JP2002363054A - フィラグリン合成促進剤、角質層保湿機能改善・増強剤および角質層遊離アミノ酸量増加剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 フィラグリン合成促進剤、角質層保湿機能改
善・増強剤および角質層遊離アミノ酸量増加剤を提供す
る。 【解決手段】 カンゾウ抽出物を有効成分として含有せ
しめる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、フィラグリンの合
成を促進することができるフィラグリン合成促進剤、フ
ィラグリン合成促進作用を通じて角質層の保湿機能を本
質的に改善及び／又は増強することができる角質層保湿
機能改善・増強剤、並びにフィラグリン合成促進作用を
通じて天然保湿因子（ＮＭＦ）の主体をなす角質層の遊
離アミノ酸量を増加させることができる角質層遊離アミ
ノ酸量増加剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】皮膚の角質層は角質細胞と細胞間脂質か
ら構成され、体内の水分蒸散や外界からの異物の侵入を
防ぐというバリアー機能を発揮している。この角質層に
含まれる水分が、スキンケアにおける保湿に重要な役割
を果たしており、その保湿に関与する因子としては天然
保湿因子（以下「ＮＭＦ」と略す。）を挙げることがで
きる。ＮＭＦは、糖、アミノ酸及びその誘導体、乳酸
塩、ミネラル塩などから構成されており、アミノ酸がそ
の主体をなしている。

【０００３】これまでは、ＮＭＦである糖、アミノ酸、
有機酸、ピロリドンカルボン酸塩、コラーゲン、ヒアル
ロン酸などのムコ多糖類、グリセリン、1,3-ブチレング
リコール等の保湿作用を有する物質を塗布して皮膚の保
湿性を高めてきた。

【０００４】しかしながら、上記のような保湿剤は、塗
布により皮膚からの蒸散を防ぐ作用は有しても、角質層
の水分保持機構を本質的に改善する作用までは期待でき
ない。また、上記のような保湿剤は、皮膚からの水分蒸
散を遅くするものであるから、概して使用感が悪く、長
期間の使用により皮膚障害を起こすことさえある。

【０００５】一方、角質層水分量の低下を伴う乾皮症、
アトピー性疾患及び肌荒れの皮膚においては、角質層の
アミノ酸量が減少していることが知られている。ＮＭＦ
の主体をなすアミノ酸の産生は、ケラトヒアリン顆粒に
由来するフィラグリンの分解によるものである。このフ
ィラグリンは、表皮ケラチノサイトにおいてプロフィラ
グリンとして発現し、直ちにリン酸化し、ケラトヒラリ
ン顆粒に蓄積する。その後、脱リン酸、加水分解を経
て、フィラグリンへと分解され、角質層へと移行し、ケ
ラチンフィラメントの凝集効率を高め、角質細胞の内部
構築に関わる。

【０００６】近年、このフィラグリンが皮膚の水分保持
に非常に重要かつ必要不可欠であること、及び乾燥など
の条件によりフィラグリンの合成が低下することが明ら
かとなったが、フィラグリンの合成を促進させることが
できる物質は未だ発見されていない。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】そこで、本発明は、第
一に、フィラグリン合成を促進させることができる物質
を見出し、これを有効成分として含有するフィラグリン
合成促進剤を提供することを目的とする。

【０００８】また、本発明は、第二に、フィラグリン合
成促進作用を通じて角質層の保湿機能を本質的に改善及
び／又は増強することができる角質層保湿機能改善・増
強剤を提供することを目的とする。

【０００９】さらに、本発明は、第三に、フィラグリン
合成促進作用を通じて天然保湿因子の主体をなす角質層
の遊離アミノ酸量を増加させることができる角質層遊離
アミノ酸量増加剤を提供することを目的とする。

【００１０】

【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に、本発明のフィラグリン合成促進剤、角質層保湿機能
改善・増強剤および角質層遊離アミノ酸量増加剤は、カ
ンゾウ抽出物を有効成分として含有することを特徴とす
る。

【００１１】本発明のフィラグリン合成促進剤、角質層
保湿機能改善・増強剤および角質層遊離アミノ酸量増加
剤の好ましい実施形態において、前記カンゾウ抽出物
は、極性溶媒を抽出溶媒として用いて得られるカンゾウ
の根部からの抽出物である。

【００１２】

【発明の実施の形態】本発明のフィラグリン合成促進
剤、角質層保湿機能改善・増強剤および角質層遊離アミ
ノ酸量増加剤の有効成分である「カンゾウ抽出物」は、
カンゾウから得られる抽出物を意味し、「カンゾウ抽出
物」には、カンゾウから得られる抽出液、該抽出液の希
釈液もしくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥
物、またはこれらの粗精製物もしくは精製物のいずれも
が含まれる。

