JP2001500471A - プロテアーゼインヒビターの生物学的及び抗ウイルス活性を改善する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 プロテアーゼインヒビターの細胞の取り込みを改善するための方法であり、プロテアーゼインヒビターに基づく治療において、単独で或いは１種又はそれ以上の補足的治療薬の存在中で、プロテアーゼインヒビターの存在中でのＡＡＧに競合的に結合する、ＡＡＧに十分な結合親和性を有する、マクロライド系或いはリンコサミド系抗生物質のような１種またはそれ以上のＡＡＧ結合性化合物の投与を含んでいる。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称 プロテアーゼインヒビターの生物学的及び抗ウイルス活性を改善する方法 発明の背景 発明の分野 本発明は、プロテアーゼインヒビター（protease inhibitors）のような治療 薬剤を細胞が取り込む（uptake）ことを改善し及びそれらの活性、殊に抗-ＨＩ Ｖ活性を増強するための方法に関する。 背景の検討 エイズ（ＡＩＤＳ）として知られる病気は早くも１９７９年に最初に確認され た。ＣＤＣ（Centers for Disease Control and Prevention）に報告された事例 の数はその時から各年劇的に増加し、且つ１９８２年においてＣＤＣはエイズの 新たな流行を宣言した。１９８７年１２月と１９８８年１１月の間、32,000を超 えるエイズの新たな事例がＣＤＣによって報告された（ＨＩＶ／ＡＩＤＳサーベ イランスレポート，1-16，1989年12月）。3,000を超える新規の事例が１９８４ 年だけで報告された。早くも１９９５年で、世界保健機構（ＷＨＯ）では、世界 中で発生しているこの病気の事例が少なくとも４百万と見積もった。また凡そ１ 千万の人々が今日、ＨＩＶに感染していると見積もっている。 アメリカ合衆国において、エイズは約441,000の事例が今までＣＤＣにより報 告されている。1995年1月現在、ＣＤＣは、合衆国単独でエイズにより250,000人 が死亡していることを報告した。人間の生存の期間におけるエイズ伝染の代価は 不安定（staggering）であり、且つ最悪の事態がさらに到来することは明らかで ある。 レトロウイルスはエイズの原因となる作因として定義される。最近、ヒト免疫 不全ウイルスタイプ１（ＨＩＶ）がエイズのためのウイルス応答のための適した 名称として現われている。ＨＩＶの抗体はエイズ感染者又は前エイズ症候群（pr e-AIDS syndrome）として診断された患者の８０％以上に存在し、且つそれはま た危険群と同定された中から高率で見出されている。 エイズに伸展する危険性を診断することは困難であると見なされる。エイズは ＨＩＶに感染した殆ど全ての個人において結局発現することが知られる。 患者はＴ細胞の免疫が損なわれ完全な免疫システム獲得を持つ以前の健全な成 人の時にエイズを持つものと一般的に診断される。その損なわれた免疫性は１８ ヶ月から３年の期間を通じて現われる。この損なわれた免疫性の結果として、そ の患者は、日和見感染を受け易く、カポジ肉腫、及び免疫システムの機能低下に 関連した別の疾患のような各種の癌腫になる。 病気を予防すること又はエイズの免疫不全性の有意な転換ができる現に有効で ある治療は無い。日和見感染を持つ全ての患者とカポジ肉腫を持った全ての患者 のうちの概ね半数は、診断の二年以内に死亡している。エイズを持つ患者におけ る免疫システムの復活の試みは今までのところ成功していない。 ３’−アジド−３’−デオキシチミジン（ＡＺＴ）は、ＨＩＶ感染とエイズの 治療において最も汎用されているが、それは可逆性の骨髄毒性のような重要な負 の副作用を持ち、かつ患者によってＡＺＴに対してウイルス抵抗性が発現する。 このように治療の他の方法は非常に切望されている。 ウイルスは伝統的に抗体治療に応答しない。それ故に、他の治療剤はウイルス 感染を治療する時に使用される。昨今発見された治療の一つは、ウイルス複製サ イクルを分裂させるプロテアーゼインヒビターを使用しあちこち循環させるもの である。プロテアーゼインヒビター治療は、レトロウイルス（例えばＨＩＶ）、 ヘパドナウイルス（例えばＣ型肝炎ウイルス(hepatitis C virus)）、ヘルペス ウイルス（例えば単純ヘルペスウイルス(herpes simplex virus)及びサイトメガ ロウイルス）及びミクソウイルス（例えばインフルエンザウイルス）、同様に寄 生プロトゾア（例えばクリプトスポリジウム及びマラリア）、癌の化学療法とウ イルス性病状の病気によるそれらの事例のような、ウイルス感染症を含む疾患の 広い範囲の治療に使用し得る潜在能力を持っている。実施例のために、ＨＩＶ複 製サイクルにおけるＨＩＶプロテアーゼの役割を以下に記す。 ＨＩＶプロテアーゼと複製サイクル ＨＩＶはＤＮＡ中間体を通して複製する。それぞれのウイルス粒子はウイルス のヌクレオカプシド蛋白質（nucleocapsid protein）によって囲まれた二つの同 一の一重鎖ＲＮＡ分子を含む。ウイルスの残るコアはカプシド（capsid）とマト リックス蛋白質とから構成されている。宿主細胞（host cells）内のウイルスの 遺伝的材料の複製化及び構築のために要求される酵素もまた、そのカプシドの内 部に含まれる。ウイルス粒子の外被覆はウイルス性外皮糖タンパク質（viral en velope glycoproteins）と宿主細胞に由来する膜とから構成される。 他のレトロウイルスと共に、ＨＩＶは、ｇａｇ，ｐｏｌ，及びｅｎｖ遺伝子の ための同様の基本的な遺伝的構造を持つ。これらの遺伝子は、非スプライス伝達 ＲＮＡと呼ばれる、ウイルスの遺伝的材料の一つの中間体形態から発現し、先駆 体（precursor）ｇａｇ-ｐｏｌ融合ポリタンパク質の合成を生じる。そのポリタ ンパク質は次いで成熟したウイルスのタンパク質を生じるように、ＨＩＶプロテ アーゼ酵素によって切断される。ｇａｇ先駆体は、ｐ１７（マトリックス）、ｐ ２４（カプシド）、ｐ７（ヌクレオカプシド）及びｐ６に切断する。一方、ｐｏ ｌ先駆体は、個別のプロテアーゼ、逆転写酵素及びインテグラーゼ酵素にて処理 される。かくしてＨＩＶプロテアーゼは、全ての伝染し得るウイルスにおけるウ イルス粒子の成熟に通じる開裂発生の調整カスケードのために応答し得るもので ある。 ＨＩＶプロテアーゼはアスパラギン酸プロテアーゼファミリーの一員である。 それは２つのサブユニットのホモ二量体として機能する哺乳動物のアスパラギン 酸プロテアーゼとは異なる。対照してみると、哺乳動物のプロテアーゼは単量体 ポリタンパク質である。