JP2018048175A - 脳機能向上用組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】好酸球増加症、神経疾患及び／又は神経変性疾患に関連した障害治療法の代案、及び／又は改善、ひいては脳機能の増進に対する治療及び当該治療の手段の提供。【解決手段】α−ケトグルタル酸（ＡＫＧ）又はその薬学的に許容される塩、リパーゼ、プロテアーゼおよびアミラーゼを含む組成物であって、ＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００ないし２０，０００ＵＳＰ単位のリパーゼ、ＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり５００ないし５０，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼおよびＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００ないし２０，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼを含む、組成物。【選択図】図１

Description

本発明は、医薬品及び栄養補助食品分野に関し、特に神経疾患及び／又は神経変性疾患の治療と脳機能向上に関する。

神経幹細胞における新しいニューロンの形成（神経発生）は、ヒトを含む哺乳類成体において一生かけて持続する現象として知られている。但し、当該現象は、加齢によって減少する明らかな傾向を見せる。成体の神経発生において最も活動的な遺伝子座は、記憶と空間知覚で中心的な役割を担う海馬である。海馬は、アルツハイマー病により最初に損傷する領域でもある。相当数の神経疾患（特にパーキンソン病又はアルツハイマー病等の神経変性疾患、又は鬱病）を成体の神経発生の刺激によって治療することができるという仮説を立証するため、該当方法に対する研究が集中的に行われていた。

好酸球（又は好酸性料粒球）は、寄生体の防御に関連する白血球であり、また新生物性疾患、自己免疫疾患及びアレルギー性疾患にも関与する。好酸球数を減少させる治療はコルチコステロイド、メポリズマブ、レスリズマブ、ロイコトリエン拮抗剤及びイマチニブ等で多様であるが、これらはいずれも欠陥があった。

好酸球増加症、神経疾患及び／又は神経変性疾患に関連した障害治療法の代案、及び／又は改善、ひいては脳機能の増進に対する医学的要求はまだ満たされていない。

本発明の目的は上述の治療及び当該治療の手段を提供することである。

定義
本願において、別途の記載がない限り、略語ＡＫＧはα−ケトグルタル酸（式Ｉを参照）、
式Ｉ
及びその薬学的に許容可能な塩を意味する。本発明において、前記塩は有機塩又は無機塩である。好ましい塩の例としては、α−ケトグルタル酸のナトリウム塩及びカルシウム塩が挙げられる（それぞれ、Ｎａ−ＡＫＧ及びＣａ−ＡＫＧと表記する）。他の好ましい塩には、カリウム−ＡＫＧとマグネシウム−ＡＫＧ、また反対イオンがタンパク質（アルギニン、ロイシン、イソロイシン等）、ピリドキシン、キトサン、クレアチン又はオルチニンから自然的に発生するアミノ酸であるα−ケトグルタル酸の有機塩が含まれる。

＜薬学的に許容可能な塩＞は、指定の被験体に指定された量を投与しても有害でなく、特定の目的に適した安定性と可用性を有するという意味で薬学的に許容可能な全ての種類の塩が挙げられる。本発明の薬学的に許容可能な塩において、α−ケトグルタル酸塩の反対イオンがそのもので活性成分でないことが好ましいが、反対イオンが活性成分であっても許容可能な場合もあり得る。

本発明において、＜リパーゼ＞とは、脂肪酸、グリセロール、モノグリセリド及び／又はジグリセリドを放出するトリグリセリドから脂肪酸の加水分解放出を促進する酵素をいう。リパーゼは、長鎖又は中間鎖多不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）の放出を促進することが好ましい。ここで、＜長鎖＞とは炭素原子１２個以上の尻尾を有する脂肪酸を、＜中間鎖＞とは炭素原子６ないし１２個の尻尾を有する脂肪酸をいう。＜多不飽和＞とは、多不飽和脂肪酸の尻尾に存在する炭素原子間に少なくとも２つの二重結合が存在することを意味する。ＰＵＦＡの例として、リノール酸、リノエライジン酸、α−リノール酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸が挙げられるが、これに限定されない。本発明のリパーゼの活性は実質的にｐＨによらず、ｐＨ６〜８で活性化されることが好ましい。

本発明でいうリパーゼは、ヒト、動物、植物、真菌、細菌、真核生物及び原核生物等から由来する全てのリパーゼを含み、この場合、リパーゼを組み換え方法で生成したか、又は非組み換え方法で生成したかは問わない。

リパーゼは酸安定性を有することが好ましい。酸安定性リパーゼは、リパーゼ−ＣＬＥＣ（架橋酵素結晶）であってもよい。リパーゼ−ＣＬＥＣ結晶及びその製造方法は本分野において周知の事実であり、例えば、本願に援用されているＵＳ２００６／０１２１０１７を参照することができる。胃腸における活性損失、すなわち、制酸剤、プロトンポンプ抑制剤又は他の適した薬理学的方法によって、減少した患者の胃酸性度を補うため投与量を増加した場合、又はリパーゼが本分野における周知の保護性腸溶製剤で生成された場合、酸非安定性リパーゼを用いることも可能である。

本発明において、＜プロテアーゼ＞とは、タンパク質において内部アミドペプチド結合の分裂を促進する酵素であるプロテイナーゼ、タンパク質分解酵素又はペプチダーゼをいう。特に、プロテアーゼは１つのアミノ酸のカルボキシル基と他のアミノ酸のアミノ基との間に存在するアミド連鎖を開裂してタンパク質をより小さなタンパク質／ペプチド、及び／又はその成分であるアミノ酸への切替を促進する。プロテアーゼは一般的に触媒類に分類され、例えば、アスパルト酸ペプチダーゼ、システイン（チオール）ペプチダーゼ、メタロペプチダーゼ、セリンペプチダーゼ、スレオニンペプチダーゼ、アルカリ性又はセミアルカリ性プロテアーゼ、中性ペプチダーゼ、及び未詳の触媒機構のペプチダーゼに分けられる（http://merops.sanger.ac.uk参照）。全ての触媒類は、本発明で定義する用語に含まれるものとみなす。本発明でいうプロテアーゼは、ヒト、動物、植物、真菌、細菌、真核生物及び原核生物等から由来する全てのプロテアーゼを含み、この場合、プロテアーゼを組み換え方法で生成したか、又は非組み換え方法で生成したかは問わない。

本発明において、＜アミラーゼ＞とは、広範囲な基質特異性を有し、澱粉、グリコーゲン及び３個以上のα−１，４−結合型Ｄ−グルコース単位生産マルトース、グルコース及び／又は２〜３単位の限界デキストリンを含有する関連多糖類のα−１，４−グルコシド結合の加水分解を促進するアミラーゼ酵素をいう。本発明でいうアミラーゼは、ヒト、動物、植物、真菌、細菌、真核生物及び原核生物等から由来する全てのアミラーゼを含み、この場合、アミラーゼを組み換え方法で生成したか、又は非組み換え方法で生成したかは問わない。

＜ＵＳＰ単位＞とは、薬剤又は組成物に存在する酵素活性を示すアメリカ薬局方の単位をいう。リパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼの１ＵＳＰ単位は、ＵＳＰ−ＮＦ；米国薬局方−国民医薬品集 ２４、ｐｐ．１２５４−１２５５（２０００）のパンクレリパーゼの項目に定義されている。上記参考文献は、リパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼの評価法を開示し、該当の内容は本願に援用される。

本発明において、＜神経発生＞とは、神経幹細胞から新しいニューロンが形成される過程をいう。神経発生において、未分化神経前駆細胞又は幹細胞から新しいニューロン、星状細胞、神経膠及び他の神経系列が活性生成される。

本発明において、＜神経変性疾患＞とは、ニューロンの構造及び／又は機能の進行性損失を誘発する疾患をいう包括的用語である。この場合、ニューロン死の有無は考慮対象でない。神経変性疾患の例としては、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病及び筋萎縮性側索硬化症が挙げられるが、これに限定されない。

本発明において、＜好酸球増加症＞は、原発性好酸球増加症と好酸球数の増加が症状として現れる状態の両方ともを包括する。
本発明において、＜パンクレリパーゼ＞は、当該技術分野で定義する一般的な意味のパンクレリパーゼは勿論、パンクレアチンのような類似調合剤及び動物から採取した類似調合剤をいずれも包括する。

各群に関する説明は表１及び実施例１を参照する。

図１は、本発明によって、海馬のＣＡ１領域において錐体細胞層１ｍｍ当たりの増加したネスチン陽性ニューロンの数で示される、成体神経発生の増加を説明するためのものである。星印（^＊）は統計的有意差を示す。

図２は、Ｔ型迷路試験における自発的交替行動の比率で示される、本発明による認知能力の向上を説明する。（＋）は、実験動物が左右の通路を正確に通り過ぎた試みの成功回数で、（−）は、実験動物が同一通路を二回通り過ぎた試みの失敗回数である。

図３は、血液化学分析の結果を示す。図３Ａは、血小板１０^３／μｌ、図３Ｂはリンパ球（％）、図３Ｃは好酸球（％）、図３Ｄは単核細胞（％）である。ａ又はｃは対照群（ｐ＜０．０５）に対する統計的有意差を示す。

図４は、他の治療群において、海馬のＣＡ１領域１００μｍ^２当たりのシナプス末端の平均数を示す。星印（^＊）は、対照群（ｐ＜０．０５）と比較したときの統計的有意性を示す。

図５は、他の治療群において海馬のＣＡ１領域のシナプス末端の平均面積（μｍ^２）を示す。

図６は、海馬のＣＡ１領域において、シナプス（Ａ）当たり、及びシナプス末端（Ｂ）１００μｍ^２当たりのシナプス小胞の平均数を示す。星印（^＊）は、対照群（ｐ＜０．０５）と比較したときの統計的有意性を示す。

図７は、シナプス小胞からシナプス前末端の活性帯までの平均距離（ｎｍ）を示す。星印（^＊）は、対照群（ｐ＜０．０５）と比較したときの統計的有意性を示す。

図８は、シナプス前末端の小胞から直近の小胞までの平均距離（ｎｍ）を示す。星印（^＊）は、対照群（ｐ＜０．０５）と比較したときの統計的有意性を示す。

図９は、海馬のＣＡ１領域において穿孔シナプスと多重シナプスとの比率（％）を示す。残りのものは単純シナプスに該当する。灰色及び黒色の棒上の字は、ｐ＜０．０５の場合の統計的差を示している。同一の字がある棒同士は互いに統計的有意差がない。Ｃは年齢適合（高齢）対照群を示す。

図１０は、Ｔ型迷路試験における自発的交替行動の比率で現れる、本発明による認知能力の向上を示す（実施例５を参照）。本試験は出生（０ヶ月目）当時に行い、２ヶ月目及び４ヶ月目に繰り返された。変形ワルド法で算出した９５％信頼区間で成功回数の比率を示した。基線（０）における治療と４ヶ月目の治療とは、９５％信頼区間が重なっていないため、少なくともｐ＜０．０５で統計的有意差を示す。

図１１は、Ｔ型迷路試験で２ヶ月目及び４ヶ月目（統合結果（ｒｅｓｕｌｔｓ ｐｏｏｌｅｄ））に基線における認知能力より鈍化又は向上した能力を示す実施例５の個別動物の比率を現す。実験群において、能力が向上した動物の比率は、黒色の縦棒で、能力が劣化した動物の比率は灰色の縦棒で表記した。１群は年齢適合未治療群、２群はＡＫＧ＋酵素を用いた治療群である。差異はｐ＜０．０５で著しく現れた。

本発明は以下の項目を提供する。

１．α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩（ＡＫＧ）と、リパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼからなる群より選択される１種以上の酵素を含む組成物。

２．項目１において、リパーゼ、プロテアーゼ、及び／又はアミラーゼを、表Ｙ及び表Ｚを参照として表Ｘに示した実施形態に基づく量で含む、組成物。

３．項目１又は項目２において、リパーゼを含む、組成物。

４．項目３において、前記リパーゼは哺乳類リパーゼである、組成物。

５．項目３において、前記リパーゼは微生物リパーゼである、組成物。

６．項目３において、前記リパーゼは細菌性リパーゼである、組成物。

７．項目３において、前記リパーゼはパンクレリパーゼリパーゼである、組成物。

８．項目３において、前記リパーゼはリプロタマーゼリパーゼである、組成物。

９．項目３において、前記リパーゼはシュードモナスリパーゼである、組成物。

１０．項目３において、前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩刺激性リパーゼ（ＢＳＳＬ）である、組成物。

