JP2014530835A - Ｓ１ｐ受容体モジュレーターまたはｓ１ｐ受容体アゴニストのための投薬量レジメン - Google Patents

Abstract

本発明は、そのような処置を必要とする哺乳動物患者、好ましくはヒトにおける多発性硬化症を処置する方法であって、前記ヒトへと、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される投与レジメンに従い投与するステップを含む方法に関する。

Description

発明の分野
本発明は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストのための投薬量レジメン（dosage regimen）に関する。より詳細には、本発明は、例えば、多発性硬化症などの自己免疫疾患または自己免疫障害を患う患者を、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストで処置するための投薬量レジメンに関する。

発明の背景
Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストは、１つまたは複数のスフィンゴシン１リン酸受容体、例えば、Ｓ１Ｐ１〜Ｓ１Ｐ８に対して、アゴニストとしてシグナル伝達する化合物である。Ｓ１Ｐ受容体へのアゴニストの結合は、例えば、結果として細胞内におけるヘテロ三量体のＧタンパク質のＧα−ＧＴＰおよびＧβγ−ＧＴＰへの解離をもたらし、かつ／またはアゴニストにより占有された受容体のリン酸化、および／もしくは下流のシグナル伝達経路／キナーゼの活性化を増大させうる。

Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストは、哺乳動物、とりわけ、ヒトにおける多様な状態を処置するのに有用な治療用化合物である。例えば、ラット（皮膚、心臓、肝臓、小腸）モデル、イヌ（腎臓）モデル、およびサル（腎臓）モデルでは、移植片拒絶の防止におけるＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの有効性が裏付けられている。加えて、それらの免疫調節力のために、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストはまた、炎症性疾患および自己免疫疾患を処置するためにも有用である。ヒトでは、若齢成人における神経学的身体障害の主要な原因であり、中枢神経系の最も一般的な脱髄障害である、多発性硬化症の処置における化学名２−アミノ−２−［２−（４−オクチルフェニル）エチル］プロパン−１，３−ジオールを有するＳ１Ｐ受容体アゴニストであるＧｉｌｅｎｙａ（登録商標）（フィンゴリモド）の有効性が裏付けられている（Mehling Mら、「FTY720 Therapy Exerts Differential Effects on T Cell Subsets in Multiple Sclerosis」、Neurology、2008、71（16）: 1261〜7；およびKappos L、ら、「Oral Fingolimod (FTY720) for Relapsing Multiple Sclerosis」、New England Journal of Medicine、2006年9月14日、355（11）: 1124〜40）。

Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストは、治療用量において負の変時効果をもたらしうる、すなわち、例えば、Schmouder R.ら、「FTY720: Placebo-Controlled Study of the Effect on Cardiac Rate and Rhythm in Healthy Subjects」、J. Clin. Pharmacol.、2006、46; 895において記載される通り、それらは、心調律を低減しうる。１.２５ｍｇのＦＴＹ７２０の投与は、約８拍／分の心拍の低下を誘導しうる。この副作用の帰結として、心調律が許容されるレベルで維持されていることを点検するために、Ｓ１Ｐモジュレーター療法またはＳ１Ｐアゴニスト療法は、緊密な治療的監視下で開始することが必要な場合がある。これは、患者の入院を伴う可能性があり、このために、処置は、より高額で、かつ、複雑なものとなる。

薬物一般の場合と同様、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストである薬物に関しても、任意の既知の薬物の副作用のほか、任意の未知の副作用も最小化するために、薬物を患者へと最低有効量で投与することが必要とされている。このような薬物を施される特定の患者に対する有益性は、最低有効用量の決定が、薬物を施される個別の患者に特異的な特性に基づく場合に、その程度に応じて、すなわち、薬物を個別化投与レジメン（individualized dosing regimen）に従い投与する場合に実質的に増強される。

本発明は、自己免疫疾患、例えば、多発性硬化症を処置するためのＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの投与のための個別化投与レジメンに関する。

発明の要旨
本発明は、そのような処置を必要とする哺乳動物患者、好ましくはヒトにおける自己免疫疾患を処置する方法であって、患者へと、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストである化合物またはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグを、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される個別化投与レジメンに従い投与するステップを含む方法に関する。以下、この方法を「本発明の方法」と称する。

