JP2001519715A

JP2001519715A - Beer production method

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Publication number: JP2001519715A
Application number: JP54307698A
Authority: JP
Inventors: ペルツ，ディーター; モーザー，ギルベルト; ツァンカー，ゲラルト; ゼルロ，ヴァルター; リビッシュ，フォルカー; ラントハーン，ホルスト; デジェン，ピーター・ジェイ
Original assignee: Pall Corp
Current assignee: Pall Corp
Priority date: 1997-04-08
Filing date: 1998-04-07
Publication date: 2001-10-23
Anticipated expiration: 2018-04-07
Also published as: CN1137765C; AU724451B2; CN1259882A; KR100538790B1; EP0973603A1; CA2286267A1; KR20010006206A; WO1998045029A1; JP3538203B2; BR9814243A; AU6891698A

Abstract

(57)【要約】本発明は、多孔質膜を清浄しなければならない時間まで多孔質膜を通してビールを濾過し、多孔質膜を清浄するためにセルラーゼ、アミラーゼ及びその組み合わせからなる群から選択される酵素、特に60分で少なくとも約0.1の結晶質：可溶性セルロース活性比を有するセルラーゼと前記多孔質膜とを接触させ、次いでビールの濾過を継続するために前記多孔質膜を再利用することを含む、ビール製造法を提供する。本発明は、さらに、濾過時に連続的に目詰まりする多孔質膜を通してビールを濾過し、前記多孔質膜の目詰まり度の尺度として前記多孔質膜の流出またはゼータ電位をモニターし、前記多孔質膜の流出またはゼータ電位により決定して前記多孔質膜が完全に目詰まりする前に前記多孔質膜を通すビールの濾過を停止し、前記多孔質膜を清浄し、次いでビールの濾過を継続するために前記多孔質膜を再利用することを含む、ビール製造法を提供する。 (57) Abstract: The present invention is directed to filtering beer through a porous membrane until the time the porous membrane must be cleaned, and selecting from the group consisting of cellulase, amylase and combinations thereof to clean the porous membrane. Contacting the porous membrane with an enzyme, particularly a cellulase having a crystalline: soluble cellulose activity ratio of at least about 0.1 in 60 minutes, and then reusing the porous membrane to continue filtration of the beer. And a method for producing beer. The present invention further comprises filtering beer through a porous membrane that is continuously clogged during filtration, monitoring the outflow or zeta potential of the porous membrane as a measure of the degree of clogging of the porous membrane, Stop the filtration of the beer through the porous membrane before the porous membrane is completely clogged, as determined by the outflow or zeta potential of the membrane, clean the porous membrane, and then continue the filtration of the beer A method for producing beer, the method comprising reusing the porous membrane for the production of a beer.

Description

【発明の詳細な説明】ビールの製造方法発明の技術分野本発明はビールの製造方法、特に、ビールを濾材に通して濾過し、濾材をビール濾過に再使用できるように酵素によって濾材を洗浄する方法に関する。発明の背景拡大された販路を考慮すると、ビールを貯蔵可能にするために、ビールから微生物（例えば、細菌）を除去しなければならない。現在、微生物除去は主としてビールの低温殺菌によって行われている。このために、ビールを例えばびん又は缶に入れて、６２〜６９℃の温度に加熱して、微生物を殺す。しかし、この低温殺菌はかなりのエネルギー消費を必要とする。これは、導入されたエネルギーが化学反応を誘発する可能性があり、これらの化学反応が製品をそこない、制御されることが困難であるというさらなる欠点を有する。これらの反応は、例えば、製品のフレーバーに不利な影響を与え(“低温殺菌味(pasteu rized taste)”)、さらに好ましくない物質が形成されるという危険性がある。それ故、低温殺菌は、高いエネルギー消費を必要とし、その結果、環境に有害な影響を与え、製品の質を低下させる、比較的費用のかかる微生物除去方法である。他の、知られた微生物除去方法は低温濾過である。低温濾過ビールは例えば合衆国、日本及び韓国においていわゆる“ドラフトビール”として入手可能である。このビールは工業的酵素(technical enzyme)を含有するので、ヨーロッパでは禁止されている。これらの工業的酵素は、低温−濾過方法に固有の欠点：フィルターが閉塞しやすいを防止するために、ビール中に存在する。この閉塞は、フィルター、例えば、膜フィルターの上流側に、ビールから濾過されるべき物質の付着物による。この付着物はフィルターから除去されることが困難であるか又は不可能でさえあり、フィルターの耐用寿命を減ずる。このことは、膜フィルターが高価であるので、ビールの製造コストを高めることになる。フィルターの耐用寿命を長くするために、膜フィルターの製造者は使用済み膜をプロテアーゼ、グルカナーゼ及びキシラナーゼと、例えば界面活性剤、酸／アルカリ及び酸化剤のような化学薬品とで処理することによって膜を洗浄して、使用済み膜を再使用可能にすることを薦めている。この洗浄は例えば２段階で、第１段階では上記酵素によって、その後任意に第２段階における上記化学薬品による追加洗浄によって行うことができる。文献はさらに、多様な技法を含む、ビールの濾過に用いた膜フィルターの洗浄方法を開示している。例えば、米国特許５，２２７，８１９は、ビールの低温濾過に用いたポリアミド微孔質膜の洗浄方法であって、この微孔質膜に希薄なアルカリ溶液を通すことによる方法を開示している。国際特許出願ＷＯ９６／２３５７９は、ビールの濾過に用いた膜フィルターの幾らか異なる方法を開示している。この方法は、膜フィルターをβ−グルカナーゼ、キシラナーゼ及びセルラーゼの酵素含有水溶液によって処理し、この膜フィルターを酸性洗浄水溶液によって洗浄し、かつ過酸化物含有アルカリ性洗浄溶液によって洗浄することを特徴とする。例えば、約３２０ｍ²のフィルター面積を想定するならば、洗浄方法は例として５，０００ヘクトリットルを濾過した後毎に酵素洗浄を用意し、２０，０００ヘクトリットルを濾過した後毎に追加の化学洗浄を用意する。製造者が薦める洗浄を受けた、約３２０ｍ²の上記フィルター面積を有するフィルターの典型的な耐用寿命は約１００，０００ヘクトリットルである。しかし、今までに知られた洗浄方法は、フィルター上の付着物を充分に除去することができず、このことが膜フィルターの使用年数(age)が増すにつれて、洗浄効率を強度に低下させるという欠点を有する。さらに他の欠点は、総窒素含量又はオリジナルのウワート％のような標準規格に関係ない、フィルター膜の突然のランダムな閉塞である。完全に閉塞した膜フィルターは最新技術による方法で充分に洗浄されることができず、フィルターの耐用寿命を強度に低下させる。何時フィルターが充分に洗浄されることができないほど閉塞した状態になるかを知ることは困難であるので、フィルターは早期に又は適時にではなく、即ち、早すぎるか又は遅すぎて洗浄される可能性がある。上記問題を考慮すると、改良されたビール製造方法、特に充分に洗浄することができ、再使用することができる濾材に通してビールを濾過することができる方法の必要性が存在する。本発明はこのような方法を提供する。本発明の上記その他の利点並びに他の本発明の特徴は、本明細書に提供する本発明の説明から明らかになるであろう。発明の簡単な概要本発明は、多孔質膜が洗浄を必要とするようなときまで多孔質膜に通してビールを濾過し、この多孔質膜をセルラーゼ、アミラーゼ及びこれらの組み合わせから成る群から選択された酵素、特に、６０分間目の結晶質：溶解性セルロース活性比率少なくとも約０．１を有するセルラーゼと接触させて、多孔質膜を洗浄し、その後にこの多孔質膜を再使用して、ビールの濾過を続けることを含む、ビールの製造方法を提供する。本発明はさらに、濾過中に徐々に閉塞する多孔質膜に通してビールを濾過し、多孔質膜の流出(streaming)又はゼータ・ポテンシャルを多孔質膜の閉塞度の尺度としてモニターし、多孔質膜の流出又はゼータ・ポテンシャルによって判定して多孔質膜が完全に閉塞する前に、多孔質膜を通してのビールの濾過を停止し、多孔質膜を洗浄してから、多孔質膜を再使用して、ビールの濾過を続けることを含む、ビールの製造方法を提供する。図面の簡単な説明図１は、未使用の、即ち、新しい多孔質膜を通してのビール濾過に関するビール濾過量（ｇ）対濾過時間（秒）のグラフである。図２は、閉塞した多孔質膜を通してのビール濾過に関するビール濾過量（ｇ）対濾過時間（秒）のグラフである。図３は、以前に閉塞して、先行技術方法によって洗浄された多孔質膜を通してのビール濾過に関するビール濾過量（ｇ）対濾過時間（秒）のグラフである。図４は、以前に閉塞して、本発明よって洗浄された多孔質膜を通してのビール濾過に関するビール濾過量（ｇ）対濾過時間（秒）のグラフである。図５は、濾材のゼータ・ポテンシャルを測定するためのデバイスを示す概略図である。図６は、濾材のゼータ・ポテンシャル（ｍＶ）対電解質溶液ｐＨのグラフであり、曲線“ａ”は新しい多孔質膜に関し、曲線“ｂ”はビール濾過に関連して部分的に閉塞している多孔質膜に関し、曲線“ｃ”はビール濾過に関連してほぼ完全に閉塞している多孔質膜に関する。図７は、バイパス系と図５の測定デバイスとを用いてビールを濾過するための装置を示す概略図である。好ましい実施態様の説明本発明は、ビール、特に低温濾過ビールの製造方法を提供する。この方法は多孔質膜、即ち膜フィルターに通して、膜フィルターが洗浄を必要とするようなときまでビールを濾過し、この多孔質膜を酵素と接触させて多孔質膜を洗浄し、その後に多孔質膜を再使用して、ビールの濾過を続けることを含む。多孔質膜がプロテアーゼ、キシラナーゼ及び／又はグルカナーゼによるよりもセルラーゼによって及び／又はアミラーゼによってより良好にかつより穏やかに洗浄されうることが、意外にも判明している。本発明による洗浄は、ビール濾過に用いられる多孔質膜の耐用寿命をかなり延長させるので、ビール製造における多孔質膜の使用に付随する商業的利益を大きく改良する。酵素はセルラーゼ、アミラーゼ及びこれらの組み合わせから成る群から選択される。上述したように、多孔質膜の洗浄にセルラーゼ及び／又はアミラーゼと共に、プロテアーゼ、キシラナーゼ及び／又はグルカナーゼを用いる必要はなく、用いないことが好ましい。セルラーゼは望ましくは少なくとも約０．１、より望ましくは少なくとも約０．３、好ましくは少なくとも約０．４、より好ましくは少なくとも約０．５、最も好ましくは少なくとも約１、特に少なくとも約１．２の結晶質：溶解性セルロース活性比率（以下でさらに詳しく説明）を有する。適当なセルラーゼはＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ、特にＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒに由来するセルラーゼを包含する。好ましいセルラーゼはＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ、好ましくはＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ及びＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａＩｏｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍと、Ｔｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ、好ましくはＴｈｅｒｍｏｍｏｎｏｓｐｏｒａｆｕｓｃａとに由来するセルラーゼを包含する。セルラーゼの他のソースは米国特許４，９１２，０５６に記載されている。適当なアミラーゼはα−アミラーゼ、β−アミラーゼ及びこれらの組み合わせを包含する。より好ましくは、本発明の方法にセルラーゼとアミラーゼ以外の酵素を用いない、即ち、多孔質膜をセルラーゼ又はアミラーゼ以外の酵素に接触させない。最も好ましくは、本発明の方法に用いる酵素はセルラーゼであり、最適には、セルラーゼ以外の酵素を用いない、即ち、多孔質膜をセルラーゼと接触させて、他の酵素と接触させない。多孔質膜はビールの濾過に適した任意の膜でよい。本発明に関連して、多孔質膜は典型的に微孔質膜、即ち、約０．０２〜１μｍの孔等級を有する多孔質膜である。多孔質膜は好ましくは約０．１〜１μｍの孔等級、最も好ましくは約０．４５μｍの孔等級を有する。このような多孔質膜は細菌と他の好ましくない微生物をビールから除去するために用いることができ、好ましくは、ビールを低温殺菌する必要性を回避する。多孔質膜はまた、ビールから酵母と、他の好ましくない物質を除去するために用いることができる。適当な多孔質膜は例えばセラミック及び金属のような無機物質と、好ましくは、例えばポリアミド、ポリエーテルスルホン、ポリオレフィン、ポリビニリデンフルオリド等のような、有機ポリマーから製造された多孔質膜を包含する。多孔質膜は好ましくはポリアミド多孔質膜、特にナイロン−６，６多孔質膜である。本発明による方法の好ましい実施態様は、多孔質膜を付加的に塩基水溶液と接触させることを特徴とし、望ましくは、多孔質膜を第１段階では塩基水溶液と接触させ、第２段階では酵素と接触させる。塩基水溶液としてはＮａＯＨ及び／又はＫＯＨの水溶液の使用が好都合であると判明している。塩基が０．１〜１Ｎ、より好ましくは０．２５〜１Ｎ、最も好ましくは０．５〜１Ｎの濃度で存在することが好ましい。塩基水溶液による処理は４０〜９０℃の温度において最も良く行われる。本発明による方法のさらなる有利な実施態様は、セルラーゼによる処理を４０〜５０℃の温度及び４．５〜５．５のｐＨにおいて行い、α−アミラーゼによる処理を６０〜７５℃の温度及び４．６〜５．８のｐＨにおいて行い、β−アミラーゼによる処理を４０〜６０℃の温度及び４．６〜５．８のｐＨにおいて行うことを特徴とする。多孔質膜の流出ポテンシャル(streaming potential)又はゼータ・ポテンシャルがもはや変化しない時点まで、洗浄を行うことが好都合である。操作中に多孔質膜において生じる流出ポテンシャル又はそれから算出されるゼータ・ポテンシャル（以下参照）は、多孔質膜を閉塞させた物質が除去されている程度の良好な指標である。本発明はまた、多孔質膜が適時に洗浄されることを保証すことによって、多孔質膜の耐用寿命を延長させることを目的とする。したがって、本発明は、濾過が進行するにつれて徐々に閉塞する多孔質膜を通してビールを濾過することを含むビールの製造を提供する。多孔質膜が部分的にのみ閉塞する、即ち、完全に閉塞した状態にまだ達していない特定の時点において、濾過を停止する。閉塞度は任意の適当な手段によって、望ましくは、例えば米国特許５，４４９，４６５に一般的に述べられているように、多孔質膜を横切っての圧力低下をモニターすることによって判定することができる。或いは、本発明は、フィルターからの流出ポテンシャル及び／又はゼータ・ポテンシャルの測定による洗浄時間の確認を提供する。本発明のこの態様は、流出ポテンシャル−−又は、前者の記録データから補外されるゼータ・ポテンシャル−−が閉塞度に応じてｐＨ範囲（このｐＨ範囲内でビール醸造又は濾過が行われる）において変化し、したがって、閉塞状態の信頼できる、殆ど定量的なインジケーターを意味するという認識に基づく。そのため、多孔質膜の流出ポテンシャル及び／又はゼータ・ポテンシャルの測定は、特定の閉塞状態の正確な像を与えることができる。多孔質膜が二通りに作用することが知られている。第一に、多孔質膜はふるい作用する、この場合にはフィルターの孔より大きい粒子が媒質から機械的に濾過される。第二に、多孔質膜は静電引力によって作用することが知られている。膜の孔度より非常に小さい直径の粒子は、濾材のゼータ・ポテンシャルと粒子のゼータ・ポテンシャルとが反対の極性であるときに、膜上に付着する(例えば、ＰａｌｌＦｉｌｔｒａｔｉｏｎｓｔｅｃｈｎｉｋＧｍｂＨ，ドイツのＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌＢｒｏｃｈｕｒｅＳＤ８７２ｈＧを参照のこと)。ゼータ・ポテンシャルを用いて、多孔質膜の閉塞度を測定することができるという事実は、本発明の前にはまだ知られていない。多孔質膜のゼータ・ポテンシャルは膜の化学的性質によって影響される。専門家は、そのゼータ・ポテンシャルが閉塞度に比例して充分に大きい速度で変化するフィルターのみを選択することに困難を有さない−−本発明を認識する。フィルターのオンラインと、データ獲得を介しての連続モニターリングとによって、濾過プロセスを適時に、例えば、閉塞が開始したならば、停止することができる。まだ完全には閉塞していないフィルターの洗浄は、完全に閉塞したフィルターの洗浄よりも非常に容易であり、より長い態様寿命を保証する。したがって、本発明の好ましい方法は、フィルターのゼータ・ポテンシャルが、フィルターがその未使用状態で示した値の最大２０％に低下した時点で、又は閉塞が８０％を超えない時点でフィルターを停止させる。この方法の他の工夫は、ポリアミドの多孔質膜を用いて、ゼータ・ポテンシャルが４．２のｐＨにおいて測定して−５ｍＶを超えるときに濾過が停止することである。ビールは正式の濾過、即ち多孔質膜を通しての濾過の前に、予備濾過を受けることが好ましい。ダイアトマイト(diatomite)としても知られる珪藻土（滴虫土）が予備濾過の前に殆ど排他的に用いられる。珪藻土と厚い層濾過(deep-bed fi ltration)との組み合わせも実行可能である。本発明は任意の適当なビール製造系に用いることができる。好ましくは、本発明は米国特許５，４１７，１０１と５，５９４，１６１に記載されているような、クラスターフィルターに関して用いられる。本発明はまた、濾過を受けるビールのフィーダーラインと、多孔質膜と、濾過済みビールの搬出ライン(run-off line)とを備えた、ビールを濾過するための濾過ユニットにも関する。これは、バイパスとして機能し、多孔質膜と、ビールがそれを通って流れるメーターセル(meter cell)の膜フィルターの流出ポテンシャル及び／又はゼータ・ポテンシャルをモニターするための例えば電極のような手段とを特徴とする、メーターセルとしてのモジュールによって表される。本発明はまた、濾過を受けるビールのフィーダーラインと、多孔質膜と、濾過済みビールの搬出ラインとを特徴とする、ビールを濾過するための濾過ユニットをも取り扱う。上記パラグラフとは異なり、この濾過ユニットは、多孔質膜を通ってビールが流れるときの流出ポテンシャル及び／又はゼータ・ポテンシャルをモニター又は読み取るために多孔質膜に取り付けられた、例えば電極のような手段を特徴とする。このバリエーションでは、ゼータ・ポテンシャルは、膜フィルターにバイパスとして備えられたメーターセルを介して測定されず、むしろ膜フィルター自体において測定される。本発明の実施態様に関連して、任意の適当なバイパス形態を用いることができる。好ましくは、本発明は米国特許５，４４９，４６５に記載された装置と方法を組み込む。フィルターのゼータ・ポテンシャルが閉塞の一般状態に相関するという発見はビール濾過に次のように実現することができる；１．濾過プロセス中の多孔質膜の流出ポテンシャル及び／又はゼータ・ポテンシャルに生じる変化を絶えず観察することによって、予想外の又はランダムな発生を防止するために、膜の閉塞度を正確に指摘することができ、フィルター交換のためのタイミングの良い測定値を知ることができる。２．多孔質膜が完全に閉塞する前に濾過を停止することができる。このことはフィルターの容易な洗浄を促進する。完全に閉塞したフィルター中の閉塞物質は慣用的な洗浄方法によっては非常な困難を伴ってのみ除去されることができるか、又はフィルターから全く除去されることができず、耐用寿命の短縮をもたらす。完全な閉塞の前に濾過を停止するならば、洗浄プロセスは非常に容易になり、より完全になり、フィルターは長い寿命を保持する。ポリアミド多孔質膜の場合には、ゼータ・ポテンシャルがそのオリジナル値の約８０％より多く失っていない点で、即ち８０％より以上に閉塞されていないときに、濾過を停止するならば、多孔質膜からの全ての閉塞物質の上首尾な除去を達成することができる。３．洗浄方法の成功は、洗浄済み膜のゼータ・ポテンシャルを測定することによって試験することができる。洗浄の作用がゼータ・ポテンシャルをほぼそのオリジナル値に復帰させる。この方法によって、洗浄プロセスをその効率に関して評価及び／又は最適化することができる。４．反復使用の理由からの多孔質膜のエージングを追跡して、その残留耐用寿命予測に関する手ごろな推定値を与えることができる。５．ゼータ・ポテンシャルを測定することによって、液体系の閉塞物質とフィルター材料及び／又はフィルターのシャント手段との間の相互作用を評価して、フィルター材料(filter material)とシャント材料(shunting material)（例えば、ダイアトマイト、ベントナイト、パーライト、ポリビニルピロリドン）をビール濾過における適合性に関して試験することができる。６．閉塞が開始する時点まで比膜負荷(specific membrane load)（ｈｌ／ｍ² ）がその下で記録されるゼータ・ポテンシャルを測定することによって、多孔質膜の耐用寿命を推定することができる。閉塞度に比例して顕著な変化を示すゼータ・ポテンシャルを有する多孔質膜がこの方法にとって最も適していることを、当業者は気づいている。これらのパラメーターの実証は上記の簡単な試験方法を用いることによって充分に容易である。下記実施例はさらに本発明を説明するが、これらの実施例を如何なる意味でも本発明の範囲を限定するものと解釈すべきでない。実施例１この実施例は、本発明のビール製造方法の有効性を説明する。特に、この実施例は、セルラーゼとアミラーゼを用いて、ビール濾過の過程において閉塞した多孔質膜を充分に、この多孔質膜が連続ビール濾過に再使用されることができるように洗浄することができることを実証する。ナイロン−６，６（ＮＢ型、製造者：ＰａｌｌＦｉｌｔｒａｔｉｏｎｓｔｅｃｈｎｉｋＧｍｂＨ，ドイツ）から製造された多孔質膜をフィルターとして用いた。このようなフィルターは最新技術においてビールの低温濾過にしばしば用いられる。Ｅｓｓｅｒによる、いわゆる膜フィルター試験（ＭｏｎａｔｓｚｅｉｔｓｃｈｒｉｆｔｆｕｅｒＢｒａｕｅｒｅｉ(ＭｏｎｔｈｌｙＭａｇａｚｉｎｅｆｏｒＢｒｅｗｅｒｉｅｓ)，２５^th年，６号，１４５〜１５１頁，１９７２）を用いて、フィルターの濾過性能を評価した。この試験は、濾過可能性を改良するための対策(measures)をチェックするために信頼できる。新しい、即ち、未使用の多孔質膜の濾過効率を測定するために、加圧濾過装置 (ＳＭ１６５３６型、２００ｍｌ容量、製造者：ＳｅｒｔｏｒｉｕｓＧｍｂＨ，Ｇｏｅｔｔｉｎｇｅｎ，ドイツ）を、４７ｍｍ直径と０．２μｍ孔度を有するポリアミドナイロン−６，６多孔質膜に対して用いた。０℃に冷却したビールを等圧条件（１ｂａｒ）下で多孔質膜に通し、濾液量を１０秒間毎に秤量した。２００ｇの濾液が得られた後に、試験を停止した。結果は図１の線図にグラフとして示す。図１は、上記条件下で未使用フィルターによって約２１０秒間後に２００ｇの濾液が得られたことを示す。同じ条件下で、閉塞した、即ち使用済みの多孔質膜の濾過性能を試験した。結果は図２に示す、図２は７２０秒間においても僅か約６０ｇの濾液が得られたに過ぎないことを示す。この閉塞した多孔質膜を先行技術方法に従って洗浄した、この方法では、以下に説明するように、膜を最初に酵素によって、次に化学的に洗浄した。酵素洗浄のためには、閉塞した膜を、ｐＨ５（界面活性剤と酸成分との混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ７５；製造者：Ｈｅｎｋｅｌ）の０．０５％水溶液によって設定）を有する、β−グルカナーゼとキシラナーゼとの混合物(Ｐ３− Ｕｌｔｒａｓｉｌ６５；製造者：Ｈｅｎｋｅｌ)の１％水溶液によって５０℃ の温度において１時間処理した。その後、この処理をもう１回行った。次に、膜を、ｐＨ９〜９．５（界面活性剤とアルカリ成分との混合物（Ｐ３− Ｕｌｔｒａｓｉｌ９１；製造者：Ｈｅｎｋｅｌ）の０．１５％水溶液によって設定）を有する、界面活性剤と、グルカナーゼと、プロテアーゼとの混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ６２；製造者：Ｈｅｎｋｅｌ）の０．