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JP2000506397A - Tailless nuclear hormone receptor (TLX receptor) - Google Patents

Tailless nuclear hormone receptor (TLX receptor)

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JP2000506397A
JP2000506397A JP10528551A JP52855198A JP2000506397A JP 2000506397 A JP2000506397 A JP 2000506397A JP 10528551 A JP10528551 A JP 10528551A JP 52855198 A JP52855198 A JP 52855198A JP 2000506397 A JP2000506397 A JP 2000506397A
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JP
Japan
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nuclear hormone
hormone receptor
polypeptide
tailless nuclear
tailless
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Pending
Application number
JP10528551A
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Japanese (ja)
Inventor
ビーリー，リー・ジェイムズ
ジェンキンズ，オーウェン
モサコースカ，ダヌタ・エワ・イレーナ
Original Assignee
スミスクライン・ビーチャム・パブリック・リミテッド・カンパニー
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Publication date
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Abstract

(57)【要約】 テイルレス核ホルモンポリペプチドおよびポリヌクレオチド、ならびに組み換え法によるかかるポリペプチドの製造方法を開示する。治療および診断アッセイにおけるこれらのポリペプチドおよびポリヌクレオチドの使用方法も開示する。   (57) [Summary] Disclosed are tailless nuclear hormone polypeptides and polynucleotides, and methods for producing such polypeptides by recombinant methods. Methods of using these polypeptides and polynucleotides in therapeutic and diagnostic assays are also disclosed.

Description

【発明の詳細な説明】 テイルレス核ホルモン受容体（ＴＬＸ受容体） 発明の分野 本発明は、新たに同定されたポリヌクレオチド、それによりコードされるポリ ペプチド、ならびにかかるポリヌクレオチドおよびポリペプチドの使用、ならび にそれらの製造に関する。より詳細には、本発明ポリヌクレオチドおよびポリペ プチドは核ホルモン受容体に関連している(以下、テイルレス核ホルモン受容体( tailless nudear hormone receptor)(ＴＬＸ）という)。また本発明は、かかる ポリヌクレオチドおよびポリペプチドの作用の阻害または活性化にも関する。 発明の背景 核ホルモン受容体は、すべての脊椎動物および無脊椎動物に見られる蛋白の大 規模ファミリーであり、それらの機能は遺伝子転写を転調させることである(Par ker(1993)Curr.Op.Cell.Biol.5:499-504,Laudet et al,(1992)EMBO J.11:1003-1 013,Mangelsdorf et al,1995 Cell83:835-839,Loprs de Silva amd Burbach(199 5)Trends Neurosci.18:542-548に概説されている)。それらは、ＤＮＡ結合ドメ インおよびリガンド結合ドメインを含む類似のドメイン構造を有している。構造 関連性に基づけば、これらの受容体はステロイドホルモン受容体、甲状腺ホルモ ン受容体およびレチノイン酸受容体のごときサブファミリーに分類されうるが、 既知リガンドを有しない多くの受容体の大規模でさらに増えつつあるファミリー も存在し、それらは孤児受容体（orphan receptors）と呼ばれる。ＤＮＡ結合ド メインは、化学シグナルおよび／またはシグナルトランスダクション経路に応答 して特異的標的遺伝子のシス作用性エレメントと相互作用しうる。ステロイドホ ルモン受容体のごとき古典的受容体の場合、エストラジオール、テストステロン 、プロゲステロンのごとき内分泌系からのシグナルは、ホルモンとこれらの蛋白 のリガンド結合ドメインとの直接相互作用により細胞応答へとトラ ンスダクションされうる。これらの受容体のいくつかについての他の天然リガン ドが同定されており、それらは全−トランスレチノイン酸、１，２５−ジヒドロ キシビタミンＤ３、３，５，３’−１−トリヨードチロニンおよび１５−デオキ シ−Δ12,14−プロスタグランジンＪ2を包含する(Mangelsdorf et al,1995Ceｌl 83:835-839)。 テイルレスとしても知られるＴＬＸ（Monaghan et al,1995,Development,121: 839-853,Pignoni et al,1990,Cell,62:151-163）は、ショウジョウバエ(Pignoni et al,1990)、マウス(Tu et al,1994,Nature 370:375-379,Monaghan et al,199 5)、アフリカツメガエル（Holleman et al,1996,GenBank受託番号Ｕ67886）およ びニワトリ（Yu et al,1994）において見いだされている。ＴＬＸは発達中のシ ョウジョウバエ胚の末端（Pignoni et al,1990）および発達中のニワトリおよび マウスの前脳（Yu et al,1994,Monaghan et al,1995）において発現される。テ イルレス機能の喪失はすべての原脳神経芽細胞の不存在を招く(Younossi-Harten stein et al,1997,Developmental Biology 182:270-283)。テイルレス遺伝子の ノックアウトマウスが公表されており(Monaghan et al,1997,Nature 390:515-51 7)、マウスは欠損辺縁系を有し、過度に興奮しやすく、攻撃的な表現型を有する ことが示されている。ホモ接合変異マウスは誕生時には生育可能であるが、嗅覚 皮質、下嗅覚皮質および内嗅覚皮質を含む嗅脳および辺縁構造、扁桃および歯状 回のサイズが小さい。ＴＬＸ／テイルレス機能の修飾は、鬱病、不安症、攻撃性 疾患、卒中、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、ニューロパシ ー性の痛み、ＣＮＳ炎症性疾患および他の神経変性疾患を包含するＣＮＳの疾病 (これらに限らない)、ならびに目の欠陥およびＣＮＳ発達に関する問題を変化さ せうる。 最近、しかも本発明の優先日後、Jacksonら（Royal Free Hospital,London） は、ヒトＴＬＸ遺伝子配列を公表した(GenBank受託番号Ｙ13276)。 治療において役割を果たしうるさらなる受容体の同定および特徴づけに対する 必要性が存在し続けている。 発明の概要 １の態様において、本発明は、テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドなら びにその製造のための組み換え物質および方法に関する。本発明のもう１つの態 様は、テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドおよびポリヌクレオチドの使用 方法に関する。かかる使用は、とりわけ鬱病、不安症、攻撃性疾患、卒中、多発 性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、ニューロパシー性の痛み、ＣＮ Ｓ炎症性疾患および他の神経変性疾患のごときＣＮＳの疾病中枢神経系の疾病、 目の欠陥およびＣＮＳ発達に関する問題の治療を包含する。さらにもう１つの態 様において、本発明は、本発明により提供される材料を用いるアンタゴニストお よびアゴニストの同定方法、ならびに同定された化合物を用いるテイルレス核ホ ルモン受容体のバランス不良関連症状の治療方法に関する。さらにもう１つの態 様は、不適当なテイルレス核ホルモン受容体活性またはレベルに関連した疾病の 検出のための診断アッセイに関する。 図面の簡単な説明 図１はヒトテイルレス核ホルモン受容体のヌクレオチド配列配列番号：１およ び推定アミノ酸配列配列番号：２を示す。 発明の説明定義 下記定義は、本明細書で頻繁に使用される特定の用語の理解を容易にするため のものである。 「テイルレス核ホルモン受容体」は、一般的には、配列番号：２に示すアミノ 酸配列を有するポリペプチド、またはその対立遺伝子変種をいう。 「受容体活性」または「受容体の生物学的活性」は、該テイルレス核ホルモン 受容体の代謝的または生理学的機能をいい、類似の活性または改善された活性ま たは望ましくない副作用を減じられたこれらの活性を包含する。該テイルレス核 ホルモン受容体の抗原性および免疫原性の活性も含まれる。 「テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチド」は、テイルレス核ホルモン受容 体配列に対して十分に類似したアミノ酸配列を有するポリペプチド、好ましくは 少なくとも１つの当該受容体活性を示すポリペプチドをいう。 「テイルレス核ホルモン受容体遺伝子」は、配列番号：１に示すヌクレオチド 配列を有するポリヌクレオチドまたはその対立遺伝子変種および／またはそれら の相補物をいう。 「テイルレス核ホルモン受容体ポリヌクレオチド」は、テイルレス核ホルモン 受容体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするヌクレオチド配列、あ るいは配列番号：２のポリペプチドまたはその対応フラグメントをコードしてい るヌクレオチド配列に対して少なくとも９２％の同一性を有するヌクレオチド配 列、あるいは配列番号：１に含まれるヌクレオチド配列に対して十分な同一性を 有していて増幅に使用可能な条件またはプローブもしくはマーカーとして使用可 能な条件でハイブリダイゼーションするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチ ドをいう。 本明細書の用語「抗体」は、ポリクローナルおよびモノクローナル抗体、キメ ラ、１本鎖、ならびにヒト化抗体、さらにはＦａｂフラグメントを包含し、 Ｆａｂまたは他の免疫グロブリン発現ライブラリーの生成物も包含する。 「単離」とは、「人間の手により」天然の状態から変化させられた、すなわち 、それが天然に存在する場合、元来の環境から変化させるもしくは取り除く、ま たはその両方を行ったことを意味する。例えばポリヌクレオチドまたはポリペプ チドが、天然の状態で生物中に存在する場合は、「単離」されていないが、同一 のポリヌクレオチドまたはポリペプチドが、天然に共存する物質から分離されて いる場合は、本明細書に用いる用語である、「単離」がなされている。 「ポリヌクレオチド」とは、一般的には、修飾されていないＲＮＡもしくはＤ ＮＡ、または修飾されたＲＮＡもしくはＤＮＡであってよい、任意のポリリボヌ クレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオチドを意味する。「ポリヌクレオチ ド」は、一本鎖および二本鎖ＤＮＡ、一本鎖および二本鎖領域の混合物または一 本鎖、二本鎖および三本鎖領域の混合物であるＤＮＡ、一本鎖および二本鎖ＲＮ Ａ、ならびに一本鎖および二本鎖領域の混合物であるＲＮＡ、一本鎖もしくはよ り典型的には二本鎖もしくは三本鎖、または一本鎖および二本鎖領域の混合物で あってもよいＤＮＡおよびＲＮＡを含むハイブリッド分子を意味するが、これ らに限定するものではない。さらに、「ポリヌクレオチド」は、ＲＮＡもしくは ＤＮＡ、またはＲＮＡとＤＮＡの両方を含む三本鎖領域を意味する。安定性また はその他の理由で修飾した骨格を有するＤＮＡまたはＲＮＡは、本明細書の用語 「ポリヌクレオチド」に含まれる。イノシン等の通常的でない塩基、またはトリ チル化塩基等は「修飾」された塩基に含まれる。種々の修飾がＤＮＡおよびＲＮ Ａについて行われているので、「ポリヌクレオチド」は、典型的に、天然におい て見いだされるようなポリヌクレオチドのかかる化学的、酵素的または代謝的に 修飾された形態、ならびにウイルスおよび細胞に特徴的なＤＮＡおよびＲＮＡの 化学的形態を包含する。また、「ポリヌクレオチド」は、しばしばオリゴヌクレ オチドと称される短いポリヌクレオチドを包含する。 「ポリペプチド」は、ペプチド結合または修飾したペプチド結合により互いに 結合している２個またはそれ以上のアミノ酸を含むペプチドまたは蛋白を意味す る。「ポリペプチド」は、通常、例えばペプチド、オリゴペプチドおよびオリゴ マーとも称される短鎖のもの、および一般的に蛋白と称される長鎖のものの両方 を意味する。ポリペプチドは遺伝子によりコードされた２０種のアミノ酸とは異 なるアミノ酸を含有していてもよい。「ポリペプチド」には、プロセッシングお よびその他の翻訳後修飾のような天然プロセスにより修飾されたものが含まれる が、当業者に周知の化学修飾技術によっても修飾される。かかる修飾は基礎的な 参考書およびさらに詳細な論文ならびに多数の研究文献にも詳しく記載されてお り、これらは当業者に周知である。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖および アミノまたはカルボキシル末端等のポリペプチドの任意の部位で起こりうる。同 一の型の修飾は該ポリペプチドの幾つかの部位で、同一または異なる程度で存在 し得ることが理解されよう。また、ポリペプチドは多くの型の修飾をも含み得る 。ポリペプチドは、ユビキチネーションの結果として分枝状となったものであっ てもよく、ポリペプチドは分枝ありまたはなしの環状のものであってもよい。環 状、分枝状；および環状かつ分枝状ポリペプチドは、翻訳後の天然プロセスによ り生じるものであってもよく、また、合成的方法により作られるものであっても よい。修飾には、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−リボシル化、アミド化、フラ ビンの 共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有 結合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホスホチジルイノシトールの共有結合 、交差架橋、環化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、交差架橋共有結合形成 、シスチン形成、ピログルタメート形成、ホルミル化、ガンマ−カルボキシル化 、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形成、水酸化、ヨウ素化、メチル化、ミリスト イル化、酸化、蛋白加水分解プロセッシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化 、グリコシル化、脂質結合、硫酸化、グルタミン酸残基のガンマ−カルボキシル 化、水酸化およびＡＤＰリボシル化、セレノイル化、硫酸化、アルギニル化のご ときトランスファーＲＮＡ媒介の蛋白へのアミノ酸の添加、ならびにユビキチネ ーションなどがある。例えばProteins-Structure and Molecular Properties、 第２版、T.E.Creighton、W.H.Freeman and Company、ニューヨーク（1993）およ びPosttranslational Covalent Modification of Proteins、B.C.Johnson編、ア カデミックプレス、ニューヨーク（1983）のWold,F.,Post-translational Prote in Modifications:Perspective and Prospects、１〜12頁；Seifterら、Meth.En zymol.182:626-646（1990）およびRattanら、Protein Synthesis：Posttranslat ional Modifications and Aging，Ann.N.YAcad.Sci.663:48-62（1992）を参照さ れたい。 本明細書で用いる「変種」なる用語は、対照ポリヌクレオチドまたはポリペプ チドとは各々異なるポリヌクレオチドまたはポリペプチドであるが、本質的な特 性は保持している。典型的なポリヌクレオチドの変種は、別の対照ポリヌクレオ チドとはヌクレオチド配列が異なる。変種のヌクレオチド配列の変化は、対照ポ リヌクレオチドによりコードされるポリペプチドのアミノ酸配列を変化させるも のであってもよく、変化させないものであってもよい。以下に論じるように、ヌ クレオチドの変化は結果的に、対照配列によりコードされるポリペプチドにおけ るアミノ酸置換、付加、欠損、融合および末端切断を招く。典型的なポリペプチ ドの変種は、別の対照ポリペプチドとはアミノ酸配列が異なる。一般的には、差 異は、対照ポリペプチドおよび変種の配列が、全体的に非常に類似しており、多 くの領域で同一なものに限られる。変種および対照ポリペプチドは、１またはそ れ以上の置換、付加、欠損が任意の組み合わせで起こることにより、アミノ酸配 列が変化し得る。置換または挿入されたアミノ酸残基は、遺伝学的コードにより コードされたものであってもなくてもよい。ポリヌクレオチドまたはポリペプチ ドの変種は、例えば対立遺伝子変種のような自然発生的なものでもよく、または 自然発生することが知られていない変種でよい。ポリヌクレオチドおよびポリペ プチドの非自然発生変種は、突然変異技術または直接的合成により製造できる。 「同一性」とは、ヌクレオチド配列またはアミノ酸配列の同一性の尺度である 。一般的には、最大の合致が得られるように配列が並置される。「同一性」なる 用語自体は当該分野において認識された意味を有し、公表された方法を用いて計 算できる。例えば、Computational Molecular Biology，Lesk,A.M.編、オックス フォード・ユニバーシティー・プレス、ニューヨーク、1988年；Biocomputing： Informatics and Genome Projects,Smith,D.W編、アカデミック・プレス、ニュ ーヨーク、1993年；Computer Analysis of Sequence Data，パートＩ，Griffin, A.M.およびGriffin,H.G.編、ヒューマン・プレス、ニュージャージー、1994年； Sequence Analysis in Molecular Biology,von Heinie,G.、アカデミック・プレ ス、1987年；Sequence Analysis Primer,Gribskov,M.およびDevereux,J.編、Ｍ ストックトン・プレス、ニューヨーク、1991年参照。２つのポリヌクレオチドま たはポリペプチド配列間の同一性を測定するための多くの方法があるが、用語「 同一性」は当業者によく知られている。(Carillo,H.およびLipman,D.,SIAM J.Ap phied Math.,48:1073(1988))。２つの配列間の同一性または類似性を決定するた めに通常用いられる方法には、Guide to Huge Computers,Martin J.Bishop,ed., Academic Press,San Diego,1994およびCarillo,H.およびLipman,D.,SIAM J.Apph ed Math.,48:1073（1988）に記載された方法があるが、これらに限らない。同一 性および類似性を決定する方法は、公に入手できるコンピュータープログラムに 集成されている。二つの配列間の同一性および類似性を測定する好ましいコンピ ュータープログラム法には、ＧＣＳプログラムパッケージ（Devereux,J.ら、Nuc leic Acids Research 12(1):387（1984）、BLASTPN、BLASTN、およびFASTA (Atschul,S.F.ら、J.Molec.Biol（1990） 215:403)）があるが、これらに限定す るものではない。 本発明は、新規テイルレス核ホルモン受容体のポリペプチドおよびポリヌクレ オチドに関し、それらはアミノ酸配列同一性によりマウス孤児核受容体テイルレ スに関連している。本発明は、特に、図１（配列番号：１および２）に示すヌク レオチドおよびアミノ酸配列を有するテイルレス核ホルモン受容体に関する。 本発明のポリペプチド テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドは、配列番号：２のポリペプチド（ 詳細には成熟ポリペプチド）；ならびに配列番号：２のポリペプチドまたはその 重要部分に対して少なくとも９９％の同一性を有するテイルレス核ホルモン受容 体ポリペプチドを包含する。 テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドは「成熟」蛋白の形態であってもよ く、あるいは融合蛋白のごとき大型の蛋白の一部であってもよい。分泌またはリ ーダー配列、プロ配列、複数のヒスチジン残基のごとき精製を促進する配列、ま たは組み換え生産を行っている間の安定性のためのさらなる配列を含むさらなる アミノ酸配列を含んでいることがしばしば有利である。 生物学的活性のあるテイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドのフラグメント も本発明に包含される。フラグメントは、前述のテイルレス核ホルモン受容体ポ リペプチドのアミノ酸配列のすべてではなく一部に対して全く同一であるアミノ 酸配列を有するポリペプチドである。テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチド では、フラグメントは「独立して存在するもの(free standing)」であるか、あ るいはより大きなポリペプチド内に含まれていてもよく、その中でフラグメント は一部分もしくは領域を形成している。最も好ましくは、単一の連続した領域と して、より大きなポリペプチドに含まれる。本発明ポリペプチドフラグメントの 典型例は、例えば、テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドのアミノ酸番号約 １〜２０、２１〜４０、４１〜６０、６１〜８０、８１〜１００および１０１か ら末端までからなるフラグメントを包含する。この意味において、「約」とは、 片方の端または両端において、示された数よりも数個、５個、４個、３個、２個 または１個多いかまたは少ない範囲を含む。 好ましいフラグメントは、例えば、アミノ末端を含む一連の残基が欠失、また はカルボキシ末端を含む一連の残基が欠失、あるいは一方がアミノ末端でもう一 方がカルボキシ末端を含む２種の一連の残基が欠失していること以外はテイルレ ス核ホルモン受容体ポリペプチドのアミノ酸配列を有する末端切断ポリペプチド を包含する。また、構造的または機能的属性により特徴づけられるフラグメント 、例えばアルファーヘリックスおよびアルファーヘリックス形成領域、ベータシ ートおよびベータシート形成領域、ターンおよびターン形成領域、コイルおよび コイル形成領域、親水性領域、疎水性領域、アルファー両親媒性領域、ベータ両 親媒性領域、可変領域、表面形成領域、基質結合領域、および高抗原性指標領域 を含むフラグメントなども好ましい。