JP2003521521A - ウイルス性ケモカインｖＭＩＰ−ＩＩのＮ末端に由来する、ＣＸＣＲ４の新規ペプチド性拮抗物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 ウイルス性マクロファージ炎症性蛋白質ＩＩ（ｖＭＩＰ−ＩＩ）はＣＣＲ５およびＣＸＣＲ４を含むＣＣおよびＣＸＣケモカイン受容体と相互作用を起こすケモカインである。ＣＣＲ５とＣＸＣＲ４はヒト免疫不全ウイルス１型（ＨＩＶ−１）の細胞進入に必要な主な共受容体である。本発明はＨＩＶ−１ウイルスの共受容体ＣＸＣＲ４と相互作用するのを予防し、よってその細胞にウイルスが感染するのを予防するｖＭＩＰ−ＩＩのペプチド断片について説明する。これらのペプチド断片はＨＩＶ−１感染に対する治療薬剤の開発への糸口となる化合物として貢献することになろう。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【関連出願の参照】

本出願は２０００年２月３日出願の米国仮特許出願番号６０／１８０、４８７
号に基づき３５ ＵＳＣ １１９条の下に優先権を主張する。

【０００２】

【発明の属する技術分野】

本出願は分子生物学の分野に関し、より具体的には、ウイルス性マクロファー
ジ炎症性蛋白質−ＩＩ（ｖＭＩＰ−ＩＩ）およびその断片のケモカイン受容体へ
の結合、その結合によるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−１）の標的細胞への進
入の抑制に関する。

【０００３】

【発明の背景】

ケモカインはＴ細胞、単核白血球およびマクロファージの炎症性先駆物質およ
び有効化学誘引剤の小蛋白質からなるスーパーファミリーである。Ｎ末端におけ
る保存された２つのシステイン残基の位置に基づいて、ケモカインは主にＣＣと
ＣＸＣの二つのサブファミリーに分けられる（ウェルズ、Ｔ．Ｎ．Ｃ．他、Ｊ
Ｌｅｕｋ Ｂｉｏｌ、５９：５３−６０、１９９６）。ケモカイン受容体はＨＩ
Ｖ−１の標的細胞への進入の共受容体として重要な役割を果たし、その内、ＣＣ
Ｒ５とＣＸＣＲ４が二つの主要なＨＩＶ−１共受容体である（ブローダー、Ｃ．
およびバーガー、Ｅ．、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、９２：９
００４−９００８、１９９５）。ＲＡＮＴＥＳやＭＩＰ−１β（コッチ、Ｆ．他
、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２７０：１８１１−１８１５）のようなヒトＣＣケモカイン
およびＳＤＦ−１α（ブルール、Ｃ．Ｃ．他、Ｎａｔｕｒｅ、３８２：８２９−
８３３、１９９６；オバーリン、Ｅ．他、Ｎａｔｕｒｅ、３８２：８３３−８３
５、１９９６）のようなＣＸＣケモカインは、それぞれＨＩＶ−１のＣＣＲ５お
よびＣＸＣＲ４受容体経由の進入を抑制する。概して特定のケモカインは同じサ
ブファミリー内の、一つまたはそれ以上の受容体しか結合できない。しかし、ヒ
トヘルペスウイルス８（ＨＨＶ−８）（モーア、Ｐ．Ｓ．他、Ｓｃｉｅｎｃｅ
２７４：１７３９−１７４４、１９９６）でコードされるウイルス性マクロファ
ージ炎症性蛋白質−ＩＩ（ｖＭＩＰ−ＩＩ）は、ＣＣおよびＣＸＣケモカイン受
容体の両方と多様な相互作用を示し、ＣＣＲ３、ＣＣＲ５およびＣＸＣＲ４を媒
介とするＨＩＶ−１の進入を抑制する（ボショフ、Ｃ．他、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２
７８：２９０−２９４、１９９７；クレダル、Ｔ．Ｎ．他、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２
７７：１６５６−１６５９、１９９７）。ｖＭＩＰ−ＩＩの広域受容体への結合
性はすべての公知のケモカイン中において特異なものであり、よってケモカイン
のリガンド−受容体相互作用を研究し、新しい小分子抗ＨＩＶ剤を作り出す鋳型
として有用である。ｖＭＩＰ−ＩＩの作用メカニズムに関する重要な問題は、多
数の受容体と共通の一般的結合用領域を使うのか、または異なる受容体との選択
的相互作用のためにｖＭＩＰ−ＩＩ内に特殊な部位が発達しそれを用いているの
かということである。

【０００４】 本発明では、ｖＭＩＰ−ＩＩの生体機能のメカニズムを探るための合成ペプチ
ドを用いたアプローチを説明する。ｖＭＩＰ−ＩＩ（配列番号：１）のアミノ酸
配列と他のヒトケモカインを比較すると、ｖＭＩＰ−ＩＩのＮ末端はＣＣケモカ
インまたはＣＸＣケモカインのどちらとも相同性がほとんどないこと、しかしｖ
ＭＩＰ−ＩＩの他の領域はＭＩＰ−１αやＭＩＰ−１βのようなＣＣケモカイン
とかなり類似した配列であることがわかった（クレダル、Ｔ．Ｎ．他、Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ、２７７：１６５６−１６５９、１９９７）。他のいくつかのケモカイン
のＮ末端が生体機能に決定的なものであることは公知である（クラーク−ルイス
、Ｉ．他、Ｊ Ｌｅｕｋ Ｂｉｏｌ、５７：７０３−７１１、１９９５）。従って
、ｖＭＩＰ−ＩＩの特異なＮ末端配列が他のケモカインとは異なる生体機能を与
える事が考えられる。本発明では、ｖＭＩＰ−ＩＩのＮ末端から由来する合成ペ
プチドを合成し、種々の生物学的アッセイで検査した。このＶ１と指定されるペ
プチドはｖＭＩＰ−ＩＩ（ＬＧＡＳＷＨＲＰＤＫＣＣＬＧＹＱＫＲＰＬＰ、配列
番号：２）の１−２１番目のアミノ酸残基配列を含む。このペプチドはＣＸＣＲ
４に対して拮抗活性を示したが、ＣＣＲ５に対しては示さず、ＣＸＣＲ４媒介の
Ｔ−および両指向性ＨＩＶの進入を選択的に抑制した。本発明はｖＭＩＰ−ＩＩ
がケモカイン受容体と相互作用するために必要な機能的決定因子を説明する。さ
らに、これらの機能的決定因子は新しい抗ＨＩＶ剤の発生における主要な化合物
として提供されるであろう。

【０００５】

【発明の概要】

ウイルス性マクロファージ炎症性蛋白−ＩＩ（ｖＭＩＰ−ＩＩ）のペプチド断
片がＣＸＣＲ４のシグナルトランスダクションとＨＩＶ−１の進入媒介における
共受容体機能を選択的に予防することは本発明の目的である。このペプチド断片
がｖＭＩＰ−ＩＩのアミノ末端の断片であることも目的である。より具体的に示
せば、ｖＭＩＰ−ＩＩの１−２１番目の残基（配列番号：２）またはその中の任
意のサブフラグメントである。このペプチド断片がＨＩＶ−１の細胞進入を防ぐ
新しい小分子物質の発生に主要な化合物として作用することも本発明の目的であ
る。

【０００６】 Ｘ−Ｒ_１−Ｒ_２−Ｒ_３−Ｒ_４−Ｒ_５−Ｒ_６−Ｒ_７−Ｒ_８−Ｒ_９−Ｒ_１０−Ｒ_{１ １} −Ｒ_１２−Ｒ_１３−Ｒ_１４−Ｒ_１５−Ｒ_１６−Ｒ_１７−Ｒ_１８−Ｒ_１９−Ｒ_{２ ０} −Ｒ_２１−Ｙ．の式で表わされるペプチドが下記のアミノ酸を持つことも本発
明の別な目的である。ここにおいて、ＸはペプチドのＮ末端に付着した置換基で
、ＸはＨ、ＣＨ_３ＣＯ、Ｃ_６Ｈ_５ＣＯまたはＣ_６Ｈ_５ＣＨ_２ＣＯのどれかであり
；Ｙは一般式、Ｃ（α）−ＣＯ−Ｙを持つペプチドのＣ末端に付着した置換基で
、ＹはＯＨ、ＮＨ_２、ＯＣＨ_３、ＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５またはＮＨＣＨ_３のどれかで
あり；Ｙは０から９個のアミノ酸からなり得、 Ｒ_１はＩｌｅ、Ｌｅｕ、ＶａｌまたはＰｈｅ； Ｒ_２はＧｌｙ、Ａｌａ； Ｒ_３はＡｌａ、Ｇｌｙ； Ｒ_４はＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５はＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ； Ｒ_６はＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｙｒ； Ｒ_７はＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８はＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_９はＡｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇまたはＬｙｓ； Ｒ_１０はＬｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓ； Ｒ_１１はＣｙｓ、ＳｅｒまたはＡｌａ； Ｒ_１２はＣｙｓ、ＳｅｒまたはＡｌａ； Ｒ_１３はＩｌｅ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_１４はＧｌｙ、Ａｌａ； Ｒ_１５はＴｙｒ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ； Ｒ_１６はＧｌｎ、Ａｓｎ、ＡｒｇまたはＬｙｓ； Ｒ_１７はＬｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓ； Ｒ_１８はＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_１９はＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_２０はＩｌｅ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_２１はＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； そしてＲ_１１がＣｙｓならＲ_１２はＣｙｓ、ペニシラミン、または第三級ブチ
ルオキシカルボニル−ａ−アミノ酪酸のうちのどれかになり；Ｒ_１２がＣｙｓな
らＲ_１１はＣｙｓ、ペニシラミン、または第三級ブチルオキシカルボニル−ａ−
アミノ酪酸のうちのどれかになり、そして、Ｒ_１１とＲ_１２がペニシラミンか第
三級ブチルオキシカルボニル−ａ−アミノ酪酸でもよいし；そして、Ｒ_１１とＲ _１２ がＡｌａでもよい。

【０００７】 好ましい一具体例において、下記の式をもつことは本発明のさらなる目的であ
る：ＸはＨまたはＣＨ_３ＣＯ；ＹはＯＨまたはＮＨ_２；そして、Ｒ_１はＬｅｕ，
Ｒ_２はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、Ｒ_４はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ _７ はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ_９はＡｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓ、Ｒ_１１はＣｙｓ、
Ｒ_１２はＣｙｓ、Ｒ_１３はＬｅｕ、Ｒ_１４はＧｌｙ、Ｒ_１５はＴｙｒ、Ｒ_１６は
Ｇｌｎ、Ｒ_１７はＬｙｓ、Ｒ_１８はＡｒｇ、Ｒ_１９はＰｒｏ、Ｒ_２０はＬｅｕ、
Ｒ_２１はＰｒｏである。

【０００８】 本発明のペプチドの最も好ましい一具体例において、ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そ
してＲ_１はＬｅｕ、Ｒ_２はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、Ｒ_４はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ
、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ_７はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ_９はＡｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓ
、Ｒ_１１はＣｙｓ、Ｒ_１２はＣｙｓ、Ｒ_１３はＬｅｕ、Ｒ_１４はＧｌｙ、Ｒ_１５ はＴｙｒ、Ｒ_１６はＧｌｎ、Ｒ_１７はＬｙｓ、Ｒ_１８はＡｒｇ、Ｒ_１９はＰｒｏ
、Ｒ_２０はＬｅｕ、Ｒ_２１はＰｒｏである。