しかしながらプロテアーゼの二つの型は、それらの全体 的な構造と機能において類似する。1988年において、それは非感染性、未熟なウ イルス粒子、ＨＩＶの複製サイクル内で必須の機能を提供し且つエイズのための 特異的抗ウイルス薬の設計のため魅力ある標的となるプロテアーゼ作製の示唆の 結果により、ＨＩＶプロテアーゼ遺伝子の変異又は欠失が観測された。他のアス パラギン酸プロテアーゼに関する研究から蓄積された知見の広大な内容、最も注 目に値するヒトのレニンは、ＨＩＶプロテアーゼインヒビターの設計と発見とを 容易にしている。コンピューター補助論理的薬物設計（computer-aided rationa l drug design）における最近の前進はＨＩＶの有効で且つ高度に特異的なイン ヒビターの発見のための製薬及び遺伝子工学において広く翻訳されている。プロ テアーゼインヒビターは、それのインビトロにおける論理的解釈を提供でき、プ ロテアーゼインヒビターの構造が複合体であれば、エックス線分析によって決定 される。 ＨＩＶ複製の後段階では、構成タンパク質と複製性酵素先駆体の成熟化の過程 のためにウイルスのコード化されたアスパラギン酸プロテアーゼが要求される。 プロテアーゼの阻害は、未熟化、非感染ウイルス粒子及びウイルス伝染性の停止 の結果を生じる。 ＨＩＶプロテアーゼインヒビター これまでに、ＨＩＶプロテアーゼ機能を阻害する数々の化合物が確認されてい る。以下の図表は臨床試験の様々な段階で広く知られたＨＩＶプロテアーゼイン ヒビターの種類を示し、且つＨＩＶ治療におけるこれら化合物を調査している会 社である。 ＨＩＶプロテアーゼインヒビター（Ｉ）構造式は上記プロテアーゼインヒビターの選択のために以下に用意される。 これらの化合物は、それらがＨＩＶの複製サイクルの後段階でＨＩＶを攻撃す ることから抗レトロウイルスの一つの特に有望な新規のクラスを組み上げ、且つ これにより慢性的な感染細胞中の潜伏ウイルスに対して潜在的な攻撃をする。一 般に許可された、ＡＺＴ，ｄｄＩ，ｄｄＣ、及びより最近のｄ４Ｔと対照すれば 、逆転写酵素のインヒビターとして働き、ＨＩＶ複製の早い段階でウイルスの酵 素に作用する。一方、これらの薬剤はＨＩＶ感染を妨げることができ且つ更なる 感染が無いよう細胞を保護し、それらは慢性的な感染細胞のように既に完成した 細胞に対し本質的に不活性である。感染が細胞中に一旦確立すると（例えばＨＩ Ｖ遺伝的材料が宿主細胞ゲノム内に統合される）、逆転写酵素はもはやウイルス 複製のために要求されない。しかしながら、プロテアーゼ酵素は感染をもたらす ビリオン（virions）、成熟したウイルス粒子のために必須である。ＨＩＶプロ テアーゼインヒビターの機能は、新規に作製されるウイルス粒子に非感染性を与 えることである。それ故に、慢性的な感染細胞中で活性な薬剤、単独で又は他の 抗-ＨＩＶ薬剤と組み合わせるかのいずれか一方で使用される、ＨＩＶ感染の治 療において成功の機会を提供する薬剤が緊急に必要とされる。 一つのファクターは、プロテアーゼインヒビターのような薬剤のインビトロで のＥＣ₅₀（中間有効濃度）と、インビボでの生理的条件の下で要求される薬剤の タンパク質結合性の範囲及び効果の抗ウイルス性の濃度の間の相関関係に影響を 与えることができる。幾つかのＨＩＶプロテアーゼインヒビターの抗ウイルス活 性はヒトの血清又は血漿の高い濃度での存在を減少させる結果を示している（Bi lello，アブストラクト #419 1st Intl．Conference on Human Retroviruses，Dec．12- 16 1993 Washington，D.C.;Bilello，アブストラクト 178，34th Interscience Confere nce on Antimicrobial Agents and Chemotherapy Oct．4-7,1994）。ＨＩＶプロ テアーゼインヒビターの高い結合親和性は、それらの親油性に関係する（Kagaya maら，Antimicro．Agents and Chemother.，38:1107-1111，1994）。ソマドシイ ら（Sommadossiら,アブストラクト"A Human Serum Glycoprotein Profoundly Affects A ntiviral Activity of the Protease Inhibitor SC-52151 by Decreasing Its C ellular Uptake"The Second Nat'1 Conference on Human Retroviruses and Rel ated Infections，Washington，DC，1995年1月30日）及びビレロら（Bilello,ら ，1993 supra）には、アルブミンではないが、ヒト血漿の両方の主要成分で、プ ロテアーゼインヒビターA77003とSC-52151及びそれらの類似物の抗ウイルス活性 を著しく減じることができるヒトのアルファ−１−酸 糖タンパク質（ＡＡＧ） を最近示している。ＡＡＧは、0.5から1.5mg/mlの通常な生理学的レベルを持つ 急性期タンパク質であり、感染、癌、炎症及び創傷によってホメオスタシスの傷 害の後に増加させることができる。ＡＡＧの平均値は、健康人と比べ、エイズ及 び癌の患者は50-100%高いことが報告されている（Oeiら，J．AIDS， 6:25-27，1993）。 実験で抗ウイルス活性が確かめられた抗ＨＩＶ薬剤は、デキストラン硫酸、オ リゴヌクレオチド及びペプチドミメチック基（peptidomimetic-based）プロテア ーゼインヒビター、及びより小さい範囲について、ヌクレオシド類似物、（Kaga yamaら(supra)；Hartmanら，AIDS Res．Hum．Retroviruses，6:805-812，1990） を含み、ヒト血清又はヒト血漿の成分の高い濃度によって顕著に作用する。特別 の薬剤の候補の構造はインビトロでの血漿タンパク質結合親和性（Schmidin"The Plasma Proteins，Structure，Function and Genetic Control"Ed．by F.W．Pu tnam，Academic Press，Inc．New York，pp184-228，1975）を予想して使用する ことができないが、アルブミン又はＡＡＧのような血漿又は血漿成分の生理学的 に適切な濃度の存在する中で抗ウイルス能力を縮小することは、臨床学的に重大 な意味を持たすことができる。 ＥＣ₅₀に作用しかつプロテアーゼインヒビターの抗ウイルス濃度の別のファク ターは、プロテアーゼインヒビターに抵抗するウイルスの株の発展である。