１１．項目３において、前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩依存性リパーゼ（ＢＳＤＬ）である、組成物。

１２．項目３において、前記リパーゼはリゾプスオリーゼリパーゼである、組成物。

１３．項目３において、前記リパーゼはクロモバクテリウムビスコスムリパーゼである、組成物。

１４．項目３において、前記リパーゼはリゾプスデレマーリパーゼである、組成物。

１５．項目３において、前記リパーゼはバークホルデリアリパーゼである、組成物。

１６．項目１５において、前記リパーゼはバークホルデリアセパシアリパーゼである、組成物。

１７．項目１６において、前記リパーゼは架橋リパーゼ結晶であるバークホルデリアセパシアリパーゼである、組成物。

１８．項目１ないし項目１７のいずれか１つにおいて、プロテアーゼを含む、組成物。

１９．項目１８において、前記プロテアーゼは哺乳類プロテアーゼである、組成物。

２０．項目１８において、前記プロテアーゼは微生物プロテアーゼである、組成物。

２１．項目１８において、前記プロテアーゼは真菌性プロテアーゼである、組成物。

２２．項目１８において、前記プロテアーゼはパンクレリパーゼプロテアーゼである、組成物。

２３．項目１８において、前記プロテアーゼはリプロタマーゼプロテアーゼである、組成物。

２４．項目１８において、前記プロテアーゼはアスペルギルスプロテアーゼである、組成物。

２５．項目２４において、前記プロテアーゼはアスペルギルスメレウスプロテアーゼである、組成物。

２６．項目１ないし項目２５のいずれか１つにおいて、アミラーゼを含む、組成物。

２７．項目２６において、前記アミラーゼは哺乳類アミラーゼである、組成物。

２８．項目２６において、前記アミラーゼは微生物アミラーゼである、組成物。

２９．項目２６において、前記アミラーゼは真菌性アミラーゼである、組成物。

３０．項目２６において、前記アミラーゼはパンクレリパーゼアミラーゼである、組成物。

３１．項目２６において、前記アミラーゼはリプロタマーゼアミラーゼである、組成物。

３２．項目２６において、前記アミラーゼはアスペルギルスアミラーゼである、組成物。

３３．項目３２において、前記アミラーゼはアスペルギルスオリーゼアミラーゼである、組成物。

３４．項目１ないし項目１７のいずれか１つにおいて、前記組成物はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のリパーゼを含む、組成物。

３５．項目１８ないし項目２５、又は項目３４のいずれか１つにおいて、前記組成物はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり５００〜５０，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼを含む、組成物。

３６．項目２６ないし項目３３、項目３４又は項目３５のいずれか１つにおいて、前記組成物はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼを含む、組成物。

３７．項目１において、架橋リパーゼ結晶であるＡＫＧ１ｇ当たり３，０００〜３００，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ、ＡＫＧ１ｇ当たり２，０００〜２００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３０，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼを含む、組成物。

３８．項目１において、ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のリプロタマーゼに相当する量のリプロタマーゼを含む、組成物。

３９．項目１において、ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のパンクレリパーゼに相当する量のパンクレリパーゼを含む、組成物。

４０．上記の項目のいずれか１つにおいて、前記組成物はα−ケトグルタル酸ナトリウムを含む、組成物。

４１．上記の項目のいずれか１つにおいて、前記組成物はα−ケトグルタル酸カルシウムを含む、組成物。

４２．上記の項目のいずれか１つにおいて、薬剤として用いられる、組成物。

４３．上記の項目のいずれか１つにおいて、神経変性疾患、神経幹細胞疾患、神経前駆細胞疾患、虚血性疾患、神経性外傷、情動障害、神経精神疾患、網膜変性疾患、網膜損傷／外傷、認知・学習・記憶障害から選択される神経疾患の治療又は予防に用いられる、組成物。

４４．上記の項目のいずれか１つにおいて、アルツハイマー病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、パーキンソン病及びパーキンソン症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、鬱病、双極性鬱病／障害、慢性疲労症候群、不安症候群／障害、自閉症、アスペルガー症候群、注意欠陥障害、認知能力又は記憶力関連障害から選択される病状の治療又は予防に用いられる、組成物。

４５．項目４４において、鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防に用いられる、組成物。

４６．上記の項目のいずれか１つにおいて、患者に１日当たりＡＫＧ０．１〜３０ｇを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、組成物。

４７．項目１ないし項目４５のいずれか１つにおいて、患者にＡＫＧ０．５〜２４０ｍｍｏｌを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、組成物。

４８．項目４７において、患者に１日当たりＡＫＧ０．５〜２４ｍｍｏｌを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、組成物。

４９．項目４８において、患者に１日当たりＡＫＧ１〜１２ｍｍｏｌを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、組成物。

５０．鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防に用いられる、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

５１．神経変性疾患、神経幹細胞疾患、神経前駆細胞疾患、虚血性疾患、神経性外傷、情動障害、神経精神疾患、網膜変性疾患、網膜損傷／外傷、認知・学習・記憶障害、アルツハイマー病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、パーキンソン病及びパーキンソン症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、鬱病、双極性鬱病／障害、慢性疲労症候群、不安症候群／障害、自閉症、アスペルガー症候群、注意欠陥障害、認知能力又は記憶力関連障害の治療又は予防方法に用いられ、上記方法は、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩と、そのリパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼから選択される１種以上の酵素を被験体に投与することを含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

５２．項目５１において、上記方法は、リパーゼ、プロテアーゼ、及び／又はアミラーゼを、表Ｙ及び表Ｚを参照として表Ｘに示した実施形態に基づきＡＫＧの量に対応する量で投与することを含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

５３．項目５１又は項目５２において、上記方法はリパーゼの投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

５４．項目５３において、前記リパーゼは哺乳類リパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

５５．項目５３において、前記リパーゼは微生物リパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

５６．項目５３において、前記リパーゼは細菌性リパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

５７．項目５３において、前記リパーゼはパンクレリパーゼリパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

５８．項目５３において、前記リパーゼはリプロタマーゼリパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

５９．項目５３において、前記リパーゼはシュードモナスリパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

６０．項目５３において、前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩刺激性リパーゼ（ＢＳＳＬ）である、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

６１．項目５３において、前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩依存性リパーゼ（ＢＳＤＬ）である、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

６２．項目５３において、前記リパーゼはリゾプスオリーゼリパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

６３．項目５３において、前記リパーゼはクロモバクテリウムビスコスムリパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

６４．項目５３において、前記リパーゼはリゾプスデレマーリパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

６５．項目５３において、前記リパーゼはバークホルデリアリパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

６６．項目６５において、前記リパーゼはバークホルデリアセパシアリパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

６７．項目６６において、前記リパーゼは架橋リパーゼ結晶であるバークホルデリアセパシアリパーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

６８．項目５１ないし項目６７のいずれか１つにおいて、上記方法はプロテアーゼの投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

６９．項目６８において、前記プロテアーゼは哺乳類プロテアーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

７０．項目６８において、前記プロテアーゼは微生物プロテアーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

７１．項目６８において、前記プロテアーゼは真菌性プロテアーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

７２．項目６８において、前記プロテアーゼはパンクレリパーゼプロテアーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

７３．項目６８において、前記プロテアーゼはリプロタマーゼプロテアーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

７４．項目６８において、前記プロテアーゼはアスペルギルスプロテアーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

７５．項目７４において、前記プロテアーゼはアスペルギルスメレウスプロテアーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

７６．項目５１ないし項目７５のいずれか１つにおいて、上記方法はアミラーゼの投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

７７．項目７６において、前記アミラーゼは哺乳類アミラーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

７８．項目７６において、前記アミラーゼは微生物アミラーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

７９．項目７６において、前記アミラーゼは真菌性アミラーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

８０．項目７６において、前記アミラーゼはパンクレリパーゼアミラーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

８１．項目７６において、前記アミラーゼはリプロタマーゼアミラーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

８２．項目７６において、前記アミラーゼはアスペルギルスアミラーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

８３．項目８２において、前記アミラーゼはアスペルギルスオリーゼアミラーゼである、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

８４．項目５１ないし項目８３のいずれか１つにおいて、上記方法はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のリパーゼの投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

８５．項目５１ないし項目８４のいずれか１つにおいて、上記方法はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり５００〜５，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼの投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

８６．項目５１ないし項目８５のいずれか１つにおいて、上記方法はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼ投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

８７．項目５１において、上記方法は、架橋リパーゼ結晶であるＡＫＧ１ｇ当たり３，０００〜３００，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ、ＡＫＧ１ｇ当たり２，０００〜２００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３０，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼの投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

８８．項目５１において、上記方法はＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のリプロタマーゼに相当する量のリプロタマーゼの投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

８９．項目５１において、上記方法はＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のパンクレリパーゼに相当する量のパンクレリパーゼの投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

９０．項目５１ないし項目８９のいずれか１つにおいて、上記方法はα−ケトグルタル酸ナトリウムの投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

９１．項目５１ないし項目９０のいずれか１つにおいて、上記方法はα−ケトグルタル酸カルシウムの投与を含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

９２．項目５１ないし項目９１のいずれか１つにおいて、上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ０．０３〜１００ｇを投与することを含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

９３．項目５１ないし項目９１のいずれか１つにおいて、上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ０．５〜２４０ｍｍｏｌを投与することを含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

９４．項目９３において、上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ０．５〜２４ｍｍｏｌを投与することを含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

９５．項目９４において、上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ１〜１２ｍｍｏｌを投与することを含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

９６．項目９５において、上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ３〜９ｍｍｏｌを投与することを含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

発明の詳細な説明
発明者は、ＡＫＧ、またリパーゼ、プロテアーゼ、及びアミラーゼを含む組成物が神経発生と認知に影響を及ぼすという事実を明らかにした。ＡＫＧと上述の酵素を組み合わせた結果、神経発生と認知向上に相乗的効果をもたらした。当該組み合わせはシナプス形態にも相乗的効果を及ぼした。

相乗作用組成物
第１様態において、本発明はα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩（ＡＫＧ）と、リパーゼ、プロテアーゼ、及びアミラーゼからなる群より選択される１種以上の酵素を含み、各成分は相乗的有効相対量で存在する新規相乗作用組成物を開示する。

前記組成物は、神経発生の促進、シナプス形態の向上、好酸球の減少、後述の各種病状の治療等で相乗的効果を発揮する。

特定の実施形態において、前記組成物はリパーゼを含んでいるが、プロテアーゼ又はアミラーゼは含んでいない。

特定の実施形態において、前記組成物はプロテアーゼを含んでいるが、リパーゼ又はアミラーゼは含んでいない。

特定の実施形態において、前記組成物はアミラーゼを含んでいるが、リパーゼ又はプロテアーゼは含んでいない。

特定の実施形態において、前記組成物はリパーゼとプロテアーゼを含んでいるが、アミラーゼは含んでいない。

特定の実施形態において、前記組成物はリパーゼとアミラーゼを含んでいるが、プロテアーゼは含んでいない。

特定の実施形態において、前記組成物はプロテアーゼとアミラーゼを含んでいるが、リパーゼは含んでいない。

特定の実施形態において、前記組成物はリパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼを含む。

本発明の組成物で用いるに適したリパーゼ、プロテアーゼ、及びアミラーゼ（あるいはこれらの調合物）は当該分野において周知のものであり、例えば、ＵＳ２００６／０１２０１７、ＵＳ２００４／００５７９４４、ＵＳ２００１／００４６４９３及びＵＳ６，０５１，２２０（以上、全文援用）を参照することができる。

当該組成物は、薬学的又は栄養学的に許容可能な賦形剤又は添加剤をさらに含んでいてもよい。当該組成物は、必要に応じて追加活性成分を含有していてもよい。但し、追加活性成分を含有していない方が好ましい。

組成物は経口投与用であることが好ましい。含有成分を経口投与できるように当該分野における周知の方法で調剤してもよい。製剤が非酸安定性リパーゼを含んでいる場合、少なくともこの成分を腸溶性被覆剤で封入することが好ましい。前記被覆剤は当該分野における周知の事実であり、市販中のものである。