本発明のより特殊な実施形態は、自己免疫疾患が多発性硬化症である本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、必要な場合、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される毎日の投薬量（daily dosage）を、約０．５ｍｇ／日以上であり、かつ、約５．０ｍｇ／日以下となるように調整する本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、必要な場合、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される毎日の投薬量を、約０．２ｍｇ／日以上であり、かつ、約５．０ｍｇ／日以下となるように調整する本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、必要な場合、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される毎日の投薬量を、約０．２５ｍｇ／日以上であり、かつ、約５．０ｍｇ／日以下となるように調整する本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの毎日の投薬量を、患者の血中リンパ球カウントが血中リンパ球標的レベル（Blood Lymphocyte Target Level）を超える場合は増大させ、患者の血中リンパ球カウントが血中リンパ球標的レベルを下回る場合は減少させる本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの毎日の投薬量を、患者の血中リンパ球カウントが血中リンパ球標的レベルを超える場合は増大させ、患者の血中リンパ球カウントが血中リンパ球標的レベルを下回る場合は減少させ、血中リンパ球標的レベルが、０．２×１０^９（10e9）個／Ｌを超え、かつ、０．５×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントである本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの毎日の投薬量を、患者の血中リンパ球カウントが血中リンパ球標的レベルを超える場合は増大させ、患者の血中リンパ球カウントが血中リンパ球標的レベルを下回る場合は減少させ、血中リンパ球標的レベルが、０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、１．０×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントである本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、患者へと投与される維持投薬量（maintenance dosage）が、工程ステップ「ａ」〜「ｅ」からなる以下の工程：
（ａ）導入期（Introductory Period）に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグを、患者へと、約１．０ｍｇ／日〜約２．０ｍｇ／日の間の導入投薬量（Introductory Dosage）で投与するステップと、
（ｂ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントを、血中リンパ球標的レベルと比較するステップと、
（ｃ）（ｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルの範囲と同等であるかまたはこの範囲内にあれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、導入投薬量とほぼ同じ維持投薬量で投与するステップ、あるいは
（ｉｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、導入後期（Post-Introductory Period）に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入投薬量を約４０％〜約６０％の間で下回る量と（Ｂ）約０．５ｍｇ／日とで大きい方の量である導入後投薬量（Post-Introductory Dosage）で投与するステップ、あるいは
（ｉｉｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、導入後期に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入投薬量を約９０％〜約１１０％の間で超える量と（Ｂ）約５．０ｍｇ／日とで小さい方の量である導入後投薬量で投与するステップと、
（ｄ）導入後期の間に、患者に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグを、上記のステップ（ｃ）（ｉｉ）またはステップ（ｃ）（ｉｉｉ）に従い決定される導入後投薬量で投与した場合は、導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントを、血中リンパ球標的レベルと比較するステップと、
（ｅ）（ｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルの範囲と同等であるかまたはこの範囲内にあれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、患者へと、導入後投薬量とほぼ同じ維持投薬量で投与するステップ、あるいは
（ｉｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入後用量を約４０％〜約６０％の間で下回る量と（Ｂ）約０．５ｍｇ／日とで大きい方の量である維持投薬量で投与するステップ、あるいは
（ｉｉｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入後投薬量を約９０％〜約１１０％の間で超える量と（Ｂ）約５．０ｍｇ／日とで小さい方の量である維持投薬量で投与するステップと
により決定される本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、ステップ「ａ」〜「ｅ」を含む上記の本発明の方法であって、導入期が約１４日間であり、導入後期が約１４日間である方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、ステップ「ｂ」で言及される血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、ステップ（ｃ）（ｉｉ）に従い、導入後期の間に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、導入投薬量を約５０％下回る投薬量で投与する本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、ステップ「ｂ」で言及される血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、ステップ（ｃ）（ｉｉｉ）に従い、導入後期の間に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、導入投薬量を約１００％超える投薬量で投与する本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、導入投薬量が約１．０ｍｇ／日である本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、導入投薬量が、約１．０ｍｇ／日〜約２．０ｍｇ／日である本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、導入期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベル、すなわち、上記のステップ「ｃ」で比較される血中リンパ球標的レベルが、導入後期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベル、すなわち、上記のステップ「ｅ」で比較される血中リンパ球標的レベルと異なる本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、導入期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベル、すなわち、上記のステップ「ｃ」で比較される血中リンパ球標的レベルが、約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．５×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントであり、導入後期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベル、すなわち、上記のステップ「ｅ」で比較される血中リンパ球標的レベルが、約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約１．０×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントである本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、ステップ（ｃ）で用いられる血中リンパ球標的レベルおよびステップ（ｅ）で用いられる血中リンパ球標的レベルの各々が独立に、以下の範囲：
（Ａ）約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約１．０×１０^９個／Ｌ未満；
（Ｂ）約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．５×１０^９個／Ｌ未満；
（Ｃ）約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．７×１０^９個／Ｌ未満；
（Ｄ）約０．３×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．７×１０^９個／Ｌ未満；および
（Ｅ）約０．３×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約１．０×１０^９個／Ｌ未満
のうちの１つの範囲内にある本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、式ＩａまたはＩｂ

［式中、
Ａは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_５、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ_５）_２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ_５）_２、−Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ_５、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ_５）ＯＲ_５、および１Ｈ−テトラゾール−５−イルから選択され；各Ｒ_５は、水素およびＣ_１〜６アルキルから独立に選択され；
Ｗは、結合、Ｃ_１〜３アルキレン、Ｃ_２〜３アルケニレンから選択され；
Ｙは、Ｃ_６〜１０アリールおよびＣ_２〜９ヘテロアリール［式中、Ｙの任意のアリールまたはヘテロアリールは、場合によって、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６アルコキシ、ハロで置換されたＣ_１〜６アルキル、およびハロで置換されたＣ_１〜６アルコキシから選択される１つ〜３つの基で置換することができる］から選択され；
Ｚは、

［式中、Ｚの左側および右側の星印は、それぞれ、−Ｃ（Ｒ_３）（Ｒ_４）−と式ＩａまたはＩｂのＡとの間の結合点を示し；Ｒ_６は、水素およびＣ_１〜６アルキルから選択され；Ｊ_１およびＪ_２は、独立に、メチレンまたはＳ、Ｏ、およびＮＲ_５［式中、Ｒ_５は、水素およびＣ_１〜６アルキルから選択される］から選択されるヘテロ原子であり；Ｚの任意のアルキレンは、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１〜６アルキルから選択される１つ〜３つの基でさらに置換することができ；またはＲ_６はＹの炭素原子と結合して、５〜７員環を形成することができる］から選択され；
Ｒ_１は、Ｃ_６〜１０アリールおよびＣ_２〜９ヘテロアリール［式中、Ｒ_１の任意のアリールまたはヘテロアリールは、場合によって、Ｃ_６〜１０アリールＣ_０〜４アルキル、Ｃ_２〜９ヘテロアリールＣ_０〜４アルキル、Ｃ_３〜８シクロアルキルＣ_０〜４アルキル、Ｃ_３〜８ヘテロシクロアルキルＣ_０〜４アルキル、またはＣ_１〜６アルキルから選択される基で置換され；Ｒ_１の任意のアリール基、ヘテロアリール基、シクロアルキル基、またはヘテロシクロアルキル基は、場合によって、ハロ、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６アルコキシ、ハロで置換されたＣ_１〜６アルキル、およびハロで置換されたＣ_１〜６アルコキシから選択される１つ〜５つの基で置換することができ；Ｒ_１の任意のアルキル基は、場合によって、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−、−ＮＲ_５−および−Ｏ−［式中、Ｒ_５は、水素またはＣ_１〜６アルキルから選択される］から選択される原子または基で置きかえられたメチレンを有しうる］から選択され；
Ｒ_２は、水素、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_２〜６アルケニル、Ｃ_２〜６アルキニル、およびハロで置換されたＣ_１〜６アルキルから選択され；
Ｒ_３およびＲ_４は、水素、Ｃ_１〜６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１〜６アルコキシ、ハロで置換されたＣ_１〜６アルキル、およびハロで置換されたＣ_１〜６アルコキシから独立に選択される］
の化合物；ならびにＮ−オキシド誘導体、保護された誘導体、個別の異性体、およびそれらの異性体の混合物；ならびにこのような化合物の医薬として許容される塩、溶媒和物（例えば、水和物）、およびプロドラッグである、本発明の方法に関する。

