JP2016537362A

JP2016537362A - ヒト胎盤灌流液細胞、その亜集団を含む組成物、およびそれらの使用

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Publication number: JP2016537362A
Application number: JP2016530925A
Authority: JP
Inventors: ピー．グルネイジョディ; ズハングキアオクイ; ハーブステイシー; ジェイ．ハリリロバート
Original assignee: アントフロゲネシスコーポレーション
Priority date: 2013-11-15
Filing date: 2014-11-14
Publication date: 2016-12-01
Also published as: KR20210121277A; CN113679740A; WO2015073800A2; US20190117705A1; ZA201603270B; CA2930573A1; WO2015073800A8; AU2014348454A1; JP2022020622A; RU2016123361A; KR20240023709A; CA2930573C; MX2016006270A; MX2021003799A; AU2022215291A1; JP2024016037A; JP2020019777A; EP3068432A4; EP3068432A2; WO2015073800A3

Abstract

本明細書で提供されるのは、ヒト胎盤灌流液由来の単核球を含む組成物、および、例えば、キメリズムを確立し、移植片対宿主病の重症度または持続期間を減少させ、サルコペニア、代謝障害、および血液学的悪性腫瘍などの血液学的障害の症状を治療または寛解し、虚血性脳症（例えば、低酸素性虚血性脳症）および他の中枢神経系損傷の症状を治療または寛解するために、細胞を造血細胞とともに使用することを含む、そのような細胞を使用する方法である。【選択図】図１

Description

（１．分野）
本出願は、２０１３年１１月１５日出願の米国仮特許出願第６１／９０５，０７６号および２０１３年１１月１５日出願の米国仮特許出願第６１／９０５，０７７号の利益を主張するものであり、それらの開示は、それらの全体において参照により本明細書に組み込まれている。
本明細書で提供されるのは、ヒト胎盤灌流液由来の単核球を含む組成物、および、例えば、キメリズムを確立し、移植片対宿主病の重症度または持続期間を減少させ、サルコペニア、代謝障害、および血液学的悪性腫瘍などの血液学的障害の症状を治療または寛解し、虚血性脳症（例えば、低酸素性虚血性脳症）および他の中枢神経系損傷の症状を治療または寛解するために、細胞を造血細胞とともに使用することを含む、そのような細胞を使用する方法である。

（２．背景）
胎盤灌流液は、胎盤脈管構造を介して灌流溶液を通すことにより得られた胎盤細胞の収集物、および脈管構造由来、胎盤の母体面由来、またはその両方由来の灌流液の収集物を含む。哺乳類胎盤の還流方法は、例えば、米国特許第７，０４５，１４６号および米国特許第７，２５５，８７９号に記載されている。還流により得られた胎盤細胞の集団は、不均一であり、とりわけ、ＣＤ３４^＋細胞、顆粒球、単球、およびマクロファージなどの有核細胞、および組織培養基質接着性胎盤幹細胞を含む。

（３．概要）
本明細書で提供されるのは、単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物である。特定の実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、少なくとも６×１０^５個のＣＤ３４^＋細胞を含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、２倍を超える数のＣＤ３４^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋細胞をさらに含む。より具体的な実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋細胞を含む。

他の特定の実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、少なくとも５×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞を含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞をさらに含む。より具体的な実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞を含む。

他の特定の実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、少なくとも６×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞を含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞をさらに含む。より具体的な実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞を含む。

他の特定の実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、少なくとも５×１０^５個のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞を含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞をさらに含む。より具体的な実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞を含む。

他の特定の実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、少なくとも５×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞を含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞をさらに含む。より具体的な実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞を含む。

他の特定の実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、少なくとも６×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞を含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞をさらに含む。より具体的な実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞を含む。

他の特定の実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、少なくとも７×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞を含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞をさらに含む。より具体的な実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞を含む。

他の特定の実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、少なくとも６×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞を含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞をさらに含む。より具体的な実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞を含む。

他の特定の実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、少なくとも３×１０^５個のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞を含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞をさらに含む。より具体的な実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞を含む。

他の特定の実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、少なくとも３×１０^４個のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞を含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、２倍を超える数のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、１０倍を超える数のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞をさらに含む。いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、５０倍を超える数のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞をさらに含む。より具体的な実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞を含む。

いくつかの実施態様では、ヒト胎盤灌流液は、単一の胎盤の灌流から単離されたものである。

また、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物および別の供給源からの造血細胞を対象に投与することを含む、対象において中枢神経系の損傷、疾患、または障害を治療する方法である。特定の実施態様では、前記中枢神経系の損傷、疾患、または障害は、虚血性脳症（例えば、低酸素性虚血性脳症）である。

また、本明細書で提供されるのは、本明細書において提供される単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物および別の供給源からの造血細胞を対象に投与することを含む、対象においてサルコペニアを治療する方法である。

本明細書で提供されるのは、本明細書において提供される単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物および別の供給源からの造血細胞を対象に投与することを含む、対象においてキメリズムを誘発する方法である。

本明細書で提供されるのは、本明細書において提供される単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物および別の供給源からの造血細胞を対象に投与することを含む、対象における細胞生着の方法である。

本明細書で提供されるのは、本明細書において提供される単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物および別の供給源からの造血細胞を対象に投与することを含む、対象において移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の持続期間または重症度を低減させる方法である。

本明細書で提供されるのは、本明細書において提供される単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物および別の供給源からの造血細胞を対象に投与することを含む、対象において代謝障害を治療する方法である。

本明細書で提供されるのは、本明細書において提供される単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物および別の供給源からの造血細胞を対象に投与することを含む、対象において血液学的障害または血液学的悪性腫瘍を治療する方法である。

本明細書で提供されるのは、（ａ）対象における中枢神経系の損傷、疾患、または障害の治療の方法であって、好ましくは、前記中枢神経系の損傷、疾患、または障害が、低酸素性虚血性脳症である、前記方法；（ｂ）対象においてキメリズムを誘発する方法；（ｃ）細胞生着の方法；（ｄ）対象において移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の持続期間または重症度を低減する方法；（ｅ）対象において代謝障害を治療する方法；（ｆ）対象において血液学的障害または血液学的悪性腫瘍を治療する方法；または（ｇ）対象においてサルコペニアを治療する方法で使用する、単離されたヒト胎盤灌流液またはヒト胎盤灌流液細胞を含む組成物である。

また、本明細書で提供されるのは、（ａ）対象における中枢神経系の損傷、疾患、または障害の治療の方法であって、好ましくは、前記中枢神経系の損傷、疾患、または障害が、低酸素性虚血性脳症である、前記方法；（ｂ）対象においてキメリズムを誘発する方法；（ｃ）細胞生着の方法；（ｄ）対象において移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の持続期間または重症度を低減する方法；（ｅ）対象において代謝障害を治療する方法；（ｆ）対象において血液学的障害または血液学的悪性腫瘍を治療する方法；または（ｇ）対象においてサルコペニアを治療する方法で使用する、単離されたヒト胎盤灌流液またはヒト胎盤灌流液細胞を含む組成物であり、組成物は、別の供給源からの造血細胞をさらに含む。

（４．図面の簡単な説明）
図１は、ヒト胎盤灌流液および臍帯血単位の４３個の適合対の全有核細胞数を示す。

図２Ａ〜２Ｃは、ＣＤ４５^＋細胞（Ｂ）に最初にゲートされたヒト胎盤灌流液細胞（Ａ）、およびＣＤ３４^＋細胞（Ｃ）に最初にゲートされたヒト胎盤灌流液細胞（Ａ）のＦＡＣＳ分析を示す。

図３Ａ〜３Ｅは、ＣＤ３４^＋細胞に最初にゲートされたヒト胎盤灌流液（Ａ）と臍帯血（Ｂ）の間の比較を示す。次いで、ＣＤ３４^＋細胞（Ｃ）にゲートされたヒト胎盤灌流液細胞をソーティングして、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻（Ｄ）およびＣＤ３４^＋ＣＤ４５^＋（Ｅ）細胞に分離してもよい。

図４は、ヒト胎盤灌流液（ＨＰＰ）または臍帯血（ＨＵＣＢ）中で特異的ＣＤ３４^＋表現型を発現する有核細胞の割合を示す。

図５は、ヒト胎盤灌流液内皮細胞（上側）を用いたリポタンパク質取り込み実験、および、ＨＵＶＥＣおよびヒト胎盤灌流液（ＨＰＰ）細胞（下側）で観察された微小血管形成を示す。

図６は、ヒト胎盤灌流液（ＨＰＰ）または臍帯血（ＨＵＣＢ）中でＣＤ３４および／またはネスチンを発現する有核細胞の割合を示す。

図７は、ヒト胎盤灌流液（ＨＰＰ）または臍帯血（ＨＵＣＢ）中で特異的ＨＬＡ抗原を発現する有核細胞の割合を示す。

図８は、ヒト胎盤灌流液または臍帯血（ＨＵＣＢ）中で、ＣＤ４の有無によらず、かつＣＤ８の有無によらずＣＤ３を発現する有核細胞の割合を示す。

（５．詳細な説明）
種々の態様では、本明細書で提供されるのは、ヒト胎盤灌流液由来の単核球（ＨＰＣ）、例えば、ヒト胎盤灌流液を産生する方法、そのような細胞を含む組成物、および中枢神経系の損傷、疾患、障害、または状態を有する個人の治療においてそのような細胞の使用である。より具体的な実施態様では、前記疾患、障害、または状態は、虚血性脳症（例えば、低酸素性虚血性脳症）である。また、本明細書で提供されるのは、移植片対宿主病の重症度を減少させ、血液学的悪性腫瘍などの代謝異常および血液学的障害の症状を治療または寛解するために、ＨＰＣ（例えば、ヒト胎盤潅流液）を対象、例えば、ヒト対象に投与する方法である。また、本明細書で提供されるのは、サルコペニアの症状を治療または寛解するために、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液を対象、例えば、ヒト対象に投与する方法である。
（５．１．胎盤灌流液細胞を含む組成物、およびそれらの使用方法）
胎盤灌流液は、本明細書に記載のように、胎盤を通過した灌流溶液から得た全単核球を含む。一般に、単一の胎盤灌流由来の胎盤灌流液は、約１億〜約５億個の有核細胞を含む。ある実施態様では、単一の胎盤灌流由来の胎盤灌流液は、約１億〜約４億個の有核細胞、約１億〜約３億個の有核細胞、または約１億〜約２億個の有核細胞を含む。

本開示に従って使用するためのヒト胎盤灌流液（ＨＰＣ）、例えば、ヒト胎盤灌流液由来の単核球は、任意の医学的または薬学的に許容される様式で収集してもよく、組成物、例えば、医薬組成物中に存在してもよい。ある実施態様では、本明細書で提供される組成物（例えば、医薬組成物、すなわち、ヒトへの投与に適した医薬品グレードの溶液）は、ヒト胎盤灌流液を含む。

ある実施態様では、胎盤灌流液または灌流液細胞は、ＣＤ３４^＋細胞、例えば、造血幹細胞、または前駆細胞、または内皮前駆細胞を含む。そのような細胞は、より具体的な実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻幹細胞または前駆細胞、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５^＋幹細胞または前駆細胞、骨髄系前駆細胞、リンパ前駆細胞、および／または赤血球前駆細胞を含み得る。