当該組成物は、食品補助剤、栄養補助剤、医薬組成物、栄養補助食品又は食品添加剤であってもよい。

リパーゼ
第１様態の組成物はリパーゼを含んでいてもよく、必要に応じて後述のプロテアーゼ、後述のアミラーゼ、又は両方と組み合わせて含んでいてもよい。リパーゼは、哺乳類リパーゼ、微生物リパーゼ、細菌性リパーゼ、パンクレリパーゼリパーゼ（パンクレリパーゼに含まれているリパーゼ）、リプロタマーゼリパーゼ（リプロタマーゼに含まれているリパーゼ）、シュードモナスリパーゼ、ヒト又は他の哺乳類の胆汁酸塩刺激性リパーゼ（ＢＳＳＬ）、あるいは胆汁酸塩依存性リパーゼ（ＢＳＤＬ）、リゾプスオリーゼリパーゼ、クロモバクテリウムビスコスムリパーゼ、リゾプスデレマーリパーゼ、バークホルデリアリパーゼ、より好ましいバークホルデリアセパシアリパーゼ、最も好ましい架橋リパーゼ結晶であるバークホルデリアセパシアリパーゼから選択してもよい。

当該組成物は、ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３，０００，０００ＵＳＰ単位のリパーゼを含んでいてもよく、ＡＫＧ１ｇ当たり３，０００〜３００，０００ＵＳＰ単位のリパーゼが好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり６，０００〜１５０，０００ＵＳＰ単位のリパーゼがより好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり１５，０００〜６０，０００ＵＳＰ単位のリパーゼがさらに好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり約３０，０００ＵＳＰ単位のリパーゼが最も好ましい。

プロテアーゼ
第１様態の組成物はプロテアーゼを含んでいてもよく、必要に応じて上述のリパーゼ、後述のアミラーゼ、又は両方と組み合わせて含んでいてもよい。プロテアーゼは、哺乳類プロテアーゼ、微生物プロテアーゼ、真菌性プロテアーゼ、パンクレリパーゼプロテアーゼ（パンクレリパーゼに含まれているプロテアーゼ）、リプロタマーゼプロテアーゼ（パンクレリパーゼに含まれているプロテアーゼ）、アスペルギルスプロテアーゼ、最も好ましいアスペルギルスメレウスプロテアーゼから選択してもよい。

当該組成物はＡＫＧ１ｇ当たり２００〜２，０００，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼを含んでいてもよく、ＡＫＧ１ｇ当たり２，０００〜２００，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼが好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり４，０００〜１００，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼがより好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり１０，０００〜４０，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼがさらに好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり約２０，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼが最も好ましい。

アミラーゼ
第１様態の組成物はアミラーゼを含んでいてもよく、必要に応じて上述のリパーゼ、上述のプロテアーゼ、又は両方と組み合わせて含んでいてもよい。アミラーゼは、哺乳類アミラーゼ、微生物アミラーゼ、真菌性アミラーゼ、パンクレリパーゼアミラーゼ（パンクレリパーゼに含まれているアミラーゼ）、リプロタマーゼアミラーゼ（リプロタマーゼに含まれているアミラーゼ）、アスペルギルスアミラーゼ、最も好ましいアスペルギルスオリーゼアミラーゼから選択してもよい。

当該組成物はＡＫＧ１ｇ当たり３０．０〜３，０００，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼを含んでいてもよく、ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼが好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３０，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼがより好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり６００〜１５，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼがさらに好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり約３，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼが最も好ましい。

好ましい特定組み合わせ及び変形
第１様態の組成物は、ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３，０００，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ（好ましくは架橋リパーゼ結晶）、ＡＫＧ１ｇ当たり２００〜２，０００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり３０．０〜３，０００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼを含んでいてもよい。

第１様態の組成物は、ＡＫＧ１ｇ当たり３，０００〜３００，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ（好ましくは架橋リパーゼ結晶）、ＡＫＧ１ｇ当たり２，０００〜２００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼを含んでいてもよい。

第１様態の組成物は、ＡＫＧ１ｇ当たり６，０００〜１５０，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ（好ましくは架橋リパーゼ結晶）、ＡＫＧ１ｇ当たり４，０００〜１００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３０，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼを含んでいてもよい。

第１様態の組成物は、ＡＫＧ１ｇ当たり１５，０００〜６０，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ（好ましくは架橋リパーゼ結晶）、ＡＫＧ１ｇ当たり１０，０００〜４０，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり６００〜１５，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼを含んでいてもよい。

第１様態の組成物は、ＡＫＧ１ｇ当たり約３０，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ（好ましくは架橋リパーゼ結晶）、ＡＫＧ１ｇ当たり約２０，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり約３，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼを含んでいてもよい。

第１様態の組成物はリプロタマーゼを含んでいてもよい。リプロタマーゼの量は、ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位であってもよく、ＡＫＧ１ｇ当たり３，０００〜１５０，０００ＵＳＰリパーゼ単位のリプロタマーゼが好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり１５，０００〜６０，０００ＵＳＰリパーゼ単位のリプロタマーゼがより好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり約３０，０００ＵＳＰリパーゼ単位のリプロタマーゼが最も好ましい。ＡＫＧとリプロタマーゼからなる組成物は重量側面で同一量のＮａ−ＡＫＧ及びＣａ−ＡＫＧを含んでいてもよい。

第１様態の組成物はパンクレリパーゼを含んでいてもよい。パンクレリパーゼの量は、ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位であってもよく、ＡＫＧ１ｇ当たり３，０００〜１５０，０００ＵＳＰリパーゼ単位のパンクレリパーゼが好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり１５，０００〜６０，０００ＵＳＰリパーゼ単位のパンクレリパーゼがより好ましく、ＡＫＧ１ｇ当たり約３０，０００ＵＳＰリパーゼ単位のパンクレリパーゼが最も好ましい。ＡＫＧとパンクレリパーゼからなる組成物は重量側面で同一量のＮａ−ＡＫＧ及びＣａ−ＡＫＧを含んでいてもよい。

本発明は実施例項目以後に別添の表Ｘで第１様態の組成物の実施形態をさらに提供している。表Ｘの内容は以下の通りある。

表Ｘの各行は実施形態に対応する。＜＃＞と表記された左側から１列は実施形態の識別番号である。＜Ａ＞と表記された左側から２列は当該実施形態のリパーゼの濃度範囲であり、表Ｙ及び表Ｚを参照できる。＜Ｂ＞と表記された左側から３列は当該実施形態のプロテアーゼの濃度範囲であり、表Ｙ及び表Ｚを参照できる。＜Ｃ＞と表記された左側から４列は当該実施形態のアミラーゼの濃度範囲であり、表Ｙ及び表Ｚを参照できる。

表Ｙ：表ＸのＡ列、Ｂ列、Ｃ列の解釈

また、表Ｘに記載の実施形態の範囲の最後の値を表Ｘに記載の他の実施形態の範囲（同列）の最後の値と組み合わせてもよい。

例えば、Ａ列の値がそれぞれ２と９である２つの実施形態がある場合、これらを（１）基準値／１００〜基準値、（２）基準値〜基準値×１００、（３）基準値／２５〜基準値×１００、又は（４）基準値／１００〜基準値／２５の範囲を有する４つの実施形態の中のいずれか１つと組み合わせることができる。

一実施形態の最後の値は、他の実施形態に適用するオープンレンジの最後の値を設定するにも用いられる。例えば、Ａ列が２である場合、リパーゼの量がＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり＜少なくとも基準値／１００＞ＵＳＰ単位である実施形態と、リパーゼの量がＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり＜少なくとも基準値×１００＞ＵＳＰ単位である実施形態との根拠になる。同様に、Ａ列の２は、リパーゼの量がＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり＜基準値／１００未満＞ＵＳＰ単位である実施形態と、リパーゼの量がＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり＜基準値×１００未満＞ＵＳＰ単位である実施形態との根拠になることがある。

表Ｚ：表ＸのＡ列、Ｂ列、Ｃ列の解釈基準値（表Ｙ参照）

表Ｘの解釈法に対する理解のため、以下を例として説明する。

表Ｘの実施例５３の場合、Ａ列は１、Ｂ列は６、Ｃ列は３の値を有する。

表Ｙによると、実施例５３のリパーゼ含有量は基準値／２５０〜基準値×２５０、プロテアーゼ含有量は基準値〜基準値×５、アミラーゼ含有量は基準値／２５〜基準値×２５になる。

表Ｚが提示する基準値を適用すると、実施例５３に適用される数値は以下のようである。

リパーゼ含有量：２０００／２５０〜２０００×２５０ＵＳＰ単位／ｍｍｏｌ ＡＫＧ。すなわち、８〜５００，０００ＵＳＰ単位／ｍｍｏｌ ＡＫＧ
プロテアーゼ含有量：５０００〜５０００×５ＵＳＰ単位ｓ／ｍｍｏｌ ＡＫＧ。すなわち、５，０００〜２５，０００ＵＳＰ単位／ｍｍｏｌ ＡＫＧ
アミラーゼ含有量：２０００／２５〜２０００×２５ＵＳＰ単位／ｍｍｏｌ ＡＫＧ。すなわち、８〜５０，０００ＵＳＰ単位／ｍｍｏｌ ＡＫＧ

表Ｚ及び表Ｙを参照にする表Ｘに記載の本発明の第１様態の実施形態は、リパーゼ、プロテアーゼ、及びアミラーゼが特定の実施形態で存在する限り、リパーゼとしてバークホルデリアセパシアリパーゼ（好ましくは架橋リパーゼ結晶）、プロテアーゼとしてアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、アミラーゼとしてアスペルギルスオリーゼアミラーゼを含むことが好ましい。

また、表Ｚ及び表Ｙを参照にする表Ｘに記載の本発明の第１様態の実施形態は、リパーゼ、プロテアーゼ、及びアミラーゼが特定の実施形態で存在する限り、唯一のリパーゼとしてバークホルデリアセパシアリパーゼ（好ましくは架橋リパーゼ結晶）、唯一のプロテアーゼとしてアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、唯一のアミラーゼとしてアスペルギルスオリーゼアミラーゼを含むことがより好ましい。

ＡＫＧ
上述の第１様態の組成物（表Ｘに記載の実施形態を含む）に含有されたＡＫＧ成分は、α−ケトグルタル酸ナトリウム、α−ケトグルタル酸カルシウム、又はこれらの組み合わせ（同一量で組み合わせることが好ましい）で構成されるか、又はこれらを含んでいてもよい。ＡＫＧ成分は、さらに、α−ケトグルタル酸マグネシウム又はα−ケトグルタル酸カリウムのようなＡＫＧの他の薬学的に許容可能な無機塩、又は、オルチニン−ＡＫＧ、アルギニン−ＡＫＧ、キトサン−ＡＫＧ、ピロドキシン−ＡＫＧ、ロイシン−ＡＫＧ、イソロイシン−ＡＫＧ又はクレアチン−ＡＫＧ、あるいはこれらの組み合わせのようなＡＫＧの薬学的に許容可能な有機塩で構成されるか、又はこれらを含んでいてもよい。

第１様態の組成物の製造法及び用途
第２様態において本発明は、薬剤として用いられる第１様態による組成物を提供する。

また、薬剤の製造における第１様態による組成物の用途を提供する。

さらに、第１様態による組成物を治療又は予防を必要とする被験体に投与することを含む治療法又は予防法を提供する。

第３様態において、本発明は、神経変性疾患、神経幹細胞疾患、神経前駆細胞疾患、虚血性疾患、神経性外傷、情動障害、神経精神疾患、網膜変性疾患、網膜損傷／外傷、認知・学習・記憶障害から選択される神経疾患の治療又は予防に用いられる第１様態による組成物を提供する。

また、神経変性疾患、神経幹細胞疾患、神経前駆細胞疾患、虚血性疾患、神経性外傷、情動障害、神経精神疾患、網膜変性疾患、網膜損傷／外傷、認知・学習・記憶障害から選択される神経疾患の治療又は予防に用いられる薬剤の製造における第１様態による組成物の用途を提供する。

さらに、第１様態による組成物を神経変性疾患、神経幹細胞疾患、神経前駆細胞疾患、虚血性疾患、神経性外傷、情動障害、神経精神疾患、網膜変性疾患、網膜損傷／外傷、認知・学習・記憶障害から選択される神経疾患の治療又は予防を必要とする被験体に投与することを含む治療法又は予防法を提供する。

