JP2013209333A

JP2013209333A - 白血球及び異常プリオン除去フィルター、並びにこれを用いた白血球及び異常プリオンの除去方法

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Publication number: JP2013209333A
Application number: JP2012081795A
Authority: JP
Inventors: Tomohisa Yokomizo; 朋久横溝; Takako Kai; 多佳子甲斐; Morikazu Miura; 司和三浦
Original assignee: Asahi Kasei Medical Co Ltd
Current assignee: Asahi Kasei Medical Co Ltd
Priority date: 2012-03-30
Filing date: 2012-03-30
Publication date: 2013-10-10

Abstract

【課題】血液製剤から白血球を効率よく除去できると共に、異常プリオンをも同時に除去でき、かつ濾過保存後の血液製剤品質を維持できる白血球及び異常プリオンの除去方法を提供すること。
【解決手段】塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー由来のユニットと、疎水性重合性モノマー由来のユニットと、プロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマー由来のユニットと、から構成され、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー由来のユニットのモル分率が３モル％以上５モル％以下であり、かつプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマー由来のユニットに対する疎水性重合性モノマー由来のユニットのモル比が０．５２〜０．６７であるポリマーからなり、白血球及び異常プリオンを吸着する、コート剤。
【選択図】なし

Description

本発明は、白血球及び異常プリオン除去フィルター、並びにこれを用いた白血球及び異常プリオンの除去方法に関する。より具体的には、血液製剤から凝集物、白血球及び異常プリオン等の好ましくない成分を除去でき、濾過保存後製剤の品質を維持できる除去フィルター等に関する。

現在、輸血分野においては、血液製剤中に含まれる混入白血球を除去して輸血する、いわゆる白血球除去輸血が広く行われている。これは、輸血に伴う頭痛、吐気、悪寒、非溶血性発熱反応等の副作用や、受血者により深刻な影響を及ぼすアロ抗原感作、輸血後移植片対宿主疾患（ＧＶＨＤ）、ウイルス感染等の重篤な副作用が、主として輸血に用いられた血液製剤中に混入している白血球が原因となって引き起こされることが明らかになったためである。血液製剤から白血球を除去する方法では白血球除去能力が高いことと、操作が簡便であること、コストが低いことなどの理由によりフィルター法が広く用いられている。フィルター法、即ち、白血球除去フィルターによる血液製剤などの処理は、近年では白血球除去血液製剤の品質管理を徹底するために、保存前に血液センターにおいて濾過が行われることが一般的になりつつある。通常、血液センターで白血球除去フィルターを使用して血液を濾過する際は、濾過されるべき血液製剤が入った血液バッグを、濾過後の血液製剤を回収するバックよりも７０ｃｍから１５０ｃｍ高い位置に置き、重力の作用によって血液製剤を濾過することが一般的に行われている。
そして、前述の重篤な副作用を防止するため保存後の血液製剤品質を維持し、かつ白血球除去能力に優れた白血球除去フィルターが望まれている。

一方、最近では、英国を中心に発生した変異型ＣＪＤが、ＢＳＥに感染したウシからの牛肉消費の結果であると指摘された（非特許文献１〜３）。変異型ＣＪＤはウシからヒトへの牛肉消費による伝播に加えて、血液製剤の輸血や組織の移植片に存在する変異型のプリオンタンパク質の伝播によりヒトからヒトへ感染が伝播する危険性が示唆されてきた。この状況の中で２００４年に献血後変異型ＣＪＤを発症したドナーの血液を輸血されたレシピエントが変異型ＣＪＤに感染した２例の症例が報告され、２００６年には３例目の症例が報告されたことから輸血による変異型ＣＪＤの伝播の可能性が高まってきている。また、変異型ＣＪＤをまだ発症はしていないが感染しているヒトがかなりの数存在しており、これらのヒトからの血液製剤により感染が拡大する可能性も指摘されている。したがって、血液製剤から異常プリオンを除去する方法が必要とされる。

伝播性海綿状脳症（ＴＳＥ）、又はプリオン病は、ヒト及び他の哺乳動物種において致死的な神経変性疾患を惹起する。特にヒツジにおけるスクレイピー（ｓｃｒａｐｉｅ）、ウシにおけるＢＳＥが広く知られている。ヒトの疾患の形態は、孤発性クロイツフェルト・ヤコブ病（ｓＣＪＤ）、医原性のクロイツフェルト・ヤコブ病、Ｇｅｒｓｔｍａｎｎ−Ｓｔｒａｅｕｓｓｌｅｒ−Ｓｃｈｅｉｎｋｅｒ（ＧＳＳ）症候群、致死的な家族性イソムニア（ｉｓｏｍｎｉａ）（ＦＦＩ）及びクールー（Ｋｕｒｕ）も含まれる。プリオン病は天然に存在する正常プリオンが構造変化を起こし、変異型の異常プリオン（プリオン病の原因物質となっている変異型のプリオンタンパク質）に変換し、ヒト及び他の哺乳動物に感染すると考えられている。変異型のプリオンタンパク質は正常型のプリオンタンパク質に比べ、βシートに富む構造をとるため、疎水性が高く、多量体を形成しやすく、またプロテアーゼＫに耐性であるという特徴を持つ。

血液製剤から白血球等を除去する方法として、例えば、特許文献１には疎水性重合性モノマー由来のユニットと塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー由来のユニットとプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマー由来のユニットから構成される白血球除去フィルター素材コート用ポリマーが開示されている。また、特許文献２には疎水性重合性モノマー由来のユニットと塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー由来のユニットとプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマー由来のユニットである３つのユニットから構成されてなるポリマーをコートした担体を充填したフィルターで血液製剤をろ過し、血液製剤を回収することを特徴とする血液製剤から異常プリオンと白血球を同時に除去する方法が開示されている。

国際公開第０３／０１１９２４号国際公開第０８／００７４６５号

Ｇ．Ｃｈａｚｏｔ，ｅｔａｌ．，（１９９６）Ｌａｎｃｅｔ３４７：１１８１Ｒ．Ｇ．Ｗｉｌｌ，ｅｔａｌ．，（１９９６）Ｌａｎｃｅｔ３４７：９２１−２５Ｇｕｉｄｅｔｏｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｕｓｅａｎｄｑｕａｌｉｔｙａｓｓｕｒａｎｃｅｏｆｂｌｏｏｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ９ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ／ＣｏｕｎｃｉｌｏｆＥｕｒｏｐｅＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇ

血液製剤から白血球等を除去する方法においては、血液センターにおける操作性、コスト、血液の損失量等が従来技術と同等以上かつ、保存後も血液製剤の品質が維持されていることが好ましい。さらには、血液製剤の安全性確保のため、異常プリオンを同時に除去できることが好ましい。

特許文献１には、特許文献１に記載のポリマーは白血球除去能力が高い素材として記載されているが、異常プリオンの除去と保存後製剤品質についてはなんら記載も示唆もない。特許文献２には、特許文献２に記載の方法は血液製剤の流れ性が良好で溶血の少ない高品質の血液製剤が得られると記載されている。しかしながら、特許文献２では濾過後製剤の保存後製剤品質に関して溶血のみを評価しており、製剤中での微粒子発生については記載も示唆もない。

本発明は、血液製剤から白血球を効率よく除去できると共に、異常プリオンをも同時に除去でき、かつ濾過保存後の血液製剤品質を維持できる白血球及び異常プリオンの除去方法を提供することを課題とする。

本発明者らは、疎水性重合性モノマー、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー、又はプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーそれぞれ単独からなるポリマーではなく、これらの３元共重合ポリマーをコーティングしたフィルターを用いて鋭意研究を重ねた結果、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーを所定量含み、疎水性重合性モノマーとプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーとの比が所定の範囲にあるとき、血液製剤から白血球を高い効率で除去でき、保存後の血液製剤品質を維持できること、白血球と同時に異常プリオンを除去できること、さらにはフィルターのプライミング不良による性能不良を防ぐことができることを見出し、本発明を得るに至った。

すなわち本発明は以下に関するものである。
［１］除去フィルターに血液製剤を通液する工程を備える、血液製剤中の白血球及び異常プリオンの除去方法であって、
前記除去フィルターが、血液の入口及び出口を有する容器と、該容器に充填された担体とを備え、
前記担体が、基材と、該基材の表面に固着したコート剤とを有し、
前記コート剤が、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー由来のユニットと、疎水性重合性モノマー由来のユニットと、プロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマー由来のユニットと、から構成され、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー由来のユニットのモル分率が３モル％以上５モル％以下であり、かつプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマー由来のユニットに対する疎水性重合性モノマー由来のユニットのモル比が０．５２〜０．６７であるポリマーからなる、除去方法。
［２］濾過後４２日保存後の血液製剤中の微粒子発生個数が２００個以下である、［１］に記載の除去方法。
［３］血液製剤を濾過したときの、
白血球除去性能が４Ｌｏｇ以上であり、異常プリオン除去性能が３Ｌｏｇ以上であり、かつ濾過後血液製剤中の微粒子発生個数が２００個以下である、［１］又は［２］に記載の除去方法。
［４］前記ポリマーがビニル系ポリマーである、［１］〜［３］のいずれかに記載の除去方法。
［５］前記疎水性重合性モノマー、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー及びプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーが、いずれもアクリル酸誘導体又はメタアクリル酸誘導体である、［１］〜［４］のいずれかに記載の除去方法。
［６］前記塩基性含窒素部分が３級アミノ基である、［１］〜［５］のいずれかに記載の除去方法。
［７］前記プロトン性中性親水性部分が水酸基である、［１］〜［６］のいずれかに記載の除去方法。
［８］前記基材が繊維状媒体であり、
前記担体の前記容器への充填密度が０．１ｇ／ｃｍ^３以上０．５ｇ／ｃｍ^３以下である、［１］〜［７］のいずれかに記載の除去方法。
［９］前記基材が繊維状媒体又はスポンジ状構造物である、［１］〜［８］のいずれかに記載の除去方法。
［１０］基材の比表面積が１．０ｍ^２／ｇ以上５．０ｍ^２／ｇ以下である、［１］〜［９］のいずれかに記載の除去方法。
［１１］基材の平均孔径が１μｍ以上６０μｍ以下である、［１］〜［１０］のいずれか記載の除去方法。
［１２］基材の空隙率が６５％以上９０％以下である、［１］〜［１１］のいずれかに記載の除去方法。
［１３］前記基材が不織布である、［１］〜［１２］のいずれかに記載の除去方法。
［１４］前記不織布の平均繊維径が０．３μｍ以上３．０μｍ以下である、［１］〜［１３］のいずれかに記載の除去方法。
［１５］［１］〜［１４］のいずれかに記載の除去方法に用いられる白血球及び異常プリオンの除去フィルター。
［１６］［１］〜［１４］のいずれかに記載の除去方法に用いられる担体。
［１７］［１］〜［１４］のいずれかに記載の除去方法に用いられる白血球及び異常プリオンを吸着するコート剤。