上記の式ＩａおよびＩｂの化合物は、キラル中心を含有することが可能であり、したがって、異なるエナンチオマー形態およびジアステレオマー形態で存在しうる。個別の異性体は、最終生成物または中間体の調製時における光学的分解、光学的な選択反応、またはクロマトグラフィーによる分離など、知られた方法により得ることができる。上記の式ＩａおよびＩｂは、ラセミ混合物としての式Ｉの化合物の全ての光学異性体および全ての立体異性体と、このような化合物の個別のエナンチオマーおよびジアステレオマー、ならびにこれらの混合物としての式Ｉの化合物の全ての光学異性体および全ての立体異性体との両方を包含する。

上記の式ＩａおよびＩｂはまた、同位体で標識された化合物であって、１つまたは複数の原子を、原子量または質量数が天然で通常見出される原子量または質量数と異なる原子で置きかえるという事実を除き、式ＩａおよびＩｂで列挙された化合物と同一な化合物も包含する。本発明の化合物へと組み込みうる同位体の例には、それぞれ、^２Ｈ、^３Ｈ、^１３Ｃ、^１１Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１８Ｏ、^１７Ｏ、^３１Ｐ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、および^３６Ｃｌなど、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、および塩素の同位体が含まれる。

式ＩａおよびＩｂの化合物が、酸性部分または塩基性部分を有しうる限りにおいて、それらは、遊離酸形態または遊離塩基形態で存在することが可能であり、また、多様な無機酸および有機酸または無機塩基および有機塩基と共に多種多様な異なる塩を形成することも可能である。このような塩は、動物への投与について、医薬として許容されなければならないが、実際は、まず、遊離塩基または遊離酸を、医薬として許容されない塩としての反応混合物から単離し、次いで、それを、アルカリ性または酸性の試薬で処理することにより、遊離塩基または遊離酸へと転換し、その後、この遊離酸または遊離塩基を、医薬として許容される酸添加塩または塩基添加塩へと転換することがしばしば所望される。前述の基本化合物式ＩａおよびＩｂの医薬として許容される酸添加塩を調製するのに用いられる酸は、非毒性の酸添加塩、例えば、塩酸塩、臭化水素塩、ヨウ化水素塩、硝酸塩、硫酸塩、または重硫酸塩、リン酸塩またはリン酸、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩またはクエン酸、酒石酸塩または重酒石酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、ヘミフマル酸塩、グルコン酸塩、含糖酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩（例えば、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフト酸））など、医薬として許容されるアニオンを含有する塩を形成する酸である。前述の式ＩａおよびＩｂの基本化合物の医薬として許容される塩基添加塩を調製するのに用いられる塩基は、非毒性の酸添加塩、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、およびアルミニウムなどの金属の塩、トリエチルアミンなど、アミンを伴う塩、およびリシンなど、二塩基性アミノ酸を伴う塩を形成する塩基である。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸、またはその医薬として許容される塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグである、本発明の方法に関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸のヘミフマル酸塩である、本発明の方法に関する。

本発明はまた、そのような処置を必要とする哺乳動物患者、好ましくはヒトにおける多発性硬化症を処置するための、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグの毎日の投薬単位（daily units of medication）を含有するキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニスト、またはその医薬として許容される塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグの毎日の投薬量が、患者の血中リンパ球カウントに関して決定されるキットにも関する。

本発明のより特殊な実施形態は、上記で記載されたキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグの毎日の投薬量が、以下の方法：
（ａ）導入期に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグを、患者へと、約１．０ｍｇ／日〜約２．０ｍｇ／日の間の導入投薬量で投与するステップと、
（ｂ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントを、血中リンパ球標的レベルと比較するステップと、
（ｃ）（ｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルの範囲と同等であるかまたはこの範囲内にあれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、導入投薬量とほぼ同じ維持投薬量で投与するステップ、あるいは
（ｉｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、導入後期に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入投薬量を約４０％〜約６０％の間で下回る量と（Ｂ）約０．５ｍｇ／日とで大きい方の量である導入後投薬量で投与するステップ、あるいは
（ｉｉｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、導入後期に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入投薬量を約９０％〜約１１０％の間で超える量と（Ｂ）約５．０ｍｇ／日とで小さい方の量である導入後投薬量で投与するステップと、
（ｄ）導入後期の間に、患者に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグを、上記のステップ（ｃ）（ｉｉ）またはステップ（ｃ）（ｉｉｉ）に従い決定される導入後投薬量で投与した場合は、導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントを、血中リンパ球標的レベルと比較するステップと、
（ｅ）（ｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルの範囲と同等であるかまたはこの範囲内にあれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、患者へと、導入後投薬量とほぼ同じ維持投薬量で投与するステップ、あるいは
（ｉｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入後投薬量を約４０％〜約６０％の間で下回る量と（Ｂ）約０．５ｍｇ／日とで大きい方の量である維持投薬量で投与するステップ、あるいは
（ｉｉｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入後投薬量を約９０％〜約１１０％の間で超える量と（Ｂ）約５．０ｍｇ／日とで小さい方の量である維持投薬量で投与するステップと
を用いて決定された維持投薬量であるキットに関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、上記で記載されたキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸、またはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグであるキットである。

本発明の別のより特殊な実施形態は、上記で記載されたキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸のヘミフマル酸塩であるキットに関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、上記で記載されたキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグの毎日の投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」を用いて決定される維持投薬量であり、ステップ「ａ」、「ｂ」、および「ｃ」で言及される導入期が約１４日間であり、ステップ「ｃ」、「ｄ」、および「ｅ」で言及される導入後期が約１４日間であるキットに関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、上記で記載されたキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、ステップ「ｂ」で言及される血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、ステップ（ｃ）（ｉｉ）に従い、導入後期の間に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、導入投薬量を約５０％下回る投薬量で投与するキットに関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、上記で記載されたキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、ステップ「ｂ」で言及される血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、ステップ（ｃ）（ｉｉｉ）に従い、導入後期の間に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、導入投薬量を約１００％超える投薬量で投与するキットに関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、上記で記載されたキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、導入投薬量が約１．０ｍｇ／日であるキットに関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、上記で記載されたキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、導入期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベル、すなわち、上記のステップ「ｃ」で指定される血中リンパ球標的レベルが、導入後期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベル、すなわち、上記のステップ「ｅ」で指定される血中リンパ球標的レベルと異なるキットに関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、上記で記載されたキットであって、ステップ（ｃ）で用いられる血中リンパ球標的レベルおよびステップ（ｅ）で用いられる血中リンパ球標的レベルの各々が独立に、以下の範囲：
（Ａ）約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約１．０×１０^９個／Ｌ未満；
（Ｂ）約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．５×１０^９個／Ｌ未満；
（Ｃ）約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．７×１０^９個／Ｌ未満；
（Ｄ）約０．３×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．７×１０^９個／Ｌ未満；および
（Ｅ）約０．３×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約１．０×１０^９個／Ｌ未満
のうちの１つの範囲内にあるキットに関する。

