨＣｌ－ＥｔＯＡｃ（２．００Ｍ、２７６ｍＬ）に加え、１５℃の条件下で１６ｈ撹拌しながら反応させることが含まれた。反応完了後に２つの反応溶液を合わせ、減圧下で蒸留して濃縮し、残留物をジクロロメタンで希釈して繰り返して減圧下で濃縮し、３回繰り返した。減圧下で吸引乾燥させた後、目標化合物１－ｈ（９１．０ｇ、粗製品）を得た。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ ７．９１－７．８０（ｍ，２Ｈ），７．４２－７．２６（ｍ，６Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．０７－４．９２（ｍ，４Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０６－３．９８（ｍ，３Ｈ），３．９８－３．８２（ｍ，３Ｈ），３．７３－３．６５（ｍ，１Ｈ），３．４４－３．３５（ｍ，１Ｈ），３．１２－２．９４（ｍ，２Ｈ），２．２２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），２．０１－１．９７（ｍ，４Ｈ），１．９４－１．９０（ｍ，１Ｈ），１．８９（ｓ，３Ｈ），１．８７－１．７９（ｍ，２Ｈ），１．７６（ｓ，３Ｈ），１．７４－１．６７（ｍ，１Ｈ），１．４９－１．４０（ｍ，２Ｈ），１．４０－１．３２（ｍ，２Ｈ），１．２４（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，４Ｈ），１．１９－１．１３（ｍ，１Ｈ）。
ＭＳ、Ｃ_３３Ｈ_４７Ｎ_３Ｏ_１４、実測Ｍ^＋７１０．３。

ステップ６
平行して２つの反応を行った：それぞれの反応には、化合物１－ｇ（４５．０ｇ、６０．３ｍｍｏｌ）と化合物１－ｈ（３８．５ｇ、５４．３ｍｍｏｌ）を２７０ｍＬのＤＭＦに加え、０℃で更にＤＩＰＥＡ（１０．１ｇ、７８．４ｍｍｏｌ、１３．６ｍＬ）を加え、更にＨＯＢｔ（８．９７ｇ、６６．３ｍｍｏｌ）とＥＤＣＩ（１２．７ｇ、６６．３ｍｍｏｌ）を加えたことが含まれた。１５℃の条件下で１６ｈ撹拌しながら反応させた。反応完了後に２つの反応溶液を合わせ、３００ｍＬのＤＣＭを加えて希釈し、順に飽和塩化アンモニウム（８００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ_３（８００ｍＬ）と飽和食塩水（８００ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥した。ろ過した後、加圧下で蒸発して濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１～０：１）、目標化合物１－ｉ（６６．０ｇ、４７．４ｍｍｏｌ、収率が３９．３％、純度が９５．１％）を得た。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．９６－７．７８（ｍ，５Ｈ），７．４１－７．２５（ｍ，６Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，２Ｈ），５．０５－４．９２（ｍ，４Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．２２－４．１２（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｓ，６Ｈ），３．９４－３．８０（ｍ，３Ｈ），３．７４－３．６４（ｍ，２Ｈ），３．４５－３．３５（ｍ，２Ｈ），３．１１－２．９２（ｍ，４Ｈ），２．２０－２．１２（ｍ，４Ｈ），２．１０（ｓ，６Ｈ），１．９９（ｓ，６Ｈ），１．８９（ｓ，６Ｈ），１．８２－１．７９（ｍ，２Ｈ），１．７６（ｓ，６Ｈ），１．７４－１．６３（ｍ，２Ｈ），１．４４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，４Ｈ），１．３７（ｓ，１２Ｈ），１．２４（ｓ，９Ｈ）。
ＭＳ：Ｃ_６２Ｈ_９４Ｎ_６Ｏ_２５、実測値ｍ／ｚ１３２３．８。

ステップ７
１１個の反応に分けて行った：それぞれの反応に化合物１－ｉ（５．００ｇ、３．７８ｍｍｏｌ）とトルエン（３００ｍＬ）を加え、シリカゲル（４５．０ｇ）を加えた。１００℃で４０ｈ撹拌しながら反応させ、反応完了後に１１個の反応混合物を合わせた。減圧下で溶剤を蒸留して除去した後、残留物にイソプロパノール及びジクロロメタンを加え、２０ｍｉｎ撹拌した。ろ過して不溶物を除去し、生成物が溶出されないまでイソプロパノールでろ過ケーキを洗浄し、得られた溶液から溶剤を除去して吸引乾燥した後に目標化合物１－ｊ（４３．２ｇ、３４．０ｍｍｏｌ、収率が８２．０％）を得た。
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ８．０１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．９３－７．７９（ｍ，２Ｈ），７．３９－７．２７（ｍ，３Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．０６－４．９１（ｍ，２Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０７－３．９７（ｍ，３Ｈ），３．９４－３．８２（ｍ，２Ｈ），３．７３－３．６５（ｍ，１Ｈ），３．４５－３．３６（ｍ，２Ｈ），３．１０－２．９４（ｍ，２Ｈ），２．１５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），１．９９（ｓ，３Ｈ），１．８９（ｓ，３Ｈ），１．８６－１．７９（ｍ，１Ｈ），１．７７（ｓ，３Ｈ），１．７４－１．６５（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｓ，２Ｈ），１．３７（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），１．２４（ｓ，４Ｈ）。
ＭＳ：Ｃ_５８Ｈ_８６Ｎ_６Ｏ_２５、実測ｍ／ｚ＝１２６７．８。