５％水溶液によって５０℃の温度において３時間処理し、続いて、温水（５０℃）によってすすぎ洗いした。化学的洗浄のためには、膜を界面活性剤と酸成分との混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ７５；製造者：Ｈｅｎｋｅｌ）の１％水溶液によって６０℃において３０分間処理し、次に新鮮な水によってすすぎ洗いした。続いて、膜を界面活性剤とアルカリ成分との混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ９１；製造者：Ｈｅｎｋｅｌ）１％と、界面活性剤と酸素ドナーとの混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ０５；製造者：Ｈｅｎｋｅｌ）１％とを含有する水溶液によって、６０℃の温度において３０分間処理し、次に新鮮な水によってすすぎ洗いした。膜を次に、界面活性剤と酸成分との混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ７５；製造者：Ｈｅｎｋｅｌ）の０．５％水溶液によってもう１回３０分間処理し、続いて、新鮮な水によって、すすぎ水が新鮮な水の導電率に達するまで、すすぎ洗いした。次に、この洗浄済み多孔質膜の濾過性能を上記条件下で再び試験した。結果は図３に示す。図３は、約６００秒間後に２００ｇの濾液が得られたので、濾過性能が幾らか改良されたことを示す。その濾過効率を図２に示した、同じ閉塞した膜を本発明の方法によって洗浄した。この膜をＣ₁−及びＣ_x−セルラーゼの水溶液（この溶液は４．７のｐＨ値を有する）によって４５℃の温度において３０分間処理した。次に膜を同じ溶液によって、但し５．０のｐＨ値と５０℃の温度において、最後に、４．７のｐＨ値と６０℃の温度において６０分間処理した。続いて、膜を５０℃の温水によってすすぎ洗いした。本発明の方法によって洗浄した膜の濾過性能を上記方法によって試験した。結果は図４に示す。図４は、約２２０秒間後に２００ｇの濾液が得られたことを示す。これは先行技術（図３）を凌駕する有意な改良を表す。それ故、本発明による方法は、先行技術の洗浄方法によって可能であるよりも、使用済み膜のかなり良好な洗浄を可能にする。本発明によって、セルラーゼの代りにアミラーゼを用いた場合にも、同様に良好な結果が得られた。このように、本発明による洗浄方法によって、多孔質膜の耐用寿命を延長させることができる。実施例２この実施例は、多孔質膜の洗浄をアシストするための多孔質膜の流出ポテンシャル又はゼータ・ポテンシャルの使用を説明する。特に、流出ポテンシャル又はゼータ・ポテンシャルが膜の洗浄程度と、何時、膜が最も充分に洗浄されるかを判定するために有用であることが実証されている。膜フィルターのゼータ・ポテンシャルをＡｎｔｏｎＰａａｒＧｍｂＨ，オーストリアのエレクトロカイネチック測定系(electrokineticmeasuring system) ＥＫＡによって測定した。この測定は流出ポテンシャル法に基づく。電解質はフィルターを通って流れ、対イオンのせん断(shearing-off)によって生じるポテンシャル（流出ポテンシャル）を電極によって検出して、この測定量からゼータ・ポテンシャルを算出する(以下参照)。図５は、流出ポテンシャル又はゼータ・ポテンシャルを測定した測定セルを概略的に示す。参照番号１は測定セルを示し、このセルでは多孔質膜２がポリテトラフルオロエチレンから製造されたフィルターホルダー３と４に、たわまないように、クランプされている。フィルターホルダー３と４は、それぞれ、２ツノピストン５と６の末端部であり、測定セル１の円筒形部分７内に移動のために取り付けられている。ピストン５と６の末端部３と４は、それぞれ、濾過されるべき流体のための微細孔１０と１１を有し、穿孔電極８と９を多孔質膜２に押圧する。電極８と９はビストン５と６の内側に伸びる電気端子１２と１３に接続するので、膜２を通って流体が流れるときに生じる流出ポテンシャルを測定することができる。電流の通過中に低い分極を示す銀電極又は塩化銀電極が電極として好ましい。ピストン６と７は、それぞれ、シール１４と１５に、一方では、これらが移動可能であり，他方ではこれらが測定セルから流体が漏出するのを許さないように取り付けられる。濾過されるべき流体は供給ライン１６を通って測定セル１の円筒形部分７に流入し、ピストン６の微細孔１０を通り、電極８を通り、多孔質膜２を通って、電位が生じる。濾過済み流体は電極９を通って流れて、同様にポテンシャルを形成しながら、ピストンの微細孔１１を通り、放出ライン１７を通って測定セルを出る。測定された流出ポテンシャルからゼータ・ポテンシャルを算出するために、供給ライン１６と放出ライン１７との間の測定セル内の差圧の測定（説明せず）、導電率、及び適切にはｐＨ値も必要である。ゼータ・ポテンシャルはこれらの測定量から次のように算出される：式中、Ｕは流出ポテンシャルであり、△Ｐは差圧であり、ＬＦは導電率であり、 ηは粘度であり、εε₀は比誘電率である。閉塞が進行するときの膜フィルターのゼータ・ポテンシャル変化は図６に示す。この図は、ミリボルトでのゼータ・ポテンシャルが縦座標にプロットされ、ゼータ・ポテンシャルを測定したｐＨ値が横座標にプロットされた線図である。電解質溶液（０．００１ＮのＫＣｌ水溶液）のｐＨ値は０．１ＮＨＣｌ又は０．１ＮＮａＯＨによって設定した。指定した圧力差は３５０ｍｂａｒであった。上述した測定セルによって、新しい、即ち、未使用のポリアミド製多孔質膜( ＮＢ型；製造者：ＰａｌｌＦｉｌｔｒａｔｉｏｎｓｔｅｃｈｎｉｋＧｍｂＨ，６０７２Ｄｒｅｉｅｉｃｈ１，ドイツ)のゼータ・ポテンシャルを種々なｐＨ値において最初に測定することによって、線図を得た。未使用多孔質膜に関する結果を曲線“ａ”としてプロットする。未使用多孔質膜がアルカリ性ｐＨによって約−１８ｍＶのゼータ・ポテンシャルを有し、ｐＨの低下によってゼータ・ポテンシャルが上昇して、最後には、約３のｐＨにおいて零に達することが明らかである。曲線“ｂ”は、上述した同じ条件下で、但し、ビールの濾過に使用した後の、それ故、部分的閉塞を有する多孔質膜のｐＨ値へのゼータ・ポテンシャルの依存性を示す。明らかであるように、このゼータ・ポテンシャルは部分的閉塞によって幾らか上昇するが、約７のｐＨ値において約−１５ｍＶの値に達するに過ぎない。曲線“ｃ”は、ほぼ完全に閉塞した状態の同じ多孔質膜に関してプロットしたものである。このゼータ・ポテンシャルが今や、ｐＨ値によって極僅かに変化すろに過ぎず、アルカリ性範囲においても約−２ｍＶ未満に低下しないことが明らかである。本発明による洗浄を試験するために、洗浄すべき膜のゼータ・ポテンシャルを測定する、洗浄済み膜のゼータ・ポテンシャルが未使用膜のゼータ・ポテンシャルの方向にできる限り大きくシフトするならば、洗浄は成功であった。そのゼータ・ポテンシャルが閉塞度の関数として充分に大きな程度に変化する多孔質膜が、本発明による方法に用いるために特に良好に適することは、当業者に明らかであろう。この特徴は、簡単な試験によって当業者が容易に判定することができる。ポリアミドの多孔質膜が、濾過を受けるビールのｐＨ（約ｐＨ＝４．２）におけるゼータ・ポテンシャルが漸進的な閉塞によって重度な変化を受けるので、このプロセスに関して特に適する。図６から知ることができるように、濾過の開始時のこの特定のｐＨにおける膜は約−８ｍＶのゼータ・ポテンシャルを示す。完全に閉塞した膜は約−２ｍＶのゼータ・ポテンシャルを有する。図７は、図５に示した、バイパスとしてそれに付属するメーターセル２２を有する濾過室１８を特徴とする上記濾過ユニットの変形を示す。この濾過室１８はフィルター・キャンドル(filter candles)を有する。濾過を受けるビールはライン２０から濾過室１８に供給され、フィルター・キャンドル（膜フィルター）１９を通って流れて、濾過室１８から搬出ライン２１を通って濾過済みビールとして出る。メーターセルを図７に細部なしに示す。メーターセル２２を通る実際の流れは、濾過室１８の多孔質膜表面のｃｍ²当りの量に等しい、多孔質膜表面のｃｍ²当りのビール量が濾過される程度に制御されなければならない。フィルター試験パート２（図５）の濾過中のメーターセル１内側のゼータ・ポテンシャルの重度な変化は、濾過室１８内のフィルター・キャンドル１９の状態の評価を可能にする。実施例３この実施例は、溶解性及び結晶質セルロース基質の酵素分解におけるＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ由来のセルラーゼの有効性を説明する。Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ由来のセルラーゼはＦｌｕｋａ（品目番号２２１７８）から入手した。この酵素を２種類の異なるセルロース：溶解性カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ，品目番号４１９２７−３としてＡｌｄｒｉｃｈから入手可能）と結晶質セルロース（Ａｖｉｃｅｌ，品目番号ＰＨ−１０５としてＦＭＣから入手可能）に関して評価した。試験方法は（ｉ）１８ｍｌＣＭＣ（1％）又はＡｖｉｃｅｌ(１％)、（ｉｉ）５ｍｌ酢酸ナトリウム緩衝液（５０ｍＭ，ｐＨ４．８）及び（ｉｉｉ）３０℃ における酢酸ナトリウム緩衝液（５０ｍＭ，ｐＨ４．８）中の酵素溶液５ｍｌのインキュベーション溶液の調製を必要とした。次に、１．４ｍｌのインキュベーション溶液に０．１ｍｌのグルコース溶液（０．１５％）と、１．５ｍｌの３，５−ジニトロサリチル酸（ＤＮＳ）試薬（Ｓｉｇｍａから品目番号Ｄ−０５５０として入手可能）とを混合することによって、試験溶液を調製した。試験溶液を１５分間煮沸した。時間（分）の関数としての総μｍｏｌグルコース当量／ｍｇ酵素を、２つの並行サンプルを用いて、Ｍｉｌｌｅｒ，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．３１，４２６〜２８（１９５９）に記載された方法に従って、グルコース標準による直線キャリブレーションを用いて、分光測光法（５７５ｎｍ）によって測定した。たんぱく質量はＢｒａｄｆｏｒｄ，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．７２，２４８〜６４（１９７６）に記載された方法によって、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）標準を用いて測定した。セルロースの酵素分解はグルコースの産生を生じるので、総μｍｏｌグルコース当量／ｍｇ酵素の測定は、特定の種類のセルロース、例えば溶解性（ＣＭＣ）又は結晶質（Ａｖｉｃｅｌ）セルロースに関する酵素活性の尺度である。アスペルギルスニガー(Aspergillus niger)から誘導したセルラーゼに関するこの評価の結果を表１に示す。可溶性(CMC)セルロース基質の試験溶液は、0.8 mg酵素/28ml培養液(約17.6μｇ蛋白質)を含んでいた。結晶質(Avicel)セルロース基質の試験溶液は、0.35mg酵素/28ml培養液(約7.7μｇ蛋白質)を含んでいた。可溶性セルロース基質と比較して結晶質セルロース基質に対して比較的強い活性を有するこれらの酵素は、ビールの濾過で使用した多孔質膜の清浄に特に有効であることが知見された。結晶質セルロース基質に対して生成したグルコース当量と可溶性セルロース基質に対して生成したグルコース当量の割合は本発明における酵素の有効性の指標であり、結晶質：可溶性セルロース活性比として記載する。結晶質：可溶性セルロース活性比は、この実施例で記載した試験プロトコルの時間の範囲、例えば、30分、60分及び／または90分、特に60分で先に記載した値を有するのが望ましい。表１に示されたデータから明らかなように、アスペルギルスニガー由来のセルラーゼは60分における結晶質：可溶性セルロース活性比0.11を有し、かかるセルラーゼがビール濾過で使用した多孔質膜の清浄目的に関して適度に有効な酵素であることを示している。実施例４この実施例は、酵素分解性の可溶性セルロース基質と結晶質セルロース基質におけるトリコデルマレーセイ(Trichoderma reesei)から誘導したセルラーゼの有効性を示す。トリコデルマレーセイから誘導したセルラーゼは、Flukaより入手した(品目番号22173)。この酵素を実施例３と同様の方法で評価した。トリコデルマレーセイから誘導したセルラーゼに関して評価した結果を表２に示す。可溶性(CMC)セルロース基質の試験溶液は0.37mg酵素/28ml培養液(約128 μｇ蛋白質)を含んでいた。結晶質(Avicel)セルロース基質の試験溶液は、0.08m g酵素/28ml培養液(約25.6μｇ蛋白質)を含んでいた。表２のデータから明らかなように、トリコデルマレーセイから誘導したセルラーゼの60分における結晶質：可溶性セルロース活性比は0.54であり、かかるセルラーゼがビールの濾過で使用した多孔質膜の清浄目的に関して優れた酵素であることを示している。実施例５この実施例は、酵素分解性の可溶性セルロース基質及び結晶質セルロース基質におけるバシラスサチリス(Bacillus subtilis)から誘導したβ-セルラーゼの有効性を示す。バシラスサチリスから誘導したセルラーゼは、Flukaより入手した(品目番号 49106)。この酵素を実施例３と同様の方法で評価した。バシラスサチリスから誘導したβ-セルラーゼに関して評価した結果を表３に示す。可溶性(CMC)セルロース基質の試験溶液は14.4mg酵素/28ml培養液(約8.3 μｇ蛋白質)を含んでいた。結晶質(Avicel)セルロース基質の試験溶液は、15.6m g酵素/28ml培養液(約8.8μｇ蛋白質)を含んでいた。表３に示されたデータから明らかなように、バシラスサチリス由来のβ-セルラーゼは60分における結晶質：可溶性セルロース活性比0.10を有し、かかるセルラーゼがビール濾過で使用した多孔質膜の清浄目的に関して適度に有効な酵素であることを示している。実施例６この実施例は、酵素分解性の可溶性セルロース基質と結晶質セルロース基質におけるサーモモノスポラフスカ(Thermomonospora fusca)から誘導したエキソセルラーゼ(exocellulase)の有効性を示す。サーモモノスポラフスカから誘導したエキソセルラーゼE3は、コーネル大学より入手した。培養液が50℃で振盪した(i)18ml CMC(1％)またはAvicel(1％)、( ii)9ml酢酸ナトリウム緩衝液(50mM，pH5.6)、及び(iii)酢酸ナトリウム緩衝液(5 0mM，pH5.6)中酵素溶液1mlを含んでいた(約960μｍ蛋白質)以外には、この酵素を実施例３と同様の方法で評価した。試験溶液は、実施例３に記載のDNS試験よりもむしろ着色試験を使用して評価した。サーモモノスポラフスカから誘導したセルラーゼに関して評価した結果を表４に示す。表４に示されたデータから明らかなように、バシラスサチリス由来のβ-セルラーゼは60分における結晶質：可溶性セルロース活性比1.33を有し、かかるセルラーゼがビール濾過で使用した多孔質膜の清浄目的に関して優れた酵素であることを示している。実施例７この実施例は、酵素分解性の可溶性のセルロース基質と結晶質セルロース基質におけるバシラスサチリス(Bacillus subtilis)から誘導したα-アミラーゼの有効性を示す。バシラスサチリスから誘導したα-アミラーゼは、Flukaより入手した(品目番号10069)。培養液が30℃で振盪した(i)18ml CMC(1％)またはAvicel(1％)、(ii )5ml酢酸ナトリウム緩衝液(50mM，pH6.9)、及び(iii)酢酸ナトリウム緩衝液(50m M，pH6.9)中酵素溶液5mlを含んでいた(約8.5μｍ蛋白質)以外には、この酵素を実施例３と同様の方法で評価した。試験溶液は、実施例３に記載のDNS試験よりもむしろ着色試験を使用して評価した。バシラスサチリスから誘導したα-アミラーゼに関して評価した結果を表５に示す。表５に示されたデータから明らかなように、バシラスサチリス由来のα-アミラーゼは、60分における結晶質：可溶性セルロース活性比約0(＜0.1μmol検出限界)を有し、かかるアミラーゼは先に記載したセルラーゼほどビール濾過で使用した多孔質膜の清浄目的に関して有効な酵素ではないことが解る。実施例８この実施例は、酵素分解性の可溶性セルロース基質と結晶質セルロース基質における種々のセルラーゼの有効性を示す。セルラーゼ調製物：(a)C_x-セルラーゼ(粉末、品目番号VP0945/2)、(b)トリコデルマレーセイ由来のC₁-セルラーゼ(粉末、品目番号VP0965/2)、(c)C₁-セルラーゼ(液体、品目番号Cleanzym SB1)、(d)C₁-セルラーゼ(液体、品目番号VP097 6/4)、(e)セルラーゼ(液体、品目番号VP0971/1)、及び(f)セルラーゼ(液体、品目番号VP0971/4)はErbsloh Companyより入手した。培養液が(i)酢酸ナトリウム緩衝液(50mM，pH4.8)中の23ml CMC(1％)またはAvicel(1％)、及び(ii)酢酸ナトリウム緩衝液(50mM，pH4.8)中の酵素溶液5mlを含んでいた以外には、この酵素を実施例３と同様の方法で評価した。粉末化酵素調製物(5mg/ml)と液体酵素調製物 (5μl/ml)から0.5％ストック溶液を製造した。溶液を30℃で振盪した。試験溶液は、1:5に希釈した後に、実施例３に記載のDNS試験よりもむしろ着色試験を使用して評価した。種々のセルラーゼに関する評価結果を表６に示す。グルコース当量データは平均のμmolグルコース当量/分(全時間間隔)であり、(表１〜５に記載のデータの条件のように)酵素mg当たりで標準化していない。勿論、割合を計算する際に単位を配分する限り、結晶質：可溶性セルロース活性比はグルコース当量の単位により変化しない(即ち、割合には単位がない)。表６に示したデータから明らかなように、種々のセルラーゼは60分で0.4〜1.0 の範囲の結晶質：可溶性セルロース活性比を有し、これらがビール濾過で使用した多孔質膜の清浄の目的に関して優れた酵素であることを示している。実施例９この実施例は、ビールを製造する本発明の方法の有効性について詳細に説明するものである。特に、本実施例は、セルラーゼだけを使用する(即ち、他の酵素を使用しない)と、連続ビール濾過で使用するために多孔質膜を戻す目的に関して、ビールを濾過する間に目詰まりした多孔質膜の清浄に非常に優れていることを示す。種々の特徴を有するビールをクラスターフィルター装置で0.45μｍの口径(por e rating)を有するナイロン-6,6多孔質膜(約300m²)(PALL-CFS、Pall Filtration stechnik GmbH，ドイツ)を通して濾過した。特定のビール濾過間隔で、多孔質膜を本発明の清浄工程にかけた。清浄工程は、0.5％NaOH溶液で15分間の循環、続いて60分間のソーキングを含んでいた。次いで多孔質膜を水でバックフラッシュした。38℃の水でクラスターフィルター装置を通して内部ループを設置した。乳酸を水に添加してpHを4.2±0 .3に調節し、次いでErbsloh Companyより入手したトリコデルマロンジブラチアタム(Trichoderma longibrachiatum)から誘導したセルラーゼ(品目番号VP0945 /1)を含有する酵素調製物６１を投与ポンプを介して水に添加した。水中酵素調製物(約20〜40g酵素/100kgフィルターハウジング流体容積の濃度)を約15分間循環させ、続いて30分ソーキング、さらに15分間循環し、最後に６時間ソーキングした。次いで多孔質膜を水でバックフラッシュした。約90,000hlの全ビールを多孔質膜で濾過した後に多孔質膜を清浄し、次いで多孔質膜を施設に戻した。即ち、ビール濾過を継続した。約100,000hl、約140,000 hl及び約160,000hlの全ビールを多孔質膜を通して濾過した後に、多孔質膜を同様に清浄し、施設に戻した。約190,000hlの全ビール(total beer)を多孔質膜で濾過した後、多孔質膜は機械的に破壊した。上記データは、本発明を使用すると思い通りにビールを製造し得ることを示す。特に、本発明によって多孔質膜を効果的に清浄し且つ施設に戻し得るというこの実施例の結果により、ビール製造工程で多孔質媒体の有効耐用時間を延長できることを示す。特許、特許出願及び刊行物を含む本明細書中で引用した全ての文献は、本明細書中その全体を参照として含むものとする。好ましい実施態様を強調して本発明を記載してきたが、当業者には好ましい態様の種々の変形が可能であり、本明細書中に特記した以外にも本発明を実施し得ることが明らかであろう。従って、本発明は、以下の請求項により定義されるように本発明の趣旨及び範囲内に全ての変形を包含するものとする。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION Beer production method TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to a method for producing beer, in particular, filtering beer through a filter medium, and filtering the filter medium for beer. The present invention relates to a method for washing a filter medium with an enzyme so that it can be reused for filtration. Background of the Invention Considering the expanded sales channels, the beer needs to be Organisms (eg, bacteria) must be removed. At present, microbial removal is mainly This is done by beer pasteurization. For this purpose, a beer, for example a bottle or Place in cans and heat to a temperature of 62-69 ° C. to kill microorganisms. However, this pasteurization requires considerable energy consumption. This is the introduction Energy can trigger chemical reactions, and these chemical reactions Has the further disadvantage that it is difficult to control. these Reaction has, for example, an adverse effect on the flavor of the product (“pasteurized taste (pasteu rized taste) ”), with the risk that further undesired substances are formed. Therefore, pasteurization requires high energy consumption and, as a result, is harmful to the environment. A relatively costly microbial removal method that impacts and reduces product quality . Another known microbial removal method is cryogenic filtration. Low-temperature filtered beer Available as so-called "draft beer" in the United States, Japan and Korea . This beer contains technical enzymes, so in Europe prohibited. These industrial enzymes have the disadvantages inherent in the low temperature-filtration process: filter clogging and Present in beer to prevent panting. This blockage can be caused by a filter, for example Due to deposits of substances to be filtered from the beer, upstream of the membrane filter. This Deposits are difficult or even impossible to remove from the filter , Reducing the useful life of the filter. This is because membrane filters are expensive , This will increase beer production costs. To increase the useful life of filters, membrane filter manufacturers use With proteases, glucanases and xylanases, such as surfactants, acids / Clean the membrane by treating it with chemicals such as It is recommended that used membranes be made reusable. This cleaning is performed in, for example, two steps. In one stage, by the enzyme, and then optionally in the second stage, by the chemical. This