JP2005162685A - 抗血栓用組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】 現在、血栓症を解決するために、血栓の生成を抑制する抗血栓剤及び血栓形成予防剤と、生成された血栓を溶解させる血栓溶解剤の研究開発が主に行われているが、特異性がないため、生体内においては血栓以外の部分にも影響を及ぼし、生体内に残存した場合、出血等を引き起こす可能性がある。そこで最近では、医薬品による治療よりは食生活を通じて病気を予防し、体質を調節又は活性化させる機能を持った成分又は食品成分に対する研究も注目されているが、風味や性状等に問題があるために幅広い飲食品に使用できなかったり、実用域の活性が弱いなどの問題があった。本発明は、幅広い飲食品に使用可能な抗血栓用組成物及びそれを含有する飲食品を提供することを目的とする。
【解決手段】 茶の抽出物を含有することにより上記課題を解決する。
【選択図】 なし

Description

本発明は、茶抽出物を含有する抗血栓用組成物及びそれを含有する飲食品に関する。

血栓は、フィブリノーゲンというタンパク質が活性化され、フィブリンに転換されながら、血小板、白血球等と共に、不溶性の重合体となって血管の内壁に固まってできる。身体が正常なときには、この血栓のもととなるフィブリンを溶かす働きをする線溶酵素が血栓予防をして、線溶酵素が不足するとフィブリンを溶解できなくなり、血栓ができるようになる。
形成された血栓は血管に沈着し、血管の断面積を減少させ、血液の循環を阻害し、その結果、血液が細胞及び組職で栄養分と酸素を正常に供給することができず、また、細胞及び組織の老廃物を排出できなくなり、毒性が蓄積される等の問題点が発生するようになる。
血管の中で、血栓といわれる血液の固まりが引き起こす症状を広義の血栓症（以下、単に「血栓症」と記載した場合は、広義の血栓症をいう）と呼び、血栓が原因になって起こる病態は狭義の血栓症と塞栓症に分けられる。狭義の血栓症は血栓が形成個所で血流を部分的にあるいは完全に閉塞することによる症状で、塞栓症は血栓が形成個所から剥がれて血流によって移動し、他の個所で血流を部分的にあるいは完全に閉塞することによって起こる病態のことを指す。
このような血栓症は血栓が生じた血管の部位によって多様な疾病を誘発するようになる。その中でも特に脳血管や心臓血管に生じた場合には脳卒中、脳出血、脳梗塞、心不全症、心筋梗塞、心臓麻痺等深刻な症状が発生し、半身不随を引き起こし、ひどい場合には死亡することもある。

現在、血栓症を解決するために、血栓の生成を抑制する抗血栓剤及び血栓形成予防剤と、生成された血栓を溶解させる血栓溶解剤の研究開発が主に行われている。
抗血栓剤又は血栓形成予防剤としては、血管壁への血小板の付着を阻害することで血液の凝固を阻害するアスピリンと、体内の内因性血液凝固経路を遮断するヘパリン（Ｈｅｐａｒｉｎ）、クマリン（Ｃｏｕｍａｒｉｎ）等が現在臨床で使われている。また最近はエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、プロスタサイクリン（Ｐｒｏｓｔａｃｙｃｌｉｎｅ；ＰＧ１２）誘導体等が商品化されている。しかし、これら薬剤は特異性がないため、生体内においては血栓以外の部分にも影響を及ぼし、生体内に残存した場合、出血等を引き起こす可能性がある。その他に、ヒルジン（ｈｉｒｕｄｉｎ）、合成抗トロンビン（ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎ）、チクロピジン（Ｔｉｃｌｏｐｉｄｉｎ）等の抗血栓活性についても報告されているが、まだ実用化には至っていない。
血栓溶解剤としては、ストレプトキナーゼ（ｓｔｒｅｐｔｏｋｉｎａｓｅ）、ウロキナーゼ（ｕｒｏｋｉｎａｓｅ）のようなプラスミノゲンアクチベーター（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ）を血栓が生成された患者に静脈注射して、体内の血栓溶解系を活性化する治療法が一般的に使われている。これらが血栓を溶解させる効果は、幾多の臨床実験で立証されたが、抗血栓剤又は血栓形成予防剤と同様、血栓に対する特異性が無く、血栓を治療する間に全身出血する等の副作用がある。また組職型プルラスミノゲンアクチベーター（ｔｉｓｓｕｅ−ｔｙｐｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ，ｔＰＡ）は血栓に対する選択性が高く、理想的な血栓溶解剤と考えられたが、実際に臨床治療に適用した結果、程度の差はあるが相変らず全身出血等の副作用があった。また血液内での半減期が非常に短く、薬効の持続時間が短いため、体内で薬効を維持するためには投与量が多くなければならず、そのため治療費用が従来の血栓溶解剤に比べ非常に高いという問題点がある。