【０００９】 好ましい一具体例が少なくとも下記の断片を含むＣ末端切断ペプチドを持つこ
と： Ｘ−Ｒ_１−Ｒ_２−Ｒ_３−Ｒ_４−Ｒ_５−Ｒ_６−Ｒ_７−Ｒ_８−Ｙ、ここで： Ｒ_１はＩｌｅ、ＬｅｕまたはＰｈｅ； Ｒ_２はＧｌｙ、ＡｌａまたはＶａｌ； Ｒ_３はＡｌａ、ＶａｌまたはＧｌｙ； Ｒ_４はＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５はＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ またはＬｅｕ； Ｒ_６はＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｒｐ； Ｒ_７はＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８はＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ、 そして、Ｃ末端切断ペプチドが少なくとも次の断片を含む事が好ましい。つま
り、ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１はＬｅｕ、Ｒ_２はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、
Ｒ_４はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ_７はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ _９ はＡｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓである。ペプチドが３から３０個のアミノ酸、好ま
しくは８から２１個のアミノ酸であることは本発明のさらなる目的である。

【００１０】 本発明の別の一具体例において、合成ペプチドのアミノ酸はＤ−アミノ酸で、
次の式をもつ： Ｘ−Ｒ_１ｄ−Ｒ_２ｄ−Ｒ_３ｄ−Ｒ_４ｄ−Ｒ_５ｄ−Ｒ_６ｄ−Ｒ_７ｄ−Ｒ_８ｄ−Ｒ _９ｄ −Ｒ_１０ｄ−Ｒ_１１ｄ−Ｒ_１２ｄ−Ｒ_１３ｄ−Ｒ_１４ｄ−Ｒ_１５ｄ−Ｒ_{１６ ｄ} −Ｒ_１７ｄ−Ｒ_１８ｄ−Ｒ_１９ｄ−Ｒ_２０ｄ−Ｒ_２１ｄ−Ｙ、ここでＸはペプ
チドのＮ末端に付着した置換基で、ＸはＨ、ＣＨ_３ＣＯ、Ｃ_６Ｈ_５ＣＯまたはＣ _６ Ｈ_５ＣＨ_２ＣＯのどれかであり、Ｙは次の一般構造を持つペプチドのＣ末端に
付着した置換基で： Ｃ（α）−ＣＯ−Ｙ、ここでＹはＯＨ、ＮＨ_２、ＯＣＨ_３、ＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５ またはＮＨＣＨ_３のどれかであり、Ｙは０から９個のアミノ酸からなり得、そし
て Ｒ_１ｄはＩｌｅ、Ｌｅｕ、ＶａｌまたはＰｈｅ； Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ａｌａ； Ｒ_３ｄはＡｌａ、Ｇｌｙ； Ｒ_４ｄはＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ； Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｙｒ； Ｒ_７ｄはＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８ｄはＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇまたはＬｙｓ； Ｒ_１０ｄはＬｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓ； Ｒ_１１ｄはＡｌａ、ＣｙｓまたはＳｅｒ； Ｒ_１２ｄはＡｌａ、ＣｙｓまたはＳｅｒ； Ｒ_１３ｄはＩｌｅ、ＬｅｕまたはＰｈｅ； Ｒ_１４ｄはＧｌｙ、Ａｌａ； Ｒ_１５ｄはＴｙｒ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ； Ｒ_１６ｄはＧｌｎ、Ａｓｎ、ＡｒｇまたはＬｙｓ； Ｒ_１７ｄはＬｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓ； Ｒ_１８ｄはＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_１９ｄはＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_２０ｄはＩｌｅ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_２１ｄはＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； そしてここで、 Ｒ_１１ｄがＣｙｓならＲ_１２ｄはＣｙｓ、ペニシラミン、または第三級ブチル
オキシカルボニル−ａ−アミノ酪酸のうちのどれかになり； Ｒ_１２ｄがＣｙｓならＲ_１１ｄはＣｙｓ、ペニシラミン、または第三級ブチル
オキシカルボニル−ａ−アミノ酪酸のうちのどれかになり、 そして、 Ｒ_１１とＲ_１２がペニシラミンか第三級ブチルオキシカルボニル−ａ−アミノ
酪酸でもよいし；そして、Ｒ_１１とＲ_１２がＡｌａでもよい。

【００１１】 ペプチドをふくむＤ−アミノ酸の好ましい一具体例において、下記の式をもつ
ことは本発明のさらなる目的である： ＸはＨまたはＣＨ_３ＣＯ；ＹはＯＨまたはＮＨ_２；そして、Ｒ_１ｄはＬｅｕ，
Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄは
Ｈｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_８ｄはＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓ
、Ｒ_１１ｄはＡｌａ、Ｒ_１２ｄはＣｙｓ、Ｒ_１３ｄはＬｅｕ、Ｒ_１４ｄはＧｌｙ
、Ｒ_１５ｄはＴｙｒ、Ｒ_１６ｄはＧｌｎ、Ｒ_１７ｄはＬｙｓ、Ｒ_１８ｄはＡｒｇ
、Ｒ_１９ｄはＰｒｏ、Ｒ_２０ｄはＬｅｕ、Ｒ_２１ｄはＰｒｏである。

【００１２】 Ｄ−アミノ酸ペプチドの最も好ましい一具体例は： ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１ｄはＬｅｕ、Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌ
ａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_{８ ｄ} はＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓ、Ｒ_１１ｄはＡｌａ、Ｒ_１２ｄ はＣｙｓ、Ｒ_１３ｄはＬｅｕ、Ｒ_１４ｄはＧｌｙ、Ｒ_１５ｄはＴｙｒ、Ｒ_１６ｄ はＧｌｎ、Ｒ_１７ｄはＬｙｓ、Ｒ_１８ｄはＡｒｇ、Ｒ_１９ｄはＰｒｏ、Ｒ_２０ｄ はＬｅｕ、Ｒ_２１ｄはＰｒｏである。

【００１３】 Ｄ−アミノ酸ペプチドの好ましいＣ末端切断ペプチドが少なくとも次の断片を
持つことは本発明の別な目的である： Ｘ−Ｒ_１ｄ−Ｒ_２ｄ−Ｒ_３ｄ−Ｒ_４ｄ−Ｒ_５ｄ−Ｒ_６ｄ−Ｒ_７ｄ−Ｒ_８ｄ−Ｙ ここで； Ｒ_１ｄはＩｌｅ、ＬｅｕまたはＰｈｅ； Ｒ_２ｄはＧｌｙ、ＡｌａまたはＶａｌ； Ｒ_３ｄはＡｌａ、ＶａｌまたはＧｌｙ； Ｒ_４ｄはＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ またはＬｅｕ； Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｒｐ； Ｒ_７ｄはＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８ｄはＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌである。

【００１４】 Ｃ末端切断ペプチドが少なくとも次の断片を含む事がさらに好ましい； ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１ｄはＬｅｕ、Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌ
ａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_{８ ｄ} はＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓである。Ｄ−アミノ酸ペプチド
が３から３０個のアミノ酸、好ましくは８から２１個のアミノ酸を持つことは本
発明の別な目的である。

【００１５】 ペプチドが前述の式の逆型を持つ事は本発明の別な目的で、 Ｘ−Ｒ_２１−Ｒ_２０−Ｒ_１９−Ｒ_１８−Ｒ_１７−Ｒ_１６−Ｒ_１５−Ｒ_１４−Ｒ _１３ −Ｒ_１２−Ｒ_１１−Ｒ_１０−Ｒ_９−Ｒ_８−Ｒ_７−Ｒ_６−Ｒ_５−Ｒ_４−Ｒ_３−
Ｒ_２−Ｒ_１−Ｙ ここでアミノ酸はＬ型または自然発生アミノ酸として存在する。

【００１６】 逆型ペプチドの好ましい具体例は：ＸはＨまたはＣＨ_３ＣＯ；ＹはＯＨまたは
ＮＨ_２；そして、Ｒ_１はＬｅｕ，Ｒ_２はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、Ｒ_４はＳｅｒ、
Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ_７はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ_９はＡｓｐ、Ｒ _１０ はＬｙｓ、Ｒ_１１はＣｙｓ、Ｒ_１２はＣｙｓ、Ｒ_１３はＬｅｕ、Ｒ_１４はＧ
ｌｙ、Ｒ_１５はＴｙｒ、Ｒ_１６はＧｌｎ、Ｒ_１７はＬｙｓ、Ｒ_１８はＡｒｇ、Ｒ _１９ はＰｒｏ、Ｒ_２０はＬｅｕ、Ｒ_２１はＰｒｏである。

【００１７】 逆型ペプチドの最も好ましい具体例は：ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１はＬ
ｅｕ、Ｒ_２はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、Ｒ_４はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉ
ｓ、Ｒ_７はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ_９はＡｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓ、Ｒ_１１はＣ
ｙｓ、Ｒ_１２はＣｙｓ、Ｒ_１３はＬｅｕ、Ｒ_１４はＧｌｙ、Ｒ_１５はＴｙｒ、Ｒ _１６ はＧｌｎ、Ｒ_１７はＬｙｓ、Ｒ_１８はＡｒｇ、Ｒ_１９はＰｒｏ、Ｒ_２０はＬ
ｅｕ、Ｒ_２１はＰｒｏである。

【００１８】 逆型ペプチドが少なくとも次の断片を含むＣ末端切断ペプチドを持つことは本
発明の別な目的である： Ｘ−Ｒ_１−Ｒ_２−Ｒ_３−Ｒ_４−Ｒ_５−Ｒ_６−Ｒ_７−Ｒ_８−Ｙ、ここで； Ｒ_１はＩｌｅ、ＬｅｕまたはＰｈｅ； Ｒ_２はＧｌｙ、ＡｌａまたはＶａｌ； Ｒ_３はＡｌａ、ＶａｌまたはＧｌｙ； Ｒ_４はＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５はＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ またはＬｅｕ； Ｒ_６はＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｒｐ； Ｒ_７はＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８はＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ、 そして、Ｃ末端切断ペプチドが少なくとも次の断片を含む事が好ましい。つま
り、ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１はＬｅｕ、Ｒ_２はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、
Ｒ_４はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ_７はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ _９ はＡｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓである。

【００１９】 逆型ペプチドが３から３０個のアミノ酸、好ましくは８から２１個のアミノ酸
であることは本発明の別な目的である。

【００２０】 ペプチドがＤ−アミノ酸を持つ逆型ペプチドで、次の式を持つことは本発明の
別な目的である： Ｘ−Ｒ_２１ｄ−Ｒ_２０ｄ−Ｒ_１９ｄ−Ｒ_１８ｄ−Ｒ_１７ｄ−Ｒ_１６ｄ−Ｒ_{１５ ｄ} −Ｒ_１４ｄ−Ｒ_１３ｄ−Ｒ_１２ｄ−Ｒ_１１ｄ−Ｒ_１０ｄ−Ｒ_９ｄ−Ｒ_８ｄ−Ｒ _７ｄ −Ｒ_６ｄ−Ｒ_５ｄ−Ｒ_４ｄ−Ｒ_３ｄ−Ｒ_２ｄ−Ｒ_１ｄ−Ｙ、ここでアミノ酸
はＤ型または非自然発生アミノ酸として存在する。Ｄ−アミノ酸を持つ逆式の好
ましい一具体例は： ＸはＨまたはＣＨ_３ＣＯ；ＹはＯＨまたはＮＨ_２；そして、Ｒ_１ｄはＬｅｕ，
Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄは
Ｈｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_８ｄはＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓ
、Ｒ_１１ｄはＡｌａ、Ｒ_１２ｄはＣｙｓ、Ｒ_１３ｄはＬｅｕ、Ｒ_１４ｄはＧｌｙ
、Ｒ_１５ｄはＴｙｒ、Ｒ_１６ｄはＧｌｎ、Ｒ_１７ｄはＬｙｓ、Ｒ_１８ｄはＡｒｇ
、Ｒ_１９ｄはＰｒｏ、Ｒ_２０ｄはＬｅｕ、Ｒ_２１ｄはＰｒｏである。