第４様態において、本発明はアルツハイマー病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、パーキンソン病及びパーキンソン症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、脊髄虚血、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、外傷性脊髓損傷、がん関連脳／脊髓損傷、統合失調症及び他の精神疾患、脳回欠損、鬱病、双極性鬱病／障害、慢性疲労症候群、不安症候群／障害、恐怖症、ストレス症候群及び連関症候群、認知機能障害、攻撃性、薬物及びアルコール濫用、強迫性行動症候群、季節性情動障害、境界性人格障害、脳性麻痺、生活改善薬物濫用、多発虚血性脳卒中性認知症、レビー小体認知症、加齢に伴う老人性認知症、てんかん及びてんかん関連損傷、側頭葉てんかん、脊髓損傷、脳損傷、脳手術、脳震盪関連脳損傷、反復性の脳震盪又は頭部外傷による脳損傷、爆発の衝撃波による脳損傷を含む外傷関連脳／脊髓損傷、坑がん治療関連脳／脊髓組織損傷、感染及び炎症関連脳／脊髓損傷、環境毒素関連脳／脊髓損傷、多発性硬化症、自閉症、アスペルガー症候群、注意欠陥障害、嗜眠症、睡眠障害、認知能力又は記憶力関連障害から選択される病状の治療又は予防に用いられる第１様態による組成物を提供する。

また、第４様態が開示する状態から選択される病状の治療又は予防に用いられる薬剤の製造における第１様態による組成物の用途を提供する。

さらに、第１様態による組成物を第４様態が開示する状態から選択される病状の治療又は予防を必要とする被験体に投与することを含む治療法又は予防法を提供する。

第５様態において、本発明は鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防に用いられる第１様態による組成物を提供する。

また、鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防に用いられる薬剤の製造における第１様態による組成物の用途を提供する。

さらに、第１様態による組成物を鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防を必要とする被験体に投与することを含む治療法又は予防法を提供する。

第６様態において、本発明は好酸球増加症を伴う障害の治療又は予防に用いられる第１様態による組成物を提供する。

また、好酸球増加症を伴う障害の治療又は予防に用いられる薬剤の製造における第１様態による組成物の用途を提供する。

さらに、第１様態による組成物を好酸球増加症を伴う障害の治療又は予防を必要とする被験体に投与することを含む治療法又は予防法を提供する。

第７様態において、本発明は喘息、アトピー性皮膚炎、好酸球性食道炎、鼻炎結膜炎を含むアレルギー性疾患；原発性胆汁性硬化、侵襲繊維状リーデル甲状腺炎、皮膚筋炎、全身性紅斑性狼瘡及びシェーグレン症候群を含む自己免疫疾患；蠕虫感染誘発性好酸球増加症を含む寄生虫感染誘発性好酸球増加症；移植片対宿主病；薬物誘発性好酸球増加症；原発性好酸球増加症、原発性皮膚Ｔ細胞リンパ腫関連好酸球増加症を含む新生物性疾患誘発性好酸球増加症、セザリー症候群、ホジキン病、ランゲルハンス細胞組織球増加症、甲状腺がん、胃がん、肝がん及び膀胱がんの治療又は予防に用いられる第１様態による組成物を提供する。

また、第４様態が開示する状態から選択される病状の治療又は予防に用いられる薬剤の製造における第１様態による組成物の用途を提供する。

さらに、第１様態による組成物を第４様態が開示する状態から選択される病状の治療又は予防を必要とする被験体に投与することを含む治療法又は予防法を提供する。

第８様態において、本発明は、患者に１日当たりＡＫＧ０．０３〜１００ｇを含有する量の組成物、１日当たりＡＫＧ０．１〜３０ｇを含有する量の組成物、１日当たりＡＫＧ１〜１０ｇを含有する量の組成物、又は１日当たりＡＫＧ２〜６ｇを含有する量の組成物を投与することを含む方法に用いられる第１様態による組成物を提供する。

第８様態は、また、患者（好ましくはヒト）に毎日０．５〜２４０ｍｍｏｌ、１〜１２０ｍｍｏｌ、３〜６０ｍｍｏｌ、５〜３６ｍｍｏｌ、９〜２４ｍｍｏｌ、０．５〜３ｍｍｏｌ、０．５〜５ｍｍｏｌ、０．５〜９ｍｍｏｌ、０．５〜１２ｍｍｏｌ、１〜５ｍｍｏｌ、３〜９ｍｍｏｌ、３〜１２ｍｍｏｌ、３〜２４ｍｍｏｌ、１〜５ｍｍｏｌ、３〜５ｍｍｏｌ、１〜３ｍｍｏｌ、９〜３６ｍｍｏｌ、約０．５ｍｍｏｌ、約１ｍｍｏｌ、約３ｍｍｏｌ、約５ｍｍｏｌ、約９ｍｍｏｌ、約１２ｍｍｏｌ、約２４ｍｍｏｌ、約３６ｍｍｏｌ、約６０ｍｍｏｌ、約１２０ｍｍｏｌ又は約２４０ｍｍｏｌのＡＫＧを含有する量の組成物を投与することを含む方法に用いられる第１様態による組成物を提供する。上述の範囲の最後の値を組み合わせて設定した範囲も適用可能である。

上記投与は経口投与であってもよい。上記患者はヒトであることが好ましく、特に上述の治療を必要とするヒトであることが好ましい。

また、本発明は、食品補助剤、栄養補助剤、医薬組成物、栄養補助食品又は食品添加剤の製造における第１様態による組成物の用途を提供する。また、本発明は、食品補助剤、栄養補助剤、医薬組成物、栄養補助食品又は食品添加剤としての第１様態による組成物の用途を提供する。

ＡＫＧの新しい医学的用途
第９様態において、本発明は鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防に用いられるα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩を提供する。

また、鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防に用いられる薬剤の製造におけるα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩の用途を提供する。

さらに、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩を鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防を必要とする被験体に有効量のみ投与することを含む治療法又は予防法を提供する。

第９様態によるα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩は、患者に１日当たりＡＫＧ０．０３〜１００ｇを含有する量のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩、好ましくは１日当たりＡＫＧ０．１〜３０ｇを含有する量のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩、より好ましくは１日当たりＡＫＧ１〜１０ｇを含有する量のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩、最も好ましくは１日当たりＡＫＧ２〜６ｇを含有する量のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法に用いられてもよい。

第９様態によるα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩は、患者（好ましくはヒト）に毎日０．５〜２４０ｍｍｏｌ、１〜１２０ｍｍｏｌ、３〜６０ｍｍｏｌ、５〜３６ｍｍｏｌ、９〜２４ｍｍｏｌ、０．５〜３ｍｍｏｌ、０．５〜５ｍｍｏｌ、０．５〜９ｍｍｏｌ、０．５〜１２ｍｍｏｌ、１〜５ｍｍｏｌ、３〜９ｍｍｏｌ、３〜１２ｍｍｏｌ、３〜２４ｍｍｏｌ、１〜５ｍｍｏｌ、３〜５ｍｍｏｌ、１〜３ｍｍｏｌ、９〜３６ｍｍｏｌ、約０．５ｍｍｏｌ、約１ｍｍｏｌ、約３ｍｍｏｌ、約５ｍｍｏｌ、約９ｍｍｏｌ、約１２ｍｍｏｌ、約２４ｍｍｏｌ、約３６ｍｍｏｌ、約６０ｍｍｏｌ、約１２０ｍｍｏｌ又は約２４０ｍｍｏｌのＡＫＧを含有する量の組成物を投与することを含む方法に用いられてもよい。上述の範囲の最後の値を組み合わせて設定した範囲も適用可能である。

上記投与は経口投与であることが好ましい。上記患者はヒトであってもよく、特に上述の治療を必要とするヒトであってもよく。

薬学的に許容可能な塩は、α−ケトグルタル酸ナトリウム、α−ケトグルタル酸カルシウム、α−ケトグルタル酸マグネシウム又はα−ケトグルタル酸カリウムのような他の薬学的に許容可能な無機塩、又は、オルチニン−ＡＫＧ、アルギニン−ＡＫＧ、キトサン−ＡＫＧ、ピロドキシン−ＡＫＧ、ロイシン−ＡＫＧ、イソロイシン−ＡＫＧ又はクレアチン−ＡＫＧ、あるいはこれらの組み合わせのようなＡＫＧの薬学的に許容可能な有機塩で構成されるか、又はこれらを含んでいてもよい。

治療法又は予防法として用いられるＡＫＧ
第１０様態において、本発明は、さらに神経変性疾患、神経幹細胞疾患、神経前駆細胞疾患、虚血性疾患、神経性外傷、情動障害、神経精神疾患、網膜変性疾患、網膜損傷／外傷、認知・学習・記憶障害、アルツハイマー病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、パーキンソン病及びパーキンソン症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、脊髄虚血、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、外傷性脊髓損傷、がん関連脳／脊髓損傷、統合失調症及び他の精神疾患、脳回欠損、鬱病、双極性鬱病／障害、慢性疲労症候群、不安症候群／障害、恐怖症、ストレス症候群及び連関症候群、認知機能障害、攻撃性、薬物及びアルコール濫用、強迫性行動症候群、季節性情動障害、境界性人格障害、脳性麻痺、生活改善薬物濫用、多発虚血性脳卒中性認知症、レビー小体認知症、加齢に伴う老人性認知症、てんかん及びてんかん関連損傷、側頭葉てんかん、脊髓損傷、脳損傷、脳手術、脳震盪関連脳損傷、反復性の脳震盪又は頭部外傷による脳損傷、及び爆発の衝撃波による脳損傷を含む外傷関連脳／脊髓損傷、坑がん治療関連脳／脊髓組織損傷、感染及び炎症関連脳／脊髓損傷、環境毒素関連脳／脊髓損傷、多発性硬化症、自閉症、アスペルガー症候群、注意欠陥障害、嗜眠症、睡眠障害、認知能力又は記憶力関連障害、好酸球増加症連関障害、喘息、アトピー性皮膚炎、好酸球性食道炎及び鼻炎結膜炎；原発性胆汁性硬化、侵襲繊維状リーデル甲状腺炎、皮膚筋炎、全身性紅斑性狼瘡及びシェーグレン症候群を含む自己免疫疾患；蠕虫感染誘発性好酸球増加症を含む寄生虫感染誘発性好酸球増加症；移植片対宿主病；薬物誘発性好酸球増加症；原発性好酸球増加症、原発性皮膚Ｔ細胞リンパ腫関連好酸球増加症を含む新生物性疾患誘発性好酸球増加症、セザリー症候群、ホジキン病、ランゲルハンス細胞組織球増加症、甲状腺がん、胃がん、肝がん及び膀胱がんを治療又は予防する方法として用いられるα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩を提供する。当該方法は、被験体にα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩と、リパーゼ、プロテアーゼ、及びアミラーゼの中１種以上を投与することを含む。

特定の実施形態において、上記方法はリパーゼを投与するが、プロテアーゼ又はアミラーゼは投与しない。

特定の実施形態において、上記方法はプロテアーゼを投与するが、リパーゼ又はアミラーゼは投与しない。

特定の実施形態において、上記方法はアミラーゼを投与するが、リパーゼ又はプロテアーゼは投与しない。

特定の実施形態において、上記方法はリパーゼとプロテアーゼを投与するが、アミラーゼは投与しない。

特定の実施形態において、上記方法はリパーゼとアミラーゼを投与するが、プロテアーゼは投与しない。

特定の実施形態において、上記方法はプロテアーゼとアミラーゼを投与するが、リパーゼは投与しない。

特定の実施形態において、上記方法はリパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼを投与する。

第１０様態による上記方法で投与されるＡＫＧ、リパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼは、第１様態の組成物の構成成分として指定されたものと同一の性質及び特徴を有していてもよい。

第１０様態による上記方法で投与されるＡＫＧ、リパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼの相対量及び絶対量は、第１様態の組成物及びその用途で指定されたものであってもよい。

第１０様態の方法は、被験体に０．０３〜１００ｇ／日、０．１〜３０ｇ／日、１〜１０ｇ／日、又は２〜６ｇ／日の量でＡＫＧを投与することを含んでいてもよい。

具体的に、第１０様態の方法は、被験体（好ましくはヒト）に毎日０．５〜２４０ｍｍｏｌ、１〜１２０ｍｍｏｌ、３〜６０ｍｍｏｌ、５〜３６ｍｍｏｌ、９〜２４ｍｍｏｌ、０．５〜３ｍｍｏｌ、０．５〜５ｍｍｏｌ、０．５〜９ｍｍｏｌ、０．５〜１２ｍｍｏｌ、１〜５ｍｍｏｌ、３〜９ｍｍｏｌ、３〜１２ｍｍｏｌ、３〜２４ｍｍｏｌ、１〜５ｍｍｏｌ、３〜５ｍｍｏｌ、１〜３ｍｍｏｌ、９〜３６ｍｍｏｌ、約０．５ｍｍｏｌ、約１ｍｍｏｌ、約３ｍｍｏｌ、約５ｍｍｏｌ、約９ｍｍｏｌ、約１２ｍｍｏｌ、約２４ｍｍｏｌ、約３６ｍｍｏｌ、約６０ｍｍｏｌ、約１２０ｍｍｏｌ又は約２４０ｍｍｏｌのＡＫＧを投与することを含んでいてもよい。上述の範囲の最後の値を組み合わせて設定した範囲も適用可能である。