他の実施態様では、胎盤灌流液および胎盤灌流液細胞は、例えば、内皮前駆細胞、骨細胞前駆細胞、および／またはナチュラルキラー細胞を含む。

ある実施態様では、胎盤から収集して赤血球を欠失させた胎盤灌流液、またはそのような灌流液から単離した灌流液細胞は、約６０〜９０％、例えば、約６０％、６５％、７０％、８０％、８５％、または９０％、例えば、約６０〜９０％、６５〜９０％、７０〜９０％、または約７５〜９０％の白血球を含む。ある実施態様では、胎盤から収集して赤血球を欠失させた胎盤灌流液、またはそのような灌流液から単離した灌流液細胞は、例えば、フローサイトメトリー、例えば、ＦＡＣＳ分析によって決定されるように、約２〜１１％、例えば、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０または１１％、例えば、約５〜８％、または約６〜７％のナチュラルキラー細胞（ＣＤ３⁻、ＣＤ５６^＋）；および／または約７〜３７％、例えば、約７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、または３７％、例えば、約２０〜２５％、約２２〜２４％、または約２２〜２３％のＴ細胞（ＣＤ３^＋）；および／または約５〜１５％、例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５％、例えば、約８〜１２％、または約１０〜１１％のＢ細胞（ＣＤ１９^＋）；および／または約２０〜３２％、例えば、約２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、または３２％、例えば、約２２〜２８％、２５〜２８％、または約２６〜２７％の単球（ＣＤ１４^＋）；および／または約１〜５％、例えば、約１、２、３、４、または５％、例えば、約２〜４％または約２〜３％の内皮前駆細胞（例えば、ＣＤ３４^＋、ＣＤ３１^＋）；および／または約０．５〜５％、例えば、約０．５、１、２、３、４、または５％、例えば、約２〜４％または約２〜３％の神経前駆細胞（ネスチン^＋）；および／または約１〜７％、例えば、約１、２、３、４、５、６、または７％、例えば、約２〜４％または約３〜４％の造血前駆細胞（ＣＤ３４^＋）；および／または約１〜５％、例えば、約１、２、３、４、または５％、例えば、約２〜４％、約２〜３％、または約１〜２％の接着性胎盤幹細胞（例えば、ＣＤ３４⁻、ＣＤ１１７⁻、ＣＤ１０５^＋、およびＣＤ４４^＋）を含む。

ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３４^＋細胞を含む。より具体的な実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞は、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞である。別の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞は、胎盤から単離される。さらに別の実施態様では、胎盤灌流液細胞の前記集団は、前記灌流液から単離されないさらなる単離ＣＤ３４^＋細胞（例えば、臍帯血、胎盤血、末梢血、骨髄などから単離された）をさらに含む。別の実施態様では、前記さらなるＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血、胎盤血、末梢血、または骨髄から単離される。

他の実施態様では、ＣＤ３４^＋細胞はさらに、ＣＤ１１７⁻である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋細胞はさらに、ＣＤ３１^＋、ＣＸＣＲ４^＋、および／またはＫＤＲ^＋である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋細胞はさらに、ＣＤ１４０ａ^＋である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋細胞はさらに、ネスチン^＋である。ある実施態様では、前記ヒト胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも多いＣＤ１１７⁻細胞を含む。ある実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも多いＣＤ３１^＋、ＣＸＣＲ４^＋、および／またはＫＤＲ^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞のいずれかは、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞である。ある実施態様では、前記ヒト胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも多いＣＤ１４０ａ^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記ヒト胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも多いネスチン^＋細胞を含む。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来のＣＤ３４^＋細胞の当量数よりも高いレベルで１つ以上の血管新生関連マーカーの量を産生する。特定の実施態様では、前記マーカーは、ＣＤ３１、ＫＤＲ、および／またはＣＸＣＲ４を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞は、ＣＤ４５⁻である。より具体的な実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞またはＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞は、臍帯血由来のＣＤ３４^＋細胞の当量数よりも高いレベルのＣＤ３１、ＣＸＣＲ４、またはＫＤＲの少なくとも１つを発現する。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋胎盤細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも高いレベルのネスチンを発現する。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ３４^＋細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ４５⁻細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ３１^＋、ＫＤＲ^＋、および／またはＣＸＣＲ４^＋細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋、ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋、および／またはＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ１４０ａ^＋細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ１１７⁻細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ３８⁻細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ネスチン^＋細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞の濃縮である。ある実施態様では、前記胎盤灌流液は、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞の濃縮である。

濃縮に関して、特定の細胞集団は、例えば、そのような細胞型（単数または複数）を集団に導入し、さらなる量の細胞型（単数または複数）を集団に追加し、および／または１つ以上の異なる細胞型、例えば、異なる特定の細胞表面マーカー表現型を呈する細胞（のいくつかまたは全てを除去する）を集団から欠失させることで、１つ以上の細胞型、例えば、特定の細胞表面マーカー表現型を呈する細胞の濃縮であってもよい。

いくつかの実施態様では、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中の細胞の特定の集団または亜集団の濃縮は、１つ以上のラウンドの細胞ソーティング、例えば、ＦＡＣＳ細胞ソーティングを介して達成される。いくつかの実施態様では、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中の細胞の特定の集団または亜集団の濃縮は、細胞の１つ以上の他の集団または亜集団の除去を介して達成される。いくつかの実施態様では、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中の細胞の特定の集団または亜集団の濃縮は、胎盤灌流液から単離されている細胞の集団または亜集団の追加を介して達成される。いくつかの実施態様では、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中の細胞の特定の集団または亜集団の濃縮は、別の供給源（例えば、臍帯血）から単離されている細胞の集団または亜集団の追加を介して達成される。いくつかの実施態様では、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中の細胞の特定の集団または亜集団の濃縮は、細胞の集団または亜集団で濃縮されている胎盤灌流液の追加を介して達成される。他の実施態様では、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中の細胞の特定の集団または亜集団の濃縮は、細胞の集団または亜集団の拡張を介して達成される。いくつかの実施態様では、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中の細胞の特定の集団または亜集団の濃縮は、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中のそれらの細胞の総数を増加させることによって達成される。いくつかの実施態様では、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中の細胞の特定の集団または亜集団の濃縮は、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中のそれらの細胞の割合を増やすことによって達成される。いくつかの実施態様では、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中の細胞の特定の集団または亜集団の濃縮は、培養を介した細胞の特定の集団または亜集団の拡張によって達成される。いくつかの実施態様では、前記胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中の細胞の特定の集団または亜集団の欠失は、培養を介した細胞の別の特定の集団または亜集団の拡張によって達成される。細胞の特定の集団または亜集団の濃縮または単離は、細胞の特定の集団または亜集団の拡張後に行ってもよく、または胎盤灌流液由来の全有核細胞上で行ってもよい。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、または９×１０^６個のＣＤ３４^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、６×１０^５〜３×１０^７個のＣＤ３４^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^６〜１×１０^７個のＣＤ３４^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^５〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^４〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋細胞を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞は、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングにより得られている。いくつかの実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞は、胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞から単離されている。いくつかの実施態様では、胎盤灌流液由来のＣＤ３４^＋細胞は、培養で拡張されている。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約１０％のＣＤ３４^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、８％〜１２％のＣＤ３４^＋細胞を含む。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、または９×１０^６個のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、５×１０^５〜１×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^６〜１×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^５〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^４〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞は、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ４５に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。別の特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞は、ＣＤ４５に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。いくつかの実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞は、胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞から単離されている。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、または９×１０^６個のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、６×１０^５〜３×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^６〜１×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^５〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^４〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞は、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ３１に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。別の特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞は、ＣＤ３１に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。いくつかの実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞は、胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞から単離されている。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、または９×１０^６個のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、５×１０^５〜２×１０^７個のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^６〜１×１０^７個のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^５〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^４〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞は、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＫＤＲに対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。別の特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞は、ＫＤＲに対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。いくつかの実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞は、胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞から単離されている。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、または９×１０^６個のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、６×１０^５〜３×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^６〜１×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^５〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^４〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞は、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＸＣＲ４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。別の特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞は、ＣＸＣＲ４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。いくつかの実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞は、胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞から単離されている。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、または９×１０^６個のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、６×１０^５〜３×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^６〜１×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^５〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^４〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞は、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ３８に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。別の特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞は、ＣＤ３８に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。いくつかの実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞は、胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞から単離されている。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、または９×１０^６個のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、７×１０^５〜２×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^６〜１×１０^７個のＣＤ３４ＣＤ１１７⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^５〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^４〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞は、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ１１７に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。別の特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞は、ＣＤ１１７に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。いくつかの実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞は、胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞から単離されている。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、または９×１０^６個のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、６×１０^５〜２×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^６〜１×１０^７個のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^５〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^４〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞は、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ１４０ａに対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。別の特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞は、ＣＤ１４０ａに対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。いくつかの実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞は、胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞から単離されている。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、または９×１０^６個のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、６×１０^５〜２×１０^７個のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^６〜１×１０^７個のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^５〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^４〜１×１０^８個のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞は、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ネスチンに対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。別の特定の実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞は、ネスチンに対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞の細胞ソーティングを経由した後、ＣＤ３４に対する抗体による胎盤灌流液由来の全有核細胞のソーティングにより得られている。いくつかの実施態様では、前記ＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞は、胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞から単離されている。

別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、約２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、または９×１０^６個のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、４×１０^４〜５×１０^６個のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^６〜１×１０^７個のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^５〜１×１０^８個のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞を含む。別の実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、１×１０^４〜１×１０^８個のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞を含む。特定の実施態様では、前記ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞は、単離されている。より具体的な実施態様では、前記ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞は、ヒトＣＤ４^＋ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低調節性Ｔ細胞（カタログ＃１５８６１、ＳｔｅｍＣｅｌｌ）用の完全キットを用いて単離されている。

ある実施態様では、ＣＤ３４^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３４^＋細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ４５⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ４５⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ４５⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、または２０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ４５⁻細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ３１^＋、ＫＤＲ^＋、および／またはＣＸＣＲ４^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ３１^＋、ＫＤＲ^＋、および／またはＣＸＣＲ４^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ３１^＋、ＫＤＲ^＋、および／またはＣＸＣＲ４^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３１^＋、ＫＤＲ^＋、および／またはＣＸＣＲ４^＋細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋、ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋、および／またはＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋、ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋、および／またはＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋、ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋、および／またはＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋、ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋、および／またはＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ１１７⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ１１７⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ１１７⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ１１７⁻細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ３８⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ３８⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ３８⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３８⁻細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ１４０ａ^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ１４０ａ^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ１４０ａ^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ１４０ａ^＋細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ネスチン^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ネスチン^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ネスチン^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ネスチン^＋細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２倍である。ある実施態様では、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の３倍である。ある実施態様では、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞の濃縮は、濃縮されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞の２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍である。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞の純粋または実質的に純粋な集団である。

ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも低いレベルでＣＤ３を発現する。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも低いレベルでＣＤ３およびＣＤ８を発現する。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも低いレベルでＣＤ３およびＣＤ４を発現する。

ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞には、ＣＤ３^＋細胞が欠失されている。ある実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞には、ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞が欠失されている。ある実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞には、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋細胞が欠失されている。

ある実施態様では、ＣＤ３^＋細胞の欠失により、欠失されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中よりも２倍少ないＣＤ３^＋細胞をもたらす。ある実施態様では、ＣＤ３^＋細胞の欠失により、欠失されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中よりも３倍少ないＣＤ３^＋細胞をもたらす。ある実施態様では、ＣＤ３^＋細胞の欠失により、欠失されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中よりも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、または２０倍少ないＣＤ３^＋細胞をもたらす。

ある実施態様では、ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞の欠失により、欠失されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中よりも２倍少ないＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞をもたらす。ある実施態様では、ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞の欠失により、欠失されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中よりも３倍少ないＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞をもたらす。ある実施態様では、ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞の欠失により、欠失されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中よりも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍少ないＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞をもたらす。

ある実施態様では、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋細胞の欠失により、欠失されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中よりも２倍少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋細胞をもたらす。ある実施態様では、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋細胞の欠失により、欠失されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中よりも３倍少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋細胞をもたらす。ある実施態様では、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋細胞の欠失により、欠失されていない胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞中よりも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、または５０倍少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋細胞をもたらす。

ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低ＣＤ４５ＲＡ^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低ＣＤ４５ＲＡ⁻細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低ＣＤ４５ＲＡ⁻ＨＬＡＤＲ^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^＋／−ＣＤ１２７^＋／−細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^＋／−ＣＤ１２７^＋／−ＣＤ４５ＲＡ^＋ＨＬＡＤＲ⁻細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^＋／−ＣＤ１２７^＋／−ＣＤ４５ＲＡ⁻ＣＣＲ７^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^＋／−ＣＤ１２７^＋／−ＣＤ４５ＲＡ⁻ＣＣＲ７⁻細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^＋／−ＣＤ１２７^＋／−ＣＤ４５ＲＡ^＋ＣＣＲ７⁻細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^＋／−ＣＤ１２７^＋／−ＣＤ４５ＲＡ⁻ＨＬＡＤＲ^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^＋／−ＣＤ１２７^＋／−ＣＤ４５ＲＡ⁻ＣＤ６９^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４⁻ＣＤ８^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４⁻ＣＤ８^＋ＣＤ４５ＲＡ^＋ＨＬＡＤＲ⁻ＣＣＲ７^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４⁻ＣＤ８^＋ＣＤ４５ＲＡ⁻ＣＣＲ７^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４⁻ＣＤ８^＋ＣＤ４５ＲＡ^＋ＣＣＲ７⁻細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４⁻ＣＤ８^＋ＣＤ４５ＲＡ⁻ＣＣＲ７⁻細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４⁻ＣＤ８^＋ＣＤ４５ＲＡ⁻ＨＬＡＤＲ^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８^＋細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４⁻ＣＤ８⁻細胞を含む。ある実施態様では、前記胎盤灌流液細胞、例えば、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来の細胞の当量数よりも少ないＣＤ３^＋ＣＤ４⁻ＣＤ８⁻ＣＤ６９^＋細胞を含む。

ある実施態様では、本明細書に記載のＣＤ３４^＋細胞またはＣＤ３４^＋細胞の集団のいずれかは、拡張される。ある実施態様では、本明細書に記載のＣＤ３４^＋細胞またはＣＤ３４^＋細胞の集団のいずれかは、濃縮される。ある実施態様では、本明細書に記載のＣＤ３^＋細胞、例えば、ＣＤ３４^＋ＣＤ３^＋細胞のいずれかは、欠失される。

ある実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３^＋細胞の増殖を抑制するために処置されている。ある実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞の増殖を抑制するために処置されている。ある実施態様では、前記胎盤灌流液または前記胎盤灌流液細胞は、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋細胞の増殖を抑制するために処置されている。特定の実施態様では、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋細胞の増殖の抑制は、単離ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞の追加によって達成される。

胎盤灌流液、胎盤灌流液細胞、およびそれらの任意の集団および亜集団は、組み合わせてもよい。一実施態様では、前記胎盤灌流液細胞の１つ以上の集団または亜集団を、胎盤灌流液由来の全有核細胞と組み合わせる。別の実施態様では、前記胎盤灌流液細胞の１つ以上の集団または亜集団を互いに組み合わせる。特定の実施態様では、前記１つ以上の集団または亜集団は、細胞の１つ以上の特定の表現型について濃縮されている。別の特定の実施態様では、前記１つ以上の集団または亜集団は、胎盤灌流液または胎盤灌流液細胞から単離されている。別の特定の実施態様では、前記１つ以上の集団または亜集団は、１つ以上のラウンドの細胞ソーティングを介して得られている。別の特定の実施態様では、前記１つ以上の集団または亜集団は、細胞の１つ以上の特定の表現型について欠失されている。

さらに別の実施態様では、胎盤灌流液または灌流液細胞の集団を、複数のＣＤ３４^＋細胞と組み合わせる。そのようなＣＤ３４^＋細胞は、例えば、未処理胎盤、臍帯血または末梢血内、胎盤血、臍帯血または末梢血由来の全有核細胞中、胎盤血、臍帯血または末梢血由来のＣＤ３４^＋細胞の単離集団中、未処理骨髄中、骨髄由来の全有核細胞中、骨髄由来のＣＤ３４^＋細胞の単離集団などに含有され得る。特定の実施態様では、造血幹細胞は、ＣＤ３４^＋胎盤内皮前駆細胞である。

一態様では、本明細書で提供されるのは、胎盤灌流液または本明細書で提示される細胞集団または亜集団のいずれか、またはその任意の組み合わせを、中枢神経系の損傷、疾患または障害の１つ以上の症状の検出可能な改善、または該症状の悪化の軽減をもたらすのに十分な量で個人に投与することを含む、中枢神経系の損傷、疾患または障害を有する個人を治療する方法である。特定の実施態様では、中枢神経系の損傷、疾患、または障害は、虚血性脳症（例えば、低酸素性虚血性脳症）である。別の特定の実施態様では、前記胎盤灌流液細胞は、胎盤灌流液由来の全有核細胞である。別の実施態様では、前記胎盤灌流液細胞は、本明細書に記載の胎盤灌流液細胞を含む、任意の集団、亜集団、または組み合わせである。別の特定の実施態様では、胎盤灌流液細胞の前記集団は、単一の胎盤の灌流から単離した胎盤灌流液細胞を含む。別の特定の実施態様では、胎盤灌流液細胞の前記集団は、前記灌流液から単離されない単離ＣＤ３４^＋細胞を含む。より具体的な実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞は、胎盤から単離される。別のより具体的な実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血、胎盤血、末梢血、または骨髄から単離される。別のより具体的な実施態様では、前記ＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血由来のＣＤ３４^＋細胞の当量数よりも高いレベルのネスチンを発現する。

別の態様では、本明細書で提供されるのは、移植片対宿主病の重症度を減少させ、および／または血液学的悪性腫瘍などの代謝異常および血液学的障害の症状を治療または寛解するために、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液を対象、例えば、ヒト対象に投与する方法である。

別の態様では、本明細書で提供されるのは、サルコペニアの症状を治療または寛解するために、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液を対象、例えば、ヒト対象に投与する方法である。そのような方法のさらなる実施態様は、以下のセクションでより詳細に説明する。

（５．２．胎盤灌流液細胞の単離、ソーティング、および特徴付け）
本明細書で提供されるのは、哺乳類胎盤から胎盤灌流液および胎盤灌流液細胞を得る方法である。本明細書に記載の全ての実施態様では、好ましい灌流液は、ヒト胎盤灌流液であり、好ましい灌流液細胞は、ヒト胎盤灌流液細胞である。また、本明細書で記載されるのは、細胞集団および亜集団を単離し、細胞集団および亜集団およびその組み合わせを特徴付ける方法である。

本開示に従って使用するためのヒト胎盤灌流液（ＨＰＣ）、例えば、ヒト胎盤灌流液由来の単核球は、任意の医学的または薬学的に許容される様式で収集してもよく、組成物、例えば、医薬組成物中に存在してもよい。ある実施態様では、本明細書で提供される組成物（例えば、医薬組成物、すなわち、ヒトへの投与に適した医薬品グレードの溶液）は、ヒト胎盤灌流液を含む。ある実施態様では、組成物は、部分的に放血させた胎盤から得たヒト胎盤灌流液を含む。ある実施態様では、組成物は、放血させた胎盤から得られるヒト胎盤灌流液を含む。ある実施態様では、組成物は、ヒト胎盤灌流液から単離した幹細胞などの細胞を含む。ある実施態様では、組成物は、ヒト胎盤灌流液から単離した有核細胞、例えば、単核球または全有核細胞を含む。

一実施態様では、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液は、無菌である。

特定の実施態様では、ＨＰＣまたはヒト胎盤灌流液は、標準的な方法に従って赤血球および／または顆粒球を除去することで処理し、有核細胞の集団を生成する。そのような濃縮した細胞集団は、凍結せずに使用してもよく、またはその後の使用のために凍結してもよい。細胞集団を凍結しようとする場合、標準的な凍結保存剤（例えば、ＤＭＳＯ、グリセロール、Ｅｐｉｌｉｆｅ（商標）ＣｅｌｌＦｒｅｅｚｉｎｇＭｅｄｉｕｍ（ＣａｓｃａｄｅＢｉｏｌｏｇｉｃｓ））を、濃縮した細胞集団に添加してから、細胞集団を凍結することができる。

ある実施態様では、胎盤灌流液から得た細胞は、胎盤灌流液由来の単核球を含む。ある実施態様では、胎盤灌流液から得た細胞は、胎盤灌流液由来の全有核細胞を含む。特定の実施態様では、灌流液を処理して、ヘタスターチ（ヒドロキシエチルスターチ）を灌流液に加えた後、重力によって沈降させることで、赤血球を除去または実質的に除去することができる。

ある実施態様では、胎盤灌流液から得た細胞は、単一の胎盤から得られる。ある実施態様では、胎盤灌流液から得た細胞は、２つ以上の胎盤から得られる。ある実施態様では、胎盤灌流液由来の細胞は、２つの胎盤から得られる。細胞が２つ以上の胎盤から得られる実施態様では、異なる胎盤由来の細胞は、互いに血縁関係にあるかまたは適合している必要はない。

本明細書に記載のように、胎盤灌流液は、臍帯血を流し出しており、かつ、胎盤細胞を得るための灌流前に残留血液を除去するために灌流されている胎盤から得てもよい。胎盤灌流液は、臍帯血を流し出しているが、残留血液を除去するために灌流されていない胎盤から得てもよい。胎盤灌流液は、臍帯の０．５〜６．０インチ、例えば、０．５〜１．０、１．０〜１．５、１．５〜２．０、２．０〜２．５、２．５〜３．０、３．０〜３．５、３．５〜４．０、または４．０〜６．０インチを除いた全てから分離されている胎盤から得てもよく、臍帯は、残余の臍帯血を含んでもよく、その一部は、灌流中に胎盤灌流液に入ることがあるため、胎盤灌流液に含まれる。胎盤灌流液は、臍帯血を流し出しておらず、かつ、灌流前に残留血液を除去するために灌流されてもいない胎盤から得てもよい。後者の２つの実施態様では、胎盤細胞、例えば、胎盤灌流液由来の有核細胞、例えば、ＨＰＣは、胎盤血および／または臍帯血由来の有核細胞を含む。特定の実施態様では、本開示に従って使用される胎盤灌流液は、臍帯血を含まない。別の特定の実施態様では、本開示に従って使用される胎盤灌流液は、臍帯血を実質的に含まず、例えば、前記胎盤灌流液は、１０％未満、５％未満、１％未満、０．５％未満、または０．１％未満の臍帯血を含む。一般に、灌流液由来の細胞が臍帯血細胞を含む場合、そのような細胞は、本明細書で提供される方法の目的上、ＨＰＣ集団の一部であり、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞の一部ではないと見なされる。

胎盤灌流液は、投与のために、単一の個人から（すなわち、単一の単位として）収集してもよく、または例えば、同じ個人または１人または複数の他の個人から他の単位と共にプールしてもよい。ある実施態様では、胎盤灌流液またはそれから得た細胞を投与前に保管する。ある実施態様では、１単位の胎盤灌流液は、対象のキログラム体重当たり少なくとも約１．０×１０^５、０．５×１０^６、１．０×１０^６、１．５×１０^６、２．０×１０^６、２．５×１０^６、３．０×１０^６、４．０×１０^６、５．０×１０^６、または１．０×１０^７個の胎盤灌流液から得た細胞、例えば、全有核細胞を投与するように十分な数の細胞を含有する。ある実施態様では、１単位の胎盤灌流液またはそれから得た細胞を投与する。ある実施態様では、１単位未満を投与する。ある実施態様では、２単位以上を投与する。

胎盤灌流液を得るための胎盤は、出産および胎盤剥離に成功した後に回収することができる。ある実施態様では、胎盤は、正期産から得る。ある実施態様では、胎盤は、早産から得る。いくつかの実施態様では、胎盤は、妊娠約２３〜約２５週で出生した乳児の胎盤である。いくつかの実施態様では、胎盤は、妊娠約２６〜約２９週で出生した乳児の胎盤である。いくつかの実施態様では、胎盤は、妊娠約３０〜約３３週で出生した乳児の胎盤である。いくつかの実施態様では、胎盤は、妊娠約３４〜約３７週で出生した乳児の胎盤である。いくつかの実施態様では、胎盤は、妊娠約３７〜約４２週で出生した乳児の胎盤である。

特定の実施態様では、胎盤は、約１時間〜約７２時間または約４時間〜約２４時間の期間にわたって保管し、それから、胎盤を灌流していずれの残余の臍帯血も除去してもよく、または残余の臍帯血を除去せずに胎盤を灌流してもよい。胎盤を、抗凝固溶液中で、約５℃〜約２５℃、例えば、室温付近の温度で保管してもよい。適切な抗凝固溶液は、当該技術分野においてよく知られている。例えば、ヘパリンまたはワルファリンナトリウムの溶液を使用することができる。一実施態様では、抗凝固溶液は、ヘパリン溶液（１：１０００溶液中、１％ｗ／ｗ）を含む。ある実施態様では、胎盤は、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液を収集する前、３６時間以上は保管しない。