【００２１】 Ｄ−アミノ酸を持つ逆式の最も好ましい一具体例は： ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１ｄはＬｅｕ、Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌ
ａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_{８ ｄ} はＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓ、Ｒ_１１ｄはＡｌａ、Ｒ_１２ｄ はＣｙｓ、Ｒ_１３ｄはＬｅｕ、Ｒ_１４ｄはＧｌｙ、Ｒ_１５ｄはＴｙｒ、Ｒ_１６ｄ はＧｌｎ、Ｒ_１７ｄはＬｙｓ、Ｒ_１８ｄはＡｒｇ、Ｒ_１９ｄはＰｒｏ、Ｒ_２０ｄ はＬｅｕ、Ｒ_２１ｄはＰｒｏである。

【００２２】 Ｄ−アミノ酸を含む逆型ペプチドの好ましいＣ末端切断ペプチドは少なくとも
次の断片を持つ： Ｘ−Ｒ_１ｄ−Ｒ_２ｄ−Ｒ_３ｄ−Ｒ_４ｄ−Ｒ_５ｄ−Ｒ_６ｄ−Ｒ_７ｄ−Ｒ_８ｄ−Ｙ ここで、 Ｒ_１ｄはＩｌｅ、ＬｅｕまたはＰｈｅ； Ｒ_２ｄはＧｌｙ、ＡｌａまたはＶａｌ； Ｒ_３ｄはＡｌａ、ＶａｌまたはＧｌｙ； Ｒ_４ｄはＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ またはＬｅｕ； Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｒｐ； Ｒ_７ｄはＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８ｄはＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌである。

【００２３】 Ｄ−アミノ酸を含む逆型ペプチドの好ましい一具体例は少なくとも次の断片で
ある； ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１ｄはＬｅｕ、Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌ
ａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_{８ ｄ} はＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓである。逆型が３から３０個の
アミノ酸、好ましくは８から２１個のアミノ酸を持つことは本発明の別な目的で
ある。

【００２４】 薬剤物質が薬剤として許容できる担体と本発明のペプチドまたはペプチド断片
のどれか一つであることは本発明のさらなる目的である。ＨＩＶ−１のＣＸＣＲ
−４発現細胞への進入を抑制する方法が本発明のペプチドまたはペプチド断片の
どれか一つと接触することを含むことは本発明の別な目的である。

【００２５】 ＨＩＶ−１感染の治療法が本発明のペプチドまたはペプチド断片のどれか一つ
を効果的な量を患者に投与することを含むことは本発明のさらなる目的である。

【００２６】 疾患、ＣＸＣＲ４を通ってＣＸＣＲ４発現細胞へ進入することを必要とするそ
の疾患の原因因子、の抑制法がそれらの細胞を本発明のペプチドまたはペプチド
断片のどれか一つに接触させることを含むことは本発明の別な目的である。疾患
、ＣＸＣＲ４を通ってＣＸＣＲ４発現細胞へ進入することを必要とするその疾患
の原因因子、の治療法が本発明のペプチドまたはペプチド断片のどれか一つを効
果的な量患者に投与することを含むことは本発明のさらなる目的である。

【００２７】 略語表 ｖＭＩＰ−ＩＩ： ウイルス性マクロファージ炎症性蛋白質−ＩＩ ＨＩＶ−１： ヒト免疫不全ウイルス１型 ＭＩＰ−１α： マクロファージ炎症性蛋白質１α ＦＡＣＳ： 蛍光発色セルソーター ＳＤＦ−１： 間質細胞由来因子−１ ＲＡＮＴＥＳ： 正常Ｔ細胞発現分泌活性化物質 Ｆｍｏｃ： Ｎ−（９−フルオレニル）メトキシカルボニル。

【００２８】 アミノ酸記号 本発明のポリペプチド化合物を表わす命名法は従来の方法に従い、アミノ基を
左側に示し、それぞれのアミノ残基の右側にカルボキシル基を示す。本発明の特
定の具体例を表わす公式において、アミノおよびカルボキシル末端基は、特定的
に示していないが、特別なことわりがない限り、生理的ｐＨ値においてとるであ
ろう形であると理解されるものである。アミノ酸構造式において、それぞれの残
基は概して次のようにアミノ酸の慣用名に対応して３文字で表わされている。

【００２９】 アラニン Ａｌａ システイン Ｃｙｓ アスパラギン酸 Ａｓｐ グルタミン酸 Ｇｌｕ フェニルアラニン Ｐｈｅ グリシン Ｇｌｙ ヒスチジン Ｈｉｓ イソロイシン Ｉｌｅ リジン Ｌｙｓ ロイシン Ｌｅｕ メチオニン Ｍｅｔ アスパラギン Ａｓｎ プロリン Ｐｒｏ グルタミン Ｇｌｎ アルギニン Ａｒｇ セリン Ｓｅｒ トレオニン Ｔｈｒ バリン Ｖａｌ トリプトファン Ｔｒｐ チロシン Ｔｙｒ

【００３０】 定義 次に本発明の範囲および実施を理解する上での手助けとしてこの明細書を通し
て使われている用語の定義を示す。

【００３１】 「ペプチド」はペプチド結合によって共有結合したアミノ酸残基からなる化合
物である。

【００３２】 「アミノ酸」という表現は天然アミノ酸と合成アミノ酸の両方、またＤアミノ
酸とＬアミノ酸の両方を意味するものとして本明細書で使われている。「天然ア
ミノ酸」は典型的にペプチド、ポリペプチドおよび蛋白質を形成する２０の主要
な自然発生アミノ酸の内任意のものを意味する。「合成アミノ酸」は合成的に調
製されたかまたは天然源から由来するかに関わらず、天然アミノ酸以外のどのよ
うなアミノ酸をも意味する。本明細書では、「合成アミノ酸」はまた塩、誘導体
（アミド等）および置換を含む、しかしこれらに限られない、化学修飾アミノ酸
も包含して使っている。本発明のペプチド内に含まれるアミノ酸は、特にカルボ
キシルまたはアミノ末端において、メチル化、アミド化、アセチル化または自ら
の活性に悪影響を与えずにペプチドの循環性半減期を変えることのできる他の化
学基との置換によって修飾され得る。また、抗ＨＩＶ活性が維持されている限り
、本発明のペプチド内にジスルフィド結合があってもよいし、なくてもよい。

【００３３】 アミノ酸は次の一般構造を持つ。 Ｈ ｜ Ｒ―Ｃ―ＣＯＯＨ ｜ ＮＨ_２ アミノ酸は側鎖Ｒに基づいて（１）脂肪族側鎖、（２）水酸基（ＯＨ）を含む
側鎖、（３）硫黄原子を含む側鎖、（４）酸性またはアミド基を含む側鎖、（５
）塩基を含む側鎖、（６）芳香族環を含む側鎖、そして（７）側鎖がアミノ基に
融合しているイミノ酸であるプロリンの７つのグループに分けられる。数多くの
アミノ酸からなるペプチドは「ポリペプチド」と呼ばれることがある。本明細書
および添付した請求項に記述されるペプチドのアミノ酸はＤまたはＬアミノ酸で
あると理解され、Ｌアミノ酸がより好ましい。

【００３４】 本明細書において、末端アミノ基に関して「保護」とは末端アミノ基がペプチ
ド合成で従来から使われている種々のアミノ末端保護基のうちのどれかと共役す
るペプチドの末端アミノ基に当てはまる。これらの保護基には、例えば、ホルミ
ル、アセチル、ベンゾイル、トリフルオロアセチル、スクシニル、メトキシスク
シニルのようなアクリル保護基、ベンジルオキシカルボニルのような芳香族ウレ
タン保護基、そして例えばタート−ブトキシカルボニルやアダマンチルオキシカ
ルボニルのような脂肪族ウレタン保護基がある。適当な保護基に関してはグロス
およびミーンホーファー編、Ｔｈｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、第三巻、ｐｐ．３−８
８（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク、１９８１）を参照。

【００３５】 本明細書において、末端カルボキシル基に関して「保護」とは末端カルボキシ
ル基が種々のカルボキシル末端保護基のうちのどれかと共役するペプチドの末端
カルボキシル基に当てはまる。これらの保護基には、例えば、第三級ブチル、ベ
ンジルまたは他の許容できる基でエステルまたはエーテル結合によって末端カル
ボキシル基に連結したものがある。

【００３６】 アミノ酸配列に関して「Ｎ末端切断片」とはそのＮ末端から一つまたはそれ以
上のアミノ酸を除去して親配列から獲得した断片を意味する。

【００３７】 アミノ酸配列に関して「Ｃ末端切断片」とはそのＣ末端から一つまたはそれ以
上のアミノ酸を除去して親配列から獲得した断片を意味する。

【００３８】

【発明の実施の形態】

実験計画 材料− 組換えヒトケモカインのＳＤＦ−１、ＭＩＰ−１βおよびｖＭＩＰ−ＩＩ（Ｒ
&Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ミネソタ州、ミネアポリス）を無菌リン酸緩衝食塩水（Ｐ
ＢＳ）中に１μｇ／μｌまたは２．５μｇ／μｌの保存溶液として凍結乾燥およ
び溶解し、一定量ずつ−２０℃で保存した。放射性ヨウ化ＳＤＦ−１αとＭＩＰ
−１βはＤｕＰｏｎｔ ＮＥＮから購入した。^１２５Ｉ−ＳＤＦ−１αと^１２５
Ｉ−ＭＩＰ−１βの比放射能は２２００Ｃｉ／ｍｍｏｌであった。細胞培地とＧ
４１８はＬｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ．から購入した。抗ＣＸ
ＣＲ４モノクローナル（ｍＡｂ）１２Ｇ５（エンドレス、Ｍ．Ｊ．他、Ｃｅｌｌ
、８７：７４５−７５６、１９９６）はＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ（カリフォルニア
州、サンディエゴ）から購入した。２９３とＮＩＨ／３Ｔ３細胞はペンシルバニ
ア大学のロバート Ｗ．ドムズ氏の協力で提供され、ダルベッコイーグル培地に
１０％のウシ胎仔血清を加えて維持された。ヒトｐｃＣＸＣＲ４およびＨＩＶ−
１の二つのエンベロープ蛋白質をコードする組換えワクチニアウイルス、ｖＳＣ
６０（ＢＨ１０）（Ｓ．チャクラバルチおよびＢ．モス、個人的通信）そしてｖ
ＢＤ３（８９．６）、およびＴ７ ＲＮＡポリメラーゼ、ｖＴＦ１．１（アレク
サンダー、Ｗ．他、Ｊ Ｖｉｒｏｌ、６６：２９３４−２９４２、１９９２）も
またロバート Ｗ．ドムズ氏から贈られた。