【００１３】抽出原料としては、カンゾウ（甘草）を使
用する。カンゾウは、マメ科に属し、古代より薬用又は
甘味料の原料として利用されている有用植物である。特
に根部にはグリチルリチンその他有用成分が含有されて
いることが確認されている。

【００１４】カンゾウには、Glychyrrhiza glabra、Gly
chyrrhiza inflata、Glychyrrhizauralensis、Glychyrr
hiza aspera、Glychyrrhiza eurycarpa、Glychyrrhiza
pallidiflora、Glychyrrhiza yunnanensis、Glychyrrhi
za lepidota、Glychyrrhizaechinata、Glychyrrhiza ac
anthocarpaなど様々な種類のものがあり、これらのう
ち、いずれの種類の植物を抽出原料として使用してもよ
いが、Glychyrrhiza属に属する植物のうち、Glychyrrhi
za glabraおよびGlychyrrhiza inflataを抽出原料とし
て使用することが好ましい。また、抽出原料としては、
カンゾウの根部を使用することが好ましい。

【００１５】抽出原料として使用するカンゾウは、採取
後ただちに乾燥し粉砕したものが適当である。乾燥は天
日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行
ってもよい。カンゾウは、ヘキサン、ベンゼン等の非極
性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料と
して使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことによ
り、カンゾウの極性溶媒による抽出処理を効率よく行う
ことができる。

【００１６】抽出処理の際には、抽出溶媒として極性溶
媒を使用するのが好ましい。カンゾウに含まれるフィラ
グリン合成促進作用を示す成分は、極性溶媒を抽出溶媒
とする抽出処理によって容易に抽出することができる。

【００１７】好適な抽出溶媒の具体例としては、水、低
級脂肪族アルコール、含水の低級脂肪族アルコール等を
例示でき、これらを単独で、又はこれら２種以上の混合
物として使用することができる。好適な低級脂肪族アル
コールの具体例としては、メタノール、エタノール、プ
ロパノール、1,3−ブチレングリコール、グリセリン、
プロピレングリコール等を例示することができる。

【００１８】抽出溶媒として使用し得る水には、純水、
水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等
の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に
施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、滅菌、
ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれ
る。従って、本発明において抽出溶媒として使用し得る
水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リ
ン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。

【００１９】２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒と
して使用する場合、その混合比は適宜調整することがで
きる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を
使用する場合には、水と低級脂肪族アルコールとの混合
比を自由に変更することができるが、特に７：３〜２：
８（重量比）が好適である。

【００２０】抽出処理は、カンゾウに含まれる可溶性成
分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定されず、常法
に従って行うことができる。抽出処理の際には、特殊な
抽出方法を採用する必要はなく、室温ないし還流加熱下
において任意の装置を使用することができる。

【００２１】例えば、抽出溶媒を満たした処理槽に抽出
原料を投入し、ときどき攪拌しながら可溶性成分を溶出
させる。この際、抽出条件は抽出原料等に応じて適宜調
整し得るが、抽出溶媒量は通常、抽出原料の５〜１５倍
量（重量比）あり、抽出時間は通常１〜３時間であり、
抽出温度は通常、常温〜９５℃である。

【００２２】抽出処理により可溶性成分を溶出させた
後、ろ過して抽出残渣を除くことによって、抽出液を得
ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液
若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精
製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、
濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。

【００２３】得られた抽出液はそのままでもフィラグリ
ン合成促進剤、角質層保湿機能改善・増強剤および角質
層遊離アミノ酸量増加剤として使用することができる
が、濃縮液またはその乾燥物としたものの方が利用しや
すい。抽出液の乾燥物を得るにあたっては、吸湿性を改
善するためにデキストリン、シクロデキストリン等のキ
ャリアーを添加してもよい。

【００２４】また、カンゾウは特有の匂いと味を有して
いるため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、
脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、化
粧料に添加する場合には大量に使用するものではないか
ら、未精製のままでも実用上支障はない。精製は、具体
的には活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理
等によって行うことができる。

【００２５】カンゾウ抽出物は、そのままでもフィラグ
リン合成促進剤、角質層保湿機能改善・増強剤または角
質層遊離アミノ酸量増加剤として使用することができる
が、常法に従って製剤化して使用することもできる。製
剤化する場合、保存や取扱いを容易にするために、デキ
ストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容され得
るキャリアーその他任意の助剤を添加することができ
る。カンゾウからの抽出物は、製剤化により粉末状、顆
粒状、錠剤状等、任意の剤形とすることができる。