このような医薬品が血栓の生成予防に使用されてはいるものの、血栓除去にあまり著しい効果を現わすことが無く、深刻な副作用を誘発するため、最近では、医薬品による治療よりは食生活を通じて病気を予防し、体質を調節又は活性化させる機能を持った成分又は食品成分に対する研究も注目されるようになってきている。
食品成分としては、ナットウキナーゼや多価不飽和脂肪酸、グルコサミン、タマネギの薄皮（例えば、特許文献１参照。）等の素材が知られているが、風味や性状等に問題があり、幅広く食品に応用できなかった。
また、最近では、キウイフルーツ抽出物（例えば、特許文献２参照。）についての特許が公開されたが、中性域での活性が弱いという欠点がある。

特開２００２−１７１９３４号公報（第２頁） 特開２００３−１７１２９４号公報（第２−５頁）

本発明の課題は、幅広い飲食品に使用可能な抗血栓用組成物及びそれを含有する飲食品を提供することにある。

本発明者らは様々な天然植物を利用して抗血栓成分を捜す目的で、多角的に研究検討した結果、茶の抽出物に優れた抗血栓効果があることを見出し、本発明を完成させた。

本発明で得られた茶の抽出物を含有する抗血栓用組成物は、活性化部分トロンボプラスチン時間（Ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｐａｒｔｉａｌ Ｔｈｒｏｍｂｏｐｌａｓｔｉｎ Ｔｉｍｅ；ＡＰＴＴ）を測定した結果から、内因性経路に関与する因子を不活性化して、フィブリン形成を阻害し、血管内の血栓生成を抑制する効果が高いことがわかった。
特に茶は、昔から人間が日常食生活に使用してきた天然植物由来なので、従来使用していた薬剤とは違い、体内で出血を起こす副作用が無く安全である。
本発明は茶抽出物を含有する抗血栓用組成物を各種飲食品及び医薬品等に利用して、血栓の生成を抑制することで脳出血、脳梗塞、心筋梗塞、動脈硬化及び冠状動脈症のような心血関係疾患を予防することができる。

本願発明に用いる茶とは、特に限定するものではなく、植物学的にはツバキ科植物の葉より製造される不発酵茶である緑茶、半発酵茶である烏龍茶、発酵茶である紅茶が挙げられる。それらの中で、効果の点より好ましくは不発酵茶である緑茶を用いるのがよい。

本発明の茶抽出物は、渋み成分であるポリフェノール類が低減されていることが風味の点より好ましい。
渋み成分であるポリフェノールを除去する方法としては抽出液にポリビニルポリピロリドンを添加する方法（特開平１−２１８５５０号）や凍結濃縮により脱水された水と一緒にポリフェノールを除去する方法（特開２００２−３２５５３９）等が一般に知られており利用可能である。
本発明におけるポリフェノール含量の測定方法については特に限定されることはないが、例えば酒石酸鉄比色法、フォーリンチオカルト法が挙げられ、好ましくは酒石酸鉄比色法が望ましい。ポリフェノール含量は、味の面より茶抽出物の固形分中１５％以下であることが好ましく、更に好ましくは、１０％以下である。

ここで、例えば、ポリフェノール類の採取を目的とした場合にあっては、茶の水又は熱水抽出物からポリフェノール類を抽出した後の残渣が、まさに本発明の「ポリフェノール類を低減させた茶抽出物」に該当する。なお、ポリフェノール類は特定の有機溶媒に溶解しやすい性質を有しているため、例えば特定の有機溶媒を用いて分画を行ったときには大部分が有機溶媒側（非水溶性画分）に溶解し、水画分には殆ど含まれなくなる。つまり、茶葉又は茶葉を粉砕したものを、水又は熱水で抽出し、それを酢酸エチル、アセトン等の溶媒に分配した際の水移行画分より得たものである。また、近年においては、ポリフェノール類の有する種々の機能性に鑑みてポリフェノール類の利用度が高まってきており、茶の熱水抽出物からポリフェノール類を抽出した後の成分はいわば副産物（又は残渣）として取り扱われ、殆ど有効利用されずにそのまま廃棄されていた。その点、本発明によると、これまで有効利用されずに廃棄されていた成分の有効利用が図られるため、茶の熱水抽出物を余すことなく利用できるようになり、経済性の向上及び廃棄物排出量の低減にもつながるという利点もある。

