JP2018185160A - 血液検体の分析方法、分析装置及びコンピュータプログラム - Google Patents

Abstract

【課題】トロンビンを添加した血液検体から取得される凝固波形に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得可能な手段を提供することを課題とする。【解決手段】血液検体にトロンビン含有試薬を添加して凝固波形を取得し、凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値を取得し、取得したパラメータの値に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得することにより、上記の課題を解決する。【選択図】なし

Description

本発明は、血液検体の分析方法に関する。また、本発明は、血液検体分析装置及びコンピュータプログラムに関する。

フィブリノゲンは、凝固第Ｉ因子とも呼ばれ、生体内でフィブリン血栓の形成に関与する。フィブリノゲンは、トロンビンの作用によりフィブリンとなる。このフィブリンは、活性化凝固第XIII因子の作用により、強固な安定化フィブリンとなって、フィブリン血栓が形成される。フィブリノゲンは、出血性疾患の診断及び予後の判定に重要であるだけでなく、血栓症のリスク因子としても重要な指標となる。

フィブリノゲンの測定法には、トロンビン時間法(Clauss法)、塩析沈殿法、免疫比濁法などがあるが、利便性やコストなどの観点からClauss法が広く利用されている。また、Clauss法に適したトロンビン含有試薬やフィブリノゲン測定用キットも市販されている。Clauss法は、所定量のトロンビンによってフィブリノゲンがフィブリンへ転化する時間がフィブリノゲン濃度に依存することを利用して、フィブリノゲンの活性を測定する方法である。Clauss法では、濃度既知のフィブリノゲン標準液の測定結果から検量線を作成することにより、血液検体におけるフィブリノゲンの活性濃度を取得することもできる。

Clauss法は、自動血液凝固測定装置に適用可能である点でも好まれている。例えば、特許文献１には、血液検体分析装置により凝固時間を測定して、フィブリノゲンの濃度を取得することが開示されている。特許文献１でいうフィブリノゲンの濃度は、フィブリノゲンの活性濃度である。

特開2007-107889号公報

Clauss法で得られるフィブリノゲンの活性濃度は、血液検体中のフィブリノゲンの機能が正常であると仮定した場合のフィブリノゲン濃度である。そのため、活性濃度が低値であるとき、その原因が、フィブリノゲンのタンパク質としての量(抗原量)の減少であるか、又はフィブリノゲンの活性の異常であるかを別途確かめる必要がある。これは、いずれの原因により活性濃度が低下しているかによって、疑われる疾患が異なるからである。フィブリノゲンの抗原量の減少が原因であれば、フィブリノゲン欠損症や低フィブリノゲン血症が疑われる。フィブリノゲンの活性の異常が原因であれば、フィブリノゲン異常症が疑われる。

従来、フィブリノゲンの抗原量は、ラテックス凝集法などの免疫学的測定によって測定される。しかし、施設によっては、Clauss法による凝固時間の測定は行っているが、免疫学的測定は取り扱っていないことがある。そのため、トロンビンを添加した血液検体の凝固時間の測定に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得可能な手段の開発が望まれる。

本発明者らは、トロンビン時間法(Clauss法)による凝固波形を微分して得られるパラメータの値及び凝固波形から得られる総反応時間が、ラテックス凝集法により測定されたフィブリノゲンの抗原量とよく相関することを見出して、本発明を完成した。

本発明の第１の態様は、血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、該血液検体を凝固させて凝固波形を取得する工程と、該凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値を取得する工程と、該パラメータの値に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得する工程とを含む、血液検体の分析方法を提供する。

本発明の第２の態様は、血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、該血液検体を凝固させて凝固波形を取得する工程と、該凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値と、凝固時間とを取得する工程と、取得した該パラメータの値と該凝固時間とに基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得する工程とを含む、血液検体の分析方法を提供する。

本発明の第３の態様は、血液検体と、トロンビン含有試薬とを含む測定試料を調製し、調製された測定試料から凝固波形を取得する測定部と、該凝固波形に基づいてフィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得する情報取得部とを備え、該情報取得部が、該測定部により取得された凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値を取得し、取得した該パラメータの値に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得する、血液検体分析装置を提供する。

本発明の第４の態様は、血液検体と、トロンビン含有試薬とを含む測定試料を調製し、調製された測定試料から凝固波形を取得する測定部と、該凝固波形に基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得する情報取得部とを備え、該情報取得部が、該測定部により取得された凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値と、凝固時間とを取得し、取得した該パラメータの値と該凝固時間に基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得する、血液検体分析装置を提供する。

本発明の第５の態様は、コンピュータが読み取り可能な媒体に記録されているコンピュータプログラムであって、血液検体と、トロンビン含有試薬とを含む測定試料から取得された凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値を取得するステップと、取得した該パラメータの値に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得するステップとをコンピュータに実行させる、血液検体の分析のためのコンピュータプログラムを提供する。

本発明の第６の態様は、コンピュータが読み取り可能な媒体に記録されているコンピュータプログラムであって、血液検体と、トロンビン含有試薬とを含む測定試料から取得された凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値と、凝固時間とを取得するステップと、取得した該パラメータの値と該凝固時間に基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得するステップとをコンピュータに実行させる、血液検体の分析のためのコンピュータプログラムを提供する。

本発明の第７の態様は、血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、該血液検体を凝固させて凝固波形を取得する工程と、該凝固波形に基づいて、該凝固波形を構成する測定値の変化がなくなるまでの総反応時間を取得する工程と、該総反応時間に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得する工程とを含む、血液検体の分析方法を提供する。

本発明の第８の態様は、血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、該血液検体を凝固させて凝固波形を取得する工程と、該凝固波形に基づいて、該凝固波形を構成する測定値の変化がなくなるまでの総反応時間と、凝固時間とを取得する工程と、該総反応時間と該凝固時間とに基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得する工程とを含む、血液検体の分析方法を提供する。

本発明によれば、凝固波形の微分に関するパラメータ又は総反応時間に基づいて、血液検体におけるフィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得することが可能になる。

正常血漿とトロンビン含有試薬を含む測定試料の透過光強度を測定して得られる凝固波形の一例である。 正常血漿の凝固波形とその１次微分及び２次微分のグラフの一例である。 凝固波形において凝固反応が終了した時点を決定する方法１を説明する図面である。 凝固波形において凝固反応が終了した時点を決定する方法２を説明する図面である。 凝固波形において凝固反応が終了した時点を決定する方法３を説明する図面である。 血液検体分析装置の全体構成を示す斜視図である。 血液検体分析装置の測定装置の内部を上側から見た場合の平面図である。 血液検体分析装置の測定装置の構成を示す図である。 血液検体分析装置の制御装置の構成を示す図である。 血液検体分析装置の検出部の断面図である。 血液検体分析装置による血液検体の測定処理を示すフローチャートである。 血液検体分析装置による血液検体の分析処理を示すフローチャートである。 血液検体分析装置による血液検体の分析処理を示すフローチャートである。 血液検体分析装置による血液検体の分析処理を示すフローチャートである。 血液検体分析装置による分析結果を表示する画面の一例を示す図である。 正常血漿における、|min 1|と、ラテックス免疫アッセイ(LIA)で測定したフィブリノゲンの抗原量との相関を示したグラフである。 正常血漿における、|max 2|と、LIAで測定したフィブリノゲンの抗原量との相関を示したグラフである。 正常血漿における、総反応時間と、LIAで測定したフィブリノゲンの抗原量との相関を示したグラフである。 ビリルビン-Ｆを含む検体における活性濃度(Clauss)、|min 1|及び|max 2|の値の変動を示すグラフである。 ビリルビン-Ｃを含む検体における活性濃度(Clauss)、|min 1|及び|max 2|の値の変動を示すグラフである。 ヘモグロビンを含む検体における活性濃度(Clauss)、|min 1|及び|max 2|の値の変動を示すグラフである。 乳びを含む検体における活性濃度(Clauss)、|min 1|及び|max 2|の値の変動を示すグラフである。

[１．フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得するための血液検体の分析方法]
上述のとおり、本発明者らは、凝固波形の微分に関するパラメータの値と総反応時間が、ラテックス凝集法により測定されたフィブリノゲンの抗原量とよく相関することを見出している。以下に、凝固波形の微分に関するパラメータの値を用いる第１の態様と、総反応時間を用いる第７の態様について説明する。

第１及び第７の態様に係る血液検体の分析方法では、まず、血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、該血液検体を凝固させて凝固波形を取得する。

血液検体としては、全血及び血漿が挙げられるが、好ましくは血漿である。血液検体には、凝固検査に通常用いられる公知の抗凝固剤が添加されていてもよい。そのような抗凝固剤としては、例えばクエン酸３ナトリウムが挙げられる。必要に応じて、血液検体を、オーレンベロナール緩衝液などの適当な緩衝液で希釈してもよい。トロンビン含有試薬を添加する前に、血液検体を予め凝固反応に適した温度(例えば36℃以上38℃以下)まで加温してもよい。

血液検体によっては、乳び、ビリルビンなどが多く含まれることがある。また、溶血により、多量のヘモグロビンが血液検体中に含まれることもある。乳び、ビリルビン、ヘモグロビンなどの物質は、血液凝固の光学的測定に影響を及ぼす干渉物質として知られている。しかし、本発明者らは、凝固波形の微分に関するパラメータ及び総反応時間が干渉物質の影響を受けにくいことを見出している。特に、凝固波形の微分に関するパラメータの値は、干渉物質の影響をほとんど受けない。よって、本実施形態では、血液検体は、干渉物質を含む検体であってもよい。

トロンビン含有試薬は、トロンビンを含み、且つトロンビン時間法(Clauss法)を測定原理とする試薬であればよい。トロンビン含有試薬は凍結乾燥品であってもよいが、使用時に液体試薬とすることが好ましい。トロンビンは、ウシなどの哺乳動物に由来する天然型トロンビンであってもよいし、組換え型トロンビンであってもよい。本実施形態では、トロンビン含有試薬として、市販のトロンビン試薬又はトロンビン時間法に基づくフィブリノゲン測定用キットを用いてもよい。そのような試薬やキットとしては、トロンボチェックFib(シスメックス株式会社)、マルチフィブリンＵ(Siemens社)などが挙げられる。使用前に、トロンビン含有試薬を予め凝固反応に適した温度(例えば36℃以上38℃以下)まで加温してもよい。