本発明により、血液製剤から白血球を高い効率で除去でき、かつ保存後の血液製剤品質を維持することができるようになった。さらには、異常プリオンをも同時に除去した血液製剤を得られるようになった。

一実施形態に係る血液製剤の濾過システムを示す模式図である。

〔コート剤〕
本発明の白血球及び異常プリオンを吸着するコート剤は、所定のポリマーからなる。該ポリマーは、疎水性重合性モノマー（本明細書において「疎水性モノマー」ともいう。）由来のユニットと塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー（本明細書において「塩基性モノマー」ともいう。）由来のユニットとプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマー本明細書において「親水性モノマー」ともいう。）由来のユニットと、から構成される。

本明細書において「ユニット」とは、それぞれの重合性モノマー由来の繰り返し最小単位を意味する。ユニットについて例示する。重合性モノマーが、ＣＨ_２＝ＣＸＹ（Ｘ：Ｈ又はＨ以外の置換基、Ｙ：Ｘ以外の置換基）で表されるビニル化合物であり、二重結合が単に開いて付加重合する場合、ユニットは繰り返し最小単位となる−（ＣＨ_２−ＣＸＹ）−である。重合性モノマーが、Ａ−（Ｒ）−Ｂ（Ｒ：重合により脱離しない部分、Ａ及びＢ：重合により脱離する部分）であり、重縮合する場合、ユニットはＡＢが脱離して重合する際の繰り返し最小単位となる−（Ｒ）−である。

疎水性重合性モノマーとは、水に対する親和性が極めて低い重合性モノマーであり、且つ分子内に塩基性含窒素部分もプロトン性中性親水性部分も含まないモノマーのことである。

疎水性重合性モノマーとして、具体的には入手のし易さ、取り扱いの点から、スチレン、メチルスチレン、メチルアクリレート、メチルメタアクリレート、エチルアクリレート、エチルメタクリレート、ブチルアクリレート、ブチルメタアクリレート、フェニルアクリレート、フェニルメタアクリレート、エチルヘキシルアクリレート、エチルヘキシルメタアクリレート、トリクロロエチルアクリレート、トリクロロエチルメタアクリレート、などのアクリレート又はメタアクリレート、ペンテン、ヘキセン、ヘプテン、オクテンなどのアルケン類、シリコーン・シロキサンなどの有機ケイ素化合物、エチレンの水素原子が１個以上フッ素原子と置き換えられた有機フッ素重合性モノマーなどを例示することができるが、疎水性重合性モノマーはこれらに限定されるものではない。その中でもモノマーの入手が容易であること、取り扱いやすい等の理由により、付加重合（ビニル重合）することでビニル系ポリマーが得られる重合性部分がビニル基であるモノマーが好ましい。中でも、疎水性重合性モノマーとしてアクリル酸誘導体又はメタアクリル酸誘導体がより好ましい。疎水性重合性モノマーとしてアクリレート又はメタクリレートが最も好ましい。

塩基性含窒素官能基を有する材料は、生理的液体中で材料表面が正電荷を有するようになり、負電荷を有する白血球を粘着させることができる。また、異常プリオンの除去性能を向上させる効果も示す。塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーとは、以下に述べる塩基性含窒素部分を有する重合性のモノマーをいう。

塩基性含窒素部分としては、第１級アミノ基、第２級アミノ基、第３級アミノ基及び第４級アミノ基、並びにピリジル基及びイミダゾイル基などの含窒素芳香族基などの官能基を例示することができる。塩基性含窒素部分としては、特に３級アミノ基が好ましい。

塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーとして、具体的には入手のし易さ、取り扱い性の点から、ビニルアミン、２−ビニルピリジン、４−ビニルピリジン、２−メチル−５−ビニルピリジン、４−ビニルイミダゾール、Ｎ−ビニル−２−エチルイミダゾール、Ｎ−ビニル−２−メチルイミダゾール等の含窒素芳香族環化合物のビニル誘導体、ジメチルアミノエチルアクリレート、ジメチルアミノエチルメタアクリレート、ジエチルアミノエチルアクリレート、ジエチルアミノエチルメタアクリレート、３−ジメチルアミノ−２−ヒドロキシプロピルアクリレート、３−ジメチルアミノ−２−ヒドロキシプロピルメタアクリレート等のアクリレート及びメタアクリレート、Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノエチルアクリル酸アミド、Ｎ−ジメチルアミノエチルメタアクリル酸アミド、Ｎ、Ｎ−ジエチルアミノエチルアクリル酸アミド、Ｎ、Ｎ−ジエチルアミノエチルメタアクリル酸アミド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノプロピルアクリル酸アミド等のアクリル酸アミド及びメタアクリル酸アミド誘導体、ｐ−ジメチルアミノメチルスチレン、ｐ−ジエチルアミノエチルスチレン等のスチレン誘導体、及び上記重合性モノマーをハロゲン化アルキル基によって４級アンモニウム塩とした誘導体などが挙げられるが、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーはっこれらに限定されるものではない。その中でモノマーの入手が容易であること、取り扱いやすい等の理由により、付加重合（ビニル重合）することでビニル系ポリマーが得られる重合性部分がビニル基であるモノマーが好ましい。塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーとしてはアクリル酸誘導体又はメタアクリル酸誘導体が好ましい。塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーとしてより好ましくはアクリレート又はメタアクリレートがより好ましい。その中でも特にジメチルアミノエチルアクリレート、ジメチルアミノエチルメタアクリレート、ジエチルアミノエチルアクリレート、ジエチルアミノエチルメタアクリレートが好ましい。

プロトン性中性親水性部分を有する重合性モノマーとは、非重合性部分が解離してプロトン（Ｈ^＋）を放出し得るものであり、カルボン酸又は塩基性アミノ基のような極端な酸性、塩基性を示さない重合性モノマーのことである。プロトン性中性親水性部分を有する重合性モノマーは、非プロトン性中性親水性部分を有する重合性モノマーに比べて高い親水性を示し、血液のプライミング性、血液のチャネリング防止特性に優れる。プロトン性中性親水性部分としては、水酸基、α位にプロトンが存在するアルデヒド基やα位にプロトンが存在するアミド基、１、３−ジカルボニル基等が挙げられる。プロトン性中性親水性部分としては、特に水酸基が好ましい。プロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーとして２−ヒドロキシエチルメタアクリレート、ヒドロキシプロピルメタクリレート、アクリルアミド、メタアクリルアミドなどが挙げられるが、プロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーはこれらに限定されるものではない。その中でモノマーの入手が容易であること、取り扱いやすい等の理由により、付加重合（ビニル重合）することでビニル系ポリマーが得られる重合性部分がビニル基であるモノマーが好ましい。中でも、プロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーとしてアクリル酸誘導体又はメタアクリル酸誘導体が好ましい。プロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーとしてアクリレート又はメタアクリレートが最も好ましい。

本明細書において「ビニル系ポリマー」とは、広義の意味でのビニル系ポリマーであり、主鎖が非環式である重合体を意味する。その具体的例としては、「ＪＢｒａｎｄｒｕｐ；Ｅ．Ｈ．Ｉｍｍｅｒｇｕｔ．１９８９．“ＰｏｌｙｍｅｒＨａｎｄｂｏｏｋＴｈｉｒｄＥｄｉｔｉｏｎ”ＡＷｉｌｌｅｙ−ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ、ｐＶＩＩ−５〜ＶＩＩ−１８」に示される、ポリアクリル酸のα−置換体とその誘導体、ポリビニルエーテル、ポリビニルアルコール、ポリビニルエステル、ポリスチレンとその誘導体、及びこれらを含む共重合体等を挙げることができる。

ポリマーのプロトン性中性親水性部分は主に製剤を処理する際にフィルター全般が製剤に行き渡るための濡れ性の確保、特に、製剤処理初期に製剤を満たす「プライミング」といった操作を円滑に行うために、フィルター素材表面を改質する上でポリマー中に必須な部分である。

血漿成分を含む血液製剤中の異常プリオンを高度に除去するためには、上記した疎水性重合性モノマー由来のユニット、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー由来のユニット、プロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマー由来のユニットの三者を含むポリマーを用いなければならない。各々単独のユニットからなるポリマーでは異常プリオンを高度に除去できず、特に血漿成分を含む血液製剤からの高度な異常プリオン除去性能は得られない。