本開示に従って使用するためのヒト胎盤灌流液またはそれから得た細胞は、一般に、細胞の対象レシピエントと非血縁である。本開示に従って使用するためのヒト胎盤灌流液またはそれから得た細胞は、一般に、細胞の対象レシピエントに不適合であるかまたは部分的に不適合である。

本開示に従って使用するためのヒト胎盤灌流液またはそれから得た細胞は、任意の方法によって得ることができる。胎盤灌流液は、例えば、米国特許第７，０４５，１４８号、米国特許第７，２５５，８７９号、および／または米国特許第８，０５７，７８８号に開示されるように得ることができる。これらの各々の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。そのような灌流は、例えば、灌流流体を、胎盤脈管構造を強制的に通過させ、かつ胎盤、典型的には母側から滲出する灌流液を、胎盤を含むパン中に収集するパン法による灌流であってもよい。灌流は、例えば、灌流液を通過させ、胎盤の胎児脈管構造のみから収集する閉回路灌流であってもよい。例えば、米国特許第８，０５７，７８８号を参照されたい。この内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。特定の実施態様では、そのような灌流は、連続的であってもよく、すなわち、胎盤を通過した灌流液を、胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）の単離に先立ってもう１回または複数回通過させる。

ある実施態様では、約０．５〜２リットル、例えば、約０．５〜１リットル、または約７５０ｍＬの灌流液を用いて、胎盤を灌流させる。特定の実施態様では、胎盤の灌流は、約１５分〜２時間、例えば、約３０分〜１．５時間、約３０分〜１時間、または約３０分以内に完了させる。

哺乳類胎盤から収集された細胞の数および型は、例えば、形態および細胞表面マーカーの変化を、例えば、フローサイトメトリー、細胞ソーティング、免疫細胞化学法（例えば、組織特異的または細胞マーカー特異的抗体での染色）、蛍光活性化細胞ソーティング（ＦＡＣＳ）、磁気活性化細胞ソーティング（ＭＡＣＳ）などの標準細胞検出技術を用いて測定することによって、光学顕微鏡もしくは共焦点顕微鏡を用いる細胞の形態の検査によって、および／または、ＰＣＲおよび遺伝子発現プロファイリングなどの当該技術分野においてよく知られた技術を用いて遺伝子発現の変化を測定することによって、モニターすることができる。これらの技術を用いて、１つ以上の特定のマーカーについて陽性である細胞も同定することができる。例えば、ＣＤ３４に対する抗体を用いて、細胞が検出可能な量のＣＤ３４を含むかどうか（もしそうならば、その細胞はＣＤ３４^＋である）を上記技術を用いて決定することができる。同様に、細胞が、ＲＴ−ＰＣＲによって特定のマーカーに対して検出可能であるのに十分なＲＮＡを産生するか、または特定のマーカーに対してＲＮＡを成熟細胞よりも著しく多く産生する場合、その細胞は、マーカーに対して陽性である。細胞表面マーカー（例えば、ＣＤ３４などのＣＤマーカー）に対する抗体、および特異的遺伝子の配列は、当該技術分野においてよく知られている。

別の実施態様では、胎盤細胞、例えば、胎盤灌流液または灌流液細胞は、コロニー形成単位アッセイによって同定され、特徴付けることができる。コロニー形成単位アッセイは、当該技術分野において一般的に知られている。

さらに、胎盤灌流液または灌流液細胞は、（生存能を評価するための）トリパンブルー排除アッセイ、フルオレセインジアセテート取込みアッセイ、ヨウ化プロピジウム取込みアッセイ；および（増殖を評価するための）チミジン取込みアッセイ、ＭＴＴ細胞増殖アッセイなどの当該技術分野で知られている標準技術を用いて生存能、増殖力、および寿命について評価することができる。寿命は、長期培養で倍加した最大数の集団を決定することによるなどの当該技術分野においてよく知られた方法によって決定してもよい。

細胞は、例えば、ソーティングすることができ、例えば、蛍光活性化細胞ソーター（ＦＡＣＳ）を用いてソーティングすることができる。蛍光活性化細胞ソーティング（ＦＡＣＳ）は、粒子の蛍光性質に基づいて、細胞を含む粒子を分離するためのよく知られた方法である（Ｋａｍａｒｃｈ、１９８７、ＭｅｔｈｏｄｓＥｎｚｙｍｏｌ、１５１：１５０−１６５）。個々の粒子における蛍光部分のレーザー励起によって小さな電気的変化が生じ、それによって、混合物からプラスの粒子およびマイナスの粒子の電磁気的分離が可能になる。一実施態様では、細胞表面マーカー特異的抗体またはリガンドは、別々の蛍光標識で標識される。細胞は、用いられた抗体に結合するそれらの能力に基づいて細胞の分離を可能にする細胞ソーターによって処理される。ＦＡＣＳソーティングされた粒子は、分離およびクローニングを容易にするために、９６ウェルまたは３８４ウェルのプレートの個々のウェルへ直接堆積させてもよい。

別の実施態様では、磁気ビーズを用いて、細胞を分離するかまたはソーティングする、および／または細胞集団を欠失することができる。細胞は、例えば、磁気活性化細胞ソーティング（ＭＡＣＳ）技術を用いてソーティングしてもよく、その技術とは、粒子を、磁気ビーズ（０．５〜１００μｍ直径）を結合するそれらの能力に基づいて分離するための方法である。磁気ミクロスフェアに様々な有用な修飾を施すことができ、それらには、特定の細胞表面分子またはハプテンを特異的に認識する抗体の共有結合的付加が挙げられる。その後、ビーズは、結合を可能にするように細胞と混合される。その後、細胞を、磁場に通過させて、特定の細胞表面マーカーを有する細胞を分離して取り出す。一実施態様では、これらの細胞を、次いで、単離し、追加の細胞表面マーカーに対する抗体に結合した磁気ビーズと再混合することができる。細胞を、再び、磁場に通過させ、抗体を両方とも結合した細胞を単離する。次いで、そのような細胞を、クローン単離のためにマイクロタイターディッシュなどの別個のディッシュに希釈することができる。

胎盤灌流液細胞は、当該技術分野で知られた他の技術、例えば、所望の細胞の選択的増殖（陽性選択）、望まない細胞の選択的破壊（陰性選択）；混合集団における、例えば、ダイズ凝集素とのような、異なる細胞凝集能に基づいた分離；凍結融解手順；濾過；通常の遠心分離およびゾーン遠心分離；遠心性水簸（向流遠心分離）；単位重力分離；向流分配；電気泳動などを用いて分離することができる。

（５．３．造血細胞、例えば、臍帯血細胞、およびヒト胎盤灌流液由来の細胞を使用する方法）
一態様では、本明細書で提供されるのは、ヒト胎盤灌流液（ＨＰＣ）、例えば、ヒト胎盤灌流液由来の単核球と組み合わせて造血細胞を投与することを含む、造血細胞を対象、例えば、ヒト対象に移植する方法である。前記ＨＰＣは、ヒト胎盤灌流液、胎盤灌流液由来の全有核細胞、または本明細書に記載のヒト胎盤灌流液由来の単核球の任意の集団、亜集団、または組み合わせであってもよく、特定の集団または亜集団を濃縮したものまたは欠失したものを含む。本明細書に記載の造血細胞を移植する方法で使用することができる造血細胞の供給源としては、例えば、骨髄またはそれに由来する細胞、末梢血またはそれに由来する細胞、および臍帯血またはそれに由来する細胞が挙げられる。本明細書で用いる場合、造血細胞のこれらの供給源は、「ＨＴ細胞」と総称される。

一実施態様では、本明細書で提供されるのは、ＨＴ細胞、例えば、ヒト臍帯血細胞（ＵＣＢ）細胞、例えば、ヒト臍帯血を対象、例えば、ヒト対象に移植する方法であって、ＨＴ細胞、例えば、ヒト臍帯血細胞（ＵＣＢ）細胞、例えば、ヒト臍帯血をヒト胎盤灌流液（ＨＰＣ）、例えば、ヒト胎盤灌流液由来の単核球と組み合わせて投与することを含む、前記方法である。一実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ヒトＵＣＢ細胞、例えば、ヒトＵＣＢは、対象と非血縁である。特定の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、例えば、ヒトＵＣＢは、対象に部分的に不適合である。別の実施態様では、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液は、対象と非血縁である。特定の実施態様では、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液は、対象に部分的に不適合である。別の特定の実施態様では、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液は、対象に適合しない。さらに別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ヒトＵＣＢ細胞、例えば、ヒトＵＣＢは、対象と非血縁であり、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液は、対象と非血縁である。さらに別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ヒトＵＣＢ細胞、例えば、ヒトＵＣＢは、対象と非血縁であり、かつ、該対象に部分的に不適合であり、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液は、対象と非血縁であり、かつ、該対象に部分的に不適合であるかまたは不適合である。一実施態様では、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液は、ＨＴ細胞、例えば、ヒトＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢと非血縁であり、かつ、不適合である。一実施態様では、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液は、ＨＴ細胞、例えば、ヒトＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢ、およびレシピエントと非血縁であり、かつ、不適合である。

特に記載のない限り、ＵＣＢまたはＨＰＣの文脈において本明細書で使用される「血縁関係にある」とは、自身または一等親もしくは二等親血縁者のことを言う。例えば、対象に血縁関係にあるＵＣＢとは、対象自身由来のＵＣＢ、または対象の一等親もしくは二等親血縁者由来のＵＣＢのことを言う。別の例では、ＨＰＣに血縁関係にあるＵＣＢとは、同じドナー、または一等親もしくは二等親血縁者であるドナー由来のＵＣＢおよびＨＰＣのことを言う。同様に、特に記載のない限り、これらの文脈における「非血縁である」とは、二等親血縁者の関係よりも遠い関係のことを言う。

特に記載のない限り、ＵＣＢまたはヒト胎盤灌流液由来の細胞（例えば、ＨＰＣ）の文脈において本明細書で使用される「適合した」とは、ＨＬＡ適合のことを言う。さらに、本明細書で使用される、ＵＣＢまたはヒト胎盤灌流液由来の細胞（例えば、ＨＰＣ）の文脈において本明細書で使用される「部分的に不適合である」とは、３／６、４／６、または５／６のＨＬＡ遺伝子座で適合する状況のことを言う。また、特に記載のない限り、ＵＣＢまたはヒト胎盤灌流液由来の細胞（例えば、ＨＰＣ）の文脈において本明細書で使用される「不適合である」とは、０／６、１／６、または２／６のＨＬＡ遺伝子座での適合のことを言う。「適合した」、「部分的に不適合であった」、および「不適合であった」とは、例えば、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞とＨＰＣとの間、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞の単位間、および／または、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、および／またはＨＰＣと細胞のレシピエントである対象との間の関係のことを言う。

ある実施態様では、そのような方法は、１単位のＵＣＢまたはそれに由来する細胞を投与することを含む。別の実施態様では、本明細書に示される方法は、複数単位のＵＣＢまたはそれに由来する細胞を投与することを含む。例えば、本明細書に示される方法は、２、３、または４単位のＵＣＢまたはそれに由来する細胞を投与することを含むことができる。２単位以上のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞を使用する例では、ある実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞の少なくとも一部分は、対象に、ＨＰＣに、および／または、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞（例えば、他のＵＣＢ細胞単位）の他の部分と非血縁であり得る。２単位以上のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞を使用する例では、ある実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞の少なくとも一部分は、対象に、ＨＰＣに、および／または、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞（例えば、他のＵＣＢ細胞単位）の他の部分に不適合であるかまたは部分的に不適合であり得る。別の実施態様では、本明細書に示される方法は、１単位未満のＨＴ細胞またはＵＣＢまたはそれに由来する細胞を投与することを含むことができる。例えば、本明細書に示される方法は、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、または０．９単位のＨＴ細胞またはＵＣＢまたはそれに由来する細胞を投与することを含むことができる。特定の実施態様では、本明細書に示される方法は、複数投与にわたって特定数の単位（１未満、１、または２以上）を投与することを含むことができる。