can be done by additional washing. The literature further includes cleaning of membrane filters used for beer filtration, including a variety of techniques. A method is disclosed. For example, U.S. Pat. No. 5,227,819 discloses low temperature filtration of beer. A method for cleaning a polyamide microporous membrane used for filtration, wherein a dilute alcohol A method by passing a potash solution is disclosed. International Patent Application WO 96/235 79 discloses a somewhat different method of membrane filter used for beer filtration . In this method, a membrane filter is used for β-glucanase, xylanase and cellulase. The membrane filter is treated with an acidic washing aqueous solution. Cleaning, and cleaning with a peroxide-containing alkaline cleaning solution. You. For example, about 320m^TwoIf the filter area is assumed, the washing method is an example. After filtering 5,000 hectoliters, an enzyme wash is prepared every Provide an additional chemical wash after each filtration of the hectoliter. Washing recommended by manufacturer About 320m^TwoTypical of a filter having the above filter area The service life is about 100,000 ha. However, the cleaning methods known so far sufficiently remove the deposits on the filter. And this can increase as the age of the membrane filter increases. There is a disadvantage that the purification efficiency is strongly reduced. Still other drawbacks include standards such as total nitrogen content or original wort%. Regardless of the sudden random blockage of the filter membrane. Completely occluded membrane Filters cannot be adequately cleaned using state-of-the-art methods and filter The service life is strongly reduced. When the filter can not be washed enough Because it is difficult to know how much blockage will occur, Or it may not be timely cleaned, i.e. too early or too late. In view of the above problems, an improved method of making beer, especially thorough washing Beer can be filtered through a reusable filter medium There is a need for law. The present invention provides such a method. The above of the present invention Other advantages, as well as other features of the invention, will be apparent from the description of the invention provided herein. It will be. BRIEF SUMMARY OF THE INVENTION The present invention provides a method of passing beads through a porous membrane until such time as the porous membrane requires cleaning. And filter the porous membrane with cellulase, amylase or a combination thereof. An enzyme selected from the group consisting of: Washing the porous membrane by contacting with a cellulase having a sex ratio of at least about 0.1. , Followed by reuse of the porous membrane and continuing filtration of the beer, The present invention provides a method for manufacturing a device. The invention further relates to porous membranes that gradually clog during filtration. Filtration of the beer through a porous membrane streaming or zeta potential Is monitored as a measure of the degree of occlusion of the porous membrane, and the outflow of the porous membrane or zeta potato Before the porous membrane is completely closed, as determined by the Stop filtering the beer, wash the porous membrane, and reuse the porous membrane to remove the beer. A method for producing beer, comprising continuing filtration of the beer. BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES FIG. 1 shows a bead for beer filtration through a fresh, ie, new, porous membrane. 4 is a graph of filtration amount (g) versus filtration time (second). FIG. 2 shows beer filtration volume (g) for beer filtration through a closed porous membrane. It is a graph of filtration time (second). FIG. 3 shows through a porous membrane that was previously occluded and cleaned by the prior art method. 4 is a graph of beer filtration amount (g) versus filtration time (second) for the beer filtration of Example 1. FIG. 4 shows beer through a porous membrane that has been previously closed and washed according to the present invention. 5 is a graph of beer filtration volume (g) versus filtration time (sec) for filtration. FIG. 5 is a schematic diagram showing a device for measuring the zeta potential of a filter medium. It is. FIG. 6 is a graph of the zeta potential (mV) of the filter media versus the pH of the electrolyte solution. Curve "a" relates to the new porous membrane and curve "b" relates to beer filtration. For a partially occluded porous membrane, curve "c" is almost complete in connection with beer filtration. It relates to a completely closed porous membrane. FIG. 7 shows a diagram for filtering beer using the bypass system and the measuring device of FIG. It is a schematic diagram showing an apparatus. Description of the preferred embodiment The present invention provides a method for producing beer, especially cold filtered beer. This method is often When passing through a porous membrane, that is, a membrane filter, and the membrane filter requires cleaning, Until the beer is filtered, contacting the porous membrane with an enzyme to wash the porous membrane, After reusing the porous membrane and continuing filtration of the beer. The porous membrane is more than a protease, xylanase and / or glucanase Better and more gentle by cellulase and / or by amylase It has surprisingly been found that it can be washed. The washing according to the invention is a beer filtration In the beer production, it greatly extends the useful life of the porous membrane used for Significantly improve the commercial benefits associated with the use of porous membranes. The enzyme is selected from the group consisting of cellulases, amylases and combinations thereof. It is. As described above, cellulase and / or amylase are used for cleaning the porous membrane. It is not necessary to use protease, xylanase and / or glucanase, It is preferable not to use it. Cellulase is desirably at least about 0.1, more desirably. Preferably at least about 0.3, preferably at least about 0.4, more preferably At least about 0.5, most preferably at least about 1, especially at least about 1.2 Having a crystalline: soluble cellulose activity ratio (described in more detail below). Suitable The appropriate cellulase is Aspergillus, especially Aspergillus ni ger. A preferred cellulase is Trichod erma, preferably Trichoderma reesei and Tricho derma Iongibrachiatum and Thermomonospo ra, preferably a cell derived from Thermomonospora fusca. Lulase. Other sources of cellulases are described in US Pat. No. 4,912,056. Has been described. Suitable amylases are α-amylase, β-amylase and And combinations thereof. More preferably, the method of the present invention comprises a cellulase and an amino acid. Do not use enzymes other than lase, that is, use a porous membrane other than cellulase or amylase. Do not contact with enzymes. Most preferably, the enzyme used in the method of the invention is cellular Optimally, no enzyme other than cellulase is used. Contact with enzyme but not with other enzymes. The porous membrane can be any membrane suitable for filtering beer. In connection with the present invention, porous The membrane is typically a microporous membrane, i.e., a porous membrane having a pore grade of about 0.02-1 μm. is there. The porous membrane preferably has a pore size of about 0.1-1 μm, most preferably about 0.1 μm. It has a pore size of 45 μm. Such porous membranes can be used for bacteria and other undesirable microbes. Can be used to remove material from the beer, preferably by beer pasteurization. Avoid the need to germ. Porous membranes can also be used to remove yeast from beer and other undesirable Can be used to remove unwanted substances. Suitable porous membranes include, for example, ceramics. Inorganic substances such as metals and metals, preferably, for example, polyamides, polyethers Organic polymers such as sulfones, polyolefins, polyvinylidene fluoride, etc. Includes porous membranes made from The porous membrane is preferably a polyamide porous Membranes, especially nylon-6,6 porous membranes. In a preferred embodiment of the method according to the invention, the porous membrane is additionally contacted with an aqueous base. Preferably, in the first step, the porous membrane is brought into contact with an aqueous base solution. And in the second stage, contact with the enzyme. NaOH and / or Have found it convenient to use aqueous solutions of KOH. Base is 0.1-1N, More preferably it is present at a concentration of 0.25 to 1N, most preferably 0.5 to 1N. Is preferred. Treatment with an aqueous base solution is best at temperatures between 40 and 90 ° C. Done. A further advantageous embodiment of the method according to the invention provides that the treatment with cellulase Carried out at a temperature of ５０50 ° C. and a pH of 4.5-5.5, by α-amylase The treatment is carried out at a temperature of 60-75 ° C. and a pH of 4.6-5.8, Treatment at a temperature of 40-60 ° C and a pH of 4.6-5.8. And features. The streaming potential or zeta potential of the porous membrane Le It is expedient to carry out the washing until the point at which no longer changes. Porous during operation Outflow potential generated in the membrane or zeta potential calculated from it (See below) should be good enough to remove any material that has blocked the porous membrane. It is a mark. The present invention also provides a porous membrane by ensuring that the porous membrane is cleaned in a timely manner. The purpose is to extend the useful life of the membrane. Therefore, the present invention Includes filtering beer through a porous membrane that gradually plugs as it progresses Provides beer production. Porous membrane only partially occludes, ie completely occluded At a certain point in time when the filtered state has not yet been reached, the filtration is stopped. The degree of obstruction is optional By any suitable means, desirably, for example, US Pat. No. 5,449,465. Monitor the pressure drop across the porous membrane as described generally. Can be determined by Alternatively, the present invention provides Provides confirmation of cleaning time by measuring tension and / or zeta potential I do. This aspect of the invention provides extrapolation from the runoff potential-or the former recorded data. The zeta potential is determined by the pH range (in this pH range, depending on the degree of occlusion). Beer brewing or filtration takes place) and therefore the reliability of the occlusion It is based on the recognition that it means a possible, almost quantitative indicator. for that reason Measurement of the outflow potential and / or zeta potential of the porous membrane Can provide an accurate image of the closed state of the camera. It is known that porous membranes work in two ways. First, the porous membrane is a sieve Works, in this case particles larger than the pores of the filter are mechanically filtered from the medium Is done. Second, porous membranes are known to act by electrostatic attraction. film Particles with diameters much smaller than the porosity of the Deposit on the membrane when the data potential is of the opposite polarity (eg, P all Filtrationtechnik GmbH, Info, Germany rmational Brochure SD 872h G). Using the zeta potential, it is possible to measure the degree of blockage of a porous membrane That fact is not yet known before the present invention. The zeta potential of a porous membrane is affected by the chemistry of the membrane. Specialty The house changes its zeta potential at a sufficiently large rate in