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JP2018193336A - Skin external preparation - Google Patents

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JP2018193336A JP2017099326A JP2017099326A JP2018193336A JP 2018193336 A JP2018193336 A JP 2018193336A JP 2017099326 A JP2017099326 A JP 2017099326A JP 2017099326 A JP2017099326 A JP 2017099326A JP 2018193336 A JP2018193336 A JP 2018193336A
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英生 岩野
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茂 澤木
茂豊 澤木
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茂豊 澤木
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Abstract

To provide a skin external preparation and a hair composition containing components that have a skin whitening effect, a skin moisture effect, and a hair growth effect, and cause no skin irritation and have excellent biological safety.SOLUTION: The present invention provides a skin external composition or a hair composition containing fermentation products as an active ingredient, the fermentation products obtained by fermenting plants of Liliaceae, Hemerocallis or extract thereof, or water-soluble solvent extract of the plants, with lactic acid bacteria, yeast, koji mold or Bacillus natto.SELECTED DRAWING: None

Description

本発明は、天然物に由来し、すぐれた生理活性及び生体安全性を有する新規有効成分及びこれを配合してなる皮膚(頭皮も含む)外用剤及び美容又は健康増進用の飲食品である。   The present invention is a novel active ingredient derived from a natural product and having excellent physiological activity and biosafety, a skin (including scalp) external preparation, and a food or drink for beauty or health promotion comprising the same.

近年、細胞の老化現象や外的因子(例えば、紫外線、大気汚染物質や環境ホルモン等の化学物質、花粉等のアレルギー物質、環境ストレス等)による細胞へのダメージに関する研究が行われ、様々な細胞の老化現象や、細胞の損傷及びその予防、回復に関するメカニズムが解明されている。   In recent years, research has been conducted on cell aging and external factors (for example, ultraviolet rays, chemical substances such as air pollutants and environmental hormones, allergens such as pollen, environmental stress, etc.), and various cells have been studied. The mechanism of aging, cell damage and its prevention and recovery has been elucidated.

例えば、皮膚細胞に関しては、加齢に伴う細胞増殖・分化の不活化、ホルモン分泌の低下、皮膚を構成する細胞外マトリックス成分(コラーゲン、ラミニン等)の量的低下等の内的要因と、太陽光(紫外線)に誘発される活性酸素、大気汚染物質や環境ホルモン等の化学物質、花粉等のアレルギー物質、環境ストレス等の外的要因とが複雑に絡み合って、老化現象(シワ、タルミ等)や肌荒れ、色調の変化が生じる。   For example, regarding skin cells, internal factors such as inactivation of cell growth / differentiation associated with aging, decrease in hormone secretion, quantitative decrease in extracellular matrix components (collagen, laminin, etc.) constituting the skin, and the sun Aging phenomenon (wrinkles, tarmi, etc.) intricately intertwined with external factors such as active oxygen induced by light (ultraviolet rays), chemical substances such as air pollutants and environmental hormones, allergens such as pollen, and environmental stress Rough skin and color changes occur.

さらに、外的要因である紫外線、化学物質、アレルギー物質は、生体内の細胞や組織にダメージを与えて生体成分(タンパク質等)を変質させたり、又は活性酸素を発生させたりする。これにより、生体において炎症の原因となる抗原やサイトカインが生じたり、また、皮膚においてニキビやサンバーンの要因となる過酸化脂質が生じたりする。さらには、上記外的要因が細胞内のメラニン色素の異常沈着を誘発して皮膚にシミ、ソバカス、肝斑等を生じさせる。   Furthermore, ultraviolet rays, chemical substances, and allergens, which are external factors, damage cells and tissues in the living body, alter biological components (proteins, etc.), or generate active oxygen. As a result, antigens and cytokines that cause inflammation are generated in the living body, and lipid peroxides that cause acne and sunburn are generated in the skin. Furthermore, the above external factors induce abnormal deposition of intracellular melanin pigments, causing spots, freckles, liver spots and the like on the skin.

また、上述のように、上記内的要因と外的要因により、表皮のターンオーバーが不規則になり、バリア機能の低下やキメの乱れも生じる。   Further, as described above, due to the internal factor and the external factor, the turnover of the epidermis becomes irregular, and the barrier function is deteriorated and the texture is disturbed.

以上のような細胞の不健全化や老化を予防及び改善する目的で、従来、種々の活性成分が提案され、それら活性成分を配合した化粧品、飲食品及び医薬品が上市されている。例えば、ビタミンC、ビタミンE、カタラーゼ等の抗酸化剤;グリチルリチン酸又はその塩、アラントイン、トラネキサム酸等の抗炎症剤;各種紫外線吸収剤;α−ヒドロキシカルボン酸、胎盤抽出液、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸等の細胞賦活成分;コラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸又はその塩等の細胞外マトリックス成分;尿素等の保湿剤;アミノグアニジン等のタンパク質糖化抑制剤が挙げられる。また、皮膚のシミ、ソバカス、肝斑等の色素沈着の発生を抑制する物質としては、コウジ酸やリノール酸等が知られており、美白剤の有効成分として広く使用されている。   Various active ingredients have been proposed for the purpose of preventing and improving the unhealthy and aging of cells as described above, and cosmetics, foods and drinks and pharmaceuticals containing these active ingredients have been put on the market. For example, antioxidants such as vitamin C, vitamin E, and catalase; anti-inflammatory agents such as glycyrrhizic acid or salts thereof, allantoin, tranexamic acid; various ultraviolet absorbers; α-hydroxycarboxylic acid, placenta extract, γ-amino- Cell activation components such as β-hydroxybutyric acid; extracellular matrix components such as collagen, elastin, hyaluronic acid or salts thereof; humectants such as urea; and protein glycation inhibitors such as aminoguanidine. In addition, kojic acid, linoleic acid, and the like are known as substances that suppress the occurrence of pigmentation such as skin spots, buckwheat, and liver spots, and are widely used as active ingredients of whitening agents.

以上のように、従来、細胞の老化現象や不健全化のメカニズムに基づいて、細胞賦活剤、抗老化剤及び美白剤が提案されているが、生体に対する安全性、また、実際に生体への塗布又は服用に際しての有効性の観点で問題が存在する。従って、それら従来の問題点が改善された有効成分が求められている。   As described above, conventionally, cell activators, anti-aging agents and whitening agents have been proposed based on the aging phenomenon and unhealthy mechanism of cells. There are problems in terms of effectiveness in application or taking. Accordingly, there is a need for an active ingredient that improves these conventional problems.

上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、本発明者らは、ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物若しくは抽出物、又はそれらの発酵物が、格段にすぐれた皮膚のターンオーバーの正常化効果及び育毛効果を有することを新たに見出した。さらに、それら抽出物又は発酵物が、細胞内へのビタミンCの取り込みに関与するビタミンCトランスポーター(SVCT1)の合成促進効果を有することも見出した。   As a result of diligent research to solve the above problems, the present inventors have found that plants or extracts belonging to the genus Hemerocallis, or fermented products thereof, have a remarkable effect of normalizing skin turnover. And newly found to have a hair-growth effect. Furthermore, it has also been found that these extracts or fermented products have an effect of promoting the synthesis of vitamin C transporter (SVCT1) involved in the incorporation of vitamin C into cells.

従来、ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物の抽出物又は発酵物を化粧料に使用する発明は、例えば、特許文献1〜3により知られていた。しかし、ユリ科ワスレグサ属に属する植物又はその抽出物、当該抽出物の加水分解物、又は当該植物の発酵物が皮膚のターンオーバーの正常化効果、SVCT1の合成促進効果及び育毛効果を有することは知られていなかった。
特開2006-052165号 特開2006-143670号 特開2008-050326号
Conventionally, the invention of using an extract or fermented product of a plant belonging to the genus Hemerocallis in a cosmetic is known from Patent Documents 1 to 3, for example. However, a plant belonging to the genus Forget-me-not, or an extract thereof, a hydrolyzate of the extract, or a fermented product of the plant has a skin turnover normalizing effect, an SVCT1 synthesis promoting effect, and a hair growth effect. It was not known.
JP 2006-052165 JP 2006-143670 JP2008-050326

本発明は、ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物又はその抽出物を乳酸菌、麹菌又は納豆菌で発酵させて得られる発酵物を有効成分とする皮膚外用組成物である。
また、本発明は、ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物又はその抽出物を酵母で発酵させて得られる発酵物を有効成分とする美白用組成物である。
また、本発明は、ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物又はその抽出物を酵母で発酵させて得られる発酵物を有効成分とする保湿用組成物である。
本発明は、ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物又はその抽出物を乳酸菌、酵母、麹菌又は納豆菌で発酵させて得られる発酵物を有効成分とする毛髪化粧料用組成物である。
本発明は、ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物の水溶性溶媒抽出物を有効成分とする皮膚外用組成物である。
The present invention is an external composition for skin containing as an active ingredient a fermented product obtained by fermenting a plant belonging to the genus Hemerocallis or an extract thereof with lactic acid bacteria, koji molds or natto bacteria.
The present invention also provides a whitening composition comprising as an active ingredient a fermented product obtained by fermenting a plant belonging to the genus Hemerocallis or an extract thereof with yeast.
The present invention is also a moisturizing composition comprising as an active ingredient a fermented product obtained by fermenting a plant belonging to the genus Hemerocallis or an extract thereof with yeast.
The present invention is a composition for hair cosmetics comprising as an active ingredient a fermented product obtained by fermenting a plant belonging to the genus Hemerocallis or an extract thereof with lactic acid bacteria, yeast, koji mold or natto.
The present invention is an external composition for skin comprising as an active ingredient a water-soluble solvent extract of a plant belonging to the genus Hemerocallis.

本発明に係る抽出物又は発酵物は、皮膚表皮細胞が合成する基底膜タンパク質であるXVII型コラーゲンの合成を促進する効果を有することから、それらのいずれかを配合した組成物は、表皮細胞と基底膜の接着を強固にし、ひいては表皮のターンオーバーの正常化に寄与する。また、本効果は表皮の状態を健全に保つとともに、色素細胞で合成されたメラニン色素の速やかな排出を促し、美白効果の速やかな発現にも寄与する。また、頭皮のXVII型コラーゲンの発現を誘導することで、脱毛、白髪予防効果を奏することも示唆される。   Since the extract or fermented product according to the present invention has an effect of promoting the synthesis of type XVII collagen, which is a basement membrane protein synthesized by skin epidermal cells, the composition containing any of them is composed of epidermal cells and Strengthens the adhesion of the basement membrane, which in turn contributes to normalizing the epidermis turnover. In addition, this effect keeps the state of the epidermis healthy, promotes rapid discharge of melanin synthesized in pigment cells, and contributes to rapid expression of whitening effect. It is also suggested that the effect of preventing hair loss and white hair can be achieved by inducing the expression of type XVII collagen in the scalp.

さらに、本発明に係る発酵物は、色素細胞のビタミンCの取り込み口であるSVCT-1の発現を亢進することができることから、美白有効成分としてのビタミンCと併用することによって、その色素細胞への取り込みを増大させ、より効果的な美白効果を得ることが可能となる。   Furthermore, since the fermented product according to the present invention can enhance the expression of SVCT-1, which is the intake port of vitamin C in pigment cells, it can be used in combination with vitamin C as a whitening active ingredient, to the pigment cells. It is possible to obtain a more effective whitening effect.

以下、本発明について詳細に説明する。
本発明で用いるユリ科ワスレグサ属の植物としては、例えば、ホンカンゾウ(Hemerocallis fulva var. fulva)、ヤブカンゾウ(Hemerocallis fulva var. kwanso)、ハマカンゾウ(Hemerocallis fulva var. littorea)、ノカンゾウ(Hemerocallis fulva var. longituba)、アキノワスレグサ(Hemerocallis fulva var. sempervirens)等のワスレグサ(Hemerocallis fulva)、ウコンカンゾウ(Hemerocallis citrina Baroni)、ヒメカンゾウ(Hemerocallis dumortieri var. dumortieri)、マンシュウキスゲ (Hemerocallis lilioasphodelus L.)、小黄花菜(Hemerocallis mirror)、エゾキスゲ(Hemerocallis lilioasphodelus var. yezoensis)、ニッコウキスゲ(Hemerocallis dumortieri var. esculenta)、ユウスゲ(Hemerocallis citrina var. vespertina)、又は叶萱草(Hemerocallis plicata)等が挙げられる。
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
Examples of the plant belonging to the genus Forget-me-not used in the present invention include, for example, Honkanllis (Hemerocallis fulva var. Fulva), Yakukan elephant (Hemerocallis fulva var. Kwanso), Hakukan elephant (Hemerocallis fulva var. , Hemerocallis fulva (Hemerocallis fulva), Hemerocallis citrina Baroni, Hemerocallis dumortieri var. Dumortieri, Hemerocallis lilioasp ), Ezokisge (Hemerocallis lilioasphodelus var. Yezoensis), Nikko Kusuge (Hemerocallis dumortieri var. Esculenta), Yuusuge (Hemerocallis citrina var. Vespertina), or Hemerocallis plicata.