本発明の別のより特殊な実施形態は、上記で記載されたキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」で記載される通りに決定され、導入期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベル、すなわち、上記のステップ「ｃ」で指定される血中リンパ球標的レベルが、０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、０．５×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントであり、導入後期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベル、すなわち、上記のステップ「ｅ」で指定される血中リンパ球標的レベルが、０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、１．０×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントであるキットに関する。

本発明はまた、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの、ヒト患者を含めた哺乳動物患者における自己免疫疾患を処置するための医薬（medication）の製造における使用であって、前記医薬を、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される投与レジメンに従い患者へと投与する使用にも関する。

本発明のより特殊な実施形態は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの、ヒト患者を含めた哺乳動物患者における自己免疫疾患を処置するための医薬の製造における使用であって、前記医薬を、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される投与レジメンに従い患者へと投与し、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸のヘミフマル酸塩であり、患者へと投与される維持投薬量が、上記のステップ「ａ」〜「ｅ」の工程を用いて決定される使用に関する。

特定のＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの使用に制限されない本発明の方法および本発明のより特殊な実施形態で用いうる他のＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストには、参照によりそれらの全体において本明細書に組み込まれる以下の参考文献：ＷＯ０４／１０３３０６、ＷＯ０５／０００８３３、およびＷＯ０５／１０３３０９で言及されるＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが含まれるがこれらに限定されない。

本発明の方法およびキットで用いられうる好ましいＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストには、例えば、それらのＳ１Ｐへの結合特性に加えてまた、リンパ球のホーミングを加速化させる特性（accelerating lymphocyte homing property）も有する化合物が含まれる。例えば、このような化合物は、循環から二次リンパ組織へとリンパ球が再分布することから生じるリンパ球減少症であって、全体的な免疫抑制を引き起こすことのない、好ましくは可逆性のリンパ球減少症を誘発しうる。ナイーブ細胞が隔離され、血液からのＣＤ４／ＣＤ８ Ｔ細胞およびＢ細胞がリンパ節（ＬＮ）およびパイエル板（ＰＰ）へと遊走するように刺激されることが適切である。

発明の詳細な説明（Detailed Description of the Invention）において、さらなる態様および実施形態を提示する。

発明の詳細な説明
本発明者らは、驚くべきことに、多発性硬化症を処置するためのＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストによる処置を必要とする患者の血中リンパ球カウントが、疾患の状態または進行、特に、ＭＲＩスキャンにおいて観察される病変の数と関連し、この関連を使用して、このような患者の処置の有益性と危険性の比（treatment benefit-risk ratio）を改善しうることを見出した。これらの薬物の投与レジメンを個別化することは、最低有効用量の使用により薬物の安全性プロファイルを改善しながら、患者間の処置に応答した個別のばらつき（individual variability）の低減をもたらす可能性が高い。

以下の定義では、本出願で用いられる場合の特定の用語の意味が定義される。

本明細書で用いられる「アルキル」という用語は、別段に示されない限り、直鎖部分、分枝部分、もしくは環状部分、またはこれらの組合せを有する一価の飽和炭化水素基を包含する。「アルキル」基の例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソ−ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、３−エチルブチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、ノルボルニルなどが含まれるがこれらに限定されない。

本明細書で用いられる「アルコキシ」という用語は、別段に示されない限り、「アルキル−Ｏ−」を意味し、この場合、「アルキル」は、上記で定義された通りである。「アルコキシ」基の例には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、およびペントキシが含まれるがこれらに限定されない。

本明細書で用いられる「アルケニル」という用語は、別段に示されない限り、２つの炭素原子を結合する１つまたは複数の二重結合を有する不飽和の炭化水素基であって、直鎖部分、分枝部分、もしくは環状部分、またはこれらの組合せを有しうる炭化水素基を包含する。「アルケニル」基の例には、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、およびジメチルペンチルが含まれるがこれらに限定されず、該当する場合には、Ｅ形態およびＺ形態を包含する。

本明細書で用いられる「アルキニル」という用語は、別段に示されない限り、２つの炭素原子を結合する１つまたは複数の三重結合を有する不飽和の炭化水素基であって、直鎖部分、分枝部分、もしくは環状部分、またはこれらの組合せを有しうる炭化水素基を包含する。「アルキニル」基の例には、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、およびジメチルペンチニルが含まれるがこれらに限定されない。

本明細書で用いられる「アリール」という用語は、別段に示されない限り、ヘテロ原子を伴わない芳香環系、例えば、非置換の場合もあり、ハロ、場合によって、１つ〜３つのフッ素原子で置換された（Ｃ_１〜Ｃ_４）アルキル、および、場合によって、１つ〜３つのフッ素原子で置換された（Ｃ_１〜Ｃ_４）アルコキシからなる群から選択される、１つ、２つ、または３つの置換基で置換される場合もある、フェニルまたはナフチルを包含する。

本明細書で用いられる「シクロアルキル」という用語は、環状の飽和炭化水素部分を意味する。

本明細書で用いられる「ヘテロアリール」という用語は、別段に示されない限り、５環員または６環員を含有する芳香族複素環であって、５環員または６環員のうちの１〜４環員がＮ、Ｓ、およびＯから独立に選択されるヘテロ原子であることが可能であり、非置換の場合もあり、ハロ、（Ｃ_１〜Ｃ_４）アルキル、および（Ｃ_１〜Ｃ_４）アルコキシ（場合によって、１つ〜３つのフッ素原子で置換されている）からなる群から独立に選択される置換基で一置換される場合もあり、二置換される場合もある芳香族複素環を包含する。

