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JP2003532404A - ビルレンス遺伝子、タンパク質およびそれらの使用 - Google Patents

ビルレンス遺伝子、タンパク質およびそれらの使用

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JP2003532404A
JP2003532404A JP2001582371A JP2001582371A JP2003532404A JP 2003532404 A JP2003532404 A JP 2003532404A JP 2001582371 A JP2001582371 A JP 2001582371A JP 2001582371 A JP2001582371 A JP 2001582371A JP 2003532404 A JP2003532404 A JP 2003532404A
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JP
Japan
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peptide
microorganism
meningitidis
therapeutic
identity
Prior art date
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Application number
JP2001582371A
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English (en)
Inventor
クリストフ タン，
Original Assignee
マイクロサイエンス リミテッド
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Filing date
Publication date
Application filed by マイクロサイエンス リミテッド filed Critical マイクロサイエンス リミテッド
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Abstract

(57)【要約】 髄膜炎菌Neisseria meningitidisの一連の遺伝子は、ビルレンスに関与する生成物をコードすることが示されている。したがってこれらの遺伝子の同定は、弱毒化微生物を生産することを可能にする。さらに遺伝子またはそれらのコード生成物は、治療的用途のためのワクチンの製造に用いることが出来る。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 （技術分野） 本発明は、ビルレンス遺伝子およびタンパク質ならびにそれらの使用に関する
。特に本発明は、髄膜炎菌Neisseria meningitidisから得られる遺伝子およびタ
ンパク質／ペプチド、ならびに治療におけるそして薬剤のスクリーニングにおけ
るそれらの使用に関する。
【０００２】 （発明の背景） 髄膜炎菌は、敗血症性ショックおよび細菌性髄膜炎に関与するグラム陰性細菌
病原体である。この細菌は、先進国における細菌性髄膜炎の主因であり、アフリ
カおよび中国において大規模流行を引き起こす。英国では、髄膜炎菌は、交通事
故を除いては、小児期における死亡の主因である。当該細菌は、天然にはヒトの
鼻咽頭に棲息し、その後血流に入り、そこから重症敗血症または髄膜炎を引き起
こす。最新の抗菌薬は身体から細菌を排除するのに有効であるが、しかし髄膜炎
菌性敗血症による死亡は依然として多大である。例えば免疫感作により、髄膜炎
菌により引き起こされる症状を治療または予防するための手段を提供することが
望ましい。
【０００３】 （発明の要約） 本発明は、髄膜炎菌におけるビルレンス遺伝子の発見に基づいている。
【０００４】 本発明の第一の局面によれば、本発明のペプチドは、治療的または診断的使用
のための、請求項１で同定されたヌクレオチド配列のいずれかまたはグラム陰性
細菌におけるその相同体のいずれかまたはその機能的断片のいずれかを含むオペ
ロンによりコードされる。
【０００５】 ペプチドは、ナイセリア感染症を治療するための多数の治療的使用、例えば予
防的適用のためのワクチン中での使用を有し得る。
【０００６】 第二の局面によれば、前記のペプチドをコードするポリヌクレオチドも、治療
または診断に有用であり得る。
【０００７】 第三の局面によれば、ペプチドをコードする遺伝子は、弱毒化微生物を調製す
るために利用され得る。弱毒化微生物は、ビルレンスを欠く菌株を提供するため
に、通常は本明細書中で同定された１つまたはそれ以上の遺伝子の発現を阻害す
る突然変異を有する。これらの微生物も、治療および診断における使用を有する
。
【０００８】 第四の局面によれば、本発明のペプチド、遺伝子および弱毒化微生物は、ナイ
セリアまたはグラム陰性細菌による感染に関連した症状の治療または予防に用い
られ得る。
【０００９】 （発明の説明） 本発明は、ビルレンスに関与するペプチドをコードする遺伝子の発見に基づい
ている。したがって本発明のペプチドおよび遺伝子は、感染症を治療するための
治療薬の調製のために有用である。治療に対する参照は、予防的処置、例えばワ
クチン接種も包含する、と理解されるべきである。さらに本発明の生成物は主と
してヒト患者における感染症の治療のために意図されるが、しかし獣医学的用途
も本発明の範囲内であると考えられる。
【００１０】 髄膜炎菌を参照しながら、本発明を説明する。しかしながらすべてのナイセリ