異常プリオンは、陽性荷電した官能基、陰性荷電した官能基、及び疎水性官能基に結合する３つの異なる結合領域を有する。一方で、異常プリオンの等電点はｐＨ４．６とされており、血液製剤のｐＨは約５から７．５の間であることから血液製剤中の異常プリオンは陰性に荷電している。したがって、塩基性モノマー由来のユニットと疎水性モノマー由来のユニットにより、血液製剤から異常プリオンを高度に除去することができる。また、陰性荷電を有する材料と血液製剤の接触により、血圧低下、顔面紅潮、結膜充血、平滑筋収縮、発痛などのアナフィラキシーを引き起こすブラジキニンの生成が引き起こされるとされており、陰性荷電を有するポリマーは血液製剤を濾過する担体表面のコートには適さない。

一方で、血液製剤をフィルターで濾過する際には現行の白血球除去フィルターで濾過する時と同じ品質の血液製剤を提供することが求められている。ポリマーのプロトン性中性親水性部分は、フィルター全体に血液製剤が行き渡るための濡れ性の確保、特に、血液製剤の濾過初期に血液製剤をフィルターに満たすプライミング操作を円滑に行うために必須な部分である。また、塩基性含窒素を有するモノマーと疎水性重合成モノマーはポリマー中の組成がある一定を超えると、溶血又は濾過時間の延長といった品質低下を起こす。したがって、異常プリオンが高度に除去された血液製剤を得るためには、疎水性重合性モノマー、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー及びプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーの組成が適切に設定されていることが必須である。

本発明における疎水性モノマーとは、２０℃の水に対する溶解度が１２（ｇ／水１００ｇ）以下であることが好ましい。溶解度が１２（ｇ／水１００ｇ）を超えると本発明にて得られる様な高い白血球除去能が得られにくくなる傾向にある。また、溶解度は２（ｇ／水１００ｇ）以下であることがより好ましい。溶解度の測定は、重合性モノマーが固体の場合には、露点法、熱分析法、溶液の起電力や電導度を測定する電気的方法、ガスクロマトグラフィー分析法、トレーサー法等の公知の測定方法で測定できる。重合性モノマーが液体の場合には、固体の時と同じ測定法でも測定できるが、更に容量法、光散乱法、蒸気圧法等の公知の方法によって測定することができる。また、より簡便な方法として、重合性モノマーが水より沸点が十分に高い場合には、重合性モノマーの飽和水溶液から水を蒸発させ、残量の重さを測定する方法により求めることもできる。

高い白血球及び血小板除去性能、濾過保存後の製剤品質維持、より高度な異常プリオン除去性能を具現化するためには、ポリマーを構成する前記各モノマーの組成（モル百分率）は塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーの組成が３モル％以上５モル％以下、かつ、１００モル％からポリマー中の塩基性含窒素部分を含む重合成モノマーの組成を引いた残余中の、プロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーに対する疎水性重合性モノマーのモル％組成比（モル比。以下「Ｘ」と呼ぶ。）が０．５２以上０．６７以下であることが好ましい。

ポリマー中の塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーの組成が５モル％を超えると、ポリマー中の塩基性含窒素部分の増加によりポリマーの表面荷電が高まり、血液製剤中の血球成分とポリマーとの荷電性吸着による接触頻度が上がり、これにより血球の表面を損傷させ、保存後製剤の品質を低下させる微粒子が発生するため好ましくない。

一方、ポリマー中の塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーの組成が３モル％より少ないと、ポリマー中の塩基性含窒素部分の減少によるポリマー表面の荷電低下により異常プリオン蛋白の荷電部分がポリマーに吸着する力が弱まり、プリオン除去性能が低下するため好ましくない。

ポリマー中の塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーの組成が３モル％以上５モル％以下、かつＸが０．５２より小さい場合には、疎水性部分が減少することにより異常プリオン蛋白の疎水性部分がポリマーに吸着する力が弱まり異常プリオン蛋白の除去性能が低下するため好ましくない。

ポリマー中の塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーの組成が３モル％以上５モル％以下、かつＸが０．６７より大きい場合には、疎水性部分が増加するためポリマーの表面荷電が相対的に高まる。その結果、血液製剤中の血球成分を過度に吸着して血球の表面を損傷させ、保存後製剤の品質を低下させる微粒子が発生するため好ましくない。更に、ポリマーをコートした担体を充填した除去フィルターで血液製剤を濾過する際に、血液製剤に対して濡れ性が悪く処理時間の延長が見られ好ましくない。

ポリマー中のモノマーの組成は一般的物理化学的手法にて測定することができる。共重合組成を測定する物理化学的手法について例示するならば、核磁気共鳴スペクトル法（ＮＭＲ、−１Ｈ、−１３Ｃ）、熱分解ＧＣマススペクトル法等公知の手法を用いて測定することができる。仕込み通りに重合されたこと、ロット間変動なども確認できる。また、白血球及び血小板除去用フィルター素材の表面にコーティングされているポリマーを該ポリマーの溶剤等を用い溶解及び抽出し、その抽出物質であるポリマー中の各モノマーの共重合組成を、前記と同様の方法にて測定することもできる。また白血球及び血小板除去用フィルター素材を表面に存在しているポリマーともに重水素化した溶剤にて溶解し、核磁気共鳴スペクトル法（ＮＭＲ、−１Ｈ、−１３Ｃ）の手法にて測定する方法も共重合組成を測定する方法として利用できる。

ポリマーの重量平均分子量は、例えば、ポリマーを１．０ｍｇ／ｍＬの濃度で移動相に溶かした試料液を作製し、以下の条件で、ゲルパーミュエーションクロマトグラフィー測定を行うことにより求められる（ポリメタクリル酸メチル樹脂（ＰＭＭＡ）換算である）。
装置：ＨＬＣ−８２２０ＧＰＣ（東ソー株式会社）
カラム：ＳｈｏｄｅｘＫＦ−６０６Ｍ、ＫＦ−６０１
オーブン：４０℃
移動相：１．０ｍＬ／ｍｉｎＤＭＦ＋５ｍＭＬiＢｒ
検出器：示差屈折率検出器

ポリマーの重量平均分子量（Ｍｗ）は、５万以上３００万以下の範囲にあることが好ましく、１０万以上２００万以下の範囲にあることがより好ましく、１５万以上１５０万以下の範囲にあることが更に好ましい。重量平均分子量（Ｍｗ）が５万以上であると、白血球を含む血液製剤から白血球除去処理した時にポリマーの血液製剤への溶出を充分に抑制できる。また重量平均分子量Ｍｗが３００万以下であると、コーティングする際の溶剤への溶解度が充分であり、また重合の際、安定して製造することができる。

ポリマーはランダム共重合体、ブロック共重合体のどちらでも良いが、ブロック共重合体はコーティングする際の溶剤への溶解度が低下する傾向が見られたり、溶液中でミセル形成などのコーティングの均一性を損なう傾向が見られたりするため、ランダム共重合体が好ましい。直鎖状ポリマーでも分岐状ポリマーでもいずれでも良いが、分岐状ポリマー鎖はコーティングする際の溶剤への溶解度が低下する傾向があり、また溶液中でミセル形成するなどによりコーティングの均一性を損なうため、直鎖状ポリマー鎖がより好ましい。

ポリマーの合成方法としては一般的な重合法を用いれば良い。連鎖反応である付加重合（ビニル重合）等を用いても良く、異性化重合、逐次反応である脱離反応、重付加、重縮合、付加重縮合等を用いても良い。ポリマーを重合するにあたり、連鎖逓電体（ｃｈａｉｎｃａｒｒｉｅｒ）としてはラジカル、イオン等を用いれば良い。重合の方式として溶液重合、塊状重合、析出重合、エマルション重合等を例示することができる。その中でも溶液重合が好ましい。

以下に重合方法を例示する。
重合溶媒としてエタノールを用い、窒素雰囲気下、エタノールの沸点以下の一定温度で攪拌を行いながら、各モノマーとジアゾ系開始剤を溶解したエタノール溶液を滴下して反応させる。また安定剤などを適宜加えても構わない。反応の収率はガスクロマトグラフ法などの公知の方法にて測定し確認する。

ポリマー中又はポリマーを含む反応液中に存在する製剤処理中に溶出の懸念となる低分子量成分、未反応物等の不純物を除くために、一般的な化学的精製方法を用いることで精製することができる。精製方法を例示すると、不純物を溶解し重合体を溶解しない溶媒中に注ぎ沈殿させ、濾別、デカンテーション等で沈殿を分ける方法、また必要に応じ、沈殿溶媒より溶解性のやや高い溶剤（沈殿溶媒と溶媒の混合物など）にて沈殿を洗い、減圧乾燥にて沈殿が恒量になるまで乾燥し、固形状ポリマーとして得る方法を挙げることができる。

〔担体〕
本発明に係る白血球及び異常プリオンを吸着する担体は、基材と、該基材の表面に固着された本発明のコート剤とを有する。

ここで、基材とは、血液を濾過し得る細孔を有する基材であれば特に限定はなく、何れの基材形態を有する物も含まれる。具体的には天然繊維、ガラス繊維、編布、織布、不織布などの繊維状媒体、多孔膜、三次元網目状連続孔を有するスポンジ状構造物が特に好ましい。また血球にダメージを与えにくいものであれば特に限定はなく各種のものを用いることができ、有機高分子材料、無機高分子材料、金属等が挙げられる。その中でも有機高分子材料は切断等の加工性に優れるため好ましい基材である。例えば、ポリエステル、ポリオレフィン、ポリアクリロニトリル、ポリアミド、ポリスチレン、ポリメチルメタアクリレート、ポリ弗化ビニル、ポリウレタン、ポリビニルアルコール、ポリビニルアセタール、ポリスルホン、ポリ弗化ビニリデン、ポリトリフルオロクロロビニル、弗化ビニリデン−テトラフルオロエチレン共重合体、ポリエーテルスルホン、ポリアクリレート、ブタジエン−アクリロニトリル共重合体、ポリエーテル−ポリアミドブロック共重合体、エチレン−ビニルアルコール共重合体、セルロース、セルロースアセテート等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。好ましくはポリエステル、ポリオレフィン、特に好ましくはポリエステルである。