受容体活性を媒介する、生物学的に活性な 領域も好ましく、類似の活性もしくは改善された活性のある、または望ましくな い活性を減じたフラグメント等がある。動物、とりわけヒトにおいて抗原的また は免疫原的なフラグメントも含まれる。 よって、本発明ポリペプチドは、配列番号：２のアミノ酸配列に対して少なく とも９９％同一であるアミノ酸配列を有するポリペプチドまたは配列番号：２の 対応フラグメントに対して少なくとも９９％の同一性を有するそのフラグメント を包含する。好ましくは、これらのポリペプチドのすべては、抗原的活性を包含 する受容体の生物学的活性を保持している。上記配列およびフラグメントの変種 もこのグループに含まれる。好ましい変種は、保存的アミノ酸置換により変化し たものであり、すなわち、同様の特徴を有するアミノ酸により置換されているも のである。典型的なかかる置換は、Ａｌａ、Ｖａｌ、ＬｅｕおよびＩｌｅ間： ＳｅｒおよびＴｈｒ間；ＡｓｐおよびＧｌｕ間；ＡｓｎおよびＧｌｎ間；ならび に塩基性残基ＬｙｓおよびＡｒｇ間；あるいは芳香族残基ＰｈｅおよびＴｙｒ間 におけるものである。数個、５ないし１０個、１ないし５個、または１ないし２ 個のアミノ酸がいずれかの組み合わせで置換、欠失または付加されている変種が 特に好ましい。 いずれの適当な方法でも本発明テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドを製 造することができる。かかるポリペプチドは、単離された天然ポリペプチド、組 み換え法によるポリペプチド、合成法によるポリペプチド、またはこれらの方法 の組み合わせによるポリペプチドを包含する。かかるポリペプチドの製造手段は 当該分野においてよく理解されている。 本発明のポリヌクレオチド 本発明のもう１つの態様は、テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドをコー ドしている単離ポリヌクレオチドおよびそれに密接に関連したポリヌクレオチド に関する。 ヒトテイルレス核受容体ホルモン受容体をコードするｃＤＮＡの配列決定結果 により示されるように、本発明テイルレス核ホルモン受容体は、核ホルモン受容 体の他の蛋白に構造的に関連している。そのｃＤＮＡ配列は、３８５個のアミノ 酸（推定分子量４２．６ｋＤａ）をコードする１つの読み枠を含んでいる。図１ （配列番号：２）のテイルレス核ホルモン受容体は、マウステイルレス核ホルモ ン受容体（Monaghan et al,Development,121:839-853,1995）に対して３８５個 のアミノ酸残基において約９８％の同一性（BLASTを用いた場合）を有する。図 １（配列番号：１）のテイルレス核ホルモン受容体遺伝子は、マウステイルレス 核ホルモン受容体（Monaghan et al,Development,121:839-853,1995）に対して １１５８個のヌクレオチド残基において約９１％の同一性（BLAST）を有する。 本発明テイルレス核ホルモン受容体は、コーディング配列中の１つの位置、す なわち位置２６８においてJacksonらの配列（GenBank受託番号Ｙ13276）と異な り、この位置においてＣではなくＴを有する。これが翻訳されるとアミノ酸配列 の９０番目がヒスチジンでなくチロシンとなる。この相違は多型性変異またはエ ラー、例えば配列を得るための遺伝子クローニングにおけるＰＣＲエラーにより 生じうる。カエル、マウス、ニワトリのごとき他の種由来のＴＬＸはJacksonの 配列と同じ位置にＣを有する。 ヒト・扁桃細胞中のｍＲＮＡ由来のｃＤＮＡライブラリーから、発現配列タグ （ＥＳＴ）分析（Adams,M.D.,et al.Science(1991)252:1651-1656;Adams,M.D.et al.,Nature(1992)355:632-634;Adams,M.D.,et al.,Nature(1995)377 Supp:3-17 4）を用いて、テイルレス核ホルモン受容体をコードしている本発明の１のポリ ヌクレオチドを得てもよい。ゲノムＤＮＡライブラリーのごとき天然起源から本 発明ポリヌクレオチドを得ることもでき、あるいはよく知られ市販されている手 段方法を用いて合成することもできる。 テイクレス核ホルモン受容体ポリペプチドをコードしているヌクレオチド配列 は、その全長にわたり図１（配列番号：１）に示すコーディング配列と同一であ ってもよく、あるいは配列番号：２のポリペプチドをコードしているこのヌクレ オチド配列の縮重形態であってもよく、あるいは配列番号：２のポリペプチドを コードしているヌクレオチド配列に対して非常に同一性のあるものであってもよ い。好ましくは、本発明ポリヌクレオチドは、テイルレス核ホルモン受容体ポリ ペプチドをコードしているヌクレオチド配列に対して少なくとも９２％同一、好 ましくは少なくとも９５％同一、より好ましくは少なくとも９７％同一、最も好 ましくは少なくとも９９％同一であるヌクレオチド配列を含み、あるいは図１（ 配列番号：１）に示すコーディングヌクレオチド配列に対して少なくとも９２％ 同一、好ましくは少なくとも９５％同一、より好ましくは少なくとも９７％同一 、最も好ましくは少なくとも９９％同一であるヌクレオチド配列を含み、あるい は配列番号：２のポリペプチドをコードしているヌクレオチド配列に対して少な くとも９２％同一、好ましくは少なくとも９５％同一、より好ましくは少なくと も９７％同一であるヌクレオチド配列を含む。 本発明ポリヌクレオチドをテイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドの組み換 え生産に用いる場合、ポリヌクレオチドはそれ自体、成熟ポリペプチドまたはそ のフラグメントのコーディング配列を含むものであってもよく；あるいは他のコ ーディング配列を伴った読み枠中の成熟ポリペプチドまたはフラグメントのコー ディング配列を含むものであってもよい。他のコーディング配列としては、例え ば、リーダーまたは分泌配列、プレ、プロ、プレプロ蛋白配列をコードする コーディング配列、または他の融合ペプチド部分が挙げられる。例えば、融合ポ リペプチドの精製を促すマーカー配列をコードしていてもよい。本発明のこの態 様の１の好ましい具体例において、マーカー配列は、ｐＱＥベクター（Qiagen,I nc.）に提供されるようなヘキサーヒスチジンペプチド（Gentzら、Proc.Natl.Ac ad.Sci.,USA,86:821-824（1989）に記載される）またはＨＡタグ（Wilsonら、Ce ll，37:767(1984)）である。本発明のポリヌクレオチドはまた、構造遺伝子およ び遺伝子発現を調節する天然の配列をも含むが、これらに限定するものではない 。ポリヌクレオチドは、例えば、転写された非翻訳配列、終止シグナル、リボソ ーム結合部位、ｍＲＮＡを安定化する配列のごとき非コーディング５'および３' 配列を含有していてもよい。 図１（配列番号：２）に示すアミノ酸配列を有するテイルレス核ホルモン受容 体またはその変種をコードしているポリヌクレオチドは本発明の特に好ましい具 体例である。 さらに好ましい具体例は、表２（配列番号：２）のテイルレス核ホルモン受容 体ポリペプチドのアミノ酸配列を含むテイルレス核ホルモン受容体変種をコード しているポリヌクレオチドであり、数個、５ないし１０個、１ないし５個、１な いし３個、１ないし２個または１個のアミノ酸残基がいずれかの組み合わせで置 換、欠失または付加されているものである。 本発明のさらに好ましい具体例は、図１（配列番号：２）に示すアミノ酸配列 を有するテイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドをコードしているポリヌクレ オチドに対して全長にわてり少なくとも９２％同一であるポリヌクレオチド、お よびかかるポリヌクレオチドに相捕的なポリヌクレオチドである。寄託クローン のヒトｃＤＮＡのテイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドをコードしているポ リヌクレオチドに対して全長にわたり少なくとも９２％同一である領域を含むポ リヌクレオチドおよびそれに相捕的なポリヌクレオチドが最も好ましい。この点 において、少なくとも９７％同一のポリヌクレオチドが非常に好ましく、少なく とも９８〜９９％同一のものがさらに非常に好ましく、少なくとも９９％同一の ものが最も好ましい。 さらに本発明は、上記配列にハイブリダイゼーションするポリヌクレオチドに 関する。この点において、本発明は、厳密な条件下で上記ポリヌクレオチドにハ イブリダイゼーションするポリヌクレオチドに特別に関する。本明細書の用語「 厳密な条件」は、配列間に少なくとも９５％、好ましくは少なくとも９７％の同 一性がある場合にハイブリダイゼーションが起こることを意味する。 配列番号：１に含まれるヌクレオチド配列またはそのフラグメントに対して十 分に同一である本発明ポリヌクレオチドをｃＤＮＡおよびゲノムＤＮＡ用のハイ ブリダイゼーションプローブとして用いて全長のｃＤＮＡおよびテイルレス核ホ ルモン受容体をコードしているゲノムクローンを単離し、あるいはテイルレス核 ホルモン受容体遺伝子に対して高い類似性を有する配列を有する他の遺伝子の ｃＤＮＡおよびゲノムクローンを単離してもよい。かかるハイブリダイゼーショ ン法は当業者に知られている。典型的には、これらのヌクレオチド配列は、対照 に対して７０％、好ましくは８０％、より好ましくは９０％の同一性を有する。 一般的には、プローブは少なくとも１５個のヌクレオチドを含む。好ましくは、 かかるプローブは少なくとも３０個のヌクレオチドを有し、少なくとも５０個の ヌクレオチドを有していてもよい。特に好ましいプローブは３０ないし５０個の 範囲のヌクレオチドを含む。 本発明ポリヌクレオチドおよびポリペプチドを、動物およびヒトの疾病の研究 試薬ならびに治療および診断のための材料として用いてもよい。 ベクター、宿主細胞、発現 本発明はまた、ポリヌクレオチドまたは本発明のポリヌクレオチドを含むベク ター、本発明のベクターで遺伝子操作する宿主細胞および組換え技法による本発 明のポリペプチドの製造にも関する。本発明のＤＮＡ構築物に由来するＲＮＡを 用いる、かかる蛋白の製造に無細胞翻訳系を用いてもよい。 組換え体を製造するために、宿主細胞を遺伝子操作して、発現系もしくはそれ らの一部、または本発明のポリヌクレオチドを組み込むことができる。ポリヌク レオチドの宿主細胞への導入は、例えば、Davisら、Basic Methods in Molecular Biology(1986)；Sambrookら、Molecular Cloning；A Laboratory Man ual、第２版；コールド・スプリング・ハーバー・ラボラトリー・プレス、コー ルド・スプリング・ハーバー、ニューヨーク（1989）のように、多くの標準的な 実験マニュアルに記載される方法により行うことができ、例えばリン酸カルシウ ムトランスフェクション、ＤＥＡＥ−デキストラン媒介トランスフェクション、 トランスベクション、マイクロインジェクション、陽イオン脂質媒介トランスフ ェクション、エレクトロポレーション、トランスダクション、スクレイプ負荷(s crape loading)、バリスティック導入（ballistic introduction）および感染等 がある。 適当な宿主の代表的なものには、細菌細胞、例えば連鎖球菌属(Streptococci) 、ブドウ球菌属(Staphylococi)、大腸菌(E.coli)、ストレプトミセスおよび枯草 菌（Bacillus subtiis）細胞；真菌細胞例えば酵母細胞およびアスペルギルス属 （Aspergillus）細胞；昆虫細胞例えばショウジョウバエＳ２（DrosophilaS2） およびスポドプテラＳｆ９（Spodoptera Sf9）細胞;動物細胞例えばＣＨＯ、Ｃ ＯＳ、ＨｅＬａ、Ｃ１２７、３Ｔ３、ＢＨＫ、２９３およびボウズ（Bows）黒色 腫細胞；ならびに植物細胞等がある。 非常に多くの発現系を使用できる。かかる系は、染色体、エピソームおよびウ イルス由来のベクター、例えば細菌プラスミド由来、バクテリオファージ由来、 トランスポゾン由来、酵母エピソーム由来、挿入エレメント由来、酵母染色体エ レメント由来、例えばバキュロウイルス、パポバウイルス、例えばＳＶ４０、ワ クシニアウイルス、アデノウイルス、鶏痘ウイルス、仮性狂犬病ウイルスおよび レトロウイルス等のウイルス由来のベクター、ならびにそれらを組み合わせた物 に由来するベクター、例えばプラスミドおよびバクテリオファージ遺伝学的エレ メント由来のベクター、例えばコスミドおよびファージミドを包含する。発現系 は、発現を制御ならびに発生させる制御領域を含有していてもよい。一般的には 、宿主中でポリヌクレオチドを保持、伸長または発現してポリペプチドを発現す るのに適した系またはベクターを用いてもよい。例えばSambrookら、Molecular Cloning,A Laboratory Manual（上述）に記載されているような周知のおよび 常套的な種々の技術により、適当なＤＮＡ配列を発現系に挿入できる。 翻訳蛋白を、小胞体内腔、ペリプラスミックスペースまたは細胞外環境へ分泌 させるために、適当な分泌シグナルを所望ポリペプチド中に含ませてもよい。こ れらのシグナルはポリペプチドに本来的なものであってもく、あるいは異種性の シグナルでもよい。 テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドをスクリーニングアッセイのために 発現させる場合、一般的には、細胞表面にポリペプチドを生成させるのが好まし い。この場合、スクリーニングアッセイに使用する前に細胞を集めてもよい。テ イルレス核ホルモン受容体ポリペプチドを培地中でスクリーニングする場合、培 地を回収してポリペプチドを回収し精製することができる。細胞内に生成される 場合、まず細胞を溶解し、次いで、ポリペプチドを回収しなければならない。 テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドは周知の方法により、組換え細胞培 養物から回収および精製でき、その方法には例えば硫酸アンモニウムまたはエタ ノール沈殿、酸抽出、陰イオンまたは陽イオン交換クロマトグラフィー、ホスホ セルロースクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、親和性ク ロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィーおよびレクチン クロマトグラフィー等がある。高速液体クロマトグラフィーを精製に用いるのが 最も好ましい。ポリペプチドが単離および／または精製中に変性した場合、再び 活性な立体配座にするために、蛋白再生のための周知の技法を用いることができ る。 診断アッセイ 本発明はまた診断試薬としての本発明テイルレス核ホルモン受容体ポリヌクレ オチドの使用にも関する。機能不全に関連している変異形態のテイルレス核ホル モン受容体遺伝子の検出は、テイルレス核ホルモン受容体の発現低下、過剰発現 または変化した発現から生じる疾病またはかかる疾病に対する感受性の診断をす るための手段を提供するであろう。テイルレス核ホルモン受容体遺伝子中の変異 を有する個体を、種々の方法によりＤＮＡレベルで検出できる。 診断用の核酸は、対象の細胞、例えば骨、血液、尿、唾液、組織生検または剖 検材料から得てもよい。ゲノムＤＮＡは検出に直接使用できるか、または分析の 前にＰＣＲもしくはその他の増幅法を用いることにより酵素的に増幅できる。 ＲＮＡまたはｃＤＮＡも同様の方法で用いることができる。正常な遺伝子型と比 較した場合の増幅生成物のサイズの変化により、欠失および挿入を検出すること ができる。点突然変異は、増幅ＤＮＡを標識テイルレス核ホルモン受容体ポリヌ クレオチド配列にハイブリダイズさせることにより同定できる。好ましくは、完 全に対合した配列は、ＲＮアーゼ消化または融解温度の差により、誤対合二重ら せんから区別できる。ＤＮＡ配列の差はまた、変性剤含有または不含のゲル中の ＤＮＡフラグメントの電気泳動の可動性の変化を検出することにより、または直 接的なＤＮＡの配列決定により検出できる。例えばMeyers et.al.Science,230:1 242（1985）参照。特異的な位置での配列の変化はまた、ヌクレアーゼ保護アッ セイ例えばＲＮアーゼおよびＳ１保護または化学的切断法によっても明らかにす ることができる。例えばCotton et al.Proc.Natl.Acad.Sci.,USA,85:4397-4401 （1985）参照。 診断アッセイは、本明細書記載の方法によりテイルレス核ホルモン受容体遺伝 子の変異を検出することにより、鬱病、不安症、攻撃性疾患、卒中、多発性硬化 症、アルツハイマー病、パーキンソン病、ニューロパシー性の痛み、ＣＮＳ炎症 性疾患および他の神経変性疾患のごときＣＮＳの疾病中枢神経系の疾病、目の欠 陥およびＣＮＳ発達に関する問題に対する感受性の診断または決定方法を提供す る。 さらに、対象由来の試料の異常に上昇または低下したテイルレス核ホルモン受 容体ポリペプチドもしくはテイルレス核ホルモン受容体ｍＲＮＡレベルを調べる ことを含む方法によって、鬱病、不安症、攻撃性疾患、卒中、多発性硬化症、ア ルツハイマー病、パーキンソン病、ニューロパシー性の痛み、ＣＮＳ炎症性疾患 および他の神経変性疾患のごときＣＮＳの疾病中枢神経系の疾病、目の欠陥およ びＣＮＳ発達に関する問題を診断することができる。減少または増加した発現は 、ポリヌクレオチドの定量法として当該分野で周知の方法の任意の方法、例え ばＰＣＲ、ＲＴ−ＰＣＲ、ＲＮアーゼ保護、ノーザンブロッティングおよびその 他のハイブリダイゼーション法を用いて測定できる。宿主由来の試料中の蛋白レ ベル、例えばテイルレス核ホルモン受容体のレベルを決定するために用いること ができるアッセイ法は、当業者に周知である。このようなアッセイ法には、ラジ オイムノアッセイ、競争結合アッセイ、ウェスタンブロット分析およびＥＬＩＳ Ａアッセイ等がある。 染色体アッセイ 本発明ヌクレオチド配列は染色体の同定にも価値がある。本発明配列は、個々 のヒト・染色体上の特定の位置を標的とし、これにハイブリダイゼーションしう る。本発明による重要な部分の染色体へのマッピングは、それらの配列を遺伝子 関連疾病と関連づける重要な第１工程である。配列を正確な染色体位置にマッピ ングしたならば、染色体上の配列の物理的位置を遺伝学的地図のデータと関連づ けることができる。かかるデータは、例えば、V.McKusick,Mendelian Inheritan ce in Man（Johns Hopkins University Weich Medical Libraryからオンライン で利用できる）に見いだされる。次いで、連関（物理的に近接した遺伝子の同時 遺伝）の分析により、同じ染色体領域にマッピングされた遺伝子と疾病との関係 を同定する。 罹病個体と未罹病個体との間のｃＤＮＡまたはゲノム配列の相違も調べること ができる。罹病個体のいくつかまたは全部において変異が観察されるが正常個体 においては観察されない場合、その変異は疾病の原因である可能性がある。 遺伝子が６ｑ２１に局在しており、ＣＮＳの疾病に関連したトランスロケーシ ョンにマッピングされる領域にあることが、染色体局在化により示された。この 局在化はJacksonらにより確証された(上記文献参照)。 抗体 本発明のポリペプチドもしくはそれらの変種、またはそれらを発現する細胞は 、テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドに対して免疫特異的な抗体を産生す る 免疫原として用いることができる。本明細書で用いる「免疫特異的」とは、抗体 が、先行技術における他の関連ポリペプチドに対してよりも、本発明ポリペプチ ドに対して実質的に大きいアフィニティーを有することを意味する。 本発明のポリペプチドに対して生じる抗体は、ポリペプチドまたはエピトープ が付いたフラグメント、アナログまたは細胞を、好ましくはヒトはでない動物に 、通常の実験法を用いて投与することにより得ることができる。連続的細胞系培 養により産生される抗体を提供する、当業者周知の技術を用いて、モノクローナ ル抗体を調製することができる。例としては、Kohler,G.and Milstein,C.,Natur e，256:495-497（1975）；Kozbor et al.Immunology Today，4:72（1983）；Col e et al.Monodonal Antibodies and Cancer Therapy,Alan R Liss,Inc.,77-96頁 （1985）に記載されるような種々の技法がある。 一本鎖抗体の産生のために記載された技術（米国特許第４９４６７７８号）は 、本発明のポリペプチドに対する一本鎖抗体を産生するのに適用できる。また、 トランスジェニックマウスまたはその他の生物、例えばその他の哺乳動物を用い て、ヒト化抗体等の抗体を発現させてもよい。 上記抗体を用いて、ポリペプチドを発現するクローンを単離または同定しても よく、あるいはアフィニティークロマトグラフィーによりポリペプチドを精製し てもよい。 テイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドに対する抗体を用いて、とりわけ、 鬱病、不安症、攻撃性疾患、卒中、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキン ソン病、ニューロパシー性の痛み、ＣＮＳ炎症性疾患および他の神経変性疾患の ごときＣＮＳの疾病中枢神経系の疾病、目の欠陥およびＣＮＳ発達に関する問題 を治療してもよい。 ワクチン 本発明の別の態様は、哺乳動物における免疫学的反応を誘導する方法に関し、 該方法は、抗体および／またはＴ細胞免疫応答を生じさせるに十分なテイルレス 核ホルモン受容体またはそれらのフラグメントを哺乳動物に接種して、とりわけ 、 鬱病、不安症、攻撃性疾患、卒中、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキン ソン病、ニューロパシー性の痛み、ＣＮＳ炎症性疾患および他の神経変性疾患の ごときＣＮＳの疾病中枢神経系の疾病、目の欠陥およびＣＮＳ発達に関する問題 から該動物を防御することを特徴とする。本発明のもう１つの態様は、哺乳動物 における免疫学的応答を誘導する方法に関し、該方法は、テイルレス核ホルモン 受容体ポリペプチドをインビボで発現させるベクターを介してテイルレス核ホル モン受容体ポリペプチドを送達し、かかる免疫学的応答を誘導して該動物を疾患 から防御する抗体を生させることを特徴とする。 本発明のさらなる態様は免疫学的／ワクチン処方（組成物）に関するものであ り、それは、哺乳動物宿主中に導入された場合、テイルレス核ホルモン受容体ポ リペプチドに対する哺乳動物の免疫学的応答を誘導する。該組成物はテイルレス 核ホルモン受容体ポリペプチドまたはテイルレス核ホルモン受容体遺伝子を含ん でなる。ワクチン処方は、さらに適当な担体を含んでいてもよい。テイルレス核 ホルモン受容体ポリペプチドは胃で分解される可能性があるので、好ましくは非 経口投与する(皮下、筋肉内、静脈、皮内等への注射を包含)。非経口投与に適し た処方は、抗酸化剤、バッファー、静細菌剤および処方を受容者の血液と等張に する溶質を含んでいてもよい水性または非水性滅菌注射用溶液；ならびに懸濁剤 または増粘剤を含んでいてもよい水性または非水性滅菌懸濁液を包含する。処方 を１回量または複数回量として容器に入れて提供してもよく、例えば、密封アン プルおよびバイアルに入れて提供してもよく、また使用直前に滅菌液体担体の添 加のみを必要とする凍結乾燥状態として保存してもよい。またワクチン処方は、 水中油系および当該分野で知られた他の系のごとき処方の免疫原性を高めるため のアジュバント系を含んでいてもよい。用量は、個々のワクチンの活性に左右さ れ、通常の実験により容易に決定することができる。 