ステップ８
このステップは平行して２つの反応に分けて行った：それぞれの反応には、化合物１－ｄ（１１．８ｇ、２１．０ｍｍｏｌ）と化合物１－ｊ（２１．３ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）を７０ｍＬのＤＭＦに加え、０℃で更にＤＩＰＥＡ（３．５４ｇ、２７．３ｍｍｏｌ、４．７７ｍＬ）を加え、更にＨＯＢｔ（３．１３ｇ、２３．１ｍｍｏｌ）とＥＤＣＩ（４．４４ｇ、２３．１ｍｍｏｌ）を加えたことが含まれた。１５℃の条件下で１６ｈ撹拌しながら反応させた。反応完了後に２つの反応溶液を合わせ、５００ｍＬのＤＣＭを加えて希釈し、順に飽和塩化アンモニウム（１．５Ｌ）、飽和ＮａＨＣＯ_３（１．５ｍＬ）と飽和食塩水（１．５ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥した。ろ過し後、加圧下で蒸発して濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し（ジクロロメタン：メタノール＝５０：１～１０：１）、目標化合物１－ｋ（５４．０ｇ、３１．８ｍｍｏｌ、収率が７５．６％）を得た。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．９１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８７－７．７８（ｍ，５Ｈ），７．７３（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４２－７．２４（ｍ，６Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，３Ｈ），５．０６－４．９２（ｍ，５Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，３Ｈ），４．１９－４．０９（ｍ，２Ｈ），４．０７－３．９７（ｍ，１０Ｈ），３．９４－３．８０（ｍ，４Ｈ），３．７６－３．６４（ｍ，３Ｈ），３．４２－３．３７（ｍ，４Ｈ），３．０８－２．９４（ｍ，６Ｈ），２．２０－２．１２（ｍ，２Ｈ），２．１０（ｓ，９Ｈ），２．０８－２．０１（ｍ，２Ｈ），１．９９（ｓ，９Ｈ），１．８９（ｓ，９Ｈ），１．８７－１．７９（ｍ，２Ｈ），１．７７（ｓ，９Ｈ），１．７４－１．６３（ｍ，２Ｈ），１．４４（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，６Ｈ），１．４０－１．３１（ｍ，６Ｈ），１．２４（ｓ，１３Ｈ）。
ＭＳ：Ｃ_７８Ｈ_１１８Ｎ_８Ｏ_３３、実測値ｍ／ｚ＝１６９６．１。

ステップ９
このステップは平行して３個の反応に分けて行った：それぞれの反応には、化合物１－ｋ（１７．０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（１００ｍＬ）を加え、アルゴンガス保護下でＰｄ／Ｃ（５．０ｇ、１０％の純度）を加え、更にＴＦＡ（１．１４ｇ、１０．０ｍｍｏｌ、７４２μＬ）を加え、反応溶液に水素ガスを通し、ガス圧を１５Ｐｓｉのままにして、３０℃に加熱して４ｈ撹拌しながら反応させた。反応が完了した後、平行して行った３つの反応を合わせ、ろ過し、減圧下でろ液を濃縮した。残留物をジクロロメタンで希釈して繰り返して減圧下で濃縮し、３回繰り返した。残留物を分取液体クロマトグラフィー（Ｃ１８、移動相Ａ：０．１％ＴＦＡ－水、移動相Ｂ：１０％～４０％のＣＡＮ、２０ｍｉｎ）により精製して目標化合物１－ｌ（１７．３ｇ、１０．２ｍｍｏｌ、収率が３４．０％）を得た。
^１ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ８．４５（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，３Ｈ），７．９７（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．９０－７．７７（ｍ，４Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，３Ｈ），４．９６（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１１．６Ｈｚ，３Ｈ），４．４７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，３Ｈ），４．２０－４．１０（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｓ，８Ｈ），３．８７（ｑ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，３Ｈ），３．７５－３．６１（ｍ，４Ｈ），３．４６－３．３４（ｍ，３Ｈ），３．２１－２．９３（ｍ，６Ｈ），２．２１（ｓ，２Ｈ），２．１４－２．０２（ｍ，１１Ｈ），１．９９（ｓ，９Ｈ），１．９６－１．８２（ｍ，１２Ｈ），１．８０－１．６５（ｍ，１０Ｈ），１．４４（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，８Ｈ），１．３６（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ），１．３０－１．１７（ｍ，１２Ｈ）
ＭＳ：Ｃ_７０Ｈ_１１２Ｎ_８Ｏ_３１、実測値ｍ／２ｚ＝７８１．８。

ステップ１０
化合物１－ｍ（２ｇ、１２．６４ｍｍｏｌ）をピリジン（１０ｍＬ）に溶け、室温下でＤＭＴｒＣｌ（４．７１ｇ、１３．９０ｍｍｏｌ）のピリジン（１０ｍＬ）溶液を滴下し、室温下で５時間撹拌しながら反応させ、反応が完了した後、メタノールでクエンチし、減圧下で濃縮して粗製品を得て、シリカゲルにより精製し（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１で溶離した）、生成物溶離液を収集し、減圧下で溶剤を蒸発乾燥させて４ｇの化合物１－ｎを得た。
ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_２９Ｈ_３２Ｏ_５、［Ｍ＋Ｈ］^＋実測：４６１．３。