【００２６】本発明のフィラグリン合成促進剤、角質層
保湿機能改善・増強剤または角質層遊離アミノ酸量増加
剤は、次のような作用効果を発揮することができる。

【００２７】本発明のフィラグリン合成促進剤は、経皮
的に吸収されて、皮膚におけるフィラグリン合成を促進
することができる。本発明のフィラグリン合成促進剤の
作用機序としては、プロフィラグリンの発現量の増加な
どが考えられる。

【００２８】本発明の角質層保湿機能改善・増強剤は、
フィラグリン合成促進作用を通じて、フィラグリンによ
るケラチンフィラメントの凝集を誘導し、これによって
角質細胞の内部構造を構築して、角質層の保湿機能を改
善及び／又は増強することができる。

【００２９】本発明の角質層遊離アミノ酸量増加剤は、
フィラグリン合成促進作用を通じて、天然保湿因子の主
体をなす角質層の遊離アミノ酸量を増加させ、これによ
って保湿効果を発揮することができる。また、本発明の
角質層遊離アミノ酸量増加剤は、乾皮症、アトピー性疾
患、肌荒れなど角質層の遊離アミノ酸量の低下が原因と
なって発症する皮膚疾患を予防及び／又は治療すること
ができる。

【００３０】本発明のフィラグリン合成促進剤、角質層
保湿機能改善・増強剤および角質層遊離アミノ酸量増加
剤は、フィラグリン合成促進作用を通じて保湿効果を発
揮することができるとともに、皮膚に適用した場合の使
用感と安全性に優れているため、皮膚化粧料に配合する
のに好適である。

【００３１】本発明のフィラグリン合成促進剤、角質層
保湿機能改善・増強剤および角質層遊離アミノ酸量増加
剤を配合し得る皮膚化粧料は特に限定されないが、その
具体例としては、軟膏、クリーム、乳液、ローション、
パック、入浴剤等を例示することができる。

【００３２】皮膚化粧料におけるフィラグリン合成促進
剤、角質層保湿機能改善・増強剤および角質層遊離アミ
ノ酸量増加剤の配合量は、皮膚化粧料の種類や抽出物の
生理活性等によって適宜調製することができるが、好適
な配合率は標準的なカンゾウ抽出物に換算して約０．０
１〜１０重量％である。

【００３３】皮膚化粧料には、保湿効果の妨げにならな
い限り、皮膚化粧料の製造に通常使用される各種主剤及
び助剤、その他任意の助剤を配合することができ、皮膚
の保湿効果に関し、本発明の保湿剤のみが主剤となるも
のに限られるわけではない。

【００３４】皮膚化粧料において、本発明のフィラグリ
ン合成促進剤、角質層保湿機能改善・増強剤および角質
層遊離アミノ酸量増加剤と共に構成成分として利用可能
なものとしては、具体的に挙げると次のとおりである。
なお、カンゾウ抽出物とともに以下の構成成分を併用し
た場合、カンゾウ抽出物と併用された構成成分との間の
相乗作用が、通常期待される以上の優れた使用効果をも
たらすことがある。

【００３５】収斂剤：クエン酸又はその塩類、酒石酸又
はその塩類、乳酸又はその塩類、塩化アルミニウム、硫
酸アルミニウムカリウム、アラントインクロルヒドロキ
シアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウ
ム、パラフェノールスルホン酸亜鉛、硫酸亜鉛、ジユエ
キス、エイジツエキス、ハマメリスエキス、ゲンノショ
ウコエキス、茶カテキン類、プロアントシアニジン類、
ガイヨウエキス、オドリコソウエキス、オトギリソウエ
キス、ダイオウエキス、ヤグルマソウエキス、スギナエ
キス、キズタエキス、キューカンバーエキス、マロニエ
エキス、サルビアエキス、メリッサエキス、タマリンド
ハスクエキス等。

【００３６】殺菌・抗菌剤：安息香酸、安息香酸ナトリ
ウム、パラオキシ安息香酸エステル、塩化ジステアリル
メチルアンモニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化アルキ
ルジアミノエチルグリシン液、塩酸クロルヘキシジン、
オルトフェニルフェノール、感光素１０１号、感光素２
０１号、サリチル酸、サリチル酸ナトリウム、ソルビン
酸、ハロカルバン、レゾルシン、パラクロロフェノー
ル、フェノキシエタノール、ビサボロール、ヒノキチオ
ール、メントール、キトサン、キトサン分解物、ジユエ
キス、クジンエキス、エンメイソウエキス、ビワエキ
ス、ウワウルシエキス、ホップエキス、ユッカエキス、
アロエエキス、ケイヒエキス、ガジュツエキス、油溶性
甘草エキス（カンゾウ疎水性フラボノイド、グラブリジ
ン、グラブレン、リコカルコンＡ）等。