本発明に係る担体は、ポリマーが製剤処理中に容易に溶出しないように、基材表面にポリマーが固着されている。ポリマーの基材表面への固着の方法は化学的な共有結合によるものでも、物理化学的な非共有結合によるものでも構わない。ポリマーの存在量が担体全表面積単位面積あたり０．６ｍｇ／ｍ^２未満の場合、白血球除去能が低下する傾向があり、また、８３ｍｇ／ｍ^２を超える場合、コートむらによる性能ばらつきが大きくなるなどの傾向にあり好ましくない。ポリマーの存在量は、担体全表面積単位面積あたり５ｍｇ／ｍ^２以上５０ｍｇ／ｍ^２以下であることが好ましく、５ｍｇ／ｍ^２以上１５ｍｇ／ｍ^２以下であることがより好ましい。なお、担体全表面積単位面積あたりの存在量とは、基材表面に存在する全ポリマー量を基材の全表面積で除した値を意味する。

本明細書において、基材の全表面積（ｍ^２）とは、基材の重量（ｇ）と基材の比表面積（ｍ^２／ｇ）との積から得られる値を言う。基材表面に存在するポリマーの量は一般的物理化学的手法にて測定することができる。基材表面に存在するポリマーの量を測定する方法としては、例えば、基材及びポリマーをともに重水素化した溶剤に溶解し、核磁気共鳴（ＮＭＲ、−１Ｈ、−１３Ｃ）の手法にて測定する方法などが挙げられる。

基材表面へポリマーを固着させる方法は、例えば上記にて説明した各重合性モノマー又はポリマーを基材に化学的な共有結合によって固着させる方法（グラフトなど）、物理化学的な非共有結合（イオン結合、ファン・デア・ワールス力など）によって固着させる方法（コーティングなど）、包埋等の公知の方法を例示することができる。より具体的には放射線グラフトやプラズマグラフトなどのグラフト重合法によって、各重合性モノマー又はポリマーを基材表面に直接グラフトさせる方法、又はポリマーを溶解した液に基材を含浸又は塗布・転写させ表面にコーティングする方法が比較的容易に製造可能であり、且つ安定して性能が優れているためより好ましい。

本発明のポリマーの基材へのコーティング方法は基材の細孔を著しく閉塞することなく、かつ基材表面がある程度の範囲にて均一にコーティングできるものであれば特に制限はなく各種の方法を用いることができる。例えば、ポリマーを溶かした溶液に基材を含浸させる方法、ポリマーを溶かした溶液を基材（例えば、フィルター材の素材）に吹き付ける方法、ポリマーを溶かした溶液をグラビアロール等を用い基材（例えば、フィルター材の素材）に塗布・転写する方法、などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。この中でもポリマーを溶かした溶液に基材を含浸させ含浸後基材を絞る方法、該ポリマーを溶かした溶液をグラビアロール等を用い基材（例えば、フィルター材の素材）に塗布・転写する方法は、連続生産性に優れ、コストも低いことより好ましい方法である。

ポリマーを溶解する溶剤としては、基材を著しく溶解させないものであれば特に限定なく種々の溶剤を用いることができ、水及び無機塩を含む水溶液、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、酢酸メチル、酢酸エチルなどのエステル類、ベンゼン、シクロヘキサンなどの炭化水素類、クロロホルム、ジクロロメタンなどのハロゲン化炭化水素類、ジメチルスルホキシドなどの硫黄含有溶剤、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドなどのアミド類及び上記の複数の溶剤の可溶な範囲での混合物などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。

またコーティング後の乾燥としては、機械的な圧縮、重力、空気や窒素などの気体の吹き付けなどで余剰の溶液を除去し、乾燥気体中又は減圧下で常温又は加温するなどの方法を用いることができる。また、コーティングの前に、本発明のポリマーと基材との接着性をより高めるため、基材の表面を酸、アルカリなどの適当な薬品で処理を行ったり、プラズマを照射することもできる。更に、ポリマーのコーティング後に熱処理や、γ線、電子線などの放射線を照射する後加工を施し、基材とポリマーとの接着性を更に強化することもできる。なお、コーティングは基材を製造するときに行っても良いし、基材製造後に行っても良い。

担体の物理的な構造は白血球及び異常プリオンの除去能に大きく寄与する。そのため、白血球及び異常プリオンの除去能を向上させるには担体に用いる基材の選択も重要な因子となる。担体の物理的な構造として、基材の比表面積は１．０ｍ^２／ｇ以上５．０ｍ^２／ｇ以下であることが好ましく、１．１ｍ^２／ｇ以上３．０ｍ^２／ｇ以下であることがより好ましく、１．３ｍ^２／ｇ以上２．０ｍ^２／ｇ以下であることが更に好ましい。基材の比表面積が１．０ｍ^２／ｇ未満であると高率で白血球及び異常プリオンを除去することが難しい。基材の比表面積は５．０ｍ^２／ｇを超えると、もはや安定して担体を製造することができない。また、後述する本発明の白血球及び異常プリオンの除去フィルター（以下、「除去フィルター」ともいう。）においては、複数の比表面積の基材から得られた担体を出口側に向かって比表面積がより大きくなる様に配置することが好ましい。

基材の比表面積（ｍ^２／ｇ）は、例えば（株）島津製作所「アキュソーブ２１００」又はこれと同等の仕様を持った装置を用いて、気体吸着法（ＢＥＴ法）によって求められる基材単位重量あたりの表面積のことである。

担体の物理的な構造として、基材の空隙率は６５％以上９０％以下が好ましく、７５％以上８８％以下がより好ましい。空隙率は６５％未満であると血液等の濾過速度が低くなって、白血球及び異常プリオンの除去に長時間要するようになる傾向がある。また、空隙率が９０％を超えると、異常プリオンと白血球が接着しやすい繊維と繊維の交絡部が少なくなるため、高い白血球除去性能と異常プリオン除去性能が得られにくい傾向にある。

基材の空隙率（％）は、例えば基材厚みから計算した単位体積当たりに占める空間の割合である。

不織布などの繊維状媒体を基材とする場合、その平均繊維径は０．３μｍ以上３．０μｍ以下であることが好ましく、０．５μｍ以上２．５μｍ以下であることがより好ましく、１μｍ以上２μｍ以下であることが更に好ましい。本発明の除去フィルターにおいては複数の平均繊維径の基材から得られた担体を出口側に向かって平均繊維径がより細かくなる様に配置することが好ましい。また本発明の除去フィルターにおいては必要に応じ担体より入口側に微小凝集体除去を主な目的とした平均繊維径１０μｍ以上４０μｍ以下の基材を配置しても構わない。

本明細書において、基材の平均繊維径とは、繊維状媒体の電子顕微鏡写真を、５カ所程度無作為に撮影し、格子が描かれた透明シートを上記で撮影した写真に重ね、直径が既知のポリスチレンラテックスを対照として、格子の交点と重なった１００箇所の繊維の直径を測定し、その平均を算出して平均繊維径としたものである。

担体の物理的な構造として、基材の平均孔径は、１μｍ以上６０μｍ以下であることが好ましく、１μｍ以上３０μｍ以下であることがより好ましく、１μｍ以上２０μｍ以下であることが更に好ましい。平均孔径が１μｍ未満であると血液製剤が流れ難くなる傾向にある。一方、６０μｍを超えると白血球除去能が低下する傾向にある。本発明の除去フィルターにおいては複数の平均孔径の基材から得られた担体を出口側に向かって平均孔径が小さくなる様に配置することが好ましい。また本発明の除去フィルターにおいては必要に応じ担体より入口側に微小凝集体除去を主な目的とした平均孔径５０μｍ以上２００μｍ以下の基材を配置しても構わない。さらに本発明の除去フィルターにおいては必要に応じ担体より出口側に偏流防止を主な目的とした平均気孔径５０μｍ以上２００μｍ以下のポストフィルターを配置しても構わない。基材の平均孔径とは、例えばコールターエレクトロニクス社製コールターＲポロメーターを使用し、約５０ｍｇの試料を用いて測定した値（ミーン・フロー・ポアサイズ：ＭＦＰ）である。

〔除去フィルター〕
本発明の白血球及び異常プリオンの除去フィルターは、血液（例えば、血液製剤）の入口及び出口を有する容器に本発明の担体を充填したものである。除去フィルターには、血液製剤の上流側（担体よりも入口に近い側）に微小凝集物を捕捉するための基材があっても良いし、下流側（担体よりも出口に近い側）に基材があっても良い。