別の態様では、本明細書で提供されるのは、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢと、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液との組み合わせを対象に投与することを含む、対象におけるキメリズムを誘発する方法であって、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞の少なくとも一部分は、対象に部分的に不適合であり、および／または、ＨＰＣは、対象におけるキメリズムが起こるように、対象に不適合であるかまたは部分的に不適合である、前記方法である。特に記述がない限り、本明細書で使用される「キメリズム」とは、対象における非自己ＤＮＡの存在、例えば、レシピエント対象に対して不適合であるかまたは部分的に不適合である細胞由来のＤＮＡの存在のことを言う。

そのような方法の一実施態様では、２単位以上のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞を対象に投与し、例えば、２、３、または４単位のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞を対象に投与する。２単位以上のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞を対象に投与する特定の実施態様では、キメリズムを誘発する方法は、複数のキメリズムをもたらすことができる、すなわち、２単位以上および最大で全単位の投与したＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、単位、またはその子孫を伴うキメリズムをもたらし得る。

そのような方法の別の実施態様では、ＨＰＣまたはその子孫を伴うキメリズムをもたらし得る。さらに別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞（２単位以上のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞を投与する例では、複数のキメリズムを含む）またはその子孫、およびＨＰＣまたはその子孫を伴うキメリズムをもたらし得る。

そのような方法のさらに別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、対象と非血縁である。２単位以上のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢを投与する例では、１以上のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞単位は、対象と非血縁であることがある。そのような方法の特定の実施態様では、ＨＰＣは、対象と非血縁であり、さらに、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞と非血縁であり得る。そのような方法のさらに別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞とＨＰＣの両方は、対象と非血縁である。

そのような方法のある実施態様では、キメリズム（ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、またはその子孫、またはＨＰＣまたはその子孫のいずれかまたは両方を含む）は、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞をＨＰＣと組み合わせて対象に投与した１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２日以内、またはそれ以上で、対象において最初に検出される。

キメリズムは、当該技術分野で公知の方法を用いて検出することができる。例えば、キメリズムは、血液試料を用いて検出することができる。一実施態様では、キメリズムは、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）ベース方法を用いて、例えば、短縦列反復アッセイによって検出される。一実施態様では、造血幹細胞移植後のキメリズムに対する試験は、レシピエントとドナーの遺伝子プロファイルを識別することと、その後、レシピエントの血液、骨髄、または他の組織中における混合の度合いを評価することを伴う。ＤＮＡによるキメリズム試験（生着分析）は、ヒト同一性試験で一般に用いられる方法を使用し、短縦列反復（ＳＴＲ）遺伝子座と呼ばれるゲノム多型の分析により達成される。一実施態様では、末梢血ドナーキメリズム（ＵＣＢおよび灌流液細胞）（全血、ＮＫおよびＴ細胞）の定量（例えば、短縦列反復アッセイを用いて）は、７日目、１４日目、３０日目、６０日目、１００日目、および１８０日目（＋／−１０日）に評価し、ここで、末梢血レシピエントキメリズムの定量（例えば、短縦列反復アッセイを用いて）は、ベースラインでのドナー細胞（ＵＣＢおよび灌流液細胞）のキメリズムに沿ったベースラインで評価する。

さらに別の態様では、本明細書で提供されるのは、ＨＴ細胞、例えば、ヒトＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢと、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液との組み合わせを対象に投与することを含む、対象における細胞生着の方法であって、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞の少なくとも一部分は、対象に部分的に適合し、および／または、ＨＰＣは、対象において細胞生着が起こるように、対象に不適合であるかまたは部分的に不適合である、前記方法である。ある実施態様では、細胞生着は、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞またはその子孫の生着を含む。特定の他の実施態様では、細胞生着は、ＨＰＣまたはその子孫の生着を含む。さらに他の実施態様では、生着は、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞またはその子孫、およびＨＰＣまたはその子孫の生着を含む。

そのような方法の一実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、対象と非血縁である。特定の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、対象に部分的に不適合である。別の特定の実施態様では、ＨＰＣは、対象と非血縁であり、さらに、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞と非血縁であり得る。特定の実施態様では、ＨＰＣは、対象に部分的に不適合である。別の特定の実施態様では、ＨＰＣは、対象に適合しない。さらに別の実施態様では、ＵＣＢ細胞は、対象と非血縁であり、ＨＰＣは、対象と非血縁である。さらに別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、対象と非血縁であり、かつ、該対象に部分的に不適合であり、ＨＰＣは、対象と非血縁であり、かつ、該対象に部分的に不適合であるかまたは不適合である。ある実施態様では、本明細書に示される方法は、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞の単独での投与と比べて、生着する能力が増したことを示す。

生着は、当該技術分野で公知の方法を用いて検出することができる。例えば、一実施態様では、分画をもつ全血球計算は、０日目から、好中球絶対数が最低値に到達後３日間で＞５００／ｍｍ^３になり、かつ、血小板数が、３つの異なる日で３回連続した測定で、血小板輸血から最低７日間独立して≧２０，０００／ｍｍ^３に到達するまで、１日〜３日ごとに行ってもよい。本明細書で用いる場合、「好中球生着」とは、好中球数最低値の後に好中球絶対数が５００／ｍｍ^３を上回る最初の３日間のことを言う。本明細書で用いる場合、「血小板生着」とは、血小板が輸血なしで≧２０，０００／ｍｍ^３となる７日間の後に、血小板数が≧２０，０００／ｍｍ^３を示す最初の連続３日間のことを言う。

ある実施態様では、対象における細胞生着は、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞をＨＰＣと組み合わせて対象に投与した１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、または６２日、または２カ月、２．５カ月、３カ月以内に、またはそれ以上で、検出される。

ある実施態様では、本明細書に示される方法は、１単位のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢを投与することを含む。別の実施態様では、本明細書に示される方法は、複数単位のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢを投与することを含む。例えば、本明細書に示される方法は、２、３、または４単位のＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢを投与することを含むことができる。

さらに別の態様では、本明細書で提供されるのは、ＨＴ細胞、例えば、ヒトＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢと、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液との組み合わせを対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの持続期間または重篤度を軽減する方法であって、対象におけるＧＶＨＤの持続期間または重篤度の軽減が起こるように、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞の少なくとも一部分は、対象に部分的に適合し、および／または、ＨＰＣは、対象に不適合であるかまたは部分的に不適合である、前記方法である。

そのような方法の一実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、対象と非血縁である。特定の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、対象に部分的に不適合である。別の特定の実施態様では、ＨＰＣは、対象と非血縁であり、さらに、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞と非血縁であり得る。特定の実施態様では、ＨＰＣは、対象に部分的に不適合である。別の特定の実施態様では、ＨＰＣは、対象に適合しない。さらに別の実施態様では、ＵＣＢ細胞は、対象と非血縁であり、ＨＰＣは、対象と非血縁である。さらに別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、対象と非血縁であり、かつ、該対象に部分的に不適合であり、ＨＰＣは、対象と非血縁であり、かつ、該対象に部分的に不適合であるかまたは不適合である。ある実施態様では、本明細書に示される方法は、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞の単独での投与と比べて、ＧＶＨＤの重症度または持続期間が軽減されたことを示す。

別の態様では、本明細書で提供されるのは、サルコペニアを有する個人を治療する方法であって、胎盤灌流液または本明細書で提示される細胞集団または亜集団のいずれか、またはその任意の組み合わせを、サルコペニアの１つ以上の症状の検出可能な改善、または該症状の悪化の軽減をもたらすのに十分な量で個人に投与することを含み、ＨＴ細胞、例えば、ヒトＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢ、およびＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液の組み合わせを対象に投与することを含む、前記方法である。

さらに別の態様では、本明細書で提供されるのは、中枢神経系の損傷、疾患または障害を有する個人を治療する方法であって、胎盤灌流液または本明細書で示される細胞集団または亜集団のいずれか、またはその任意の組み合わせを、中枢神経系の損傷、疾患または障害の１つ以上の症状の検出可能な改善、または該症状の悪化の軽減をもたらすのに十分な量で個人に投与することを含み、ＨＴ細胞、例えば、ヒトＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢ、およびＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液の組み合わせを対象に投与することを含む、前記方法である。特定の実施態様では、中枢神経系の損傷、疾患、または障害は、虚血性脳症（例えば、低酸素性虚血性脳症）である。

ある実施態様では、本明細書に示される方法は、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢを、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液と同時に投与することを含む。特定の実施態様では、細胞を対象に同時に投与する。別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、およびＨＰＣを、互いに、０．５、１、１．５、２、３、４、６、８、１０、１２、１６、１８、または２４時間以内、またはそれ以上、または１、２、３、４、５、６、または７日以内、またはそれ以上に対象に投与する。特定の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢを対象に投与した後、ＨＰＣ、例えば、ヒト胎盤灌流液を投与する、例えば、ＵＣＢを投与してから１時間以内に、または対象がＵＣＢ投与に有害反応を示していないことを確認するのに必要な最短期間以内に投与する。

本明細書で提供される方法は、例えば、細胞生着までにかかる時間の短縮、対象が好中球減少症になる時間の制限、対象が血小板減少症になる時間の制限、キメリズムの確立、およびＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢの単独投与に対するＧＶＨＤの重症度または持続期間の軽減またはＧＶＨＤの予防を含み得る利点を示すことができる。

投与されるＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞とＨＰＣとの比率は変更可能である。ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞とＨＰＣとの比率は、当業者の判断に従って決めることができる。ある実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞とＨＰＣとの比率は、約１００，０００，０００：１、５０，０００，０００：１、２０，０００，０００：１、１０，０００，０００：１、５，０００，０００：１、２，０００，０００：１、１，０００，０００：１、５００，０００：１、２００，０００：１、１００，０００：１、５０，０００：１、２０，０００：１、１０，０００：１、５，０００：１、２，０００：１、１，０００：１、５００：１、２００：１、１００：１、５０：１、２０：１、１０：１、５：１、２：１、１：１；１：２；１：５；１：１０；１：１００；１：２００；１：５００；１：１，０００；１：２，０００；１：５，０００；１：１０，０００；１：２０，０００；１：５０，０００；１：１００，０００；１：５００，０００；１：１，０００，０００；１：２，０００，０００；１：５，０００，０００；１：１０，０００，０００；１：２０，０００，０００；１：５０，０００，０００；または約１：１００，０００，０００である。ある実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞とＨＰＣとの比率は、約２０：１〜約１：２０であり、または約１：１０、約１：５、約１：１、約５：１、または約１０：１である。

ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、およびＨＰＣの投与は、当該技術分野で公知の任意の細胞投与技術を用いて行うことができる。一実施態様では、投与は、静脈、例えば、静脈内、例えば、ＩＶ、ＰＩＣＣライン、中心ラインなどを介してである。例えば、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、およびＨＰＣは、注射または輸血を含む任意の薬学的または医学的に許容される様式で、対象に別々の組成物または単一組成物で投与してもよい。ある実施態様では、組成物（または複数）は、注射用組成物として配合してもよい（例えば、ＷＯ９６／３９１０１、その内容全体を文献引用によって本明細書に組み込んだものとする）。

ある実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、またはＨＰＣを対象に非経口投与する。本明細書で使用される用語「非経口」には、皮下注射、静脈内、筋肉内、動脈内注射、または注入技術が含まれる。ある実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、またはＨＰＣを対象に静脈内投与する。特定の他の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、またはＨＰＣを対象に脳室内投与する。

ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、およびＨＰＣは、任意の薬学的に許容される担体に別々または一緒に含まれてもよい。ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、またはＨＰＣは、任意の薬学的または医学的に許容される容器、例えば、血液バッグ、移動バッグ、プラスチック製チューブ、シリンジ、バイアルなどで運ぶ、保管する、または輸送してもよい。

ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、および／またはＨＰＣの対象への投与は、１回または複数回で行ってもよい。ある実施態様では、投与は、１回で行う。ある実施態様では、投与は、複数回、例えば、２、３、４、またはそれ以上の回数で行う。ある実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞を複数回投与する。ある実施態様では、ＨＰＣを複数回投与する。