本実施形態で得られる凝固波形は、トロンビン時間法に基づく凝固波形である。ここで、トロンビンによる血液凝固反応は、凝固第３相を反映し、内因系凝固過程及び外因系凝固過程とは異なる。よって、血液検査の分野において、本実施形態で得られる凝固波形は、トロンビン時間法以外の測定原理(例えば、プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間)に基づく凝固波形とは異なるものである。

血液検体にトロンビン含有試薬を添加すると凝固が開始するので、トロンビン含有試薬の添加と同時に凝固波形を測定する。以下、血液検体とトロンビン含有試薬との混合物を、「測定試料」という。ここで、凝固波形とは、血液検体の凝固の進行に伴って生じる、該検体の光学的特性又は物理的特性を示す値の経時的変化を表す波形である。本実施形態において、凝固波形は、光学的測定法により取得してもよいし、物理的測定法により取得してもよい。光学的測定法としては、例えば、測定試料に光を照射して透過光強度などの光学的情報を取得する方法が挙げられる。物理的測定法としては、例えば、スチールボールを用いて測定試料の粘度などの物理的情報を取得する方法が挙げられる。測定は、自動血液凝固測定装置により行ってもよい。例えば、自動血液凝固測定装置のCSシリーズ(シスメックス株式会社)は、透過光強度などの光学的情報を測定でき、自動血液凝固線溶測定装置のSTA Compact(ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社)は、粘度などの物理的情報を測定できる。

測定条件は特に限定されないが、光学的情報又は物理的情報の取得は、測定試料を調製した時(具体的には血液検体にトロンビン含有試薬を添加した時)から凝固の完了時までの間、連続的又は断続的に行うことが好ましい。測定開始から凝固完了までの一連の過程において連続的又は断続的に測定された光学的情報又は物理的情報に基づけば、該過程の任意の時点又は時間において、後述の凝固波形の微分に関するパラメータを取得できる。また、そのような凝固波形から、後述の総反応時間を取得できる。

測定時間は、血液検体に応じて適宜決定してよい。本実施形態では、測定時間は、例えば、４秒以上500秒以下の範囲の範囲から決定できる。なお、本実施形態の方法では、正常血漿(健常者から得た血漿)を血液検体として用いた場合、通常、測定試料の調製時から15秒以内に凝固が完了する。

好ましい実施形態では、凝固波形は、測定試料に光を照射して得られる光学的情報から取得される。そのような光学的情報としては、例えば、連続的又は断続的に測定された散乱光量、透過光強度及び吸光度などが挙げられる。この場合、凝固波形は、散乱光量、透過光強度又は吸光度の経時的変化を表す波形である。測定試料に照射する光は、凝固時間の測定に通常用いられる光であればよく、例えば、波長が660 nm近傍、好ましくは660 nmの光が挙げられる。光源は特に限定されないが、例えば、発光ダイオード、ハロゲンランプなどが挙げられる。

本実施形態で取得される凝固波形には、凝固波形の曲線自体、及び凝固波形を構成する各プロットのデータが含まれる。凝固波形を構成する各プロットのデータとしては、測定開始点からの時間及びその時点における測定試料の光学的特性又は物理的特性の測定値が挙げられる。

図１を参照して、透過光強度の経時的変化を示した典型的な凝固波形について説明する。図中のＡ点は、血液検体とトロンビン含有試薬とを混合した時点であり、測定開始の時点でもある。その後、凝固反応が進行してフィブリンの形成により、透過光強度の変化が開始する(図中のＢ点)。フィブリンの形成が進行するにつれて透過光強度は減少し、ほとんどのフィブリノゲンが消費されると反応は収束し、透過光強度の変化はなくなる(図中のＣ点)。凝固時間は、例えば、凝固反応開始時であるＢ点の透過光強度(未凝固レベル)と、透過光強度の変化がなくなる時であるＣ点の透過光強度との差である透過光強度の変化量(dH)を100％としたときに、透過光強度の変化量(dH)が50％となる時間であってもよい。好ましい実施形態では、凝固時間は、光学的測定による凝固波形において、光学的測定値の変化量(dH)が50％となる時間である。

自動血液凝固測定装置を用いる場合、凝固時間は、例えばパーセント法、一次微分法、二次微分法、変曲点法などなどの方法により算出できる。光学的情報として散乱光量を取得する装置を用いる場合、パーセント法とは、反応の開始から終了までの散乱光量変化のうち、一定の割合を閾値として、閾値を越える時間を凝固時間とする方法である。例えば、閾値が散乱光量変化の50％の場合には、Ｅ_range ^(1)-2×0.5＋Ｅ_b＝式(Ａ)の右辺という方程式を解くことにより、凝固時間ｔを算出する。なお、式(Ａ)を以下に示す。

式(Ａ)において、Ｅ_rangeは、散乱光強度Ｅの最大値Ｅ_pと最小値Ｅ_bとの差を示し、ａは、凝固波形の近似曲線の変曲点における時間ｔを示し、ｋは、該近似曲線におけるベースライン領域及びプラトー領域に挟まれた領域における曲線の傾きを示し、ｂは、補正用パラメータを示す。一次微分法とは、散乱光量の微分値(散乱光量変化)の最も大きくなる時間を凝固時間とする方法である。Ｅ_range ^(1)-2、ａ^(1)-2、ｂ^(1)-2、ｋ^(1)-2、Ｅ_b ^(1)-2を式(Ａ)に代入して得られる近似式を一次微分し、極大値を算出する。二次微分法とは、散乱光量の二次微分値の最も大きくなる時間を凝固時間とする方法であり、Ｅ_range ^(1)-2、ａ^(1)-2、ｂ^(1)-2、ｋ^(1)-2、Ｅ_b ^(1)-2を式(Ａ)に代入して得られる近似式を二次微分し、極大値を算出する。変極点法とは、ａ^(1)-2をそのまま凝固時間とする方法である。なお、これらの凝固時間の算出法については、WO2014/162878を参照されたい。

第１の態様に係る血液検体の分析方法では、凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値(以下、「微分パラメータ」ともいう)を取得する。微分パラメータは、凝固波形を微分して得られる凝固速度の波形、又は該凝固速度の波形を微分して得られる凝固の加速度及び減速度の波形から取得されるパラメータであればよい。ここで、図２を参照して、速度の波形と加速度及び減速度の波形について説明する。凝固波形(図２の上段のグラフ)を微分(１次微分)すると、凝固速度の変化を示す波形(図２の中段のグラフ)が得られる。速度の波形を微分(２次微分)すると、凝固の加速度及び減速度の変化を示す波形(図２の下段のグラフ)が得られる。図２では、凝固速度(dT/dt)が正の値となるように波形が表示されているが、凝固速度が負の値となるように表示してもよい。すなわち、図２の中段及び下段のグラフは、縦軸の正負が反転した波形を取得してもよい。

微分パラメータとしては、例えば、|min 1|、|max 2|、|min 2|、曲線下面積(AUC)、凝固速度が最大となるまでの時間(|min 1|時間)などが挙げられるが、これらに限定されない。代表的な微分パラメータについて説明する。|min 1|とは、速度の波形のピーク値の絶対値であり、最大凝固速度を表す。|min 2|とは、凝固加速度のピーク値の絶対値であり、最大凝固加速度を表す。|max 2|とは、凝固減速度のピーク値の絶対値であり、最大凝固減速度を表す。なお、|min 1|、|min 2|及び|max 2|という用語自体は、当該技術において公知である。「AUC」とは、速度の波形において、波形の曲線、横軸(時間を示す軸)及び縦軸(速度を示す軸)で囲まれた領域の面積の値である。|min 1|時間とは、速度の波形において、測定開始時から凝固速度が最大値(|min 1|の値)となる時までの時間である。これらの中でも、|min 1|及び|max 2|が好ましい。微分パラメータは、凝固波形から用手法で算出してもよい。自動血液凝固測定装置を用いて凝固波形を取得した場合は、微分パラメータは該装置により取得できる。

第７の態様に係る血液検体の分析方法では、凝固波形に基づいて、総反応時間を取得する。総反応時間とは、凝固波形において、血液検体とトロンビン含有試薬とを混合した時点から、該凝固波形を構成する測定値の変化がなくなる時点までの時間である。凝固波形を構成する測定値の変化がなくなる時点(以下、単に「終点」ともいう)は、凝固波形において、測定試料の光学的特性又は物理的特性の測定値に変化が認められなくなった時点である。例えば、図１の凝固波形においては、終点はＣ点であり、総反応時間はＡ−Ｃ間の時間である。総反応時間は、凝固波形から用手法で算出してもよい。自動血液凝固測定装置を用いて測定した場合は、総反応時間は該装置により取得できる。

透過光強度の経時的変化を表す凝固波形を取得した場合、終点は、例えば、次の方法１〜３のいずれかにより決定してもよい。これらの方法は、自動血液凝固測定装置CS-5100(シスメックス株式会社)において採用されている。

・方法１：凝固反応が開始した時点(以下、「開始点」ともいう)以後において、判定点からＸ軸時間分後ろまでの区間における透過光強度の変化がＹ軸レベル以内であった場合、該判定点を終点とする(図３Ａ参照)。ここで、Ｘ軸時間とＹ軸レベルは、適宜設定できる。凝固開始点は、ベースラインからの透過光強度が所定の値以上となる時点であってもよい。ベースラインは、測定開始から所定の時間(例えば60秒)内に、透過光強度が最大となる時点の透過光強度であってもよい。