ステップ１１
化合物１－ｎ（２ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ、１．４３ｍＬ、８．６８ｍｍｏｌ）とＨＡＴＵ（２．４７ｇ、６．５１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶け、室温下で化合物１－ｏのＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を加え、室温下で８時間撹拌しながら当該反応を行った。反応が完了した後、水を加えてクエンチし、水相を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機相をまず水で洗浄し、更に飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄してから、減圧下で溶剤を蒸発乾燥させ、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃｏｌｕｍｎ：ＢｏｓｔｏｎＧｒｅｅｎＯＤＳ１５０ｍｍ＊３０ｍｍ＊５μｍ、条件：２５％～８０％（Ａ：水０．０７５％のＮＨ_３ ^．Ｈ_２Ｏ、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：５５ｍＬ／ｍｉｎ）を経て、凍結乾燥した後に２．４ｇの化合物１－ｐを得た。
ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_３３Ｈ_３９ＮＯ_７、［Ｍ＋Ｈ］^＋実測：５６２．４。

ステップ１２
化合物１－ｐ（２．４ｇ、４．２７ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのメタノールと水（２：１）の混合溶液に溶け、室温下でＬｉＯＨ（０．３６ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）を加えて一晩撹拌した。反応が完了した後に減圧下で溶剤を蒸発乾燥させ、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃｏｌｕｍｎ：ＢｏｓｔｏｎＧｒｅｅｎＯＤＳ１５０ｍｍ＊３０ｍｍ＊５μｍ、条件：２５％～７５％（Ａ：水０．０７５％のＮＨ_３ ^．Ｈ_２Ｏ、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：５５ｍＬ／ｍｉｎ）を経て、凍結乾燥した後に２ｇの化合物１－ｑを得た。
ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_３２Ｈ_３７ＮＯ_７、［Ｍ＋Ｈ］^＋実測：５４８．６。

ステップ１３
化合物１－ｑ（０．３７ｇ、０．６９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０．１９ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）とＨＡＴＵ（０．３２ｇ、０．８６ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＭＦに溶け、室温下で化合物１－ｌ（０．９ｇ、０．６９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を加え、室温下で一晩撹拌した。反応が完了した後、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で反応液を希釈し、そして順に飽和ＮａＨＣＯ_３（２０ｍＬ）と飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過した後に減圧下で濃縮した。逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃｏｌｕｍｎ：ＢｏｓｔｏｎＧｒｅｅｎＯＤＳ１５０ｍｍ＊３０ｍｍ＊５μｍ、条件：２５％～６５％（Ａ：水０．０７５％のＮＨ_３ ^．Ｈ_２Ｏ、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：４５ｍＬ／ｍｉｎ）により精製し、凍結乾燥した後に０．５ｇの化合物１－ｒを得た。
ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_１０２Ｈ_１４７Ｎ_９Ｏ_３７、［Ｍ－Ｈ］^＋実測：２０８８．５。

ステップ１４
化合物１－ｒ（３００ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）とコハク酸無水物（２８．７０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフランに溶け、反応液にＤＭＡＰ（３．５０ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）を加えて４０℃で一晩撹拌した。反応が完了した後、反応が完了した後、メタノール（１８．８ｍｇ）を加え、１０ｍｉｎ撹拌しながら反応させ、その後、反応液はジクロロメタン（３ｍＬ）で反応液を希釈し、且つ飽和ＮａＨＣＯ_３（５ｍＬ）で２回洗浄した。有機相を減圧下で乾燥になるまで濃縮し、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃｏｌｕｍｎ：ＢｏｓｔｏｎＧｒｅｅｎＯＤＳ１５０ｍｍ＊３０ｍｍ＊５μｍ、条件：２５％～６５％（Ａ：水０．０７５％のＮＨ_３ ^．Ｈ_２Ｏ、Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）、流速：３５ｍＬ／ｍｉｎ）により精製し、凍結乾燥した後に１４０ｍｇの化合物１－ｓを得た。
ＭＳｍ／ｚ：Ｃ_１０６Ｈ_１５１Ｎ_９Ｏ_４０、［Ｍ－Ｈ］^＋実測：２１８９．４。

ステップ１５
前のステップで得られた化合物１－ｒ（１４０ｍｇ、６４μｍｍｏｌ）をアセトニトリル（５ｍＬ）に加え、更にＨＢＴＵ（４８．７ｍｇ、１２８μｍｏｌ）を加え、表面がアミノ基で修飾された固相支持体（ＣＰＧ－ＮＨ２、２．３ｇ）を加え、ＤＩＥＡ（４１．５ｍｇ、３２０μｍｏｌ、５５μＬ）を加え、３０℃のままにして１６ｈ振とうしながら反応させた。反応が完了した後、ろ過し、また順にメタノール（８ｍＬ×４）、ジクロロメタン（８ｍＬ×４）で洗浄した。固体をピリジン：酢酸無水物（ｖ：ｖ＝４：１、１０．０ｍＬ）に加え続け、引き続き３０℃のままにして１６ｈ振とうしながら反応させた。反応が完了した後、ろ過し、また順にメタノール（８ｍＬ×４）、ジクロロメタン（８ｍＬ×４）で洗浄した。固相ベクターに連結された化合物１－ｔを２．１ｇ得た。