スクリーニングアッセイ 本発明受容体ポリペプチドに結合してこれを活性化（アゴニスト）または阻害 （アンタゴニスト）する化合物のスクリーニングプロセスにおいて本発明テイル レス核ホルモン受容体を用いてもよい。よって、本発明ポリペプチドを用いて、 小型分子基質とリガンドとの結合を、例えば細胞、無細胞調製物、化学ライブラ リーおよび天然産物混合物において評価してもよい。これらの基質およびリガン ドは天然の基質およびリガンドであってもよく、あるいは構造または機能を模倣 したものであつてもよい。Cohgan et al.,Current Protocols in Immunology 1( 2):Chapter5(1991)参照。 テイルレス核ホルモン受容体蛋白は咄乳動物宿主に広く存在し、多くの生物学 的機能に関与しており、多くの病気にもかかわっている。したがって、テイルレ ス核ホルモン受容体を刺激する化合物および薬剤、あるいはまたテイルレス核ホ ルモン受容体を阻害しうる化合物または薬剤を見いだすことが望まれる。一般的 には、鬱病、不安症、攻撃性疾患、卒中、多発性硬化症、アルツハイマー病、パ ーキンソン病、ニューロパシー性の痛み、ＣＮＳ炎症性疾患および他の神経変性 疾患のごときＣＮＳの疾病中枢神経系の疾病、目の欠陥およびＣＮＳ発達に関す る問題のごとき状態を治療または予防するためにアゴニストが用いられる。鬱病 、不安症、攻撃性疾患、卒中、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン 病、ニューロパシー性の痛み、ＣＮＳ炎症性疾患および他の神経変性疾患のごと きＣＮＳの疾病中枢神経系の疾病、目の欠陥およびＣＮＳ発達に関する問題のご とき状態の種々の治療または予防のためにアンタゴニストを用いてもよい。 一般的には、かかるスクリーニング手順は、細胞表面に本発明受容体ポリペプ チドを発現する適当な細胞を製造することを含む。かかる細胞は、哺乳動物由来 の細胞、酵母、ショウジョウバエ（Drosophila）または大腸菌（E.coh）を包含 する。次いで、受容体発現細胞（または発現された受容体を含む細胞膜）を試験 化合物と接触させて、結合または機能的応答の刺激もしくは阻害を観察する。 アッセイの一例は、本発明テイルレス核ホルモン受容体のリガンド結合ドメイ ンおよび別の蛋白のＤＮＡ結合ドメインを含むキメラ受容体をリポーター遺伝子 アッセイにおいて用いるものであってもよい。これはシス−トランスアッセイの 形態となるであろう。かかるキメラ受容体の一例は、配列番号：２のアミノ酸残 基１０４から３８５までまたは８３から３８５までに対応するポリペプチドを含 む。リガンド結合ドメインをイー・コリ（E.coh）ＧＳＴ−融合蛋白として直接 発現させることによりアッセイを構築してもよい。これをリガンド結合アッセイ または蛍光捕捉アッセイとして用いてもよい。 そのアッセイは候補化合物の結合を試験するだけでよく、候補化合物に直接的 または間接的に結合した標識を用いることにより、あるいは標識競争物質との競 争を用いるアッセイにおいて、受容体を有する細胞への付着を検出する。さらに 、これらのアッセイにおいて、受容体を表面に有する細胞に適する検出系を用い て、候補化合物が受容体活性化により発生するシグナルを生じるかどうかを試験 してもよい。一般的には、既知アゴニスト存在下において活性化阻害剤をアッセ イし、アゴニストによる活性化に対する候補化合物の存在の影響を観察する。 潜在的なテイルレス核ホルモン受容体アンタゴニストの例は、抗体、あるいは いくつかの場合にはオリゴヌクレオチドまたはテイルレス核ホルモン受容体のリ ガンドに密接に関連した蛋白（例えば、リガンドのフラグメント、または受容体 に結合するが応答を誘発せず、その結果受容体活性を妨害する小型分子）を包含 する。 予防および治療方法 本発明は、過剰または不十分な量のテイルレス核ホルモン受容体活性に関連す る異常な状態の治療方法を提供する。 テイルレス核ホルモン受容体活性が過剰な場合、いくつかの方法を用いること ができる。１の方法は、有効量の上記阻害剤化合物（アンタゴニスト）を医薬上 許容される担体とともに対象に投与して、テイルレス核ホルモン受容体へのリガ ンドの結合をブロックすることあるいは第２のシグナルを阻害することにより活 性化を阻害し、そのことにより異常な状態を改善することを特徴とする。 もう１つのアプローチにおいて、内在性テイルレス核ホルモン受容体と競争し てリガンドに結合する能力をやはり有している可溶性形態のテイルレス核ホルモ ン受容体ポリペプチドを投与してもよい。かかる競争物質の典型的な具体例はテ イルレス核ホルモン受容体ポリペプチドのフラグメントを含む。 さらにもう１つの方法において、発現ブロック法を用いて内在性テイルレス核 ホルモン受容体をコードしている遺伝子の発現を阻害してもよい。知られている かかる方法には、細胞内で生成した、あるいは別個に投与されたアンチセンス配 列を用いる。例えば、Oligodeoxynucleotides as Antisense Inhibitors of Gen e Expression,CRC Press,Boca Raton,FL(1988）中、OWConnor,J.Neurochem (1991)56:560を参照のこと。別法として、遺伝子とともに三重らせんを形成する オリゴヌクレオチドを提供してもよい。例えば、Lee et al.,Nucleic Acids Res (1979)6:3073;Cooney et al.,Science(1988)241:456;Dervan et al.,Science (1991)251:1360参照。これらのオリゴマーはそれ自体投与することができ、ある いは関連オリゴマーをインビボで発現させることもできる。 ティルレス核ホルモン受容体およびその活性の発現不足に関連する異常な症状 の治療には、いくつかの方法が用いられる。１の方法は、テイルレス核ホルモン 受容体を活性化する治療上有効量の化合物（すなわち上記アゴニスト）を医薬上 許容される担体とともに投与し、そのことにより異常な状態を改善することを特 徴とする。別法として、遺伝子治療を用いて、対象中の細胞によるテイルレス核 ホルモン受容体の細胞内での生成を有効ならしめてもよい。例えば、上記のごと く本発明ポリヌクレオチドを処理加工して複製欠損レトロウイルスベクターに入 れて発現するようにしてもよい。次いで、レトロウイルス発現構築物を単離し、 本発明ポリペプチドをコードしているＲＮＡを含むレトロウイルスプラスミドベ クターでトランスダクションしたパッケージング細胞中に導入して、今度はパッ ケージング細胞が目的遺伝子を含む感染性ウイルス粒子を生成するようにしても よい。これらのプロデューサー細胞を対象に投与して細胞をインビボで処理加工 して、インビボでポリペプチドを発現するようにしてもよい。遺伝子治療の概説 としては、Human Molecular Genetics,T.Strachan and A.P.Read,BIOS Scientif -ic Publishers Ltd(1986)中、第２０章、Gene Therapy and other Molecular G enetic-based Therapeutic Approaches（およびその中の引用文献）参照。もう １つのアプローチは、適当な医薬担体と混合して治療量のテイルレス核ホルモン 受容体ポリペプチドを投与することである。 処方および投与 可溶性形態のテイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドのごときペプチド、な らびにアゴニストおよびアンタゴニストペプチドまたは小型分子を、適当な医薬 担体と組み合わせて処方してもよい。かかる処方は、治療上有効量のポリペプチ ドまたは化合物、および医薬上許容される担体または賦形剤を含んでなる。かか る担体としては、セイライン、緩衝化セイライン、デキストロース、水、グリセ ロール、エタノール、およびそれらの混合物が挙げられるが、これらに限らない 。処方は投与経路に適したものとすべきであり、当業者によく知られている。さ らに本発明は、上記本発明成分の１種またはそれ以上を充填した、１個またはそ れ以上の容器を含んでなる医薬パックおよびキットにも関する。 本発明ポリペプチドおよび他の化合物を単独で使用してもよく、あるいは治療 化合物のごとき他の化合物と一緒に使用してもよい。 医薬組成物の全身投与の好ましい形態は、注射、典型的には静脈注射を包含す る。皮下、筋肉内または腹腔内のごとき他の注射経路を用いることもできる。全 身投与のための別の手段は、胆汁酸塩またはフシジン酸または他の界面活性剤の ごとき浸透剤を用いる経粘膜または経皮投与を包含する。さらに、腸溶処方また はカプセル処方がうまく処方されるならば、経口投与も可能である。これらの化 合物の投与は局所的なものであってもよく、膏薬、パスタ、ゲル等の形態であっ てもよい。 必要な用量範囲は、ペプチド、投与経路、処方の性質、対象の症状の性質、お よび担当医師の判断による。しかしながら、適当な用量は対象の体重１ｋｇあた り０．１ないし１００μｇの範囲である。しかしながら、種々の使用化合物およ び種々の投与経路のさまざまな有効性を考慮すれば、必要な用量は広範囲なもの と思われる。例えば、経口投与には静脈注射よりも多い用量が必要であると考え られる。当該分野においてよく知られた最適化のための標準的な常套的実験を用 いてこれらの用量の変更を行うことができる。 しばしば「遺伝子治療」と称される上記治療方法において、治療に使用するポ リペプチドを対象中において得ることもできる。よって、例えば、レトロウイル スプラスミドベクターを用いることにより、ポリペプチドをコードしているＤＮ ＡまたはＲＮＡのごときポリヌクレオチドを用いて対象由来の細胞をエクスビボ で処理加工してもよい。次いで、細胞を対象に導入する。 特記しないかぎり、当業者によく知られた標準的方法を用いて下記実施例を行 う。実施例は本発明を例示説明するものであり、本発明を限定するものではない 。 実施例１ イー・コリ宿主株ＳＯＬＲ（Stratagene）中のＨＧＳクローン２４３８９０を ＨＧＳから得て、２５０ｍlのLuriaブロス中で増幅した。塩化セシウム遠心分離 によりファージミドＤＮＡを精製し、蛍光色素ターミネーターサイクル配列決定 を用いるABI Prism 377 ＤＮＡシークエンサーにより配列決定した。最初にpBlu escript II SK＋ファージミドベクター（Stratagene）中のＴ７およびＴ３プロ モーターに相捕的なプライマー、次いで、得られた配列に相捕的な内部プライマ ーを用いて両鎖からヌクレオチド配列を得た。 ＨＧＳクローン２４３８９０から失われているテイルレス核ホルモン受容体遺 伝子の５’末端を、製造者の説明に従って下記の合成オリゴヌクレオチドプライ マーを用いてヒト脳Marathon-ReadyTMcDNAライブラリー（Clontech）の全体から ＰＣＲ増幅し、次いで、pCRScriptTMSK(+)（Stratagene）中にクローン化した。 ５’ＧＧＣＡＧＣＴＧＡＴＴＣＡＣＡＣＡＣＣＧＡＣＴＣＣ３’ ５’ＧＴＧＧＣＣＡＣＴＴＣＡＴＡＧＡＧＡＴＡＣＡＴＴＧＧＧ３’ 実施例２−組織分配 ＲＴ−ＰＣＲおよびTaqmanシステム（Perkin Elmer/Applied Biosystems）を 用いて、ＣＮＳおよび末梢組織におけるヒトのテイルレス核ホルモン受容体（Ｔ ＬＸ）の組織分配を調べた。脳の８つの異なる領域および１４の末梢組織からＲ ＮＡを得た。ヒトＴＬＸ配列特異的プライマーをＲＴ−ＰＣＲ用に設計し、第２ のプライマーセットをTaqman用に設計した。ＲＴ−ＰＣＲは、ＴＬＸが 大動脈、心臓、膵臓、骨格筋、精巣、前立腺、肺、腎臓、骨髄、肝臓および脂肪 組織には存在しないが、ＴＬＸが扁桃、尾形、海馬、視床、黒質、小脳、視床下 部、前頭皮質および脊髄に存在することを示した。Taqmanのデータは、ＴＬＸが 膵臓、肺、肝臓、脾臓および腸には存在しないが、ＴＬＸが扁桃、海馬、小脳、 側座核、線条、果核、海馬傍回、内側前回に存在することを示した。ＴＬＸは、 胃において、脳の領域よりも約２オーダー低いレベルで存在していた。 DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION Tailless Nuclear Hormone Receptor (TLX Receptor) Field of the Invention The present invention relates to newly identified polynucleotides, polypeptides encoded thereby, and the use of such polynucleotides and polypeptides. And their manufacture. More specifically, the polynucleotides and polypeptides of the present invention are related to nuclear hormone receptors (hereinafter referred to as tailless nude hormone receptors (TLX)). The invention also relates to inhibiting or activating the action of such polynucleotides and polypeptides. Background of the Invention Nuclear hormone receptors are a large family of proteins found in all vertebrates and invertebrates whose function is to modulate gene transcription (Parker (1993) Curr.Op. Cell. Biol. 5: 499-504, Laudet et al, (1992) EMBO J. 11: 1003-1 013, Mangelsdorf et al, 1995 Cell 83: 835-839, Loprs de Silva amd Burbach (199 5) Trends Neurosci. 18: 542-548). They have a similar domain structure including a DNA binding domain and a ligand binding domain. On the basis of structure relevance, these receptors can be divided into subfamilies such as steroid hormone receptors, thyroid hormone receptors and retinoic acid receptors, but on a large scale, many receptors lacking a known ligand. There are also an increasing number of families, which are called orphan receptors. DNA binding domains can interact with cis-acting elements of specific target genes in response to chemical signals and / or signal transduction pathways. In classical receptors, such as steroid hormone receptors, signals from the endocrine system, such as estradiol, testosterone, and progesterone, can be transduced into cellular responses by direct interaction of the hormone with the ligand-binding domain of these proteins . Other natural ligands for some of these receptors have been identified, including all-trans retinoic acid, 1,25-dihydroxyvitamin D3, 3,5,3'-1-triiodothyronine and 15 -Deoxy-Δ 12,14 -Prostaglandin J Two (Mangelsdorf et al, 1995 Cell 83: 835-839). TLX, also known as tailless (Monaghan et al, 1995, Development, 121: 839-853, Pigoni et al, 1990, Cell, 62: 151-163), is known from Drosophila (Pignoni et al, 1990), mice (Tu et al, 1994, Nature 370: 375-379, Monaghan et al, 1995), Xenopus laevis (Holleman et al, 1996, GenBank accession number U67886) and chickens (Yu et al, 1994). TLX is expressed in the end of the developing Drosophila embryo (Pignoni et al, 1990) and in the developing chicken and mouse forebrain (Yu et al, 1994, Monaghan et al, 1995). Loss of tailless function leads to the absence of all cerebral neuroblasts (Younossi-Hartenstein et al, 1997, Developmental Biology 182: 270-283). Tailless gene knockout mice have been published (Monaghan et al, 1997, Nature 390: 515-517), and mice have a defective limbic system, are overly excitable, and have an aggressive phenotype. It is shown. Homozygous mutant mice can grow at birth but have small olfactory brain and limbic structures, including the olfactory cortex, the hyposmotic cortex and the internal olfactory cortex, and small tonsils and dentate gyrus. Modification of TLX / tailless function has been implicated in the CNS, including depression, anxiety, aggressive disease, stroke, multiple sclerosis, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, neuropathic pain, CNS inflammatory diseases and other neurodegenerative diseases. Diseases can change, but are not limited to, problems with eye defects and CNS development. Recently, and after the priority date of the present invention, Jackson et al. (Royal Free Hospital, London) published the human TLX gene sequence (GenBank accession number Y13276). There continues to be a need for the identification and characterization of additional receptors that can play a role in therapy. SUMMARY OF THE INVENTION In one aspect, the invention relates to tailless nuclear hormone receptor polypeptides and recombinant materials and methods for their production. Another aspect of the invention relates to methods of using tailless nuclear hormone receptor polypeptides and polynucleotides. Such uses are particularly useful for diseases of the CNS, such as depression, anxiety, aggressive disease, stroke, multiple sclerosis, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, neuropathic pain, CNS inflammatory diseases and other neurodegenerative diseases. It includes the treatment of systemic diseases, eye defects and problems with CNS development. In yet another aspect, the invention relates to methods for identifying antagonists and agonists using the materials provided by the invention, and methods for treating tailless nuclear hormone receptor imbalance-related conditions using the identified compounds. Yet another aspect relates to a diagnostic assay for the detection of a disease associated with inappropriate tailless nuclear hormone receptor activity or level. BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 shows the nucleotide sequence SEQ ID NO: 1 and the deduced amino acid sequence SEQ ID NO: 2 of the human tailless nuclear hormone receptor. Description of the invention Definition The following definitions are provided to facilitate understanding of certain terms used frequently herein. "Tailless nuclear hormone receptor" generally refers to a polypeptide having the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 