ある実施態様では、本明細書に記載の方法に従って対象に投与される臍帯血またはそれから得た細胞（例えば、臍帯血由来の全有核細胞）の量は、臍帯血中に存在する細胞の数に基づいて決定することができる。対象に投与されるＵＣＢまたはそれから得た細胞（例えば、臍帯血由来の全有核細胞）、および／または、ヒト胎盤灌流液またはＨＰＣまたはそれから得た全有核細胞の量または数は、臍帯血またはそれから得た細胞（例えば、臍帯血由来の全有核細胞）、および／または、ヒト胎盤灌流液またはＨＰＣまたはそれに由来する全有核細胞の供給源、治療される障害または状態の重症度または性質、並びに対象の年齢、体重、および健康状態などに依存する。ある実施態様では、対象のキログラム体重当たり約０．０１〜約０．１、約０．１〜約１、約１〜約１０、約１０〜約１０^２、約１０^２〜約１０^３、約１０^３〜約１０^４、約１０^４〜約１０^５、約１０^５〜約１０^６、約１０^６〜約１０^７、約１０^７〜約１０^８、または約１０^８〜約１０^９個の臍帯血細胞（例えば、臍帯血由来の全有核細胞）、ヒト胎盤灌流液またはそれから得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）、または全臍帯血細胞および胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは全有核細胞）を投与する。種々の実施態様では、対象のキログラム体重当たり少なくとも約０．１、１、１０、１０^２、１０^３、１０^４、１０^５、１０^６、１０^７、１０^８、または１０^９個の臍帯血細胞（例えば、臍帯血由来の全有核細胞）、胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）、または臍帯血細胞および胎盤灌流液から得た細胞を投与する。

特定の実施態様では、対象のキログラム体重当たり少なくとも約０．５×１０^６、１．０×１０^６、１．５×１０^６、２．０×１０^６、２．５×１０^６、３．０×１０^６、３．５×１０^６、４．０×１０^６、４．５×１０^６、５．０×１０^６、５．５×１０^６、６．０×１０^６、６．５×１０^６、７．０×１０^６、７．５×１０^６、８．０×１０^６、８．５×１０^６、９．０×１０^６、９．５×１０^６、１．０×１０^７、１．５×１０^７、２．０×１０^７、２．５×１０^７、３．０×１０^７、３．５×１０^７、４．０×１０^７、４．５×１０^７、５．０×１０^７、５．５×１０^７、または６．０×１０^７個の臍帯血細胞（例えば、臍帯血由来の全有核細胞）、胎盤灌流液由来の細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）、または臍帯血細胞および胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）を投与する。より具体的な実施態様では、対象のキログラム体重当たり少なくとも約０．５×１０^６、１．０×１０^６、１．５×１０^６、２．０×１０^６、２．５×１０^６、３．０×１０^６、３．５×１０^６、４．０×１０^６、４．５×１０^６、または５．０×１０^６個の胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）を投与する。より具体的な実施態様では、対象のキログラム体重当たり少なくとも約１．５×１０^７、２．０×１０^７、２．５×１０^７、３．０×１０^７、３．５×１０^７、４．０×１０^７、４．５×１０^７、５．０×１０^７、５．５×１０^７、または６．０×１０^７個の臍帯血細胞（例えば、臍帯血由来の全有核細胞）を投与する。種々の実施態様では、対象のキログラム体重当たり多くとも約１０^４、１０^５、１０^６、１０^７、１０^８、または１０^９個の臍帯血細胞、胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）、または臍帯血細胞および胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）を投与する。特定の実施態様では、対象のキログラム体重当たり多くとも約０．５×１０^６、１．０×１０^６、１．５×１０^６、２．０×１０^６、２．５×１０^６、３．０×１０^６、３．５×１０^６、４．０×１０^６、４．５×１０^６、５．０×１０^６、５．５×１０^６、６．０×１０^６、６．５×１０^６、７．０×１０^６、７．５×１０^６、８．０×１０^６、８．５×１０^６、９．０×１０^６、９．５×１０^６、１．０×１０^７、１．５×１０^７、２．０×１０^７、２．５×１０^７、３．０×１０^７、３．５×１０^７、４．０×１０^７、４．５×１０^７、５．０×１０^７、５．５×１０^７、または６．０×１０^７個の臍帯血細胞（例えば、臍帯血由来の全有核細胞）、胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）、または臍帯血細胞および胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）を投与する。より具体的な実施態様では、対象のキログラム体重当たり多くとも約０．５×１０^６、１．０×１０^６、１．５×１０^６、２．０×１０^６、２．５×１０^６、３．０×１０^６、３．５×１０^６、４．０×１０^６、４．５×１０^６、または５．０×１０^６個の胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）を投与する。より具体的な実施態様では、対象のキログラム体重当たり多くとも約１．５×１０^７、２．０×１０^７、２．５×１０^７、３．０×１０^７、３．５×１０^７、４．０×１０^７、４．５×１０^７、５．０×１０^７、５．５×１０^７、または６．０×１０^７個の臍帯血細胞（例えば、臍帯血由来の全有核細胞）を投与する。

上記実施態様の特定の実施態様、臍帯血細胞（例えば、臍帯血由来の全有核細胞）または胎盤灌流液から得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）は、ＣＤ３４^＋細胞である。ある実施態様では、キログラム体重当たり少なくとも約１０^４〜約１０^７個のＣＤ３４^＋細胞を投与する。そのようなＣＤ３４^＋細胞は、臍帯血単独に由来してもよく、または臍帯血および胎盤灌流液に由来してもよい。

ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢ、およびＨＰＣ、例えば、胎盤灌流液は、対象のサイズに適した容量で送達することができる。ヒト成人の一般的な血液量は、約８５〜１００ｍＬ／ｋｇ体重である。従って、ヒト成人の血液量は、約４０ｍＬから約３００ｍＬの範囲である。従って、種々の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞、例えば、ＵＣＢ、およびＨＰＣ、例えば、胎盤灌流液は、約０．５ｍＬ、１．０ｍＬ、２ｍＬ、３ｍＬ、４ｍＬ、５ｍＬ、６ｍＬ、７ｍＬ、８ｍＬ、９ｍＬ、１０ｍＬ、１１ｍＬ、１２ｍＬ、１３ｍＬ、１４ｍＬ、１５ｍＬ、１６ｍＬ、１７ｍＬ、１８ｍＬ、１９ｍＬ、２０ｍＬ、２１ｍＬ、２２ｍＬ、２３ｍＬ、２４ｍＬ、２５ｍＬ、２６ｍＬ、２７ｍＬ、２８ｍＬ、２９ｍＬ、または約３０ｍＬ、またはそれ以上の全容量で投与する。そのような容量の投与は、単一投与または複数投与であってもよい。そのような容量の臍帯血または臍帯血細胞の数、またはヒト胎盤灌流液またはそれから得た細胞（例えば、ＨＰＣまたは胎盤灌流液由来の全有核細胞）を投与することができる時間は、例えば、０．５時間、１時間、１．５時間、２時間、２．５時間、３時間、３．５時間、４時間、またはそれ以上に変更可能である。

ある実施態様では、２０ｍＬを下回る少量の輸血は、シリンジを用いて行われる。より大容量の輸血は、注入デバイスによって、例えば、１〜４時間以内で投与することができる。

本明細書で提供される方法は、それを必要とする任意の対象で行うことができる。一態様では、対象は、造血の再構成、部分再構成、または増加を必要としている。ある実施態様では、対象は、ヒト対象である。ある実施態様では、対象は、成人ヒト対象である。ある実施態様では、対象は、２５歳またはそれ以下である。ある実施態様では、対象は、乳児である。

ある実施態様では、本明細書に示される方法、例えば、キメリズムを誘発する移植方法、および／または生着方法の前に、例えば、ＴＢＩ、クロファラビン、および／またはＡｒａ−Ｃ１を用いた骨髄破壊的前処置；例えば、ブスルファン、フルダラビン、および／またはアレムツズマブを用いた毒性軽減前処置；または放射線治療；または免疫抑制療法または血球数を減少させる療法などの他の療法が患者に施されている。

特定の態様では、本明細書で提供される方法は、先天性代謝異常、副腎脳白質ジストロフィー、ムコ多糖症、ニーマン−ピック病、異染性白質ジストロフィー、ウォルマン病、クラッベ病、ゴーシェ病、フコシドーシス、またはバッテン病などの代謝異常の治療方法として、それを必要とする対象に使用することができる。

別の特定の態様では、本明細書で提供される方法は、血液学的疾患または悪性疾患、例えば、リンパ造血系悪性疾患、骨髄異形成症候群、無巨核球性血小板減少症、急性リンパ性白血病（例えば、白血病（ＡＬＬ）および急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））、好中球減少症、鎌状赤血球病（例えば、鎌状赤血球貧血）、ベータサラセミア（例えば、ベータサラセミアメジャー）、重症複合型免疫不全症、骨髄不全症、または貧血（例えば、重症再生不良性貧血またはダイアモンド・ブラックファン貧血）の治療方法として、それを必要とする対象に使用することができる。

本明細書で用いる場合、「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、および「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は、障害または状態、またはそのような障害または状態の任意のパラメータまたは症状の進行、重症度、および／または持続期間を低下または寛解させることを指す。治療は、対象が生存する場合、または治療される障害または状態が、治療の結果として何らかの形で測定可能に改善される場合に、効能を示すとみなすことができる。そのような改善は、例えば、１つまたは複数の測定可能な指標によって示すことができ、それらとして、例えば、特定の疾患、障害、または状態に伴う生理的な状態または一連の生理的な状態の検出可能な変化が挙げられる。また、１つまたは複数の指標が、例えば、ほぼ同年齢の個体についての正常値の範囲内の値、またはそのような（１つもしくは複数の）指標が、治療がない場合に示すと予想されるよりも正常値に近い値に変化することによって、そのような治療に対して応答しているように見える場合に、治療は有効とみなされる。

本明細書で提供される方法のある実施態様では、本明細書で提供される方法は、障害または状態の治療において、第１の療法を１つまたは複数の第２の療法と組み合わせて使用することができる。そのような第２の療法としては、これらに限定されないが、手術、ホルモン療法、免疫療法、光線療法、または特定の薬物を用いる治療が挙げられる。本明細書で提供される方法と組み合わせて使用することができる例示的な療法としては、環境温度の制御；酸素を用いる補助；人工呼吸器または換気装置；末梢血の輸血；鉄の補充；経静脈栄養；光線療法；手術；代謝異常または血液学的疾患（血液系腫瘍を含む）を治療するための薬剤；抗生物質または抗ウイルス薬；抗炎症剤（例えば、ステロイド系抗炎症性化合物、非ステロイド系抗炎症性（ＮＳＡＩＤ）化合物）；一酸化窒素；抗ヒスタミン剤；免疫抑制剤；および免疫調節化合物（例えば、ＴＮＦ−α阻害剤）が挙げられる。

（５．４．臍帯血細胞）
本開示に従って使用するための臍帯血（本明細書では、ＵＣＢまたは「臍帯血」とも呼ばれる）は、任意の医学的または薬学的に許容される様式で収集してもよいし、組成物、例えば、医薬組成物中に存在してもよい。臍帯血を収集するための種々の方法が記載されている。例えば、米国特許第６，１０２，８７１号；米国特許第６，１７９，８１９号；および米国特許第７，１４７，６２６号を参照されたい。これらの各々の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。臍帯血を収集するための従来の技術は、針またはカニューレの使用に基づいており、これは、重力の助けを借りて使用される。臍帯血は、例えば、血液バッグ、移動バッグ、または無菌のプラスチック製チューブの中に収集してもよい。

いくつかの実施態様では、臍帯血は、商業的な臍帯血バンク（例えば、ＬｉｆｅＢａｎｋＵＳＡなど）から得られる。別の実施態様では、臍帯血を、分娩後の哺乳動物の臍帯から収集し、直ちに（例えば、収集後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２時間以内に）使用する。他の実施態様では、対象を治療するために使用する臍帯血は、凍結保存されていた臍帯血である。臍帯血は、単一の臍帯または複数の臍帯から収集することができる。