【００３９】 ペプチド合成 ペプチドは、以前に説明されたように（佐藤、Ｔ．他、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ
、２７２：１２１７５−１２１８０、１９９７；リー、Ｓ．他、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃ
ｈｅｍ、２７３：１６４４２−１６４４５、１９９８）、４３０Ａペプチド合成
器（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、カリフォルニア州、フォスターシ
ティ）および９０５０ペプシンセサイザープラス（Ｐｅｒｓｅｐｔｉｖｅ Ｂｉ
ｏｓｙｓｔｅｍｓ、マサチューセッツ州ケンブリッジ）のＦｍｏｃ法を使って固
相合成で調製した。Ｎ−Ｆｍｏｃ（Ｎ−（９−フルオレニル）メトキシカルボニ
ル）アミノ酸を保護する側鎖は：Ａｒｇ、Ｐｍｃ；Ａｓｐ、ＯｔＢｕ；Ｃｙｓ、
Ｔｒｔ；Ｇｌｎ、Ｔｒｔ；Ｈｉｓ、Ｔｒｔ；Ｌｙｓ、Ｂｏｃ；Ｓｅｒ、ｔＢｕ、
Ｔｙｒ、ｔＢｕ；およびＴｒｐ，Ｂｏｃ（Ｐｍｃ＝２、２、５、７、８−ペンタ
メチル−クロマン−６−スルフォニル、ＯｔＢｕ＝タート−ブチルエステル、Ｔ
ｒｔ＝トリチル、Ｂｏｃ＝第三級−ブチルオキシカルボニルおよびｔＢｕ＝第三
級−ブチルエステル）。すべての共役反応段階において、Ｎ−Ｆｍｏｃアミノ酸
のＯ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ、Ｎ、Ｎ Ｎ’−テトラメチルウロニ
ウムヘキサフルオロフォスフェート、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
の４倍余剰、およびジイソプロピルエチルアミンの１０倍余剰が使われた。ペプ
チドの樹脂からの分割は分割試薬（トリフルオロ酢酸：チオアニソール：フェノ
ール：水：エタンジチオール：トリイソプロピルシラン／８１．５：５：５：５
：２．５：１）を用い、緩やかに攪拌しながら室温で２時間行なった。粗ペプチ
ドを氷で冷却したメチル−ｔ−ブチルエーテル中に沈殿させ、遠心分離し、凍結
乾燥した。粗ペプチドをその後二つの溶媒系の０．１％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏと０．
１％ ＴＦＡ／アセトニトリルを持つＤｙｎａｍａｘ−３００ÅＣ_１８２５ｃｍ
×２１．４ｍｍＩ．Ｄ．カラムを使って調整用高性能液体クロマトグラフィー（
ＨＰＬＣ）で精製した。適当なペプチドを含む分画を集めて凍結乾燥した。最終
生成物の純度は分析逆相高性能液体クロマトグラフィー、毛管電気泳動およびマ
トリックス補助レーザー脱離・電離飛行時間質量分析によって評価した。すべて
のペプチドが少なくとも９５％純性であった。

【００４０】 上記の方法で次のペプチドが合成された：

【表１】

【００４１】

【表２】

【００４２】 大文字はＬアミノ酸残基を表わし、小文字はＤアミノ酸残基を表わす。

【００４３】 フローサイトメトリー ＳｕｐＴ１細胞（２×１０^５）は蛍光発色セルソーター（ＦＡＣＳ）緩衝剤（
０．５％のウシ血清アルブミン、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中の０．０５％の
アジ化ナトリウム）で洗浄し、抗ＣＸＣＲ４モノクローナル抗体（ｍＡｂ）１２
Ｇ５（１０μｇ／ｍｌ）で３０分間４℃で培養した。ＦＡＣＳ緩衝剤で洗浄後、
細胞は１０μｇのフルオレセインイソチオンシアネート（ＦＩＴＣ）共役ヤギ抗
マウスＩｇＧ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ａｓｓｏｃｉａ
ｔｅｓ、Ｉｎｃ．、アラバマ州、バーミングハム）で３０分間４℃で培養した。
ＦＡＣＳ緩衝剤で二度洗浄後、細胞を固定緩衝剤（ＰＢＳ中の２％パラホルムア
ルデヒド）中で固定し、ＦＡＣＳｃａｎフローサイトメーター（Ｃｏｕｌｔｅｒ
ＥＰＩＣＳ Ｅｌｉｔｅ、Ｃｏｏｌｔｅｎ Ｃｏｒｐ．、フロリダ州、ハイアリ
ア）で分析した。

【００４４】 ＣＸＣＲ４への^１２５Ｉ−ＳＤＦ−１α競合結合 中枢興奮機構（ＣＥＭ）−Ｔ４細胞を回収し、ＰＢＳで二回洗浄した。最終量
１００μｌの２ｘ１０^５細胞を含む結合緩衝剤（５０ｎＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．
４、１ｎＭ ＣａＣｌ_２、５ｎＭ ＭｇＣｌ_２、０．１％ウシ血清アルブミン）中
の増加性濃度の未標識リガンドの存在中における単一濃度（０．２ｎＭ）の^{１２ ５} Ｉ−ＳＤＦ−１を使って、競合結合実験を行なった。１００ｎＭの未標識ＳＤ
Ｆ−１αを添加し、非特異結合を定量した。試料を室温で６０分間培養した。細
胞を結合緩衝剤から遠心分離で分離し、５００μｌの冷たい結合緩衝剤で洗浄し
て培養を終結した。γ放出計数によって結合リガンドを定量した。

【００４５】 ＣＸＣＲ５への^１２５Ｉ−ＭＩＰ−１β競合結合 上述と類似した実験手法によって、ＣＣＲ５でトランスフェクトされた２９３
細胞と^１２５Ｉ−ＭＩＰ−１βを使ってペプチドのＣＣＲ５への特異結合活性を
定量した。

【００４６】 遺伝子レポーター融合アッセイ 発明者の研究所（ゾウ、Ｎ．他、Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、３０：１６４−
１７３、２０００）およびその他（ドランズ、Ｂ．Ｊ．他、Ｃｅｌｌ、８５：１
１４９−１１５８、１９９６；ドランズ、Ｂ．Ｊ．他、Ｊ Ｖｉｒｏｌ、７１：
６３０５−６３１４、１９９７；ラッカー、Ｊ．他、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙ
ｍｏｌ、２８８：１１８−１３３、１９９７）が発表した修正手法に従い、遺伝
子レポーター融合アッセイを使ってＨＩＶ−１ウイルス進入の媒介におけるＣＸ
ＣＲ４とＣＣＲ５の共受容体活性へのペプチドの抑制作用を定量した。ＨＩＶ−
１Ｅｎｖ蛋白質とＴ７ＲＮＡポリメラーゼを組換えワクチニアウイルス感染によ
って２９３エフェクター細胞に導入し、リファンピシン（１００μｇ／ｍｌ）の
存在中に３２℃で一晩培養した。ＮＩＨ／３Ｔ３標的細胞に、Ｔ７プロモーター
の制御下において、６ウェルプレート中でＣＤ４、ＣＸＣＲ４またはＣＣＲ５を
コードするプラスミドとルシフェラーゼを、ＣａＰＯ_４トランスフェクション法
によって共にトランスフェクトして、３７℃で一晩培養した。融合を始めるため
に、それぞれのウェルに１０^５エフェクター細胞を添加し、シトシンアラビノシ
ドおよびリファンピシンの存在中に３７℃で培養した。融合を５時間した後、細
胞を１５０μlのレポーター溶解緩衝剤（プロメガ）中で溶解し、市販の試薬（
プロメガ）を使ってルシフェラーゼ活性の検査をした。

【００４７】 細胞内カルシウム ＳｕｐＴ１細胞とＣＣＲ５でトランスフェクトされた２９３細胞を使って細胞
内カルシウム流入を測定した。［Ｃａ^２＋］_ｉは蛍光分光計において３４０およ
び３８０ｎｍでの励起を使って測定した（パーキンエルマー ＬＳ５０）。較正
は全蛍光体の放出に１０％のトリトンＸ−１００と無キレートＣａ^２＋に０．５
ＭのＥＧＴＡを使って行なった。細胞内Ｃａ^２＋濃度は蛍光分光計測定プログラ
ムを使って計算した。

【００４８】 細胞遊走 ＳｕｐＴ１細胞の移動は直径６．５ｍｍの部屋と膜細孔サイズ３μＭの使い捨
てトランズウェルトレー（Ｃｏｓｔａｒ、マサチューセッツ州、ケンブリッジ）
を使って評価した。０．５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）ＲＰＭＩ１６４０中
の１００ｎＭのＳＤＦ−１（エール大学のエリアス・ロリス氏提供）を下部ウェ
ルに添加した。ＳＤＦ−１を除く同じ媒体中の１ｘ１０^７細胞／ｍｌのＳｕｐＴ
１細胞１００μｌを上部ウェルに添加した。ペプチドの抑制作用実験のために、
種々の濃度のペプチドと共に細胞をあらかじめ２５℃で１５分間培養しておいた
。また下部のウェルにも同濃度のペプチドを添加した。３７℃、５％のＣＯ_２で
４時間培養後、下部のウェルに移動した細胞を数えた。細胞遊走移動は媒体中を
移動した細胞を引き算することによってのみ定量した（空の対照実験）。

【００４９】 結果： Ｖ１ペプチドはＣＸＣＲ４を結合するがＣＣＲを結合しない Ｖ１ペプチド（配列番号：２）はｖＭＩＰ−ＩＩ（配列番号：１）のＮ末端領
域の１―２１番残基に対応して合成した（表１）。ｖＭＩＰ−ＩＩはＣＸＣＲ４
とＣＣＲ５の両方と相互作用するので（クレダル、Ｔ．Ｎ．他、Ｓｃｉｅｎｃｅ
、２７７：１６５６−１６５９、１９９７）、Ｖ１ペプチド（配列番号：２）の
これら両方の受容体との結合活性を調べた。ＣＸＣＲ４結合は、ペプチドを、対
照としての天然ｖＭＩＰ−ＩＩおよびＳＤＦ−１αと共に、^１２５Ｉ−ＳＤＦ−
１αと抗ＣＸＣＲ ４ｍＡｂ １２Ｇ５の両方の競合結合アッセイ（図１および図
２）を使って調べた。Ｖ１ペプチド（配列番号：２）は１９０ｎＭのＩＣ_５０で
濃度依存して^１２５Ｉ−ＳＤＦ−１αのＣＸＣＲ４結合と強く競合する。したが
って、Ｖ１ペプチド（配列番号：２）は報告された他のＳＤＦ−１のＮ末端に由
来するペプチドと比べてかなりＣＸＣＲ４の結合性が高いように見える（ローツ
チャー、Ｐ．他、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２７３：２２２７９−２２２８３、１
９９８；ヘベカー、N．他、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｌｏｇｙ、８：３６９−３７
６、１９９８）。ＳＤＦ−１のＮ末端に由来するシステイン含有ペプチドの２量
体化が受容体の結合に関係すると報告されているので（ローツチャー、Ｐ．他、
Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２７３：２２２７９−２２２８３、１９９８）、二つの
システインを含むＶ１ペプチド（配列番号：２）の２量体形成を調べた。質量分
析によると２量体を含まない純粋な単体が検出され、よってＶ１ペプチド（配列
番号：２）の強いＣＸＣＲ４結合への２量体化の影響は見られなかった。