あら ゆるプロテアーゼインヒビターと逆転写酵素インヒビターの安易な使用は、抵抗 性ウイルス株を生じる可能性を持つ。これはＨＩＶ感染の治療に事例において特 別なことであるが、その能力のためにＨＩＶは直ちに変異し旦つ抵抗性は発展す る。メローら（Mellrsら，International Antiviral News，3(1)，pp 8-13,1995 ）はＲＴインヒビターと抵抗性変異体に発展しているＨＩＶに対するプロテアー ゼインヒビターの多様性を最近報告している。（Condraら，Nature 374，pp．56 9-571，1995を参照）。 かくして、同一又は一様に高い抗ウイルス活性のレベルを保持する間に弱いプ ロテアーゼインヒビターを用いた治療が実行できるなら、感染薬はプロテアーゼ インヒビターに対する抵抗体を減少すべき株の中の変異を処理する傾向となる。 結論において、ＡＡＧに対するプロテアーゼインヒビターの結合は、抗-ＨＩ Ｖ活性の変更という結果を生じる薬剤の細胞取り込みを主に減退させることにな る。それ故、プロテアーゼインヒビターの細胞への取り込みを続行することが、 それらのインビボでの抗-ＨＩＶ活性のため、およびそのような細胞の合体のた めに危うければ、ＡＡＧの効果は封じねばならない。 発明の開示 従って本発明の目的の一つは、プロテアーゼインヒビターの細胞の取り込みと 細胞内濃度を増加させるための方法の提供である。 本発明の更なる目的は、プロテアーゼ逆転写酵素インヒビター、抗融合／結合 性剤（antifusion/binding agents）、抗インテグラーゼ剤及び抗ウイルスオリ ゴヌクレオチドから選択された１種またはそれ以上の付加的な治療薬の存在中、 １種またはそれ以上のプロテアーゼインヒビターの細胞の取り込みと細胞内濃度 を増加するための方法を提供することである。 本発明の更なる目的は、病原性ウイルス及びウイルス性、カビ性、抗レニン、 寄生プロトゾア、癌及び抗菌性疾患を含む感染性疾患のためのプロテアーゼイン ヒビターの細胞の取り込みと細胞内濃度を増加するための方法を提供することで ある。 本発明の更なる目的は、ＨＩＶプロテアーゼインヒビターの抗ＨＩＶ活性の改 善のための方法を提供することである。 本発明の更なる目的は、プロテアーゼインヒビターの存在中、ＡＡＧを競合的 に結合させるための方法を提供することである。 本発明の更なる目的は、細胞への取り込みのためにプロテアーゼインヒビター の有効性を増加させることによって、プロテアーゼインヒビターを基礎とした治 療において投与されるプロテアーゼインヒビターの量を減じる方法を提供するこ とである。 本発明のこれら及び他の目的は、マクロライド（Macrolide）及びリンコサミ ド（Lincosamide）ファミリーのような、ＡＡＧプロテアーゼインヒビター結合 定数より優れた結合定数を持つＡＡＧ結合性の幾つかの、有効なＡＡＧバインダ ーの発見によって満足されており、かくしてプロテアーゼインヒビターの細胞の 取り込みが増加され、且つプロテアーゼインヒビター、殊にプロテアーゼインヒ ビターの抗ＨＩＶ活性のような治療薬の細胞の取り込みと抗ウイルス活性を改善 するための方法においてこの発見を使用する。 好適な実施態様の詳細な説明 本発明は、プロテアーゼインヒビターの細胞への取り込みと細胞内濃度を改善 するための方法に関し、その必要における主体として、プロテアーゼインヒピタ ーに対するＡＡＧの親和性よりも強力なＡＡＧへの親和性を有するＡＡＧ-結合 性化合物の有効量を、単独で或いは１種又はそれ以上の付加的な治療薬と組み合 わせて投与することを備える。 この方法において、ＡＡＧ結合性化合物が実験的に働く全てではない。事実、 本発明のＡＡＧ-結合性化合物は、プロテアーゼインヒビターの存在中でＡＡＧ に競合的に結合するＡＡＧ結合性のために、十分に強い親和性を有する必要があ る。 本発明において使用される好適なＡＡＧ-結合性化合物は、マクロライド系抗 生物質およびリンコサミド系抗生物質を含む。より好ましいマクロライド系抗生 物質は、エリスロマイシン（erythromycin）、トロレアンドマイシン（troleand omycin）、クラリスロマイシン（clarithromycin）及びロキシスロマイシン（ro xithromycin）を含む。最も好ましいマクロライド系抗生物質はクラリスロマイ シンとロキシスロマイシンである。最も好適なロンコサミド抗生物質はリンコマ イシン（lincomycin）である。 本発明の好適な方法において、ＡＡＧ結合性化合物は、投薬組成物のための通 常の方法の何れかにおいて投与することができる。そのような方法は、静脈内に 腹膜腔内に、及び経口内への投与を含むが、それに限定されない。その組成物は 、注射用溶液、経口摂取溶液、タブレット、カプセル、トローチ剤、粉末、など の形態において投与することができる。本発明の方法において、ＡＡＧ結合性化 合物は、単独で或いは２種またはそれ以上のＡＡＧ結合性化合物の混合物として 投与することができる。加えて、ＡＡＧ結合性化合物は、プロテアーゼインヒビ ターの投与の直前に、プロテアーゼインヒビターの投与と同時に、或いはプロテ アーゼインヒビターの投与の後に、投与することができ、好ましくはプロテアー ゼインヒビターの投与の直前又は同時である。 プロテアーゼインヒビター療法において使用される何れかのプロテアーゼイン ヒビターが本発明の方法において使用可能である。プロテアーゼインヒビターは 、単独で或いは２種又はそれ以上の混合物として投与して良い。好適なプロテア ーゼインヒビターは、前述の表中に記したものを含み、ＳＣ−５２１５１が最も 好ましい。 １種又はそれ以上のプロテアーゼインヒビターと１種又はそれ以上のＡＡＧ結 合性化合物が同時に投与されるならば、それらは直接の投与に先立って混入して 良く、或いはＡＡＧ結合性化合物の投与のための上述した形態の何れかで投与す ることができる。 本発明の更なる実施態様において、本発明による１種又はそれ以上のＡＡＧ結 合性化合物は、プロテアーゼ逆転写酵素インヒビター、抗融合／結合性剤、抗イ ンテグラーゼ剤及び抗ウイルス性オリゴヌクレオチドから選択される１種又はそ れ以上の補足的な治療薬と併合した１種又はそれ以上のプロテアーゼインヒビタ ーの投与と共に投与されて良い。 本発明によるＡＡＧ結合性化合物は、非-プロテアーゼインヒビターを基礎と した治療におけるそれの正常の投薬範囲の０．１倍から、それの最大許容投薬量 （その化合物の毒性に基づく）までの投薬範囲において使用される。好ましくは 、本発明によるＡＡＧ結合性化合物は、非-プロテアーゼインヒビターを基礎と した治療におけるそれの正常の投薬範囲の１から１０倍の投薬範囲において使用 される。