HU220593B1

HU220593B1 - Foszfolipidszármazékok, foszfónium, arzónium és stibónium belső sói, ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás az előállításukra

Info

Publication number: HU220593B1
Application number: HU9302772A
Authority: HU
Inventors: Jürgen Engel; Peter Hilgard; Bernhard Kutscher; Gerhard Nössner; Jurij Stekar
Original assignee: Asta Medica Ag.
Priority date: 1992-10-01
Filing date: 1993-09-30
Publication date: 2002-03-28
Also published as: AU661795B2; DE4233044A1; US5449798A; CA2107439A1; US5637577A; DK0594999T3; JPH06199876A; FI934297A0; FI111261B; BR9303990A; CA2107439C; IL107141A0; EP0594999B1; PH29951A; ZA937282B; EP0594999A1; UA39163C2; JP3688304B2; MX9306076A; KR100331367B1

Abstract

A találmány tárgya (I) általános képletű vegyületek, mely képletben R5jelentése egyenes vagy elágazó nyílt szénláncú, 16–22 szénatomosszénhidrogéncsoport, mely telített vagy egy kettős, vagy hármas kötésttartalmaz, vagy 10–16 szénatomos alkil-ciklohexil-metil-csoport; Ajelentése egyszeres kötés vagy (IV) általános képletű csoport, ahol R7jelentése egyenes vagy elágazó szénláncú, 1– 4 szénatomosalkilcsoport, ami mellett a (IV) általános képletű csoportoxigénatomja az (I) általános képlet foszforatomjához kapcsolódik; Xjelentése oxigén- vagy kénatom; A1 jelentése 2–3 szénatomosalkiléncsoport; R6 jelentése (+)YR8R9R10 általános képletű csoport,ahol Y jelentése P-, As- vagy Sb-atom; R8, R9 és R10 jelentéseegymástól függetlenül egyenes vagy elágazó szénláncú, 1–6 szénatomosalkilcsoport, vagy Y, R9 és R10 együttesen egy 4–9 tagú heterogyűrűtis képezhet. A találmány a fenti vegyületeket tartalmazó, tumorok vagyprotozoon-megbetegedések kezelésére szolgáló gyógyszerkészítményekreés mindezek előállítására is vonatkozik. ŕ

Description

A találmány tárgya (I) általános képletű vegyületek, mely képletben

R⁵ jelentése egyenes vagy elágazó nyílt szénláncú, 16-22 szénatomos szénhidrogéncsoport, mely telített vagy egy kettős, vagy hármas kötést tartalmaz, vagy 10-16 szénatomos alkil-ciklohexil-metil-csoport;

A jelentése egyszeres kötés vagy (IV) általános képletű csoport, ahol R⁷ jelentése egyenes vagy elágazó szénláncú, 1-4 szénatomos alkilcsoport, ami mellett a (IV) általános képletű csoport oxigénatomja az (I) általános képlet foszforatomjához kapcsolódik;

X jelentése oxigén- vagy kénatom;

A! jelentése 2-3 szénatomos alkiléncsoport;

R⁶ jelentése (⁺)YR⁸R⁹R¹⁰ általános képletű csoport, ahol Y jelentése P-, As- vagy Sb-atom;

R⁸, R⁹ és R¹⁰ jelentése egymástól függetlenül egyenes vagy elágazó szénláncú, 1-6 szénatomos alkilcsoport, vagy Y, R⁹ és R¹⁰ együttesen egy 4-9 tagú heterogyűrűt is képezhet.

A találmány a fenti vegyületeket tartalmazó, tumorok vagy protozoon-megbetegedések kezelésére szolgáló gyógyszerkészítményekre és mindezek előállítására is vonatkozik.

O

R-X-A-ff-O-^-R⁶

-ch₂-ch-ch,-o¹ 7

OR⁷ (IV)

HU 220 593 B1

A leírás terjedelme 18 oldal (ezen belül 6 lap ábra)

HU 220 593 Bl

A találmány foszfónium, arzónium és stibónium belső sókat tartalmazó foszfolipidszármazékokra vonatkozik.

Mikrobaellenes hatású, hosszú szénláncú alkil-foszfokolinokat Kanetani és szerzőtársai ismertetnek [Nippin, KayakuKaishi 9,1452 (1984)].

A 108 565 számú európai közrebocsátási iratban (bejelentő: Takeda) az (A) általános képletű vegyületeket ismertetik, ahol a képletben

R¹ jelentése 8-30 szénatomos alifás szénhidrogéncsoport,

R², R³ és R⁴ jelentése azonos vagy eltérő és hidrogénatom vagy rövid szénláncú alkilcsoport, vagy -NR²R³R⁴ csoport valamely ciklusos ammóniumcsoportot jelent, és n értéke 0 vagy 1.

Az említett vegyületeket tumorellenes, valamint gombásodásgátló hatásúként ismertetik.

A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek tumorok terápiájában és protozoon-megbetegedések kezelésére alkalmazhatók, mely képletben R⁵ jelentése egyenes vagy elágazó nyílt szénláncú,

16-22 szénatomos szénhidrogéncsoport, mely telített vagy egy kettős, vagy hármas kötést tartalmaz, vagy 10-16 szénatomos alkil-ciklohexil-metil-csoport;

A jelentése egyszeres kötés vagy (IV) általános képletű csoport, ahol a (IV) képletben R⁷ jelentése egyenes vagy elágazó szénláncú, 1 -4 szénatomos alkilcsoport, ami mellett a (IV) általános képletű csoport oxigénatomja az (I) általános képlet foszforatomjához kapcsolódik;

X jelentése oxigén- vagy kénatom;

A[ jelentése 2-3 szénatomos alkiléncsoport;

R⁶ jelentése (⁺)YR⁸R⁹R¹⁰ általános képletű csoport, ahol

Y jelentése P-, As- vagy Sb-atom;

R⁸, R⁹ és R*0 jelentése egymástól függetlenül egyenes vagy elágazó szénláncú, 1-6 szénatomos alkilcsoport, vagy Y, R⁹ és R¹⁰ együttesen egy 4-9 tagú heterogyűrűt is képezhet.

A protozoon-megbetegedések terápiájánál alkalmasak például az olyan (I) általános képletű vegyületek, amelyekben Y jelentése As vagy Sb.

Ezen túlmenően valamennyi vegyület különösen tumoros megbetegedések elleni szerek hatóanyagaként alkalmazható. A találmány szerinti vegyületek alkalmasak a vér tumoros megbetegedésekkel kapcsolatban fellépő betegségeinek, így például vérszegénység terápiájánál.

Az (I) általános képletű vegyületek csekély toxicitásukkal tűnnek ki. így például a 3. példa szerinti vegyület LD₅₀-értéke egéren egyszeri per os beadás esetén nagyobb, mint 1470 mg/testtömeg kg.

A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek az alábbi eljárásokkal állíthatók elő.

Előállítás

1. eljárás

Az egyedényes eljárás első lépése foszforil-kloridnak egy R⁵-X-A-H általános képletű alkohollal vagy tioalkohollal, ahol R⁵ és X jelentése a fenti, A pedig egyszeres kötést jelent, halogénezett szénhidrogénekben, telített ciklusos éterekben, aciklusos éterekben, telített 5-10 szénatomos szénhidrogénekben, folyékony aromás szénhidrogénekben - amelyek halogénekkel (különösen klórral) szubsztituáltak is lehetnek - vagy az előzőekben említett oldószerek elegyében, vagy oldószer alkalmazása nélkül végzett reakciója, adott esetben erre szokásos bázisos anyagok jelenlétében.