ユリ科ワスレグサ属の植物を用いて、抽出物又は微生物(酵母、乳酸菌、麹菌又は納豆菌)による発酵物を得る場合、該植物の発酵部位には特に限定はなく、全草、葉、花、雄しべ、雌しべ、茎、根茎、種子(子実)等適宜の部位を用いることができるが、花弁、蕾を含む花部又は花部を含む全草の使用が好ましい。   When a lilyaceae forget-me-not plant is used to obtain a fermented product by an extract or a microorganism (yeast, lactic acid bacteria, koji mold or natto), the fermentation site of the plant is not particularly limited, and the whole grass, leaves, flowers, Although appropriate parts such as stamens, pistils, stems, rhizomes, seeds (grains) can be used, the use of petals, flower parts including buds or whole plants containing flower parts is preferable.

ワスレグサ属の植物の発酵する場合は、例えば、以下のようにして行うことができる。まず、発酵の資化源としてはワスレグサ属の植物それ自体(以下、植物体ということがある)を用いてもよく、或いは植物体を適宜の媒体で抽出して得られる抽出物を用いてもよい。また、抽出物を用いる場合には、被抽出物の植物体を固液分離によって除去することなく、植物体を含んだままで発酵を行うことも可能である。ここで、ワスレグサ属の植物は、生のままであっても、又予め乾燥若しくは半乾燥したものであってもよい。また、形状としては採取したものをそのまま用いることも可能である。   When fermenting a forget-me-not plant, it can be carried out, for example, as follows. First, as an assimilation source for fermentation, a forget-me-not plant itself (hereinafter sometimes referred to as a plant) may be used, or an extract obtained by extracting a plant with an appropriate medium may be used. Good. Moreover, when using an extract, it is also possible to perform fermentation with a plant body contained, without removing the plant body of an extract by solid-liquid separation. Here, forget-me-not plants may be raw or may be dried or semi-dried in advance. Further, the collected shape can be used as it is.

植物体を資化源として発酵を行う場合は、まず植物体を溶媒に懸濁させる。植物体を懸濁させるための溶媒としては、水或いは水と低級アルコール類(メタノール、エタノール、イソプロパノール等)若しくはグリコール類(エチレングリコール、1,3−プロパンジオール、1,3−ブチレングリコール、1,2−ペンタンジオール、グリセリン等)との混液等が用いることができる。また、それら溶媒中にはグルコース、フルクトース、シュークロース等の糖類を添加してもよい。ここで、植物体と溶媒との混合比は、植物体の乾燥重量換算で一般に1:1〜1:100、好ましくは1:10〜1:50の範囲である。   When fermentation is performed using a plant body as an assimilation source, the plant body is first suspended in a solvent. As a solvent for suspending the plant body, water or water and lower alcohols (methanol, ethanol, isopropanol, etc.) or glycols (ethylene glycol, 1,3-propanediol, 1,3-butylene glycol, 1, 2-pentanediol, glycerin, etc.) can be used. In these solvents, saccharides such as glucose, fructose, sucrose may be added. Here, the mixing ratio of the plant body and the solvent is generally in the range of 1: 1 to 1: 100, preferably 1:10 to 1:50 in terms of the dry weight of the plant body.

植物体の抽出物を発酵資化源として用いる場合、抽出物の調製方法としては、抽出対象部位、例えば花部(花弁、蕾等)を、必要に応じて予め水洗、乾燥し、好ましくはさらに細切或いは粉砕した上、浸漬法、向流抽出法等適宜の手段により抽出溶媒と接触せしめる方法等が採用できる。又、超臨界抽出法を用いてもよい。   When using an extract of a plant body as a fermentation assimilation source, the preparation method of the extract is, as necessary, pre-washing a part to be extracted, such as a flower part (petals, buds, etc.), if necessary, and preferably further A method of contacting with an extraction solvent by an appropriate means such as a dipping method or a countercurrent extraction method after being chopped or crushed can be employed. A supercritical extraction method may also be used.

抽出溶媒としては、水;メタノール、エタノール、プロパノール等の低級アルコール類、オレイルアルコール、ステアリルアルコール、オクチルドデカノール等の高級アルコール類;エチレングリコール、プロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール、グリセリン等の多価アルコール類;酢酸エチル、酢酸ブチル、プロピオン酸メチル、トリオクタン酸グリセリル等のエステル類;アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類;エチルエーテル、イソプロピル、エーテル等のエーテル類;n−ヘキサン、トルエン、クロロホルム等の炭化水素系溶媒等が挙げられ、それらは単独で若しくは二種以上混合して用いることができる。   As an extraction solvent, water; lower alcohols such as methanol, ethanol and propanol; higher alcohols such as oleyl alcohol, stearyl alcohol and octyldodecanol; many solvents such as ethylene glycol, propylene glycol, 1,3-butylene glycol and glycerin Monohydric alcohols; esters such as ethyl acetate, butyl acetate, methyl propionate and glyceryl trioctanoate; ketones such as acetone and methyl ethyl ketone; ethers such as ethyl ether, isopropyl and ether; n-hexane, toluene, chloroform and the like A hydrocarbon solvent etc. are mentioned, These can be used individually or in mixture of 2 or more types.

混合溶媒を用いる場合の混合比は、例えば水とエチルアルコールとの混合溶媒であれば、容量比(以下同じ)で1:1〜25:1、水とグリセリンとの混合溶媒であれば1:1〜15:1、又水と1,3−プロパンジオール若しくは1,3−ブチレングリコールとの混合溶媒であれば、1:1〜15:1の範囲とすることが好ましい。抽出溶媒として水以外の溶媒或いは水と水以外の溶媒との混合溶媒を用いた場合は、発酵工程に移行するに先立って、一旦水以外の溶媒を濃縮等の操作で留去した後、固形分として0.01〜10%程度となるように水に再溶解するか或いは水で希釈して発酵の資化源としてもよい。   The mixing ratio in the case of using a mixed solvent is, for example, 1: 1 to 25: 1 by volume ratio (hereinafter the same) if the mixed solvent is water and ethyl alcohol, and 1: if the mixed solvent is water and glycerin. If it is 1 to 15: 1, or a mixed solvent of water and 1,3-propanediol or 1,3-butylene glycol, it is preferably in the range of 1: 1 to 15: 1. When a solvent other than water or a mixed solvent of water and a solvent other than water is used as the extraction solvent, the solvent other than water is once distilled off by an operation such as concentration before moving to the fermentation step, and then solid. It may be redissolved in water so as to be about 0.01 to 10% as a fraction, or diluted with water and used as a utilization source for fermentation.

上述のように調整した懸濁液又は抽出物溶液の発酵処理に使用する微生物としては以下のものが挙げられる。   Examples of the microorganism used for the fermentation treatment of the suspension or extract solution prepared as described above include the following.

発酵に用いる乳酸菌としては、例えばラクトバシルス プランタラム(Lactobacillus plantarum)、ラクトバシルス ブレビス(L. brevis)、ラクトバシルス カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバチルス・デルブルッキー(Lactobacillus delbrueckii)等のラクトバシルス(Lactobacillus)属の乳酸菌;カルノバクテリウム ディバージェンス(Carnobacterium divergens)、カルノバクテリウム ピシコーラ(Carnobacterium piscicola)等のカルノバクテリウム(Carnobacterium)属の乳酸菌;ロイコノストック メセンテロイズ(Leuconostoc mesenteroides)、ロイコノストック ラクティス(Leuconostoc lactis)、ロイコノストック シトレウム(Leuconostoc citreum)等のロイコノストック(Leuconostoc)属の乳酸菌; ストレプトコッカス フェーカリス(Streptococcus faecalis)、ストレプトコッカス ピオジェネス(Streptococcus pyogenes)等のストレプトコッカス属の乳酸菌;エンテロコッカス カゼリフラバス(Enterococcus caseliflavus)、エンテロコッカス サルフレウス(Enterococcus sulfreus)等のエンテロコッカス(Enterococcus)属の乳酸菌;ラクトコッカス プランタラム(Lactococcus plantarum) ラクトコッカス ラフィノラクティス(Lactococcus rafinolactis)等のラクトコッカス属の乳酸菌;ヴェイセラ コンフューザ(Weissella confusa)、ヴェイセラ カンドウレリ(Weissella kandleri)等のヴェイセラ属の乳酸菌;アトポビウム ミニュタム(Atopobium minutum)、アトポビウム パービュラス(Atopobiumparvulus)等のアトポビウム(Atopobium)属の乳酸菌;バゴコッカス フルビアリス(Vagococcus fluvialis)、バゴコッカス サーモニナラム(Vagococcus salmoninarum)等のバゴコッカス(Vagococcus)属の乳酸菌;ペディオコッカス ダムノサス(Pediococcus damnosus)、ペディオコッカス ペントサセウス(Pediococcus pentosaceus)等のペディオコッカス(Pediococcus)属の乳酸菌等が挙げられる。   Examples of lactic acid bacteria used for fermentation include Lactobacillus plantarum, L. brevis, Lactobacillus casei, Lactobacillus delbrueckii and other Lactobacillus genus Lactobacillus lactic acid bacteria. Lactic acid bacteria of the genus Carnobacterium such as Carnobacterium divergens, Carnobacterium piscicola; Leuconostoc mesenteroides, Leuconostoc lactis, Leuconostoc lactis Leuconostoc lactic acid bacteria such as Leuconostoc citreum; Streptococcus faecalis, Streptococcus piogenes (Streptococcus) lactic acid bacteria of the genus Streptococcus such as pyogenes; lactic acid bacteria of the genus Enterococcus such as Enterococcus caseliflavus and Enterococcus sulfreus; Lactococcus plantaact Lococcus plantaact Lactococcus lactic acid bacteria; Weissella confusa, Weissella kandleri, and other Weissella lactic acid bacteria; Atopobium minutum, Atopobium parvulus, etc. (Vagococcus fluvialis), Lactobacillus of the genus Vagococcus such as Vagococcus salmoninarum; Pediococca Damunosasu (Pediococcus damnosus), include lactic acid bacteria of the Pediococcus (Pediococcus) genus such as Pediococcus pentosaceus (Pediococcus pentosaceus).

本発明において、酵母とは、例えば、サッカロミセス セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)、サッカロミセス アワモリ(Saccharomyces awamori)、サッカロミセス チェバリエリ(Saccharomyces chevalieri)、サッカロミセス カールスバージェンシス(Saccharomyces carlsbergensis)、サッカロミセス バヨナス(Saccharomyces bayonus)等のサッカロミセス属の酵母、ガラクトミセス(Galactomyces)属の酵母、トルラスポラ デルブルエキ(Torulaspora delbruekii)、トルラスポラ ファーメンタチ(Torulaspora fermentati)、トルラスポラ ロゼイ(Torulaspora rosei)等のトルラスポラ属の酵母、ジゴサッカロミセス ローキシ(Zygosaccharomyces rouxii)、ジゴサッカロミセス ソーヤ(Zygosacchar omyces soya)、ジゴサッカロミセス サケ(Zygosaccharomyces sake)、ジゴサッカロミセス ミソ(Zygosaccharomyces miso)、ジゴサッカロミセス ラクティス(Zygosaccharomyces lactis)等のジゴサッカロミセス属の酵母、カンディダ ベルサチリス(Candida versatilis)、カンディダ エチェリシイ(Candida etchellsii)、カンディダ ケフィール(Candida kefyr)、カンディダ サケ(Candida sake)、カンディダ スコッティ(Candida scottii)等のカンディダ属の酵母、オーレオバシディウムプルランス(Aureobasidium Pullulans)、オーレオバシディウム マンソニー(Aureobasidium mansonii)、オーレオバシディウム マイクロスティクタム(Aureobasideium microstictum)等のオーレオバシディウム属の酵母等が挙げられる。また、本発明に係る酵母としては、清酒酵母、ワイン酵母、ビール酵母、植物の花(バラ、ユリ、サクラ等)由来の酵母、海由来の酵母の何れであっても良い。   In the present invention, yeast refers to, for example, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces awamori, Saccharomyces chevalieri, Saccharomyces cerevisias, Yeast of the genus, yeast of the genus Galactomyces, Torulaspora delbruekii, Torulaspora fermentati, Torulaspora rosei, Torulaspora rosey, etc. Zygosaccharomyces soya, Zygosaccharomyces sake, Zygosaccharomyces miso, Digosaccharomyces miso (Zygosaccharomyces lactis) and other yeasts of the genus Gigosaccharomyces, Candida versatilis, Candida etchellsii, Candida kefyr, Candida sake, and Candida scotty (C) Yeasts of the genus Aureobasidium such as Aureobasidium pullulans, Aureobasidium mansonii, Aureobasideium microstictum, etc. . The yeast according to the present invention may be any of sake yeast, wine yeast, beer yeast, plant flower (rose, lily, cherry tree, etc.) yeast, or sea-derived yeast.