ア菌株および多数のその他のグラム陰性際菌株は、本明細書中で同定されたもの
とアミノ酸配列同一性または類似性を有する関連ペプチドまたはタンパク質を包
含すると思われる。当該ペプチドを含有すると思われる生物体としては、サルモ
ネラ属、エンテロバクター属、クレブシエラ属、シゲラ属およびエルシニア属が
挙げられるが、これらに限定されない。
【００１１】 実験を実行して、本発明で利用している髄膜炎菌Ｂ株のビルレンス遺伝子を同
定した。相同性検索は、Ａ株データベースにおいて実施されたが、しかしながら
Ｂ株からのタンパク質および遺伝子が好ましい。
【００１２】 好ましくは本発明の種々の局面で有用であり得るペプチドは、本明細書中で同
定されたペプチドと４０％より大きい類似性を有する。さらに好ましくは、ペプ
チドは６０％より大きい配列類似性を有する。最も好ましくは、ペプチドは８０
％より大きい配列類似性、例えば９５％類似性を有する。本明細書中で同定され
たポリヌクレオチド配列に関しては、本発明の種々の局面で有用であり得る関連
ポリヌクレオチドは、本明細書中で同定された配列と４０％より大きい同一性を
有し得る。さらに好ましくは、ポリヌクレオチド配列は、６０％より大きい配列
同一性を有する。最も好ましくは、ポリヌクレオチド配列は、８０％より大きい
配列同一性、例えば９５％同一性を有する。
【００１３】 「類似性」および「同一性」という用語は、当業界で既知である。「同一性」
という用語の使用は、比較されている配列中の相対的に同一位置間の同一適合性
に基づいた配列比較を指す。「類似性」という用語は、アミノ酸配列間の比較を
指し、対応する位置における同一アミノ酸だけでなく、対応する位置における機
能的に類似のアミノ酸も考慮に入れる。したがってポリペプチド配列間の類似性
は、配列類似性のほかに、機能的類似性を示す。
【００１４】 遺伝子配列間の同一性のレベルおよびアミノ酸配列間の同一性または類似性の
レベルは、既知の方法を用いて算定され得る。本発明に関連して、同一性および
類似性を確定するための公的に利用可能なコンピューターに基づく方法としては
、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮおよびＦＡＳＴＡ（Atschul et al., J. Molec.
Biol., 1990; 215:403-410）、ＮＣＢＩから利用可能なＢＬＡＳＴＸプログラム
およびGenetics Computer Group, Madison WIからのＧａｐプログラムが挙げら
れる。本明細書中で提供される類似性および同一性のレベルは、Ｇａｐプログラ
ムを用いて得られ、アミノ酸配列比較の確定に関してはＧａｐペナルティー１２
およびＧａｐ長ペナルティー４を、ポリヌクレオチド配列比較に関してはＧａｐ
ペナルティー５０およびＧａｐ長ペナルティー３を使用した。
【００１５】 本発明の遺伝子を特性化すれば、他の微生物において関連遺伝子またはペプチ
ドを検索するために当該遺伝子配列を用いることができる。これは、既存のデー
タベース、例えばＥＭＢＬまたはＧｅｎＢａｎｋでの検索により実行され得る。
【００１６】 本発明のペプチドまたはタンパク質は、当業界で既知の方法により精製し、単
離され得る。特に、遺伝子配列を同定すれば、組換え技法を用いて適切な宿主中
で遺伝子を発現できる。活性断片および関連分子が同定され得るし、治療に有用
であり得る。例えばペプチドまたはそれらの活性断片は、免疫応答を誘導するた
めに、ワクチン中で抗原決定基として用いられ得る。それらは、抗体の調製に、
受動的免疫感作のために、または診断的用途にも用いられ得る。適切な抗体とし
ては、モノクローナル抗体またはその断片、例えば一本鎖Ｆｖ断片が挙げられる
。抗体の調製方法は、当業者には明らかである。
【００１７】 ペプチドの活性断片は、ペプチドの生物学的機能を保有するものである。例え
ば免疫応答を誘導するために用いられる場合、断片から生成される抗体が細菌微
生物においてそのペプチドと他のペプチドを区別するよう、断片は十分なサイズ
を有する。典型的には断片は少なくとも３０ヌクレオチド（１０アミノ酸）のサ
イズであり、好ましくは６０ヌクレオチド（２０アミノ酸）、最も好ましくは９
０ヌクレオチド（３０アミノ酸）より大きいサイズである。
【００１８】 他の微生物からの関連分子のほかに、本発明は、本明細書中で同定されたペプ
チドおよびポリヌクレオチドになされる、生物学的機能を有意に変更しない修飾
を包含する、とも理解されるべきである。遺伝暗号の縮退は本明細書中に特定さ
れたものからの小塩基変化を有するが、しかしそれにもかかわらず同一ペプチド
をコードするポリヌクレオチドを生じ得る、ということは当業者には明らかであ
る。相補的ポリヌクレオチドも本発明の範囲内である。アミノ酸レベルでの保存
的置換も予見され、即ち異なる酸性または塩基性アミノ酸は、機能の実質的損失
を伴わずに置換され得る。
【００１９】 弱毒化微生物に基づいたワクチンの調製は、当業者に既知である。ワクチン組
成物は、必要な場合または要望があった場合、適切な担体またはアジュバント、
例えばミョウバンとともに処方されて、感染症に対する有効な免疫感作を提供す
る。ワクチン処方物の調製は、当業者には明らかである。弱毒化微生物は、本明
細書中で同定された遺伝子のいずれかの発現を阻害する突然変異を用いて調製さ
れ得る。当業者は特定の遺伝子の発現を阻害する方法を知っている。用いられ得
る技法としては、挿入的不活性化または遺伝子欠失技法が挙げられる。本発明の
弱毒化微生物はさらに、他の遺伝子中に、例えば本明細書中で同定された二次遺
伝子中に、または微生物の増殖に必要とされる別個の遺伝子中に、例としてａｒ
