JP2022146763A

JP2022146763A - 植物ステロールを含む組成物

Info

Publication number: JP2022146763A
Application number: JP2021047896A
Authority: JP
Inventors: 江里子三澤; Eriko Misawa; 万里江齊藤; Marie Saito
Original assignee: Morinaga Milk Industry Co Ltd
Current assignee: Morinaga Milk Industry Co Ltd
Priority date: 2021-03-22
Filing date: 2021-03-22
Publication date: 2022-10-05

Abstract

【課題】コラーゲン合成促進作用、ヒアルロン酸分解抑制作用を有する組成物を提供する。
【解決手段】ロフェノール化合物及びシクロラノスタン化合物からなる群から選択される１又は複数の化合物と構造中にヒドロキシプロリンを含むペプチドとを組み合わせて有効成分とする。
【選択図】なし

Description

本発明は、植物ステロールとコラーゲンを加水分解して得られるペプチドを含む、飲食品、化粧品、医薬品として利用できる組成物に関する。

コラーゲンは、生体の約３０％を含む主要タンパク質であり、皮膚、結合組織、骨に存在している。生体のコラーゲンは、加齢とともに減少し、皮膚や結合組織の老化現象を引き起こすことが知られている。
コラーゲンの減少を抑制する目的で、種々のコラーゲン合成促進剤が提案されている。例えば、３－ヒドロキシピリジニウム誘導体を有効成分として含有するコラーゲン合成促進剤が開示されている（特許文献１）。

ヒアルロン酸は、保水性に優れるムコ多糖類の一種であり、皮膚や結合組織に存在している。ヒアルロン酸も、コラーゲンと同様、加齢とともに減少し、皮膚や結合組織の老化現象を引き起こすことが知られている。
ヒアルロン酸の減少を抑制する目的で、種々のヒアルロン酸合成促進剤が提案されている。例えば、レバン組成物を含有するヒアルロン酸合成促進剤が提案されている（特許文献２）。

また、クラゲムチンに、コラーゲン合成促進作用及びヒアルロン酸合成促進作用があることが報告されている（特許文献３）。

ところで、植物ステロールのうち、シクロラノスタン骨格を有する化合物やロフェノール骨格を有する化合物には、線維芽細胞賦活作用（特許文献４）やマトリックスメタロプロテアーゼ産生阻害作用（特許文献５）があることが知られている。

また、コラーゲン成分を分解して得られるトリペプチドは、コラーゲン合成促進作用を有することが知られている（特許文献６、特許文献７）。

特開２０１９－０１９１２９号公報特開２０１９－００６７２５号公報特開２０１８－１４５１０６号公報国際公開第２０１５／０１５８１６号パンフレット国際公開第２０１５／０８３４７６号パンフレット特開２００２－２５５８４７号公報特開２００３－１３７８０７号公報

上記先行技術のあるところ、本発明は、新規な組成物を提供することを課題とする。
特に、本発明は、コラーゲン合成促進能、ヒアルロン酸分解抑制能を有する組成物を提供すること、さらに、皮膚、結合組織、骨の老化現象に対して有効な組成物を提供することを課題とする。

本発明者らは、構造中にヒドロキシプロリンを含むペプチドと、ロフェノール化合物及びシクロラノスタン化合物からなる群から選択される１又は複数の化合物とを組み合わせることにより、コラーゲン合成促進作用、及びヒアルロン酸分解抑制作用が顕著に増大することを見出し、本発明を完成させた。

すなわち、本発明は、ロフェノール化合物及びシクロラノスタン化合物からなる群から選択される１又は複数の化合物と、コラーゲンを加水分解して得られる、構造中にヒドロキシプロリンを含むペプチドとを含む、組成物である。
本発明の組成物は、コラーゲン合成促進作用、及びヒアルロン酸分解抑制作用を有する。

本発明の好ましい形態では、前記ロフェノール化合物が、４－メチルコレスト－７－エン－３－オール、４－メチルエルゴスト－７－エン－３－オール、及び４－メチルスチグマスト－７－エン－３－オールからなる群から選択される。

本発明の好ましい形態では、前記シクロラノスタン化合物が、９，１９－シクロラノスタン－３－オール、及び２４－メチレン－９，１９－シクロラノスタン－３－オールからなる群から選択される。

本発明の好ましい形態では、ロフェノール化合物及びシクロラノスタン化合物からなる群から選択される１又は複数の化合物の総含有量が、０．００００１質量％以上である。

本発明の好ましい形態では、前記組成物は、飲食品組成物又は化粧品組成物である。

本発明の好ましい形態では、前記組成物は、コラーゲン合成促進用又はヒアルロン酸分解抑制用である。

本発明の好ましい形態では、前記組成物は、皮膚の抗老化用、シワ抑制用、タルミ抑制用、保湿用又はバリア機能向上用、皮膚弾力性向上用、皮膚機能改善用、光老化防止用である。

本発明の組成物は、コラーゲン合成促進作用又はヒアルロン酸分解抑制作用を有する。本発明の組成物は、皮膚の抗老化用、シワ抑制用、タルミ抑制用、保湿用又はバリア機能向上用、皮膚弾力性向上用、皮膚機能改善用、光老化防止用に、好適である。

次に、本発明の好ましい形態について詳細に説明する。ただし、本発明は以下の好ましい形態に限定されず、本発明の範囲内で自由に変更することができるものである。尚、本明細書において百分率は特に断りのない限り質量による表示である。

本発明の組成物は、ロフェノール化合物（化合物１）及びシクロラノスタン化合物（化合物２）からなる群から選択される１又は複数の化合物と、構造中にヒドロキシプロリンを含むペプチドを有効成分として含有する。
以下、各有効成分について説明する。