本明細書で用いられる「ヘテロシクロアルキル」という用語は、別段に示されない限り、シクロアルキル部分であって、炭素原子のうちの１つまたは複数が、Ｎ、Ｓ、およびＯから独立に選択されるヘテロ原子で置きかえられるシクロアルキル部分を意味する。

本明細書で用いられる「複素環式」という用語は、Ｓ、Ｏ、およびＮから選択される１つ〜３つのヘテロ原子を有する５〜７員の複素環基を意味する。このような複素環基の例には、上記で示したヘテロアリール基、および部分的または完全に水素化されたヘテロアリール基に対応する複素環化合物、例えば、フリル、チエニル、ピロリル、アゼピニル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、ピラニル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、テトラヒドロピラニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピロリジニル、ピロリル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、オキサゾリジニル、イソキサゾリジニル、チアゾリジニル、またはピラゾリジニルが含まれる。好ましい複素環基は、５または６員のヘテロアリール基であり、最も好ましい複素環基は、モルホリニル基、チオモルホリニル基、またはピペリジニル基である。

本明細書で用いられる「ハロ」および「ハロゲン」という用語は、別段に示されない限り、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを包含する。

本明細書で用いられる「メチレン」という用語は、−ＣＨ_２−を意味する。

本明細書で用いられる「アルキレン」という用語は、−（ＣＨ_２）_ｎ−［式中、ｎは、１以上である］を意味する。

本明細書で用いられる「アルケニレン」という用語は、少なくとも２つの炭素原子のアルキレン基であって、隣接する炭素原子の１つまたは複数の対が互いと二重結合し、別の炭素原子とは二重結合しないアルキレン基を意味する。

本明細書で用いられる「プロドラッグ」という用語は、不活性形態または著明に低活性の形態で患者へと投与される物質であって、ｉｎ ｖｉｖｏにおける代謝を介して活性形態または著明に高活性の形態へと転換される物質を意味する。プロドラッグには、対応する薬物の官能基の可逆性の誘導体である官能基を組み入れる。このようなプロドラッグは、加水分解により活性の薬物へと変換されることが典型的である。例は以下の通りである：

官能基 可逆性の誘導体
カルボン酸 例えば、アルキルエステルおよびアシロキシアルキルエステルを含めたエステル；アミド
アルコール 例えば、硫酸エステルおよびリン酸エステルのほか、カルボン酸（例えば、アルカン酸）エステルを含めたエステル
アミン アミド、カルバメート、イミン、エナミン
カルボニル（アルデヒド、ケトン） イミン、オキシム、アセタール／ケタール、エノールエステル、オキサゾリジンおよびチアゾキソリジン

プロドラッグにまた、酸化反応または還元反応により活性の薬物へと転換されうる化合物も含まれる。プロドラッグをそれらの対応する活性の薬物へと転換する、酸化による活性化反応の例は、Ｎ−脱アルキル化反応およびＯ−脱アルキル化反応、酸化による脱アミノ化反応、Ｎ−酸化反応、およびエポキシ化反応である。プロドラッグをそれらの対応する活性の薬物へと転換する、還元による活性化反応の例は、アゾ還元反応、ジスルフィド還元反応、生物学的還元によるアルキル化反応、およびニトロ還元反応である。プロドラッグの代謝による活性化としてはまた、ヌクレオチド活性化反応、リン酸化による活性化反応、および脱カルボキシル化による活性化反応も含まれる。さらなる情報については、参照により本明細書に組み込まれる、「The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action」、R B Silverman（特に、８章、４９７〜５４６頁）を参照されたい。

本明細書で用いられる「処置すること」という用語は、このような用語が適用される障害もしくは状態の進行を反転させること、緩和すること、阻害すること、または障害もしくは状態を防止すること、あるいはこのような状態または障害の１もしくは複数の症状を防止することを指す。本明細書で用いられる「処置」という用語は、「処置すること」が、直前で定義された通りの場合の、処置する行為を指す。

本明細書で用いられる「血中リンパ球標的レベル」という用語は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの所望される有効性と関連するものとして所望される血中リンパ球カウント、または血中リンパ球カウントの範囲を意味する。

本明細書で用いられる「導入期」という用語は、その全体にわたり、患者に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、導入投薬量で投与する期間であって、血中リンパ球レベルが安定化するための時間が経過した後の時点であり、患者の血中リンパ球カウントを、まず血中リンパ球標的レベルと比較して、投薬量の変化が正当化されるのかどうかを決定する時点で終わる期間を意味する。導入期を、患者へのＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの初期用量で開始する必要はない。例えば、患者へと施されるＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの初期用量は、極めて低用量、例えば、約０．２５ｍｇであることが可能であり、その後、場合によって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストと関連する、心拍数の低下を改善することを目的とする滴定レジメン（titration regimen）の一部としての毎日の投与で微増させる。このようなレジメンは、導入期を定義しない。本発明と関連する導入期の間に、患者に唯一の投薬量を投与し、この期間の間に、血中リンパ球レベルが安定化するための時間が経過する。

本明細書で用いられる「導入投薬量」という用語は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの初期投薬量であって、患者へと、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される個別化投与レジメンの一部として、すなわち、本発明の方法の一部として投与される初期投薬量を意味する。本発明の個別化投与法、すなわち、本発明の方法に従い、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの個別化投与を施されるように定められた患者には、患者に施す毎日の投薬量が、約１．０ｍｇ／日未満であるかまたは約２．０ｍｇ／日を超えるように、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、別の投与レジメンに従い、既に投与しておくことができる。このような患者には、導入投薬量が、患者にあらかじめ施しておいた投薬量を本発明の方法を開始するために調整した初期投薬量となるであろう。

本明細書で用いられる「導入後投薬量」という用語は、導入後期の間に、患者へと、本発明の個別化投与法の上記のステップ「ａ」〜「ｅ」に従い投与されるＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの投薬量を意味する。

本明細書で用いられる「導入後期」という用語は、導入期の後における患者への、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの最初の投与であって、用量の調整が推奨されるのかどうかを決定することを目的とした、患者の血中リンパ球カウントの、血中リンパ球標的レベルとの最初の比較に基づき決定された投薬量を用いる最初の投与で始まり、その後における、用量の調整が推奨されるのかどうかを決定することを目的とした、患者の血中リンパ球カウントの、血中リンパ球標的レベルとの最初の比較で終わる期間を意味する。