例えば、ロキシスロマイシンは、１５０ｍｇで一日２回の量において細 菌感染の治療に通常使用される。しかしながら、本発明の方法において、ロキシ スロマイシンは１日２回、１５ｍｇから３０００ｍｇの量で投与される。 プロテアーゼインヒビター治療の間にＡＡＧ結合性化合物を使用することによ って、プロテアーゼインヒビターの細胞への取り込みを増加させる本発明が提供 される。本発明は一方で、本発明のＡＡＧ結合性化合物の作用の形態に関する何 らかの特別な理論によって結合されることを望むものではなく、それはＡＡＧに 非結合性であるが故に生じるよりフリーな（非結合性の）プロテアーゼインヒビ ターの存在においてＡＡＧ結合性化合物がＡＡＧに競合的に結合することによる ものと確信される。これは細胞の取り込みのためにより有効なプロテアーゼイン ヒビターを提供するものと確信される。 本方法は、レトロウイルス（例えばＨＩＶ）、ヘパドナウイルス（例えばＣ型 肝炎ウイルス）、ヘルペスウイルス（例えば単純ヘルペスウイルスとサイトメガ ロウイルス）及びミクソウイルス（例えばインフルエンザウイルス）によってこ れらに起因する各種のウイルス感染症、及び同様に寄生プロトゾア（クリプトス ポリジウム及びマラリア）、プロテアーゼインヒビターを用いて治療される癌の 化学療法及び病態疾患の治療、それに限定されない、を含むプロテアーゼインヒ ビターを用いた各種の治療に有益である。 実施例のために、ＨＩＶプロテアーゼインヒビターの細胞への取り込みについ ての本方法の効果を以下に記す。 ＳＣ−５２１５１は、例えば（Ｓ）−ヒドロキシ配置が好ましいレニンインヒ ビターとは対照をなして、（Ｒ）−ヒドロキシ異性体において強い選択性が示さ れる（ヒドロキシエチル）ウレアアイソスターを結合させるＨＩＶプロテアーゼ インヒビターの有効なクラスの一員である。そのＳＣ−５２１５１の構造を、式 （Ｉ）として以下に示す。 ＳＣ−５２１５１は他のＨＩＶプロテアーゼインヒビターに比して、インビト ロでの同様の抗ウイルス有効性と、選択性を有する（Chang，J．Physicians Ass oc．Aids Res.，July pp.8-18，1994）。 ＨＩＶプロテアーゼインヒビターＳＣ−５２１５１は、ヒドロキシエチルウレ アアイソスターを含む密着結合性の遷移状態類似物である。最近の臨床試行にお いて、ＰＣＲ，ＲＮＡ，Ｐ２４抗原又はＣＤ4+を含むＳＣ−５２１５１は抗-Ｈ ＩＶ活性のマーカー上に測定されない効果を導き、経口吸収にもかかわらず、イ ンビトロでのＥＣ₅₀を上記の５から１８倍より上の血漿レベルに導く。ヒト血清 ＡＡＧはウイルス性プロテアーゼインヒビターのウイルス学的効果を妨害するこ とが示されている。次の表は、ＨＩＶに感染したＣＥＭ細胞中のプロテアーゼイ ンヒビターのインビトロでの抗ウイルス活性におけるＡＡＧの有効性を示す。 ＨＩＶに感染したＣＥＭ細胞中のプロテアーゼインヒビターのインビトロにおけ る抗ウイルス活性についてのヒト血清アルファ−１酸糖タンパク質（ＡＡＧ）の 有効性。 ¹ＥＣ₉₀値はＨＩＶ感染細胞の清澄な上澄みに合同した逆転写活性の阻害に関係 する適応曲線から評価した。 生理学的濃度で、ヒト血清ＡＡＧは、Ｒｏ ３１−８９５９とＭＫ−６３９の ＥＣ₉₀値を５−６倍に増幅し且つＳＣ−５２１５１のＥＣ₉₀値を２５倍増加する と共に、プロテアーゼインヒビターのインビトロにおける抗-ＨＩＶ活性を妨害 するように見える。ＶＸ−４７８とＫＮＩ−２７２の抗ウイルス活性もまたＡＡ Ｇの存在によって多くは影響される。ＳＣ−５２１５１，ＶＸ−４７８及びＫＮ Ｉ−２７２に関連するタンパク質結合性の研究では、これらは各々ＡＡＧとヒト 血漿タンパク質に結合される。ヒトのＨＩＶに感染しＰＨＡ活性化された抹消血 液単核細胞（ＰＣＭＣ）に対する１μＭのＳＣ−５２１５１の暴露は、３０分以 内に１．５から４．０pmole／１０⁶細胞の細胞内定常状態レベルの結果を生じ、 非感染細胞より２−３倍増加した。細胞が低い或いは高い感染多重度（ＭＯＩ） で感染した時、ＳＣ−５２１５１の細胞内含有量に違いのないことが検出された 。アルブミンではないＡＡＧの生理学的濃度はＳＣ−５２１５１の抗ウイルス能 力に実質的に影響を及ぼす。 本発明によるＡＡＧ結合性化合物は、ＡＡＧが存在すると結合し、プロテアー ゼインヒビターをフリーの状態とし、又はＡＡＧに対するプロテアーゼインヒビ ターの結合を妨げることによて、ＳＣ−５２１５１のようなプロテアーゼインヒ ビターの活性増加を提供する。 広く記載された本発明の有する、更なる理解は、単なる説明の目的のためにこ こに提供されかつ別の特定された場合を除き限定されることを企図しないある特 定の実施例に鑑みて得ることができる。 実施例 ＳＣ−５２１５１の調製 プロテアーゼインヒビターＳＣ−５２１５１はゲットマンら（Getmanら，J．M ed．Chem.，36:288-291(1993)）の方法を用いて調製される。 ＳＣ−５２１５１の細胞への取り込みにおけるＡＡＧ結合性化合物の有効性 フィトヘマグルタニン（phytohemagglutanin;PHA）-刺激したヒト抹消血液単 核細胞（ＰＢＭＣ）中のＨＩＶプロテアーゼインヒビターＳＣ−５２１５１の細 胞の蓄積は、１ｍｇ／ｍｌのＡＡＧと本発明のＡＡＧ結合性化合物を各種の濃度 で含む活性調節剤の存在中、１μＭのＳＣ−５２１５１に曝露した後に測定され る。活性調節剤の各々はＡＡＧとＳＣ−５２１５１の添加より１５分前に加えら れ且つ実験は測定の２時間前に実行される。以下の全ての実験にヒトＡＡＧが使 用される。ウシＡＡＧの使用は同様の結果を得ることができるが、しかしながら 本発明のＡＡＧ結合性化合物の細胞の取り込みの活性と効果はウシＡＡＧの使用 で弱れられる。その結果を次の表において示す。 表 １ 活性調節剤 ヒトＡＡＧ 細胞の取り込み コントロールに対する （μＭ） (1mg/ml) (pmole/10⁶細胞^*) パーセント (%) 無し − 1.44 100 無し ＋ 0.12 8.3エリスロマイシン (50) ＋ 0.55 38.2エリスロマイシン (100) ＋ 0.85 59.0エリスロマイシン (500) ＋ 1.50 104.2トロレアンドマイシン (50) ＋ 0.42 29.2トロレアンドマイシン (100) ＋ 0.64 44.4トロレアンドマイシン (500) ＋ 1.29 89.6 ^*１pmole／10⁶細胞＝概略１μＭ 表１はＡＡＧが不在中でのＳＣ−５２１５１の投与及びＡＡＧの1mg/mlの存在 中でＨＩＶプロテアーゼインヒビターＳＣ−５２１５１の投与とを比較して、Ａ ＡＧの存在中でプロテアーゼインヒビターＳＣ−５２１５１の細胞の取り込みに 関しての有効性を示す。