２．ｄｓＲＮＡの合成
表２３におけるｄｓＲＮＡはホスホロアミダイト固相合成法により合成した。

３．試験
この実験は、本開示の異なる部位２’－フルオロで修飾されたｄｓＲＮＡの体内での標的遺伝子ｍＲＮＡ発現量への阻害効率を調べた。雄の６週齢～８週齢のＣ５７ＢＬ／６マウスを無作為に群分け、１群あたり合計６匹で、各時点で３匹ずつであり、各群のマウスにそれぞれ試験試料（２個、ＴＲＤ００７０４７とＴＲＤ００６８７０）、比較試料（ＴＲＤ００２２１８）及びＰＢＳを投与した。全ての動物は、体重によって投与量が算出され、皮下注射で単回投与され、ｄｓＲＮＡの投与用量（リガンドを含まないｓｉＲＮＡの量で）は１ｍｇ／ｋｇ、投与体積は５ｍＬ／ｋｇであった。投与の７日後に、マウスを屠殺し、肝臓を収集し、ＲＮＡｌａｔｅｒ（ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ社）で保存し、その後、組織ホモジナイザーにより肝組織をホモジネートし、更に組織ＲＮＡ抽出試薬キット（凡知医療科技、ＦＧ０４１２）により取扱説明書に記載された操作ステップに従って肝組織全ＲＮＡを抽出して得た。全ＲＮＡをｃＤＮＡに逆転写し、そしてリアルタイム蛍光定量ＰＣＲ方法により肝組織中のＴＴＲｍＲＮＡの発現量を検出した。当該蛍光定量ＰＣＲ法において、グリセルアルデヒド３－リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）遺伝子を内部基準遺伝子として、ＴＴＲとＧＡＰＤＨに対するＴａｑｍａｎプローブプライマーによりＴＴＲとＧＡＰＤＨのｍＲＮＡ発現量をそれぞれ検出した。化合物情報は表２３に、マウス体内の実験化合物の群分け情報は表２４を参照し、プライマーは表１１と同じであった。

ここで、ＮＡＧ１の構造は
である。

投与の２８日後に、本開示の異なる部位の２’ーフルオロで修飾されたｄｓＲＮＡの体内での標的遺伝子ｍＲＮＡ発現量への阻害効率は、表２５に示された。陽性対照ＴＲＤ００２２１８を参照し、異なる部位の２’ーフルオロで修飾されたｄｓＲＮＡは、投与の２８日後にＴＴＲｍＲＮＡ発現への阻害が参照陽性化合物より高く、２種類の修飾方法は何れも、高い阻害効率を示すと共に、有意差がなく、２種類の修飾方法は、より効率的な阻害効率を媒介できることを示唆した。

ＴＴＲｍＲＮＡ発現量は、下記の等式によって算出した。

ＴＴＲｍＲＮＡ発現量＝［（試験群ＴＴＲｍＲＮＡ発現量／試験群ＧＡＰＤＨｍＲＮＡ発現量）／（対照群ＴＴＲｍＲＮＡ発現量／対照群ＧＡＰＤＨｍＲＮＡ発現量）］×１００％。

実施例１３：ＰＨＨ細胞を用いたｄｓＲＮＡの体外抗ＨＢＶ活性（自由摂取）を評価した
体外抗ＨＢＶ活性評価を、それぞれＴＲＤ００７９７０、ＴＪＲ１００２５９及びＡＤ８１８９０に対して行った。

０日目に、まずはｄｓＲＮＡをＰＢＳで７個の濃度（１００、２５、６．２５、１．５６３、０．３９１、０．０９８、０．０２４ｎＭ）に勾配希釈し、４８ウェルプレートに加えた。冷凍保存のＰＨＨを蘇生し、続いてＰＨＨを４８ウェルプレートに播種し、播種する同時に試験化合物を細胞に自由摂取（ｆｒｅｅｕｐｔａｋｅ）させた。

１日目に、ｄｓＲＮＡを含まない培地を交換し、ＨＢＶ感染ＰＨＨを添加した。

２日目、４日目及び６日目に、ｄｓＲＮＡを含まない新鮮な培地を交換した。

８日目に上清を収集し、収集した細胞上清をＥＬＩＳＡ法によりＨＢｓＡｇ及びＨＢｅＡｇを検出し、ｑＰＣＲ法によりＨＢＶＤＮＡレベルを検出した。実験の結果は、表２６に示される。

結果は、対照ＡＤ８１８９０に比較し、ＴＲＤ００７９７０及びＴＪＲ１００２５９のＰＨＨにおける抗ウイルス活性がより良好であることを示した。

実施例１４：エクソヌクレアーゼ安定性実験によるｄｓＲＮＡの安定性評価
ＴＲＤ００７９７０及びＴＪＲ１００２５９のｓｉＲＮＡ原配列ＴＪＲ１００３８１及びＴＪＲ１００３８２（表２７を参照）についてエキソヌクレアーゼ安定性評価を行い、実験の反応系に従って対応する反応溶液を調製して実験を行った（表２８を参照）。

５’エキソヌクレアーゼ（ＰＤＩＩ、Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ、ｃａｔ＃ＬＳ００３６０２）の最終濃度は５００Ｕ／ｍＬであり、３’エキソヌクレアーゼ（ＳＶＰＤ、Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ、ｃａｔ＃ＬＳ００３９２６）の最終濃度は０．５Ｕ／ｍＬであった。調製完了後、０ｈ、１．５ｈ、２ｈ、３ｈ、４ｈの５つの時点で異なる８連チューブに分注し（各ウェルに１６μＬ）、３７℃でインキュベートし、時点に達した直後に反応液を取り出し、９Ｍの尿素を含むローディング緩衝液（各ウェルに３２μＬ）を加え、－８０℃で冷蔵庫に保存して使用に備えた。その後、２０％（７Ｍの尿素）ＰＡＧＥゲルによって電気泳動を行った。電気泳動終了後、ゲルをｇｅｌｒｅｄ色素に浸し、シェーカー染色を１０ｍｉｎ行い、ゲルイメージング（３１２ｎｍのＵＶ）観察及び写真撮影を行った。実験結果を図３（ゲル電気泳動結果）、図４（５’エキソヌクレアーゼ定量結果）及び図５（３’エキソヌクレアーゼ定量結果）に示され、結果はＴＪＲ１００３８２の安定性がＴＪＲ１００３８１よりも顕著に優れていることを示した。