【００５０】 ＣＸＣＲ４の認識に重要なｖＭＩＰ−ＩＩ（配列番号：１）のＮ末端内の残基
をさらに同定するために、切断したＶ１類似体を合成した（表１）。Ｖ１（配列
番号：２）の両端を切断したＶ２ペプチド（ｖＭＩＰ−ＩＩの６−１８番残基、
配列番号：３）ではＣＸＣＲ４の結合に有意な損失が見られたが、Ｖ１配列（配
列番号：２）の最初の半分を含むＶ３ペプチド（ｖＭＩＰ−ＩＩの１−１０番残
基、配列番号：４）では活性がいくらか残っていた（図１）。これらのペプチド
のＣＣＲ５受容体との相互作用を、放射線標識ＭＩＰ−１βを使って、競合結合
アッセイで調べた。これらのペプチドはＣＣＲ５とは全く結合活性を示さなかっ
た。これらの結果によれば、ｖＭＩＰ−ＩＩ（配列番号：1）のＮ末端に由来す
るペプチドはＣＸＣＲ４と相互作用を起こすが、ＣＣＲ５とは起こさない。これ
は、これらの受容体を両方とも認識する天然のｖＭＩＰ−ＩＩと対照的である。

【００５１】 Ｖ１ペプチドは選択的にＴ−および両指向性ＨＩＶ−１進入を抑制する 種々のＨＩＶ−１分離株の細胞進入を媒介する共受容体機能を阻止する能力に
おけるＣＸＣＲ４およびＣＣＲ５ペプチドの能力を定量するために細胞−細胞融
合アッセイを使った。

【００５２】 Ｖ１ペプチド（配列番号：２）はＣＸＣＲ４経由のＴ−および両指向性ＨＩＶ
−１ｇｐ１２０−媒介細胞−細胞融合の両方を抑制した（図２）。ＣＸＣＲ４結
合における有意な損失（図１）から期待されたように、切断Ｖ２ペプチド（配列
番号：３）は活性を何も示さなかった。反面、Ｖ１（配列番号：２）およびＶ２
（配列番号：３）のどちらもＣＣＲ５経由のＭ−指向性ＨＩＶ−１ｇｐ１２０−
媒介細胞−細胞融合には効果を示さなかった。これらの結果は結合研究と一致し
、Ｖ１ペプチド（配列番号：2）がＨＩＶ−１進入媒介におけるＣＸＣＲ４共受
容体の機能を選択的に抑制することを示した。

【００５３】 Ｖ１ペプチドはＣＸＣＲ４経由のＳＤＦ−１のシグナルおよび細胞遊走を阻止
する Ｖ１ペプチド（配列番号：２）はＣＸＣＲ４受容体を結合できるので、その細
胞内シグナルを誘導する能力およびＣＸＣＲ４経由のＳＤＦ−１シグナルを妨害
する能力をその受容体を発現するＳｕｐＴ１細胞の細胞内カルシウム流入を測定
して調べた。種々の濃度において、ペプチドはＣＸＣＲ４経由のシグナル活性を
何も示さず、よってその拮抗物質としての活性を示した（図３ａ）。さらに、こ
のペプチドは天然ＣＸＣＲ４リガンドであるＳＤＦ−１のシグナルを妨害し、２
００μＭの濃度ではほとんど完全にＳＤＦ−１シグナルを阻止した（図３ａ）。

【００５４】 Ｖ１ペプチド（配列番号：２）のＣＣＲ５経由のシグナルトランスダクション
への効果もＣＣＲ５でトランスフェクトされた２９３細胞において調べた。ＣＣ
Ｒ５への結合がないことから予想されたように、ペプチドはシグナル活性も示さ
なかったし、ＭＩＰ−１βがＣＣＲ５経由で誘発したシグナルも阻止しなかった
（図３ｂ）。ＣＸＣＲ４もＣＣＲ５も結合しない（図１）Ｖ２ペプチド（配列番
号：３）はＣＸＣＲ４のシグナルトランスダクションでもＣＣＲ５のシグナルト
ランスダクションでも何の効果も示さなかった。カルシウム流入のほかに、Ｖ１
ペプチド（配列番号：２）はＳｕｐＴ１細胞の細胞遊走アッセイでも検査した。
ＣＸＣＲ４経由のＳＤＦ−１シグナルを妨害する能力と同様、Ｖ１ペプチド（配
列番号：２）は濃度に依存する形でＳＤＦ−１の細胞遊走活性を抑制することが
わかった（図４）。

【００５５】 薬剤物質 本発明はＣＸＣＲ４受容体を発現する細胞へのウイルスの進入を抑制してＨＩ
Ｖ−１感染を治療する方法を提供する。このＣＸＣＲ４発現細胞には、例えば、
Ｔ細胞が含まれる。従って、本発明のｖＭＩＰ−ＩＩペプチドを一つまたはそれ
以上、その治療を要する患者に投与する。治療効果量のその薬剤を薬剤的に許容
される担体と組み合わせた物質として投与してもよい。

【００５６】 薬剤的に許容できる担体には、非経口注射、鼻腔内または舌下送出、経口投与
、直腸または局所投与等のための、生理的に許容または容認できる希釈剤、賦形
剤、溶剤、アジュバンドまたはビヒクルがある。物質は無菌で発熱性でないこと
が好ましい。適当な担体の例には、水、食塩水、デキストロース、マニトール、
ラクトース、またはその他の糖類、レシチン、アルブミン、グルタミン酸ナトリ
ウム、システイン塩酸塩、エタノール、ポリオール（プロピリングリコール、エ
チレン、ポリエチレングリコール、グリセロール、等）、野菜油（オリーブ油等
）、オレイン酸エチル、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエ
チレンソルビトールおよびソルビタンエステルのような注射可能な有機エステル
、微結晶性セルロース、アルミニウムメタハイドロキサイド、ベントナイト、寒
天およびトラガカント、またはこれらの物質の混合物等がある。

【００５７】 この薬剤物質はまた湿潤剤、乳化剤、ｐＨ緩衝剤、抗菌および抗黴剤（パラオ
キシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等）のよ
うな非毒性補助物質を少量含んでもよい。望むなら、吸収促進剤または遅延剤（
リポゾーム、アルミニウムモノステアレート、またはゼラチン等）を使うことも
できる。この薬剤物質は液体の溶液や懸濁液、注射の前に液体の溶液や懸濁液に
するに適した固体形、または乳剤のように、従来の形で調製できる。

【００５８】 ｖＭＩＰ−ＩＩペプチドを含む物質は感染の進行を抑制するに効果的な量が任
意の便利な方法で投与され、ＨＩＶ−１によるＣＸＣＲ４発現細胞の感染部位へ
結果的に運ばれる。投与の様式には例えば、経口、直腸、非経口（静脈内、筋肉
内、動脈内、皮下）、槽内、膣内、腹腔内、局所的（粉末、軟膏または滴剤）、
または頬または鼻スプレーまたはエアゾールとして等がある。

【００５９】 薬剤物質の最も効果的な投与方法は非経口投与で、静脈内または皮下投与が好
ましい。静脈内投与には、塩化ナトリウム、グリシン等生理条件に適合する緩衝
ｐＨを持つ生理的に適合する物質を含む任意の適切なデリバリービヒクルに溶解
して使うことができる。この静脈内デリバリービヒクルは当業者に公知である。
好ましい一具体例において、ビヒクルは無菌食塩水である。ペプチドが充分に小
さい場合は、その他の好ましい投与方法として鼻腔内、舌下等がある。静脈内ま
たは皮下投与は、例えば、注射や注入からなり得る。

【００６０】 本発明のｖＭＩＰ−ＩＩ由来ペプチドはＨＩＶ感染の抑制が望まれるどのよう
な状況においても投与することができる。本発明のペプチドはＨＩＶ感染を避け
るための予防手段として、またすでにＨＩＶ感染した患者の治療薬として被験者
の治療に使う事ができる。本発明のペプチドで伝染が抑制され得るウイルスには
ＨＩＶ−１株が含まれるが、Ｔ−向性および両指向性株のようなＣＸＣＲ４経由
で進入する株に最も効果的である。Ｔ−向性株はＣＸＣＲ４を進入に使い、二−
向性株はＣＸＣＲ４またはＣＣＲ５を使う（シモンズ他、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ． ７
０：８３５５−６０、１９９６）。本発明のペプチドはＨＩＶウイルスにさらさ
れた後、感染していない個人に予防的に使うこともできる。このような使用状況
の例としては、母体から乳児へのウイルス伝染予防、そして医療機関の事故にお
いて従業員がＨＩＶ混入血液やシリンジ等にさらされた場合等がある。ペプチド
はまたＨＩＶにかかる危険のある個人、例えば、同性愛者、売春婦、静脈内麻薬
使用者等にも投与してよい。

【００６１】 ｖＭＩＰ−ＩＩ由来ペプチドは単体で投与してもよいし、または他のペプチド
や他の抗ＨＩＶ薬剤と組み合わせて投与してもよい。投与の効果量および方法は
患者の性別、年齢、体重および疾患の段階、投与が治療目的かまたは予防目的か
、またその他の当業者には明らかな要因によって変わる。本明細書に記述した研
究に基づけば、ペプチドの適切な投与量は、約１から１００μＭ、より好ましく
は約１０から約５０μＭ、最も好ましくは約２５μＭの組織中濃度を得る投与量
である。より低いまたはより高い濃度もまた効果的であろうと予測される。組織
中濃度はペプチドの血液値から得る事ができる。

【００６２】 有効薬剤の投与量は感染の度合いに依存する。当業者が個々の状況および患者
の必要性に合わせて適当な投与の量およびスケジュールを引き出す。投与量はだ
いたい体重１ｋｇあたり約０．０１から約１ｍｇ、好ましくは約０．１から約０
．５ｍｇと予想される。有効薬剤は、例えば、２から３週間続く療法中に毎日注
射で投与する。または、薬剤を皮下移植ポンプ経由のような継続する注入法で投
与することもできる。

【００６３】 考察 ウイルス性ケモカインのｖＭＩＰ−ＩＩはいくつかのＣＣおよびＣＸＣケモカ
イン受容体の両方との結合力が高いという点で他のすべての公知のヒトケモカイ
ンと異なる（クレダル、Ｔ．Ｎ．他、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２７７：１６５６−１６
５９、１９９７）。ｖＭＩＰ−ＩＩのこの独自の性質は混然とした受容体相互作
用の構成基盤を探るための魅惑的な道を開く。本発明はｖＭＩＰ−ＩＩの共通結
合部位が多数の受容体相互作用のためにウイルスによって最適化されているのか
、または異なる受容体のために特殊の結合決定因子が進化したのかを決定するこ
とに関する。

【００６４】 合成ペプチド接近法を使って、二つの重要なケモカイン受容体であるＣＸＣＲ
４とＣＣＲ５での識別におけるｖＭＩＰ−ＩＩ（配列番号：１）のＮ末端の役割
を調べた。Ｎ末端領域はｖＭＩＰ−ＩＩおよびその他のケモカインのなかでも最
も多種多様なもので、他のケモカインにおけるＮ末端の重要性に基づけば（クラ
ーク−ルイス、I．他、Ｊ Ｌｅｕｋ Ｂｉｏｌ、５７：７０３−１１、１９９５
）、ｖＭＩＰ−ＩＩの独自機能に決定的に重要なものである。本発明のＶ１ペプ
チド（配列番号：２）はこの領域に対応し、ＣＸＣＲ４と相互作用を起こすこと
が示されており、よってシグナルトランスダクションとＨＩＶ−１の進入を媒介
する共受容体機能を阻止するものである。これはｖＭＩＰ−ＩＩのＮ末端がＣＸ
ＣＲ４を通した生体機能に必須であることを示す。そのＣＸＣＲ４経由の有効な
活性と対照的に、Ｖ１ペプチド（配列番号：２）はＣＣＲ５とは何の相互作用も
示さず、ＣＣＲ５のシグナルおよび共受容体機能の抑制もしなかった。天然のｖ
ＭＩＰ−ＩＩ（配列番号：１）が両方の受容体と結合しその機能を阻止するのに
ｖＭＩＰ−ＩＩのＮ末端断片がＣＣＲ５と相互作用を起こさないということは、
まだ同定されていない他の領域がｖＭＩＰ−ＩＩのＣＣＲ５経由の機能を媒介す
ることを示唆する。または、ｖＭＩＰ−ＩＩ蛋白質のその他の領域を持たないペ
プチドはＣＣＲ５の認識に必要なコンフォメーションを採っていないのかもしれ
ない。しかし、このペプチドの別な受容体、つまりＣＸＣＲ４、との強い相互作
用を考えると、このペプチドが受容体結合に適当な構成要素を持っているはずで
あるから、この確率は低い。両方を考慮して、本発明は異なる受容体を経由する
生体機能を媒介するｖＭＩＰ−ＩＩ（配列番号：１）中の特殊な決定因子を説明
する。