表中に示す如く、プロテアーゼインヒビターの細胞濃度 が５０μＭから５００μＭの範囲を通して、ＡＡＧの不在において得られるレベ ルの本質的に１００％に著しく増加する。細胞濃度５０μＭのエリスロマイシン とトロレアンドマイシンの一様な低レベルは、ＡＡＧの無いコントロールの３０ −４０％であり、ＡＡＧの存在中で実行されたコントロール実験は、ＡＡＧの不 在中で得られるものに比較して僅か８．３％に細胞濃度が減じられた。かくして 明確に示されたように、エリスロマイシンとトロレアンドマイシンのようなマク ロライド系抗生物質は、プロテアーゼインヒビターの細胞濃度をかなり増加する ことができる。 クラリスロマイシンは、エリスロマイシン又はトロレアンドマイシンに比較し て、クラリスロマイシンの低い投薬量でプロテアーゼインヒビターの紹胞濃度を 増化させることによって示される通り、エリスロマイシン又はトロレアンドマイ シンで見られるよりも、プロテアーゼインヒビター細胞濃度に関する一様に強い 有効性を提供する。この結果は表２中に示す。 表 ２ 活性調節剤 ヒトＡＡＧ 細胞の取り込み コントロールに対する (μＭ) (1mg/ml) (pmole/10⁶細胞^*) パーセント (%) 無し − 1.02 100 無し ＋ 0.09 8.8クラリスロマイシン (50) ＋ 0.54 52.9 無し − 1.25 100 無し ＋ 0.13 10.4クラリスロマイシン (100) ＋ 1.02 82.0 ^*１pmole／10⁶細胞＝概略１μＭ 全てとは限らないがＡＡＧ結合性化合物は、低濃度で本発明において有望に使 用される。更に、全てではないがマクロライド系抗生物質は、ミデカマイシン（ midecamycin）、オレアンドマイシン(oleandomycin)及びスピラマイシン（spira mycin）を用いて得られた結果を提供する以下の表３中に示す通り有用である。 ＨＩＶプロテアーゼインヒビターの細胞濃度の幾らかの改善は、これらのマクロ ライド系抗生物質を用いて得られるが、その効果はＡＡＧに強力な結合親和性を 有するマクロライド系抗生物質に対して明らかに劣る。 表 ３ 活性調節剤 ヒトＡＡＧ 細胞の取り込み コントロールに対する (μＭ) (1mg/ml) (pmole/10⁶細胞^*) パーセント (%)ミデカマイシン (100) ＋ 0.24 19.3オレアンドマイシン (100) ＋ 0.29 23.3スピラマイシン (100) ＋ 0.23 18.5アジスロマイシン (100) ＋ 0.18 17.7ジョサマイシン (100) ＋ 0.37 26.4ロキタマイシン (100) ＋ 0.34 24.3 ^*１pmole／10⁶細胞＝概略１μＭ 本発明において使用する最強のマクロライド系抗生物質の一つはロキシスロマ イシンである。表４と５にロキシスロマイシンを用いた二つの従属実験から得ら れた結果を示す。ＨＩＶプロテアーゼインヒビターＳＣ−５２１５１の細胞濃度 は、ＡＡＧが存在し且つロキシスロマイシンの不在において実行された実験に比 較して改善されるだけでなく、ＳＣ−５２１５１の細胞濃度はＡＡＧの不在中で 実行したコントロールに比べても増加しており、細胞濃度が該コントロールを７ ２．４％超えるほど高く増加した。従って、ロキシスロマイシンは、ＡＡＧが不 在の時、予め到達する程度より以上及び超えて、プロテアーゼインヒビターの細 胞濃度を増大する。これらの結果から明らかなように、マクロライド系抗生物質 のＡＡＧ結合能力は、ミデカマイシンのような有能なＡＡＧ結合能力を有するこ とが知られた化合物からプロテアーゼインヒビターの細胞濃度に影響するファク ターだけではなく、100μＭで一様なプロテアーゼインヒビターの細胞の取り込 みに著しい影響を及ぼすことはない。 表 ４ 活性調節剤 ヒトＡＡＧ 細胞の取り込み コントロールに対する (μＭ) (1mg/ml) (pmole/10⁶細胞^*) パーセント (%) 無し − 1.27 100 無し ＋ 0.11 8.7ロキシスロマイシン (10) ＋ 0.27 21.6ロキシスロマイシン (50) ＋ 2.08 163.8ロキシスロマイシン (100) ＋ 2.19 172.4 ^*１pmole／10⁶細胞＝概略１μＭ 表 ５ 活性調節剤 ヒトＡＡＧ 細胞の取り込み コントロールに対する (μＭ) (1mg/ml) (pmole/10⁶細胞^*) パーセント (%) 無し − 1.47 100 無し ＋ 0.10 6.8ロキシスロマイシン (10) ＋ 0.30 20.4ロキシスロマイシン (20) ＋ 0.97 66.0ロキシスロマイシン (30) ＋ 1.33 90.5ロキシスロマイシン (40) ＋ 1.96 133.3ロキシスロマイシン (50) ＋ 2.16 147.0^*１pmole／10⁶細胞＝概略１μＭ 表６は、ＡＡＧに結合することが知られたリンコサミド系抗生物質、クリンダ マイシン（clindamycin）に比較して、リンコサミド系抗生物質であるリンコマ イシンを用いて得られた細胞濃度における改善を示す。その結果、クリンダマイ シンがプロテアーゼインヒビター細胞取り込みを無視できる程度に増加させるこ とが示されたことからして、ＡＡＧ結合性がプロテアーゼインヒビターの細胞取 り込みの増加を演じる上での単なるファクターでないことを再び示す。 表 ６ 活性調節剤 ヒトＡＡＧ 細胞の取り込み コントロールに対する (μＭ) (1mg/ml) (pmole/10⁶細胞^*) パーセント (%) 無し − 1.44 100 無し ＋ 0.12 8.3リンコマイシン (50) ＋ 0.43 29.9リンコマイシン (100) ＋ 0.55 38.2リンコマイシン (500) ＋ 1.28 88.8クリンダマイシン (100) ＋ 0.15 10.4 ^*１pmole／10⁶細胞＝概略１μＭ 本発明は、ＡＡＧ-プロテアーゼインヒビター結合性を分裂させ或いは妨害す るＡＡＧに対して十分な結合親和性を有し、且つプロテアーゼインヒビターの細 胞の取り込みを増加するＡＡＧ結合性化合物の使用を請求する。表７の化合物は ＡＡＧに結合することが知られている（Kremerら，Pharm．Rev．40(1)，1-47,19 88とそこに引用された参考文献）。しかしながら、例えそれらの化合物がＡＡＧ に結合することが知られていたとしても、ＳＣ−５２１５１中で細胞の取り込み に適度な改善が示されたベラパミールを除いて、それらは臨床的な相対濃度での プロテアーゼインヒビター濃度について有意な有効性を有することは現われなか った。 