実施例１５：肝臓Ｓ９代謝安定性分析
カニクイザルの肝臓Ｓ９（カニクイザル肝臓Ｓ９、雄、供給元Ｘｅｎｏｔｅｃｈ、ロット番号１５１０１９２）を、それぞれＴＲＤ００７９７０、ＴＪＲ１００２５９及びＡＤ８１８９０に対して行い、ｄｓＲＮＡの代謝安定性分析を、以下のように実施した：
１、Ｔ０、Ｔ６０、Ｔ１２０、Ｔ２４０、Ｔ３６０、Ｔ１４４０、Ｔ２８８０、ブランクと命名した８個の９６ウェル試料プレートを調製した。

２、１９０μＬ／ウェルＳ９懸濁液（又はブランク緩衝液）を各プレートに添加し、次いで、３７℃で約１０分間インキュベートした。

３、基質細孔に加えて、各プレート（Ｔ０、Ｔ６０、Ｔ１２０、Ｔ２４０、Ｔ３６０、Ｔ１４４０、Ｔ２８８０）に、各ウェルに１０μＬの試料又はブランク緩衝液を加えた。

４、Ｔ０に加えて、各時点（６０、１２０、２４０、３６０、１４４０、２８８０分）のＴＲＤ００７９７０、ＴＪＲ１００２５９及びＡＤ８１８９０試料は、何れも３７℃の水浴においてインキュベートした。

５、各時点の終了時に、２００μＬ（１００ｍＭのＮＨ４ＡｃｐＨ１０．０、１ｍＭのＥＤＴＡ及び７５０ｎｇ／ｍＬを水中に内部標準）を添加し、６０秒間ボルテックスミキサー上で振とうさせた。

６、ＰＣＩ（フェノール／クロロホルム／イソペンタノール（２５：２４：１））試薬２００μＬ及びジクロロメタン４００μＬを各ウェルに添加し、ボルテックスミキサーで１０ｍｉｎ振とうした後、遠心分離し（４℃、３２２０ｇ、２０ｍｉｎ）、上清液を得た。

７、上清液を新しいプレートに移し、ＬＣ－ＭＳ分析を行う前に４℃で保存した。

８、ＡＳ鎖及びＳＳ鎖の一本鎖の余剰百分率をそれぞれ検出し、それによりＴＲＤ００７９７０、ＴＪＲ１００２５９及びＡＤ８１８９０の余剰量を特徴付けた。

９、以下の式を用いて計算した：
余剰％＝各時点での分析物対内部標準のピーク面積比／Ｔ０分析物対内部標準のピーク面積比×１００％
Ｃ_ｔ＝Ｃ_０＊ｅ^{－ｋｅ＊ｔ}
Ｔ_１／２＝Ｌｎ２／ｋ_ｅ＝０．６９３／ｋ_ｅＣｌ_ｉｎｔ（Ｓ９）＝０．６９３／体外Ｔ_１／２＊１／（ｍｇ／ｍＬ反応系におけるＳ９タンパク質）
Ｃｌ_ｉｎｔ（ｌｉｖｅｒ）＝Ｃｌ_ｉｎｔ（Ｓ９）×（ｍｇＳ９）／ｇ肝臓×ｇ肝臓／（ｋｇ体重）。

実験結果を表３０に示され、結果はカニクイザル肝臓Ｓ９を４８ｈインキュベートし、ＴＪＲ１００２５９アンチセンス鎖が９３．８％残り、ＡＤ８１８９０アンチセンス鎖が７０．２％残り、ＴＲＤ００７９７０アンチセンス鎖が６１．０％残りことを示した。データは、カニクイザル肝臓Ｓ９を４８ｈインキュベートし、ＴＪＲ１００２５９におけるアンチセンス鎖が、ＡＤ８１８９０におけるアンチセンス鎖及びＴＲＤ００７９７０におけるアンチセンス鎖に比べてより安定であることを示した。

カニクイザル肝臓Ｓ９を４８ｈインキュベートし、ＴＪＲ１００２５９センス鎖が２１．０％残り、ＡＤ８１８９０センス鎖が１２．２％残り、ＴＲＤ００７９７０センス鎖が８．９％残った。データは、カニクイザル肝臓Ｓ９を４８ｈインキュベートし、ＴＪＲ１００２５９におけるセンス鎖がＡＤ８１８９０におけるセンス鎖及びＴＲＤ００７９７０におけるセンス鎖に比べてより安定であることを示した。

一本鎖の余剰率は、ｄｓＲＮＡの安定性を反映することができ、余剰率が高いほど安定性が良好である。従って、ＴＪＲ１００２５９は、カニクイザル肝臓Ｓ９代謝安定性実験条件下でＡＤ８１８９０及びＴＲＤ００７９７０よりも安定性が高い。