第１０様態で記述した方法は、ＡＫＧ、リパーゼ、プロテアーゼ、及び／又はアミラーゼを同時に、別途に又は連続して投与することを含んでいてもよい。上記の構成成分はこれら物質の組み合わせを含む製剤として投与されてもよい。

第１０様態で記述した方法は、ＡＫＧとリプロタマーゼを同時に、別途に又は連続して投与することを含むことが好ましい。また第１０様態で記述した方法はＡＫＧとパンクレリパーゼを同時に、別途に又は連続して投与することを含むことが好ましい。

本願は引用文献の全文を援用している。後述の実施例は本発明を限定しない。＜含む／〜で（から）なる＞は包括的に、すなわち＜含んでいるが限定されない＞の感覚として用いられる。

実施例
実施例１：海馬神経発生の誘導
「構成物質及び方法」で指定された治療過程を経た後、実験動物を解剖して脳を組織学的に分析して海馬の神経発生を定量化した。

ネスチンは幼若ニューロン用のマーカーである。ネスチン陽性細胞は錐体ニューロンの海馬層から発見された。海馬細胞の体細胞は高いネスチン染色率を現した。一部の細胞において、樹状突起と思われる長い突起は海馬の内部層まで延在しており、これらの突起もやはりネスチン陽性であった。海馬のＣＡ領域全体（ＣＡ１〜ＣＡ３）において、これらの細胞は錐体細胞と構造的に類似していた。ネスチン陽性細胞及びニューロン間の構造的類似性を通じてこのような類型の細胞を新たに生成されたニューロンとみなすことができる。

年齢適合群（すなわち、高齢群）と比較した結果、ＡＫＧ及びＥＮＺはいずれも海馬神経発生を増加させることが分かった（図１参照）。特に、ＡＫＧ＋ＥＮＺの組み合わせはさらに効果的であり、神経発生において相乗的増大効果をもたらした（ＡＫＧ＋ＥＮＺ群はＡＫＧ群及びＥＮＺ群の両方と統計的に有意差を有した）。併用治療により得られた神経発生水準は、高齢体における神経発生水準を幼年体における神経発生水準まで引き上げた。

結論：ＡＫＧ、ＥＮＺ又はＡＫＧ＋ＥＮＺを用いた治療は神経発生を増加させる。ＡＫＧ＋ＥＮＺの組み合わせは相乗的効果を見せる。

実施例２：認知機能／記憶力の向上
治療過程において、「構成物質及び方法」で指定されたようにＴ型迷路試験を通じて実験動物の認知機能及び／又は記憶力を測定した。

驚くべきことに、結果は実施例１で現れた神経発生の増加と深い関連性を現した（図２）。これは、神経発生が認知機能向上を誘発することを暗示する。機構にかかわらず、実験は、ＡＫＧ、ＥＮＺ及びＡＫＧ＋ＥＮＺがいずれも高齢体の認知を向上させ、ＡＫＧ＋ＥＮＺの組み合わせが特に優れた効果を発揮するという事実を表す。

実施例３：血中好酸球の減少
「構成物質及び方法」に詳しく記述されたように、血液標本を分析して血液パラメーターにおける効果を判定した。

結果（図３）によると、血小板、リンパ球及び単核細胞の数が治療に影響を受けないのに対し、好酸球数はＡＫＧ＋ＥＮＺの組み合わせで著しく減少した。但し、ＡＫＧ単独又はＥＮＺ単独の使用によっては減少しなかった。ここでも、ＡＫＧ＋ＥＮＺの組み合わせは相乗的効果を現した。

実施例４：シナプス形態の変化
序論
研究者は、ヒト及び他の脊椎動物の頭脳で重要な構成要素に該当する海馬を研究対象として選定した。海馬は、大脳辺縁系の一部であり、また短期記憶から長期記憶への情報の統合、空間記憶及び空間知覚、感情及び行動の形成、認知機能において重要な役割を担当する。海馬は多様な侵害刺激に非常に脆弱である。酸素欠乏（低酸素症）、脳炎、側頭葉てんかん、加齢関連疾患（アルツハイマー病）等によって海馬は損傷することがある。海馬は、脳で最初に損傷する領域の中の１つであり、初期症状としては記憶喪失及び方向感覚の喪失が含まれる。

海馬のニューロンは、質と量を正確に推定できるように、特定の方式で配列されている。

まとめると、上述の特徴（機能的面、脆弱性、ニューロンの配列）が、海馬を神経学的研究に最も適した神経系にしたということである。

シナプスの損失に関連した疾患の種類は多様である。アルツハイマー病、脳卒中、ダウン症候群、統合失調症、外傷性脳損傷及びストレス等の疾患はシナプスの量及び構造の両方ともを損傷させる。一部の著者は正常な老化過程でもシナプスの損失を観測した。

解剖学的及び機能的研究の結果、ヒトは６０歳を越えると頭脳の容積と重量が減少するという事実が明らかになっているが、容積減少がニューロンの損失、収縮あるいは両方全てを意味するかはまだ論難の余地がある。ニューロンの損失は、海馬、大脳皮質、小脳扁桃を含む脳の特定領域で発生するものと見える。

海馬は、神経変性及び機能低下に著しく影響を受ける頭脳領域の中の１つであり、＜正常老化＞による神経変性及び機能低下においても同様である。ニューロン量の減少、シナプス連結数の減少、細胞内病変は、いずれも海馬の形成が特に老化に脆弱である可能性を提示している。幼年体ラットと高齢体ラットの海馬を対象として、形態学的研究を行った結果、
高齢体の錐体ニューロンがさらに小さく、樹状突起の枝と棘の数も少ないという事実が明らかになった。シナプス後膜の長さ単位に対するシナプス前末端の密度も低い。

各シナプス前末端は、神経伝達物質で充満したシナプス小胞数百個を含む。シナプス小胞は直径４０ｎｍの均一な細胞小器官であり、これらはエキソサイトーシス−エンドサイトーシスサイクルを連続して通じる神経伝達物質を放出及び貯蔵する中央細胞小器官を構成する。上記のサイクルの間、シナプス前末端内における小胞の位置、数及び空間上の配列が変更され、神経伝達物質の代謝回転を観測できるようになる。

活動転位がシナプス前原形質膜を消極すると、Ｃａ^２＋経路が開かれ、Ｃａ^２＋が末端に流れ込んでシナプス小胞のエキソサイトーシスを誘発する。その結果、シナプスの間隙で神経伝達物質を放出するようになる。

シナプス小胞サイクルは、エキソサイトーシス、エンドサイトーシス、再循環で構成される。シナプス小胞は、小胞内部を酸性化する（小胞酸性化）プロトンポンプが確立した電気化学的傾斜度が加速化させた能動輸送（神経伝達物質吸収）によって神経伝達物質（ＮＴ）に充填される。

シナプスエキソサイトーシスに対し、シナプス小胞は活性帯でドッキングし、小胞をＣａ^２＋信号に応答可能な状態に変更するＡＴＰ依存性過程によって感作される。活動転位がシナプス前膜を消極すると、Ｃａ^２＋経路が開かれ、活性帯の細胞内Ｃａ^２＋が局地的に増加して融合反応を完成させる。放出された神経伝達物質は、その後、シナプシス後膜の厚さ（ＰＳＤ）に係る収容体と結合する。

結果
研究で分析したＣＡ１放射状層の中央部分において、シナプス入力のほとんど大部分は興奮性であり、樹状突起軸で選択的に断絶される。この点を考慮して、研究者は興奮性ＣＡ１棘シナプスのプールに分析の焦点を合わせた。

高齢対照群に属した実験動物の場合、単位面積（１００μｍ^２）当たりのシナプス末端の数は幼年体に比べて３倍以上少ないが、ＡＫＧ及び／又はリパーゼ＋プロテアーゼ＋アミラーゼで長期間治療した後は、シナプス接合数が最大５５％（ＡＫＧ及びＥＮＺ）、あるいは最大４７％（ＡＫＧ＋ＥＮＺ）まで増加する（図４）。属した実験群にかかわらず全ての高齢体のシナプス末端領域は幼年体より３倍以上大きく、事実上同一であった（図６）。

幼年体に比べて高齢体で末端当たりのＳＶ数が減少したという事実は、ＳＶ再循環過程の損傷を示すことでもある。シナプス小胞タンパク質は、生理的条件及び病態でリン酸化反応程度が変わるという事実は多数の研究で既に明らかになっている。

アレチネズミを用いた実験において、ＡＫＧ群、ＥＮＺ群及びＡＫＧ＋ＥＮＺ群のシナプス前末端に対するＳＶの数は高齢対照群に比べて増加した（図６Ａ）。但し、末端の正方形単位（１００μｍ^２）当たりＳＶの数は、１群を除いては対照群と異なっていない（図６Ｂ）。属した実験群にかかわらず全ての高齢体のシナプス末端領域が幼年体よりも著しく大きかったため、このような差が発生した。

幼年体対照群は、神経伝達物質のシナプスの形成及び合成が老化又は病態により損傷しておらず、外部要因で刺激を受けていない海馬の生理学的状態を代表する。シナプス内の小胞の数は、神経伝達物質の量に密接に関連しており、超過量が観測される場合、治療が誘発した神経伝達物質の合成に刺激を受けたものと解釈することができる。

高齢対照群に属したアレチネズミの海馬シナプスと、１群（ＡＫＧ）及び２群（酵素）から選定したアレチネズミの海馬シナプスで、小胞から活性帯までの距離増加を含むシナプス小胞の空間分布の変化が観測された（図７）。当該パラメーターは３群（ＡＫＧ＋酵素）のアレチネズミの場合は著しく低く、幼年体に比べると僅かに大きいだけであった。活性帯までの距離によってシナプス小胞のプールの分化が起きる。最も近い小胞のプールはシナプス前末端における即時放出と迅速な神経伝達を目的で設計されているため、シナプス小胞から活性帯までの平均距離が減少することはシナプス伝達向上の前兆になる。

小胞クラスタ化の分析を通じてＳＶは距離増加によっても遠くなったことが分かった。高齢対照群に属した実験動物を対象として平均ＮＮＤ値を評価した結果、幼年体よりも約３０％高かった（図８）。３群のＮＮＤ値のみが高齢対照群（４群）の動物に比べて著しく減少した。直近の小胞までの距離をシナプス小胞の空間クラスタ形成傾向を測定する指標とした。小胞密度は１単位面積当たりの小胞の数であり、ＮＮＤパラメーターは小胞間の平均距離でない直近の小胞までの平均距離である。これらパラメーターの比較を通じてシナプス内の小胞の空間分布度の差を説明することができる。

長期間の治療はシナプス末端の種類に明白な構造的変化をもたらした。３群及び２群で穿孔シナプスの量が確然に増加し、また複数棘の神経繊維末端（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｐｉｎｅ ｂｏｕｔｏｎ）がそれより少ない量で増加したことが観測された。

穿孔シナプスの比率の増加は、シナプス伝達でより効率が良好であり、シナプスの損失の場合は代償機構として見なされる。穿孔は、さらに反応性シナプスの形成と関連性を有する。穿孔シナプスの密度は認識記憶の正確度と結付されている。シナプスの再構成は神経学的改善の兆候として知られており、よって、当該結果は効果的な治療によって一般的に神経疾患、特にアルツハイマーを治療及び予防できるという事実を裏付ける。

本研究は、シナプス可塑性に関連するシナプスの形態学的変化が実際に変更された生理的条件及び病態下の活性化機構と関連がある可能性を示唆している。面積、形状、シナプス前末端の大きさ、ＳＶ密度と分布図等のシナプス接合パラメーターはいずれもシナプス伝達の効率と関連がある。

要すると、シナプスのネットワーク内の形態の変化の中の大多数は老化の影響によるものである。研究者はシナプス接合が動物に適用された新規の治療条件下で変移するという事実を見つけた。高齢体ＣＡ１放射状層の興奮性シナプスの密度が幼年体に比べて減少すると長期治療後の回復の前兆として受け入れることができる。シナプス要素の膨脹、ＳＶプールの枯渇及び再配列のように潜在的に有害なシナプスの形態の変化は、一見、平衡を合わせるための適応性変異、例えばシナプス接合の強化を反映する可能性が高い穿孔の増加、又は反応性シナプスの形成を暗示する複数棘の神経繊維末端の相対的増加を伴う。