【００３７】紫外線吸収剤：β−イソプロピルフラノン
誘導体、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、オキシベ
ンゾン、オキシベンゾンスルホン酸、テトラヒドロキシ
ベンゾフェノン、ジヒドロキシジメトキシベンゾフェノ
ン、ジヒドロキシベンゾフェノン、シノキサート、ジイ
ソプロピルケイヒ酸メチル、メトキシケイヒ酸オクチ
ル、パラアミノ安息香酸グリセリル、パラジメチルアミ
ノ安息香酸アミル、パラジメチル安息香酸オクチル、パ
ラアミノ安息香酸オクチル、パラアミノ安息香酸、パラ
アミノ安息香酸エチル、ブチルメトキシジベンゾイルメ
タン、酸化チタン、β−カロチン、γ−オリザノール、
コメヌカエキス、アロエエキス、カバノキエキス、シラ
カンバエキス、カミツレエキス、コゴメグサエキス、セ
イヨウサンザシエキス、ヘンナエキス、テウチグルミエ
キス、マロニエエキス、イチョウ葉エキス、カミツレエ
キス、油溶性カンゾウエキス等。

【００３８】美白剤：アスコルビン酸およびその誘導
体、イオウ、胎盤加水分解物、エラグ酸およびその誘導
体、コウジ酸およびその誘導体、グルコサミンおよびそ
の誘導体、アゼライおよびその誘導体、アルブチンおよ
びその誘導体、ヒドロキシケイヒ酸およびその誘導体、
グルタチオン、アルニカエキス、オウゴンエキス、セン
キュウエキス、ソウハクヒエキス、サイコエキス、ボウ
フウエキス、ハマボウフウエキス、マンネンタケ菌糸体
培養物およびその抽出物、ギムネマエキス、シナノキエ
キス、モモ葉エキス、エイジツエキス、クジンエキス、
ジユエキス、トウキエキス、ヨクイニンエキス、カキ葉
エキス、ダイオウエキス、ボタンピエキス、ハマメリス
エキス、マロニエエキス、オトギリソウエキス、オドリ
コソウエキス、油溶性カンゾウエキス（カンゾウ疎水性
フラボン、グラブリジン、グラブレン、リコカルコン
Ａ）等。

【００３９】保湿剤：セリン、グリシン、スレオニン、
アラニン、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ビトロネ
クチン、フィブロネクチン、ケラチン、エラスチン、ロ
ーヤルゼリー、コンドロイチン硫酸ヘパリン、グリセロ
リン酸脂質、スフィンゴリン脂質、スフィンゴ糖脂質、
リノール酸又はそのエステル類、エイコサペンタエン酸
又はそのエステル類、ペクチン、アルゲコロイド、ビフ
ィズス菌発酵物、乳酸発酵物、酵母抽出物、レイシ菌糸
体培養物又はその抽出物、小麦胚芽油、アボガド油、米
胚芽油、ホホバ油、ダイズリン脂質、γ-オリザノール、
ビロウドアオイエキス、ヨクイニンエキス、ジオウエキ
ス、タイソウエキス、カイソウエキス、キダチアロエエ
キス、ゴボウエキス、マロニエエキス、マンネンロウエ
キス、アルニカエキス、小麦フスマ、コメヌカエキス
等。

【００４０】細胞賦活剤：胎盤抽出物、リボフラビン又
はその誘導体、ピリドキシン又はその誘導体、ニコチン
酸又はその誘導体、パントテン酸又はその誘導体、α−
トコフェロール又はその誘導体、アルニカエキス、ニン
ジンエキス、オタネニンジンエキス、エゾウコギエキ
ス、ヘチマエキス（サポニン）、シコンエキス、シラカ
ンバエキス、オウバクエキス、ボタンピエキス、シャク
ヤクエキス、ムクロジエキス、ベニバナエキス、アシタ
バエキス、ビワ葉エキス、ヒキオコシエキス、ユキノシ
タエキス、黄杞エキス、サルビアエキス、ニンニクエキ
ス、マンネンロウエキス等。

【００４１】消炎・抗アレルギー剤：アズレン、アラン
トイン、アミノカプロン酸、インドメタシン、塩化リゾ
チーム、イプシロンアミノカプロン酸、オキシベンゾ
ン、グリチルリチン酸又はその誘導体、グリチルレチン
酸又はその誘導体、感光素301号、感光素401号、塩酸ジ
フェンヒドラミン、トラネキサム酸又はその誘導体、ア
デノシンリン酸、エストラジオール、エスロン、エチニ
ルエストラジオール、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、
プレドニゾロン、プロゲステロン、コルチコステロン、
アルニカエキス、インチンコウエキス、サンシシエキ
ス、ジュウヤクエキス、カンゾウエキス、トウキエキ
ス、ヨモギエキス、ワレモコウエキス、リンドウエキ
ス、サイコエキス、センキュウエキス、ボウフウエキ
ス、セイヨウノコギリソウエキス、オウレンエキス、シ
ソエキス、マロニエエキス、オウゴンエキス等。