・方法２：開始点から判定点の区間における傾き(Slope1)と、判定点以後(開始点から判定点までの区間と同じ幅)での傾き(Slope2)とを算出する(図３Ｂ参照)。これらの傾きの比(Slope2/Slope1)が所定の値より小さい場合に、該判定点を終点とする。ここで、所定の値は、適宜設定できる。

・方法３：判定点を基点とし、任意の区間幅における前後の面積(S1及びS2)を算出する(図３Ｃ参照)。図３Ｃでは、任意の区間幅におけるベースラインと凝固波形の曲線とで囲まれた領域の面積を算出している。前後の面積の比(S2/S1)が、所定の値より小さい場合に、判定点を終点とする。ここで、所定の値は、適宜設定できる。

第１の態様に係る血液検体の分析方法において、取得する微分パラメータの数は１つであってもよいし、２つ以上であってもよい。また、微分パラメータは、２つ以上を組み合わせて得られる値であってもよく、例えば|min 1|、|max 2|、|min 2|、AUC及び|min 1|時間から選択される少なくとも２つの値の和、差、積、比などが挙げられる。

本実施形態では、取得した凝固波形の微分に関するパラメータの値の少なくとも１つ、又は総反応時間に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得する。ここで、フィブリノゲンの抗原量とは、抗フィブリノゲン抗体を用いる免疫学的測定によって取得される、フィブリノゲンのタンパク質量をいう。フィブリノゲンの抗原量に関する情報は、フィブリノゲンの抗原量を定量的又は半定量的に示す情報であればよい。フィブリノゲンの抗原量を定量的に示す情報は、例えば、微分パラメータの値又は総反応時間から算出される、フィブリノゲンの抗原量の推定値又は換算値であってもよい。

フィブリノゲンの抗原量を半定量的に示す情報は、例えば、フィブリノゲンの抗原量を、「ほとんどない」、「少ない」、「正常」又は「多い」などのように段階的に示す情報であってもよい。また、「ほとんどない」、「少ない」、「正常」及び「多い」との段階的な情報を、それぞれ１、２、３及び４といったレベルを示す数字で表してもよい。フィブリノゲンの抗原量を半定量的に示す情報は、フィブリノゲンの抗原量を定量的に示す情報に基づいて取得してもよい。

フィブリノゲンの抗原量に関する情報は、微分パラメータの値又は総反応時間から算出される、フィブリノゲンの抗原量の推定値又は換算値であることが好ましい。本実施形態では、複数の正常検体について、予め微分パラメータの値又は総反応時間と、免疫学的測定によるフィブリノゲンの抗原量とをそれぞれ取得し、これらの値をグラフにプロットして検量線を作成することが好ましい。また、得られた検量線について回帰式を作成してもよい。得られた検量線又は回帰式により、微分パラメータの値又は総反応時間を、フィブリノゲンの抗原量の値に換算できる。正常検体としては、健常者から得た血液検体又は市販の正常血漿などが挙げられる。

本実施形態では、微分パラメータの値又は総反応時間の値そのものだけでなく、それらの値から算出される値を用いて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得してもよい。例えば、微分パラメータの値から算出される値としては、例えば、該パラメータの値に定数を乗じた値、該パラメータの値に定数を足した値、該パラメータの値から定数を引いた値、該パラメータの値の逆数、及びこれらの計算を組み合わせて得られる値などが挙げられる。総反応時間から算出される値も、上記と同様にして得ることができる。

本実施形態では、微分パラメータの値うち、|min 1|又は|max 2|の値からフィブリノゲンの抗原量の値を取得することが好ましい。特に、|min 1|の値からフィブリノゲンの抗原量の値を取得することが好ましい。この場合、フィブリノゲンの抗原量の値は、検量線又は回帰式を用いて、|min 1|又は|max 2|の値を、フィブリノゲンの抗原量の値に換算することにより取得することがより好ましい。また、第７の態様に係る血液検体の分析方法では、フィブリノゲンの抗原量の値は、検量線又は回帰式を用いて、総反応時間の値を、フィブリノゲンの抗原量の値に換算することにより取得することがより好ましい。

本実施形態では、凝固波形に基づいて、凝固時間をさらに取得してもよい。また、取得した凝固時間に基づいて、後述のフィブリノゲンの活性濃度に関する情報を取得してもよい。これにより、凝固波形の測定結果から、フィブリノゲンの抗原量に関する情報だけでなく、フィブリノゲンの凝固能に関連する凝固時間又はフィブリノゲンの活性濃度に関する情報も得ることができる。

[２．フィブリノゲンの機能に関する情報を取得するための血液検体の分析方法]
第１及び第７の態様に係る血液検体の分析方法では、上記のとおり、フィブリノゲンの活性を測定するトロンビン時間法に基づく凝固波形の測定により、フィブリノゲンの抗原量に関する情報が得られる。第２及び第８の態様に係る血液検体の分析方法では、微分パラメータ又は総反応時間に加えて、凝固時間を取得することにより、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得できる。

本実施形態において、フィブリノゲンの機能とは、トロンビンの添加によって惹起されるフィブリノゲンの凝固能をいう。フィブリノゲンの機能に関する情報は、フィブリノゲンの機能の定量的情報であってもよいし、該機能の定性的情報であってもよい。フィブリノゲンの機能の定量的情報としては、フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報が好ましい。フィブリノゲンの機能の定性的情報としては、フィブリノゲンに異常があるか否かに関する情報が好ましい。

本実施形態では、まず、血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、該血液検体を凝固させて凝固波形を取得する。血液検体、トロンビン含有試薬及び凝固波形の詳細、及び凝固波形の取得は、第１及び第７の態様について述べたことと同様である。

第２の態様に係る血液検体の分析方法では、凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値の少なくとも１つと、凝固時間とを取得する。また、第８の態様に係る血液検体の分析方法では、凝固波形に基づいて、総反応時間と凝固時間とを取得する。凝固波形の微分に関するパラメータの値及び総反応時間の詳細、及びそれらの取得は、第１及び第７の態様について述べたことと同様である。

本実施形態において、凝固時間は、凝固波形において、凝固反応開始時の光学的測定値と、光学的測定値の変化がなくなる時の光学的測定値との差である光学的測定値の変化量(dH)を100％としたときに、光学的測定値の変化量が50％となる時間であることが好ましい(図１参照)。光学的測定値としては、透過光強度が好ましい。用手法で凝固時間を測定する場合は、血液検体とトロンビン含有試薬とを混合した時点から、測定試料にフィブリンが析出して凝固した時点までの時間を、凝固時間として取得してもよい。用手法での凝固時間の測定自体は、当該技術において公知である。

(フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報の取得)
フィブリノゲンの機能に関する情報として、フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報を取得する実施形態について、以下に説明する。この実施形態では、凝固波形の微分に関するパラメータの値の少なくとも１つ、又は総反応時間に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得し、凝固時間に基づいて、フィブリノゲンの活性濃度に関する情報を取得する。フィブリノゲンの抗原量に関する情報の詳細及びその取得は、第１及び第７の態様について述べたことと同様である。本実施形態では、フィブリノゲンの抗原量に関する情報は、フィブリノゲンの抗原量の値が好ましい。

フィブリノゲンの活性濃度とは、血液検体中のフィブリノゲンの凝固能が正常であると仮定した場合に、トロンビン時間法に基づく凝固時間から得られる、該血液検体におけるフィブリノゲン濃度をいう。フィブリノゲンの活性濃度に関する情報は、フィブリノゲンの活性濃度を定量的又は半定量的に示す情報であればよい。フィブリノゲンの活性濃度を定量的に示す情報は、例えば、フィブリノゲンの活性濃度の値であってもよい。フィブリノゲンの活性濃度を取得する方法自体は、当該技術において公知である。例えば、血液検体の凝固時間を、濃度既知のフィブリノゲン標準液の凝固時間から作成された検量線又は換算表に当てはめて、フィブリノゲンの活性濃度を得ることができる。

フィブリノゲンの活性濃度を半定量的に示す情報は、例えば、フィブリノゲンの活性濃度を、「ほとんどない」、「低い」、「正常」又は「高い」などのように段階的に示す情報であってもよい。また、「ほとんどない」、「低い」、「正常」及び「高い」との段階的な情報を、それぞれ１、２、３及び４といったレベルを示す数字で表してもよい。フィブリノゲンの活性濃度を半定量的に示す情報は、フィブリノゲンの活性濃度を定量的に示す情報に基づいて取得してもよい。

本実施形態では、フィブリノゲンの活性濃度に関する情報は、フィブリノゲンの活性濃度の値であることが好ましい。

本実施形態では、フィブリノゲンの抗原量に関する情報及びフィブリノゲンの活性濃度に関する情報に基づいて、フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報を取得する。この比に関する情報は、抗原量と活性とを対比した情報又は数値であればよい。フィブリノゲンの抗原量に関する情報及びフィブリノゲンの活性濃度に関する情報が半定量的な情報であるとき、抗原量と活性濃度とを対比した情報は、例えば、「抗原量：活性濃度＝(正常)：(低い)」又は「抗原量：活性濃度＝３：１」のような情報であってもよい。抗原量と活性濃度とを対比した数値は、例えば、フィブリノゲンの活性濃度の値と、フィブリノゲンの抗原量の値との比の値が挙げられる。

本実施形態では、フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報は、フィブリノゲンの活性濃度の値と、フィブリノゲンの抗原量の値との比の値であることが好ましい。該比の値は、下記の式(１)又は(２)により算出できる。

(比の値)＝(フィブリノゲンの活性濃度の値)／(フィブリノゲンの抗原量の値) ・・・式(１)
又は
(比の値)＝(フィブリノゲンの抗原量の値)／(フィブリノゲンの活性濃度の値) ・・・式(２)

式(１)により算出される比の値は、所定の抗原量当たりのフィブリノゲンの活性値を示し、これはフィブリノゲンの比活性に相当する。式(２)により算出される比の値は、フィブリノゲンの比活性の逆数に相当する。このように、トロンビン時間法に基づく凝固波形の測定により、フィブリノゲンの比活性を示す値を取得できる。