Halogénezett szénhidrogénekként például 1-6 szénatomos szénhidrogének jönnek számításba, amelyekben egy vagy több hidrogénatom vagy valamennyi hidrogénatom klóratommal van helyettesítve.

Például metilén-klorid, kloroform, etilén-klorid, klór-benzol vagy diklór-benzol alkalmazható. Amennyiben halogénatommal helyettesített aromás szénhidrogénekről van szó, úgy ezek előnyösen egy vagy két halogénatommal szubsztituáltak.

Telített ciklusos éterekként például 5-6 szénatomból és 1 vagy 2 oxigénatomból álló gyűrűk alkalmazhatók.

Példaképpen a tetrahidrofurán és a dioxán említhető meg.

Az aciklusos éterek 2-8 szénatomból állnak és cseppfolyósak. Példaképpen a következők jönnek számításba: a dietil-éter, a diizobutil-éter, a metil-(terc-butil)-éter és a diizopropil-éter.

Telített szénhidrogénekként egyenes vagy elágazó szénláncú, 5-10 szénatomos, folyékony szénhidrogének jönnek számításba. Példaképpen a pentán, hexán, heptán és ciklohexán említhető meg.

Aromás szénhidrogénekként például a benzol, valamint alkilcsoporttal szubsztituált benzolok jönnek számításba, ahol az alkilszubsztituensek 1-5 szénatomosak.

Bázisos anyagokként mind a foszforil-kloridnak alkohollal vagy tioalkohollal való reakciója számára, mind pedig a foszfónium-, stibónium- vagy arzóniumsóval történő, ezt követő reakcióhoz aminok jönnek számításba, például NR⁶R⁷R⁸ általános képletű alifás aminok, amelyek képletében R⁶, R⁷ és R⁸ jelentése azonos vagy eltérő, és hidrogénatomot vagy 1-6 szénatomos alkilcsoportot jelentenek, vagy aromás aminok így a piridin vagy pikolin - jönnek számításba. Alkalmazhatók továbbá kinolin, diizopropil-amin, izokinolin, trietil-amin és Hünig-féle bázis is /Hunig, Kissel, Chem. Bér., 91, 380 (1958)/.

A foszfónium-, stibónium- vagy arzóniumsóval való reakciónál az ehhez szükséges bázisos anyag egyidejűleg, vagy a foszfónium-, stibónium- vagy arzóniumsó előtt is hozzáadható. Ezen reakció számára minden esetben oldószer szükséges, vagyis amennyiben az első reakciólépést külön oldószer nélkül hajtjuk végre, úgy ilyen hozzáadása szükséges.

A foszforil-klorid mólaránya az alkoholhoz vagy tioalkoholhoz például 1,5:1-től 0,8:1-ig terjed.

Amennyiben a foszforil-klorid reakcióját az alkanollal vagy tioalkanollal valamilyen bázisos anyag jelenlétében végezzük, úgy a bázisos anyag mennyisége például 1-3 mól, 1 mól POCl₃-ra vonatkoztatva.

A foszfónium-, stibónium- vagy arzóniumsóval való, ezt követő reakcióhoz az alkalmazott bázisos anyag mennyisége például 1-5 mól, 1 mól alkoholra vagy tioalkoholra számítva.

HU 220 593 Bl

A foszforil-klorid alkohollal vagy tioalkohollal végzett reakciójának hőmérséklete -30 °C és +30 °C, előnyösen -15 °C és 0 °C, különösen -10 °C és 0 °C közötti.

A reakció időtartama például 0,5-5 óra, előnyösen 1-3 óra, különösen 1,5-2 óra. Amennyiben a reakciót bázisos anyag jelenlétében hajtjuk végre, általában gyorsabban megy végbe (mintegy 30 perc alatt).

A kapott terméket elkülönítés és tisztítás nélkül valamely inért oldószerben egy (VIII) általános képletű foszfónium-, arzónium- vagy stibóniumsóval reagáltatjuk, ahol a képletben

Aj és R⁶ jelentése a fentiekben megadott jelentésű.

Arzenokolin és sói, például a K. Irgolic, Applied Organometallic Chemistry (1987) 1,403-412. oldalain megadott előírások szerint állíthatók elő.

A foszfónium-, stibónium- vagy arzóniumsót részletekben vagy egyszerre adjuk hozzá.

A foszfónium-, stibónium- vagy arzóniumsó savkomponenseiként ásványi savakkal (így például kénsavval, sósavval) alkotott sók jönnek számításba, továbbá szerves savakkal, így például ecetsavval, para-toluolszulfonsawal és hasonlókkal alkotott sók alkalmazhatók.

Ezt a reakciólépést egy inért oldószerben hajtjuk végre. Oldószerekként itt ugyanazok jönnek számításba, amelyek a foszforil-kloridnak alkohollal vagy tioalkohollal való reakciójánál alkalmazhatók, amennyiben ezt a reakciót oldószerben végezzük.

Ezt követően a bázisos anyagot a megadott oldószerek egyikében oldjuk, vagy oldószer nélkül hozzácsepegtetjük.

A bázisos anyag számára oldószerként előnyösen a következőket alkalmazzuk: halogénezett szénhidrogének, telített ciklusos éterek, aciklusos éterek, telített, 5-10 szénatomos szénhidrogének, folyékony aromás szénhidrogének vagy az előzőekben említett oldószerek elegyei.

Itt ugyanazokról az oldószerekről van szó, amelyeket a foszforil-kloridnak az alkohollal vagy tioalkohollal való reakciójánál alkalmaztunk.

A bázisos anyag hozzáadása által a hőmérséklet emelkedik. Gondoskodni kell arról, hogy a hőmérséklet 0 °C és 40 °C között, előnyösen 10 °C és 30 °C, különösen 15 °C és 20 °C között legyen.

Ezután a reakcióelegyet még 5 °C-30 °C, előnyösen 15 °C-25 °C hőmérsékleten keverjük (például 1-től 40 óráig terjedő időtartamig, előnyösen 3-15 órán át).

A reakcióelegyet víz hozzáadásával hidrolizáljuk, ami mellett 10 °C és 30 °C, előnyösen 15 °C és 30 °C, különösen 15 °C és 20 °C közötti hőmérsékletet kell betartani.

Az előbb említett hidrolízisfolyadékok bázisos anyagokat is tartalmazhatnak. Ilyen bázisos anyagokként az alkálifémek és alkáliföldfémek karbonátjai és hidrogénkarbonátjai jönnek számításba.

A hidrolízis teljessé tételére ezt követően még 0,5-4 órán, előnyösen 1-3 órán, különösen 1,5-2,5 órán át 10 °C-30 °C, előnyösenl5 °C-25 °C, különösen 18 °C-22 °C hőmérsékleten keverjük.

Ezután a reakcióoldatot egy vízből és alkoholokból (előnyösen 1-4 szénatomos, telített alifás alkoholokból) álló olyan eleggyel mossuk, amely még bázisos anyagok is tartalmazhat.

A víz:alkohol aránya például 5 és 0,5 közötti, előnyösen 1-3 (térfogat/térfogat).