proportion to the degree of obstruction There is no difficulty in selecting only one filter--recognizing the present invention. Fi With Luther online and continuous monitoring via data acquisition, The filtration process can be stopped in a timely manner, for example, if occlusion has started . Washing a filter that is not completely occluded should be done with a completely occluded filter. Is much easier than cleaning and guarantees a longer mode life. Therefore, the book The preferred method of the invention is to reduce the zeta potential of the filter At the time of drop to a maximum of 20% of the value shown in the unused state, or when the occlusion exceeds 80% Stop the filter when not possible. Another ingenuity of this method is to use a porous membrane made of polyamide to create a zeta potential. Filtration stops when the pH exceeds -5 mV measured at a pH of 4.2. It is. Beer undergoes pre-filtration before formal filtration, ie filtration through a porous membrane Is preferred. Diatomaceous earth (dropworm soil), also known as diatomite ) Is used almost exclusively before pre-filtration. Diatomaceous earth and deep-bed fi ltration) is also feasible. The invention can be used in any suitable beer production system. Preferably, Ming et al., As described in US Patents 5,417,101 and 5,594,161. , Used for cluster filters. The invention also provides a beer feeder line to be filtered, a porous membrane, A filter for beer filtration with a run-off line for used beer It also relates to excess units. This acts as a bypass, allowing the porous membrane and beer Outflow potential of the meter cell membrane filter flowing through it Hand, such as an electrode, to monitor the zeta and / or zeta potential Represented by modules as meter cells, characterized by steps. The invention also provides a beer feeder line to be filtered, a porous membrane, Filtration unit for filtering beer, characterized by a line for discharging used beer Also deal with. Unlike the above paragraph, this filtration unit passes through a porous membrane. Tsu The runoff potential and / or zeta potential when the beer flows Means, such as electrodes, attached to the porous membrane for monitoring or reading It is characterized by. In this variation, the zeta potential is It is not measured via a meter cell provided as a bypass in the Measured in Luther itself. Any suitable bypass configuration may be used in connection with embodiments of the present invention. You. Preferably, the present invention relates to an apparatus and method as described in US Pat. No. 5,449,465. Incorporate. The discovery that the zeta potential of a filter correlates with the general state of occlusion Beer filtration can be realized as follows: 1. Outflow potential and / or zeta potential of the porous membrane during the filtration process By constantly observing the changes that occur in the char, unexpected or random In order to prevent production, the degree of membrane occlusion can be pinpointed, and filter replacement It is possible to know the measurement value with good timing for the measurement. 2. Filtration can be stopped before the porous membrane is completely closed. This means Facilitates easy cleaning of the filter. Occlusion material in a completely occluded filter Can it be removed only with great difficulty by conventional cleaning methods? Or cannot be removed from the filter at all, resulting in a shortened service life . If the filtration is stopped before complete occlusion, the washing process becomes very easy, Being more complete, the filter retains a long life. For a porous polyamide membrane Has lost the zeta potential more than about 80% of its original value If the filtration is stopped at a point where it is not blocked by more than 80% Successful removal of all occluding materials from the porous membrane can be achieved. 3. The success of the cleaning method depends on measuring the zeta potential of the cleaned membrane. Therefore, it can be tested. The action of the cleaning will substantially reduce the zeta potential Return to the original value. In this way, the cleaning process can be evaluated and / or optimized for its efficiency. Can be 4. Track the aging of porous membranes due to repeated use and their residual service life A reasonable estimate of life prediction can be provided. 5. By measuring the zeta potential, occluding substances and filters in liquid systems Assessing the interaction between the Luther material and / or the filter shunt means, Filter material and shunting material (eg, , Diatomite, bentonite, perlite, polyvinylpyrrolidone) Can be tested for suitability in filtration. 6. Until the start of occlusion, specific membrane load (hl / m^Two ) By measuring the zeta potential recorded below The service life of the membrane can be estimated. Porous membrane with zeta potential showing a remarkable change in proportion to the degree of occlusion Those skilled in the art are aware that this method is most suitable. These para Demonstration of the meter is easy enough using the simple test method described above . The following examples further illustrate the invention, but do not limit these examples in any way. It should not be construed as limiting the scope of the invention. Example 1 This example illustrates the effectiveness of the beer manufacturing method of the present invention. In particular, this implementation An example is the use of cellulase and amylase to block many beer during the beer filtration process. The porous membrane is sufficient so that it can be reused for continuous beer filtration. Demonstrate that it can be washed as Nylon-6,6 (NB type, manufacturer: Pall Filtrationste) chnik GmbH, Germany) as a filter. Was. Such filters are often used in the state of the art for low temperature filtration of beer Can be. The so-called membrane filter test by Esser (Monatszeitsch) lift fuel Brauerei (Monthly Magazine for Breweries), 25^thYear, No. 6, pp. 145-151, 1972 ) Was used to evaluate the filtration performance of the filter. This test improves filterability Reliable to check for measures. A pressure filtration device to measure the filtration efficiency of a new, i.e., unused, porous membrane (S M16536 type, 200 ml capacity, manufacturer: Sertorius GmbH, G Oettingen, Germany) with a poly (47 mm diameter and 0.2 μm porosity). Amide used for nylon-6,6 porous membrane. Beer cooled to 0 ° C. is passed through a porous membrane under isobar conditions (1 bar) and the filtrate volume is reduced. Weighed every 10 seconds. After 200 g of filtrate had been obtained, the test was stopped. result Is shown graphically in the diagram of FIG. FIG. 1 shows that the filter was not used under the above conditions. This indicates that 200 g of filtrate was obtained after about 210 seconds. Under the same conditions, the filtration performance of the closed, ie used, porous membrane was tested. Conclusion The results are shown in FIG. 2. FIG. 2 shows that only about 60 g of filtrate was obtained even after 720 seconds. To indicate that it is not. The clogged porous membrane was washed according to the prior art method. The membrane was first washed with enzymes and then chemically, as described in. For enzyme cleaning, the occluded membrane is brought to pH 5 (mixture of surfactant and acid component). (P3-Ultrasil 75; Manufacturer: Henkel) 0.05% aqueous solution A mixture of β-glucanase and xylanase (P3- Ultrasil 65; Manufacturer: Henkel) at 50 ° C. with 1% aqueous solution For 1 hour. Thereafter, this process was performed once more. Next, the membrane was adjusted to pH 9 to 9.5 (a mixture of a surfactant and an alkali component (P3- Ultrasil 91; manufacturer: Henkel) with a 0.15% aqueous solution A mixture of surfactant, glucanase and protease (P) 3-Ultrasil 62; manufacturer: Henkel) For 3 hours at a temperature of 50 ° C., followed by a rinse with warm water (50 ° C.) Washed. For chemical cleaning, the membrane is treated with a mixture of surfactant and acid component (P3-Ultr). asil 75; manufacturer: Henkel) at 60 ° C. with 1% aqueous solution Treated for 30 minutes, then rinsed with fresh water. Subsequently, the membrane is surface-active Mixture of an agent and an alkaline component (P3-Ultrasil 91; manufacturer: Hen) kel) 1% and a mixture of surfactant and oxygen donor (P3-Ultrasil) 05; manufacturer: Henkel) with an aqueous solution containing 1% Every time For 30 minutes and then rinsed with fresh water. Next, the membrane Mixture of surfactant and acid component (P3-Ultrasil 75; Manufacturer: Hen kel) with another 0.5% aqueous solution for 30 minutes, followed by fresh water Rinsed until the rinse water reached the conductivity of fresh water. Next, the filtration performance of the washed porous membrane was tested again under the above conditions. Result is As shown in FIG. FIG. 3 shows that 200 g of filtrate was obtained after about 600 seconds. Indicates that the performance has been somewhat improved. The same clogged membrane whose filtration efficiency is shown in FIG. 2 was washed by the method of the present invention. Was. This film is C₁-And C_xAn aqueous solution of cellulase (this solution has a pH value of 4.7) For 30 minutes at a temperature of 45 ° C. Then put the membrane in the same solution Therefore, at a pH value of 5.0 and a temperature of 50 ° C., finally a pH value of 4.7 And a temperature of 60 ° C. for 60 minutes. Subsequently, the membrane was rinsed with warm water at 50 ° C. Washing by the method of the present invention The filtration performance of the cleaned membrane was tested by the method described above. The results are shown in FIG. FIG. 4 shows that 200 g of filtrate was obtained after about 220 seconds. This is a precedence It represents a significant improvement over the technology (FIG. 3). Therefore, the method according to the invention Allows much better cleaning of used membranes than is possible with the technology's cleaning methods Make it work. According to the present invention, similarly, when amylase is used in place of cellulase, Good results were obtained. Thus, by the cleaning method according to the present invention, the porous membrane The service life can be extended. Example 2 This example illustrates the outflow potential of the porous membrane to assist in cleaning the porous membrane. The use of a potential or zeta potential will be described. In particular, runoff potential or The zeta potential is the degree to which the membrane is cleaned, and when the membrane is most thoroughly cleaned. It has proven useful for making decisions. The zeta potential of the membrane filter was determined by Anton Paar GmbH, Electrokineticmeasuring system in Sutoria Measured by EKA. This measurement is based on the runoff potential method. The electrolyte is Potential flowing through the filter and caused by the shearing-off of the counterion The char (outflow potential) is detected by the electrode, and the zeta Calculate the potential (see below). Figure 5 shows a schematic diagram of a measuring cell for measuring the outflow potential or zeta potential. Shown schematically. Reference numeral 1 denotes a measuring cell, in which the porous membrane 2 is I won't bend on filter holders 3 and 4 made from lafluoroethylene So, it is clamped. Filter holders 3 and 4 are Ends of the stons 5 and 6, which are taken for movement into the cylindrical part 7 of the measuring cell 1. It is attached. The ends 3 and 4 of the pistons 5 and 6, respectively, provide fines for the fluid to be filtered. It has pores 