表 ７ 活性調節剤 ヒトＡＡＧ 細胞の取り込み コントロールに対する (μＭ) (1mg/ml) (pmole/10⁶細胞^*) パーセント (%) 無し − 1.44 100 無し ＋ 0.12 8.3チオリダジン (5) ＋ 0.17 11.8 無し − 0.65 100 無し ＋ 0.06 9.2ベラパミール (10) ＋ 0.23 35.4 無し − 0.58 100 無し ＋ 0.074 12.6プラゾシン (5) ＋ 0.089 15.2ジソピラミド (5) ＋ 0.11 19.3ジピリダモール (1) ＋ 0.084 14.3インドメタシン (5) ＋ 0.083 14.2オキシプレノロール (5) ＋ 0.10 17.7 ^*１pmole／10⁶細胞＝概略１μＭ 上述した研究において示されたプロテアーゼインヒビターの細胞取り込みの増 加は、抗ウイルス化合物の細胞取り込みの増加が示されるマクロライド系抗生物 質の存在中で回復されるであろうプロテアーゼインヒビターの抗ウイルス活性か どうか更なる研究をした。 抗ウイルスの研究 細胞． 健全なＨＩＶ−１血清反応陰性、且つＢ型肝炎ウイルス血清反応陰性 の供与者からのヒトＰＢＭＣは、1,000ｘｇで３０分間、フィコール-ハイパック 不連続密度勾配遠心分離によって分離し、そしてリン酸塩緩衝液（pH7.2，PBS） にて２度洗浄し、さらに300ｘｇで１０分間ペレット化した。感染の前に、その 細胞は、１５％の加熱不活性化したウシ胎児血清、１．５ｍＭのＬ−グルタミン 、 ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００Ｕ／ｍｌ）、及び ４ｍＭの重炭酸ナトリウム緩衝液を補充したＲＰＭＩ１６４０培地中で三日間、 ８μｇ／ｍｌの濃度でフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）によって刺激した。 ウイルス． ＨＩＶ−１（ＬＡＶ−１株）はＣＤＣ，アトランタ、ＧＡから入 手した。そのウイルスは、ＰＨＡ又はフンギゾンを除外し、且つ１００Ｕ／ｍｌ の組替え体インターロイキン−２（Cetus）及び７μｇ／ｍｌのＤＥＡＥ-デキス トラン（ファーマシア,Uppsala,スウェーデン）を補充した以外は先の記述（McDougalら，J． Immun．Meth．76:171-183,1985）の通りのＲＰＭＩ１６４０培地を用いてヒトＰ ＢＭＣ中で増殖させた。無細胞培養の上清から得られたウイルスは滴定し且つ等 分して使用するまで-70℃で保管した。 ヒトＰＢＭＣ中のウイルス複製の禁止． 非感染化したＰＨＡ-刺激ヒトＰＢＭＣは、約２ｘ１０⁶細胞／ｍｌを含む５ｍ １の懸濁液が付与されるように２５ｃｍ²フラスコ中に均一に分配した。ウイル スの適当な希薄物は培養液中に感染するために加えられる。接種物の逆転写酵素 （ＲＴ）の活性の測定値は、60,000ｄｐｍＲＴ活性／１０⁶細胞（ＭＯＩ＝0.01 ）であった。ＲＰＭＩ１６４０培地５ｍｌの２度の遠心分離後に補充されるべき 薬剤が上述した通り添加される。平衡細胞密度で非感染化した及び未処理のＰＢ ＭＣは、コントロールとして平行して培養した。その培養物は湿った５％ＣＯ₂ −９５％空気中のインキュベーター中に、全ての培養物が上清のＲＴ活性のため のサンプルとされる時点で感染した後、６日間保管した。研究の前に、最大ＲＴ レベルはその時点で得られたことが示されている。処理しないコントロールに比 較した細胞の上清を結合したＲＴ活性の９０％の減少が提供された濃度が、ＥＣ₉₀ 値として以下に報告される。 ＲＴ活性アッセイ． 各培養物からの上清６ｍ１は、３００ｘｇで１０分間の 遠心分離によって清浄化した。ウイルス粒子は、ベックマン７０．１Ｔｉロータ ーを用いて40,000ｒｐｍで３０分間遠心分離し、５ｍｌのサンプルからペレット 化し、更にウイルス分散緩衝液（５０ｍＭトリス塩酸、ｐＨ７．８、８００ｍＭ のＮａＣｌ、２０％のグリセロール、０．５ｍＭのフェニルメチルスルホニルフ ルオリド、及び０．５％のトリトンＸ−１００）２００μｌ中に懸濁させた。 そのＲＴアッセイは、スピラら（Spiraら，J．Clin．Microbiol．25:97-99，1 987）によって記述された通り、９６穴ミクロタイタープレート中で実行した。 その反応混合物、５０ｍＭのトリス塩酸ｐＨ７．８，９のＭｇＣｌ₂、５ｍＭの ジチオトレイトール、４．７μｇ／ｍｌ（ｒＡ）_n・（ｄＴ）_12-18、１４０μＭ のｄＡＴＰ、及び０．２２μＭ［³Ｈ］ＴＴＰ（比活性７８．０Ｃｉ／ｍｍｏｌ ，17,300ｃｐｍ／ｐｍｏｌに等しい；ＮＥＮリサーチプロダクツ、ボストン、Ｍ Ａ．）は、それぞれの穴に加えられる。そのサンプル（２０μｌ）は３７℃で２ 時間インキュベートしてから反応混合物に加える。その反応は、０．４５ｍＭの ピロリン酸を含む１０％トリクロロ酢酸１００μｌの添加によって停止される。 沈澱した酸不溶性の核酸は、スカトロンセミオートマチックハーベスター（Skat ronsemi-automatic harvester）（セッテイング９）を用いるガラスフィルター 上に捕集される。そのフィルターは５％ＴＣＡと７０％エタノールで洗浄し、乾 燥し、そしてシンチレーション管（scintillation vials）に移した。シンチレ ーション液（エコライト、ＩＣＮｍ，Irvine，CA）４ｍｌを加え、そしてそれぞ れのサンプル中の放射能活性の量は、パッカードトリーカーブリキッドシンチレーションアナライザー （Packard Tri-Carb liquid scintillation analyzer(model 2,000CA)）を用い て測定される。その結果は、最初の清浄化した上清のｄｐｍ／ｍｌに明示される 。上記ＰＢＭＣ中の抗ＨＩＶ−１アッセイのための手続は、公開されている（Sc hinaziら，in Antimicrob．Agents Chemother．32:1784-1789，1988及びSchinaz iら，in Antimicrob．Agents Chemother．34:1061-1067 1990）。ＣＥＭ研究は 、スキナジら（Schinaziら，in Antimicrob．Agents Chemother．36:2423-2431 ，1992）によって開示された通り実行される。 次の表８に、急性感染したＰＢＭとＣＥＭ細胞におけるマクロライド系抗生物 質によるＳＣ−５２１５１の抗ＨＩＶ活性の復活に関する抗ウイルス研究の結果 を提示する。 上述のデータより、クラリスロマイシン、エリスロマイシン及びロキシスロマ イシンは、６００μＭまでのＨＩＶ−１に対する抗ウイルス活性は全てが本質的 に不活性である。ＰＢＭ又はＣＥＭ細胞中にＳＣ−５２１５１が単独で存在する 時、ＳＣ−５２１５１のＥＣ₉₀は０．１４μＭである。ＡＡＧが添加された時、 ＰＢＭ中のＳＣ−５２１５１のＥＣ₉₀は１．２２μＭの大きなレベルに増加する （ＣＥＭ細胞中１．