実施例１６：組織分布実験
ＴＲＤ００７９７０、ＴＪＲ１００４１０及びＴＪＲ１００２５９を用いて、以下のように組織分布実験を行った：
雄性Ｃ５６ＢＬ／６Ｊマウス（７－８ｗ、北京京維通利華実験動物技術有限公司）７２匹を約１週間馴化し、２４匹ずつの３群に分けた。ＴＲＤ００７９７０、ＴＪＲ１００２５９及びＴＪＲ１００４１０の用量は、何れも１０ｍｇ／ｋｇであり、投与後０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、８ｈ、２４ｈ、７２ｈ、１６８ｈ（ｎ＝３）に試料を採取した。安楽死後に心臓を採血し、左腎臓と肝臓左側の最大葉を採取し、採取した臓器を生理食塩水で洗浄した。肝臓腎臓試料の前処理後に、高分解能質量分析法を用いて肝臓及び腎臓のＡＳ鎖濃度を分析し、ＴＲＤ００７９７０、ＴＪＲ１００２５９及びＴＪＲ１００４１０の濃度を特徴付けた。

実験の結果は、表３１に示されている。その結果、Ｃ５６ＢＬ／６Ｊマウス組織分布実験におけるＴＲＤ００７９７０、ＴＪＲ１００２５９及びＴＪＲ１００４１０アンチセンス鎖肝臓と腎臓の暴露量比は、それぞれ９．４４、２９．３８及び３．４９であった。肝臓と腎臓の暴露量比が大きいということは、標的臓器（肝臓）の濃度が高く、非標的臓器（腎臓）の濃度が低いことを示している。従って、同等用量では、ＴＪＲ１００２５９はＴＲＤ００７９７０よりも高い肝腎臓比を示し、ＴＲＤ００７９７０はＴＪＲ１００４１０よりも高い肝腎臓比を示し、ＴＪＲ１００２５９はＴＲＤ００７９７０よりも低い腎臓毒性のリスクを示し、ＴＲＤ００７９７０はＴＪＲ１００４１０よりも低い腎臓毒性のリスクを示す。

実施例１７：肝臓ホモジネート安定性
ＴＪＲ１００４１０及びＴＪＲ１００２５９を、以下のように肝臓ホモジネート安定性分析を行った：
１．カニクイザル肝臓ホモジネート（実験単位薬明康徳により提供される）をＡｐｒｉｃｏｔを用いて１９０μＬ／ウェルに添加し、プレートを３７℃で約３０分間インキュベートした。

２．基質細孔を除いて、各プレートは、１０μＬのｄｓＲＮＡ又は対照緩衝液を、各ウェル（Ｔ０、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ４、Ｔ６、Ｔ２４、Ｔ４８、表３２）に添加し、時間を計り始めた。

２．１、試料の準備
（１）２００μＬのｄｓＲＮＡを、指定されたウェルに加えた。
（２）ＣｌａｒｉｆｙＯＴＸ溶解緩衝液１０００μＬを加えた。
（３）８００ｒｐｍの速度で５分間振とうした。

２．２、ＳＰＥ
（１）条件：フェノメネクスＣｌａｒｉｔｙＯＴＸＳＰＥプレート（８ｅ－ｓ１０３－ｃｇａ）により、６００μＬのＭｅＯＨで洗浄した。
（２）平衡：ＳＰＥプレートにより、平衡緩衝液６００μＬ（ｐＨ５．５の５０ｍＭＮＨ４Ａｃ、０．００２５％のＴｒｉｔｏｎＸ－１００及び０．０１ｍｇ／ｍＬシステインを含む）で洗浄した。
（３）ローディング：２．１の試料をＳＰＥプレートで洗浄した。
（４）洗浄１：６００μＬの洗浄緩衝液１（２５ｍＭＮＨ４ＡｃｐＨ５．５）を固相抽出プレートで洗浄した後、再び上記ステップを再び繰り返した。
（５）洗浄２：６００μＬの洗浄緩衝液２（２５ｍＭＮＨ４ＡｃｐＨ５．５、５０％ＣＡＮ）を固相抽出プレートで洗浄した後、上記ステップを再び繰り返した。
（６）溶離：試料を１５０μＬの溶出緩衝液（１００ｍＭＮＨ４ＨＣＯ３、４０％ＡＣＮ及び１０％ＴＨＦを含む１ｍＭＴＣＥＰｐＨ９．５）で溶離し、このステップを繰り返した。
（７）試料をＮ_２蒸発器を用いて４５℃で（約２時間）乾燥させた。
（８）試料を７０μＬの移動相Ａと組み換える。５１
（９）ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析前に、８００ｒｐｍの速度で０．５時間軽く振とうした。
（１０）以下の式を用いて算出した。
Ｃ_ｔ＝Ｃ_０＊ｅ^{－ｋｅ＊ｔ} Ｃ_ｔ＝１／２Ｃ_０Ｔ_１／２＝Ｌｎ２／（－ｋ_ｅ）＝０．６９３／（－ｋ_ｅ）。

そのうち、ＴＪＲ１００４１０は対照ｄｓＲＮＡであり、そのセンス鎖は、
ＧｍｓＵｍｓＧｍＵｍＧｍＣｍＡｆＣｆＵｆＵｍＣｍＧｍＣｍＵｍＵｍＣｍＡｍＣｍＣｍ－ＮＡＧ１（配列番号５３）であり、
アンチセンス鎖は、
ＡｍｓＧｆｓＵｍＧｆＡｍＡｆ（－）ｈｍｐＮＡ（Ｇ）ＣｍＧｍＡｆＡｍＧｆＵｍＧｆＣｍＡｆＣｍＡｆＣｍｓＧｍｓＧｍ（配列番号５４）であり、
ＮＡＧ１の構造は
であった。