発酵に用いる麹菌としては、例えばアスペルギルス オリゼー(Aspergillus oryzae)、アスペルギルス フラバス(Aspergillus flavus)、アスペルギルス ポリオキソジェネス(Aspergillus polyoxogenes)、アスペルギルス ソーヤ(Aspergillus sojae)等の黄麹菌、アスペルギルス アワモリ(Aspergillus awamori)、アスペルギルス カワウチ(Aspergillus kawauchii)、アスペルギルス ウサミ(Aspergillus usami)、アスペルギルス ニガー(Aspergillus niger)等の黒麹菌、モナスカス アンカ(Monascus anka)、モナスカス ピロサス(Monascus pilosus)等の紅麹菌等が挙げられる。   Examples of Aspergillus used for fermentation include Aspergillus oryzae, Aspergillus flavus, Aspergillus polyoxogenes, Aspergillus sojae, Aspergillus aspergillus, Aspergillus aspergillus sperm Examples include Aspergillus kawauchii, Aspergillus usami, Aspergillus niger and other black koji molds, Monascus anka and Monascus pilosus.

発酵に用いる枯草菌(Bacillus subtilis)としては、例えば、バシルス ナットー(Bacillus natto)、バシルス サブチルス(Bacillus subtilis)、バシルス サーキュランス(Bacillus circulans)等が挙げられる。   Examples of Bacillus subtilis used for fermentation include Bacillus natto, Bacillus subtilis, Bacillus circulans, and the like.

上述の懸濁液又は抽出物を微生物により発酵させるときには、発酵工程前に、殺菌を行って発酵の障害となる雑菌を除去することが必要である。この雑菌の殺菌除去方法としては、発酵素材を予め殺菌用エタノール等で洗浄した後無菌水等の無菌溶媒に懸濁する方法を用いてもよく、又発酵素材を溶媒に懸濁した後、懸濁液を加熱殺菌等により殺菌するようにしてもよい。加熱殺菌処理としては、懸濁液を120〜130℃で10〜20分間加熱するオートクレーブ殺菌法や、80〜90℃に60〜120分間保持することを1日1回2〜3日間繰り返す間断殺菌法といった加熱殺菌法が一般に用いられる。   When the above-mentioned suspension or extract is fermented with microorganisms, it is necessary to sterilize the microorganisms before the fermentation step to remove the germs that hinder fermentation. As a method for sterilizing and removing the various bacteria, a method in which the fermentation material is washed with ethanol for sterilization in advance and then suspended in a sterile solvent such as sterile water may be used. The turbid liquid may be sterilized by heat sterilization or the like. As the heat sterilization treatment, the autoclave sterilization method in which the suspension is heated at 120 to 130 ° C. for 10 to 20 minutes, or holding at 80 to 90 ° C. for 60 to 120 minutes is repeated once a day for 2 to 3 days. The heat sterilization method such as the method is generally used.

無菌化した懸濁液を発酵タンクに入れ、これに微生物を植菌して発酵させる。微生物の接種量は10〜10個/mLが適量である。接種量が上記の範囲より多くなっても発酵の進行時間は殆ど変わらず、一方上記の範囲より少なくなると発酵完了までに長時間を要することとなって好ましくない。 The sterilized suspension is placed in a fermentation tank, in which microorganisms are inoculated and fermented. The appropriate amount of inoculated microorganism is 10 7 to 10 8 cells / mL. Even if the inoculation amount exceeds the above range, the fermentation progress time hardly changes. On the other hand, if the inoculation amount is less than the above range, it takes a long time to complete the fermentation.

発酵温度は一般に5〜50℃の範囲、好ましくは各微生物の生育至適温度である20℃〜40℃(例えば、乳酸菌であれば30℃〜40℃、酵母であれば25℃〜30℃)の範囲である。発酵日数は、至適温度に於いて一般に1〜10日、好ましくは2〜5日の範囲である。発酵日数が上記の一般的範囲より短くなると発酵が十分に行われず発酵物の有効性が低下する傾向にあり、一方10日を越えて長くしても有効性のそれ以上の上昇は認められないだけでなく、着色や発酵臭の増加が生ずることとなっていずれも好ましくない。   The fermentation temperature is generally in the range of 5 to 50 ° C., preferably 20 ° C. to 40 ° C., which is the optimum temperature for growth of each microorganism (for example, 30 ° C. to 40 ° C. for lactic acid bacteria, 25 ° C. to 30 ° C. for yeast). Range. The number of days of fermentation is generally in the range of 1 to 10 days, preferably 2 to 5 days, at the optimum temperature. If the fermentation days are shorter than the above general range, the fermentation is not sufficiently performed and the effectiveness of the fermented product tends to be reduced. On the other hand, if the fermentation days are longer than 10 days, no further increase in effectiveness is observed. Not only that, but also coloring and an increase in fermentation odor occur.

ワスレグサ属の植物から抽出物を調製する場合、その安定性、有効性等を向上させるために加水分解処理を行ってもよい。また、発酵物を調製する際にも、対象使用部位の成分が微生物の資化源としてより有効に利用されるようにするため、微生物の植菌前又は同時に前記の懸濁液又は抽出物溶液に対して加水分解処理を行ってもよい。加水分解の処理方法としては、酸、アルカリ又は酵素による処理が挙げられる。   When an extract is prepared from a forget-me-not plant, a hydrolysis treatment may be performed in order to improve its stability, effectiveness, and the like. In addition, when preparing a fermented product, the above suspension or extract solution is used before or simultaneously with inoculation of microorganisms so that the components of the target use site can be used more effectively as a source of microorganism utilization. Hydrolysis treatment may be performed on. Examples of the hydrolysis treatment include acid, alkali or enzyme treatment.

酵素を用いて加水分解処理を行う場合、酵素としては、蛋白分解酵素、澱粉分解酵素、ペクチン質分解酵素、繊維素分解酵素、脂質分解酵素から選ばれた少なくとも1種の酵素が用いることができる。   When the hydrolysis treatment is performed using an enzyme, at least one enzyme selected from a proteolytic enzyme, a amylolytic enzyme, a pectin degrading enzyme, a fibrinolytic enzyme, and a lipolytic enzyme can be used as the enzyme. .

蛋白分解酵素としては、例えば、アクチナーゼ等のアクチナーゼ類、ペプシン等のペプシン類、トリプシン、キモトリプシン等のトリプシン類、パパイン、キモパパイン等のパパイン類、グリシルグリシンペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼ、アミノペプチダーゼ等のペプチダーゼ類、ブロメライン等を用いることができる。   Examples of proteolytic enzymes include actinases such as actinase, pepsins such as pepsin, trypsins such as trypsin and chymotrypsin, papains such as papain and chymopapain, and peptidases such as glycylglycine peptidase, carboxypeptidase and aminopeptidase. Bromelain or the like can be used.

澱粉分解酵素としては、例えば、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、グルコアミラーゼ、β−ガラクトシダーゼ等を用いることができる。   As the starch degrading enzyme, for example, α-amylase, β-amylase, glucoamylase, β-galactosidase and the like can be used.

ペクチン質分解酵素としては、例えば、ペクチンデポリメラーゼ、ペクチンデメトキシラーゼ、ペクチンリアーゼ、ペクチンエステラーゼ、ポリガラクチュロナーゼ等を用いることができる。   Examples of pectin degrading enzymes that can be used include pectin depolymerase, pectin demethoxylase, pectin lyase, pectin esterase, and polygalacturonase.

繊維素分解酵素としては、例えば、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、アガラーゼ、マンナーゼ、キチナーゼ、キトサナーゼ、カラゲナーゼ、アルギナーゼ、フコイダナーゼ、イヌラーゼ、キシラナーゼ、リグニナーゼ等を用いることができる。   Examples of the fibrinolytic enzyme include cellulase, hemicellulase, agarase, mannase, chitinase, chitosanase, carrageenase, arginase, fucoidanase, inulase, xylanase, and ligninase.

脂質分解酵素としては、例えば、リパーゼ、ホスホリパーゼ等を用いることができる。   As the lipolytic enzyme, for example, lipase, phospholipase and the like can be used.

酵素の使用量は、懸濁液中のワスレグサ属植物の固形分に対して、合計で0.01〜10重量%が好ましく、0.1〜1.0重量%がより好ましい。或いはワスレグサ属植物の抽出物の固形分に対して、合計で0.001〜5重量%が好ましく、0.01〜0.5重量%がより好ましい。温度、時間等の処理条件としては、酵素処理を発酵前に行うのであれば、各酵素の至適温度付近で1〜24時間の処理を行うのがよく、一方、発酵と同時に行うのであれば、前記の発酵と同条件が適用される。   The total amount of the enzyme used is preferably 0.01 to 10% by weight, more preferably 0.1 to 1.0% by weight, based on the solid content of the forget-me-not plant in the suspension. Or 0.001 to 5 weight% is preferable in total with respect to solid content of the extract of a forget-me-not plant, and 0.01 to 0.5 weight% is more preferable. As treatment conditions such as temperature and time, if the enzyme treatment is performed before fermentation, the treatment should be performed for about 1 to 24 hours near the optimum temperature of each enzyme. The same conditions as for the fermentation described above apply.

以上の発酵終了後、微生物殺菌のため、又酵素処理を併用した場合であれば微生物の殺菌と酵素の失活を兼ねて、発酵液に70〜100℃で10〜120分程度の加熱殺菌処理を施した後、これをそのまま、或いは一般且つ好適にはろ過或いは遠心分離等の固液分離手段によって液相を分取し、必要ならばpHを通常の化粧料のpH領域であるpH6〜8に調整し、さらに必要ならば希釈若しくは濃縮によって適宜の濃度とした上、化粧料の配合原料として供する。又、場合によっては、固液分離後の液相をスプレードライ法、凍結乾燥法等常法に従って粉末化した上化粧料に配合してもよい。   After the above fermentation, if sterilization of microorganisms is used in combination with microbial sterilization, the sterilization of the fermentation broth is performed at 70 to 100 ° C. for about 10 to 120 minutes for both sterilization of microorganisms and inactivation of enzyme. After that, the liquid phase is separated as it is or generally and preferably by solid-liquid separation means such as filtration or centrifugation, and if necessary, the pH is adjusted to pH 6-8 which is the pH range of ordinary cosmetics. In addition, if necessary, it is adjusted to an appropriate concentration by dilution or concentration and used as a raw material for cosmetics. In some cases, the liquid phase after solid-liquid separation may be blended into a cosmetic after being powdered according to a conventional method such as spray drying or freeze drying.

本発明に係る抽出物又は発酵物は、外用組成物(化粧料、医薬部外品、外用医薬品)、美容用又は健康増進用の飲食品に配合することができる。皮膚外用剤としては、例えば、乳液、クリーム、ローション、エッセンス、パック、口紅、ファンデーション、リクイドファンデーション、メイクアッププレスパウダー、ほほ紅、白粉、洗顔料、ボディシャンプー、頭皮,頭髪用シャンプー、頭髪用コンディショナー、育毛,養毛用のシャンプー又はトニック、石けん等の清浄用化粧料、さらには浴剤等が挙げられるが、本発明はこれらに限定されるものではない。また、美容用又は健康増進用の飲食品としては、美容飲料、栄養ドリンク、スポーツドリンク、ニアウォーター、ビタミン飲料、ミネラル飲料、アルコール飲料等の飲料;各種スープ類(粉末スープも含む)、乳製品、ゼリー、キャンディ、錠菓、ガム等の食品;錠剤、液状、顆粒状又はゼリー状の健康食品・飲料等に配合することができるが、本発明はこれらに限るものではなく、経口摂取できる飲食品等に配合することができる   The extract or fermented product according to the present invention can be blended in a composition for external use (cosmetics, quasi-drugs, and external medicines), and a food or drink for cosmetics or health promotion. Examples of skin external preparations include emulsions, creams, lotions, essences, packs, lipsticks, foundations, liquid foundations, makeup press powders, blushers, white powders, facial cleansers, body shampoos, scalp, hair shampoos, hair conditioners. , Shampoos or tonics for hair growth, hair restoration, and cosmetics for cleaning such as soap, and bath preparations, and the like, but the present invention is not limited thereto. In addition, as food and drink for beauty or health promotion, drinks such as beauty drinks, nutrition drinks, sports drinks, near water, vitamin drinks, mineral drinks, alcoholic drinks; various soups (including powdered soups), dairy products , Jelly, candy, tablet confectionery, gum and other foods; tablets, liquids, granules or jelly-like health foods / beverages, etc., but the present invention is not limited to these and can be taken orally Can be blended into products

本発明に係る抽出物又は発酵物の配合量は、組成物の固形分として、例えば、基礎化粧料の場合は、0.002〜1.0重量%(固形分重量%、以下同じ)の範囲、メイクアップ化粧料の場合は、0.002〜1.0重量%の範囲、又清浄用化粧料の場合は、0.002〜10.0重量%の範囲である。また、毛髪用化粧料の場合は、組成物の固形分として、0.0001〜5.0重量%の範囲である。また、飲食品おける本発明に係る発酵物の配合量は、組成物の固形分として、0.1〜15重量%の範囲が好ましい。   The blending amount of the extract or fermented product according to the present invention is, for example, in the case of a basic cosmetic in the range of 0.002 to 1.0% by weight (solid content% by weight, hereinafter the same) as the solid content of the composition. In the case of makeup cosmetics, the range is 0.002 to 1.0% by weight, and in the case of cleansing cosmetics, the range is 0.002 to 10.0% by weight. Moreover, in the case of hair cosmetics, it is 0.0001 to 5.0 weight% as solid content of a composition. Moreover, the compounding quantity of the fermented material which concerns on this invention in food-drinks has the preferable range of 0.1-15 weight% as solid content of a composition.