容器の材質は、硬質樹脂や軟質樹脂のいずれでも良い。硬質樹脂の場合、素材はフェノール樹脂、アクリル樹脂、エポキシ樹脂、ホルムアルデヒド樹脂、尿素樹脂、ケイ素樹脂、ＡＢＳ樹脂、ナイロン、硬質のポリウレタン、ポリカーボネート、塩化ビニル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリエステル、などが例示できる。軟質樹脂の場合、可撓性の合成樹脂製のシートに血液製剤の入口と出口を形成し、それを周縁部で溶着したものや血液製剤の入口と出口を持つ円筒状成型物等が用いられる。材質は、本発明に係る担体と一緒に容器と溶着するような場合には、担体と熱的、電気的性質が類似のものが良く、例えば、軟質ポリ塩化ビニル、ポリウレタン、エチレン−酢酸ビニル共重合体、ポリエチレン及びポリプロピレンのようなポリオレフィン、スチレン−ブタジエン−スチレン共重合体の水添物、スチレン−イソプレン−スチレン共重合体又はその水添物等の熱可塑性エラストマー、及び、熱可塑性エラストマーとポリオレフィン、エチレン−エチルアクリレート等の軟化剤との混合物等が好適な材料として挙げられる。中でも好ましいのは軟質塩化ビニル、ポリウレタン、エチレン−酢酸ビニル共重合体、ポリオレフィン、及び、これらを主成分とする熱可塑性エラストマーであり、特に好ましいのは軟質塩化ビニル、ポリオレフィンである。

容器の形状は、血液製剤の入口と、異常プリオン及び白血球が除去された血液製剤の出口とを有する形状であれば特に限定されないが、担体の形状に応じた形状であることが好ましい。例えば、担体が平板状の場合には、四角形、六角形などの多角形や、円形、楕円形などの曲線からなる扁平形状の容器を用いることができる。より詳細には、容器は血液製剤入口を有する入口側容器と血液製剤出口を有する出口側容器から構成され、両者が担体を直接又は支持体を介して挟み込むことにより担体内部を二室に分け、扁平状のフィルターを形成するような形状が例示できる。また、別の例として、担体が円筒形状の場合には、容器も同様に円筒状であることが好ましい。より詳細には、容器は、担体を収容する筒状胴部と血液製剤入口を有する入口側ヘッダー及び血液製剤出口を有する出口側ヘッダーから構成され、ポッティング加工により、容器内部が入口から導入された液体が円筒状担体の外周部から内周部（又は内周部から外周部）に流れるように二室に分けた、円筒状のフィルター形成するような形状が例示できる。

本発明の除去フィルターは血液製剤を濾過したときに、血液製剤中の白血球数を９９％以上除去できることが好ましく、９９．９％以上除去できることがより好ましく、９９．９９％以上除去できることが更に好ましい。これを白血球除去性能で言い換える場合には下式（１）に従い算出される値で、２以上（２Ｌｏｇ以上）の除去性能を示すことが好ましく、３以上（３Ｌｏｇ以上）の除去性能を示すことがより好ましく、４以上（４Ｌｏｇ以上）の除去性能を示すことが更に好ましい。
白血球除去性能＝−Ｌｏｇ１０｛［白血球濃度（個／μＬ）（濾過後血）］÷［白血球濃度（個／μＬ）（濾過前血）］｝（１）

本発明の除去フィルターは、濾過後製剤品質を維持することができる。本発明の除去フィルターは、濾過後血液製剤中の微粒子発生個数が２００個以下であることが好ましく、１５０個以下であることがより好ましい。微粒子とは、抗体ＩｇＧＬ−ＰＥで検出されるものをいう。また、濾過後に保存した後の製剤品質を維持することも可能である。本発明の除去フィルターは、例えば、濾過後４２日保存後の血液製剤中の微粒子発生個数が２００個以下であることが好ましく、１５０個以下であることがより好ましい。

除去フィルターが、繊維状媒体を基材とする場合、容器内に充填したときの充填密度が０．１ｇ／ｃｍ^３以上０．５ｇ／ｃｍ^３以下であることが好ましく、０．１ｇ／ｃｍ^３以上０．３ｇ／ｃｍ^３以下であることがより好ましい。充填密度は、例えば、充填する不織布等を充填カットサイズ（ｃｍ^２）にカットし、その重量（ｇ）を測定し、実際の容器内で圧縮された状態での距離（ｃｍ）から求めることができる。

除去フィルターが、繊維状媒体を基材とする場合、基材の平均繊維径が０．３μｍ未満、若しくは平均気孔径が１μｍ未満、又は充填密度が０．５ｇ／ｃｍ^３を超えると血球の目詰まりや圧力損失の増大を引き起こしやすい傾向にあり、基材の平均繊維径が３．０μｍを超える、若しくは平均気孔径が６０μｍを超える、又は充填密度が０．１ｇ／ｃｍ^３未満であると、白血球及び異常プリオンの除去能が低下してしまう傾向にある。

除去フィルターが、多孔質膜、三次元網目状連続孔を有するスポンジ状構造物を基材とする場合、基材の平均孔径が、１μｍ以上６０μｍ以下であることが好ましく、５μｍ以上５０μｍ以下であることがより好ましく、１０μｍ以上４０μｍ以下であることが更に好ましい。平均孔径が１μｍ未満であると血球目詰まりや圧力損失を引き起こしやすい傾向にあり、平均孔経が６０μｍを超えると白血球除去能が低下してしまう傾向にある。

〔血液製剤〕
本明細書において、血液製剤とは、異常プリオンを含む可能性のある、全血や全血から調製して得られる単一もしくは複数種類の血液成分からなる液体、又はそれらの液体に抗凝固剤や保存液などが添加された液体を総称するものである。具体例としては、全血製剤、赤血球製剤、血小板製剤、血漿製剤、洗浄赤血球浮遊液、解凍赤血球濃厚液、合成血、多血小板血漿、バフィーコートなどが挙げられるが、これらに限定されるものでは無い。

本明細書において、全血製剤とは、献血者から採血された全血にＣｉｔｒａｔｅＰｈｏｓｐｈａｔｅＤｅｘｔｒｏｓｅ（ＣＰＤ）、ＣｉｔｒａｔｅＰｈｏｓｐｈａｔｅＤｅｘｔｒｏｓｅＡｄｅｎｉｎｅ−１（ＣＰＤＡ−１）、ＣｉｔｒａｔｅＰｈｏｓｐｈａｔｅ−２−Ｄｅｘｔｒｏｓｅ（ＣＰ２Ｄ）、ＡｃｉｄＣｉｔｒａｔｅＤｅｘｔｒｏｓｅＦｏｒｍｕｌａ−Ａ（ＡＣＤ−Ａ）、ＡｃｉｄＣｉｔｒａｔｅＤｅｘｔｒｏｓｅＦｏｒｍｕｌａ−Ｂ（ＡＣＤ−Ｂ）、ヘパリンなどの保存液、抗凝固剤を添加した血液製剤のことである。

〔異常プリオンの除去方法〕
本明細書において、異常プリオンとは、ヒト及び動物に海綿状脳症と言われている疾患を引き起こすことが知られている変異型の異常プリオンタンパク質を意味するものとする。異常プリオンは正常プリオンと同じアミノ酸配列を持つがβ−シートに富む構造変化したタンパク質であり、プロテアーゼＫによる消化に抵抗性を示す。異常プリオンによる疾患として、ヒツジ及びヤギの神経系の感染性変性疾患であるスクレイピー（ｓｃｒａｐｉｅ）、ウシにおけるＢＳＥが広く知られている。ヒトの疾患の形態は、孤発性クロイツフェルト・ヤコブ病（ｓＣＪＤ）、医原性のクロイツフェルト・ヤコブ病、Ｇｅｒｓｔｍａｎｎ−Ｓｔｒａｅｕｓｓｌｅｒ−Ｓｃｈｅｉｎｋｅｒ（ＧＳＳ）症候群、致死的な家族性イソムニア（ｉｓｏｍｎｉａ）（ＦＦＩ）、クールー（Ｋｕｒｕ）そしてＢＳＥの食肉により感染することが知られている変異型ＣＪＤがある。

本明細書において、異常プリオンは、以上の疾患のすべてもしくは任意の１つ、又は任意の動物、特にヒト及び家畜動物において疾患を引き起こすすべての型の異常プリオンタンパク質を含む。因みに２００６年３月に開催されたＣａｍｂｒｉｄｇｅＨｅａｌｔｈｔｅｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔ’ｓ１０ｔｈＡｎｎｕａｌＴｒａｎｓｍｉｓｓｉｂｌｅＳｐｏｎｇｉｆｏｒｍＥｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｉｅｓ −ＴｈｅＤｅｆｉｎｉｔｉｖｅＡｍｅｒｉｃａｎＴＳＥＭｅｅｔｉｎｇ−のＳａｍｕｅｌＣｏｋｅｒの発表によれば、スクレイピー、変異型ＣＪＤ及び孤発性ＣＪＤ由来の異常プリオンは、フィルター（ポール社製ＬＡＰＲＦ）で同じように除去されて、その除去率にほとんど差はなかった。このことはフィルター除去性能に関係する異常プリオンタンパク質構造は動物や疾患の種類が異なってもほとんど異ならず、動物由来の異常プリオンの除去率をもってヒト由来の異常プリオンの除去率を推定することができることを示している。

次に、血液製剤から異常プリオンを除去する方法について、説明する。先ず初めに、各種血液製剤を調製する方法の一つの態様について説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

（異常プリオン除去全血製剤の調製）
採血された全血にＣＰＤ、ＣＰＤＡ−１、ＣＰ２Ｄ、ＡＣＤ−Ａ、ＡＣＤ−Ｂ、ヘパリンなどの保存液、抗凝固剤を添加し、本発明の除去フィルターで濾過することにより全血から異常プリオンを除去し、異常プリオン除去全血製剤を得る。