2, or an allelic variant thereof. "Receptor activity" or "biological activity of a receptor" refers to the metabolic or physiological function of the tailless nuclear hormone receptor, and is similar or improved activity or those with reduced undesirable side effects. Activity. Also included are the antigenic and immunogenic activities of the tailless nuclear hormone receptor. "Tailless nuclear hormone receptor polypeptide" refers to a polypeptide having an amino acid sequence sufficiently similar to a tailless nuclear hormone receptor sequence, preferably a polypeptide that exhibits at least one such receptor activity. "Tailless nuclear hormone receptor gene" refers to a polynucleotide having the nucleotide sequence set forth in SEQ ID NO: 1 or allelic variants thereof and / or their complements. A "tailless nuclear hormone receptor polynucleotide" is at least a nucleotide sequence encoding a tailless nuclear hormone receptor polypeptide or a fragment thereof, or a nucleotide sequence encoding the polypeptide of SEQ ID NO: 2 or a corresponding fragment thereof. Hybridization under conditions in which the nucleotide sequence has 92% identity or has sufficient identity to the nucleotide sequence contained in SEQ ID NO: 1 to be usable for amplification or to be usable as a probe or marker Refers to a polynucleotide containing a nucleotide sequence. The term `` antibody "Includes polyclonal and monoclonal antibodies, chimeric, single chain, and humanized antibodies, as well as Fab fragments, and also encompasses the products of Fab or other immunoglobulin expression libraries. " Isolation "Means" changed from its natural state "by the hand of man", that is, it has been changed or removed from its original environment, or both, if it occurs in nature. For example, a polynucleotide or polypeptide is not `` isolated '' when it is present in an organism in its natural state, but when the same polynucleotide or polypeptide is separated from a naturally occurring substance. "Isolated," a term used herein. " Polynucleotide "Generally means any polyribonucleotide or polydeoxyribonucleotide, which may be unmodified RNA or DNA, or modified RNA or DNA. "Polynucleotide" refers to DNA, single-stranded and double-stranded DNA, DNA that is a mixture of single-stranded and double-stranded regions or a mixture of single-stranded, double-stranded and triple-stranded regions. RNA, which is a mixture of single-stranded and double-stranded regions, single-stranded or more typically double-stranded or triple-stranded, or a mixture of single-stranded and double-stranded regions; A hybrid molecule, including but not limited to DNA and RNA. Further, "polynucleotide" means a triple-stranded region comprising RNA or DNA, or both RNA and DNA. DNA or RNA having a backbone modified for stability or for other reasons is included in the term "polynucleotide" herein. Unusual bases, such as inosine, or tritylated bases, are among the "modified" bases. As various modifications have been made to DNA and RNA, "polynucleotide" typically refers to such chemically, enzymatically or metabolically modified forms of the polynucleotide as found in nature, and Includes the chemical forms of DNA and RNA characteristic of viruses and cells. "Polynucleotide" also embraces short polynucleotides, often referred to as oligonucleotides. " Polypeptide "Means a peptide or protein comprising two or more amino acids joined to each other by peptide bonds or modified peptide bonds. "Polypeptide" usually means both short chains, also referred to as, for example, peptides, oligopeptides and oligomers, and longer chains, generally referred to as proteins. Polypeptides may contain amino acids different from the 20 amino acids encoded by the gene. "Polypeptides" include those modified by natural processes such as processing and other post-translational modifications, but also by chemical modification techniques well known to those skilled in the art. Such modifications are well described in basic reference books and more detailed articles and in numerous research literatures, which are well known to those skilled in the art. Modifications can occur at any site in the polypeptide, such as the peptide backbone, amino acid side chains, and the amino or carboxyl terminus. It will be appreciated that the same type of modification may be present at the same or varying degrees at several sites in the polypeptide. Polypeptides can also contain many types of modifications. Polypeptides may be branched as a result of ubiquitination, and polypeptides may be cyclic, with or without branching. Cyclic, branched; and cyclic and branched polypeptides may result from post-translation natural processes or may be made by synthetic methods. Modifications include acetylation, acylation, ADP-ribosylation, amidation, covalent attachment of flavin, covalent attachment of a heme moiety, covalent attachment of nucleotides or nucleotide derivatives, covalent attachment of lipids or lipid derivatives, phosphotidylinositol Covalent bond, cross-link, cyclization, disulfide bond formation, demethylation, cross-link covalent bond formation, cystine formation, pyroglutamate formation, formylation, gamma-carboxylation, glycosylation, GPI anchor formation, hydroxylation, iodination , Methylation, myristoylation, oxidation, proteolytic processing, phosphorylation, prenylation, racemization, glycosylation, lipid binding, sulfation, gamma-carboxylation of glutamic acid residues, hydroxylation and ADP-ribosylation, selenoylation , Sulfate, arginyl transfer The addition of amino acids to proteins of NA-mediated, as well as such as ubiquitination. For example, Proteins-Structure and Molecular Properties, 2nd edition, TECreighton, WH Freeman and Company, New York (1993) and Posttranslational Covalent Modification of Proteins, edited by BC Johnson, edited by Academic Press, New York (1983), Wold, F., Post-translational Protein. Modifications: Perspective and Prospects, pp. 1-12; Seifter et al., Meth. Enzymol. 182: 626-646 (1990) and Rattan et al., Protein Synthesis: Posttranslational Modifications and Aging, Ann. N. YAcad. Sci. 663: 48-62 (1992). As used herein, " Variant The term "is a polynucleotide or polypeptide that differs from a reference polynucleotide or polypeptide, respectively, but retains essential properties. A typical variant of a polynucleotide differs in nucleotide sequence from another, reference polynucleotide. Changes in the nucleotide sequence of the variant may or may not change the amino acid sequence of the polypeptide encoded by the control polynucleotide. As discussed below, nucleotide changes result in amino acid substitutions, additions, deletions, fusions and truncations in the polypeptide encoded by the reference sequence. A typical variant of a polypeptide differs in amino acid sequence from another, reference polypeptide. Generally, differences are limited so that the sequences of the control polypeptide and the variant are closely similar overall and, in many regions, identical. Variant and control polypeptides can have an altered amino acid sequence by one or more substitutions, additions, or deletions occurring in any combination. The substituted or inserted amino acid residue may or may not be one encoded by the genetic code. The variant of the polynucleotide or polypeptide may be naturally occurring, for example, an allelic variant, or may be a variant that is not known to occur naturally. Non-naturally occurring variants of polynucleotides and polypeptides can be made by mutagenesis techniques or by direct synthesis. " identity "Is a measure of the identity of nucleotide or amino acid sequences. Generally, the sequences are juxtaposed to give the largest match. The term "identity" per se has an art-recognized meaning and can be calculated using published methods. For example, Computational Molecular Biology, Lesk, A. M. Ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W, Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A. M. And Griffin, H. G. Ed., Human Press, New Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinie, G. Academic Press, 1987; Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. And Devereux, J. Ed., M. Stockton Press, New York, 1991. There are many methods for determining the identity between two polynucleotide or polypeptide sequences, but the term "identity" is well known to those skilled in the art. (Carillo, H. And Lipman, D. , SIAM J. Ap phied Math. , 48: 1073 (1988)). Methods commonly used to determine identity or similarity between two sequences are described in Guide to Huge Computers, Martin J .; Bishop, ed. , Academic Press, San Diego, 1994 and Carillo, H. And Lipman, D. , SIAM J. Apped math. , 48: 1073 (1988), but not limited thereto. Methods for determining identity and similarity are codified in publicly available computer programs. A preferred computer program method for determining identity and similarity between two sequences is the GCS Program Package (Devereux, J .; Et al., Nucleic Acids Research 12 (1): 387 (1984), BLASTPN, BLASTN, and FASTA (Atschul, S. F. J. Molec. Biol (1990) 215: 403)), but is not limited thereto. The present invention relates to novel tailless nuclear hormone receptor polypeptides and polynucleotides, which are related to the mouse orphan nuclear receptor tailless by amino acid sequence identity. The invention particularly relates to tailless nuclear hormone receptors having the nucleotide and amino acid sequences shown in FIG. 1 (SEQ ID NOs: 1 and 2). Polypeptides of the Invention A tailless nuclear hormone receptor polypeptide is a polypeptide of SEQ ID NO: 2 (particularly a mature polypeptide); and at least 99% identical to the polypeptide of SEQ ID NO: 2 or a significant portion thereof. Includes sexual tailless nuclear hormone receptor polypeptides. The tailless nuclear hormone receptor polypeptide may be in the form of the "mature" protein or may be part of a larger protein such as a fusion protein. It is often advantageous to include additional amino acid sequences, including secretory or leader sequences, prosequences, sequences that facilitate purification such as multiple histidine residues, or additional sequences for stability during recombinant production. It is. Fragments of biologically active tailless nuclear hormone receptor polypeptides are also included in the invention. A fragment is a polypeptide having an amino acid sequence that entirely is the same as part, but not all, of the amino acid sequence of the aforementioned tailless nuclear hormone receptor polypeptides. In a tailless nuclear hormone receptor polypeptide, a fragment may be "free standing" or may be included within a larger polypeptide, wherein