【００６５】 ＣＸＣＲ４認識のためのｖＭＩＰ−ＩＩのＮ末端の重要な特徴を切断したＶ１
ペプチド類似体を使ってさらに分析した。ＳＤＦ−１における陽性残基の空間ク
ラスターがＣＸＣＲ４の細胞外領域の陰性電荷表面との好ましい静電相互作用を
形成するために決定的であると示唆されている（ディールウィス、Ｃ．他、Ｐｒ
ｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、９５：６９４１−６９４６、１９９８
）。高陽性電荷はＴ２２（村上、Ｔ．他、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ、１８６：１３８９
−１３９３、１９９７）、ＡＬＸ４０−４Ｃ（ドランズ、Ｂ．Ｊ．他、Ｊ Ｗｘ
ｐ Ｍｅｄ、１８６：１３９５−１４００、１９９７）、およびＡＭＤ３１００
（ショールズ、Ｄ．他、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ、１８６：１３８３−１３８８、１９
９７）のようなＣＸＣＲ４のいくつかのペプチドおよびノンペプチド抑制剤に見
られる。面白いことに、ｖＭＩＰ−ＩＩ（配列番号：１）は、二者の間の非常に
低い相同性にもかかわらず、ＳＤＦ−１と同じように高い純陽性電荷を持つ。ｖ
ＭＩＰ−ＩＩのＮ末端に由来するＶ１ペプチド（配列番号：２）もいくつかの陽
性電荷残基を含むので、これらの残基が受容体の相互作用に役割を果たすのかど
うかが問題となった。 本発明のＶ２ペプチド（配列番号：３）は、すべての陽
性残基をＶ１ペプチド（配列番号：２）のコア領域に保持するのだが、これらの
陽性電荷残基の機能を調べた。Ｖ２ペプチド（配列番号：３）における活性の損
失は、受容体結合における陽性残基の主要な役割を否定する根拠となった。また
は、ｖＭＩＰ−ＩＩの最初の五つの残基がより決定的で、Ｖ２ペプチド（配列番
号：３）からそれらを取り除いたことが活性損失を説明する。これは、他のケモ
カインの観察においてＮ末端における最初のいくつかの残基が生体機能に最も大
切であったという結果と一致する（ヘベカー、Ｎ．他、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏ
ｌｏｇｙ、８：３６９―３７６、１９９８；ヒューバート、Ｃ．Ａ．他、Ｊ Ｂ
ｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２６６：１８９８９−１８９９４、１９９１；クランプ、Ｍ
．Ｐ．他、ＥＭＢＯＪｏｕｒｎａｌ、１６：６９９６−７００７、１９９７）。
ｖＭＩＰ−ＩＩのＮ末端における最初の五つの残基の役割はさらにＶ１ペプチド
（配列番号：２）のＮ末端側半分だけを含む短い類似体であるＶ３（配列番号：
４）がＣＸＣＲ４結合におけるいくらかの活性を保持していたことによっても示
された（図１）。

【００６６】 本発明のＶ１ペプチド（配列番号：２）はＣＸＣＲ４の高結合性リガンドの発
生に有望な先端化合物である。他のケモカイン由来ペプチドとの直接比較は結合
アッセイのプロトコルが異なるためできないが、他のＣＸＣＲ４結合ペプチドと
比較したときのＶ１ペプチド（配列番号：２）の相対的結合性はこれらのペプチ
ドを天然ＳＤＦ−１と比較して予想される。本発明において、Ｖ１ペプチド（配
列番号：２）は、それぞれ免疫複合体（ＩＣ_５０）値が６４０と１９０ｎＭの抗
ＣＸＣＲ４ ｍＡｂ １２Ｇ５と^１２５Ｉ−ＳＤＦ−１αのＣＸＣＲ４結合と競合
することが示された（表２および図１）。これは、それぞれ、ＳＤＦ−１と比べ
て約３３分の１および約７０分の１の効力である。この値はＳＤＦ−１のＮ末端
に由来する他の報告されたペプチドがＳＤＦ−１と比べて約８２分の１から１０
００分の１の効力であることと比べると、好ましい値である（ローツチャー、Ｐ
．他、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２７３：２２２７９−２２２８３、１９９８；ヘ
ベカー、Ｎ．他、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｌｏｇｙ、８：３６９―３７６、１９
９８）。これまでに報告されたケモカイン由来ペプチドの中において相対的に高
いＣＸＣＲ４結合性を持つ他、Ｖ１ペプチド（配列番号：２）はＣＸＣＲ４の内
在化の誘導のように他の興味深い生物学的性質を持つ。Ｖ１ペプチド（配列番号
：２）の細胞−細胞融合アッセイ（図２）における効力は競合結合アッセイにお
けるものよりずっと低い（図１および表２）。これらの二つのアッセイ間の同様
の効力の不一致はＳＤＦ−１に関しても見られ、^１２５Ｉ−ＳＤＦ−１α競合ア
ッセイ（図1および表２）ではＩＣ_５０が２．７ｎＭであったのに対し、２００
ｎＭにおいてさえも、細胞−細胞融合を４５％しか抑制しなかった（図２）。以
前に他所で報告されたように（ラッカー、Ｊ．他、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍ
ｏｌ、２８８：１１８−１３３、１９９７）、これらは抗ＨＩＶ剤の効力定量に
おける細胞−細胞融合アッセイの相対的な鈍感性による。従って、Ｖ１ペプチド
（配列番号：２）および対照ＳＤＦ−１の活性が細胞−細胞融合アッセイでは低
く見積もられていることになる。細胞−細胞融合アッセイに比較して、細胞遊走
アッセイにおけるＶ１ペプチド（配列番号：２）の抑制活性はずっと高く、ＩＣ _５０ が約１μＭであり、これはＣＸＣＲ４結合効力にずっと近い結果であった（
図４）。

【００６７】 まとめとして、ｖＭＩＰ−ＩＩ（配列番号：１）内のＣＸＣＲ４とＣＣＲ５に
関する精密な結合部位の同定はｖＭＩＰ−ＩＩ機能の分子メカニズムを理解し、
広域スペクトルのＨＩＶ抑制剤を開発するための決定的な段階である。本発明は
ｖＭＩＰ−ＩＩのＮ末端、特に最初の五つの残基をＣＸＣＲ４の重要な結合部位
として同定する。この領域に由来する合成ペプチドはＣＸＣＲ４およびＣＣＲ５
と広く異なった相互作用を示し、よってｖＭＩＰ−ＩＩ（配列番号：１）内の特
殊な部位が異なるケモカイン受容体との相互作用を媒介するという説を実験的に
支持する。この高いＣＸＣＲ４受容体結合性と有効な拮抗効果をもって、本発明
のｖＭＩＰ−ＩＩ由来ペプチド（Ｖ１、配列番号：２）はＨＩＶのＣＸＣＲ４経
由の細胞進入を予防する新しい小分子薬剤の今後の開発にとって良い糸口となる
化合物である。

【００６８】

【配列表】

【化１】

【００６９】

【化２】

【００７０】

【化３】

【００７１】

【化４】

【００７２】

【化５】

【００７３】

【化６】

【００７４】

【化７】

【００７５】

【化８】

【００７６】

【化９】

【００７７】

【化１０】

【００７８】

【化１１】

【００７９】

【化１２】

【００８０】

【化１３】

【配列表】

【図面の簡単な説明】

【図１】 ペプチドＶ１（配列番号：２）（黒三角で示す）、Ｖ２（配列番号：３）（黒
丸で示す）、Ｖ３（配列番号：４）（白抜き四角で示す）、またＳＤＦ−１α（
黒四角で示す）およびｖＭＩＰ−ＩＩ（白抜き丸で示す）の、^１２５Ｉ−ＳＤＦ
−１α蛋白競合結合アッセイで同定したＣＳＣＲ４結合。図中の結果は３つの独
立したアッセイの平均値を示す。データはＰｒｉｓｍ２．０１（Ｇｒａｐｈｐａ
ｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｉｎｃ．、カリフォルニア）を使って処理した。３つの
独立した実験の平均値を示す。

【図２】 細胞−細胞融合アッセイにおけるｖＳＣ６０（ＢＨ１０）Ｔ−指向性および８
９．６両指向性単離株のＣＳＣＲ４のＨＩＶ−１共受容体機能のｖＭＩＰ−ＩＩ
由来ペプチドによる抑制。棒グラフは少なくとも三つの独立したアッセイの平均
値を示し、誤差の棒グラフは標準偏差（±Ｓ．Ｅ．）を示す。

【図３】 ＳｕｐＴ１（ａ）およびＣＣＲ５でトランスフェクトされた２９３細胞（ｂ）
における細胞内カルシウム流入。指示濃度のＶ１ペプチド（配列番号：２）とＳ
ＤＦ−１（１００ｎＭ）またはＭＩＰ−１β（１００ｎＭ）をＳｕｐＴ１と２９
３細胞の処理にそれぞれ連続して使った。

【図４】 ＳＤＦ−１に誘導されたＳｕｐＴ１細胞の走化性のＶ１ペプチド（配列番号：
２）による抑制。棒グラフは三つの独立したアッセイの平均値を示し、誤差の棒
グラフは標準偏差（±Ｓ．Ｅ．）を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｋ 14/00 Ａ６１Ｋ 37/02 Ｆターム(参考） 4C084 AA02 AA07 BA01 BA08 BA18 BA23 CA56 NA14 ZB33 ZC55 4H045 AA10 AA30 BA01 BA09 BA12 BA13 BA14 BA15 BA16 BA17 BA18 BA51 CA03 EA31 FA34