結論
高齢体アレチネズミの海馬シナプスで小胞から活性帯までの距離及び直近の小胞までの距離増加を含む、シナプス小胞の空間分布の変化が発生した。

異なるタイプのシナプス末端の再分布は、穿孔シナプス及び多重シナプスの増加と共に発生する。

治療が誘発した可塑的変化は、Ｔ型迷路試験で立証された海馬ニューロン機能の向上機構で主な役割を担当している可能性が高い。

実施例５：認知機能の向上
実施例１ラインの高齢のスナネズミを用いて実験を繰り返して行い、但し、酵素成分を「構成物質及び方法」に指定されたことによって改良した。

本実験において、対照群とＡＫＧ＋酵素で治療した群との２つに分けた。Ｔ型迷路による行動分析は０ヶ月目、２ヶ月目、４ヶ月目で行った。図１０に示されたように、治療群は２ヶ月目に既に認知能力が向上し、４ヶ月目にはさらに著しい向上を見せた。反対に、対照群では明らかな傾向が現れなかった。

当該結果は、実施例１の結果を他の酵素製剤と濃度でも再現することができ、明白な効果が治療２ヶ月目に現れ始め、４ヶ月目まで持続的に向上するという事実を立証した。

対照群と実験群の両方の各動物を対象として統計を算出した。１次試みにより解決された課題の百分率差と、２回の連続試みにより解決された課題の平均百分率とを比較した（図１１）。実験群（１群）の各個体は、試験１回当りに解決された課題数の増加がさらに多く現れ、増加の趨勢が現れた場合、対照群の個体と比較してその増加幅が大きかった。第１群のスナネズミの中６７．７％が基線時点での認知能力より向上した能力を２ヶ月目及び４ヶ月目（統合結果）に見せた。それに対し、対照群（２群）では単に２９％のみが向上した能力を見せた（図１１）。

結論として、何らの治療も受けていない動物は時間が経過するにつれ結果が悪化する一方（老化が原因である可能性が高い）、治療を受けた動物は時間が経過するにつれ能力が向上する傾向が見られることで、当該治療の認知能力の向上効果を立証した。

測定を通じて、治療過程中に試験を通過できる水準まで能力が向上した個体の存在の有無を判別することができる。動物の数が十分に多いので、マンホイットニー検定の正統計量であるＵ統計量は既知のパラメーターを用いたガウス近似値であり、いずれか一方の群が同一の確率法則で記述された確率は０．０５未満である。これは、信頼係数０．０５において２つの群間に定性的差があることを立証する。

構成物質及び方法
実施例１において、表１に記載の試験化合物を動物に補ったＬａｂｏｆｅｅｄ Ｂ標準飼料（Ｌａｂｏｆｅｅｄ ｃｏｍｐａｎｙ；Ａｎｄｒｚｅｊ Ｍｏｒａｗｓｋｉ Ｆｅｅｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｐｌａｎｔ，Ｋｃｙｎｉａｎｅａｒ．Ｂｙｄｇｏｓｚｃｚ，Ｐｏｌａｎｄ）を供給した。

表１：治療群、実施例１

リパーゼ、プロテアーゼ、及びアミラーゼとして、表２のように調剤されたリパーゼ３０，０００ＵＳＰ単位／カプセル、プロテアーゼ２０，０００ＵＳＰ単位／カプセル、アミラーゼ３，０００ＵＳＰ単位／カプセルを含有するカプセルを用いた。カプセル２０個の内容物をＥＮＺ群及びＡＫＧ＋ＥＮＺ群に供給した飼料１ｋｇ毎に混合した。

表２．リパーゼ、プロテアーゼ、及びアミラーゼ含有カプセル

カプセルには充填材を最大２００ｍｇまで満たした。

実施例５で、表３に記載の試験化合物を動物に補ったＬａｂｏｆｅｅｄ Ｂ標準飼料（Ｌａｂｏｆｅｅｄ ｃｏｍｐａｎｙ；Ａｎｄｒｚｅｊ Ｍｏｒａｗｓｋｉ Ｆｅｅｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｐｌａｎｔ、Ｋｃｙｎｉａ ｎｅａｒ．Ｂｙｄｇｏｓｚｃｚ、Ｐｏｌａｎｄ）を供給した。

表３：治療群、実施例５

表３の酵素を表４で定義する。

表４．実施例５のリパーゼ、プロテアーゼ、及びアミラーゼの仕様

研究の概要
動物及び動物飼育方法（実施例１〜４）
長期間（６ヶ月）飼育した雄スナネズミ７５匹を任意に選択して実験に用いた。選択したネズミは実験開始時点で約１．５歳であり、平均体重は８８．０±６ｇであり、実験終了時点では２歳であった。また、ちょうど成体になった「幼年体」の雄スナネズミ６匹（６月齢）を追加し、＜年齢適合対照群＞として用いた（グラフでは「Ｃｏｎｔｒｏｌ（ｙｏｕｎｇ）」、「Ｙｏｕｎｇ」又は「Ｙ」で示す）。

スナネズミを個別ケースに入れ、行う治療毎に分類した（表１）。各ケージは水差しを備えている。

スナネズミ（１ケージ当たり４〜８匹）をトウモロコシの穂軸、巣の材料として用いられる紙タオル、貯蔵用缶（長さ１３ｃｍ×直径１０ｃｍ）を備えた透明なポリカーボネートケージ（４８×２７×２０ｃｍ）に入れた。

飼料（各群毎に異なる。表１〜２参照）と水には常に接近可能とし、一日に一回補った。

照明は７時から１９時までオンにし、室温と湿度は約２３℃、３０〜７０％に維持した。

実験開示前にスナネズミがケージに慣れるまで１週間待った。

動物及び動物飼育方法（実施例５）
上述の実施例１〜４と同一の方法で実験動物を飼育し、実験対象は２つの群に限定し、表３〜４によって治療した。

対照群は１５匹、年齢適合治療群は１６匹で構成した。

海馬神経発生の評価
形態学的標本の製造
実験終了時点で、スナネズミをケタミン（１００ｍｇ／ｋｇ体重ｉ／ｍ）で麻酔し、固定して０．１Ｍリン酸緩衝液内の４％ホルムアルデヒド及び０．２５％グルタルアルデヒドで経心腔的灌流を行った。灌流後に脳を摘出して両半球に分離した。

免疫細胞化学
兔疫細胞化学用標本（各動物の半球１つ）を＋４℃で同一固定剤でひと晩の間後置した。翌日、標本をｖｉｂｒａｔｏｍｅ Ｖｉｂｒｏｓｌｉｃｅ ７５２Ｍ（Ｃａｍｐｄｅｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社、イギリス）を用いて５０μｍ厚さの前頭骨切片に切り出した。脳切片を０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で洗浄し、１％正常ヤギ血清と０．３％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有する遮断溶液で処理した。ヤギの単クロン性抗ネスチン抗体（１：５００）（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社、ＵＳＡ）を神経特異性中間フィラメントネスチンを見つける増殖型幼若神経細胞を検出するに用いた。切片を＋４℃で１６時間１次抗体で培養した。洗浄後に切片をＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７（１：１０００）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｐｒｏｂｅｓ、ＵＳＡ）と接合した抗ヤギ２次抗体で１．５時間室温で培養した。その後、切片を洗浄し、組織スライド上に蛍光染色用マウンティングメディウム（Ｄａｋｏ、デンマーク）と共に載置した。海馬組織の画像を共焦点型ＦＶ１０００−ＢＸ６１ＷＩ顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ、日本）で撮影した。ＣＡ１海馬領域のネスチン陽性細胞分布図の定性的分析を各実験群に対して行った。

統計的分析
統計データはいずれもＳＴＡＴＩＳＴＩＣＡ ｖｅｒ．７．０（ＳｔａｔＳｏｆｔ、ＵＳＡ）で評価した。２標本コルモゴルフ−スミルノフ検定を用いて標本間の差異を評価した（ｐ＜０．０５は統計的有意性を現す）。ＳＥ（標準誤差）をエラーバーとして用いた。

シナプスの変化
電子顕微鏡検査
スナネズミを致死量未満のケタミン（１００ｍｇ／ｋｇ体重ｉ／ｍ）で麻酔し、固定して０．１Ｍリン酸緩衝液内の４％ホルムアルデヒド、及び０．２５％グルタルアルデヒドで経心腔的灌流を行った。灌流後に脳を摘出して両半球に分離した。

各動物の半球１つは兔疫細胞化学的検定に用いた。

他の半球の海馬を摘出し、チョッパー（ＭｃＩｌｗａｉｎ社のティッシュチョッパー、イギリス）を用いて４００μｍ厚さの横切片に切り出した。切片を２．５％グルタルアルデヒドと共に固定剤溶液内で１．５時間、次いで１％ＯｓＯ４で１時間後置した。エタノール系を昇順に適用した後、乾燥アセトンを用いて組織切片を脱水させ、標準手順によってＥＰＯＮ樹脂に埋め込んだ。超ミクロトーム ＬＫＢ−８８００で分割片を生成した。トルイジンブルーで染色した海馬の半薄切片（１μｍ）を用いて海馬ＣＡ１領域の位置を特定した。電子顕微鏡の検査のために、ＣＡ１錐体細胞層と放射状層の中央部分から得た超薄切片（７０ｎｍ）を酢酸ウラニルとクエン酸鉛で染色した。

ＪＥＭ−１００ＣＸ（Ｊｅｏｌ、日本）透過型電子顕微鏡を用いて倍率×１０，０００倍で画像を撮影した。以下の各群で実験動物をそれぞれ三匹選択して算出した。

１群（ＡＫＧ）
２群（リパーゼ＋プロテアーゼ＋アミラーゼ）
３群（ＡＫＧ＋リパーゼ＋プロテアーゼ＋アミラーゼ）
４群（高齢対照群）
群（幼年体）
調査領域のシナプス末端はシナプス末端形状（単純、穿孔、複数の神経繊維末端）の比率変化を含んで高い水準の構造可塑性を現した。穿孔シナプスは不連続ＰＳＤを有するシナプスで定義した。同一のシナプス前末端と接触する棘が１つ以上であるシナプスを、複数棘神経繊維末端（ＭＳＢ）に分類した。

ＳＶ分布図の分析のために、ＳＶプロフィール中央のｘ座標及びｙ座標、シナプス活性帯のトレーシングポイントをＵＴＨＳＣＳＡ ＩｍａｇｅＴｏｏｌソフトウェア（ｖｅｒｓｉｏｎ ３、テキサス州サンアントニオテキサス州立大；ｆｔｐ：／／ｍａｘｒａｄ６．ｕｔｈｓｃｓａ．ｅｄｕ）でデジタル顕微鏡写真上にポイントツールを用いてマーキングした。ＳＶから活性帯プロフィールまでの最短距離（「活性帯の距離［ＡＺＤ］」）、及びＳＶプロフィールの相互間空間近接度（「最近傍距離［ＮＮＤ］」）をｋ近傍法を用いて上述のようにＬｏＣｌｕｓｔソフトウェア（Ｎｉｋｏｎｅｎｋｏ ａｎｄ Ｓｋｉｂｏ、２００４）で定量化した。

ＡＺＤ量及びＮＮＤ量を群毎に統合した。各実験及び制御条件に対してＳＶを含むシナプス１００個を分析した。統計分析にはＳｔａｔｉｓｔｉｃａソフトウェア（ｖｅｒｓｉｏｎ ５、ＳｔａｔＳｏｆｔ、ＵＳＡ）を用いた。値は平均の平均±標準誤差（ＳＥＭ）で現した。２標本コルモゴルフ−スミルノフ検定を用いて標本間の差を評価した（ｐ＜０．０５は統計的有意性を現す）。

シナプス形態計測及びシナプス小胞分布図の定量化
単一写真を用いて、計数フレーム（３６ｍｋｍ^２検定領域）に限定される顕微鏡写真面上の非対称棘シナプス（シナプス前末端の活性帯において隆起ＰＳＤとドッキングされているシナプス小胞（ＳＶ）とを有する棘の存在の有無により判定する）を全部計数し、単位表面積当たりのシナプス数を算出してシナプス密度を推定した。