ｏ突然変異、サルモネラに関しては、ＷＯ−Ａ−９６／１７９５１で同定された
ＳＰ１２領域に位置する遺伝子中に、付加的突然変異を含み得る。
【００２０】 弱毒化微生物は、異種抗原、治療用タンパク質または核酸（ＤＮＡまたはＲＮ
Ａ）の送達のための担体系としても用いられ得る。この実施態様では、弱毒化微
生物は、異種抗原、タンパク質または核酸をin vivoで特定部位に送達するため
に用いられる。弱毒化微生物中への異種抗原、ペプチドまたは核酸の導入は、慣
用的技法により、異種抗原または治療用タンパク質を発現するポリヌクレオチド
を含み、そして適切なプロモーター配列も包含する組換え構築物、例えばベクタ
ーの使用により実行され得る。あるいは異種抗原またはタンパク質をコードする
遺伝子は、生物体のゲノム中に組入れられ得るし、内因性プロモーターは発現を
制御するために用いられ得る。
【００２１】 一般的に、そして当業者に周知のように、治療的使用のための、本発明の適量
の活性構成成分は、適切な担体または賦形剤、ならびに投与経路と同様に、選択
され得る。これらの因子は、治療される症状の性質／重症度、被験者の種類およ
び／または健康のような既知の判定基準によって選択され、確定され得る。
【００２２】 別個の実施態様では、本発明の生成物は考え得る抗菌薬の同定のために、また
はビルレンス検出のために、スクリーニング法に用いられ得る。慣用のスクリー
ニング法は当業者に既知であり、適切な方法で本発明の生成物を用いることによ
り適応され得る。例えば本発明の生成物は、考え得る薬剤に対する標的として用
いられ、薬剤の活性として標的を不活性化するかまたは標的と結合して考え得る
抗微生物活性を示す。
【００２３】 本発明の種々の生成物は、獣医学的用途にも用いられ得る。
【００２４】 以下は、ビルレンス遺伝子を同定するために用いられる実験手法の簡単な概要
である。
【００２５】 特徴標識突然変異誘発（ＳＴＭ）（Hensel et al., Science, 1995; 269: 400
-403）を用いて、敗血症感染症に不可欠である髄膜炎菌中の遺伝子を同定した。
ＳＴＭにおいては、個々の突然変異体は独特の配列確認物で標識して、多数の突
然変異体の同時分析を可能にする。しかしながら髄膜炎菌の研究における制限ま
では、挿入する突然変異体のライブラリーを構築する必要がある。Ｔｎ１０転位
の精製構成成分を用いてin vitroでナイセリアＤＮＡが修飾される方法の使用に
より、突然変異誘発を首尾よく成し遂げた。髄膜炎菌は外因性ＤＮＡを効率的に
取込むので、次に形質転換により修飾された対立遺伝子を髄膜炎菌中に導入する
。次に突然変異体は、全身性感染症を引き起こすそれらの能力に関してスクリー
ニングし得る。
【００２６】 ベクターｐＳＴＭ１１５（Sun et al. Nature Medicine, 2000; 6(11): 1269-
1273）を、in vitro突然変異誘発のためのトランスポゾン供与体として用いた。
各々独自の特徴標識を含有する９６のｐＳＴＭ１１５誘導体を、９６の別個の転
位反応に包含させた。修飾化ゲノムＤＮＡを修復し、形質転換により宿主に戻し
た。Ｔｎ１０挿入が種々の部位で起こるか否かを確定するために、サザンブロッ
ト分析により単一転位反応から、４０の形質転換体を査定した。各々が、単一の
異なるＴｎ１０挿入を有した。Ｔｎ１０組込みが幼仔ラットの全身性感染中安定
であるか否かを確立するために、ラットによる継代の前および後の６つの突然変
異体のハイブリダイゼーションパターンを比較した。感染前および後に同一ハイ
ブリダイゼーションパターンを得た。
【００２７】 用いた実験条件は、以下のようであった：
【００２８】 細菌株および増殖： Ｃ３１１＋は、侵襲性髄膜炎菌感染患者からのＥＴ−５、血清群Ｂ髄膜炎菌単
離物である（Virji et al., Mol. Microbiol., 1991; 5:1831-1841）。髄膜炎菌
を、５％レビンタールサプリメントを含有する脳心臓浸出物培地上で増殖させた
。大腸菌株は、ルリア−ベルタニ培地上で増殖させた。必要な場合には、髄膜炎
菌および大腸菌に関してそれぞれ、７５および５０μｇ／ｍｌの濃度で、固形培
地にカナマイシンを付加した。
【００２９】 in vitro転位および挿入部位特性化： ｐＳＴＭ１１５中の複製起点ｐＡＣＹＣ１８４を用いて、マーカー救援により
挿入部位を単離した。ヌクレオチドシーケンシングは、プライマーＮＧ６２（5'
-TTGGTTAATTGGTTGTAACACTGG-3'）（配列番号２０９）またはＮＧ９９（5'-ATTCT
CATGTTTGACAGCG-3'）（配列番号２１０）とともにダイターミネーション法（Per
kin Elmer, Norwalk, Connecticut）を用いて実行した。相同性検索は、タンパ
ク質データベース（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/）、例えば血清群ＡおよびＢ
髄膜炎菌ならびに淋菌ゲノム配列（それぞれhttp://sanger.ac.uk/Projects/N
_meningitidisおよびhttp://www.tigr.orgおよびhttp://dna1.chem.ou.edu/gono
.html）に対して実施した。
【００３０】 タグ増幅、クローニングおよびサザンブロット分析： Hensel et al.（上記）に記載されたように、ハイブリダイゼーションおよび
ドットブロットの調製を実施したが、但し、タグはプライマーＮＧ１３（5'-ATC
CTACAACCTCAAGCT-3'）（配列番号２１１）およびＮＧ１４（5'-ATCCCATTCTAACCA