ロフェノール化合物（化合物１）は、以下の一般式（１）で表される。

一般式（１）中、Ｒ１は、炭素数５～１６の直鎖若しくは分岐鎖状のアルキル基、又は２重結合を１つ若しくは２つ含むアルケニル基である。また、前記アルキル基又はアルケニル基は、１又は２の水素原子がヒドロキシル基及び／又はカルボニル基に置換された置換アルキル基又は置換アルケニル基であってもよい。
また、Ｒ２、Ｒ３は各々独立に水素原子又は炭素数１～３のアルキル基である。ここで、前記炭素原子数１～３のアルキル基としては、メチル基、エチル基等が好ましく、メチル基が特に好ましい。また、前記アルキル基は、少なくとも１の水素原子がヒドロキシル基及び／又はカルボニル基に置換された置換アルキル基であってもよい。

また、Ｒ４は環を構成する炭素原子とともにＣ＝Ｏを形成するか、又は－ＯＨ、－ＯＣＯＣＨ_３の何れかである。

前記一般式（１）中、Ｒ１は、下記式で表される基の何れかであることが好ましい。

また、前記一般式（１）中、Ｒ２及びＲ３の一方が水素原子であり、他方がメチル基であることが好ましく、Ｒ４が水素基であることが好ましい。

化合物１として、好ましくは、４－メチルコレスト－７－エン－３－オール、４－メチルエルゴスト－７－エン－３－オール及び４－メチルスチグマスト－７－エン－３－オールが挙げられる。各化合物は、それぞれ、以下の式で表される構造を有する。

化合物１は、公知の製造方法に準じて化学的に製造することができる。
例えば、ＶｉｔａｌｉＭａｔｙａｓｈｅｔａｌ．，ＰＬＯＳＢＩＯＬＯＧＹ，Ｖｏｌｕｍｅ２，Ｉｓｓｕｅ１０, ｅ２８０, ２００４に記載されたサプリメントデータに準じて、合成することが可能である。

また、化合物１が植物に含まれていることは知られており、公知のロフェノールの製造方法に準じて、化合物１を製造することができる（生物化学実験法２４、脂肪脂質代謝実験法、山田晃弘著、学会出版センター、第１７４ページ、１９８９年）。
例えば、化合物１が含まれている植物より、熱水抽出法、有機溶媒抽出法、超臨界抽出法又は亜臨界抽出法などの方法を用いて抽出することが可能である（例えば、特許第３９０５９１３号公報参照）。化合物１は、例えばユリ科、マメ科、イネ科、ナス科及びバショウ科の植物から抽出することができる。
前記のようにして製造した化合物１は、例えば、マススペクトル（ＭＳ）法、及び核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）法等によって、その分子量や構造等を決定又は確認することができる。

また、化合物１は、医薬品組成物に許容される塩であってもよい。医薬品組成物に許容される塩として、金属塩（無機塩）と有機塩との両方が含まれ、それらのリストは「レミントン・ファーマシューティカル・サイエンシーズ（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ）、第１７版、１９８５年、第１４１８貢」に掲載されているものが例示される。
具体的には塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、及び臭化水素酸塩などの無機酸塩や、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、パモ酸塩、サリチル酸塩、及びステアリン酸塩などの有機酸塩が非限定的に含まれる。
また、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム等の金属の塩、リジン等のアミノ酸との塩とすることもできる。また、前記化合物若しくはその医薬品組成物に許容される塩の水和物等の溶媒和物も使用できる。

シクロラノスタン化合物（化合物２）は、以下の一般式（２）で表される。

一般式（２）中、Ｒ５は、炭素数６～８の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基、２重結合を１つ又は２つ含むアルケニル基である。また、前記アルキル基又はアルケニル基は、１又は２の水素原子がヒドロキシル基及び／又はカルボニル基に置換された置換アルキル基又は置換アルケニル基であってもよい。
また、Ｒ６，Ｒ７は各々独立に水素原子又はメチル基である。また、Ｒ８は環を構成する炭素原子とともにＣ＝Ｏを形成するか、又は下記式の何れかである。

前記一般式（２）中、Ｒ５は、下記式で表される基の何れかであることが好ましい。

また、前記一般式（２）中、Ｒ６及びＲ７の一方が水素原子であり、他方がメチル基であることが好ましく、Ｒ８が水酸基であることが好ましい。

化合物２としては、好ましくは、９，１９－シクロラノスタン－３－オール及び２４－メチレン－９，１９－シクロラノスタン－３－オールが挙げられる。各化合物は、それぞれ、以下の式で表される構造を有する。

化合物２は、公知の製造方法に準じて化学的に製造することができる。例えば、２４－メチレン－９，１９－シクロラノスタン－３－オール（慣用名：２４－メチレンシクロアルタノール）は、特開昭５７－０１８６１７号公報や国際公開第２０１２／０２３５９９号（γ－オリザノールから合成する方法）に開示される方法にて製造することが可能である。また、化合物２は、特開２００３－２７７２６９号公報に開示される方法にて、シクロアルテノールフェルレートの加水分解物を出発物質として製造することが可能である。