行動試験
Ｔ型迷路自発的交替行動
Ｔ型迷路自発的交替行動は、動物、特にＣＮＳ障害げっ歯類モデルの探査行動を測定する行動試験である。この試験は、新しい環境を探険しようとするげっ歯類の意欲、すなわち迷路の慣れた通路よりも新しい通路を選好する傾向に基づいている。脳の多くの部分（海馬、中隔、前脳基底部、前頭葉皮質）がこのような課題に関与する。

当該手順は、Ｔ型迷路を用いてげっ歯類の認知能力を評価する方法を詳しく説明する。Ｔ型迷路は、水平に置いたときにＴ字形態を有する上昇又は密閉装置を現す。動物は、Ｔの基底部から始めて幹の反対側に隣接している目的の通路の中から１つを選択することができる。連続して早く２回試みる場合、げっ歯類は２次試みで１次選択での記憶を反映して、以前に行って見なかった通路を選択する傾向がある。これを＜自発的交替行動＞という。自発的交替行動及び補償による交替行動はいずれも海馬の機能不全に非常に敏感であるが、それ以外の脳構造も関与する。各試みは２分未満で終わらなければならないが、総試み回数は統計的及び科学的必要に応じて変えることができる。交替行動は環境を探険して、食べ物、水、配偶者又はねぐらのような資源の位置を捜し出そうとする動物の動機を反映する。動物が上述の資源を剥奪されなくても交替行動を見せる場合、これを＜自発的交替行動＞といえる。

被験体をまずＴ型迷路の出発通路に置いた。出発通路を発ちながら、被験体は左側又は右側の目的通路の中のいずれに入るかを選択する。試みを繰り返えすことによって、被験体が入ったことのある通路に再度入る傾向が低く見られた。交替行動の百分率（各目的の通路を交互に選択した回数）及び総試み期間を記録した。

実施例２において、動物は当該試験を１回行った。

実施例５において、動物は実験開示日から四日連続で当該試験を行い、その後、治療２ヶ月目と４ヶ月目に三日連続で当該試験を行った。

血液生化学的分析
研究終了時点で、血液分析機ＡＢＸ Ｍｉｃｒｏｓ ６０ ＯＴ（フランス）を用いて標準方法によって血液パラメーターを研究した。

表Ｘ

プロテアーゼ
第１様態の組成物はプロテアーゼを含んでいてもよく、必要に応じて上述のリパーゼ、後述のアミラーゼ、又は両方と組み合わせて含んでいてもよい。プロテアーゼは、哺乳類プロテアーゼ、微生物プロテアーゼ、真菌性プロテアーゼ、パンクレリパーゼプロテアーゼ（パンクレリパーゼに含まれているプロテアーゼ）、リプロタマーゼプロテアーゼ（リプロタマーゼに含まれているプロテアーゼ）、アスペルギルスプロテアーゼ、最も好ましいアスペルギルスメレウスプロテアーゼから選択してもよい。

また、第７様態が開示する状態から選択される病状の治療又は予防に用いられる薬剤の製造における第１様態による組成物の用途を提供する。

さらに、第１様態による組成物を第７様態が開示する状態から選択される病状の治療又は予防を必要とする被験体に投与することを含む治療法又は予防法を提供する。

さらに、本願発明は次の態様を含む。
１. α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩（ＡＫＧ）と、
リパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼからなる群より選択される１種以上の酵素を含む、組成物。
２. リパーゼ、プロテアーゼ、及び／又はアミラーゼを、表Ｙ及び表Ｚを参照として表Ｘに示した実施形態に基づく量で含む、項１に記載の組成物。
３. リパーゼを含む、項１又は項２に記載の組成物。
４. 前記リパーゼは哺乳類リパーゼである、項３に記載の組成物。
５. 前記リパーゼは微生物リパーゼである、項３に記載の組成物。
６. 前記リパーゼは細菌性リパーゼである、項３に記載の組成物。
７. 前記リパーゼはパンクレリパーゼリパーゼである、項３に記載の組成物。
８. 前記リパーゼはリプロタマーゼリパーゼである、項３に記載の組成物。
９. 前記リパーゼはシュードモナスリパーゼである、項３に記載の組成物。
１０. 前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩刺激性リパーゼ（ＢＳＳＬ）である、項３に記載の組成物。
１１. 前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩依存性リパーゼ（ＢＳＤＬ）である、項３に記載の組成物。
１２. 前記リパーゼはリゾプスオリーゼリパーゼである、項３に記載の組成物。
１３. 前記リパーゼはクロモバクテリウムビスコスムリパーゼである、項３に記載の組成物。
１４. 前記リパーゼはリゾプスデレマーリパーゼである、項３に記載の組成物。
１５. 前記リパーゼはバークホルデリアリパーゼである、項３に記載の組成物。
１６. 前記リパーゼはバークホルデリアセパシアリパーゼである、項１５に記載の組成物。
１７. 前記リパーゼは架橋リパーゼ結晶であるバークホルデリアセパシアリパーゼである、項１６に記載の組成物。
１８. プロテアーゼを含む、項１ないし項１７のいずれか一項に記載の組成物。
１９. 前記プロテアーゼは哺乳類プロテアーゼである、項１８に記載の組成物。
２０. 前記プロテアーゼは微生物プロテアーゼである、項１８に記載の組成物。
２１. 前記プロテアーゼは真菌性プロテアーゼである、項１８に記載の組成物。
２２. 前記プロテアーゼはパンクレリパーゼプロテアーゼである、項１８に記載の組成物。
２３. 前記プロテアーゼはリプロタマーゼプロテアーゼである、項１８に記載の組成物。
２４. 前記プロテアーゼはアスペルギルスプロテアーゼである、項１８に記載の組成物。
２５. 前記プロテアーゼはアスペルギルスメレウスプロテアーゼである、項２４に記載の組成物。
２６. アミラーゼを含む、項１ないし項２５のいずれか一項に記載の組成物。
２７. 前記アミラーゼは哺乳類アミラーゼである、項２６に記載の組成物。
２８. 前記アミラーゼは微生物アミラーゼである、項２６に記載の組成物。
２９. 前記アミラーゼは真菌性アミラーゼである、項２６に記載の組成物。
３０. 前記アミラーゼはパンクレリパーゼアミラーゼである、項２６に記載の組成物。
３１. 前記アミラーゼはリプロタマーゼアミラーゼである、項２６に記載の組成物。
３２. 前記アミラーゼはアスペルギルスアミラーゼである、項２６に記載の組成物。
３３. 前記アミラーゼはアスペルギルスオリーゼアミラーゼである、項３２に記載の組成物。
３４. 前記組成物は、ＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のリパーゼを含む、項１ないし項１７のいずれか一項に記載の組成物。
３５. 前記組成物は、ＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり５００〜５０，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼを含む、項１８ないし項２５、又は項３４のいずれか一項に記載の組成物。
３６. 前記組成物はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼを含む、項２６ないし項３３、項３４又は項３５のいずれか一項に記載の組成物。
３７. 架橋リパーゼ結晶であるＡＫＧ１ｇ当たり３，０００〜３００，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ、ＡＫＧ１ｇ当たり２，０００〜２００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３０，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼを含む、項１に記載の組成物。
３８. ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のリプロタマーゼに相当する量のリプロタマーゼを含む、項１に記載の組成物。
３９. ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のパンクレリパーゼに相当する量のパンクレリパーゼを含む、項１に記載の組成物。
４０. 前記組成物はα−ケトグルタル酸ナトリウムを含む、上記項のいずれか一項に記載の組成物。
４１. 前記組成物はα−ケトグルタル酸カルシウムを含む、上記項のいずれか一項に記載の組成物。
４２. 薬剤として用いられる、上記項のいずれか一項に記載の組成物。
４３. 神経変性疾患、神経幹細胞疾患、神経前駆細胞疾患、虚血性疾患、神経性外傷、情動障害、神経精神疾患、網膜変性疾患、網膜損傷／外傷、認知・学習・記憶障害から選択される神経疾患の治療又は予防に用いられる、上記項のいずれか一項に記載の組成物。
４４. アルツハイマー病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、パーキンソン病及びパーキンソン症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、鬱病、双極性鬱病／障害、慢性疲労症候群、不安症候群／障害、自閉症、アスペルガー症候群、注意欠陥障害、認知能力又は記憶力関連障害から選択される病状の治療又は予防に用いられる、上記項のいずれか一項に記載の組成物。
４５. 鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防に用いられる、項４４に記載の組成物。
４６. 患者に１日当たりＡＫＧ０．１〜３０ｇを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、上記項のいずれか一項に記載の組成物。
４７. 患者にＡＫＧ０．５〜２４０ｍｍｏｌを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、項１ないし項４５のいずれか一項に記載の組成物。
４８. 患者に１日当たりＡＫＧ０．５〜２４ｍｍｏｌを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、項４７に記載の組成物。
４９. 患者に１日当たりＡＫＧ１〜１２ｍｍｏｌを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、項４８に記載の組成物。
５０. 鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防に用いられる、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
５１. 神経変性疾患、神経幹細胞疾患、神経前駆細胞疾患、虚血性疾患、神経性外傷、情動障害、神経精神疾患、網膜変性疾患、網膜損傷／外傷、認知・学習・記憶障害、アルツハイマー病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、パーキンソン病及びパーキンソン症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、鬱病、双極性鬱病／障害、慢性疲労症候群、不安症候群／障害、自閉症、アスペルガー症候群、注意欠陥障害、認知能力又は記憶力関連障害の治療又は予防方法に用いられ、
上記方法は、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩と、そのリパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼから選択される１種以上の酵素を被験体に投与することを含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
５２. 上記方法は、リパーゼ、プロテアーゼ、及び／又はアミラーゼを、表Ｙ及び表Ｚを参照として表Ｘに示した実施形態に基づきＡＫＧの量に対応する量で投与することを含む、項５１に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
５３. 上記方法はリパーゼの投与を含む、項５１又は項５２に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
５４. 前記リパーゼは哺乳類リパーゼである、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
５５. 前記リパーゼは微生物リパーゼである、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
５６. 前記リパーゼは細菌性リパーゼである、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
５７. 前記リパーゼはパンクレリパーゼリパーゼである、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
５８. 前記リパーゼはリプロタマーゼリパーゼである、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
５９. 前記リパーゼはシュードモナスリパーゼである、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
６０. 前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩刺激性リパーゼ（ＢＳＳＬ）である、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
６１. 前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩依存性リパーゼ（ＢＳＤＬ）である、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
６２. 前記リパーゼはリゾプスオリーゼリパーゼである、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
６３. 前記リパーゼはクロモバクテリウムビスコスムリパーゼである、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
６４. 前記リパーゼはリゾプスデレマーリパーゼである、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
６５. 前記リパーゼはバークホルデリアリパーゼである、項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
６６. 前記リパーゼはバークホルデリアセパシアリパーゼである、項６５に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
６７. 前記リパーゼは架橋リパーゼ結晶であるバークホルデリアセパシアリパーゼである、項６６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
６８. 上記方法はプロテアーゼの投与を含む、項５１ないし項６７のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
６９. 前記プロテアーゼは哺乳類プロテアーゼである、項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
７０. 前記プロテアーゼは微生物プロテアーゼである、項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
７１. 前記プロテアーゼは真菌性プロテアーゼである、項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
７２. 前記プロテアーゼはパンクレリパーゼプロテアーゼである、項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
７３. 前記プロテアーゼはリプロタマーゼプロテアーゼである、項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
７４. 前記プロテアーゼはアスペルギルスプロテアーゼである、項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
７５. 前記プロテアーゼはアスペルギルスメレウスプロテアーゼである、項７４に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
７６. 上記方法はアミラーゼの投与を含む、項５１ないし項７５のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
７７. 前記アミラーゼは哺乳類アミラーゼである、項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
７８. 前記アミラーゼは微生物アミラーゼである、項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
７９. 前記アミラーゼは真菌性アミラーゼである、項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
８０. 前記アミラーゼはパンクレリパーゼアミラーゼである、項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
８１. 前記アミラーゼはリプロタマーゼアミラーゼである、項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
８２. 前記アミラーゼはアスペルギルスアミラーゼである、項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
８３. 前記アミラーゼはアスペルギルスオリーゼアミラーゼである、項８２に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
８４. 上記方法はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のリパーゼの投与を含む、項５１ないし項８３のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
８５. 上記方法はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり５００〜５，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼの投与を含む、項５１ないし項８４のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
８６. 上記方法はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼ投与を含む、項５１ないし項８５のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
８７. 上記方法は、架橋リパーゼ結晶であるＡＫＧ１ｇ当たり３，０００〜３００，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ、ＡＫＧ１ｇ当たり２，０００〜２００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３０，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼの投与を含む、項５１に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
８８. 上記方法はＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のリプロタマーゼに相当する量のリプロタマーゼの投与を含む、項５１に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
８９. 上記方法はＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のパンクレリパーゼに相当する量のパンクレリパーゼの投与を含む、項５１に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
９０. 上記方法はα−ケトグルタル酸ナトリウムの投与を含む、項５１ないし項８９のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
９１. 上記方法はα−ケトグルタル酸カルシウムの投与を含む、項５１ないし項９０のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
９２. 上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ０．０３〜１００ｇを投与することを含む、項５１ないし項９１のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
９３. 上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ０．５〜２４０ｍｍｏｌを投与することを含む、項５１ないし項９１のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
９４. 上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ０．５〜２４ｍｍｏｌを投与することを含む、項９３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
９５. 上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ１〜１２ｍｍｏｌを投与することを含む、項９４に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
９６. 上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ３〜９ｍｍｏｌを投与することを含む、項９５に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。