AGC-3'）（配列番号２１２）を用いて増幅し、プラスミドＤＮＡよりむしろＰＣ
Ｒ産物が膜上に固定された。オリゴヌクレオチドＳ１（5'-AAGAGATTACGCGCAGACC
-3'）（配列番号２１３）およびＳ２（5'-AATACGCAACCGCCTCTC-3'）（配列番号
２１４）を、「特徴標識」と側面を接するｐＳＴＭ１１５中の配列とアニーリン
グさせ、各ｐＳＴＭ１１５誘導体からの３６７塩基対産物を増幅するために用い
た。サザンブロット分析に関しては、無作為プライマー法（ＮＥＢ）を用いてｐ
ＳＴＭ１１５からのカナマイシン耐性カセットを標識し、ＣｌａＩで消化された
ゲノムＤＮＡに対するプローブとして用いた。
【００３１】 動物モデル： ＳＴＭプールをスクリーニングするために、微量滴定プレート中で１８時間、
別々に突然変異体を増殖させた。細菌をプールし、次にＰＢＳ中に再懸濁した。
ウィスターWistarラット（５日齢）に１００μｌの懸濁液を腹腔内接種し、４８
時間モニタリングした。突然変異体の競合指数を確立するために、野生型および
突然変異体細菌を固形培地上で１８時間増殖させ、ＰＢＳ中に収集して、５ｘ１
０6ＣＦＵの総接種物中１：１比の突然変異体対野生型細胞をラットに接種した
。付加抗生物質を含有するまたは含有しない培地に反復試験試料をプレート化す
ることにより、突然変異（カナマイシン耐性）対野生型（カナマイシン感受性）
細菌の割合を確定した。
【００３２】 相同性検索の結果を表１に示す。
【００３３】
【表１】
【００３４】
【表２】
【００３５】 本明細書中で同定された残りの配列に関しては、相同性の結果は得られなかっ
た。
【００３６】 遺伝子産物を用いて、種々の髄膜炎菌株に対するＥＬＩＳＡ法で試験されたポ
リクローナル抗体を産生し、ワクチン候補としてのそれらの有効性を評価した。
用いた菌株は以下のとおりであった： １０００型（Ｂ）髄膜炎菌 ＮＧＥ３１型（Ｂ）髄膜炎菌 ＮＧＨ１５型（Ｂ）髄膜炎菌 ＳＷ２ １０７型（Ｂ）髄膜炎菌 ＮＨＧ３８型（Ｂ）髄膜炎菌 ＮＧＥ２８型（Ｂ）髄膜炎菌 ２９９６型（Ｂ）髄膜炎菌
【００３７】 これは、これらの抗体により認識される髄膜炎菌株の多様性に関する情報を提
供する。
【００３８】 ５％ＣＯ2中で３７℃で１４時間、チョコレート化ウマ血液（オキソイド）を
含有するコロンビア寒天上で髄膜炎菌を増殖させた。細胞を寒天プレートから掻
き取り、５０ｍｌ試験管中の２０ｍｌＰＢＳ中に再懸濁させた。細胞懸濁液を５
６℃で３０分間加熱して、細菌を殺害した。
【００３９】 加熱殺菌髄膜炎菌の５０μｌ試料をチョコレート化ウマ血液を含有するコロン
ビア寒天上に拡げ、３７℃、５％ＣＯ2で１８時間インキュベートした。これは
、髄膜炎菌細胞が殺害されているという確証を可能にする。懸濁液のＯＤ620を
ＰＢＳに対して０．１ＯＤに調整する。
【００４０】 加熱殺菌髄膜炎菌を用いたＥＬＩＳＡ法 以下のプロトコールを用いて、加熱殺菌髄膜炎菌を用いて、ＥＬＩＳＡ法を実
行した。加熱殺菌細胞でＥＬＩＳＡプレートを一夜被覆した（９６ウエルプレー
トの各ウエルにＰＢＳ中の５０μｌの死細菌。そして４℃でインキュベートした
）。
【００４１】 標準ＥＬＩＳＡプロトコールにしたがって、インキュベーションはすべて３７
℃で１時間で行った。ＰＢＳ／３％ＢＳＡ遮断溶液、ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ ０．
１％洗浄溶液、抗ウサギＡＰ複合体第二抗体（Sigma）およびシグマファストＰ
ニトロフェニルホスフェート検出試薬（Sigma）を利用した。適切な微量滴定プ
レート読取器を用いて４０５ｎｍでデータを読み取った。用いた血清は、一次追
加免疫ワクチン接種（初回ワクチン接種後３５日目）後７日利用可能なものであ
った。
【００４２】 試験した抗体は、配列番号８、１０２、１４０、１５８および２０２として同
定された遺伝子産物に対して生じたものであった。各々の場合、結果は、抗血清
が髄膜炎菌Ｂのいくつかの異なる菌株を認識することを示した。
【００４３】 ex vivo／in vitroスクリーニング ヒトにおける髄膜炎菌性疾患に対する防御は、髄膜炎菌に対する殺細菌性抗体
の存在に関連していた（Goldscheider et al. J. Exp. Med., 1969; 129: 1307-
1326）。In vivoモデルにおける検出可能な殺細菌活性の存在および防御間の相
関関係を示唆する証拠も存在する（Martin, J. Bacteriol., 2000; 83:27-31参
照）。したがって生じた抗血清を用いて、生成された抗体の殺細菌活性を評価し
た。
【００４４】 前免疫血清および候補抗原に対して生じた対応するウサギ抗血清を用いて、死
菌分析を実施した。補体供給源として、補体のみを排除して殺害するための予備
スクリーニングを行った市販ウサギ血清を用いた。ダルベッコのＰＢＳ（Gibco
）を、必要な場合に緩衝液として用いた。分析に使用する前に、３７℃（５％Ｃ
Ｏ2）で１４時間、髄膜炎菌ＭＣ５８菌株を増殖させた。
【００４５】 加熱不活性化血清の１００μｌの連続希釈液とともに補体（５０μｌ）の存在
下で、５０μｌ容積中の２００〜４００ＣＦＵのＭＣ５８をインキュベートした
。ゼロ時点での試料を、チョコレート化ウマ血液（オキソイド）を含有するコロ
ンビア寒天にプレート化した。６０分間インキュベーション後、チョコレート化
ウマ血液（オキソイド）を含有するコロンビア寒天にプレート化することにより
、生存細菌の数を評価した。殺細菌活性を、６０分後に生存している細菌のパー
センテージに換算して表した。試料はすべて二重反復試験し、三重反復プレート
化した。すべての適切な陽性および陰性対照を利用した。各試験試料において、