また、化合物２も、ユリ科、マメ科、イネ科、ナス科及びバショウ科などの植物に含まれていることが知られている（［フィトケミストリー（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ），米国、１９７７年、第１６巻、第１４０～１４１ページ］、［ハンドブック・オブ・フィトケミカル・コンスティチュエンツ・オブ・ＧＲＡＳ・ハーブ・アンド・アザー・エコノミック・プランツ（ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＧＲＡＳｈｅｒｂｓａｎｄｏｔｈｅｒｅｃｏｎｏｍｉｃｐｌａｎｔｓ），１９９２年、米国、シーアールシープレス］、又は［ハーゲルス・ハントブーフ・デア・ファルマツォイティシェン・プラクシス（Ｈａｇｅｒ’ｓＨａｎｄｂｕｃｈｄｅｒＰｈａｒｍａｚｅｕｔｉｓｃｈｅｎＰｒａｘｉｓ）、第２～６巻、１９６９～１９７９年、ドイツ、シュプリンガー・フェアラークベルリン］参照）。よって、化合物２は、これらの植物より、有機溶媒抽出法又は熱水抽出法などの公知の方法を用いて抽出することが可能である（例えば、特許第３９２４３１０号公報参照）。化合物２は、ユリ科アロエ属の植物から抽出することが好ましい。
前記のようにして製造した化合物は、例えば、マススペクトル（ＭＳ）法、及び核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）法等によって、その分子量や構造等を決定又は確認することができる。

また、化合物２は、医薬品組成物に許容される塩であってもよい。このような塩は化合物１について例示したとおりである。

本発明の組成物は、化合物１及び化合物２から選ばれる１又は複数の化合物を有効成分として含有する。また、化合物１及び化合物２のそれぞれについて、１又は複数を有効成分とすることができる。有効成分は、化合物１又は化合物２のいずれか単独であっても化合物１及び化合物２の混合物であってもよいが、化合物１及び化合物２の混合物がより好ましい。すなわち、好ましい態様において、化合物１から選ばれる１又は複数と、化合物２から選ばれる１又は複数の混合物を有効成分として含有する。
化合物１又は化合物２を単独で用いる場合としては、化合物１（主に、４－メチルコレスト－７－エン－３－オール、４－メチルエルゴスト－７－エン－３－オール、若しくは４－メチルスチグマスト－７－エン－３－オール）、又は化合物２（主に、９，１９－シクロラノスタン－３－オール若しくは２４－メチレン－９，１９－シクロラノスタン－３－オール）の何れかであることが好ましい。
中でも溶解性等の物性の点で、化合物１としては４－メチルコレスト－７－エン－３－オールが特に好ましく、化合物２としては９，１９－シクロラノスタン－３－オールが特に好ましい。
また、化合物１と化合物２を対比した場合では、化合物１（主に、４－メチルコレスト－７－エン－３－オール、４－メチルエルゴスト－７－エン－３－オール又は４－メチルスチグマスト－７－エン－３－オール）であることがより好ましい。
また、化合物１又は化合物２各々においても、１種の化合物を用いてもよいし、複数の化合物を混合して用いてもよい。
本発明の組成物は、好ましくは、４－メチルコレスト－７－エン－３－オール、４－メチルエルゴスト－７－エン－３－オール、４－メチルスチグマスト－７－エン－３－オール、９，１９－シクロラノスタン－３－オール、２４－メチレン－９，１９－シクロラノスタン－３－オールからなる群から選択される１又は複数の化合物を有効成分として含有する。

化合物１及び化合物２の両者を組み合わせる場合（化合物１と化合物２との混合物）において、化合物１及び化合物２の質量比の範囲は、例えば以下が挙げられる。
化合物１：化合物２は、好ましくは５：１～１：５、さらに好ましくは３：１～１：３、特に好ましくは２：１～１：２である。

本発明の組成物における前記化合物の含有量は、症状等に応じて適宜選択することができるが、総量で、好ましくは０．００００１質量％以上、より好ましくは０．０００１質量％以上、さらに好ましくは０．０００５質量％以上、特に好ましくは０．００１質量％以上である。また本発明の組成物における当該量の上限は特に制限されないが、総量で、９０質量％以下、好ましくは７０質量％以下、より好ましくは５０質量％以下が例示される。

また、本発明の組成物は、化合物１及び化合物２からなる群から選択される１又は複数の化合物を０．００００１質量％以上含む組成物を、有効成分として含有する形態とすることもできる。
このような組成物としては、例えば、前述した化合物１を含む植物から得られた抽出物、化合物２を含む植物から得られた抽出物、及び化合物１及び化合物２の両者を含む植物から得られた抽出物、並びにこれらの混合物が挙げられる。

ここで、化合物１、化合物２を含む植物としては、例えば、ユリ科、マメ科、イネ科、ナス科及びバショウ科などの植物を挙げることができる。

天然の植物に含まれる例として、アロエ・ベラ中には、化合物１（主に、４－メチルコレスト－７－エン－３－オール、４－メチルエルゴスト－７－エン－３－オール及び４－メチルスチグマスト－７－エン－３－オール）、及び化合物２（主に、９，１９－シクロラノスタン－３－オール及び２４－メチレン－９，１９－シクロラノスタン－３－オール）が含まれていることが知られている。

そのため、アロエ・ベラを原料として、４－メチルコレスト－７－エン－３－オール、４－メチルエルゴスト－７－エン－３－オール、若しくは４－メチルスチグマスト－７－エン－３－オール（化合物１）の何れか、又は９，１９－シクロラノスタン－３－オール、若しくは２４－メチレン－９，１９－シクロラノスタン－３－オール（化合物２）の何れかをそれぞれ精製して、化合物１：化合物２が５：１～１：５、好ましくは３：１～１：３、特に好ましくは２：１～１：２で含む混合物を得ることが可能である。このようにして得られた混合物は、本発明の組成物の有効成分として好適である。

本発明には、構造中にヒドロキシプロリンを含むペプチド（以下、単にコラーゲンペプチドとも表記する）を使用する。

本発明に使用されるコラーゲンペプチドとしては、２～４個のアミノ酸からなるペプチドを好ましく挙げることができる。

ここで、本発明に使用されるコラーゲンペプチドはコラーゲン・トリペプチド及び／又はコラーゲン・ジペプチドであることが好ましい。

コラーゲン・トリペプチドとしては、Ｇｌｙ－Ｈｙｐ－Ｘ若しくは、Ｇｌｙ－Ｘ－Ｈｙｐで表されるアミノ酸配列からなるコラーゲン・トリペプチドを好ましく挙げることができる。中でも、本発明に使用されるコラーゲン・トリペプチドは、そのアミノ酸配列がＰｒｏ－Ｈｙｐ－Ｇｌｙで表されるものであることが好ましい。