Claims (96)

1. α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩（ＡＫＧ）と、
   リパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼからなる群より選択される１種以上の酵素を含む、組成物。
2. リパーゼ、プロテアーゼ、及び／又はアミラーゼを、表Ｙ及び表Ｚを参照として表Ｘに示した実施形態に基づく量で含む、請求項１に記載の組成物。
3. リパーゼを含む、請求項１又は請求項２に記載の組成物。
4. 前記リパーゼは哺乳類リパーゼである、請求項３に記載の組成物。
5. 前記リパーゼは微生物リパーゼである、請求項３に記載の組成物。
6. 前記リパーゼは細菌性リパーゼである、請求項３に記載の組成物。
7. 前記リパーゼはパンクレリパーゼリパーゼである、請求項３に記載の組成物。
8. 前記リパーゼはリプロタマーゼリパーゼである、請求項３に記載の組成物。
9. 前記リパーゼはシュードモナスリパーゼである、請求項３に記載の組成物。
10. 前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩刺激性リパーゼ（ＢＳＳＬ）である、請求項３に記載の組成物。
11. 前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩依存性リパーゼ（ＢＳＤＬ）である、請求項３に記載の組成物。
12. 前記リパーゼはリゾプスオリーゼリパーゼである、請求項３に記載の組成物。
13. 前記リパーゼはクロモバクテリウムビスコスムリパーゼである、請求項３に記載の組成物。
14. 前記リパーゼはリゾプスデレマーリパーゼである、請求項３に記載の組成物。
15. 前記リパーゼはバークホルデリアリパーゼである、請求項３に記載の組成物。
16. 前記リパーゼはバークホルデリアセパシアリパーゼである、請求項１５に記載の組成物。
17. 前記リパーゼは架橋リパーゼ結晶であるバークホルデリアセパシアリパーゼである、請求項１６に記載の組成物。
18. プロテアーゼを含む、請求項１ないし請求項１７のいずれか一項に記載の組成物。
19. 前記プロテアーゼは哺乳類プロテアーゼである、請求項１８に記載の組成物。
20. 前記プロテアーゼは微生物プロテアーゼである、請求項１８に記載の組成物。
21. 前記プロテアーゼは真菌性プロテアーゼである、請求項１８に記載の組成物。
22. 前記プロテアーゼはパンクレリパーゼプロテアーゼである、請求項１８に記載の組成物。
23. 前記プロテアーゼはリプロタマーゼプロテアーゼである、請求項１８に記載の組成物。
24. 前記プロテアーゼはアスペルギルスプロテアーゼである、請求項１８に記載の組成物。
25. 前記プロテアーゼはアスペルギルスメレウスプロテアーゼである、請求項２４に記載の組成物。
26. アミラーゼを含む、請求項１ないし請求項２５のいずれか一項に記載の組成物。
27. 前記アミラーゼは哺乳類アミラーゼである、請求項２６に記載の組成物。
28. 前記アミラーゼは微生物アミラーゼである、請求項２６に記載の組成物。
29. 前記アミラーゼは真菌性アミラーゼである、請求項２６に記載の組成物。
30. 前記アミラーゼはパンクレリパーゼアミラーゼである、請求項２６に記載の組成物。
31. 前記アミラーゼはリプロタマーゼアミラーゼである、請求項２６に記載の組成物。
32. 前記アミラーゼはアスペルギルスアミラーゼである、請求項２６に記載の組成物。
33. 前記アミラーゼはアスペルギルスオリーゼアミラーゼである、請求項３２に記載の組成物。
34. 前記組成物は、ＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のリパーゼを含む、請求項１ないし請求項１７のいずれか一項に記載の組成物。
35. 前記組成物は、ＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり５００〜５０，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼを含む、請求項１８ないし請求項２５、又は請求項３４のいずれか一項に記載の組成物。
36. 前記組成物はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼを含む、請求項２６ないし請求項３３、請求項３４又は請求項３５のいずれか一項に記載の組成物。
37. 架橋リパーゼ結晶であるＡＫＧ１ｇ当たり３，０００〜３００，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ、ＡＫＧ１ｇ当たり２，０００〜２００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３０，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼを含む、請求項１に記載の組成物。
38. ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のリプロタマーゼに相当する量のリプロタマーゼを含む、請求項１に記載の組成物。
39. ＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のパンクレリパーゼに相当する量のパンクレリパーゼを含む、請求項１に記載の組成物。
40. 前記組成物はα−ケトグルタル酸ナトリウムを含む、上記請求項のいずれか一項に記載の組成物。
41. 前記組成物はα−ケトグルタル酸カルシウムを含む、上記請求項のいずれか一項に記載の組成物。
42. 薬剤として用いられる、上記請求項のいずれか一項に記載の組成物。
43. 神経変性疾患、神経幹細胞疾患、神経前駆細胞疾患、虚血性疾患、神経性外傷、情動障害、神経精神疾患、網膜変性疾患、網膜損傷／外傷、認知・学習・記憶障害から選択される神経疾患の治療又は予防に用いられる、上記請求項のいずれか一項に記載の組成物。
44. アルツハイマー病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、パーキンソン病及びパーキンソン症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、鬱病、双極性鬱病／障害、慢性疲労症候群、不安症候群／障害、自閉症、アスペルガー症候群、注意欠陥障害、認知能力又は記憶力関連障害から選択される病状の治療又は予防に用いられる、上記請求項のいずれか一項に記載の組成物。
45. 鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防に用いられる、請求項４４に記載の組成物。
46. 患者に１日当たりＡＫＧ０．１〜３０ｇを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、上記請求項のいずれか一項に記載の組成物。
47. 患者にＡＫＧ０．５〜２４０ｍｍｏｌを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、請求項１ないし請求項４５のいずれか一項に記載の組成物。
48. 患者に１日当たりＡＫＧ０．５〜２４ｍｍｏｌを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、請求項４７に記載の組成物。
49. 患者に１日当たりＡＫＧ１〜１２ｍｍｏｌを含有する量の前記組成物を投与することを含む方法に用いられる、請求項４８に記載の組成物。
50. 鬱病又は慢性疲労症候群の治療又は予防に用いられる、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
51. 神経変性疾患、神経幹細胞疾患、神経前駆細胞疾患、虚血性疾患、神経性外傷、情動障害、神経精神疾患、網膜変性疾患、網膜損傷／外傷、認知・学習・記憶障害、アルツハイマー病、軽度認知障害（ＭＣＩ）、パーキンソン病及びパーキンソン症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、鬱病、双極性鬱病／障害、慢性疲労症候群、不安症候群／障害、自閉症、アスペルガー症候群、注意欠陥障害、認知能力又は記憶力関連障害の治療又は予防方法に用いられ、
    上記方法は、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩と、そのリパーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼから選択される１種以上の酵素を被験体に投与することを含む、α−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
52. 上記方法は、リパーゼ、プロテアーゼ、及び／又はアミラーゼを、表Ｙ及び表Ｚを参照として表Ｘに示した実施形態に基づきＡＫＧの量に対応する量で投与することを含む、請求項５１に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
53. 上記方法はリパーゼの投与を含む、請求項５１又は請求項５２に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
54. 前記リパーゼは哺乳類リパーゼである、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
55. 前記リパーゼは微生物リパーゼである、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
56. 前記リパーゼは細菌性リパーゼである、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
57. 前記リパーゼはパンクレリパーゼリパーゼである、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
58. 前記リパーゼはリプロタマーゼリパーゼである、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
59. 前記リパーゼはシュードモナスリパーゼである、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
60. 前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩刺激性リパーゼ（ＢＳＳＬ）である、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
61. 前記リパーゼはヒト又は他の哺乳類、好ましくはヒトの胆汁酸塩依存性リパーゼ（ＢＳＤＬ）である、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
62. 前記リパーゼはリゾプスオリーゼリパーゼである、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
63. 前記リパーゼはクロモバクテリウムビスコスムリパーゼである、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
64. 前記リパーゼはリゾプスデレマーリパーゼである、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
65. 前記リパーゼはバークホルデリアリパーゼである、請求項５３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
66. 前記リパーゼはバークホルデリアセパシアリパーゼである、請求項６５に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
67. 前記リパーゼは架橋リパーゼ結晶であるバークホルデリアセパシアリパーゼである、請求項６６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
68. 上記方法はプロテアーゼの投与を含む、請求項５１ないし請求項６７のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
69. 前記プロテアーゼは哺乳類プロテアーゼである、請求項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
70. 前記プロテアーゼは微生物プロテアーゼである、請求項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
71. 前記プロテアーゼは真菌性プロテアーゼである、請求項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
72. 前記プロテアーゼはパンクレリパーゼプロテアーゼである、請求項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
73. 前記プロテアーゼはリプロタマーゼプロテアーゼである、請求項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
74. 前記プロテアーゼはアスペルギルスプロテアーゼである、請求項６８に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
75. 前記プロテアーゼはアスペルギルスメレウスプロテアーゼである、請求項７４に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
76. 上記方法はアミラーゼの投与を含む、請求項５１ないし請求項７５のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
77. 前記アミラーゼは哺乳類アミラーゼである、請求項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
78. 前記アミラーゼは微生物アミラーゼである、請求項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
79. 前記アミラーゼは真菌性アミラーゼである、請求項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
80. 前記アミラーゼはパンクレリパーゼアミラーゼである、請求項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
81. 前記アミラーゼはリプロタマーゼアミラーゼである、請求項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
82. 前記アミラーゼはアスペルギルスアミラーゼである、請求項７６に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
83. 前記アミラーゼはアスペルギルスオリーゼアミラーゼである、請求項８２に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
84. 上記方法はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のリパーゼの投与を含む、請求項５１ないし請求項８３のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
85. 上記方法はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり５００〜５，０００ＵＳＰ単位のプロテアーゼの投与を含む、請求項５１ないし請求項８４のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
86. 上記方法はＡＫＧ１ｍｍｏｌ当たり２００〜２０，０００ＵＳＰ単位のアミラーゼ投与を含む、請求項５１ないし請求項８５のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
87. 上記方法は、架橋リパーゼ結晶であるＡＫＧ１ｇ当たり３，０００〜３００，０００ＵＳＰ単位のバークホルデリアセパシアリパーゼ、ＡＫＧ１ｇ当たり２，０００〜２００，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスメレウスプロテアーゼ、及びＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３０，０００ＵＳＰ単位のアスペルギルスオリーゼアミラーゼの投与を含む、請求項５１に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
88. 上記方法はＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のリプロタマーゼに相当する量のリプロタマーゼの投与を含む、請求項５１に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
89. 上記方法はＡＫＧ１ｇ当たり３００〜３００，０００ＵＳＰリパーゼ単位のパンクレリパーゼに相当する量のパンクレリパーゼの投与を含む、請求項５１に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
90. 上記方法はα−ケトグルタル酸ナトリウムの投与を含む、請求項５１ないし請求項８９のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
91. 上記方法はα−ケトグルタル酸カルシウムの投与を含む、請求項５１ないし請求項９０のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
92. 上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ０．０３〜１００ｇを投与することを含む、請求項５１ないし請求項９１のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
93. 上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ０．５〜２４０ｍｍｏｌを投与することを含む、請求項５１ないし請求項９１のいずれか一項に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
94. 上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ０．５〜２４ｍｍｏｌを投与することを含む、請求項９３に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
95. 上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ１〜１２ｍｍｏｌを投与することを含む、請求項９４に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。
96. 上記方法は、被験者に１日当たりＡＫＧ３〜９ｍｍｏｌを投与することを含む、請求項９５に記載のα−ケトグルタル酸又はその薬学的に許容される塩。