(フィブリノゲンの異常に関する情報の取得)
フィブリノゲンの機能に関する情報として、フィブリノゲンの異常があるか否かに関する情報を取得する実施形態について、以下に説明する。この実施形態では、トロンビン時間法に基づく凝固波形の測定結果から、フィブリノゲンの抗原量に関する情報及びフィブリノゲンの活性濃度に関する情報を取得することにより、フィブリノゲンの異常があるか否かを判定できる。

本実施形態では、まず、血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、該血液検体を凝固させて凝固波形を取得する。血液検体、トロンビン含有試薬及び凝固波形の詳細、及び凝固波形の取得は、第１及び第７の態様について述べたことと同様である。

次いで、第２の態様に係る血液検体の分析方法では、凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値の少なくとも１つと、凝固時間とを取得する。また、第８の態様に係る血液検体の分析方法では、凝固波形に基づいて、総反応時間と凝固時間とを取得する。凝固波形の微分に関するパラメータの値、総反応時間及び凝固時間の詳細、及びそれらの取得については、上述のとおりである。

そして、凝固波形の微分に関するパラメータの値の少なくとも１つ、又は総反応時間に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得し、凝固時間に基づいて、フィブリノゲンの活性濃度に関する情報を取得する。フィブリノゲンの抗原量に関する情報及びフィブリノゲンの活性濃度に関する情報の詳細、及びそれらの取得については、上述のとおりである。

本実施形態では、フィブリノゲンの抗原量に関する情報及びフィブリノゲンの活性濃度に関する情報に基づいて、フィブリノゲンの異常があるか否かに関する情報を取得する。ここで、フィブリノゲンの異常とは、フィブリノゲンの抗原量の異常(量的異常)であってもよいし、フィブリノゲンの活性の異常(質的異常)であってもよい。

本実施形態では、例えば、フィブリノゲンの抗原量が少ないか又はほとんどないことを示す情報又は数値を取得し、且つフィブリノゲンの活性濃度が低いか又はほとんどないことを示す情報又は数値を取得した場合、フィブリノゲンの抗原量の異常があると判定してもよい。また、フィブリノゲンの抗原量が正常であることを示す情報又は数値を取得し、且つフィブリノゲンの活性濃度が低いか又はほとんどないことを示す情報又は数値を取得した場合、フィブリノゲンの活性の異常があると判定してもよい。これにより、フィブリノゲンに異常があるか否かに関する情報を取得できる。

上記の判定は、正常検体についてのフィブリノゲンの抗原量に関する情報及びフィブリノゲンの活性濃度に関する情報との比較により行うことが好ましい。例えば、血液検体におけるフィブリノゲンの抗原量の値が、正常検体におけるフィブリノゲンの抗原量の値よりも低い場合、該血液検体のフィブリノゲンの抗原量は少ないか又はほとんどないとの情報を取得できる。また、血液検体におけるフィブリノゲンの活性濃度の値が、正常検体におけるフィブリノゲンの活性濃度の値よりも低い場合、該血液検体のフィブリノゲンの活性濃度は低いか又はほとんどないとの情報を取得できる。

本実施形態では、フィブリノゲンの抗原量に関する情報は、フィブリノゲンの抗原量の値であることが好ましい。また、フィブリノゲンの活性濃度に関する情報は、フィブリノゲンの活性濃度の値であることが好ましい。

フィブリノゲンの活性の異常があるか否かを判定する場合、フィブリノゲンの抗原量に関する情報及びフィブリノゲンの活性濃度に関する情報に基づいて、フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報を取得し、該比に関する情報に基づいて判定を行ってもよい。抗原量と活性との比に関する情報の詳細及びその取得については、上述のとおりである。本実施形態では、フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報は、フィブリノゲンの活性濃度の値と、フィブリノゲンの抗原量の値との比の値であることが好ましい。該比の値は、上記の式(１)又は(２)により算出できる。

上述のように、式(１)により算出される比の値は、フィブリノゲンの比活性に相当し、式(２)により算出される比の値は、フィブリノゲンの比活性の逆数に相当する。よって、これらの値を、所定の閾値と比較することにより、フィブリノゲンの活性の異常を簡便に判定できる。例えば、式(１)により算出された比の値と、第１の閾値とを比較して、該式(１)により算出された比の値が第１の閾値よりも低い場合に、フィブリノゲンの活性に異常があると判定できる。また、式(１)により算出された比の値が、第１の閾値よりも高いか又は第１の閾値と同じである場合に、フィブリノゲンの活性に異常がないと判定してもよい。

あるいは、式(２)により算出された比の値と、第２の閾値とを比較して、該式(２)により算出された比の値が第２の閾値よりも高い場合に、フィブリノゲンの活性に異常があると判定できる。また、式(２)により算出された比の値が、第２の閾値よりも低いか又は第２の閾値と同じである場合に、フィブリノゲンの活性に異常がないと判定してもよい。

本実施形態では、第１及び第２の閾値は特に限定されない。例えば、健常者の血液検体について、凝固波形パラメータ及び凝固時間のデータを蓄積することにより、第１及び第２の閾値を経験的に設定してもよい。あるいは、複数の正常検体について測定したフィブリノゲンの抗原量の値及び活性濃度の値から、式(１)及び(２)により算出される比の値を、第１及び第２の閾値として設定してもよい。

[３．血液検体分析装置及びコンピュータプログラム]
以下に、本実施形態に係る血液検体分析装置の一例を、図面を参照して説明する。しかし、本実施形態はこの例のみに限定されない。以下、血液検体分析装置を、単に「分析装置」ともいう。

図４に示されるように、分析装置１は、測定試料の調製及び測定を行う測定装置５と、測定装置５により取得された測定データを分析すると共に測定装置５に指示を与える制御装置４とを備える。測定装置５は、測定試料からの光学的情報又は物理的情報を取得する測定部２と、測定部２の前方に配置された検体搬送部３とを備える。本実施形態では、検体搬送部３と測定部２とが一体となって分析装置１の一部を構成している。さらなる実施形態では、検体搬送部３は、分析装置１と別体としてもよい。例えば、複数の分析装置を含む大規模なシステムにおいて、検体搬送部を各分析装置に設けずに、大型の搬送ラインに複数の分析装置が接続された形態を採用してもよい。

(測定装置の構成)
測定装置５の測定部２は、検体搬送部３から供給された検体に対して光学的測定を行うことにより、供給された検体に関する光学的情報を取得することが可能なように構成される。本実施形態では、検体搬送部３のラック１５１に置かれた試験管１５０から測定部２のキュベット１５２(図５参照)内に分注された血液検体に対して光学的測定が行われる。

測定部２は、図４及び図５に示されるように、キュベット供給部１０と、回転搬送部２０と、検体分注アーム３０と、HIL検出部４０と、ランプユニット５０と、２つの試薬分注アーム６０と、キュベット移送部７０と、検出部８０と、緊急検体セット部９０と、キュベット廃棄部１００と、流体部１１０と、制御部１２０(図６参照)とを備える。本実施形態において、測定部２は、血液検体から測定試料を調製する測定試料調製部としての機能と、調製した測定試料を測定する測定部としての機能とを有する。制御部１２０は、測定部２及び検体搬送部３における各機構の動作制御を行う機能を有する。

本実施形態において、測定試料調製部は、キュベット供給部１０と、回転搬送部２０と、検体分注アーム３０と、２つの試薬分注アーム６０とから構成される。測定試料調製部は、後述の試薬テーブル２１と、試薬テーブル２２と、二次分注テーブル２３と、一次分注テーブル２４とをさらに含んでいてもよい。

キュベット供給部１０は、ユーザによって投入された複数のキュベット１５２を回転搬送部２０に順次供給することが可能なように構成される。このキュベット供給部１０は、図５に示されるように、ブラケット１１(図４参照)を介して装置本体に取り付けられたホッパ１２と、ホッパ１２の下方に設けられた２つの誘導板１３と、２つの誘導板１３の下端に配置された支持台１４と、支持台１４から所定の間隔を隔てて設けられた供給用キャッチャ部１５とを含む。２つの誘導板１３は、キュベット１５２のつば部の直径よりも小さく且つキュベット１５２の胴部の直径よりも大きい間隔を隔てて、互いに平行に配置されている。ホッパ１２内に供給されたキュベット１５２は、つば部が２つの誘導板１３の上面に接した状態で、支持台１４に向かって滑り落ちながら移動する。支持台１４は、誘導板１３を滑り落ちて移動したキュベット１５２を、供給用キャッチャ部１５が把持可能な位置まで回転移送する機能を有する。そして、供給用キャッチャ部１５は、支持台１４により回転移送されたキュベット１５２を回転搬送部２０に供給するために設けられる。

回転搬送部２０は、キュベット供給部１０から供給されたキュベット１５２と、キュベット１５２内の血液検体に添加される試薬を収容した試薬容器(図示せず)とを回転方向に搬送するために設けられる。回転搬送部２０は、図５に示されるように、円形状の試薬テーブル２１と、円形状の試薬テーブル２１の外側に配置された円環形状の試薬テーブル２２と、円環形状の試薬テーブル２２の外側に配置された円環形状の二次分注テーブル２３と、円環形状の二次分注テーブル２３の外側に配置された円環形状の一次分注テーブル２４とにより構成される。これらの一次分注テーブル２４、二次分注テーブル２３、試薬テーブル２１及び試薬テーブル２２は、それぞれ、時計回り方向及び反時計回り方向の両方に回転可能で、且つ各々のテーブルが互いに独立して回転可能なように構成される。