殺細菌活性は、前免疫血清に関するものより実質的に大きかった。
【００４６】 in vivoスクリーニング ワクチン候補の防御効力を評価するために、配列番号１０２および１０８とし
て本明細書中で同定された組換えタンパク質を用いて成体マウスを免疫感作し、
そして生細菌誘発試験により防御応答を測定した。各ワクチン候補に関しては、
３週間間隔で２回の別個の時機に、１５匹の６週齢マウス（６週齢ｂａｌｂ／Ｃ
マウス）に２５μｇの抗原をワクチン接種（皮下）した。
【００４７】 免疫感作スケジュール終了後１週間目に、その群を同種細菌ＭＣ５８株を用い
て誘発試験した。１０7ｃｆｕの用量で、脳心臓浸出物／０．５％鉄デキストラ
ン培地中で５００μｌの容積中で、細菌を腹腔内接種した。先の結果は、これら
の動物における菌血症の開始のために鉄が必要とされることを示していた。この
モデルは、ワクチン接種の防御効力を実証するために、従来用いられてきた（Li
ssolo et al., Infect. Immujn., 1995; 63:884-890）。
【００４８】 対照群は、アジュバント単独を用いて（陰性対照）、または精製ＰｏｒＡと組
合せたアジュバントを用いて（陽性対照）ワクチン接種された動物を包含した。
ＰｏｒＡは、髄膜炎菌によりもっぱら発現される外膜タンパク質であり、外膜小
胞ワクチンにより誘導される殺細菌抗体の主標的である。ＰｏｒＡに対するモノ
クローナル抗体は、幼仔ラットモデルにおいて動物を受動的に防御することも示
されている。しかしながらＰｏｒＡは菌株間でかなり変化し、同種菌株を用いて
誘発試験した場合に何らかの防御を引き出すが、理想的ワクチン候補ではない。
誘発試験後に、生存をモニタリングした。陰性対照は、４８時間後に生存を示さ
なかった。ＰｏｒＡでワクチン接種されたものは、７２時間目に６生存体を示し
た。配列番号１０２および１０８のタンパク質を用いてワクチン接種されたもの
は、それぞれ５および３生存体を示した。
【配列表】
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１４年７月２４日（２００２．７．２４）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｋ 16/12 Ｃ１２Ｎ 1/15 ４Ｈ０４５ Ｃ１２Ｎ 1/15 1/19 1/19 1/21 1/21 Ｃ１２Ｑ 1/18 5/10 Ｇ０１Ｎ 33/15 Ｚ Ｃ１２Ｑ 1/18 33/50 Ｚ Ｇ０１Ｎ 33/15 Ｃ１２Ｒ 1:01 33/50 Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ //(Ｃ１２Ｎ 1/21 5/00 Ａ Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｑ 1/18 Ｃ１２Ｒ 1:01） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ， ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，Ｇ Ｍ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ， ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，Ｂ Ｚ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＯ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＣ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ， ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，Ｉ Ｎ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ， ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，Ｐ Ｌ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ， ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ Ｆターム(参考） 2G045 AA29 AA40 CB17 CB21 DA12 DA13 DA36 FB03 GC22 4B024 AA01 AA11 BA80 CA04 DA02 DA05 DA06 DA11 DA12 EA04 GA11 HA12 4B063 QA19 QA20 QQ06 QS33 QX10 4B065 AA01X AA01Y AA57X AA90X AA92X AB01 BA02 CA44 CA45 CA46 4C085 AA03 AA19 BA16 CC07 FF24 GG04 4H045 AA10 AA11 AA30 BA10 CA11 DA75 DA86 EA31 EA52 FA72 FA74

Claims (19)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 治療的または診断的使用のためのナイセリア属髄膜炎菌Neis
    seria meningitidisの配列番号１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、
    １９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、