10 and 11 and presses the perforated electrodes 8 and 9 against the porous membrane 2. Electrodes 8 and 9 Since it is connected to the electrical terminals 12 and 13 extending inside the bistons 5 and 6, it passes through the membrane 2. Outflow potential generated when the fluid flows. Current Silver or silver chloride electrodes that exhibit low polarization during passage are preferred as electrodes. piston 6 and 7 are on seals 14 and 15 respectively, while these are movable On the other hand, they are mounted in such a way that they do not allow fluid to escape from the measuring cell. It is. The fluid to be filtered flows through the supply line 16 to the cylindrical part 7 of the measuring cell 1. Through the micropores 10 of the piston 6, through the electrodes 8, through the porous membrane 2, and Place occurs. The filtered fluid flows through the electrode 9 and also forms a potential While exiting the measuring cell through the micropore 11 of the piston, through the discharge line 17 You. To calculate the zeta potential from the measured runoff potential, Measurement of the differential pressure in the measuring cell between the supply line 16 and the discharge line 17 (not described), The conductivity, and suitably the pH value, is also required. The zeta potential is It is calculated from the quantification as follows: Where U is the outflow potential, ΔP is the differential pressure, LF is the conductivity, η is the viscosity, εε₀Is the relative permittivity. The change in zeta potential of the membrane filter as the occlusion progresses is shown in FIG. . In this figure, the zeta potential in millivolts is plotted on the ordinate and the zeta potential is plotted. FIG. 3 is a diagram in which pH values obtained by measuring data potentials are plotted on an abscissa. Electric The pH value of the dissolving solution (0.001N KCl aqueous solution) is 0.1N HCl or 0.1N HCl. Set by 1N NaOH. The specified pressure difference was 350 mbar. By the measuring cell described above, a new, i.e., unused, polyamide porous membrane ( NB type; Manufacturer: Pall Filtrationtechnik GmbH , 6072 Dreieich 1, Germany) with various zeta potentials. A diagram was obtained by first measuring the pH value. The results for the virgin porous membrane are plotted as curve "a". Unused porous The membrane has a zeta potential of about -18 mV due to the alkaline pH; The zeta potential rises due to a decrease in pH, and finally at a pH of about 3 It is clear that it reaches zero. Curve "b" is obtained under the same conditions as described above, but after being used for beer filtration. Therefore, the dependence of the zeta potential on the pH value of a porous membrane with partial occlusion Shows sex. As is evident, this zeta potential is due to partial occlusion. At a pH value of about 7, but only reaches a value of about -15 mV. No. Curve "c" was plotted for the same porous membrane with almost complete occlusion Things. This zeta potential now varies very slightly with pH. It is clear that it does not drop below about -2 mV even in the alkaline range. Is. To test the cleaning according to the invention, the zeta potential of the membrane to be cleaned is Measure the zeta potential of the cleaned membrane and the zeta potential of the unused membrane If the shift was as large as possible in the direction of the circle, the wash was successful. Its zeta potential changes to a sufficiently large degree as a function of the degree of occlusion Those skilled in the art will appreciate that porous membranes are particularly well suited for use in the method according to the invention. It will be obvious. This feature can be easily determined by those skilled in the art by simple tests. Can be. The polyamide porous membrane adjusts the pH of the beer to be filtered (approximately pH = 4.2). This is because the zeta potential of It is particularly suitable for the process. As can be seen from FIG. 6, the start of filtration At this particular pH, the membrane exhibits a zeta potential of about -8 mV. Complete Fully occluded membranes have a zeta potential of about -2 mV. FIG. 7 has the meter cell 22 attached to it as a bypass shown in FIG. A modification of the above-mentioned filtration unit featuring a filtration chamber 18 is shown. This filtration chamber 18 With filter candles. The beer to be filtered is supplied to the filtration chamber 18 from the line 20 and is filtered. It flows through a candle (membrane filter) 19 and passes from the filtration chamber 18 to a discharge line 21. Exits as filtered beer. The meter cell is shown in FIG. 7 without details. The actual flow through the meter cell 22 is , Cm of the porous membrane surface of the filtration chamber 18^TwoPer cm of porous membrane surface^TwoThis Beer volume must be controlled to the extent that it is filtered. Zeta Po inside meter cell 1 during filtration in filter test part 2 (Figure 5) Severe changes in the tension are caused by the condition of the filter candle 19 in the filtration chamber 18. Enables the evaluation of Example 3 This example demonstrates Aspe in the enzymatic degradation of soluble and crystalline cellulose substrates. The effectiveness of cellulase derived from rgillus niger will be described. Aspergillus niger-derived cellulase is Fluka (item number No. 22178). This enzyme is used in two different types of cellulose: soluble Ruboxymethylcellulose (CMC, Item No. 41927-3 as Aldri ch.) and crystalline cellulose (Avicel, Item No. PH-105) (Available from FMC). The test method was (i) 18 ml CMC (1%) or Avicel (1%), (ii ) 5 ml sodium acetate buffer (50 mM, pH 4.8) and (iii) 30 ° C 5 ml of enzyme solution in sodium acetate buffer (50 mM, pH 4.8) Preparation of the incubation solution was required. Next, a 1.4 ml incubator 0.1 ml of glucose solution (0.15%) and 1.5 ml of 3, 5-Dinitrosalicylic acid (DNS) reagent (Item No. D-0550 from Sigma) The test solution was prepared by mixing Test solution Boil for 15 minutes. Total μmol glucose equivalent / mg as a function of time (minutes) The enzyme was purified using Miller, Anal. Chem. 3 1,426-28 (1959), using a glucose standard. Spectrophotometry (575 nm) using linear calibration Was. Protein mass is determined by Bradford, Anal. Biochem. 72, 24 8-64 (1976) by the method described in Bovine Serum Albumin (BSA). ) Measured using a standard. Enzymatic degradation of cellulose results in the production of glucose, so total μmol glucose The measurement of sub-equivalent / mg enzyme is based on the specific type of cellulose, eg, solubility (CMC) Or a measure of enzyme activity for crystalline (Avicel) cellulose. Cellulase derived from Aspergillus niger Table 1 shows the results of this evaluation. Test solution of soluble (CMC) cellulose substrate is 0.8 mg enzyme / 28 ml culture (about 17.6 μg protein). Crystalline (Avicel) cellulos The test solution of the substrate contained 0.35 mg enzyme / 28 ml culture (approximately 7.7 μg protein). Relatively strong activity on crystalline cellulose substrates compared to soluble cellulose substrates These enzymes are particularly effective in cleaning porous membranes used in beer filtration It was found that Glucose produced on crystalline cellulose substrates The ratio of the amount of glucose produced to the amount of soluble cellulose substrate Is an index of the effectiveness of the enzyme in the activity, and is described as the crystalline: soluble cellulose activity ratio. You. The crystalline: soluble cellulose activity ratio is determined by the test protocol described in this example. Time ranges, such as 30 minutes, 60 minutes and / or 90 minutes, especially 60 minutes, as described above. It is desirable to have a value. As is clear from the data shown in Table 1, cells derived from Aspergillus niger Lulase has a crystalline: soluble cellulose activity ratio of 0.11 at 60 minutes, and Lulase is a moderately effective enzyme for cleaning porous membranes used in beer filtration It shows that it is elementary. Example 4 This example demonstrates the use of enzymatically degradable soluble and crystalline cellulose substrates. Of cellulase derived from Trichoderma reesei Indicates effectiveness. Cellulase derived from Trichoderma reesei was obtained from Fluka (Item Number 22173). This enzyme was evaluated in the same manner as in Example 3. Table 2 shows the results of evaluating cellulases derived from Trichoderma reesei. Shown in The test solution of soluble (CMC) cellulose substrate was 0.37 mg enzyme / 28 ml culture (about 128 μg protein). Test solution of crystalline (Avicel) cellulose substrate is 0.08m g enzyme / 28 ml culture (about 25.6 μg protein). As is evident from the data in Table 2, cells derived from Trichoderma reesei The activity ratio of crystalline to soluble cellulose at 60 minutes of the Lulase is an excellent enzyme for cleaning porous membranes used in beer filtration. It indicates that there is. Example 5 This example demonstrates enzymatically degradable soluble and crystalline cellulose substrates. Of β-cellulase derived from Bacillus subtilis in Japan Indicates effectiveness. Cellulases derived from Bacillus subtilis were obtained from Fluka (item no. 49106). This enzyme was evaluated in the same manner as in Example 3. Table 3 shows the results of evaluation of β-cellulase derived from Bacillus subtilis. Shown in The test solution of soluble (CMC) cellulose substrate was 14.4 mg enzyme / 28 ml culture (about 8.3 μg protein). Test solution of crystalline (Avicel) cellulose substrate, 15.6m g enzyme / 28 ml culture (about 8.8 μg protein). As is clear from the data shown in Table 3, β-serum derived from Bacillus subtilis Lulase has a crystalline: soluble cellulose activity ratio of 0.10. Lulase is a moderately effective enzyme for cleaning porous membranes used in beer filtration It shows that it is elementary. Example 6 This example demonstrates the use of enzymatically degradable soluble and crystalline cellulose substrates. Exo Derived from Thermomonospora fusca in Japan 2 shows the efficacy of exocellulase. Exocellulase E3 derived from Thermomonospora fusca is from Cornell University Obtained from. The culture was shaken at 50 ° C. (i) 18 ml CMC (1%) or Avicel (1%), ( ii) 9 ml sodium acetate buffer (50 mM, pH 5.6), and (iii) sodium acetate buffer (5 0 mM, pH 5.6) except for 1 ml of the enzyme solution (about 960 μm protein). Was evaluated in the same manner as in Example 3. The test solution was prepared according to the DNS test described in Example 3. Rather, it was evaluated using a color test. Table shows the results of the evaluation of cellulase derived from Thermomonospora fusca. It is shown in FIG. As is clear from the data shown in Table 4, β-serum derived from Bacillus subtilis Lulase has a crystalline: soluble cellulose activity ratio of 1.33 at 60 minutes, such Cellulase is an excellent enzyme for cleaning the porous membrane used in beer filtration. Which indicates that. Example 7 This example illustrates the use of enzymatically degradable soluble and crystalline cellulose substrates. Of α-amylase derived from Bacillus subtilis in Japan Indicates effectiveness. Α-amylase derived from Bacillus subtilis was obtained from Fluka (Item No. 10069). The culture was shaken at 30 ° C. (i) 18 ml CMC (1%) or Avicel (1%), (ii) ) 5 ml sodium acetate buffer (50 mM, pH 6.9), and (iii) sodium acetate buffer (50 mM M, pH 6.9) except for 5 ml of the enzyme solution (about 8.5 μm protein). Evaluation was performed in the same manner as in Example 3. The test solution was obtained from the DNS test described in Example 3. Rather, they were evaluated using a color test. Table 5 shows the results of evaluation of α-amylase derived from Bacillus subtilis. Shown in As is clear from the data shown in Table 5, α-α-derived from Bacillus subtilis The activity of the crystalline: soluble cellulose at about 60 minutes (<0.1 μmol detected) The amylase is used in beer filtration as much as the cellulase described above. It turns out that it is not an effective enzyme for the purpose of cleaning the used porous membrane. Example 8 This example demonstrates the use of enzymatically degradable soluble and crystalline cellulose substrates. 