the fragment comprises a portion or region. Has formed. Most preferably, it is contained in a larger polypeptide as a single continuous region. A typical example of the polypeptide fragment of the present invention is, for example, a fragment consisting of amino acids 1 to 20, 21 to 40, 41 to 60, 61 to 80, 81 to 100 and 101 to the end of the tailless nuclear hormone receptor polypeptide. Is included. In this sense, "about" includes, on one or both ends, a range that is several, five, four, three, two, or one more or less than the number shown. Preferred fragments include, for example, a series of residues containing the amino terminus or a series of residues containing the carboxy terminus, or two series of residues containing one amino terminus and the other containing the carboxy terminus. Includes truncated polypeptides having the amino acid sequence of a tailless nuclear hormone receptor polypeptide except that the group is deleted. Also, fragments characterized by structural or functional attributes, such as alpha helices and alpha helix forming regions, beta sheets and beta sheet forming regions, turns and turn forming regions, coils and coil forming regions, hydrophilic regions, hydrophobic regions Also preferred are fragments comprising an alpha-amphiphilic region, a beta-amphiphilic region, a variable region, a surface forming region, a substrate binding region, and a high antigenic index region. Also preferred are biologically active regions that mediate receptor activity, such as fragments with similar or improved activity, or with reduced undesirable activity. Also included are fragments that are antigenic or immunogenic in animals, especially humans. Thus, a polypeptide of the invention has a polypeptide having an amino acid sequence that is at least 99% identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 or a polypeptide having at least 99% identity to the corresponding fragment of SEQ ID NO: 2 Include fragments. Preferably, all of these polypeptides retain the biological activity of the receptor, including antigenic activity. Variants of the above sequences and fragments are also included in this group. Preferred variants are those that are altered by conservative amino acid substitutions, ie, those that are substituted by amino acids having similar characteristics. Typical such substitutions are between Ala, Val, Leu and Ile: between Ser and Thr; between Asp and Glu; between Asn and Gln; and between the basic residues Lys and Arg; or between the aromatic residues Phe and Tyr. It is in. Particularly preferred are variants in which several, 5 to 10, 1 to 5, or 1 to 2 amino acids have been substituted, deleted or added in any combination. The tailless nuclear hormone receptor polypeptide of the present invention can be produced by any appropriate method. Such polypeptides include isolated natural polypeptides, recombinantly-processed polypeptides, synthetically-processed polypeptides, or polypeptides by a combination of these methods. Means for producing such polypeptides are well understood in the art. Polynucleotides of the Invention Another aspect of the present invention relates to isolated polynucleotides encoding tailless nuclear hormone receptor polypeptides and closely related polynucleotides. As shown by the results of sequencing the cDNA encoding the human tailless nuclear receptor hormone receptor, the tailless nuclear hormone receptor of the present invention is structurally related to other proteins of the nuclear hormone receptor. The cDNA sequence has 385 amino acids (presumed molecular weight 42. 6 kDa). The tailless nuclear hormone receptor in FIG. 1 (SEQ ID NO: 2) is approximately 98 amino acids at 385 amino acid residues relative to the mouse tailless nuclear hormone receptor (Monaghan et al, Development, 121: 839-853, 1995). % Identity (when using BLAST). The tailless nuclear hormone receptor gene in FIG. 1 (SEQ ID NO: 1) is approximately 1158 nucleotide residues relative to the mouse tailless nuclear hormone receptor (Monaghan et al, Development, 121: 839-853, 1995). It has 91% identity (BLAST). The tailless nuclear hormone receptor of the present invention differs from the sequence of Jackson et al. (GenBank accession number Y13276) at one position in the coding sequence, position 268, and has a T instead of a C at this position. When this is translated, the 90th amino acid sequence becomes tyrosine instead of histidine. This difference can be caused by polymorphic mutations or errors, such as PCR errors in gene cloning to obtain the sequence. TLXs from other species such as frogs, mice, and chickens have a C at the same position as the Jackson sequence. Expression sequence tag (EST) analysis (Adams, M. et al.) From a cDNA library derived from mRNA in human tonsillar cells. D. , et al. Science (1991) 252: 1651-1656; Adams, M. D. et al. , Nature (1992) 355: 632-634; Adams, M. D. , et al. , Nature (1995) 377 Supp: 3-17 4) may be used to obtain one polynucleotide of the invention encoding a tailless nuclear hormone receptor. The polynucleotide of the present invention can be obtained from a natural source such as a genomic DNA library, or can be synthesized using well-known and commercially available means. The nucleotide sequence encoding the takeless nuclear hormone receptor polypeptide may be identical over its entire length to the coding sequence shown in FIG. 1 (SEQ ID NO: 1), or may encode the polypeptide of SEQ ID NO: 2. It may be a degenerate form of this nucleotide sequence, or it may be highly identical to the nucleotide sequence encoding the polypeptide of SEQ ID NO: 2. Preferably, a polynucleotide of the invention is at least 92% identical, preferably at least 95% identical, more preferably at least 97% identical, most preferably at least at least 92% identical to the nucleotide sequence encoding the tailless nuclear hormone receptor polypeptide. Comprises a nucleotide sequence that is 99% identical, or is at least 92% identical, preferably at least 95% identical, more preferably at least 97% identical, most preferably, to the coding nucleotide sequence shown in Figure 1 (SEQ ID NO: 1). Comprises a nucleotide sequence that is at least 99% identical, or is at least 92% identical, preferably at least 95% identical, more preferably at least 97% identical to the nucleotide sequence encoding the polypeptide of SEQ ID NO: 2. Nu Including the Reochido array. When the polynucleotide of the present invention is used for recombinant production of a tailless nuclear hormone receptor polypeptide, the polynucleotide may itself comprise the coding sequence of the mature polypeptide or a fragment thereof; And the coding sequence of the mature polypeptide or fragment in the open reading frame. Other coding sequences include, for example, leader or secretory sequences, coding sequences encoding pre, pro, prepro protein sequences, or other fusion peptide moieties. For example, it may encode a marker sequence that facilitates purification of the fusion polypeptide. In one preferred embodiment of this aspect of the invention, the marker sequence is a pQE vector (Qiagen, Inc. Hex-histidine peptide as provided in (Gentz et al., Proc. Natl. Ac ad. Sci. , USA, 86: 821-824 (1989)) or the HA tag (Wilson et al., Cell, 37: 767 (1984)). The polynucleotides of the present invention also include, but are not limited to, structural genes and native sequences that regulate gene expression. Polynucleotides may contain non-coding 5 'and 3' sequences, such as, for example, transcribed untranslated sequences, termination signals, ribosome binding sites, sequences that stabilize mRNA. A polynucleotide encoding a tailless nuclear hormone receptor or a variant thereof having the amino acid sequence shown in FIG. 1 (SEQ ID NO: 2) is a particularly preferred embodiment of the present invention. More preferred embodiments are polynucleotides encoding a tailless nuclear hormone receptor variant comprising the amino acid sequence of the tailless nuclear hormone receptor polypeptide of Table 2 (SEQ ID NO: 2), wherein several, five to ten, , 1 to 5, 1 to 3, 1 to 2, or 1 amino acid residue in any combination, substitution, deletion or addition. A further preferred embodiment of the present invention is at least 92% identical over its entire length to a polynucleotide encoding a tailless nuclear hormone receptor polypeptide having the amino acid sequence shown in FIG. 1 (SEQ ID NO: 2). Certain polynucleotides, and polynucleotides that are complementary to such polynucleotides. Most preferred are polynucleotides that include a region that is at least 92% identical over its entire length to a polynucleotide encoding a tailless nuclear hormone receptor polypeptide of the deposited cDNA human cDNA, and polynucleotides complementary thereto. In this regard, polynucleotides at least 97% identical are highly preferred, those with at least 98-99% are most highly preferred, and those with at least 99% are most preferred. The invention further relates to polynucleotides that hybridize to the above sequences. In this regard, the present invention is particularly directed to polynucleotides that hybridize under stringent conditions to the above polynucleotides. As used herein, the term “stringent conditions” means that hybridization occurs when there is at least 95%, preferably at least 97%, identity between the sequences. The polynucleotide of the present invention, which is sufficiently identical to the nucleotide sequence contained in SEQ ID NO: 1 or a fragment thereof, can be used as a hybridization probe for cDNA and genomic DNA to encode full-length cDNA and tailless nuclear hormone receptor. Genomic clones, or cDNA and genomic clones of other genes having sequences with high similarity to the tailless nuclear hormone receptor gene. Such hybridization methods are known to those skilled in the art. Typically, these nucleotide sequences have 70%, preferably 80%, more preferably 90% identity to the control. Generally, a probe contains at least 15 nucleotides. Preferably, such probes have at least 30 nucleotides and may have at least 50 nucleotides. Particularly preferred probes contain a range of 30 to 50 nucleotides. The polynucleotides and polypeptides of the present invention may be used as research reagents for animal and human diseases and as materials for therapy and diagnosis. Vectors, Host Cells, Expression The present invention also relates to polynucleotides or vectors containing the polynucleotides of the present invention, host cells genetically engineered with the vectors of the present invention, and the production of polypeptides of the present invention by recombinant techniques. A cell-free translation system may