A mosófolyadékhoz bázisos anyagként például az alkálifémek és alkáliföldfémek karbonátjai és a hidrogénkarbonátjai, valamint az ammónium-hidroxid (például vizes ammónium-hidroxid-oldat) jönnek számításba. Különösen előnyös egy 3%-os vizes nátrium-karbonát-oldat.

Adott esetben ezt követően a reakcióoldatot egy savas oldattal mossuk.

A savas mosás a reakcióoldat még átalakulatlan bázisos részeinek az eltávolítása szempontjából előnyös, különösen metilén-kloridnak oldószerként való alkalmazása esetén.

A mosóoldat víz és alkoholok elegyéből áll. Előnyösen 1-4 szénatomos telített alifás alkoholokból képezett elegyek jönnek számításba, ami mellett adott esetben még egy savas anyag is jelen lehet. A víz: alkohol keverési aránya például 5 és 0,5 közötti, előnyösen 1-3 lehet (téforgat/térfogat).

A mosófolyadék számára savas anyagként például ásványi és szerves savak alkalmazhatók, például sósav, kénsav vagy borkősav és citromsav. Különösen előnyös egy 10%-os vizes sósavoldat.

Ezt követően még egy mosást végzünk vízből és alkoholból álló eleggyel. Előnyösen 1 -4 szénatomos telített alifás alkoholokból képezett elegyek jönnek számításba, ami mellett adott esetben még egy bázisos anyag is jelen lehet.

A víz:alkohol keverési aránya például 5 és 0,5 között lehet, előnyösen 1-3.

A mosott fázisokat ezután egyesítjük és szokásos módon szárítjuk, majd az oldószert (előnyösen csökkentett nyomáson, például 5-100 hPascalon) - adott esetben 150-1000 ml, előnyösen 300-700 ml, különösen 450-550 ml alifás alkohol hozzáadása után - eltávolítjuk. (Az alifás alkohol említett mennyiségi adatai 1 mól tömegrész száraz termékre vonatkoznak).

Alkoholokként előnyösen 1-5 szénatomos lánchosszúságú telített alifás alkoholok jönnek számításba. Alkoholokként különösen előnyösek az n-butanol, izopropanol. Ennek az alkoholos kezelésnek a célja a maradék víz teljes eltávolítása.

Az így kapott terméket ezt követően szokásos módon (például kromatográfiásan, átkristályosítással) tisztíthatjuk.

2. eljárás

Ez az eljárás egy ciklusos foszforsav-triésztemek valamely (X) általános képletű vegyülettel való reakciójából áll.

A ciklusos foszforsav-triésztert az EP 108 565 szerint a ciklusos foszforsav-diészter-kloridnak alkanollal való reagáltatása útján kapjuk.

Egy (IX) általános képletű vegyületet - ahol R¹ jelentése megegyezik R⁵ jelentésével és m értéke 2 vagy 3 valamilyen (X) általános képletű vegyülettel reagáltatunk egy inért oldószerben, magasabb hőmérsékleten, a

HU 220 593 Bl képletekben A, X, Y, R\ R⁹ és R¹⁰ jelentése az (I) általános képlettel kapcsolatban megadottakkal megegyező.

Inért oldószerekként alifás nitrilek jönnek számításba, például acetonitril, propionitril, továbbá poláros oldószerek, így az N-metil-pirrolidon, dimetil-formamid, dimetil-acetamid.

A reakcióhőmérséklet 30 °C és 140 °C közötti, előnyösen 50 °C és 120 °C közötti, különösen 70 °C és 100 °C közötti.

A reakció során mind légköri nyomáson, mind pedig magasabb nyomáson is dolgozhatunk, a nyomás 1000 hPa és 2000 hPa közötti, előnyösen 1000 hPa és 1750 hPa közötti és különösen előnyösen 1000 hPa és 1500 hPa közötti.

A reakció időtartama 0,5 óra és 4 óra közötti, amennyiben megnövelt nyomáson dolgozunk, így például 1500 hPa nyomáson és 85 °C-on, úgy a reakció időtartama 2 óra.

3. eljárás

Egy (XII) általános képletű vegyületet, amely egy, az alifás részen aktivált foszforsav-észtert képez, a képletben

R¹, X, A, Ai jelentése a fentiekben megadottakkal megegyező,

Z¹ jelentése klór-, brómatom, mezilát-, tozilátcsoport, jódatom, valamely (X) általános képletű vegyülettel reagáltatunk.

Ezt a reakciót ismert módon, oldószer alkalmazása nélkül vagy inért oldószerben, 50-150 °C közötti hőmérsékleten hajtjuk végre.

A reakciót követően savmegkötő, illetve halogenidmegkötő anyagokkal, így például Ag₂CO₃-mal és bázisokkal, például alkálifém-karbonátokkal és alkáliföldfém-karbonátokkal és szerves aminokkal reagáltatunk. Oldószerként alifás alkoholokat, például metanolt, etanolt és izopropanolt alkalmazhatunk. Adott esetben magasabb hőmérsékleten dolgozhatunk.

Valamennyi reakció befejezése előtt be kell tartani a szerves fémvegyületek esetében szokásos nedvességés légoxigén-kizárást.

Tisztítás

A tisztítási eljárás mind a 4 eljáráshoz csatlakozhat. A fentiekben szemléltetett vegyület tisztítását úgy hajthatjuk végre, hogy a maradékot, amely a reakcióközeg adott esetben csökkentett nyomáson végzett - elpárologtatása után keletkezik, valamilyen szerves oldószerben, előnyösen 0-4% víztartalmú rövid szénláncú alkoholban (így például metanolban, etanolban, izopropanolban, n-butanolban) feloldunk, és kevertágyas ioncserélővel vagy egymást követően savas és bázisos ioncserélővel kezelünk. A kapott szűrletet ezután egy kevertágyas ioncserélővel, így például Amberlite® MB3-mal, például 1-5 órán át, előnyösen 2 órán keresztül 10 °C-50 °C, előnyösen 20 °C hőmérsékleten keverünk. Kevertágyas ioncserélő helyett a tisztítást egymás után savas ioncserélővel és bázisos ioncserélővel is végezhetjük.

Ioncserélőként valamennyi oldhatatlan szilárd anyag alkalmazható, amely ioncserélő csoportokkal rendelkezik.

Savas ioncserélők azok, amelyek például savas csoportokat, így szulfonsavcsoportokat, karboxilcsoportokat tartalmaznak. Szulfonsavcsoportokat polisztirolmátrixon tartalmazó ioncserélőkre példaképpen az Amberlite® IR 120-at, Dowex® HCR-t, Duolite® C 20at vagy a Lewatit® S 100-at említjük meg. Gyengén savas ioncserélők például azok, amelyek egy poliakrilsav-mátrixon alapulnak, így például az Amberlite® IRC 76, Duolite® C 433 vagy Relite® CC, amelyek karbonsavcsoportokat hordoznak.

Bázisos ioncserélőkként például olyanok jönnek számításba, amelyek polimermátrixon (például polisztirolmátrixon) primer, szekunder, tercier vagy kvatemer aminocsoportokat hordoznak, így például a Duolite® A 101, Duolite® A 102, Duolite® A 348, Duolite® A 365, Duolite® A 375, Amberlite® IRA 67, Amberlite® IRA 458 és a Duolite® A 132.