図１は、全血製剤の濾過を行うシステムの一実施形態を示す模式図である。全血製剤の濾過は、少なくとも血液製剤の入ったバッグ１、本発明の除去フィルター３、異常プリオンを除去された濾過後の血液製剤を回収するためのバッグ４が回路２によりこの順に無菌的に接続されたシステムを用いて行われる。採血針や採血バッグや遠心分離後各成分に分けるためのバッグや除去フィルターに残留した血液製剤を回収するための回路が接続されていても良い。濾過は除去フィルターよりも高い位置に設置された血液製剤の入ったバッグから、重力落差によって血液製剤が導管を経由して除去フィルターに流れることによって行われてもよいし、また、ポンプなどの手段を用いて血液製剤を除去フィルターの入口側から加圧及び／又は除去フィルターの出口側から減圧して流すことによって異常プリオンの除去を行ってもよい。この濾過方法は全血製剤に限らず、他の血液製剤でも同様である。

異常プリオン全血製剤の調製においては、保存前に異常プリオンを除去する場合、好ましくは室温下又は冷蔵下にて保存された全血を採血後７２時間以内、更に好ましくは２４時間以内、特に好ましくは１２時間以内、最も好ましくは８時間以内に室温下又は冷蔵下にて本発明の除去フィルターを用いて異常プリオン除去を行うことにより異常プリオン除去全血製剤を得る。保存後に異常プリオンを除去する場合、室温下又は冷蔵下にて保存された全血を、好ましくは使用前２４時間以内にフィルターを用いて異常プリオンを除去することにより異常プリオン除去全血製剤を得る。本発明では異常プリオンと共に白血球をも除去された全血製剤を得ることもできる。

（異常プリオン除去赤血球製剤の調製）
採血された全血にＣＰＤ、ＣＰＤＡ−１、ＣＰ２Ｄ、ＡＣＤ−Ａ、ＡＣＤ−Ｂ、ヘパリンなどの保存液、抗凝固剤を添加する。これに引続き行われる各血液成分への分離方法は、全血から異常プリオンを除去した後に遠心分離を行う場合と、全血を遠心分離した後に赤血球もしくは赤血球とバフィーコート（以下、「ＢＣ」という）から異常プリオンを除去する場合がある。

全血から異常プリオンを除去した後に遠心分離を行う場合、前記異常プリオン除去全血製剤の調製と同様に異常プリオン除去全血を得た後、異常プリオン除去全血を遠心分離し、下層の濃厚赤血球を回収することにより異常プリオン除去赤血球製剤を得る。

異常プリオン除去前に全血を遠心分離する場合、遠心条件は、赤血球、富血小板血漿（ＰＲＰ）に分離される弱遠心条件と、赤血球、ＢＣ、乏血小板血漿（ＰＰＰ）に分離される強遠心条件の２種類がある。必要に応じて全血から分離回収された赤血球、もしくはＢＣを含んだ赤血球にＳａｌｉｎｅＡｄｅｎｉｎｅＧｌｕｃｏｓｅＭａｎｎｉｔｏｌｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＳＡＧＭ）、Ａｄｄｉｔｉｖｅｓｏｌｕｔｉｏｎ−１（ＡＳ−１）、Ａｄｄｉｔｉｖｅｓｏｌｕｔｉｏｎ−３（ＡＳ−３）、Ａｄｄｉｔｉｖｅｓｏｌｕｔｉｏｎ−５（ＡＳ−５）、ＭａｎｎｉｔｏｌＡｄｅｎｉｎｅＰｈｏｓｐｈａｔｅ（ＭＡＰ）などの保存液を添加後、本発明の除去フィルターで赤血球製剤を濾過して異常プリオン除去赤血球製剤を得る。

異常プリオン除去赤血球製剤調製においては、好ましくは室温下又は冷蔵下にて保存された全血を採血後７２時間以内、更に好ましくは４８時間以内、特に好ましくは２４時間以内、最も好ましくは１２時間以内に遠心分離を行う。また、保存前に異常プリオンを除去する場合、好ましくは室温下又は冷蔵下にて保存された赤血球製剤から採血後１２０時間以内、更に好ましくは７２時間以内、特に好ましくは２４時間以内、最も好ましくは１２時間以内に室温下又は冷蔵下にて本発明の除去フィルターで濾過して異常プリオンを除去することにより異常プリオン除去赤血球製剤を得る。保存後異常プリオン除去の場合、好ましくは室温下又は冷蔵下にて保存された赤血球製剤から使用前２４時間以内に本発明の除去フィルターで濾過して異常プリオンを除去することにより異常プリオン除去赤血球製剤を得る。

以下、本発明を実施例でさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。

実施例、比較例で用いた諸数値は以下の方法によって測定した。

（基材の比表面積）
基材（不織布）の比表面積（ｍ^２／ｇ）は、（株）島津製作所「アキュソーブ２１００」又はこれと同等の仕様を持った装置を用いて、気体吸着法（ＢＥＴ法）によって求めた。０．５０ｇ〜０．５５ｇの範囲で秤量した不織布を試料管に充填し、上記アキュソーブ本体で１×１０^−４ｍｍＨｇの減圧度（室温下）にて２０時間脱気処理した後、吸着ガスとして吸着占有面積の判っているクリプトンガスを用い、液体窒素の温度下で不織布の表面に吸着させその吸着量から秤量した不織布中の全表面積を求め、秤量した不織布重量で割ることで求めた。

（平均繊維径の測定）
不織布の電子顕微鏡写真を、不織布につき５カ所程度無作為に撮り、格子が描かれた透明シートを上記で撮影した写真に重ね、直径が既知のポリスチレンラテックスを対照として、格子の交点と重なった、１００箇所の繊維の直径を測定し、その平均を算出して平均繊維径とした。

（担体全表面積単位面積あたりのポリマー存在量）
ポリエステル不織布にメチルメタクリレート、ジメチルアミノエチルアメクリレート、２−ヒドロキシメタクリレートからなるポリマーをコーティングした担体の一定重量を、重水素化１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロ−２−プロパノールに溶解し、ＮＭＲ測定を行い、明確に不織布に帰属するシグナル（例えば、ベンゼン環のプロトン）とポリマーに明確に帰属するシグナル（例えば、メチルメタクリレートのエステル隣接のメチル基のプロトン）の強度比と、別途測定したポリマーの共重合組成から、不織布単位重量当たりのポリマー保持量を求めた。また、不織布単位重量当たりのポリマー保持量を、基材の比表面積から、担体全表面積単位面積あたりのポリマー保持量に換算した。

（白血球除去性能試験：実施例１〜５、比較例１〜７）
［除去フィルターの作製］
基材として、平均繊維直径１２μｍ、目付３０ｇ／ｍ^２、比表面積０．２４ｍ^２／ｇのポリエステル製不織布Ｐ、平均繊維直径１．８μｍ、目付６０ｇ／ｍ^２、比表面積１．１ｍ^２／ｇのポリエステル製不織布Ａ、及び各実施例、比較例で準備したポリマーをコーティングした平均繊維径１．２μｍ、目付４０ｇ／ｍ^２、比表面積１．４７ｍ^２／ｇのポリエステル製不織布Ｂを使用した。基材Ｐ及びＡ、並びに担体Ｂを上流から順番にＰ−Ａ−Ｂの順に重ね、更にこの下流側にＡと同基材のＡ’、Ｐと同基材のＰ’を重ね、全体としてＰ−Ａ−Ｂ−Ａ’−Ｐ’という対称構造の積層体とした。この積層体を血液入口又は出口となるポートを有する可撓性塩化ビニル樹脂シートで挟み、高周波溶着機を用いて、積層体と可撓性シートの周縁部分を溶着、一体化させ、有効濾過面積４３ｃｍ^２の除去フィルターを作製した。なお、全ての評価で１１５℃、５９分間高圧蒸気滅菌を実施した。

［白血球除去性能試験］
欧州基準に従って調製された赤血球製剤を用いた。これを落差１００ｃｍの自然落差で実施例１〜５、比較例１〜７で準備したポリマーをコーティングしたポリエステル製不織布Ｂを含む除去フィルターを用いて濾過し、血液を回収して濾過後血とした。

［白血球除去性能］
下記式（１）で白血球除去性能を評価した。
白血球除去性能＝−Ｌｏｇ１０｛［白血球濃度（個／μＬ）（濾過後血）］÷［白血球濃度（個／μＬ）（濾過前血）］｝（１）
白血球濃度は、各血液１００μＬをサンプリングし、ビーズ入りＬｅｕｃｏｃｏｕｎｔキット（日本ベクトン・ディッキンソン社製）を用い、フローサイトメトリー法（装置：ＢＥＣＴＯＮＤＩＣＫＩＮＳＯＮ社製ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ）により測定した。

（濾過後製剤品質確認試験：実施例１〜５、比較例１〜７）
血液評価に用いた血液製剤は、欧州基準に従って調製された赤血球製剤を用いた。評価に用いた除去フィルターは、白血球除去性能試験と同じ方法で作製した。

［微粒子数測定試験］
白血球除去性能試験と同じ方法で、実勢例１〜５、比較例１〜７で準備したポリマーをコーティングしたポリエステル製不織布Ｂを含む除去フィルターを用いて血液製剤を濾過し、血液を回収して添加濾過後血とした。濾過直後及び濾過後４２日冷蔵保存した血液中の微粒子数を測定した。

［濾過後製剤品質］
微粒子数は、赤血球製剤を１０ｍＬ採取し、２，０００×ｇで２０分遠心分離後の血漿５０μＬと抗体ＩｇＧＬ−ＰＥ１０μＬを混和し、室温で暗所に２０分間静置し、１％パラホルムアルデヒド／ＰＢＳを２ｍＬを添加し、２〜８℃で暗所に３０分静置後それぞれにＦｌｏｗ−Ｃｏｕｎｔ（ＢＥＣＫＭＡＮＣＯＵＬＴＥＲ社製）５０μＬを添加し、フローサイトメトリー法（装置：ＢＥＣＫＭＡＮＣＯＵＬＴＥＲ社製ＣｙｔｏｍｉｃｓＦＣ５００）により測定した。