本明細書で用いられる「維持投薬量」という用語は、本発明の個別化投与法の上記のステップ「ａ」〜「ｅ」に従い、特定の患者のために維持すべき投薬量であることが決定される投薬量を意味する。上記のステップ「ａ」〜「ｅ」に従い、維持投薬量は、（Ａ）Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの投薬量であって、リンパ球カウントが安定化するのに十分な長期間の間に患者へと投与され、その後、患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルの範囲と同等であるかまたはその範囲内にあることが決定される投薬量；または（Ｂ）約０．５ｍｇ／日；または（Ｃ）約４．０ｍｇ／日のいずれかとなろう。維持投薬量とは、最低の治療有効投薬量、すなわち、意図される疾患または状態を効果的に（すなわち、対象が、処置もしくは防止される疾患の徴候もしくは症状の軽減を示すように、または、好ましくは、この疾患の徴候および症状を示さないように）処置するのに必要な、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの最低投薬量であることが好ましい。

本発明の目的のために有用な式ＩａおよびＩｂの特定の化合物の例には、

ならびにその医薬として許容される塩、溶媒和物、およびプロドラッグが含まれる。

本発明の方法およびキットで使用されうる、式ＩａおよびＩｂの化合物の他の例は、その内容が参照により本明細書に組み込まれる、ＷＯ２００４／１０３３０６の表１に示される実施例の化合物である。このような化合物は、この参考文献において記載される合成法を用いて調製することができる。

本発明の化合物の方法およびキットで使用されるＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはＳ１Ｐ受容体モジュレーターは、Ｓ１Ｐ_１受容体に選択的であってもよい。例えば、Ｓ１Ｐ_１受容体に対して保有する選択性（^３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイを用いて決定される、Ｓ１Ｐ_１受容体についてのＥＣ_５０の、Ｓ１Ｐ_３受容体についてのＥＣ_５０に対する比により測定される）が、Ｓ１Ｐ_３受容体に対する場合の少なくとも２０倍、例えば、１００、５００、１０００、または２０００倍の化合物であって、^３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイにより評価されるＳ１Ｐ１受容体に対する結合についてのＥＣ_５０が１００ｎＭ以下の化合物である。

^３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイは、ＷＯ０３／０９７０２８およびDS. Imら、Mol. Pharmacol.、2000、57: 753において記載されている。略述すると、一過性にトランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞に由来する２５μｇの膜調製物を用いて、リガンドを介する、ＧＴＰγＳの、Ｇタンパク質に対する結合を、ＧＴＰ結合緩衝液（ｍＭ単位で：５０のＨＥＰＥＳ、１００のＮａＣｌ、１０のＭｇＣｌ_２、ｐＨ７．５）中で測定する。１０μＭのＧＤＰおよび０．１ｎＭの［^３５Ｓ］ＧＴＰγＳ（１２００Ｃｉ／ミリモル）の存在下で、リガンドを膜へと添加し、３０℃で３０分間にわたりインキュベートする。Ｂｒａｎｄｅｌ ｈａｒｖｅｓｔｅｒ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）を用いて、結合したＧＴＰγＳを、結合しなかったＧＴＰγＳから分離し、液体シンチレーションカウンターでカウントした。

本発明の方法およびキットで使用されるＳ１Ｐ受容体モジュレーターおよびＳ１Ｐ受容体アゴニストは、経口経路、非経口経路（皮下経路、静脈内経路、筋内経路、胸骨内経路、および注入法など）、直腸内経路、鼻腔内経路、または局所経路を介して投与することができる。

本発明の方法およびキットで使用されるＳ１Ｐ受容体モジュレーターおよびＳ１Ｐ受容体アゴニストは、既に示された経路のうちのいずれかにより、単独で投与することもでき、医薬として許容される担体または希釈剤と組み合わせて投与することもでき、このような投与は、単回投与または複数回投与で実行することができる。これらは、多種多様な異なる剤形（dosage form）で投与することができる、すなわち、それらは、錠剤、カプセル、ドロップ、トローチ、ハードキャンディー、粉末、スプレー、クリーム、軟膏（salves）、坐剤、ゼリー、ゲル、ペースト、ローション、軟膏（ointments）、水性懸濁液、注射用溶液、エリキシル剤、シロップなどの形態にある、医薬として許容される多様な不活性の担体と組み合わせることができる。このような担体には、固体の希釈剤または充填剤、滅菌の水性媒体、および多様な非毒性の有機溶媒などが含まれる。さらに、経口の医薬組成物には、甘味および／または香味を加えることが適切でありうる。

ポリビニルピロリドン、スクロース、ゼラチン、およびアカシアなどの造粒結合剤を併せて伴う、微晶質セルロース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸二カルシウム、およびグリシンなど、多様な賦形剤を含有する、経口投与用の錠剤は、デンプン（好ましくは、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、またはタピオカデンプン）、アルギン酸および特定の錯体のケイ酸など、多様な崩壊剤と共に使用することができる。加えて、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、および滑石などの潤滑剤も、錠剤化の目的に極めて有用であることが多い。また、類似の種類の固体の組成物も、ゼラチンカプセル内の充填剤として使用することができる。この関係で好ましい材料にはまた、ラクトースまたは乳糖のほか、高分子量のポリエチレングリコールも含まれる。経口投与用に水性懸濁液および／またはエリキシル剤が所望される場合は、有効成分を多様な甘味剤または香味剤、着色物質または色素と組み合わせることができ、そのように所望される場合は、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、および多様なその類似の組合せなどの希釈剤を併せて伴う、乳化剤および／または懸濁化剤ともまた組み合わせることができる。

非経口投与用には、ゴマ油もしくはラッカセイ油または水性プロピレングリコール中の本発明の化合物の溶液を使用することができる。必要な場合は、水溶液を緩衝処理し（ｐＨが８を超えることが好ましい）、液体の希釈剤をまず等張性とすることが適切であるものとする。これらの水溶液は、静脈内注射の目的に適する。油性溶液は、関節内注射、筋内注射、および皮下注射の目的に適する。無菌条件下におけるこれらの溶液全ての調製は、当業者に周知の標準的な薬学的技法により容易に達成される。

Claims (34)