また、コラーゲン・ジペプチドとしては、Ｈｙｐ－Ｙ若しくは、Ｙ－Ｈｙｐで表されるアミノ酸配列からなるコラーゲン・ジペプチドを好ましく挙げることができる。中でも、本発明に使用されるコラーゲン・ジペプチドは、そのアミノ酸配列がＰｒｏ－Ｈｙｐ、Ｈｙｐ－Ｇｌｙで表されるものであることが好ましい。

なお、上記のアミノ酸配列において、Ｘ及びＹは任意のアミノ酸残基を示す。

本発明に使用するコラーゲンペプチドは、市販のコラーゲン・トリペプチドやコラーゲン・ジペプチドを用いることができる。また、本発明に使用するコラーゲンペプチドとしては、コラーゲン成分またはゼラチン成分を、コラゲナーゼ酵素を用いて特異的に分解することで得られるものを使用することもできる。

コラーゲンペプチドの出発原料である、コラーゲン成分またはゼラチン成分は、牛、豚、鳥、鯨その他の鳥獣類の骨、軟骨、皮、腱、または鮭、鮫その他の魚類の魚皮を原料として調製されたものを用いることができ、本発明においては、原料のタイプは問わない。

コラーゲンペプチドの調製方法としては、特開平７－８２２９９号公報、特開平９－１７６１９６号公報、特開平１１－１２１９６号公報、特開２００６－１６０６５４号公報、特開２００９－５７３２７号公報、特許第６０７５６５６号に詳述されている方法等を適用することができる。これらの調製方法により調製したものが、本発明に用いられるコラーゲンペプチドである。

具体的には、特開平７－８２２９９号公報に記載の以下の（ｉ）～（ｉｉｉ）の方法で、コラーゲンペプチドを調製することができる。（ｉ）コラーゲン（ゼラチン、宮城化学工業）をｐＨ７．０の緩衝液に溶解させた後、冷却し、コラーゲン溶液を調製する。（ｉｉ）コラゲナーゼ酵素（コスモ・バイオ社製、ABC Form III）を含む酵素溶液を、コラーゲン溶液にすばやく加えて撹拌・加温し、コラゲナーゼ酵素によるコラーゲン分解液を製造する。（ｉｉｉ）コラーゲン分解液を濾過・精製し、本発明に用いられるコラーゲンペプチドを得る。

コラゲナーゼ酵素としては、Clostridium histolyticum, Bacillusなどの細菌、Streptomyces parvulus などの放線菌、乳酸菌、酵母または真菌などの由来であって、コラーゲン特有のアミノ酸配列：（Ｇｌｙ－Ｘ－Ｙ）ｎにおけるグリシンのアミノ基側を特異的に切断する酵素を用いる。また、コラゲナーゼ酵素は、これらの酵素遺伝子を遺伝子工学的に特定のベクターに組み込んで、乳酸菌や酵母などの他の菌体または動物に産生させて得られた遺伝子組み替えによる酵素であって、コラゲナーゼ酵素と類似の基質特異性を有するコラゲナーゼ様酵素であってもよい。

これらの調製方法により調製したコラーゲンペプチドを用いる場合には、トリペプチド及び／又はジペプチドを１０％以上、より好ましくは２０％以上、より好ましくは３０％以上、さらに好ましくは５０％以上、含んで構成されていることが好ましい。

本発明の組成物において、コラーゲンペプチドの含有量は、好ましくは０．０１質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、さらに好ましくは０．５質量％以上である。
また本発明の組成物における当該量の上限は特に制限されないが、８０質量％以下、好ましくは３０質量％以下、より好ましくは２０質量％以下が例示される。

従って、本発明の組成物は、コラーゲンの減少若しくはヒアルロン酸の減少、これらの両者により引き起こされる状態や疾患の改善の用途に用いることができる。
前記状態や疾患としては、加齢による老化、シワ、タルミ、乾燥、バリア機能低下、皮膚弾力性の低下、皮膚機能の低下、光老化、関節痛、関節の変形、骨疾患、骨粗しょう症が挙げられる。

すなわち、本発明の組成物は、抗老化用、シワ抑制用、タルミ抑制用、保湿用、バリア機能向上用、皮膚弾力性向上用、皮膚機能改善用、又は光老化防止用に好適である。

また、本発明の組成物は、飲食品組成物とすることができる。本発明において、「飲食品組成物」には、人間が摂取する飲食品の他、人間以外の動物が摂取する飼料も含まれる。

また、飲食品組成物における前記化合物１及び化合物２から選ばれる化合物の総量は、その形態に応じて、前記化合物を、総量で、好ましくは０．０００１～１００ｍｇ／日、より好ましくは０．００１～５０ｍｇ／日、特に好ましくは０．０１～１０ｍｇ／日の範囲で摂取するのに適した量とすることもできる。従って、本発明の飲食品組成物は、前記化合物を、総量で、好ましくは０．０００１～１００ｍｇ／日、より好ましくは０．００１～５０ｍｇ／日、特に好ましくは０．０１～１０ｍｇ／日摂取するように用いられることが好ましい。