Claims (44)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ウイルス性マクロファージ炎症性蛋白質ＩＩ（ｖＭＩＰ−１１
   ）（配列番号：１）のペプチド断片であり、前記断片がＣＸＣＲ４のシグナルト
   ランスダクションとＨＩＶ−１の進入媒介における共受容体機能を選択的に予防
   するペプチド断片。
2. 【請求項２】 前記断片は前記ｖＭＩＰ−ＩＩのアミノ末端を含む請求項１記
   載のペプチド断片。
3. 【請求項３】 前記アミノ末端は１―２１番目のアミノ酸残基（Ｖ１、配列番
   号：２）、またはその中の任意のサブフラグメントを含む請求項２記載のペプチ
   ド断片。
4. 【請求項４】 前記断片はＨＩＶ−１の細胞進入を予防する新しい小分子薬剤
   の開発に糸口となる化合物である請求項１記載のペプチド断片。
5. 【請求項５】 Ｘ−Ｒ_１−Ｒ_２−Ｒ_３−Ｒ_４−Ｒ_５−Ｒ_６−Ｒ_７−Ｒ_８−Ｒ_９ −Ｒ_１０−Ｒ_１１−Ｒ_１２−Ｒ_１３−Ｒ_１４−Ｒ_１５−Ｒ_１６−Ｒ_１７−Ｒ_１８ −Ｒ_１９−Ｒ_２０−Ｒ_２１−Ｙ の式で表わされるペプチドであり、 ここにおいて、 ＸはペプチドのＮ末端に付着した置換基で、ＸはＨ、ＣＨ_３ＣＯ、Ｃ_６Ｈ_５Ｃ
   ＯまたはＣ_６Ｈ_５ＣＨ_２ＣＯのどれかであり； Ｙは一般式、 Ｃ（α）−ＣＯ−Ｙ を持つペプチドのＣ末端に付着した置換基で、 ＹはＯＨ、ＮＨ_２、ＯＣＨ_３、ＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５またはＮＨＣＨ_３のどれかで
   あり；Ｙは０から９のアミノ酸からなり得、 Ｒ_１はＩｌｅ、Ｌｅｕ、ＶａｌまたはＰｈｅ； Ｒ_２はＧｌｙ、Ａｌａ； Ｒ_３はＡｌａ、Ｇｌｙ； Ｒ_４はＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５はＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ； Ｒ_６はＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｙｒ； Ｒ_７はＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８はＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_９はＡｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇまたはＬｙｓ； Ｒ_１０はＬｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓ； Ｒ_１１はＣｙｓ、ＳｅｒまたはＡｌａ； Ｒ_１２はＣｙｓ、ＳｅｒまたはＡｌａ； Ｒ_１３はＩｌｅ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_１４はＧｌｙ、Ａｌａ； Ｒ_１５はＴｙｒ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ； Ｒ_１６はＧｌｎ、Ａｓｎ、ＡｒｇまたはＬｙｓ； Ｒ_１７はＬｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓ； Ｒ_１８はＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_１９はＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_２０はＩｌｅ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_２１はＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； そしてＲ_１１がＣｙｓならＲ_１２はＣｙｓ、ペニシラミン、または第三級ブチ
   ルオキシカルボニル−ａ−アミノ酪酸のうちのどれかになり； Ｒ_１２がＣｙｓならＲ_１１はＣｙｓ、ペニシラミン、第三級ブチルオキシカル
   ボニル−ａ−アミノ酪酸のうちのどれかになり、そして、 Ｒ_１１とＲ_１２がペニシラミンか第三級ブチルオキシカルボニル−ａ−アミノ
   酪酸でもよいし； そして、Ｒ_１１とＲ_１２がＡｌａでもよいペプチド。
6. 【請求項６】 好ましい一具体例において、 ＸはＨまたはＣＨ_３ＣＯ；ＹはＯＨまたはＮＨ_２；そして、Ｒ_１はＬｅｕ，Ｒ _２ はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、Ｒ_４はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ_７ はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ_９はＡｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓ、Ｒ_１１はＣｙｓ、Ｒ _１２ はＣｙｓ、Ｒ_１３はＬｅｕ、Ｒ_１４はＧｌｙ、Ｒ_１５はＴｙｒ、Ｒ_１６はＧ
   ｌｎ、Ｒ_１７はＬｙｓ、Ｒ_１８はＡｒｇ、Ｒ_１９はＰｒｏ、Ｒ_２０はＬｅｕ、Ｒ _２１ はＰｒｏである請求項５記載のペプチド。
7. 【請求項７】 最も好ましい一具体例において、 ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１はＬｅｕ、Ｒ_２はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、Ｒ _４ はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ_７はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ_９ はＡｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓ、Ｒ_１１はＣｙｓ、Ｒ_１２はＣｙｓ、Ｒ_１３はＬｅｕ
   、Ｒ_１４はＧｌｙ、Ｒ_１５はＴｙｒ、Ｒ_１６はＧｌｎ、Ｒ_１７はＬｙｓ、Ｒ_１８ はＡｒｇ、Ｒ_１９はＰｒｏ、Ｒ_２０はＬｅｕ、Ｒ_２１はＰｒｏである請求項５記
   載のペプチド。
8. 【請求項８】 好ましい具体例が少なくとも次の断片を含むＣ末端切断ペプチ
   ドからなり： Ｘ−Ｒ_１−Ｒ_２−Ｒ_３−Ｒ_４−Ｒ_５−Ｒ_６−Ｒ_７−Ｒ_８−Ｙ、そしてここで； Ｒ_１はＩｌｅ、ＬｅｕまたはＰｈｅ； Ｒ_２はＧｌｙ、ＡｌａまたはＶａｌ； Ｒ_３はＡｌａ、ＶａｌまたはＧｌｙ； Ｒ_４はＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５はＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ またはＬｅｕ； Ｒ_６はＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｒｐ； Ｒ_７はＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８はＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ、 そして、Ｃ末端切断ペプチドが好ましくは少なくとも次の断片を含み、ここで
   ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１はＬｅｕ、Ｒ_２はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、Ｒ_４ はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ_７はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ_９は
   Ａｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓである請求項５記載のペプチド。
9. 【請求項９】 前記ペプチドが３から３０個のアミノ酸、好ましくは８から２
   １個のアミノ酸を含む請求項１記載のペプチド。
10. 【請求項１０】 合成ペプチドであり、前記合成ペプチドのそれぞれのアミノ
    酸はＤ−アミノ酸で、次の式を持ち： Ｘ−Ｒ_１ｄ−Ｒ_２ｄ−Ｒ_３ｄ−Ｒ_４ｄ−Ｒ_５ｄ−Ｒ_６ｄ−Ｒ_７ｄ−Ｒ_８ｄ−Ｒ _９ｄ −Ｒ_１０ｄ−Ｒ_１１ｄ−Ｒ_１２ｄ−Ｒ_１３ｄ−Ｒ_１４ｄ−Ｒ_１５ｄ−Ｒ_{１６ ｄ} −Ｒ_１７ｄ−Ｒ_１８ｄ−Ｒ_１９ｄ−Ｒ_２０ｄ−Ｒ_２１ｄ−Ｙ、ここで ＸはペプチドのＮ末端に付着した置換基で、ＸはＨ、ＣＨ_３ＣＯ、Ｃ_６Ｈ_５Ｃ
    ＯまたはＣ_６Ｈ_５ＣＨ_２ＣＯのどれかであり；そして Ｙは次の一般構造を持つペプチドのＣ末端に付着した置換基で： Ｃ（α）−ＣＯ−Ｙ、ここでＹはＯＨ、ＮＨ_２、ＯＣＨ_３、ＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５ またはＮＨＣＨ_３のどれかであり、Ｙは０から９のアミノ酸からなり得、 Ｒ_１ｄはＩｌｅ、Ｌｅｕ、ＶａｌまたはＰｈｅ； Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ａｌａ； Ｒ_３ｄはＡｌａ、Ｇｌｙ； Ｒ_４ｄはＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ； Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｙｒ； Ｒ_７ｄはＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８ｄはＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇまたはＬｙｓ； Ｒ_１０ｄはＬｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓ； Ｒ_１１ｄはＡｌａ、ＣｙｓまたはＳｅｒ； Ｒ_１２ｄはＡｌａ、ＣｙｓまたはＳｅｒ； Ｒ_１３ｄはＩｌｅ、ＬｅｕまたはＰｈｅ； Ｒ_１４ｄはＧｌｙ、Ａｌａ； Ｒ_１５ｄはＴｙｒ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ； Ｒ_１６ｄはＧｌｎ、Ａｓｎ、ＡｒｇまたはＬｙｓ； Ｒ_１７ｄはＬｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓ； Ｒ_１８ｄはＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_１９ｄはＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_２０ｄはＩｌｅ、ＬｅｕまたはＶａｌ； Ｒ_２１ｄはＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ； そしてここで、 Ｒ_１１ｄがＣｙｓならＲ_１２ｄはＣｙｓ、ペニシラミン、または第三級ブチル
    オキシカルボニル−ａ−アミノ酪酸のうちのどれかになり； Ｒ_１２ｄがＣｙｓならＲ_１１ｄはＣｙｓ、ペニシラミン、または第三級ブチル
    オキシカルボニル−ａ−アミノ酪酸のうちのどれかになり； そして、 Ｒ_１１とＲ_１２がペニシラミンか第三級ブチルオキシカルボニル−ａ−アミノ
    酪酸でもよいし； そして、Ｒ_１１とＲ_１２がＡｌａでもよいペプチド。
11. 【請求項１１】 好ましい一具体例において： ＸはＨまたはＣＨ_３ＣＯ；ＹはＯＨまたはＮＨ_２；そして、Ｒ_１ｄはＬｅｕ，
    Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄは
    Ｈｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_８ｄはＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓ
    、Ｒ_１１ｄはＡｌａ、Ｒ_１２ｄはＣｙｓ、Ｒ_１３ｄはＬｅｕ、Ｒ_１４ｄはＧｌｙ
    、Ｒ_１５ｄはＴｙｒ、Ｒ_１６ｄはＧｌｎ、Ｒ_１７ｄはＬｙｓ、Ｒ_１８ｄはＡｒｇ
    、Ｒ_１９ｄはＰｒｏ、Ｒ_２０ｄはＬｅｕ、Ｒ_２１ｄはＰｒｏである請求項１０記
    載のペプチド。
12. 【請求項１２】 最も好ましい一具体例において： ＸはＨ；ＹはＮＨ_２；そして、Ｒ_１ｄはＬｅｕ，Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡ
    ｌａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ _８ｄ はＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓ、Ｒ_１１ｄはＡｌａ、Ｒ_{１２ ｄ} はＣｙｓ、Ｒ_１３ｄはＬｅｕ、Ｒ_１４ｄはＧｌｙ、Ｒ_１５ｄはＴｙｒ、Ｒ_{１６ ｄ} はＧｌｎ、Ｒ_１７ｄはＬｙｓ、Ｒ_１８ｄはＡｒｇ、Ｒ_１９ｄはＰｒｏ、Ｒ_{２０ ｄ} はＬｅｕ、Ｒ_２１ｄはＰｒｏである請求項１０記載のペプチド。