be used for the production of such a protein using RNA derived from the DNA construct of the present invention. To produce a recombinant, the host cell can be genetically engineered to incorporate an expression system or a portion thereof, or a polynucleotide of the present invention. Introduction of polynucleotides into host cells is described, for example, in Davis et al., Basic Methods in Molecular Biology (1986); Sambrook et al., Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Second Edition; Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Press. Can be performed by methods described in many standard laboratory manuals, such as Spring Harbor, New York (1989), for example, calcium phosphate transfection, DEAE-dextran mediated transfection, transvection, microinjection, positive injection There are ionic lipid-mediated transfection, electroporation, transduction, scrape loading, ballistic introduction and infection. Representative of suitable hosts include bacterial cells, such as Streptococci, Staphylococi, E. coli (E. E. coli), Streptomyces and Bacillus subtiis cells; fungal cells such as yeast cells and Aspergillus cells; insect cells such as Drosophila S2 and Spodoptera Sf9 cells; animal cells such as CHO, C OS, HeLa, C127, 3T3, BHK, 293 and Bows melanoma cells; and plant cells. Numerous expression systems can be used. Such systems include chromosomal, episomal and viral derived vectors, such as bacterial plasmid derived, bacteriophage derived, transposon derived, yeast episomal derived, insertion element derived, yeast chromosomal element derived such as baculovirus, papovavirus such as SV40, vaccinia virus, Includes vectors derived from viruses such as adenovirus, fowlpox virus, pseudorabies virus and retrovirus, and vectors derived from the combination thereof, such as vectors derived from plasmids and bacteriophage genetic elements, such as cosmids and phagemids. I do. The expression system may contain control regions that regulate as well as generate expression. In general, any system or vector suitable to maintain, extend or express a polynucleotide in a host to express the polypeptide may be used. Suitable DNA sequences can be inserted into the expression system by a variety of well-known and conventional techniques, such as those described in, for example, Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual (supra). An appropriate secretion signal may be included in the desired polypeptide to secrete the translated protein into the endoplasmic reticulum lumen, the periplasmic space, or the extracellular environment. These signals may be native to the polypeptide or they may be heterologous signals. When expressing a tailless nuclear hormone receptor polypeptide for a screening assay, it is generally preferred to produce the polypeptide on the cell surface. In this case, the cells may be collected before use in the screening assay. When screening for a tailless nuclear hormone receptor polypeptide in a medium, the medium can be recovered and the polypeptide recovered and purified. If produced intracellularly, the cells must first be lysed and then the polypeptide recovered. Tailless nuclear hormone receptor polypeptides can be recovered and purified from recombinant cell culture by well known methods, including, for example, ammonium sulfate or ethanol precipitation, acid extraction, anion or cation exchange chromatography, phosphocellulose chromatography. , Hydrophobic interaction chromatography, affinity chromatography, hydroxylapatite chromatography and lectin chromatography. Most preferably, high performance liquid chromatography is used for purification. If the polypeptide denatures during isolation and / or purification, well-known techniques for protein regeneration can be used to regain the active conformation. Diagnostic Assays The present invention also relates to the use of the present tailless nuclear hormone receptor polynucleotides as diagnostic reagents. Detection of a mutant form of the tailless nuclear hormone receptor gene associated with dysfunction is a means for diagnosing a disease resulting from reduced, over- or altered expression of the tailless nuclear hormone receptor or susceptibility to such disease. Will provide. Individuals having a mutation in the tailless nuclear hormone receptor gene can be detected at the DNA level by various methods. Diagnostic nucleic acids may be obtained from cells of a subject, such as bone, blood, urine, saliva, tissue biopsy or autopsy material. Genomic DNA can be used directly for detection or can be amplified enzymatically by using PCR or other amplification methods prior to analysis. RNA or cDNA can be used in a similar manner. Deletions and insertions can be detected by a change in the size of the amplification product when compared to the normal genotype. Point mutations can be identified by hybridizing the amplified DNA to a labeled tailless nuclear hormone receptor polynucleotide sequence. Preferably, perfectly matched sequences can be distinguished from mismatched duplexes by RNase digestion or by differences in melting temperatures. DNA sequence differences can also be detected by detecting a change in electrophoretic mobility of the DNA fragment in the gel, with or without denaturing agents, or by direct DNA sequencing. For example, Meyers et. al. Science, 230: 1242 (1985). Sequence changes at specific locations can also be revealed by nuclease protection assays, such as RNase and S1 protection or chemical cleavage methods. For example, Cotton et al. Proc. Natl. Acad. Sci. , USA, 85: 4397-4401 (1985). The diagnostic assay detects a mutation in the tailless nuclear hormone receptor gene by the methods described herein to determine depression, anxiety, aggressive disease, stroke, multiple sclerosis, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, neuropathic Methods of diagnosing or determining susceptibility to diseases of the CNS, such as pain, CNS inflammatory diseases and other neurodegenerative diseases, diseases of the central nervous system, eye defects and problems with CNS development. In addition, methods that include examining abnormally elevated or decreased tailless nuclear hormone receptor polypeptide or tailless nuclear hormone receptor mRNA levels in a sample from the subject can provide for depression, anxiety, aggressive disease, stroke, multiple sclerosis. CNS diseases such as Alzheimer's disease, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, neuropathic pain, CNS inflammatory diseases and other neurodegenerative diseases can be diagnosed, diseases of the central nervous system, eye defects and problems with CNS development. Decreased or increased expression can be measured using any of the methods well known in the art for quantifying polynucleotides, such as PCR, RT-PCR, RNase protection, Northern blotting, and other hybridization methods. Assays that can be used to determine levels of a protein, such as tailless nuclear hormone receptor, in a sample derived from a host are well-known to those of skill in the art. Such assays include radioimmunoassays, competitive binding assays, Western blot analysis, and ELISA assays. Chromosome assays The nucleotide sequences of the present invention are also valuable for chromosome identification. The sequences of the present invention can target and hybridize to specific locations on individual human chromosomes. Mapping important parts to chromosomes according to the present invention is an important first step in linking their sequences to gene-related diseases. Once a sequence has been mapped to a precise chromosomal location, the physical location of the sequence on the chromosome can be correlated with genetic map data. Such data is, for example, V. Found in McKusick, Mendelian Inheritance in Man (available online at Johns Hopkins University Weich Medical Library). The association (co-inheritance of physically close genes) is then analyzed to identify the relationship between the gene mapped to the same chromosomal region and the disease. Differences in the cDNA or genomic sequence between affected and unaffected individuals can also be determined. If the mutation is observed in some or all of the affected individuals but not in normal individuals, then the mutation may be responsible for the disease. Chromosomal localization indicated that the gene was located at 6q21 and was in a region that maps to translocation associated with CNS disease. This localization was confirmed by Jackson et al. (See above). Antibodies The polypeptides of the invention or variants thereof, or cells expressing them, can be used as an immunogen to produce antibodies immunospecific for a tailless nuclear hormone receptor polypeptide. As used herein, "immunospecific" means that the antibody has a substantially greater affinity for the polypeptide of the present invention than for other related polypeptides in the prior art. Antibodies raised against the polypeptides of the present invention can be obtained by administering fragments, analogs or cells bearing the polypeptides or epitopes, preferably to non-human animals, using conventional laboratory techniques. Monoclonal antibodies can be prepared using techniques well known to those skilled in the art that provide antibodies produced by continuous cell line cultures. For example, Kohler, G. and Milstein, C. , Nature, 256: 495-497 (1975); Kozbor et al. Immunology Today, 4:72 (1983); Col e et al. Monodonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R Liss, Inc. , Pp. 77-96 (1985). The techniques described for the production of single-chain antibodies (US Pat. No. 4,946,778) can be applied to produce single-chain antibodies to a polypeptide of the invention. In addition, antibodies such as humanized antibodies may be expressed using transgenic mice or other organisms, for example, other mammals. Using the above antibodies, clones expressing the polypeptide may be isolated or identified, or the polypeptide may be purified by affinity chromatography. Using antibodies against tailless nuclear hormone receptor polypeptides, among others, depression, anxiety, aggressive disease, stroke, multiple sclerosis, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, neuropathic pain, CNS inflammatory disease and other neurological disorders Diseases of the CNS, such as degenerative diseases Diseases of the central nervous system, eye defects and problems with CNS development may be treated. Vaccine Another aspect of the present invention relates to a method of inducing an immunological response in a mammal, comprising the step of producing a tailless nuclear hormone receptor or a fragment thereof sufficient to generate an antibody and / or