飲食品組成物における、コラーゲンペプチドの投与量は、用法、投与対象の年齢、性別、栄養状態又は疾患の程度、その他の条件等により適宜選択される。通常有効成分としてのコラーゲンペプチドの量は、１０～１００ｍｇ／日、好ましくは１００～１０００ｍｇ／日、特に好ましくは１０００～１００００ｍｇ／日の範囲となる量を目安とするのが良く、１日１回又は複数回に分けて投与することができる。

前記飲食品は、好ましくは保健機能食品である。「保健機能食品」とは、疾患の予防効果、又は疾患の発生リスクの低減効果が、直接的又は間接的に表示された食品、及び事業者の責任で科学的根拠を基に商品パッケージに機能性を表示するものとして、消費者庁に届け出られた食品を意味する。例えば、現在、日本において、特定保健用食品、機能性表示食品、健康補助食品等の態様で販売される食品が挙げられる。

前記飲食品の形態としては特に制限されないが、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果汁飲料、乳酸菌飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液及び調製用粉末を含む）が、前記化合物を効率よく摂取する観点から特に好ましい。

また、機能性飲食品の形態としては、顆粒状、タブレット状又は液状のサプリメントであることも、摂取者が有効成分の摂取量を把握しやすいという点で好ましい。

また、このような機能性飲食品には、「コラーゲン合成促進のため」、「ヒアルロン酸分解抑制のため」の用途の表示が付された形態とすることも好ましい。

前記「表示」は、需要者に対して前記用途を知らしめる機能を有するすべての表示を含む。すなわち、前記用途を想起・類推させうるような表示であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物・媒体等の如何に拘わらず、すべて前記「表示」に該当する。
また、前記「表示が付された」とは、前記表示と飲食品（製品）を関連付けて認識させようとする表示行為が存在していることをいう。
表示行為は、需要者が前記用途を直接的に認識できるものであることが好ましい。具体的には、本発明の飲食品に係る商品又は商品の包装への前記用途の記載行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類（電磁的方法により提供されるものを含む）への前記用途の記載行為が例示できる。

一方、表示される内容（表示内容）としては、行政等によって認可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示）であることが好ましい。
例えば、健康食品、機能性飲食品、経腸栄養食品、特別用途食品、保健機能食品、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品、医薬品組成物用部外品等の表示を例示することができる。特に、消費者庁によって認可される表示、例えば、特定保健用食品制度、これに類似する制度にて認可される表示を例示できる。後者の例としては、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク低減表示等を例示することができ、詳細にいえば、健康増進法施行規則（平成１５年４月３０日日本国厚生労働省令第８６号）に定められた特定保健用食品としての表示（特に保健の用途の表示）、及びこれに類する表示が、典型的な例として列挙することが可能である。

前記用途を表す文言は、コラーゲン合成促進又はヒアルロン酸分解抑制を表現する文言であれば、本発明の範囲に包含されることは言うまでもない。
また、本発明の飲食品は、前記用途の表示に加え、前記有効成分の表示、さらには、前記用途と前記有効成分の関連性を示す表示を含むことも好ましい。

前記飲食品は、化合物１及び化合物２から選ばれる化合物と、コラーゲンペプチドとを、有効成分として配合することで製造することができる。本発明の飲食品は、例えば、前記化合物と、コラーゲンペプチドとを、飲食品原料に混合して、加工することで製造することができる。
また、前記飲食品は、前記化合物を含む公知の植物等を原料として、熱水や各種溶媒を用いた抽出、超臨界抽出、亜臨界抽出することにより得た抽出物を、飲食品原料とともに加工することで製造することもできる。

また、前記飲食品の形態を、顆粒状、タブレット状又は液状のサプリメントとする場合には、有効成分である前記化合物とコラーゲンペプチドとを、例えば、ラクチュロース、マルチトール、及びラクチトール等の糖類、及びそれ以外の糖類、例えばデキストリン、デンプン等；ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質；アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類；セルロース、アラビアゴム等の多糖類；大豆油、中性脂肪酸トリグリセリド等の油脂類等とともに、製剤化することも好ましい。

また、本発明の組成物は、化粧品組成物とすることができる。
「化粧品組成物」には、薬事法における化粧品および医薬部外品が含まれ、皮膚に使用する化粧品、浴用剤、芳香品等が挙げられる。

化粧品組成物には、通常用いられる成分を適宜配合することができる。また、化粧品組成物の形態も特に制限されない。
本発明の化粧品組成物としては、例えば、せっけん、合成化粧せっけん、液状ボディ洗浄料（ボディーソープ）、洗顔料等の洗浄料、クレンジングクリーム、洗浄用化粧水、化粧水、乳液、美容液、ローション、液状パック、ペースト状パック等のパック、粉白粉、水白粉、練白粉等の白粉、打粉、ファンデーション、口紅、頬紅等の化粧品、アイライナー、アイシャドウ等の目のまわりの化粧料、日焼け止め化粧料、サンタン化粧料、除毛化粧料等の化粧料、或いはシェービングローション、アフターシェービングローション等のひげそり用化粧料等が挙げられるが、これらに限定されない。

本発明の化粧品組成物は、上記化合物を有効量含んでなるものであり、使用により、コラーゲン合成促進作用又はヒアルロン酸分解抑制作用の少なくとも何れかの作用を発揮できるものである。

また、化粧品組成物には前記化合物の他、化粧品に通常用いられる成分を本発明の目的、作用、効果を損なわない範囲で適宜選択して添加して使用することができる。このような成分としては例えば界面活性剤、油分、保湿剤、柔軟剤、感触向上剤、油性剤、乳化剤、酸化防止剤、防腐剤、防黴剤、エモリエント剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、安定化剤、紫外線吸収剤、アルコール類、シリコン化合物、増粘剤、粘度調整剤、可溶化剤、パール化剤、香料、清涼剤、殺菌剤、抗菌剤、天然抽出物、着色剤、褪色防止剤、精製水その他の溶剤、噴射剤等が挙げられるが、これらに限定されない。