実験の結果は、表３３に示される。

結果は、カニクイザル肝臓ホモジネートを４８ｈインキュベートし、ＴＪＲ１００２５９におけるアンチセンス鎖が９４．６％残り、ＴＪＲ１００４１０におけるアンチセンス鎖が４２．７％残り、ＴＪＲ１００２５９におけるセンス鎖が１８．３％残り、ＴＪＲ１００４１０におけるセンス鎖が４．３％残ることを示した。データは、カニクイザル肝臓ホモジネートを４８ｈインキュベートし、ＴＪＲ１００２５９におけるアンチセンス鎖がＴＪＲ１００４１０におけるアンチセンス鎖よりも安定であり、ＴＪＲ１００２５９におけるセンス鎖はＴＪＲ１００４１０におけるセンス鎖よりも安定であることを示した。

一本鎖の余剰率は、ｄｓＲＮＡの安定性を反映することができ、余剰率が高いほど安定性が良好である。従って、ＴＪＲ１００２５９は、カニクイザル肝臓ホモジネート安定性実験条件下でＴＪＲ１００４１０よりも安定性が高い。

Claims

ｄｓＲＮＡであって、
ｓｉＲＮＡ及び
それに複合する１つ又は複数のリガンドを含み、
前記ｓｉＲＮＡはセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み、
前記アンチセンス鎖は、その５’末端から２位～８位の少なくとも１つのヌクレオチド位置で式（Ｉ）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩を含み、
前記式（Ｉ）に示される化学修飾は、
の何れか１つの構造から選ばれ、Ｂは塩基であり、
前記リガンドは、以下の構造式に示されるリガンド又はその薬学的に許容される塩であり、
前記ｓｉＲＮＡは、Ｂ型肝炎ウイルスを標的とする、
ｄｓＲＮＡ。
前記センス鎖は、配列番号１～配列番号４の何れか１つのヌクレオチド配列と３個以下のヌクレオチドの違いがある配列を含み、それは少なくとも１５個の連続ヌクレオチドを含み、及び／又は、
アンチセンス鎖は、配列番号５～配列番号８の何れか１つのヌクレオチド配列と３個以下のヌクレオチドの違いがある配列を含み、それは少なくとも１９個の連続ヌクレオチドを含み、
好ましくは、前記センス鎖は、配列番号１～配列番号４の何れか１つに示されるヌクレオチド配列を含み、及び／又は、
アンチセンス鎖は、配列番号５～配列番号８の何れか１つに示されるヌクレオチド配列を含み、
より好ましくは、前記センス鎖及びアンチセンス鎖は、
センス鎖は配列番号１に示されるヌクレオチド配列を含み、アンチセンス鎖は配列番号５に示されるヌクレオチド配列を含み、
センス鎖は配列番号１に示されるヌクレオチド配列を含み、アンチセンス鎖は配列番号８に示されるヌクレオチド配列を含み、
センス鎖は配列番号２に示されるヌクレオチド配列を含み、アンチセンス鎖は配列番号６に示されるヌクレオチド配列を含み、
センス鎖は配列番号３に示されるヌクレオチド配列を含み、アンチセンス鎖は配列番号７に示されるヌクレオチド配列を含み、
センス鎖は配列番号４に示されるヌクレオチド配列を含み、アンチセンス鎖は配列番号５に示されるヌクレオチド配列を含む、という群の何れか１つから選ばれる、
請求項１に記載のｄｓＲＮＡ。
前記センス鎖の３’末端が、前記リガンドに複合される、
請求項１又は２に記載のｄｓＲＮＡ。
前記リガンドは、ホスフェート基又はチオホスフェート基を介して前記ｓｉＲＮＡ末端に連結し、好ましくは、ホスホジエステル基又はチオホスホジエステル基を介して連結し、より好ましくは、ホスホジエステル基を介して連結する、
請求項１～３の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ。
前記アンチセンス鎖は、その５’末端から５、６又は７位で式（Ｉ）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩を含み、好ましくは、７位に位置する、
請求項１～４の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ。
式（Ｉ）に示される化学修飾を含む残りの位置において、前記センス鎖及び／又はアンチセンス鎖における少なくとも１つの別のヌクレオチドが修飾されたヌクレオチドである、
請求項１～５の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ。
前記センス鎖が、下記式に示されるヌクレオチド配列を含み、
５’－Ｎ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ｂＮ_ｂＮ_ｂＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａ－３’、又は、
５’－Ｎ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ｂＮ_ａＮ_ｂＮ_ｂＮ_ｂＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａＮ_ａ－３’、
そのうち、Ｎ_ａは２’－メトキシ基で修飾されたヌクレオチドで、Ｎ_ｂは２’－フルオロで修飾されたヌクレオチドである、
請求項１～６の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ。
前記アンチセンス鎖は、
５’－Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｗ’Ｎ_ａ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ｂ’Ｎ_ａ’Ｎ_ａ’Ｎ_ａ’－３’、
そのうち、それぞれのＸ’は、独立的にＮ_ａ’又はＮ_ｂ’であり、Ｙ’はＮ_ａ’又はＮ_ｂ’であり、
Ｎ_ａ’は２’－メトキシ基で修飾されたヌクレオチドで、Ｎ_ｂ’は２’－フルオロで修飾されたヌクレオチドであり、
Ｗ’は、式（Ｉ）に示される化学修飾、その互変異性体又はその薬学的に許容される塩を含むヌクレオチドを示し、前記式（Ｉ）は、
から選ばれ、そのうち、Ｂは、前記アンチセンス鎖の５’末端から７位のヌクレオチドが修飾されていない場合の塩基と同じである、
請求項１～７の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ。
前記センス鎖及び／又はアンチセンス鎖の少なくとも１つのホスフェート基は、修飾基を有するホスフェート基であり、好ましくは、前記修飾基を有するホスフェート基は、チオホスホジエステル基である、
請求項１～８の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ。
前記チオホスホジエステル基は、
前記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、
前記センス鎖の５’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
前記アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、
前記アンチセンス鎖の５’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
前記アンチセンス鎖の３’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、及び