本発明に係る抽出物又は発酵物を配合した組成物には、必須成分の発酵物のほかに、通常。皮膚外用剤や飲食品に用いられる成分、例えば、油性成分、界面活性剤(合成系、天然物系)、保湿剤、増粘剤、防腐・殺菌剤、粉体成分、抗酸化剤、キレート剤、pH調整剤、色素、香料等を必要に応じて適宜配合することができる。また、有効性、特長を損なわない限り、他の生理活性成分と組み合わせで使用することも何ら差し支えない。   In addition to the essential fermented product, the composition containing the extract or fermented product according to the present invention is usually used. Ingredients used in external preparations for skin and foods and drinks, for example, oily ingredients, surfactants (synthetic and natural products), moisturizers, thickeners, antiseptic / bactericides, powder ingredients, antioxidants, chelating agents , PH adjusters, pigments, fragrances and the like can be appropriately blended as necessary. Moreover, as long as the effectiveness and characteristics are not impaired, there is no problem even if it is used in combination with other physiologically active ingredients.

ここで、油性成分としては、例えば、ハス油、オリーブ油、ホホバ油、ヒマシ油、大豆油、米油、米糠油、米胚芽油、ヤシ油、カミツレ油、パーム油、カカオ油、メドウフォーム油、ローズヒップ油、ランベンダー油、シアーバター、ティーツリー油、アボガド油、マカデミアナッツ油、植物由来スクワラン等の植物由来の油脂類;ミンク油、タートル油等の動物由来の油脂類;ミツロウ、カルナウバロウ、ライスワックス、ラノリン等のロウ類;流動パラフィン、ワセリン、パラフィンワックス、スクワラン等の炭化水素類;ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、エイコセン酸等の脂肪酸類;ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコール等の高級アルコール類;ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オレイン酸ブチル、2−エチルヘキシルグリセライド、高級脂肪酸オクチルドデシル(ステアリン酸オクチルドデシル等)等の合成エステル類及び合成トリグリセライド類等が挙げられる。   Here, as the oil component, for example, lotus oil, olive oil, jojoba oil, castor oil, soybean oil, rice oil, rice bran oil, rice germ oil, coconut oil, chamomile oil, palm oil, cacao oil, meadow foam oil, Oils derived from plants such as rosehip oil, lambender oil, sheer butter, tea tree oil, avocado oil, macadamia nut oil, plant-derived squalane; oils derived from animals such as mink oil and turtle oil; beeswax, carnauba wax, rice Waxes such as wax and lanolin; hydrocarbons such as liquid paraffin, petrolatum, paraffin wax and squalane; fatty acids such as myristic acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, isostearic acid and eicosenoic acid; lauryl alcohol, cetanol, Higher alcohols such as stearyl alcohol; Isopro myristate Le, isopropyl palmitate, butyl oleate, 2-ethylhexyl glycerides, synthetic esters and synthetic triglycerides such as higher fatty acid octyldodecyl (octyl stearate dodecyl and the like), and the like.

界面活性剤としては、例えば、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル等の非イオン界面活性剤;脂肪酸塩、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレン脂肪アミン硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル燐酸塩、α−スルホン化脂肪酸アルキルエステル塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル燐酸塩等のアニオン界面活性剤;第四級アンモニウム塩、第一級〜第三級脂肪アミン塩、トリアルキルベンジルアンモニウム塩、アルキルピリジニウム塩、2−アルキル−1−アルキル−1−ヒドロキシエチルイミダゾリニウム塩、N,N−ジアルキルモルフォルニウム塩、ポリエチレンポリアミン脂肪酸アミド塩等のカチオン界面活性剤;N,N−ジメチル−N−アルキル−N−カルボキシメチルアンモニオベタイン、N,N,N−トリアルキル−N−アルキレンアンモニオカルボキシベタイン、N−アシルアミドプロピル−N′,N′−ジメチル−N′−β−ヒドロキシプロピルアンモニオスルホベタイン等の両性界面活性剤等を使用することができる。   As the surfactant, for example, polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene fatty acid ester, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, glycerin fatty acid ester, polyglycerin fatty acid ester, polyoxyethylene glycerin fatty acid ester, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, Nonionic surfactants such as polyoxyethylene sorbitol fatty acid esters; fatty acid salts, alkyl sulfates, alkylbenzene sulfonates, polyoxyethylene alkyl ether sulfates, polyoxyethylene fatty amine sulfates, polyoxyethylene alkyl phenyl ether sulfates , Polyoxyethylene alkyl ether phosphate, α-sulfonated fatty acid alkyl ester salt, polyoxyethylene alkyl phenyl ether phosphate, etc. Surfactant; quaternary ammonium salt, primary to tertiary fatty amine salt, trialkylbenzylammonium salt, alkylpyridinium salt, 2-alkyl-1-alkyl-1-hydroxyethylimidazolinium salt, N, Cationic surfactants such as N-dialkylmorphonium salts and polyethylene polyamine fatty acid amide salts; N, N-dimethyl-N-alkyl-N-carboxymethylammoniobetaine, N, N, N-trialkyl-N-alkylene Amphoteric surfactants such as ammoniocarboxybetaine and N-acylamidopropyl-N ′, N′-dimethyl-N′-β-hydroxypropylammoniosulfobetaine can be used.

乳化剤又は乳化助剤としては、酵素処理ステビア等のステビア誘導体、サポニン又はその誘導体、カゼイン又はその塩(ナトリウム等)、糖と蛋白質の複合体、ショ糖又はそのエステル、ラクトース、大豆由来の水溶性多糖、大豆由来蛋白質と多糖の複合体、ラノリン又はその誘導体、コレステロール、ステビア誘導体(ステビア酵素処理物等)、ケイ酸塩(アルミニウム、マグネシウム等)、炭酸塩(カルシウム、ナトリウム等)、サポニン及びその誘導体、レシチン及びその誘導体(水素添加レシチン等)、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類(麦類、豆類、雑穀等)等を配合することもできる。   Examples of emulsifiers or emulsifiers include stevia derivatives such as enzyme-treated stevia, saponins or derivatives thereof, casein or salts thereof (sodium, etc.), sugar-protein complexes, sucrose or esters thereof, lactose, soybean-derived water-soluble Polysaccharides, soy-derived protein and polysaccharide complex, lanolin or derivatives thereof, cholesterol, stevia derivatives (stevia enzyme-treated products, etc.), silicates (aluminum, magnesium, etc.), carbonates (calcium, sodium, etc.), saponins and their Derivatives, lecithin and derivatives thereof (hydrogenated lecithin, etc.), lactic acid bacteria fermented rice, lactic acid bacteria fermented rice, lactic acid bacteria fermented cereals (wheat, legumes, millet, etc.) and the like can also be blended.

保湿剤としては、例えば、グリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、キシリトール、ピロリドンカルボン酸ナトリウム等があり、さらにトレハロース等の糖類、ムコ多糖類(例えば、ヒアルロン酸及びその誘導体、コンドロイチン及びその誘導体、ヘパリン及びその誘導体等)、エラスチン及びその誘導体、コラーゲン及びその誘導体、NMF関連物質、乳酸、尿素、高級脂肪酸オクチルドデシル、海藻抽出物、シラン根(白及)抽出物、各種アミノ酸及びそれらの誘導体が挙げられる。   Examples of the humectant include glycerin, propylene glycol, dipropylene glycol, 1,3-butylene glycol, polyethylene glycol, sorbitol, xylitol, sodium pyrrolidonecarboxylate, and saccharides such as trehalose, mucopolysaccharides (for example, Hyaluronic acid and derivatives thereof, chondroitin and derivatives thereof, heparin and derivatives thereof, elastin and derivatives thereof, collagen and derivatives thereof, NMF related substances, lactic acid, urea, higher fatty acid octyldodecyl, seaweed extract, silane root (white and white) ) Extracts, various amino acids and their derivatives.

増粘剤としては、例えば、アルギン酸、寒天、カラギーナン、フコイダン等の褐藻、緑藻又は紅藻由来成分;シラン根(白及)抽出物;ペクチン、ローカストビーンガム、アロエ多糖体、アルカリゲネス産生多糖体等の多糖類;キサンタンガム、トラガントガム、グアーガム等のガム類;カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等のセルロース誘導体;ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸・メタクリル酸共重合体等の合成高分子類;ヒアルロン酸及びその誘導体;ポリグルタミン酸及びその誘導体等が挙げられる。   Examples of thickeners include, for example, brown algae such as alginic acid, agar, carrageenan, fucoidan, green algae, or red algae; silane root (white) extract; pectin, locust bean gum, aloe polysaccharide, alkaline-genes-producing polysaccharide, etc. Polysaccharides such as xanthan gum, tragacanth gum and guar gum; cellulose derivatives such as carboxymethylcellulose and hydroxyethylcellulose; synthetic polymers such as polyvinyl alcohol, polyvinylpyrrolidone, carboxyvinyl polymer and acrylic acid / methacrylic acid copolymer; hyaluron Examples include acid and derivatives thereof; polyglutamic acid and derivatives thereof.

防腐・殺菌剤としては、例えば、尿素;パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチル等のパラオキシ安息香酸エステル類;フェノキシエタノール、ジクロロフェン、ヘキサクロロフェン、塩酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、サリチル酸、エタノール、ウンデシレン酸、フェノール類、ジャマール(イミダゾデイニールウレア)、ポリリン酸、プロパンジオール、1,2−ペンタンジオール、各種精油類、樹皮乾留物、大根発酵液、サトウキビ等の植物由来のエタノール又は1,3−ブチレングリコール等がある。   Examples of the antiseptic / bactericidal agent include urea; paraoxybenzoates such as methyl paraoxybenzoate, ethyl paraoxybenzoate, propyl paraoxybenzoate, and butyl paraoxybenzoate; phenoxyethanol, dichlorophene, hexachlorophene, chlorhexidine hydrochloride, chloride Benzalkonium, salicylic acid, ethanol, undecylenic acid, phenols, jamal (imidazodenyl urea), polyphosphoric acid, propanediol, 1,2-pentanediol, various essential oils, dry bark, radish fermented liquor, sugarcane, etc. There are plant-derived ethanol and 1,3-butylene glycol.

粉体成分としては、例えば、セリサイト、酸化チタン、タルク、カオリン、ベントナイト、酸化亜鉛、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、酸化ジルコニウム、硫酸バリウム、無水ケイ酸、雲母、ナイロンパウダー、ポリエチレンパウダー、シルクパウダー、セルロース系パウダー、穀類(米、麦、トウモロコシ、キビ等)のパウダー、豆類(大豆、小豆等)のパウダー等がある。   Examples of the powder component include sericite, titanium oxide, talc, kaolin, bentonite, zinc oxide, magnesium carbonate, magnesium oxide, zirconium oxide, barium sulfate, silicic anhydride, mica, nylon powder, polyethylene powder, silk powder, Cellulose powder, grains (rice, wheat, corn, millet, etc.) powder, beans (soybean, red beans, etc.) powder, and the like.

紫外線吸収剤としては、例えば、パラアミノ安息香酸エチル、パラジメチルアミノ安息香酸エチルヘキシル、サリチル酸アミル及びその誘導体、パラメトキシ桂皮酸2−エチルヘキシル、桂皮酸オクチル、オキシベンゾン、2,4−ジヒドロキシベンゾフェノン、2−ヒドロキシ−4−メトキシベンゾフェノン−5−スルホン酸塩、4−ターシャリーブチル−4−メトキシベンゾイルメタン、2−(2−ヒドロキシ−5−メチルフェニル)ベンゾトリアゾール、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、アロエ抽出物等がある。   Examples of the ultraviolet absorber include ethyl paraaminobenzoate, ethylhexyl paradimethylaminobenzoate, amyl salicylate and derivatives thereof, 2-ethylhexyl paramethoxycinnamate, octyl cinnamate, oxybenzone, 2,4-dihydroxybenzophenone, 2-hydroxy- 4-methoxybenzophenone-5-sulfonate, 4-tertiarybutyl-4-methoxybenzoylmethane, 2- (2-hydroxy-5-methylphenyl) benzotriazole, urocanic acid, ethyl urocanate, aloe extract, etc. is there.

抗酸化剤としては、例えば、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、ムラサキシキブの抽出物、シラン根の抽出物、シャクヤク抽出物、ビタミンE及びその誘導体(例えば、ビタミンEニコチネート、ビタミンEリノレート等)等がある。   Antioxidants include, for example, butylhydroxyanisole, butylhydroxytoluene, propyl gallate, murasakixibub extract, silane root extract, peony extract, vitamin E and its derivatives (eg, vitamin E nicotinate, vitamin E linoleate) Etc.).