A kevertágyas ioncserélők savas és lúgos ioncserélő gyanták keverékeit alkotják, így például az Amberlite® MB1, Amberlite® MB2, Amberlite® MB3 és az Amberlite® MB6.

Egyebekben utalunk az Ullmann’s Encyclopedia of Industrial Chemistry című mű, 5. kiadás (1989), 14. kötet 450. oldalára, ahol valamennyi, kereskedelemben szokványos ioncserélőt ismertetnek, amelyek a tisztítási eljárásban alkalmazhatók.

Az ioncserélő gyanta leszívatása után csökkentett nyomáson (például 20-200 torr nyomáson), 40-70 °C hőmérsékleten bepárlást végzünk és ezt követően halogénezett szénhidrogénekből, telített alifás ketonokból, alkohol/keton-elegyekből vagy telített vagy aromás szénhidrogénekből átkristályosítást hajtunk végre.

Az átkristályosításhoz halogénezett szénhidrogénekként például olyan 1-6 szénatomos szénhidrogének jönnek számításba, amelyeknél egy vagy több, vagy valamennyi hidrogénatom klóratommal van helyettesítve.

Például metilén-klorid, kloroform, etilén-klorid vagy klór-benzol alkalmazható.

Alkoholokként telített, alifás, 1-6 szénatomos és 1-3 hidroxilcsoporttal rendelkezők jönnek számításba. Ketonokként telített, alifás, 3-6 szénatomos ketonok alkalmazhatók.

Az alkohol: keton keverési aránya 1-5-höz (térfogat/térfogat).

Különösen előnyös egy 1:1 (térforgat/térfogat) arányú etanol/aceton elegy.

Telített vagy aromás szénhidrogénekként magas forráspontú petroléterek, toluol, xilol és az etil-benzol jön számításba.

A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek jó tumorellenes hatásukkal tűnnek ki, egyidejű alacsony toxicitás mellett. Például az 1. példa szerinti vegyület L1210-sejt-tenyészeten végzett kísérletben 2,9 pg/ml feletti ECc^-értékkel rendelkezik. Az EC₉₀ valamely tumorellenes hatású anyagnak azt a koncentrációját jelenti pg/ml-ben, amely in vitro a ráksejtek növekedését 90%-kal gátolja egy olyan kontrolihoz képest, amely antitumor hatású anyagot nem tartalmaz.

HU 220 593 Β1

Biológiai vizsgálatok

Az in vitro biológiai vizsgálatokat KB-sejtekkel lágyagar-kolónia assay-ben végeztük Salmon és Hamburger módszere szerint /N. Engl. J. Med. 298, 132 (1987)/. Megadjuk a vizsgált tesztvegyületnek azt a koncentrációját, amely a kolóniaképzést 90%-ban gátolta a kontrollal összehasonlítva (EC₉₀). A hatás kritériumaként azt jelöltük meg, hogy EC₉₀< 10 pg/ml.

Továbbá in vitro terápiás vizsgálatokat is végeztünk. Minden esetben a vizsgált anyagot po. adtuk be oldatban gyomorszondán keresztül (a megfelelő dózist az 1. táblázatban zárójelben tüntettük fel). Megadjuk az adott esetben elért tumomövekedés-gátlási indexet (WHI) százalékban, amelyet a következő képlet alapján számítottunk:

W -W —2--x 100 = WHI (%)

W ”o ahol W_o= átlagos tumortömeg-eltérés a kontrollcsoportban a 0. napra vonatkoztatva

W[ = a kezelt csoportra kapott megfelelő érték A 100-nál nagyobb értékek tumorregressziót jelentenek a kiindulási tumormérethez viszonyítva. A 100-as érték azt jelenti, hogy a terápia végén a tumorok ugyanolyan méretűek, mint a kísérlet kezdetén (azonban egyértelműen kisebbek, mint a kontroll állatok tumorjai). A 0 és 100 közötti értékek a tumomövekedés gátlását jelentik a kontrollokhoz viszonyítva. A 0-nál kisebb értékek a tumomövekedés stimulálását jelentik.

Az in vivő KB egy olyan tumormodellt jelent, amelynél a KB-sejteket szubkután az NMRI csupasz egérbe transzplantáljuk.

Az in vivő DMBA egy olyan tumormodellre vonatkozik, melyben kémiailag dimetil-benzantracén (DMBA) adásával nőstény patkányok tejmirigyében tumorokat indukálunk.

A fenti vizsgálatokban kapott adatokat az 1. táblázatban mutatjuk be.

1. táblázat

Példa száma	EC₉₀ (Mg/ml) KB-sejt in vitro	WHI (%) KB in vivő	WHI (%) DMBA in vivő
1.	3,2	42,9 (1x511 mg/kg)	112,8 (4x 100 mg/kg)
2.	27	nem mértük	nem mértük
3.	>10	nem mértük	nem mértük
4.	3,1	111 (2x316 mg/kg)	108,7 (4x 147 mg/kg)
5.	>10	nem mértük	nem mértük
6.	>10	nem mértük	43,9 (4x 147 mg/kg)
7.	3,0	nem mértük	nem mértük
8.	>10	nem mértük	nem mértük
9.	>10	nem mértük	nem mértük
10.	5,8	104 (2x316 mg/kg)	nem mértük
11.	>10	nem mértük	nem mértük

Példa száma	ECgg (Mg/ml) KB-sejt in vitro	WHI (%) KB in vivő	WHI (%) DMBA in vivő
12.	>10	nem mértük	nem mértük
13.	>10	nem mértük	nem mértük
14.	3,0	nem mértük	nem mértük
15.	>10	nem mértük	nem mértük
16.	2,6	nem mértük	nem mértük
17.	3,0	nem mértük	nem mértük
18.	3,0	nem mértük	nem mértük
19.	oldhatatlan	nem mértük	nem mértük
20.	3,2	nem mértük	nem mértük
21.	3,1	nem mértük	nem mértük
22.	3,1	nem mértük	nem mértük
23.	>10	nem mértük	nem mértük
24.	2,8	nem mértük	73 (4x 100 mg/kg)
25.	2,7	nem mértük	nem mértük
27.	3,0	nem mértük	nem mértük

Az eredmények értékelése

Az in vitro KB-sejtekkel szemben hatásosnak (EC₉₀<10 pg/ml) bizonyultak az 1., 4., 7., 10., 14., 16., 17., 18., 20., 21., 22., 24., 25. és 27. példa szerinti vegyületek. In vivő kísérletben 5 vegyületet teszteltünk, melyek közül 2 DMBA- és KB-modellben is, 2 DMBAmodellben és 1 KB-modellben mutatott tumorellenes hatást. A T/C-értékek helyett az úgynevezett növekedést gátló indexet (WHI) számoltuk. Azok az anyagok, amelyek a tumomövekedést gátolják, 0 és 100% közötti WHI-értékeket adnak. A tumortömeg visszafejlődése azt jelenti, hogy WHI>100%. A WHI alkalmazása a tumorellenes hatású anyagok jellemzésére ismert.

A találmányt az alábbi - nem korlátozó jellegű példákkal illusztráljuk.