3 shows the effectiveness of various cellulases in the cell. Cellulase preparation: (a) C_x-Cellulase (powder, item number VP0945 / 2), (b) Tricho C from Derma Raysey₁-Cellulase (powder, item number VP0965 / 2), (c) C₁-cell Lase (liquid, item number Cleanzym SB1), (d) C₁-Cellulase (liquid, item number VP097 6/4), (e) cellulase (liquid, item no.VP0971 / 1), and (f) cellulase (liquid, item Eye number VP0971 / 4) was obtained from Erbsloh Company. The culture solution is (i) sodium acetate 23 ml CMC (1%) or Avicel (1%) in buffer (50 mM, pH 4.8), and (ii) sodium acetate This enzyme was used except that it contained 5 ml of an enzyme solution in lium buffer (50 mM, pH 4.8). Evaluation was performed in the same manner as in Example 3. Powdered enzyme preparation (5 mg / ml) and liquid enzyme preparation A 0.5% stock solution was made from (5 μl / ml). The solution was shaken at 30 ° C. Test solution Uses the color test rather than the DNS test described in Example 3 after dilution 1: 5 Was evaluated. Table 6 shows the evaluation results of various cellulases. Glucose equivalent data is flat Average μmol glucose equivalent / min (all time intervals), (data of Tables 1 to 5 Not standardized per mg enzyme (as in conditions). Of course, when calculating the ratio, The crystalline: soluble cellulose activity ratio is in units of glucose equivalent Less changeable (ie, there are no units in the proportions). As is evident from the data shown in Table 6, the various cellulases were 0.4-1.0 in 60 minutes. Having a crystalline: soluble cellulose activity ratio in the range of It is an excellent enzyme for the purpose of cleaning porous membranes. Example 9 This example illustrates in detail the effectiveness of the method of the present invention for producing beer. Things. In particular, this example uses only cellulase (i.e., other enzymes). ) And the purpose of returning the porous membrane for use in continuous beer filtration. And is very good at cleaning clogged porous membranes while filtering beer Is shown. Beer with various characteristics is filtered with a cluster filter device to a 0.45 μm e-rating) nylon-6,6 porous membrane (about 300m^Two) (PALL-CFS, Pall Filtration (stechnik GmbH, Germany). At specific beer filtration intervals, a porous membrane Was subjected to the cleaning step of the present invention. The cleaning step includes a 15 minute circulation with a 0.5% NaOH solution, followed by a 60 minute soak. I was out. The porous membrane was then backflushed with water. Cluster in water at 38 ° C An inner loop was installed through the filter device. Add lactic acid to water to adjust pH to 4.2 ± 0 .3, then Trichoderma longibrachi obtained from Erbsloh Company Cellulase derived from Atam (Trichoderma longibrachiatum) (item number VP0945 / 1) was added to the water via a dosing pump. Enzyme in water Product (about 20-40 g enzyme / 100 kg filter housing fluid volume concentration) for about 15 minutes Cycle, then soak for 30 minutes, circulate for another 15 minutes, and finally soak for 6 hours did. The porous membrane was then backflushed with water. After filtering about 90,000 hl of all beer through the porous membrane, the porous membrane is cleaned, and then The porous membrane was returned to the facility. That is, beer filtration was continued. About 100,000hl, about 140,000 hl and about 160,000 hl of total beer after filtering through the porous membrane. Cleaned and returned to the facility. Approximately 190,000hl total beer with porous membrane After filtration, the porous membrane was broken mechanically. The above data shows that the beer can be produced as desired using the present invention . In particular, this invention allows the porous membrane to be effectively cleaned and returned to the facility. According to the results of the examples, the effective service life of the porous medium can be extended in the beer production process. Indicates that All documents cited herein, including patents, patent applications, and publications, are The entire document is included as reference. Although the present invention has been described with emphasis on preferred embodiments, those skilled in the art will recognize Various modifications are possible, and the present invention may be practiced other than as specifically described herein. It will be clear that Accordingly, the invention is defined by the following claims. Thus, all modifications are included within the spirit and scope of the present invention.

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１１年２月１日（１９９９．２．１）【補正内容】差替え用紙第９頁の翻訳文：原翻訳文第７頁第７行〜第８頁第３行［したがって、本発明の・・・・・を特徴とする］と差替える。したがって、本発明の好ましい方法は、フィルターのゼータ・ポテンシャルが、フィルターがその未使用状態で示した値の最大２０％に低下した時点で、又は閉塞が８０％を超えない時点でフィルターを停止させる。この方法の他の工夫は、ポリアミドの多孔質膜を用いて、ゼータ・ポテンシャルが４．２のｐＨにおいて測定して−５ｍＶを超えるときに濾過が停止することである。ビールは正式の濾過、即ち多孔質膜を通しての濾過の前に、予備濾過を受けることが好ましい。ダイアトマイト(diatomite)としても知られる珪藻土（滴虫土）が予備濾過の前に殆ど排他的に用いられる。珪藻土と厚い層濾過(deep-bed fi ltration)との組み合わせも実行可能である。本発明は任意の適当なビール製造系に用いることができる。好ましくは、本発明は来国特許５，４１７，１０１と５，５９４，１６１に記載されているような、クラスターフイルターに関して用いられる。本発明はまた、濾過を受けるビールのフィーダーラインと、多孔質膜と、濾過済みビールの搬出ライン(run-off line)とを備えた、ビールを濾過するための濾過ユニットにも関する。これは、バイパスとして機能し、多孔質膜と、ビールがそれを通って流れるメーターセル(meter cell)の膜フィルターの流出ポテンシャル及び／又はゼータ・ポテンシャルをモニターするための例えば電極のような手段とを特徴とする、メーターセルとしてのモジュールを特徴とする。本発明はまた、濾過を受けるビールのフィーダーラインと、多孔質膜と、濾過済みビールの搬出ラインとを特徴とする、ビールを濾過するための濾過ユニットをも取り扱う。上記パラグラフとは異なり、この濾過ユニットは、多孔質膜を通ってビールが流れるときの流出ポテンシャル及び／又はゼータ・ポテンシャルをモニター又は読み取るために多孔質膜に取り付けられた、例えば電極のような手段を特徴とする。差替え用紙第１１，１２、１３頁の翻訳文：原翻訳文第８頁第２７行〜第１１頁第１２行［このほう法によって、・・・・・６０分間処理した。］と差替える。この方法によって、洗浄プロセスをその効率に関して評価及び／又は最適化することができる。４．反復使用の理由からの多孔質膜のエージングを迫跡して、その残留耐用寿命予測に関する手ごろな推定値を与えることができる。５．ゼータ・ポテンシャルを測定することによって、液体系の閉塞物質とフィルター材料及び／又はフィルターのシャント手段との間の相互作用を評価して、フィルター材料(filter material)とシャント材料(shunting material)（例えば、ダイアトマイト、ベントナイト、パーライト、ポリビニルピロリドン）をビール濾過における適合性に関して試験することができる。６．閉塞が開始する時点まで比膜負荷(specific membrane load)（ｈｌ／ｍ² ）がその下で記録されるゼータ・ポテンシャルを測定することによって、多孔質膜の耐用寿命を推定することができる。閉塞度に比例して顕著な変化を示すゼータ・ポテンシャルを有する多孔質膜がこの方法にとって最も適していることを、当業者は気づいている。これらのパラメーターの実証は上記の簡単な試験方法を用いることによって充分に容易である。下記実施例はさらに本発明を説明するが、これらの実施例を如何なる意味でも本発明の範囲を限定するものと解釈すべきでない。実施例１この実施例は、本発明のビール製造方法の有効性を説明する。特に、この実施例は、セルラーゼとアミラーゼを用いて、ビール濾過の過程において閉塞した多孔質膜を充分に、この多孔質膜が連続ビール濾過に再使用されることができるように洗浄することができることを実証する。ナイロン−６，６（ＮＢ型、ＰａｌｌＦｉｌｔｒａｔｉｏｎｓｔｅｃｈｎｉｋＧｍｂＨ，ドイツから商業的に入手可能）から製造された多孔質膜をフィルターとして用いた。このようなフィルターは最新技術においてビールの低温濾過にしばしば用いられる。Ｅｓｓｅｒによる、いわゆる膜フィルター試験（ＭｏｎａｔｓｚｅｉｔｓｃｈｒｉｆｔｆｕｅｒＢｒａｕｅｒｅｉ（ＭｏｎｔｈｌｙＭａｇａｚｉｎｅｆｏｒＢｒｅｗｅｒｉｅｓ），２５^th年，６号，１４５〜１５１頁，１９７２）を用いて、フィルターの濾過性能を評価した。この試験は、濾過可能性を改良するための対策(measures)をチェックするために信頼できる。新しい、即ち、未使用の多孔質膜の濾過効率を測定するために、加圧濾過装置 (ＳＭ１６５３６型、２００ｍｌ容量；ＳｅｒｔｏｒｉｕｓＧｍｂＨ，Ｇｏｅｔｔｉｎｇｅｎ，ドイツから商業的に入手可能)を、４７ｍｍ直径と０．２μｍ孔度を有するポリアミドナイロン−６，６多孔質膜に対して用いた。０℃に冷却したビールを等圧条件（１ｂａｒ）下で多孔質膜に通し、濾液量を１０秒間毎に秤量した。２００ｇの濾液が得られた後に、試験を停止した。結果は図１の線図にグラフとして示す。図１は、上記条件下で未使用フィルターによって約２１０秒間後に２００ｇの濾液が得られたことを示す。同じ条件下で、閉塞した、即ち使用済みの多孔質膜の濾過性能を試験した。結果は図２に示す、図２は７２０秒間においても僅か約６０ｇの濾液が得られたに過ぎないことを示す。この閉塞した多孔質膜を先行技術方法に従って洗浄した、この方法では、以下に説明するように、膜を最初に酵素によって、次に化学的に洗浄した。酵素洗浄のためには、閉塞した膜を、ｐＨ５（界面活性剤と酸成分との混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ７５；Ｈｅｎｋｅｌから商業的に入手可能）の０．０５％水溶液によって設定）を有する、β−グルカナーゼとキシラナーゼとの混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ６５；Ｈｅｎｋｅｌから商業的に入手可能）の１％水溶液によって５０℃の温度において１時間処理した。その後、この処理をもう１回行った。次に、膜を、ｐＨ９〜９．５（界面活性剤とアルカリ成分との混合物（Ｐ３− Ｕｌｔｒａｓｉｌ９１；Ｈｅｎｋｅｌから商業的に入手可能）の０．１５％水溶液によって設定）を有する、界面活性剤と、グルカナーゼと、プロテアーゼとの混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ６２；Ｈｅｎｋｅｌから商業的に入手可能）の０．５％水溶液によって５０℃の温度において３時間処理し、続いて、温水（５０℃）によってすすぎ洗いした。化学的洗浄のためには、膜を界面活性剤と酸成分との混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ７５；Ｈｅｎｋｅｌから商業的に入手可能）の１％水溶液によって６０℃において３０分間処理し、次に新鮮な水によってすすぎ洗いした。続いて、膜を界面活性剤とアルカリ成分との混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ９１；Ｈｅｎｋｅｌから商業的に入手可能）１％と、界面活性剤と酸素ドナーとの混合物（Ｐ３−Ｕｌｔｒａｓｉｌ０５；Ｈｅｎｋｅｌから商業的に入手可能）１％とを含有する水溶液によって、６０℃の温度において３０分間処理し、次に新鮮な水によってすすぎ洗いした。膜を次に、界面活性剤と酸成分との混合物（Ｐ３− Ｕｌｔｒａｓｉｌ７５；Ｈｅｎｋｅｌから商業的に入手可能）の０．５％水溶液によってもう１回３０分間処理し、続いて、新鮮な水によって、すすぎ水が新鮮な水の導電率に達するまで、すすぎ洗いした。次に、この洗浄済み多孔質膜の濾過性能を上記条件下で再び試験した。結果は図３に示す。図３は、約６００秒間後に２００ｇの濾液が得られたので、濾過性能が幾らか改良されたことを示す。その濾過効率を図２に示した、同様に閉塞した膜を本発明の方法によって洗浄した。この膜をＣ₁−及びＣ_x−セルラーゼの水溶液（この溶液は４．７のｐＨ値を有する）によって４５℃の温度において３０分間処理した。次に膜を同じ溶液によって、但し５．０のｐＨ値と５０℃の温度において、最後に、４．７のｐＨ値と６０℃の温度において６０分間処理した。差替え用紙第１５、１６頁翻訳文：原翻訳文第１２頁第５行〜第１３頁第２１行［参照番号１は・・・・・低下しないことが明らかである。］と差替える。参照番号１は測定セルを示し、このセルでは多孔質膜２がポリテトラフルオロエチレンから製造されたフィルターホルダー３と４に、たわまないように、クランプされている。フィルターホルダー３と４は、それぞれ、２ツノピストン５と６の末端部であり、測定セル１の円筒形部分７内に移動のために取り付けられている。ピストン５と６の末端部３と４は、それぞれ、濾過されるべき流体のための微細孔１０と１１を有し、穿孔電極８と９を多孔質膜２に押圧する。電極８と９はピストン５と６の内側に伸びる電気端子１２と１３に接続するので、膜２を通って流体が流れるときに生じる流出ポテンシャルを測定することができる。電流の通過中に低い分極を示す銀電極又は塩化銀電極が電極として好ましい。ピストン６と７は、それぞれ、シール１４と１５に、一方では、これらが移動可能であり，他方ではこれらが測定セルから流体が漏出するのを許さないように取り付けられる。濾過されるべき流体は供給ライン１６を通って測定セル１の円筒形部分７に流入し、ピストン６の微細孔１０を通り、電極８を通り、多孔質膜２を通って、電位が生じる。濾過済み流体は電極９を通って流れて、同様にポテンシャルを形成しながら、ピストンの微細孔１１を通り、放出ライン１７を通って測定セルを出る。測定された流出ポテンシャルからゼータ・ポテンシャルを算出するために、供給ライン１６と放出ライン１７との間の測定セル内の差圧の測定（説明せず）、導電率、及びｐＨ値も必要である。ゼータ・ポテンシャルはこれらの測定量から次のように算出される：式中、Ｕは流出ポテンシャルであり、△Ｐは差圧であり、ＬＦは導電率であり、 ηは粘度であり、εε₀は比誘電率である。閉塞が進行するときの膜フィルターのゼータ・ポテンシャル変化は図６に示す。この図は、ミリボルトでのゼータ・ポテンシャルが縦座標にプロットされ、ゼータ・ポテンシャルを測定したｐＨ値が横座標にプロットされた線図である。電解質溶液（０．００１ＮのＫＣｌ水溶液）のｐＨ値は０．１ＮＨＣｌ又は０．１ＮＮａＯＨによって設定した。指定した圧力差は３５０ｍｂａｒであった。上述した測定セルによって、新しい、即ち、未使用のポリアミド製多孔質膜( ＮＢ型；ＰａｌｌＦｉｌｔｒａｔｉｏｎｓｔｅｃｈｎｉｋＧｍｂＨ，６０７２Ｄｒｅｉｅｉｃｈ１，ドイツから商業的に入手可能)のゼータ・ポテンシャルを種々なｐＨ値において最初に測定することによって、線図を得た。未使用多孔質膜に関する結果を曲線“ａ”としてプロットする。未使用多孔質膜がアルカリ性ｐＨによって約−１８ｍＶのゼータ・ポテンシャルを有し、ｐＨの低下によってゼータ・ポテンシャルが上昇して、最後には、約３のｐＨにおいて零に達することが明らかである。曲線“ｂ”は、上述した同じ条件下で、但し、ビールの濾過に使用した後の、それ故、部分的閉塞を有する多孔質膜のｐＨ値へのゼータ・ポテンシャルの依存性を示す。明らかであるように、このゼータ・ポテンシャルは部分的閉塞によって幾らか上昇するが、約７のｐＨ値において約−１５ｍＶの値に達するに過ぎない。曲線“ｃ”は、ほぼ完全に閉塞した状態の同じ多孔質膜に関してプロットしたものである。このゼータ・ポテンシャルが今や、ｐＨ値によって極僅かに変化するに過ぎず、アルカリ性範囲においても約−２ｍＶ未満に低下しないことが明らかである。差替え用紙第１８頁翻訳文：原翻訳文第１４頁第１７行〜第１５頁第１２行［フィルター試験パート２・・・・・を用いて測定した。］と差替える。フィルター試験膜２（図５）の濾過中のメーターセル１内側のゼータ・ポテンシャルの重度な変化は、濾過室１８内のフィルター・キャンドル１９の状態の評価を可能にする。実施例３この実施例は、溶解性及び結晶質セルロース基質の酵素分解におけるＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ由来のセルラーゼの有効性を説明する。Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ由来のセルラーゼはＦｌｕｋａ（品目番号２２１７８）から入手した。この酵素を２種類の異なるセルロース：溶解性カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ，品目番号４１９２７−３としてＡｌｄｒｉｃｈから入手可能）と結晶質セルロース（Ａｖｉｃｅｌ，品目番号ＰＨ−１０５としてＦＭＣから入手可能）に関して評価した。試験方法は（ｉ）１８ｍｌＣＭＣ（1％）又はＡｖｉｃｅｌ(１％)、（ｉｉ）５ｍｌ酢酸ナトリウム緩衝液（５０ｍＭ，ｐＨ４．８）及び（ｉｉｉ）３０℃ における酢酸ナトリウム緩衝液（５０ｍＭ，ｐＨ４．８）中の酵素溶液５ｍｌのインキュベーション溶液の調製を必要とした。次に、１．４ｍｌのインキュベーション溶液に０．１ｍｌのグルコース溶液（０．１５％）と、１．５ｍｌの３，５−ジニトロサリチル酸（ＤＮＳ）試薬（Ｓｉｇｍａから品目番号Ｄ−０５５０として入手可能）とを混合することによって、試験溶液を調製した。試験溶液を１５分間煮沸した。時間（分）の関数としての総μｍｏｌグルコース当量／ｍｇ酵素を、２つの並行サンプルを用いて、Ｍｉｌｌｅｒ，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．３１，４２６〜２８（１９５９）に記載された方法に従って、グルコース標準による直線キャリブレーションを用いて、分光測光法（５７５ｎｍ）によって測定した。たんぱく質量はＢｒａｄｆｏｒｄ，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．７２，２４８〜６４（１９７６）に記載された方法によって、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）標準を用いて測定した。請求の範囲を以下の通り補正する。請求項１〜８を補正する。請求項９〜３５は補正しない。１．多孔質膜を清浄しなければならない時間まで多孔質膜を通してビールを濾過し、前記多孔質膜を清浄するためにプロテアーゼまたはグルカナーゼの非存在下、セルラーゼ、アミラーゼ及びその組み合わせからなる群から選択される酵素と前記多孔質膜とを接触させ、次いでビールの濾過を継続するために前記多孔質膜を再利用することを含む、ビール製造法。２．