また、本発明の茶抽出物は、凝血の原因となるプロトロンビン及びフィブリノーゲンの血中濃度を増加させる働きがあるカフェインが低減されていることが好ましい。
カフェインを除去する方法としては酸性白土を使用する方法（特開平０６−１４２４０５号）や活性炭を使用する方法（特開平０８−０７０７７２号）、合成吸着剤を使用する方法（特開平０８−１０９１７８号）等が一般に知られており利用可能である。
カフェインの測定方法については特に限定されるものではないが例えば高速液体クロマトグラフイーが挙げられる。カフェイン含量は、茶抽出物の固形分中、２％以下であることが好ましく、更に好ましくは１％以下である。

前述の茶の熱水抽出物の酢酸エチル又はアセトンによる分配品の水画分より分離する方法はポリフェノールと同時に、カフェインを低減することができるため好ましい。

更に、上記の抽出において、抽出残渣に対して再度抽出工程を１回又はそれ以上繰り返すことで、抽出率が向上するので、好ましい。この場合の抽出に用いる溶媒は、同じでも良いし、別の溶媒を用いても良い。

上記の抽出物は、そのままでも使用できるが、濾過や遠心分離により、不溶性物質を取り除くことにより、抗血栓効果が高くなり、応用範囲も広がるので好ましい。
不溶性物質を取り除いた後、抽出液にエタノールを加えて得られる沈殿物を回収したものは、更に抗血栓効果が高くなるので好ましい。エタノールの濃度としては、特に限定するものではないが、収率及び効果の点より、終濃度として１０〜５０％が好ましく、１５〜４５％が更に好ましい。
抽出物はそのままでの使用も可能だが、必要であれば乾燥させて使用することも可能である。

本願発明における抗血栓とは、特に限定されるものではないが、好ましくは、血栓の生成を抑制する作用（抗凝固作用）のことである。
本願発明における抗血栓効果の測定は、特に限定されるものではないが、例えば、内因性血液凝固システムに対する、抗凝固活性を測定する方法が挙げられ、活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）を測定することにより確認することができる。

本願発明の抗血栓用組成物は、飲食品、医薬品、飼料等に応用でき、好ましくは、人が手軽に摂食できる飲食品が好ましい。
本願発明における飲食品とは溶液、懸濁物、粉末、固体成形物等経口摂取可能な形態であれば良く特に限定するものではない。より具体的には、即席麺、レトルト食品、缶詰、電子レンジ食品、即席スープ・みそ汁類、フリーズドライ食品等の即席食品類、清涼飲料、果汁飲料、野菜飲料、豆乳飲料、コーヒー飲料、茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、栄養飲料、アルコール飲料等の飲料類、パン、パスタ、麺、ケーキミックス、から揚げ粉、パン粉等の小麦粉製品、飴、キャラメル、チューイングガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、デザート菓子等の菓子類、ソース、トマト加工調味料、風味調味料、調理ミックス、たれ類、ドレッシング類、つゆ類、カレー・シチューの素類等の調味料、加工油脂、バター、マーガリン、マヨネーズ等の油脂類、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料、アイスクリーム類、クリーム類等の乳製品、冷凍食品、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品等の水産加工品、畜肉ハム・ソーセージ等の畜産加工品、農産缶詰、ジャム・マーマレード類、漬け物、煮豆、シリアル等の農産加工品、栄養食品、錠剤、カプセル等が例示される。

本願発明において、抗血栓用組成物又は、飲食品等に加工する際に、各種栄養成分を強化することができる。
強化できる栄養成分としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ_１、ビタミンＢ_２、ビタミンＢ_６、ビタミンＢ_１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ナイアシン（ニコチン酸）、パントテン酸、葉酸等のビタミン類、リジン、スレオニン、トリプトファン等の必須アミノ酸類や、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅等のミネラル類及び、例えば、α−リノレン酸、ＥＰＡ、ＤＨＡ、月見草油、オクタコサノール、カゼインホスホペプチド（ＣＰＰ）、カゼインカルシウムペプチド（ＣＣＰ）、水溶性食物繊維、不溶性食物繊維、オリゴ糖等の人の健康に寄与する物質類、その他の食品や食品添加物として認可されている有用物質の１種又は２種以上が使用できる。