【００４２】抗酸化・活性酸素消去剤：ジブチルヒドロ
キシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、没子食酸
プロピル、バイカリン、バイカレイン、スーパーオキサ
イドディスムターゼ、カタラーゼ、ローズマリーエキ
ス、メリッサエキス、オウゴンエキス、エイジツエキ
ス、ビワ葉エキス、ホップエキス、ハマメリスエキス、
シャクヤクエキス、セージエキス、キナエキス、カミツ
レエキス、ユーカリエキス、シソエキス、イチョウ葉エ
キス、タイムエキス、カルダモンエキス、キャラウェイ
エキス、ナツメグエキス、メースエキス、ローレルエキ
ス、クローブエキス、ターメリックエキス、ヤナギタデ
エキス等。

【００４３】油脂類：大豆油、アマニ油、キリ油、ゴマ
油、ヌカ油、綿実油、ナタネ油、サフラワー油、トウモ
ロコシ油、オリーブ油、ツバキ油、アーモンド油、ヒマ
シ油、落花生油、カカオ油、モクロウ、ヤシ油、パーム
核油、牛脂、ミンク油、卵黄油、ホホバ油、月見草油、
馬油等。

【００４４】ロウ類：カルナウバロウ、キャンデリラロ
ウ、蜜ロウ、サラシ蜜ロウ、鯨ロウ、セラックス、ラノ
リン類等。

【００４５】炭化水素類：流動パラフィン、ワセリン、
マイクロスリスタリンワックス、セレシン、スクワラ
ン、ポリエチレン末等。

【００４６】脂肪酸類：ステアリン酸、リノール酸、ラ
ウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ヘベニン酸、
ラノリン酸、オレイン酸、ウンデシレン酸、イソステア
リン酸等。

【００４７】アルコール類：ラウリルアルコール、セチ
ルアルコール、ステアリルアルコール、ラノリンアルコ
ール、水添ラノリンアルコール、オレイルアルコール、
ヘキサデシルアルコール、2−オクチルドデカノール、
グリセリン、ソルビトール、プロピレングリコール、1,
3−ブチレングリコール、エチレングリコール又はその
重合体、ブドウ糖、白糖、コレステロール、フィトステ
ロール、セトステアリルアルコール等。

【００４８】エステル類：オレイン酸デシル、ステアリ
ン酸ブチル、ミリスチン酸ミリスチル、ラウリン酸ヘキ
シル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプ
ロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ジメチルオク
タン酸ヘキシルデシル、ジオレイン酸プロピレングリコ
ール、フタル酸ジエチル、モノステアリン酸プロピレン
グリコール、モノステアリン酸エチレングリコール、モ
ノステアリン酸グリセリン、トリミリスチン酸グリセリ
ン、酢酸ラノリン、乳酸セチル等。

【００４９】界面活性剤：陰イオン性界面活性剤、陽イ
オン界面活性剤、両イオン性界面活性剤、非イオン性界
面活性剤等。

【００５０】香料：メントール、カルボン、オイゲノー
ル、アネトール、ハッカ油、スペアミント油、ペパーミ
ント油、ユーカリ油、アニス油その他各種動植物からの
オイル状香料等。

【００５１】以上に説明した本発明のフィラグリン合成
促進剤、角質層保湿機能改善・増強剤および角質層遊離
アミノ酸量増加剤は、ヒトに対して好適に適用されるも
のであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト
以外の動物に対して適用することもできる。

【００５２】

【実施例】以下、実施例を示して本発明を更に詳細に説
明する。なお、本発明の範囲はこれらの実施例等に限定
されるものではない。

【００５３】〔製造例１〕カンゾウ（Glychyrrhiza gla
bra及びGlychyrrhiza inflataの混合物）の根部の粗砕
物３００ｇを抽出溶媒２０００ｍＬに投入し、ゆるく攪
拌しながら３時間、７０℃に保った。その後、ろ過し、
ろ液を４０℃で減圧下にて濃縮し、さらに減圧乾燥機で
乾燥させ、カンゾウ抽出物を得た。４種類の抽出溶媒を
用いて上記抽出を行ったところ、抽出物の収率は表１の
とおりであった。なお、抽出溶媒が混合物の場合、以下
に示す混合比は重量基準によるものである。