    ４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、
    ６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、
    ９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５、１０７、１０９、１
    １１、１１３、１１５、１１７、１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１
    ２９、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４５、１
    ４７、１４９、１５１、１５３、１５５、１５７、１５９、１６１、１６３、１
    ６５、１６７、１６９、１７１、１７３、１７５、１７７、１７９、１８１、１
    ８３、１８５、１８７、１８９、１９１、１９３、１９５、１９７、１９９、２
    ０１、２０３、２０５、２０７として本明細書中で同定されたヌクレオチド配列
    のいずれかを含むオペロンによりコードされるペプチド、あるいはグラム陰性細
    菌におけるペプチドまたはヌクレオチドレベルで少なくとも４０％の配列類似性
    または同一性を有する関連分子あるいはその機能的断片。
  2. 【請求項２】 配列類似性または同一性が少なくとも６０％である請求項１
    記載のペプチド。
  3. 【請求項３】 配列類似性または同一性が少なくとも９０％である請求項１
    または請求項２記載のペプチド。
  4. 【請求項４】 配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、
    ２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、
    ４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、
    ６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、
    ９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、
    １１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、
    １３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、
    １４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、
    １６６、１６８、１７０、１７２、１７４、１７６、１７８、１８０、１８２、
    １８４、１８６、１８８、１９０、１９２、１９４、１９６、１９８、２００、
    ２０２、２０４、２０６および２０８として本明細書中で同定されたアミノ酸配
    列を含む請求項１記載のペプチド。
  5. 【請求項５】 治療的または診断的使用のための前記請求項１〜４のいずれ
    かに記載のペプチドをコードするポリヌクレオチド。
  6. 【請求項６】 請求項１〜４のいずれかに記載のペプチドを発現するよう形
    質転換された宿主。
  7. 【請求項７】 請求項１で定義されたヌクレオチド配列のいずれかの発現を
    阻害する突然変異を含む弱毒化微生物。
  8. 【請求項８】 突然変異が挿入による不活性化または遺伝子の欠失である請
    求項７記載の微生物。
  9. 【請求項９】 髄膜炎菌Neisseria meningitidisである請求項７または請求
    項８記載の微生物。
  10. 【請求項１０】 二次ヌクレオチド配列中に二次突然変異を含む請求項７〜
    ９のいずれかに記載の微生物。
  11. 【請求項１１】 治療的または診断的使用のための請求項７〜１０のいずれ
    かに記載の微生物。
  12. 【請求項１２】 異種抗原、治療用ペプチドまたは核酸を含む請求項７〜１
    １のいずれかに記載の微生物。
  13. 【請求項１３】 請求項１〜４のいずれかに記載のペプチドを含むワクチン
    あるいはその発現のための手段。
  14. 【請求項１４】 請求項７〜１２のいずれかに記載の微生物を含むワクチン
    。
  15. 【請求項１５】 請求項１〜４のいずれかに記載のペプチドに対して生じる
    抗体。
  16. 【請求項１６】 ナイセリア属またはグラム陰性細菌による感染に関連した
    症状の治療または予防に用いる薬剤の製造のための請求項１〜１２のいずれかに
    記載の生成物の使用。
  17. 【請求項１７】 症状が髄膜炎である請求項１６記載の生成物の使用。
  18. 【請求項１８】 獣医学的治療のための請求項１６または請求項１７記載の
    生成物の使用。
  19. 【請求項１９】 抗菌薬の同定のためのスクリーニング法における請求項１
    〜１２のいずれかに記載の生成物の使用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2013522177A (ja) * 2010-03-11 2013-06-13 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム グラム陰性細菌性、例えば髄膜炎菌性の感染または疾患に対する免疫原性組成物またはワクチン

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU711524C (en) 1994-12-09 2004-03-18 Emergent Product Development Uk Limited Identification of genes