a T cell immune response. When inoculated into mammals, the CNS, such as depression, anxiety, aggressive disease, stroke, multiple sclerosis, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, neuropathic pain, CNS inflammatory disease and other neurodegenerative diseases, among others, Diseases Protecting the animal from diseases of the central nervous system, eye defects and problems with CNS development. Another aspect of the invention pertains to a method of inducing an immunological response in a mammal, the method comprising the step of expressing a tailless nuclear hormone receptor polypeptide via a vector that expresses the tailless nuclear hormone receptor polypeptide in vivo. Delivering and inducing such immunological responses to raise antibodies that protect the animal from disease. A further aspect of the invention relates to immunological / vaccine formulations (compositions), which, when introduced into a mammalian host, elicit a mammalian immunological response to a tailless nuclear hormone receptor polypeptide. I do. The composition comprises a tailless nuclear hormone receptor polypeptide or a tailless nuclear hormone receptor gene. The vaccine formulation may further include a suitable carrier. Since the tailless nuclear hormone receptor polypeptide may be degraded in the stomach, it is preferably administered parenterally (including subcutaneous, intramuscular, intravenous, intradermal etc. injection). Formulations suitable for parenteral administration include aqueous or non-aqueous sterile injectable solutions which may contain antioxidants, buffers, bacteriostatic agents and solutes which render the formulation isotonic with the blood of the recipient; Or sterile aqueous or non-aqueous suspensions which may contain a thickening agent. Formulations may be provided in single or multiple doses in containers, for example, in sealed ampules and vials, and may require only the addition of a sterile liquid carrier immediately before use. It may be stored in a dry state. Vaccine formulations may also include adjuvant systems to increase the immunogenicity of the formulation, such as oil-in-water and other systems known in the art. The dose will depend on the activity of the particular vaccine and can be readily determined by routine experimentation. Screening Assays The tailless nuclear hormone receptor of the present invention may be used in a screening process for compounds that bind to and activate (agonist) or inhibit (antagonist) the receptor polypeptide of the present invention. Thus, the polypeptides of the invention may be used to assess the binding of small molecule substrates to ligands, for example, in cells, cell-free preparations, chemical libraries and natural product mixtures. These substrates and ligands may be natural substrates and ligands, or may mimic structure or function. Cohgan et al. , Current Protocols in Immunology 1 (2): Chapter 5 (1991). Tailless nuclear hormone receptor proteins are widely found in mammalian hosts, are involved in many biological functions, and are involved in many diseases. It is therefore desirable to find compounds and agents that stimulate tailless nuclear hormone receptors or, alternatively, compounds or agents that can inhibit tailless nuclear hormone receptors. In general, diseases of the CNS such as depression, anxiety, aggressive disease, stroke, multiple sclerosis, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, neuropathic pain, CNS inflammatory diseases and other neurodegenerative diseases Agonists are used to treat or prevent conditions such as diseases of the eye, eye defects and problems with CNS development. CNS diseases such as depression, anxiety, aggressive diseases, stroke, multiple sclerosis, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, neuropathic pain, CNS inflammatory diseases and other neurodegenerative diseases, diseases of the central nervous system, Antagonists may be used for various treatments or prevention of conditions such as defects and problems with CNS development. Generally, such screening procedures involve producing suitable cells that express the receptor polypeptide of the present invention on the cell surface. Such cells include cells from mammals, yeast, Drosophila or E. coli (E. coh). The receptor-expressing cell (or cell membrane containing the expressed receptor) is then contacted with a test compound to observe binding or stimulation or inhibition of a functional response. One example of an assay may use a chimeric receptor comprising a ligand binding domain of a tailless nuclear hormone receptor of the present invention and a DNA binding domain of another protein in a reporter gene assay. This will be in the form of a cis-trans assay. One example of such a chimeric receptor comprises a polypeptide corresponding to amino acid residues 104 to 385 or 83 to 385 of SEQ ID NO: 2. The ligand binding domain is designated E. coli (E. coh) Assays may be constructed by direct expression as a GST-fusion protein. This may be used as a ligand binding assay or a fluorescence capture assay. The assay only needs to test the binding of the candidate compound, using a label directly or indirectly bound to the candidate compound, or in an assay that uses competition with a labeled competitor, to bind to cells having the receptor. Detect adhesion. In addition, in these assays, one may test whether the candidate compound produces a signal generated by receptor activation, using a detection system suitable for cells bearing the receptor. Generally, activation inhibitors are assayed in the presence of a known agonist and the effect of the presence of the candidate compound on activation by the agonist is observed. Examples of potential tailless nuclear hormone receptor antagonists include antibodies, or, in some cases, oligonucleotides or proteins closely related to the ligand of the tailless nuclear hormone receptor (eg, a fragment of the ligand, or binding to the receptor). But does not elicit a response, and thus interferes with receptor activity). Methods of Prevention and Treatment The present invention provides methods of treating abnormal conditions associated with excessive or insufficient amounts of tailless nuclear hormone receptor activity. If the tailless nuclear hormone receptor activity is in excess, several methods can be used. One method comprises administering to the subject an effective amount of the inhibitor compound (antagonist) together with a pharmaceutically acceptable carrier to block binding of the ligand to the tailless nuclear hormone receptor or to inhibit a second signal. And thereby inhibits activation, thereby improving abnormal conditions. In another approach, a soluble form of a tailless nuclear hormone receptor polypeptide that also has the ability to compete with the endogenous tailless nuclear hormone receptor and bind the ligand may be administered. Typical examples of such competitors include fragments of the tailless nuclear hormone receptor polypeptide. In yet another method, expression of the gene encoding endogenous tailless nuclear hormone receptor may be inhibited using an expression blocking method. Known such methods employ an antisense sequence generated intracellularly or administered separately. For example, in Oligodeoxynucleotides as Antisense Inhibitors of Gene Expression, CRC Press, Boca Raton, FL (1988), OWConnor, J. See Neurochem (1991) 56: 560. Alternatively, oligonucleotides that form triple helices with the gene may be provided. For example, Lee et al. , Nucleic Acids Res (1979) 6: 3073; Cooney et al. , Science (1988) 241: 456; Dervan et al. , Science (1991) 251: 1360. These oligomers can be administered as such, or the relevant oligomers can be expressed in vivo. Several methods are used to treat abnormal conditions associated with an under-expression of the Tirles nuclear hormone receptor and its activity. One method comprises administering a therapeutically effective amount of a compound that activates a tailless nuclear hormone receptor (ie, the above-described agonist) together with a pharmaceutically acceptable carrier, thereby ameliorating the abnormal condition. . Alternatively, gene therapy may be used to effect intracellular production of tailless nuclear hormone receptor by cells in the subject. For example, as described above, the polynucleotide of the present invention may be processed and put into a replication-defective retrovirus vector for expression. The retroviral expression construct is then isolated and introduced into packaging cells transduced with a retroviral plasmid vector containing the RNA encoding the polypeptide of the present invention, which in turn allows the packaging cells to become infected with the gene of interest. Viral virus particles may be generated. These producer cells may be administered to a subject and the cells processed and processed in vivo to express the polypeptide in vivo. For an overview of gene therapy, see Human Molecular Genetics, T. Strachan and A. P. Read, BIOS Scientif-ic Publishers Ltd (1986), Chapter 20, Gene Therapy and other Molecular Genetic-based Therapeutic Approaches (and references cited therein). Another approach is to administer a therapeutic amount of a tailless nuclear hormone receptor polypeptide in admixture with a suitable pharmaceutical carrier. Formulation and Administration Peptides, such as the soluble form of the tailless nuclear hormone receptor polypeptide, as well as agonist and antagonist peptides or small molecules, may be formulated in combination with a suitable pharmaceutical carrier. Such formulations comprise a therapeutically effective amount of the polypeptide or compound, and a pharmaceutically acceptable carrier or excipient. Such carriers include, but are not limited to, saline, buffered saline, dextrose, water, glycerol, ethanol, and mixtures thereof. The formulation should suit the route of administration and is well known to those skilled in the art. The invention further relates to pharmaceutical packs and kits comprising one or more containers filled with one or more of the above-mentioned components of the invention. The polypeptides of the present invention and other compounds may be used alone or in combination with other compounds, such as therapeutic compounds. Preferred forms of systemic administration of the pharmaceutical composition include injection, typically intravenous. Other injection routes, such as subcutaneous, intramuscular or intraperitoneal, can also be used. Another means for systemic administration involves transmucosal or transdermal administration using penetrants such as bile salts or fusidic acid or other surfactants. In addition, if an