以下本発明を、実施例にて詳細に説明するが、次の実施例は、本発明の範囲を限定するものではない。

（実施例１）抗血栓用組成物の調製１
緑茶葉を１ｋｇに対して熱水１５ｋｇを加え、９０℃で３０分間抽出し、茶殻を除くためにろ過した後、そのろ過液１２ｋｇに酢酸エチル１２ｋｇを加えて振とうし、静置、分配した。その水画分を分取、減圧下（０．０６７ｍｐａ）で脱溶媒の後、噴霧乾燥し、本願発明の抗血栓用組成物Ａを１１０ｇ得た。
このもののポリフェノール含量は９．２％、カフェイン含量は０．７％であった。

（試験例１）抗血栓効果の確認
本願発明の抗血栓用組成物の抗凝固活性を、人間の血液から分離した乏血小板血漿（Ｐｌａｔｅｌｅｔ Ｐｏｏｒ Ｐｌａｓｍａ，ＰＰＰ）を利用して凝固計（Ｃｏａｇｕｌｏｍｅｔｅｒ）で測定した。
反応キュベットに、試料１０マイクロリットル、ＡＰＴＴ試薬２５マイクロリットル、１０％セファリン２５マイクロリットルを入れて、３７℃で３分間反応させた後、ＰＰＰ５０マイクロリットルを入れて、２分間反応させた。最後に、２５ミリモル塩化カルシウム５０マイクロリットルを入れて、凝固させて、血漿が凝固されるまでの時間を測定し、ＡＰＴＴとした。
この時、対照に水を入れ、同じ方法でＡＰＴＴを測定した。測定された試料のＡＰＴＴから、下記の数式によって、対照に対する抗凝固活性（％）を計算した。
抗凝固活性（％）＝（（試料のＡＰＴＴ−対照のＡＰＴＴ）／対照のＡＰＴＴ）×１００
本願発明の抗血栓用組成物の濃度と、抗凝固活性との関係を確認するために、固形分濃度として、０（コントロール）、１、３、５ｍｇ／ｍｌの本願発明の抗血栓用組成物を使用して、その活性を測定した。その結果を、下記表１に示す。

表１

上記表１の結果により、本願発明の抗血栓用組成物が高い抗凝固活性を示すことが確認できた。また抽出物の濃度を増加させることによって比例的に抗凝固活性も増加することが確認できた。

（実施例２）抗血栓用組成物の調製２
実施例１で得られた抗血栓用組成物Ａ１００グラムに、水２リットルを加えて溶解し、エタノールを加え、２．２２リットルになるように調製（最終エタノール濃度２０％）した後、室温で２４時間静置して、不溶性成分を沈殿させた。沈澱物を、遠心分離で分離し、減圧乾燥後、水２リットルに再溶解し、濾過して不溶性成分除去後、濾液を凍結乾燥して本願発明の抗血栓用組成物Ｂを２５ｇ（収率２５％）を得た。
同様にして、エタノールの終濃度が４０％、６０％、８０％にして、本願発明の抗血栓用組成物Ｃ，Ｄ，Ｅを得た。
ここで得られた抗血栓用組成物Ｂ〜Ｅのポリフェノール含量はそれぞれ、Ｂ：１．１％、Ｃ：１．５％、Ｄ：１．８％、Ｅ：２．３％であり、カフェイン含量はそれぞれ、Ｂ：０．１％、Ｃ：０．３％、Ｄ：０．４％、Ｅ：０．５％であった。

（試験例２）抗血栓効果の確認
実施例２で得られた抗血栓用組成物Ｂ〜Ｅについて、５ｍｇ／ｍｌの濃度で、ＡＰＴＴを測定した。その結果を表２に示した。

表２

上記表２の結果により、エタノール濃度が４０％の時が最も抗血栓効果が高いことがわかった。

（実施例３）抗血栓用組成物含有食品（錠菓）の調製
実施例２で得られた抗血栓用組成物Ｂ ５０ｇ、乳糖３０ｇ、ＤＨＡ含有粉末油脂（サンコートＤＹ−５；太陽化学株式会社製）１２ｇ、ショ糖脂肪酸エステル４ｇ、ヨーグルト香料４ｇを混合し、１錠が３００ｍｇになるように打錠して、本願発明の抗血栓用組成物含有飲食品（錠菓）を得た。