1. példa

IUPA C-elnevezés:

[2-][(Oktadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén] As,As,As-trimetil-arzónium-belső só [(1) képlet] C₂₃H₅₀AsO₄P (496,54)

2,3 ml (25 mmol) foszforil-kloridot 15 ml kloroformban oldunk és 0-5 °C hőmérsékleten cseppenként elegyítünk 6,1 g (22,5 mmol) oktadekanol 25 ml kloroformmal készített oldatával, amely 8 ml piridint tartalmaz. A hozzáadás időtartama 30 perctől 1 óráig terjed. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten még egy órán át keverjük, majd ezt követően egy adagban 7,4 g (30 mmol) arzenokolin-bromidot adunk hozzá. Ebbe az oldatba 10 ml piridint csepegtetünk oly módon, hogy a hőmérséklet a 20-25 °C-ot nem haladja meg. A reakcióelegyet a hozzáadás befejezése után szobahőmérsékleten még 3 órán át keveqük, 5-10 °C hőmérsékletre való lehűlés után 4 ml vízzel hidrolizáljuk és 20-20 ml víz/metanol eleggyel (1:1), 3%-os nátrium-karbonát/metanol eleggyel (1:1), 3%-os citromsav-metanol eleggyel, majd víz/metanol eleggyel (1:1) mossuk. A szerves fá5

HU 220 593 Bl zist magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk, és a maradékot 96%-os etanollal felvesszük. Szűrés után összekeverjük 30 g Amberlite® MB3 ioncserélővel. Kovaföld/aktívszén rétegen leszívatva, vákuumban bepároljuk, és acetonból kristályosítjuk.

Kitermelés: 2,54 g (23%)

Elemanalízis:

C H As számított: 55,64, 10,15, 15,09%;

talált: 55,71, 10,41, 14,1%;

55,93, 10,58%.

Vékonyréteg-kromatogram: állófázisként minden esetben a szokásos Kiesel-gélt (SiO₂) alkalmazzuk; (kloroform/metanol/1 mólos nátrium-acetát 25%-os ammónium-hidroxidban, 70:40:10), R_f=0,53.

2. példa

1UPA C-elnevezés:

{2-[[(Hexadecil-oxi)-hidroxi-foszforilJ-oxi]-etilén]As,As,As-trimetil-arzónium-belső só [(2) képlet] C₂₁H₄₆AsO₄P (468,48)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre, 2,3 ml (25 mmol) foszforil-kloridból, 5,5 g (22,5 mmol) hexadekanolból, 8 + 10 ml piridinből és 7,4 g (30 mmol) arzenokolin-bromidból. A tisztítást 23 g Amberlite® MB3 ioncserélővel 96% etanolban végezzük.

Kitermelés: 1,4 g (13%)

Elemanalízis:

C H számított: 53,84, 9,90%;

talált: 53,45, 10,16%;

53,67, 10,20%.

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/1 mólos nátrium-acetát 25%-os ammónium-hidroxidban, 70:40:10) R_f=0,48.

3. példa

IUPAC-elnevezés:

[2-[[(cisz-13-Dokozenil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén]-As,As,As-trimetil-arzónium-belső só [(3) képlet] C₂₇H₅₆AsO₄P (550,63)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre, 2,3 ml (25 mmol) foszforil-kloridból, 7,3 g (22,5 mmol) erucil-alkoholból, 8 + 10 ml piridinből és 7,4 g (30 mmol) arzenokolin-bromidból. A tisztítást 23 g Amberlite® MB3 ioncserélővel 96%os etanolban végezzük.

Kitermelés: 1,1 g (10%)

Elemanalízis:

C H számított: 55,28, 10,31%;

talált: 54,98, 10,19%;

55,08, 10,30%.

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/1 mólos nátrium-acetát 25%-os ammónium-hidroxidban, 70:40:10), R_f=0,52.

4. példa

1UPA C-elnevezés:

[2-[[(Oktadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén]Ρ,Ρ,Ρ-trimetil-foszfónium-belső só [(4) képlet] C₂₃H₅₀P₂O₄ (452,59)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre, 4,6 ml (50 mmol) foszforil-kloridból, 12,2 g (45 mmol) oktadekanolból, 16+20 ml piridinből és 12,1 g (60 mmol) foszfokolin-bromidból. A tisztítást 50 g Amberlite® MB3 ioncserélővel 96%os etanolban végezzük.

Kitermelés: 2,1 g (10%)

Elemanalízis:

C H számított: 60,40, 11,14%;

talált: 60,94, 11,53%;

60,44, 11,42%.

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/1 mólos nátrium-acetát 25%-os ammónium-hidroxidban, 70:40:10), R_f=0,43.

5. példa

IUPA C-elnevezés:

[2-[((Hexadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén]Ρ,Ρ,Ρ-trimetil-foszfónium-belső só [(5) képlet] C_2IH₄₆P₂O₄ (424,54)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre, 4,6 ml (50 mmol) foszforil-kloridból, 10,9 g (45 mmol) hexadekanolból, 16+20 ml piridinből és 12,1 g (60 mmol) foszfokolin-bromidból. A tisztítást Amberlite® MB3 ioncserélővel 96%-os etanolban való kezeléssel végezzük.

Kitermelés: 5,2 g (27%).

Elemanalízis:

C H számított: 59,41, 10,92%;

talált: 58,73, 11,16%;

59,19, 12,02%.

Vékonyréteg-kromatogram:

6. példa

IUPA C-elnevezés:

[2-[[(cisz-(6)13-Dokozenil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]etilén]-P,P,P-trimetil-foszfónium-belső só [(6) képlet] C₂₇H₅₆P₂O₄ (506,68)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre, 3,5 ml (38 mmol) foszforil-kloridból, 11,2 g (34 mmol) erucil-alkoholból, 12+15 ml piridinből és 9,2 g (46 mmol) foszfokolin-bromidból. A tisztítást 45 g Amberlite® MB3 ioncserélővel 96%os etanolban végezzük.

Kitermelés: 1,9 g (11%).

Elemanalízis:

C H számított: 60,76, 11,14%;

talált: 60,56, 11,35%;

61,39, 11,54%

V ékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/1 mólos nátrium-acetát 25%-os ammónium-hidroxidban, 70:40:10), R_f=0,47.

HU 220 593 Bl

7. példa

IUPAC-elnevezés:

[2-[[(Oktadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén]As,As,As-trietil-arzónium-belső só [(7) képlet] C₂₆H₅₆AsPO₄ (538,62)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre, 3,5 ml (38 mmol) foszforil-kloridból, 9,33 g (35 mmol) oktadekanolból, 12+15 ml piridinből és 13,2 g (46 mmol) trietil-(2-hidroxi-etil)arzónium-bromidból. A tisztítást Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő, kovasavgélen CH₂Cl₂/CH₃OH/25%-os ammónium-hidroxid 70:40:10 arányú elegyével végzett oszlopkromatográfiás kezeléssel végezzük.

Kitermelés: 3,39 g (18%).

Elemanalízis:

C H számított: 54,35, 10,52%;

talált: 54,65, 11,58%;

54,41, 11,78%.

R_f=0,60.

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/25%-os ammónium-hidroxid, 80:25:5).