キレート剤としては、例えば、エチレンジアミンヒドロキシエチル三酢酸三ナトリウム、エデト酸又はその塩類、グルコン酸、フィチン酸、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、ヒドロキシエタンジホスホン酸四ナトリウム等がある。   Examples of the chelating agent include trisodium ethylenediaminehydroxyethyl triacetate, edetic acid or a salt thereof, gluconic acid, phytic acid, sodium polyphosphate, sodium metaphosphate, tetrasodium hydroxyethane diphosphonate, and the like.

pH調整剤としては、例えば、クエン酸又はその塩類、乳酸又はその塩類、グリコール酸、コハク酸、塩酸、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等がある。   Examples of the pH adjuster include citric acid or a salt thereof, lactic acid or a salt thereof, glycolic acid, succinic acid, hydrochloric acid, monoethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, sodium hydroxide, potassium hydroxide and the like.

美白剤としては、例えば、t−シクロアミノ酸誘導体、コウジ酸及びその誘導体、アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノン又はその誘導体、エラグ酸及びその誘導体、ニコチン酸及びその誘導体、レゾルシノール誘導体、トラネキサム酸及びその誘導体、4−メトキシサリチル酸カリウム塩、マグノリグナン(5,5'−ジプロピル−ビフェニル−2,2’−ジオール)、ヒドロキシ安息香酸及びその誘導体、ビタミンE及びその誘導体、α−ヒドロキシ酸、AMP(アデノシンモノホスフェイト、アデノシン1リン酸)が挙げられ、これらを単独で配合しても、複数を組み合わせて配合しても良い。   Examples of whitening agents include t-cycloamino acid derivatives, kojic acid and derivatives thereof, ascorbic acid and derivatives thereof, hydroquinone or derivatives thereof, ellagic acid and derivatives thereof, nicotinic acid and derivatives thereof, resorcinol derivatives, tranexamic acid and derivatives thereof 4-methoxysalicylic acid potassium salt, magnolignan (5,5′-dipropyl-biphenyl-2,2′-diol), hydroxybenzoic acid and its derivatives, vitamin E and its derivatives, α-hydroxy acid, AMP (adenosine mono) Phosphate, adenosine monophosphate), and these may be blended singly or in combination.

上記のコウジ酸誘導体としては、例えば、コウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸ジブチレート等のコウジ酸エステル類、コウジ酸エーテル類、コウジ酸グルコシド等のコウジ酸糖誘導体等が、アスコルビン酸誘導体としては、例えばL−アスコルビン酸−2−リン酸エステルナトリウム、L−アスコルビン酸−2−リン酸エステルマグネシウム、L−アスコルビン酸−2−硫酸エステルナトリウム、L−アスコルビン酸−2−硫酸エステルマグネシウム等のアスコルビン酸エステル塩類、L−アスコルビン酸−2−グルコシド、L−アスコルビン酸−5−グルコシド、アスコルビルトコフェリルマレイン酸、アスコルビルトコフェリルリン酸K、ミリスチル3−グリセリルアスコルビン酸、カプリリル2−グリセリルアスコルビン酸等のアスコルビン酸糖誘導体、それらアスコルビン酸糖誘導体の6位アシル化物(アシル基は、ヘキサノイル基、オクタノイル基、デカノイル基等)、L−アスコルビン酸テトライソパルミチン酸エステル、L−アスコルビン酸テトララウリン酸エステル等のL−アスコルビン酸テトラ脂肪酸エステル類、3−O−エチルアスコルビン酸、L−アスコルビン酸−2−リン酸−6−O−パルミテートナトリウム、グリセリルアスコルビン酸又はそのアシル化誘導体、ビスグリセリルアスコルビン酸等のアスコルビン酸グルセリン誘導体、L−アスコルビン酸リン酸アミノプロピル、L−アスコルビン酸のヒアルロン酸誘導体、3−O−Dラクトース−L−アスコルビン酸、イソステアリルアスコルビルリン酸塩等が、ハイドロキノン誘導体としては、アルブチン(ハイドロキノン−β−D−グルコピラノシド)、α−アルブチン(ハイドロキノン−α−D−グルコピラノシド)等が、トラネキサム酸誘導体としては、トラネキサム酸エステル(例えば、トラネキサム酸ラウリルエステル、トラネキサム酸ヘキサデシルエステル、トラネキサム酸セチルエステル又はその塩)、トラネキサム酸のアミド体(例えば、トラネキサム酸メチルアミド)等が挙げられ、レゾルシノール誘導体としては、例えば、4−n−ブチルレゾルシノール、4−イソアミルレゾルシノール等が、2,5−ジヒドロキシ安息香酸誘導体としては、例えば2,5−ジアセトキシ安息香酸、2−アセトキシ−5−ヒドロキシ安息香酸、2−ヒドロキシ−5−プロピオニルオキシ安息香酸等が、ニコチン酸誘導体としては、例えばニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等が、α−ヒドロキシ酸としては、例えば乳酸、リンゴ酸、コハク酸、クエン酸、α−ヒドロキシオクタン酸等がある。   Examples of the kojic acid derivative include kojic acid monobutyrate, kojic acid monocaprate, kojic acid monopalmitate, kojic acid esters such as kojic acid dibutyrate, kojic acid ethers, and kojic acid sugar derivatives such as kojic acid glucoside. As the ascorbic acid derivative, for example, L-ascorbic acid-2-phosphate sodium, L-ascorbic acid-2-phosphate magnesium, L-ascorbic acid-2-sulfate sodium, L-ascorbic acid- Ascorbic acid ester salts such as 2-sulfate magnesium, L-ascorbic acid-2-glucoside, L-ascorbic acid-5-glucoside, ascorbyl tocopheryl maleic acid, ascorbyl tocopheryl phosphate K, myristyl 3-glyceryl ascorbic acid Ascorbic acid sugar derivatives such as caprylyl 2-glyceryl ascorbic acid, 6-position acylated products of these ascorbic acid sugar derivatives (acyl groups are hexanoyl group, octanoyl group, decanoyl group, etc.), L-ascorbic acid tetraisopalmitate, L -L-ascorbic acid tetrafatty acid esters such as ascorbyl tetralaurate, 3-O-ethylascorbic acid, L-ascorbic acid-2-phosphate-6-O-palmitate sodium, glyceryl ascorbic acid or acyl thereof Derivatives, ascorbyl glycerol derivatives such as bisglyceryl ascorbic acid, aminopropyl phosphate L-ascorbate, hyaluronic acid derivatives of L-ascorbic acid, 3-OD lactose-L-ascorbic acid, isostearyl ascorbyl Examples of hydroquinone derivatives include phosphates such as arbutin (hydroquinone-β-D-glucopyranoside), α-arbutin (hydroquinone-α-D-glucopyranoside), and tranexamic acid derivatives such as tranexamic acid esters (for example, tranexam). Acid lauryl ester, tranexamic acid hexadecyl ester, tranexamic acid cetyl ester or a salt thereof), amides of tranexamic acid (for example, tranexamic acid methylamide) and the like. Examples of resorcinol derivatives include 4-n-butylresorcinol, Examples of 2,5-dihydroxybenzoic acid derivatives such as 4-isoamylresorcinol include 2,5-diacetoxybenzoic acid, 2-acetoxy-5-hydroxybenzoic acid, and 2-hydroxy-5-propionylol. Examples of nicotinic acid derivatives include nicotinic acid amide and benzyl nicotinate, and examples of α-hydroxy acids include lactic acid, malic acid, succinic acid, citric acid, and α-hydroxyoctanoic acid. .

生理活性成分としては、例えば、胎盤抽出液、ソウハクヒ抽出物、ユキノシタ抽出物、シソ抽出物、米糠抽出物又はその加水分解物、白芥子抽出物又はその加水分解物、白芥子の発酵物、シャクヤク抽出物又はその加水分解物、乳酸菌醗酵米、ムラサキシキブ抽出物、ハスの花の抽出物、ハス種子抽出物又はその加水分解物、ハス種子発酵物、ハトムギ加水分解物、ハトムギ種子発酵物、ローヤルゼリー発酵物、酒粕抽出物又はそれに含まれるセラミド、酒粕発酵物、パンダヌス・アマリリフォリウス(Pandanus amaryllifolius Roxb.)抽出物、アルカンジェリシア・フラバ(Arcangelicia flava Merrilli)抽出物、カミツレ抽出物等が挙げられる。また、サンゴ草抽出物、イネの葉の抽出物又はその加水分解物、ナス(ハス、長ナス、賀茂ナス、米ナス等)抽出物又はその加水分解物、アンズ果実の抽出物、カタメンキリンサイ等の海藻の抽出物、アマモ等の海産顕花植物の抽出物、豆乳発酵物、クラゲ水、米抽出物又はその加水分解物、米醗酵エキス、発芽米抽出物又はその加水分解物、発芽米発酵物、黒豆抽出物又はその加水分解物、ダマスクバラの花の抽出物、タケノコの皮の抽出物、リノール酸及びその誘導体若しくは加工物(例えばリポソーム化リノール酸等)、動物又は魚由来のコラーゲン及びその誘導体、エラスチン及びその誘導体、グリチルリチン酸及びその誘導体(ジカリウム塩等)、t−シクロアミノ酸誘導体、ビタミンA及びその誘導体、アラントイン、ジイソプロピルアミンジクロロアセテート、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸、ゲンチアナ抽出物、甘草抽出物、ニンジン抽出物、オタネニンジン抽出物又はその発酵物、紅参抽出物、ミツイシコンブ抽出物、ヘチマ抽出物、アナアオサ抽出物、モモ抽出物、桃仁抽出物、キウイ抽出物、ヒマワリ抽出物、ジュアゼイロ(Zizyphus joazeiro)抽出物、パウダルコ樹皮抽出物、ハイビスカスの花抽出物または発酵物、ハゴロモグサ抽出物、チェリモヤ抽出物、マンゴー抽出物、マンゴスチン抽出物、フノリ抽出物、烏龍茶抽出物、紅富貴抽出物、シラン抽出物、山椒果皮又は種皮の抽出物または加水分解物、ベニバナ花抽出物、カサブランカ抽出物、甘藷抽出物又はその発酵物、グアバ葉抽出物、ドクダミ抽出物、晩白柚抽出物、アロエ抽出物、イチジク花抽出物、リンゴ抽出物、ホワイトアスパラガス抽出物等がある。   Examples of the physiologically active component include placenta extract, Sakuhakuhi extract, Yukinoshita extract, perilla extract, rice bran extract or hydrolyzate thereof, white coconut extract or hydrolyzate thereof, fermented white coconut, peony Extract or hydrolyzate thereof, lactic acid bacteria fermented rice, murasakixikib extract, lotus flower extract, lotus seed extract or hydrolyzate thereof, lotus seed fermented product, pearl hydrolyzate, pearl seed fermented product, royal jelly fermentation Products, sake lees extract or ceramides contained therein, fermented sake lees, Pandanus amaryllifolius Roxb. Extract, Arcangelicia flava Merrilli extract, chamomile extract and the like. Also, coral grass extract, rice leaf extract or hydrolyzate thereof, eggplant (lotus, long eggplant, Kamo eggplant, rice eggplant etc.) extract or hydrolyzate thereof, apricot fruit extract, catamen giraffe, etc. Seaweed extract of sea urchin, extract of marine flowering plant such as sea cucumber, fermented soymilk, jellyfish water, rice extract or hydrolyzate thereof, rice fermented extract, germinated rice extract or hydrolyzate thereof, germinated rice fermented , Black bean extract or hydrolyzate thereof, damask rose flower extract, bamboo shoot peel extract, linoleic acid and its derivatives or processed products (eg liposomal linoleic acid), animal or fish-derived collagen and Derivatives thereof, elastin and derivatives thereof, glycyrrhizic acid and derivatives thereof (dipotassium salts, etc.), t-cycloamino acid derivatives, vitamin A and derivatives thereof, allantoin, diisopropyl Pyramine dichloroacetate, γ-amino-β-hydroxybutyric acid, gentian extract, licorice extract, carrot extract, ginseng extract or fermented product thereof, red ginseng extract, beetroot extract, loofah extract, anaasa extract , Peach extract, Peach extract, Kiwi extract, Sunflower extract, Zizyphus joazeiro extract, Paudarco bark extract, Hibiscus flower extract or fermented product, Hagoromogusa extract, Cherimoya extract, Mango extract , Mangosteen extract, Funori extract, Oolong tea extract, Benifumi extract, Silane extract, Extract of yam peel or seed coat or hydrolysate, Safflower flower extract, Casablanca extract, Sweet potato extract or fermented product thereof , Guava leaf extract, dokudami extract, evening birch extract, aloe extract, fig flower extract , Apple extract, there is a white asparagus extract or the like.

次に、製造例、試験例及び実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。なお以下に於いて、部はすべて重量部を、又%はすべて重量%を意味する。   Next, the present invention will be described more specifically with reference to production examples, test examples, and examples, but the present invention is not limited thereto. In the following, all parts are by weight, and all% are by weight.