CA2341349C (en) 1998-09-04 2013-12-10 Creatogen Aktiengesellschaft Attenuated cells comprising sp12 mutants, carriers and compositions containing same, methods of production and uses thereof
EP1163343B1 (en) 1999-03-12 2009-12-09 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Neisseria meningitidis antigenic polypeptides, corresponding polynucleotides and protective antibodies
GB9910812D0 (en) 1999-05-10 1999-07-07 Microscience Ltd Vaccine composition
MY149591A (en) * 2002-08-02 2013-09-13 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccines comprising l2 and/or l3 los from neisseria
GB0330007D0 (en) * 2003-12-23 2004-01-28 Imp College Innovations Ltd Vaccines
CN113198013B (zh) 2005-04-08 2024-02-20 惠氏有限责任公司 多价肺炎球菌多糖－蛋白质缀合物组合物
US7709001B2 (en) 2005-04-08 2010-05-04 Wyeth Llc Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
CA2700841A1 (en) * 2007-09-27 2009-04-02 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Departmen T Of Health And Human Services Isoindoline compounds for the treatment of spinal muscular atrophy and other uses
WO2009158240A1 (en) 2008-06-16 2009-12-30 Emergent Product Development Uk Limited Salmonella vectored vaccines against chlamydia and methods of use
GB0816447D0 (en) 2008-09-08 2008-10-15 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
CN111118043B (zh) * 2020-01-13 2022-07-05 吉林大学 一种苦豆子SaMET6基因克隆及其应用
CN116042562B (zh) * 2022-03-11 2023-10-20 山东恒鲁生物科技有限公司 重组酵母菌及其应用
CN117567562B (zh) * 2023-11-24 2024-06-04 中国水产科学研究院黄海水产研究所 南极磷虾ace抑制肽及其制备方法和应用
CN119080891B (zh) * 2024-11-11 2025-03-11 四川大学华西医院 鲍曼不动杆菌TonB重组蛋白抗原、制备方法及其应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0656690A (ja) * 1990-07-19 1994-03-01 Merck & Co Inc 免疫キャリア及び増強性質を有するネイセリア・メニンギチジスの外膜のクラスｉｉタンパク質
WO1999024578A2 (en) * 1997-11-06 1999-05-20 Chiron S.P.A. Neisserial antigens
WO2000066791A1 (en) * 1999-04-30 2000-11-09 Chiron Corporation Neisseria genomic sequences and methods of their use

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5338664A (en) * 1992-12-04 1994-08-16 American Cyanamid Company Assay for detection of bacterial iron transport inhibitors
US6121037A (en) * 1994-10-18 2000-09-19 Stojiljkovic; Igor Bacterial hemoglobin receptor genes
AU711524C (en) * 1994-12-09 2004-03-18 Emergent Product Development Uk Limited Identification of genes
FR2751000B1 (fr) * 1996-07-12 1998-10-30 Inst Nat Sante Rech Med Adn specifiques des bacteries de l'espece neisseria meningitidis, leurs procedes d'obtention et leurs applications biologiques