enteric formulation or a capsule formulation is formulated properly, oral administration is also possible. Administration of these compounds may be topical or in the form of salves, pastes, gels and the like. The required dosage range depends on the peptide, the route of administration, the nature of the formulation, the nature of the subject's condition, and the judgment of the attending physician. However, an appropriate dose is 0.1 mg / kg of the subject's body weight. It is in the range of 1 to 100 μg. However, in view of the different efficiencies of the different compounds used and the different routes of administration, the required dosage will likely vary. For example, oral administration may require higher doses than intravenous injection. Variations on these dosages can be made using standard routine experimentation for optimization well known in the art. In the above treatment methods, often referred to as "gene therapy", the polypeptide to be used for treatment can also be obtained in a subject. Thus, for example, by using a retroviral plasmid vector, subject-derived cells may be processed ex vivo using a polynucleotide such as DNA or RNA encoding the polypeptide. The cells are then introduced into a subject. The following examples are performed using standard methods well known to those skilled in the art, unless otherwise specified. The examples illustrate the invention and do not limit the invention. Example 1 HGS clone 243890 in E. coli host strain SOLR (Stratagene) was obtained from HGS and amplified in 250 ml Luria broth. Phagemid DNA was purified by cesium chloride centrifugation and sequenced on an ABI Prism 377 DNA sequencer using fluorescent dye terminator cycle sequencing. Nucleotide sequences were obtained from both strands using first primers complementary to the T7 and T3 promoters in the pBluescript II SK + phagemid vector (Stratagene) and then internal primers complementary to the resulting sequence. The 5 'end of the tailless nuclear hormone receptor gene missing from HGS clone 243890 was cloned into human brain Marathon-Ready using the following synthetic oligonucleotide primers according to the manufacturer's instructions. TM PCR amplification from the entire cDNA library (Clontech) followed by pCRScript TM It was cloned into SK (+) (Stratagene). 5'GGCAGCTGATTCACACACCGAACTCC3 '5'GTGGCCACTTCATAGAGATACATTGGG3' Example 2-Tissue Distribution Using RT-PCR and the Taqman system (Perkin Elmer / Applied Biosystems), human tailless nuclear hormone receptor (TLX) in the CNS and peripheral tissues. Was examined. RNA was obtained from eight different regions of the brain and 14 peripheral tissues. Human TLX sequence specific primers were designed for RT-PCR, and a second primer set was designed for Taqman. RT-PCR indicates that TLX is not present in the aorta, heart, pancreas, skeletal muscle, testis, prostate, lung, kidney, bone marrow, liver and adipose tissue, but TLX is not present in tonsils, caudate, hippocampus, thalamus, substantia nigra, cerebellum , In the hypothalamus, frontal cortex and spinal cord. Taqman data show that TLX is absent in the pancreas, lung, liver, spleen and intestine, but TLX is present in the tonsil, hippocampus, cerebellum, nucleus accumbens, striatum, nucleus, parahippocampus, medial previous time showed that. TLX was present in the stomach at a level about two orders of magnitude lower than in brain regions.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 39/395 Ａ６１Ｋ 39/395 Ｎ Ｃ０７Ｋ 14/705 Ｃ０７Ｋ 14/705 16/28 16/28 Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｑ 1/02 Ｃ１２Ｑ 1/02 Ｇ０１Ｎ 33/15 Ｇ０１Ｎ 33/15 Ｚ 33/50 33/50 Ｔ Ｐ 33/566 33/566 33/68 33/68 //(Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｒ 1:19） (72)発明者 ジェンキンズ，オーウェン イギリス、シーエム19・５エイダブリュ ー、エセックス、ハーロウ、サード・アベ ニュー、ニュー・フロンティアーズ・サイ エンス・パーク・サウス、スミスクライ ン・ビーチャム・ファーマシューティカル ズ (72)発明者 モサコースカ，ダヌタ・エワ・イレーナ イギリス、シーエム19・５エイダブリュ ー、エセックス、ハーロウ、サード・アベ ニュー、ニュー・フロンティアーズ・サイ エンス・パーク・サウス、スミスクライ ン・ビーチャム・ファーマシューティカル ズ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI Theme coat ゛ (Reference) A61K 39/395 A61K 39/395 N C07K 14/705 C07K 14/705 16/28 16/28 C12N 1/21 C12N 1/21 C12Q 1/02 C12Q 1/02 G01N 33/15 G01N 33/15 Z 33/50 33/50 T P 33/566 33/566 33/68 33/68 // (C12N 1/21 C12R 1 : 19) (72) Inventor Jenkins, Owen United Kingdom, CM 19.5 ADB, Essex, Harlow, Third Avenue, New Frontiers Science Park South, SmithKline Beecham Pharmaceutical (72) Inventor Mosacoseka, Danuta Eva Irena 19.5 D CM, UK AW over, Essex, Harlow, third-Abe New, New Frontiers, science Park South, Smith Cry emissions Beecham Pharmaceuticals

Claims (1)

【特許請求の範囲】 １．配列番号：２またはその対応フラグメントのポリペプチドをコードしてい るヌクレオチド配列に対して少なくとも９２％同一であるヌクレオチド配列を含 む単離ポリヌクレオチド、または該ヌクレオチド配列に相捕的なヌクレオチド配 列。 ２．配列番号：２のポリペプチドまたはそのフラグメントをコードしているヌ クレオチド配列をコードしている請求項１のポリヌクレオチド。 ３．配列番号：１に含まれるヌクレオチド配列に対して少なくとも９２％同一 であるヌクレオチド配列を含む単離ポリヌクレオチド。 ４．ヌクレオチド配列が配列番号：１に含まれるものである請求項３のポリヌ クレオチド。 ５．請求項３のポリヌクレオチドの少なくとも１５個の連続したヌクレオチド を含むポリヌクレオチドプローブまたはプライマー。 ６．適合する宿主細胞中に存在する場合に、配列番号：２のポリペプチドまた はそのフラグメントのポリペプチドをコードしているヌクレオチド配列に対して 少なくとも９２％の同一性を有するテイルレス核ホルモン受容体またはそのフラ グメントを生成する能力のある発現系を含むＤＮＡまたはＲＮＡ分子。 ７．請求項６の発現系で宿主細胞を形質転換またはトランスフェクションして 、適当な培養条件下で宿主細胞がテイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドまた はフラグメントを生成するようにすることを含む、テイルレス核ホルモン受容体 ポリペプチドまたはそのフラグメントを生成する細胞の製造方法。 ８．配列番号：２に含まれるアミノ酸配列に対して少なくとも９９％同一であ るアミノ酸配列を含むテイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドまたはそのフラ グメント。 ９．配列番号：２のアミノ酸配列を含む請求項８のポリヌクレオチド、または そのフラグメント。 １０．請求項８のテイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドに対して免疫特異 的な抗体。 １１．テイルレス核ホルモン受容体活性の増強を必要とする対象の治療方法で あって、 （ａ）該受容体に対する治療上有効量のアゴニストを対象に投与すること、お よび／または （ｂ）インビボで該受容体活性を生じる形態のテイルレス核ホルモン受容体ポ リヌクレオチドを対象に提供すること を含む方法。 １２．テイルレス核ホルモン受容体活性の阻害を必要とする対象の治療方法で あって、 （ａ）該受容体に対する治療上有効量のアンタゴニストを投与すること、およ び／または （ｂ）該受容体をコードしているヌクレオチド配列の発現を阻害する核酸分子 を対象に投与すること、および／または （ｃ）リガンドを求めて該受容体と競争する治療上有効量のポリペプチドを対 象に投与すること を含む方法。 １３．対象におけるテイルレス核ホルモン受容体の発現または活性に関連した 対象における疾病またはかかる疾病に対する感受性の診断方法であって、 （ａ）該対象ノゲノム中の該テイルレス核ホルモン受容体をコードしているヌ クレオチド配列における変異の存在または不存在を決定すること、および/また は （ｂ）該対象由来の試料中のテイルレス核ホルモン受容体発現の存在または量 を分析すること を含む方法。 １４．テイルレス核ホルモン受容体に結合する化合物の同定方法であって、 （ａ）請求項１１の細胞を候補化合物と接触させること、ついで （ｂ）該細胞に結合する候補化合物の能力を評価すること を含む方法。 １５．候補化合物が細胞表面のテイルレス核ホルモン受容体ポリペプチドの活 性化により発生するシグナルを生じさせるかどうかを決定することをさらに含み 、該シグナルを生じさせる候補化合物がアゴニストであると同定される請求項 １４の方法。 １６．請求項１５の方法により同定されるアゴニスト。 １７．テイルレス核ホルモン受容体に対する既知アゴニストに該細胞を接触さ せ、ついで、該候補化合物の存在下で該アゴニストにより生じたシグナルが減少 するかどうかを決定することをさらに含み、該シグナルを減少させる候補化合物 が該テイルレス核ホルモン受容体に対するアンタゴニストであると同定される請 求項１４の方法。 １８．請求項１７の方法により同定されるアンタゴニスト。[Claims]   1. Encodes the polypeptide of SEQ ID NO: 2 or a corresponding fragment thereof. A nucleotide sequence that is at least 92% identical to the nucleotide sequence An isolated polynucleotide or a nucleotide sequence complementary to the nucleotide sequence Column.   2. A nucleic acid encoding the polypeptide of SEQ ID NO: 2 or a fragment thereof The polynucleotide of claim 1, which encodes a nucleotide sequence.   3. At least 92% identical to the nucleotide sequence contained in SEQ ID NO: 1 An isolated polynucleotide comprising a nucleotide sequence that is:   4. The polynucleotide of claim 3 wherein the nucleotide sequence is contained in SEQ ID NO: 1. Creotide.   5. 4. At least 15 contiguous nucleotides of the polynucleotide of claim 3. A polynucleotide probe or primer comprising   6. When present in a compatible host cell, the polypeptide of SEQ ID NO: 2 or Is relative to the nucleotide sequence encoding the polypeptide of the fragment. A tailless nuclear hormone receptor having at least 92% identity or a homolog thereof DNA or RNA molecules comprising an expression system capable of producing a fragment.   7. Transforming or transfecting a host cell with the expression system of claim 6; Under appropriate culture conditions, the host cell may be a tailless nuclear hormone receptor polypeptide or Generating a fragment, including a tailless nuclear hormone receptor A method for producing a cell that produces a polypeptide or a fragment thereof.   8. At least 99% identical to the amino acid sequence contained in SEQ ID NO: 2 Tailless nuclear hormone receptor polypeptide comprising an amino acid sequence Gment.   9. 9. The polynucleotide of claim 8, comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, or That fragment.   10. An immunospecific for the tailless nuclear hormone receptor polypeptide of claim 8. Antibodies.   11. For treatment of subjects requiring enhanced tailless nuclear hormone receptor activity So,   (A) administering to the subject a therapeutically effective amount of an agonist for the receptor; And / or   (B) a tailless nuclear hormone receptor polypeptide that produces the receptor activity in vivo Providing renucleotides to subjects A method that includes   12. For treatment of subjects in need of inhibition of tailless nuclear hormone receptor activity So,   (A) administering a therapeutically effective amount of an antagonist to the receptor; And / or   (B) a nucleic acid molecule that inhibits expression of a nucleotide sequence encoding the receptor Administering to the subject, and / or   (C) binding a therapeutically effective amount of a polypeptide that competes with the receptor for a ligand. Administration to elephants A method that includes   13. Associated with expression or activity of tailless nuclear hormone receptor in the subject A method of diagnosing a disease or susceptibility to such a disease in a subject, comprising:   (A) a nucleic acid encoding the tailless nuclear hormone receptor in the subject genome; Determining the presence or absence of a mutation in the nucleotide sequence; and / or Is   (B) the presence or amount of tailless nuclear hormone receptor expression in a sample from the subject Analyzing A method that includes   14． A method for identifying a compound that binds to a tailless nuclear hormone receptor, comprising:   (A) contacting the cells of claim 11 with a candidate compound;   (B) assessing the ability of the candidate compound to bind to the cell A method that includes   15. Candidate compound activates cell surface tailless nuclear hormone receptor polypeptide Further determining whether or not to cause a signal generated by Wherein the candidate compound that produces the signal is identified as an agonist. 14 methods.   16. An agonist identified by the method of claim 15.   17． Contacting the cells with a known agonist for a tailless nuclear hormone receptor Then the signal generated by the agonist in the presence of the candidate compound decreases A candidate compound that reduces the signal. Is identified as an antagonist to the tailless nuclear hormone receptor The method of claim 14.   18. An antagonist identified by the method of claim 17.
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