ある実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、対象および／またはＨＰＣと非血縁である。別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、対象および／またはＨＰＣに部分的に不適合である。さらに別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、ＨＰＣに不適合である。さらに別の実施態様では、ＨＴ細胞、例えば、ＵＣＢ細胞は、ＨＰＣと非血縁であり、かつ、不適合である。特定の実施態様では、ＵＣＢは、３／６、４／６、または５／６のＨＬＡ遺伝子座で対象に適合する。特定の実施態様では、例えば、成人の供給源由来のＨＴ細胞は、６／８、７／８、または８／８のＨＬＡ遺伝子座で対象に適合する。

いくつかの実施態様では、臍帯血は、早産の臍帯から調製する。他の実施態様では、臍帯血は、正期産の臍帯から調製する。ある実施態様では、臍帯血は、正期産の分娩後の哺乳動物の臍帯から得られる。他の実施態様では、臍帯血は、早産の分娩後の哺乳動物の臍帯から得られる。いくつかの実施態様では、臍帯は、妊娠約２３〜約２５週で出生した乳児の臍帯である。いくつかの実施態様では、臍帯は、妊娠約２６〜約２９週で出生した乳児の臍帯である。いくつかの実施態様では、臍帯は、妊娠約３０〜約３３週で出生した乳児の臍帯である。いくつかの実施態様では、臍帯は、妊娠約３４〜約３７週で出生した乳児の臍帯である。いくつかの実施態様では、臍帯は、妊娠約３７〜約４２週で出生した乳児の臍帯である。

臍帯血またはそれから得た細胞（例えば、全有核細胞またはそれに由来する幹細胞）は、投与のために、単一の個人から（すなわち、単一の単位として）収集してもよく、または他の単位と共にプールしてもよい。ある実施態様では、臍帯血またはそれから得た細胞（例えば、全有核細胞またはそれに由来する幹細胞）は、使用前に保管する。臍帯血を複数の臍帯からプールする場合、プールした臍帯血は、正期産のみに由来する臍帯血、正期産の組み合わせに由来する臍帯血、または早産のみに由来する臍帯血を含むことができる。例えば、未熟児の臍帯に由来する臍帯血は、例えば、他の未熟児に由来する臍帯血、正期産のみに由来する臍帯血、または早産の胎盤および正期産の胎盤の両方に由来する臍帯血の組み合わせと組み合わせることができる。自己の臍帯血または同種異系間の臍帯血を含めて、臍帯血は、末梢血と組み合わせることもできる。ある実施態様では、早産に由来する臍帯血を使用し、したがって、臍帯血は、正期産由来の臍帯血と比較して、単位体積当たり、比較的多数のＣＤ３４＋幹細胞を含む。ある実施態様では、１単位の臍帯血は、対象のキログラム体重当たり少なくとも約１．０×１０^６、１．５×１０^６、２．０×１０^６、１．５×１０^６、２．０×１０^６、２．５×１０^６、３．０×１０^６、３．５×１０^６、４．０×１０^６、４．５×１０^６、６．０×１０^６、６．５×１０^６、７．０×１０^６、７．５×１０^６、８．０×１０^６、８．５×１０^６、９．０×１０^６、９．５×１０^６、１．０×１０^７、１．５×１０^７、２．０×１０^７、２．５×１０^７、３．０×１０^７、３．５×１０^７、４．０×１０^７、４．５×１０^７、５．０×１０^７、５．５×１０^７、または６．０×１０^７個の前記臍帯血から得られる細胞、例えば、臍帯血由来の全有核細胞を投与するように十分な数の細胞を含有する。ある実施態様では、１単位の臍帯血またはそれから得た細胞を投与する。ある実施態様では、１単位未満を投与する。ある実施態様では、２単位以上を投与する、例えば、２つまたはそれ以上（例えば、２、３、４、５、６、またはそれ以上）の単位を投与する。

（６．実施例）
（６．１．実施例１：ヒト胎盤灌流液細胞組成物）
この実施例は、細胞型および関連表現型によるヒト胎盤灌流液の組成物の決定を示す。

ヒト胎盤灌流液（ＨＰＰ）は、上記のセクション５．２に記載したように得た。ドナー適合ＨＰＰおよびヒト臍帯血（ＨＵＣＢ）のバッグを３７℃で別々に解凍した後、等容量の解凍用培地ＩＭＤＭ（カタログ＃３０〜２００５、ＡＴＣＣ）＋２％ＦＢＳ（カタログ＃ＳＨ３００７０．０３、Ｈｙｃｌｏｎｅ）＋Ｐ／Ｓ（カタログ＃１５１４０〜１２２、Ｇｉｂｃｏ））で希釈した。希釈した細胞混合物を４００ｇで、１５ｍｌ円錐管を用いる場合には８分間、５０ｍｌ円錐管の場合には１０分間スピンした。細胞ペレットを１×１０^７／ｍｌでＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ（カタログ＃１００１０〜０２３、Ｇｉｂｃｏ）＋２％ＦＢＳ＋Ｐ／Ｓ）に再懸濁した。塩化アンモニウム対細胞の比率を９：１として塩化アンモニウム溶液（カタログ＃０７８５０、ＳｔｅｍＣｅｌｌ）を加えることで、ＲＢＣ（赤血球）を氷上で１０分間溶解した。ＲＢＣ溶解後、試料を４００ｇで５分間スピンした後、ＦＡＣＳ緩衝液で２回洗浄した。その後、細胞ペレットを１×１０^７個の細胞当たり１ｍｌでＣｙｔｏｆｉｘ／ｃｙｔｏｐｅｒｍ溶液（カタログ＃５５４７２２、ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に２０分間４℃で再懸濁した。試料をＦＡＣＳ緩衝液で２回洗浄した後、ＲＴ（室温）で暗がりで２０分間蛍光色素結合抗体で染色した。表現型パネルを表１および表２に記載する。抗体の情報を表３に記載する。データ収集のために、染色試料をＦＡＣＳ緩衝液で２回洗浄し、２００μｌのＦＡＣＳ緩衝液で再懸濁させた：製造者により提供された指示書に従って、ＦＡＣＳＡｒｉａ（ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）による９色パネル、ＦＡＣＳＣａｎｔｏＩＩ（ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）による６色パネル。ＦｌｏｗＪｏ（ＴｒｅｅＳｔａｒ）によってデータ分析を行った。統計分析にはペアードスチューデントＴ検定を用いた。

表１：９色表現型パネル

表２：６色表現型パネル

表３：表現型特徴付けに用いた抗体に関する情報。

ＨＰＰ由来の単核球を分析して、種々の単核細胞型の組成物を決定した。表４は、同定した細胞型を詳述する：

表４：ヒト胎盤灌流液の組成物

（６．２．実施例２：ヒト胎盤灌流液中の全有核細胞数）
この実施例は、ヒト胎盤灌流液および臍帯血単位の全有核細胞数の決定を示す。

４３対のドナー適合ＨＰＰおよびＨＵＣＢ単位を処理して、全有核細胞数を決定した。ＨＰＰの単一の単位に対する平均の全有核細胞数は、〜１．３５億個の細胞であった。ＨＵＣＢの単一の単位に対する平均の全有核細胞数は、〜６．６６億個の細胞であった（図１）。

（６．３．実施例３：ヒト胎盤灌流液中の前駆細胞集団）
この実施例は、ヒト胎盤灌流液および臍帯血中のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻およびＣＤ３４^＋ＣＤ４５^＋細胞の集団の決定を示す。

蛍光活性化細胞ソーティング（ＦＡＣＳ）を用いて、ヒト胎盤灌流液細胞の亜集団を決定した（図２Ａ）。ＣＤ３４^＋細胞の亜集団は、ＣＤ４５⁻であるため、ＩＳＨＡＧＥプロトコル（Ｂａｒｎｅｔｔら、１９９９，Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ．Ｈａｅｍ．２１：３０１−３０８）であるシーケンシャルゲーティング戦略（図２Ｂ）（これは、ＣＤ４５^＋細胞を最初にゲートする）を用いて計数から排除した。別のシーケンシャルゲーティング戦略を用いたプロトコルが確立されており、それによって、ヒト胎盤灌流液中のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻およびＣＤ３４^＋ＣＤ４５^＋細胞の双方を分析するために、ＣＤ３４^＋細胞のゲーティングを最初に行った（図２Ｃ）。このプロトコルを用いて、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞の別々の集団が、ヒト胎盤灌流液中で明らかとなった。

ＦＡＣＳによる細胞ソーティングは、以下のように行った：ドナー適合ＨＰＰおよびＨＵＣＢのバッグを３７０℃で別々に解凍した後、塩化アンモニウムによってＲＢＣ溶解した。その後、ＦＩＴＣ抗ヒトＣＤ３４（カタログ＃５５５８２１、ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＰＥ抗ヒトＣＤ４５（カタログ＃５５５４８３、ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で、試料をＲＴで暗がりにて１５分間染色した。ＦＡＣＳ緩衝液で２回洗浄後、試料を１×１０^７／ｍｌで再懸濁させ、製造者により提供されたプロトコルを用いて、ＦＡＣＳＡｒｉａ（ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）によってソーティングした。

ＦＡＣＳソーティングプロトコルを用いて、ヒト胎盤灌流液は、ドナー適合対中の臍帯血と比べてより大きな割合のＣＤ３４^＋細胞を含有することが確認された（図３Ａ〜３Ｂ）。ヒト胎盤灌流液細胞を用いたコロニー形成アッセイにより、ソーティングの後にＣＤ３４^＋ＣＤ４５^＋細胞およびＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞からの成長が実証された。

（６．４．実施例４：ヒト胎盤灌流液中のＣＤ３４^＋亜集団）
この実施例は、ヒト胎盤灌流液および臍帯血中のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋、ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋、およびＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ−４^＋細胞の集団の決定を示す。

セクション６．１に記載の表現型特徴付けプロトコルを用いて、ＨＰＰＣＤ３４^＋細胞は、ＨＵＣＢＣＤ３４^＋細胞よりもより高い割合のＣＤ３１^＋、ＫＤＲ^＋、およびＣＸＣＲ−４^＋細胞を含むことが確認された（図４）。これらの表現型は、血管芽細胞の集団を含むＨＰＰと一致している。

（６．５．実施例５：ヒト胎盤灌流液由来の細胞の機能評価）
この実施例は、臍帯血細胞と比べたヒト胎盤灌流液細胞の血管新生特性の決定を示す。図５に示すように、ヒト胎盤灌流液は、本明細書に記載のアッセイにおいて、臍帯血と比べてより高い血管新生（血管形成）活性を示した。

ＨＰＰ細胞は、上記のセクション５．５に従って得た。ＨＰＰ細胞（図５、上部の左側）を１０μｇ／ｍＬのＤｉｌ−ＡＣＬＤＬ（カタログ＃Ｌ３４８４、Ｌｉｆｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）で３７℃にて４時間インキュベートし、ＨＰＰ由来の内皮細胞によるリポタンパク質取り込みの蛍光写真（図５、上部の右側）をＡｘｉｏｖｅｒｔ２００Ｍ（Ｚｅｉｓｓ）によって撮影した。インビトロ機能的アッセイを行って、ヒト胎盤灌流液由来の細胞の血管新生特性を評価した。上記のセクション５．５に従って得たＨＰＰ細胞を、インビトロ血管新生アッセイキット（Ｃｈｅｍｉｃｏｎカタログ＃ＥＣＭ６２５）を用いて、９６ウェルプレート中で約１０^６細胞／ウェルでＥＣＭＡＴＲＩＸ（商標）上で１８〜２４時間培養した。ここで、細胞は、ＴＧＦ−ベータ、ＦＧＦ、プラスミノーゲン、ｔＰＡおよびマトリクスメタロプロテアーゼの存在下で培養する。ヒト胎盤灌流液細胞培養において微小血管形成が観察された（図５、下部の右側）。ＨＵＶＥＣ（ヒト臍帯静脈内皮細胞）は、陽性対照として用いた（図５、下部の左側）。臍帯血培養において有意な管形成は観察されなかった。