8. példa

IUPA C-elnevezés:

[2-][(Hexadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén] As,As,As-trietil-arzónium-belső só [(8) képlet] C₂₄H₅₂AsPO₄ (510,56)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 3,5 ml (38 mmol) foszforil-kloridból, 8,43 g (35 mmol) hexadekanolból, 12+15 ml piridinből és 13,2 g (46 mmol) trimetil-(2-hidroxi-etil)-arzóniumbromidból. A tisztítást Amberlite® ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő, kovasavgélen CH₂C1₂/CH₃OH/ 25% ammónium-hidroxid 70:40 :10 arányú elegyével végzett oszlopkromatográfiás kezeléssel végzzük. Kitermelés: 2,26 g (13%).

Elemanalízis:

C H számított: 51,05, 10,35%;

talált: 50,22, 11,37%;

50,81, 11,77%.

R_f=0,57.

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/25%-os ammónium-hidroxid, 80:25:5).

9. példa

IUPA C-elnevezés :

[2-[[(cisz-13-Dokozenil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén]-As,As,As-trietil-arzónium-belső só [(9) képlet] C₃₀H₆₂AsPO₄ (552,71)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre, 3,5 ml (38 mmol) foszforil-kloridból, 11,4 g (35 mmol) erucil-alkoholból, 12 + 15 ml piridinből és 13,2 g (46 mmol) trietil-(2-hidroxi-etil)-arzónium-bromidból. A tisztítást 30 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő, kovasavgélen CH₂C1₂/CH₃OH/25%-os ammónium-hidroxid

70:40:10 elegyével való oszlopkromatográfiás kezeléssel végezzük.

Kitermelés: 4,50 g (22%)

Elemanalízis:

C H számított: 51,05, 10,35%;

talált: 50,22, 11,37%;

50,81, 11,77%.

R_f=0,57.

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/25%-os ammónium-hidroxid, 80:25:5).

10. példa

IUPA C-elnevezés:

[3-[[(Oktadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-propilén] As,As,As-trimetil-arzónium-belső só [(10) képlet] C₂₄H₅₂AsPO₄ (510,56)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre, 4,0 ml (38 mmol) foszforil-kloridból, 10,8 g (35 mmol) oktadekanolból, 14+17 ml piridinből és 13,2 g (53 mmol) trimetil-(3-hidroxi-propil)arzónium-bromidból. A tisztítást 30 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő, kovasavgélen CH₂C1₂(CH₃OH) 25%-os ammóniumhidroxid 70:40:10 arányú elegyével való oszlopkromatográfiás kezeléssel végezzük.

Kitermelés: 1,97 g (10%).

Elemanalízis:

C H számított: 52,74, 10,33%;

talált: 52,22, 10,38%;

52,19, 10,37%.

R_f=0,47.

V ékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/25%-os ammónium-hidroxid, 70:40:10).

11. példa

IUPAC-elnevezés:

[3-[[(Hexadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi] -propilén] As,As,As-trimetil-arzónium-belső só [(11) képlet] C₂₂H_4SAsPO₄ (482,51)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon végezzük 4,0 ml (43 mmol) foszforil-kloridból, 9,7 g (40 mmol) hexadekanolból, 14+17 ml piridinből és

13,6 g (53 mmol) trimetil-(3-hidroxi-propil)-arzóniumbromidból. A tisztítást 30 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő, kovasavgélen CH₂Cl₂/CH₃OH/25%-os ammónium-hidroxid 70:40:10 arányú elegyével való oszlopkromatográfiás kezeléssel végezzük.

Kitermelés: 2,0 g (10%).

Elemanalízis:

C H számított: 51,86, 10,09%;

talált: 51,55, 10,05%;

51,74, 10,17%.

R_f=0,47.

HU 220 593 Bl

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/25%-os ammónium-hidroxid 70:40:10).

12. példa

1UPA C-elnevezés:

[3-[[(cisz-(6)13-Dokozenil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]propilén]-As,As,As-trimetil-arzónium-belső só [(12) képlet]

C₂₈H₅₈AsPO₄ (564,66)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 4,0 ml (43 mmol) foszforil-kloridból, 13,0 g (40 mmol) erucil-alkoholból, 14+17 ml piridinből és 13,2 g (53 mmol) trimetil-(3-hidroxi-propil)-arzónium-bromidból. A tisztítást 30 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő, kovasavgélen CH₂Cl₂/CH₃OH/25%-os ammónium-hidroxid 70:40:10 arányú elegyével való oszlopkromatográfiás kezeléssel végezzük.

Kitermelés: 2,4 g (11%).

Elemanalízis:

C H számított: 54,36, 10,43%;

talált: 54,45, 10,34%;

54,86, 10,51%.

R_f=0,50.

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/25%-os ammónium-hidroxid 70:40:10).

13. példa

IUPA C-elnevezés :

[3-[[(cisz-(6)13-Dokozenil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxiJpropilén]-P,P,P-trimetil-foszfónium-belső só [(13) képlet]

C₂₈H₅₈P₂₄ (520,71)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 4,2 ml (45 mmol) foszforil-kloridból, 13,8 g (42 mmol) erucil-alkoholból, 14+18 ml piridinből és 12,0 g (56 mmol) trimetil-(3-hidroxi-propil)-foszfónium-bromidból. A tisztítást 45 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő, kovasavgélen CH₂Cl₂/CH₃OH/25%-os ammónium-hidroxid 70:40:10 arányú elegy ével való oszlopkromatográfiás kezeléssel végezzük.

Kitermelés: 2,93 g (13%).

Elemanalízis:

C H számított: 59,44, 11,22%;

talált: 59,28, 10,92%;

59,57, 11,54%.

R_f=0,25.

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/1 mólos nátrium-acetát 25%-os ammónium-hidroxidban 70:40:10).

14. példa

IUPA C-elnevezés :

[3-[[(Oktadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-propilén]Ρ,Ρ,Ρ-trimetil-foszfónium-belső só [(14) képlet] ^24^52^2^₄ (466,62)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 4,2 ml (45 mmol) foszforil-kloridból,

11,4 g (42 mmol) oktadekanolból, 14 +18 ml piridinből és 12,2 g (56 mmol) trimetil-(3-hidroxi-propil)-foszfónium-bromidból. A tisztítást 55 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő, kovasavgélen CH₂Cl₂/CH₃OH/25%-os ammónium-hidroxid 70:40 :10 arányú elegyével való oszlopkromatográfiás kezeléssel végezzük.

Kitermelés: 2,27 g (11%).

Elemanalízis:

C H számított: 58,39, 11,23%;

talált: 59,08, 11,42%;

58,63, 11,39%.

R_f: 0,50.

V ékonyréteg-kromatogram:

15, példa

IUPA C-elnevezés:

3-[](Hexadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxiJ -propilén] Ρ,Ρ,Ρ-trimetil-foszfónium-belső só [(15) képlet] C2₂H₄₈P₂O₄ (438,56)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 4,2 ml (45 mmol) foszforil-kloridból, 10,2 g (42 mmol) hexadekanolból, 14+18 ml piridinből és 12,0 g (56 mmol) trimetil-(3-hidroxi-propil)-foszfónium-bromidból. A tisztítást 55 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő, kovasavgélen CH₂Cl₂/CH₃OH/25%-os ammónium-hidroxid 70:40:10 arányú elegyével való oszlopkromatográfiás kezeléssel végezzük.

Kitermelés: 1,86 g (10%).

Elemanalízis:

C H számított: 57,87, 11,04%;

talált: 57,30, 10,92%;

57,02, 11,29%.

R_f=0,50.