【００５４】 [表１]試料No. 抽出溶媒 抽出物収率(重量％) １ 水 ２９ ２ エタノール/水(1:1) １５ ３ メタノール １４ ４ プロパノール/水(1:1) １３

【００５５】〔製造例２〕製造例１で用いたものと同一
のカンゾウの根部の粗砕物３００ｇを抽出溶媒２０００
ｍＬに投入し、攪拌しながら３時間、８０℃に保った。
その後、ろ過し、ろ液を得た。４種類の抽出溶媒を用い
て上記抽出を行い、表２に示した固形分濃度の抽出液約
１５００ｍＬを得た。なお、抽出溶媒が混合物の場合、
以下に示す混合比は重量基準によるものである。

【００５６】 [表２]試料No. 抽 出 溶 媒 抽出液濃度(重量％) ５ 1,3-ブチレングリコール/水(1:1) ４．３ ６ グリセリン/水(1:1) ３．８ ７ プロピレングリコール/水(1:1) ３．５

【００５７】〔試験例１〕細胞賦活作用試験 （１）正常ヒト表皮細胞（クラボウ）を２×１０^４cell
s／wellの密度で９６穴マイクロプレートに播種した。
この際、播種培地としてHumedia-KG2（クラボウ）を用
いた。３７℃、５％二酸化炭素下で２４時間培養後、製
造例１の試料１（濃度：１．２５，０．６３，０．３
１，０．１６，０．０８，０．０４ｍｇ／ｍＬ）を添加
した試験培地に交換し３７℃、５％二酸化炭素下で２４
時間培養した。その後、細胞賦活作用をＭＴＴ還元法
（H.Tada et.al.,J.Immunol.Methods 93, 157, 1986）
によって評価した。

【００５８】各濃度における試料１の細胞賦活率（細胞
増加率）（％）は、以下の表３に示すとおりであった。
なお、表３には、細胞賦活率（細胞増加率）（％）を平
均±Ｓ．Ｄ（ｎ＝６）で示し、表３中、「^＊＊」はｐ＜
０．０１、「^＊」はｐ＜０．０５を意味する。

【００５９】 [表３] 試 料 濃 度（ｍｇ／ｍＬ） 1.25 0.63 0.31 0.16 0.08 0.04 70.6 98.6 109.6^* 114.6^** 116.0^** 113.2^*

【００６０】表３に示される結果より、カンゾウ抽出物
が０．３１ｍｇ／ｍＬ以下の濃度で正常ヒト表皮細胞賦
活作用（増殖作用）を有することが確認された。

【００６１】〔試験例２〕フィラグリン合成促進作用試
験およびフィラグリンの観察 試験例１で細胞毒性のないことを確認した濃度（０．１
６，０．０８，０．０４ｍｇ／ｍＬ）を用いてフィラグ
リン合成促進作用を評価した。正常ヒト表皮細胞（クラ
ボウ）を２×１０^４cells／wellの密度で９６穴マイク
ロプレートに播種した。この際、播種培地としてHumedi
a-KG2（クラボウ）を用いた。３７℃、５％二酸化炭素
下で２４時間培養後、製造例１の試料１を添加した試験
培地に交換し３７℃、５％二酸化炭素下で６日間培養し
た。その後、細胞を溶解し、色素結合法にてタンパク量
を定量した。フィラグリン合成量はドットブロット法を
用いた酵素抗体法にて定量した。すなわち、一定量のタ
ンパクをドットブロットし、抗フィラグリン抗体、Hors
eradish Peroxidase標識した二次抗体を用いて発色させ
た後、デンシトメトリーにて数値化し、フィラグリン合
成促進率（％）を求めた。その結果を表４に示す。な
お、表４には、フィラグリン合成促進率（％）を平均±
Ｓ．Ｄ（ｎ＝６）で示し、表４中、「^＊＊」はｐ＜０．
０１を意味する。

【００６２】また、フィラグリンの観察を目的とし、表
皮染色切片を作成した。製造例１の試料１を０．２ｇ秤
量し、１０(v/v)％エタノール溶液１０ｍＬに溶解した
ものを試料溶液とした。この試料溶液０．１ｍＬを生後
６週齢のへアレスマウス（ＨＲ−１、雌）の背部に１日
２回（朝夕）、１００μＬを２週間連続塗布した。同時
にコントロールとして試料を溶解していない１０(v/v)
％エタノール溶液を塗布した。試料塗布終了時から２４
時間目に皮膚組織を採取し、凍結切片を作成した。フィ
ラグリンは酵素抗体染色法にて、ＦＩＴＣ標識抗体を用
いて染色した。その結果を図１に示す。なお、図１中、
（ａ）はコントロールマウスの結果を、（ｂ）はカンゾ
ウエキス塗布マウスの結果を示す。