（実施例４）抗血栓用組成物含有飲料（野菜果汁混合飲料）の調製
実施例２で得られた抗血栓用組成物Ｂ １ｇ及び、グアーガム分解物（サンファイバーＲ；太陽化学株式会社製）３ｇを市販の野菜果汁混合飲料１００ｍｌに添加混合溶解して、本願発明の抗血栓用組成物含有飲食品（野菜果汁混合飲料）を得た。

本発明の実施態様ならびに目的生成物を挙げれば以下の通りである。
（１） 茶の抽出物を含有することを特徴とする抗血栓用組成物。
（２） 茶の抽出物が、ポリフェノール類を低減させた茶抽出物であることを特徴とする前記（１）記載の抗血栓用組成物。
（３） 茶の抽出物中のポリフェノール類含量が、茶抽出物の固形分中１５％以下であることを特徴とする前記（１）又は（２）記載の抗血栓用組成物。
（４） 茶の抽出物中のポリフェノール類含量が、茶抽出物の固形分中１０％以下であることを特徴とする前記（１）〜（３）いずれか記載の抗血栓用組成物。
（５） 茶の抽出物が、カフェインを低減させた茶抽出物であることを特徴とする前記（１）〜（４）記載の抗血栓用組成物。
（６） 茶の抽出物中のカフェイン含量が、茶抽出物の固形分中２％以下であることを特徴とする前記（１）〜（５）いずれか記載の抗血栓用組成物。
（７） 茶の抽出物中のカフェイン含量が、茶抽出物の固形分中１％以下であることを特徴とする前記（１）〜（６）いずれか記載の抗血栓用組成物。
（８） ポリフェノール類及び／又はカフェインを低減させた茶抽出物が、茶の熱水抽出物の酢酸エチルによる分配品の水画分であることを特徴とする前記（２）〜（７）いずれか記載の抗血栓用組成物。

（９） 茶の抽出物が、ポリフェノール類及び／又はカフェインを低減させた茶抽出物を更に、エタノールで分画されていることを特徴とする前記（１）〜（８）記載の抗血栓用組成物。
（１０） エタノールで分画する際のエタノール濃度が、終濃度として１０〜５０％であり、その沈殿画分であることを特徴とする前記（１）〜（９）いずれか記載の抗血栓用組成物。
（１１） エタノールで分画する際のエタノール濃度が、終濃度として２０〜４０％であり、その沈殿画分であることを特徴とする前記（１）〜（１０）いずれか記載の抗血栓用組成物。
（１２） 前記（１）〜（１１）いずれか記載の抗血栓用組成物を含有することを特徴とする飲食品。
（１３） 前記（１）〜（１１）いずれか記載の抗血栓用組成物を含有することを特徴とする医薬品。
（１４） 前記（１）〜（１１）いずれか記載の抗血栓用組成物を含有することを特徴とする飼料。

本発明で得られた茶の抽出物を含有するの抗血栓用組成物は、血液凝固体系の内因性経路に関与する、多くの酵素と最終段階であるフィブリンを形成するトロンビンの活性を阻害し、血栓の生成を抑制する抗血栓効果が高く、各種飲食品及び医薬品等に利用して、血栓の生成を抑制することで脳出血、脳梗塞、心筋梗塞、動脈硬化及び冠状動脈症のような心血関係疾患を予防することができる。

Claims (5)

1. 茶の抽出物を含有することを特徴とする抗血栓用組成物。
2. 茶の抽出物が、ポリフェノール類を低減させた茶抽出物であることを特徴とする請求項１記載の抗血栓用組成物。
3. 茶の抽出物が、カフェインを低減させた茶抽出物であることを特徴とする請求項１又は２記載の抗血栓用組成物。
4. 茶の抽出物が、ポリフェノール類及び／又はカフェインを低減させた茶抽出物を更に、エタノールで分画された沈殿物であることを特徴とする請求項１〜３いずれか記載の抗血栓用組成物。
5. 請求項１〜４いずれか記載の抗血栓用組成物を含有することを特徴とする飲食品。