（異常プリオン除去性能評価：実施例１〜５、比較例１〜７）
評価に用いた除去フィルターは、白血球除去性能試験と同じ方法で作製した。

［スクレイピーに感染したハムスター脳の調製］
スクレイピーを発症させる２６３Ｋハムスター由来の異常プリオンＳｃ２３７をハムスターに接種後６５日から７０日経過したハムスター脳をスクレイピー感染ハムスター脳とした。

［ホモジネートの調製］
スクレイピーに感染したハムスターの脳を３２０ｍＭショ糖の中で超音波破砕を行い、１０重量（ｇ）／容量（１００ｍｌ）％（以下、「Ｗ／Ｖ％」と記す）のホモジネートを作製し、添加するホモジネート（以下、「ホモジネート」と略す）として用いた。

［マイクロソーマルフラクションの調製］
ホモジネートを４５００×ｇ、３０分遠心し、その上清をさらに１０００００×ｇ、１時間遠心した。遠心後の沈殿を１５０ｍＭＮａＣｌ、２０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４の溶液に再懸濁し、さらに１０００００×ｇ、１時間遠心した。遠心後の沈殿をｐＨ７．４のＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ＢｕｆｆｅｒｅｄＳａｌｉｎｅ）で再懸濁して添加するマイクロソーマルフラクション（以下、「マイクロソーマルフラクション」と略す）として用いた。

［プロテアーゼＫの濃度決定方法］
白血球除去後全血製剤を４０００×ｇ、３０分間遠心し、その上清１１．７ｍｌに１．３ｍｌのマイクロソーマルフラクションを加え（以下、「添加濾過前血」という）、１２ｍｌには何も添加しなかった（以下、「未添加濾過前血」という）。

＜プロテアーゼＫ処理をしないサンプル＞
３ｍＬの添加濾過前血又は３ｍＬの未添加濾過前血をそれぞれ１０００００×ｇ、４℃±２℃、１時間遠心した。その沈殿を１００μＬのｓａｍｐｌｅｂｕｆｆｅｒで再懸濁し、５〜１０分間、１００℃±５℃でインキュベートした。

＜プロテアーゼＫ処理をしたサンプル＞
３ｍＬの添加濾過前血又は未添加濾過前血に１〜２％（ｗ／ｖ）のＳａｒｋｏｓｙｌと濃度の異なるプロテアーゼＫを混合し、１０００００×ｇ、４℃±２℃、１時間遠心した。その沈殿を１００μＬのｓａｍｐｌｅｂｕｆｆｅｒで再懸濁し、５〜１０分間、１００℃±５℃、でそれぞれ保持した。

プロテアーゼＫ処理をしないサンプルとプロテアーゼＫ処理をしたサンプルをウエスタンブロット法により解析して、正常プリオン及び抗体と非特異的に反応するタンパク質が完全にプロテアーゼＫによって検出されなくなり、かつ異常プリオンが検出されるプロテアーゼＫの最小濃度を決定した。

［異常プリオン除去性能試験：実施例１〜５、比較例１〜７］
欧州基準に従って調製された白血球除去赤血球製剤を購入して用いた。１〜２日間４℃の冷蔵庫内で保存後、白血球除去赤血球製剤１単位あたりのマイクロソーマルフラクションが９．５ｍＬになるよう室温で添加して添加濾過前血を作製した。これを落差１００ｃｍの自然落差で実施例１〜５及び比較例１〜７で準備したポリマーをコーティングしたポリエステル製不織布Ｂを含む除去フィルターを用いて濾過し、血液を回収して添加濾過後血とした。この添加濾過前血及び添加濾過後血を４０００×ｇ、３０分間遠心し上清を分注した。それらの上清に、上記で定めた必要最小濃度になるようプロテアーゼＫを加えて、１０００００ｘｇ、４℃±２℃、２時間遠心した。遠心後、沈殿を１００μＬのｓａｍｐｌｅｂｕｆｆｅｒで再懸濁し、５〜１０分間、１００℃±５℃で保持した。

［異常プリオン力価の解析］
ｓａｍｐｌｅｂｕｆｆｅｒを加えて加熱した添加濾過前後の血液製剤はプリオンタンパクに特異的に結合する３Ｆ４を一次抗体として用いて一般的なＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔの方法で異常プリオンを検出した。すべての添加濾過前後血の検出を連続的な３倍希釈系列で複数回ずつ繰り返し、Ｓｐｅａｒｍａｎ（Ｂｒｉｔ．Ｊ．ｏｆＰｓｙｃｈｏｌｏｇｙ１９０８；２：２２７ｆｆ．）とＫａｅｒｂｅｒ（ＮａｕｎｙｎＳｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇ’ｓＡｒｈｃ．Ｅｘｐ．Ｐａｔｈ．Ｐｈａｒｍａｋ．１９３１；１５２：３８０ｆｆ．）の方法によりＥＤ５０を求めた後、単位体積（１ｍＬ）当たりのＥＤ５０に換算し、その対数値を力価とした。ＥＤ５０の算出方法は以下の通りである。

Ｙ_０：繰り返し全てで異常プリオンを検出した最大希釈の対数値
ｄ：希釈系列の対数値
Ｙ_ｉ：Ｙ_０以上希釈したときの異常プリオンが検出された割合の和

［異常プリオン除去性能］
異常プリオン除去性能は下記の式（３）によって求めた。
異常プリオン除去性能＝異常プリオンの力価（添加濾過前血）−異常プリオンの力価（添加濾過後血）（３）

（ポリマーの重量平均分子量）
ポリマーの重量平均分子量は、例えば、ポリマーを１．０ｍｇ／ｍＬの濃度で移動相に溶かした試料液を作製し、以下の条件で、ゲルパーミュエーションクロマトグラフィー測定を行うことにより求められる（ポリメタクリル酸メチル樹脂（ＰＭＭＡ）換算である）。
装置：ＨＬＣ−８２２０ＧＰＣ（東ソー株式会社）
カラム：ＳｈｏｄｅｘＫＦ−６０６Ｍ、ＫＦ−６０１
オーブン：４０℃
移動相：１．０ｍＬ／ｍｉｎＤＭＦ＋５ｍＭＬiＢｒ
検出器：示差屈折率検出器

〔実施例１〕
重合溶媒としてエタノールを用い、窒素雰囲気下、７８℃で攪拌を行ないながら、重合性モノマーとジアゾ系開始剤を溶解したエタノール溶液を滴下して、重合を行った。各重合性モノマーの仕込み比（モル比）は、疎水性重合性モノマーとしてメチルメタクリレート（以下、「ＭＭＡ」と略す）３３モル％、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマーとしてジメチルアミノエチルメタクリレート（以下、「ＤＭ」と略す）３モル％、プロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーとして２−ヒドロキシエチルメタアクリレート（以下、「ＨＥＭＡ」と略す）６４モル％であった。重合液を過剰の水にて精製し、減圧乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。結果は、ほぼ仕込み比通りであり、ポリマー中の共重合組成（モル分率）は、ＭＭＡが３３モル％、ＤＭが３モル％、ＨＥＭＡが６４モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．５２であり、重量平均分子量Ｍｗは１９万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用い、ポリマー濃度０．５ｗ／ｖ％とした。素材（基材）であるポリエステル製不織布Ｂに上記ポリマー濃度にてコーティングを行なった。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１０ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は５．００Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後９３個／μＬ、濾過後４２日保存後１３１個／μＬ、異常プリオン除去性能は３．３Ｌｏｇであった。

〔実施例２〕
各重合性モノマーの仕込み比をＭＭＡ３３モル％、ＤＭ５モル％、ＨＥＭＡ６２モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが３３モル％、ＤＭが５モル％、ＨＥＭＡが６２モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．５３であり、重量平均分子量Ｍｗは２７万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．５ｗ／ｖ％にてポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１１ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は４．８６Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後１２０個／μＬ、濾過後４２日保存後１３９個／μＬ、異常プリオン除去性能は３．５Ｌｏｇであった。

〔実施例３〕
各重合モノマーの仕込み比をＭＭＡ３８モル％、ＤＭ３モル％、ＨＥＭＡ５９モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが３８モル％、、ＤＭが３モル％、ＨＥＭＡが５９モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．６４であり、重量平均分子量Ｍｗは１６万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．５ｗ／ｖ％にてポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１１ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は５．２５Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後１０５個／μＬ、濾過後４２日保存後１３３個／μＬ、異常プリオン除去性能は３．１Ｌｏｇであった。

〔実施例４〕
各重合モノマーの仕込み比をＭＭＡ３８モル％、ＤＭ５モル％、ＨＥＭＡ５７モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが３８モル％、、ＤＭが５モル％、ＨＥＭＡが５７モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．６７であり、重量平均分子量Ｍｗは２２万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．５ｗ／ｖ％にてポリエステル不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１２ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は４．９３Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後９８個／μＬ、濾過後４２日保存後１１９個／μＬ、異常プリオン除去性能は３．９Ｌｏｇであった。

〔実施例５〕
各重合モノマーの仕込み比をＭＭＡ３５モル％、ＤＭ５モル％、ＨＥＭＡ６０モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが３５モル％、、ＤＭが５モル％、ＨＥＭＡが６０モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．５８であり、重量平均分子量Ｍｗは２１万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．５ｗ／ｖ％にてポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１０ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は５．１５Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後１２２個／μＬ、濾過後４２日保存後１５０個／μＬ、異常プリオン除去性能は３．７Ｌｏｇであった。