前記アンチセンス鎖の３’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
という位置から選ばれる少なくとも１つに存在し、
好ましくは、
前記センス鎖及び／又はアンチセンス鎖は複数のチオホスホジエステル基を含み、前記チオホスホジエステル基は、
前記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、
前記センス鎖の５’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
前記アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、
前記アンチセンス鎖の５’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
前記アンチセンス鎖の３’末端の１番目のヌクレオチドと２番目のヌクレオチドとの間、及び
前記アンチセンス鎖の３’末端の２番目のヌクレオチドと３番目のヌクレオチドとの間、
という位置から選ばれる少なくとも１つに存在する、
請求項９に記載のｄｓＲＮＡ。
ｄｓＲＮＡであって、そのうち、
前記ｄｓＲＮＡは、
配列番号９に示されるセンス鎖及び配列番号１７に示されるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号９に示されるセンス鎖及び配列番号２０に示されるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１１に示されるセンス鎖及び配列番号１８に示されるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１３に示されるセンス鎖及び配列番号１９に示されるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１０に示されるセンス鎖及び配列番号１７に示されるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１２に示されるセンス鎖及び配列番号１８に示されるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１４に示されるセンス鎖及び配列番号１９に示されるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、
配列番号１５に示されるセンス鎖及び配列番号１７に示されるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、という群の何れか１つから選ばれる、
ｄｓＲＮＡ。
前記ｄｓＲＮＡは、以下の構造又はその薬学的に許容される塩から選ばれ、
そのうち、
Ａｆ＝アデニン２’－Ｆリボヌクレオシド、Ｃｆ＝シトシン２’－Ｆリボヌクレオシド、Ｇｆ＝グアニン２’－Ｆリボヌクレオシド、Ｕｆ＝ウラシル２’－Ｆリボヌクレオシド、
Ａｍ＝アデニン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド、Ｃｍ＝シトシン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド、Ｇｍ＝グアニン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド、Ｕｍ＝ウラシル２’－ＯＭｅリボヌクレオシド、Ｉｍ＝ヒポキサンチン２’－ＯＭｅリボヌクレオシド、
はチオホスホジエステル基を表し、
はホスホジエステル基を表し、
ＮＡＧ００５２’は
を表し、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ｇ）は
を表し、（－）ｈｍｐＮＡ（Ｃ）は
を表し、
（－）ｈｍｐＮＡ（Ａ）は
を表す、
請求項１～１１の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ。
二本鎖領域を形成するセンス鎖及びアンチセンス鎖を含むｓｉＲＮＡであって、前記センス鎖及びアンチセンス鎖は、
センス鎖は配列番号１を含み、アンチセンス鎖は配列番号８を含み、
センス鎖は配列番号４を含み、アンチセンス鎖は配列番号５を含む、という群の何れか１つから選ばれる、
ｓｉＲＮＡ。
前記ｄｓＲＮＡ又はｓｉＲＮＡは合成由来又はインビトロで調製されるものから選ばれる、
ことを特徴とする請求項１～１２の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ又は請求項１３に記載のｓｉＲＮＡ。
医薬組成物であって、
請求項１～１２、１４の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ又は請求項１３～１４の何れか一項に記載のｓｉＲＮＡ、及び
任意選択的に、１つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤を含む、
医薬組成物。
他の治療剤を更に含む、
請求項１５に記載の医薬組成物。
薬剤の調製における、請求項１～１２、１４の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ、又は請求項１５若しくは１６に記載の医薬組成物の使用であって、
前記薬剤はＢ型肝炎ウイルス感染症又はＢ型肝炎ウイルス関連疾患の予防及び／又は治療するために用いられ、
好ましくは、前記Ｂ型肝炎ウイルス関連疾患は、慢性肝炎、急性Ｂ型肝炎、慢性Ｂ型肝炎、Ｄ型肝炎ウイルス感染症、Ｄ型肝炎、肝線維症、進行性肝疾患、肝細胞癌から選ばれ、
前記Ｂ型肝炎ウイルス感染症の対象又はＢ型肝炎ウイルス関連疾患の対象がＨＢｅＡｇ陽性又はＨＢｅＡｇ陰性である、
使用。
ＨＢＶ標的遺伝子又はそのｍＲＮＡの発現を阻害する方法であって、
請求項１～１２、１４の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ、又は請求項１５若しくは１６に記載の医薬組成物の有効量又は有効用量を対象に投与することを含む、
方法。
前記ｄｓＲＮＡ又は医薬組成物は、別の治療剤と組み合わせて投与される、
請求項１８記載の方法。
肝臓にオリゴヌクレオチドを送達する方法であって、
請求項１～１２、１４の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ、又は請求項１５若しくは１６に記載の医薬組成物の有効量又は有効用量を対象に投与することを含む、
方法。
請求項１３に記載のｓｉＲＮＡを含む、
細胞。
請求項１～１２、１４の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ又は請求項１３～１４の何れか一項に記載のｓｉＲＮＡを含む、
ベクター。
請求項１～１２、１４の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡ又は請求項１５若しくは１６の何れか一項に記載の医薬組成物を独立的に含む１つ又は複数の容器を含む、
試薬キット又はキット。
請求項１～１２、１４の何れか一項に記載のｄｓＲＮＡを合成することを含む、
ｄｓＲＮＡを調製する方法。