Vékonyréteg-kromatogram:

16. példa

IUPA C-elnevezés:

[2-[[(Nonadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén]Ρ,Ρ,Ρ-trimetil-foszfónium-belső só [(16) képlet] C₂₄H₅₂P₂O₄ (466,62)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 3,2 ml (35 mmol) foszforil-kloridból, 9,18 g (32 mmol) monodekanolból, 11 + 14 ml piridinből és 8,64 g (43 mmol) foszfokolin-bromidból. A tisztítást 25 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő acetonnal való kétszeres kiforralással végezzük.

Kitermelés: 1,85 g (12%).

Elemanalízis:

HU 220 593 Bl

C H számított: 60,61, 11,23%;

talált: 60,69, 11,55%;

61,01, 11,39%.

R_f: 0,58

Vékonyréteg-kromatogram:

77. példa

IUPA C-elnevezés:

[2-[[(-Eikozil-oxi)-hidroxi-foszforil/-oxi[-etilén] -Ρ,Ρ,Ρtrimetil-foszfónium-belső só [(17) képlet/

C₂₅H₅₄P₂O₄ (480,65)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 3(2 ml (35 mmol) foszforil-kloridból, 9,63 g (32 mmol) eikozanonból 11 + 14 ml piridinből és 8,64 g (43 mmol) foszfokolin-bromidból. A tisztítást 25 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és ezt követő, acetonnal való kétszeres kiforralással végezzük. Kitermelés: 0,02 g (7%).

Elemanalízis:

C H számított: 61,32, 11,32%;

talált: 61,72, 11,65%;

61,55, 11,47%.

R_f: 0,53

Vékonyréteg-kromatogram:

(koroform/metanol/1 mólos nátrium-acetát 25%-os ammónium-hidroxidban 70:40:10).

18. példa

IUPA C-elnevezés:

[2-[[(Nonadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-As,As,As-etilén]-trimetil-arzónium-belső só [(18) képlet] C₂₃H_S2AsPO₄ (510,65)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 4,6 ml (50 mmol) foszforil-kloridból, 12,8 g (45 mmol) nonadekanolból, 16+20 ml piridinből és 14,7 g (60 mmol) arzenokolin-bromidból. A tisztítást 55 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban végezzük.

Kitermelés: 4,05 g (18%)

Elemanalízis:

C H számított: 55,48, 10,28%;

talált: 55,89, 10,43%;

55,89, 10,52%.

R_f: 0,45

V ékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/25%-os ammónium-hidroxid 80:25:5).

19. példa

IUPAC-elnevezés:

[2 [[(Eikozil-oxi)-hídroxi-foszforil]-oxi]-etilén] As,As,As-trimetil-arzónium-belső só [(19) képlet] C₂₅H₅₄AsPO₄ (524,60)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 4,6 ml (50 mmol) foszforil-kloridból,

13.4 g (45 mmol) eikozanolból, 16+20 ml piridinből és

14,7 g (60 mmol) arzenokolin-bromidból. A tisztítást 50 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban végezzük.

Kitermelés: 2,81 g (12%)

Elemanalízis:

C H számított: 57,24, 10,38%;

talált: 56,92, 10,52%;

57,02, 10,36%.

R_f: 0,45.

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/25%-os ammónium-hidroxid 80:25:5).

20. példa

IUPAC-elnevezés:

[2-[[(Heptadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén] As,As,As-trimetil-arzónium-belső só [(20) képlet] C₂₂H₄₈AsPO₄ (482,51)

11.5 g (45 mmol) heptadekanolból, 16+20 ml piridinből és 14,7 g (60 mmol) arzenokolin-bromidból. A tisztítást 35 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban, majd acetonban ezt követő kikeveréssel végezzük.

Kitermelés: 1,20 g (6%).

Elemanalízis:

C H számított: 52,79, 10,07%;

talált: 52,46, 9,95%;

53,26, 10,30%.

R_f: 0,45.

Vékonyréteg-kromatogram:

21. referenciapélda

IUPA C-elnevezés [2-[((Oktadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén] -P,Pdietil-P-fenil-foszfónium-belső só [(21) képlet] C₃₀H₅₆P₂O₄ (542,72)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 2,3 ml (25 mmol) foszforil-kloridból, 7,17 g (26,5 mmol) oktadekanolból, 8+10 ml piridinből és 7,28 g (26,5 mmol) dietil-fenil-(2-hidroxi-etil)-foszfónium-bromidból. A tisztítást 21 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és acetonból való átkristályosítással végezzük.

Kitermelés: 1,76 g (13%).

Elemanalízis:

C H számított: 64,26, 10,43%;

talált 64,03, 10,77%;

64,24, 10,92%.

R_f: 0,37

V ékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/25%-os ammónium-hidroxid 80:25:5).

HU 220 593 Β1

22. referenciapélda [2-[[(cisz-(8)13-Dokozeml-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilénl-P,P-dietil-P-fenil-foszfóniutn-belső só [(22) képlet] C₃₄H₆₂P₂O₄ (596,82)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 2,3 ml (25 mmol) foszforil-kloridból, 8,6 g (27 mmol) erucil-alkoholból, 8+10 ml piridinből és 7,28 g (27 mmol) dietil-(2-hidroxi-etil)-fenil-foszfónium-bromidból. Ezután 30 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban kezeljük és acetonból kristályosítjuk.

Kitermelés: 2,53 g (17%).

Elemanalízis:

C H számított: 65,46, 10,50%;

talált: 65,71, 10,33%;

65,59, 10,99%.

R_f: 0,37

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/25%-os ammónium-hidroxid 80:25:5).

23. példa

IUPAC-elnevezés:

[2-[[((4’-Dodecil-ciklohexil)-metil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén]-As,As,As-trimetil-arzónium-belső só [(23) képlet]

C₂₄H₅₂AsPO₄ (510,65)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 2,4 ml (26 mmol) foszforil-kloridból, 6,50 g (23 mmol) dodecil-ciklohexil-metanolból, 9+12 piridinből és 7,59 g (31 mmol) arzenokolin-bromidból. A tisztítást 30 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és acetonban való kikeveréssel végezzük.

Kitermelés: 1,64 g (14%).

Elemanalízis:

C H számított: 56,68 9,91%;

talált: 56,66, 10,25%;

56,91, 10,28%.

R_f: 0,37.

Vékonyréteg-kromatogram:

24. példa

HJPAC-elnevezés:

[2[[((l-O-Oktadecil)-(2-O-metil)-rac-glicero-lil-oxi)hidr oxi-foszforil]-oxi]-etilén]-As.As, As-trimetil-arzóniutn-belső só [(24) képlet]

C₂₇H₅₈AsPO₆ (584,64)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 3,0 ml (33 mmol) foszforil-kloridból,

10,8 g (30 mmol) l-O-oktadecil-2-O-metil-rac-glicerinből, 11 +13 ml piridinből és 9,8 g (40 mmol) arzenokolin-bromidból. A tisztítást 55 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban és acetonnal való kikeveréssel végezzük.

Kitermelés: 5,83 g (33%).

Elemanalízis:

C H számított: 55,47, 10,00%;

talált: 55,23, 10,23%;

55,79, 10,26%.

R_f: 0,57.