〔比較例１〕
各重合モノマーの仕込み比をＭＭＡ２５モル％、ＤＭ３モル％、ＨＥＭＡ７２モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが２６モル％、ＤＭが３モル％、ＨＥＭＡが７１モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．３７であり、重量平均分子量Ｍｗは１９万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．８ｗ／ｖ％にてポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１６ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は３．８０Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後１２２個／μＬ、濾過後４２日保存後１４１個／μＬ、異常プリオン除去性能は１．６Ｌｏｇであった。
塩基性含窒素部分を含む重合成モノマーの共重合組成が５モル％未満となり、ＭＭＡ／ＨＥＭＡが０．５２よりも低いと異常プリオンの吸着が減少し、異常プリオンの除去性能が低下する結果となった。

〔比較例２〕
各重合モノマーの仕込み比をＭＭＡ２０モル％、ＤＭ１３モル％、ＨＥＭＡ６７モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが２２モル％、、ＤＭが１２モル％、ＨＥＭＡが６６モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．３３であり、重量平均分子量Ｍｗは３９万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．８ｗ／ｖ％にてポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１７ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は３．１５Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後７８６８個／μＬ、濾過後４２日保存後３０５１９個／μＬ、異常プリオン除去性能は３．５Ｌｏｇであった。
塩基性含窒素部分を含む重合成モノマーの共重合組成が５％を超え、かつＭＭＡ／ＨＥＭＡが０．５２よりも小さいと、濾過直後に微粒子が発生し血液品質上好ましくない結果となった。

〔比較例３〕
各重合モノマーの仕込み比をＭＭＡ３０モル％、ＤＭ１０モル％、ＨＥＭＡ６０モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが３０モル％、、ＤＭが１０モル％、ＨＥＭＡが６０モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．５０であり、重量平均分子量Ｍｗは３１万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．８ｗ／ｖ％にてポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１８ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は３．８５Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後１２３個／μＬ、濾過後４２日保存後２８６５４個／μＬ、異常プリオン除去性能は３．２Ｌｏｇであった。
塩基性含窒素部分を含む重合成モノマーの共重合組成が５％を超え、かつＭＭＡ／ＨＥＭＡが０．５２よりも小さいと、濾過保存後に微粒子が発生し血液品質上好ましくない結果となった。

〔比較例４〕
各重合モノマーの仕込み比をＭＭＡ４０モル％、ＤＭ５モル％、ＨＥＭＡ５５モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが４２モル％、、ＤＭが５モル％、ＨＥＭＡが５３モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．７９であり、重量平均分子量Ｍｗは２７万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．５ｗ／ｖ％にてポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１０ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は５．２６Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後９５個／μＬ、濾過後４２日保存後２５３１６個／μＬ、異常プリオン除去性能は３．９Ｌｏｇであった。
塩基性含窒素部分を含む重合成モノマーの共重合組成が５％、かつＭＭＡ／ＨＥＭＡが０．６７よりも大きいと、濾過保存後に微粒子が発生し血液品質上好ましくない結果となった。

〔比較例５〕
各重合モノマーの仕込み比をＭＭＡ４０モル％、ＤＭ１３モル％、ＨＥＭＡ６７モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが４０モル％、、ＤＭが１３モル％、ＨＥＭＡが４７モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．８５であり、重量平均分子量Ｍｗは１９万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．５ｗ／ｖ％にてポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１０ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は４．８３Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後１７４８８個／μＬ、濾過後４２日保存後６９９５３個／μＬ、異常プリオン除去性能は３．３Ｌｏｇであった。
塩基性含窒素部分を含む重合成モノマーの共重合組成が５％を超え、かつＭＭＡ／ＨＥＭＡが０．６７よりも大きいと、濾過保存後に微粒子が発生し血液品質上好ましくない結果となった。

〔比較例６〕
各重合モノマーの仕込み比をＤＭ３モル％、ＨＥＭＡ９７モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＤＭが３モル％、ＨＥＭＡが９７モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．００であり、重量平均分子量Ｍｗは５５万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．５ｗ／ｖ％にて、ポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、８ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は５．１１Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後１１８個／μＬ、濾過後４２日保存後１３０個／μＬ、異常プリオン除去性能は０．８Ｌｏｇであった。
塩基性含窒素部分を含む重合成モノマーの共重合組成が５モル％未満となり、ＭＭＡ／ＨＥＭＡが０．５２よりも低いと異常プリオンの吸着が減少し、異常プリオンの除去性能が低下する結果となった。

〔比較例７〕
各重合モノマーの仕込み比をＭＭＡ３０モル％、ＤＭ３モル％、ＨＥＭＡ６７モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが３０モル％、、ＤＭが３モル％、ＨＥＭＡが６７モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．４５であり、重量平均分子量Ｍｗは２０万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．５ｗ／ｖ％にてポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１０ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は４．８８Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後１０７個／μＬ、濾過後４２日保存後１２５個／μＬ、異常プリオン除去性能は０．５Ｌｏｇであった。
塩基性含窒素部分を含む重合成モノマーの共重合組成が５モル％未満となり、ＭＭＡ／ＨＥＭＡが０．５２よりも低いと異常プリオンの吸着が減少し、異常プリオンの除去性能が低下する結果となった。

〔比較例８〕
各重合モノマーの仕込み比をＭＭＡ３５モル％、ＤＭ２モル％、ＨＥＭＡ６３モル％として実施例１と同様の条件で重合、精製、乾燥した。ポリマーの共重合組成を^１Ｈ−ＮＭＲにて測定した。ポリマー中の共重合組成は、ＮＭＡが３５モル％、ＤＭが２モル％、ＨＥＭＡが６３モル％であった。ＭＭＡ／ＨＥＭＡは０．５６であり、重量平均分子量Ｍｗは１４万であった。コーティング溶媒としてエタノールを用いポリマー濃度０．５ｗ／ｖ％にてポリエステル製不織布Ｂにコーティングを行った。ポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量は、１０ｍｇ／ｍ^２であった。上述の方法で白血球除去性能試験、濾過保存後の微粒子数試験と異常プリオン除去性能試験を行ったところ、白血球除去性能は４．９７Ｌｏｇ、微粒子は濾過直後１２５個／μＬ、濾過後４２日保存後１４４個／μＬ、異常プリオン除去性能は１．５Ｌｏｇであった。

実施例と比較例の結果を表１に示す。

表１中、「分子量」は重量平均分子量（Ｍｗ）を表し、「存在量」はポリマーの担体全表面積単位面積あたりの存在量を表す。

本発明に係る除去フィルターは、血液製剤から凝集物、白血球、異常プリオン等の好ましくない成分を除去できる。したがって、上記除去システムは、濾過保存後製剤中の品質を維持する方法、血液製剤から白血球と同時に異常プリオンを除去する方法に使用することができる。これらの除去フィルター及び方法は、白血球による輸血副作用の防止、さらには輸血医療の現場で異常プリオンによる伝播性海綿状脳症（ＴＳＥ）の輸血感染の防止に有用である。

１…血液製剤のバック、２…回路、３…除去フィルター、４…濾過後の血液製剤を回収するバック。

Claims

除去フィルターに血液製剤を通液する工程を備える、血液製剤中の白血球及び異常プリオンの除去方法であって、
前記除去フィルターが、血液の入口及び出口を有する容器と、該容器に充填された担体とを備え、
前記担体が、基材と、該基材の表面に固着したコート剤とを有し、
前記コート剤が、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー由来のユニットと、疎水性重合性モノマー由来のユニットと、プロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマー由来のユニットと、から構成され、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー由来のユニットのモル分率が３モル％以上５モル％以下であり、かつプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマー由来のユニットに対する疎水性重合性モノマー由来のユニットのモル比が０．５２〜０．６７であるポリマーからなる、除去方法。
濾過後４２日保存後の血液製剤中の微粒子発生個数が２００個以下である、請求項１に記載の除去方法。
血液製剤を濾過したときの、
白血球除去性能が４Ｌｏｇ以上であり、異常プリオン除去性能が３Ｌｏｇ以上であり、かつ濾過後血液製剤中の微粒子発生個数が２００個以下である、請求項１又は２に記載の除去方法。
前記ポリマーがビニル系ポリマーである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の除去方法。
前記疎水性重合性モノマー、塩基性含窒素部分を含む重合性モノマー及びプロトン性中性親水性部分を含む重合性モノマーが、いずれもアクリル酸誘導体又はメタアクリル酸誘導体である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の除去方法。
前記塩基性含窒素部分が３級アミノ基である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の除去方法。
前記プロトン性中性親水性部分が水酸基である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の除去方法。
前記基材が繊維状媒体であり、
前記担体の前記容器への充填密度が０．１ｇ／ｃｍ^３以上０．５ｇ／ｃｍ^３以下である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の除去方法。
前記基材が繊維状媒体又はスポンジ状構造物である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の除去方法。
基材の比表面積が１．０ｍ^２／ｇ以上５．０ｍ^２／ｇ以下である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の除去方法。
基材の平均孔径が１μｍ以上６０μｍ以下である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の除去方法。
基材の空隙率が６５％以上９０％以下である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の除去方法。
前記基材が不織布である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の除去方法。
前記不織布の平均繊維径が０．３μｍ以上３．０μｍ以下である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の除去方法。
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の除去方法に用いられる白血球及び異常プリオンの除去フィルター。
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の除去方法に用いられる担体。
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の除去方法に用いられる白血球及び異常プリオンを吸着するコート剤。