試薬テーブル２１及び２２は、図５に示されるように、それぞれ、円周方向に沿って所定の間隔を隔てて設けられた複数の孔部２１ａ及び２２ａを含む。試薬テーブル２１及び２２の孔部２１ａ及び２２ａは、血液検体から測定試料を調製する際に添加される種々の試薬を収容した複数の試薬容器(図示せず)を置くために設けられる。一次分注テーブル２４及び二次分注テーブル２３は、それぞれ、円周方向に沿って所定の間隔を隔てて設けられた円筒形状の複数の保持部２４ａ及び２３ａを含む。保持部２４ａ及び２３ａは、キュベット供給部１０から供給されたキュベット１５２を保持するために設けられる。一次分注テーブル２４の保持部２４ａに保持されたキュベット１５２には、一次分注処理の際に、検体搬送部３の試験管１５０に収容される検体が分注される。二次分注テーブル２３の保持部２３ａに保持されたキュベット１５２には、二次分注処理の際に、一次分注テーブル２４に保持されたキュベット１５２に収容される検体が分注される。保持部２４ａには、該保持部２４ａの側方の互いに対向する位置に一対の小孔が形成される。この一対の小孔は、後述するランプユニット５０の分岐光ファイバ５８から出射された光を通過させるために設けられる。

検体分注アーム３０は、検体搬送部３により吸引位置２ａに搬送された試験管１５０に収容される検体を吸引するとともに、吸引した検体を回転搬送部２０に移送されたキュベット１５２内に分注する機能を有する。

HIL検出部４０は、試薬を添加する前の血液検体中の干渉物質(乳び、ヘモグロビン及びビリルビン)の有無及びその濃度を測定するために、検体から光学的情報を取得するように構成される。具体的には、後述するランプユニット５０から照射される５種類の光(340 nm、405 nm、575 nm、660 nm及び800 nm)の内の４種類の光(405 nm、575 nm、660 nm及び800 nm)を用いて、干渉物質の有無及びその濃度を測定している。なお、405 nmの波長を有する光は、乳び、ヘモグロビン及びビリルビンのいずれにも吸収される。すなわち、405 nmの波長を有する光により測定された光学的情報には、乳び、ヘモグロビン及びビリルビンの影響が寄与する。575 nmの波長を有する光は、ビリルビンには実質的に吸収されず、且つ乳び及びヘモグロビンに吸収される。すなわち、575nmの波長を有する光により測定された光学的情報には、乳び及びヘモグロビンの影響が寄与する。660 nm及び800 nmの波長を有する光は、ビリルビン及びヘモグロビンには実質的に吸収されず、且つ乳びに吸収される。すなわち、660 nm及び800 nmの波長を有する光により測定された光学的情報には、乳びの影響が寄与する。乳びは、低波長域の405 nmから高波長域の800 nmまでの波長の光を吸収する。また、660 nmの波長を有する光の方が、800 nmの波長を有する光に比べて、乳びによる吸収が多い。すなわち、800 nmの波長を有する光で測定した光学的情報の方が、660 nmの波長を有する光で測定した光学的情報より、乳びの影響が小さい。

HIL検出部４０による検体の光学的情報の取得は、検出部８０による検体の光学的測定(本測定)の前に行われる。HIL検出部４０は、図５に示されるように、一次分注テーブル２４の保持部２４ａに保持されたキュベット１５２内の検体から光学的情報を取得する。

本実施の形態では、ランプユニット５０は、図５に示されるように、HIL検出部４０及び検出部８０で行われる光学的測定に用いられる光を供給するために設けられる。すなわち、１つのランプユニット５０が、HIL検出部４０及び検出部８０に対して共通に用いられるように構成される。

試薬分注アーム６０は、図４及び図５に示されるように、回転搬送部２０に置かれた試薬容器(図示せず)内の試薬を回転搬送部２０に保持されたキュベット１５２に分注することにより、キュベット１５２内の血液検体に試薬を混合するために設けられる。これにより、HIL検出部４０による光学的測定が終了した血液検体に試薬を添加して測定試料が調製される。キュベット移送部７０は、キュベット１５２を回転搬送部２０と検出部８０との間を移送させるために設けられる。試薬分注アーム６０の先端付近には、試薬の加温機能を備えた加温装置を構成する加温ピペットが取り付けられる。

検出部８０は、調製された測定試料の加温を行うとともに、該測定試料から光学的情報を測定するための機能を有する。この検出部８０は、図５に示されるように、キュベット設置部８１と、キュベット設置部８１の下方に配置された検出器８２とを備える。

図８を参照して、キュベット設置部８１には、複数の挿入孔８１ａが形成され、この挿入孔８１ａにキュベット１５２が挿入されている。検出器８２は、光源８２ａと、光電変換素子８２ｂとを有しており、光源８２ａから発せられ、キュベット１５２を透過した光(透過光)が光電変換素子８２ｂにより受光される。光源８２ａとしてはハロゲンランプやLEDが用いられ、光電変換素子８２ｂとしてはフォトダイオードが用いられる。キュベット設置部８１には、加温機能を有する挿入孔(図示せず)も設けられる。

緊急検体セット部９０は、図４及び図５に示されるように、緊急を要する検体に対しての分析処理を行うために設けられる。緊急検体セット部９０は、検体搬送部３から供給された検体に対しての分析処理が行われている際に、緊急検体を割り込ませることが可能なように構成される。キュベット廃棄部１００は、回転搬送部２０のキュベット１５２を廃棄するために設けられる。キュベット廃棄部１００は、図２に示されるように、廃棄用キャッチャ部１０１と、廃棄用キャッチャ部１０１から所定の間隔を隔てて設けられた廃棄用孔１０２(図４参照)と、廃棄用孔１０２の下方に設置された廃棄ボックス１０３とにより構成される。廃棄用キャッチャ部１０１は、回転搬送部２０のキュベット１５２を、廃棄用孔１０２を介して廃棄ボックス１０３に移動させるために設けられる。流体部１１０は、分析装置１のシャットダウン処理の際に、各分注アームに設けられるノズルに洗浄液などの液体を供給するために設けられる。

図６を参照して、キュベット供給部１０、回転搬送部２０、検体分注アーム３０、HIL検出部４０、ランプユニット５０、２つの試薬分注アーム６０、キュベット移送部７０、検出部８０、緊急検体セット部９０、キュベット廃棄部１００及び流体部１１０は、制御部１２０に電気信号を通信可能に接続されている。制御部１２０は、ＣＰＵ、ＲＯＭ、ＲＡＭなどから構成される。ＣＰＵがＲＯＭに予め記憶された制御プログラムを実行することにより、上述した各機構の動作を制御し、これにより測定部２が測定動作やメンテナンス動作などを実行する。

測定装置５の検体搬送部３は、図４に示すように、測定部２に血液検体を供給するために、血液検体を収容した複数(本実施形態では10本)の試験管１５０が載置されたラック１５１を測定部２の吸引位置２ａに搬送する機能を有する。検体搬送部３は、未処理の検体を収容した試験管１５０が収納されたラック１５１をセットするためのラックセット領域３ａと、処理済みの検体を収容した試験管１５０が収納されたラック１５１を収容するためのラック収容領域３ｂとを有する。

(測定部の変形例)
凝固波形は、血液凝固による粘度の変化などの物理的情報に基づいて測定されてもよい。凝固波形を粘度の変化に基づいて測定する場合、測定部２は、高周波発信コイルと、高周波受信コイルと、高周波発信コイルと高周波受信コイルとの間にある、スチールボールを収容したキュベットを設置するキュベット設置部と、キュベット設置部の両端に設けられた電磁石とを備える。キュベット内のスチールボールは、電磁石が発生する磁力によって左右に振幅運動する。この振幅運動は、粘度が増加するほど減少する。測定試料の凝固が始まると、測定試料の粘度が増加するため、スチールボールの振幅が減少する。したがって、測定部２は、高周波発信コイルが発信する高周波を高周波受信コイルが受信することによって、振幅の変化を検知する。また、後述の制御装置４は、検知された振幅の変化に基づき、凝固波形を取得する。

(制御装置の構成)
図４に示すように、制御装置４は、パーソナルコンピュータ４０１(ＰＣ)などからなり、制御部４ａと、表示部４ｂと、キーボード４ｃとを含む。制御部４ａは、測定部２及び検体搬送部３の動作制御を行うとともに、測定部２で得られた検体の光学的情報を分析するための機能を有する。制御部４ａは、ＣＰＵ、ＲＯＭ、ＲＡＭなどからなる。表示部４ｂは、制御部４ａで得られた分析結果を表示し、分析装置１のメンテナンス履歴などを表示する。

図４を参照して、制御部４ａは、ＣＰＵ４０１ａと、ＲＯＭ４０１ｂと、ＲＡＭ４０１ｃと、ハードディスク４０１ｄと、読出装置４０１ｅと、入出力インタフェース４０１ｆと、通信インタフェース４０１ｇと、画像出力インタフェース４０１ｈとから主として構成される。ＣＰＵ４０１ａ、ＲＯＭ４０１ｂ、ＲＡＭ４０１ｃ、ハードディスク４０１ｄ、読出装置４０１ｅ、入出力インタフェース４０１ｆ、通信インタフェース４０１ｇ、及び画像出力インタフェース４０１ｈは、バス４０１ｉによって接続される。

ＣＰＵ４０１ａは、ＲＯＭ４０１ｂに記憶されているコンピュータプログラム及びＲＡＭ４０１ｃにロードされたコンピュータプログラムを実行することが可能である。ＲＯＭ４０１ｂは、マスクＲＯＭ、ＰＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ、ＥＥＰＲＯＭなどによって構成される。ＲＯＭ４０１ｂには、ＣＰＵ４０１ａに実行されるコンピュータプログラム及びこれに用いるデータなどが記録されている。

ＲＡＭ４０１ｃは、ＳＲＡＭ又はＤＲＡＭなどによって構成される。ＲＡＭ４０１ｃは、ＲＯＭ４０１ｂ及びハードディスク４０１ｄに記録されているコンピュータプログラムの読み出しに用いられる。また、これらのコンピュータプログラムを実行するときに、ＣＰＵ４０１ａの作業領域として利用される。

ハードディスク４０１ｄは、オペレーティングシステム、ＣＰＵ４３１に実行させるためのアプリケーションプログラム(血液検体の分析のためのコンピュータプログラム)などのコンピュータプログラム、当該コンピュータプログラムの実行に用いるデータ、及び制御装置４の設定内容がインストールされている。