製造例1.発酵物の調製(1)
ホンカンゾウの花部の細切物150gに精製水1500g、セルラーゼ1.5g及びペクチナーゼ1.5gを混合し、40℃で3時間抽出および酵素分解処理を行った後、80℃で1時間加熱し、酵素を失活させた。さらに、ここに得られた抽出懸濁液を加熱殺菌した。この抽出懸濁液に乳酸菌(ラクトバシルス プランタラム)を10個/mL接種し、窒素気流下に37℃で3日間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、脱臭、脱色処理を行い、褐色透明の溶液1123g(固形分濃度4.22%)を得た。これを精製水で3倍希釈し、乳酸菌発酵物溶液とした。
Production Example 1 Preparation of fermented product (1)
Purified water 1500 g, cellulase 1.5 g and pectinase 1.5 g were mixed with 150 g of Honkan elephant flower parts, extracted for 3 hours at 40 ° C. and subjected to enzymatic degradation, then heated at 80 ° C. for 1 hour, The enzyme was deactivated. Furthermore, the extract suspension obtained here was sterilized by heating. This extract suspension was inoculated with 10 8 cells / mL of lactic acid bacteria (Lactobacillus plantarum), and left to stand at 37 ° C. for 3 days under a nitrogen stream. After culturing, the mixture was sterilized by heating, and the culture broth was filtered to perform deodorization and decolorization treatment to obtain 1123 g of a brown transparent solution (solid content concentration: 4.22%). This was diluted 3 times with purified water to obtain a lactic acid bacteria fermentation product solution.

製造例2.発酵物の調製(2)
製造例1のホンカンゾウに代えて、ヤブカンゾウを用いる他は製造例1と同様にして、乳酸菌発酵物溶液1163g(固形分濃度4.01%)を得た。
Production Example 2 Preparation of fermented product (2)
1163 g (solid content concentration: 4.01%) of a lactic acid bacteria fermented product solution was obtained in the same manner as in Production Example 1 except that yak licorice was used in place of Honkaku of Production Example 1.

製造例3.発酵物の調製(3)
製造例1のホンカンゾウに代えて、ニッコウキスゲを用いる他は製造例1と同様にして、乳酸菌発酵物溶液1208g(固形分濃度4.13%)を得た。
Production Example 3 Preparation of fermented product (3)
1208 g (solid content concentration 4.13%) of a lactic acid bacteria fermented product solution was obtained in the same manner as in Production Example 1 except that Nikkokisuge was used in place of Honkanzo in Production Example 1.

製造例4.発酵物の調製(4)
製造例1のラクトバシルス プランタラムに代えて乳酸菌(ロイコノストック ラクティス)を用いる他は製造例1と同様にして、乳酸菌発酵物溶液1133g(固形分濃度4.31%)を得た。
Production Example 4 Preparation of fermented product (4)
1133 g (solid content concentration 4.31%) of a lactic acid bacteria fermented product solution was obtained in the same manner as in Production Example 1 except that lactic acid bacteria (Leuconostoc lactis) were used instead of Lactobacillus plantarum of Production Example 1.

製造例5.発酵物の調製(5)
ホンカンゾウの花部の細切物150gに精製水1500g、セルラーゼ1.5g及びペクチナーゼ1.5gを混合し、40℃で3時間抽出および酵素分解処理を行った後、80℃で1時間加熱し、酵素を失活させた。さらに、ここに得られた抽出懸濁液を加熱殺菌した。この抽出懸濁液に酵母(サッカロミセス セレビシエ)を10個/mL接種し、窒素気流下に30℃で3日間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、脱臭、脱色処理を行い、褐色透明の酵母発酵物溶液1108g(固形分濃度3.91%)を得た。これを精製水で3倍に希釈し、酵母発酵物溶液とした。
Production Example 5 Preparation of fermented product (5)
Purified water 1500 g, cellulase 1.5 g and pectinase 1.5 g were mixed with 150 g of Honkan elephant flower parts, extracted for 3 hours at 40 ° C. and subjected to enzymatic degradation, then heated at 80 ° C. for 1 hour, The enzyme was deactivated. Furthermore, the extract suspension obtained here was sterilized by heating. This extract suspension was inoculated with 10 8 cells / mL of yeast (Saccharomyces cerevisiae) and statically cultured at 30 ° C. for 3 days under a nitrogen stream. After completion of the culture, the mixture was sterilized by heating, and the culture broth was filtered to perform deodorization and decoloration treatment to obtain 1108 g of a brown transparent yeast fermented product solution (solid content concentration: 3.91%). This was diluted 3 times with purified water to obtain a yeast fermented product solution.

製造例6.発酵物の調製(6)
製造例5のサッカロミセス セレビシエに代えて酵母(カンディダ ベルサチリス)を用いる他は製造例5と同様にして、酵母発酵物溶液1203g(固形分濃度3.76%)を得た。
Production Example 6 Preparation of fermented product (6)
1203 g of yeast fermented product solution (solid content concentration: 3.76%) was obtained in the same manner as in Production Example 5 except that yeast (Candida versachiris) was used instead of Saccharomyces cerevisiae in Production Example 5.

製造例7.発酵物の調製(7)
製造例5のホンカンゾウに代えてヤブカンゾウを用いる他は製造例5と同様にして、酵母発酵物溶液1158g(固形分濃度3.69%)を得た。
Production Example 7 Preparation of fermented product (7)
1158 g of yeast fermented product solution (solid content concentration: 3.69%) was obtained in the same manner as in Production Example 5 except that yak licorice was used instead of Honkaku of Production Example 5.

製造例8.発酵物の調製(8)
製造例5のホンカンゾウに代えてニッコウキスゲを用いる他は製造例5と同様にして、酵母発酵物溶液1120g(固形分濃度3.74%)を得た。
Production Example 8 Preparation of fermented product (8)
1120 g (solid content concentration: 3.74%) of a yeast fermented product solution was obtained in the same manner as in Production Example 5 except that Nikkokisuge was used instead of Honkanzo in Production Example 5.

製造例9.発酵物の調製(9)
ホンカンゾウの花部の細切物150gに精製水1500g、セルラーゼ1.5g及びペクチナーゼ1.5gを混合し、40℃で3時間抽出および酵素分解処理を行った後、80℃で1時間加熱し、酵素を失活させた。さらに、ここに得られた抽出懸濁液を加熱殺菌した。この抽出懸濁液に麹菌(アスペルギルス オリゼー)を10個/mL接種し、窒素気流下に30℃で3日間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、脱臭、脱色処理を行い、褐色透明の麹菌発酵物溶液1083g(固形分濃度4.35%)を得た。これを精製水で3倍に希釈し、麹菌発酵物溶液とした。
Production Example 9 Preparation of fermented product (9)
Purified water 1500 g, cellulase 1.5 g and pectinase 1.5 g were mixed with 150 g of Honkan elephant flower parts, extracted for 3 hours at 40 ° C. and subjected to enzymatic degradation, then heated at 80 ° C. for 1 hour, The enzyme was deactivated. Furthermore, the extract suspension obtained here was sterilized by heating. The koji mold (Aspergillus oryzae) on the extracted suspension was inoculated 10 8 / mL, and allowed to stand for 3 days incubation at 30 ° C. under a stream of nitrogen. After completion of the culture, the mixture was sterilized by heating, and the culture solution was filtered to perform deodorization and decolorization treatment to obtain 1083 g (solid content concentration: 4.35%) of a brown transparent gonococcal fermentation product solution. This was diluted 3 times with purified water to obtain a koji mold fermented product solution.

製造例10.発酵物の調製(10)
ホンカンゾウの花部の細切物150gに精製水1500g、セルラーゼ1.5g及びペクチナーゼ1.5gを混合し、40℃で3時間抽出および酵素分解処理を行った後、80℃で1時間加熱し、酵素を失活させた。さらに、ここに得られた抽出懸濁液を加熱殺菌した。この抽出懸濁液に枯草菌(バシルス ナットー)を10個/mL接種し、窒素気流下に30℃で3日間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、脱臭、脱色処理を行い、褐色透明の枯草菌発酵物溶液1233g(固形分濃度4.15%)を得た。これを精製水で3倍に希釈し、枯草菌発酵物溶液とした。
Production Example 10 Preparation of fermented product (10)
Purified water 1500 g, cellulase 1.5 g and pectinase 1.5 g were mixed with 150 g of Honkan elephant flower parts, extracted for 3 hours at 40 ° C. and subjected to enzymatic degradation, then heated at 80 ° C. for 1 hour, The enzyme was deactivated. Furthermore, the extract suspension obtained here was sterilized by heating. The extract suspension Bacillus subtilis (Bacillus Natto) were inoculated 10 8 cells / mL in and allowed to stand for 3 days incubation at 30 ° C. under a stream of nitrogen. After completion of the culture, the mixture was sterilized by heating, and the culture solution was filtered to perform deodorization and decolorization treatment to obtain 1233 g (solid content concentration 4.15%) of a brown transparent Bacillus subtilis fermentation product. This was diluted 3 times with purified water to obtain a Bacillus subtilis fermentation product solution.

製造例11.発酵物の調製(11)
製造例1の花部に代えて、地上部(花部を含む)の細切物を用いて抽出懸濁溶液を調製する他は製造例1と同様にして全草の乳酸菌発酵物溶液(固形分濃度3.58%)を得た。
Production Example 11 Preparation of fermented product (11)
Instead of the flower part of Production Example 1, the whole suspension of lactic acid bacteria fermented solution (solid) was prepared in the same manner as in Production Example 1 except that an extract suspension was prepared using a cut portion of the ground part (including the flower part). A partial concentration of 3.58%).

製造例12.抽出物の調製
ホンカンゾウの花部の細切物150gに精製水1500g、セルラーゼ1.5g及びペクチナーゼ1.5gを混合し、40℃で3時間抽出および酵素分解処理を行った後、80℃で1時間加熱し、酵素を失活させた。さらに、ここに得られた抽出懸濁液を加熱殺菌して褐色透明の溶液(固形分濃5.82%)を得た。これを精製水で5倍に希釈し、抽出物溶液とした。
Production Example 12. Preparation of Extracts 150 g of Honkan elephant flower parts were mixed with 1500 g of purified water, 1.5 g of cellulase and 1.5 g of pectinase, extracted at 40 ° C. for 3 hours, and subjected to enzymatic degradation treatment. The enzyme was inactivated by heating for a period of time. Further, the extract suspension thus obtained was sterilized by heating to obtain a brown transparent solution (solid content concentration: 5.82%). This was diluted 5 times with purified water to obtain an extract solution.

製造例13.抽出物の調製
ヤブカンゾウの花部の細切物150gに精製水1500g、セルラーゼ1.5g及びペクチナーゼ1.5gを混合し、40℃で3時間抽出および酵素分解処理を行った後、80℃で1時間加熱し、酵素を失活させた。さらに、ここに得られた抽出懸濁液を加熱殺菌して褐色透明の溶液(固形分濃5.62%)を得た。これを精製水で5倍に希釈し、抽出物溶液とした。
Production Example 13 Preparation of extract After mixing 1500 g of purified water, 1.5 g of cellulase, and 1.5 g of pectinase with 150 g of shredded flower of Aedes albopictus, extraction and enzymatic degradation treatment were performed at 40 ° C. for 3 hours, and then 1 The enzyme was inactivated by heating for a period of time. Furthermore, the extract suspension obtained here was sterilized by heating to obtain a brown transparent solution (solid content concentration: 5.62%). This was diluted 5 times with purified water to obtain an extract solution.

処方例1.化粧水
[成分] 部
ホホバ油 1.0
ポリオキシエチレン(5.5)セチルアルコール 5.0
ブチルパラベン 0.1
製造例1の発酵物 5.0
グリセリン 5.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が100部となる量
香料 適量
Formulation Example 1 Lotion [Ingredients] part Jojoba oil 1.0
Polyoxyethylene (5.5) cetyl alcohol 5.0
Butylparaben 0.1
Fermented product of Production Example 1 5.0
Glycerin 5.0
1,3-butylene glycol 5.0
Potassium hydroxide appropriate amount Purified water Amount to make 100 parts in total Perfume Appropriate amount

処方例2.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例2の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 2 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1 except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 2 was used instead of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 1.

処方例3.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例3の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 3 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1 except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 3 was used instead of the fermented product of Production Example 1 contained in Formulation Example 1.

処方例4.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例4の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 4 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1 except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 4 was used instead of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 1.

処方例5.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例5の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 5 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1 except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 5 was used instead of the fermented product of Production Example 1 contained in Formulation Example 1.

処方例6.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例6の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 6 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1 except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 6 was used instead of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 1.

処方例7.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例7の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 7 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1, except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 7 was used instead of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 1.

処方例8.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例8の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 8 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1, except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 8 was used instead of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 1.

処方例9.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例9の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 9 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1 except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 9 was used instead of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 1.

処方例10.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例10の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 10 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1, except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 10 was used instead of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 1.

処方例11.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例11の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 11 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1, except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 11 was used instead of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 1.

処方例12.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例12の抽出物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 12. Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1 except that 5.0 parts of the extract of Production Example 12 was used instead of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 1.

処方例13.化粧水
処方例1に含まれる製造例1の発酵物に代えて、製造例13の抽出物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
Formulation Example 13 Lotion Toner lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 1, except that 5.0 parts of the extract of Production Example 13 was used instead of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 1.