本発明の組成物は、医薬品組成物とすることができる。
本発明の医薬品組成物は、経口的、又は非経口的にヒトを含む哺乳動物に投与することができる。

また、本発明の医薬品組成物において、化合物１及び化合物２からなる群から選択される１又は複数の化合物の総含有量は、好ましくは０．０００１質量％以上、さらに好ましくは０．０００５質量％以上、特に好ましくは０．００１質量％以上である。

本発明の医薬品組成物において、コラーゲンペプチドの含有量は、好ましくは０．０１質量％以上、さらに好ましくは０．１質量％以上、特に好ましくは５．０質量％以上である。

本発明の医薬品組成物の形態は特に限定されず、用法に応じて適宜選択できる。具体的には、錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、坐剤、注射剤、軟膏剤、貼付剤、点眼剤、点鼻剤等を例示できる。

本発明の医薬品組成物の投与時期は特に限定されず、対象となる疾患に応じて、適宜選択することが可能である。また、投与量は製剤形態、用法、患者の年齢、性別、その他の条件、症状の程度等に応じて決定されることが好ましい。
本発明の医薬品組成物の投与量は、用法、患者の年齢、性別、疾患の程度、その他の条件等により適宜選択される。通常、有効成分の量に換算して、好ましくは０．０００１～１００ｍｇ／日、より好ましくは、０．００１～５０ｍｇ／日、特に好ましくは０．０１～１０ｍｇ／日の範囲を目安とする。

本発明の医薬品組成物は、医薬品組成物に汎用される添加剤を含有してもよい。添加剤としては、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、界面活性剤、注射剤用溶剤等が挙げられる。

本発明の医薬品組成物は、前記化合物とコラーゲンペプチドとを有効成分として医薬品組成物用担体に配合することで製造することができる。本発明の医薬品組成物は、例えば、前記化合物を、前述した添加剤とともに製剤化することで製造することができる。
また、本発明の医薬品組成物は、前記化合物を含む公知の植物等を原料として、熱水や各種溶媒を用いた抽出、超臨界抽出、亜臨界抽出することにより得た抽出物を、前述した添加剤とともに製剤化することで製造することもできる。

＜１＞被験試料の調製
（１）化合物１及び化合物２を含む試料の調製
４－メチルコレスト－７－エン－３－オール、４－メチルエルゴスト－７－エン－３－オール、４－メチルスチグマスト－７－エン－３－オール、９，１９－シクロラノスタン－３－オール、及び２４－メチレン－９，１９－シクロラノスタン－３－オールのモル比１：１：１：１：１の混合物（以下、単に植物ステロールと表記する）を、用時、ＤｉｍｅｔｈｙｌＳｕｌｆｏｘｉｄｅ（ＤＭＳＯ）によって希釈して、各種濃度の被験試料を調製した。

（２）コラーゲンペプチドの調製
本実施例では、コラーゲン・トリペプチド（株式会社ペプチド研究所商品番号：4032）（以下、単にＣＴＰと表記する）をｄｅｉｏｎｉｚｅｄｗａｔｅｒｆｉｌｔｅｒｅｄｗｉｔｈ０．２２μｍ（ＭＩＬＬＥＸ（登録商標）ＧＶ，ＣａｔＮｏ．Ｒ５ＤＡ８２３１０，ＭｉｌｌｉｐｏｒｅＤＷ)で用時希釈することで３μg／ｍＬの被験試料を調製し、以下の（３）組成物の調製に用いた。

（３）組成物の調製
下記表に従い、参考例１、参考例２、実施例１および実施例２の構成を含む被験物質を調製し、試験に供した。併せて、陰性対照を調製し、試験に供した。

＜２＞遺伝子の発現試験
以下の方法により、各被験試料が、ヒト皮膚線維芽細胞のコラーゲン合成酵素遺伝子、ヒアルロン酸分解酵素遺伝子の発現に与える影響を解析した。

（１）ヒト皮膚線維芽細胞の培養
１０．０％（ｖ/ｖ）ＦｅｔａｌＢｏｖｉｎｅＳｅｒｕｍ（ＦＢＳ，Ｈｙｃｌｏｎｅ，ＵＫ）を用いて、ヒト新生児由来の真皮線維芽細胞ＮＲ１ＲＧＢ細胞（ＲＩＫＥＮＢＲＣ,Ｊａｐａｎ）を３５ｍｍディッシュに２．０×１０⁵ｃｅｌｌｓ／２ｍＬ播種し、５％ＣＯ₂、３７℃環境下で２４時間培養した。
２４時間後、３５ｍｍディッシュの培地を除去して、表１に記載の各被験物質および陰性対照培地を加え、５％ＣＯ₂、３７℃環境下で、２４時間、または４８時間培養した後、ＰｕｒｅＬｉｎｋＴＭＲＮＡＭｉｎｉＫｉｔ（ＣａｔＮｏ.１２１８３０１８Ａ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＵＳＡ)を用いてＲＮＡを回収した。