【００６３】

【００６４】表４に示される結果より、カンゾウ抽出物
が０．1６ｍｇ／ｍＬの濃度でコントロールと比較して
有意なフィラグリン合成促進作用を発揮することが確認
された。また、図１より、フィラグリン量の増加は組織
学的にも明らかとなった。

【００６５】〔試験例３〕角質層水分測定 製造例１の試料１を０．２ｇ秤量し、１０(v/v)％エタ
ノール溶液１０ｍＬに溶解したものを試料溶液とした。
この試料溶液０．１ｍＬを生後６週齢のへアレスマウス
（ＨＲ−１、雌）の背部に１日２回（朝夕）、１００μ
Ｌを２週間連続塗布した。同時にコントロールとして試
料を溶解していない１０(v/v)％エタノール溶液を塗布
した。

【００６６】試料塗布終了時から２４時間目にネンブタ
ール麻酔下でＳＫＩＣＯＮ−２００（ＩＢＳ株式会社）
を用いて試料塗布部の電気伝導度（μＳ）を測定した。
角質層中の水分量は電気伝導度と相関することから、角
質層水分量はこの値をもとに評価した。なお、測定は室
温２３℃、湿度５５％に保った室内で行った。その結果
を表５に示す。なお、表５には、コントロールの角質層
水分量（コンダクタンス（μＳ））を平均±Ｓ．Ｄ（ｎ
＝５）で示し、試料１を用いた場合の角質層水分量（コ
ンダクタンス（μＳ））を平均±Ｓ．Ｄ（ｎ＝６）で示
し、表５中、「^＊」はｐ＜０．０５を意味する。

【００６７】

【００６８】表５に示される結果より、カンゾウ抽出物
を塗布することにより、コントロールと比較して有意な
角質層水分量の増加作用が確認された。

【００６９】〔試験例４〕角質層遊離アミノ酸量測定 製造例１の試料１を０．２ｇ秤量し、１０(v/v)％エタ
ノール溶液１０ｍＬに溶解したものを試料溶液とした。
この試料溶液０．１ｍＬを生後６週齢のへアレスマウス
（ＨＲ−１、雌）の背部に１日２回（朝夕）、１００μ
Ｌを２週間連続塗布した。同時にコントロールとして試
料を溶解していない１０(v/v)％エタノール溶液を塗布
した。

【００７０】試料塗布終了時から２４時間目にテープス
トリップ法にて角質層を採取した。トルエン抽出および
乾燥後、０．３ｍｏｌ／ＬのＨＣｌＯ₄を添加し、遠心
分離にて沈殿したペプチドを除去した。上清に等量の
０．３ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウムを加えて中和し、
凍結乾燥させたものをアミノ酸分析試料とした。

【００７１】コントロールの結果を表６に、試料１を用
いた場合の結果を表７に示す。なお、表６には遊離アミ
ノ酸量（ｎｍｏｌ／６ｃｍ^２）を平均値±Ｓ．Ｄ（ｎ＝
５）で示し、表７には遊離アミノ酸量（ｎｍｏｌ／６ｃ
ｍ^２）を平均値±Ｓ．Ｄ（ｎ＝４）で示し、表７中、「
^＊」はｐ＜０．０５、「^＊＊」はｐ＜０．０１を意味す
る。

【００７２】

【００７３】

【００７４】表６および７に示されるアミノ酸分析の結
果より、カンゾウ抽出物の塗布により、コントロールと
比較して有意な全アミノ酸の増加が確認された。また、
個々のアミノ酸４種についても、コントロールと比較し
て有意な増加が認められた。

【００７５】 〔配合例１〕 下記の組成の乳液を常法により製造した。 ホホバオイル ４．０ｇ オリーブオイル ２．０ｇ アロエエキス ２．０ｇ パセリエキス ２．０ｇ ヒアルロン酸ナトリウム ０．５ｇ スクワラン ２．０ｇ セタノール ２．０ｇ モノステアリン酸グリセリル ２．０ｇ ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．０） ２．５ｇ オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(２０Ｅ.０) ２．０ｇ １，３−ブチレングリコール ３．０ｇ パラオキシ安息香酸メチル ０．１５ｇ 香料 ０．０５ｇ カンゾウ抽出物（製造例１の試料１） １．０ｇ 精製水 残部（全量を１００ｇとする）