1. そのような処置を必要とする哺乳動物患者、好ましくはヒトにおける自己免疫疾患を処置する方法であって、患者へと、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストである化合物またはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグを、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される投与レジメンに従い投与するステップを含む、方法。
2. 自己免疫疾患が、多発性硬化症である、請求項１に記載の方法。
3. Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストの毎日の投薬量を、患者の血中リンパ球カウントが血中リンパ球標的レベルを超える場合は増大させ、患者の血中リンパ球カウントが血中リンパ球標的レベルを下回る場合は減少させる、請求項１に記載の方法。
4. 必要な場合、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される毎日の投薬量を、約０．５ｍｇ以上であり、かつ、約５．０ｍｇ以下となるように調整する、請求項３に記載の方法。
5. 必要な場合、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される毎日の投薬量を、約０．２ｍｇ以上であり、かつ、約５．０ｍｇ以下となるように調整する、請求項４に記載の方法。
6. 必要な場合、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される毎日の投薬量を、約０．２５ｍｇ以上であり、かつ、約５．０ｍｇ以下となるように調整する、請求項４に記載の方法。
7. （ａ）導入期に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグを、患者へと、約１．０ｍｇ／日〜約２．０ｍｇ／日の間の導入投薬量で投与するステップと、
   （ｂ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントを、血中リンパ球標的レベルと比較するステップと、
   （ｃ）（ｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルの範囲と同等であるかまたはこの範囲内にあれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、導入投薬量とほぼ同じ維持投薬量で投与するステップ、あるいは
   （ｉｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、導入後期に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入投薬量を約４０％〜約６０％の間で下回る量と（Ｂ）約０．５ｍｇ／日とで大きい方の量である導入後投薬量で投与するステップ、あるいは
   （ｉｉｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、導入後期に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入投薬量を約９０％〜約１１０％の間で超える量と（Ｂ）約５．０ｍｇ／日とで小さい方の量である導入後投薬量で投与するステップと、
   （ｄ）導入後期の間に、患者に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグを、上記のステップ（ｃ）（ｉｉ）またはステップ（ｃ）（ｉｉｉ）に従い決定される導入後投薬量で投与した場合は、導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントを、血中リンパ球標的レベルと比較するステップと、
   （ｅ）（ｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルの範囲と同等であるかまたはこの範囲内にあれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、患者へと、導入後投薬量とほぼ同じ維持投薬量で投与するステップ、あるいは
   （ｉｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入後投薬量を約４０％〜約６０％の間で下回る量と（Ｂ）約０．５ｍｇ／日とで大きい方の量である維持投薬量で投与するステップ、あるいは
   （ｉｉｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入後投薬量を約９０％〜約１１０％の間で超える量と（Ｂ）約５．０ｍｇ／日とで小さい方の量である維持投薬量で投与するステップと
   を含む、請求項３に記載の方法。
8. ステップ（ｃ）（ｉｉ）（Ｂ）および（ｅ）（ｉｉ）（Ｂ）に示される毎日の投薬量が、０．５ｍｇ／日ではなく、０．２ｍｇ／日である、請求項７に記載の方法。
9. ステップ（ｃ）（ｉｉ）（Ｂ）および（ｅ）（ｉｉ）（Ｂ）に示される毎日の投薬量が、０．５ｍｇ／日ではなく、０．２５ｍｇ／日である、請求項７に記載の方法。
10. 導入投薬量が約１．０ｍｇ／日である、請求項７、８、または９のいずれかに記載の方法。
11. 導入期が約１４日間である、請求項７、８、または９のいずれかに記載の方法。
12. 導入後期が約１４日間である、請求項７、８、または９のいずれかに記載の方法。
13. 血中リンパ球標的レベルが、約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．５×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントである、請求項４から１２のいずれかに記載の方法。
14. 血中リンパ球標的レベルが、約０．３×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．７×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントである、請求項４から１２のいずれかに記載の方法。
15. ステップ「ｂ」で言及される血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、ステップ（ｃ）（ｉｉ）に従い、導入後期の間に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、導入投薬量を約５０％下回る投薬量で投与する、請求項７から１２のいずれかに記載の方法。
16. ステップ「ｂ」で言及される血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、ステップ（ｃ）（ｉｉｉ）に従い、導入後期の間に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、導入投薬量を約１００％超える投薬量で投与する、請求項７から１２のいずれかに記載の方法。
17. 導入期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベルであって、ステップ「ｃ」で指定されるレベルが、導入後期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベルであって、ステップ「ｅ」で指定されるレベルと異なる、請求項７から１２のいずれかに記載の方法。
18. 導入期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベルであって、ステップ「ｃ」で指定されるレベルが、０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、０．５×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントであり、導入後期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベルであって、ステップ「ｅ」で指定されるレベルが、０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、１．０×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントである、請求項７から１２のいずれかに記載の方法。
19. Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、式ＩａまたはＩｂ
    

    

    ［式中、
    Ａは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_５、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ_５）_２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ_５）_２、−Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ_５、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ_５）ＯＲ_５、および１Ｈ−テトラゾール−５−イルから選択され；各Ｒ_５は、水素およびＣ_１〜６アルキルから独立に選択され；
    Ｗは、結合、Ｃ_１〜３アルキレン、Ｃ_２〜３アルケニレンから選択され；
    Ｙは、Ｃ_６〜１０アリールおよびＣ_２〜９ヘテロアリール［式中、Ｙの任意のアリールまたはヘテロアリールは、場合によって、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６アルコキシ、ハロで置換されたＣ_１〜６アルキル、およびハロで置換されたＣ_１〜６アルコキシから選択される１つ〜３つの基で置換することができる］から選択され；
    Ｚは、
    

    