（２）遺伝子発現変化の解析
得られたＲＮＡをＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＴＭＩＶＶＩＬＯＴＭＭａｓｔｅｒＭｉｘｗｉｔｈｅｚＤＮａｓｅ(ＣａｔＮｏ.１１７６６０５０，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＵＳＡ)を用いて、逆転写を行った。
８連チューブ(ＡＢ１１８２，ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＵＳＡ)に１０×ｅｚＤＮａｓｅＢｕｆｆｅｒ、ｅｚＤＮａｓｅｅｎｚｙｍｅ、Ｎｕｃｌｅａｓｅ－ｆｒｅｅＷａｔｅｒ、１０μｇ/ｍＬＲＮＡを加え、３７℃で２分間インキュベートした。２分後、８連チューブにＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＴＭＩＶＶＩＬＯＴＭＭａｓｔｅｒＭｉｘ、およびＮｕｃｌｅａｓｅ－ｆｒｅｅＷａｔｅｒを添加し、リアルタイムＰＣＲ（ＱｕａｎｔＳｔｕｄｉｏ（登録商標)３，ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，ＵＳＡ）を用いて２５℃で１０分間、５０℃で１０分間、８５℃で５分間加熱して、ｃＤＮＡを合成した。ＰＣＲプレート（ＣａｔＮｏ．Ｎ８０１０５６０，ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＵＳＡ）にＴａｑＭａｎ（登録商標）ＦａｓｔＡｄｖａｎｃｅｄＭａｓｔｅｒＭｉｘ（ＣａｔＮｏ．４４４４５５７，ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，ＵＳＡ）、ＴａｑＭａｎＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｒ、ＵｌｔｒａＰｕｒｅＴＭＤｉｓｔｉｌｌｅｄＷａｔｅｒ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＣａｔＮｏ.１０９７７－０１５，ＵＳＡ)およびｃＤＮＡを加え、プレートシールにより密封した。リアルタイムＰＣＲシステムを用いてＲｅａｌ－ＴｉｍｅｑＰＣＲを行い、陰性対象及び被験物質における各遺伝子のＴｈｒｅｓｈｏｌｄＣｙｃｌｅ（Ｃｔ）値を算出した。内部標準遺伝子によりＣｔ値を補正し、ΔΔＣｔ法によって陰性対照の遺伝子発現量を１として被験物質の遺伝子発現量を解析した。遺伝子のプローブは下記を用いた。
遺伝子発現量について、実施例と、参考例（単独添加群）又は陰性対照群の間で、Ｄｕｎｎｅｔ法にて有意差検定を行った。

・内部標準遺伝子：HumanGlyceraldehyde 3 Phosphate Dehydrogenase (GAPDH, Assay ID. s02786624_g1)
・コラーゲン合成酵素遺伝子：HumanCollagen Type 1 Alpha 1 (COL1A1, Assay ID. Hs00164004_m1)
・ヒアルロン酸分解酵素遺伝子：Human Hyaluronidase 1 (HYAL1, Assay ID. Hs00201046_m1)

＜３＞結果
（１）コラーゲン合成酵素遺伝子（ＣＯＬ１Ａ）

表１より、参考例１、参考例２と比較し、実施例１（植物ステロール２．０μＭ＋ＣＴＰ３．０μg／ｍＬ）及び実施例２（植物ステロール０．２μＭ＋ＣＴＰ３．０μg／ｍＬ）は、有意にコラーゲン合成酵素遺伝子の発現を促進することがわかった。

（２）ヒアルロン酸分解酵素遺伝子（ＨＹＡＬ１）

表２より、参考例１、参考例２と比較し、実施例１（植物ステロール２．０μＭ＋ＣＴＰ３．０μg／ｍＬ）及び実施例２（植物ステロール０．２μＭ＋ＣＴＰ３．０μg／ｍＬ）は、有意にヒアルロン酸分解酵素遺伝子の発現を低減させることがわかった。

以上の結果から、ロフェノール化合物及びシクロラノスタン化合物から選ばれる化合物と、コラーゲンペプチド(構造中にヒドロキシプロリンを含むペプチド)を組み合わせることで、コラーゲン合成促進作用、及びヒアルロン酸分解抑制作用が得られることがわかった。

［製造例１］
次の組成からなる医薬品組成物を、以下の方法により製造した。
ロフェノール化合物とシクロラノスタン化合物とを、ロフェノール化合物：シクロラノスタン化合物＝１：１の質量比で含有した混合物に、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ：第一工業製薬株式会社製）を添加し分散させて調製した前記混合物を０．００１質量％含有する組成物を２質量％、コラーゲンペプチドを０．１質量％、中鎖脂肪酸（ＭＣＴ：理研ビタミン株式会社製）２質量％、グリセリン脂肪酸エステル（理研ビタミン株式会社製）を４質量％、サポニン（丸善製薬株式会社製）を０．５質量％、エタノール（日本アルコール産業株式会社製）を０．２質量％、マルチトール（株式会社林原製）を１．３質量％、グリセリン（日油株式会社製）を７８質量％、さらに水を添加して全量が１００質量％、となるように混合して、ロフェノール化合物（化合物１）及びシクロラノスタン化合物（化合物２）の混合物が最終濃度で０．００００２質量％、コラーゲンペプチドを０．１質量％以上含有するシロップ状の製剤を製造した。
製造例１の医薬品組成物は、コラーゲン合成促進作用、及びヒアルロン酸分解抑制作用を有する。

［製造例２］
次の組成からなる飲食品組成物を、以下の方法により製造した。
ロフェノール化合物とシクロラノスタン化合物とを、ロフェノール化合物：シクロラノスタン化合物＝６．１：３．９の質量比で含有した混合物を４質量％含有し、コラーゲンペプチドを1.0質量％、その他に中鎖脂肪酸（ＭＣＴ：理研ビタミン株式会社製）２質量％、グリセリン脂肪酸エステル（理研ビタミン株式会社製）４質量％、サポニン（丸善製薬株式会社製）０．５質量％、エタノール（日本アルコール産業株式会社製）０．２質量％、マルチトール（株式会社林原製）１．３質量％、グリセリン（日油株式会社製）７８質量％、水９質量％を混合して、シクロラノスタン化合物及びロフェノール化合物の混合物を含有する食品添加剤を製造した。