１８μＭ）。しかしながら、本発明のＡＡＧ結合性化合物、 すなわちクラリスロマイシン、エリスロマイシン及びロキシスロマイシンが添加 された時、ＥＣ₉₀が投薬量に比例して減少され、優れた抗ウイルス能力を示す。 特に、本発明のＡＡＧ結合性化合物の添加は、抗ウイルス活性を増加させるもの と解釈されるＳＣ−５２１５１の細胞取り込みの増加を提供する。事実、上記表 中のＡＡＧ結合性化合物は、ＳＣ−５２１５１単独で達せられたものを超えた抗 ウイルス活性の増加を提供する。この増幅された活性は、ＰＢＭ細胞とＣＥＭ紹 胞の両方の上記結果によって確認される通り、細胞系に従うのではない。 明らかに、本発明の付加的な修正や変化は、上記の教示に照して可能である。 それ故に添付のクレームの範囲内にあると理解されるべき発明は、特徴的なここ の記載以外のことを実行することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 31/12 Ａ６１Ｐ 31/18 31/18 33/02 33/02 35/00 35/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ Ａ６１Ｋ 37/64 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ Ｚ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ， ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，Ｈ Ｕ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ， ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，Ｒ Ｏ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 シナズィ，レイモンド エフ アメリカ合衆国 ジョージア 30033 デ ィケイター リージェンシー ウォーク ドライヴ 1524 (72)発明者 ソーマドッスィ，ジャン−ピエール アメリカ合衆国 アラバマ 35242 バー ミンハム グレイストーン ウェイ 5075

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． プロテアーゼインヒビターに基づく治療の間にプロテアーゼインヒビター の細胞の取り込みを改善する方法であり、１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合 物の有効量を、それを必要とする対象に、投与することを備えたことを特徴とす る方法。 ２． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、マクロライド系抗生物質 及びリンコサミド系抗生物質からなる群より選択されることを特徴とする請求項 １記載の方法。 ３． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、エリスロマイシン、トロ レアンドマイシン、クラリスロマイシン及びロキシスロマイシンからなる群より 選択されるマクロライド系抗生物質であることを特徴とする請求項２記載の方法 。 ４． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、リンコマイシンであるこ とを特徴とする請求項２記載の方法。 ５． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、静脈内に投与されること を特徴とする請求項１記載の方法。 ６． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、経口投与されることを特 徴とする請求項１記載の方法。 ７． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、プロテアーゼインヒビタ ーの投与と同時に投与されることを特徴とする請求項１記載の方法。 ８． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、プロテアーゼインヒビタ ーの投与の後で投与されることを特徴とする請求項１記載の方法。 ９． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物の投与の後にプロテアーゼイ ンヒビターを投与することを更に備えることを特徴とする請求項１記載の方法。 １０． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、１日当たり１から３回 、非-プロテアーゼインヒビターに基づく治療に使用される通常の投薬量の０． １倍から、上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物の毒物学的限度までの量 で投与することを特徴とする請求項１記載の方法。 １１． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物がロキシスロマイシン又は クラリスロマイシン又はそれらの混合物であることを特徴とする請求項３記載の 方法。 １２． 上記ロキシスロマイシンが、１日当たり１から３回、１５ｍｇから３０ ０ｍｇの量で投与されることを特徴とする請求項１１記載の方法。 １３． ＨＩＶプロテアーゼインヒビターと１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化 台物の有効量を、それを必要とする対象に、投与することを備え、上記１種又は それ以上のＡＡＧ結合性化合物の不在中での上記ＨＩＶプロテアーゼインヒビタ ーの細胞の取り込みと比較した時に、上記ＨＩＶプロテアーゼインヒビターの細 胞の取り込みを増加させるために有効な量の１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化 合物を投与することを特徴とするＨＩＶ感染の治療方法。 １４． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、マクロライド系抗生物 質及びリンコサミド系抗生物質からなる群より選択されることを特徴とする請求 項１３記載の方法。 １５． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、エリスロマイシン、ト ロレアンドマイシン、クラリスロマイシン及びロキシスロマイシンからなる群よ り選択されるマクロライド系抗生物質であることを特徴とする請求項１４記載の 方法。 １６． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、ロキシスロマイシン又 はクラリスロマイシン又はそれらの混合物であることを特徴とする請求項１５記 載の方法。 １７． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、リンコマイシンである ことを特徴とする請求項１４記載の方法。 １８． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、プロテアーゼインヒビ ターの投与と同時に投与されることを特徴とする請求項１３記載の方法。 １９． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、プロテアーゼインヒビ ターの投与の後で投与されることを特徴とする請求項１３記載の方法。 ２０． 上記プロテアーゼインヒビターが、上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合 性化合物の投与の後に投与されることを特徴とする請求項１３記載の方法。 ２１． １種またはそれ以上のプロテアーゼインヒビター及び、プロテアーゼ逆 転写酵素インヒビター、抗融合／結合性剤、抗インテグラーゼ剤及び抗ウイルス オリゴヌクレオチドからなる群より選択される１種またはそれ以上の補足的治療 薬と一緒に、１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物の有効量を、それを必要と する対象に、投与することを備える治療薬の細胞の取り込みを改善する方法。 ２２． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、マクロライド系抗生物 質及びリンコサミド系抗生物質からなる群より選択されることを特徴とする請求 項２１記載の方法。 ２３． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、エリスロマイシン、ト ロレアンドマイシン、クラリスロマイシン及びロキシスロマイシンからなる群よ り選択されるマクロライド系抗生物質であることを特徴とする請求項２１記載の 方法。 ２４． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、リンコマイシンである ことを特徴とする請求項２１記載の方法。 ２５． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、静脈内に投与されるこ とを特徴とする請求項２１記載の方法。 ２６． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、経口投与されることを 特徴とする請求項２１記載の方法。 ２７． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、上記１種又はそれ以上 のプロテアーゼインヒビターと上記１種またはそれ以上の補足的治療薬の投与と 同時に投与されることを特徴とする請求項２１記載の方法。 ２８． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、上記１種又はそれ以上 のプロテアーゼインヒビターと上記１種またはそれ以上の補足的治療薬の投与の 後で投与されることを特徴とする請求項２１記載の方法。 ２９． 上記１種又はそれ以上のプロテアーゼインヒビターと上記１種またはそ れ以上の補足的治療薬が、１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物の投与の後に 投与されることを特徴とする請求項２１記載の方法。 ３０． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、ロキシスロマイシン又 はクラリスロマイシン又はそれらの混合物であることを特徴とする請求項２３記 載の方法。 ３１． 上記ロキシスロマイシンが、１日当たり１から３回、１５ｍｇから３０ ０ｍｇの量で投与されることを特徴とする請求項３０記載の方法。 ３２． 病原性の又はウイルス性、カビ性、抗レシン、寄生プロトゾア、癌また は抗菌性オリジンの感染性疾患の治療用組成物であり、１種又はそれ以上のＡＡ Ｇ結合性化合物を混ぜた１種又はそれ以上のプロテアーゼインヒビターの有効量 を備えたことを特徴とする組成物。 ３３． プロテアーゼ逆転写酵素インヒビター、抗融合／結合性剤、抗インテグ ラーゼ剤及び抗ウイルスオリゴヌクレオチドからなる群より選択される１種また はそれ以上の補足的治療薬を更に備えたことを特徴とする請求項３２記載の組成 物。 ３４． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、マクロライド系抗生物 質及びリンコサミド系抗生物質からなる群より選択されることを特徴とする請求 項３２記載の組成物。 ３５． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、エリスロマイシン、ト ロレアンドマイシン、クラリスロマイシン及びロキシスロマイシンからなる群よ り選択されるマクロライド系抗生物質であることを特徴とする請求項３３記載の 組成物。 ３６． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、リンコマイシンである ことを特徴とする請求項３３記載の組成物。 ３７． 上記１種又はそれ以上のＡＡＧ結合性化合物が、ロキシスロマイシン又 はクラリスロマイシン又はそれらの混合物であることを特徴とする請求項３４記 載の組成物。 ３８． 上記プロテアーゼインヒビターが、ＳＣ−５２１５１、ＭＫ−６３９、 ＡＢＴ−５３８、Ｒｏ ３１−８９５９、ＸＭ−３２３、ＫＮＩ−２７２、Ｕ− １０３と０１７、ＡＧ−１３４３、ＶＸ−４７８、ＤＰＭ−４５０、ＢＭＳ−１ ８２と１９３、ＣＧＰ−５３８２０、ＣＧＰ−５３４３７、ＨＯＥ／ＢＡＹ−７ ９３及びＲＰＩ−３１２からなる群から選択される一員であることを特徴とする 請求項３２記載の組成物。 ３９． 上記プロテアーゼインヒビターが、ＳＣ−５２１５１、ＭＫ−６３９、 ＡＢＴ−５３８、Ｒｏ ３１−８９５９、ＸＭ−３２３、ＫＮＩ−２７２、Ｕ− １０３と０１７、ＡＧ−１３４３、ＶＸ−４７８、ＤＰＭ−４５０、ＢＭＳ−１ ８２と１９３、ＣＧＰ−５３８２０、ＣＧＰ−５３４３７、ＨＯＥ／ＢＡＹ−７ ９３及びＲＰＩ−３１２からなる群から選択される一員であることを特徴とする 請求項３７記載の組成物。