前記多孔質膜を前記セルラーゼまたは前記アミラーゼ以外の酵素とは接触させない、請求項１に記載の方法。３．前記多孔質膜を前記セルラーゼと接触させる、請求項１または２に記載の方法。４．多孔質膜を清浄しなければならない時間まで多孔質膜を通してビールを濾過し、前記多孔質膜を清浄するために60分で少なくとも約０.１の結晶質：可溶性セルロース活性比を有するセルラーゼと前記多孔質膜とを接触させ、次いでビールの濾過を継続するために前記多孔質膜を再利用することを含む、ビール製造法。５．前記多孔質膜を前記セルラーゼと接触させ、他の酵素とは接触させない、請求項３または４に記載の方法。６．前記セルラーゼが60分で少なくとも約0.1の結晶質：可溶性セルロース活性比を有する、請求項１〜３または５のいずれか１項に記載の方法。７．前記セルラーゼが60分で少なくとも約0.3の結晶質：可溶性セルロース活性比を有する、請求項６に記載の方法。８．前記セルラーゼが60分で少なくとも約0.4の結晶質：可溶性セルロース活性比を有する、請求項７に記載の方法。【手続補正書】【提出日】平成１１年１２月３日（１９９９．１２．３）【補正内容】（１）明細書を下記のとおり補正いたします。頁行補正前補正後１９下から２行バシラスサチリスサーモモノスポラフスカ１９下から１〜２行 β―セルラーゼエキソセルラーゼ[Procedure of Amendment] Article 184-8, Paragraph 1 of the Patent Act [Submission date] February 1, 1999 (1999.2.1) [Correction contents]Translation of the replacement page, page 9: Original translation, page 7, line 7 to page 8, line 3 , Of the present invention ....]. Therefore, a preferred method of the present invention is that the zeta potential of the filter is When the filter drops to a maximum of 20% of its unused value, or Stop filter when occlusion does not exceed 80%. Another ingenuity of this method is to use a porous membrane made of polyamide to create a zeta potential. Filtration stops when the pH exceeds -5 mV measured at a pH of 4.2. It is. Beer undergoes pre-filtration before formal filtration, ie filtration through a porous membrane Is preferred. Diatomaceous earth (dropworm soil), also known as diatomite ) Is used almost exclusively before pre-filtration. Diatomaceous earth and deep-bed fi ltration) is also feasible. The invention can be used in any suitable beer production system. Preferably, Ming is described in US Pat. Nos. 5,417,101 and 5,594,161. , Used for cluster filters. The invention also provides a beer feeder line to be filtered, a porous membrane, A filter for beer filtration with a run-off line for used beer It also relates to excess units. This acts as a bypass, allowing the porous membrane and beer Outflow potential of the meter cell membrane filter flowing through it Hand, such as an electrode, to monitor the zeta and / or zeta potential It features a module as a meter cell, characterized by steps. The invention also provides a beer feeder line to be filtered, a porous membrane, Filtration unit for filtering beer, characterized by a line for discharging used beer Also deal with. Unlike the above paragraph, this filtration unit passes through a porous membrane. The outflow potential and / or zeta potential when the beer flows A hand, such as an electrode, attached to the porous membrane for monitoring or reading Features steps.Translations of the replacement sheets, pages 11, 12, and 13: Original translation, page 8, line 27 to page 11 Line 12 [By this method, processing was performed for 60 minutes. ]. In this way, the cleaning process is evaluated and / or optimized for its efficiency. be able to. 4. Significant aging of the porous membrane due to repeated use and its residual service life A reasonable estimate of life prediction can be provided. 5. By measuring the zeta potential, occluding substances and filters in liquid systems Assessing the interaction between the Luther material and / or the filter shunt means, Filter material and shunting material (eg, , Diatomite, bentonite, perlite, polyvinylpyrrolidone) Can be tested for suitability in filtration. 6. Until the start of occlusion, specific membrane load (hl / m^Two ) By measuring the zeta potential recorded below The service life of the membrane can be estimated. Porous membrane with zeta potential showing a remarkable change in proportion to the degree of occlusion Those skilled in the art are aware that this method is most suitable. These para Demonstration of the meter is easy enough using the simple test method described above . The following examples further illustrate the invention, but do not limit these examples in any way. It should not be construed as limiting the scope of the invention. Example 1 This example illustrates the effectiveness of the beer manufacturing method of the present invention. In particular, this implementation An example is the use of cellulase and amylase to block many beer during the beer filtration process. The porous membrane is sufficient so that it can be reused for continuous beer filtration. Demonstrate that it can be washed as Nylon-6,6 (NB type, Pall Filtrationtechni) kGmbH, commercially available from Germany). Used as a monitor. Such filters are the latest technology in low temperature filtration of beer Often used for. The so-called membrane filter test by Esser (Monatszeitsch) lift future Brauerei (Monthly Magazine) for Breweries), 25^thYear, No. 6, pp. 145-151, 1972 ) Was used to evaluate the filtration performance of the filter. This test improves filterability Reliable to check for measures. A pressure filtration device to measure the filtration efficiency of a new, i.e., unused, porous membrane (Model SM16536, 200 ml capacity; Sertorius GmbH, Goe (available commercially from Ttingen, Germany) with a 47 mm diameter and 0.2 μm Used for porous nylon-6,6 porous membranes with porosity. Beer cooled to 0 ° C. is passed through a porous membrane under isobar conditions (1 bar) and the filtrate volume is reduced. Weighed every 10 seconds. After 200 g of filtrate had been obtained, the test was stopped. result Is shown graphically in the diagram of FIG. FIG. 1 shows that the filter was not used under the above conditions. This indicates that 200 g of filtrate was obtained after about 210 seconds. Under the same conditions, the filtration performance of the closed, ie used, porous membrane was tested. Conclusion The results are shown in FIG. 2. FIG. 2 shows that only about 60 g of filtrate was obtained even after 720 seconds. To indicate that it is not. The clogged porous membrane was washed according to the prior art method. The membrane was first washed with enzymes and then chemically, as described in. For enzyme cleaning, the occluded membrane is brought to pH 5 (mixture of surfactant and acid component). (P3-Ultrasil 75; commercially available from Henkel). A mixture of β-glucanase and xylanase Compound (P3-Ultrasil 65; commercially available from Henkel) Treated with a 1% aqueous solution at a temperature of 50 ° C. for 1 hour. Then, this process I went again. Next, the membrane was adjusted to pH 9 to 9.5 (a mixture of a surfactant and an alkali component (P3- 0.15% water (Ultrasil 91; commercially available from Henkel) Surfactant, glucanase, and protease (P3-Ultrasil 62; commercially available from Henkel) ) At a temperature of 50 ° C. for 3 hours, followed by warm water (50 ° C.). For chemical cleaning, the membrane is treated with a mixture of surfactant and acid component (P3-Ultr). asil 75; commercially available from Henkel) Treated at 0 ° C. for 30 minutes, then rinsed with fresh water. continue, The membrane was mixed with a mixture of a surfactant and an alkali component (P3-Ultrasil 91; H 1% plus a mixture of surfactant and oxygen donor (P3-Ultrasil 05; commercially available from Henkel) 1% For 30 minutes at a temperature of 60 ° C. and then fresh Rinsed with water. The membrane is then coated with a mixture of surfactant and acid component (P3- 0.5% aqueous solution of Ultrasil 75 (commercially available from Henkel) Another 30 minutes treatment with the liquid, followed by fresh water to rinse water Rinsed until fresh water conductivity was reached. Next, the filtration performance of the washed porous membrane was tested again under the above conditions. Result is As shown in FIG. FIG. 3 shows that 200 g of filtrate was obtained after about 600 seconds. Indicates that the performance has been somewhat improved. The filtration efficiency is shown in FIG. 2, and the similarly clogged membrane is washed by the method of the present invention. did. This film is C₁-And C_xAn aqueous solution of cellulase (this solution has a pH value of 4.7) At a temperature of 45 ° C. for 30 minutes. Then put the membrane in the same solution But at a pH value of 5.0 and a temperature of 50 ° C., finally a pH of 4.7 Treated for 60 minutes at the value and a temperature of 60 ° C.Replacement sheet, pages 15 and 16 Translated text: original translated text, page 12, line 5 to page 13, line 21 [It is clear that reference number 1 does not decrease. ]. Reference numeral 1 designates a measuring cell in which the porous membrane 2 is made of polytetrafluoroethylene. Clamp the filter holders 3 and 4 made of Have been Filter holders 3 and 4 have two horn pistons 5 and 6, respectively. And is mounted for movement in the cylindrical part 7 of the measuring cell 1. You. The ends 3 and 4 of the pistons 5 and 6, respectively, provide fines for the fluid to be filtered. It has pores 10 and 11 and presses the perforated electrodes 8 and 9 against the porous membrane 2. Electrodes 8 and 9 Because they are connected to electrical terminals 12 and 13 that extend inside the pistons 5 and 6, Outflow potential generated when the fluid flows. Current Silver or silver chloride electrodes that exhibit low polarization during passage are preferred as electrodes. piston 6 and 7 are on seals 14 and 15 respectively, while these are movable On the other hand, they are mounted in such a way that they do not allow fluid to escape from the measuring cell. It is. The fluid to be filtered flows through the supply line 16 to the cylindrical part 7 of the measuring cell 1. Through the micropores 10 of the piston 6, through the electrodes 8, through the porous membrane 2, and Place occurs. The filtered fluid flows through the electrode 9 and also forms a potential While exiting the measuring cell through the micropore 11 of the piston, through the discharge line 17 You. To calculate the zeta potential from the measured runoff potential, Measurement of the differential pressure in the measuring cell between the supply line 16 and the discharge line 17 (not described), Conductivity and pH values are also required. The zeta potential is derived from these measurements It is calculated as follows: Where U is the outflow potential, ΔP is the differential pressure, LF is the conductivity, η is the viscosity, εε₀Is the relative permittivity. The change in zeta potential of the membrane filter as the occlusion progresses is shown in FIG. . In this figure, the zeta potential in millivolts is plotted on the ordinate and the zeta potential is plotted. FIG. 3 is a diagram in which pH values obtained by measuring data potentials are plotted on an abscissa. Electric The pH value of the dissolving solution (0.001N KCl aqueous solution) is 0.1N HCl or 0.1N HCl. Set by 1N NaOH. The specified pressure difference was 350 mbar. By the measuring cell described above, a new, i.e., unused, polyamide porous membrane ( NB type; Pall Filtrationtechnik GmbH, 607 2Dreieich 1, commercially available from Germany) Zeta Potencia A diagram was obtained by first measuring the pH at various pH values. The results for the virgin porous membrane are plotted as curve "a". Unused porous The membrane has a zeta potential of about -18 mV due to the alkaline pH; The zeta potential rises due to a decrease in pH, and finally at a pH of about 3 It is clear that it reaches zero. Curve "b" is obtained under the same conditions as described above, but after being used for beer filtration. Therefore, the dependence of the zeta potential on the pH value of a porous membrane with partial occlusion Shows sex. As is evident, this zeta potential is due to partial occlusion. At a pH value of about 7, but only reaches a value of about -15 mV. No. Curve "c" was plotted for