製造した食品添加剤を飲料に加えて均一に混合することにより、ロフェノール化合物（化合物１）及びシクロラノスタン化合物（化合物２）の混合物が最終濃度で０．００００２質量％、コラーゲンペプチドが１．０質量％含有する飲食品組成物を製造した。
製造例２の飲食品組成物は、コラーゲン合成促進作用、ヒアルロン酸分解抑制作用を有する。

［製造例３］
＜クリーム＞
以下に示す処方でクリームを製造した。
（処方）
（１）ステアリン酸５．０質量％
（２）ステアリルアルコール４．０質量％
（３）イソプロピルミリステート１８．０質量％
（４）グリセリンモノステアリン酸エステル３．０質量％
（５）プロピレングリコール１０．０質量％
（６）シクロラノスタン化合物およびロフェノール化合物混合物０．０００２質量％
（７）苛性カリ０．２質量％
（８）亜硫酸水素ナトリウム０．０１質量％
（９）防腐剤適量
（１０）香料適量
（１１）コラーゲン・トリペプチド１０質量％含有コラーゲン溶液１０質量％
（１２）イオン交換水残余

（製法）
イオン交換水に（５）～（７）を加えて溶解し、加熱して７０℃に保って水相部を調製した。さらに前記水相部とは別に、残りの成分をすべて混合し、加熱融解して７０℃に保って油相部を調製した。次に、水相部に油相部を徐々に加え、全部加え終わってからしばらくその温度に保った後、ホモミキサーで均一に乳化し、よく混合しながら３０℃まで冷却してクリームを調製した。

［製造例４］
＜乳液＞
以下に示す処方で、乳液を製造した。
（処方）
（１）ステアリン酸２．５質量％
（２）セチルアルコール１．５質量％
（３）ワセリン５．０質量％
（４）流動パラフィン１０．０質量％
（５）ポリオキシエチレン（１０モル）モノオレイン酸エステル２．０質量％
（６）ポリエチレングリコール１５００３．０質量％
（７）トリエタノールアミン１．０質量％
（８）カルボキシビニルポリマー０．０５質量％
（９）シクロラノスタン化合物およびロフェノール化合物混合物０．００００２質量％
（１０）亜硫酸水素ナトリウム０．０１質量％
（１１）エチルパラベン０．３質量％
（１２）香料適量
（１３）コラーゲン・トリペプチド１０質量％含有コラーゲン溶液１０質量％
（１４）イオン交換水残余

（製法）
イオン交換水の一部に（８）を溶解して１液とした。さらに前記１液とは別に、残りのイオン交換水に（６）と（７）を加え、加熱溶解して７０℃に保ち２液とした。また、前記１液および２液とは別に、残りの成分をすべて混合し、７０℃で溶解して３液とした。次いで、２液に３液を加えた後、さらに、これに１液を加えてホモミキサーで均一乳化し、乳化後よくかき混合しながら３０℃まで冷却して乳液を調製した。

［製造例５］
以下に示す処方で、サンスクリーン剤を製造した。
＜サンスクリーン剤＞
（処方）
（１）環状シリコン２１．９質量％
（２）酸化亜鉛１０．０質量％
（３）酸化チタン１０．０質量％
（４）ジメチコン５．５質量％
（５）メトキシケイヒ酸オクチル５．５質量％
（６）グリセリン３．０質量％
（７）クオタニウム－１８ベントナイト１．０質量％
（８）ジグリセリン１．０質量％
（９）フェノキシエタノール０．１質量％
（１０）シクロラノスタン化合物およびロフェノール化合物混合物０．００００２質量％
（１１）香料適量
（１２）コラーゲン・トリペプチド１０質量％含有コラーゲン溶液１０質量％
（１３）メチルパラベン０．１質量％
（１４）エタノール１．０質量％
（１５）１,３－ブチレングリコール３．０質量％
（１６）イオン交換水残余

（製法）
（１）～（１２）を室温で撹拌しながら分散し、Ａ相とした。水と１,３－ブチレングリコールを室温で撹拌溶解し、Ｂ相とした。メチルパラベンとエタノールを室温で撹拌溶解し、Ｃ相とした。Ａ相をディスパーでかき混ぜながら、Ｂ相とＣ相を加えて乳化した（１０００ｒｐｍ、３分間）。その後パドルでかき混ぜながら３５℃まで冷却した。

製造例３～５の化粧品組成物は、コラーゲン合成促進作用、ヒアルロン酸分解抑制作用を有する。

本発明は、抗老化や美容を目的とした、飲食品組成物、化粧品組成物、医薬品組成物に利用できる。

Claims

ロフェノール化合物及びシクロラノスタン化合物からなる群から選択される１又は複数の化合物と、構造中にヒドロキシプロリンを含むペプチドを含む、組成物。
前記ロフェノール化合物が、４－メチルコレスト－７－エン－３－オール、４－メチルエルゴスト－７－エン－３－オール、及び４－メチルスチグマスト－７－エン－３－オールからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
前記シクロラノスタン化合物が、９，１９－シクロラノスタン－３－オール、及び２４－メチレン－９，１９－シクロラノスタン－３－オールからなる群から選択される、請求項１又は２に記載の組成物。
ロフェノール化合物及びシクロラノスタン化合物からなる群から選択される１又は複数の化合物の総含有量が、０．００００１質量％以上である、請求項１～３の何れかに記載の組成物。
飲食品組成物又は化粧品組成物である、請求項１～４の何れかに記載の組成物。
コラーゲン合成促進用又はヒアルロン酸分解抑制用である、請求項１～５の何れかに記載の組成物。
皮膚の抗老化用、シワ抑制用、タルミ抑制用、保湿用又はバリア機能向上用、皮膚弾力性向上用、皮膚機能改善用、光老化防止用である、
請求項１～６の何れかに記載の組成物。