読出装置４０１ｅは、フレキシブルディスクドライブ、ＣＤ−ＲＯＭドライブ、又はＤＶＤ−ＲＯＭドライブなどによって構成され、可搬型記録媒体４０４に記録されたコンピュータプログラム又はデータを読み出すことができる。

入出力インタフェース４０１ｆは、例えば、ＵＳＢ、ＩＥＥＥ１３９４、ＲＳ−２３２Ｃ等のシリアルインタフェース、ＳＣＳＩ、ＩＤＥ、ＩＥＥＥ１２８４などのパラレルインタフェース、及びＤ／Ａ変換器、Ａ／Ｄ変換器等からなるアナログインタフェースなどから構成される。入出力インタフェース４０１ｆには、キーボード４ｃが接続され、ユーザがそのキーボード４ｃを用いて、コンピュータ４０１にデータを入力することが可能である。

通信インタフェース４０１ｇは、例えば、Ｅｔｈｅｒｎｅｔ(登録商標)インタフェースである。コンピュータ４０１は、通信インタフェース４０１ｇにより、所定の通信プロトコルを使用して測定部２との間でデータの送受信が可能である。

画像出力インタフェース４０１ｈは、ＬＣＤ又はＣＲＴなどで構成された表示部４ｂに接続され、ＣＰＵ４０１ａから与えられた画像データに応じた映像信号を表示部４ｂに出力する。表示部４ｂは、入力された映像信号にしたがって、画像(画面)を表示する。

制御装置４は、検出部８０によって検出された光学的情報(例えば透過光強度)に基づき、凝固波形の取得手段として機能する。第３の態様に係る血液検体分析装置では、制御装置４は、凝固波形に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得する情報取得部として機能する。第４の態様に係る血液検体分析装置では、制御装置４は、凝固波形に基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得する情報取得部として機能する。第４の態様に係る血液検体分析装置では、制御装置４は、凝固波形に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報及びフィブリノゲンの活性濃度に関する情報を取得し、これらの情報に基づいてフィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報を取得する情報取得部として機能してもよい。また、第４の態様に係る血液検体分析装置では、制御装置４は、凝固波形に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報及びフィブリノゲンの活性濃度に関する情報を取得し、これらの情報に基づいてフィブリノゲンの異常に関する情報を取得する情報取得部として機能してもよい。

(血液検体分析装置の処理手順)
測定装置５における処理は、主として制御部１２０の制御の下で行われ、制御装置４における処理は、主として制御部４ａの制御の下で行われる。ユーザにより入力された測定開始指示を制御装置４から受信すると、測定装置５は測定処理を開始する。図９を参照して、測定処理が開始されると、検体分注アーム３０により試験管１５０から所定量の血液検体の吸引が行われる。そして、検体分注アーム３０を回転搬送部２０の一次分注テーブル２４に保持されたキュベット１５２の上方に移動させる。その後、検体分注アーム３０から一次分注テーブル２４のキュベット１５２内に所定量の血液検体が吐出されることにより、キュベット１５２内に血液検体が一次分注される(ステップＳ１１)。

一次分注テーブル２４を回転させて、検体が分注されたキュベット１５２をHIL検出部４０による測定が可能な位置に搬送し、HIL検出部４０によって血液検体に対する光学的測定が行われる(ステップＳ１２)。そして、検体分注アーム３０により一次分注テーブル２４の保持部２４ａに保持されたキュベット１５２から所定量の血液検体が吸引される。その後、検体分注アーム３０から二次分注テーブル２３のキュベット１５２に所定量の血液検体が吐出されることにより、キュベット１５２内に血液検体が二次分注される(ステップＳ１３)。

試薬分注アーム６０を駆動させて、試薬テーブル２１及び２２に載置された試薬容器(図示せず)内のトロンビン含有試薬を二次分注テーブル２３のキュベット１５２内の血液検体に添加する。これにより、測定試料の調製が行われる(ステップＳ１４)。そして、キュベット移送部７０を用いて、測定試料が収容された二次分注テーブル２３のキュベット１５２を検出部８０のキュベット設置部８１の挿入孔８１ａに移動させる。

検出部８０の検出器８２によりキュベット１５２内の測定試料に対して光学的測定が行われる(ステップＳ１５)。この測定では、光源８２ａから光が照射され、キュベット１５２内の測定試料を通過した光が光電変換素子８２ｂに受光され、その透過光量(透過光強度)に応じた電気信号に変換される。電気信号は、図示しないＡ／Ｄ変換器によってデジタル信号に変換される。測定結果は、所定時間毎の透過光量と、各透過光量が測定された時間とを対応づけたデータとして取得される。測定装置５の制御部１２０は、測定結果を制御装置４へ送信する(ステップＳ１６)。

制御装置４が測定装置５から測定結果(データ)を受信すると(ステップＳ２１：ＹＥＳ）、制御装置４は、受信した測定結果に対して分析処理を実行する(ステップＳ２２)。制御部４ａは、取得されたデータから、時間の経過に伴う透過光強度の変化を表す凝固反応曲線(凝固波形)を生成する。図１を参照して、試薬添加直後の測定開始時は、透過光強度の変化はほとんど見られないが、その後、凝固が進行するにつれて測定試料が白濁し、透過光強度の急速な減少が見られる。そして、凝固反応がほぼ終了すると、透過光強度の変化は小さくなり、その後、略一定となる。

制御部４ａは、凝固反応開始時の透過光強度(開始レベル)を０％とし、かつ透過光強度の変化がなくなった時の透過光量(終了レベル)を100％とした場合の、所定の検出パーセント(例えば50％)に達した時間ｔを凝固波形から求め、この時間ｔを凝固時間として取得する。なお、開始レベルは、試薬を添加してから所定時間(例えば60秒)の間における最大の透過光強度とされる。終了レベルは、開始レベルと認識された時点以降で、所定時間当たりの透過光強度の低下量が所定以下となった時点における透過光量とされる。制御装置４は、生成した凝固波形から、凝固波形の微分に関するパラメータの値及び総反応時間を取得する。そして、分析処理を行った後、制御装置４は、分析結果の表示処理を実行する(ステップＳ２３)。

(フィブリノゲンの抗原量に関する情報の取得の処理手順)
図１０Ａを参照して、フィブリノゲンの抗原量に関する情報の取得処理のフローを説明する。ここでは、凝固波形から|min 1|の値を取得し、取得した値から血液検体のフィブリノゲンの抗原量の値を取得する場合を例として説明する。しかし、本実施形態は、この例のみに限定されるものではない。この例においては、|min 1|に代えて、|max 2|又は総反応時間を取得してもよい。

ステップＳ１０１において、制御装置４のＣＰＵ４０１ａは、測定装置５から受信したデータに基づいて、透過光強度の凝固波形を取得する。次に、ステップＳ１０２において、ＣＰＵ４０１ａは、取得した凝固波形から、ハードディスク４０１ｄに記憶された凝固波形の微分に関するパラメータを算出するための式にしたがって、|min 1|の値を算出する。ステップＳ１０３において、ＣＰＵ４０１ａは、算出した|min 1|の値から、ハードディスク４０１ｄに記憶された換算式にしたがって、フィブリノゲンの抗原量の値を算出する。ここで、換算式は、正常血漿の測定により予め作成され、制御部４ａのハードディスク４０１ｄに記憶されている。ステップＳ１０４において、ＣＰＵ４０１ａは、取得したフィブリノゲンの抗原量の値を画像出力インタフェース４０１ｈに送信する。画像出力インタフェース４０１ｈは、フィブリノゲンの抗原量の値を表示部４１に表示させたり、プリンタに印刷させたりする。あるいは、音声で出力してもよい。これにより、フィブリノゲンの抗原量の値を、例えば推定抗原量としてユーザに提供できる。

(フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報の取得の処理手順)
図１０Ｂを参照して、抗原量と活性との比に関する情報の取得処理のフローを説明する。ここでは、凝固波形から|min 1|の値及び凝固時間を取得し、これらの値から血液検体の抗原量と活性との比の値を取得する場合を例として説明する。しかし、本実施形態は、この例のみに限定されるものではない。この例においては、|min 1|に代えて、|max 2|又は総反応時間を取得してもよい。また、抗原量と活性との比の値は、上記の式(１)に代えて、上記の式(２)にしたがって取得してもよい。

ステップＳ２０１において、制御装置４のＣＰＵ４０１ａは、測定装置５から受信したデータに基づいて、透過光強度の凝固波形を取得する。次に、ステップＳ２０２において、ＣＰＵ４０１ａは、取得した凝固波形から、ハードディスク４０１ｄに記憶された凝固波形の微分に関するパラメータ及び凝固時間を算出するための式にしたがって、|min 1|の値を算出する。また、ＣＰＵ４０１ａは、取得した凝固波形から凝固時間を取得する。ステップＳ２０３において、ＣＰＵ４０１ａは、上述のステップＳ１０３と同様に、|min 1|の値からフィブリノゲンの抗原量の値を算出する。また、ＣＰＵ４０１ａは、算出した凝固時間の値から、ハードディスク４０１ｄに記憶された換算式にしたがって、フィブリノゲンの活性濃度の値を算出する。ここで、換算式は、濃度既知のトロンビン標準液の測定により予め作成され、制御部４ａのハードディスク４０１ｄに記憶されている。

ステップＳ２０４において、ＣＰＵ４０１ａは、取得したフィブリノゲンの抗原量の値及び活性濃度の値から、ハードディスク４０１ｄに記憶された上記の式(１)にしたがって、抗原量と活性との比の値を取得する。ステップＳ２０４において、ＣＰＵ４０１ａは、抗原量と活性との比の値を画像出力インタフェース４０１ｈに送信する。画像出力インタフェース４０１ｈは、抗原量と活性との比の値を表示部４１に表示させたり、プリンタに印刷させたりする。あるいは、音声で出力してもよい。また、フィブリノゲンの抗原量の値及び活性濃度の値も、表示部４１に表示してもよい。これにより、抗原量と活性との比の値を、例えば比活性としてユーザに提供できる。