    ［式中、Ｚの左側および右側の星印は、それぞれ、−Ｃ（Ｒ_３）（Ｒ_４）−と式ＩａまたはＩｂのＡとの間の結合点を示し；Ｒ_６は、水素およびＣ_１〜６アルキルから選択され；Ｊ_１およびＪ_２は、独立に、メチレンまたはＳ、Ｏ、およびＮＲ_５［式中、Ｒ_５は、水素およびＣ_１〜６アルキルから選択される］から選択されるヘテロ原子であり；Ｚの任意のアルキレンは、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１〜６アルキルから選択される１つ〜３つの基でさらに置換することができ；またはＲ_６はＹの炭素原子と結合して、５〜７員環を形成することができる］から選択され；
    Ｒ_１は、Ｃ_６〜１０アリールおよびＣ_２〜９ヘテロアリール［式中、Ｒ_１の任意のアリールまたはヘテロアリールは、場合によって、Ｃ_６〜１０アリールＣ_０〜４アルキル、Ｃ_２〜９ヘテロアリールＣ_０〜４アルキル、Ｃ_３〜８シクロアルキルＣ_０〜４アルキル、Ｃ_３〜８ヘテロシクロアルキルＣ_０〜４アルキル、またはＣ_１〜６アルキルから選択される基で置換され；Ｒ_１の任意のアリール基、ヘテロアリール基、シクロアルキル基、またはヘテロシクロアルキル基は、場合によって、ハロ、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６アルコキシ、ハロで置換されたＣ_１〜６アルキル、およびハロで置換されたＣ_１〜６アルコキシから選択される１つ〜５つの基で置換することができ；Ｒ_１の任意のアルキル基は、場合によって、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−、−ＮＲ_５−および−Ｏ−［式中、Ｒ_５は、水素またはＣ_１〜６アルキルから選択される］から選択される原子または基で置きかえられたメチレンを有しうる］から選択され；
    Ｒ_２は、水素、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_２〜６アルケニル、Ｃ_２〜６アルキニル、およびハロで置換されたＣ_１〜６アルキルから選択され；
    Ｒ_３およびＲ_４は、水素、Ｃ_１〜６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１〜６アルコキシ、ハロで置換されたＣ_１〜６アルキル、およびハロで置換されたＣ_１〜６アルコキシから独立に選択される］
    の化合物；ならびにＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護された誘導体、個別の異性体、およびそれらの異性体の混合物；ならびにこのような化合物の医薬として許容される塩および溶媒和物である、請求項１から１８のいずれかに記載の方法。
20. Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸、またはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグである、請求項１から１９のいずれかに記載の方法。
21. Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸のヘミフマル酸塩である、請求項１から２０のいずれかに記載の方法。
22. そのような処置を必要とする哺乳動物患者、好ましくはヒトにおける多発性硬化症を処置するための、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグの毎日の投薬単位を含有するキットであって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニスト、またはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグの毎日の投薬量の投薬量が、患者の血中リンパ球カウントに関して決定される、キット。
23. Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグの毎日の投薬量が、以下の方法：
    （ａ）導入期に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグを、患者へと、約１．０ｍｇ／日〜約２．０ｍｇ／日の間の導入投薬量で投与するステップと、
    （ｂ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントを、血中リンパ球標的レベルと比較するステップと、
    （ｃ）（ｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルの範囲と同等であるかまたはこの範囲内にあれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、導入投薬量とほぼ同じ維持投薬量で投与するステップ、あるいは
    （ｉｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、導入後期に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入投薬量を約４０％〜約６０％の間で下回る量と（Ｂ）約０．５ｍｇ／日とで大きい方の量である導入後投薬量で投与するステップ、あるいは
    （ｉｉｉ）導入期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、導入後期に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（ｉ）導入投薬量を約９０％〜約１１０％の間で超える量と（ｉｉ）約５．０ｍｇ／日とで小さい方の量である導入後投薬量で投与するステップと、
    （ｄ）導入後期の間に、患者に、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターもしくはＳ１Ｐ受容体アゴニストまたはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグを、上記のステップ（ｃ）（ｉｉ）またはステップ（ｃ）（ｉｉｉ）に従い決定される導入後投薬量で投与した場合は、導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントを、血中リンパ球標的レベルと比較するステップと、
    （ｅ）（ｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルの範囲と同等であるかまたはこの範囲内にあれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、患者へと、導入後投薬量とほぼ同じ維持投薬量で投与するステップ、あるいは
    （ｉｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを下回れば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入後投薬量を約４０％〜約６０％の間で下回る量と（Ｂ）約０．５ｍｇ／日とで大きい方の量である維持投薬量で投与するステップ、あるいは
    （ｉｉｉ）導入後期の終了時に決定される患者の血中リンパ球カウントが、血中リンパ球標的レベルを超えれば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストを、対象へと、（Ａ）導入後投薬量を約９０％〜約１１０％の間で超える量と（Ｂ）約５．０ｍｇ／日とで小さい方の量である維持投薬量で投与するステップと
    を用いて決定された維持投薬量である、請求項２２に記載のキット。
24. Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸、またはその医薬として許容される塩もしくはプロドラッグである、請求項２２または２３に記載のキット。
25. Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターまたはＳ１Ｐ受容体アゴニストが、１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸のヘミフマル酸塩である、請求項２２、２３、または３４に記載のキット。
26. 導入期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベルであって、ステップ「ｃ」で指定されるレベルが、０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、０．５×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントであり、導入後期の終了時に患者の血中リンパ球カウントが比較される血中リンパ球標的レベルであって、ステップ「ｅ」で指定されるレベルが、０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、１．０×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントである、請求項２２から２５のいずれかに記載のキット。
27. 導入投薬量が約２．０ｍｇ／日である、請求項７から９または請求項１１から２１のいずれかに記載の方法。
28. 導入期が約７日間である、請求項７から９または１３から２１のいずれかに記載の方法。
29. 導入後期が約７日間である、請求項７から９または１３から２１のいずれかに記載の方法。
30. 導入期および導入後期の長さが独立に、約７〜約１４日間である、請求項７から９または１３から２１のいずれかに記載の方法。
31. 血中リンパ球標的レベルが、約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約１．０×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントである、請求項４から１２のいずれかに記載の方法。
32. 血中リンパ球標的レベルが、約０．３×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約１．０×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントである、請求項４から１２のいずれかに記載の方法。
33. 血中リンパ球標的レベルが、約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．７×１０^９個／Ｌ未満の血中リンパ球カウントである、請求項４から１２のいずれかに記載の方法。
34. ステップ（ｃ）で用いられる血中リンパ球標的レベルおよびステップ（ｅ）で用いられる血中リンパ球標的レベルが独立に、以下の範囲：
    （Ａ）約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約１．０×１０^９個／Ｌ未満；
    （Ｂ）約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．５×１０^９個／Ｌ未満；
    （Ｃ）約０．２×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．７×１０^９個／Ｌ未満；
    （Ｄ）約０．３×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約０．７×１０^９個／Ｌ未満；および
    （Ｅ）約０．３×１０^９個／Ｌを超え、かつ、約１．０×１０^９個／Ｌ未満
    のうちの１つの範囲内にある、請求項７に記載の方法。