処方例14.乳液
[成分] 部
流動パラフィン 6.0
ヘキサラン 4.0
ホホバ油 1.0
ハス精油 0.025
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 1.0
親油型ステアリン酸グリセリル 1.0
水添大豆レシチン 1.5
製造例1の発酵物 3.0
L−アスコルビン酸 2−グルコシド 2.0
水酸化カリウム 0.5
グリセリン 3.0
1,3−ブチレングリコール 2.0
カルボキシメチルセルロース 0.3
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
水溶性コラーゲン 0.1
精製水 全量が100部となる量
香料 適量
Formulation Example 14. Latex [Ingredients] part Liquid paraffin 6.0
Hexalan 4.0
Jojoba oil 1.0
Lotus essential oil 0.025
Polyoxyethylene (20) sorbitan monostearate 1.0
Lipophilic glyceryl stearate 1.0
Hydrogenated soybean lecithin 1.5
Fermented product of Production Example 1 3.0
L-ascorbic acid 2-glucoside 2.0
Potassium hydroxide 0.5
Glycerin 3.0
1,3-butylene glycol 2.0
Carboxymethylcellulose 0.3
Sodium hyaluronate 0.01
Water-soluble collagen 0.1
Purified water Total amount of 100 parts Perfume Suitable amount

処方例15.乳液
処方例14に含まれる製造例1の発酵物3.0部に代えて製造例5の発酵物3.0部を用いるほかは処方例14と同様にして乳液を得た。
Formulation Example 15. Emulsion An emulsion was obtained in the same manner as in Formulation Example 14 except that 3.0 parts of the fermented product of Production Example 5 was used instead of 3.0 parts of the fermented product of Production Example 1 included in Formulation Example 14.

処方例16.乳液
処方例14に含まれるL−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてトラネキサム酸2.0部を用いるほかは処方例14と同様にして乳液を得た。
Formulation Example 16. Emulsion An emulsion was obtained in the same manner as in Formulation Example 14 except that 2.0 parts of tranexamic acid was used instead of 2.0 parts of L-ascorbic acid-2-glucoside and 0.5 part of potassium hydroxide contained in Formulation Example 14. It was.

処方例17.乳液
処方例14に含まれるL−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてアルブチン3.0部を用いるほかは処方例14と同様にして乳液を得た。
Formulation Example 17. Emulsion An emulsion was obtained in the same manner as in Formulation Example 14 except that 3.0 parts of arbutin was used instead of 2.0 parts of L-ascorbic acid-2-glucoside and 0.5 part of potassium hydroxide contained in Formulation Example 14. .

処方例18.乳液
処方例14に含まれるL−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてニコチン酸アミド5.0部を用いるほかは処方例14と同様にして乳液を得た。
Formulation Example 18. Emulsion The emulsion was prepared in the same manner as in Formulation Example 14 except that 5.0 parts of nicotinamide was used instead of 2.0 parts of L-ascorbic acid-2-glucoside and 0.5 parts of potassium hydroxide contained in Formulation Example 14. Obtained.

処方例19.乳液
[成分] 部
スクワラン 3.0
ベヘニルアルコール 3.0
ヘキサラン 4.0
ホホバ油 1.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 1.0
グリセリン脂肪酸エステル 1.0
大豆レシチン 1.5
製造例1の発酵物 5.0
L−アスコルビン酸 2−グルコシド 2.0
水酸化カリウム 0.5
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1
グリセリン 3.0
1,3−ブチレングリコール 2.0
水溶性コラーゲン 0.1
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
精製水 全量が100部となる量
Formulation Example 19. Emulsion [Ingredients] part squalane 3.0
Behenyl alcohol 3.0
Hexalan 4.0
Jojoba oil 1.0
Polyoxyethylene (20) sorbitan monostearate 1.0
Glycerin fatty acid ester 1.0
Soy lecithin 1.5
Fermented product of Production Example 1 5.0
L-ascorbic acid 2-glucoside 2.0
Potassium hydroxide 0.5
Dipotassium glycyrrhizinate 0.1
Glycerin 3.0
1,3-butylene glycol 2.0
Water-soluble collagen 0.1
Sodium hyaluronate 0.01
Amount of purified water totaling 100 parts

処方例20.乳液
処方例19に含まれるグリチルリチン酸ジカリウム1.0部に代えてトラネキサム酸1.0部を用いるほかは処方例19と同様にして乳液を得た。
Formulation Example 20. Emulsion An emulsion was obtained in the same manner as in Formulation Example 19 except that 1.0 part of tranexamic acid was used instead of 1.0 part of dipotassium glycyrrhizinate contained in Formulation Example 19.

処方例21.ローション
[成分] 部
製造例2の発酵物 10.0
エタノール 10.0
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
メチルパラベン 0.2
クエン酸 0.1
クエン酸ナトリウム 0.3
カルボキシビニルポリマー 0.1
キサンタンガム 0.1
グアーガム 0.1
香料 適量
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が100部となる量
Formulation Example 21. Lotion [Component] part Fermented product of Production Example 2 10.0
Ethanol 10.0
Glycerin 3.0
1,3-butylene glycol 2.0
Methylparaben 0.2
Citric acid 0.1
Sodium citrate 0.3
Carboxyvinyl polymer 0.1
Xanthan gum 0.1
Guar gum 0.1
Perfume Appropriate amount Potassium hydroxide Appropriate amount Purified water Amount to make 100 parts in total

処方例22.ローション
処方例21の成分中製造例2の発酵物に代えて製造例3の発酵物10.0部を用いるほかは処方例21と同様にしてローションを得た。
Formulation Example 22. Lotion A lotion was obtained in the same manner as in Formulation Example 21, except that 10.0 parts of the fermented product of Production Example 3 was used instead of the fermented product of Production Example 2 among the ingredients of Formulation Example 21.

処方例23.エッセンス
[成分] 部
エタノール 2.0
グリセリン 5.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
メチルパラベン 0.1
ヒアルロン酸 0.1
加水分解ヒアルロン酸液 0.1
製造例4の発酵物 5.0
クエン酸 0.3
クエン酸ナトリウム 0.6
精製水 全量が100部となる量
Formulation Example 23. Essence [Ingredients] part Ethanol 2.0
Glycerin 5.0
1,3-butylene glycol 5.0
Methylparaben 0.1
Hyaluronic acid 0.1
Hydrolyzed hyaluronic acid solution 0.1
Fermented product of Production Example 4 5.0
Citric acid 0.3
Sodium citrate 0.6
Amount of purified water totaling 100 parts

実施例24.リキッドファンデーション
[成分] 部
ステアリン酸 2.4
モノステアリン酸プロピレングリコール 2.0
セトステアリルアルコール 0.2
液状ラノリン 2.0
流動パラフィン 3.0
ミリスチン酸イソプロピル 8.5
プロピルパラベン 0.05
製造例6の発酵物 5.0
カルボキシメチルセルロースナトリウム 0.2
ベントナイト 0.5
プロピレングリコール 4.0
トリエタノールアミン 1.1
メチルパラベン 0.1
精製水 全量が100部となる量
酸化チタン 8.0
タルク 4.0
着色顔料 適量
Example 24. Liquid foundation [ingredient] part Stearic acid 2.4
Propylene glycol monostearate 2.0
Cetostearyl alcohol 0.2
Liquid lanolin 2.0
Liquid paraffin 3.0
Isopropyl myristate 8.5
Propylparaben 0.05
Fermented product of Production Example 6 5.0
Sodium carboxymethylcellulose 0.2
Bentonite 0.5
Propylene glycol 4.0
Triethanolamine 1.1
Methylparaben 0.1
Purified water Amount to be 100 parts Titanium oxide 8.0
Talc 4.0
Coloring pigment appropriate amount

処方例25.ボディシャンプー
[成分] 部
N−ラウロイルメチルアラニンナトリウム 25.0
ヤシ油脂肪酸カリウム液(40%) 26.0
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 3.0
メチルパラベン 0.1
製造例7の発酵物 5.0
1,3−ブチレングリコール 2.0
精製水 全量が100部となる量
Formulation Example 25. Body shampoo [ingredient] part N-lauroylmethylalanine sodium 25.0
Palm oil fatty acid potassium liquid (40%) 26.0
Palm oil fatty acid diethanolamide 3.0
Methylparaben 0.1
Fermented product of Production Example 7 5.0
1,3-butylene glycol 2.0
Amount of purified water totaling 100 parts

処方例26.ヘアシャンプー
[成分] 部
N−ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム 10.0
ポリオキシエチレン(3)アルキルエーテル硫酸ナトリウム 20.0
ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン 10.0
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 4.0
メチルパラベン 0.1
クエン酸 0.1
製造例1の発酵物 2.0
1,3−ブチレングリコール 2.0
精製水 全量が100部となる量
Formulation Example 26. Hair shampoo [ingredient] part N-coconut oil fatty acid methyl taurine sodium 10.0
Polyoxyethylene (3) sodium alkyl ether sulfate 20.0
Lauryldimethylaminoacetic acid betaine 10.0
Palm oil fatty acid diethanolamide 4.0
Methylparaben 0.1
Citric acid 0.1
Fermented product of Production Example 1 2.0
1,3-butylene glycol 2.0
Amount of purified water totaling 100 parts

実施例27.ヘアコンディショナー
[成分] 部
ポリオキシエチレン(10)硬化ヒマシ油 1.0
塩化ジステアリルジメチルアンモニウム 1.5
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム 2.0
2−エチルヘキサン酸グリセリル 1.0
セタノール 3.2
ステアリルアルコール 1.0
メチルパラベン 0.1
製造例5の発酵物 2.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
精製水 全量が100部となる量
Example 27. Hair conditioner [ingredient] part polyoxyethylene (10) hydrogenated castor oil 1.0
Distearyldimethylammonium chloride 1.5
Stearyltrimethylammonium chloride 2.0
Glyceryl 2-ethylhexanoate 1.0
Cetanol 3.2
Stearyl alcohol 1.0
Methylparaben 0.1
Fermented product of Production Example 5 2.0
1,3-butylene glycol 5.0
Amount of purified water totaling 100 parts

処方例28.育毛剤
[成分] 部
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1
モノニトログアヤコールナトリウム 0.02
塩酸ピリドキシン 0.03
l−メントール 0.8
タマサキツヅラフジ根エキス 0.3
褐藻エキス 0.3
オタネニンジンエキス 0.3
センブリエキス 2.0
製造例1の発酵物 5.0
トリメチルグリシン 0.5
乳酸 0.2
1,3−ブチレングリコール 10.0
フェノキシエタノール 0.2
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.4
L−アルギニン 適量
エタノール 20.0
精製水 全量が100部となる量
Formulation Example 28. Hair restorer [ingredient] part dipotassium glycyrrhizinate 0.1
Mononitroguaiacol sodium 0.02
Pyridoxine hydrochloride 0.03
l-Menthol 0.8
Japanese cypress raft root extract 0.3
Brown algae extract 0.3
Panax ginseng extract 0.3
Assembly extract 2.0
Fermented product of Production Example 1 5.0
Trimethylglycine 0.5
Lactic acid 0.2
1,3-butylene glycol 10.0
Phenoxyethanol 0.2
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil 0.4
L-arginine appropriate amount ethanol 20.0
Amount of purified water totaling 100 parts

処方例29.育毛剤
処方例28に含まれる製造例1の発酵物に代えて製造例5の発酵物5.0部を用いるほかは処方例28と同様にして育毛剤を得た。
Formulation Example 29. Hair restorer A hair restorer was obtained in the same manner as in Formulation Example 28 except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 5 was used instead of the fermented product of Production Example 1 contained in Formulation Example 28.

処方例30.育毛剤
処方例28に含まれる製造例1の発酵物に代えて製造例9の発酵物5.0部を用いるほかは処方例28と同様にして育毛剤を得た。
Formulation Example 30. Hair restorer A hair restorer was obtained in the same manner as in Formulation Example 28 except that 5.0 parts of the fermented product of Production Example 9 was used instead of the fermented product of Production Example 1 contained in Formulation Example 28.

処方例31.育毛剤
処方例28に含まれる製造例1の発酵物に代えて製造例12の抽出物5.0部を用いるほかは処方例28と同様にして育毛剤を得た。
Formulation Example 31. Hair restorer A hair restorer was obtained in the same manner as in Formulation Example 28 except that 5.0 parts of the extract of Production Example 12 was used instead of the fermented product of Production Example 1 contained in Formulation Example 28.