(フィブリノゲンの異常に関する情報の取得の処理手順)
図１０Ｃを参照して、フィブリノゲンの異常に関する情報の取得処理のフローを説明する。ここでは、凝固波形から|min 1|の値及び凝固時間を取得し、これらの値から血液検体におけるフィブリノゲンの抗原量と活性との比の値を取得し、該比の値に基づいてフィブリノゲンの活性の異常に関する情報を取得する場合を例として説明する。しかし、本実施形態は、この例のみに限定されるものではない。この例においては、|min 1|に代えて、|max 2|又は総反応時間を取得してもよい。また、フィブリノゲンの抗原量と活性との比の値は、上記の式(１)に代えて、上記の式(２)にしたがって取得してもよい。

ステップＳ３０１〜Ｓ３０４については、それぞれ上記のステップＳ２０１〜Ｓ２０４と同様である。ステップＳ３０５において、ＣＰＵ４０１ａは、取得した比の値と、ハードディスク４０１ｄに記憶された第１の閾値とを用いて、フィブリノゲンの活性に異常があるかを判定する。ここで、比の値が第１の閾値よりも小さいとき、処理はステップＳ３０６に進行する。ステップＳ３０６において、ＣＰＵ４０１ａは、フィブリノゲンの活性に異常があるとの判定結果を画像出力インタフェース４０１ｈに送信する。一方、比の値が第１の閾値よりも小さくないとき(すなわち、比の値が第１の閾値以上であるとき)、処理はステップＳ３０７に進行する。ステップＳ３０７において、ＣＰＵ４０１ａは、フィブリノゲンの活性に異常がないとの判定結果を画像出力インタフェース４０１ｈに送信する。

なお、比の値を上記の式(２)によって算出した場合は、該比の値と第２の閾値とを比較する。このとき、比の値が第２の閾値よりも小さいか又は第２の閾値と同じであるとき、ＣＰＵ４０１ａは、フィブリノゲンの活性に異常がないとの判定結果を画像出力インタフェース４０１ｈに送信する。また、比の値が第２の閾値よりも大きいとき、ＣＰＵ４０１ａは、フィブリノゲンの活性に異常があるとの判定結果を画像出力インタフェース４０１ｈに送信する。

ステップＳ３０８において、画像出力インタフェース４０１ｈは、フィブリノゲンの機能の異常に関する情報を表示部４１に表示させたり、プリンタに印刷させたりする。あるいは、音声で出力してもよい。また、フィブリノゲンの抗原量の値、活性濃度の値及びそれらの比の値も、表示部４１に表示してもよい。

分析結果を表示する画面の一例を、図１１を参照して説明する。画面Ｄ１は、検体番号を表示する領域Ｄ１１と、測定項目名を表示する領域Ｄ１２と、詳細画面を表示させるためのボタンＤ１３と、測定日時を表示するための領域Ｄ１４と、測定結果を表示する領域Ｄ１５と、分析情報を表示する領域Ｄ１６と、凝固波形及びそれを微分したグラフを表示する領域Ｄ１７を含む。

領域Ｄ１５には、測定項目と測定値が表示される。領域Ｄ１５において、「Fbg sec」は、トロンビン時間法による凝固時間であり、「Fbg conc.」は、フィブリノゲンの活性濃度である。領域Ｄ１５には、|min 1|などの微分パラメータの値や総反応時間が表示されてもよい。

領域Ｄ１６には、分析項目と参考情報が表示される。領域Ｄ１６において、「活性値」は、フィブリノゲンの活性濃度の値である。「推定抗原量」は、微分パラメータの値又は総反応時間に基づいて取得したフィブリノゲンの抗原量の値である。「比活性」とは、抗原量と活性との比の値(フィブリノゲンの活性濃度の値／フィブリノゲンの抗原量の値)である。「Cutoff(参考)」は、比活性の値に対応する正常値(第１の閾値)である。「判定(参考)」は、血液検体分析装置による判定結果である。図１１では、血液検体が、フィブリノゲンの活性に異常がある検体である疑いがあることを示す。なお、フィブリノゲンの異常の診断は、この判定結果だけでなく、他の検査結果などの情報も考慮して行われることが望ましい。よって、本実施形態に係る血液検体分析装置による判定結果及びCutoffが参考情報であることを示すために、「(参考)」と表示している。図１１では、判定結果を「活性異常の疑い」という文字で表示しているが、フラグなどの記号や図形標識で表示してもよい。あるいは、判定結果を音声で出力してもよい。

以下に、本発明を実施例により詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

実施例１： フィブリノゲンの抗原量と、微分パラメータ及び総反応時間との相関
(１) 凝固波形の微分に関するパラメータの値及び総反応時間の取得
正常血漿(12検体)の凝固波形を、フィブリノゲンキットのトロンボチェックFib(L)(シスメックス株式会社)を用いて測定した。該キットは、トロンビン時間法に基づくキットであり、トロンビン含有試薬を含む。具体的な操作は、該キットに添付のマニュアルに従って行った。測定は、自動血液凝固測定装置CS-5100(シスメックス株式会社)により行った。CS-5100により、トロンビン含有試薬を添加した各検体における透過光強度の変化を経時的に測定し、凝固波形を取得した。また、CS-5100により、各検体の|min 1|、|max 2|及び総反応時間を取得した。

(２) フィブリノゲンの抗原量の測定
上記の正常血漿におけるフィブリノゲンの抗原量を、血漿中フィブリノゲン測定キットのファクターオート(商標)フィブリノーゲン(株式会社キューメイ研究所)を用いて、ラテックス凝集法により測定した。該キットは、抗フィブリノゲン抗体を含むキットである。具体的な操作は、該キットに添付のマニュアルに従って行った。

(３) フィブリノゲンの抗原量と、微分パラメータ及び総反応時間との相関
各検体について、フィブリノゲンの抗原量と凝固波形パラメータとをプロットしてグラフを作成した。また、各グラフについて、回帰式を作成し、決定係数(R²)を算出した。結果を図１２Ａ〜Ｃ及び表１に示す。図及び表中、LIAとはラテックス免疫アッセイを示し、TRTとは総反応時間を示す。

図１２Ａ〜Ｃ及び表１に示されるように、|min 1|、|max 2|及び総反応時間はいずれも、ラテックス凝集法により測定されたフィブリノゲンの抗原量とよく相関した。よって、得られたグラフ又は回帰式を用いることにより、|min 1|、|max 2|及び総反応時間を、フィブリノゲンの抗原量に換算できる。このように、|min 1|、|max 2|及び総反応時間から、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得できることが示された。

実施例２： 凝固波形解析に基づくフィブリノゲン異常症の判定
(１) 閾値の算出
実施例１で得られた回帰式を用いて、正常血漿の|min 1|からフィブリノゲンの抗原量の換算値を取得した。以下、凝固波形パラメータから得られた換算値を「推定抗原量」又は「eAg」ともいう。また、濃度既知のフィブリノゲン標準液の凝固時間を測定して作成した検量線を用いて、実施例１で測定した凝固時間から、正常血漿におけるフィブリノゲンの活性濃度を取得した。以下、フィブリノゲンの活性濃度の値を「Ac」ともいう。そして、正常血漿の|min 1|について、フィブリノゲンの活性濃度と推定抗原量との比(Ac/eAg)を算出した。得られたAc/eAgの値(mean±2SD)は、1.103±0.305であった。実施例２では、この比の値を所定の閾値として用いた。

(２) 患者検体の測定
フィブリノゲン異常症と診断された患者から得た血漿(４検体)について、実施例１と同様にしてトロンビン時間法による凝固波形を測定し、|min 1|を取得した。また、これらの血漿について、ラテックス凝集法によるフィブリノゲンの抗原量の測定を、実施例１と同様にして行った。以下、ラテックス凝集法により得られたフィブリノゲンの抗原量の値を「Ag」ともいう。各患者検体について、上記(１)と同様にして、凝固時間からAcを取得し、|min 1|からeAgを取得し、Ac/eAgを算出した。結果を表２に示す。

(３) 結果
フィブリノゲン異常症は、フィブリノゲンのタンパク質量に異常はないが、フィブリノゲンの活性に異常がある疾患である。そのため、フィブリノゲン異常症の血液検体では、フィブリノゲンの抗原量は正常であるが、フィブリノゲンの活性濃度は低い値を示す。実際、表２に示されるように、患者１〜４の血漿では、抗原量(Ag)の値に比べて、フィブリノゲンの活性濃度(Ac)が低くなっている。このことは、推定抗原量(eAg)とフィブリノゲンの活性濃度(Ac)との比較からも言える。また、患者１〜４のAc/eAgの値はいずれも、上記(１)で得た所定の閾値(正常血漿のAc/eAg)よりも有意に低かった(p＜0.00001)。これらのことから、フィブリノゲンの活性濃度と、微分パラメータに基づくフィブリノゲンの抗原量との比が、フィブリノゲンの機能に関する新たな指標として有用であることが示された。また、検体についての該比の値と、正常検体についての比の値とを比較することにより、フィブリノゲンの活性の異常を判定できることが示された。

実施例３： 凝固波形解析に基づくフィブリノゲン異常症の判定(２)
(１) 閾値の算出
実施例１で得られた回帰式を用いて、正常血漿の|max 2|及び総反応時間からフィブリノゲンの推定抗原量(eAg)を取得した。また、実施例２で取得した正常血漿におけるフィブリノゲンの活性濃度(Ac)を用いて、正常血漿の|max 2|及び総反応時間のそれぞれについてAc/eAgを算出した。正常血漿の|max 2|によるAc/eAgの値(mean±2SD)は、1.171±0.259であり、正常血漿の総反応時間によるAc/eAgの値(mean±2SD)は、0.678±0.368であった。実施例３では、これらの比の値を所定の閾値として用いた。