the same porous membrane with almost complete occlusion Things. This zeta potential now varies very slightly with pH. Only in the alkaline range, it does not drop below about -2 mV. Is.Replacement sheet, page 18, translation: original translation, page 14, line 17 to page 15, line 12 It was measured using the filter test part 2. ]. Zeta potential inside meter cell 1 during filtration of filter test membrane 2 (FIG. 5) Severe changes in the char are indicative of the condition of the filter candle 19 in the filtration chamber 18. Make value possible. Example 3 This example demonstrates Aspe in the enzymatic degradation of soluble and crystalline cellulose substrates. The effectiveness of cellulase derived from rgillus niger will be described. Aspergillus niger-derived cellulase is Fluka (item number No. 22178). This enzyme is used in two different types of cellulose: soluble Ruboxymethylcellulose (CMC, Item No. 41927-3 as Aldri ch.) and crystalline cellulose (Avicel, Item No. PH-105) (Available from FMC). The test method was (i) 18 ml CMC (1%) or Avicel (1%), (ii) 5 ml sodium acetate buffer (50 mM, pH 4.8) and (iii) 30 ° C. 5 ml of enzyme solution in sodium acetate buffer (50 mM, pH 4.8) Preparation of the incubation solution was required. Next, a 1.4 ml incubator 0.1 ml of glucose solution (0.15%) and 1.5 ml of 3, 5-Dinitrosalicylic acid (DNS) reagent (Item No. D-0550 from Sigma) The test solution was prepared by mixing Test solution Boil for 15 minutes. Total μmol glucose equivalent / mg as a function of time (minutes) The enzyme was purified using Miller, Anal. Chem. 3 1,426-28 (1959), using a glucose standard. Spectrophotometry (575 nm) using linear calibration Was. Protein mass is determined by Bradford, Anal. Biochem. 72, 24 8-64 (1976) by the method described in Bovine Serum Albumin (BSA). ) Measured using a standard. The claims are amended as follows. Claims 1 to 8 are corrected. Claims 9 to 35 do not correct. 1. Filter the beer through the porous membrane until the time the porous membrane has to be cleaned Having no protease or glucanase to clean the porous membrane Below, an enzyme selected from the group consisting of cellulase, amylase and combinations thereof And the porous membrane are brought into contact with each other, and then the porous A method of making beer, including recycling the membrane. 2. Contacting the porous membrane with an enzyme other than the cellulase or the amylase The method of claim 1, wherein the method does not allow the method. 3. The method according to claim 1, wherein the porous membrane is brought into contact with the cellulase. Method. 4. Filter the beer through the porous membrane until the time the porous membrane has to be cleaned Having at least about 0.1 crystalline in 60 minutes to clean the porous membrane: soluble Cellulase having a hydrophilic cellulose activity ratio is brought into contact with the porous membrane; Beer production, including recycling the porous membrane to continue filtration of the beer. Law. 5. Bringing the porous membrane into contact with the cellulase and not with other enzymes; The method according to claim 3. 6. The cellulase has a crystalline: soluble cellulose activity of at least about 0.1 in 60 minutes. The method according to any one of claims 1 to 3 or 5, having a sex ratio. 7. The cellulase has a crystalline: soluble cellulose activity of at least about 0.3 in 60 minutes. 7. The method of claim 6, wherein the method has a sex ratio. 8. The cellulase has a crystalline: soluble cellulose activity of at least about 0.4 in 60 minutes. The method of claim 7 having a sex ratio. [Procedure amendment] [Submission date] December 3, 1999 (1999.12.3) [Correction contents] (1) The statement will be amended as follows.Page Line Before correction After correction 19 Two lines from the bottom Bacillus subtilis Thermomonospora Fusca 19 1 or 2 lines from bottom β-cellulase exocellulase

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者ツァンカー，ゲラルトオーストリア共和国アー―8075 ハルト・ベイ・グラーツ，シュルガッセ１ (72)発明者ゼルロ，ヴァルターオーストリア共和国アー―2440 ライゼンベルク，アップラス５ (72)発明者リビッシュ，フォルカーオーストリア共和国アー―8010 グラーツ，ハインリヒシュトラーセ 28 (72)発明者ラントハーン，ホルストドイツ連邦共和国デー―64297 ダルムシュタット，フランケンシュタイナー・シュトラーセ 58 (72)発明者デジェン，ピーター・ジェイアメリカ合衆国ニューヨーク州11748，ハンティントン，グレイズ・ウェイ 24────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (81) Designated country EP (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, I T, LU, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ , CF, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AP (GH, GM, KE, L S, MW, SD, SZ, UG, ZW), EA (AM, AZ , BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM), AL , AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CU, CZ, DE, DK, E E, ES, FI, GB, GE, GH, GM, GW, HU , ID, IL, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, M D, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL , PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, US, U Z, VN, YU, ZW (72) Inventor Tsunker, Geralt Austria Republic-8075 Hart Bay Graz, Schurgasse 1 (72) Inventor Zello, Walter Republic of Austria Aar-2440 Reisen Berg, Upras 5 (72) Inventor Ribish, Volker Republic of Austria-8010 Gra Tu, Heinrichstrasse 28 (72) Inventor Landhahn, Horst Federal Republic of Germany Day 64297 Darmushi Sutat, Frankensteiner Sch Trase 58 (72) Inventors Degen, Peter Jay 11748, New York, United States Nintington, Grays Way 24

Claims

[Claims] 1. Filter the beer through the porous membrane until the time the porous membrane has to be cleaned Having no protease or glucanase to clean the porous membrane Below, an enzyme selected from the group consisting of cellulase, amylase and combinations thereof And the porous membrane are brought into contact with each other, and then the porous A method of making beer, including recycling the membrane. 2. Contacting the porous membrane with an enzyme other than the cellulase or amylase 2. The method of claim 1, wherein there is no. 3. 3. The method according to claim 1, wherein the porous membrane is brought into contact with the cellulase. Or the method of claim 1. 4. Filter the beer through the porous membrane until the time the porous membrane has to be cleaned Having at least about 0.1 crystalline / soluble in 60 minutes to clean the porous membrane A cellulase having a cellulose activity ratio is brought into contact with the porous membrane, Beer production process, including recycling the porous membrane to continue filtration of the beer . 5. Bringing the porous membrane into contact with the cellulase and not with other enzymes; The method according to claim 3. 6. The cellulase has a crystalline: soluble cellulose activity of at least about 0.1 in 60 minutes. The method according to any one of claims 1 to 5, having a sex ratio. 7. The cellulase is crystalline at least about 0.3 in 60 minutes; 7. The method of claim 6, wherein the method has a sex ratio. 8. The cellulase has a crystalline: soluble cellulose activity of at least about 0.4 in 60 minutes. The method of claim 7 having a sex ratio. 9. The cellulase has a crystalline: soluble cellulose activity of at least about 0.5 in 60 minutes. 9. The method of claim 8, having a sex ratio. 10. The cellulase has a crystalline: soluble cellulose activity of at least about 1 in 60 minutes. 10. The method of claim 9, having a sex ratio. 11. The cellulase is at least about 1.2 crystalline in 60 minutes: soluble cellulose 11. The method according to claim 10, wherein the method has an activity ratio. 12. The cellulase is derived from Trichoderma. 12. The method according to any one of 1 to 11. 13. Trichoderma reesei or Trichoderma reesei Is Trichoderma longibrachiatum, The method according to claim 12. 14． The cellulase is derived from Thermomonospora The method according to any one of claims 1 to 11. 15. The Thermomonospora fusca (Thermomonospora fsca) 15. The method of claim 14, wherein the method is usca). 16. 3. The porous membrane is contacted with the amylase. 6. The method according to any one of items 5 to 5. 17． Whether the amylase is α-amylase, β-amylase and a combination thereof 17. The method of claim 16, wherein the method is selected from the group consisting of: 18. Before reuse, the porous membrane is further contacted with a basic aqueous solution. 18. The method according to any one of claims 1 to 17. 19. Prior to contacting with the enzyme, the porous membrane is contacted with the basic aqueous solution. 20. The method of claim 18, wherein 20. 19. The basic aqueous solution is an aqueous solution of NaOH and / or KOH. Or the method according to 19. 21. The base is present in the basic aqueous solution at a concentration of 0.1 to 1 N. 21. The method according to any one of 8 to 20. 22. Contacting the porous membrane with the basic aqueous solution at a temperature of 40 to 90 ° C. 22. The method according to any one of 18 to 21. 23. The porous membrane is contacted with the cellulase at a temperature of 40 to 50 ° C. and a pH of 4.5 to 5.5. 23. A method according to any one of the preceding claims. 24. The porous membrane is contacted with α-amylase at a temperature of 60 to 75 ° C. and a pH of 4.6 to 5.8. The method according to any one of claims 1 to 3 and 6 to 23. 25. The porous membrane is contacted with β-amylase at a temperature of 40-60 ° C and pH 4.6-5.8. The method according to any one of claims 1 to 3 and 6 to 23. 26. Clean the porous membrane until the zeta potential of the porous membrane has changed The method according to any one of claims 1 to 25. 27. The time that the porous membrane must be cleaned crosses the porous membrane The method according to any of the preceding claims, wherein the method is determined by a pressure drop. 28. The time during which the porous membrane has to be cleaned is determined by the outflow of the porous membrane or The method according to any one of claims 1 to 26, wherein is determined by zeta potential. 29. Filtering the beer through a porous membrane that is continuously clogged during filtration, Monitor the outflow or zeta potential of the porous membrane as a measure of the degree of clogging of the porous membrane. And the porous membrane is complete as determined by the outflow or zeta potential of the porous membrane. Stop beer filtration through the porous membrane before fully clogging, And then reusing the porous membrane to continue filtration of the beer A method for producing beer, including: 30. The outflow or zeta potential of the porous membrane is 20% of the original value of the unused porous membrane. 30. The method of claim 28 or 29, wherein the filtration is stopped when the percentage has decreased to 30%. 31. 31. The porous membrane according to claim 1, wherein the porous membrane is a polyamide porous membrane. Item 2. The method according to item 1. 32. If the zeta potential of the porous membrane exceeds −5 mV when measured at pH 4.2, 32. The method of claim 31, wherein said filtering is stopped. 33. Wherein the beer filtration is a cold-fitration beer, The method according to any one of claims 1 to 32. 34. Feeder line, perforated for the filtration-bound beer Membrane, the outflow line for the filtered beer, and the outflow potential of the porous membrane through which the beer flows, And / or a filter for filtering beer, including means for monitoring zeta potential. Excessive unit. 35. A bypass porous membrane through which the beer flows, wherein the outflow potential and / or The monitoring means for monitoring the zeta potential is also provided on the bypass porous membrane. 35. The filtration unit of claim 34, provided.