13. 【請求項１３】 好ましいＣ末端切断ペプチドが少なくとも次の断片を含む、
    つまり： Ｘ−Ｒ_１ｄ−Ｒ_２ｄ−Ｒ_３ｄ−Ｒ_４ｄ−Ｒ_５ｄ−Ｒ_６ｄ−Ｒ_７ｄ−Ｒ_８ｄ−Ｙ そしてここで； Ｒ_１ｄはＩｌｅ、ＬｅｕまたはＰｈｅ； Ｒ_２ｄはＧｌｙ、ＡｌａまたはＶａｌ； Ｒ_３ｄはＡｌａ、ＶａｌまたはＧｌｙ； Ｒ_４ｄはＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ またはＬｅｕ； Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｒｐ； Ｒ_７ｄはＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８ｄはＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌである請求項１０記載のペプチド。
14. 【請求項１４】 より好ましくはＣ末端切断ペプチドが少なくとも次の断片か
    らなる、つまり； ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１ｄはＬｅｕ、Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌ
    ａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_{８ ｄ} はＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓである請求項１０記載のペプチ
    ド。
15. 【請求項１５】 ３から３０個のアミノ酸、好ましくは８から２１個のアミノ
    酸を含む請求項１０記載のペプチド。
16. 【請求項１６】 前記ペプチドが前述の式の逆型からなり、 Ｘ−Ｒ_２１−Ｒ_２０−Ｒ_１９−Ｒ_１８−Ｒ_１７−Ｒ_１６−Ｒ_１５−Ｒ_１４−Ｒ _１３ −Ｒ_１２−Ｒ_１１−Ｒ_１０−Ｒ_９−Ｒ_８−Ｒ_７−Ｒ_６−Ｒ_５−Ｒ_４−Ｒ_３−
    Ｒ_２−Ｒ_１−Ｙ ここでアミノ酸はＬ型または自然発生アミノ酸として存在する請求項５記載の
    ペプチド。
17. 【請求項１７】 好ましい一具体例において： ＸはＨまたはＣＨ_３ＣＯ；ＹはＯＨまたはＮＨ_２；そして、Ｒ_１はＬｅｕ，Ｒ _２ はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、Ｒ_４はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ_７ はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ_９はＡｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓ、Ｒ_１１はＣｙｓ、Ｒ _１２ はＣｙｓ、Ｒ_１３はＬｅｕ、Ｒ_１４はＧｌｙ、Ｒ_１５はＴｙｒ、Ｒ_１６はＧ
    ｌｎ、Ｒ_１７はＬｙｓ、Ｒ_１８はＡｒｇ、Ｒ_１９はＰｒｏ、Ｒ_２０はＬｅｕ、Ｒ _２１ はＰｒｏである請求項１６記載のペプチド。
18. 【請求項１８】 最も好ましい一具体例において： ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１はＬｅｕ、Ｒ_２はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌａ、Ｒ _４ はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ_７はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ、Ｒ_９ はＡｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓ、Ｒ_１１はＣｙｓ、Ｒ_１２はＣｙｓ、Ｒ_１３はＬｅｕ
    、Ｒ_１４はＧｌｙ、Ｒ_１５はＴｙｒ、Ｒ_１６はＧｌｎ、Ｒ_１７はＬｙｓ、Ｒ_１８ はＡｒｇ、Ｒ_１９はＰｒｏ、Ｒ_２０はＬｅｕ、Ｒ_２１はＰｒｏである請求項１６
    記載のペプチド。
19. 【請求項１９】 好ましい一具体例が少なくとも次の断片を含むＣ末端切断ペ
    プチドを含む、つまり： Ｘ−Ｒ_１−Ｒ_２−Ｒ_３−Ｒ_４−Ｒ_５−Ｒ_６−Ｒ_７−Ｒ_８−Ｙ、ここで； Ｒ_１はＩｌｅ、ＬｅｕまたはＰｈｅ； Ｒ_２はＧｌｙ、ＡｌａまたはＶａｌ； Ｒ_３はＡｌａ、ＶａｌまたはＧｌｙ； Ｒ_４はＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５はＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ またはＬｅｕ； Ｒ_６はＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｒｐ； Ｒ_７はＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８はＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌ、 そして、好ましくはＣ末端切断ペプチドが少なくとも次の断片を含む、つまり
    ここで、ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１はＬｅｕ、Ｒ_２はＧｌｙ、Ｒ_３はＡｌ
    ａ、Ｒ_４はＳｅｒ、Ｒ_５はＴｒｐ、Ｒ_６はＨｉｓ、Ｒ_７はＡｒｇ、Ｒ_８はＰｒｏ
    、Ｒ_９はＡｓｐ、Ｒ_１０はＬｙｓである請求項１６記載のペプチド。
20. 【請求項２０】 前記ペプチドは３から３０個のアミノ酸、好ましくは８から
    ２１個のアミノ酸を含む請求項１６記載のペプチド。
21. 【請求項２１】 ペプチドが前記式の逆型を含む、つまり Ｘ−Ｒ_２１ｄ−Ｒ_２０ｄ−Ｒ_１９ｄ−Ｒ_１８ｄ−Ｒ_１７ｄ−Ｒ_１６ｄ−Ｒ_{１５ ｄ} −Ｒ_１４ｄ−Ｒ_１３ｄ−Ｒ_１２ｄ−Ｒ_１１ｄ−Ｒ_１０ｄ−Ｒ_９ｄ−Ｒ_８ｄ−Ｒ _７ｄ −Ｒ_６ｄ−Ｒ_５ｄ−Ｒ_４ｄ−Ｒ_３ｄ−Ｒ_２ｄ−Ｒ_１ｄ−Ｙ、ここでアミノ酸
    はＤ型または不自然発生アミノ酸として存在する請求項５記載のペプチド。
22. 【請求項２２】 好ましい一具体例において： ＸはＨまたはＣＨ_３ＣＯ；ＹはＯＨまたはＮＨ_２；そして、Ｒ_１ｄはＬｅｕ，
    Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄは
    Ｈｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_８ｄはＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓ
    、Ｒ_１１ｄはＡｌａ、Ｒ_１２ｄはＣｙｓ、Ｒ_１３ｄはＬｅｕ、Ｒ_１４ｄはＧｌｙ
    、Ｒ_１５ｄはＴｙｒ、Ｒ_１６ｄはＧｌｎ、Ｒ_１７ｄはＬｙｓ、Ｒ_１８ｄはＡｒｇ
    、Ｒ_１９ｄはＰｒｏ、Ｒ_２０ｄはＬｅｕ、Ｒ_２１ｄはＰｒｏである請求項２１記
    載のペプチド。
23. 【請求項２３】 最も好ましい一具体例において： ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１ｄはＬｅｕ、Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌａ
    、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_８ｄ はＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓ、Ｒ_１１ｄはＡｌａ、Ｒ_１２ｄは
    Ｃｙｓ、Ｒ_１３ｄはＬｅｕ、Ｒ_１４ｄはＧｌｙ、Ｒ_１５ｄはＴｙｒ、Ｒ_１６ｄは
    Ｇｌｎ、Ｒ_１７ｄはＬｙｓ、Ｒ_１８ｄはＡｒｇ、Ｒ_１９ｄはＰｒｏ、Ｒ_２０ｄは
    Ｌｅｕ、Ｒ_２１ｄはＰｒｏである請求項２１記載のペプチド。 【請求項２３】 好ましいＣ末端切断ペプチドは少なくとも次の断片を含む、
    つまり： Ｘ−Ｒ_１ｄ−Ｒ_２ｄ−Ｒ_３ｄ−Ｒ_４ｄ−Ｒ_５ｄ−Ｒ_６ｄ−Ｒ_７ｄ−Ｒ_８ｄ−Ｙ そしてここで、 Ｒ_１ｄはＩｌｅ、ＬｅｕまたはＰｈｅ； Ｒ_２ｄはＧｌｙ、ＡｌａまたはＶａｌ； Ｒ_３ｄはＡｌａ、ＶａｌまたはＧｌｙ； Ｒ_４ｄはＳｅｒ、ＴｈｒまたはＴｙｒ； Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ またはＬｅｕ； Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＴｒｐ； Ｒ_７ｄはＡｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ； Ｒ_８ｄはＰｒｏ、ＬｅｕまたはＶａｌである請求項２１記載のペプチド。
24. 【請求項２４】 より好ましい一具体例は少なくとも次の断片を含む、つまり
    ； ＸはＨ、ＹはＮＨ_２；そしてＲ_１ｄはＬｅｕ、Ｒ_２ｄはＧｌｙ、Ｒ_３ｄはＡｌ
    ａ、Ｒ_４ｄはＳｅｒ、Ｒ_５ｄはＴｒｐ、Ｒ_６ｄはＨｉｓ、Ｒ_７ｄはＡｒｇ、Ｒ_{８ ｄ} はＰｒｏ、Ｒ_９ｄはＡｓｐ、Ｒ_１０ｄはＬｙｓである請求項２１記載のペプチ
    ド。
25. 【請求項２５】 ３から３０個のアミノ酸、好ましくは８から２１個のアミノ
    酸を含む請求項２１記載のペプチド。
26. 【請求項２６】 薬剤的に許容できる担体と請求項５記載のペプチドを含む薬
    剤物質。
27. 【請求項２７】 薬剤的に許容できる担体と請求項１０記載のペプチドを含む
    薬剤物質。
28. 【請求項２８】 薬剤的に許容できる担体と請求項１６記載のペプチドを含む
    薬剤物質。
29. 【請求項２９】 薬剤的に許容できる担体と請求項２１記載のペプチドを含む
    薬剤物質。
30. 【請求項３０】 ＨＩＶ−１のＣＸＣＲ４発現細胞への進入を抑制する方法で
    、前記細胞を請求項５記載のペプチドに接触させることを含む方法。
31. 【請求項３１】 ＨＩＶ−１のＣＸＣＲ４発現細胞への進入を抑制する方法で
    、前記細胞を請求項１０記載のペプチドに接触させることを含む方法。
32. 【請求項３２】ＨＩＶ−１のＣＸＣＲ４発現細胞への進入を抑制する方法で、
    前記細胞を請求項１６記載のペプチドに接触させることを含む方法。
33. 【請求項３３】 ＨＩＶ−１のＣＸＣＲ４発現細胞への進入を抑制する方法で
    、前記細胞を請求項２１記載のペプチドに接触させることを含む方法。
34. 【請求項３４】 ＨＩＶ−１感染の治療法で、請求項５記載のペプチドを効果
    的な量個人に投与することを含む治療法。
35. 【請求項３５】 ＨＩＶ−１感染の治療法で、請求項１０記載のペプチドを効
    果的な量個人に投与することを含む治療法。
36. 【請求項３６】 ＨＩＶ−１感染の治療法で、請求項１６記載のペプチドを効
    果的な量個人に投与することを含む治療法。 【請求項３６】 ＨＩＶ−１感染の治療法で、請求項２１記載のペプチドを効
    果的な量個人に投与することを含む治療法。
37. 【請求項３７】 疾患、ＣＸＣＲ４経由でＣＸＣＲ４発現細胞へ進入すること
    を必要とする前記疾患の原因因子の抑制法で、前記細胞を請求５記載のペプチド
    に接触させることを含む抑制法。
38. 【請求項３８】 疾患、ＣＸＣＲ４経由でＣＸＣＲ４発現細胞へ進入すること
    を必要とする前記疾患の原因因子の抑制法で、前記細胞を請求１０記載のペプチ
    ドに接触させることを含む抑制法。
39. 【請求項３９】 疾患、ＣＸＣＲ４経由でＣＸＣＲ４発現細胞へ進入すること
    を必要とする前記疾患の原因因子の抑制法で、前記細胞を請求１６記載のペプチ
    ドに接触させることを含む抑制法。
40. 【請求項４０】 疾患、ＣＸＣＲ４経由でＣＸＣＲ４発現細胞へ進入すること
    を必要とする前記疾患の原因因子の抑制法で、前記細胞を請求２１記載のペプチ
    ドに接触させることを含む抑制法。
41. 【請求項４１】 疾患、ＣＸＣＲ４経由でＣＸＣＲ４発現細胞へ進入すること
    を必要とする前記疾患の原因因子の治療法で、請求５記載のペプチドを効果的な
    量個人に投与することを含む治療法。
42. 【請求項４２】 疾患、ＣＸＣＲ４経由でＣＸＣＲ４発現細胞へ進入すること
    を必要とする前記疾患の原因因子の治療法で、請求１０記載のペプチドを効果的
    な量個人に投与することを含む治療法。
43. 【請求項４３】 疾患、ＣＸＣＲ４経由でＣＸＣＲ４発現細胞へ進入すること
    を必要とする前記疾患の原因因子の治療法で、請求４６記載のペプチドを効果的
    な量個人に投与することを含む治療法。
44. 【請求項４４】 疾患、ＣＸＣＲ４経由でＣＸＣＲ４発現細胞へ進入すること
    を必要とする前記疾患の原因因子の治療法で、請求２１記載のペプチドを効果的
    な量個人に投与することを含む治療法。