(２) 患者検体の測定
各患者検体のAc及びAgの値は、実施例２と同じである。実施例２の患者１〜３の血漿について、実施例１と同様にしてトロンビン時間法による凝固波形を測定し、|max 2|及び総反応時間を取得した。また、実施例１で得られた回帰式を用いて、|max 2|及び総反応時間のそれぞれからeAgを取得し、Ac/eAgを算出した。結果を表３及び４に示す。

(３) 結果
患者１〜３の|max 2|によるAc/eAgの値はいずれも、上記(１)で得た|max 2|による所定の閾値よりも低かった。また、患者１〜３の総反応時間によるAc/eAgの値はいずれも、上記(１)で得た総反応時間による所定の閾値よりも有意に低かった(p＜0.00001)。これらのことから、|max 2|及び総反応時間についても、|min 1|と同様、フィブリノゲンの活性濃度と、微分パラメータ又は総反応時間に基づくフィブリノゲンの抗原量との比が、フィブリノゲンの機能に関する指標として利用できることが示された。また、検体についての該比の値と、正常検体についての比の値とを比較することにより、フィブリノゲンの活性の異常を判定できることが示された。

参考例： 凝固波形の微分に関するパラメータの取得における干渉物質の影響
(１) 干渉物質を含む検体の調製
正常血漿に、ビリルビン-Ｆ(終濃度０、10又は20 mg/dL)、ビリルビン-Ｃ(終濃度０、10又は20 mg/dL)、ヘモグロビン(終濃度０、10又は20 mg/dL)又は乳び(終濃度０、10又は20 FTU)を添加して、干渉物質を含む検体を調製した。

(２) 検体の測定
上記の検体について、実施例１と同様にしてトロンビン時間法による凝固波形を測定し、凝固時間、|min 1|及び|max 2|を取得した。濃度既知のフィブリノゲン標準液の凝固時間を測定して作成した検量線を用いて、各検体の凝固時間からフィブリノゲンの活性濃度を取得した。干渉物質を含まない検体(終濃度０ mg/dL又は０ FTU)から得られた活性濃度、|min 1|及び|max 2|の値を100％として、干渉物質を含む検体から得られた活性濃度、|min 1|及び|max 2|の変化を算出した。結果を図１３Ａ〜Ｄに示す。図中、「Clauss」とは、フィブリノゲンの活性濃度を指す。

図１３Ａ〜Ｄから示されるように、干渉物質を含む検体から得られた凝固波形の微分に関するパラメータの値及びフィブリノゲンの活性濃度は、干渉物質を含まない検体から得られた値とほぼ同じであった。よって、本実施形態の分析方法は、干渉物質の影響を受けないことが示された。

１ 血液検体分析装置
２ 測定部
３ 検体搬送部
４ 制御装置
５ 測定装置
４ａ 制御部
８０ 検出部
１２０ 制御部

Claims (29)

1. 血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、前記血液検体を凝固させて凝固波形を取得する工程と、
   前記凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値を取得する工程と、
   取得した前記パラメータの値に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得する工程と
   を含む、血液検体の分析方法。
2. 凝固波形の微分に関するパラメータが、最大凝固速度(|min 1|)及び最大凝固減速度(|max 2|)から選択される少なくとも１つである請求項１に記載の分析方法。
3. 前記フィブリノゲンの抗原量に関する情報が、フィブリノゲンの抗原量の値である請求項１又は２に記載の分析方法。
4. 前記凝固波形に基づいて、凝固時間を取得する工程を含む請求項１〜３のいずれか１項に記載の血液検体の分析方法。
5. 前記凝固波形に基づいて、フィブリノゲンの活性濃度に関する情報を取得する工程を含む請求項１〜４のいずれか１項に記載の血液検体の分析方法。
6. 血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、前記血液検体を凝固させて凝固波形を取得する工程と、
   前記凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値と、凝固時間とを取得する工程と、
   取得した前記パラメータの値と前記凝固時間とに基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得する工程と
   を含む、血液検体の分析方法。
7. 前記凝固波形の微分に関するパラメータが、最大凝固速度(|min 1|)及び最大凝固減速度(|max 2|)から選択される少なくとも１つである請求項６に記載の分析方法。
8. 前記フィブリノゲンの機能に関する情報が、フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報である請求項６又は７に記載の分析方法。
9. 前記フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報が、フィブリノゲンの抗原量に関する情報と、フィブリノゲンの活性濃度に関する情報とに基づいて取得される請求項８に記載の分析方法。
10. 前記フィブリノゲンの機能に関する情報が、フィブリノゲンの異常があるか否かに関する情報である請求項６又は７に記載の分析方法。
11. 前記フィブリノゲンの異常が、フィブリノゲンの活性の異常である請求項１０に記載の分析方法。
12. 前記フィブリノゲンの異常があるか否かに関する情報が、フィブリノゲンの抗原量に関する情報と、フィブリノゲンの活性濃度に関する情報とに基づいて取得される請求項１０又は１１に記載の分析方法。
13. 前記フィブリノゲンの抗原量に関する情報と、前記フィブリノゲンの活性濃度に関する情報とに基づいて、フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報を取得し、前記フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報に基づいて、フィブリノゲンに異常があるか否かに関する情報を取得する請求項１２に記載の分析方法。
14. 前記フィブリノゲンの抗原量に関する情報が、前記凝固波形の微分に関するパラメータの値に基づいて取得される請求項９、１２及び１３のいずれか１項に記載の分析方法。
15. 前記フィブリノゲンの活性濃度に関する情報が、前記凝固時間に基づいて取得される請求項９及び１２〜１４のいずれか１項に記載の分析方法。
16. 前記フィブリノゲンの抗原量に関する情報が、フィブリノゲンの抗原量の値である請求項９及び１２〜１５のいずれか１項に記載の分析方法。
17. 前記フィブリノゲンの活性濃度に関する情報が、フィブリノゲンの活性濃度の値である請求項９及び１２〜１６のいずれか１項に記載の分析方法。
18. 前記フィブリノゲンの抗原量と活性との比に関する情報が、フィブリノゲンの活性濃度の値とフィブリノゲンの抗原量の値との比の値である請求項８、９及び１３〜１７のいずれか１項に記載の分析方法。
19. 前記比の値が、下記の式(１)又は(２)により算出される請求項１８に記載の判定方法。
    (比の値)＝(フィブリノゲンの活性濃度の値)／(フィブリノゲンの抗原量の値) ・・・式(１)
    又は
    (比の値)＝(フィブリノゲンの抗原量の値)／(フィブリノゲンの活性濃度の値) ・・・式(２)
20. 下記の式(１)により算出された比の値と、第１の閾値とを比較して、算出された比の値が第１の閾値よりも低い場合に、フィブリノゲンの活性に異常があるとの情報を取得するか、又は
    下記の式(２)により算出された比の値と、第２の閾値とを比較して、算出された比の値が第２の閾値よりも高い場合に、フィブリノゲンの活性に異常があるとの情報を取得する
    請求項１３に記載の分析方法。
    (比の値)＝(フィブリノゲンの活性濃度の値)／(フィブリノゲンの抗原量の値) ・・・式(１)
    又は
    (比の値)＝(フィブリノゲンの抗原量の値)／(フィブリノゲンの活性濃度の値) ・・・式(２)
21. 前記凝固波形が、トロンビン時間法に基づく凝固波形である請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
22. 前記凝固波形が、前記血液検体と前記トロンビン含有試薬とを含む測定試料に光を照射して得られる光学的情報から取得される請求項１〜２１のいずれか１項に記載の分析方法。
23. 前記光学的情報が、連続的又は断続的に測定された散乱光量、透過光強度又は吸光度であり、凝固波形が、散乱光量、透過光強度又は吸光度の経時的変化を表す波形である請求項２２に記載の方法。
24. 血液検体と、トロンビン含有試薬とを含む測定試料を調製し、調製された前記測定試料から凝固波形を取得する測定部と、
    前記凝固波形に基づいてフィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得する情報取得部と
    を備え、
    前記情報取得部が、
    前記測定部により取得された凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値を取得し、
    取得した前記パラメータの値に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得する、
    血液検体分析装置。
25. 血液検体と、トロンビン含有試薬とを含む測定試料を調製し、調製された前記測定試料から凝固波形を取得する測定部と、
    前記凝固波形に基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得する情報取得部と
    を備え、
    前記情報取得部が、
    前記測定部により取得された凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値と、凝固時間とを取得し、
    取得した前記パラメータの値と前記凝固時間とに基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得する、
    血液検体分析装置。
26. コンピュータが読み取り可能な媒体に記録されているコンピュータプログラムであって、下記のステップ：
    血液検体と、トロンビン含有試薬とを含む測定試料から取得された凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値を取得するステップと、
    取得した前記パラメータの値に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得するステップと
    を前記コンピュータに実行させる、血液検体の分析のためのコンピュータプログラム。
27. コンピュータが読み取り可能な媒体に記録されているコンピュータプログラムであって、下記のステップ：
    血液検体と、トロンビン含有試薬とを含む測定試料から取得された凝固波形に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータの値と、凝固時間とを取得するステップと、
    取得した前記パラメータの値と前記凝固時間に基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得するステップと
    を前記コンピュータに実行させる、血液検体の分析のためのコンピュータプログラム。
28. 血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、前記血液検体を凝固させて凝固波形を取得する工程と、
    前記凝固波形に基づいて、前記凝固波形を構成する測定値の変化がなくなるまでの総反応時間を取得する工程と、
    前記総反応時間に基づいて、フィブリノゲンの抗原量に関する情報を取得する工程と
    を含む、血液検体の分析方法。
29. 血液検体とトロンビン含有試薬とを混合して、前記血液検体を凝固させて凝固波形を取得する工程と、
    前記凝固波形に基づいて、前記凝固波形を構成する測定値の変化がなくなるまでの総反応時間と、凝固時間とを取得する工程と、
    前記総反応時間と前記凝固時間とに基づいて、フィブリノゲンの機能に関する情報を取得する工程と
    を含む、血液検体の分析方法。