WO1998017805A2 (en) * 1996-10-24 1998-04-30 THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, represented by THE SECRETARY, DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES, c/o Centers for Disease Control and Prevention, Technology Transfer Office Invasion associated genes from neisseria meningitidis serogroup b
GB9711964D0 (en) * 1997-06-09 1997-08-06 Medical Res Council Live attenuated vaccines
PL194800B1 (pl) * 1997-08-15 2007-07-31 Stw Technology Foundation Polinukleotydy kodujące białko LbpB Neisseria meningitidis, jego fragment lub białko o określonej identyczności z białkiem LbpB Neisseria meningitidis, komórka gospodarza zawierająca taki polinukleotyd i sposób jej wytwarzania, sposoby wytwarzania rekombinowanego polipeptydu LbpB i pęcherzyka zewnątrzbłonowego zawierającego zrekombinowny LbpB, nielipidowany polipeptyd LbpB z Neisseria meningitidis, rekombinowny polipeptyd oraz polipeptyd LbpB z Neisseria meningitidis, jego fragment oraz swoiste immunologiczne przeciwciało wobec polipeptydu LbpB z Neiss
KR20060118630A (ko) * 1998-04-29 2006-11-23 와이어쓰 홀딩스 코포레이션 나이제리아 고노리아 또는 나이제리아 메닌지티디스에 대한재조합 필린을 함유한 백신
GB9811260D0 (en) * 1998-05-26 1998-07-22 Smithkline Beecham Biolog Novel compounds
JP2004511201A (ja) * 1998-10-09 2004-04-15 カイロン　コーポレイション ナイセリアゲノム配列およびそれらの使用方法
US6610836B1 (en) * 1999-01-29 2003-08-26 Genome Therapeutics Corporation Nucleic acid amino acid sequences relating to Klebsiella pneumoniae for diagnostics and therapeutics

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0656690A (ja) * 1990-07-19 1994-03-01 Merck & Co Inc 免疫キャリア及び増強性質を有するネイセリア・メニンギチジスの外膜のクラスｉｉタンパク質
WO1999024578A2 (en) * 1997-11-06 1999-05-20 Chiron S.P.A. Neisserial antigens
WO2000066791A1 (en) * 1999-04-30 2000-11-09 Chiron Corporation Neisseria genomic sequences and methods of their use
JP2003527079A (ja) * 1999-04-30 2003-09-16 カイロン コーポレイション ナイセリアゲノム配列およびそれらの使用方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2013522177A (ja) * 2010-03-11 2013-06-13 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム グラム陰性細菌性、例えば髄膜炎菌性の感染または疾患に対する免疫原性組成物またはワクチン

Also Published As

Publication number Publication date
ATE382056T1 (de) 2008-01-15
EP1908839A3 (en) 2008-07-16
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RU2005101623A (ru) 2006-07-10
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WO2001085772A2 (en) 2001-11-15
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