Vékonyréteg-kromatogram:

25. példa

IUPA C-elnevezés:

[2[[((1 -O-Oktadecil)-(2-O-metil)-rac-glicero-l il-oxif hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén] -P,P,P-trimetil-foszfóniumbelsó só [(25) képlet]

C₂₇H₅₈P₂O₆ (540,70)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre, 4,6 ml (50 mmol) foszforil-kloridból, 16,1 g (45 mmol) l-O-oktadecil-2-O-metil-rac-glicerinből, 16+20 ml piridinből és 12,1 g (60 mmol) foszfokolin-bromidból. A tisztítást 45 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban való kezeléssel és acetonnal való kikeveréssel végezzük.

Kitermelés: 6,25 g (26%).

Elemanalízis:

C H számított: 58,99, 10,82%;

talált: 58,73, 11,19%;

59,12, 11,05%.

Vékonyréteg-kromatogram:

(kloroform/metanol/1 mólos nátrium-acetát 25%-os ammónium-hidroxidban, 70:40:10).

26. példa

IUPA C-elnevezés:

[2-[[(Oktadecil-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi]-etilén]Sb,Sb,Sb-trimetil-stibónium-belső só [(26) képlet] C₂₃H₅₀PSbO₄ (543,38)

Az előállítást az 1. példában leírtakkal analóg módon hajtjuk végre 2,1 ml (23 mmol) foszforil-kloridból, 6,49 g (24,5 mmol) oktadekanolból, 7+9 ml piridinből és 7,0 g (24 mmol) stibonokolin-bromidból. A tisztítást 15 g Amberlite® MBB ioncserélővel 96%-os etanolban való kezeléssel és ezt követő kovasavgélen CH₂Cl₂/CH₃OH/25%-os ammónium-hidroxid 80:25:5 arányú elegyével végzett oszlopkromatográfiás kezeléssel végezzük. A terméket tartalmazó frakciókat dietiléterrel kivonjuk és bepároljuk.

Kitermelés: 1,0 g (8%).

Elemanalízis:

C H számított: 47,68, 9,39%;

talált: 47,54, 9,45%;

47,58, 9,28%.

R_f: 0,62.

Vékonyréteg-kromatogram:

HU 220 593 Bl

27. példa

Oktadecil-[2-(As-metil-arzenanio)-etil]-foszfát [(27) képlet]

C₂₆H₅₆AsPO₄ (528,63)

A vegyület előállítását az 1. példával analóg módon végezzük 0,32 ml (3,50 mmol) foszforil-kloridból, 0,87 g (3,50 mmol) oktadekanolból, 11 + 14 ml piridinből és 1,22 g (4,28 mmol) 1 -metil- l-(2-hidroxi-etil)arzenanio-bromidból. A tiszítást 2,5 g Amberlite® MB3 ioncserélővel 96%-os etanolban való kezeléssel és ezt követően Kiesel-gélen CH₂Cl₂/CH₃OH/25%-os ammónium-hidroxid 70:40:10 arányú elegyével végzett oszlopkromatográfiával végezzük.

Kitermelés: 160 mg (10%)

Elemanalízis:

C H számított: 57,24, 10,16%;

talált: 57,26, 10,30%.

Olvadáspont: 185 °C

R_f: 0,8 (kloroform/metanol/lM nátrium-acetát 25%-os ammónium-hidroxidban 70:40:10)

28. példa [2-[[Oktadec-9-in-1 -il-oxi)-hidroxi-foszforil]-oxi] etilén]-Ρ,Ρ,Ρ-trimetil-foszfónium-belső só [(28) képletű vegyület]

Elemanalízis:

C H számított: 58,09, 10,39%;

talált: 57,50, 10,81%;

talált: 58,09, 10,75%.

R_f: 0,50 (kloroform/metanol/lM nátrium-acetát 25%-os ammónium-hidroxidban 70:40:10)

NMR (500 MHz, CDCL₃) δ ppm-ben kifejezve: 0,85 (3 H, t, -CH₃), 1,30 (18 H, m, -(CH₂)_n-), 1,45 (4H, m, -CH₂-CC-CH₂-), 1,57 (2 H, p, -CH₂-), 2,12 (9 H, d, -P+(CH₃)₃), 2,75 (2 H, m, -CH₂-P+), 3,78 (2 H, q, -CH₂-OP (=0) (O1-) -O-), 4,22 (2 H, m, -O-P ( = 0) (O1-) -O-CH₂-C-P+).

Claims

1. (I) általános képletű vegyületek, mely képletben R⁵ jelentése egyenes vagy elágazó nyílt szénláncú,

16-22 szénatomos szénhidrogéncsoport, mely telített vagy egy kettős, vagy hármas kötést tartalmaz, vagy 10-16 szénatomos alkil-ciklohexil-metilcsoport;

X jelentése oxigén- vagy kénatom;

Aj jelentése 2-3 szénatomos alkiléncsoport;

R⁸, R⁹ és R¹⁰ jelentése egymástól függetlenül egyenes vagy elágazó szénláncú, 1-6 szénatomos alkilcsoport; vagy Y, R⁹ és R¹⁰ együttesen egy 4-9 tagú heterogyűrűt képezhet.

2. Gyógyszerkészítmény tumorok és protozoonmegbetegedések kezelésére, amely egy vagy több, 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyületet tartalmaz 0,1-6000 mg mennyiségben.

3. Eljárás az (I) általános képletű - ahol R⁵, A, X, A, és R« jelentése az 1. igénypontban megadott - vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy

a) a jelentésében kötést tartalmazó vegyületek előállítására foszforil-kloridot egy R⁵-X-A-H általános képletű alkohollal vagy tioalkohollal, ahol R⁵ és X jelentése a fenti, A pedig egyszeres kötést jelent, inért oldószerben vagy oldószer nélkül - adott esetben bázis jelenlétében - reagáltatunk, a kapott terméket elkülönítés és tisztítás nélkül egy (VIII) általános képletű vegyülettel, ahol A, és R⁶ jelentése a fenti, inért oldószerben, bázis jelenlétében tovább reagáltatjuk, majd a kapott vegyületet elhidrolizáljuk; vagy

b) egy (IX) általános képletű vegyületet, ahol R¹ jelentése megegyezik R⁵ jelentésével, X és A jelentése a fenti, m jelentése pedig 2 vagy 3, egy (X) általános képletű vegyülettel, ahol Y, R⁸, R⁹ és R¹⁰ jelentése R⁶jelentésénél megadott, inért oldószerben reagáltatunk; vagy

c) egy (XII) általános képletű vegyületet, ahol R¹, X, A és A₃ jelentése a fenti, Z¹ jelentése pedig klór-, bróm- vagy jódatom vagy mezilát- vagy tozilátcsoport, egy (X) általános képletű vegyülettel, ahol Y, R⁸, R⁹ és R¹⁰ jelentése R⁶ jelentésénél megadott, oldószerben vagy anélkül, savmegkötő jelenlétében reagáltatunk; és kívánt esetben az a)-c) eljárások bármelyikével kapott (I) általános képletű vegyületet egyidejűleg vagy egymást követően savas és bázisos ioncserélőn tisztítjuk.

4. Eljárás gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy egy vagy több, 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyületet szokásos hordozóés/vagy egyéb segédanyagokkal összekeverve gyógyszerkészítménnyé alakítunk.

5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 0,1-6000 mg (I) általános képletű vegyületet tartalmazó gyógyszerkészítményt állítunk elő.