（６．６．実施例６：ヒト胎盤灌流液中の未分化前駆細胞集団）
この実施例は、ヒト胎盤灌流液および臍帯血中の種々のＣＤ３４^＋未分化前駆細胞の集団の決定を示す。

セクション６．１に記載の表現型特徴付けプロトコルを用いて、ヒト胎盤灌流液は、臍帯血と比べて実質的により大きな割合のネスチン^＋／ＣＤ３４^＋細胞を含むことが確認された（図６）。ネスチン^＋ＣＤ３４^＋細胞は、より未分化の神経前駆体であることが示唆される（Ｍｉｉら、Ｊ．ＣｅｌｌＢｉｏｌ．，２０１３）。

ヒト胎盤灌流液は、表５に示すように、臍帯血よりも著しく大量の未熟造血幹細胞集団（すなわち、ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻、ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻）を含有する。表２に同様に示すように、推定血管芽細胞集団（すなわち、ＣＤ３４^＋Ｃ３１^＋、ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋、およびＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋）は、臍帯血中よりもヒト胎盤灌流液中でより多い量で発見される。

表５：ヒト胎盤灌流液対臍帯血中の未分化前駆体

（６．７．実施例７：ヒト胎盤灌流液中のＴ細胞含有量）
この実施例は、ヒト胎盤灌流液および臍帯血中の種々のＴ細胞集団の決定を示す。

ＨＬＡクラスＩおよびクラスＩＩの全体的な評価、並びに広範な免疫表現型特徴付けを、９色Ｔ細胞ＦＡＣＳパネルを用いてヒト胎盤灌流液および臍帯血で行い、上記のセクション６．１と同様にＴ細胞亜集団であるＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ１２７、ＣＤ６９、ＣＤ３、ＣＣＲ７、ＨＬＡＤＲ、およびＣＤ４を示した。

表６に示すように、結果は、ヒト胎盤灌流液が臍帯血と比べて著しく低いＴ細胞含有量を含むことが示される。同様に、ヒト胎盤灌流液細胞は、ＨＬＡクラスＩおよびＨＬＡクラスＩＩの発現が低い（図７）。ＣＤ３、ＣＤ４、および／またはＣＤ８を発現する特異的Ｔ細胞集団の相対的比率も、ヒト胎盤灌流液および臍帯血中で決定した（図８）。ヒト胎盤灌流液のＴ細胞含有量は、例えば、同種不適合移植におけるヒト胎盤灌流液細胞の適合性を示している。

表６：ヒト胎盤灌流液および臍帯血中のＴ細胞集団。「高」および「低」は、特定の表現型マーカー発現強度を示す。

（６．８．実施例８：Ｔ細胞単離、機能評価、および拡張）
この実施例は、ヒト胎盤灌流液および臍帯血中のＴ_ｒｅｇ細胞の集団を無事に単離、評価、および拡張するために使用することができる方法を示す。同様の方法を用いて、ヒト胎盤灌流液細胞の他の集団または亜集団を単離、評価、および拡張してもよい。

ヒトＣＤ４^＋ＣＤ１２７^低ＣＤ２５^＋調節性Ｔ細胞（カタログ＃１５８６１、ＳｔｅｍＣｅｌｌ）の完全キットを用いて、ドナー適合ＨＰＰまたはＨＵＣＢ由来のＴ_ｒｅｇ細胞を別々に単離することができる。ドナー適合ＨＰＰまたはＨＵＣＢ由来の別々に単離されたＴ_ｒｅｇ細胞、ドナー適合ＨＰＰまたはＨＵＣＢ、またはＴ_ｒｅｇ細胞を有さないドナー適合ＨＰＰまたはＨＵＣＢは、インビトロビーズＴ細胞反応（ＢＴＲ）アッセイによって評価することができる。簡単に言えば、抗ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズで活性化された末梢血（ＰＢ）由来のＴ細胞は、上に列挙した試料で５日間共培養することができる。ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞の増殖の抑制は、ＦＡＣＳによって測定することができる。

２つビーズベースの拡張キットは、Ｔ_ｒｅｇ拡張キット（カタログ＃：１３０−０９５−３４５、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）およびＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）調節性ＣＤ４^＋ＣＤ２５^＋Ｔ細胞キット（カタログ＃１１３６３Ｄ、ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を用いて、ドナー適合ＨＰＰおよびＨＵＣＢ由来のＴ_ｒｅｇ細胞増殖を別々に評価することができる。臨床用途のための増殖したＴｒｅｇ細胞の効力の改善は、壊死因子レセプターファミリーメンバー：増強のためのＯＸ４０、４−１ＢＢを用いて達成してもよい（Ｈｉｐｐｅｎら、２００８）。

（均等物：）
本発明は、本明細書に記載の特定の実施態様によって範囲を制限されるものではない。実際に、本明細書に記載するものに加えて、本発明の種々の改変が、前述の説明から当業者には明らかになるであろう。そのような改変は、添付の特許請求の範囲に属することを意図する。

本明細書に引用した参照文献は全て、それぞれの個々の刊行物、特許または特許出願を特異的かつ個々に、その全体を全ての目的で参照により組み込まれることが示されたかのように、それらの全体が全ての目的で参照により本明細書に組み込まれている。

いずれの刊行物の引用も、本出願日前のその開示に関するものであり、これによって、本発明が、先行発明によるそのような刊行物に先行するものではないことを認めると解釈してはならない。

Claims

単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物であって、該ヒト胎盤灌流液が、少なくとも６×１０^５個のＣＤ３４^＋細胞を含む、前記組成物。
前記組成物が、２倍を超える数のＣＤ３４^＋細胞をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
前記組成物が、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋細胞をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
前記組成物が、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋細胞をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
前記組成物が、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋細胞を含む、請求項１に記載の組成物。
単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物であって、該ヒト胎盤灌流液が、少なくとも５×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞を含む、前記組成物。
前記組成物が、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞をさらに含む、請求項６に記載の組成物。
前記組成物が、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞をさらに含む、請求項６に記載の組成物。
前記組成物が、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞をさらに含む、請求項６に記載の組成物。
前記組成物が、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＤ４５⁻細胞を含む、請求項６に記載の組成物。
単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物であって、該ヒト胎盤灌流液が、少なくとも６×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞を含む、前記組成物。
前記組成物が、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞をさらに含む、請求項１１に記載の組成物。
前記組成物が、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞をさらに含む、請求項１１に記載の組成物。
前記組成物が、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞をさらに含む、請求項１１に記載の組成物。
前記組成物が、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＤ３１^＋細胞を含む、請求項１１に記載の組成物。
単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物であって、該ヒト胎盤灌流液が、少なくとも５×１０^５個のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞を含む、前記組成物。
前記組成物が、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞をさらに含む、請求項１６に記載の組成物。
前記組成物が、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞をさらに含む、請求項１６に記載の組成物。
前記組成物が、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞をさらに含む、請求項１６に記載の組成物。
前記組成物が、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＫＤＲ^＋細胞を含む、請求項１６に記載の組成物。
単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物であって、該ヒト胎盤灌流液が、少なくとも５×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞を含む、前記組成物。
前記組成物が、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞をさらに含む、請求項２１に記載の組成物。
前記組成物が、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞をさらに含む、請求項２１に記載の組成物。
前記組成物が、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞をさらに含む、請求項２１に記載の組成物。
前記組成物が、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＸＣＲ４^＋細胞を含む、請求項２１に記載の組成物。
単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物であって、該ヒト胎盤灌流液が、少なくとも６×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞を含む、前記組成物。
前記組成物が、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞をさらに含む、請求項２６に記載の組成物。
前記組成物が、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞をさらに含む、請求項２６に記載の組成物。
前記組成物が、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞をさらに含む、請求項２６に記載の組成物。
前記組成物が、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＤ３８⁻細胞を含む、請求項２６に記載の組成物。
単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物であって、該ヒト胎盤灌流液が、少なくとも７×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞を含む、前記組成物。
前記組成物が、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞をさらに含む、請求項３１に記載の組成物。
前記組成物が、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞をさらに含む、請求項３１に記載の組成物。
前記組成物が、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞をさらに含む、請求項３１に記載の組成物。
前記組成物が、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＤ１１７⁻細胞を含む、請求項３１に記載の組成物。
単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物であって、該ヒト胎盤灌流液が、少なくとも６×１０^５個のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞を含む、前記組成物。
前記組成物が、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞をさらに含む、請求項３６に記載の組成物。
前記組成物が、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞をさらに含む、請求項３６に記載の組成物。
前記組成物が、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞をさらに含む、請求項３６に記載の組成物。
前記組成物が、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ＣＤ１４０ａ^＋細胞を含む、請求項３６に記載の組成物。
単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物であって、該ヒト胎盤灌流液が、少なくとも３×１０^５個のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞を含む、前記組成物。
前記組成物が、２倍を超える数のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞をさらに含む、請求項４０に記載の組成物。
前記組成物が、１０倍を超える数のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞をさらに含む、請求項４０に記載の組成物。
前記組成物が、５０倍を超える数のＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞をさらに含む、請求項４０に記載の組成物。
前記組成物が、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３４^＋ネスチン^＋細胞である、請求項４０に記載の組成物。
単離されたヒト胎盤灌流液を含む組成物であって、該ヒト胎盤灌流液が、少なくとも３×１０^４個のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞を含む、前記組成物。
前記組成物が、２倍を超える数のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞をさらに含む、請求項４６に記載の組成物。
前記組成物が、１０倍を超える数のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞をさらに含む、請求項４６に記載の組成物。
前記組成物が、５０倍を超える数のＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞をさらに含む、請求項４６に記載の組成物。
前記組成物が、実質的に純粋なヒト胎盤灌流液ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻ＣＤ２５^高ＣＤ１２７^低細胞である、請求項４６に記載の組成物。
前記ヒト胎盤灌流液が、単一の胎盤の灌流から単離されたものである、請求項１〜５０のいずれか１項に記載の組成物。
対象において中枢神経系の損傷、疾患、または障害を治療する方法であって、請求項１〜５０のいずれか１項に記載の組成物および別の供給源からの造血細胞を該対象に投与することを含む、前記方法。
前記中枢神経系の損傷、疾患、または障害が、低酸素性虚血性脳症である、請求項５２に記載の方法。
対象においてサルコペニアを治療する方法であって、請求項１〜５０のいずれか１項に記載の組成物および別の供給源からの造血細胞を該対象に投与することを含む、前記方法。
対象においてキメリズムを誘発する方法であって、請求項１〜５０のいずれか１項に記載の組成物および別の供給源からの造血細胞を該対象に投与することを含む、前記方法。
対象における細胞生着の方法であって、請求項１〜５０のいずれか１項に記載の組成物および別の供給源からの造血細胞を該対象に投与することを含む、前記方法。
対象において移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の持続期間または重症度を低減させる方法であって、請求項１〜５０のいずれか１項に記載の組成物および別の供給源からの造血細胞を該対象に投与することを含む、前記方法。
対象において代謝障害を治療する方法であって、請求項１〜５０のいずれか１項に記載の組成物および別の供給源からの造血細胞を該対象に投与することを含む、前記方法。
対象において血液学的障害または血液学的悪性腫瘍を治療する方法であって、請求項１〜５０のいずれか１項に記載の組成物および別の供給源からの造血細胞を該対象に投与することを含む、前記方法。
（ａ）対象における中枢神経系の損傷、疾患、または障害の治療の方法であって、好ましくは、該中枢神経系の損傷、疾患、または障害が、低酸素性虚血性脳症である、前記方法；
（ｂ）対象においてキメリズムを誘発する方法；
（ｃ）細胞生着の方法；
（ｄ）対象において移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の持続期間または重症度を低減する方法；
（ｅ）対象において代謝障害を治療する方法；
（ｆ）対象において血液学的障害または血液学的悪性腫瘍を治療する方法；または
（ｇ）対象においてサルコペニアを治療する方法
で使用するための、請求項１〜５０のいずれか１項に記載の組成物。
前記組成物が、別の供給源からの造血細胞をさらに含む、請求項６０に記載の使用のための組成物。