【００７６】〔配合例２〕下記の組成の化粧水を常法に
より製造した。 グリセリン ３．０ｇ １，３−ブチレングリコール ３．０ｇ オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(２０Ｅ.０) ０．５ｇ パラオキシ安息香酸メチル ０．１５ｇ クエン酸 ０．１ｇ クエン酸ソーダ ０．１ｇ ビタミンＥ ０．１ｇ ハマメリスエキス １．０ｇ パセリ由来抗酸化物質 ０．５ｇ 香料 ０．０５ｇ カンゾウ抽出物（製造例１の試料１） １．０ｇ 精製水 残部（全量を１００ｇとする）

【００７７】〔配合例３〕下記の組成のクリームを常法
により製造した。 流動パラフィン ５．０ｇ サラシミツロウ ４．０ｇ セタノール ３．０ｇ スクワラン １０．０ｇ ラノリン ２．０ｇ ステアリン酸 １．０ｇ オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(２０Ｅ.０) １．５ｇ モノステアリン酸グリセリル ３．０ｇ １，３−ブチレングリコール ６．０ｇ パラオキシ安息香酸メチル １．５ｇ アミノ酸・糖混合物 ０．５ｇ 酵母エキス ０．５ｇ カロットエキス ０．５ｇ α−ヒドロキシ脂肪酸 ０．５ｇ 香料 ０．１ｇ カンゾウ抽出物（製造例１の試料１） １．０ｇ 精製水 残部（全量を１００ｇとする）

【００７８】〔配合例４〕下記の組成のパックを常法に
より製造した。 ポリビニルアルコール １５．０ｇ ポリエチレングリコール ３．０ｇ プロピレングリコール ７．０ｇ エタノール １０．０ｇ パラオキシ安息香酸エチル ０．０５ｇ 香料 ０．０５ｇ グリチルリチン酸 １．０ｇ Ｌ-アルギニン ０．５ｇ カンゾウ抽出物（製造例１の試料１） ５．０ｇ 精製水 残部（全量を１００ｇとする）

【００７９】

【発明の効果】本発明により、フィラグリン合成促進
剤、角質層保湿機能改善・増強剤および角質層遊離アミ
ノ酸量増加剤が提供される。本発明のフィラグリン合成
促進剤、角質層保湿機能改善・増強剤および角質層遊離
アミノ酸量増加剤は、皮膚の保湿機能の衰えを予防およ
び／または改善する上で有用である。また、本発明のフ
ィラグリン合成促進剤、角質層保湿機能改善・増強剤お
よび角質層遊離アミノ酸量増加剤は、皮膚の保湿効果を
発揮することができるとともに、皮膚の適用した場合の
使用感と安全性に優れているので、皮膚化粧料の配合成
分として有用である。

【図面の簡単な説明】

【図１】試料塗布終了時から２４時間後の皮膚組織凍結
切片のフィラグリンを、ＦＩＴＣ標識抗体を用いて染色
した結果を表す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 43/00 １０５ Ａ６１Ｐ 43/00 １０５ (72)発明者 神原 敏光 広島県尾道市向東町14703−10 (72)発明者 鳥居 宏右 兵庫県神戸市中央区港島中町６−13−１ (72)発明者 岡野 由利 兵庫県神戸市中央区港島中町６−13−１ (72)発明者 正木 仁 兵庫県神戸市中央区港島中町６−13−１ Ｆターム(参考） 4C083 AA032 AA082 AA111 AA112 AA122 AC022 AC072 AC122 AC182 AC242 AC302 AC422 AC442 AC482 AC582 AD042 AD192 AD332 AD512 AD532 AD662 BB41 BB48 CC04 CC05 CC07 EE12 4C088 AB60 AC01 AC11 CA03 CA05 CA06 CA08 MA05 MA16 MA22 MA63 NA14 ZA89 ZC41

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 カンゾウ抽出物を有効成分として含有す
   ることを特徴とするフィラグリン合成促進剤。
2. 【請求項２】 前記カンゾウ抽出物が、極性溶媒を抽出
   溶媒として用いて得られるカンゾウの根部からの抽出物
   であることを特徴とする請求項１記載のフィラグリン合
   成促進剤。
3. 【請求項３】 カンゾウ抽出物を有効成分として含有す
   ることを特徴とする角質層保湿機能改善・増強剤。
4. 【請求項４】 前記カンゾウ抽出物が、極性溶媒を抽出
   溶媒として用いて得られるカンゾウの根部からの抽出物
   であることを特徴とする請求項３記載の角質層保湿機能
   改善・増強剤。
5. 【請求項５】 カンゾウ抽出物を有効成分として含有す
   ることを特徴とする角質層遊離アミノ酸量増加剤。
6. 【請求項６】 前記カンゾウ抽出物が、極性溶媒を抽出
   溶媒として用いて得られるカンゾウの根部からの抽出物
   であることを特徴とする請求項５記載の角質層遊離アミ
   ノ酸量増加剤。