試験例1.XVII型コラーゲン遺伝子発現の評価試験
正常ヒト表皮細胞を増殖添加剤含有HuMediaKG2[クラボウ社製]にて6×105個/mLに調製し、φ6cmシャーレに1mLを播種して、5%CO2、飽和水蒸気下、37℃で培養した。24時間培養後、さらに、試料溶液として製造例1〜10の発酵物及び製造例12〜13の抽出物を含む培養液(培養液全量に対して溶液として終濃度が1%となるように試料溶液を添加したもの)を添加して培養した。また、比較対照として、試料溶液に代えて、PBS(-)溶液のみを含んだ培養液(培養液全量に対するPBS(-)の終濃度を1%に調整したもの)を添加した試験区(コントロール区)を設定した。24時間培養後、それぞれの試験区の細胞をTrizol試薬(Invitrogen社製)1mLで回収した。回収した細胞に対してクロロホルム(和光純薬工業社製)200μL添加して撹拌混合し遠心分離機(TOMY社製/MX-160)で15,000rpm、4℃の条件下で15分間遠心分離した後、水層のみを400μL分取した。回収した水層にイソプロパノール(和光純薬工業社製)500μLを添加して撹拌混合し、15,000rpm、4℃の条件下で15分間遠心分離してtotalRNAの沈殿物を得た。totalRNAに75%エタノールを1mL添加して撹拌して洗浄し、15,000rpm、4℃条件下で15分間遠心分離して沈殿を回収した。回収したtotal RNAを所定のキット(PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)[タカラバイオ社製])を用いて逆転写反応し、cDNAを合成した。合成したcDNAをサンプルとして、Thermal Cycler Dice(登録商標)Real Time System Single(タカラバイオ社製)、及びSYBR(登録商標)Premix Ex TaqTM II(Perfect Real Time)[タカラバイオ社製]を用いて、XVII型コラーゲン遺伝子の発現と、内部標準物質βアクチン遺伝子の発現の検出を行った。ここで、βアクチンは、ハウスキーピング遺伝子(多くの組織や細胞中に共通して一定量発現する遺伝子であって、常に発現され,細胞の維持,増殖に不可欠な遺伝子である)の一つであり、発現量が常に一定とされていることから、PCRの実験では内部標準として用いられるものである。試験結果は、βアクチン遺伝子の発現量を一定とした場合の、それぞれの試験区でのXVII型コラーゲン遺伝子の発現量を比較した。本試験系においては、コントロール区のそれぞれの遺伝子の発現量を100としたときの他の試験区でのその遺伝子の発現量の相対値を求めた。
Test Example 1 XVII type collagen gene expression evaluation test Normal human epidermal cells were prepared to 6 × 10 5 cells / mL with HuMediaKG2 (Kurabo) containing growth additives, 1 mL was seeded in a φ6 cm dish, 5% CO 2 , The cells were cultured at 37 ° C under saturated steam. After culturing for 24 hours, a culture solution containing the fermented product of Production Examples 1 to 10 and the extract of Production Examples 12 to 13 as a sample solution The solution was added) and cultured. In addition, as a comparative control, instead of the sample solution, a test group to which a culture solution containing only the PBS (-) solution (the final concentration of PBS (-) with respect to the total amount of the culture solution was adjusted to 1%) was added (control). Ward). After culturing for 24 hours, the cells in each test group were collected with 1 mL of Trizol reagent (Invitrogen). 200 μL of chloroform (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) is added to the collected cells, stirred and mixed, and then centrifuged at 15,000 rpm, 4 ° C. for 15 minutes with a centrifuge (TOMY / MX-160) Only 400 μL of the aqueous layer was collected. To the recovered aqueous layer, 500 μL of isopropanol (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added, mixed with stirring, and centrifuged at 15,000 rpm at 4 ° C. for 15 minutes to obtain a total RNA precipitate. 1 mL of 75% ethanol was added to totalRNA, stirred and washed, and centrifuged at 15,000 rpm under 4 ° C. for 15 minutes to collect a precipitate. The recovered total RNA was subjected to reverse transcription using a predetermined kit (PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) [manufactured by Takara Bio Inc.]) to synthesize cDNA. Using the synthesized cDNA as a sample, Thermal Cycler Dice (registered trademark) Real Time System Single (manufactured by Takara Bio Inc.), and SYBR (registered trademark) Premix Ex TaqTM II (Perfect Real Time) [manufactured by Takara Bio Inc.] Expression of type XVII collagen gene and expression of internal standard β-actin gene were detected. Here, β-actin is one of housekeeping genes (a gene that is expressed in a certain amount in common in many tissues and cells and is always expressed and essential for cell maintenance and proliferation). Since the expression level is always constant, it is used as an internal standard in PCR experiments. As a test result, the expression level of the type XVII collagen gene in each test section was compared when the expression level of β-actin gene was constant. In this test system, the relative value of the expression level of each gene in other test plots when the expression level of each gene in the control plot was set to 100 was determined.

試験例1の結果を表1に示す。
[表1]
The results of Test Example 1 are shown in Table 1.
[Table 1]

表1に示すように、本発明に係る抽出物及び発酵物は、格段にすぐれたXVII型コラーゲン遺伝子の発現亢進効果を有することを確認した。   As shown in Table 1, it was confirmed that the extract and the fermented product according to the present invention had an excellent expression enhancing effect on the type XVII collagen gene.

試験例2.ナトリウム依存性ビタミンCトランスポーター(SVCT)合成促進効果
正常ヒト表皮メラニン細胞を増殖添加剤含有DermaLife(登録商標)[クラボウ社製]にて1×105個/mLに調製し、96穴マイクロプレートに100μLずつ播種して、5%炭酸ガス、飽和水蒸気下、37℃で培養した。24時間後、製造例1の発酵物1〜11及び製造例12〜13の抽出物を試料溶液として含んだ培養液を追添加しさらに培養した。ここで、試料溶液は、培養液に対する溶液としての終濃度が1.0%,2.0%となるように調製した。また、コントロールとして、試料溶液に代えてPBS(-)を含んだ培養液を追添加した対照区を設定した。なお、PBS(-)は、試料溶液と同様に溶液としての培養液に対して終濃度1.0%、2.0%となるように調製した。48時間後、培養上清を除去して、PBS(-)を200μLずつ添加して除去し、次に10%トリクロロ酢酸(和光純薬社)を50μLずつ添加して冷温下で30分間インキュベートした後、上清を除去した。PBS(-)を100μL用いて洗浄し、0.2%Triton-X含有PBS(-)を50μLずつ添加して室温下で1時間インキュベートをした。上清を除去して8%牛血清アルブミン(SIGMA社)含有PBS(-)を50μLずつ添加して室温下で2時間インキュベートした。上清を除去し0.2%Triton-X含有PBS(-)を100μL用いて洗浄し、抗SVCTマウスモノクローナル抗体(Santa Cruz社)を50μLずつ添加して冷温下で24時間インキュベートした。上清を除去し0.2%Triton-X含有PBS(-)100μLを用いて洗浄を3回繰り返した。Alexa Fluor 488抗マウス二次抗体(Life Technologies社)を50μL添加して室温下、暗所にて2時間インキュベートした。上清を除去し0.2%Triton-X含有PBS(-)100μLを用いて洗浄を3回繰り返し、PBS(-)を100μLずつ添加して蛍光プレートリーダー(大日本製薬社)を用いてEx485/Em520における蛍光強度を測定した。対照区の測定値に対する蛍光強度の相対値をSVCT合成率(%)とした。
Test Example 2 Sodium-dependent vitamin C transporter (SVCT) synthesis promoting effect Normal human epidermal melanocytes are prepared to 1 × 10 5 cells / mL with DermaLife (registered trademark) [manufactured by Kurabo Industries Inc.] containing growth additives, 96-well microplate 100 μL each was seeded and cultured at 37 ° C. in 5% carbon dioxide gas and saturated steam. After 24 hours, a culture solution containing the fermented products 1 to 11 of Production Example 1 and the extracts of Production Examples 12 to 13 as sample solutions was further added and further cultured. Here, the sample solution was prepared so that the final concentration as a solution with respect to the culture solution was 1.0% and 2.0%. As a control, a control group was set in which a culture solution containing PBS (−) was added instead of the sample solution. PBS (-) was prepared so as to have final concentrations of 1.0% and 2.0% with respect to the culture medium as a solution in the same manner as the sample solution. After 48 hours, the culture supernatant was removed, 200 μL of PBS (−) was added and removed, and then 50 μL of 10% trichloroacetic acid (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added and incubated at cold temperature for 30 minutes. Thereafter, the supernatant was removed. The plate was washed with 100 μL of PBS (−), 50 μL of PBS (−) containing 0.2% Triton-X was added, and incubated at room temperature for 1 hour. After removing the supernatant, 50 μL of PBS (−) containing 8% bovine serum albumin (SIGMA) was added and incubated at room temperature for 2 hours. The supernatant was removed, washed with 100 μL of 0.2% Triton-X-containing PBS (−), 50 μL of anti-SVCT mouse monoclonal antibody (Santa Cruz) was added and incubated at cold temperature for 24 hours. The supernatant was removed, and washing was repeated 3 times using 100 μL of 0.2% Triton-X-containing PBS (−). 50 μL of Alexa Fluor 488 anti-mouse secondary antibody (Life Technologies) was added and incubated at room temperature for 2 hours in the dark. The supernatant was removed, and washing was repeated 3 times using 100 μL of 0.2% Triton-X-containing PBS (−). 100 μL of PBS (−) was added and Ex485 / Em520 was added using a fluorescent plate reader (Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd.). The fluorescence intensity was measured. The relative value of the fluorescence intensity with respect to the measured value in the control group was defined as the SVCT synthesis rate (%).

試験例2の結果を表2に示す。
[表2]

The results of Test Example 2 are shown in Table 2.
[Table 2]

試験例3.過酸化脂質抑制効果
0.5Mリノール酸エタノール1.0mL、0.2Mリン酸緩衝液(pH7.0)10mL及びエタノール9.0mLを混合し、充分撹拌した。この混合液に、製造例1〜11の発酵物及び製造例12〜13の抽出物を試料溶液として5.0mLを加えて充分撹拌し、試料溶液を調製した。ここで、試料溶液としては、その全量に対する試料溶液の終濃度(溶液としての濃度)がそれぞれ1.0%,2.0%となるように調製した2種の濃度のものを使用した。この試料溶液の調製直後、さらに1日間、2日間、5日間、8日間、40℃に放置したものに対して、それぞれ0.1mL、75%エタノール4.7mL、30%チオシアン酸アンモニウム溶液0.1mL、及び0.02M塩化第一鉄の3.5%塩酸溶液0.1mLを加えて充分に混合撹拌したのち、3分後の波長500nmにおける吸光度を測定した。また。コントロールとして1,3−ブチレングリコールの30%水溶液についても同様の試験を行い、本試験系での過酸化脂質生成量を、調製直後の値を差し引いた波長500nmにおける吸光度の増加量で表した。
Test Example 3 Lipid peroxide inhibitory effect
0.5 mL ethanol linoleate 1.0 mL, 0.2 M phosphate buffer (pH 7.0) 10 mL and ethanol 9.0 mL were mixed and stirred thoroughly. To this mixed solution, 5.0 mL of the fermented products of Production Examples 1 to 11 and the extracts of Production Examples 12 to 13 as sample solutions were added and stirred sufficiently to prepare sample solutions. Here, as the sample solution, those having two concentrations prepared so that the final concentration (concentration as a solution) of the sample solution with respect to the total amount was 1.0% and 2.0%, respectively, were used. Immediately after the preparation of this sample solution, the samples were left at 40 ° C. for 1 day, 2 days, 5 days, 8 days, 0.1 mL, 4.7% of 75% ethanol, 0.1 mL of 30% ammonium thiocyanate solution, and After adding 0.1 mL of a 3.5% hydrochloric acid solution of 0.02M ferrous chloride and thoroughly mixing and stirring, the absorbance at a wavelength of 500 nm was measured after 3 minutes. Also. As a control, a similar test was performed on a 30% aqueous solution of 1,3-butylene glycol, and the amount of lipid peroxide produced in this test system was expressed as an increase in absorbance at a wavelength of 500 nm after subtracting the value immediately after preparation.

試験例3の結果を表3に示す。
[表3]
The results of Test Example 3 are shown in Table 3.
[Table 3]

表3に示すように、本発明に係る発酵物は、格段にすぐれた過酸化脂質抑制効果を有することが確認された。   As shown in Table 3, it was confirmed that the fermented product according to the present invention has an excellent lipid peroxide inhibiting effect.

Claims (5)

ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物又はその抽出物を乳酸菌、麹菌又は納豆菌で発酵させて得られる発酵物を有効成分とする皮膚外用組成物。   A composition for external application of skin, comprising as an active ingredient a fermented product obtained by fermenting a plant belonging to the genus Hemerocallis or its extract with lactic acid bacteria, koji molds or natto bacteria. ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物又はその抽出物を酵母で発酵させて得られる発酵物を有効成分とする美白用組成物。   A whitening composition comprising as an active ingredient a fermented product obtained by fermenting a plant belonging to the genus Hemerocallis or an extract thereof in yeast. ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物又はその抽出物を酵母で発酵させて得られる発酵物を有効成分とする保湿用組成物。   A moisturizing composition comprising as an active ingredient a fermented product obtained by fermenting a plant belonging to the genus Hemerocallis or an extract thereof with yeast. ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物又はその抽出物、或いは当該植物又はその抽出物を乳酸菌、酵母、麹菌又は納豆菌で発酵させて得られる発酵物を有効成分とする毛髪化粧料用組成物。   A composition for hair cosmetics comprising as an active ingredient a plant belonging to the genus Hemerocallis or an extract thereof, or a fermented product obtained by fermenting the plant or an extract thereof with lactic acid bacteria, yeast, koji mold or natto bacteria. . ユリ科ワスレグサ属(Hemerocallis)に属する植物の水溶性溶媒抽出物を有効成分とする皮膚外用組成物。   An external composition for skin comprising a water-soluble solvent extract of a plant belonging to the genus Hemerocallis.
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